SK279298B6 - Deriváty camptothecinu, spôsob ich výroby, farmace - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka vo vode rozpustných derivátov camptothecinu, substituovaných v polohe 7, spôsobu výroby týchto látok a farmaceutických prostriedkov s ich obsahom, určených na liečbu nádorov.

Doterajší stav techniky

Camptothecin, prírodný cytotoxický alkaloid je inhibítor topoizomerázy a účinná protinádorová látka. Prvýkrát bola izolovaná z listov a kôry činskcj rastliny Camptotheca accuminata a opísaná v publikácii Wall a ďalší, J. Am. Chem. Soc., 88,3888 (1966).

Camptothecin je tvorený kondenzovaným systémom kruhov, a to chinolínovými kruhmi A a B, kondenzovanými na pyrolidínový kruh C, ktorý je ďalej kondenzovaný na alfa-pyridónový kruh D, ktorý je kondenzovaný ešte na laktónový kruh E.

Camptothecin

Táto látka obsahuje v polohe 20 asymetrický atóm uhlíka, takže sú možné dve enantioméme formy. Prírodné sa vyskytujúca zlúčenina má znázornenú konfiguráciu S.

Cytotoxické látky sa často používajú na spomalenie rastu alebo na potlačenie rastu nádorov. Cytotoxická účinnosť Camptothecinu je pravdepodobne spôsobená schopnosťou tejto látky spôsobiť inhibíciu topoizomerázy. Funkcia topoizomerázy bola podrobnejšie vysvetlená v publikáciách A. Lehninger, Principles ofBiochemistry, 813, Worth Publudhes, New York 1982, L. F. Liu, „DNA Topoisomerases“, CRC Critical Rewiew in Biochemistry, 1 až 24, 15, 1983 a H. Vosberg, „DNA Topoisomerases: Enzymes that Control DNA Conťormation“, Current Topics in Microbiology and Immunology, 19, Springer-Verlag, Berlín, 1985. Zvlášť bolo dokázané, že Camptothecin je účinný pri liečbe leukémie (L-1210) a niektorých tuhých nádorov laboratórnych zvierat, ako bolo opísané napríklad v publikáciách Chem. Rev. 23, 385, 1973 aCancer Treat. Rep., 60, 1007, 1967.

Nanešťastie sa nevyplnili úplne nádeje, ktoré boli kladené do použitia Camptothecinu ako veľmi účinnej protinádorovej látky. Camptothecin je totiž v podstate nerozpustný v z fyziologického hľadiska prijateľných vodných prostrediach a je nutné ho modifikovať tak, aby bol dostatočne rozpustný na parenterálne podávanie, ktoré je pri nádorovej liečbe výhodné. Rozpustnosť je možné zvýšiť tvorbou sodnej soli, to znamená otvorením laktónového kruhu pôsobením hydroxidu sodného, ako bolo opísané v publikácii F. M. Muggia a ďalší, Cancer Chemotherapy Reports, pt. 1, 56, č. 4, 515, 1972. Ale v publikácii M. C. Wani a ďalší, J. Med. Chem. 23, 554, 1980 sa uvádza, že alfahydroxylaktónová časť kruhu E je úplne nevyhnutná na protinádorovú účinnosť.

V danej oblasti techniky sú známe pokusy o modifikáciu a o tvorbu derivátu Camptothecinu s cieľom zlepšiť rozpustnosť tejto látky vo vode. Napriek tomu, že rad týchto derivátov bol účinný in vitro a in vivo u laboratórnych zvierat v prípade leukémie L-1210, pri chronických pokusoch na živočíšnych modeloch s implantovanými tuhými nádormi, nebolo možné dosiahnuť uspokojivé výsledky.

V publikácii Miyasaka a ďalší, US patentový spis č. 4 399 282 sa uvádza skupina Camptothecinových derivátov, substituovaných v polohe 7 rôznymi skupinami, napríklad hydroxymetylovou a alkoxymetylovou skupinou. Okrem toho v US patentovom spise č. 4 399 276 toho istého autora sú opísané Camptothecin-7-aldehyd a niektoré príbuzné aldehydové deriváty, ako acetály, oxímy a hydrazóny. V poslednom čase bol v US patentovom spise č. 4 943 579, Vishnuvajjala a ďalší, opísaný rad vo vode rozpustných Camptothecinových derivátov so substituentmi na kruhu A, podobné deriváty boli opísané aj v európskom patentovom spise č. 321 122, Boehm a ďalší.

Ďalšie príklady derivátu Camptothecinu sú opísané v US patentovom spise č. 4 473 692 a 4 545 880, oba Miyasaka a ďalší a v publikácii W. Kingsbury a ďalší, J. Med. Chem. 34, 98, 1991. V žiadnej z týchto publikácií sa neuvádzajú zlúčeniny, ktoré by mali vyšší protmádorový účinok než Camptothecin.

Wani a spolupracovníci uvádzajú v publikácii M. C. Wani a ďalší, J. Med. Chem. 29, 2358, 1986 a 30, 2317, 1987, že 10,11 -metyléndioxycamptothecin je účinnejší než nesubstituovaný Camptothecin. Ale rozpustnosť tejto látky vo vode je rovnako nízka ako rozpustnosť Camptothecinu, čo podstatne obmedzuje klinické využitie tejto látky.

Teraz boli nájdené nové, vo vode rozpustné analógy Camptothecinu, ktoré majú dobrý inhibičný účinok proti topoizomeráze I in vitro a veľmi dobrý protmádorový účinok in vivo.

Podstata vynálezu

Podstatu vynálezu tvoria vo vode rozpustné deriváty Camptothecinu všeobecného vzorca (I)

kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

i) R¹ a R² znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, (Cj-sjalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl(C_w)alkyl, (C_M>lkenyl, hydroxy(C^)alkyl alebo (Cj._s)alkoxy(C|^)alkyl, ii) R¹ znamená atóm vodíka, (Cj^jalkyl, (C₃.₇)cyk- loalkyl, (C₃_₇)cykloalkyl(C|_₆)alkyl, (C₃₆)alkenyl, hydroxy(Cj_₆)alkyl alebo (C^jjalkoxy(C|.₆)alkyl a

R² znamená skupinu -COR³, v ktorej

R³ znamená atóm vodíka, (C^jalkyl, peifaalogén(C_M)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C₃.₇) cykloalkyl(C_w)alkyl, (C_3<)alkenyl, hydroxy(Ci.₆)alkyl, (Ci.₆)alkoxyskupinu, (C_w)alkoxy(C_w)alkyl, alebo iii) R¹ a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca (IA) ^(IA) ’ kde

Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO_;, CH₂ alebo NR4, v ktorej

R⁴ znamená atóm vodíka, (Ci.₆)alkyl, perhalogén(C_b6)alkyl, aryl, substituovaný aryl, v ktorom substituentom je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (Ci.íjalkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (Ci.₆)alkylaminoskupina, perhalogén(Ci._s)alkyl, hydroxy(C₁.₆)alkyl, (C|_₆)alknxyskupina (C_{I 6})alkoxy(C j.ŕ)alkylová skupina, alebo R⁴ znamená skupinu -COR⁵, v ktorej

R⁵ znamená atóm vodíka, (C].₆)alkyl, perhalogén(C_b6)alkyl, (C₁₆)alkoxyskupmu, aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C^jalkyl, perhalogén(C₁.₆)alkyl, hydroxy(Ci_₆)alkyl alebo (Ci.₆)alkoxy(Ci._e)alkyl, ako aj farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

Soli, prijateľné z farmaceutického hľadiska zahrnujú napríklad soli s anorganickými kyselinami, ako hydrochloridy, sulfáty, fosfáty, hydrogénfosfáty, hydrobromidy a dusičnany alebo soli s organickými kyselinami, ako acetáty, maláty, maleáty, fiimaráty, vínany, jantarany, citráty, laktáty, metánsulfonáty, p-toluénsulfonáty, palmoáty, salicyláty a stearáty. Soli iných kyselín, napríklad oxaláty nemusia byť prijateľné z farmaceutického hľadiska, ale je možné ich využiť ako medziprodukty na získanie zlúčenín podľa vynálezu a ich solí, prijateľných z farmaceutického hľadiska.

Laktónový kruh, kruh E, môže byť otvorený hydroxidom alkalického kovu alebo kovu alkalických zemín, napríklad hydroxidom sodným alebo hydroxidom vápenatým za vzniku soli zodpovedajúcej zlúčeniny všeobecného vzorca (I) s otvoreným kruhom E s alkalickým kovom alebo s kovom alkalických zemín. Vzhľadom na lepšiu rozpustnosť vo vode je možné zlúčeninu s otvoreným kruhom E výhodne čistiť bežným prekryštalizovaním. Potom je možné formu s otvoreným kruhom E použiť aj ako medziprodukt na získanie zlúčeniny všeobecného vzorca (I), napríklad pôsobením kyseliny, ako kyseliny chlorovodíkovej, čím môže byť získaná čistená zlúčenina všeobecného vzorca (I).

Ako už bolo uvedené, obsahuje Camptothecin asymetrický atóm uhlíka v polohe 20, takže sú možné dve jeho enantioméme formy, R a S. Vynález zahrnuje obe enantioméme formy a tiež akékoľvek kombinácie týchto dvoch foriem. Tam, kde nie je uvedená v štruktúrnom vzorci špecifická konfigurácia v polohe 20, rozumie sa, že vzorec predstavuje obe enantioméme formy a ich zmesi. Pokiaľ nie je uvedené inak, podľa uznávaného názvoslovia znamená označenie (R, S) racemickú zmes, v ktorej sú v približne rovnakom množstve prítomné formy R a S, zatiaľ čo označenie (R) a (S) označuje v podstate čisté enantioméry R a S. Vynález zahrnuje aj ďalšie formy zlúčenín všeobecného vzorca (I), napríklad solváty, hydráty, polymorfhé formy a podobne.

Zlúčeniny podľa vynálezu je možné využiť na inhibíciu topoizomerázy typu I v bunkách cicavcov tak, že sa cicavcom podá množstvo zlúčenín všeobecného vzorca (I), schopné spôsobiť inhibíciu uvedeného enzýmu. Týmto spôsobom je možné liečiť nádory cicavcov tak, že sa cicavcovi, ktorý nádorom trpí, podá protinádorovo účinné množstvo zlúčeniny všeobecného vzorca (I).

Podstatu vynálezu tvoria aj farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú zlúčeniny všeobecného vzorca (I) ako svoju účinnú zložku, okrem toho tvorí podstatu vynálezu aj spôsob výroby zlúčenín všeobecného vzorca (I) a spôsob výroby nových chemických medziproduktov, použitých pri syntéze, ako aj tieto nové medziprodukty.

Pod pojmom „nižší“ sa v prípade alkylových a alkoxylovyeh skupín rozumejú zvyšky s 1 až 6 atómami uhlíka a v prípade alkenylových skupín zvyšky s 3 až 6 atómami uhlíka za predpokladu, že dvojitá väzba nevychádza z atómu uhlíka, ktorý je viazaný na atóm dusíka. Pod pojmom „perhalogén“ sa rozumie, že všetky atómy uhlíka v príslušnej skupine sú nahradené atómami halogénu, ide teda napríklad o trifluónnetyl v prípade nižšieho perhalogénalkylového zvyšku. Pod pojmom „aryl“ sa rozumie fenyl alebo naftyl.

Zvlášť výhodnými zlúčeninami všeobecného vzorca (I) sú tie látky, v ktorých R¹ a R² nezávisle znamenajú

i) nezávisle od seba atóm vodíka, (C^jalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (CA₇)cykloaIkyl(C_M)alkyl, (C_3J))alkenyl, hydroxy(Cj₄)alkyl, (Cj₄)alkoxy(C_M)alkyl, alebo ii) spoločne s atómom dusíka tvoria aziridín, azetidín, pyrolidín, piperidín, hexametylénimín, imidazolidín, pyrazolidín, izoxazolidín, piperazín, N-metylpiperazín, homopiperazín, N-metylhomopiperazín, tiazolidín, izotiazolidín, morfolín alebo tiomorfolín.

Výhodnú skupinu zlúčenín podľa vynálezu predstavujú tie látky všeobecného vzorca (I), v ktorých R¹ a R² spoločne tvoria heterocyklickťi skupinu, a to aziridínovú, azetidínovú, pyrolidínovú, piperidínovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidínovú, izoxazolidínovú, piperazínovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metylhomopiperazínovú, tiazolidínovú, izotiazolidínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu.

Ďalej sú výhodné zlúčeniny, v ktorých n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

i) R¹ a R² nezávisle znamenajú atóm vodíka, (Ci4)al- kyl, alebo hydroxy(C₁.₄)alkyl, ii) R¹ znamená atóm vodíka a R² znamená skupinu -COR³, kde R³ znamená perhalogén(C].4)alkyl, alebo iii) R*a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý· sú viazané azetidínovú, pyrolidínovú, piperidínovú, morfolínovú, tiomorfolínovú alebo piperazínovú skupinu, prípadne substituovanú na atóme dusíka (C_M)alky- lom, fenylom, prípadne substituovaným jedným alebo väčším počtom perhalogén(C_lJt)alkylových, alebo (Cj.₄)alk(>xyskupín; alebo skupinu -COR⁵, kde R⁵ znamená (C ifyalkoxy skupinu.

Špecifickými zlúčeninami podľa vynálezu sú nasledujúce zlúčeniny: 7-dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-dimetylaminometylén-10,l 1 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-dimetylanúnometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-morfolinometylén-l 0,11 -etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-morfolinometylén-l 0,1 l-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-pyrolidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-piperidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-piperidmometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-(4-metylpiperazinonietylén)-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-dietylaminometylén-l 0,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-N-metyletanolaminometylén-10,l 1 -metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecm,

7-dietanolaminometylén-10,11 -etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-dietanolammometylén-l 0,1 l-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

7-azetidinometylén-10,11 -metyléndioxy-20(S)<amptothecin,

7-tiomorfolinometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-azetidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-(4-metylpiperazinometylén)-10,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-triĽuóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-trifluóracetamidometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-aminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptotliecin-dihydrochlorid,

7-aminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin-dihydrochlorid,

7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy20 (S) -camptothecin,

-piperazinometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin vo forme soli s kyselinou trifluóroctovou, 7-(a,a,a-trifluór-m-tolyl)piperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

7-(2-metoxyfenylpiperazino)metylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin a

7-ténylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, a soli a so 1 vaty týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.

Výhodnou zlúčeninou je 7-(4-metylpiperazinometylén)10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, a soli a solváty tejto látky, prijateľné z farmaceutického hľadiska.

Výhodné sú zlúčeniny v konfigurácii S.

Jednou skupinou výhodných zlúčenín všeobecného vzorca (I) sú zlúčeniny všeobecného vzorca (ľ)

kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

R^la a R^2a znamenajú

i) nezávisle od seba atóm vodíka, (Ci_₆)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C\₇)cykloalkyl(C|.₆)alkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxy(C₁.₆)alkyl, (Ci.₆)alkoxy(C_l.₆)alkyl, alebo ii) tvoria spoločne s atómom dusíka heterocyklickú skupinu s 3 až 7 atómami všeobecného vzorca (IA')

(i*·) , kde

Y^a znamená atóm kyslíka, síry, CH₂, NH alebo

N((C_w)alkyl) a soli týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.

Výhodné sú soli alkalického kovu alebo kovu alkalických zemín, zodpovedajúce zlúčenine všeobecného vzorca (I), v ktorej kruh E je otvorený, pričom táto soľ je získaná pôsobením bázy alkalického kovu alebo kovu alkalickej zeminy na túto zlúčeninu.

Príprava zlúčenín

Spôsobom podľa vynálezu je možné vyrobiť zlúčeniny všeobecného vzorca (I) tak, že sa a) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (IV)

kde

X znamená atóm halogénu, so zlúčeninou všeobecného vzorca (V)

HNR^lR² (V), kde R¹ a R² majú význam, uvedený vo vzorci (I), alebo sa b) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (Ľa)

kde R¹ a R² majú význam, uvedený vo vzorci (I), so zlúčeninou všeobecného vzorca (III)

a prípadne sa v takto získanej zlúčenine uskutoční jeden alebo väčší počet nasledujúcich reakcií:

i) výsledná zlúčenina všeobecného vzorca (Ί) alebo jej soľ alebo chránený derivát sa premení na inú zlúčeninu všeobecného vzorca (I) a/alebo sa ii) odstráni akákoľvek ochranná skupina alebo skupiny a/alebo iii) sa premení zlúčenina všeobecného vzorca (I) alebo jej soľ na soľ alebo solvát, prijateľný z fyziologického hľadiska.

SK 279298 Β6

Podľa postupu A je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa stupňa 2 nasledujúcej schémy I

Schéma I

NR'R²

V stupni 1 schémy I je možné nechať reagovať zlúčeniny všeobecného vzorca (II), v ktorom X znamená ľahko odštiepiteľnú skupinu podľa publikácie J. March, Advanced Organic Chemistry, 3. vydanie, str. 179, John Wilcy and Sons, New York, 1985, napríklad atóm halogénu, ako atóm chlóru so zlúčeninou všeobecného vzorca (IH) spôsobom podľa US patentového spisu č. 4 894 456, vydaného 16. januára 1990 (Wall a ďalší), čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca (IV).

V stupni 2, ktorý je vlastnýmpostupom A podľa vynálezu sa premieňajú zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) na zlúčeniny všeobecného vzorca (I) tak, že sa odštiepi ľahko odštiepiteľná skupina X pôsobením, zlúčeniny všeobecného vzorca (V), v ktorej R¹ a R² majú význam, uvedený vo vzorci (1). Táto náhrada jednej skupiny druhou sa bežne uskutočňuje v rozpúšťadle, ako je voda, alkanol s 1 až 4 atómami uhlíka, alkyléndiol s 2 až 4 atómami uhlíka 1 -hydroxy-2-metoxyetán, dimetylacetamid (DMAC), N-metylpyrolidinón, dimetylformamid (DMF), tetrahydrofúrán (THF), dimetylsulfoxid (DMSO), toluén alebo zmes týchto rozpúšťadiel za prítomnosti prebytku amínu, to znamená prebytku zlúčeniny všeobecného vzorca (V), prípadne za prítomnosti bázy, napríklad uhličitanu draselného. Tento postup je zvlášť vhodný na prípravu zlúčenín všeobecného vzorca (I), v ktorom ani jeden zo symbolov R¹ alebo R² neznamená atóm vodíka.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu D je možné pripraviť zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa stupňa 2a nasledujúcej schémy 1A:

Schéma IA

V stupni la sa zlúčenina všeobecného vzorca (V) nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca (II) za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (ΠΑ), v ktorej R¹ a R² majú význam, uvedený vo všeobecnom vzorci (I). Reakciu je možné uskutočňovať za podobných podmienok, aké boli opísané pre všeobecný postup A v stupni 2 schémy IA.

V stupni 2a všeobecného postupu B sa zlúčenina všeobecného vzorca (ΠΑ) nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca (III) podobným spôsobom ako v stupni 1A schémy I za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (I).

V špecifickom uskutočnení postupu B je možné získať zlúčeniny všeobecného vzorca (I) postupom, znázorneným v nasledujúcej schéme IB:

Schéma IB

SK 279298 Β6

Schéma IB - pokračovanie

V stupni lb sa zlúčenina všeobecného vzorca (Va), v ktorej „Hal“ znamená atóm halogénu, to znamená fluóru, chlóru, brómu alebo jódu, napríklad trifluóracetamid nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca (II) v polárnom aprotickom rozpúšťadle, napríklad v acetonitrile za prítomnosti bázy, ktorá je v polárnych aprotických rozpúšťadlách rozpustná, napríklad uhličitanu cézneho v prípade, že rozpúšťadlom je acetonitril, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca (Ilb).

V stupni 2b sa zlúčenina všeobecného vzorca (Hb) nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca (Hl) podobným spôsobom ako v stupni 1 schémy I, čím sa získa zlúčenina všeobecného vzorca (IVb).

V stupni 3b sa na zlúčeninu všeobecného vzorca (Vb) pôsobí kyselinou všeobecného vzorca (H^B'), môže ísť o anorganickú kyselinu, napríklad kyselinu chlorovodíkovú, získa sa zlúčenina všeobecného vzorca (Ib), to znamená soľ zlúčeniny všeobecného vzorca (I). Na zlúčeninu všeobecného vzorca (Ib) je možné pôsobiť zvyčajným spôsobom zásadou, čím sa získa zodpovedajúca voľná báza. Túto voľnú bázu je potom možné v prípade potreby premeniť zvyčajným spôsobom na soľ, prijateľnú z farmaceutického hľadiska.

Tento postup je zvlášť vhodný na výrobu zlúčenín všeobecného vzorca (I), v ktorom R¹ a R² znamenajú atómy vodíka alebo v ktorom R* znamená atóm vodíka. Zlúčeniny všeobecného vzorca (II) je možné pripraviť podľa nasledujúcej schémy II:

Schéma II

,( vi) stupeň !

V stupni 1 schémy II sa nechá reagovať zlúčenina vzorca (VI) s acylačným činidlom, napríklad halogenidom alebo anhydridom alkánkarboxylovej kyseliny s 2 až 5 atómami uhlíka, napríklad acetylchloridom alebo anhydridom kyseliny octovej za prítomnosti slabej bázy, napríklad uhličitanu draselného v polárnom, aprotickom rozpúšťadle, napríklad chloroforme za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (VII), v ktoromAc znamená acylovú skupinu s 2 až 5 atómami uhlíka.

V stupni 2 sa zlúčenina všeobecného vzorca (VII) nechá reagovať so zlúčeninou všeobecného vzorca (VHI), v ktorom X znamená odštiepiteľnú skupinu, tak ako bola definovaná v prípade zlúčenín všeobecného vzorca (IV) a Hal znamená atóm halogénu, za prítomnosti halogenidu kovu, napríklad chloridu zinočnatého v polárnom aprotickom rozpúšťadle, napríklad nitrometáne za vzniku zlúčeniny všeobecného vzorca (IX). Zlúčeninou všeobecného vzorca (VIII) môže byť napríklad halogénacetylhalogenid, ako chlóracetylchlorid alebo halogénacetonitril, ako chlóracetonitril.

V stupni 3 sa vytvára zlúčenina všeobecného vzorca (Π) odstránením acylovej skupiny Ac zo zlúčeniny všeobecného vzorca (IX) deacyláciou známymi postupmi, napríklad spôsobom podľa publikácie T. Green, Protective Qroups in Organic Chemistry, kapitola 7, John Wiley, New York, 1981. Je napríklad možné zahrievať zlúčeninu všeobecného vzorca (IX) v koncentrovanej kyseline chlorovodíkovej na teplotu varu pod spätným chladičom a výslednú soľ potom neutralizovať pôsobením bázy, napríklad hydroxidu sodného za vzniku zlúčeniny vzorca (II).

V stupni 2a schémy II v prípade, že zlúčeninou všeobecného vzorca (VI) je etyléndioxyzlúčenina, to znamená, že n = 2, je možné túto látku nechať reagovať priamo so zlúčeninou všeobecného vzorca (VUI) bez toho, aby bola vopred chránená aminoskupina acyláciou, čím sa získajú zodpovedajúce zlúčeniny všeobecného vzorca (II). Zlúčeniny všeobecného vzorca (II) je možné získať aj spôsobom podľa publikácie T. Sugasawa a ďalší, J. Org. Chem., 44, 578 (1979).

Zlúčeniny všeobecného vzorca (II) je možné pripraviť spôsobom podľa uvedeného US patentového spisu č.

894, 456, stĺpec 11, od r. 30. Zo schémy I je zrejmé, že konfigurácia asymetrického atómu uhlíka v zlúčenine všeobecného vzorca (III) bude určovať aj konfiguráciu výsledných produktov všeobecného vzorca (I). Racemickú zlúčeninu všeobecného vzorca (ΊΠ) je možné deliť na enantioméry spôsobom podľa US patentového spisu č.

053 512 (Wani a ďalší).

Nové medziprodukty všeobecných vzorcov (II, IIA a IV) sú taktiež súčasťou podstaty vynálezu.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu D je možné premieňať zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu na iné zlúčeniny podľa vynálezu bežnými postupmi.

Je napríklad možné alkylovať zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorých aspoň jeden zo symbolov R¹ a R² znamená atóm vodíka zvyčajným spôsobom. Reakciu je možné uskutočniť pri použití vhodného alkylačného činidla, napríklad alkylhalogenidu, alkyltosylátu alebo dialkylsulfátu. Alkylačnú reakciu je možné uskutočňovať v organickom rozpúšťadle, napríklad v amide, ako dimetylformamide, alebo v éteri, napríklad tetrahydrofuráne, výhodne za prítomnosti bázy. Vhodnou bázou je napríklad hydrid alkalického kovu, ako hydrid sodíka, ďalej je možné použiť uhličitany alkalických kovov, napríklad metoxid sodný alebo alkoxidy alkalických kovov, napríklad metoxid, etoxid alebo terc.butoxid sodíka alebo draslíka. Alkylačnú reakciu

SK 279298 Β6 je možné uskutočňovať pri teplote v rozmedzí 25 až 100 °C.

Zlúčeninu všeobecného vzorca (I), v ktorom aspoň jeden zo symbolov R¹ a R² znamená atóm vodíka je možné premeniť na inú zlúčeninu všeobecného vzorca (I) aj redukčnou alkyláciou. Redukčnú alkyláciu príslušným aldehydom alebo ketónom jc možné uskutočniť s použitím bórhydridu kovu alkalických zemín alebo kyánu bórhydridu. Reakciu je možné uskutočniť vo vodnom alebo nevodnom reakčnom prostredí, bežne v alkohole, napríklad metanole alebo etanole alebo éteri, napríklad dioxáne alebo tetrahydrofuráne, prípadne v prítomnosti vody.

Reakčná teplota sa pohybuje v rozmedzí 0 až 100, výhodne 5 až 50 °C.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (Ί), v ktorom aspoň jeden zo symbolov R¹ a R² znamená nižšiu alkenylovú skupinu je možné premeniť na zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R¹ alebo R² znamená nižší alkyl. Redukciu je možné uskutočniť vodíkom za prítomnosti katalyzátora na báze kovu, napríklad Raneyovho niklu alebo ušľachtilého kovu, ako paládia, platiny, oxidu platiny alebo rodia, zvyčajne na nosiči, napríklad na aktívnom uhlí. Reakciu je možné uskutočniť v rozpúšťadle, napríklad v alkohole ako etanole pri teplote v rozmedzí -10 až +50 °C, výhodne 20 až 30 °C.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom R² znamená hydroxyalkyl, je tiež možné pripraviť redukciou zlúčeniny všeobecného vzorca (T), v ktorom R* znamená skupinu všeobecného vzorca -COR³, v ktorej R³ znamená nižšiu alkoxyskupinu. Redukciu je možné ľahko uskutočniť s použitím vhodného redukčného činidla na báze hydridu, napríklad lítiumalumíniumhydridu alebo lítiumtrietylbórhydridu vo vhodnom rozpúšťadle, napríklad éteri, ako dietyléteri, tetrahydrofuráne alebo dioxáne alebo v uhľovodíku, napríklad toluéne. Reakcia zvyčajne dobre prebieha pri teplote v rozmedzí -78 až 100, výhodne približne 0 °C.

Podľa ďalšieho všeobecného postupu E je možné pripraviť zlúčeninu všeobecného vzorca (I) alebo jej soľ tak, že sa z chráneného derivátu všeobecného vzorca (1) alebo jeho soli odstráni ochranná skupina alebo skupiny.

Ide o to, že v niektorom z predchádzajúcich stupňov prípravy zlúčenín všeobecného vzorca (I) alebo jeho soli môže byť potrebné a/alebo žiaduce chrániť jednu alebo väčší počet reakčných skupín v molekule, aby nedochádzalo k nežiaducim vedľajším reakciám.

Ochranné skupiny, použité pri výrobe zlúčenín všeobecného vzorca (I) môžu byť použité zvyčajným spôsobom, napríklad tak, ako je uvedené v publikácii Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J. F. W. McOmie, Plénum Press 1973 alebo Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, 1981.

Bežné ochranné skupiny na aminoskupine sú napríklad aralkylové skupiny, ako benzyl, difenylmetyl alebo trifenylmetyl a acylové skupiny, napríklad N-benzyloxykarbonyl alebo terc.butoxykarbonyl. Zlúčeniny všeobecného vzorca (I), v ktorom aspoň jeden zo symbolov R¹ a R² znamená atóm vodíka, je teda možné pripraviť odstránením ochranných skupín zo zodpovedajúcich chránených zlúčenín.

Hydroxyskupiny je možné chrániť napríklad aralkylovými skupinami, ako sú benzyl, difenylmetyl alebo trifenylmetyl, acylovými skupinami, ako je acetyl, ochrannými skupinami, ktoré obsahujú kremík, ako sú trimetylsilyl alebo terc.butyldimetylsilyl alebo vo forme tetrahydropyránových derivátov.

Ochranné skupiny je možné odstrániť zvyčajnými postupmi. Napríklad aralkylovú skupinu, ako benzylovú skupinu, je možné odštiepiť hydrogenolýzou za prítomnosti katalyzátora, napríklad paládia na aktívnom uhli, acylovú skupinu, napríklad N-benzyloxykarbonylovú skupinu je možné odstrániť hydrolýzou, napríklad pôsobením bromovodíka v kyseline octovej alebo redukciou, napríklad katalytickou hydrogenáciou a ochranné skupiny s obsahom kremíka je možné odstrániť napríklad pôsobením fluoridového iónu alebo hydrolýzou v kyslom prostredí. Tetrahydropyránové skupiny je možné odštiepiť hydrolýzou v kyslom prostredí.

Je zrejmé, že v priebehu uvedených postupov A až D môže byť potrebné chrániť niektoré skupiny tak, ako bolo opísané. To znamená, že vo všetkých týchto postupoch môže byť nutné zaradiť reakčný stupeň, v ktorom sa odstránia ochranné skupiny z chráneného derivátu všeobecného vzorca (I) alebo z niektorej z jeho solí.

To znamená, že v prípade potreby je možné uskutočniť v priebehu ktoréhokoľvek zo všeobecných postupov A až D v ľubovoľnom poradí niektorú z nasledujúcich reakcií:

i) odstránenie akýchkoľvek ochranných skupín a ii) premenu zlúčeniny všeobecného vzorca (I) alebo jej soli na soľ, prijateľnú z farmaceutického hľadiska.

V prípade, že je žiaduce izolovať zlúčeninu vynálezu vo forme soli, napríklad vo forme adičnej soli s kyselinou, je toto možné dosiahnuť tak, že sa na voľnú bázu všeobecného vzorca (I) pôsobí príslušnou kyselinou, výhodne v ekvivalentnom množstve alebo kreatinín sulfátom vo výhodnom rozpúšťadle, napríklad vodnom etanole.

I keď je tento postup uvedený ako posledný hlavný stupeň pri výrobe požadovaných látok, je možné ho použiť v priebehu výroby zlúčenín podľa vynálezu aj v rôznych medzistupňoch na zavedenie požadovaných skupín. Je zrejmé, že vo viacstupňových postupoch je teda nutné voliť poradie jednotlivých reakcií tak, aby reakčnými podmienkami neboli v molekule ovplyvnené tie skupiny, ktorých prítomnosť je žiaduca v molekule výsledného produktu.

Biologická účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca (I) je s najväčšou pravdepodobnosťou spojená s enantiomérom S, zatiaľ čo enantiomér R má len malú alebo nemá vôbec žiadnu účinnosť. To znamená, že enantiomér S zlúčeniny všeobecného vzorca (I) je všeobecne výhodnejší než zmes uvedených enantiomérov, napríklad racemická zmes. Ale v prípade, že je požadovaný enantiomér R, napríklad na kontrolné pokusy alebo na syntézu ďalších zlúčenín, je možné ho ľahko pripraviť uvedenými postupmi s použitím enantioméru R zlúčeniny všeobecného vzorca (ΠΙ), pripraveného podľa uvedeného US patentového spisu č. 5 053 512.

Zlúčeninu všeobecného vzorca (I), pripravenú podľa reakčnej schémy I, IA alebo IB je možné čistiť bežnými postupmi, napríklad chromatografiou, destiláciou alebo kryštalizáciou.

Inhibičná účinnosť proti topoizomeráze in vitro

V nasledujúcej tabuľke A je uvedená inhibičná účinnosť zlúčenín všeobecného vzorca (1) proti topoizomeráze typu I. Skúška bola uskutočnená spôsobom podľa publikácie Hsiang Y. a ďalší, J. Biol. Chem., 260,14873 až 14878, 1985 a je v dobrej korelácii s protinádorovým účinkom inhibítorov topoizomerázy na živočíšnych modeloch. Opis skúšky pre camptothecin a jeho analógy bol opísaný napríklad v publikácii Hsiang a ďalší, Cancer Research, 49, 4385 až 4389, 1989 a tiež Jaxel a ďalší, Cancer Research, 49,1465 až 1469, 1989.

Tie zlúčeniny, v ktorých je možné dokázať účinnosť až v koncentrácii vyššej než 2000 nM (sú označené + v tabuľke A) sú považované za slabo až stredne účinné, zatiaľ čo látky s účinnosťou nižšou než 500 nM (sú označované ++++ v tabuľke A) sú veľmi účinné. Ako IC50 je označená taká koncentrácia zlúčeniny všeobecného vzorca (I), pri ktorej 50 % substrátu DNA je zachytených topoizomerázou I.

Tabuľka A

Inhibičná účinnosť zlúčenín vzorca (I) proti topoizomeráze

Príklad č.	izoméma forma	relatívna IC50 !
2	S	-H-H-
6	S	-H-H-
11	S	-H-H-
1	R,S	-H-H-
17	R,S	-H-H-
5	R,S	-H-H-
4	S	+++
9	R,S	-H-+
10	R,S	-H++
13	R,S	-H-+-
16	R,S	-H-
7	R,S	-H-
15	R,S	-H-
16	R,S	-H-
19	R,S	-H-
8	R,S

Zlúčeniny všeobecného vzorca (IV) majú aj dobrý inhibičný účinok na topoizomerázu I.

Štepy ľudských nádorov

V posledných rokoch boli transplantované štepy ľudských nádorov ako cudzorodé transplantáty do bezsrstých myši a tieto živočíšne modely sú teraz široko používané na stanovenie protinádorového účinku rôznych chemických látok, ako bolo opísané v Giovanella B. C., Stehlin Jr., J. S. Shepard R. C. a Williams Jr., L. J.: Correlation between response to chemotherapy of human tumors in patients and in nude mice, Cancer 52:1146 až 1152, 1983, Boven E. a Winograd B., Eds. The Nude Mouse in Oncology Research, CRC Press, Inc., Boca Raton, FL, 1991 a Fiebig H. H., Comparison of Tumor response in nude mice and in patients, Human Tumor Xenografts in Anticancer Drug Development, Winograd B., Peckam N. J. a Pinedo H. M., Eds. E. S. O. Monographs, Springer, Heidelberg, 25, 1988.

Všeobecne je možné uviesť, že si štepy ľudských nádorov uchovávajú nielen histologické, biochemické a antigénne vlastnosti, ale aj chemosenzitivitu pôvodného nádorového tkaniva, ako bolo opísané v druhej z uvedených publikácií. Dlhodobé štúdie dokázali, že štepy ľudských nádorov si uchovávajú tieto dôležité biologické vlastnosti pôvodného nádoru vrátane biologickej nestálosti, ktorá sa prejavuje u chorých. Veľmi dôležité je, že celý rad výskumných pracovníkov dokladá dobrú koreláciu medzi účinkom protmádorových látok štepov ľudských nádorov a klinickými výsledkami na chorých, ako je tiež uvedené najmä v prvej z uvedených publikácií.

Skúšky so štepom ľudského kolorektálneho adenokarcinómu HT-29 in vivo

Bezsrsté myšie samice kmeňa NU/NU s hmotnosťou 21 ± 2 g boli použité na modifikáciu skúšky opísanej v publikácii B. C. Giovanella a ďalší, Science, 246, 1046, 1989. Kontrolným a pokusným zvieratám bola podkožné vstreknutá do podlopatkovej oblasti v dni 0 suspenzia 106 životaschopných nádorových buniek ľudského hrubého čreva HT-29. Po dvoch týždňoch rastu nádoru boli podávané účinné látky. V prípade každej z týchto látok bolo pou žitých niekoľko dávok v závislosti od účinnosti týchto látok proti topoizomeráze I in vitro. Na každú dávku bolo použitých osem zvierat. Skúmané látky boli podávané buď v 0,1 M acetátovom pufri s pH 5 (prostredie a) alebo v prostredí s obsahom 87,5 % chloridu sodného s fosfátovým pufrom, 12,375 % dimetylsulfoxidu a 0,125 % Tween 80, t. j. polyoxyetylénsorbitanmonooleátu (ICI), toto prostredie bolo označené ako prostredie b. Účinné látky podávané podkožné dvakrát týždenne počas 5 týždňov, začínajúc odo dňa 14. Dávky sú uvádzané v mg/kg podľa priemernej hmotnosti zvierat v každej klietke.

Hmotnosť nádorov bola vypočítaná z dvoch na seba kolmých meraní dotykovým meradlom s použitím vzťahu hmotnosť nádoru = dĺžka x šírka² ± 2 v milimetroch

Pre každé zviera bola sledovaná hmotnosť nádoru v priebehu celého pokusu. Každej skupine boli výsledky vyjadrené ako pomer strednej hmotnosti nádoru bezprostredne po piatich týždňoch liečenia, t. j. v 50. dni, a strednej hmotnosti národov tesne pred začiatkom liečenia, t j. v 14. dni. Výsledky sú uvedené v tabuľke B. Pre každé z nosných prostredí je pomer približne 20, čo znamená, že bez liečenia sa hmotnosť nádoru v priebehu pokusu zvýšila približne dvadsaťkrát. Pomer 1 dokazuje zastavenie rastu nádoru, pomer nižší ako 1 jeho zmenšovanie. Zlúčeniny 4 a 6 teda spôsobili zastavenie rastu nádoru, zlúčeniny 1 a 23 jeho zmenšenie. Kritérium pre protinádorovú účinnosť je aspoň 50 % inhibicia rastu nádorov po 5 týždňoch, t. j. v 50. dni, čo zodpovedá pomeru 10 alebo menej.

Tabuľka B Protinádorovú účinnosť in vivo

zlúčenina	mg/kg	hmotnosť nádoru: hmotnosť nádoru
kontrola (nosné prostredie)		20,0a, 21,8b
2	0,8	l,8b
4	7,0	l,3a, l,0b
6	1,0	l,0b
1	9,0	0,6a
14	2,0	2,0a
20	1,5	l,5a
22	12,0	l,6a
23	3,0	0,5a

^a 0,lM acetátový puťer, pH 5 ^b 87,5 % roztoku chloridu sodného s fosfátovým pufrom,

12,375 % dimetylsulfoxidu a 0,125 % Tween 80.

Použitie zlúčenín podľa vynálezu

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) sú účinné proti širokému spektru nádorov cicavcov vrátane človeka, ide napríklad o karcinóm ústnej dutiny a hrtanu vrátane pier, jazyka a ústnej sliznice, o nádory pažeráka, žalúdka, tenkého čreva, hrubého čreva, rekta, pečene a žlčových ciest, slinivky brušnej, hltanu, pľúc vrátane karcinómu, s výnimkou karcinómu z malých buniek, ďalej o nádory kostí, spojivové tkanivá, kože, hrubého čreva, mliečnej žľazy, krček maternice, maternice, vaječníkov, prostaty, samčej pohlavnej žľazy, močového mechúra, obličiek a ďalších tkanív močovej sústavy, oka, mozgu a centrálneho nervového systému, štítnej žľazy a ďalších žliaz s vnútornou sekréciou, leukémie, lymfocytámej, granulocytovej a monocytovej, Hodgkinovej choroby, lymfómu odlišného ako Hodgkinovho typu, násobného myómu a podobne. V priebehu prihlášky

SK 279298 Β6 sú pojmy nádor, zhubný nádor a nádorové bujnenie používané ako synonymá.

Množstvo zlúčenín všeobecného vzorca (I), ktoré je potrebné na potlačenie nádoru sa bude meniť v závislosti od rôznych faktorov, napríklad na cicavcovi, ktorý má byť liečený a presné množstvo určí lekár alebo veterinár. Je nutné vziať do úvahy stav chorého, spôsob podania, typ farmaceutického prostriedku, hmotnosť, vek a celkový stav chorého, veľkosť nádoru a typ použitej zlúčeniny. Všeobecne je nutné uviesť, že sa účinná protinádorová dávka pohybuje v rozmedzí 0,1 až 200, s výnimkou 1 až 100 mg/kg a deň. Celkovú dennú dávku je možné podať naraz alebo rozdelene v dvoch až šiestich dávkach denne alebo vo forme vnútrožilovej infúzie. Je však možné použiť aj dávky nižšie alebo vyššie než uvedené rozmedzie v prípade, že je to vhodné alebo nutné.

Napríklad u cicavcov s hmotnosťou 75 kg sa bude denná dávka pohybovať v rozmedzí 75 až 7500 mg denne, typická dávka bude 800 mg denne. V prípade, že má ísť o rozdelené jednotlivé dávky, mohlo by byť podaných 200 mg zlúčeniny všeobecného vzorca (I) štyrikrát derme.

Farmaceutické prostriedky

Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu obsahujú ako svoju zložku zlúčeninu všeobecného vzorca (I) spolu s prijateľným nosičom a prípadne ďalšie účinné zložky. Nosič musí byť farmaceutický prijateľný, to znamená kompatibilný s ostatnými zložkami a neškodný pre chorého.

Podstatu vynálezu tvoria teda také farmaceutické prostriedky s protinádorovým účinkom, ktoré ako svoju účinnú zložku obsahujú zlúčeninu všeobecného vzorca (I) a okrem toho nosič, prijateľný z farmaceutického hľadiska.

Môže ísť o prostriedky, vhodné na perorálne, rektálne vaginálne, transdermálne alebo parenterálne podanie, vrátane podania podkožného, vnútrosvalového a vnútrožilového, výhodné sú najmä prostriedky na perorálne a parenterálne podanie.

Liekové formy výhodne obsahujú jednotlivú dávku a môžu byť pripravené bežným spôsobom. Zvyčajne sa postupuje tak, že sa účinná zložka homogénne premieša s kvapalným nosičom alebo jemne práškovým tuhým nosičom a potom sa prípadne produkt spracuje do požadovaného tvaru.

Farmaceutické prostriedky na perorálne podanie môžu byť napríklad kapsuly, tablety a podobne, každá kapsula alebo tableta obsahuje vopred stanovené množstvo účinnej zložky, môže však ísť aj o prášky, granuláty, suspenzie alebo roztoky vo vodnom alebo nevodnom kvapalnom prostredí, ide napríklad o sirupy, elixíry alebo emulzie.

Tabletu je možné pripraviť lisovaním alebo odliatím, tableta prípadne obsahuje jednu alebo väčší počet pomocných látok. Lisované tablety sa pripravujú vo vhodnom tabletovacom stroji, lisuje sa zmes účinnej zložky v sypkej forme, napríklad vo forme prášku alebo granulátu s ďalšími zložkami, ako sú spojivá, klzné látky, inertné riedidlá, zmáčadlá alebo dispergačné látky. Odlievané tablety je možné pripraviť vo vhodnom zariadení zo zmesi práškovej účinnej látky a akéhokoľvek vhodného nosiča.

Sirupy alebo suspenzie je možné pripraviť pridaním účinnej látky ku koncentrovanému vodnému roztoku cukru, napríklad sacharózy, prípadne s ďalšími prídavnými zložkami. Môže ísť o chuťové látky, látky, spomaľujúce kryštalizáciu cukru alebo zvyšujúce rozpustnosť ďalších zložiek, môže ísť napríklad o viacsýtne alkoholy, ako je glycerol alebo sorbitol.

Prostriedky na rektálne alebo vaginálne podanie môžu byť napríklad čapíky s obsahom bežného nosiča, ako kaka ového masla alebo iného základu pre čapíky, napríklad Withepsolu S55 (Dynamite Nobel Chemical, SRN).

Na transdermálne podanie je možné zlúčeniny podľa vynálezu spracovať na krémy, gély, mazadlá, emulzie alebo masti. Tieto prostriedky môžu byť pripravené s použitím vodného alebo olejového základu a vhodných zahusťovadiel, gélov, emulgátorov, stabilizátorov, dispergačných látok, látok napomáhajúcich vzniku suspenzie a/alebo farbív.

Prostriedky, vhodné na parenterálne podanie zvyčajne obsahujú sterilný vodný roztok účinnej látky, výhodne izotonický s krvou príjemcu. Takéto prostriedky môžu obsahovať roztok alebo suspenziu adičnej soli zlúčeniny všeobecného vzorca (I), prijateľnú z farmaceutického hľadiska a izotonickú s krvou príjemcu. Príkladom zloženia môže byť destilovaná voda, 5 % roztok dextrózy v destilovanej vode alebo vo fyziologickom roztoku a adičná soľ zlúčeniny všeobecného vzorca (I) s kyselinou, prijateľná z farmaceutického hľadiska a rozpustná v uvedenom rozpúšťadle, napríklad hydrochloride. Môže tiež ísť o koncentrované roztoky alebo prášky, ktoré sú po zriedení rozpúšťadlom vhodným na parenterálne podanie.

Okrem uvedených zložiek môžu farmaceutické prostriedky obsahovať ešte ďalšie zložky, napríklad riedidlá, pufre, chuťové látky, spojivá, zmáčadlá, zahusťovadlá, klzné látky, činidlá napomáhajúce vzniku suspenzie, konzervačné látky vrátane antioxidačných látok a podobne.

Vynález bude vysvetlený nasledujúcimi príkladmi, ktoré však nemajú slúžiť na obmedzenie jeho rozsahu. Použitie názvoslovia je v súlade s návrhom Joumal of the Američan Chemical Society. „Teplota miestnosti“ je teplota približne 25 °C.

Predmetom vynálezu je aj medziprodukt všeobecného vzorca (TV)

(iv) , kde n je 1 alebo 2 a X znamená atóm halogénu.

Medzi ďalšie medziprodukty patria zlúčeniny, vybrané zo skupiny zahrnujúcej:

7-chlórmetyl-10,l l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-chlórmetyl-l 0,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-chlórmetyl-l 0,1 l-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin a 7-chlórmetyl-l 0,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecm.

Výhodným medziproduktom je zlúčenina všeobecného vzorca (Ila)

(ii«) , kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

i) R¹ a R² znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, (C^jalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (Q.^cykloalkylíC^jalkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxy(C_1<5)alkyl alebo (C^jalkoxy(Cwjalkyl, ii) R¹ znamená atóm vodíka, (C_w)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C'i^jcykloalkylíC.slalkyl, (C₃^)alkenyl, hydroxy(C_w)alkyl alebo (C_w)alkoxy(Cl-6)alkyl a

R² znamená skupinu -COR³, v ktorej

R³ znamená atóm vodíka, (C|.₆)alkyl, perhalogén(Cj.₆)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C_:1_₇)cykloalkyl(C|._;,)alkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxyÚT.jalkyl, (C._₆)a1koxyskupinu, (Cj.^alkoxyjCj.^jalkyl, alebo iii) R¹ a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca (IA)

-^221 ^(ia) >

kde

Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO₂, CH₂ alebo NR4, v ktorej

R⁴ znamená atóm vodíka, (Ci_₆)alkyl, perhalogén(C^íjalkyl, aryl, substituovaný aryl, v ktorom substituentom je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (C^jalkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (Ci_₆)alkylaminoskupina, perhalogén(Ci.₆)alkyl, hydroxy(C₁.₆)alkyl, (C|₆)alkoxyskupina (C^jalkoxy^j.jjalkylová skupina, alebo R⁴ znamená skupinu -COR⁵, v ktorej

R⁵ znamená atóm vodíka, (C_w)alkyl, perhalogén (C|.₆)alkyl, (Ci.₆)alkoxyskupinu alebo aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C₁.₆)alkyl, perhalogé^Cps)alkyl, hydroxy(Ci.₆)alkyl alebo (C_w)alkoxy(Ci^)alkyl.

Ďalšími výhodnými medziproduktmi sú zlúčeniny, v ktorých R¹ a R² tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridínovú, azetidínovú, pyrolidínovú, piperidínovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidínovú, izoxazolidínovú, piperazínovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metylhomopiperazínovú, tiazolidínovú, izotiazolidínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu.

Medzi medziprodukty podľa vynálezu patrí zlúčenina všeobecného vzorca (II)

kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a X znamená atóm halogénu.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

7-Dimety laminometylén-10,11 -metyléndioxy-20 (R,S) -camptothecin (zlúčenina 1)

A) 3,4-Metyléndioxyacetanilid

17,0 g, 124 mmol bežne dodávaného 3,4-metyléndioxyanilínu a 15,5 g, 136 mmol uhličitanu sodného v 90 ml chloroformu sa pri teplote 5 °C zmieša s 0,8 g, 124 mmol acctylchloridu, ktorý sa pridáva po kvapkách za miešania. Reakčná zmes sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a potom sa mieša ešte približne 18 hodín. Potom sa zmes premyje 2 x 50 ml IN kyseliny chlorovodíkovej, organická vrstva sa vysuší síranom horečnatým a rozpúšťadlo sa odparí na hnedú tuhú látku. Po prekryštalizovaní z vody s aktívnym uhlím sa vo výťažku 42,1 % teoretického množstva získa 9,34 g, 3,4-metyléndioxyacetanilidu ako svetlohnedá tuhá látka.

Analýza pre C₉H₉NO₃ vypočítané C 60,33, H 5,06, N 7,82 % nájdené C 60,34, H 5,04, N 7,79 %.

B) 2'-AĽetylamino-4',5 '-metyléndioxy-2-ĽhlóraĽetofenón

K zmesi 24,3 g, 178,3 mmol chloridu zinočnatého a 16,1 ml, 202,1 mmol chlóracetylchloridu v 85 mlnitrometánu sa pod dusíkom pri teplote miestnosti za miešania po kvapkách pridá roztok 8,96 g, 50,0 mmol 3,4-metyléndioxyacetanilidu v 15 ml nitrometánu. Zmes sa zahrieva 1,5 hodiny na teplotu varu pod spätným chladičom, potom sa nechá ochladiť na teplotu miestnosti, vleje sa do ľadu, extrahuje metylénchloridom, ktorý sa potom odparí, čím sa získa hnedá tuhá látka. Táto tuhá látka sa nechá prekryštalizovať zo zmesi etylacetátu a hexánu s prísadou aktívneho uhlia, čím sa vo výťažku 6,5 % teoretického množstva získa 831,3 mg 2'-acetylamino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu vo forme žltých kryštálov. 'H-NMR (CDC1₃): 8,45 (s, 1H), 7,2 (s, 1H), 6,09 (s, 2H), 4,65 (s, 2H), 2,25 (s, 3H).

C) 3,4-Metyléndioxypivaloylanilid

Túto látku je možné získať spôsobom podľa príkladu 1 A) s tým rozdielom, že sa namiesto acetylchloridu použije ekvivalentné množstvo 2,2-dimetylpropanoylchloridu.

D) 2'-Pivaloylamino-4',5'-metyléndioxy-2-clilóracetofenón

Túto látku je možné získať spôsobom podľa príkladu 1B) s tým rozdielom, že sa namiesto 3,4-metyléndioxyacetanilidu použije ekvivalentné množstvo 3,4-metyléndioxypivaloylanilidu.

E) 2'-Amino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetoténón

K 0,9 g, 3,53 mmol 2'-acetylamino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu alebo ekvivalentnému množstvu 2'-pivaloylamino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu v 60 ml etanolu sa pri teplote 5 °C po kvapkách pridá 12,5 ml, 149,7 mmol koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej. Zmes sa 1 hodinu zahrieva na teplotu varu pod spätným chladičom, potom sa vleje do zmesi 80 ml 2N hydroxidu sodného a 60 g ľadu a premyje sa 3 x 70 ml etylacetátu. Organické roztoky sa spoja a premyjú sa 50 ml nasýteného roztoku chloridu sodného, vysušia sa bezvodým síranom sodným a odparia vo vákuu na zelenožltú tuhú látku, ktorá sa nechá prekry štalizovať zo zmesi etylacetátu, izopropanolu a hexánu s prísadou aktívneho uhlia, čím sa vo výťažku 52 % teoretického množstva získa 0,39 g, 2'-amino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu.

Analýza pre C9H9NOJ vypočítané C 50,60, H 3,77, N 6,56 % nájdené C 50,66, H 3,80, N 6,47 %.

F) 5'(R,S)-l,5-dioxo-(5'-etyl- 5'-1^<1τοχγ-2Ή,5Ή,6Ή-6-οxopyrano)[3',4^,-f]delta⁶’⁸-tetrahydroindolizín a 5'(S)-l,5-dioxo-(5'-etyl- 5'-1ινύπ)χγ-2Ή,5Ή,6Ή-6-οχοργΓ3no)[3',4'-f]delta⁶’⁸-tetrahydroindolizín (zlúčeniny vzorca (M))

Tieto látky, ktoré budú ďalej nazývané „tricyklický ketón (R,S)“ a „tricyklický ketón (S)“ alebo spoločne ako „zlúčeniny vzorca (Hl)“ sa pripravia spôsobom podľa US patentového spisu č. 5 053 512, Wani a ďalší. Zodpovedajúci enantiomérRje možné pripraviť tým istým spôsobom.

G) 7-Chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Postupuje sa podľa všeobecného postupu, uvedeného vo zmienenom patentovom spise Waniho a ďalších, 2'-amino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenón sa mieša v

SK 279298 Β6 ml toluénu pri teplote vatu pod spätným chladičom spolu s 256,3 mg, 0,97 mmol tri cyklického ketónu (R,S) s použitím Dean-Starkovho zariadenia celkom pol hodiny. Potom sa reakčná zmes ochladí, tuhá látka sa odfiltruje a premyje sa toluénom a etanolom, čím sa vo výťažku 68,8 % získa 408,5 mg 6-chlórmetyl-10,l 1-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu.

'H-300 NMR (DMSO-d₆): 7,72 (s, IH), 7,55 (s, IH), 7,2 (s, IH), 6,34 (s, 2H), 5,42 (s, 2H), 5,32 (s, 2H), 5,24 (s, 2H), 1,85 (m, 2H), 0,88 (t, 3H).

Hmotnostne spektrum M + 1:

vypočítané 441 nájdené 441.

H) 7-Dimetylaminometylén-10,l l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

K miešanej zmesi 0,11 g, 0,25 mmol 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-(R,S)-camptothecmu a 346 mg, 0,5 mmol uhličitanu draselného v 1 ml dimetylfonnamidu DMF sa pridá 6,1 ml, 0,5 mmol dimetylamínu vo forme roztoku v tetrahydrofúráne s obsahom 3,73 mg dimetylamínu v 1 ml tetrahydrofuránu pri teplote 5 °C. Reakčná zmes sa pevne zazátkuje, nechá sa otepliť na teplotu miestnosti, mieša sa približne 15 hodín a potom sa prefiltruje na odstránenie tuhého podielu. Filtrát sa odparí vo vákuu, výsledný tuhý podiel sa rozotrie s acetonitrilom a roztok sa prefiltruje. Filtrát sa odparí vo vákuu na hustý zvyšok, ktorý sa rozpustí v čo najmenšom množstve chloroformu a podrobí sa rýchlej chromatografii na 30 g silikagélu, ktorý sa postupne premýva 250 ml etylacetátu a potom 250 ml zmesi etylacetátu a izopropanolu 9:1 a nakoniec 250 ml etylacetátu a izopropanolu 9:1a nakoniec 250 ml etylacetátu a izopropanolu 4:1. Frakcie sa spoja a sledujú chromatografiou na tenkej vrstve s použitím 5% metanolu v etylacetáte, na detekciu sa použije UV-svetlo. Príslušné frakcie sa spoja, odparia a sušia vo vákuu, čím sa vo výťažku 4,7 % získa 6,0 mg 7-dimetylaminometylén-10,l 1-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu. Táto látka bola analyzovaná vo forme svojho acetátu s teplotou tupenia vyššou ako 250 °C.

Analýza pre C24H23N3O3.C2H4O2 vypočítané C 61,29, H 5,34, N 8,25 % nájdené C 61,64, H 5,17, N 8,73 %.

I) Forma s otvoreným kruhom E

Zlúčenina zo stupňa H sa spracuje pôsobením ekvivalentného množstva hydroxidu sodného, čím vznikne zodpovedajúca forma s otvoreným kruhom E. V prípade, že sa na túto formu pôsobí ekvivalentným množstvom kyseliny chlorovodíkovej, dôjde opäť k uzavretiu E a znova sa získa zlúčenina zo stupňa H.

Príklad 2 7-Dimetylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin

A) 7-Chlórmetyl-10,l l-metyléndioxy-20(S)-camptothecin

Produkt sa získa spôsobom podľa príkladu 1 s tým rozdielom, že sa v stupni G použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S namiesto tricyklického ketónu R,S. Teplota topenia je vyššia než 250 °C.

B) 7-Dimetylaminometylén-10,l l-metyléndioxy-20(S)-camptothecin

Tento produkt je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu 1, stupeň H s tým, rozdielom, že sa namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecinu, pripraveného podľa príkladu 2, stupeň A.

Teplota topenia je vyššia než 250 °C.

Hmotnostne spektrum M+l:

vypočítané: 450 nájdené: 450.

Príklad 3

-Dimetylaminometylén-10,11 -etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 3)

A) 7-Chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Túto látku je možné získať spôsobom podľa príkladu 1 s tým rozdielom, že sa v stupňoch A a C použije ekvivalentné množstvo 3,4-etyléndioxyanilínu namiesto 3,4-metyléndioxyanilínu.

Hmotnostne spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou M+l:

vypočítané: 455,1009 nájdené: 455,1005.

B) 7-Dimetylaminometylén-10,l l-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Túto látku je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu 1, časť H s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,l l-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu.

Hmotnostne spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou M+l:

vypočítané: 464,1821 nájdené: 464,1833.

Príklad 4 7-Dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-caniptothecin (zlúčenina 4)

A) 7-Chlórmetyl-10,l 1 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin

Túto látku je možné získať spôsobom podľa príkladu 1 s tým rozdielom, že sa v stupňoch A a C použije ekvivalentné množstvo 3,4-etyléndioxyanilínu namiesto 3,4-metyléndioxyanilínu a v stupni G sa použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S namiesto tricyklického ketónu R,S.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 455,1009 nájdené: 455,1000.

B) 7-Dimetylaminometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-campptothecin

Túto látku je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,l l-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothccinu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 464,1821 nájdené: 464,1811.

Príklad 5

-Morfolinomety lén-10,11 -etyléndioxy-20(R,S)-campto thecin (zlúčenina 5)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo morfolínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,1 l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlóimetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň B.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 506,1942 nájdené: 506,1925.

Príklad 6 7-Mortblinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)€amptothecin (zlúčenina 6)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo morfolínu a namiesto 7-chlórmetyl10,ll-rnetyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň B. Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 506,1942 nájdené: 506,1929.

Príklad 7

7-Pyrolidinometylén-10,l l-etyléndioxy-20(R,S)eamptothecin (zlúčenina 7)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo pyrolidínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,1 l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 490,1978 nájdené: 490,1988.

Príklad 8 7-Piperidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 8)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo piperidínu. Nominálne hmotnostné spektrum M+l:

vypočítané: 490 nájdené: 490.

‘H-300 NMR (DMSO-d₆): 7,95 (s, IH), 7,62 (s, IH), 7,29 (s, IH), 6,35 (s, 2H), 5,49 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 4,85 (široký s, 211), 1,9-0,7 (m, 11H).

Príklad 9 7-Piperidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 9)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo piperidínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,1 l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlónnetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 504,2127 nájdené: 504,2129.

Príklad 10

7-(4-Metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 10)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo 4-mctylpiperazínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,l l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 519,223 6 nájdené: 519,2246.

Príklad 11

7-(4-Metylpiperazinometylén)-l 0,11 -etyléndioxy-20(S)camptothecin (zlúčenina 11)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo 4-metylpiperazínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,l l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,1 l-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 261 až 264 °C.

Nominálne hmotnostné spektrum M+l:

vypočítané 519 nájdené 519.

Príklad 12

7-Dietylaminometylén-10,l l-metyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 12)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietylamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,1 l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 2, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 478,1978 nájdené: 478,1963.

Príklad 13 7-Dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 13)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietylamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,11 -metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlóimetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 492,2134 nájdené: 492,2140.

Príklad 14 7-Dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 14)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietylamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,1 l-rnetyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,l 1-etyléndioxy-20(S)-camptothccinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 492,2134 nájdené: 492,2122.

Príklad 15

7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 15)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo N-metyletanolamínu. Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 480,1771 nájdené: 480,1776.

Príklad 16

7-N-metyletanolaminometylén-10,l 1 -etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 16)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo N-metyletanolamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,l l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 494,1927 nájdené: 494,1929.

Príklad 17

7-Dietanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptoťhecin (zlúčenina 17)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietanolamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,11 -metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlóimetyl-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 3, stupeň A.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 524,2024 nájdené: 524,2026.

Príklad 18

-Dietanolaminometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 18)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo dietanolamínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 230 až 233 °C.

Nominálne hmotnostné spektrum M + 1:

vypočítané 524 nájdené 524.

Príklad 19

7-Azetidinometyl-10,1 l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin (zlúčenina 19)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo azetidínu.

Teplota topenia: vyššia ako 250 °C.

Nominálne hmotnostné spektrum M + 1:

vypočítané 462 nájdené 462.

Príklad 20

7-Azetidinometylén-10,11 -metyléndioxy-20 (S) -camptothe cín (zlúčenina 20)

Produkt je možné pripraviť podobným spôsobom ako v príklade 1 s tým rozdielom, že sa v stupni G namiesto tricyklického ketónu R,S použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S a v stupni H sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo azetidínu.

Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou:

vypočítané: 462,1665 nájdené: 462,1667.

Príklad 21

7-T iomorfolinometylén-10,11 -ety léndioxy-20 (S) -campto thecin (zlúčenina 21)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo tiomorfolínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 249 až 252 °C.

Nominálne hmotnostné spektrum M + 1:

vypočítané 522 nájdené 522.

Príklad 22

7-Azetidinometylén-10,l 1 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 22)

Postupuje sa podobným spôsobom ako v príklade 1, stupeň H s tým rozdielom, že sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo azetidínu a namiesto 7-chlórmetyl-10,1 l-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecinu sa použije ekvivalentné množstvo 7-chlórmetyl-10,U-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu, získaného podľa príkladu 4, stupeň A.

Teplota topenia: 208 až 210 °C za rozkladu. Nominálne hmotnostné spektrum 476,2.

Príklad 23

7-(4-Metylpiperazinometylén)-10,l l-metyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 23)

Produkt je možné pripraviť podobným spôsobom ako v príklade 1 s tým rozdielom, že sa v stupni G namiesto tricyklického ketónu R,S použije ekvivalentné množstvo tricyklického ketónu S a v stupni H sa namiesto dimetylamínu použije ekvivalentné množstvo 4-metylpiperazínu. Hmotnostné spektrum s vysokou rozlišovacou schopnosťou: vypočítané: 505,2083 nájdené: 505,2087.

Príklad 24

7-Trifluóracetamidotnetylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothccin (zlúčenina 24)

A) 2'-Amino-4',5'-metyléndioxy-2-trifluóracetamidoacetofenón

227 mg, 2 mmol trifluóracetamínu sa pridá k roztoku 1,63 g, 5 mmol uhličitanu cézneho v 15 ml bezvodého acetonitrilu pod dusíkom pri teplote miestnosti. Potom sa

SK 279298 Β6 pridá 2^l-aminoM^,,5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenón a zmes sa umiestni na olejový kúpeľ, predohriaty na 90 °C, kde sa nechá stáť 30 minút. Potom sa reakčná zmes ochladí na teplotu miestnosti a vleje sa priamo na vrstvu 15 g oxidu kremičitého v sintrovanom sklenenom lieviku. Oxid kremičitý sa dvakrát premyje etylacetátom, materiál, použitý na premývanie sa spojí a prchavé zložky sa odparia vo vákuu. Odparok sa rozotrie s dietyléterom, čím sa vo výťažku 86 % získa svetlooranžová tuhá látka, ktorá sa odfiltruje a vysuší vo vákuu. Získa sa celkom 498 mg produktu s teplotu topenia 219 až 220 °C.

‘H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆): 4,44 (d, 2H), 5,96 (s, 2H),

6,35 (s, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,40 (bs, 2H), 9,59 (t, 1H). Nominálne hmotnostné spektrum MH+: vypočítané 291 nájdené 291 m/z.

B) 2'-Amino-4',5 '-etyléndioxy-2-tritIuóracetamidoacetofenón

Produkt je možné pripraviť uvedeným spôsobom s tým rozdielom, že sa použije namiesto 2'-amino-4',5'-metyléndioxy-2-chlóracetofenónu ekvivalentné množstvo 2'-amino-4',5'-etyléndioxy-2-chlóracetofenónu. Vo výťažku 74 % sa získa zelená tuhá látka s teplotou topenia 154 až 155 °C.

‘H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆): 4,08 (m, 2H), 4,13 (m, 2H), 4,60 (d, 2H), 6,0 (bs, 2H), 6,08 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,60 (t, 1H). Nominálne hmotnostné spektrum MH+:

vypočítané 305 m/z nájdené 305 m/z.

C) 10,11 -Etyléndioxy-7 -trifluóracetamidometylén-20(S)camptothecin mg, 0,234 mmol 2'-amino-4',5'-etyléndioxy-2-trifluóracetamidoacetofenónu, 61 mg, 0,234 mmol tricyklického ketónu (S) a 2,0 ml bezvodého toluénu sa zmieša pod dusíkom pri teplote 60 °C. Pridá sa katalytické množstvo ľadovej kyseliny octovej a monohydrátu kyseliny p-toluénsulfónovej a potom sa reakčná zmes zahreje na teplotu varu pod spätným chladičom, na tejto teplote sa udržuje 16 hodín a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Filtráciou sa oddelí zelenožltá tuhá látka, ktorá sa premyje etanolom a dietyléterom a vysuší sa vo vákuu. Vo výťažku 84 % sa získa 101 mg produktu s teplotou topenia 249 °C. ‘H-NMR (300 MHz,DMSO-d₆):

0,91 (t, 3H), 1,91 (m, 2H), 4,40 (s, 4H), 4,83 (d, 2H), 5,39 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 6,48 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 10,20 (t, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH+:

vypočítané 532 m/z nájdené 532 m/z.

Príklad 25

7-Trifluóracetamidometylén-10,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 25)

Produkt sa pripraví spôsobom podľa príkladu 24 s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 2'-amino-4^l,5^,-metyléndioxy-2-trifluór-acetamidoacetofenónu namiesto 2'-amino-4',5'-etyléndioxy-2-trifluór-acetamidoacetofenónu. Vo výťažku 15 % sa získa zelenožltá tuhá látka s teplotou topenia 238 °C. za rozkladu.

‘H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆): 0,91 (t, 3H), 1,95 (m, 2H), 4,92 (s, 4H), 5,38 (s, 2H), 5,40 (s, 2H), 6,28 (s, 2H), 6,49 (s, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,78 (s, 1H), 10,21 (t, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH+:

vypočítané 518 m/z nájdené 518 m/z.

Príklad 26

7-Aminomety lén-10,11 -etyl éndioxy-20 (S) -camptothecin (zlúčenina 26) mg, 0,12 mmol 7-trifluóracetamidometylén-10,l 1-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu sa zahrieva na 105 °C v 2M vodnom roztoku kyseliny chlorovodíkovej v množstve 1,2 ml celkom 20 minút v otvorenej banke. Prchavé zložky sa odparia vo vákuu a odparok sa rozotrie s etylacetátom a roztok sa prefiltruje. Odfiltrovaná jasnožltá tuhá látka sa premyje 3 ml etylacetátu, 2 ml etanolu a 2 ml dietyléteru a potom sa suší vo vákuu, čím sa vo výťažku 100 % získa 62 mg produktu s teplotou topenia vyššou ako 300 °C. ‘H-NMR (300 MHz, DMSO-dí)·. 0,90 (t, 3H), 1,95 (m, 2H), 4,41 (s, 4H),4,61 (d, 2H), 5,40 (s, 2H), 5,45 (s, 2H), 7,24 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 8,40 (bs, 2H). Nominálne hmotnostné spektrum MH+:

vypočítané 436 m/z nájdené 436 m/z.

Príklad 27

7-Aminometylén-10,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 27)

Produkt je možné pripraviť spôsobom podľa príkladu 26 s tým rozdielom, že sa použije ekvivalentné množstvo 7trifluóracetamidometylén-10,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecinu namiesto 7-trifluóracetamidometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu. V kvantitatívnom výťažku sa izoluje zlatožltá tuhá látka s teplotou topenia 270 °C za rozkladu.

‘H-NMR (300 MHz, DMSO-d₆): 0,90 (t, 3H), 1,9 (m, 211), 4,6 (m, 2H), 5,40 (s, 2H), 5,5 (s, 2H), 6,3 (s, 2H), 7,2 (s, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,9 (s, 1H), 8,4 (bs, 2H).

Nominálne hmotnostné spektrum MH+:

vypočítané 422 m/z nájdené 422 m/z.

Príklad 28 7-Terc.butyloxykarbonylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy20(S)-camptothecin (zlúčenina 28)

K roztoku 35,8 mg, 78,7 x 10‘³ mmol (S)-10,11-etyléndioxy-7-chlórcapmtothecinu, ochladenému na -50 °C sa po kvapkách pridá 34,6 mg, 186 x 10'⁵ mmol terc.butylpiperazínkarboxylátu v 0,45 ml Ν,Ν-dirnetylformamidu (DMF). Tmavohnedá reakčná zmes sa mieša pri teplote -50 °C ešte 10 minút a potom sa nechá otepliť na 0 °C. Pridá sa ešte 8 mg, 43 x 10'³ mmol terc.butylpiperazínkarboxylátu v 0,2 ml DMF a zmes sa nechá otepliť na teplotu miestnosti. Potom sa zmes ešte 90 minút mieša, potom sa rozpúšťadlo odparí na rotačnom odpaľovači, čím sa získa surový produkt ako hnedý odparok. Po čistení chromatografiou na silikagéli pri elúcii 100% etylacetátom sa vo výťažku 58 % získa 20,7 mg produktu ako svetložltá tuhá látka. ‘II-NMR (300 MHz, CDClj):

1,04 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,45 (s, 9H), 1,87 (m, 2H), 2,46 (s, 4H), 3,41 (s, 4H), 3,94 (s, 2H), 4,43 (s, 4H), 5,29 (s, 2H), 5,30 (d, 1H, J = 16 Hz), 5,75 (d, 1H, J % 16 Hz), 7,59 (s, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,73 (s, 1H).

Nominálne hmotnostné spektrum M+l: 605.

Príklad 29

Soľ 7-piperazinometylén-10,l l-etyléndioxy-20(S)-camptothccinu s kyselinou trifluóroctovou (zlúčenina 29)

K roztoku 16,7 mg, 27,6 x 10 ³ mmol 7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometyl-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecinu v bezvodom metylénchloride v množstve 5,0 ml sa pridá 0,5 ml kyseliny trifluóroctovej. Sýtožltý roztok sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a potom sa

SK 279298 Β6 mieša 14 hodín. Potom sa zmes odparí na rotačnom odpaľovači a odparok sa čistí HPLC v reverznej fáze (stĺpec Rainin Dynamax 60A) ako elučné činidlo sa použije zmes vody, acetonitrilu, THF a kyseliny trifluóroctovej 49:10:2,5:1, čim sa po zahustení a lyofilizácii hlavnej frakcie, dokázanej UV svetlom, pri 254 nm získa 21,7 mg produktu vo forme žltého prášku.

‘H-NMR (300 MHz, DMSO-dJ: 0,88 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,87 (m, 2H), 2,60 - 2,80 (m, 4H), 3,00 - 3,20 (bs, 4H), 5,29 (s, 2H), 5,41 (s, 2H), 6,5 (bs, IH), 7,25 (s, IH), 7,56 (s, IH), 7,80 (s, IH), 8,50 (bs, 2H).

Nominálne hmotnostné spektrum (M+l): 505. Teplota topenia: 315 °C za rozkladu.

Príklad 30 7-(a,a,a-trifluór-m-tolyl)pipcrazinometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecm (zlúčenina 30)

Roztok 5,2 mg, 11,4 x 10'³ mmol 7-chlórmetyl-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecinu v 200 mikrolitroch bezvodého DMSO sa po kvapkách pridá pri teplote 0 °C k roztoku 10 mikrolitrov, 53 x 10^-3 mmol 7-(α,α,α-trifluór-m-tolyl)piperazínu v 500 mikrolitroch bezvodého toluénu. Tmavohnedá zmes sa nechá otepliť na teplotu miestnosti. Rozpúšťadlo sa odparí na rotačnom odpaľovači a potom sa za odsávania vo vysokom vákuu, čím sa získa surový produkt, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli, ako elučné činidlo sa použije 100 % etylacetát a potom zmes etylacetátu, chloroformu a metanolu 6:5:1, čim sa vo výťažku 50 % získa 3,7 mg produktu ako svetložltá tuhá látka.

'H-NMR (200 MHz, DMSO-ď): 0,90 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,95 (q, 2H, J = 7 Hz), 2,60 - 2,70 (m, 4H), 3,20 - 3,30 (m, 4H), 4,10 (s, 2H), 4,50 (s, 2H), 5,30 (s, 2H), 5,45 (s, 2H), 6,55 (s, IH), 7,40 (t, IH, J = 7 Hz), 7,60 (s, IH), 7,85 (s, IH). Nominálne hmotnostné spektrum (M+l): 649.

Príklad 31

7-(2-Metoxyfenylpiperazino)metylén-l 0,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 31)

K roztoku 17,9 mikrolitrov, 102 x 10’³ mmol 2-metoxyfenylpiperazínu v 1 ml bezvodého toluénu, ochladenému na 0 °C sa pri tej istej teplote pridá roztok 10 mg, 22 x 10'³mmol 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecinu v 200 mikrolitroch DMSO. Tmavo sfarbená zmes sa 10 minút mieša pri teplote 0 °C, potom sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a pri nej sa mieša ešte 3 hodiny. Potom sa reakčná zmes odparí na rotačnom odparovači a zvyšok rozpúšťadla sa odstráni odsávaním vo vysokom vákuu, čim sa získa surový produkt, ktorý sa čistí chromatografiou na silikagéli, ako elučné činidlo sa použije zmes hexánu a etylacetátu 1:1a potom zmes etylacetátu, chloroformu a metanolu 6:5:1, čím sa vo výťažku 25 % získa 3,4 mg produktu vo forme žltej tuhej látky.

‘H-NMR (200 MHz, CDC1₃): 1,05 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,90 (m, 2H), 2,75 (bs, 4H), 3,10 (bs, 4H), 3,75 (s, IH), 3,85 (s, 3H), 4,01 (bs, 2H), 5,35 (s, IH), 5,30 (d, IH, J = 18 Hz),

5,35 (s, IH), 5,75 (d, IH, J = 18 Hz), 6,80 - 7,00 (m, 4H), 7,60 (s, IH), 7,65 (s, IH), 7,75 (s, IH).

Nominálne hmotnostné spektrum MH+:

vypočítané: 611 nájdené: 611.

Príklad 32

7-Fenylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin (zlúčenina 32)

K roztoku 15,6 mikrolitrov, 102 x 10³ mmol fenylpiperazínu v 1 ml bezvodého toluénu sa pridá roztok 10,6 mg, 22 x 10‘³ mmol 7-chlórmetyl-10,ll-etyléndioxy20(S)-camptothecinu v 300 mikrolitroch DMSO. Tmavo sfarbená zmes sa 10 minút mieša pri teplote 0 °C, potom sa nechá otepliť na teplotu miestnosti a pri nej sa mieša ešte 3 hodiny. Potom sa reakčná zmes odparí na rotačnom odparovači a zvyšok rozpúšťadla sa odstráni odsávaním vo vysokom vákuu, čím sa získa surový produkt ako tmavý odparok. Čistením na silikagéli s použitím zmesi hexánu a etylacetátu 1:1a potom zmesi etylacetátu, chloroformu a metanolu 6:5:1 ako elučného činidla sa vo výťažku 30 % získa 3,6 mg produktu vo forme žltej tuhej látky. ‘H-NMR (200 MHz, CDC13): 1,00 (t, 3H, J = 7 Hz), 1,90 (m, 2H), 2,75 (bs, 4H), 3,20 (bs, 4H), 3,75 (s, IH), 4,05 (s, 2H), 4,45 (bs, 4H), 5,35 (s, 2H), 5,30 (d, IH, J = 18 Hz),

5,35 (s, 2H), 5,75 (d, IH), 6,80 - 7,00 (m, 3H), 7,20 - 7,35 (m, 2H), 7,60 (s, IH), 7,65 (s, IH), 7,80 (s, IH). Nominálne hmotnostné spektrum (M+1): 581.

Príklad 33 S'-Arnmo-h'J'-metyléndioxy-Z-dimetylammoacetoíénón

2'-Amino-4',5 '-metyléndioxy-2-chlóracetofenón, pripravený spôsobom podľa príkladu 1, stupeň B sa nechá reagovať s prebytkom dimetylamínu za podobných podmienok ako v príklade 1, stupeň H, čím sa získa ž'-acetylamino4',5'-metyléndioxy-2-dimetylaminoacetofenón, z ktorého sa odstránia ochranné skupiny spôsobom podľa príkladu 1, stupeň E, čím sa získa 2'-aminoA',5'-metyléndioxy-2-dimetylaminoacetofenón.

Nominálne hmotnostné spektrumM+l:

vypočítané: 223 nájdené: 223.

Príklady 34 až 38

Podľa schémy I, IA alebo IB je možné analogickým spôsobom ako v príklade 1 až 32 s použitím príslušných medziproduktov všeobecných vzorcov (II, III, IV a V) pripraviť aj nasledujúce zlúčeniny všeobecného vzorca (I)Zlúčenina 34 7-(metyl-2-metoxyetylaminometylén)-10,l 1 -metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin

Zlúčenina 35 7-cyklohexylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R)-camptothecin

Zlúčenina 36

7-(2-butenyl)aminometylén-10,l 1 -metyléndioxy-20(R,S)camptothecin

Zlúčenina 37

-cyklohexylmetylaminometylén-10,11-etyléndioxy-20(R)-camptothecin a

Zlúčenina 38 7-tiazolidmometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin.

Príklad 39

Farmaceutické prostriedky

A. Transdermálny systém zložka účinná látka kvapalný silikón koloidný oxid kremičitý množstvo

600,0 mg

450,0 mg

25,0 mg

Kvapalný silikón a účinná látka sa zmieša a pridá sa koloidný oxid kremičitý na zvýšenie viskozity. Potom sa materiál dávkuje do polymérneho laminátu, ktorý sa najskôr zataví teplom a je tvorený nasledujúcimi vrstvami: polyesterovou vrstvou, adhéznou vrstvou, ktorá j e v styku s kožou a obsahuje silikónové alebo akrylové polymér)' a riadiaca membrána, ktorá je tvorená polyolefinom, napríklad polyetylénom, polyvinylacetátom alebo polyuretánom a nepriepustnou krycou vrstvou z polyestcrovcho laminátu. Opísaný systém tvorí náplast s plochou 10 cm².

B. Tableta na perorálne podanie zložka množstvo účinná látka 200,0 mg škrob 20,0 mg stearan horečnatý 1,0 mg

Účinná látka a škrob sa granulujú s použitím vody a granulát sa vysuší. Pridá sa stearan horečnatý a zmes sa dôkladne premieša. Potom sa zmes lisuje na tablety.

C. Čapíky zložka účinná látka sodná soľ salicylátu treobromínu

Witepsol S55 množstvo

150,0 mg

250,0 mg

1725,0 mg

Pomocné zložky sa zmiešajú a roztavia. Potom sa účinná látka disperguje v roztavenej zmesi, zmes sa vleje do foriem na čapíky a nechá sa ochladiť.

D. Injekcie zložka množstvo účinná látka pufer podľa potreby propylénglykol voda na injekčné podanie

20,0 mg

0,4 g

0,6 ml.

Účinná látka a pufer sa rozpustí v propylénglykole pri teplote 50 °C. Potom sa pridá za miešania voda na injekčné podanie a výsledný roztok sa prefiltruje, plní sa do ampúl, ampuly sa zatavia a sterilizujú v autokláve.

E. Kapsuly zložka množstvo účinná látka 200,0mg laktóza 450,0mg stearan horečnatý 5,0mg

Prášková účinná zložka sa zmieša s pomocnými zložkami a plní do želatínových kapsúl.

Claims (20)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Deriváty camptothecinu všeobecného vzorca (I) kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

   i) R¹ a R² znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, (Ci.₆)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C₃.₇)cykloakyllC^j-alkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxy(C^Jalkyl alebo (C_w)aÉcoxy(Ci.₆)alkyl, ii) R¹ znamená atóm vodíka, (C₁.₆)alkyl, (C₃.₇)- cykloalkyl, (ĽJ.JcykloalkylfCpJalkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxy(Ci.₆)alkvl alebo (C ₁₆)alkoxy(C₁.,_;)alkyl a

   R² znamená skupinu -COR³, v ktorej

   R³ znamená atóm vodíka, (Cj^)alkyl, perhalogén-(Cj.Jalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl(C^sjalkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxylCJ.Jalkyl, (C ].₆)alkoxy skupinu, (Cl-6)alkoxy(Ci._e)alkyl, alebo iii) R¹ a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca (IA) (TA) kde

   Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO₂, CHj alebo NR₄, v ktorej

   R⁴ znamená atóm vodíka, (C_M)alkyl, perhalogén(C₁.₆)alkyl, aryl, substituovaný aryl, v ktorom substituentom. je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (C_w)alkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (Ci.₆)alkylaminoskupina, perhalogénjCj.J-alkyl, hydroxyíCpJalkyl, (Cj.sjalkoxyskupina (Ci.₆)alkoxy(C|.₆)alkylová skupina, alebo R⁴ znamená skupinu -COR⁵, v ktorej

   R⁵ znamená atóm vodíka, (C_w)alkyl, perhalogén(Cpjalkyl, (Cj.Jalkoxyskupinu, aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C_w)alkyl, perhalogén(Cj.₆)alkyl, hydroxy(C₁.₆)alkyl alebo (C_14i)alkoxy(Ci.₆)alkyl, ako aj farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.
2. 2. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1, v ktorých R¹ a R² znamenajú:

   i) nezávisle od seba atóm vodíka, (C_b4)alkyl, (Cj.₇)cykloalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl(C_lj4)alkyl, (C₃.₄)alkenyl, hydroxy(C₁.₄)alkyl, (C₁.₄)alkoxy(Ci.₄)allÔ'l, alebo ii) spoločne s atómom dusíka tvoria aziridin, azetidín, pyrolidín, piperidín, hexametylénimín, imidazolidín, pyrazolidín, izoxazolidín, piperazín, N-metylpiperazin, homopiperazín, N-metylhomopiperazín, tiazolidín, izotiazolidín, morfolín alebo tiomorfolín.
3. 3. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1 alebo 2, v ktorých R¹ a R² spoločne tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridínovú, azetidínovú, pyrolidínovú, piperidínovú, hexametyléniminovú, imidazolidínovú, pyrazolidínovú, izoxazo

   SK 279298 Β6 lidínovú, piperazínovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metylhomopiperazínovú, tiazolidínovú, izotiazolidínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu.
4. 4. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1 až 3, v ktorých n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

   i) R¹ a R² nezávisle znamenajú atóm vodíka, (Cj.₄)al- kyl, alebo hydroxy(C].4)alkyl, ii) R¹ znamená atóm vodíka a R² znamená skupinu -CORj, kde R³ znamená perhalogén(Cj.₄)alkyl, alebo iii) R*a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, azetidínovú, pyrolidínovú, piperidmovú, morfolínovú, tiomorfolínovú alebo piperazínovú skupinu, prípadne substituovanú na atóme dusíka (C^alky- lom, fenylom, prípadne substituovaným jednými alebo väčším počtom perhalogén(C₁.₄)alkylových, alebo (C !.₄)alkoxyskupín; alebo skupinu -COR⁵, kde R³ znamená (C|.₄)alkoxy skupinu.
5. 5. Deriváty camptothecinu podľa nároku 1, ktorými sú 7-dimetylaminometylén-10,11 -metyléndioxy-20 (R, S) -camptothecin,

   7-dimetylaminometylén-10,l l-metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-dimetylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7 -dimety laminomety lén-10,11 -etyléndioxy-20 (S)-camptothecin, 7-morfolinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7-morfolmometylén-10,l l-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-pyrolidinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-piperidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7-piperidinometylén-10,l 1 -etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7 -(4-metylpiperazinometylén)-l 0,11 -etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7-(4-metylpiperazmometylén)-l 0,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-dietylaminometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-dietylaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-N-mctyletanolaminomctylén-10,ll-metyléndioxy-20(R,S) -camptothecin, 7-N-metyletanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)camptothecin, 7-dietanolaminometylén-10,ll-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin,

   7 -dietanolaminometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7 -azetidinometylén-10,11 -metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7-azetidinometylén-10,ll-metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-tiomorfolinometylén-10,1 l-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-azetidinometylén-10,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7 -(4-metylpiperazinometylén)-10,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-trifluóracetamidometylén-10,l 1 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-trifluóracetamidometylén-10,11 -metyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-aminometylén-10,l 1 -ety1éndioxy-20(S)-camptothecin.dihydrochlorid,

   7 -aminometylén-10,11 -mety léndioxy-20(S)-camptothecin-dihydrochlorid,

   7-terc.butyloxykarbonylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin,

   7-piperazmometylén-l 0,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin vo forme soli s kyselinou trifluóroctovou, 7-(a,oí,a-triíluór-m-tolyl)piperazmometylén-10,l 1 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin, 7-(2-metoxyfenylpiperazino)metylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin a 7-fenylpiperazinometylén-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, a soli a solváty týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.
6. 6, Deriváty camptothecinu podľa nároku 1, ktorou je 7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, a soli a solváty tejto látky, prijateľné z farmaceutického hľadiska.
7. 7, Deriváty camptothecinu podľa nárokov 1 až 4, ktoré sú v konfigurácii S.
8. 8, Deriváty camptothecinu všeobecného vzorca (ľ) kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

   R^la a R^2a znamenajú

   i) nezávisle od seba atóm vodíka, (C_w)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C₃.₇)cykloalkyl(C_w)alkyl, (C₃^)alkenyl, hydroxyíCi.₆)alkyl, (C^jalkoxyľC^jalkyl, alebo ii) tvoria spoločne s atómom dusíka heterocyklickú skupinu s 3 až 7 atómami všeobecného vzorca (IA¹) kde

   Ya znamená atóm kyslíka, síry, CH₂, NH alebo Ν((Ο_μό)alkyl) a soli týchto látok, prijateľné z farmaceutického hľadiska.
9. 9. Deriváty camptothecinu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 7 na použitie ako liečivo.
10. 10. Soľ alkalického kovu alebo kovu alkalických zemín, zodpovedajúca zlúčenine všeobecného vzorca (I) podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 7, v ktorej kruh E je otvorený, pričom táto soľ je získaná pôsobením bázy alkalického kovu alebo kovu alkalickej zeminy na túto zlúčeninu.
11. 11. Spôsob výroby zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8 alebo jej fyziologicky prijateľnej soli alebo solvátu, vyznačujúci sa tým, že sa

    a) nechá reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (IV)

    SK 279298 Β6 (IV) , kde

    X znamená atóm halogénu, so zlúčeninou všeobecného vzorca (V)

    HNR'R² (V), kde R¹ a R² majú význam, uvedený vo vzorci (I), alebo sa b) na zlúčeninu všeobecného vzorca (Ila) (II»), kde R¹ a R² majú význam, uvedený vo vzorci (I), pôsobí zlúčeninou všeobecného vzorca (III) (ΙΙΓ) a pripadne sa v takto získanej zlúčenine uskutoční jeden alebo väčší počet nasledujúcich reakcií:

    i) výsledná zlúčenina všeobecného vzorca (I) alebo jej soľ alebo chránený derivát sa premení na inú zlúčeninu všeobecného vzorca (I) a/alebo sa ii) odstráni akákoľvek ochranná skupina alebo skupiny a/alebo iii) sa premení zlúčenina všeobecného vzorca (I) alebo jej soľ na soľ alebo solvát, prijateľný z fyziologického hľadiska.
12. 12. Farmaceutický prostriedok, s protinádorovým účinkom, vyznačujúci sa tým, že ako svoju účinnú zložku obsahuje zlúčeninu podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, alebo jej soľ alebo solvát, prijateľný z farmaceutického hľadiska, a ďalej obsahuje nosič, prijateľný z farmaceutického hľadiska.
13. 13. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 12, vyznačujúci sa tým, že obsahuje 7-(4-metylpiperazmometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecin, alebo jeho soľ alebo solvát, prijateľný z farmaceutického hľadiska, a ďalej obsahuje nosič, prijateľný z farmaceutického hľadiska.
14. 14. Použitie zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8 na výrobu liečiva s protinádorovým účinkom.
15. 15. Použitie podľa nároku 14, 7-(4-metylpiperazinometylén)-10,ll-etyléndioxy-20(S)-camptothecimi, alebo jeho soli alebo solvátu, prijateľného z farmaceutického hľadiska, na výrobu liečiv s protinádorovým účinkom.
16. 16. Medziprodukt všeobecného vzorca (IV) kde n je 1 alebo 2 a X znamená atóm halogénu.
17. 17. Medziprodukt, vybraný zo skupiny zahrnujúcej:

    7-chlónnetyl-10,ll-metyléndioxy-20(R,S)-camptothecin, 7 -chlórmetyl-10,11 -metyléndioxy-20 (S)-camptothecin, 7-chlórmctyI-10,l l-etyléndioxy-20(R,S)-camptothecin a 7-chlórmetyl-l 0,11 -etyléndioxy-20(S)-camptothecin.
18. 18. Medziprodukt všeobecného vzorca (Ha)

    NR kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a

    i) R¹ a R² znamenajú nezávisle od seba atóm vodíka, (C_b6)-alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C₃.7)cykloalkyl(C_b6)alkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxy(C_b6)alkyl alebo (C_b6)alkoxy(C_b6)alkyl, ii) R¹ znamená atóm vodíka, (C_b6)alkyl, (C₃.₇)cyklo- alkyl, (C₃.7)cykloalkyl(C_w)alkyl, (C₃.₆)alkenyl, hydroxy(Cl-6)alkyl alebo (Cl-6)alkoxy(Cl-6)alkyl a

    R² znamená skupinu -COR³, v ktorej

    R³ znamená atóm vodíka, (C_b6)alkyl, pcrhalogén(C_b6)alkyl, (C₃.₇)cykloalkyl, (C_b7)cykloalkyl(C_b6)alkyl, (Č₃.6)alkenyl, hydroxy(C_b6)alkyl, (Ci_e)alkoxyskupinu, (C_b6)alkoxy(C_b6)alkyl, alebo iii) R¹ a R² tvoria spoločne s atómom dusíka, na ktorý sú viazané, nasýtenú 3 až 7-člennú heterocyklickú skupinu všeobecného vzorca (IA) (IA) , kde

    Y znamená atóm kyslíka, síry alebo skupinu SO, SO₂, CH₂ alebo NR⁴, v ktorej

    R⁴ znamená atóm vodíka, (C_b6)alkyl, perhalogén(Ci-íjalkyl, aryl, substituo vaný aryl, v ktorom substituentom je jedna alebo väčší počet skupín zo skupiny (C_b6)alkyl, atóm halogénu, nitroskupina, aminoskupina, (C_b6)alkylaminoskupina, perhalogén(C_b6)-alkyl, hydroxy(C_b6)alkyl, (C_b6)alkoxyskupina (C_b6)alkoxy(C_b6)alkylová skupina, alebo R⁴ znamená skupinu -COR⁵, v ktorej

    R⁵ znamená atóm vodíka, (C_b6)alkyl, perhalogén(C_b6)alkyl, (C_b6)alkoxyskupinu alebo aryl, prípadne substituovaný jedným alebo väčším počtom substituentov zo skupiny (C_b6)alkyl, perhalogén (C_b6)alkyl, hydroxy(C_b6)alkyl alebo (C_b6)alkoxy(C_b6)alkyl.
19. 19. Medziprodukt podľa nároku 18, v ktorom R¹ a R² tvoria heterocyklickú skupinu, a to aziridínovú, azetidínovú, pyrolidínovú, piperidínovú, hexametylénimínovú, imidazolidínovú, pyrazolidínovú, izoxazolidínovú, piperazínovú, N-metylpiperazínovú, homopiperazínovú, N-metyl18

    SK 279298 Β6 homopiperazínovú, tiazolidínovú, izotiazolidínovú, morfolínovú alebo tiomorfolínovú skupinu.
20. 20. Medziprodukt všeobecného vzorca (Π) kde n znamená celé číslo 1 alebo 2 a X znamená atóm halogénu.