CZ2003126A3

CZ2003126A3 - Krystalické terapeutické činidlo

Info

Publication number: CZ2003126A3
Application number: CZ2003126A
Authority: CZ
Inventors: Laurence James Harris; Richar Anthony Storey; Albert Shaw Wood
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 2000-07-28
Filing date: 2001-07-18
Publication date: 2004-02-18
Also published as: PA8523501A1; AP2001002234A0; DZ3364A1; TNSN01112A1; CN1444585A; AP1400A; NZ523226A; IL153226A0; WO2002010171A1; MY117831A; MX233602B; UA72631C2; BG107266A; MXPA03000856A; GEP20053494B; UY26854A1; JP2004505087A; SK572003A3; TWI285643B; AU2001272690B2

Description

Oblast techniky

Vynález se týká polymorfu 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu vzorce I

který vykazuje PXRD obrazec v podstatě definovaný dále.

v

Dosavadní stav techniky

Jak je podrobně uvedeno ve WO 01/27113, 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazin je ’ účinný a a selektivní inhibitor cGMP PDE₅ a je užitečný zejména při léčení mj. samčí erektilní dysfunkce.

Pro úspěšné uplatnění ve farmaceutickém průmyslu je rozhodující, aby fyzikálněchemické vlastnosti účinné látky byly známé nebo aby je během nezbytných procesů jak při výrobě a farmaceutickém zpracování, tak během transportu, skladování a konečném terapeutickém použití bylo možno rozumě předpovědět.

V některých případech sloučeniny mohou vykazovat žádoucí medicinální vlastnosti, které však nelze přenést na vhodnou farmaceutickou kompozici, jelikož samotná účinná látka má neuspokojivé fyzikální vlastnosti, například špatné chemické nebo zpracovatelské vlastnosti. Ve farmaceutickém průmyslu je použití stabilních krystalických látek vysoce žádoucí, jelikož krystalické látky jsou obvykle stabilnější než jejich amorfní protějšky, mají určitou strukturu, kterou lze reprodukovatelně charakterizovat rentgenovou difrakcí, kterou lze využít k identifikaci přítomnosti konkrétní polymorfní formy.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je krystalická struktura 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu.

Krystalickou látku, kterou vytváří 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazin, definovanou v tomto textu, lze také označit jako nesolvatovaný produkt l-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu. Přívlastku nesolvatovaný se v tomto textu používá pro označení produktu, který v podstatě neobsahuje žádné zachycené rozpouštědlo vázané v krystalové mřížce nebo jinak zadržené nebo jinak obsažené v krystalech. Rozpouštědlo zachycené na povrchu krystalické mřížky do této definice zachyceného rozpouštědla nespadá, ačkoliv krystalická látka podle vynálezu na svém povrchu rozpouštědlo přednostně nezachycuje. Pod pojmem v podstatě žádné rozpouštědlo se v tomto textu rozumí, že zachyceno ve strukturní mřížce krystalu nebo zadrženo v krystalu je méně než 1 %, přednostně méně než

asi 0,85 %, výhodněji méně než asi 0,3 %, zejména 0 až 0,25 % veškerého rozpouštědla.

Krystaly 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl) -7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu s XRD definovaným dále mají vysokou teplotu tání a úvodní výzkumy ukázaly, že jsou nehygroskopické, stabilní a mají dobré formulační vlastnosti.

1-{6-Ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4 -ethylpiperazin vzorce I podle vynálezu je možno připravovat způsoby ilustrovanými v příkladech provedení a preparativnich postupech.

XRD 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2 -(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazQlo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu vzorce I lze charakterizovat způsobem popsaným dále.

Rentgenová difrakce

Rentgenový difřakční (XRD) obrazec monokrystalu pro l-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazin o teplotě tání 162 až 165°C (připravený způsobem popsaným v příkladu 1) se stanoví rentgenovou difrakcí monokrystalu. Zkoumá se reprezentativní krystal a soubor 0,lnm dat (maximum sin Θ/λ = 0,5) se shromáždí na difraktometru Siemens R4RA/v. Atomové rozptylové faktory jsou převzaty z mezinárodních tabulek pro rentgenovou krystalografii (International Tables for X-Ray Crystallography, sv. IV, str. 55, 99, 149, Birmingham, Kynoch Press, 1974). Všechny krystalografické výpočty byly provedeny za použití systému SHELXTL (G. M.

• · · ·

Λ · · · · Z * ·

Sheldríck, SHELXTL, User Manual, Nicolet Instruments Co.,

1981).

Simulovaný práškový rentgenový difrakční (PXRD) obrazec (jak je uveden v tabulce 1 pro intenzity vyšší než 1 %) se generuje z dat monokrystalu za použití difrakčního krystalického modulu Cerius² za následujících podmínek: radiace 0,154178 nm, polarizační faktor 0,5 a žádný monochromátor. Jako velikost krystalu se bere 50 x 50 x 50 nm³ s Lorentzovým tvarem píku. Difrakční píky se simulují v rozmezí úhlu 2théta 2 až 55°. Krystalografické výpočty (výpočty intenzity) se provádějí za použití systému SHELXTL (G. M. Sheldríck, SHELXTL, User Manual, Nicolet Instruments Co., 1981). Konečný R-index je 4,60 %.

Hlavní píky (ve stupních Θ) simulovaného PXRD obrazce jsou uvedeny v tabulce I. Pod pojmem hlavní píky se rozumí píky s intenzitou vyšší než 1 %.

Tabulka 1

Vzdálenost d (nm)	Intenzita (%)	Vzdálenost d (nm)	Intenzita (%)	Vzdálenost d (nm)	Intenzita (%)	Vzdálenost d (nm)	Intenzita (%)
1,22486	1,24	0,42323	19,04	0,3061	9,18	0,24041	2,24
0,97301	100	0,41595	1,19	0,30483	2,22	0,23424	1,22
0,85596	36,31	0,40421	1,35	0,30428	1,94	0,2299	1,13
0,73923	15,02	0,39186	7,81	0,29929	1,59	0,2264	1,23
0,73856	8,35	0,38951	10,26	0,29804	2,1	0,22605	1,29
0,73284	1,69	0,38491	5,34	0,29403	3,46	0,22079	2,65
0,58222	14,49	0,38485	2,46	0,29073	1,74	0,21855	1,9
0,57617 I	1,96	0,38427	43,14	0,28719	1,68	0,21679	1,92

0,57461	43,25	0,37357	3,1	0,28532	4,7	0,21468	1,35
0,51166	7,17	0,36961	3,99	0,28122	11,19	0,21119	4,52
0,51078	32,71	0,36805	4,51	0,28097	2,82	0,20769	1,15
0,48807	17,47	0,36042	5,28	0,27776	2,17	0,20471	1,12
0,48674	10,85	0,35988	6,09	0,27774	1,46	0,2028	1,63
0,4865	10,98	0,35819	6,8	0,27162	1,76	0,19935	1,03
0,48425	13,19	0,35721	8,55	0,27041	3,63	0,19883	2,96
0,48018	3,32	0,35355	2,47	0,26875	1,42	0,19181	1,27
0,47632	10,57	0,3407	1,2	0,26443	2,19	0,19058	1,03
0,47491	4,16	0,33461	4,91	0,26084	3,75	0,1884	1,23
0,4641	1,96	0,33318	7,54	0,26025	1,6	0,18797	2,49
0,4629	19,73	0,33154	4,36	0,25809	1,31	0,18749	2,81
0,43314	9,53	0,32827	1,7	0,25448	1,21	0,17939	1,57
0,43301	3,65	0,32774	1,22	0,25438	3,26	0,17617	1,24
0,43066	26,66	0,32434	19,95	0,24325	2,47	0,17379	1,82
0,42909	51,91	0,3224	2,11	0,24212	1,24	0,17194	1,03
0,42798	24,75	0,30663	1,38	0,24163	4,39

Předmětem vynálezu je tedy 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinová látka vykazující PXRD obrazec v podstatě jak je definován v tabulce 1 při měření výše uvedeným způsobem.

Jak bude odborníku v oboru krystalografie zřejmé, zatímco relativní intenzity různých píků uvedených v tabulce 1 se vlivem různých faktorů, jako jsou účinky orientace krystalů ve svazku rentgenových paprsků nebo čistota analyzované látky nebo stupeň krystaličnosti vzorku, mohou měnit, polohy píků zůstanou v podstatě stejné, jak jsou definovány v tabulce.

« · ···· • ·

Odborníkům v oboru krystalografie také bude zřejmé, že měření za použití jiných vlnových délek povedou k různým posunům podle Braggovy rovnice ηλ= 2d sin Θ.

Takové další PXRD obrazce 1-{6-ethoxy-5 -[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu generované za použití jiných vlnových délek jsou považovány za alternativní vyjádření PXRD obrazce krystalické látky podle vynálezu, a jako takové spadají do rozsahu tohoto vynálezu.

Stejná sloučenina, jak je definována XRD obrazcem popsaným v tabulce 1, připravená alternativním způsobem (podrobně popsanými v příkladech provedení) může mít teplotu tání v rozmezí od 155 do 165°C (měřeno za použití zařízení Perkin Elmer DSC/TGA7 při rychlosti zahřívání 20°C/min).

Zkoušky ukazují, že krystalická sloučenina definovaná v tomto textu má sklon vyskytovat se v jedné polymorfní formě, jak je podrobně popsána výše a ilustrována dále. Monomorfní sloučeniny jsou pro farmaceutické účely zvláště žádoucí.

Krystalickou sloučeninu podle vynálezu, dále označovanou jako sloučenina, je možno podávat samotnou, ale obvykle se podává ve směsi s vhodnými farmaceutickými expicipenty, ředidly nebo nosiči, které jsou zvoleny s ohledem na zvolený způsob podávání a standardní farmaceutickou praxi.

Například je možno ji podávat perorálně, bukálně nebo sublinguálně ve formě tablet, tobolek (jako měkkých želatinových tobolek), ovulí, elixírů, roztoků nebo suspenzí, které mohou obsahovat aromatizační nebo barvicí činidla, a jsou určeny pro okamžitou, odloženou, modifikovanou, řízenou, jako s trvalým ·· ·· uvolňováním, duální, nebo pulsní dodávku. Sloučeninu je také možno podávat intrakavernálními injekcemi. Sloučeninu rovněž lze podávat v rychle se dispergujících nebo rozpouštějících formách nebo ve formě vysokoenergetické disperze nebo potažených částic. Vhodné farmaceutické formulace sloučeniny mohou být podle potřeby potažené nebo nepotažené.

Takové tablety mohou obsahovat excipienty, jako je mikrokrystalická celulosa, laktosa, citran sodný, uhličitan vápenatý, dibázický foforečnan vápenatý, glycin a škrob (přednostně kukuřičný, bramborový nebo tapiokový škrob), rozvolňovadla, jako sodnou sůl škrobového glykolátu, sodnou sůl kroskarmelosy a určité komplexní silikáty, a granulační pojivá, jako jsou polyvinylpyrrolidon, hydroxypropylmethylcelulosa (HPMC), hydroxypropylcelulosa (HPC), sacharosa, želatina a klovatina. Kromě toho mohou obsahovat také lubrikační činidla, jako je stearan hořečnatý, kyselina stearová, glycerylbehenát a mastek.

Pevných kompozic podobného typu je také možno používat jako plniv v želatinových tobolkách. Jako excipienty, kterým se v tomto ohledu dává přednost, je možno uvést laktosu, škrob, celulosu nebo vysokomolekulární polyethylenglykoly. Ve vodných suspenzích a/nebo elixírech může být sloučenina kombinována s různými sladidly nebo aromatizačními činidly, barvicími látkami nebo barvivý, s emulgačními a/nebo suspenzními činidly a ředidly, jako je voda, ethanol, propylenglykol nebo glycerol, a jejich kombinacemi.

Dávkovači formy s modifikovaným a pulsním uvolňováním mohou obsahovat takové excipienty, jaké jsou popsány u forem s okamžitým uvolňováním, spolu s přídavnými excipienty, které účinkují jako modifikátory rychlosti uvolňování, mohou být obaleny a/nebo začleněny do tělesa zařízení pro dodávku léčíva. Jako neomezující příklady modifikátorů rychlosti uvolňování je možno uvést hydroxypropylmethylcelulosu, methylcelulosu, sodnou sůl karboxymethylcelulosy, ethylcelulosu, acetát celulosy, polyethylenoxid, xanthanovou pryskyřici, karbomer, kopolymer amoniummethakrylátu, hydrogenovaný ricinový olej, karnaubský vosk, parafinový vosk, acetát ftalát celulosy, ftalát hydroxypropylmethylcelulosy, kopolymer methakrylové kyseliny a jejich směsi. Formy s modifikovaným a pulsním uvolňováním mohou obsahovat jeden excipient modifikující rychlost uvolňování nebo kombinaci takových excipientů. Tyto excipienty mohou být přítomny v dávkovači formě, tj. matrici, a/nebo na dávkovači formě, tj. na povrchu nebo obalu.

Formulace s rychlým dispergováním nebo rozpouštěním mohou obsahovat následující složky: aspartam, acesulfam draselný, kyselinu citrónovou, sodnou sůl kroskarmelosy, krospovidon, kyselinu diaskorbovou, ethylakrylát, ethylcelulosu, želatinu, hydroxypropylmethylcelulosu, stearan hořečnatý, mannitol, methylmethakrylát, mátové aroma, polyethylenglykol, sublimovaný oxid křemičitý, oxid křemičitý, sodnou sůl škrobového glykolátu, stearylfumarát sodný, sorbitol a xylitol. Pojmy dispergování a rozpouštění, kterých se používá při popisu výše uvedených formulací, závisí na rozpustnosti použité léčivé látky, tzn. že když je látka nerozpustná, je možno připravit dávkovači formu s rychlým dispergováním, a když je rozpustná, lze připravit dávkovači formu s rychlým rozpouštěním.

Sloučeninu je také možno podávat parenterálně, jako například intrakavernosně, intravenosně, intraarteriálně, intraperitoneálně, intracékálně, intraventrikulárně, intraurethrálně, intrasternálně, intrakraniálně, intramuskulárně nebo subkutánně, nebo za použití infusních technik. Sloučenina se nejlépe používá ve formě sterilních vodných roztoků, které mohou obsahovat i jiné látky, například soli nebo glukosu v množství dostatečném pro izotonizaci roztoku vzhledem ke krvi. Vodné roztoky by v případě potřeby měly být účelně pufrovány (přednostně na pH 3 až 9). Vhodné parenterální formulace se připravují za sterilních podmínek standardními farmaceutickými způsoby, které jsou odborníkům v tomto oboru dobře známy.

Denní dávka sloučeniny pro perorální a parenterální podávání člověku bude obvykle ležet v rozmezí od 10 do 500 mg/kg, a může být podána ve formě jediné dávky nebo několika dílčích dávek.

Tablety nebo tobolky budou tedy obsahovat 5 až 250 mg účinné sloučeniny pro podávání jedné, dvou nebo více jednotek najednou. Skutečné dávkování stanoví v každém konkrétním příkladě lékař tak, aby se dosáhlo optimálních výsledků u jednotlivých pacientů. Skutečně zvolené dávkování se bude měnit v závislosti na věku, hmotnosti a odpovědi konkrétního pacienta. Výše uvedené dávkování je tedy uvedeno jako příklad vhodný pro průměrný případ a je samozřejmé, že se v některých případech bude vhodnější použít zvýšeného nebo sníženého dávkování. Všechny takové úpravy spadají do rozsahu tohoto vynálezu. Odborníkům v tomto oboru také bude zřejmé, že při léčení některých stavů (jako MED nebo FSD) je sloučeninu možno podávat ve formě jediné dávky podávané podle potřeby (tj. jak je nutné nebo jak je žádoucí).

Příklad tabletové formulace

Tabletová formulace typicky může obsahovat asi 0,01 mg až 500 mg sloučeniny, přičemž hmotnost tabletové náplně může být v rozmezí od asi 50 do asi 1000 mg. lOmg tableta může mít například následující složení:

·· Φ···

Složka % hmotn.

Sloučenina ve formě volné kyseliny, volné báze nebo soli

Laktosa

Škrob

Sodná sůl kroskarmelosy

Stearan hořečnatý

10,000

64,125

21,375

3,000

1,500

Množství se obvykle upraví na základě aktivity léčiva.

Takové tablety je možno vyrábět standardními způsoby, například přímým lisováním nebo granulací za vlhka nebo za sucha. Jádra tablet je možno opatřit vhodnými obaly.

Sloučeninu je také možno podávat intranasálně nebo inhalačně. Při tom se účelně používá inhalátorů pro suché prášky nebo aerosolových sprejů uvolňovaných z tlakovky, pumpičky, spreje nebo rozmlžovače, popřípadě za použití vhodného hnacího plynu, například dichlordifluormethanu, trichlorfluormethanu, dichlortetrafluorethanu, hydrofluoralkánu, jako 1,1,1,2-tetrafluorethanu (HFA 134A®) nebo 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropanu (HFA 227EA®), oxidu uhličitého nebo jiných vhodných plynů. V případě tlakových aerosolových balení může být jednotková dávka určena spuštěním ventilu uvolňuj íciho předem stanovené množství spreje. Tlakovky, pumpičky nebo rozmlžovače mohou obsahovat roztok nebo suspenzi účinné sloučeniny, například za použití směsi ethanolu a hnacího plynu jako rozpouštědla, a mohou přídavně obsahovat lubrikanty, například sorbitantrioleát. Tobolky a patrony (které jsou například zhotoveny z želatiny) pro použití v inhalačním zařízení nebo insuflátoru mohou obsahovat práškovou směs sloučeniny podle vynálezu s vhodným práškovým základem, jako je laktosa nebo škrob.

• ♦ · · fl ·· ·· · • ♦ ·♦ ··

Aerosolové prostředky jsou přednostně upraveny tak, aby jedna dávka odměřená spuštěním ventilu obsahovala 1 až 50 mg sloučeniny. Celková denní dávka za použití aerosolu by pak měla ležet v rozmezí od 1 mg do 50 mg. Podávání se může provádět jednorázově nebo, obvykleji, několikrát v průběhu dne.

Sloučeninu lze také formulovat pro dodávku za použití atomizéru. Formulace pro atomizéry mohou jako solubilizátory, emulgátory nebo suspenzní činidla obsahovat vodu, ethanol, glycerol, propylenglykol, polyethylenglykoly o nízké molekulární hmotnosti, chlorid sodný, fluorované uhlovodíky, ethery polyethylenglykolu, sorbitan trioleát a kyselinu olejovou.

Sloučeninu je také možno alternativně podávat ve formě čípků nebo pesarů nebo ji lze aplikovat topicky ve formě gelů, hydrogelů, lotionů, roztoků, krémů, mastí nebo zásypů. Také ji lze podávat dermálně a v úvahu taktéž přichází transdermální podávání, například za použití transdermálních náplastí. Lze ji také podávat okulárně, pulmonárně nebo rektálně.

Za účelem oftalmického podávání je sloučeninu možno formulovat do podoby mikronizovaných suspenzí v isotonickém sterilním solném roztoku s upraveným pH nebo, přednostně, do podoby roztoků v isotonickém sterilním solném roztoku s upraveným pH, které popřípadě obsahují konzervační činidlo, jako benzylalkoniumchlorid. Alternativně mohou mít formu masti, jako vazelínové masti.

Za.účelem topické aplikace na kůži je sloučeninu možno zpracovávat do formy vhodných mastí, které obsahují účinnou sloučeninu suspendovanou nebo rozpuštěnou v minerálním oleji, kapalné vazelíně, bílé vazelíně, propylenglykolu, sloučenině polyoxyethylenu a polyoxypropylenu, emulgačním vosku a/nebo vodě. Alternativně je sloučeninu možno formulovat jako vhodné lotiony nebo krémy, v nichž je suspendována nebo rozpuštěna například ve směsi jedné či více z následujících látek: minerálního oleje, sorbitan monostearátu, polyethylenglykolu, kapalného parafinu, polysorbate 60, cetylesterových vosků, cetarylalkoholu, 2-oktyldodekanolu, benzylakoholu a vodě.

Sloučeninu je také možno používat v kombinaci s cyklodextriny. O cyklodextrinech je známo, že s molekulami léčiv tvoří inklusní a neinklusni komplexy. Vytvoření komplexu léčivo-cyklodextrin může modifikovat rozpustnost, rychlost rozpouštění, biodostupnost a/nebo stabilitu molekuly léčiva. Takové komplexy jsou obvykle užitečné ve většině dávkovačích forem a při většině způsobů podávání. Jako alternativu k přímé tvorbě komplexů s léčivy je cyklodextrinu možno použít jako pomocného aditiva, například jako nosiče, ředidla nebo prostředku zlepšujícího rozpustnost. Vhodné příklady nej častěji používaných alfa-, beta- a gamma-cyklodextrinů jsou uvedeny ve WO-A-91/11172, WO-A-94/02518 a WO-A-98/55148.

U lidí se obvykle dává přednost perorálnímu podávání sloučeniny, jelikož je nejúčelnější a například při MED umožňuje vyhnout se dobře známým nevýhodám, které jsou spojeny s intrakavernosním (i.c.) podáváním. Při typickém dávkovacím režimu při MED se typickému muži v případě potřeby podá 5 až 250 mg sloučeniny. V případech, kdy recipient trpí poruchou polykání nebo zhoršenou absorpcí léčiva po perorálním podání, je léčivo možno podávat parenterálně, sublinguálně nebo buká1ně.

Při použití ve veterinární medicíně se sloučenina podává ve formě vhodných formulací v souladu s normální veterinární praxí. Dávkovači režim a způsob podávání, které jsou nejvhodnější pro konkrétní zvíře, zvolí ošetřující lékař.

*···

Předmětem vynálezu je tedy farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje krystalickou sloučeninu podle vynálezu spolu s farmaceuticky vhodným ředidlem nebo nosičem.

Dále je předmětem vynálezu veterinární formulace, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje krystalickou sloučeninu podle vynálezu spolu s farmaceuticky vhodným ředidlem nebo nosičem.

Krystalickou látku definovanou v tomto textu je možno připravovat způsoby popsanými v následujících preparativních postupech a příkladech provedení.

Příklady provedení vynálezu

Preparativni postup 1

Příprava výchozích látek pro příklad 1

N-[3-Karbamoyl-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinamid

OEt HgN

Me

OMe (a) 2-Hydroxy-5-sulf©nikotinová kyselina

2-Hydroxynikotinová kyselina (27 kg, 194,2 mol) se po částech během 1 hodiny při 50°C přidá ke 30% oleu (58,1 kg), přičemž vlivem exotermické reakce dojde ke zvýšení teploty na 82°C. Reakční směs se dále zahřeje na 140°C a při této teplotě udržuje 12 hodin. Poté se obsah reaktoru ochladí na 15°C a přefiltruje. Filtrační koláč se při teplotě místnosti resuspenduje v acetonu (33 kg). Vzniklá suspenze se přefiltruje a produkt se vysuší. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (35,3 kg, 83 %) ve formě bílé pevné látky. Rozklad při 273°C, δ (DMSO-dg): 7,93 (1H, d), 8,42 (1H, d). m/z (nalezeno: 220 [M+H]⁺, 100%, CgHgNOgS vypočteno: 220,17).

(b) Ethyl-2-hydroxy-5-sulfonikotinoát

2-Hydroxy-5-sulfonikotinová kyselina (500 g, 2,28 mol) se za míchání a zahřívání na 80°C rozpustí v ethanolu (2,5 litru). Po 30 minutách se z roztoku oddestiluje 0,5 litru rozpouštědla a ke směsi se přidá čerstvý ethanol (0,5 litru). Vzniklá směs se znovu zahřeje na 80°C a po dalších 60 minutách se oddestiluje 1,0 litru rozpouštědla a ke směsi se přidá čerstvý ethanol (1,0 litru). Vzniklá směs se znovu zahřeje na 80°C a po dalších 60 minutách se z ní oddestiluje 1,0 litru rozpouštědla. Reakční směs se ochladí na 22°C a 16 hodin míchá. Vysrážený produkt se odfiltruje, promyje ethanolem (0,5 litru) a suší za vakua při 50°C. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (416 g, 74 %) ve formě bílé pevné látky. Rozklad při 237°C. δ (DMSO-dg): 1,25 (3H, t), 4,19 (2H, q), 7,66 (1H, d),

8,13 (1H, d). m/z (nalezeno: 248 [M+H]⁺, 100 %, CgHigNOgS vypočteno: 248).

g, 0,1 mol) se za

2,0 mol) a ·· ·· (c) Ethyl-2-chlor-5-chlorsulfonylnikotinoát

Ethyl-2-hydroxy-5-sulfonikotinoát (24,7 míchání suspenduje v thionylchloridu (238 g, dimethylformamidu (1,0 ml). Reakční směs se 2,5 hodiny zahřívá ke zpětnému toku, načež se z ní za sníženého tlaku odstraní většina thionylchloridu. Zbytkový thionylchlorid se odstraní azeotropickou destilací s toluenem. Získá se surová titulní sloučenina (30,7 g, 108 %) ve formě žlutého oleje, δ (CDCI3):

1,46 (3H, t), 4,50 (2H, q), 8,72 (IH, d), 9,09 (IH, d). Tohoto produktu se použije přímo v následujícím stupni.

(d) Ethyl-2-chlor-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinoát

Surový ethyl-2-chlor-5-chlorsulfonikotinoát (30,7 g, předpoklad 0,1 mol) se za míchání rozpustí v ethylacetátu (150 ml). Vzniklý roztok se ochladí ledem a opatrně se k němu během 30 minut přidá roztok N-ethylpiperazinu (11,4 g, 0,1 mol) a triethylaminu (22,5 g, 0,22 mol) v ethylacetátu (50 ml), přičemž se vnitřní teplota udržuje pod 10°C. Po dokončení přídavku se reakční směs nechá zahřát na 22°C a 1 hodinu míchá. Pevná látka se odfiltruje a filtrát se zkoncentruje za sníženého tlaku. Získá se surová titulní sloučenina (37,1 g, 103 %) ve formě surové žluté pryskyřice, δ (CDCI3): 1,10 (3H,

t), 1,42 (3H, m), 2,50 (2H, m), 2,60 (4H, m), 3,19 (4H, m), 4,43 (2H, q), 8,40 (IH, d), 8,80 (IH, d). m/z (nalezeno 362 [M+H]⁺, 100 %. C14H21CIN3O4S vypočteno: 362,85).

(e) Ethyl-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinoát

Roztok ethyl-2-chlor-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinoátu (36,1 g, 0,1 mol) v ethanolu (180 ml) se za míchání ochladí na 10°C a po částech se k němu přidá ethoxid • 9 ·· 99 sodný (10,2 g, 0,15 mmol). Během přídavku se teplota udržuje pod 20°C. Reakční směs se míchá 18 hodin při teplotě okolí, načež se z ní odfiltruje sraženina. K filtrátu se přidá voda (180 ml) a vodná směs se 1 hodinu zahřívá na 40°C. Ethanol (180 ml) se oddestiluje za okolního tlaku a výsledný vodný roztok se nechá zchladnout na teplotu okolí. Vysrážený produkt se odfiltruje, promyje vodou a suší za vakua při 50°C. Získá

se sloučenina	uvedená v nadpisu	(12,6 g,	34 %)	ve formě	světle
hnědé pevné látky 0 teplotě	tání	66 až 6 8	°C. δ	(CDCI3):	1,04
(3H, t), 1,39	(3H, t), 1,45	(3H,	t), 2,41	(2H,	q) , 2,52	(4H,
m) , 3,08 (4H,	m) , 4,38 (2H,	q),	2,57 (2H,	q) z	8,38 (1H,	d) ,
8,61 (1H, d).	m/z (nalezeno:	: 372	[M+H]+,	100 %	• c₁₆h₂₆n₃o₅s

vypočteno: 372,46) (f) 2-Ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinová kyselina

Ethyl-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinoát (10,2 g, 0,0275 mol) se rozpustí v toluenu (50 ml) a ke vzniklému roztoku se přidá roztok hydroxidu sodného (1,1 g, 0,0275 mol) ve vodě (20 ml). Tato dvoufázová směs se intenzivně míchá přes noc při teplotě místnosti. Vodná fáze se oddělí a její pH se přídavkem koncentrované kyseliny chlorovodíkové nastaví na 5,6. Vysrážený produkt se 15 minut za chlazení ledem míchá s vodou, odfiltruje, promyje vodou a suší za vakua při 50°C. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (4,1 g, 43 %) ve formě špinavě bílé pevné látky o teplotě tání 206 až 207°C. δ (CDC1₃): 1,25 (3H, t), 1,39 (3H, t), 2,82 (2H, q), 3,03 (4H,

m), 3,25 (4H, m) , 4,50 (2H, q), 8,25 (1H, d), 8,56 (1H, d). m/z (nalezeno: 344 [M+H]+, 100 %. C3.4H22N3O5S vypočteno

344,38) .

• · ·· ·· ·· ·· (g) Ethyl-3 -ethyl-ΙΗ-pyrazol- 5 -karboxylát

K míchanému roztoku 2,2-dimethoxybutanu (10 g, 84,7 mmol) v dichlormethanu (50 ml) se pod atmosférou dusíku při 0°C přidá pyridin (13,7 ml, 169,5 mmol). Reakční směs se udržuje při 0°C a během 1 hodiny se k ní za konstantního míchání přidá roztok trichloracetylchloridu (18,9 ml, 169,5 mmol) v dichlormethanu (35 ml). V průběhu reakce se ze žlutooranžového roztoku začne vylučovat bílá pevná látka. Reakční směs se během 20 hodin nechá zahřát na teplotu místnosti a zředí ethanolem (150 ml). Ethanolická směs se ochladí na 0°C a během 30 minut smísí s hydrátem hydrazinu (8,2 ml, 169,5 mmol) ve formě roztoku v ethanolu (35 ml). Reakční směs se zahřeje na 50°C a za atmosférického tlaku se z ní oddestiluje rozpouštědlo. Teplota se zvyšuje, dokud se v hlavě destilační kolony nedosáhne 78°C. Zpětný tok se udržuje další 2 hodiny, poté se směs ochladí na teplotu místnosti a zředí vodou (250 ml). Z vodné směsi se za sníženého tlaku odpaří ethanol.

Zbytek se extrahuje dichlormethanem (3 x 200 ml). Spojené i organické roztoky se vysuší síranem hořečnatým, přefiltrují a filtrát se odpaří za sníženého tlaku. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě hnědého oleje (12,05 g, 85 %).

^ΣΗ NMR (CDC1₃, 300MHz): δ 1,20 (3H, t), 1,28 (3H, t), 2,67 (2H, q) , 4,29 (2H, q), 6,55 (1H, s), 12,56 (1H, s)

LRMS m/z = 167,1 [M-H]+, C₈H₁₂N₂O₂ vypočteno: 168,2 (h) Ethyl-3-ethyl-lH-pyrazol-5-karboxylové kyselina

·· ··

Vodný roztok hydroxidu sodného (10M, 100 ml, 1,0 mol) se přikape k míchané suspenzi titulní sloučeniny z preparativního postupu 1 (g) (66,0 g, 0,39 mol) v methanolu. Výsledný roztok se 4 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Chladná reakční směs se zkoncentruje za sníženého tlaku na objem asi 200 ml a zředí vodou (200 ml). Vodná směs se promyje toluenem (3 x 100 ml). Výsledná vodná fáze se okyselí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 4. Shromáždí se bílá sraženina, která se vysuší odsátím. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (34,1 g) . δ (DMSO-dg) : 1,13 (3H, t), 2,56 (2H, q) , 6,42 (IH, s) (i) 4-Nitro-3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina

Dýmavá kyselina sírová (17,8 ml) se přikape k míchané ledem chlazené dýmavé kyselině dusičné (16,0 ml). Výsledný roztok se zahřeje na 50°C a po částech během 30 minut, kdy se teploda udržuje pod 60°C, se k němu přidá 3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina (Chem. Pharm. Bull., 1984, 32,

1568, 16,4 g, 0,106 mol). Reakční roztok se 18 hodin zahřívá na 60°C, nechá zchladnout a nalije na led. Bílá sraženina se shromáždí, promyje vodou a vysuší odsátím. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (15,4 g) o teplotě tání 170 až 172°C.

Analýza pro C7H9N3O4: vypočteno: C 42,21, H 4,55, N 21,10, nalezeno: C 42,35, H 4,56, N 21,07 %. δ (DMSO-d₆): 0,90 (3H,

t), 1,64 (2H, m), 2,83 (2H, m), 14,00 (IH, s) (j) 3-Ethyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina

O.

HO

O₂N • ••0

Podobným způsobem, jaký je popsán v preparativním postupu 1 (h) se z titulní sloučeniny z preparativního postupu 2(i) vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu ve formě hnědé pevné látky (64 %) . δ (DMSO-dg): 1,18 (3H, t) , 2,84 (2H, m), 13,72 (IH, s) (k) 4-Nitro-3-n-propyl-ΙΗ-pyrazol-5-karboxamid

Roztok titulní sloučeniny z příkladu l(i) (15,4 g, 0,077 mol) v thionylchloridu (75 ml) se 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Chladná reakční směs se odpaří za sníženého tlaku.

Zbytek se azeotropicky odpaří s tetrahydrofuranem (2 x 50 ml) a poté suspenduje v tetrahydrofuranu (50 ml). Na vzniklou suspenzi se za míchání a chlazení ledem 1 hodinu působí amoniakem. Ke vzniklé směsi se přidá voda (50 ml) a vodná směs se odpaří za sníženého tlaku. Pevný zbytek se trituruje s vodou a vysuší odsátím. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (14,3 g) o teplotě tání 197 až 199°C. Analýza pro C7H]_o^N4°3^:vypočteno: C 42,42, H 5,09, N 28,27, nalezeno: C 42,35, H 5,07, N 28,38 %. δ (DMSO-dg): 0,90 (3H, t), 1,68 (2H, m), 2,86 (2H, t), 7,68 (IH, s), 8,00 (IH, s) (l) 3-Ethyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxamid

Podobným způsobem, jaký je popsán v preparativním postupu l(i) se z titulní sloučeniny z preparativního postupu 1(k) vyrobí sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílé pevné látky (90 %). δ (DMSO-dg): 1,17 (3H, t), 2,87 (2H, m), 7,40 (IH, s), 7,60 (IH, s), 7,90 (IH, s).,LRMS: m/z 185 (M+l)+ • · fl · • flfl (m) (i) 5-Ethyl-l-(2-methoxyethyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamid

Směs 3-ethyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxamidu (2,5 kg,

13,6 mol), uhličitanu sodného (1,8 kg, 17,0 mol) a 2-bromethylmethyletheru (1,98 kg, 14,2 mol) v tetrahydrofuranu (22,5 litru) a vodě (2,5 litru) se 20 hodin za míchání zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí na teplotu okolí a přidá se k ní dichlormethan (67,5 litru) a voda (22,5 litru). Organická a vodná vrstva se oddělí. Vodná fáze se extrahuje dichlormethanem (22,5 litru). Spojené organické roztoky se destilují za atmosférického tlaku za doplňování ethylacetátem (33 litrů) na konečný objem 17 litrů. Ochlazená směs se 2 hodiny nechá granulovat při teplotě místnosti, přefiltruje a promyje ethylacetátem (2,5 litru). Získá se 5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3 -karboxamid ve formě bílé krystalické pevné látky (2,10 g, 57 %) o teplotě tání 140°C. Analýza pro C 44,46, H 5,79, N 23,01 C₉H₁₄N₄O₄: vypočteno: 44,63, H 5,79, N 23,14 % δ (CDC1₃): 1,18 (3H, t), 2,98 (2H, q) , 3,22 (3H, s), 3,77 (2H, t), 4,28 (2H, q) , 6,03 (ÍH, s), 7,36 (ÍH, s)

LRMS: m/z 243 (M+1) ⁺ (m) (ii) 5-Ethyl-l-(2-methoxyethyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamid

Směs 3-ethyl-4-nitro-IH-pyrazol-5-karboxamidu (25 g, 0,136 mol), uhličitanu sodného (18 g, 0,17 mol) a jodidu sodného

• 0*00	•
• 0	• ·	•	00
• 0	•	• ·	♦ 0
• * 0	•		_Λ · 0
• · ·		•	• 0 0
·♦ * «	• · ·	0 0 00	• 0 00

·· 00 (20,4 g, 0,136 mol) se při teplotě místnosti suspenduje v ethylmethylketonu (125 ml). Ke vzniklé suspenzí se přidá 2-bromethylmethylether (12,8 ml, 0,142 mol). Reakční směs se 70 hodin míchá při teplotě zpětného toku, ochladí na teplotu okolí a přidá se k ní voda (250 ml). Vodná suspenze se zahřeje na teplotu zpětného toku a při této teplotě udržuje po dobu 30 minut, načež se ochladí na teplotu místnosti. Vyloučená sraženina se nechá granulovat 3 hodiny při teplotě místnosti, odfiltruje a vysuší za vakua. Získá 5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamid ve formě žluté krystalické pevné látky (24,3 g, 74 %). Údaje o této sloučenině jsou uvedeny v preparátivním postupu 1(m)(i).

(n) 4-Amino-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid

Směs 5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamidu (20 g, 82,6 mmol) a 5% palladia na uhlíku (1 g) v methanolu (200 ml) se v uzavřené nádobě při 25 °C podrobí tlaku

343,5 kPa a 15 hodin míchá. Poté se reakční směs přefiltruje přes arbocel a filtrační koláč se promyje methanolem. Methanolický roztok se podrobí destilaci za atmosférického tlaku a jeho objem se doplní ethylacetátem na 100 ml. Ochlazená směs se nechá granulovat 2 hodiny při teplotě okolí, přefiltruje a filtrát se promyje ethylacetátem (20 ml). Získá se 4-ámino-5-ethyl-1-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid ve formě bílé krystalické pevné látky (15 g, 88 %) o teplotě tání 131°C. Analýza pro C9H15N4O2: vypočteno: C 50,94, H 7,55, N 26,42, nalezeno: C 50,75, H 7,62, N 26,38 %

• ··«· -
* · • · • · · • · ·	9 9 9 * Λ	9 9
·· ·♦	999	99

9 ·· ·· (CDC1₃): 1,20 (3Η, t), 2,63 (2H, q), 3,32 (3H, s), 3,74 (2H,

t) , 3,95 (2H, s), 4,15 (2H, t), 5,27 (ÍH, s), 6,59 (ÍH, s) LRMS: m/z 213 (M+l)⁺ (o)

NEt způsob (a)

2-Ethoxy-5 -(4 -ethyl-1-piperazinylsulfonyl)nikotinová kyselina (2,31 kg, 6,73 mol) se suspenduje v ethylacetátu (16,2 litru). Ke vzniklé suspenzi se při teplotě místnosti přidá 1,1-karbonyldiimidazol (1,09 kg, 6,73 mol). Reakční směs se 40 minut zahřívá na 45°C, poté 40 minut míchá při teplotě zpětného toku, ochladí na teplotu okolí a přidá se k ní 4amino-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid (1,5 kg, 7,06 mol). Výsledná směs se dalších 15 hodin míchá při teplotě zpětného toku, ochladí a přefiltruje. Filtrační koláč se promyje směsí tvořenou 90 % vody a 10 % ethylacetátu (2 ml/g). Získá se N-[3-karbamoyl-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-1H-pyrazol-4-yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsufonyl)nikotinamid ve formě špinavě bílé krystalické pevné látky (3,16 kg, 88 %) o teplotě tání 156°C. Analýza pro C23H35N7O5S: vypočteno: C 51,40, H 6,53, N 18,25, nalezeno: C 51,33, H 6,56, N 18,36 % (CDC1₃): 1,04 (3Η, t), 1,22 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,44 (2H,

• ····
• · • ·	··	* ··	·· • ·
* · ·		•	• ·
• · ·		•	• · ·
·· ··	···	• ···	• · ··

·· ··

(4H, m), 2,96	(2H,	q) , 3,12	(4H,	m) , 3,36	(3H,	S) ,
t), 4,27 (2H,	t) ,	4,80 (2H,	q),	5,35 (IH,	s) ,	6,68
8,66 (IH, d),	8,86	(IH, d) ,	10,51	(IH, s)

LRMS: m/z = 539 (M+l)+ způsob (b)

2-Ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinová kyselina (57,5 g, 0,08 mol) se suspenduje v ethylacetátu (0,193 litru) a ke vzniklé suspenzi se při teplotě místnosti přidá 1,1-karbonyldiimidazol (13,3 kg, 0,082 mol). Reakční směs se 15 minut zahřívá na 45°C, poté 60 minut míchá při teplotě zpětného toku, ochladí na teplotu okolí a přidá se k ní 4-amino-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid (16,5 g, 0,078 mol) . Reakční směs se dalších 17 za míchání zahřívá ke zpětnému toku. Výsledný roztok se ochladí a přidá se k němu voda (0,07 litru) a ethylacetát (0,17 litru). Vzniklá suspenze se zahřeje na 40°C. Organická vrstva se oddělí a zkoncentruje odpařením 0,23 litru rozpouštědla. Získaná suspenze se ochladí a nechá granulovat při 0 až 10°C, přefiltruje a filtrační koláč se promyje směsí 90 % vody a 10 % ethylacetátu (2 ml/g). Získá se N-[3-karbamoyl-5-ethyl-1- -(2methoxyethyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinamid ve formě špinavě bílé krystalické pevné látky (38,7 g, 89 %) o teplotě tání 159 až 161°C. δ (CDC1₃): 1,04 (3H, t), 1,22 (3H, t), 1,61 (3H, t), 2,42 (2H,

q), 2,54	(4H,	m) , 2,96	(2H,	q) , 3,12	(4H,	m) , 3,36 (3H,	s) ,
3,81 (2H,	t) ,	4,27 (2H,	t) ,	4,78 (2H,	q) /	5,35 (IH, s),	6,68
(IH, S),	8,66	(IH, d),	8,86	(IH, d),	10,51	(IH, S)

Příprava výchozích látek pro příklad 2

LRMS: m/z = 538 (M+1)+ • « • · · (a) Pyridin-2-amino-5-sulfonová kyselina

o=s=o

OH

2-Aminopyridin (80 g, 0,85 mmol) se po částech během 30 minut přidá k oleu (320 g). Výsledný roztok se 4 hodiny zahřívá na 140°C a poté ochladí. Reakční směs se nalije na led (200 g) a 2 hodiny míchá v lázni ze soli a ledu. Vzniklá suspenze se přefiltruje a pevná látka se promyje ledovou vodou (200 ml) a chladným IMS (200 ml) a vysuší odsátím. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě pevné látky (111,3 g) .

LRMS: m/z 175 (M+l)+

b) Pyridin-2-amino-3-brom-5-sulfonová kyselina

NH.

Br

O=S=O

OH

Brom (99 g, 0,62 mol) se během hodiny přikape k horkém roztoku titulní sloučeniny ze stupně a) (108 g, 0,62 mol) ve vodě (600 ml) tak, aby se trvale udržel zpětným tok. Po dokončení přídavku se reakční směs ochladí a vzniklá směs se přefiltruje. Pevná látka se promyje vodou a vysuší odsátím. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu (53,4 g).

δ (DMSO-dg, 300 MHz): 8,08 (IH, s), 8,14 (IH, s)

LRMS: m/z 253 (M)+

c) Pyridin-3-brom-2-chlor-5-sulfonylchlorid • · ·

Cl

Br

0=S=0

Cl

Roztok dusitanu sodného (7,6 g, 110,0 mmol) ve vodě (30 ml) se přikape k ledem chlazenému roztoku titulní sloučeniny ze stupně b) (25,3 g, 100,0 mmol) ve vodné kyselině chlorovodíkové (115 ml, 20%) takovou rychlostí, aby se teplota udržela pod 6°C. Reakční směs se 30 minut míchá při 0°C, další hodinu při teplotě místnosti a poté odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se suší 72 hodin za vakua při teplotě 70°C. Směs této pevné látky, chloridu fosforečného (30,0 g, 144,0 mmol) a oxychloridu fosforečného (1 ml, 10,8 mmol) se 3 hodiny zahřívá na 125°C, poté ochladí a nalije na led (100 g). Vzniklá pevná látka se odfiltruje a promyje vodou. Produkt se rozpustí v dichlormethanu, dichlormethanový roztok se vysuší síranem hořečnatým a odpaří za sníženého tlaku. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě žluté pevné látky (26,58 g) . δ (CDC1₃, 300 MHz): 8,46 (IH, s), 8,92 (IH, s)

d) 3-Brom-2-chlor-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin

Cl •Br

Roztok 1-ethylpiperazinu (11,3 ml, 89,0 mmol) a triethylaminu (12,5 ml, 89,0 mmol) v dichlormethanu (150 ml) se přikape k ledem chlazenému roztoku produktu ze stupně c) (23,0 g,

79,0 mmol) v dichlormethanu (150 ml). Reakční směs se hodinu ··· · · · · · · ··· ·· ··· ··· ·· ·· míchá pří 0°C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku. Hnědý olej ovitý zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití elučního gradientu dichlormethan : methanol (99 : 1 až 97 : 3) . Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě oranžové pevné látky (14,5 g).

δ (CDC1₃, 300 MHz): 1,05 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,55 (4H, m),

3,12 (4H, m), 8,24 (IH, s), 8,67 (IH, s)

e) 3-Brom-2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-1-ylsulfonyl)pyridin p

Br

O=S=O

Směs produktu ze stupně d) (6,60 g, 17,9 mmol) a ethoxidu sodného (6,09 g, 89,55 mmol) v ethanolu (100 ml) se 18 hodin zahřívá ke zpětnému toku, poté ochladí a zkoncentruje za sníženého tlaku. Zbytek se rozdělí mezi vodu (100 ml) a ethylacetát (100 ml). Vrstvy se oddělí a vodná fáze se extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml). Spojené organické roztoky se > vysuší síranem hořečnatým a odpaří za sníženého tlaku. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě hnědé pevné látky (6,41 g).

Analýza pro Cjg^oBr^C^S: vypočteno: C 41,35, H 5,28, N 10,99, nalezeno: C 41,27, H 5,33, N 11,11 % δ (CDC1₃, 300 MHz): 1,06 (3H, t), 1,48 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,56 (4H, m), 3,09 (4H, m), 4,54 (2H, q), 8,10 (IH, s), 8,46 (IH, s)

LRMS: m/z 378, 380 (M+1)+

• ·

f) Ethylester pyridin-2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-3-karboxylové kyseliny

Směs produktu ze stupně e) (6,40 g, 16,92 mmol), triethylaminu (12 ml, 86,1 mmol) a bis(trifenylfosfin)palladia(0) v ethanolu (60 ml) se 18 hodin pod atmosférou oxidu uhelnatého za tlaku 1374 kPa zahřívá na 100°C, poté ochladí a odpaří za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí sloupcovou chromatografií na silikagelu za použití elučního gradientu dichlormethan :

: methanol (100 : 0 až 97 : 3). Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě oranžového oleje (6,2 g).

	δ (cdci₃,	300	MHz) :	1,02 (3H, t), 1,39 (3H, t),	1,45 (3H, t),
	2,40 (2H,	q) z	2,54	(4H, m), 3,08 (4H, m), 4,38	(2H, q), 4,55
Λ	(2H, q),	8,37	(IH,	s), 8,62 (IH, s)
	LRMS: m/z	372	(M+1)	+

g) Pyridin-2-ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)-3-karboxylová kyselina

no · · · · ····

Z. O · · · · · · * • ·· ·· ··· ··· ··

Směs produktu ze stupně f) (4,96 g, 13,35 mmol) a vodného roztoku hydroxidu sodného (25 ml, 2M, 50,0 mmol) v ethanolu (25 ml) se 2 hodiny míchá při teplotě místnosti, poté za sníženého tlaku zkoncentruje na poloviční objem, promyje etherem a 4M kyselinou chlorovodíkovou okyselí na pH 5. Vodný roztok se extrahuje diehlormethanem (3 x 30 ml). Spojené organické extrakty se vysuší síranem hořečnatým a odpaří za sníženého tlaku. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě zlatohnědé pevné látky (4,02 g) .

δ (DMSO-dg, 300 MHz): 1,18 (3H, t), 1,37 (3H, t), 3,08 (2H, q) , 3,17 3,35 (8H, m), 4,52 (2H, q), 8,30 (IH, s), 8,70 (IH, s)

h) 4- [2-Ethoxy-5-(4-ethylpiperazin-l-ylsulfonyl)pyridin-3-ylkarboxamido]-IH-3-ethylpyrazol-5-karboxamid

Roztok 4-amino-3-ethyl-lH-pyrazolkarboxamidu (WO 9849166, preparativní postup 8) (9,2 g, 59,8 mmol) v N,N-dimethylformamidu (60 ml) se přidá k roztoku produktu ze stupně g) (21,7 g, 62,9 mmol), hydrátu 1-hydroxybenzotríazolu (10,1 g, 66,0 mmol) a triethylaminu (13,15 ml, 94,3 mmol) v dichlormethanu (240 ml). Ke vzniklé směsi se přidá hydrochlorid l-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu (13,26 g, 69,2 mmol). Reakční směs se 6 hodin míchá při teplotě místnosti, načež se z ní za sníženého tlaku odstraní dichlormethan. Výsledný roztok se nalije do ethylacetátu (400 ml) a ethylacetátová směs se promyje vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (400 ml). Vzniklá krystalická sraženina se odfiltruje, promyje • · · · · · · • · · · · • ♦ · · • · · · · • · · · · • «·· · · «* ethylacetátem a vysuší za vakua. Získá se sloučenina uvedená v nadpisu ve formě bílého prášku (22 g).

δ (CDCI3+I kapka DMSO-dg): 0,96 (3H, t), 1,18	(3H,	t), 1,50
(3H, t), 2,25 2,56 (6H, m), 2,84 (2H, q), 3,00	(4H,	m) , 4,70
(2H, q), 5,60 (IH, brs), 6,78 (IH, brs), 8,56	(IH,	d) , 8,76
(IH, d), 10,59 (IH, s), 12,10-12,30 (IH, s)
LRMS: m/z 480 (M+l)+

(i) N-[3-Karbamoyl-5-ethyl-1-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-4 -yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinamid

2-Ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinová kyselina (2,31 kg, 6,73 mol) se suspenduje v ethylacetátu (16,2 litru). Ke vzniklé suspenzi se při teplotě místnosti přidá 1,1-karbonyldiimidazol (1,09 kg, 6,73 mol). Reakční směs se 40 minut zahřívá na 45°C, poté 40 minut míchá při teplotě zpětného toku, ochladí na teplotu okolí a přidá se k ní 4-amino-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid (1,5 kg, 7,06 mol). Výsledná směs se dalších 15 hodin míchá při teplotě zpětného toku, ochladí a přefiltruje. Filtrační koláč se promyje směsí tvořenou 90 % vody a 10 % ethylacetátu (2 ml/g). Získá se N-[3-karbamoyl-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-1H-pyrazol-4-yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsufonyl)nikotinamid ve formě špinavě bílé krystalické pevné látky (3,16 kg, 88 %) o teplotě tání 156°C. Analýza pro C23H35N7O5S:

vypočteno: C 51,40, H 6,53, N 18,26, nalezeno: C 51,33, H

6,56, N 18,36 % δ (CDC1₃): 1,04 (3H, t), 1,22 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,44 (2H,

q), 2,54 (4H, m), 2,96 (2H, q), 3,12 (4H, m), 3,36 (3H, s), 3,81 (2H, t), 4,27 (2H, t), 4,80 (2H, q), 5,35 (IH, s), 6,68 (IH, s) , 8,66 (IH, d), 8,86 (IH, d), 10,51 (IH, s)

LRMS: m/z = 539 (M+l)+

Preparativní postup 3

Ethylacetátový solvát 1-(6-ethoxy-5-[3-ethyl]-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3 -pyridylsulfonyl)-4-ethylpiperazinu

O

Za účelem přípravy sloučeniny uvedené v nadpisu se směs titulní sloučeniny z preparativního postupu 1, N-[3-karbamoyl-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinamidu (1,18 kg, 2,2 mol), terc-butoxidu draselného (500 g, 4,4 mol) a ethylacetátu (193 g) v ethanolu (11,8 litru) 20 hodin zahřívá na 120°C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku, oddestiluje se asi 10 litrů rozpouštědla. Ke zbytku se přidá voda (2,9 litru) a k vodné směsi se za míchání při teplotě místnosti přidává vodná kyselina chlorovodíková, dokud její pH nedosáhne 7,5, načež se

k ní přidá ethylacetát (7,5 litru). Výsledná dvoufázová směs se zahřeje na 55°C. Organická, fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje dalším ethylacetátem (3,0 litru). Spojené organické fáze se destilací za sníženého tlaku zkoncentrují na konečný objem 4 litrů. Vysrážená pevná látka se nechá granulovat 1 hodinu při 5°C, odfiltruje, promyje ethylacetátem (1,2 litru) ’ a vysuší za vakua. Získá se 1-(6-ethoxy-5-[3-ethyl]-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-5 r

-yl]-3-pyridylsulfonyl)-4-ethylpiperazin ve formě světle žluté krystalické pevné látky (877 g, 78 %) o teplotě tání 157°C.

Analýza pro C23H33N7O5S.0,2 C₂H₅CO₂CH₃: vypočteno: C 53,21, H 6,49, N 18,25, nalezeno: C 52,65, H 6,46, N 17,76 % δ (CDCI3): 1,07 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,61 (3H, t), 2,44 (2H,

q) , 2,57 (4H, m), 3,08 (2H, q), 3,15 (4H, m), 3,32 (3H, s),

3,92 (2H, q), 4,48 (2H, q), 4,77 (2H, q), 8,65 (IH, d), 9,06 (IH, d). Spektrum také vykazuje signály, které odpovídají sloučenině solvatované ethylacetátem.

LRMS: m/z 520 (M+l)⁺

způsob (b)

Za účelem sloučeniny uvedené v nadpisu preparativního postupu 3 se směs titulní sloučeniny z preparativního postupu 1, N-[3-karbamoyl-5-ethyl-l-(2-methoxyethyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-ethoxy-5-(4-ethyl-1-piperazinylsulfonyl)nikotinamidu (34,6 g, 0,064 mol), terc-butoxidu draselného (14,8 g, 0,132 mol) a ethylacetátu (8,5 g, 0,096 mol) v ethanolu (0,26 litru) 17 hodin zahřívá na 105 až 107°C a poté zkoncentruje za sníženého tlaku (oddestiluje se se celkem asi 0,16 litru rozpouštědla) . K olej ovitému zbytku se přidá voda (0,28 litru) a vodná směs se míchá při teplotě místnosti, přičemž se k ní přidává vodná kyselina chlorovodíková, dokud se nedosáhne pH 7,5. Vysrážená pevná látka se nechá granulovat 1 hodinu při -10 až 0°C, odfiltruje, promyje ethanolem (0,4 litru) a vysuší · · · · ··♦· □ X · · · · · · · ··· *» ··· ··· ·· za vakua. Získá se 1-(6-ethoxy-5-[3-ethyl]-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazol[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl ) -4 -ethylpiperazin ve formě světle žluté krystalické pevné látky (23,3 g, 69,7 %) o teplotě tání 168 až 170°C. δ (CDC1₃) : 1,07 (3H, t) , 1,42 (3H, t) , 1,61 (3H, t) , 2,44 (2H, q), 2,57 (4H, m) , 3,08 (2H, q), 3,15 (4H, m), 3,32 (3H, s),

3,92 (2H, q), 4,48 (2H, q), 4,77 (2H, q), 8,64 (1H, d), 9,05 (1H, d) .

LRMS: m/z = 520 (M+l)⁺

Příklad 1

1-{6-Ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazin

Předloží se 10 g (0,019 mol) sloučeniny z preparativního postupu 3(a), ethylacetátového solvátů 1-(6-ethoxy-5-[3-ethyl]-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl)-4-ethylpiperazinu a poté 12 ml/g (tedy 120 ml) 16% vody v ethylalkoholu. Výsledná suspenze se zahřívá ke zpětnému toku. Výsledný roztok se zkoncentruje za atmosférického tlaku oddestilováním 6 ml/g

99 99 · 9 ··

9 99 99 99

9 · · 9 9 9

OO · 9999999

JJ 999 9 9 999

999 99 999 999 99 99 (tedy 60 ml), poté ochladí na teplotu místnosti. Při 40°C dojde ke krystalizaci. Získaná suspenze se ochladí na 5 až 10°C a 30 minut nechá granulovat. Sraženina se odfiltruje a promyje ethanolem (2 ml/g, tedy 20 ml). Vlhká pevná látka se suší přes noc za vakua při 55 až 60°C. Získá se bílá krystalická pevná látka (7,6 g, 76 %) o teplotě tání 162 až 165°C.

δ (CDC1₃): 1,05 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,43 (2H,

q) , 2,57 (4H, t) , 3,09 (2H, t) , 3,15 (4H, t), 3,30 (3H, s) ,

3,93 (2H, t), 4,48 (2H, t), 4,90 (2H, q), 8,65 (1H, d), 9,05 (1H, d), 10,65 (1H, s)

Příklad 2

Předloží se 10 g (0,019 mol) sloučeniny z preparativního postupu 3(b), ethylacetátového solvátu 1-(6-ethoxy-5-[3-ethyl]-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl)-4-ethylpiperazinu φφ Φ·Φ·

Π/l φ · Φ · · Φ · · □ Η- · Φ · Φ Φ · « • ΦΦ ΦΦ ·Φ· ··· ·· a poté 12 ml/g (tedy 120 ml) 16% vody v ethylalkoholu. Výsledná suspenze se zahřívá ke zpětnému toku. Výsledný roztok se zkoncentruje za atmosférického tlaku oddestilováním 9,5 ml/g (tedy 60 ml), poté ochladí na teplotu místnosti. Při 40°C dojde ke krystalizaci. Získaná suspenze se ochladí na 5 až 10°C a 30 minut nechá granulovat. Sraženina se odfiltruje a promyje ethanolem (2 ml/g, tedy 20 ml). Vlhká pevná látka se suší přes noc za vakua při 55 až 60°C. Získá se bílá krystalická pevná látka (9,4 g, 94 %) o teplotě tání 158 až 160°C.

δ (CDC1₃): 1,05 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,43 (2H,

q) , 2,57 (4H, t), 3,09 (2H, t), 3,15 (4H, t), 3,30 (3H, s),

3,93 (2H, t), 4,48 (2H, t), 4,90 (2H, q), 8,65 (ÍH, d), 9,05 (ÍH, d), 10,65 (ÍH, s)

Při způsobech popsaných v příkladech provedení je možno používat vody a farmaceuticky vhodných alkoholů, jako methanolu, ethanolu, propanolu, přednostně ethanolu nebo isopropylalkoholu a jejich směsí. Těchto způsobů je také možno použít pro překrystalování titulní sloučeniny.

Odborníkům bude zřejmé, že solváty je možno připravovat řadou různých standardních způsobů, které jsou známé.

Další solváty 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu je možno připravovat buď z ethylacetátového solvátu (sloučeniny z preparátivního postupu 3) nebo ze sloučenin z příkladů 1 nebo 2. Takové další solváty lze například připravovat tak, že se (a) výchozí sloučenina po prodloužené období (jako například po dobu asi 2 týdnů) míchá se zkoušeným rozpouštědlem (například acetonitrilem), pevná látka se odfiltruje a poté se • ·· ·

provede PXRD analýza (jak je definována výše) této vlhké, tj. nevysušené, pevné látky (solvatované); nebo (b) výchozí sloučenina rozpustí ve zkoušeném rozpouštědle (například acetonitrilu) a z tohoto roztoku se jakýmkoliv vhodným způsobem, například ochlazením nebo za použití odpařovacích postupů, nechá vykrystalovat požadovaný solvát, a tato vlhká, tj. nevysušená, pevná látka (solvatovaná) se následně podrobí PXRD analýze.

Krystalické sloučeniny definované výše je možno připravovat ze svých solvátů desolvatací za použití standardních o sobě známých způsobů, jako je působení tepla (přednostně při asi 100 až 150°C) nebo působení podtlaku (při teplotě okolí a vyšší) nebo tak, že se rozpustí v nesolvatujícím rozpouštědle (viz například příklady 1 a 2). Odborník v tomto oboru bude při výrobě krystalické sloučeniny definované výše schopen použít alternativních vysušovacích postupů.

Jako další solváty 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3 pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu, které je možno připravovat, lze uvést solváty s n-butanolem, methylethylketonem (MEK), acetonitrilem, tetrahydrofuranem nebo toluenem. Přítomnost solvatované látky lze určit pomocí PXRD.

Například acetonitrilový solvát 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu se připraví tak, že se sloučenina nejprve rozpustí v horkém acetonitrilu. Vzniklý roztok se pomalu ochladí a výsledná suspenze se nechá granulovat přes noc při teplotě okolí. Roztok se odfiltruje za použití podtlaku a oddělená pevná látka (solvát) se nechá vysušit za teploty a tlaku okolí. Přítomnost solvátu ·· ΦΦΦ· φ φ · φ φ φφ φ φφ φφ φ φ φ φ φ φ φ φφφ

Q/ζ Φ φφφ ΦΦΦΦ Φ ύυ ΦΦΦ φ Φ ΦΦΦΦ

ΦΦΦ ΦΦ ΦΦΦ ΦΦΦ ΦΦ Φ· se detekuje pomocí PXRD. Alternativním způsobem detekce solvátu je sledování hmotnostního úbytku pomocí TGA. Acetonitrilový solvát je přítomen ve formě hemisolvátu, ačkoliv v úvahu připadají i jiné solváty.

Ukázalo se, že z těchto solvatovaných látek v případě sušení při asi 150°C vzniká volná báze 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu, jak dokládají výsledky diferenciální skanové kalorimetrie (DSC).

DSC byla prováděna za použití zařízení Perkin Elmer DSC7/TGA7 při rychlosti zahřívání 20°C/min.

Na obr. 1 je znázorněn graf DSC krystalické látky s PXRD obrazcem uvedeným v tabulce 1 (sloučeniny z příkladu 1); graf DSC ethylacetátového solvátu (sloučeniny z preparativního postupu 3); DSC graf acetonitrilového solvátu (solvátu sloučeniny z příkladu 1, který se připraví výše popsaným způsobem).

Z tohoto obrázku vyplývá, že jak ethylacetátový, tak i methylethylketonový (MEK) solvát se nejprve desolvatují a uvolní krystalickou látku definovanou výše, která poté taje při teplotě asi 160 až 165°C.

2o-0 'i -íW

Claims

PATENTOVÝ NÁROK

1. Polymorf 1-{6-ethoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-methoxyethyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-ethylpiperazinu, který vykazuje simulovaný práškový rentgenový difrakční obrazec s hlavními píky v podstatě jak jsou definovány dále

Vzdálenost d (nm) Intenzita (%) Vzdálenost d (nm) Intenzita (%) Vzdálenost d (nm) Intenzita (%) Vzdálenost d (nm) Intenzita (%) 1,22486 1,24 0,42323 19,04 0,3061 9,18 0,24041 2,24 0,97301 100 0,41595 1,19 0,30483 2,22 0,23424 1,22 0,85596 36,31 0,40421 1,35 0,30428 1,94 0,2299 1,13 0,73923 15,02 0,39186 7,81 0,29929 1,59 0,2264 1,23 0,73856 8,35 0,38951 10,26 0,29804 2,1 0,22605 1,29 0,73284 1,69 0,38491 5,34 0,29403 3,46 0,22079 2,65 0,58222 14,49 0,38485 2,46 0,29073 1,74 0,21855 1,9 0,57617 1,96 0,38427 43,14 0,28719 1,68 0,21679 1,92 0,57461 43,25 0,37357 3,1 0,28532 4,7 0,21468 1,35 0,51166 7,17 0,36961 3,99 0,28122 11,19 0,21119 4,52 0,51078 32,71 0,36805 4,51 0,28097 2,82 0,20769 1,15 0,48807 17,47 0,36042 5,28 0,27776 2,17 0,20471 1,12 0,48674 10,85 0,35988 6,09 0,27774 1,46 0,2028 1,63 0,4865 10,98 0,35819 6,8 0,27162 1,76 0,19935 1,03 0,48425 13,19 0,35721 8,55 0,27041 3,63 0,19883 2,96 0,48018 3,32 0,35355 2,47 0,26875 1,42 0,19181 1,27 0,47632 10,57 0,3407 1,2 0,26443 2,19 0,19058 1,03 0,47491 4,16 0,33461 4,91 0,26084 3,75 0,1884 1,23 0,4641 1,96 0,33318 7,54 0,26025 1,6 0,18797 2,49

• · 49 44 ·· · 9 4 • 9 4 9

4 4 9 4

4994 49 94

0,4629 19,73 0,33154 4,36 0,25809 1,31 0,18749 2,81 0,43314 9,53 0,32827 1,7 0,25448 1,21 0,17939 1,57 0,43301 3,65 0,32774 1,22 0,25438 3,26 0,17617 1,24 0,43066 26,66 0,32434 19,95 0,24325 2,47 0,17379 1,82 0,42909 51,91 0,3224 2,11 0,24212 1,24 0,17194 1,03 0,42798 24,75 0,30663 1,38 0,24163 4,39

přičemž tento PXRD obrazec je vytvořen za použití rentgenového záření mědi K-alfal o vlnové délce 0,154178 nm.

^303-12(0

·· ····