SK15742002A3 - V podstate čistý rekombinantný polypeptid, zmes, farmaceutický prostriedok a kit s jeho obsahom, spôsob jeho produkcie a spôsob modulácie fyziológie alebo vývoja bunky - Google Patents
V podstate čistý rekombinantný polypeptid, zmes, farmaceutický prostriedok a kit s jeho obsahom, spôsob jeho produkcie a spôsob modulácie fyziológie alebo vývoja bunky Download PDFInfo
- Publication number
- SK15742002A3 SK15742002A3 SK1574-2002A SK15742002A SK15742002A3 SK 15742002 A3 SK15742002 A3 SK 15742002A3 SK 15742002 A SK15742002 A SK 15742002A SK 15742002 A3 SK15742002 A3 SK 15742002A3
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- polypeptide
- seq
- dcrs5
- cell
- antibody
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 98
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 163
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 140
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 title claims description 44
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 title claims description 44
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 36
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 66
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 57
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 50
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 50
- 241000288906 Primates Species 0.000 claims abstract description 44
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 28
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 171
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 155
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 147
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 123
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 98
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 64
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 46
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 42
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 41
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 40
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 33
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 33
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 28
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 27
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 27
- 102100020790 Interleukin-12 receptor subunit beta-1 Human genes 0.000 claims description 25
- 101710103841 Interleukin-12 receptor subunit beta-1 Proteins 0.000 claims description 25
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims description 23
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 21
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 18
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 16
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 claims description 15
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims description 15
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 claims description 14
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 claims description 14
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 13
- 238000011161 development Methods 0.000 claims description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 9
- 239000002699 waste material Substances 0.000 claims description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims description 7
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 7
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 7
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 7
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 7
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 claims description 6
- 102000003810 Interleukin-18 Human genes 0.000 claims description 6
- 108090000171 Interleukin-18 Proteins 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 6
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 6
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 5
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 claims description 5
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 claims description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 claims description 4
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims description 4
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 claims description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 claims description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 claims description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 claims description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 claims description 3
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 claims description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 claims description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 claims description 2
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 claims description 2
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 claims description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 2
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 claims description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims 4
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 claims 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 claims 2
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 claims 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 abstract description 95
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 abstract description 94
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 14
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 137
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 82
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 49
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 49
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 39
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 31
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 31
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 28
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 25
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 23
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 22
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 22
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 22
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 22
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 21
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 20
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 19
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 19
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 19
- 241000894007 species Species 0.000 description 19
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 18
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 18
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 18
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 17
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 16
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 16
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 16
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 16
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 15
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 15
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 14
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 13
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 13
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 13
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 12
- 230000006870 function Effects 0.000 description 12
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 12
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 12
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 12
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 11
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 11
- PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N ionomycin Chemical compound O1[C@H](C[C@H](O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)/C=C/C[C@@H](C)C[C@@H](C)C(/O)=C/C(=O)[C@@H](C)C[C@@H](C)C[C@@H](CCC(O)=O)C)CC[C@@]1(C)[C@@H]1O[C@](C)([C@@H](C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-ADZNBVRBSA-N 0.000 description 11
- PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N ionomycin Natural products O1C(CC(O)C(C)C(O)C(C)C=CCC(C)CC(C)C(O)=CC(=O)C(C)CC(C)CC(CCC(O)=O)C)CCC1(C)C1OC(C)(C(C)O)CC1 PGHMRUGBZOYCAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 11
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 11
- 108010051110 tyrosyl-lysine Proteins 0.000 description 11
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 10
- 102000004457 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 10
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 10
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 10
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 10
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 10
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 8
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 8
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 8
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 8
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 8
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 8
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 7
- QSFHZPQUAAQHAQ-CIUDSAMLSA-N Asp-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QSFHZPQUAAQHAQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N N-formyl-L-phenylalanine Chemical compound O=CN[C@H](C(=O)O)CC1=CC=CC=C1 NSTPXGARCQOSAU-VIFPVBQESA-N 0.000 description 7
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 7
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 7
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 7
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 7
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 7
- BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N Asp-Ile Chemical compound CCC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC(O)=O BSWHERGFUNMWGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 6
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 6
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 6
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 6
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 6
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 6
- LUMXICQAOKVQOB-YWIQKCBGSA-N Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O LUMXICQAOKVQOB-YWIQKCBGSA-N 0.000 description 6
- KAFKKRJQHOECGW-JCOFBHIZSA-N Thr-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@H](O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 KAFKKRJQHOECGW-JCOFBHIZSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 6
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 6
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 6
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 6
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 6
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 6
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 6
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N Glu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JSIQVRIXMINMTA-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 5
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 5
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 5
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 5
- 108010047857 aspartylglycine Proteins 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 5
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 108010051242 phenylalanylserine Proteins 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 5
- -1 sequence Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 4
- BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N Glu-Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BUZMZDDKFCSKOT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 4
- MUSGDMDGNGXULI-DCAQKATOSA-N Glu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O MUSGDMDGNGXULI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 4
- HUORUFRRJHELPD-MNXVOIDGSA-N Ile-Leu-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N HUORUFRRJHELPD-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 4
- HPCFRQWLTRDGHT-AJNGGQMLSA-N Ile-Leu-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HPCFRQWLTRDGHT-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 4
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 4
- ZFNLIDNJUWNIJL-WDCWCFNPSA-N Leu-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZFNLIDNJUWNIJL-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 4
- IGRMTQMIDNDFAA-UWVGGRQHSA-N Lys-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 IGRMTQMIDNDFAA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 4
- OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N Lys-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O OIQSIMFSVLLWBX-VOAKCMCISA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 4
- ZUGXSSFMTXKHJS-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ala-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZUGXSSFMTXKHJS-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 4
- GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N Ser-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CO GZFAWAQTEYDKII-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 4
- MOQDPPUMFSMYOM-KKUMJFAQSA-N Ser-His-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CO)N MOQDPPUMFSMYOM-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 4
- BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO BXLYSRPHVMCOPS-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 4
- DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N Thr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DSGIVWSDDRDJIO-ZXXMMSQZSA-N 0.000 description 4
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 4
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 4
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- 108010036413 histidylglycine Proteins 0.000 description 4
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 4
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 4
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 4
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 4
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 4
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 3
- DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N Ala-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 3
- BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N BUQICHWNXBIBOG-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 3
- VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N Ala-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNFSAYFQLXPHPY-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 3
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- UZSQXCMNUPKLCC-FJXKBIBVSA-N Arg-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O UZSQXCMNUPKLCC-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 3
- SEMWSADZTMJELF-BYULHYEWSA-N Asp-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O SEMWSADZTMJELF-BYULHYEWSA-N 0.000 description 3
- DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N Asp-Ser Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DWBZEJHQQIURML-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N Asp-Ser-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O KGHLGJAXYSVNJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- BJDHEININLSZOT-KKUMJFAQSA-N Asp-Tyr-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O BJDHEININLSZOT-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 3
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 3
- NXQCSPVUPLUTJH-WHFBIAKZSA-N Cys-Ser-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O NXQCSPVUPLUTJH-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 3
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- LTUVYLVIZHJCOQ-KKUMJFAQSA-N Glu-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LTUVYLVIZHJCOQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- RAUDKMVXNOWDLS-WDSKDSINSA-N Glu-Gly-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O RAUDKMVXNOWDLS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 3
- QLPYYTDOUQNJGQ-AVGNSLFASA-N Glu-His-Lys Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N QLPYYTDOUQNJGQ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N Glu-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N XTZDZAXYPDISRR-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 3
- WTMZXOPHTIVFCP-QEWYBTABSA-N Glu-Ile-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 WTMZXOPHTIVFCP-QEWYBTABSA-N 0.000 description 3
- ZSWGJYOZWBHROQ-RWRJDSDZSA-N Glu-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ZSWGJYOZWBHROQ-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 3
- DWBBKNPKDHXIAC-SRVKXCTJSA-N Glu-Leu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O DWBBKNPKDHXIAC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FBEJIDRSQCGFJI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- XMBSYZWANAQXEV-QWRGUYRKSA-N Glu-Phe Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N Glu-Ser Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UQHGAYSULGRWRG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 3
- GPSHCSTUYOQPAI-JHEQGTHGSA-N Glu-Thr-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(O)=O GPSHCSTUYOQPAI-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 3
- 102000005720 Glutathione transferase Human genes 0.000 description 3
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 3
- QITBQGJOXQYMOA-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN QITBQGJOXQYMOA-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 3
- ITZOBNKQDZEOCE-NHCYSSNCSA-N Gly-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)CN ITZOBNKQDZEOCE-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 3
- LOEANKRDMMVOGZ-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LOEANKRDMMVOGZ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- YOSQCYUFZGPIPC-PBCZWWQYSA-N His-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YOSQCYUFZGPIPC-PBCZWWQYSA-N 0.000 description 3
- LVXFNTIIGOQBMD-SRVKXCTJSA-N His-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O LVXFNTIIGOQBMD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- LVWIJITYHRZHBO-IXOXFDKPSA-N His-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LVWIJITYHRZHBO-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 3
- WHKLDLQHSYAVGU-ACRUOGEOSA-N His-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O WHKLDLQHSYAVGU-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 3
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 3
- TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O TWVKGYNQQAUNRN-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N Ile-Ser-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O JHNJNTMTZHEDLJ-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 3
- RQJUKVXWAKJDBW-SVSWQMSJSA-N Ile-Ser-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N RQJUKVXWAKJDBW-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 3
- DRCKHKZYDLJYFQ-YWIQKCBGSA-N Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DRCKHKZYDLJYFQ-YWIQKCBGSA-N 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N Leu-Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O QNBVTHNJGCOVFA-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N Leu-Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O YOKVEHGYYQEQOP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 3
- XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N Leu-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XGDCYUQSFDQISZ-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 3
- RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N Leu-Ser-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O RGUXWMDNCPMQFB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- VSTNAUBHKQPVJX-IHRRRGAJSA-N Lys-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VSTNAUBHKQPVJX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N Lys-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IOQWIOPSKJOEKI-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- KXYLFJIQDIMURW-IHPCNDPISA-N Lys-Trp-Leu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)=CNC2=C1 KXYLFJIQDIMURW-IHPCNDPISA-N 0.000 description 3
- MYTOTTSMVMWVJN-STQMWFEESA-N Lys-Tyr Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 MYTOTTSMVMWVJN-STQMWFEESA-N 0.000 description 3
- GPAHWYRSHCKICP-GUBZILKMSA-N Met-Glu-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GPAHWYRSHCKICP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- HWROAFGWPQUPTE-OSUNSFLBSA-N Met-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCSC)N HWROAFGWPQUPTE-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 3
- IMTUWVJPCQPJEE-IUCAKERBSA-N Met-Lys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IMTUWVJPCQPJEE-IUCAKERBSA-N 0.000 description 3
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 3
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 3
- LBSARGIQACMGDF-WBAXXEDZSA-N Phe-Ala-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 LBSARGIQACMGDF-WBAXXEDZSA-N 0.000 description 3
- YZJKNDCEPDDIDA-BZSNNMDCSA-N Phe-His-Lys Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CN=CN1 YZJKNDCEPDDIDA-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 3
- SMFGCTXUBWEPKM-KBPBESRZSA-N Phe-Leu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 SMFGCTXUBWEPKM-KBPBESRZSA-N 0.000 description 3
- VGTJSEYTVMAASM-RPTUDFQQSA-N Phe-Thr-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O VGTJSEYTVMAASM-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 3
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 3
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 3
- 102000005886 STAT4 Transcription Factor Human genes 0.000 description 3
- 108010019992 STAT4 Transcription Factor Proteins 0.000 description 3
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 3
- DSSOYPJWSWFOLK-CIUDSAMLSA-N Ser-Cys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O DSSOYPJWSWFOLK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- DSGYZICNAMEJOC-AVGNSLFASA-N Ser-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O DSGYZICNAMEJOC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- GZBKRJVCRMZAST-XKBZYTNZSA-N Ser-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZBKRJVCRMZAST-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 3
- MQQBBLVOUUJKLH-HJPIBITLSA-N Ser-Ile-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O MQQBBLVOUUJKLH-HJPIBITLSA-N 0.000 description 3
- VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]([NH3+])CO VMLONWHIORGALA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- VZQRNAYURWAEFE-KKUMJFAQSA-N Ser-Leu-Phe Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 VZQRNAYURWAEFE-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 3
- MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N Ser-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O MUJQWSAWLLRJCE-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XZKQVQKUZMAADP-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 3
- GYDFRTRSSXOZCR-ACZMJKKPSA-N Ser-Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GYDFRTRSSXOZCR-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N Ser-Ser-Ser Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XQJCEKXQUJQNNK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 3
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 3
- 108700012920 TNF Proteins 0.000 description 3
- CUTPSEKWUPZFLV-WISUUJSJSA-N Thr-Cys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O CUTPSEKWUPZFLV-WISUUJSJSA-N 0.000 description 3
- BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N Thr-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O BIYXEUAFGLTAEM-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 3
- JQAWYCUUFIMTHE-WLTAIBSBSA-N Thr-Gly-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JQAWYCUUFIMTHE-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 3
- MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N Thr-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O MEJHFIOYJHTWMK-VOAKCMCISA-N 0.000 description 3
- IQPWNQRRAJHOKV-KATARQTJSA-N Thr-Ser-Lys Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN IQPWNQRRAJHOKV-KATARQTJSA-N 0.000 description 3
- NHQVWACSJZJCGJ-FLBSBUHZSA-N Thr-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O NHQVWACSJZJCGJ-FLBSBUHZSA-N 0.000 description 3
- PJCYRZVSACOYSN-ZJDVBMNYSA-N Thr-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O PJCYRZVSACOYSN-ZJDVBMNYSA-N 0.000 description 3
- XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N Thr-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XVHAUVJXBFGUPC-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 3
- GZTKZDGIEBKZAH-XIRDDKMYSA-N Trp-Cys-His Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC3=CN=CN3)C(=O)O)N GZTKZDGIEBKZAH-XIRDDKMYSA-N 0.000 description 3
- ARKBYVBCEOWRNR-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ARKBYVBCEOWRNR-UBHSHLNASA-N 0.000 description 3
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- HKYTWJOWZTWBQB-AVGNSLFASA-N Tyr-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HKYTWJOWZTWBQB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 3
- QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N Tyr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 QJKMCQRFHJRIPU-XDTLVQLUSA-N 0.000 description 3
- KSCVLGXNQXKUAR-JYJNAYRXSA-N Tyr-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KSCVLGXNQXKUAR-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 3
- AOLHUMAVONBBEZ-STQMWFEESA-N Tyr-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 AOLHUMAVONBBEZ-STQMWFEESA-N 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 3
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 3
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 3
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 3
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 3
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000031864 metaphase Effects 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 3
- 108010073025 phenylalanylphenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 3
- 108010072986 threonyl-seryl-lysine Proteins 0.000 description 3
- IXTPACPAXIOCRG-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N IXTPACPAXIOCRG-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- XYTNPQNAZREREP-XQXXSGGOSA-N Ala-Glu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XYTNPQNAZREREP-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 2
- RZZMZYZXNJRPOJ-BJDJZHNGSA-N Ala-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N RZZMZYZXNJRPOJ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- RGQCNKIDEQJEBT-CQDKDKBSSA-N Ala-Leu-Tyr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 RGQCNKIDEQJEBT-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 2
- OMCKWYSDUQBYCN-FXQIFTODSA-N Ala-Ser-Met Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O OMCKWYSDUQBYCN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- FBLMOFHNVQBKRR-IHRRRGAJSA-N Arg-Asp-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 FBLMOFHNVQBKRR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- OSASDIVHOSJVII-WDSKDSINSA-N Arg-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OSASDIVHOSJVII-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- OGSQONVYSTZIJB-WDSOQIARSA-N Arg-Leu-Trp Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(O)=O OGSQONVYSTZIJB-WDSOQIARSA-N 0.000 description 2
- CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N Arg-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CLICCYPMVFGUOF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- JPAWCMXVNZPJLO-IHRRRGAJSA-N Arg-Ser-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O JPAWCMXVNZPJLO-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- TVVYVAUGRHNTGT-UGYAYLCHSA-N Asp-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O TVVYVAUGRHNTGT-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 2
- CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N Asp-Glu Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CKAJHWFHHFSCDT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 101100228200 Caenorhabditis elegans gly-5 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N Cys-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YXQDRIRSAHTJKM-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 2
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 2
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 2
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001200922 Gagata Species 0.000 description 2
- JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N Glu-Asp-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JVSBYEDSSRZQGV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O BBBXWRGITSUJPB-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- QCMVGXDELYMZET-GLLZPBPUSA-N Glu-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QCMVGXDELYMZET-GLLZPBPUSA-N 0.000 description 2
- IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O IEFJWDNGDZAYNZ-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Cys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O BIRKKBCSAIHDDF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- WZBLRQQCDYYRTD-SIXJUCDHSA-N His-Ile-Trp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CN=CN3)N WZBLRQQCDYYRTD-SIXJUCDHSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PFTFEWHJSAXGED-ZKWXMUAHSA-N Ile-Cys-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)O)N PFTFEWHJSAXGED-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- CMNMPCTVCWWYHY-MXAVVETBSA-N Ile-His-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N CMNMPCTVCWWYHY-MXAVVETBSA-N 0.000 description 2
- GVKKVHNRTUFCCE-BJDJZHNGSA-N Ile-Leu-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N GVKKVHNRTUFCCE-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- ZNOBVZFCHNHKHA-KBIXCLLPSA-N Ile-Ser-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N ZNOBVZFCHNHKHA-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 2
- PZWBBXHHUSIGKH-OSUNSFLBSA-N Ile-Thr-Arg Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PZWBBXHHUSIGKH-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 2
- RMJWFINHACYKJI-SIUGBPQLSA-N Ile-Tyr-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N RMJWFINHACYKJI-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 2
- 108010058683 Immobilized Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004551 Interleukin-10 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010017550 Interleukin-10 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 102000010781 Interleukin-6 Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038501 Interleukin-6 Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N L-Met-L-Phe Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HGCNKOLVKRAVHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ORWTWZXGDBYVCP-BJDJZHNGSA-N Leu-Ile-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C ORWTWZXGDBYVCP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 2
- QJXHMYMRGDOHRU-NHCYSSNCSA-N Leu-Ile-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(O)=O QJXHMYMRGDOHRU-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 2
- KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N Leu-Ile-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KUIDCYNIEJBZBU-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 2
- OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N Leu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN OTXBNHIUIHNGAO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 2
- PTRKPHUGYULXPU-KKUMJFAQSA-N Leu-Phe-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PTRKPHUGYULXPU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 2
- LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N Leu-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LRKCBIUDWAXNEG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- BTEMNFBEAAOGBR-BZSNNMDCSA-N Leu-Tyr-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BTEMNFBEAAOGBR-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GGAPIOORBXHMNY-ULQDDVLXSA-N Lys-Arg-Tyr Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N)O GGAPIOORBXHMNY-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- DUTMKEAPLLUGNO-JYJNAYRXSA-N Lys-Glu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O DUTMKEAPLLUGNO-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- ZMMDPRTXLAEMOD-BZSNNMDCSA-N Lys-His-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O ZMMDPRTXLAEMOD-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- BXPHMHQHYHILBB-BZSNNMDCSA-N Lys-Lys-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O BXPHMHQHYHILBB-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 2
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N Lys-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O DLCAXBGXGOVUCD-PPCPHDFISA-N 0.000 description 2
- CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N Lys-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O CAVRAQIDHUPECU-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- DBXMFHGGHMXYHY-DCAQKATOSA-N Met-Leu-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DBXMFHGGHMXYHY-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- WSPQHZOMTFFWGH-XGEHTFHBSA-N Met-Thr-Cys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O WSPQHZOMTFFWGH-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 2
- PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N N-L-methionyl-L-tyrosine Natural products CSCCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PESQCPHRXOFIPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010002311 N-glycylglutamic acid Proteins 0.000 description 2
- BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N Nalpha-L-Leucyl-L-tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 BQVUABVGYYSDCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N Phe-Leu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KDYPMIZMXDECSU-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 2
- PHJUFDQVVKVOPU-ULQDDVLXSA-N Phe-Lys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N PHJUFDQVVKVOPU-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N Phe-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GMWNQSGWWGKTSF-LFSVMHDDSA-N 0.000 description 2
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 2
- 101150099493 STAT3 gene Proteins 0.000 description 2
- 101100497639 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) CYR1 gene Proteins 0.000 description 2
- RZEQTVHJZCIUBT-WDSKDSINSA-N Ser-Arg Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=N RZEQTVHJZCIUBT-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- WTPKKLMBNBCCNL-ACZMJKKPSA-N Ser-Cys-Glu Chemical compound C(CC(=O)O)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N WTPKKLMBNBCCNL-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- RNFKSBPHLTZHLU-WHFBIAKZSA-N Ser-Cys-Gly Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)O)N)O RNFKSBPHLTZHLU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N Ser-Glu Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O LAFKUZYWNCHOHT-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N Ser-Gly Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O WOUIMBGNEUWXQG-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- YZMPDHTZJJCGEI-BQBZGAKWSA-N Ser-His Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 YZMPDHTZJJCGEI-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO NFDYGNFETJVMSE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N Ser-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N Ser-Ser-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BMKNXTJLHFIAAH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 2
- UBTNVMGPMYDYIU-HJPIBITLSA-N Ser-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UBTNVMGPMYDYIU-HJPIBITLSA-N 0.000 description 2
- SHOMROOOQBDGRL-JHEQGTHGSA-N Thr-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O SHOMROOOQBDGRL-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 2
- LKEKWDJCJSPXNI-IRIUXVKKSA-N Thr-Glu-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LKEKWDJCJSPXNI-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 2
- BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](C)O BQBCIBCLXBKYHW-CSMHCCOUSA-N 0.000 description 2
- KKPOGALELPLJTL-MEYUZBJRSA-N Thr-Lys-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KKPOGALELPLJTL-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- PXQPYPMSLBQHJJ-WFBYXXMGSA-N Trp-Asp-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N PXQPYPMSLBQHJJ-WFBYXXMGSA-N 0.000 description 2
- UMXSDHPSMROQRB-YJRXYDGGSA-N Tyr-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N)O UMXSDHPSMROQRB-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 2
- KIJLSRYAUGGZIN-CFMVVWHZSA-N Tyr-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KIJLSRYAUGGZIN-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 2
- DMWNPLOERDAHSY-MEYUZBJRSA-N Tyr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O DMWNPLOERDAHSY-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 2
- JAGGEZACYAAMIL-CQDKDKBSSA-N Tyr-Lys-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N JAGGEZACYAAMIL-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 2
- ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N Tyr-Ser-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(O)=O ZPFLBLFITJCBTP-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 2
- MFEVVAXTBZELLL-GGVZMXCHSA-N Tyr-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 MFEVVAXTBZELLL-GGVZMXCHSA-N 0.000 description 2
- NAHUCETZGZZSEX-IHPCNDPISA-N Tyr-Trp-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC3=CC=C(C=C3)O)N NAHUCETZGZZSEX-IHPCNDPISA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 108010050025 alpha-glutamyltryptophan Proteins 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 2
- 108010069205 aspartyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 108010068265 aspartyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 2
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 2
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 2
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 2
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- DMSZORWOGDLWGN-UHFFFAOYSA-N ctk1a3526 Chemical compound NP(N)(N)=O DMSZORWOGDLWGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001400 expression cloning Methods 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 2
- 108010057083 glutamyl-aspartyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010079547 glutamylmethionine Proteins 0.000 description 2
- 108010020688 glycylhistidine Proteins 0.000 description 2
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010025306 histidylleucine Proteins 0.000 description 2
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 2
- 108040003610 interleukin-12 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 108040006858 interleukin-6 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 108010076756 leucyl-alanyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 2
- 108020001756 ligand binding domains Proteins 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- 108010005942 methionylglycine Proteins 0.000 description 2
- 108010068488 methionylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 2
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 2
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000005556 structure-activity relationship Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 2
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000010396 two-hybrid screening Methods 0.000 description 2
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N (2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-5-amino-2-[[2-[[(2S)-1-[(2S)-6-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-4-yl)propanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]acetyl]amino]-5-oxopentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 SBKVPJHMSUXZTA-MEJXFZFPSA-N 0.000 description 1
- OJHZNMVJJKMFGX-RNWHKREASA-N (4r,4ar,7ar,12bs)-9-methoxy-3-methyl-1,2,4,4a,5,6,7a,13-octahydro-4,12-methanobenzofuro[3,2-e]isoquinoline-7-one;2,3-dihydroxybutanedioic acid Chemical compound OC(=O)C(O)C(O)C(O)=O.O=C([C@@H]1O2)CC[C@H]3[C@]4([H])N(C)CC[C@]13C1=C2C(OC)=CC=C1C4 OJHZNMVJJKMFGX-RNWHKREASA-N 0.000 description 1
- RNAMYOYQYRYFQY-UHFFFAOYSA-N 2-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)-6-methoxy-n-(1-propan-2-ylpiperidin-4-yl)-7-(3-pyrrolidin-1-ylpropoxy)quinazolin-4-amine Chemical compound N1=C(N2CCC(F)(F)CC2)N=C2C=C(OCCCN3CCCC3)C(OC)=CC2=C1NC1CCN(C(C)C)CC1 RNAMYOYQYRYFQY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005084 2D-nuclear magnetic resonance Methods 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N AEBSF hydrochloride Chemical compound Cl.NCCC1=CC=C(S(F)(=O)=O)C=C1 WRDABNWSWOHGMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N Ala-Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CCCN=C(N)N JBGSZRYCXBPWGX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- WQVYAWIMAWTGMW-ZLUOBGJFSA-N Ala-Asp-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N WQVYAWIMAWTGMW-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- JQDFGZKKXBEANU-IMJSIDKUSA-N Ala-Cys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O JQDFGZKKXBEANU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- DAEFQZCYZKRTLR-ZLUOBGJFSA-N Ala-Cys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DAEFQZCYZKRTLR-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- UQJUGHFKNKGHFQ-VZFHVOOUSA-N Ala-Cys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O UQJUGHFKNKGHFQ-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N Ala-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)N GGNHBHYDMUDXQB-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- PUBLUECXJRHTBK-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PUBLUECXJRHTBK-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- MPLOSMWGDNJSEV-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O MPLOSMWGDNJSEV-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LXAARTARZJJCMB-CIQUZCHMSA-N Ala-Ile-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LXAARTARZJJCMB-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- VHVVPYOJIIQCKS-QEJZJMRPSA-N Ala-Leu-Phe Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 VHVVPYOJIIQCKS-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- XHNLCGXYBXNRIS-BJDJZHNGSA-N Ala-Lys-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O XHNLCGXYBXNRIS-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N Ala-Lys-Lys Natural products NCCCCC(NC(=O)C(N)C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O VCSABYLVNWQYQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GFEDXKNBZMPEDM-KZVJFYERSA-N Ala-Met-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GFEDXKNBZMPEDM-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- MSWSRLGNLKHDEI-ACZMJKKPSA-N Ala-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MSWSRLGNLKHDEI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NCQMBSJGJMYKCK-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N Ala-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WQKAQKZRDIZYNV-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- AAWLEICNDUHIJM-MBLNEYKQSA-N Ala-Thr-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O AAWLEICNDUHIJM-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- JPOQZCHGOTWRTM-FQPOAREZSA-N Ala-Tyr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JPOQZCHGOTWRTM-FQPOAREZSA-N 0.000 description 1
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101710187573 Alcohol dehydrogenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710133776 Alcohol dehydrogenase class-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N Arg-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OZNSCVPYWZRQPY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YSUVMPICYVWRBX-VEVYYDQMSA-N Arg-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O YSUVMPICYVWRBX-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- JTWOBPNAVBESFW-FXQIFTODSA-N Arg-Cys-Asp Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)CN=C(N)N JTWOBPNAVBESFW-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VSPLYCLMFAUZRF-GUBZILKMSA-N Arg-Cys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N VSPLYCLMFAUZRF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DGFGDPVSDQPANQ-XGEHTFHBSA-N Arg-Cys-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O DGFGDPVSDQPANQ-XGEHTFHBSA-N 0.000 description 1
- OHYQKYUTLIPFOX-ZPFDUUQYSA-N Arg-Glu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O OHYQKYUTLIPFOX-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N Arg-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O NKBQZKVMKJJDLX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- OGUPCHKBOKJFMA-SRVKXCTJSA-N Arg-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N OGUPCHKBOKJFMA-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- WVNFNPGXYADPPO-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WVNFNPGXYADPPO-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- BNODVYXZAAXSHW-IUCAKERBSA-N Arg-His Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 BNODVYXZAAXSHW-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- LKDHUGLXOHYINY-XUXIUFHCSA-N Arg-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N LKDHUGLXOHYINY-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 1
- JQFZHHSQMKZLRU-IUCAKERBSA-N Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N JQFZHHSQMKZLRU-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- MJINRRBEMOLJAK-DCAQKATOSA-N Arg-Lys-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N MJINRRBEMOLJAK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N Arg-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FRBAHXABMQXSJQ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ASQKVGRCKOFKIU-KZVJFYERSA-N Arg-Thr-Ala Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O ASQKVGRCKOFKIU-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- DDBMKOCQWNFDBH-RHYQMDGZSA-N Arg-Thr-Lys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)O DDBMKOCQWNFDBH-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- JBQORRNSZGTLCV-WDSOQIARSA-N Arg-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)=CNC2=C1 JBQORRNSZGTLCV-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- QMQZYILAWUOLPV-JYJNAYRXSA-N Arg-Tyr-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QMQZYILAWUOLPV-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- KRXIWXCXOARFNT-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ala-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O KRXIWXCXOARFNT-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- GBAWQWASNGUNQF-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ala-Cys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N GBAWQWASNGUNQF-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NECWUSYTYSIFNC-DLOVCJGASA-N Asp-Ala-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 NECWUSYTYSIFNC-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- ILJQISGMGXRZQQ-IHRRRGAJSA-N Asp-Arg-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ILJQISGMGXRZQQ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- VFUXXFVCYZPOQG-WDSKDSINSA-N Asp-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O VFUXXFVCYZPOQG-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- OMMIEVATLAGRCK-BYPYZUCNSA-N Asp-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OMMIEVATLAGRCK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- PSLSTUMPZILTAH-BYULHYEWSA-N Asp-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PSLSTUMPZILTAH-BYULHYEWSA-N 0.000 description 1
- PZXPWHFYZXTFBI-YUMQZZPRSA-N Asp-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O PZXPWHFYZXTFBI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- HKEZZWQWXWGASX-KKUMJFAQSA-N Asp-Leu-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 HKEZZWQWXWGASX-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- MYOHQBFRJQFIDZ-KKUMJFAQSA-N Asp-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O MYOHQBFRJQFIDZ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- GKWFMNNNYZHJHV-SRVKXCTJSA-N Asp-Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O GKWFMNNNYZHJHV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NVFSJIXJZCDICF-SRVKXCTJSA-N Asp-Lys-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N NVFSJIXJZCDICF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N Asp-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MGSVBZIBCCKGCY-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N Asp-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O NTQDELBZOMWXRS-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N Asp-Tyr Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 NALWOULWGHTVDA-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- SQIARYGNVQWOSB-BZSNNMDCSA-N Asp-Tyr-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SQIARYGNVQWOSB-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- CZIVKMOEXPILDK-SRVKXCTJSA-N Asp-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O CZIVKMOEXPILDK-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000969130 Atthis Species 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N BROMODEOXYURIDINE Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 240000008886 Ceratonia siliqua Species 0.000 description 1
- 235000013912 Ceratonia siliqua Nutrition 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 102000016989 Ciliary Neurotrophic Factor Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010000063 Ciliary Neurotrophic Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- YUZPQIQWXLRFBW-ACZMJKKPSA-N Cys-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YUZPQIQWXLRFBW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- YKKHFPGOZXQAGK-QWRGUYRKSA-N Cys-Gly-Tyr Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YKKHFPGOZXQAGK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- MRVSLWQRNWEROS-SVSWQMSJSA-N Cys-Ile-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N MRVSLWQRNWEROS-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- KXUKWRVYDYIPSQ-CIUDSAMLSA-N Cys-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KXUKWRVYDYIPSQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Asp Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N VXLXATVURDNDCG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YNJBLTDKTMKEET-ZLUOBGJFSA-N Cys-Ser-Ser Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YNJBLTDKTMKEET-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- FANFRJOFTYCNRG-JYBASQMISA-N Cys-Thr-Trp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O FANFRJOFTYCNRG-JYBASQMISA-N 0.000 description 1
- 102000005754 Cytokine Receptor gp130 Human genes 0.000 description 1
- 108010006197 Cytokine Receptor gp130 Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 108010090461 DFG peptide Proteins 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 241000224495 Dictyostelium Species 0.000 description 1
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 241000233756 Fabriciana elisa Species 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N Glu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O JZDHUJAFXGNDSB-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- LKDIBBOKUAASNP-FXQIFTODSA-N Glu-Ala-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O LKDIBBOKUAASNP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- RLZBLVSJDFHDBL-KBIXCLLPSA-N Glu-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O RLZBLVSJDFHDBL-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- CGYDXNKRIMJMLV-GUBZILKMSA-N Glu-Arg-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CGYDXNKRIMJMLV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N Glu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O FYYSIASRLDJUNP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DSPQRJXOIXHOHK-WDSKDSINSA-N Glu-Asp-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O DSPQRJXOIXHOHK-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- SBCYJMOOHUDWDA-NUMRIWBASA-N Glu-Asp-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SBCYJMOOHUDWDA-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- PABVKUJVLNMOJP-WHFBIAKZSA-N Glu-Cys Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PABVKUJVLNMOJP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- CGOHAEBMDSEKFB-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CGOHAEBMDSEKFB-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- ILGFBUGLBSAQQB-GUBZILKMSA-N Glu-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O ILGFBUGLBSAQQB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N Glu-Glu-Asp Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O NKLRYVLERDYDBI-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LGYZYFFDELZWRS-DCAQKATOSA-N Glu-Glu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LGYZYFFDELZWRS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KRGZZKWSBGPLKL-IUCAKERBSA-N Glu-Gly-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N KRGZZKWSBGPLKL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N Glu-Ile-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VGUYMZGLJUJRBV-YVNDNENWSA-N 0.000 description 1
- NJCALAAIGREHDR-WDCWCFNPSA-N Glu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O NJCALAAIGREHDR-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- AOCARQDSFTWWFT-DCAQKATOSA-N Glu-Met-Arg Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O AOCARQDSFTWWFT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LHIPZASLKPYDPI-AVGNSLFASA-N Glu-Phe-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O LHIPZASLKPYDPI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ITVBKCZZLJUUHI-HTUGSXCWSA-N Glu-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O ITVBKCZZLJUUHI-HTUGSXCWSA-N 0.000 description 1
- SYAYROHMAIHWFB-KBIXCLLPSA-N Glu-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O SYAYROHMAIHWFB-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- VNCNWQPIQYAMAK-ACZMJKKPSA-N Glu-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VNCNWQPIQYAMAK-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- JWNZHMSRZXXGTM-XKBZYTNZSA-N Glu-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JWNZHMSRZXXGTM-XKBZYTNZSA-N 0.000 description 1
- HZISRJBYZAODRV-XQXXSGGOSA-N Glu-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HZISRJBYZAODRV-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 1
- DDXZHOHEABQXSE-NKIYYHGXSA-N Glu-Thr-His Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O DDXZHOHEABQXSE-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- RGJKYNUINKGPJN-RWRJDSDZSA-N Glu-Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N RGJKYNUINKGPJN-RWRJDSDZSA-N 0.000 description 1
- YQAQQKPWFOBSMU-WDCWCFNPSA-N Glu-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YQAQQKPWFOBSMU-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- VJVAQZYGLMJPTK-QEJZJMRPSA-N Glu-Trp-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N VJVAQZYGLMJPTK-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- SFKMXFWWDUGXRT-NWLDYVSISA-N Glu-Trp-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)O SFKMXFWWDUGXRT-NWLDYVSISA-N 0.000 description 1
- RXJFSLQVMGYQEL-IHRRRGAJSA-N Glu-Tyr-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 RXJFSLQVMGYQEL-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HBMRTXJZQDVRFT-DZKIICNBSA-N Glu-Tyr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HBMRTXJZQDVRFT-DZKIICNBSA-N 0.000 description 1
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N Gly-Asp-Thr Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O PMNHJLASAAWELO-FOHZUACHSA-N 0.000 description 1
- SABZDFAAOJATBR-QWRGUYRKSA-N Gly-Cys-Phe Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O SABZDFAAOJATBR-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- QCTLGOYODITHPQ-WHFBIAKZSA-N Gly-Cys-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QCTLGOYODITHPQ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- YYPFZVIXAVDHIK-IUCAKERBSA-N Gly-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CN YYPFZVIXAVDHIK-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- QSVCIFZPGLOZGH-WDSKDSINSA-N Gly-Glu-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O QSVCIFZPGLOZGH-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Arg Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N HQRHFUYMGCHHJS-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Cys Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O IDOGEHIWMJMAHT-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N Gly-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C([O-])=O)NC(=O)CNC(=O)C[NH3+] XMPXVJIDADUOQB-RCOVLWMOSA-N 0.000 description 1
- YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N Gly-Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YWAQATDNEKZFFK-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- INLIXXRWNUKVCF-JTQLQIEISA-N Gly-Gly-Tyr Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 INLIXXRWNUKVCF-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N Gly-His Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CC1=CN=CN1 YIWFXZNIBQBFHR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN KGVHCTWYMPWEGN-FSPLSTOPSA-N 0.000 description 1
- UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N Gly-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CN UHPAZODVFFYEEL-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN IKAIKUBBJHFNBZ-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ala Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VBOBNHSVQKKTOT-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- PTIIBFKSLCYQBO-NHCYSSNCSA-N Gly-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CN PTIIBFKSLCYQBO-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N Gly-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CCCCN VEPBEGNDJYANCF-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- NTBOEZICHOSJEE-YUMQZZPRSA-N Gly-Lys-Ser Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O NTBOEZICHOSJEE-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- OJNZVYSGVYLQIN-BQBZGAKWSA-N Gly-Met-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OJNZVYSGVYLQIN-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- SJLKKOZFHSJJAW-YUMQZZPRSA-N Gly-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)CN SJLKKOZFHSJJAW-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N Gly-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N Gly-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BCCRXDTUTZHDEU-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N Gly-Ser-Ile Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O VNNRLUNBJSWZPF-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N Gly-Ser-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN LCRDMSSAKLTKBU-ZDLURKLDSA-N 0.000 description 1
- OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N Gly-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CN OLIFSFOFKGKIRH-WUJLRWPWSA-N 0.000 description 1
- GWNIGUKSRJBIHX-STQMWFEESA-N Gly-Tyr-Arg Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)CN)O GWNIGUKSRJBIHX-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- JYGYNWYVKXENNE-OALUTQOASA-N Gly-Tyr-Trp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O JYGYNWYVKXENNE-OALUTQOASA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102100039619 Granulocyte colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 1
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DZMVESFTHXSSPZ-XVYDVKMFSA-N His-Ala-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O DZMVESFTHXSSPZ-XVYDVKMFSA-N 0.000 description 1
- SOFSRBYHDINIRG-QTKMDUPCSA-N His-Arg-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N)O SOFSRBYHDINIRG-QTKMDUPCSA-N 0.000 description 1
- UOAVQQRILDGZEN-SRVKXCTJSA-N His-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O UOAVQQRILDGZEN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KNNSUUOHFVVJOP-GUBZILKMSA-N His-Glu-Ser Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N KNNSUUOHFVVJOP-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- LYCVKHSJGDMDLM-LURJTMIESA-N His-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 LYCVKHSJGDMDLM-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- VTMLJMNQHKBPON-QWRGUYRKSA-N His-Gly-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 VTMLJMNQHKBPON-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- IDXZDKMBEXLFMB-HGNGGELXSA-N His-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 IDXZDKMBEXLFMB-HGNGGELXSA-N 0.000 description 1
- ORERHHPZDDEMSC-VGDYDELISA-N His-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N ORERHHPZDDEMSC-VGDYDELISA-N 0.000 description 1
- KHUFDBQXGLEIHC-BZSNNMDCSA-N His-Leu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 KHUFDBQXGLEIHC-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- IGBBXBFSLKRHJB-BZSNNMDCSA-N His-Lys-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CN=CN1 IGBBXBFSLKRHJB-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- JSQIXEHORHLQEE-MEYUZBJRSA-N His-Phe-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JSQIXEHORHLQEE-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- ZHHLTWUOWXHVQJ-YUMQZZPRSA-N His-Ser-Gly Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)O)N ZHHLTWUOWXHVQJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WRPDZHJNLYNFFT-GEVIPFJHSA-N His-Thr Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N)O WRPDZHJNLYNFFT-GEVIPFJHSA-N 0.000 description 1
- DQZCEKQPSOBNMJ-NKIYYHGXSA-N His-Thr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O DQZCEKQPSOBNMJ-NKIYYHGXSA-N 0.000 description 1
- UWSMZKRTOZEGDD-CUJWVEQBSA-N His-Thr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UWSMZKRTOZEGDD-CUJWVEQBSA-N 0.000 description 1
- MRVZCDSYLJXKKX-ACRUOGEOSA-N His-Tyr-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)NC(=O)[C@H](CC3=CN=CN3)N MRVZCDSYLJXKKX-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- JATYGDHMDRAISQ-KKUMJFAQSA-N His-Tyr-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JATYGDHMDRAISQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000746367 Homo sapiens Granulocyte colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000746373 Homo sapiens Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Proteins 0.000 description 1
- 101000960954 Homo sapiens Interleukin-18 Proteins 0.000 description 1
- 101001076408 Homo sapiens Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- JRHFQUPIZOYKQP-KBIXCLLPSA-N Ile-Ala-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JRHFQUPIZOYKQP-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- QICVAHODWHIWIS-HTFCKZLJSA-N Ile-Ala-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)N QICVAHODWHIWIS-HTFCKZLJSA-N 0.000 description 1
- VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N Ile-Ala-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N VAXBXNPRXPHGHG-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- HVWXAQVMRBKKFE-UGYAYLCHSA-N Ile-Asp-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N HVWXAQVMRBKKFE-UGYAYLCHSA-N 0.000 description 1
- GYAFMRQGWHXMII-IUKAMOBKSA-N Ile-Asp-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N GYAFMRQGWHXMII-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- AQTWDZDISVGCAC-CFMVVWHZSA-N Ile-Asp-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)O)N AQTWDZDISVGCAC-CFMVVWHZSA-N 0.000 description 1
- KTGFOCFYOZQVRJ-ZKWXMUAHSA-N Ile-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O KTGFOCFYOZQVRJ-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N Ile-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 QNBYCZTZNOVDMI-HGNGGELXSA-N 0.000 description 1
- BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)[C@@H](C)CC BCVIOZZGJNOEQS-XKNYDFJKSA-N 0.000 description 1
- YNMQUIVKEFRCPH-QSFUFRPTSA-N Ile-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)O)N YNMQUIVKEFRCPH-QSFUFRPTSA-N 0.000 description 1
- TWPSALMCEHCIOY-YTFOTSKYSA-N Ile-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N TWPSALMCEHCIOY-YTFOTSKYSA-N 0.000 description 1
- KBAPKNDWAGVGTH-IGISWZIWSA-N Ile-Ile-Tyr Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KBAPKNDWAGVGTH-IGISWZIWSA-N 0.000 description 1
- PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N Ile-Leu-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N PHRWFSFCNJPWRO-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N Ile-Lys-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N AKOYRLRUFBZOSP-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- TUYOFUHICRWDGA-CIUDSAMLSA-N Ile-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCSC TUYOFUHICRWDGA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JZNVOBUNTWNZPW-GHCJXIJMSA-N Ile-Ser-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N JZNVOBUNTWNZPW-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- PELCGFMHLZXWBQ-BJDJZHNGSA-N Ile-Ser-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N PELCGFMHLZXWBQ-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- RKQAYOWLSFLJEE-SVSWQMSJSA-N Ile-Thr-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N RKQAYOWLSFLJEE-SVSWQMSJSA-N 0.000 description 1
- YBKKLDBBPFIXBQ-MBLNEYKQSA-N Ile-Thr-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)O)N YBKKLDBBPFIXBQ-MBLNEYKQSA-N 0.000 description 1
- BVRPESWOSNFUCJ-LKTVYLICSA-N Ile-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)CC)C(O)=O)=CNC2=C1 BVRPESWOSNFUCJ-LKTVYLICSA-N 0.000 description 1
- 102000004560 Interleukin-12 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010017515 Interleukin-12 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100039898 Interleukin-18 Human genes 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 244000050403 Iris x germanica Species 0.000 description 1
- 102000042838 JAK family Human genes 0.000 description 1
- WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N L-DOPA Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C(O)=C1 WTDRDQBEARUVNC-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N L-arginyl-L-glutamic acid Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HFKJBCPRWWGPEY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N L-tryptophan-L-tyrosine Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 TYYLDKGBCJGJGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000018142 Leiomyosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102100031775 Leptin receptor Human genes 0.000 description 1
- CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O CQQGCWPXDHTTNF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XIRYQRLFHWWWTC-QEJZJMRPSA-N Leu-Ala-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XIRYQRLFHWWWTC-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N Leu-Ala-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O XBBKIIGCUMBKCO-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N Leu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- YKNBJXOJTURHCU-DCAQKATOSA-N Leu-Asp-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N YKNBJXOJTURHCU-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- DLFAACQHIRSQGG-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O DLFAACQHIRSQGG-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N Leu-Asp-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O PVMPDMIKUVNOBD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- QLQHWWCSCLZUMA-KKUMJFAQSA-N Leu-Asp-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QLQHWWCSCLZUMA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- KWURTLAFFDOTEQ-GUBZILKMSA-N Leu-Cys-Glu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N KWURTLAFFDOTEQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WQWSMEOYXJTFRU-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N Leu-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 FEHQLKKBVJHSEC-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N Leu-Gly Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(O)=O LESXFEZIFXFIQR-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N Leu-Gly-Thr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HYMLKESRWLZDBR-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 XWOBNBRUDDUEEY-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O OYQUOLRTJHWVSQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- HNDWYLYAYNBWMP-AJNGGQMLSA-N Leu-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N HNDWYLYAYNBWMP-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N Leu-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O HRTRLSRYZZKPCO-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N Leu-Leu-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 KYIIALJHAOIAHF-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N Leu-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C FAELBUXXFQLUAX-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N Leu-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- VVQJGYPTIYOFBR-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Met Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N VVQJGYPTIYOFBR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- IZPVWNSAVUQBGP-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IZPVWNSAVUQBGP-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N KIZIOFNVSOSKJI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C XOWMDXHFSBCAKQ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N Leu-Ser-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BRTVHXHCUSXYRI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N)O LINKCQUOMUDLKN-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N Leu-Thr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LJBVRCDPWOJOEK-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N Leu-Thr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(C)C QWWPYKKLXWOITQ-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- ODRREERHVHMIPT-OEAJRASXSA-N Leu-Thr-Phe Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ODRREERHVHMIPT-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N Leu-Thr-Ser Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O ILDSIMPXNFWKLH-KATARQTJSA-N 0.000 description 1
- GZRABTMNWJXFMH-UVOCVTCTSA-N Leu-Thr-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O GZRABTMNWJXFMH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- RNYLNYTYMXACRI-VFAJRCTISA-N Leu-Thr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O RNYLNYTYMXACRI-VFAJRCTISA-N 0.000 description 1
- UIIMIKFNIYPDJF-WDSOQIARSA-N Leu-Trp-Met Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)=CNC2=C1 UIIMIKFNIYPDJF-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- SEOXPEFQEOYURL-PMVMPFDFSA-N Leu-Tyr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O SEOXPEFQEOYURL-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 1
- 102100021747 Leukemia inhibitory factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- WSXTWLJHTLRFLW-SRVKXCTJSA-N Lys-Ala-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O WSXTWLJHTLRFLW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N Lys-Ala-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN UWKNTTJNVSYXPC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- GQUDMNDPQTXZRV-DCAQKATOSA-N Lys-Arg-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GQUDMNDPQTXZRV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N Lys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- BRSGXFITDXFMFF-IHRRRGAJSA-N Lys-Arg-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCCN)N BRSGXFITDXFMFF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O CIOWSLJGLSUOME-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N Lys-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HKCCVDWHHTVVPN-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SSJBMGCZZXCGJJ-DCAQKATOSA-N Lys-Asp-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O SSJBMGCZZXCGJJ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NDSNUWJPZKTFAR-DCAQKATOSA-N Lys-Cys-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN NDSNUWJPZKTFAR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N Lys-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UGTZHPSKYRIGRJ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- DRCILAJNUJKAHC-SRVKXCTJSA-N Lys-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O DRCILAJNUJKAHC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N Lys-Gly-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GQZMPWBZQALKJO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N Lys-Gly-Glu Chemical compound [NH3+]CCCC[C@H]([NH3+])C(=O)NCC(=O)N[C@H](C([O-])=O)CCC([O-])=O LCMWVZLBCUVDAZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- ZXFRGTAIIZHNHG-AJNGGQMLSA-N Lys-Ile-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N ZXFRGTAIIZHNHG-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- MYZMQWHPDAYKIE-SRVKXCTJSA-N Lys-Leu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O MYZMQWHPDAYKIE-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- QKXZCUCBFPEXNK-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-His Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 QKXZCUCBFPEXNK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WVJNGSFKBKOKRV-AJNGGQMLSA-N Lys-Leu-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WVJNGSFKBKOKRV-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N Lys-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UQRZFMQQXXJTTF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- JQSIGLHQNSZZRL-KKUMJFAQSA-N Lys-Lys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCCCN)N JQSIGLHQNSZZRL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- URBJRJKWSUFCKS-AVGNSLFASA-N Lys-Met-Arg Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N URBJRJKWSUFCKS-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ALEVUGKHINJNIF-QEJZJMRPSA-N Lys-Phe-Ala Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 ALEVUGKHINJNIF-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- JMNRXRPBHFGXQX-GUBZILKMSA-N Lys-Ser-Glu Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O JMNRXRPBHFGXQX-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N Lys-Ser-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O YRNRVKTYDSLKMD-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 1
- PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N Maleimide Chemical compound O=C1NC(=O)C=C1 PEEHTFAAVSWFBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010038049 Mating Factor Proteins 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- MUYQDMBLDFEVRJ-LSJOCFKGSA-N Met-Ala-His Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CNC=N1 MUYQDMBLDFEVRJ-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- OSOLWRWQADPDIQ-DCAQKATOSA-N Met-Asp-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O OSOLWRWQADPDIQ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- STLBOMUOQNIALW-BQBZGAKWSA-N Met-Gly-Cys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O STLBOMUOQNIALW-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- UZVKFARGHHMQGX-IUCAKERBSA-N Met-Gly-Met Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCSC UZVKFARGHHMQGX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- BKIFWLQFOOKUCA-DCAQKATOSA-N Met-His-Ser Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N BKIFWLQFOOKUCA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OCRSGGIJBDUXHU-WDSOQIARSA-N Met-Leu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 OCRSGGIJBDUXHU-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- VBGGTAPDGFQMKF-AVGNSLFASA-N Met-Lys-Met Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O VBGGTAPDGFQMKF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KAKJTZWHIUWTTD-VQVTYTSYSA-N Met-Thr Chemical compound CSCC[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C([O-])=O KAKJTZWHIUWTTD-VQVTYTSYSA-N 0.000 description 1
- YJNDFEWPGLNLNH-IHRRRGAJSA-N Met-Tyr-Cys Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 YJNDFEWPGLNLNH-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- PNHRPOWKRRJATF-IHRRRGAJSA-N Met-Tyr-Ser Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 PNHRPOWKRRJATF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 108010021466 Mutant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000008300 Mutant Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N N-L-arginyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCCN=C(N)N WYBVBIHNJWOLCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 108010079364 N-glycylalanine Proteins 0.000 description 1
- 102000007607 Non-Receptor Type 11 Protein Tyrosine Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010032107 Non-Receptor Type 11 Protein Tyrosine Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N O-phosphoryl-L-serine Natural products OC(=O)C(N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010064527 OSM-LIF Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- 241000414651 Omosita colon Species 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 102000016979 Other receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- MQWISMJKHOUEMW-ULQDDVLXSA-N Phe-Arg-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MQWISMJKHOUEMW-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- LGBVMDMZZFYSFW-HJWJTTGWSA-N Phe-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N LGBVMDMZZFYSFW-HJWJTTGWSA-N 0.000 description 1
- HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N Phe-Asn-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N HXSUFWQYLPKEHF-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HWMGTNOVUDIKRE-UWVGGRQHSA-N Phe-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HWMGTNOVUDIKRE-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- XMPUYNHKEPFERE-IHRRRGAJSA-N Phe-Asp-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 XMPUYNHKEPFERE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KNPVDQMEHSCAGX-UWVGGRQHSA-N Phe-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 KNPVDQMEHSCAGX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LXUJDHOKVUYHRC-KKUMJFAQSA-N Phe-Cys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N LXUJDHOKVUYHRC-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- HGNGAMWHGGANAU-WHOFXGATSA-N Phe-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 HGNGAMWHGGANAU-WHOFXGATSA-N 0.000 description 1
- OHUXOEXBXPZKPT-STQMWFEESA-N Phe-His Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 OHUXOEXBXPZKPT-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N Phe-Leu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 YTILBRIUASDGBL-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N Phe-Ser-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 WEDZFLRYSIDIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N Phe-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IAOZOFPONWDXNT-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- RAGOJJCBGXARPO-XVSYOHENSA-N Phe-Thr-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@H](O)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 RAGOJJCBGXARPO-XVSYOHENSA-N 0.000 description 1
- KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N Phe-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KLYYKKGCPOGDPE-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- YRHRGNUAXGUPTO-PMVMPFDFSA-N Phe-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N YRHRGNUAXGUPTO-PMVMPFDFSA-N 0.000 description 1
- VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N Phe-Tyr-Arg Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CC=C(C=C2)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N VFDRDMOMHBJGKD-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- 102000009097 Phosphorylases Human genes 0.000 description 1
- 108010073135 Phosphorylases Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 1
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 1
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 101100408135 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) phnA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000012614 Q-Sepharose Substances 0.000 description 1
- 108010003201 RGH 0205 Proteins 0.000 description 1
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 1
- 108020005067 RNA Splice Sites Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N Ser-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CO SSJMZMUVNKEENT-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- HRNQLKCLPVKZNE-CIUDSAMLSA-N Ser-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HRNQLKCLPVKZNE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HBZBPFLJNDXRAY-FXQIFTODSA-N Ser-Ala-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HBZBPFLJNDXRAY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FTVRVZNYIYWJGB-ACZMJKKPSA-N Ser-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FTVRVZNYIYWJGB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- SFZKGGOGCNQPJY-CIUDSAMLSA-N Ser-Asp-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N SFZKGGOGCNQPJY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- NJSPTZXVPZDRCU-UBHSHLNASA-N Ser-Asp-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(=C1)C(=CN2)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N NJSPTZXVPZDRCU-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- FFOKMZOAVHEWET-IMJSIDKUSA-N Ser-Cys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O FFOKMZOAVHEWET-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- INCNPLPRPOYTJI-JBDRJPRFSA-N Ser-Cys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N INCNPLPRPOYTJI-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- UCOYFSCEIWQYNL-FXQIFTODSA-N Ser-Cys-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O UCOYFSCEIWQYNL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N Ser-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UOLGINIHBRIECN-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O VQBCMLMPEWPUTB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N Ser-Gly-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O IOVHBRCQOGWAQH-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- HMRAQFJFTOLDKW-GUBZILKMSA-N Ser-His-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HMRAQFJFTOLDKW-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N Ser-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JEHPKECJCALLRW-CUJWVEQBSA-N Ser-His-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JEHPKECJCALLRW-CUJWVEQBSA-N 0.000 description 1
- DLPXTCTVNDTYGJ-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Cys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O DLPXTCTVNDTYGJ-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- JIPVNVNKXJLFJF-BJDJZHNGSA-N Ser-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N JIPVNVNKXJLFJF-BJDJZHNGSA-N 0.000 description 1
- QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O QYSFWUIXDFJUDW-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N Ser-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ZIFYDQAFEMIZII-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N Ser-Leu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O XNCUYZKGQOCOQH-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N Ser-Leu-Lys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O UBRMZSHOOIVJPW-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- XXNYYSXNXCJYKX-DCAQKATOSA-N Ser-Leu-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O XXNYYSXNXCJYKX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O GZSZPKSBVAOGIE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PPNPDKGQRFSCAC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O PPNPDKGQRFSCAC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JLPMFVAIQHCBDC-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N JLPMFVAIQHCBDC-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SRKMDKACHDVPMD-SRVKXCTJSA-N Ser-Lys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N SRKMDKACHDVPMD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N Ser-Lys-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O FPCGZYMRFFIYIH-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- JAWGSPUJAXYXJA-IHRRRGAJSA-N Ser-Phe-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)N)CC1=CC=CC=C1 JAWGSPUJAXYXJA-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- MHVXPTAMDHLTHB-IHPCNDPISA-N Ser-Phe-Trp Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MHVXPTAMDHLTHB-IHPCNDPISA-N 0.000 description 1
- JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N Ser-Ser-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O JCLAFVNDBJMLBC-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- DYEGLQRVMBWQLD-IXOXFDKPSA-N Ser-Thr-Phe Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O DYEGLQRVMBWQLD-IXOXFDKPSA-N 0.000 description 1
- OJFFAQFRCVPHNN-JYBASQMISA-N Ser-Thr-Trp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(O)=O OJFFAQFRCVPHNN-JYBASQMISA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 201000001880 Sexual dysfunction Diseases 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 1
- 101001099217 Thermotoga maritima (strain ATCC 43589 / DSM 3109 / JCM 10099 / NBRC 100826 / MSB8) Triosephosphate isomerase Proteins 0.000 description 1
- VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N Thr-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VPZKQTYZIVOJDV-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N Thr-Ala-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O IGROJMCBGRFRGI-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- MQCPGOZXFSYJPS-KZVJFYERSA-N Thr-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O MQCPGOZXFSYJPS-KZVJFYERSA-N 0.000 description 1
- BSNZTJXVDOINSR-JXUBOQSCSA-N Thr-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BSNZTJXVDOINSR-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- MQBTXMPQNCGSSZ-OSUNSFLBSA-N Thr-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)CCCN=C(N)N MQBTXMPQNCGSSZ-OSUNSFLBSA-N 0.000 description 1
- IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N Thr-Asp Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O IOWJRKAVLALBQB-IWGUZYHVSA-N 0.000 description 1
- YBXMGKCLOPDEKA-NUMRIWBASA-N Thr-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O YBXMGKCLOPDEKA-NUMRIWBASA-N 0.000 description 1
- QWMPARMKIDVBLV-VZFHVOOUSA-N Thr-Cys-Ala Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O QWMPARMKIDVBLV-VZFHVOOUSA-N 0.000 description 1
- QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N Thr-Gly-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O QQWNRERCGGZOKG-WEDXCCLWSA-N 0.000 description 1
- UBDDORVPVLEECX-FJXKBIBVSA-N Thr-Gly-Met Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O UBDDORVPVLEECX-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- IGGFFPOIFHZYKC-PBCZWWQYSA-N Thr-His-Asp Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O IGGFFPOIFHZYKC-PBCZWWQYSA-N 0.000 description 1
- GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N Thr-Ile-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)N GMXIJHCBTZDAPD-QPHKQPEJSA-N 0.000 description 1
- RRRRCRYTLZVCEN-HJGDQZAQSA-N Thr-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RRRRCRYTLZVCEN-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N Thr-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O PRNGXSILMXSWQQ-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N Thr-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O VRUFCJZQDACGLH-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N Thr-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O IJVNLNRVDUTWDD-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- KRDSCBLRHORMRK-JXUBOQSCSA-N Thr-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O KRDSCBLRHORMRK-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- SPVHQURZJCUDQC-VOAKCMCISA-N Thr-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SPVHQURZJCUDQC-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- WRQLCVIALDUQEQ-UNQGMJICSA-N Thr-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WRQLCVIALDUQEQ-UNQGMJICSA-N 0.000 description 1
- WNQJTLATMXYSEL-OEAJRASXSA-N Thr-Phe-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O WNQJTLATMXYSEL-OEAJRASXSA-N 0.000 description 1
- IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N Thr-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IVDFVBVIVLJJHR-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- NBIIPOKZPUGATB-BWBBJGPYSA-N Thr-Ser-Cys Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O NBIIPOKZPUGATB-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N Thr-Ser-Ser Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O WPSKTVVMQCXPRO-BWBBJGPYSA-N 0.000 description 1
- BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N Thr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- NLWDSYKZUPRMBJ-IEGACIPQSA-N Thr-Trp-Leu Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N)O NLWDSYKZUPRMBJ-IEGACIPQSA-N 0.000 description 1
- JNKAYADBODLPMQ-HSHDSVGOSA-N Thr-Trp-Val Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)=CNC2=C1 JNKAYADBODLPMQ-HSHDSVGOSA-N 0.000 description 1
- WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N Thr-Tyr Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 WCRFXRIWBFRZBR-GGVZMXCHSA-N 0.000 description 1
- REJRKTOJTCPDPO-IRIUXVKKSA-N Thr-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O REJRKTOJTCPDPO-IRIUXVKKSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 240000001085 Trapa natans Species 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- OHGNSVACHBZKSS-KWQFWETISA-N Trp-Ala Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](C)C([O-])=O)=CNC2=C1 OHGNSVACHBZKSS-KWQFWETISA-N 0.000 description 1
- PEYSVKMXSLPQRU-FJHTZYQYSA-N Trp-Ala-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N)O PEYSVKMXSLPQRU-FJHTZYQYSA-N 0.000 description 1
- PEEAINPHPNDNGE-JQWIXIFHSA-N Trp-Asp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 PEEAINPHPNDNGE-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 1
- DVAAUUVLDFKTAQ-VHWLVUOQSA-N Trp-Asp-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CNC2=CC=CC=C21)N DVAAUUVLDFKTAQ-VHWLVUOQSA-N 0.000 description 1
- JZHJLBPBQKPTNX-UBHSHLNASA-N Trp-Cys-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)=CNC2=C1 JZHJLBPBQKPTNX-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- AIISTODACBDQLW-WDSOQIARSA-N Trp-Leu-Arg Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)=CNC2=C1 AIISTODACBDQLW-WDSOQIARSA-N 0.000 description 1
- DZHDVYLBNKMLMB-ZFWWWQNUSA-N Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 DZHDVYLBNKMLMB-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- WKQNLTQSCYXKQK-VFAJRCTISA-N Trp-Lys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WKQNLTQSCYXKQK-VFAJRCTISA-N 0.000 description 1
- BVZABQIRMYTKCF-JSGCOSHPSA-N Trp-Met Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O)=CNC2=C1 BVZABQIRMYTKCF-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- MYVYPSWUSKCCHG-JQWIXIFHSA-N Trp-Ser Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)=CNC2=C1 MYVYPSWUSKCCHG-JQWIXIFHSA-N 0.000 description 1
- RNDWCRUOGGQDKN-UBHSHLNASA-N Trp-Ser-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC2=C1C=CC=C2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RNDWCRUOGGQDKN-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- UIRPULWLRODAEQ-QEJZJMRPSA-N Trp-Ser-Glu Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)=CNC2=C1 UIRPULWLRODAEQ-QEJZJMRPSA-N 0.000 description 1
- YBRHKUNWEYBZGT-WLTAIBSBSA-N Trp-Thr Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)=CNC2=C1 YBRHKUNWEYBZGT-WLTAIBSBSA-N 0.000 description 1
- ITUAVBRBGKVBLH-BVSLBCMMSA-N Trp-Tyr-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CNC3=CC=CC=C32)N ITUAVBRBGKVBLH-BVSLBCMMSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N Tyr-Ala-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BURPTJBFWIOHEY-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- KDGFPPHLXCEQRN-STECZYCISA-N Tyr-Arg-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O KDGFPPHLXCEQRN-STECZYCISA-N 0.000 description 1
- SGFIXFAHVWJKTD-KJEVXHAQSA-N Tyr-Arg-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O SGFIXFAHVWJKTD-KJEVXHAQSA-N 0.000 description 1
- XKDOQXAXKFQWQJ-SRVKXCTJSA-N Tyr-Cys-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O XKDOQXAXKFQWQJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- NJLQMKZSXYQRTO-FHWLQOOXSA-N Tyr-Glu-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 NJLQMKZSXYQRTO-FHWLQOOXSA-N 0.000 description 1
- FNWGDMZVYBVAGJ-XEGUGMAKSA-N Tyr-Gly-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N FNWGDMZVYBVAGJ-XEGUGMAKSA-N 0.000 description 1
- JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N Tyr-Ile-Cys Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N JJNXZIPLIXIGBX-HJPIBITLSA-N 0.000 description 1
- HVPPEXXUDXAPOM-MGHWNKPDSA-N Tyr-Ile-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 HVPPEXXUDXAPOM-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- BSCBBPKDVOZICB-KKUMJFAQSA-N Tyr-Leu-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O BSCBBPKDVOZICB-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- QHLIUFUEUDFAOT-MGHWNKPDSA-N Tyr-Leu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N QHLIUFUEUDFAOT-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- PRONOHBTMLNXCZ-BZSNNMDCSA-N Tyr-Leu-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 PRONOHBTMLNXCZ-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- GYKDRHDMGQUZPU-MGHWNKPDSA-N Tyr-Lys-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N GYKDRHDMGQUZPU-MGHWNKPDSA-N 0.000 description 1
- CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N Tyr-Phe Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 CGWAPUBOXJWXMS-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- PSALWJCUIAQKFW-ACRUOGEOSA-N Tyr-Phe-Lys Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N PSALWJCUIAQKFW-ACRUOGEOSA-N 0.000 description 1
- LUMQYLVYUIRHHU-YJRXYDGGSA-N Tyr-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O LUMQYLVYUIRHHU-YJRXYDGGSA-N 0.000 description 1
- NZBSVMQZQMEUHI-WZLNRYEVSA-N Tyr-Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N NZBSVMQZQMEUHI-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 1
- PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N Tyr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PWKMJDQXKCENMF-MEYUZBJRSA-N 0.000 description 1
- BMPPMAOOKQJYIP-WMZOPIPTSA-N Tyr-Trp Chemical compound C([C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C([O-])=O)C1=CC=C(O)C=C1 BMPPMAOOKQJYIP-WMZOPIPTSA-N 0.000 description 1
- 241000700618 Vaccinia virus Species 0.000 description 1
- RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N Val-Glu-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(O)=O)=CNC2=C1 RKIGNDAHUOOIMJ-BQFCYCMXSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 208000023940 X-Linked Combined Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000008065 acid anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 description 1
- 238000003450 affinity purification method Methods 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010086434 alanyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010041407 alanylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 102000004139 alpha-Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108090000637 alpha-Amylases Proteins 0.000 description 1
- 229940024171 alpha-amylase Drugs 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003092 anti-cytokine Effects 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010069926 arginyl-glycyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010038850 arginyl-isoleucyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010062796 arginyllysine Proteins 0.000 description 1
- 125000003435 aroyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002917 arthritic effect Effects 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 1
- 230000010072 bone remodeling Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 229950004398 broxuridine Drugs 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N carbonyldiimidazole Chemical compound C1=CN=CN1C(=O)N1C=CN=C1 PFKFTWBEEFSNDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000007969 cellular immunity Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N chloramine T Chemical compound [Na+].CC1=CC=C(S(=O)(=O)[N-]Cl)C=C1 VDQQXEISLMTGAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002668 chloroacetyl group Chemical group ClCC(=O)* 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000014107 chromosome localization Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000001142 circular dichroism spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004186 co-expression Effects 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010069495 cysteinyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 239000000409 cytokine receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 239000000430 cytokine receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N dATP Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N dATP Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O1 SUYVUBYJARFZHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 1
- 239000003398 denaturant Substances 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 229950006137 dexfosfoserine Drugs 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002050 diffraction method Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000011143 downstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 1
- 238000007878 drug screening assay Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009088 enzymatic function Effects 0.000 description 1
- 208000037828 epithelial carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002875 fluorescence polarization Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000010230 functional analysis Methods 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 108010063718 gamma-glutamylaspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042598 glutamyl-aspartyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 1
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010072405 glycyl-aspartyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010084264 glycyl-glycyl-cysteine Proteins 0.000 description 1
- 108010010096 glycyl-glycyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010028188 glycyl-histidyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 125000004970 halomethyl group Chemical group 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 230000002607 hemopoietic effect Effects 0.000 description 1
- 108010018006 histidylserine Proteins 0.000 description 1
- 102000052611 human IL6 Human genes 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008102 immune modulation Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004068 intracellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 1
- 201000010260 leiomyoma Diseases 0.000 description 1
- 108010019813 leptin receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000000670 ligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 1
- 108010003700 lysyl aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010038320 lysylphenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000002483 medication Methods 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 108010085203 methionylmethionine Proteins 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000001002 morphogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000921 morphogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000000754 myometrium Anatomy 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000001216 nucleic acid method Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N olefin Natural products CCCCCCCC=C JRZJOMJEPLMPRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000033116 oxidation-reduction process Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 238000004091 panning Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 108010011903 peptide receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000005011 phenolic resin Substances 0.000 description 1
- 229920001568 phenolic resin Polymers 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N phloretic acid Chemical compound OC(=O)CCC1=CC=C(O)C=C1 NMHMNPHRMNGLLB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N phosphoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)COP(O)(O)=O BZQFBWGGLXLEPQ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N phosphotyrosine Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=C(OP(O)(O)=O)C=C1 DCWXELXMIBXGTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 1
- 108010025488 pinealon Proteins 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 239000002985 plastic film Substances 0.000 description 1
- 229920006255 plastic film Polymers 0.000 description 1
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 229910052761 rare earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002910 rare earth metals Chemical group 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 238000001525 receptor binding assay Methods 0.000 description 1
- 108091006082 receptor inhibitors Proteins 0.000 description 1
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 1
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 102000037983 regulatory factors Human genes 0.000 description 1
- 108091008025 regulatory factors Proteins 0.000 description 1
- 239000012508 resin bead Substances 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000011896 sensitive detection Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- 108010069117 seryl-lysyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010048397 seryl-lysyl-leucine Proteins 0.000 description 1
- 231100000872 sexual dysfunction Toxicity 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 230000007781 signaling event Effects 0.000 description 1
- 230000009131 signaling function Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000010474 transient expression Effects 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 102000027257 transmembrane receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091008578 transmembrane receptors Proteins 0.000 description 1
- 101150044170 trpE gene Proteins 0.000 description 1
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 description 1
- 108010014563 tryptophyl-cysteinyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010044292 tryptophyltyrosine Proteins 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010035534 tyrosyl-leucyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000002424 x-ray crystallography Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
- C07K14/715—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for cytokines; for lymphokines; for interferons
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/975—Kit
Description
V podstate čistý rekombinantný polypeptid, zmes, farmaceutický prostriedok a kit s jeho obsahom, spôsob jeho produkcie a spôsob modulácie fyziológie alebo vývoja bunky
Oblasť techniky
Predložený vynález sa týka prostriedkov a spôsobov na ovplyvňovanie cicavčej fyziológie, vrátane funkcie imunitného systému. Poskytuje najmä spôsoby na regulovanie vývoja a/alebo imunitného systému. Opísané sú aj diagnostické a terapeutické použitia týchto materiálov.
Doterajší stav techniky
Rekombinantná DNA technológia vo všeobecnosti označuje techniky integrovania genetickej informácie z donorového zdroja do vektorov na následné spracovanie, ako napríklad prostredníctvom zavedenia do hostiteľa, čím sa prenesená genetická informácia kopíruje a/alebo exprimuje v novom prostredí. Obvykle genetická informácia existuje vo forme komplementárnej DNA (cDNA) odvodenej od mediátorovej RNA (mRNA), ktorá kóduje požadovaný proteínový produkt. Nosičom je často plazmid, ktorý má schopnosť inkorporovať cDNA na neskoršiu replikáciu v hostiteľovi, a v niektorých prípadoch vlastne riadi expresiu cDNA, a tým riadi syntézu kódovaného produktu v hostiteľovi. Pozri napr. Sambrook a ďalší., (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (2. vyd.) zv. 1-3, CSH Press, NY.
Už určitý čas je známe, že cicavčia imunitná odpoveď je založená na sérii komplexných bunkových interakcií, nazývaných imunitná sieť. Súčasný výskum poskytol nové preniknutie do podstaty vnútornej prevádzky tejto siete. Zatiaľ čo ostáva zrejmé, že veľký podiel imunitnej odpovede sa v skutočnosti točí okolo sieťových interakcií lymfocytov, makrofágov, granulocytov a iných buniek, imunológovia sú teraz vo všeobecnosti toho názoru, že rozpustné proteíny, známe ako lymfokiny, cytokíny alebo monokíny, hrajú kritické úlohy pri riadení týchto bunkových interakcií. Takže je značný záujem o izoláciu, charakterizáciu a
-2mechanizmy účinku bunkových modulačných faktorov, ktorých pochopenie bude viesť k významným pokrokom v diagnostike a liečbe rôznych medicínskych abnormalít, napr. porúch imunitného systému.
Zdá sa, že lymfokíny sprostredkúvajú bunkové aktivity rôznymi spôsobmi. Pozri napr. Paul (vyd. 1996) Fundamental Immunology 3. vyd., Raven Press, New York; a Thomson (vyd. 1994) The Cytokine Handbook 2. vyd., Academic Press, San Diego. Dokázali podporiť proliferáciu, rast a/alebo diferenciáciu pluripotentných hematopoetických kmeňových buniek na veľký počet progenitorov zahŕňajúcich rôzne bunkové rodiny, ktoré tvoria komplexný imunitný systém. Správne a vyvážené interakcie medzi bunkovými komponentami sú nevyhnutné pre zdravú imunitnú odpoveď. Rozličné bunkové rodiny často odpovedajú rozličným spôsobom, ked sa podávajú lymfokíny spolu s inými činidlami.
Bunkové rodiny, ktoré sú výnimočne dôležité pre imunitnú odpoveď, zahŕňajú dve triedy lymfocytov: B-bunky, ktoré môžu produkovať a vylučovať imunoglobulíny (proteíny so schopnosťou rozoznávať a viazať sa na cudzí materiál, aby sa dosiahlo jeho odstránenie), a rôzne podtriedy T-buniek, ktoré vylučujú lymfokíny a indukujú alebo suprimujú B-bunky a rôzne iné bunky (vrátane iných T-buniek), čím vytvárajú imunitnú sieť. Tieto lymfocyty interagujú s mnohými inými typmi buniek.
Výskum na lepšie pochopenie a liečbu rôznych imunitných porúch bol brzdený všeobecnou neschopnosťou udržiavať bunky imunitného systému in vitro. Imunológovia objavili, že kultiváciu mnohých týchto buniek je možné dosiahnuť použitím T-bunkového supernatantu a supernatantov iných buniek, ktoré obsahujú rôzne rastové faktory, vrátane mnohých lymfokínov.
Existujú rôzne rastové a regulačné faktory, ktoré modulujú morfogenetický vývoj. Známe sú mnohé receptory pre cytokíny. Často existujú aspoň dve kritické podjednotky vo funkčnom receptore. Pozri napr. Heinrich, a ďalší (1998) Biochem. J. 334: 297-314; Gonda a D'Andrea (1997) Blood 89: 355-369; Presky, a ďalší (1996) Proc. Natl Acad. Sci. USA 93: 14002-14007; Drachman a Kaushansky (1995) Curr. Opin. Hematol. 2: 22-28; Theze (1994) Eur. Cytokine Netw. 5: 353-368; a Lemmon a Schlessinger (1994) Trends Biochem. Sci. 19: 459-463.
Z vyššie uvedeného je zrejmé, že objavenie a vývoj nových rozpustných proteínov a ich receptorov, vrátane proteínov podobných s lymfokínmi, by sa mali
-3podieľať na nových terapiách širokého rozsahu degeneratívnych alebo abnormálnych stavov, ktoré priamo, alebo nepriamo, zahŕňajú vývoj, diferenciáciu alebo funkciu, napr. buniek imunitného systému a/alebo hematopoetických buniek. Veľmi výhodné by bolo najmä objavenie a pochopenie nových receptorov pre lymfokínom podobné molekuly, ktoré zosilňujú alebo zvyšujú potenciál užitočných aktivít iných lymfokínov. Predložený vynález poskytuje nové receptory pre ligandy vykazujúce podobnosť s cytokínovými zmesami a príbuznými zlúčeninami a ich použitie.
Podstata vynálezu .
Predložený vynález sa týka nových receptorov príbuzných s cytokínovými receptormi, napr. primátových molekulových štruktúr podobných s cytokínovým receptorom, označovaných ako DNAX cytokínové receptorové podjednotky (DCRS), a ich biologických aktivít. Poskytuje najmä opis jednej podjednotky, označenej ako DCRS5. Zahŕňa nukleové kyseliny kódujúce samotné polypeptídy a spôsoby ich produkcie a použitie. Nukleové kyseliny podľa vynálezu sa sčasti vyznačujú ich homológiou s tu zahrnutými klonovanými komplementárnymi DNA (cDNA) sekvenciami. Okrem toho vynález poskytuje p40/IL-B30 ligand zodpovedajúci receptorovým podjednotkám DCRS5 a ΙΙ_-12β1, ktorých párovanie poskytuje možnosť preniknutia do indikácií na použitie agonistov a antagonistov na základe reakčných činidiel nasmerovaných proti nim.
Podstatou vynálezu je v podstate čistý alebo rekombinantný polypeptid, ktorý obsahuje aspoň desať po sebe idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2. V určitých uskutočneniach polypeptid: obsahuje aspoň 25 za sebou idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2; je rekombinantný a obsahuje vnútrobunkovú časť sekv. č. 2; ďalej obsahuje aspoň desať po sebe idúcich aminokyselín z nie vnútrobunkovej časti sekv. č. 2; obsahuje aspoň 25 aminokyselín extracelulárnej časti sekv. č. 2; obsahuje zrelú sekv. č. 2; alebo je v podstate čistým prirodzeným polypeptidom. Inak, rekombinantný polypeptid: pozostáva zo zrelej sekvencie podľa tabuľky 1; je neglykozylovaným polypeptidom; je z človeka; obsahuje aspoň 40 po sebe idúcich aminokyselín sekv. č. 2; obsahuje aspoň tri
-4neprekrývajúce sa segmenty obsahujúce aspoň pätnásť po sebe idúcich aminokyselín zo sekv. č. 2; je prirodzeným polymorfným variantom sekv. č. 2; má dĺžku aspoň približne 30 aminokyselín; má aspoň dva neprekrývajúce sa epitopy, ktoré sú špecifické pre primátovú DCRS5; má molekulovú hmotnosť aspoň 30 kD s prirodzenou glykozyláciou; je syntetickým polypeptidom; je v sterilnej forme; je vo vodnom alebo tlmivom roztoku; je pripojený na tuhý substrát; je konjugovaný s inou chemickou skupinou; alebo je fyzikálne spojený s IL-12Rpi polypeptidom.
Iné uskutočnenia vynálezu poskytujú: v podstate čistý alebo rekombinantný polypeptid obsahujúci aspoň dva rozličné neprekrývajúce sa segmenty s aspoň šiestimi po sebe idúcimi aminokyselinami vnútrobunkovej časti sekv. č. 2; v podstate čistý alebo rekombinantný polypeptid obsahujúci aspoň dvanásť po sebe idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2; alebo v podstate čistý prirodzený sekvenčný polypeptid obsahujúci zrelú sekv. č. 2. V konkrétnych formách polypeptid obsahuje aspoň dva rozličné neprekrývajúce sa segmenty najmenej šiestich po sebe idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2, kde: rozličné neprekrývajúce sa segmenty: zahŕňajú jeden segment s aspoň dvanástimi aminokyselinami; zahŕňajú jeden segment s aspoň siedmymi aminokyselinami a druhý segment s aspoň deviatimi aminokyselinami; zahŕňajú tretí segment s aspoň šiestimi aminokyselinami; alebo zahŕňajú jeden segment vybraný z R355-L373, P378-L405, V407-D426, K428-D439, P441-V452, I454-G460, I465-T587 alebo N592-606; alebo polypeptid ďalej obsahuje aspoň dva rozličné neprekrývajúce sa segmenty s aspoň šiestimi za sebou idúcimi aminokyselinami extracelulárnej časti sekv. č. 2. Alternatívne bude polypeptidom obsahujúcim aspoň dvanásť za sebou idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2 polypeptid, v ktorom: segment obsahujúci aspoň dvanásť za sebou idúcich aminokyselín zahŕňa jeden z R355L373, P378-L405, V407-D426, K428-D439, P441-V452, I454-G460, I465-T587 alebo N592-606; alebo polypeptid ďalej obsahuje aspoň dva rozličné neprekrývajúce sa segmenty s aspoň šiestimi za sebou idúcimi aminokyselinami extracelulárnej časti sekv. č. 2. Alebo, čistý polypeptid s prirodzenou sekvenciou obsahujúcou zrelú sekv. č. 2 môže ďalej zahŕňať purifikáciu alebo detekciu epitopu. Takéto polypeptidy môžu: pozostávať zo zrelej sekvencie podľa tabuľky 1; byť neglykozylovaným polypeptidom; byť z človeka; obsahovať aspoň 40 aminokyselín
-5zo sekv. č. 2; mať aspoň tri neprekrývajúce sa segmenty s aspoň pätnástimi po sebe idúcimi aminokyselinami sekv. č. 2; byť prirodzeným polymorfným variantom sekv. č. 2; mať dĺžku aspoň približne 30 aminokyselín; mať aspoň dva neprekrývajúce sa epitopy, ktoré sú špecifické pre primátovú DCRS5; mať molekulovú hmotnosť aspoň 30 kD s prirodzenou glykozyláciou; byť syntetickým polypeptidom; byť v sterilnej forme; byť vo vodnom alebo tlmivom roztoku; byť pripojené na tuhý substrát; byť konjugované s inou chemickou skupinou; alebo byť fyzikálne spojené s IL-12Ηβ1 polypeptidom.
Poskytnuté sú rôzne iné prostriedky, napr. prostriedky obsahujúce: v podstate čistý polypeptid kombinovaný s IL-12β 1 proteínom; alebo takýto polypeptid v nosiči, pričom nosičom je: vodná zlúčenina vrátane vody, fyziologický roztok a/alebo tlmivý roztok; a/alebo sú formulované na orálne, rektálne, nazálne, topické alebo parenterálne podanie.
Poskytnuté sú kity, ktoré obsahujú takýto polypeptid a: kompartment obsahujúci polypeptid; kompartment obsahujúci IL-12Ρβ1 polypeptid; kompartment obsahujúci p40, IL -B30 alebo p40/IL-B30 polypeptid; alebo inštrukcie na použitie alebo odpadovú nádobu pre reakčné činidlá v kite.
Poskytnuté sú protilátky a iné viažuce zlúčeniny, napr. zlúčeniny obsahujúce antigén viažuce miesto z protilátky, ktoré sa špecificky viaže na vnútrobunkovú časť DCRS5, pričom: viažuca zlúčenina je v nádobe; polypeptid je z človeka; väzobnou zlúčeninou je Fv, Fab alebo Fab2 fragment; viažuca zlúčenina je konjugovaná s inou chemickou skupinou; alebo protilátka: je vyvolaná proti peptidovej sekvencií zrelého polypeptidu podľa tabuľky 1; je vyvolaná proti zrelej DCRS5; je vyvolaná proti purifikovanej ľudskej DCRS5; je imunoselektívna; je polyklonálnou protilátkou; viaže sa na denaturovanú DCRS5; vykazuje Kd voči antigénu s veľkosťou aspoň 30 pm; je pripojená na tuhý substrát, vrátane guľôčky alebo plastickej membrány; je v sterilnom prostriedku; alebo je detegovateľne značená, zahŕňajúc rádioaktívnu alebo fluorescenčnú značku. Poskytnuté sú aj kity, ktoré obsahujú viažucu zlúčeninu a: kompartment obsahujúci viažucu zlúčeninu; kompartment obsahujúci: p40 polypeptid; IL-B30 polypeptid; DCRS5 polypeptid; a/alebo IL-12Ρβ1 polypeptid; kompartment obsahujúci protilátku, ktorá sa selektívne viaže na: p40 polypeptid; IL-6Β30 polypeptid; DCRS5 polypeptid; a/alebo IL-12Rpi polypeptid; alebo inštrukcie na použitie alebo odpadovú nádobu pre reakčné činidlá v kite.
Poskytnuté sú aj spôsoby, napr. spôsob na produkciu antigénu: protilátkový komplex, zahŕňa uvedenie primátového DCRS5 polypeptidu do kontaktu s protilátkou v príslušných podmienkach, čím sa umožní vytvorenie komplexu. Takýto spôsob sa môže použiť ak: komplex je purifikovaný od iných cytokínových receptorov; komplex je purifikovaný od inej protilátky; uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje so vzorkou obsahujúcou interferón; kontaktovanie umožňuje kvantitatívnu detekciu antigénu; kontaktovanie sa uskutočňuje so vzorkou obsahujúcou protilátku; alebo kontaktovanie umožňuje kvantitatívnu detekciu protilátky. Poskytnuté sú aj iné prostriedky, napr. prostriedky, ktoré obsahujú: sterilnú viažucu zlúčeninu alebo viažucu zlúčeninu a nosič, pričom nosičom je: vodná zlúčenina vrátane vody, fyziologický roztok a/alebo tlmivý roztok; a/alebo sú formulované na orálne, rektálne, nazálne, topické alebo parenterálne podanie.
Vynález poskytuje aj izolovanú alebo rekombinantnú nukleovú kyselinu, ktorá kóduje DCRS5 polypeptid, pričom: DCRS5 je z človeka; alebo nukleová kyselina: kóduje antigénovú peptidovú sekvenciu podľa tabuľky 1; kóduje viaceré antigénové peptidové sekvencie podľa tabuľky 1; je zhodná aspoň s trinástimi nukleotidmi prirodzenej cDNA kódujúcej segment; je expresným vektorom; ďalej obsahuje počiatok replikácie; je z prirodzeného zdroja; obsahuje detegovateľnú značku; obsahuje syntetickú oligonukleotidovú sekvenciu; je menšia ako 6 kb, výhodne menšia ako 3 kb; je z primáta; obsahuje prirodzenú celú kódujúcu sekvenciu; je hybridizačnou sondou pre gén kódujúci DCRS5; alebo je PCR primerom, PCR produktom alebo mutagenizačným primerom. Poskytnuté sú bunky obsahujúce rekombinantnú nukleovú kyselinu, vrátane bunky, ktorou je: prokaryotická bunka; eukaryotická bunka; bakteriálna bunka; kvasinková bunka; hmyzia bunka; cicavčia bunka; myšacia bunka; bunka primáta; alebo ľudská bunka.
Kitové uskutočnenia zahŕňajú kity, ktoré obsahujú nukleovú kyselinu a: kompartment obsahujúci nukleovú kyselinu; kompartment obsahujúci nukleovú kyselinu, ktorá kóduje: p40 polypeptid; IL-B30 polypeptid; DCRS5 polypeptid; a/alebo IL-12Rp1 polypeptid; kompartment, ktorý obsahuje: p40 polypeptid; IL-B30 polypeptid; CDRS5 polypeptid; a/alebo IL-12Rpi polypeptid; kompartment, ktorý
-7obsahuje protilátku, ktorá sa selektívne viaže na: p40 polypeptid; IL-B30 polypeptid;
DCRS5 polypeptid; a/alebo ΙΙ_12β1 polypeptid; alebo inštrukcie na použitie alebo odpadovú nádobu pre reakčné činidlá v kite.
Iné nukleokyselinové uskutočnenia zahŕňajú nukleové kyseliny, ktoré: hybridizujú s časťou sekv. č. 1, kódujúcou vnútrobunkovú časť, v premývacích podmienkach zahŕňajúcich 30 minút pri 30 °C a menej ako 2M soľ; alebo sú zhodné v sekvencii najmenej približne 30 nukleotidov s vnútrobunkovou časťou primátovej DCRS5. Výhodne bude takouto nukleovou kyselinou nukleová kyselina: pre ktorú sú premývacími podmienkami 45 °C a/alebo 500 mM soľ; alebo 55 °C a/alebo 150 mM soľ; alebo sekvencia s aspoň 55 alebo 75 nukleotidmi.
Terapeutické použitia zahŕňajú spôsoby modulácie fyziológie alebo vývoja bunky vrátane kontaktovania bunky s: antagonistom p40/IL-B30, ktorý je komplexom obsahujúcim: extracelulárnu časť primátovej DCRS5 a/alebo extracelulárnu časť primátového IL-12Rpi; antagonistom p40/IL-B30, ktorým je protilátka viažuca sa na komplex obsahujúci: primátovú DCRS5 a/alebo primátový IL-12Rpi; antagonistom p40/IL-B30, ktorým je protilátka viažuca sa na DCRS5; antagonistom p40/IL-B30, ktorým je protilátka viažuca sa na IL12-RP1; antagonistom p40/IL-B30, ktorým je antisense nukleová kyselina proti DCRS5 alebo IL-12RP1; alebo antagonistom p40/IL-B30, ktorým je protilátka viažuca sa na komplex, ktorý obsahuje primátovú DCRS5 a/alebo primátový IL-12Rp1. V jednom type spôsobu sa kontaktovanie uskutočňuje s antagonistom a v kombinácii s antagonistom voči IL12, IL-18, TNF a/alebo lFNy; alebo je bunka z hostiteľa, ktorý: vykazuje známky alebo symptómy chronickej, TH1 sprostredkovanej choroby; vykazuje symptómy alebo známky sklerózy multiplex, reumatoidnej artritídy, osteoartritídy, zápalového črevného ochorenia, cukrovky, psoriázy alebo sepsy; alebo dostal alogénny transplantát. Naopak, spôsobom môže byť kontaktovanie s agonistom a: kontaktovanie v kombinácii s IL-12, IL-18, TNF alebo IFNy; alebo je bunka z hostiteľa, ktorý: vykazuje známky alebo symptómy chronickej Th2 reakcie; trpí nádorom, vírusovou alebo plesňovou infekciou; dostal vakcínu; alebo trpí alergickou reakciou.
-8Prehľad
I. Všeobecná časť
II. Aktivity
III. Nukleové kyseliny
A. - kódujúce fragmenty, sekvenciu, sondy
B. - mutácie, chiméry, fúzie
C. - výroba nukleových kyselín
D. - vektory, bunky, ktoré ich obsahujú
IV. Proteíny, peptidy
A. - fragmenty, sekvencia, imunogény, antigény
B. - muteíny
C. - agonisty/antagonisty, funkčné ekvivalenty
D. - výroba proteínov
V. Výroba nukleových kyselín, proteínov
A. - syntetických
B. - rekombinantných
C. - prirodzené zdroje
VI. Protilátky
A. - polyklonálne
B. - monoklonálne
C. - fragmenty; Kd
D. - anti-idiotypové protilátky
E. - hybridómové bunkové línie
VII. Kity, diagnostika a kvantifikácia
A. -ELISA
B. - testovanie kódujúcej mRNA
C. - kvalitatívna/kvantitatívna analýza
D. - kity
VIII. Terapeutické prostriedky, spôsoby
A. - kombinačné prostriedky
B. - jednotková dávka
-9C. - podávanie
IX. Skríning
I. Všeobecná časť
Predložený vynález poskytuje aminokyselinovú sekvenciu a DNA sekvenciu cicavčích, tu primátových, molekúl podobných cytokínovej receptorovej podjednotke, ktoré sú tu označené ako DNAX cytokínová receptorová podjednotka 5 (CDRS5), ktorá má dobre definované vlastnosti, tak štrukturálne, ako aj biologické. Rôzne cDNAs kódujúce tieto molekuly sa získali z primátových, napr. ľudských, cDNA sekvenčných knižníc. Želateľné by boli aj iné primátové alebo iné cicavčie náprotivky.
Okrem toho vynález poskytuje zosúladenie p40/IL-B30 ligandu s receptorovými pojednotkami DCRS5 a IL-12Rp1, ktorých párovanie poskytuje pochopenie indikácií na použitie agonistov a antagonistov založené na reakčných činidlách nasmerovaných proti nim.
Niektoré štandardné aplikovateľné spôsoby sú opísané, alebo sa na nich odvoláva napr. v Maniatis, a ďalší (1982) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Press; Sambrook, a ďalší (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (2. vyd.), zv. 13, CSH Press, NY; Ausubel, a ďalší, Biology, Greene Publishing Associates, Brooklyn, NY; alebo Ausubel, a ďalší (1987 a periodické dodatky) Current Protocols in Molecular Biology, Greene/Wiley, New York; pričom každá z uvedených publikácií je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie.
Nukleotidová (sekv. č. 1) a zodpovedajúca aminokyselinová sekvencia (sekv. č. 2) primátového, napr. ľudského, DCRS5 kódujúceho segmentu je uvedená v tabuľke 1. Označená je predpokladaná signálna sekvencia, ale môže byť závislá na type bunky, alebo môže obsahovať niekoľko zvyškov v oboch smeroch. Potenciálnymi N-glykozylačnými miestami sú asparagínové zvyšky v polohách 6, 24, 58, 118, 157, 209 a 250. Disulfidové väzby sa pravdepodobne nachádzajú medzi cysteínovými zvyškami v polohách 29 a 78; a konzervatívny CCXW motív sa nachádza v polohách 110/121/123. Dôležitý je tryptofán v polohe 219; a WxxWS motív v polohe 281-285. Segment od približne 1-101 je Ig doména; od približne 102- ΙΟΙ 95 je cytokín viažuca doména 1; od približne 196-297 je cytokín viažuca doména 2; od približne 298-330 je spojovník; od približne 329-354 je transmembránový segment; a od približne 356-606 je vnútrobunková doména. Vnútrobunkové znaky zhŕňajú pravdepodobné SH2 viažuce miesta v Y374-I377, Y461-Q464 a Y588Q591; a potencionálne dôležité tyrozínové zvyšky v polohách 406, 427,440 a 453. Tieto miesta a ohraničenia sú dôležité.
ORF obsahuje pravdepodobnú signálnu sekvenciu, o ktorej sa predpokladá, že je štiepené v ...CHG/GIT..., ako bolo ukázané vyššie. Predpokladaná extracelulárna doména s 328 aminokyselinami je nasledovaná pravdepodobným transmembránovým segmentom a nakoniec cytoplazmatickou doménou obsahujúcou približne 252 aminokyselín. Predpokladá sa, že za ligand viažuce funkcie je zodpovedná extracelulárna doména.
Reverzná translácia nukleokyselinovej sekvencie je uvedená v tabuľke 2.
Tabuľka 1
Nukleotidová a polypeptidové sekvencia uskutočnení podobných DNAX cytokínovej receptorovej podjednotke (DCRS5). Primátové, napr. ľudské uskutočnenie (pozri sekv. č. 1 a sekv. č. 2). Označená je predpokladaná signálna sekvencia, ale môže sa meniť o niekoľko polôh a závisí na bunkovom type.
gtggtacggg aattccattg tgttgggcag ccaacaaggg tggcagcctg gctctgaagt 60 ggaattatgt gcttcaaaca ggttgaaaga gggaaacagt cttttcctgc ttccagac 118
| atg | aat | c ak | gtc | act | att | caa | tgg | gat | gca | gta | ata | gcc | ctt | tac | ata | 166 |
| Met | Asn | Xaa | Val | Thr | íle | Gin | Trp | Asp | Ala | Val | íle | Ala | Leu | Tyr | íle | |
| -20 | -15 | -10 | ||||||||||||||
| ctc | ttc | age | tgg | tgt | cat | gga | gga | att | aca | aat | ata | aac | tgc | tct | ggc | 214 |
| Leu | Phe | Ser | Trp | Cys | His | Gly | Gly | íle | Thr | Asn | íle | Asn | Cys | Ser | Gly | |
| -5 | -1 | 1 | 5 | |||||||||||||
| cac | atc | tgg | gta | gaa | cca | gcc | aca | att | ttt | aag | atg | ggt | atg | aat | atc | 262 |
| His | íle | Trp | Val | Glu | Pro | Ala | Thr | íle | Phe | Lys | Met | Gly | Met | Asn | íle | |
| 10 | 15 | 20 | 25 | |||||||||||||
| tct | ata | tat | tgc | caa | gca | gca | att | aag | aac | tgc | caa | cca | agg | aaa | ctt | 310 |
| Ser | íle | Tyr | Cys | Gin | Ala | Ala | Íle | Lys | Asn | Cys | Gin | Pro | Arg | Lys | Leu | |
| 30 | 35 | 40 |
| cat | ttt | tat | aaa | aat | ggc | atc | aaa | gaa | aga | ttt | caa | atc | aca | agg | att | 358 |
| His | Phe | Tyr | Lys | Asn | Gly | Ile | Lys | Glu | Arg | Phe | Gin | Ile | Thr | Arg | Ile | |
| 45 | 50 | 55 | ||||||||||||||
| aat | aaa | aca | aca | get | cgg | ctt | tgg | tat | aaa | aac | ttt | ctg | gaa | cca | cat | 406 |
| Asn | Lys | Thr | Thr | Ala | Arg | Leu | Trp | Tyr | Lys | Asn | Phe | Leu | Glu | Pro | His | |
| 60 | 65 | 70 | ||||||||||||||
| get | tet | atg | tac | tgc | act | get | gaa | tgt | CCC | aaa | cat | ttt | caa | gag | aca | 454 |
| Ala | Ser | Met | Tyr | Cys | Thr | Ala | Glu | Cys | Pro | Lys | His | Phe | Gin | Glu | Thr | |
| 75 | 80 | 85 | ||||||||||||||
| ctg | ata | tgt | gga | aaa | gac | att | tet | tet | gga | tat | ccg | cca | gat | att | cct | 502 |
| Leu | Ile | Cys | Gly | Lys | Asp | Ile | Ser | Ser | Gly | Tyr | Pro | Pro | Asp | Ile | Pro | |
| 90 | 95 | 100 | 105 | |||||||||||||
| gat | gaa | gta | acc | tgt | gtc | att | tat | gaa | tat | tca | ggc | aac | atg | act | tgc | 550 |
| Asp | Glu | Val | Thr | Cys | Val | Ile | Tyr | Glu | Tyr | Ser | Gly | Asn | Met | Thr | Cys | |
| 110 | 115 | 120 | ||||||||||||||
| acc | tgg | aat | get | rgg | aag | ctc | acc | tac | ata | gac | aca | aaa | tac | gtg | gta | 598 |
| Thr | Trp | Asn | Ala | Xaa | Lys | Leu | Thr | Tyr | Ile | Asp | Thr | Lys | Tyr | Val | Val | |
| 125 | 130 | 135 | ||||||||||||||
| cat | gtg | aag | agt | tta | gag | aca | gaa | gaa | gag | caa | cag | tat | ctc | acc | tca | 646 |
| His | Val | Lys | Ser | Leu | Glu | Thr | Glu | Glu | Glu | Gin | Gin | Tyr | Leu | Thr | Ser | |
| 140 | 145 | 150 | ||||||||||||||
| age | tat | att | aac | atc | tcc | act | gat | tca | tta | caa | ggt | ggc | aag | aag | tac | 694 |
| Ser | Tyr | Ile | Asn | Ile | Ser | Thr | Asp | Ser | Leu | Gin | Gly | Gly | Lys | Lys | Tyr | |
| 155 | 160 | 165 | ||||||||||||||
| ttg | gtt | tgg | gtc | caa | gca | gca | aac | gca | cta | ggc | atg | gaa | gag | tca | aaa | 742 |
| Leu | Val | Trp | Val | Gin | Ala | Ala | Asn | Ala | Leu | Gly | Met | Glu | Glu | Ser | Lys | |
| 170 | 175 | 180 | 185 | |||||||||||||
| caa | ctg | caa | att | cac | ctg | gat | gat | ata | gtg | ata | cct | tet | gca | gcc | gtc | 790 |
| Gin | Leu | Gin | Ile | His | Leu | Asp | Asp | Ile | Val | Ile | Pro | Ser | Ala | Ala | Val | |
| 190 | 195 | 200 | ||||||||||||||
| att | tcc | agg | get | gag | act | ata | aat | get | aca | gtg | CCC | aag | acc | ata | att | 838 |
| Ile | Ser | Arg | Ala | Glu | Thr | Ile | Asn | Ala | Thr | Val | Pro | Lys | Thr | Ile | Ile | |
| 205 | 210 | 215 | ||||||||||||||
| tat | tgg | gat | agt | caa | aca | aca | att | gaa | aag | gtt | tcc | tgt | gaa | atg | aga | 886 |
| Tyr | Trp | Asp | Ser | Gin | Thr | Thr | Ile | Glu | Lys | Val | Ser | Cys | Glu | Met | Arg | |
| 220 | 225 | 230 | ||||||||||||||
| tac | aag | get | aca | aca | aac | caa | act | tgg | aat | gtt | aaa | gaa | ttt | gac | acc | 934 |
| Tyr | Lys | Ala | Thr | Thr | Asn | Gin | Thr | Trp | Asn | Val | Lys | Glu | Phe | Asp | Thr |
235 240 245
| aat | ttt | aca | tat | gtg | caa | cag | tca | gaa | ttc | tac | ttg | gag | cca | aac | att | 982 |
| Asn | Phe | Thr | Tyr | Val | Gin | Gin | Ser | Glu | Phe | Tyr | Leu | Glu | Pro | Asn | íle | |
| 250 | 255 | 260 | 265 | |||||||||||||
| aag | tac | gta | ttt | caa | gtg | aga | tgt | caa | gaa | aca | ggc | aaa | agg | tac | tgg | 1030 |
| Lys | Tyr | Val | Phe | Gin | Val | Arg | Cys | Gin | Glu | Thr | Gly | Lys | Arg | Tyr | !TrP | |
| 270 | 275 | 280 | ||||||||||||||
| cag | cct | tgg | agt | tca | ccg | ttt | ttt | cat | aaa | aca | cct | gaa | aca | gtt | CCC | 1078 |
| Gin | Pro | Trp | Ser | Ser | Pro | Phe | Phe | His | Lys | Thr | Pro | Glu | Thr | Val | Pro | |
| 285 | 290 | 295 | ||||||||||||||
| cag | gtc | aca | tca | aaa | gca | ttc | caa | cat | gac | aca | tgg | aat | tet | ggg | cta | 1126 |
| Gin | Val | Thr | Ser | Lys | Ala | Phe | Gin | His | Asp | Thr | Trp | Asn | Ser | Gly | Leu | |
| 300 | 305 | 310 | ||||||||||||||
| aca | gtt | get | tcc | atc | tet | aca | ggg | cac | ctt | act | tet | gac | aac | aga | gga | 1174 |
| Thr | Val | Ala | Ser | íle | Ser | Thr | Gly | His | Leu | Thr | Ser | Asp | Asn | Arg | Gly | |
| 315 | 320 | 325 | ||||||||||||||
| gac | att | gga | ctt | tta | ttg | gga | atg | atc | gtc | ttt | get | gtt | atg | ttg | tca | 1222 |
| Asp | íle | Gly | Leu | Leu | Leu | Gly | Met | íle | Val | Phe | Ala | Val | Met | Leu | Ser | |
| 330 | 335 | 340 | 345 | |||||||||||||
| att | ctt | tet | ttg | att | ggg | ata | ttt | aac | aga | tca | ttc | ega | act | ggg | att | 1270 |
He Leu Ser Leu íle Gly íle Phe Asn Arg Ser Phe Arg Thr Gly íle
| 350 | 355 | 360 | ||||||||||||||
| aaa | aga | agg | atc | tta | ttg | tta | ata | cca | aag | tgg | ctt | tat | gaa | gat | att | 1318 |
| Lys | Arg | Arg | íle | Leu | Leu | Leu | íle | Pro | Lys | Trp | Leu | Tyr | Glu | Asp | íle | |
| 365 | 370 | 375 | ||||||||||||||
| cct | aat | atg | aaa | aac | age | aat | gtt | gtg | aaa | atg | cta | cag | gaa | aat | agt | 1366 |
| Pro | Asn | Met | Lys | Asn | Ser | Asn | Val | Val | Lys | Met | Leu | Gin | Glu | Asn | Ser | |
| 380 | 385 | 390 | ||||||||||||||
| gaa | ctt | atg | aat | aat | aat | tcc | agt | gag | cag | gtc | cta | tat | gtt | gat | ccc | 1414 |
| Glu | Leu | Met | Asn | Asn | Asn | Ser | Ser | Glu | Gin | Val | Leu | Tyr | Val | Asp | Pro | |
| 395 | 400 | 405 | ||||||||||||||
| atg | att | aca | gag | ata | aaa | gaa | atc | ttc | atc | cca | gaa | cac | aag | cct | aca | 1462 |
| Met | íle | Thr | Glu | íle | Lys | Glu | íle | Phe | íle | Pro | Glu | His | Lys | Pro | Thr | |
| 410 | 415 | 420 | 425 | |||||||||||||
| gac | tac | aag | aag | gag | aat | aca | gga | ccc | ctg | gag | aca | aga | gac | tac | ccg | 1510 |
| Asp | Tyr | Lys | Lys | Glu | Asn | Thr | Gly | Pro | Leu | Glu | Thr | Arg | Asp | Tyr | Pro | |
| 430 | 435 | 440 | ||||||||||||||
| caa | aac | tcg | cta | ttc | gac | aat | act | aca | gtt | gta | tat | att | cct | gat | ctc | 1558 |
| Gin | Asn | Ser | Leu | Phe | Asp | Asn | Thr | Thr | Val | Val | Tyr | íle | Pro | Asp | Leu |
445
450
455
| aac | act | gga | tat | aaa | CCC | caa | att | tca | aat | ttt | ctg | cct | gag | gga | agc | 1606 |
| Asn | Thr | Gly | Tyr | Lys | Pro | Gin | íle | Ser | Asn | Phe | Leu | Pro | Glu | Gly | Ser | |
| 460 | 465 | 470 | ||||||||||||||
| cat | ctc | agc | aat | aat | aat | gaa | att | act | tcc | tta | aca | ctt | aaa | cca | cca | 1654 |
| His | Leu | Ser | Asn | Asn | Asn | Glu | íle | Thr | Ser | Leu | Thr | Leu | Lys | Pro | Pro | |
| 475 | 480 | 485 | ||||||||||||||
| gtt | gat | tcc | tta | gac | tca | gga | aat | aat | CCC | agg | tta | caa | aag | cat | cct | 1702 |
| Val | Asp | Ser | Leu | Asp | Ser | Gly | Asn | Asn | Pro | Arg | Leu | Gin | Lys | His | Pro | |
| 490 | 495 | 500 | 505 | |||||||||||||
| aat | ttt | get | ttt | tet | gtt | tca | agt | gtg | aat | tca | cta | agc | aac | aca | ata | 1750 |
| Asn | Phe | Ala | Phe | Ser | Val | Ser | Ser | Val | Asn | Ser | Leu | Ser | Asn | Thr | íle | |
| 510 | 515 | 520 | ||||||||||||||
| ttt | ctt | gga | gaa | tta | agc | ctc | ata | tta | aat | caa | gga | gaa | tgc | agt | tet | 1798 |
| Phe | Leu | Gly | Glu | Leu | Ser | Leu | íle | Leu | Asn | Gin | Gly | Glu | Cys | Ser | Ser | |
| 525 | 530 | 535 | ||||||||||||||
| cct | gac | ata | caa | aac | tca | gta | gag | gag | gaa | acc | acc | atg | ctt | ttg | gaa | 1846 |
| Pro | Asp | íle | Gin | Asn | Ser | Val | Glu | Glu | Glu | Thr | Thr | Met | Leu | Leu | Glu | |
| 540 | 545 | 550 | ||||||||||||||
| aat | gat | tca | CCC | agt | gaa | act | att | cca | gaa | cag | acc | ctg | ctt | cct | gat | 1894 |
| Asn | Asp | Ser | Pro | Ser | Glu | Thr | íle | Pro | Glu | Gin | Thr | Leu | Leu | Pro | Asp | |
| 555 | 560 | 565 | ||||||||||||||
| gaa | ttt | gtc | tcc | tgt | ttg | ggg | atc | gtg | aat | gag | gag | ttg | cca | tet | att | 1942 |
| Glu | Phe | Val | Ser | Cys | Leu | Gly | íle | Val | Asn | Glu | Glu | Leu | Pro | Ser | íle | |
| 570 | 575 | 580 | 585 | |||||||||||||
| aat | act | tat | ttt | cca | caa | aat | att | ttg | gaa | agc | cac | ttc | aat | agg | att | 1990 |
| Asn | Thr | Tyr | Phe | Pro | Gin | Asn | íle | Leu | Glu | Ser | His | Phe | Asn | Arg | íle |
590 595 600 tca ctc ttg gaa aag tagagctgtg tggtcaaaat caatatgaga aagctgcctt 2045
Ser Leu Leu Glu Lys
605 gcaatctgaa cttgggtttt ccctgcaata gaaattgaat tctgcctctt tttgaaaaaa 2105 atgtattcac atacaaatct tcacatggac acatgttttc atttcccttg gataaatacc 2165 taggtagggg attgctgggc catatgataa gcatatgttt cagttctacc aatcttgttt 2225 ccagagtagt gacatttctg tgctcctacc atcaccatgt aagaattccc gggagctcca 2285 tgccttttta attttagcca ttcttctgcc tmatttctta aaattagaga attaaggtcc 2345 cgaaggtgga acatgcttca tggtcacaca tacaggcaca aaaacagcat tatgtggacg 2405 cctcatgtat tttttataga gtcaactatt tcctctttat tttccctcat tgaaagatgc 2465 aaaacagctc tctattgtgt acagaaaggg taaataatgc aaaatacctg gtagtaaaat 2525 aaatgctgaa aattttcctt taaaatagaa tcattaggcc aggcgtggtg gctcatgctt 2585
-14gtaatcccag cactttggta ggctgaggtr ggtggatcac ctgaggtcag gagttcgagt 2645 ccagcctggc caatatgctg aaaccctgtc tctactaaaa ttacaaaaat tagccggcca 2705 tggtggcagg tgcttgtaat cccagctact tgggaggctg aggcaggaga atcacttgaa 2765 ccaggaaggc agaggttgca ctgagctgag attgtgccac tgcactccag cctgggcaac 2825 aagagcaaaa ctctgtctgg aaaaaaaaaa aaaa 2859
MN(O/H)VTIOWDAVIALYILFSWCHGGITNINCSGHIWVEPATIFKMGMNISIYCQAAIKNCQPRKLHF YKNGIKERFQITRINKTTARLWYKNFLEPHASMYCTAECPKHFQETLICGKDISSGYPPDIPDEVTCVIY EYSGNMTCTWNA(G/R)KLTYIDTKYWHVKSLETEEEQQYLTSSYINISTDSLQGGKKYLVWVQAANAL GMEESKQLQIHLDDIVIPSAAVISRAETINATVPKTIIYWDSQTTIEKVSCEMRYKATTNQTWNVKEFDT NFTYVQQSEFYLEPNIKYVFQVRCQETGKRYWQPWSSPFFHKTPETVPQVTSKAFQHDTWNSGLTVASIS TGHLTSDNRGDIGLLLGMIVFAVMLSILSr.IGIFNRSFRTGIKRRILLLIPKWLYEDIPNMKNSNWKML QENSELMNNNSSEQVLYVDPMITEIKEIFIPEHKPTDYKKENTGPLETRDYPQNSLFDNTTWYIPDLNT GYKPQISNFLPEGSHLSNNNEITSLTLKPPVDSLDSGNNPRLQKHPNFAFSVSSVNSLSNTIFLGELSLI lnqgecsspdiqnsveeettmllendspsetipeqtllpdefvsclgivneelpsintyfpqnileshfn
RISLLEK
Tabuľka 2
Reverzná translácia primátovej, napr. ľudskej, DCRS5 (sekv. č. 3):
ATGAAYCAYGTNACNATHCARTGGGAYGCNGTNATHGCNYTNTAYATHYTNTTYWSNTGGTGYCAYGGNGGNAT
HACNAAYATHAAYTGYWSNGGNCAYATHTGGGTNGARCCNGCNACNATHTTYAARATGGGNATGAAYATHWSNA
THTAYTGYCARGCNGCNATHAARAAYTGYCARCCNMGNAARYTNCAYTTYTAYAARAAYGGNATHAARGARMGN
TTYCARATHACNMGNATHAAYAARACNACNGCNMGNYTNTGGTAYAARAAYTTYYTNGARCCNCAYGCNWSNAT
GTAYTGYACNGCNGARTGYCCNAARCAYTTYCARGARACNYTNATHTGYGGNAARGAYATHWSNWSNGGNTAYC
CNCCNGAYATHCCNGAYGARGTNACNTGYGTNATHTAYGARTAYWSNGGNAAYATGACNTGYACNTGGAAYGCN
MGNAARYTNACNTAYATHGAYACNAARTAYGTNGTNCAYGTNAARWSNYTNGARACNGARGARGARCARCARTA
YYTNACNWSNWSNTAYATHAAYATHWSNACNGAYWSNYTNCARGGNGGNAARAARTAYYTNGTNTGGGTNCARG
CNGCNAAYGCNYTNGGNATGGARGARWSNAARCARYTNCARATHCAYYTNGAYGAYATHGTNATHCCNWSNGCN
GCNGTNATHWSNMGNGCNGARACNATHAAYGCNACNGTNCCNAARACNATHATHTAYTGGGAYWSNCARACNAC
NATHGARAARGTNWSNTGYGARATGMGNTAYAARGCNACNACNAAYCARACNTGGAAYGTNAARGARTTYGAYA
CNAAYTTYACNTAYGTNCARCARWSNGARTTYTAYYTNGARCCNAAYATHAARTAYGTNTTYCARGTNMGNTGY
CARGARACNGGNAARMGNTAYTGGCARCCNTGGWSNWSNCCNTTYTTYCAYAARACNCCNGARACNGTNCCNCA
RGTNACNWSNAARGCNTTYCARCAYGAYACNTGGAAYWSNGGNYTNACNGTNGCNWSNATHWSNACNGGNCAYY
TNACNWSNGAYAAYMGNGGNGAYATHGGNYTNYTNYTNGGNATGATHGTNTTYGCNGTNATGYTNWSNATHYTN
WSNYTNATHGGNATHTTYAAYMGNWSNTTYMGNACNGGNATHAARMGNMGNATHYTNYTNYTNATHCCNAARTG
GYTNTAYGARGAYATHCCNAAYATGAARAAYWSNAAYGTNGTNAARATGYTNCARGARAAYWSNGARYTNATGA
AYAAYAAYWSNWSNGARCARGTNYTNTAYGTNGAYCCNATGATHACNGARATHAARGARATHTTYATHCCNGAR
-15CAYAARCCNACNGAYTAYAARAARGARAAYACNGGNCCNYTNGARACNMGNGAYTAYCCNCARAAYWSNYTNTT ygayaayacnacngtngtntayathccngayytnaayacnggntayaarccncarathwsnaayttyytnccnG
ARGGNWSNCAYYTNWSNAAYAAYAAYGARATHACNWSNYTNACNYTNAARCCNCCNGTNGAYWSNYTNGAYWSN
GGNAAYAAYCCNMGNYTNCARAARCAYCCNAAYTTYGCNTTYWSNGTNWSNWSNGTNAAYWSNYTNWSNAAYAC
NATHTTYYTNGGNGARYTNWSNYTNATHYTNAAYCARGGNGARTGYWSNWSNCCNGAYATHCARAAYWSNGTNG
ARGARGARACNACNATGYTNYTNGARAAYGAYWSNCCNWSNGARACNATHCCNGARCARACNYTNYTNCCNGAY
GARTTYGTNWSNTGYYTNGGNATHGTNAAYGARGARYTNCCNWSNATHAAYACNTAYTTYCCNCARAAYATHYT
NGARWSNCAYTTYAAYMGNATHWSNYTNYTNGARAAR
Tabuľka 3
Porovnanie rôznych cytokínových receptorových podjednotiek. Ľudský IL-6 receptorový proteín gp130 je sekv. č. 4 (GenBank M57230); ľudská IL-12 receptorová beta2 podjednotka je sekv. č. 5 (GenBank U64198).
| huIL-12R | 2 | 1 | MAHTFRGCSLAFMFIITWLLIKAKIDACKRGDVTVKPSHVILLGSTVN | 48 |
| hugpl30 | 1 | MLTLQTWWQALFIFLTTESTGELLDPCG---YISPESPWQLHSNFT | 45 | |
| huDCRS5 | 1MNHVTIQWDAVIALYILFSWCHGGITNINCS-GHIWVEPATIFKMGMNIS * . * «... | 49 | ||
| huIL-12R | 2 | 49 | ITCSLKPRQGCFHYSRRNKLILYKFDRRINFHHGHSLNSQVTGLPLG--- | 95 |
| hugpl30 | 46 | AVCVLKEKCMDYFHVNANYIVWKTNHFTIPKEQYTIINRTASSVTFTDIA | 95 | |
| huDCRS5 | 50 | IYCQAAIKN- - CQP---RKLHFYKNGIKER - FQITRINKTTARLWYKNFL | 93 | |
| huIL-12R | 2 | 96 | --TTLFVCKLACINSD-EIQICGAEIFVGVAPEQPQNLSCIQKGEQGTVA | 142 |
| hugpl30 | 96 | SLNIQLTCNILTFGQL-EQNVYGITIISGLPPEKPKNLSCIVN-EGKKMR | 143 | |
| huDCRS5 | 94 | EPHASMYCTAECPKHFQETLICGKDISSGYPPDIPDEVTCVIYEYSGNMT * · *.****.*..*. | 143 | |
| huIL-12R | 2 | 143 | CTWERGRDTHLYTEYTLQLSGPKNLTWQKQCKDIYCDYLDFGINLTPESP | 192 |
| hugpl30 | 144 | CEWDGGRETHLETNFTLKS- -EWATHKFADCKAKRDTPTSCTVDYS-TVY | 190 | |
| huDCRS5 | 144 | CTWNARKLTYIDTKYWHVKSIiETEEEQQYLTSSYINISTDSLQGG---- **.*.*... | 189 | |
| huIL-12R | 2 | 193 | ESNFTAKVTAVNSLGSSSSLPSTFTFLDIVRPLPPWDIRIKFQKASVSRC | 242 |
| hugpl30 | 191 | FVNIEVWVEAENALGKVTSDHINFDPVYKVKPNPPHNLSVINSEELSSIL | 240 | |
| huDCRS5 | 190 | -KKYLVWVQAANALGMEESKQLQIHLDDIVIPSAAVISRAETINATVPKT * * * | 238 | |
| huIL-12R | 2 | 243 | TLYWRD EGLVLLNRLRYRP SNSRLWNMVN VTKAKGRHDLLDLK | 285 |
| hugpl30 | 241 | KLTWTNPSIKSVIILKYNIQYRTKDASTWSQIPPEDTASTRSSFTVQDLK | 290 | |
| huDCRS5 | 239 | IIYWDS--QTTIEKVSCEMRYKATTNQTWNVKEFD-TNFTYVQQSEFYLE . * . . . *. * . * | 285 | |
| huIL-12R | 2 | 286 | PFTEYEFQISSKLHLYKGSWSDWSESLRAQTPEEEPTGMLDVWYMKRHID | 335 |
| hugpl30 | 291 | PFTEYVFRIRCMKEDGKGYWSDWSEEASGITYEDRPSKAPSFWYKIDPSH | 340 | |
| huDCRS5 | 286 | PNIKYVFQVRCQ-ETGKRYWQPWS SPFFHKTPETVP.............. | 320 |
**
| huIL-12R | 2 | 336 | YS-RQQISLFWKNLSVSEARGKILHYQVTLQELTGGKAMTQNITGHTS WT | 384 |
| hugpl30 | 341 | TQGYRTVQLVWKTLPPFEANGKILDYEVT---LTRWKSHLQNYTVNATKL | 387 | |
| huDCRS5 | 321 | .....QVTSKAFQHDTWNSGLTVASISTG......HLTSDN--RGDIGLL | 357 | |
| huIL-12R | 2 | 385 | TVIPRTGNWAVAVSAANSKGSSLPTRINIMNLCEAGLLAPRQVSANSEGM | 434 |
| hugpl30 | 388 | TVNLTNDRYLATLTVRNLVGKSDAAVLTIP-ACDFQATHPVMDLKAFPKD | 436 | |
| huDCRS5 | 358 | LGMIVFAVMLSILSLIGIFNRSFRTGIKRR.................... . . . . * · . | 387 | |
| huIL-12R | 2 | 435 | DNILVTWQPPRKDPSAVQEYWEWRELHPG-GDTQVPLNWLRSRPYNVSA | 483 |
| hugpl30 | 437 | NMLWVEWTTPRE---SVKKYILEWCVLS---DKAPCITDWQQEDGTVHRT | 480 | |
| huDCRS5 | 388 | ................ILLLIPKWLYEDIPNMKNSNWKMLQEN----SE • · * | 417 | |
| huIL-12R | 2 | 484 | LISENIKSYICYEIRVYALSGDQ-GGCSSILGNSKHKAPLSGPHINAITE | 532 |
| hugpl30 | 481 | YLRGNLAESKCYLITVTPVYADGPGSPESIKAYLKQAPPSKGPTVRTKKV | 530 | |
| huDCRS5 | 418 | LMNNNSSE........QVLYVDP.....MITEIKEIFIPEHKPTDYKKE- * . * * * * | 453 | |
| huIL-12R | 2 | 533 | EKGSILISWNSIPVQEQMGCLLHYRIYWKERDSNSQPQLCEIPYRVSQNS | 582 |
| hugpl30 | 531 | GKNEAVLEWDQLPVDVQNGFIRNYTIFYRT11 GN----ETAVNVDSSHTE | 576 | |
| huDCRS5 | 454 | - -NTGPLETRDYP---QNSLFDNTTWYIPDLNTG......YKPQISN- - . . * * - . . . * | 490 | |
| huIL-12R | 2 | 583 | HPINSLQPRVTYVLWMTALTAAGES SHGNEREFCLQGKAN-WMAFVAPSI | 631 |
| hugpl30 | 577 | YTLSSLTSDTLYMVRMAAYTDEG-GKDGPEFTFTTPKFAQGEIEAIWPV | 625 | |
| huDCRS5 | 491 | ..................FLPEG........................... * | 495 | |
| huIL-12R | 2 | 632 | CIAIIMVGIFSTHYFQQKVFVLLAALRP...........QWCSREIPDPA | 670 |
| hugpl30 | 626 | CLAFLLTTLLGVLFCFNKRDLIKKHIWPNVPDPSKSHIAQWSPHTPPRHN | 675 | |
| huDCRS5 | 496 | ...........SHLSNNN-EITSLTLKP..............PVDSLDSG . · . * | 519 | |
| huIL-12R | 2 | 671 | NSTCAKKYPIAEEKTQLPLDRLLID-WPTPEDPEPLVIS--EVLHQVTPV | 717 |
| hugpl30 | 676 | FNSKDQMYSDGNFTDVSWEIEANDKKPFPEDLKSLDLFKKEKINTEGHS | 725 | |
| huDCRS5 | 520 | NNPRLQKHPN-FAFSVSSVNSLSNT.............I---FLGELSLI | 552 | |
| huIL-12R | 2 | 718 | FRHPPCSNWPQREKGIQGHQASEKDMMHSASSPPPPRALQAESRQLVDLY | 767 |
| hugpl30 | 726 | SGIGGSSCMSSSRPSISSSDENESSQNTSSTVQYSTWHSGYRHQVPSVQ | 775 | |
| huDCRS5 | 553 | LNQGECS---S--PDIQNSVEEETTMLLENDSP................. . * * * | 580 | |
| huIL-12R | 2 | 768 | KVLESRGSDPKPENPACPWTVLPAGDLPTHDGYLPSN---IDDLPSHEAP | 814 |
| hugpl30 | 776 | VFSRSESTQPLLDSEERPEDLQLVDHVDGGDGILPRQQYFKQNCSQHESS | 825 | |
| huDCRS5 | 581 | --SETIPEQTLLPDEFVSCLGIVNEELPSINTYFPQN---ILESHFNR-- • . * · · | 623 | |
| huIL-12R | 2 | 815 | LADSLEELEPQHISLS.....VFPSSSLHPLTFSCG.............. | 845 |
| hugpl30 | 826 | PDISHFERSKQVSSVNEEDFVRLKQQISDHISQSCGSGQMKMFQEVSAAD | 875 | |
| huDCRS5 | 624 | --ISLLEK * * | 629 | |
| huIL-12R | 2 | 846 | ----------DKLTLDQLKMRCDSLML | 862 |
| hugpl30 huDCRS5 | 876 630 | AFGPGTEGQVERFETVGMEAATDEGMPKSYLPQTVRQGGYMPQ | 918 629 |
- 17Najbližšími príbuznými extracelulárnej domény IL-30R sú IL-6 signálny prenášač gp130 a IL-12Rp2. O niečo menej blízkymi príbuznými sú GCSF receptor, leptínový receptor, receptor leukemického inhibičného faktora a CNTF receptor. IL-30R je členom triedy I cytokínovej receptorovej superrodiny a je blízko príbuzný IL-6R/IL-12R rodiny.
Tabuľka 3 znázorňuje porovnanie dostupných sekvencií primátových receptorových podjednotiek s primátovou, napr. ľudskou DCRS5 (IL-30R). DCRS5 je podobná s IL-6 receptorovou podjednotkou gp130 (napr. IL-6R podjednotkou) a IL-12RP2 podjednotkou. DCRS5 vykazuje štrukturálne znaky beta podjednotky, ale skutočné poradie proteínových interakcií a signalizácia ostávajú nerozriešené.
Tak ako sa používa tu, opisuje výraz DCRS5 protein obsahujúci amino,kyselinovú sekvenciu uvedenú v tabuľke 1. V mnohých prípadoch bude funkčne alebo štrukturálne ekvivalentný jeho podstatný fragment, vrátane napr. ďalších extracelulárnych segmentov. Vynález zahŕňa aj proteínové odchýlky príslušnej DCRS5 alely, ktorej sekvencia je poskytnutá, napr. muteín alebo iný konštrukt. Typicky budú takéto varianty vykazovať menej ako približne 10% sekvenčné rozdiely oproti cieľovej oblasti, a teda budú často mať 1 až 11 substitúcií, napr. 2, 3, 5 a 7 substitúcií a iné. Zahrnuté sú aj alelické a iné varianty, napr. prirodzené polymorfizmy, opísaného proteínu. Typicky sa bude viazať na jeho zodpovedajúci biologický ligand, možno v dimenzovanom stave s alfa receptorovou podjednotkou, s vysokou afinitou, napr. s afinitou aspoň približne 100 nM, zvyčajne s lepšou afinitou ako približne 30 nM, výhodne lepšou ako približne 10 nM, a najvýhodnejšie s lepšou ako približne 3 nM. Tento výraz by tu mal byť používaný aj na označenie príbuzných prirodzene sa vyskytujúcich foriem, napr. aliel, polymorfných variantov a metabolických variantov cicavčieho proteínu. Výhodné formy receptorových komplexov sa budú viazať na príslušný ligand s afinitou a selektivitiou, ktorá postačuje na interakciu ligand-receptor.
Tento vynález zahŕňa aj kombinácie proteínov alebo peptidov, ktoré majú zhodnú aminokyselinovú sekvenciu s aminokyselinovou sekvenciou uvedenou v tabuľke 1. Bude zahŕňať sekvenčné varianty s relatívne malým počtom substitúcií, napr. výhodne menej ako približne 3 až 5 substitúciami.
- 18Podstatný polypeptidový fragment alebo segment je sekvencia aminokyselinových zvyškov obsahujúca aspoň približne 8 aminokyselín, vo všeobecnosti aspoň 10 aminokyselín, všeobecnejšie aspoň 12 aminokyselín, často aspoň 14 aminokyselín, častejšie aspoň 16 aminokyselín, typicky aspoň 18 aminokyselín, typickejšie aspoň 20 aminokyselín, zvyčajne aspoň 22 aminokyselín, obvyklejšie aspoň 24 aminokyselín, výhodne aspoň 26 aminokyselín, výhodnejšie aspoň 28 aminokyselín a vo výnimočne výhodných uskutočneniach aspoň približne 30 alebo viac aminokyselín. Sekvencie segmentov rôznych proteínov sa môžu navzájom porovnávať v príslušnej dĺžke reťazcov. V mnohých situáciách môžu fragmenty vykazovať funkčné vlastnosti intaktných podjednotiek, napr. extracelulárna doména transmembránového receptora si môže zachovať ligand viažuce znaky a môže byť použitá na prípravu komplexu podobného rozpustnému receptoru.
Aminokyselinová sekvenčná homológia alebo sekvenčná zhoda sa stanovujú optimalizáciou zhôd zvyškov. Pri niektorých porovnaniach sa môžu, ak je to potrebné, zaviesť medzery. Pozri napr. Needleham, a ďalší, (1970) J. Mol. Biol. 48: 443-453; Sankoff, a ďalší, (1983) 1. kapitola v Time Warps, String Edits, and Macromolecules: The Theory and Practice of Sequence Comparison, AddisonWesley, Reading, MA; a softwarové balíky od IntelliGenetics, Mountain View, CA; a the University of Wisconsin Genetics Computer Group (GCG), Madison, WI; pričom každá z týchto publikácií je tu zahrnutá jej citáciou. To sa mení, keď sa za zhody považujú konzervatívne substitúcie. Konzervatívne substitúcie typicky zahŕňajú substitúcie v rámci nasledujúcich skupín: glycín, alanín; valín, izoleucín, leucín; kyselina asparágová, kyselina glutámová; asparagín, glutamín; serín, treonín; lyzín, arginín; a fenylalanín, tyrozín. Za homologické aminokyselinové sekvencie sa považujú tie sekvencie, ktoré zahŕňajú prirodzené alelické alebo medzidruhové odchýlky v cytokínovej sekvencií. Typické homologické proteíny alebo peptidy budú na 50 až 100 % homologické (ak môžu byť zavedené medzery), na 60 až 100 % homologické (ak môžu byť zahrnuté konzervatívne substitúcie) s aminokyselinovým sekvenčným segmentom podľa tabuľky 1. Miera homológie bude aspoň približne 70 %, vo všeobecnosti aspoň 76 %, všeobecnejšie aspoň 81 %, často aspoň 85 %, častejšie aspoň 88 %, typicky aspoň 90 %, typickejšie aspoň 92 %, zvyčajne aspoň 94 %, zvyčajnejšie aspoň 95 %, výhodne aspoň 96 % a výhodnejšie aspoň 97 % a
- 19vo výnimočne výhodných uskutočneniach aspoň 98 % alebo viac. Stupeň homológie sa bude meniť s dĺžkou porovnávaných segmentov. Homologické proteíny alebo peptidy, ako napríklad alelické varianty, budú zdieľať väčšinu biologických aktivít s uskutočneniami opísanými v tabuľke 1, najmä s vnútrobunkovou časťou.
Tak ako sa používa tu, výraz biologická aktivita sa používa na opis, bez obmedzenia, vplyvov na signalizáciu, zápalové reakcie, vrodenú imunitu a/alebo morfogenický vývoj prostredníctvom cytokínom podobných ligandov. Tieto receptory môžu napríklad sprostredkovávať fosfatázové alebo fosforylázové aktivity, ktoré je možné jednoducho merať štandardnými postupmi. Pozri napr. Hardie, a ďalší (vyd. 1995) The Protein Kinase FactBook zv. I a II, Academic Press, San Diego, CA; Hanks, a ďalší (1991) Meth. Enzymol. 200: 38-62; Hunter, a ďalší (1992) Celí 70: 375-388; Lewin (1990) Celí 61: 743-752; Pines, a ďalší (1991) Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 56: 449-463; a Parker, a ďalší (1993) Náture 363: 736-738. Receptory alebo ich časti môžu byť užitočné ako fosfátové značiace enzýmy na značenie všeobecných alebo špecifických substrátov. Podjednotky môžu byť aj funkčnými imunogénmi na vyvolanie rozoznávajúcich protilátok alebo antigénmi schopnými viazať protilátky.
Výrazy ligand, agonista, antagonista a analóg, napr. DCRS5, sa týkajú interakcií ligand-receptor, napr. toho či je receptorom prirodzený receptor alebo protilátka. Bunkové odpovede sú pravdepodobne typicky sprostredkované receptorovými tyrozín kinázovými dráhami.
Ligandom je aj molekula, ktorá slúži buď ako prirodzený ligand, na ktorý sa viaže uvedený receptor alebo jeho analóg, alebo ako molekula, ktorá je funkčným analógom prirodzeného ligandu. Funkčným analógom môže byť ligand so štrukturálnymi modifikáciami, alebo to môže byť úplne nepríbuzná molekula, ktorá má molekulový tvar interagujúci s príslušnými ligandovými väzobnými determinantami. Ligandy môžu slúžiť ako agonisty alebo antagonisty, pozri napr. Goodman, a ďalší (vyd. 1990) Goodman & Gilman's: The Pharmacological Bases of Therapeutics, Pergamon Press, New York.
Racionálny dizajn liečiva môže byť založený aj na štrukturálnych štúdiách molekulových tvarov receptora alebo protilátky a iných efektorov alebo ligandov.
-20Pozri napr. Herz, a ďalší (1997) J. Recept. Signál Transduct. Res. 17: 671-776; a Chaiken, a ďalší (1996) Trends Biotechnol. 14: 369-375. Efektormi môžu byť iné proteíny, ktoré sprostredkúvajú iné funkcie ako odpoveď na viazanie ligandu, alebo iné proteíny, ktoré normálne interagujú s receptorom. Jedným prostriedkom na stanovenie toho, ktoré miesta interagujú so špecifickými inými proteínmi, je fyzikálna štrukturálna determinácia, napr. rôntgenová kryštalografia alebo dvojrozmerné NMR techniky. Tieto poskytnú návod na to, ktoré aminokyselinové zvyšky tvoria molekulové kontaktné oblasti. Podrobný opis proteínovej štrukturálnej determinácie pozri napr. Blundell a Johnson (1976) Protein Crystallography, Academic Press, New York, ktorá je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie.
II. Aktivity
Proteíny podobné cytokínovému receptoru budú mať množstvo rozličných biologických aktivít, napr. vnútrobunkovú signalizáciu, napr. prostredníctvom STAT4, modulovanie bunkovej proliferácie alebo vo fosfátovom metabolizme, pričom sa budú pridávať alebo odstraňovať zo špecifických substrátov, typicky proteínov. To bude vo všeobecnosti viesť k modulácii zápalovej funkcie, inej vrodenej imunitnej odpovede, alebo modulácii morfologického účinku. Podjednotka sa pravdepodobne bude viazať na ligand s nízkou špecifickou afinitou.
DCRS5 má charakteristické motívy receptorovej signalizácie prostredníctvom JAK dráhy. Pozri napr. Ihle, a ďalší (1997) Stem Cells 15 (dod. 1): 105-111; Silvennoinen, a ďalší (1997) APMIS 105: 497-509; Levy (1997) Cytokine Growth Factor Review 8: 81-90; Winston a Hunter (1996) Current Biol. 6: 668-671; Barrett (1996) Baillieres Clin. Gastroenterol. 10: 115; a Briscoe, a ďalší (1996) Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 351: 167-171. Zaujímavé sú najmä vyššie opísané SH2 viažuce motívy.
Biologické aktivity cytokínových receptorových podjednotiek sa budú týkať pridávania alebo odstraňovania fosfatázových skupín ku substrátom, typicky špecifickým spôsobom, ale príležitostne nešpecifickým spôsobom. Substráty môžu byť identifikované štandardnými spôsobmi a aj podmienky enzymatickej aktivity môžu byť testované štandardnými spôsobmi, napr. ako je opísané v Hardie, a ďalší (vyd. 1995) The Protein Kinase FactBook zv. I a II, Academic Press, San Diego, CA;
-21 Hanks, a ďalší (1991) Meth. Enzymol. 200: 38-62; Hunter, a ďalší (1992) Celí 70:
375-388; Lewin (1990) Celí 61: 743-752; Pines, a ďalší. (1991) Cold Spring Harbor
Symp. Quant. Biol. 56: 449-463; a Parker, a ďalší (1993) Náture 363: 736-738.
Receptorové podjednotky sa môžu kombinovať, aby sa vytvorili funkčné komplexy, napr. komplexy, ktoré môžu byť užitočné na viazanie ligándu alebo prípravu protilátok. Tieto komplexy budú mať veľké diagnostické využitie vrátane detekcie alebo kvantifikácie. Funkčné spojenie receptora s p40/IL-B30 ligandom poskytuje dôležitý prehľad o klinických indikáciách, na ktoré bude receptor užitočný. Takže antagonisty a agonisty budú mať predpokladateľné funkčné účinky.
III. Nukleové kyseliny
Tento vynález sa týka použitia izolovanej nukleovej kyseliny, alebo fragmentov, ktoré, kódujú napríklad tieto alebo blízko príbuzné proteíny, alebo ich fragmenty, ktoré napr. kódujú zodpovedajúci polypeptid, výhodne polypeptid, ktorý je biologicky aktívny. Okrem toho tento vynález zahŕňa izolované alebo rekombinantné DNAs, ktoré kódujú kombinácie takýchto proteínov alebo polypeptidov majúcich charakteristické sekvencie, napr. DCRS5s samostatne alebo v kombinácii s inými, ako napríklad s IL-12Rpi (pozri Showe, a ďalší (1996)) Ann. N. Y. Acad. Sci. 795: 413-425; Gately, a ďalší (1998) Ann. Rev. Immunol. 16: 495521; GenBankU03187, NM005535) podjednotkou. Typicky je nukleová kyselina schopná hybridizovať, v príslušných podmienkach, s nukleokyselinovým sekvenčným segmentom uvedeným v tabuľke 1, ale výhodne nie so zodpovedajúcim segmentom iných receptorov opísaných v tabuľke 3. Uvedeným biologicky aktívnym proteínom alebo polypeptidom môže byť proteín s úplnou dĺžkou, alebo fragment, a bude typicky obsahovať segment aminokyselinovej sekvencie, ktorá je vysoko homologická, napr. má významný podiel rovnakých sekvencií, so sekvenciou uvedenou v tabuľke 1. Okrem toho tento vynález zahŕňa použitie izolovanej alebo rekombinantnej nukleovej kyseliny, alebo jej fragmentov, ktoré kódujú proteíny obsahujúce fragmenty, ktoré sú ekvivalentné s DCRS5 proteínmi, napr. vnútrobunkovými časťami. Izolované nukleové kyseliny môžu byť príslušné regulačné sekvencie na 5' a 3' ohraničeniach, napr. promótory, zosiľňovače, signály na pridávanie poly-A, a iné regulačné sekvencie z
-22prirodzeného génu. Poskytnuté sú aj kombinácie, ako je uvedené vyššie, napr.
kombinácia DCRS5 s IL-12RP1, alebo s ich extracelulárnymi časťami viažucimi ligand, ako ligandovými antagonistami. Aj diagnostické využitia napr. polymorfných alebo iných variantov sú zrejmým spôsobom dôležité.
Izolovanou nukleovou kyselinou je napr. RNA, DNA alebo zmiešaný polymér, ktorý je v podstate čistý, napr. oddelený od iných komponentov, ktoré prirodzene sprevádzajú natívnu sekvenciu, ako napríklad ribozómov, polymeráz a ohraničujúcich genomických sekvencií z pôvodných druhov. Výraz zahŕňa nukleokyselinovú sekvenciu, ktorá môže byť vyňatá z prirodzene sa vyskytujúceho prostredia a zahŕňa rekombinantné alebo klonované DNA izoláty, ktoré sa tým líšia od prirodzene sa vyskytujúcich kompozícií a chemicky syntetizovaných analógov alebo analógov biologicky syntetizovaných heterológnymi systémami. V podstate čistá molekula zahŕňa izolované formy molekuly, buď úplne, alebo v podstate čisté.
Izolovanou nukleovou kyselinou bude vo všeobecnosti homogénna kompozícia molekúl, ale, v niektorých uskutočneniach, bude obsahovať heterogenitu, výhodne minoritnú. Táto heterogenita sa typicky vyskytuje na koncoch polymérov alebo v častiach, ktoré nie sú kritické pre požadovanú biologickú funkciu alebo aktivitu.
Rekombinantná nukleová kyselina je typicky definovaná buď spôsobom jej výroby, alebo jej štruktúrou. Čo sa týka spôsobu jej výroby, napr. produktu vyrobeného určitým spôsobom, využíva sa proces rekombinantných nukleokyselinových techník, napr. techník zahŕňajúcich zásah človeka do nukleotidovej sekvencie. Typicky tento zásah zahŕňa in vitro manipuláciu, hoci za určitých okolností môže zahŕňať klasickejšie techniky kríženia zvierat. Alternatívne to môže byť nukleová kyselina vyrobená generovaním sekvencie obsahujúcej fúziu dvoch fragmentov, ktoré sa prirodzene nevyskytujú kontinuálne za sebou, ale sú považované za výlučné produkty prírody, napr. prirodzene sa vyskytujúce mutanty ako sa nachádzajú v ich prirodzenom stave. Takže produktami môžu byť napr. bunky transformované s vektorom, ktorý sa prirodzene nevyskytuje, akým sú napríklad nukleové kyseliny obsahujúce sekvenciu odvodenú použitím akéhokoľvek syntetického oligonukleotidového procesu. Takýto proces sa často uskutočňuje za účelom nahradenia, napr. kodónu, iným kodónom kódujúcim rovnakú alebo
-23konzervatívnu aminokyselinu, pričom typicky sa zavádza alebo odstraňuje sekvenčné miesto rozoznávané reštrikčným enzýmom, alebo sa táto náhrada uskutočňuje kvôli štrukturálno-funkčnej analýze. Alternatívne sa proces uskutočňuje na spojenie nukleokyselinových segmentov s požadovanými funkciami, aby sa vygenerovala jediná genetická entita zahŕňajúca požadovanú kombináciu funkcií, ktorá sa nenachádza v bežne dostupných prirodzených formách, napr. kódujúca fúzovaný protein. Miesta rozoznávané reštrikčnými enzýmami sú často cieľom takýchto umelých manipulácií, ale prostredníctvom konštruovania môžu byť zahrnuté aj iné miestne špecifické ciele, napr. promótory, DNA replikačné miesta, regulačné sekvencie, riadiace sekvencie alebo iné užitočné znaky. Podobný koncept je určený pre rekombinantný, tzn. fúzovaný, polypeptid. To bude zahŕňať dimérne opakovania alebo fúziu DCRS5 s IL-12Rpi podjednotkou. Konkrétne sú zahrnuté syntetické nukleové kyseliny, ktoré, v dôsledku degenerácie genetického kódu, kódujú ekvivalentné DCRS5 polypeptidy alebo fragmenty a fúzie sekvencií z rôznych rozličných príbuzných molekúl, napr. iných členov cytokínovej receptorovej rodiny.
V kontexte nukleovej kyseliny je fragmentom kontinuálny segment aspoň približne 17 nukleotidov, vo všeobecnosti aspoň 21 nukleotidov, všeobecnejšie aspoň 25 nukleotidov, obvykle aspoň 30 nukleotidov, obvyklejšie aspoň 35 nukleotidov, často aspoň 39 nukleotidov, častejšie aspoň 45 nukleotidov, typicky aspoň 50 nukleotidov, typickejšie aspoň 55 nukleotidov, zvyčajne aspoň 60 nukleotidov, zvyčajnejšie aspoň 66 nukleotidov, výhodne aspoň 72 nukleotidov, výhodnejšie aspoň 79 nukleotidov a vo výnimočne výhodných uskutočneniach to bude aspoň 85 alebo viac nukleotidov, vrátane 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200 atď. Typicky sa môžu navzájom porovnávať fragmenty s rozličnými genetickými sekvenciami s príslušnou dĺžkou reťazcov, najmä definované segmenty, ako napríklad nižšie opísané domény.
Nukleové kyseliny, ktoré kódujú DCRS5, budú výnimočne užitočné na identifikáciu génov, mRNA a cDNA druhov, ktoré kódujú samotné alebo blízko príbuzné proteíny, ako aj DNAs, ktoré kódujú polymorfné, alelické alebo iné genetické varianty, napr. z rôznych jedincov alebo príbuzných druhov. Výhodnými sondami pre takéto skríningy sú tie oblasti receptora, ktoré sú konzervované v rámci
-24rozličných polymorfných variantov, alebo ktoré obsahujú nukleotidy, ktorým chýba špecificita, a výhodne budú mať kompletnú, alebo takmer kompletnú dĺžku. V iných situáciách budú užitočnejšie polymorfné variantové špecifické sekvencie. Diagnostikované môžu byť aj kombinácie polymorfných variantov DCRS5 s variantmi IL-12Rpi.
Tento vynález ďalej zahŕňa rekombinantné nukleokyselinové molekuly a fragmenty s nukleokyselinovou sekvenciou, ktorá je rovnaká alebo vysoko homologická s tu uvedenou izolovanou DNA. Konkrétne, sekvencie budú často operatívne spojené s DNA segmentami, ktoré riadia transkripciu, transláciu a DNA replikáciu. Tieto ďalšie segmenty typicky pomáhajú pri expresii požadovaného nukleokyselinového segmentu.
Homologické alebo vysoko zhodné nukleokyselinové sekvencie, keď sa vzájomne porovnávajú, napr. DCRS5 sekvencie, vykazujú významnú podobnosť. Štandardy pre homológiu pri nukleových kyselinách sú buď mierami homológie všeobecne používanými v oblasti porovnávania sekvencií, alebo sú založené na hybridizačných podmienkach. Komparatívne hybridizačné podmienky sú podrobnejšie opísané nižšie.
Podstatná zhoda v kontexte porovnávania nukleokyselinových sekvencií znamená buď to, že segmenty alebo ich komplementárne vlákna, keď sa porovnávajú, sú identické, ked sa optimálne zoradia, s príslušnými nukletidovými inzerciami alebo deléciami, aspoň na približne 60 % nukleotidov, vo všeobecnosti aspoň na 66 %, obvykle aspoň na 71 %, často aspoň 76 %, častejšie aspoň 80 %, zvyčajne aspoň 84 %, zvyčajnejšie aspoň 88 %, typicky aspoň 91 %, typickejšie aspoň približne 93 %, výhodne aspoň približne 95 %, výhodnejšie aspoň približne 96 až 98 % alebo viac a vo výnimočne výhodných uskutočneniach približne 99 % alebo viac nukleotidov, vrátane, napr. segmentov kódujúcich štrukturálne domény alebo iné opísané segmenty. Alternatívne, podstatná zhoda bude existovať, keď budú segmenty hybridizovať v selektívnych hybridizačných podmienkach ku vláknu alebo jeho komplementu, typicky použitím sekvencie uvedenej v tabuľke 1. Typicky, selektívna hybridizácia nastane, keď je aspoň 55% homológia pri vlákne dlhom aspoň približne 14 nukleotidov, typickejšie aspoň približne 65%, výhodne aspoň približne 75% a výhodnejšie aspoň približne 90%. Pozri Kanehisa (1984) Nucl.
-25Acids Res. 12: 203-213, pričom táto publikácia je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie. Dĺžka homologického porovnávania, ako je opísaná, môže zahŕňať dlhšie reťazce a, v určitých uskutočneniach, sa bude týkať vlákna obsahujúceho aspoň približne 17 nukleotidov, vo všeobecnosti aspoň približne 20 nukleotidov, obvykle aspoň približne 24 nukleotidov, zvyčajne aspoň približne 28 nukleotidov, typicky aspoň približne 32 nukleotidov, typickejšie aspoň približne 40 nukleotidov, výhodne aspoň približne 50 nukleotidov a výhodnejšie aspoň približne 75 až 100 alebo viac nukleotidov. To zahŕňa napr. 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275, 300, 325, 350, atď. a iné dĺžky.
Prísnymi podmienkami, vo vzťahu k homológii v hybridizačnom kontexte, budú kombinované podmienky obsahu soli, teploty, organických rozpúšťadiel a iných parametrov, ktoré sa typicky kontrolujú v hybridizačných reakciách. Prísne teplotné podmienky budú zvyčajne zahŕňať teploty nad približne 30 °C, zvyčajnejšie nad približne 37 °C, typicky nad približne 45 °C, typickejšie nad približne 55 °C, výhodne nad približne 65 °C a výhodnejšie nad približne 70 °C. Prísne podmienky obsahu soli budú zvyčajne menej ako približne 500 mM, obvykle menej ako približne 400 mM, obvyklejšie menej ako približne 300 mM, typicky menej ako približne 200 mM, výhodne menej ako približne 100 mM a výhodnejšie menej ako približne 80 mM, aj nižšie ako približne 50 alebo 20 mM. Avšak kombinácia parametrov je oveľa dôležitejšia ako hodnota ktoréhokoľvek jednotlivého parametra. Pozri napr. Wetmur a Davidson (1968) J. Mol. Biol. 31: 349-370, pričom táto publikácia je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie.
Izolovanú DNA je možné jednoducho modifikovať nukleotidovými substitúciami, nukleotidovými deléciami, nukleotidovými inzerciami a inverziami nukleotidových reťazcov. Výsledkom týchto modifikácii sú nové DNA sekvencie, ktoré kódujú tento proteín alebo jeho deriváty. Tieto modifikované sekvencie môžu byť používané na výrobu mutantných proteínov (muteínov) alebo na zosilnenie expresie variantových druhov. Zosilnená expresia môže zahŕňať génovú amplifikáciu, zvýšenú transkripciu, zvýšenú transláciu a iné mechanizmy. Takáto mutantná DCRS5 sa podobá vyššie opísanej DCRS5, ale má aminokyselinovú sekvenciu, ktorá sa líši od sekvencie iných proteínov podobných cytokínovému receptoru, ako sa nachádzajú v prírode, či už deléciou, substitúciou alebo inzerciou.
-26Najmä výraz miestne Špecificky mutantná DCRS5 zahŕňa proteín, ktorý má v podstate rovnakú sekvenciu ako proteín uvedený v tabuľke 1, a typicky zdieľa väčšinu biologických aktivít alebo účinkov tu opísaných foriem. Identifikované budú aj rôzne prirodzené polymorfné variantné sekvencie.
Hoci sú miestne špecifické mutačné miesta predeterminované, mutanty nemusia byť miestne špecifické. Mutagenéza cicavčej DCRS5 sa môže dosiahnuť vytvorením aminokyselinových inzercií alebo delécií v géne, v spojení s expresiou. Aby sa získal konečný konštrukt, môžu sa generovať substitúcie, delécie, inzercie alebo mnohé kombinácie. Inzercie zahŕňajú amino- alebo karboxy- terminálne fúzie. Náhodná mutagenéza sa môže uskutočňovať v cieľovom kodóne a expresné cicavčie DCRS5 mutanty sa potom môžu skrínovať z hľadiska požadovanej aktivity, pričom sa predpokladá určitý aspekt vzťahu medzi štruktúrou a aktivitou. Metódy výroby substitučných mutácií vo vopred určených miestach v DNA so známou sekvenciou sú v oblasti dobre známe, napr. prostredníctvom M13 primerovej mutagenézy. Pozri aj Sambrook, a ďalší (1989) a Ausubel a ďalší (1987 a periodické dodatky). Výnimočne užitočnými konštruktmi budú extracelulárne časti DCRS5 asociované s IL-12Rpi segmentami.
Mutácie v DNA by normálne nemali posunúť kódujúce sekvencie mimo čítacích rámcov a výhodne netvoria komplementárne oblasti, ktoré by mohli hybridizovať a tak vytvárať sekundárnu mRNA štruktúru, ako napríklad slučky alebo vlásenky.
Fosforamidová metóda, opísaná v Beaucage a Carruthers (1981) Tetra. Letts. 22: 1859-1862, bude produkovať vhodné syntetické DNA fragmenty. Dvojvláknový fragment sa často bude získavať buď syntetizovaním komplementárneho vlákna a vzájomným anelovaním vlákien v príslušných podmienkach, alebo pridaním komplementárneho vlákna použitím DNA polymerázy s vhodnou primerovou sekvenciou.
Pri mutagenéze sa často aplikujú techniky polymerázovej reťazovej reakcie (PCR). Alternatívne sa sú obvykle používanými metódami na generovanie definovaných mutácii vo vopred určených miestach mutagenizačné priméry. Pozri napr. Innis, a ďalší (vyd. 1990) PCR Protocols: A Guide to Methods and
-27Applications Academic Press, San Diego, CA; a Dieffenbach a Dveksler (1995;
eds.) PCR Primer: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Press, CSH, NY.
Určité uskutočnenia vynálezu sa týkajú kombinácie prostriedkov, ktoré obsahujú opísané receptorové sekvencie. V iných uskutočneniach sa môžu spojiť funkčné časti sekvencií, aby kódovali fúzované proteíny. V iných formách môžu byť substituované varianty opísaných sekvencií.
IV. Proteíny, peptidy
Ako je opísané vyššie, predložený vynález zahŕňa primátovú DCRS5, napr. DCRS5, ktorej sekvencie sú uvedené v tabuľke 1 a opísané vyššie. Zahrnuté sú aj alelické a iné varianty, vrátane napr. fúzovaných proteínov kombinujúcich časti takýchto sekvencií s inými, vrátane napr. IL-12Rpi, epitopových príveskov a funkčných domén.
Predložený vynález poskytuje aj rekómbinantné proteíny, napr. heterológne fúzované proteíny použitím segmentov týchto primátových alebo hlodavčích proteínov. Heterológnym fúzovaným proteínom je fúzia proteínov alebo segmentov, ktoré prirodzene nie sú normálne fúzované rovnakým spôsobom. Takže fúzovaný produkt DCRS5 s iným cytokínovým receptorom je kontinuálnou proteínovou molekulou, ktorá má sekvencie fúzované v typickej peptidovej väzbe, typicky vyrobenou ako jeden translačný produkt a vykazujúcou vlastnosti akými sú napr. sekvencia alebo antigénnosť, odvodené od každého zdrojového peptidu. Podobný koncept sa aplikuje na heterológne nukleokyselinové sekvencie. Poskytnuté sú aj kombinácie rôznych určených proteínov.
Okrem toho môžu byť vyrobené nové konštrukty z kombinácie podobných funkčných alebo štrukturálnych domén z iných príbuzných proteínov, napr. cytokínových receptorov alebo zvončekovitých receptorov, vrátane druhových variantov. Napríklad, ligand viažuce alebo iné segmenty sa môžu vymieňať medzi rôznymi novými fúzovanými polypeptidmi alebo fragmentmi. Pozri napr. Cunningham, a ďalší (1989) Science 243: 1330-1336; a O'Dowd, a ďalší (1988) J. Biol. Chem. 263: 15985-15992, pričom obe publikácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie. Takže výsledkom funkčného spojenia receptorviažucich špecificít budú nové chimérne polypeptidy vykazujúce nové kombinácie
-28špecificít. Napríklad, ligand viažuce domény z iných príbuzných receptorových molekúl sa môžu pridať alebo substituovať inými doménami tohto alebo príbuzných proteínov. Výsledný proteín bude mať často hybridnú funkciu a vlastnosti. Napríklad, fúzovaný proteín môže zahŕňať zameriavaciu doménu, ktorá môže slúžiť na poskytnutie sekvestrovania fúzovaného proteínu na konkrétnu subcelulárnu organelu.
Kandidátski fúzovací partneri a sekvencie sa môžu vybrať z rôznych sekvenčných databáz, napr. GenBank, clo IntelliGenetics, Mountain View, CA; a BCG, University of Wisconsin Biotechnology Computing Group, Madison, Wl, ktoré sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie. Výnimočne výhodné sú najmä kombinácie polypeptidových sekvencii uvedených v tabuľkách 1 a 3. Variantové formy proteínov sa môžu substituovať v opísaných kombináciách.
Predložený vynález poskytuje najmä muteíny, ktoré viažu cytokínom podobné ligandy a/alebo ktoré sa podieľajú na prenose signálu. Štrukturálne porovnanie ľudskej DCRS5 s inými členmi cytokínovej receptorovej rodiny ukazuje konzervované znaky/zvyšky. Pozri tabuľku 3. Porovnanie ľudskej DCRS5 sekvencie s inými členmi cytokínovej receptorovej rodiny indikuje rôzne spoločne zdieľané štrukturálne a funkčné znaky. Pozri aj Bazan a ďalší (1996) Náture 379: 591; Lodi a ďalší (1994) Science 263: 1762-1766; Sayle a Milner-White (1995) TIBS 20: 374376; a Gronenberg a ďalší (1991) Protein Engineering 4: 263-269.
Výnimočne výhodné sú substitúcie buď s myšacími sekvenciami, alebo s ľudskými sekvenciami. Naopak, konzervatívne substitúcie mimo ligand viažucich interakčných oblastí budú pravdepodobne zachovávať väčšinu signalizačných aktivít; a konzervatívne substitúcie mimo vnútrobunkových domén budú pravdepodobne zachovávať väčšinu ligand viažucich vlastností.
Deriváty primátovej DCRS5 zahŕňajú aminokyselinové sekvenčné mutanty, glykozylačné varianty, metabolické deriváty a kovalentné alebo agregačné konjugáty s inými chemickými skupinami. Kovalentné deriváty sa môžu pripraviť pripojením funkčných skupín na skupiny, ktoré sa nachádzajú v DCRS5 aminokyselinových bočných reťazcoch alebo na N-konci, napr. prostriedkami, ktoré sú v oblasti dobre známe. Tieto deriváty môžu zahŕňať, bez obmedzenia, alifatické estery alebo amidy karboxylového konca alebo zvyškov obsahujúcich karboxylové
-29vedľajšie reťazce, O-acylové deriváty zvyškov obsahujúcich hydroxylovú skupinu a N-acylové deriváty amino-koncovej aminokyseliny alebo zvyškov obsahujúcich amino skupinu, napr. lyzínu alebo arginínu. Acylové skupiny sú vybrané zo skupiny alkylových skupín, vrátane C3 až C18 normálneho alkylu, čím sa vytvárajú alkanol aroylové druhy.
Zahrnuté sú najmä glykozylačné zmeny, napr. vyrobené modifikáciou glykozylačných vzorov polypeptidu v priebehu jeho syntézy a spracovania, alebo v ďalších procesných krokoch. Výnimočne výhodnými prostriedkom na uskutočňovanie týchto glykozylačných zmien je vystavenie polypeptidu glykozylačným enzýmom izolovaným z buniek, ktoré normálne poskytujú takéto spracovávanie, napr. cicavčím glykozylačným enzýmom. Do úvahy prichádzajú aj deglykozylačné enzýmy. Zahrnuté sú aj verzie rovnakej primárnej aminokyselinovej sekvencie, ktorá má iné minoritné modifikácie vrátane fosforylovaných aminokyselinových zvyškov, napr. fosfotyrozínu/fosfoserínu alebo fosfotreonínu.
Hlavnou skupinou derivátov sú kovalentné konjugáty receptorov alebo ich fragmentov s inými proteínmi alebo polypeptidmi. Tieto deriváty je možné syntetizovať v rekombinantnej kultúre, ako N-koncové fúzie alebo použitím činidiel známych v oblasti, ktoré sú užitočné na prepájanie proteínov prostredníctvom reaktívnych bočných skupín. Výhodnými derivatizačnými miestami s prepájacími činidlami sú voľné aminoskupiny, uhľovodíkové skupiny a cysteínové zvyšky.
Poskytnuté sú aj fúzované polypeptidy medzi receptormi a inými homologickými alebo heterologickými proteínmi. Homologickými polypeptidmi môžu byť fúzie medzi rozličnými receptormi, čoho výsledkom je napríklad hybridný protein vykazujúci väzobnú špecificitu pre viaceré rozličné cytokínové ligandy, alebo receptor, ktorý môže mať širšiu alebo slabšiu špecificitu substrátového účinku. Podobne sa môžu skonštruovať heterológne fúzie, ktoré by vykazovali kombináciu vlastností alebo aktivít derivovaných proteínov. Typickými príkladmi sú fúzie reporterového polypeptidu, napr. luciferázy, so segmentom alebo doménou receptora, napr. ligand-viažucim segmentom, takže sa môže jednoducho určiť prítomnosť alebo lokalizácia požadovaného ligandu. Pozri napr. Duli a ďalší US patent č. 4859609, ktorý tu je zahrnutý prostredníctvom jeho citácie. Iný génoví fúzovací partneri zahŕňajú glutatión-S-transferázu (GST), bakteriálnu β-galakto-30zidázu, trpE, proteín A, β-laktamázu, alfa amylázu, alkohol dehydrogenázu a kvasinkový alfa párovací faktor. Pozri napr. Godowski a ďalší (1988) Science 241:
812-816. Značené proteíny budú často substituované v opísaných kombináciách proteinov. Asociácie DCRS5 s IL-12Rpi sú výnimočne významné, ako je opísané.
Fosforamidovým spôsobom, opísaným v Beaucage a Carruthers (1981) Tetra, Letts. 22:1859-1862, sa budú produkovať vhodné syntetické DNA fragmenty. Dvojvláknový fragment sa bude často získavať buď syntetizovaním komplementárneho reťazca a anelovaním reťazcov v príslušných podmienkach, alebo pridaním komplementárneho reťazca použitím DNA polymerázy s príslušnou primerovou sekvenciou.
Takéto polypeptidy môžu mať aj aminokyselinové zvyšky, ktoré boli chemicky modifikované fosforyláciou, sulfonáciou, biotinyláciou alebo pridaním alebo odstránením iných skupín, najmä skupín, ktoré majú tvar podobný s fosfátovými skupinami. V niektorých uskutočneniach budú modifikácie užitočnými značkovacími činidlami alebo budú slúžiť ako purifikačné ciele, napr. afinitné ligandy.
Fúzované proteíny budú typicky vyrábané buď rekombinantnými nukleokyselinovými metódami, alebo syntetickými polypeptidovými metódami. Techniky na manipuláciu nukleových kyselín a expresiu sú vo všeobecnosti opísané napríklad v Sambrook a ďalší (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual (2. vyd.), zv. 13, Cold Spring Harbor Laboratory, a Ausubel a ďalší (vyd. 1987 a periodické dodatky) Current Protocols in Molecular Biology, Greene/Wiley, New York, ktoré sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie. Techniky na syntézu polypeptidov sú opísané napríklad v Merrifield (1963) J. Amer. Chem. Soc. 85: 21492156; Merrifield (1986) Science 232: 341-347; a Atherton a ďalší (1989) Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach, IRL Press, Oxford; pričom každá z týchto publikácií je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie. Pozri aj Dawson a ďalší (1994) Science 266: 776-779, kde sú uvedené spôsoby na výrobu väčších polypeptidov.
Tento vynález zahŕňa aj použitie derivátov DCRS5, ktorými nie sú len odchýlky v aminokyselinovej sekvencií alebo glykozylácii. Takéto deriváty môžu zahŕňať kovalentné alebo agregačné spojenie s chemickými skupinami. Tieto deriváty vo všeobecnosti spadajú do troch tried: (1) soli, (2) kovalentné modifikácie bočných reťazcov a terminálnych zvyškov a (3) adsorpčné komplexy, napr. s
-31 bunkovými membránami. Takéto kovalentné alebo agregačné deriváty sú užitočné ako imunogény, ako reakčné činidlá v imunologických testoch, alebo pri purifikačných metódach, ako napríklad pri afinitnej purifikácii receptora alebo inej viažucej molekuly, napr. protilátky. Cytokínový ligand môže byť napríklad imobilizovaný kovalentným naviazaním na tuhý podklad, ako napríklad kyanogen bromidom aktivovanú Sepharose, spôsobmi, ktoré sú v oblasti dobre známe, alebo adsorbovaním na polyolefínové povrchy, s alebo bez glutaraldehydovým krížovým naviazaním, na použitie v testoch alebo purifikácii cytokínového receptora, protilátok alebo iných podobných molekúl. Ligand môže byť značený aj s detegovateľnou skupinou, napr. rádioiodinačnou alebo chloramínovou T procedúrou, kovalentne naviazaný na zriedkavé zemské cheláty alebo konjugovaný s inou fluorescenčnou skupinou na použitie v diagnostických testoch.
Kombinácia, napr. obsahujúca DCRS5, podľa tohto vynálezu sa môže používať ako imunogén na produkciu antiséra alebo protilátok špecifických, napr. schopných rozlíšiť medzi inými členmi cytokínovej receptorovej rodiny, pre opísané kombinácie. Komplexy sa môžu použiť na skrínovanie monoklonálnych protilátok alebo antigén-viažucich fragmentov pripravených imunizáciou s rôznymi formami nečistých prípravkov obsahujúcich proteín. Konkrétne, výraz protilátky zahŕňa aj antigén viažuce fragmenty prirodzených protilátok, napr. Fab, Fab2, Fv, atď. Purifikovaná DCRS5 sa môže použiť aj ako reakčné činidlo na detekciu protilátok generovaných pri odpovedi na prítomnosť zvýšených hladín expresie alebo pri imunologických poruchách, ktoré vedú k produkcii protilátok proti endogénnemu receptoru. Okrem toho, DCRS5 fragmenty môžu slúžiť aj ako imunogény na produkciu protilátok podľa predloženého vynálezu, ako je opísané hneď nižšie. Napríklad, tento vynález zahŕňa protilátky, ktoré majú väzobnú afinitu voči, alebo boli vyvolané proti aminokyselinovým sekvenciám uvedeným v tabuľke 1, ich fragmentom alebo rôznym homologickým peptidom. Tento vynález zahŕňa najmä protilátky, ktoré majú väzobnú afinitu voči, alebo boli vyvolané proti špecifickým fragmentom, o ktorých sa predpokladá, alebo ktoré v skutočnosti sú, vystavené na vonkajšom proteínovom povrchu prirodzenej DCSR5. Užitočné budú aj komplexy kombinácií proteínov a môžu sa voči nim vyrobiť protilátkové prípravky.
-32V určitých iných uskutočneniach, rozpustné konštrukty, napr. extracelulárne ligand viažuce segmenty DCRS5 s IL-12Rpi, môžu byť viažucimi kompozíciami pre ligand a môžu byť užitočné buď ako ligandové antagonisty, alebo ako antigény na blokovanie ligandom sprostredkovanej signalizácie. Tak môžu byť užitočné buď na diagnostiku, napr. na histologické značenie ligandu, alebo terapeuticky, napr. ako antagonisty ligandu.
Blokovanie fyziologickej odpovede na receptorové ligandy môže byť výsledkom inhibície viazania ligandu na receptor, pravdepodobne prostredníctvom kompetitívnej inhibície. Takže in vitro testy podľa predloženého vynálezu budú často využívať protilátky alebo antigén viažuce segmenty týchto protilátok, rozpustné receptorové konštrukty alebo fragmenty pripojené na tuhé fázové substráty. Tieto testy umožnia aj diagnostickú determináciu buď účinkov mutácií a modifikácií v ligand viažucej oblasti, alebo iných mutácií a modifikácií, napr. tých, ktoré ovplyvňujú signalizáciu alebo enzymatickú funkciu.
Tento vynález zahŕňa aj použitie kompetitívnych liekových skríningových testov, napr. testov, pri ktorých neutralizačné protilátky proti receptorovým komplexom alebo fragmentom súťažia s testovanou zlúčeninou pri viazaní sa na ligand alebo inú protilátku. Týmto spôsobom sa neutralizačné protilátky alebo fragmenty môžu použiť na detegovanie prítomnosti polypeptidu, ktorý zdieľa jedno alebo viac viažucich miest pre receptor, a môžu byť použité aj na obsadenie väzobných miest na receptore, kde by sa inak mohol viazať ligand. Rozpustné receptorové konštrukty, v ktorých sú skombinované extracelulárne alebo ligand viažuce domény DCRS5 s IL-12RP1, môžu byť užitočnými antagonistami na kompetitívne viazanie p40/IL-B30 ligandu.
V. Vytváranie nukleových kyselín a proteínu
DNA, ktorá kóduje proteín alebo jeho fragmenty, sa môže získať chemickou syntézou, skríningom cDNA knižníc, alebo skríningom genomických knižníc pripravených zo širokého rozsahu bunkových línií alebo tkanivových vzoriek. Prirodzené sekvencie sa môžu izolovať použitím štandardných metód a tu poskytnutých sekvencií, napr. v tabuľke 1. Iné druhy náprotivkov sa môžu
-33identifikovať hybridizačnými technikami alebo rôznymi PCR technikami v kombinácii s alebo prostredníctvom prehľadávania sekvenčných databáz, napr. GenBank.
Táto DNA sa môže exprimovať v širokom rozsahu hostiteľov, aby sa syntetizoval kompletný receptor alebo jeho fragmenty, ktoré naopak, môžu byť použité napríklad na generovanie polyklonálnych alebo monoklonálnych protilátok; na väzobné štúdie; na konštrukciu a expresiu modifikovaných ligand viažucich domén alebo kinázo/fosfatázových domén; a na štrukturálno-funkčné štúdie. Varianty fragmentov sa môžu exprimovať v hostiteľských bunkách, ktoré sú transformované alebo transfekované s príslušnými expresnými vektormi. Tieto molekuly môžu byť v podstate bez proteínových alebo bunkových kontaminantov, pričom to nie sú molekuly získané z rekombinantného hostiteľa, a preto sú výnimočne užitočné pre farmaceutické prostriedky, keď sa kombinujú s farmaceutický prijateľným nosičom a/alebo riedidlom. Proteín alebo jeho časti sa môžu exprimovať ako fúzie s inými proteínmi. Zaujímavé sú najmä kombinácie opísaných proteínov alebo nukleových kyselín, ktoré ich kódujú.
Expresné vektory sú typicky samostatne sa replikujúcimi DNA alebo RNA konštruktami, ktoré obsahujú požadovaný receptorový gén, jeho fragmenty alebo kombinácie génov, zvyčajne operatívne pripojené na vhodné genetické riadiace elementy, ktoré sú rozoznávané vo vhodnej hostiteľskej bunke. Tieto riadiace elementy sú schopné ovplyvňovať expresiu vo vnútri vhodného hostiteľa. Viaceré gény sa môžu exprimovať koordinovane a môžu byť na polycistrónovej mediátorovej RNA. Špecifický typ riadiacich elementov nevyhnutných na uskutočnenie expresie bude závisieť na konkrétnej použitej hostiteľskej bunke. Vo všeobecnosti môžu genetické riadiace elementy zahŕňať prokaryotický promótorový systém alebo eukaryotický promótorový expresný riadiaci systém a typicky zahŕňajú transkripčný promótor, voliteľne operátor na riadenie nástupu transkripcie, transkripčné zosilňovače na zvýšenie úrovne mRNA expresie, sekvenciu, ktorá kódujú vhodné ribozóm viažuce miesto a sekvencie, ktoré ukončujú transkripciu a transláciu. Expresné vektory zvyčajne obsahujú aj počiatok replikácie, ktorý umožňuje, aby sa vektor replikoval nezávisle od hostiteľskej bunky.
Vektory podľa tohto vynálezu zahŕňajú vektory, ktoré obsahujú DNA kódujúcu kombináciu proteínov, ako bola opísaná, alebo biologicky aktívny ekvivalentný
-34polypeptid. DNA môže byť riadená vírusovým promótorom a môže kódovať selekčný marker. Tento vynález ďalej zahŕňa použitie takýchto expresných vektorov, ktoré sú schopné exprimovať eukaryotické cDNAs kódujúce takéto proteíny v prokaryotickom alebo eukaryotickom hostiteľovi, pričom vektor je kompatibilný s hostiteľom a eukaryotické cDNAs sú začlenené do vektora takým spôsobom, aby sa pri pestovaní hostiteľa obsahujúceho vektor exprimovali dané cDNAs. Zvyčajne sú expresné vektory navrhnuté tak, aby sa stabilne replikovali v ich hostiteľských bunkách alebo, aby sa značne amplifikoval celkový počet kópií požadovaného génu (génov) na bunku. Nie je vždy nevyhnutné požadovať, aby sa expresný vektor replikoval v hostiteľskej bunke, napr. je možné uskutočniť prechodnú expresiu proteínu alebo jeho fragmentov v rôznych hostiteľoch použitím vektorov, ktoré neobsahujú počiatok replikácie rozoznávaný hostiteľskou bunkou. Je možné použiť aj vektory, ktoré spôsobujú integráciu protein kódujúcich častí do hostiteľskej DNA prostredníctvom rekombinácie.
Vektory, tak ako sa používajú tu, zahŕňajú plazmidy, vírusy, bakteriofágy, integrovateľné DNA fragmenty a iné vehikulá, ktoré umožňujú integráciu DNA fragmentov do genómu hostiteľa. Expresné vektory sú špecializované vektory, ktoré obsahujú genetické riadiace elementy, ktoré uskutočňujú expresiu operatívne pripojených génov. Plazmidy sú najbežnejšie používanou formou vektora, ale aj iné formy vektorov, ktoré majú ekvivalentnú funkciu, a ktoré sú, alebo sa stanú, známymi v oblasti, sú vhodné na použitie podľa tohto vynálezu. Pozri napr. Pouwels a ďalší (1985 a dodatky) Cloning Vectors: A Laboratory Manual, Elsevier, N. Y., a Rodriguez a ďalší (vyd. 1988) Vectors: A Survey of Molecular Cloning Vectors and Their Uses, Buttersworth, Boston, pričom tieto publikácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie.
Transformované bunky sú bunky, výhodne cicavčie, ktoré boli transformované alebo transfekované vektormi skonštruovanými použitím rekombinantných DNA techník. Transformované hostiteľské bunky zvyčajne exprimujú požadované proteíny, ale na účely klonovania, amplifikácie a manipulácie ich DNA nemusí exprimovať predmetné proteíny. Tento vynález ďalej zahŕňa kultiváciu transformovaných buniek vo vyživovacom médiu, čím sa umožňuje akumulácia
-35proteínov. Tieto proteíny sa môžu izolovať buď z kultúry, alebo v niektorých prípadoch z kultivačného média.
Na účely tohto vynálezu sú nukleové sekvencie operatívne spojené, keď sú navzájom vo funkčnom vzťahu. Napríklad, DNA kódujúca presekvenciu alebo sekrečný vedúci peptid je operatívne spojená s polypeptidom, ak je exprimovaná ako preproteín alebo sa podieľa na smerovaní polypeptidu do bunkovej membrány alebo na vylučovaní polypeptidu. Promótor je operatívne spojený s kódujúcou sekvenciou, ak riadi transkripciu polypeptidu. Ribozóm viažuce miesto je operatívne spojené s kódujúcou sekvenciou, ak je v polohe, ktorá umožňuje transláciu. Zvyčajne znamená operatívne spojený kontinuálny alebo v čítacom rámci, avšak určité genetické elementy, ako napríklad represné gény, nie sú kontinuálne napojené, ale sa viažu na operátorové sekvencie, ktoré na druhej strane riadia expresiu.
Vhodné hostiteľské bunky zahŕňajú prokaryoty, nižšie eukaryoty a vyššie eukaryoty. Prokaryoty zahŕňajú gram negatívne a gram pozitívne organizmy, napr. E. coli a B. subtilis. Nižšie eukaryoty zahŕňajú kvasinky, napr. S. cerevisiae a Pichia a druhy rodu Dictyostelium. Vyššie eukaryoty zahŕňajú zavedené tkanivové bunkové línie zo živočíšnych druhov, tak necicavčieho pôvodu, napr. hmyzie bunky a vtáčie bunky, ako aj cicavčieho pôvodu, napr. ľudské, primátové a hlodavčie bunky.
Prokaryotické hostiteľské vektorové systémy zahŕňajú široký rozsah vektorov z mnohých rozličných druhov. Tak ako sa používa tu, E. coli a jej vektory budú používané genericky, aby boli zahrnuté ekvivalentné vektory používané v iných prokaryotoch. Reprezentatívnym vektorom na amplifikáciu DNA je pBR322 alebo mnohé jeho deriváty. Vektory, ktoré môžu byť používané na expresiu receptora alebo jeho fragmentov, zahŕňajú, ale nie sú obmedzené na vektory obsahujúce lac promótor (pUC série); trp promótor (pBR322 trp); Ipp promótor (pIN série); lambda pP alebo pR promótory (pOTS) alebo hybridné promótory, ako napríklad ptac (pDR540). Pozri Brosius a ďalší (1988) Expression Vectors Employing Lambda, and Ipp derived Promoters, vo Vectors: A Survey of Molecular Cloning Vectors and Their Uses, (vyd. Rodriguez and Denhardt), Buttersworth, Boston, Kapitola 10, str. 205-236, pričom tieto publikácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie.
-36Nižšie eukaryoty, napr. kvasinky a Dictiostelium, môžu byť transformované s vektormi obsahujúcimi DCRS5 sekvenciu. Na účely tohto vynálezu je najbežnejším nižším eukaryotickým hostiteľom pekárenská kvasinka, Saccharomyces cerevisiae. Bude používaná ako všeobecný reprezentant nižších eukaryotov, hoci dostupných je aj množstvo iných kmeňov a druhov. Kvasinkové vektory typicky pozostávajú z počiatku replikácie (ak nejde o integratívny typ), selekčného génu, promótora, DNA kódujúcej receptor alebo jeho fragmenty a sekvencií na ukončenie translácie, polyadenyláciu a ukončenie transkripcie. Vhodné expresné vektory pre kvasinku zahŕňajú také konštitutívne promótory ako promótor 3 fosfoglycerát kinázového génu a promótory rôznych iných glykolytických enzýmových génov, alebo také inducibilné promótory, akými sú napríklad promótor alkohol dehydrogenázy 2 alebo metalotionínový promótor. Vhodné vektory zahŕňajú deriváty nasledujúcich typov: samostatne sa replikujúce s nízkym počtom kópií (ako napríklad YRp série), samostatne sa replikujúce s vysokým počtom kópií (ako napríklad YEp série); integratívne typy (ako napríklad Ylp série) alebo mini chromozómy (ako napríklad YCp série).
Vyššie eukaryotické tkanivové kultivačné bunky sú normálne výhodnými hostiteľskými bunkami na expresiu funkčne aktívnych interleukínových alebo receptorových proteínov. V princípe sú použiteľné mnohé vyššie eukaryotické tkanivové kultúrne bunkové línie, napr. hmyzie bakulovírusové expresné systémy, či už z bezstavovcov alebo zo stavovcov. Výhodné sú však cicavčie bunky. Transformácia alebo transfekcia a šírenie takýchto buniek sa stali rutinným postupom. Príklady užitočných bunkových línií zahŕňajú HeLa bunky, vaječníkové bunkové línie z čínskeho škrečka (CHO), obličkové bunkové línie z mláďat potkanov (BRK), hmyzie bunkové línie, vtáčie bunkové línie, a opičie (COS) bunkové línie. Expresné vektory pre takéto bunkové línie zvyčajne zahŕňajú počiatok replikácie, promótor, translačné iniciačné miesto, RNA zostrihové miesta (ak je použitá genomická DNA), polyadenylačné miesto, a transkripčné terminačné miesto. Tieto vektory zvyčajne obsahujú aj selekčný gén alebo amplifikačný gén. Vhodnými expresnými vektormi môžu byť plazmidy, vírusy alebo retrovírusy nesúce promótory odvodené napr. z takých zdrojov, akými sú adenovírus, SV40, parvovírusy, vakcinia vírus alebo cytomegalovírus. Reprezentatívne príklady vhodných expresných
-37vektorov zahŕňajú pCDNAl; pCD, pozri Okayama a ďalší (1985) Mol. Celí Biol. 5:
1136 1142; pMCIneo PolyA, pozri Thomas a ďalší (1987) Celí 51: 503 512; a bakulovírusový vektor, ako napríklad pAC 373 alebo pAC 610.
Pre vylučované proteíny a niektoré membránové proteíny otvorený čítací rámec zvyčajne kóduje polypeptid, ktorý pozostáva zo zrelého alebo vylučovaného produktu kovalentne pripojeného na svojom N-konci na signálny peptid. Signálny peptid sa odštepuje pred vylúčením zrelého alebo aktívneho polypeptidu. Štiepne miesto je možné predpokladať s vysokým stupňom presnosti na základe empirických pravidiel, napr. von-Heijne (1986) Nucleic Acids Research 14: 46834690 a Nielsen a ďalší (1997) Protein Eng. 10: 1-12, a presné aminokyselinové zloženie signálneho peptidu sa často nejaví ako dôležité pre jeho funkciu, napr. Randall a ďalší (1989) Science 243: 1156-1159; Kaiser a ďalší (1987) Science 235: 312-317. Zrelé proteíny podľa vynálezu sa môžu jednoducho determinovať použitím štandardných metód.
Často bude potrebné exprimovať tieto polypeptídy v systéme, ktorý poskytuje špecifický alebo definovaný glykozylačný vzor. V tom prípade, bude zvyčajným vzorom ten, ktorý je prirodzene poskytovaný expresným systémom. Avšak vzor bude modifikovateľný vystavením polypeptidu, napr. neglykozylovanej formy, príslušným glykozylačným proteínom začleneným do heterologického expresného systému. Napríklad, receptorový gén môže byť ko-transformovaný s jedným alebo viacerými génmi kódujúcimi cicavčie alebo iné glykozylačné enzýmy. Použitím tohto prístupu budú cicavčie glykozylačné vzory dosiahnuteľné v prokaryotoch alebo v iných bunkách. Expresia v prokaryotických bunkách bude typicky viesť k neglykozylovaným formám proteínu.
Zdrojom DCRS5 môže byť eukaryotický alebo prokaryotický hostiteľ exprimujúci rekombinantnú DCRS5, ako je opísané vyššie. Zdrojom môže byť aj bunková línia, ale aj iné cicavčie bunkové línie sú zahrnuté týmto vynálezom, pričom výhodná bunková línia je humánna.
Keď sú už známe sekvencie, primátová DCRS5, jej fragmenty alebo deriváty môžu byť pripravené konvenčnými postupmi na syntézu peptidov. Tieto zahŕňajú procesy, ktoré sú opísané napríklad v Stewart a Young (1984) Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chemical Co., Rockford, IL; Bodanszky a Bodanszky (1984) The
-38Practice of Peptide Synthesis, Springer Verlag, New York; a Bodanszky (1984) The Principles of Peptide Synthesis, Springer Verlag, New York; pričom všetky tieto publikácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie. Použitý môže byť napríklad azidový proces, proces s kyselinou chlorovodíkovou, proces s anhydridom kyseliny, zmiešaný anhydridový proces, proces s aktívnym esterom (napríklad p-nitrofenyl esterom, /V-hydroxysukcinimidovým esterom alebo kyanometyl esterom), karbodiimidazolový proces, oxidačno-redukčný proces alebo dicyklohexylkarbodiimid (DCCD) aditívny proces. Na vyššie uvedené procesy sú aplikovateľné tak syntéza na tuhej fáze, ako aj syntéza v roztoku. Podobné techniky môžu byť použité s čiastočnými DCRS5 sekvenciami.
DCRS5 proteíny, fragmenty alebo deriváty sa vhodne pripravujú v súlade s vyššie uvedenými procesmi, ktoré sa typicky využívajú na peptidovú syntézu, vo všeobecnosti buď prostredníctvom takzvaného postupného procesu, ktorý zahŕňa kondenzovanie aminokyseliny s koncovou aminokyselinou, jednu po. druhej, ako nasledujú v sekvencií, alebo pripájaním peptidových fragmentov na terminálnu aminokyselinu. Aminokyseliny, ktoré sa nemajú použiť v pripájacej reakcii, musia byť typicky chránené, aby sa zabránilo pripojeniu v nesprávnej lokalite.
Ak sa používa syntéza na tuhej fáze, C-koncová aminokyselina sa naviaže na nerozpustný nosič alebo podklad prostredníctvom svojej karboxylovej skupiny. Nerozpustný nosič nie je nijako zvlášť limitovaný, pokiaľ má väzobnú schopnosť voči reaktívnej karboxylovej skupine. Príklady takýchto nerozpustných nosičov zahŕňajú halogénmetylové živice, fenolové živice, ŕerc-alkyloxykarbonylhydrazínované živice a podobne.
Aminoskupinou chránená aminokyselina sa naväzuje do sekvencie prostredníctvom kondenzácie aktivovanej karboxylovej skupiny a reaktívnej aminoskupiny predtým vytvoreného peptidu alebo reťazca, aby sa syntetizoval peptid krok za krokom. Po syntetizovaní kompletnej sekvencie sa peptid oddelí od nerozpustného nosiča, aby sa vyprodukoval peptid. Tento prístup na tuhej fáze je všeobecne opísaný v Merrifield a ďalší (1963) v J. Am. Chem. Soc. 85: 2149 2156, pričom táto publikácia je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie.
Pripravený protein a jeho fragmenty sa môžu izolovať a purifikovať z reakčnej zmesi prostredníctvom peptidovej separácie, napr. extrakciou, precipitáciou,
-39elektroforézou, rôznymi formami chromatografie, prostredníctvom imunoafinity a podobne. Receptory podľa tohto vynálezu sa môžu získať v rôznych stupňoch čistoty v závislosti na požadovaných použitiach. Purifikácia sa môže uskutočňovať použitím tu opísaných proteínových purifikačných techník, pozri nižšie, alebo použitím tu opísaných protilátok v spôsoboch imunoabsorbčnej afinitnej chromatografie. Táto imunoabsorbčná afinitná chromatografia sa uskutočňuje tak, že sa najprv pripoja protilátky na tuhý podklad, a potom sa pripojené protilátky uvádzajú do kontaktu so solubilizovanými lyzátmi príslušných buniek, lyzátmi iných buniek exprimujúcich receptor alebo lyzátmi alebo supernatantami buniek produkujúcich proteín ako výsledok DNA techník, pozri nižšie.
Vo všeobecnosti bude purifikovaný proteín čistý aspoň na približne 40 %, obvykle bude čistý aspoň na približne 50 %, zvyčajne bude čistý aspoň na približne 60 %, typicky bude čistý aspoň na približne 70 %, typickejšie bude čistý aspoň na približne 80 %, výhodne bude čistý aspoň na približne 90 % a výhodnejšie, bude čistý aspoň na približne 95 % a vo výhodných uskutočneniach bude čistý na 97 % až 99 % alebo viac. Čistota bude zvyčajne vzťahovaná na hmotnosť, ale môže byť vzťahovaná aj na molové množstvo. Aplikované budú rozličné testy, podľa toho, ako to bude vhodné. Purifikované môžu byť individuálne proteíny a potom sa môžu kombinovať.
VI. Protilátky
Protilátky môžu byť vyvolané proti rôznym cicavčím, napr. primátovým DCRS5 proteínom a ich fragmentom, tak v prirodzene sa vyskytujúcich natívnych formách, ako aj v ich rekombinantných formách, pričom rozdielom je, že protilátky proti aktívnemu receptoru s väčšou pravdepodobnosťou rozoznávajú epitopy, ktoré sú prítomné len v natívnych konformáciách. Zahrnuté sú aj protilátky, ktoré rozoznávajú epitopy prezentované kombináciou, napr. funkčnou, DCRS5 s IL12Rpi. Detekcia denaturovaného antigénu môže byť užitočná napr. vo Western analýze. Zahrnuté môžu byť aj anti-idiotypové protilátky, ktoré by boli užitočné ako agonisty alebo antagonisty prirodzeného receptora alebo protilátky.
Protilátky, vrátane viažucich fragmentov a jednoreťazcových verzií, proti vopred určeným fragmentom proteínu sa môžu vyvolať imunizáciou zvierat
-40konjugátmi fragmentov s imunogénnymi proteínmi. Monoklonálne protilátky sa pripravujú z buniek vylučujúcich požadovanú protilátku. Tieto protilátky môžu byť skrínované z hľadiska väzby na normálny alebo defektný proteín, alebo môžu byť skrínované z hľadiska agonistickej alebo antagonistickej aktivity. Tieto monoklonálne protilátky sa zvyčajne budú viazať s hodnotou KD aspoň približne 1 mM, zvyčajnejšie aspoň približne 300 μΜ, typicky aspoň približne 100 μΜ, typickejšie aspoň približne 30 μΜ, výhodne aspoň približne 10 μΜ, a výhodnejšie aspoň približne 3 μΜ alebo lepšou.
Protilátky, vrátane antigén viažucich fragmentov, podľa tohto vynálezu môžu mať významnú diagnostickú alebo terapeutickú hodnotu. Môžu byť účinnými antagonistami, ktorý sa viažu na receptor a inhibujú viazanie ligandu alebo inhibujú schopnosť receptora vyvolať biologickú odpoveď, napr. účinok na jeho substrát. Môžu byť užitočné aj ako nie neutralizačné protilátky a môžu byť spojené s toxínmi alebo rádionuklidmi, aby sa viazali na produkujúce bunky alebo bunky lokalizované v zdroji interleukínu. Okrem toho, tieto protilátky môžu byť konjugované s liekmi alebo inými terapeutickými činidlami, buď priamo, alebo nepriamo, prostredníctvom spojovníka.
Protilátky podľa tohto vynálezu môžu byť užitočné aj na diagnostické aplikácie. Ako zachytávacie alebo nie neutralizačné protilátky by sa mohli viazať na receptor bez inhibovania viazania ligandu alebo substrátu. Ako neutralizačné protilátky môžu byť užitočné v kompetitívnych väzobných testoch. Budú užitočné aj na detegovanie alebo kvantifikáciu ligandu. Môžu byť použité ako reakčné činidlá pre Western blot analýzu alebo na imunoprecipitáciu alebo imunopurifikáciu zodpovedajúceho proteínu. Podobne, nukleové kyseliny a proteíny môžu byť imobilizované na tuhých substrátoch na afinitnú purifikáciu alebo detekčné metódy. Substrátmi môžu byť napr. tuhé živicové guľôčky alebo plastické fólie.
Proteínové fragmenty môžu byť pripojené na iné materiály, najmä polypeptidy, a to ako fúzované alebo ako kovalentne pripojené polypeptidy na použitie ako imunogény. Cicavčie cytokínové receptory a fragmenty môžu byť fúzované alebo kovalentne pripojené na rôzne imunogény, ako napríklad hemocyanín zo svätojánskej mušky, hovädzí sérový albumín, tetanus toxoid, atď. Spôsoby na prípravu polyklonálnych antisér pozri Microbiology, Hoeber Medical
-41 Division, Harper a Row, 1969; Landsteiner (1962) Specificity of Serological Reactions, Dover Publications, New York; a Williams a ďalší (1967) Methods in Immunology and Immunochemistry, zv. 1, Academic Press, New York; pričom každá publikácia je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie. Typický spôsob zahŕňa hyperimunizáciu zvieraťa s antigénom. Krátko po opakovaných imunizáciách sa potom odoberie krv zo zvieraťa a izoluje sa gama globulín.
V niektorých prípadoch je želateľné pripraviť monoklonálne protilátky z rôznych cicavčích hostiteľov, ako napríklad myší, hlodavcov, primátov, ľudí, atď. Opis techník na prípravu takýchto monoklonálnych protilátok je možné nájsť napr. v Stites a ďalší (vyd.) Basic and Clinical Immunology (4. vyd.), Lange Medical Publications, Los Altos, CA, a tam citované referencie; Harlow a Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, CSH Press; Goding (1986) Monoclonal Antibodies: Principles and Practice (2. vyd.) Academic Press, New York; a najmä v Kohler a Milstein (1975) v Náture 256: 495 497, kde sa diskutuje jeden spôsob generovania monoklonálnych protilátok. Každá z týchto publikácií je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie. Stručne zhrnuté, tento spôsob zahŕňa injekčné podanie imunogénu zvieraťu. Zviera sa potom usmrtí a odoberú sa bunky zo sleziny, ktoré sa potom fúzujú s myelómovými bunkami. Výsledkom je hybridná bunka alebo hybridom, ktorý je schopný reprodukovať sa in vitro. Populácia hybridómov sa potom skrínuje, aby sa izolovali jednotlivé klony, z ktorých každý vylučuje jediný druh protilátky proti imunogénu. Pri tomto spôsobe sú získané individuálne protilátkové druhy produktami imortalizovaných a klonovaných jedných B buniek z imúnneho zvieraťa, ktoré sú generované ako odpoveď voči špecifickému miestu rozoznávanému na imunogénnej látke.
Iné vhodné techniky zahŕňajú in vitro vystavenie lymfocytov antigénnym polypeptidom alebo alternatívne, selekciu z knižníc protilátok vo fágových alebo podobných vektoroch. Pozri Huse a ďalší (1989) Generation of a Large Combinatorial Library of the Immunoglobulin Repertoire in Phage Lambda, Science 246: 1275-1281; a Ward a ďalší (1989) Náture 341; 544-546, pričom každá z týchto publikácií je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie. Polypeptidy a protilátky podľa predloženého vynálezu môžu byť používané s alebo bez modifikácie, vrátane chimérnych alebo humanizovaných protilátok. Často budú polypeptidy a protilátky
-42značené prostredníctvom ich pripojenia, buď kovalentného, alebo nekovalentného, na látku, ktorá poskytuje detegovateľný signál. Známych je veľké množstvo značiek a konjugačných techník a sú zverejnené tak vo vedeckej, ako aj v patentovej literatúre. Vhodné značky zahŕňajú rádionuklidy, enzýmy, substráty, kofaktory, inhibítory, fluorescenčné skupiny, chemiluminiscentné skupiny, magnetické častice a podobne. Patenty opisujúce použitie takýchto značiek zahŕňajú US patenty č: 3817837; 3850752; 3939350; 3996345; 4277437; 4275149 a 4366241.
Produkované môžu byť aj rekombinantné a chimérne imunoglobulíny, pozri Cabilly, US patent č. 4816567; alebo môžu byť vytvárané v transgénnych myšiach, pozri Mendez a ďalší (1997) Náture Genetics 15; 146-156. Tieto publikácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácií.
Protilátky podľa tohto vynálezu môžu byť použité aj na afinitnú chromatografiu na izoláciu DCRS5 proteínov alebo peptidov. Môžu sa pripraviť kolóny, v ktorých budú protilátky pripojené na tuhý podklad, napr. častice, ako agaróza, Sephadex alebo podobne, pričom bunkový lyzát môže prechádzať cez kolónu, ktorá sa potom premyje, nasledujú zvyšujúce sa koncentrácie mierneho denaturačného činidla, čím sa uvoľní purifikovaný proteín. Alternatívne sa proteín môže použiť na purifikáciu protilátky. Aplikovať sa môžb príslušné krížové absorpcie alebo vyčerpania.
Protilátky môžu byť použité na skríning expresných knižníc na konkrétne expresné produkty. Zvyčajne, protilátky používané v takomto postupe budú značené so skupinou umožňujúcou jednoduchú detekciu prítomnosti antigénu prostredníctvom viazania protilátky.
Protilátky vyvolané proti cytokínovému receptoru budú použité aj na
I ' ' ' vyvolanie anti-idiotypových protilátok. Tieto budú užitočné na detegovanie alebo diagnostiku rôznych imunologických stavov súvisiacich s expresiou proteínu alebo buniek, ktoré exprimujú proteín. Budú užitočné aj ako agonisty alebo antagonisty ligandu, ktoré môžu byť kompetitívnymi receptorovými inhibítormi alebo môžu nahradiť prirodzene sa vyskytujúce ligandy. Určité protilátky proti receptorovým podjednotkám alebo kombinácie môžu slúžiť ako aktivačné protilátky, ktoré môžu ovplyvňovať signalizáciu, a tým slúžiť napr. ako agonisty ligandu.
-43Cytokínový receptorový proteín, ktorý sa špecificky viaže na, alebo ktorý špecificky imunologický reaguje s protilátkou generovanou proti definovanému imunogénu, ako napríklad imunogénu pozostávajúcemu z aminokyselinovej sekvencie označenej ako sekv. č. 2, sa typicky determinuje v imunoteste. Imunotest typicky využíva polyklonálne antisérum, ktoré bolo vyvolané napr. proti proteínu so sekv. č. 2. Toto antisérum je vybrané tak, aby malo nízku krížovú reaktivitu voči iným členov cytokínovej receptorovej rodiny, napr. IL-12Rp2 receptorovej podjednotke alebo IL-6 receptorovej podjednotke gp130, výhodne z rovnakých druhov, a akákoľvek takáto krížová reaktivita je odstránená imunoabsorpciou pred použitím imunotestu.
Na to, aby sa produkovalo antisérum na použitie v imunoteste, sa proteín, napr. so sekv. č. 2, izoluje ako je tu opísané. Rekombinantný proteín sa napríklad môže produkovať v cicavčej bunkovej línii. Vhodný hostiteľ, napr. inbredný kmeň myší, ako napr. Balb/c, sa imunizuje s vybraným proteínom, typicky použitím štandardného adjuvans, ako napríklad Freundovho adjuvans, a podľa štandardného imunizačného protokolu pre myši (pozri Harlow a Lane, supra). Alternatívne sa ako imunogén môže použiť syntetický peptid odvodený od tu opísaných sekvencií a konjugovaný s nosičovým proteínom. Polyklonálne séra sa izolujú a titrujú proti imunogénnemu proteínu v imunoteste, napr. imunoteste v tuhom skupenstve s imunogénom imobilizovaným na tuhom podklade. Polyklonálne antiséra s titrom 104 alebo vyšším sa selektujú a testujú z hľadiska ich krížovej reaktivity voči iným členom cytokínovej receptorovej rodiny, napr. gp130 alebo IL-12RP1 použitím kompetitívneho väzobného imunotestu, ako napríklad testu opísaného v Harlow a Lane, supra, na stranách 570-573. Na toto stanovovanie sa výhodne používajú aspoň dvaja členovia cytokínovej receptorovej rodiny. Títo členovia cytokínovej receptorovej rodiny sa môžu produkovať ako rekómbinantné proteíny a môžu sa izolovať použitím štandardných techník molekulovej biológie alebo proteínovej chémie, ktoré sú tu opísané.
Na stanovenie krížovej reaktivity sa môžu použiť imunotesty vo forme kompetitívneho viazania. Napríklad, proteín so sekv. č. 2 sa môže imobilizovať na tuhom podklade. Proteíny pridávané do testu konkurujú viazaniu antisér na imobilizovaný antigén. Schopnosť vyššie uvedených proteínov konkurovať viazaniu
-44antisér na imobilizovaný protein sa porovnáva s proteínmi, napr. gp130 alebo IL12Rpi. Percento krížovej reaktivity pre vyššie uvedené proteíny sa vypočítava použitím štandardných výpočtov. Tie antiséra, ktoré majú menej ako 10% krížovú reaktivitu s každým z vyššie uvedených proteínov, sa vyberú a spoja. Krížovo reagujúce protilátky sa potom odstránia zo spojených antisér imunoabsorpciou s vyššie uvedenými proteínmi.
Imunoabsorbované a spojené antiséra sa potom použijú v kompetičných väzobných imunotestoch, ako je opísané vyššie, aby sa porovnal druhý protein s imunogénnym proteínom (napr. proteínom podobným s DCRS5 so sekv. č. 2). Na uskutočnenie tohto porovnania sa každý z týchto dvoch proteínov testuje v širokom rozsahu koncentrácií a determinuje sa množstvo každého proteínu potrebné na 50% inhibíciu viazania antisér na imobilizovaný protein. Ak je potrebné množstvo druhého proteínu menej ako dvojnásobkom množstva proteínu z vybraného proteínu alebo proteínov, ktoré sú potrebné, potom sa o druhom proteíne hovorí, že sa špecificky viaže na protilátku generovanú voči imunogénu.
Je pochopiteľné, že tieto cytokínové receptorové proteíny sú členmi rodiny homologických proteínov, ktoré obsahujú mnohé identifikované gény. Pre konkrétny génový produkt, ako napríklad DCRS5, výraz označuje nie len tu opísané aminokyselinové sekvencie, ale aj iné proteíny, ktoré sú alelické, nealelické alebo sú druhovými variantami. Je tiež zrejmé, že výrazy zahŕňajú neprirodzené mutácie zavádzané zámerným mutovaním požutím obvyklej rekombinantnej technológie, ako napríklad jednomiestnej mutácie, alebo vystrihnutím krátkych sekcií DNA kódujúcej príslušné proteíny, alebo substitúciou nových aminokyselín, alebo pridaním nových aminokyselín. Pri takýchto minoritných zmenách sa typicky bude v podstate zachovávať imunoidentita pôvodnej molekuly a/alebo jej biologická aktivita. Takže tieto zmeny zahŕňajú proteíny, ktoré špecificky imunologický reagujú s určeným prirodzene sa vyskytujúcim DCRS5 proteínom. Biologické vlastnosti zmenených proteínov je možné determinovať prostredníctvom expresie proteínu vo vhodnej bunkovej línii a meraním príslušného účinku, napr. na transfekované lymfocyty. Konkrétne proteínové modifikácie, ktoré sú považované za minoritné, by zahŕňali konzervatívnu substitúciu aminokyselín s podobnými chemickými vlastnosťami, ako je opísané vyššie pre cytokínovú receptorovú rodinu ako celok.
-45Optimálnym zosúladením proteínu s proteínom z cytokínových receptorov a použitím tu opísaných obvyklých imunotestov na determináciu imunoidentity je možné určiť proteínové zloženie podľa vynálezu.
Okrem toho, protilátky proti receptorovým podjednotkám môžu slúžiť na priestorové blokovanie viazania sa ligandu na funkčný receptor. Takéto protilátky môžu byť vyvolané buď proti samostatnej podjednotke, alebo proti kombinácii DCRS5 s IL-12Rpi. Výsledkom by boli protilátkové antagonisty.
VII. Kity, diagnostika a kvantifikácia
Pre kity a testovacie metódy sú užitočné tak prirodzene sa vyskytujúce, ako aj rekombinantné formy molekúl podobných cytokínovým receptorom podľa vynálezu. Napríklad, tieto spôsoby by sa mohli aplikovať na skríning väzobnej aktivity napr. ligandov voči týmto proteínom. V súčasnosti bolo vyvinutých niekoľko automatizovaných testov, ktoré umožňujú skríning desiatok tisíc zlúčenín ročne. Pozri napr. BIOMEK automated workstation, Beckman Instruments, Palo Alto, California, a Fodor a ďalší (1991) Science 251: 767-773, pričom tieto publikácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie. Druhá publikácia opisuje prostriedok na testovania viazania sa rôznych definovaných polymérov syntetizovaných na tuhom substráte. Vývoj vhodných testov na skríning ligandových alebo agonistových/antagonistových homologických proteínov môže byť značne uľahčený dostupnosťou veľkých množstiev purifikovaných, rozpustných cytokínových receptorov v aktívnom stave, ako napríklad takých, ktoré sú poskytnuté týmto vynálezom.
Purifikovaná DCRS5 sa môže naniesť priamo na platne na použitie vo vyššie uvedených ligandových skríningových technikách. Avšak, nie neutralizačné protilátky voči týmto proteínom môžu byť použité ako zachytávacié protilátky na imobilizáciu príslušného receptora na tuhej fáze, čo je užitočné napr. pri diagnostických použitiach.
Tento vynález zahŕňa použitie DCRS5, jej fragmentov, peptidov a ich fúzovaných produktov v rôznych diagnostických kitoch a spôsoboch na detekciu prítomnosti proteínu alebo jeho ligandu. Alternatívne, alebo okrem toho, môžu byť v kitoch a spôsoboch zahrnuté protilátky proti molekulám. Typicky bude mať kit kompartment obsahujúci buď DCRS5 peptid alebo génový segment, alebo reakčné
-46činidlo, ktoré rozoznáva jedno alebo druhé. Typicky, rozoznávacími reakčnými činidlami by boli v prípade peptidu receptor alebo protilátka, alebo v prípade génového segmentu, by to zvyčajne bola hybridizačná sonda. Iné komponenty kitu môžu zahŕňať iné proteíny alebo reakčné činidlá príbuzné s p40, IL-B30 alebo IL12Rpi polypeptidmi ligand/receptorového párovania.
Výhodný kit na determináciu koncentrácie DCRS5 vo vzorke by typicky obsahoval značenú zlúčeninu, napr. ligand alebo protilátku, so známou väzobnou afinitou voči DCRS5, zdroj DCRS5 (prirodzene sa vyskytujúci alebo rekombinantný), ako pozitívnu kontrolu, a prostriedok na separáciu naviazanej od voľnej značenej zlúčeniny, napríklad tuhú fázu na imobilizáciu DCRS5 v testovanej vzorke. Normálne budú poskytnuté kompartmenty obsahujúce reakčné činidlá a inštrukcie. Poskytnuté sú aj kity obsahujúce príslušnú nukleovú kyselinu alebo protein.
Protilátky, vrátane antigén viažucich fragmentov, špecifické pre cicavčiu DCRS5 alebo peptidový fragment, alebo receptorové fragmenty sú užitočné na diagnostické aplikácie na detegovanie prítomnosti zvýšených hladín ligandu a/alebo jeho fragmentov. Diagnostické testy môžu byť homogénne (bez separačného kroku medzi voľným reakčným činidlom a komplexom protilátka-antigén) alebo heterogénne (so separačným krokom). Existujú rôzne komerčné testy, ako napríklad rádioimunotest (RIA), s enzýmom spojený imunoabsorbčný test (ELISA), enzýmový imunotest (EIA), enzýmová multiplicitná imunotestovacia technika (EMIT), substrátový značený fluorescenčný imunotest (SLFIA) a podobne. Využiť sa môžu napríklad neznačené protilátky použitím sekundárnej protilátky, ktorá je značená a ktorá rozoznáva protilátku proti cytokínovému receptoru alebo proti konkrétnemu fragmentu. Tieto testy boli tiež do veľkej miery diskutované v literatúre. Pozri napr. Harlow a Lane (1988) Antibodies: A Laboratory Manual, CSH., a Coligán (vyd. 1991 a periodické dodatky) Current Protocols In Immunology Greene/Wiley, New York.
Anti-idiotypové protilátky môžu mať podobné požitie a môžu slúžiť ako agonisty alebo antagonisty cytokínových receptorov. Mali by byť užitočné ako terapeutické reakčné činidlá za vhodných okolností.
Často sa reakčné činidlá pre diagnostické testy dodávajú v kitoch, aby bola optimalizovaná citlivosť testu. Na účely tohto vynálezu je poskytnutá značená alebo
-47neznačená protilátka alebo značený ligand, v závislosti na povahe testu, protokole a značke. To je zvyčajne v spojení s inými aditívami, ako napríklad tlmivými roztokmi, stabilizátormi, materiálmi nevyhnutnými na produkciu signálu, ako napríklad substrátmi pre enzýmy, a podobne. Výhodne, kit bude obsahovať aj inštrukcie na správne použitie a odpadovú nádobu na použité obsahy. Typicky má kit kompartmenty pre každé užitočné reakčné činidlo a bude obsahovať inštrukcie na správne použitie a odpadovú nádobu pre reakčné činidlá. Želateľné je, aby reakčné činidlá boli poskytnuté vo forme suchého lyofilizovaného prášku, pričom reakčné činidlá môžu byť rekonštituované vo vodnom médiu, pričom majú príslušné koncentrácie na uskutočňovanie testu.
Vyššie uvedené zložky diagnostických testov môžu byť použité bez modifikácie alebo môžu byť modifikované rôznymi spôsobmi. Napríklad, značenie sa môže dosiahnuť kovalentným alebo nekovalentným pripojením skupiny, ktorá priamo alebo nepriamo poskytuje detegovateľný signál. V mnohých týchto testoch môže byť priamo alebo nepriamo značená testovaná zlúčenina, cytokínový receptor alebo protilátka proti nim. Možnosti na priame značenie zahŕňajú značkovacie skupiny: rádioaktívne značky, ako napríklad 125l, enzýmy (US patent č. 3645090), ako napríklad peroxidázu a alkalickú fosfatázu, a fluorescenčné značky (US patent č. 3940475), ktoré sú schopné monitorovať zmenu v intenzite fluorescencie, posun vlnovej dĺžky alebo fluorescenčnú polarizáciu. Oba tieto patenty sú tu zahrnuté prostredníctvom ich citácie. Možnosti nepriameho značenia zahŕňajú biotinyláciu jednej zložky, po ktorej nasleduje viazanie na avidín pripojený na jednu z vyššie uvedených značkovacích skupín.
Existuje množstvo spôsobov na oddelenie naviazaného od voľného ligandu, ( J alebo alternatívne, naviazanej od voľnej testovanej zlúčeniny. Cytokínový receptor sa môže imobilizovať na rôznych matriciach a potom nasleduje premývanie. Vhodné matrice zahŕňajú plastické matrice, ako napríklad ELISA platne, filtre a guľôčky. Spôsoby imobilizácie receptora na matrici zahŕňajú, bez obmedzenia, priamu adhéziu na plast, použitie zachytávacej protilátky, chemické párovanie a biotín avidín. Posledný krok v tomto postupe zahŕňa precipitáciu komplexu protilátka/antigén ktoroukoľvek z niekoľkých metód vrátené spôsobov zahŕňajúcich napr. organické rozpúšťadlo, ako napríklad polyetylénglykol alebo soľ, ako napríklad síran
-48amónny. Iné vhodné separačné techniky zahŕňajú, bez obmedzenia, spôsob fluoresceínových protilátkových magnetizovateľných častíc opísaný v Rattle a ďalší (1984) Clin. Chem. 30(9): 1457 1461, a dvojitú protilátkovú magnetickú časticovú separáciu, ako je opísaná v US patente č. 4659678, pričom každá z týchto
I publikácií je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie.
Spôsoby pripájania rôznych značiek na proteín alebo fragmenty boli do veľkej miery zverejnené v literatúre a nie je potrebné podrobnejšie ich tu diskutovať. Mnohé techniky zahŕňajú použitie karbodiimidu alebo aktívnych esterov na vytvorenie peptidových väzieb, formovanie tioéterov prostredníctvom reakcie merkaptoskupiny s aktivovaným halogénom, ako napríklad chlóracetylom, alebo aktivovaným olefínom, ako napríklad maleimidom, na vytvorenie spojenia, alebo podobne. V týchto aplikáciách nájdu použitie aj fúzované proteíny.
Iný diagnostický aspekt tohto vynálezu zahŕňa použitie oligonukleotidovej alebo polynukleotidovej sekvencie vybranej zo sekvencie cytokínového receptora. Tieto sekvencie môžu byť použité ako sondy na detekciu hladín príslušného cytokínového receptora u pacientov, u ktorých je podozrenie, že majú imunologickú poruchu. Príprava tak RNA, ako aj DNA nukleotidových sekvencií, značenie sekvencií a výhodná veľkosť sekvencií sú dostatočne opísané a diskutované v literatúre. Normálne by mala mať oligonukleotidová sonda aspoň približne 14 nukleotidov, zvyčajne aspoň približne 18 nukleotidov a polynukleotidové sondy môžu mať až niekoľko kilobáz. Využité môžu byť rôzne značky, najobvyklejšie rádionuklidy, najmä 32P. Avšak využité môžu byť aj iné techniky, ako napríklad biotínom modifikované nukleotidy na začlenenie do polynukleotidu. Biotín potom slúži ako miesto na viazanie avidínu alebo protilátok, ktoré môžu byť značené širokou škálou značiek, ako napríklad rádionuklidmi, fluorescenčnými činidlami, enzýmami alebo podobne. Alternatívne, môžu byť využité protilátky, ktoré môžu rozoznávať špecifické duplexy, vrátane DNA duplexov, RAN duplexov, DNA RNA hybridných duplexov alebo DNA proteínových duplexov. Na druhej strane môžu byť protilátky značené, a môžu sa uskutočňovať testy, pri ktorom sa duplex naviaže na povrch, tak, aby sa pri vytvorení duplexu na povrchu mohla detegovať prítomnosť protilátky naviazanej na duplex. Použitie sond pre nové antisense RNA sa môže uskutočňovať obvyklými technikami, ako napríklad nukleokyselinovou hybridizáciou,
-49plus a mínus skríningom, rekombinančným sondovaním, hybridnou uvoľňovacou transláciou (HRT) a hybridnou zastavenou transláciou (HART). To zahŕňa aj amplifikačné techniky, ako napríklad polymerázovú reťazovú reakciu (PCR).
Zahrnuté sú aj diagnostické kity, ktoré testujú kvalitatívnu alebo kvantitatívnu prítomnosť iných markerov. Diagnostika alebo prognostika môžu závisieť na kombinácií viacerých indikácií použitých ako markerov. Takže, kity môžu testovať kombinácie markerov. Pozri napr. Viallet a ďalší (1989) Progress v Growth Factor Res. 1: 89-97. Detekcia polymorfných odchýlok, ktoré môžu reflektovať funkčné receptorové signalizačné rozdiely, môže byť užitočná pri určovaní terapeutickej stratégie. Odchýlky, ktoré odrážajú silnejšiu alebo slabšiu reakciu na ligand, môžu umožniť roztriedenie skupín pacientov na responzívne a neresponzívne podskupiny.
VIII. Terapeutická využiteľnosť
Tento vynález poskytuje reakčné činidlá s významnou terapeutickou hodnotou. Pozri napr. Levitzki (1996) Curr. Opin. Celí Biol. 8: 239-244. Cytokínové receptory (prirodzene sa vyskytujúce alebo rekombinantné), ich fragmenty, muteínové receptory a protilátky, spolu so zlúčeninami identifikovanými ako takými, ktoré majú väzobnú afinitu voči receptorom alebo protilátkam, by mali byť užitočné na liečbu stavov vykazujúci abnormálnu expresiu receptorov alebo ich ligandov. Takéto abnormality sa typicky budú manifestovať prostredníctvom imunologických porúch. Pozri WO 01/18051, ktorý je tu zahrnutý prostredníctvom jeho citácie. Okrem toho, tento vynález by mal poskytnúť terapeutickú hodnotu pri rôznych ochoreniach alebo poruchách spojených s abnormálnou expresiou alebo abnormálnym spúšťaním reakcie na ligand. Napríklad, o p40/IL-B30 ligande sa predpokladá, že sa zúčastňuje na vývoji bunkami sprostredkovanej imunity, napr. protinádorovej aktivite, na zosúlaďovaní humorálnej a bunkovej imunity a na protivírusových účinkoch. Konkrétne sa zdá, že ligand aktivuje NK a T bunky. Terapia sa môže kombinovať s IL-18, IL-12, TNF, IFNy, rádio/chemoterapiou, adjuvans alebo protinádorovými, protivírusovými alebo protiplesňovými zlúčeninami.
Naopak, antagonisty, ktoré môžu byť kombinované s antagonistami TNF, IFNy, IL-18 alebo IL-12, alebo s IL-10 alebo steroidmi, môžu byť indikované pri chronických Thl sprostredkovaných ochoreniach, autoimunitných ochoreniach,
-50a/alebo v situáciách odmietnutia transplatátu, pri skleróze multiplex, psoriáze, pri chronických zápalových stavoch, reumatoidnej artritíde, osteoartritíde alebo pri zápalových ochoreniach čriev. Antagonisty môžu byť vo forme protilátok proti receptorovým podjednotkám, vo forme rozpustných receptorových konštruktov alebo antisense nukleových kyselín voči jednej alebo viacerým receptorovým podjednotkám. Spojenie p40/IL-B30 ligandu s receptorovými podjednotkami DCRS5 a IL-12Rpi poskytuje pochopenie indikácií na použitie agonistu a antagonistu.
Teoreticky, na základe p40/IL-B30 opísaných aktivít, môžu byť antagonisty cytokínu ovplyvňované napr. rozpustnou DCRS5, s alebo bez rozpustnej IL-12RP1, alebo protilátkami proti každej z receptorových podjednotiek. Antagonisty môžu byť užitočné ako inhibítory nežiadúcich imunitných alebo zápalových reakcií, na zameranie pamäťových T buniek, alebo v kombinácii s IL-12/IL-12R antagonistami alebo inými protizápalovými látkami alebo imunosupresívnymi látkami. Klinickými indikáciami môžu byť chronický zápal alebo situácie pri transplantáciách. Rôzne polymorfizmy môžu zosilňovať alebo zoslabovať receptorovú funkciu, a ak je dominantná, mohli by byť užitočné ako terapeutické látky. Identifikácia takýchto odchýlok môže umožniť roztriedenie skupín pacientov na responzívnych alebo neresponzívnych. Reakčné činidlá môžu byť užitočné ako detekčné alebo značkovacie reakčné činidlá alebo ablatívne reakčné činidlá pre pamäťové T bunky a/alebo NK bunky.
Génová terapia môže spôsobiť, že požadované bunkové populácie reagujú na p40/IL-B30 ligand, napr. ako adjuvans pre nádorovú imunoterapiu na uľahčenie aktivácie lymfocytov infiltrujúcich do nádoru, T buniek alebo NK buniek. Antisense stratégie sa môžu aplikovať napr. na zabránenie receptorovej responzívnosti.
Rôzne abnormálne stavy sú známe u tých typov buniek, pri ktorých sa Northern blot analýzou ukázalo, že produkujú IL-12 p40 a/alebo IL-B30 mRNA. Pozri Berkow (vyd.) The Merck Manual of Diagnosis and Therapy, Merck & Co., Rahway, N. J.; Thorn, a ďalší Harrison's Principles of Internal Medicíne, McGrawHill, N. Y.; a Weatherall a ďalší (vyd.) Oxford Textbook of Medicíne, Oxford University Press, Oxford. Mnohé iné medicínske stavy a ochorenia budú reagovať na liečbu tu poskytnutým agonistom alebo antagonistom. Pozri napr. Stites a Terr (vyd.; 1991) Basic and Clinical Immunology Appleton and Lange, Norwalk,
-51 Connecticut; a Samter a ďalší (vyd.) Immunological Diseases Little, Brown and Co. Iné pravdepodobné indikácie na liečbu zahŕňajú remodeling kostí, sexuálnu dysfunkciu, prevenciu neurodegeneratívnych ochorení, demenciu, stres a iné. Tieto problémy by mali reagovať na prevenciu alebo liečbu použitím tu poskytnutých prostriedkov.
Rekombinantné cytokínové receptory, muteíny, agonistické alebo antagonistické protilátky proti nim alebo protilátky sa môžu purifikovať a potom podávať pacientovi. Tieto reakčné činidlá sa môžu kombinovať na terapeutické použitie s ďalšími aktívnymi zložkami, napr. v bežných farmaceutický prijateľných nosičoch alebo riedidlách, spolu s fyziologicky neškodnými stabilizátormi a excipientami. Tieto kombinácie môžu byť sterilné, napr. prefiltrované, a umiestnené v dávkových formách, napríklad prostredníctvom lyofilizácie v dávkových liekovkách, alebo uskladnené v stabilizovaných vodných prípravkoch. Tento vynález zahŕňa aj použitie protilátok alebo ich väzobných fragmentov, ktoré nepredstavujú komplementárne viazanie.
Ligandový skríning použitím cytokínového receptora alebo jeho fragmentov sa môže uskutočňovať na identifikáciu molekúl, ktoré majú väzobnú afinitu voči receptorom. Následné biologické testy sa potom môžu využiť na stanovenie toho, či pravdepodobný ligand môže poskytnúť kompetitívne viazanie, ktoré môže blokovať vlastnú stimulačnú aktivitu. Receptorové fragmenty sa môžu použiť ako blokátor alebo antagonista na blokovanie aktivity ligandu. Podobne, zlúčenina, majúca vlastnú stimulačnú aktivitu, môže aktivovať receptor a je teda agonistom, pretože stimuluje aktivitu ligandu, napr. indukuje signalizáciu. Tento vynález ďalej zahŕňa terapeutické použitie protilátok proti cytokínovým receptorom ako antagonistov.
Množstvá reakčných činidiel budú závisieť na mnohých rozličných faktoroch vrátane spôsobu podávania, cieľového miesta, fyziologickej životnosti reakčného činidla, farmakologickej životnosti, fyziologického stavu pacienta a iných podávaných liekov. Takže liečebné dávky by mali byť titrované tak, aby bola optimalizovaná bezpečnosť a účinnosť. Typicky, dávky používané in vitro môžu poskytnúť užitočný návod pri množstvách užitočných na in situ podávanie týchto reakčných činidiel. Testovanie účinných dávok na liečbu konkrétnych porúch na zvieratách poskytne ďalšiu predbežnú indikáciu humánnej dávky. Rôzne prístupy sú
-52opísané napr. v Gilman a ďalší (vyd. 1990) Goodman a Gilman's: The Pharmacological Bases of Therapeutics, 8. vyd., Pergamon Press; a Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. vyd. (1990), Mack Publishing Co., Easton, Penn.; pričom každá z týchto publikácií je tu zahrnutá prostredníctvom jej citácie. Spôsoby podávania sú diskutované tu a nižšie, napr. orálne, intravenózne, intraperitoneálne alebo intramuskulárne podanie, transdermálna difúzia a iné. Farmaceutický prijateľné nosiče budú zahŕňať vodu, fyziologický roztok, tlmivé roztoky a iné opísané zlúčeniny, napr. zlúčeniny uvedené v Merck Index, Merck & Co., Rahway, New Jersey. Kvôli pravdepodobnosti vysoko afinitného viazania alebo obratovým množstvám, medzi pravdepodobným ligandom a jeho receptormi, na začiatku by sa mala očakávať účinnosť nízkych dávok týchto reakčných činidiel. Takže obvykle by sa malo očakávať, že dávkové rozsahy budú v množstvách nižších ako ImM koncentrácie, typicky nižších ako približne 10μΜ koncentrácie, zvyčajne nižších ako približne 100 nM, výhodne nižších ako približne 10 pM (pikomolov) a najvýhodnejšie nižších ako približne 1 fM (femtomol), s príslušným nosičom. Na kontinuálne podávanie sa často budú využívať formulácie s pomalým uvoľňovaním alebo zariadenia s pomalým uvoľňovaním.
Cytokínové receptory, ich fragmenty, a protilátky alebo ich fragmenty, antagonisty a agonisty, môžu byť podávané priamo hostiteľovi, ktorý sa má liečiť alebo, v závislosti na veľkosti zlúčenín, môže byť želateľné konjugovať ich s nosičovými proteínmi, ako napríklad ovalbumínom alebo sérovým albumínom, pred ich podaním. Terapeutické formulácie sa môžu podávať v mnohých bežných dávkových formuláciách. Hoci je možné, aby sa aktívna zložka podávala samostatne, výhodné je, ak je vo forme farmaceutickej formulácie. Formulácie zahŕňajú aspoň jednu aktívnu zložku, ako je definovaná vyššie, spolu s jedným alebo viacerými prijateľnými nosičmi. Každý nosič musí byť tak farmaceutický, ako aj fyziologicky prijateľný v tom zmysle, že musí byť kompatibilný s inými zložkami a nesmie poškodzovať pacienta. Formulácie zahŕňajú tie, ktoré sú vhodné na orálne, rektálne, nazálne alebo parenterálne (vrátane subkutánneho, intramuskulárneho, intravenózneho a intradermálneho) podanie. Je vhodné, ak sú formulácie prezentované v jednotkovej dávkovej forme a môžu byť pripravené spôsobmi dobre známymi v oblasti farmácie. Pozri napr. Gilman a ďalší (vyd. 1990) Goodman and
-53Gilman's: The Pharmacological Bases of Therapeutics, 8. vyd., Pergamon Press; and Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. vyd. (1990), Mack Publishing Co., Easton, Penn.; Avis a ďalší (vyd. 1993) Pharmaceutical Dosage Forms ; Parenteral Medications Dekker, NY; Lieberman a ďalší (vyd. 1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets Dekker, NY; a Lieberman a ďalší (vyd. 1990) Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems Dekker, N Y. Terapia podľa tohto vynálezu môže byť kombinovaná s alebo použitá v spojení s inými terapeutickými činidlami, najmä agonistami alebo antagonistami iných členov cytokínovej receptorovej rodiny.
IX. Skríning
Skríning liečiv použitím DCRS5 alebo jej fragmentov sa môže uskutočňovať na identifikáciu zlúčenín, ktoré majú väzobnú afinitu voči receptorovej podjednotke, vrátane izolácie asociovaných zlúčenín. Následné biologické testy potom môžu byť využité na stanovenie toho, či má zlúčenina vlastnú stimulačnú aktivitu a či je teda blokátorom alebo antagonistom tým, že blokuje aktivitu ligandu. Okrem toho súlad medzi p40/IL-B30 ligandom a funkčným receptorom DCRS3 s IL-12Rpi, umožňuje skríning antagonistov a agonistov s pozitívnou kontrolou signálu. Môže sa uskutočňovať skríning malých molekúl alebo protilátok.
Jeden spôsob na skríning liečiv využíva eukaryotické alebo prokaryotické hostiteľské bunky, ktoré sú stabilne transformované rekombinantnými DNA molekulami exprimujúcimi DCRS5 v kombinácii s inou cytokínovou receptorovou podjednotkou, napr. IL-12Rp1. Verí sa, že signalizácia využíva STAT4. Môžu sa izolovať bunky, ktoré exprimujú receptor izolovane od iných funkčných receptorov. Takéto bunky, buď živé, alebo vo fixovanej forme, sa môžu použiť na štandardné protilátka/antigén alebo ligand/receptor väzobné testy. Pozri aj Parce a ďalší (1989) Science 246: 243-247; a Owicki a ďalší, (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 4007-4011, ktoré opisujú citlivé metódy na detekciu bunkových odpovedí. Výnimočne užitočné sú kompetitívne testy, pri ktorých sa bunky kontaktujú a inkubujú so značeným receptorom alebo protilátkou, ktoré majú známu väzobnú afinitu voči ligandu, ako napríklad 125l-protilátkou, a s testovanou vzorkou, ktorej väzobná afinita voči viažucej zlúčenine sa meria. Naviazané a voľné označené väzobné kompozície sa potom oddelia, aby sa zhodnotil stupeň viazania. Množstvo
-54naviazanej testovanej zlúčeniny je nepriamo úmerné hodnote viazania značeného receptora na známy zdroj. Je možné použiť mnohé techniky na oddelenie naviazaného od voľného ligandu, aby sa určil stupeň viazania ligandu. Tento separačný krok by mohol typicky zahŕňať postup, ako napríklad adherovanie na filtre, po ktorom nasleduje premývanie, adherovanie na plast, po ktorom nasleduje premývanie, alebo centrifugácia bunkových membrán. Živé bunky by mohli byť použité aj na skríning účinkov liečiv na cytokínom sprostredkované funkcie, napr. STAT4 signalizáciu a iné. Niektoré detekčné metódy umožňujú elimináciu separačného kroku, napr. proximálny senzitívny detekčný systém.
Široký rozsah tohto vynálezu je najlepšie pochopiteľný prostredníctvom odvolania sa na nasledujúce príklady, ktoré nie sú mienené ako obmedzenie vynálezu na konkrétne uskutočnenia.
Príklady uskutočnenia vynálezu
I. Všeobecné metódy
Niektoré štandardné metódy sú opísané alebo spomenuté napr. v Maniatis, a ďalší (1982) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor Press; Sambrook a ďalší (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, (2. vyd.), zv. 1-3, CSH Press, NY; alebo Ausubel, a ďalší (1987 a dodatky) Current Protocols in Molecular Biology, Greene/Wiley, New York. Metódy na purifikáciu proteínu zahŕňajú také metódy ako precipitácia na sírane amónnom, kolónová chromatografia, elektroforéza, centrifugácia, kryštalizácia a iné. Pozri napr. Ausubel a ďalší (1987 a periodické dodatky); Coligan a ďalší (vyd. 1996) a periodické dodatky, Current Protocols In Protein Science Greene/Wiley, New York; Deutscher (1990) Guide to Protein Purification v Methods in Enzymology, zv. 182, a iné zväzky v tejto sérií; a literatúra výrobcov o použití produktov na purifikáciu proteínov, napr. Pharmacia, Piscataway, N. J., alebo Bio-Rad, Richmond, CA. Kombinácia s rekombinantnými technikami umožňuje fúziu s príslušnými segmentami, napr. s FLAG sekvenciou alebo ekvivalentnou sekvenciu, ktoré môžu byť fúzované prostredníctvom sekvencie odstrániteľnej proteázou. Pozri napr. Hochuli (1990) Purification of Recombinant Proteins with Metal Chelate Absorbent
-55v Setlow (vyd.) Genetic Engineering, Principle and Methods 12: 87- 98, Plénum
Press, N. Y.; a Crowe a ďalší (1992) QIAexpress: The High Level Expression &
Protein Purification System QUIAGEN, Inc., Chatsworth, CA.
Počítačová sekvenčná analýza sa uskutočňuje napr. použitím dostupných softwarových programov, vrátene programom od GCG (U. Wisconsin) a GenBank zdrojov. Taktiež sa používali zverejnené sekvenčné databázy, napr. od GenBank a iných.
Mnohé techniky aplikovateľné na IL-10 receptory sa môžu aplikovať na DCRS5, ako je opísané napr. v US patente č. 5789192 (IL-10 receptor), ktorý je tu zahrnutý prostredníctvom jeho citácie.
II. Funkčné klonovanie
Pozorovalo sa, že anti-hlL-12Rp1 protilátka blokuje odpovede ľudských T buniek na p40/IL-B30, a že p40/IL-B30 sa viaže na IL-12RP1. Z toho vyplývalo, že IL-12Rp1 je jednou podjednotkou receptorového komplexu pre p40/IL-B30.
Identifikovala sa populácia myšacích T buniek, ktorá odpovedala na p40/ILB30, ale neodpovedala na IL-12, a iná populácia, ktorá odpovedala na IL-12, ale neodpovedala na p40/IL-B30. Okrem toho sa pozorovalo, že Ba/F3 bunky exprimujúce rekombinantnú mlL-12Rp1 a mlL-12Rp2 odpovedajú na IL-12, ale nie na p40/IL-B30. Z týchto výsledkov spoločne vyplývalo, že receptorový komplex pre p40/IL-B30 obsahuje IL-12RP1 a aspoň jednu inú podjednotku, ktorou nie je IL12β2. V súlade s tým sa navrhla expresná klonovacia stratégia na izoláciu tohto druhého receptorového komonentu.
cDNA knižnica sa pripravila z mRNA izolovanej z Kit225 buniek, IL-2 dependentnej ľudskej T bunkovej línie, ktorá reaguje tak na IL-12, ako aj na p40/ILB30. cDNA knižnica sa vyrobila použitím retrovírusového expresného vektora pMX. Ba/F3 bunky exprimujúce rekombinantnú hlL-12Rp1 sa infikovali s touto cDNA knižnicou, nechali sa zotavovať 3 až 4 dní v IL-3, potom sa premyli a naniesli sa na 96-jamkové platne v množstve 15000 buniek na jamku v médiu obsahujúcom 50 ng/ml hyper-hp40/hlL-B30. Pozri WO 01/18051. Do kultúr sa každých 5 dní pridával ďalší hyper-hp40/hlL-B30. Po približne dvoch týždňoch vykazovalo bunkový rast 5
-56až 10 % jamiek. Bunky sa izolovali z každej jamky, jednotlivo sa expandovali na väčšie kultúry v hyper-hp40/hlL-B30 a testovali sa z hľadiska závislosti rastu na hyper-hp40/hlL-B30.
Bunky, ktorých rast bol závislý na p40/IL-B30, sa analyzovali prostredníctvom PCR na retrovírusové cDNA inzerty. Z viac ako 40 analyzovaných izolátov všetky, okrem jedného, obsahovali cDNA kódujúce novú receptorovú DCRS5. Táto kandidátska humánna cDNA sa klonovala v expresnom vektore a transfekovala sa do Ba/F3 buniek exprimujúcich hlL-12Rpi. Tieto bunky sa stali responzívnymi na p40/IL-B30, na základe čoho sme urobili záver, že nová cDNA kóduje požadovanú DCRS5, funkčnú IL-B30 receptorovú podjednotku.
III. Znaky kompletnej DCRS5; chromozomálna lokalizácia
Cytoplazmatická doména DCRS5 nie je celkovo blízko príbuzná s inými cytoplazmatickými doménami cytokínových receptorov, spoločným znakom v tejto rodine molekúl. Cytoplazmatická doména obsahuje sedem tyr zvyškov, z ktorých aspoň tri sú časťou rozoznávaných SH2-väzobných motívov: YEDI, YKPQ a YFPQ. YEDI motív je podobný s identifikovanými väzobnými miestami pre tyrozín fosfatázu shp2. Druhé dva motívy sú veľmi podobné so sekvenciami, o ktorých je známe, že viažu Statl/Stat3, respektíve Stat3. YKPQ motív sa spolu s ohraničujúcimi sekvenciami podobá do určitého stupňa motívom v Stat4 a v IL-12Rpi, o ktorých je známe, že viažu Statl-3. To je v súlade z predchádzajúcimi údajmi naznačujúcimi, že p40/IL-B30, podobne ako IL-12, aktivuje Stat4.
PCR primery odvodené od DCRS5 sekvencie sa používajú na sondovanie ľudskej cDNA knižnice. Sekvencie môžu byť odvodené napr. z tabuľky 1, výhodne sú to sekvencie v blízkosti konca sekvencií. Kompletné cDNA pre primátovú, hlodavčiu a iné druhy DCRS5 sa klonujú napr. prostredníctvom DNA hybridizačného skríningu Xgt10 fága. PCR reakcie sa uskutočňujú použitím T. aquaticus Tagplus DNA polymerázy (Stratagene) v príslušných podmienkach.
Pripravia sa chromozómové stery. Uskutoční sa in situ hybridizácia na chromozómových prípravkoch získaných z fytohemaglutinínom stimulovaných ľudských lymfocytov kultivovaných 72 hodín. Na posledných sedem hodín kultivácie
-57sa pridá 5-brómdeoxyuridín (60 pg/ml média), aby sa zaistila posthybridizácia chromozomálnych pásov v dobrej kvalite.
PCR fragment, amplifikovaný pomocou primérov, sa klonuje do príslušného vektora. Vektor sa označí nick-transláciou s 3H. Rádioaktívne značená sonda sa hybridizuje s metafázovými stermi v konečnej koncentrácii 200 ng/ml hybridizačného roztoku, ako je opísané v Mattei a ďalší (1985) Hum. Genet. 69: 327-331.
Po porytí s nukleárnou track emulziou (KODAK NTB2) sa rezy exponujú. Aby sa zabránilo skízavaniu strieborných zrniek v priebehu páskovania, chromozómové stery sa najprv farbia tlmeným Giemsovým roztokom a fotografujú sa v metafáze. R-páskovanie sa potom uskutočňuje metódou fluórchrómfotolýzy-Giemsa (FPG) a metafázy sa opäť fotografujú pred analýzou.
Podobné vhodné metódy sa používajú pre iné druhy.
IV. Lokalizácia DCRS5 mRNA
Ľudské multiplicitné tkanivo (kat. č. 1,2) a bloty rakovinovej bunkovej línie (kat. č. 7757-1), obsahujúce približne 2 pg poly(A)+RNA na dráhu, sa nakúpili od Clontech (Palo Alto, CA). Sondy sa rádioaktívne označili s [a-32P] dATP napr. použitím Amersham Rediprime random primerového značkovacieho kitu (RPN1633). Uskutočnila sa predhybridizácia a hybridizácie napr. pri 65 °C v 0,5M Na2HPC>4, 7% SDS, 0,5M EDTA (pH 8,0). Uskutočňovali sa premývania za veľmi prísnych podmienok, napr. pri 65 °C s dvoma počiatočnými premývaniami v 2x SSC, 0,1% SDS 40 minút, po ktorých nasledovalo premývanie v 0,1xSSC, 0,1% SDS 20 min. Membrány sa potom exponovali pri -70 °C na róntgenový film (Kodak) v prítomnosti intenzifikovaných tienidiel. Podrobnejšie štúdie prostredníctvom cDNA knižnicových Southern blotov sa uskutočnili s vybranými vhodnými humánnymi DCRS5 klonmi, aby sa skúmala ich expresia v hemopoetických alebo iných podtriedach buniek.
Alternatívne sa z tabuľky 1 vybrali dva vhodné priméry. RT-PCR sa použila na vhodnú mRNA vzorku selektovanú na prítomnosť kódu na produkciu cDNA, napr. vzorku, ktorá exprimuje gén.
-58Kompletné klony sa môžu izolovať hybridizáciou cDNA knižníc z príslušných tkanív vopred selektovaných prostredníctvom PCR signálu. Môžu sa uskutočniť
Northern bloty.
Správa pre gény kódujúce DCRS5 sa bude testovať prostredníctvom vhodnej technológie, napr. prostredníctvom PCR, imunotestom, hybridizáciou alebo inak. Tkanivové a orgánové cDNA prípravy sú dostupné napr. od Clontech, Mountain View, CA. Ako bolo opísané, je užitočná identifikácia zdrojov prirodzenej expresie. A identifikácia funkčného receptorového podjednotkového párovania umožňuje predpovedať, aké bunky exprimujú kombináciu receptorových podjednotiek, ktorej výsledkom bude fyziologická responzívnosť na každý z cytokínových ligandov.
Na určenie myšacej distribúcie sa môže uskutočňovať napr. Southern analýza: DNA (5 pg) z primárne amplifikovanej cDNA knižnice sa poštiepila s príslušnými reštrikčnými enzýmami, aby sa uvoľnili inzerty, nechali sa zbehnúť na 1% agarózovom géli a preniesli sa na nylonovú membránu (Schleicher and Schuell, Keene, NY).
Vzorky na izoláciu myšacej mRNA môžu zahŕňať: myšaciu fibroblastovú L bunkovú líniu v pokojovom štádiu (C200); Braf:ER (Braf fúziu s estrogénovým receptorom) transfekované bunky, kontrolu (C201); T bunky, TH1 polarizované (Mell4 jasný, CD4+ bunky zo sleziny, polarizované 7 dní s IFN-γ a anti-IL-4; T200); T bunky, TH2 polarizované (Mell4 jasný, CD4+ bunky zo sleziny, polarizované 7 dní s IL-4 a anti-IFN-γ; T201); T bunky, vysoko TH1 polarizované (pozri Openshaw a ďalší (1995) J. Exp. Med. 182: 1357-1367); aktivované s anti-CD3 2, 6, 16 h, spojené; T202); T bunky, vysoko TH2 polarizované (pozri Openshaw a ďalší (1995) J. Exp. Med. 182: 1357-1367; aktivované s anti-CD3 2, 6,16 hodín, spojené; T203); CD44-CD25+ pre T bunky, prebrané z týmusu (T204); TH1 T bunkový kloň D1.1, odpočívajúci 3 týždne po poslednej stimulácii s antigénom (T205); TH1 T bunkový kion D 1.1, 10 μg/ml ConA stimulovaný 15 hodín (T206); TH2 T bunkový kloň CDC35, odpočívajúci 3 týždne po poslednej stimulácii s antigénom (T207); TH2 T bunkový kloň CDC35, 10 pg/ml ConA stimulovaný 15 hodín (T208); Mell4+ naivné T bunky zo sleziny, v pokojovom štádiu (T209); Mell4+ T bunky, polarizované na TH1 s IFN-y/IL-12/anti-IL-4 6, 12, 24 hodín, spojené (T210); Mell4+ T bunky polarizované na Th2 s IL-4/anti-IFN-y 6, 13, 24 hodín, spojené (T211); nestimulované zrelé B
-59bunky leukemickej bunkovej línie A20 (B200); nestimulovaná B bunková línia CH 12 (B201); nestimulovaná veľké B bunky zo sleziny (B202); B bunky z celkovej sleziny, LPS aktivované (B203); metrizamidom obohatené dentritické bunky zo sleziny, v pokojovom štádiu (D200); dentritické bunky z kostnej drene, v pokojovom štádiu (D201); monocytová bunková línia RAW 264.7 aktivovaná s LPS 4 hodiny (M200); makrofágy kostnej drene derivované s GM a M-CSF (M201); makrofágová bunková línia J774, v pokojovom štádiu (M202); makrofágová bunková línia J774 + LPS + anti-IL-10 izolovaná po 0,5, 1, 3, 6, 12 hodinách, spojená (M203); makrofágová bunková línia J774 + LPS + IL-10 izolovaná po 0,5, 1, 3, 5, 12 hodinách (M204); aerosólom iniciované myšacie pľúcne tkanivo, Th2 primery, aerosól OVA iniciácia, spojené po 7, 14, 23 hodinách (pozri Garlis a ďalší (1995) Clinical Immunology and Immunopathology 75: 75-83; X206); pľúcne tkanivo infikované s Nippostrongulus (pozri Coffman a ďalší (1989) Science 245: 308-310; X200); celkové dospelé pľúca, normálne (0200); celkové pľúca, rag-1 (pozri Schwarz a ďalší (1993) Immunodeficiency 4: 249-252; 0205); IL-10 ΚΌ. slezina (pozri Kuhn a ďalší (1991) Celí 75: 263-274; X201); celková dospelá slezina, normálna (0201); celková slezina, rag-1 (0207); IL-10 K.O. Peyerové plaky (0202); celkové Peyerové plaky, normálne (0210); IL-10 K.O. mezentrické lymfatické uzliny (X203); celkové mezentrické lymfatické uzliny, normálne (0211); IL-10 K.O. hrubé črevo (X203); celkové hrubé črevo, normálne (0212); NOD myšací pankreas (pozri Makino a ďalší (1980) Jikken Dobutsu 29: 1-13; X205); celkový týmus rag-1 (0208); celková oblička, rag-1 (0209); celkové srdce, rag-1 (0202); celkový mozog, rag-1 (0203); celkové semenníky, rag-1 (0204); celková pečeň, rag-1 (0206); normálne potkanie spojivové tkanivo, 0300); a potkanie artritické spojivové tkanivo (X300).
Vzorky na izoláciu humánnej mRNA môžu zahŕňať: periférne krvné mononukleárne bunky (monocyty, T bunky, NK bunky, granulocyty, B bunky), v pokojovom štádiu (T100); periférne krvné mononukleárne bunky, aktivované s antiCD3 a spojené po 2, 6, 12 hodinách (T101); T bunky, THO kloň Mot 72, v pokojovom štádiu (T102); T bunky, THO kloň Mot 72, aktivované s anti-CD28 a antiCD3 3, 6, 12 hodín, spojené (T103); T bunky, THO kloň Mot 72, anergicky ošetrované so špecifickým peptidom 2, 7, 12 hodín, spojené (T104); T bunky, TH1 kloň HY06, v pokojovom štádiu (T107); T bunky, TH1 kloň HY06, aktivované s anti-60CD28 a anti-CD3 3, 6, 12 hodín, spojené (T108); T bunky, TH1 kloň HY06, anergicky ošetrované so špecifickým peptidom 2, 6, 12 hodín, spojené (T109); T bunky, TH2 kloň HY935, v pokojovom štádiu (T110); T bunky, TH2 kloň HY395, aktivované s anti-CD28 a anti-CD3 2, 7, 12 hodín, spojené (Till); T bunky CD4+CD45RO-T bunky polarizované 27 dní s anti-CD28, IL-4 a anti-IFN-γ, TH2 polarizované, aktivované s anti-CD3 a anti-CD28 4 hodiny (T116); T bunkové nádorové línie Jurkat a Hut78, v pokojovom štádiu (T 117); T bunkové klony, spojené AD130.2, Tc783.12, Tc783.13, Tc783.58, Tc782.69, v pokojovom štádiu (T118); T bunkové náhodné γδ T bunkové klony, v pokojovom štádiu (T119); splenocyty, v pokojovom štádiu (B100); splenocyty, aktivované s anti-CD40 a IL-4 (B101); B bunkové EBV línie, spojené WT49, RSB, JY, CVIR, 721.221, RM3, HSY, v pokojovom štádiu (B102); B bunková línia JY, aktivovaná s PMA a ionomycínom 1, 6 hodín, spojené (B 103); NK 20 klony, spojené, v pokojovom štádiu (K100); NK 20 klony, spojené, aktivované s PMA a ionomycínom 6 hodín (K101); NKL kloň, získaný od pacientov s periférnou leukémiou LGL, ošetrené s IL-2 (K106); NK cytotoxický kloň 640-A30-1, v pokojovom štádiu (K107); hematopoetická prekurzorová línia TF1, aktivovaná s PMA a ionomycínom 1, 6 hodín, spojená (C100); U937 premonocytová línia, v pokojovom štádiu (M100); U937 premonocytová línia, aktivovaná s PMA ionomycínom 1, 6 hodín, spojená (M101); preprané monocyty, aktivované s LPS, IFN-γ, anti-IL-10 1, 2, 6, 12, 24 hodín, spojené (M102); preprané monocyty, aktivované s LPS, IFN-γ, IL-10 1, 2, 6, 12, 24 hodín, spojené (M103); preprané monocyty, aktivované s LPS, IFN-γ, anti-IL-10 4, 16 hodín, spojené (M106); preprané monocyty, aktivované s LPS, IFN-γ, IL-10 4, 16 hodín, spojené (M107); preprané monocyty, aktivované s LPS 1 hodinu (M108); preprané monocyty, aktivované s LPS 6 hodín (M109); DC 70% CD1a+, z CD34+ GM-CSF, TNFa 12 dní, v pokojovom štádiu (D101); DC 70% CD1a+, z CD34+ GMCSF, TNFa 12 dní, aktivované s PMA a ionomycínom 1 hodinu (D102); DC 70% CD1a+, z CD34+ GM-CSF, TNFa 12 dní, aktivované s PMA a ionomycínom 6 hodín (D103); DC 95% CD1a+, z CD34+ GM-CSF, TNFa 12 dní FACS roztriedené, aktivované s PMA a ionomycínom 1, 6 hodín, spojené (D104); DC 95% CD1a+, z CD34+ GM-CSF, TNFa 12 dní FACS roztriedené, aktivované s PMA a
-61 ionomycínom 1, 6 hodín, spojené (D105); DC CD1a+ CD86+, z CD34+ GM-CSF, TNFa 12 dní FAC roztriedené, aktivované s PMA a ionomycínom 1, 6 hodín, spojené (K106); DC z monocytov GM-CSF, IL-4 5 dní, v pokojovom štádiu (D107); DC z monocytov GM-CSF, IL-4 5 dní, v pokojovom štádiu (D108); DC z monocytov GM CSF, IL-4 5 dní aktivované s LPS 4, 16 hodín, spojené (D109); DC z monocytov GM-CSF, IL-4 5 dní, aktivované s TNFa, monocytový šupe 4, 16 hodín, spojené (D110); leiomyómový Ll 1 benígny nádor (X101); normálne myometrium M5 (0115); malígny leiomyosarkóm GS1 (X103); pľúcna fibroblastová sarkómová línia MRC5, aktivovaná s PMA a ionomycínom 1, 6 hodín, spojená (C101); obličková epiteliálna karcinómová bunková línia CHA, aktivovaná s PMA a ionomycínom 1, 6 hodín, spojená (C102); obličky 28 týždňového plodu (0100); pľúca 28 týždňového plodu (0101); pečeň 28 týždňového plodu (0102); srdce 28 týždňového plodu (0103); mozog 28 týždňového plodu (0104); žlčník 28 týždňového plodu (0106); tenké črevo 28 týždňového plodu (0107); tukové tkanivo 28 týždňového plodu (0108); vaječník 25 týždňového plodu (0109); maternica 25 týždňového plodu (0110); semenník28 týždňového plodu (0111); slezina 28 týždňového plodu (0112); dospelá placenta (0113); zapálená mandľa od 12 ročného dieťaťa (X100).
Podobné vzorky môžu byť na hodnotenie izolované z iných druhov.
V. Klonovanie druhových náprotivkov DCRS5
Rôzne stratégie sa používajú na získanie druhových náprotivkov DCRS5, výhodne z primátov a hlodavcov. Jedným spôsobom je krížová hybridizácia použitím blízko príbuzných druhových DNA sond. Môže byť užitočný na prechod na evolučné podobné druhy, ako prechodný krok. Iný spôsob sa uskutočňuje prostredníctvom použitia špecifických PCR primérov a je založený na identifikácii blokov podobnosti alebo rozdielnosti medzi génmi, napr. oblastí vysoko konzervatívnej alebo nekonzervatívnej polypeptidovej alebo nukieotidovej sekvencie.
Prieskumy databáz môžu identifikovať podobné sekvencie a umožniť produkciu vhodných sond.
-62VI. Produkcia cicavčieho DCRS5 proteínu
Skonštruuje sa vhodný, napr. GST, fúzovaný konštrukt na expresiu napr. v E. coli. Napríklad sa skonštruuje myšací IGIF pGex plazmid a transformuje sa do E. coli. Čerstvo transformované bunky rastú napr. v LB médiu obsahujúcom 50 pg/ml ampicilínu a indukujú sa s IPTG (Sigma, St. Louis, MO). Po inkubovaní cez noc sa baktérie zozbierajú a pelety obsahujúce DCRS5 proteín sa izolujú. Pelety sa homogenizujú napr. v TE tlmivom roztoku (50 mM Tris-bázy pH 8,0, 10 mM EDTA and 2 mM pefabloc) v 2 litroch. Tento materiál sa trikrát pasážuje cez mikrofluidizér (Microfluidics, Newton, MA). Skvapalnený supernatant sa centrifuguje na Sorvall GS-3 rotor 1 hodinu pri 13000 ot./min. Výsledný supernatant obsahujúci cytokínový receptorový proteín sa prefiltruje a pasážuje sa na glutatión-SEPHAROSE kolóne ekvilibrovanej v 50 mM Tris-bázy pH 8,0. Frakcie obsahujúce DCRS5-GST fúzovaný proteín sa spoja a poštiepia napr. s trombínom (Enzýme Research Laboratories, Inc., South Bend, IN). Poštiepené spojené frakcie sa potom prepasážujú na Q-SEPHAROSE kolóne ekvilibrovanej v 50 mM Tris-bazy. Frakcie obsahujúce DCRS5 sa spoja a nariedia v studenej destilovanej H2O, aby sa znížila vodivosť, a znova sa prepasážujú cez čerstvú Q-Sepharose kolónu, samostatne alebo aj cez imunoafinitnú protilátkovú kolónu. Frakcie obsahujúce DCRS5 proteín sa spoja, rozdelia sa na alikvóty a uskladnia sa pri -70 °C.
Porovnanie CD spektra s cytokínovým receptorovým proteínom môže naznačiť, že proteín je správne poskladaný. Pozri Hazuda a ďalší (1969) J. Biol. Chem. 264:1689-1693.
VII. Príprava DCRS5 špecifických protilátok
Inbredné Balb/c myši sa imunizujú intraperitoneálne s rekombinantnými formami proteínu, napr. purifikovaným DCRS5 alebo stabilne transfekovanými NIH3T3 bunkami. Zvieratá sa stimulujú v príslušných časových bodoch s proteínom, s alebo bez ďalšieho adjuvans, aby sa lepšie stimulovala produkcia protilátok. Izoluje sa sérum, alebo sa vyprodukujú hybridómy z izolovaných slezín.
Alternatívne, Balb/c myši sa imunizujú s bunkami transformovanými génom alebo jeho fragmentárni, buď endogénnymi, alebo exogénnymi bunkami, alebo s izolovanými membránami obohatenými z hľadiska expresie antigénu. V príslušnom
-63čase sa izoluje sérum, typicky po mnohých ďalších podaniach. Užitočné môžu byť rôzne génové terapeutické techniky, napr. pri produkcií proteínu in situ na generovanie imunologickej odpovede. Sérové alebo protilátkové prípravky sa môžu krížovo absorbovať alebo imunoselektovať, aby sa pripravili v podstate purifikované protilátky s definovanou špecificitou a vysokou afinitou.
Môžu sa vyrobiť monoklonálne protilátky. Napríklad, splenocyty sa fúzujú s vhodným fúzovacím partnerom a hybridómy sa selektujú v rastovom médiu štandardnými postupmi. Hybridómové supernatanty sa skrínujú na prítomnosť protilátok, ktoré sa viažu na DCRS5, napr. prostredníctvom ELISA alebo iným testom. Môžu sa selektovať alebo pripraviť protilátky, ktoré špecificky rozoznávajú DCRS5 uskutočnenia.
Pri inom spôsobe sa syntetické peptidy alebo purifikovaný proteín prezentujú imunitnému systému, aby sa generovali monoklonálne alebo polyklonálne protilátky. Pozri napr. Coligan (vyd. 1991) Current Protocols in Immunology Wiley/Greene; a Harlow and Lane (1989) Antibodies: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Press. Vo vhodných situáciách sa väzobné reakčné činidlo buď označí, ako je opísané vyššie, napr. fluorescenčné alebo iným spôsobom, alebo sa imobilizuje na substrát, aby sa mohli uskutočňovať panning spôsoby. Nukleové kyseliny sa môžu začleniť do buniek vo zvierati, aby sa produkoval antigén, ktorý slúži na vyvolanie imunitnej odpovede. Pozri napr. Wang a ďalší (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. 90: 4156-4160; Barry a ďalší (1994) BioTechniques 16: 616-619; a Xiang a ďalší (1995) Immunity 2: 129-135.
VIII. Produkcia fúzovaných proteínov s DCRS5
Rôzne fúzované konštrukty sa vyrábajú s DCRS5, vrátane uskutočnení, v ktorých sa kombinuje s IL-12Rpi sekvenciou. Časť príslušného génu sa fúzuje s epitopovým príveskom, napr. FLAG príveskom, alebo s dvojhybridným systémovým konštruktom. Pozri napr. Fields a Song (1989) Náture 340: 245-246.
Epitopový prívesok sa môže použiť na expresný klonovací postup s detekciu prostredníctvom anti-FLAG protilátok, aby sa detegoval väzobný partner, napr. ligand pre príslušný cytokínový receptor. Dvojhybridný systém môže byť použitý aj na izoláciu proteínov, ktoré sa špecificky viažu na DCRS5.
-64IX. Vzťah štruktúry a aktivity
Informácia o nevyhnutnosti konkrétnych zvyškov sa determinuje použitím štandardných postupov a analýz. Uskutočňuje sa štandardná mutagenézová analýza, napr. prostredníctvom generovania mnohých rozličných variantov v daných polohách, napr. vo vyššie uvedených polohách, a hodnotia sa biologické aktivity variantov. To sa môže uskutočňovať v rozsahu determinovania polôh, ktoré modifikujú aktivitu, alebo je možné zameranie na špecifické polohy, aby sa determinovali zvyšky, ktoré môžu byť substituované buď na účely zachovania, alebo blokovania, alebo modulácie biologickej aktivity.
Alternatívne môže z analýzy prirodzených variantov vyplynúť, ktoré polohy tolerujú prirodzené mutácie. To môže byť výsledkom populačnej analýzy odchýlok medzi jedincami alebo kmeňmi alebo druhmi. Vzorky od vybraných jedincov sa analyzujú, napr. PCR analýzou, a sekvenujú. To umožňuje hodnotenie populačných polymorfizmov.
X. Koexpresia DCRS5 a IL-12Rpi
Vektor alebo vektory, kódujúce príslušné gény, sa môžu transfekovať do bunky. Výhodne bude mať takýto vektor selekčné markery na identifikáciu buniek, ktoré boli úspešne transformované. Koexpresia dvoch génov umožní génovým produktom správne sa asociovať a vytvoriť aktívne receptorové komplexy.
Alternatívne je dostupné použitie metód spôsobujúcich asociáciu funkčných dimérov. Pozri napr. O'Shea a ďalší (1989) Science 245: 646-648; Kostelny a ďalší (1992) J. Immunol. 148: 1547-1553; a Patel a ďalší (1996) J. Biol. Chem. 271: 30386-30391. Expresia extracelulárnych domén a fyzikálna asociácia, napr. sprostredkovaná afinitou Fos/Jun leucínového zipsu, bude viesť k ligandovým väzobným konštruktom, ktoré by mohli slúžiť ako väzobné zlúčeniny na diagnostické alebo terapeutické použitia.
Všetky tu uvedené citácie sú tu zahrnuté prostredníctvom ich referencie v rovnakom rozsahu ako keby bola každá publikácia alebo prihláška vynálezu konkrétne a jednotlivo uvedená.
Je možné urobiť mnohé modifikácie a variácie tohto vynálezu bez toho, aby sa vybočilo z ducha a rozsahu vynálezu, ako bude zrejmé priemernému odborníkovi
-65v oblasti. Tu opísané konkrétne uskutočnenia sú poskytnuté len ako príklad a vynález je obmedzený len pripojenými nárokmi spolu s celým rozsahom ekvivalentov, ktoré vyplývajú z nárokov. Vynález nie je obmedzený konkrétnymi uskutočneniami, ktoré sú tu prezentované len ako príklady.
-66Zoznam sekvencií <110> Schering Corporation <120> Cicavčie receptorové proteíny, príbuzné reakčné činidlá a spôsoby <130> DX01074 <140> PCT/US01/15057 <150> US 60/203426 <151 >2000-05-10 <160> 5 <170> Patentln Ver. 2.0 <210> 1 <211 >2859 <212> DNA <213> neznámy <220>
<223> Opis neznámeho organizmu: primát; predpokladá sa, že Homo sapiens <220>
<221>CDS <222> (119)..(2005) <220>
<221 > mat peptid <222> (188)..(2005) <220>
<221> rôzne znaky <222> (1)..(2859) <223> Xaa translácie závisia na genetickom kóde <400> 1 gtggtacggg aattccattg tgttgggcag ccaacaaggg tggcagcctg gctctgaagt 60 ggaattatgt gcttcaaaca ggttgaaaga gggaaacagt cttttcctgc ttccagac 118
| atg | aat | c ak | gtc | act | att | caa | tgg | gat | gca | gta | ata | gcc | ctt | tac | ata |
| Met | Asn | Xaa | Val | Thr | íle | Gin | Trp | Asp | Ala | Val | íle | Ala | Leu | Tyr | íle |
| -20 | -15 | -10 | |||||||||||||
| ctc | ttc | agc | tgg | tgt | cat | gga | gga | att | aca | aat | ata | aac | tgc | tct | ggc |
| Leu | Phe | Ser | Trp | Cys | His | Gly | Gly | íle | Thr | Asn | íle | Asn | Cys | Ser | Gly |
| -5 | -1 | 1 | 5 |
| cac | atc | tgg | gta | gaa | cca | gcc | aca | att | ttt | aag | atg | ggt | atg | aat | atc |
| His | Ile | Trp | Val | Glu | Pro | Ala | Thr | Ile | Phe | Lys | Met | Gly | Met | Asn | Ile |
| 10 | 15 | 20 | 25 | ||||||||||||
| tet | ata | tat | tgc | caa | gca | gca | att | aag | aac | tgc | caa | cca | agg | aaa | ctt |
| Ser | Ile | Tyr | Cys | Gin | Ala | Ala | Ilô | Lys | Asn | Cys | Gin | Pro | Arg | Lys | Leu |
| 30 | 35 | 40 | |||||||||||||
| cat | ttt | tat | aaa | aat | ggc | atc | aaa | gaa | aga | ttt | caa | atc | aca | agg | att |
| His | Phe | Tyr | Lys | Asn | Gly | Ile | Lys | Glu | Arg | Phe | Gin | Ile | Thr | Arg | Ile |
| 45 | 50 | 55 | |||||||||||||
| aat | aaa | aca | aca | get | cgg | ctt | tgg | tat | aaa | aac | ttt | ctg | gaa | cca | cat |
| Asn | Lys | Thr | Thr | Ala | Arg | Leu | Trp | Tyr | Lys | Asn | Phe | Leu | Glu | Pro | His |
| 60 | 65 | 70 | |||||||||||||
| get | tet | atg | tac | tgc | act | get | gaa | tgt | CCC | aaa | cat | ttt | caa | gag | aca |
| Ala | Ser | Met | Tyr | Cys | Thr | Ala | Glu | Cys | Pro | Lys | His | Phe | Gin | Glu | Thr |
| 75 | 80 | 85 | |||||||||||||
| ctg | ata | tgt | gga | aaa | gac | att | tet | tet | gga | tat | ccg | cca | gat | att | cct |
| Leu | íle | Cys | Gly | Lys | Asp | Ile | Ser | Ser | Gly | Tyr | Pro | Pro | Asp | Ile | Pro |
| 90 | 95 | 100 | 105 | ||||||||||||
| gat | gaa | gta | acc | tgt | gtc | att | tat | gaa | tat | tca | ggc | aac | atg | act | tgc |
| Asp | Glu | Val | Thr | Cys | Val | Ile | Tyr | Glu | Tyr | Ser | Gly | Asn | Met | Thr | Cys |
| 110 | 115 | 120 | |||||||||||||
| acc | tgg | aat | get | rgg | aag | ctc | acc | tac | ata | gac | aca | aaa | tac | gtg | gta |
| Thr | Trp | Asn | Ala | Xaa | Lys | Leu | Thr | Tyr | Ile | Asp | Thr | Lys | Tyr | Val | Val |
| 125 | 130 | 135 | |||||||||||||
| cat | gtg | aag | agt | tta | gag | aca | gaa | gaa | gag | caa | cag | tat | ctc | acc | tca |
| His | Val | Lys | Ser | Leu | Glu | Thr | Glu | Glu | Glu | Gin | Gin | Tyr | Leu | Thr | Ser |
| 140 | 145 | 150 | |||||||||||||
| age | tat | att | aac | atc | tcc | act | gat | tca | tta | caa | ggt | ggc | aag | aag | tac |
| Ser | Tyr | Ile | Asn | Ile | Ser | Thr | Asp | Ser | Leu | Gin | Gly | Gly | Lys | Lys | Tyr |
| 155 | 160 | 165 | |||||||||||||
| ttg | gtt | tgg | gtc | caa | gca | gca | aac | gca | cta | ggc | atg | gaa | gag | tca | aaa |
| Leu | Val | Trp | Val | Gin | Ala | Ala | Asn | Ala | Leu | Gly | Met | Glu | Glu | Ser | Lys |
| 170 | 175 | 180 | 185 | ||||||||||||
| caa | ctg | caa | att | cac | ctg | gat | gat | ata | gtg | ata | cct | tet | gca | gcc | gtc |
| Gin | Leu | Gin | Ile | His | Leu | Asp | Asp | Ile | Val | Ile | Pro | Ser | Ala | Ala | Val |
| 190 | 195 | 200 | |||||||||||||
| att | tcc | agg | get | gag | act | ata | aat | get | aca | gtg | CCC | aag | acc | ata | att |
| Ile | Ser | Arg | Ala | Glu | Thr | Ile | Asn | Ala | Thr | Val | Pro | Lys | Thr | Ile | Ile |
| 205 | 210 | 215 | |||||||||||||
| tat | tgg | gat | agt | caa | aca | aca | att | gaa | aag | gtt | tcc | tgt | gaa | atg | aga |
| Tyr | Trp | Asp | Ser | Gin | Thr | Thr | Ile | Glu | Lys | Val | Ser | Cys | Glu | Met | Arg |
| 220 | 225 | 230 | |||||||||||||
| tac | aag | get | aca | aca | aac | caa | act | tgg | aat | gtt | aaa | gaa | ttt | gac | acc |
| Tyr | Lys | Ala | Thr | Thr | Asn | Gin | Thr | Trp | Asn | Val | Lys | Glu | Phe | Asp | Thr |
| 235 | 240 | 245 | |||||||||||||
| aat | ttt | aca | tat | gtg | caa | cag | tca | gaa | ttc | tac | ttg | gag | cca | aac | att |
| Asn | Phe | Thr | Tyr | Val | Gin | Gin | Ser | Glu | Phe | Tyr | Leu | Glu | Pro | Asn | Ile |
| 250 | 255 | 260 | 265 | ||||||||||||
| aag | tac | gta | ttt | caa | gtg | aga | tgt | caa | gaa | aca | ggc | aaa | agg | tac | tgg |
| Lys | Tyr | Val | Phe | Gin | Val | Arg | Cys | Gin | Glu | Thr | Gly | Lys | Arg | Tyr | Trp |
| 270 | 275 | 280 | |||||||||||||
| cag | cct | tgg | agt | tca | ccg | ttt | ttt | cat | aaa | aca | cct | gaa | aca | gtt | CCC |
| Gin | Pro | Trp | Ser | Ser | Pro | Phe | Phe | His | Lys | Thr | Pro | Glu | Thr | Val | Pro |
| 285 | 290 | 295 | |||||||||||||
| cag | gtc | aca | tca | aaa | gca | ttc | caa | cat | gac | aca | tgg | aat | tet | ggg | cta |
| Gin | Val | Thr | Ser | Lys | Ala | Phe | Gin | His | Asp | Thr | Trp | Asn | Ser | Gly | Leu |
| 300 | 305 | 310 |
262
310
358
406
454
502
550
598
646
694
742
790
838
886
934
982
1030
1078
1126
| aca | gtt | get | tcc | atc | tet | aca | ggg | cac | ctt | act | tet | gac | aac | aga | gga |
| Thr | Val | Ala | Ser | íle | Ser | Thr | Gly | His | Leu | Thr | Ser | Asp | Asn | Arg | Gly |
| 315 | 320 | 325 | |||||||||||||
| gac | att | 99a | ctt | tta | ttg | gga | atg | atc | gtc | ttt | get | gtt | atg | ttg | tca |
| Asp | íle | Gly | Leu | Leu | Leu | Gly | Met | íle | Val | Phe | Ala | Val | Met | Leu | Ser |
| 330 | 335 | 340 | 345 | ||||||||||||
| atti | ctt | tet | ttg | att | ggg | ata | ttt | aac | aga | tca | ttc | ega | act | ggg | att |
| íle | Leu | Ser | Leu | íle | Gly | íle | Phe | Asn | Arg | Ser | Phe | Arg | Thr | Gly | íle |
| 350 | 355 | 360 | |||||||||||||
| aaa | aga | agg | atc | tta | ttg | tta | ata | cca | aag | tgg | ctt | tat | gaa | gat | att |
| Lys | Arg | Arg | íle | Leu | Leu | Leu | íle | Pro | Lys | Trp | Leu | Tyr | Glu | Asp | íle |
| 365 | 370 | 375 | |||||||||||||
| cct | aat | atg | aaa | aac | age | aat | gtt | gtg | aaa | atg | cta | cag | gaa | aat | agt |
| Pro | Asn | Met | Lys | Asn | Ser | Asn | Val | Val | Lys | Met | Leu | Gin | Glu | Asn | Ser |
| 380 | 385 | 390 | |||||||||||||
| gaa | ctt | atg | aat | aat | aat | tcc | agt | gag | cag | gtc | cta | tat | gtt | gat | CCC |
| Glu | Leu | Met | Asn | Asn | Asn | Ser | Ser | Glu | Gin | Val | Leu | Tyr | Val | Asp | Pro |
| 395 | 400 | 405 | |||||||||||||
| atg | att | aca | gag | ata | aaa | gaa | atc | ttc | atc | cca | gaa | cac | aag | cct | aca |
| Met | íle | Thr | Glu | íle | Lys | Glu | íle | Phe | íle | Pro | Glu | His | Lys | Pro | Thr |
| 410 | 415 | 420 | 425 | ||||||||||||
| gac | tac | aag | aag | gag | aat | aca | gga | CCC | ctg | gag | aca | aga | gac | tac | ccg |
| Asp | Tyr | Lys | Lys | Glu | Asn | Thr | Gly | Pro | Leu | Glu | Thr | Arg | Asp | Tyr | Pro |
| 430 | 435 | 440 | |||||||||||||
| caa | aac | tcg | cta | ttc | gac | aat | act | aca | gtt | gta | tat | att | cct | gat | ctc |
| Gin | Asn | Ser | Leu | Phe | Asp | Asn | Thr | Thr | Val | Val | Tyr | íle | Pro | Asp | Leu |
| 445 | 450 | 455 | |||||||||||||
| aac | act | gga | tat | aaa | CCC | caa | att | tca | aat | ttt | ctg | cct | gag | gga | age |
| Asn | Thr | Gly | Tyr | Lys | Pro | Gin | íle | Ser | Asn | Phe | Leu | Pro | Glu | Gly | Ser |
| 460 | 465 | 470 | |||||||||||||
| cat | ctc | age | aat | aat | aat | gaa | att | act | tcc | tta | aca | ctt | aaa | cca | cca |
| His | Leu | Ser | Asn | Asn | Asn | Glu | íle | Thr | Ser | Leu | Thr | Leu | Lys | Pro | Pro |
| 475 | 480 | 485 | |||||||||||||
| gtt | gat | tcc | tta | gac | tca | gga | aat | aat | CCC | agg | tta | caa | aag | cat | cct |
| Val | Asp | Ser | Leu | Asp | Ser | Gly | Asn | Asn | Pro | Arg | Leu | Gin | Lys | His | Pro |
| 490 | 495 | 500 | 505 | ||||||||||||
| aat | ttt | get | ttt | tet | gtt | tca | agt | gtg | aat | tca | cta | age | aac | aca | ata |
| Asn | Phe | Ala | Phe | Ser | Val | Ser | Ser | Val | Asn | Ser | Leu | Ser | Asn | Thr | íle |
| 510 | 515 | 520 | |||||||||||||
| ttt | ctt | gga | gaa | tta | age | ctc | ata | tta | aat | caa | gga | gaa | tgc | agt | tet |
| Phe | Leu | Gly | Glu | Leu | Ser | Leu | íle | Leu | Asn | Gin | Gly | Glu | Cys | Ser | Ser |
| 525 | 530 | 535 | |||||||||||||
| cct | gac | ata | caa | aac | tca | gta | gag | gag | gaa | acc | acc | atg | ctt | ttg | gaa |
| Pro | Asp | íle | Gin | Asn | Ser | Val | Glu | Glu | Glu | Thr | Thr | Met | Leu | Leu | Glu |
| 540 | 545 | 550 | |||||||||||||
| aat | gat | tca | CCC | agt | gaa | act | att | cca | gaa | cag | acc | ctg | ctt | cct | gat |
| Asn | Asp | Ser | Pro | Ser | Glu | Thr | íle | Pro | Glu | Gin | Thr | Leu | Leu | Pro | Asp |
| 555 | 560 | 565 | |||||||||||||
| gaa | ttt | gtc | tcc | tgt | ttg | ggg | atc | gtg | aat | gag | gag | ttg | cca | tet | att |
| Glu | Phe | Val | Ser | Cys | Leu | Gly | íle | Val | Asn | Glu | Glu | Leu | Pro | Ser | íle |
| 570 | 575 | 580 | 585 | ||||||||||||
| aat | act | tat | ttt | cca | caa | aat | att | ttg | gaa | age | cac | ttc | aat | agg | att |
| Asn | Thr | Tyr | Phe | Pro | Gin | Asn | íle | Leu | Glu | Ser | His | Phe | Asn | Arg | íle |
| 590 | 595 | 600 |
tca ctc ttg gaa aag tagagctgtg tggtcaaaat caatatgaga aagctgcctt Ser Leu Leu Glu Lys
605
1174
1222
1270
1318
1366
1414
1462
1510
1558
1606
1654
1702
1750
1798
1846
1894
1942
1990
2045
-69gcaatctgaa cttgggtttt ccctgcaata gaaattgaat tctgcctctt tttgaaaaaa 2105 atgtattcac atacaaatct tcacatggac acatgttttc atttcccttg gataaatacc 2165 taggtagggg attgctgggc catatgataa gcatatgttt cagttctacc aatcttgttt 2225 ccagagtagt gacatttctg tgctcctacc atcaccatgt aagaattccc gggagctcca 2285 tgccttttta attttagcca ttcttctgcc tmatttctta aaattagaga attaaggtcc 2345 cgaaggtgga acatgcttca tggtcacaca tacaggcaca aaaacagcat tatgtggacg 2405 cctcatgtat tttttataga gtcaactatt tcctctttat tttccctcat tgaaagatgc 2465 aaaacagctc tctattgtgt acagaaaggg taaataatgc aaaatacctg gtagtaaaat 2525 aaatgctgaa aattttcctt taaaatagaa tcattaggcc aggcgtggtg gctcatgctt 2585 gtaatcccag cactttggta ggctgaggtr ggtggatcac ctgaggtcag gagttcgagt 2645 ccagcctggc caatatgctg aaaccctgtc tctactaaaa ttacaaaaat tagccggcca 2705 tggtggcagg tgcttgtaat cccagctact tgggaggctg aggcaggaga atcacttgaa 2765 ccaggaaggc agaggttgca ctgagctgag attgtgccac tgcactccag cctgggcaac 2825 aagagcaaaa ctctgtctgg aaaaaaaaaa aaaa 2859 <210>2 <211 >629 <212> PRT <213> neznámy <400> 2
| Met | Asn | Xaa | Val -20 | Thr | íle | Gin | Trp | Asp -15 | Ala | Val | Íle | Ala | Leu -10 | Tyr | íle |
| Leu | Phe | Ser -5 | Trp | Cys | His | Gly -1 | Gly 1 | Íle | Thr | Asn | íle 5 | Asn | Cys | Ser | Gly |
| His 10 | íle | Trp | Val | Glu | Pro 15 | Ala | Thr | Íle | Phe | Lys 20 | Met | Gly | Met | Asn | íle 25 |
| Ser | íle | Tyr | Cys | Gin 30 | Ala | Ala | Íle | Lys | Asn 35 | Cys | Gin | Pro | Arg | Lys 40 | Leu |
| His | Phe | Tyr | Lys 45 | Asn | Gly | íle | Lys | Glu 50 | Arg | Phe | Gin | íle | Thr 55 | Arg | íle |
| Asn | Lys | Thr 60 | Thr | Ala | Arg | Leu | Trp 65 | Tyr | Lys | Asn | Phe | Leu 70 | Glu | Pro | His |
| Ala | Ser 75 | Met | Tyr | Cys | Thr | Ala 80 | Glu | Cys | Pro | Lys | His 85 | Phe | Gin | Glu | Thr |
| Leu 90 | íle | Cys | Gly | Lys | Asp 95 | íle | Ser | Ser | Gly | Tyr 100 | Pro | Pro | Asp | Íle | Pro 105 |
| Asp | Glu | Val | Thr | Cys 110 | Val | Zle | Tyr | Glu | Tyr 115 | Ser | Gly | Asn | Met | Thr 120 | Cys |
| Thr | Trp | Asn | Ala 125 | Xaa | Lys | Leu | Thr | Tyr 130 | íle | Asp | Thr | Lys | Tyr 135 | Val | Val |
| His | Val | Lys 140 | Ser | Leu | Glu | Thr | Glu 145 | Glu | Glu | Gin | Gin | Tyr 150 | Leu | Thr | Ser |
| Ser | Tyr 155 | íle | Asn | íle | Ser | Thr 160 | Asp | Ser | Leu | Gin | Gly 165 | Gly | Lys | Lys | Tyr |
| Leu 170 | Val | Trp | Val | Gin | Ala 175 | Ala | Asn | Ala | Leu | Gly 180 | Met | Glu | Glu | Ser | Lys 185 |
| Gin | Leu | Gin | íle | His 190 | Leu | Asp | Asp | íle | Val 195 | íle | Pro | Ser | Ala | Ala 200 | Val |
| íle | Ser | Arg | Ala 205 | Glu | Thr | íle | Asn | Ala 210 | Thr | Val | Pro | Lys | Thr 215 | Íle | íle |
| Tyr | Trp | Asp 220 | Ser | Gin | Thr | Thr | íle 225 | Glu | Lys | Val | Ser | Cys 230 | Glu | Met | Arg |
| Tyr | Lys 235 | Ala | Thr | Thr | Asn | Gin 240 | Thr | Trp | Asn | Val | Lys 245 | Glu | Phe | Asp | Thr |
| Asn | Phe | Thr | Tyr | Val | Gin | Gin | Ser | Glu | Phe | Tyr | Leu | Glu | Pro | Asn | Ile |
| 250 | 255 | 260 | 265 | ||||||||||||
| Lys | Tyr | Val | Phe | Gin | Val | Arg | Cys | Gin | Glu | Thr | Gly | Lys | Arg | Tyr | Trp |
| 270 | 275 | 280 | |||||||||||||
| Gin | Pro | Trp | Ser | Ser | Pro | Phe | Phe | His | Lys | Thr | Pro | Glu | Thr | Val | Pro |
| 285 | 290 | 295 | |||||||||||||
| Gin | Val | Thr | Ser | Lys | Ala | Phe | Gin | His | Asp | Thr | Trp | Asn | Ser | Gly | Leu |
| 300 | 305 | 310 | |||||||||||||
| Thr | Val | Ala | Ser | Ile | Ser | Thr | Gly | His | Leu | Thr | Ser | Asp | Asn | Arg | Gly |
| 315 | 320 | 325 | |||||||||||||
| Asp | Ile | Gly | Leu | Leu | Leu | Gly | Met | íle | Val | Phe | Ala | Val | Met | Leu | Ser |
| 330 | 335 | 340 | 345 | ||||||||||||
| Ile | Leu | Ser | Leu | Ile | Gly | Ile | Phe | Asn | Arg | Ser | Phe | Arg | Thr | Gly | Ile |
| 350 | 355 | 360 | |||||||||||||
| Lys | Arg | Arg | íle | Leu | Leu | Leu | Ile | Pro | Lys | Trp | Leu | Tyr | Glu | Asp | Ile |
| 365 | 370 | 375 | |||||||||||||
| Pro | Asn | Met | Lys | Asn | Ser | Asn | Val | Val | Lys | Met | Leu | Gin | Glu | Asn | Ser |
| 380 | 385 | 390 | |||||||||||||
| Glu | Leu | Met | Asn | Asn | Asn | Ser | Ser | Glu | Gin | Val | Leu | Tyr | Val | Asp | Pro |
| 395 | 400 | 405 | |||||||||||||
| Met | íle | Thr | Glu | íle | Lys | Glu | Ile | Phe | Ile | Pro | Glu | His | Lys | Pro | Thr |
| 410 | 415 | 420 | 425 | ||||||||||||
| Asp | Tyr | Lys | Lys | Glu | Asn | Thr | Gly | Pro | Leu | Glu | Thr | Arg | Asp | Tyr | Pro |
| 430 | 435 | 440 | |||||||||||||
| Gin | Asn | Ser | Leu | Phe | Asp | Asn | Thr | Thr | Val | Val | Tyr | Íle | Pro | Asp | Leu |
| 445 | 450 | 455 | |||||||||||||
| Asn | Thr | Gly | Tyr | Lys | Pro | Gin | íle | Ser | Asn | Phe | Leu | Pro | Glu | Gly | Ser |
| 460 | 465 | 470 | |||||||||||||
| His | Leu | Ser | Asn | Asn | Asn | Glu | íle | Thr | Ser | Leu | Thr | Leu | Lys | Pro | Pro |
| 475 | 480 | 485 | |||||||||||||
| Val | Asp | Ser | Leu | Asp | Ser | Gly | Asn | Asn | Pro | Arg | Leu | Gin | Lys | His | Pro |
| 490 | 495 | 500 | 505 | ||||||||||||
| Asn | Phe | Ala | Phe | Ser | Val | Ser | Ser | Val | Asn | Ser | Leu | Ser | Asn | Thr | Ile |
| 510 | 515 | 520 | |||||||||||||
| Phe | Leu | Gly | Glu | Leu | Ser | Leu | Ile | Leu | Asn | Gin | Gly | Glu | Cys | Ser | Ser |
| 525 | 530 | 535 | |||||||||||||
| Pro | Asp | Ile | Gin | Asn | Ser | Val | Glu | Glu | Glu | Thr | Thr | Met | Leu | Leu | Glu |
| 540 | 545 | 550 | |||||||||||||
| Asn | Asp | Ser | Pro | Ser | Glu | Thr | Ile | Pro | Glu | Gin | Thr | Leu | Leu | Pro | Asp |
| 555 | 560 | 565 | |||||||||||||
| Glu | Phe | Val | Ser | Cys | Leu | Gly | Ile | Val | Asn | Glu | Glu | Leu | Pro | Ser | Ile |
| 570 | 575 | 580 | 585 | ||||||||||||
| Asn | Thr | Tyr | Phe | Pro | Gin | Asn | Ile | Leu | Glu | Ser | His | Phe | Asn | Arg | Ile |
| 590 | 595 | 600 | |||||||||||||
| Ser | Leu | Leu | Glu | Lys | |||||||||||
| 605 |
<210>3 <211> 1887 <212> DNA <213> reverzná translácia <220>
<221 > rôzne znaky <222> (1)..(1887) <223> η môže byť a, c, g alebo t
-71 <400> 3 atgaaycayg tnacnathca rtgggaygcn gtnathgcny tntayathyt nttywsntgg 60 tgycayggng gnathacnaa yathaaytgy wsnggncaya thtgggtnga rccngcnacn 120 athttyaara tgggnatgaa yathwsnath taytgycarg cngcnathaa raaytgycar 180 ccnmgnaary tncayttyta yaaraayggn athaargarm gnttycarat hacnmgnath 240 aayaaracna cngcnmgnyt ntggtayaar aayttyytng arccncaygc nwsnatgtay 300 tgyacngcng artgyccnaa rcayttycar garacnytna thtgyggnaa rgayathwan 360 wsnggntayc cnccngayat hccngaygar gtnacntgyg tnathtayga rtaywsnggn 420 aayatgacnt gyacntggaa ygcnmgnaar ytnacntaya thgayacnaa rtaygtngtn 480 caygtnaarw snytngarac ngargargar carcartayy tnacnwsnws ntayathaay 540 athwsnacng aywsnytnca rggnggnaar aartayytng tntgggtnca rgcngcnaay 600 gcnytnggna tggargarws naarcarytn carathcayy tngaygayat hgtnathccn 660 wsngcngcng tnathwsnmg ngcngaracn athaaygcna cngtnccnaa racnathath 720 taytgggayw sncaracnac nathgaraar gtnwsntgyg aratgmgnta yaargcnacn 780 acnaaycara cntggaaygt naargartty gayacnaayt tyacntaygt ncarcarwsn 840 garttytayy tngarccnaa yathaartay gtnttycarg tnmgntgyca rgaracnggn 900 aarmgntayt ggcarccntg gwsnwsnccn ttyttycaya aracnccnga racngtnccn 960 cargtnacnw snaargcntt ycarcaygay acntggaayw snggnytnac ngtngcnwsn 1020 athwsnacng gncayytnac nwsngayaay mgnggngaya thggnytnyt nytnggnatg 1080 athgtnttyg cngtnatgyt nwsnathytn wsnytnathg gnathttyaa ymgnwsntty 1140 mgnacnggna thaarmgnmg nathytnytn ytnathccna artggytnta ygargayath 1200 ccnaayatga araaywsnaa ygtngtnaar atgytncarg araaywsnga rytnatgaay 1260 aayaaywsnw sngarcargt nytntaygtn gayccnatga thacngarat haargarath 1320 ttyathccng arcayaarcc nacngaytay aaraargara ayacnggncc nytngaracn 1380 mgngaytayc cncaraayws nytnttygay aayacnacng tngtntayat hccngayytn 1440 aayacnggnt ayaarccnca rathwsnaay ttyytnccng arggnwsnca yytnwsnaay 1500 aayaaygara thacnwsnyt nacnytnaar ccnccngtng aywsnytnga ywsnggnaay 1560 aayccnmgny tncaraarca yccnaaytty gcnttywsng tnwsnwsngt naaywsnytn 1620 wsnaayacna thttyytngg ngarytnwsn ytnathytna aycarggnga rtgywsnwsn 1680 ccngayathc araaywsngt ngargargar acnacnatgy tnytngaraa ygaywsnccn 1740 wsngaracna thccngarca racnytnytn ccngaygart tygtnwsntg yytnggnath 1800 gtnaaygarg arytnccnws nathaayacn tayttyccnc araayathyt ngarwsncay 1860 ttyaaymgna thwsnytnyt ngaraar 1887 <210>4 <211> 918 <212> PRT <213> neznámy <220>
<223> Opis neznámeho organizmu: primát; pravdepodobne Homo sapiens <400> 4
| Met 1 | Leu Thr Leu | Gin 5 | Thr | Trp | Val Val | Gin 10 | Ala Leu Phe | íle | Phe 15 | Leu | |||||
| Thr | Thr | Glu | Ser | Thr | Gly | Glu | Leu | Leu | Asp | Pro | Cys | Gly | Tyr | íle | Ser |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Pro | Glu | Ser | Pro | Val | Val | Gin | Leu | His | Ser | Asn | Phe | Thr | Ala | Val | Cys |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| Val | Leu | Lys | Glu | Lys | Cys | Met | Asp | Tyr | Phe | His | Val | Asn | Ala | Asn | Tyr |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| íle | Val | Trp | Lys | Thr | Asn | His | Phe | Thr | íle | Pro | Lys | Glu | Gin | Tyr | Thr |
| 65 | 70 | 75 | 80 |
| íle | íle | Asn | Arg Thr Ala 85 | Ser | Ser | Val | Thr 90 | Phe | Thr | Asp | íle | Ala 95 | Ser | ||
| Leu | Asn | íle | Gin | Leu | Thr | Cys | Asn | íle | Leu | Thr | Phe | Gly | Gin | Leu | Glu |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| Gin | Asn | Val | Tyr | Gly | íle | Thr | íle | íle | Ser | Gly | Leu | Pro | Pro | Glu | Lys |
| 115 | 120 | 125 | |||||||||||||
| Pro | Lys | Asn | Leu | Ser | Cys | íle | Val | Asn | Glu | Gly | Lys | Lys | Met | Arg | Cys |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Glu | Trp | Asp | Gly | Gly | Arg | Glu | Thr | His | Leu | Glu | Thr | Asn | Phe | Thr | Leu |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Lys | Ser | Glu | Trp | Ala | Thr | His | Lys | Phe | Ala | Asp | Cys | Lys | Ala | Lys | Arg |
| 165 | 170 | 17 5 | |||||||||||||
| Asp | Thr | Pro | Thr | Ser | Cys | Thr | Val | Asp | Tyr | Ser | Thr | Val | Tyr | Phe | Val |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Asn | íle | Glu | Val | Trp | Val | Glu | Ala | Glu | Asn | Ala | Leu | Gly | Lys | Val | Thr |
| 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| Ser | Asp | His | íle | Asn | Phe | Asp | Pro | Val | Tyr | Lys | Val | Lys | Pro | Asn | Pro |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Pro | His | Asn | Leu | Ser | Val | íle | Asn | Ser | Glu | Glu | Leu | Ser | Ser | íle | Leu |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Lys | Leu | Thr | Trp | Thr | Asn | Pro | Ser | íle | Lys | Ser | Val | íle | íle | Leu | Lys |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Tyr | Asn | íle | Gin | Tyr | Arg | Thr | Lys | Asp | Ala | Ser | Thr | Trp | Ser | Gin | íle |
| 260 | 265 | 270 | |||||||||||||
| Pro | Pro | Glu | Asp | Thr | Ala | Ser | Thr | Arg | Ser | Ser | Phe | Thr | Val | Gin | Asp |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Leu | Lys | Pro | Phe | Thr | Glu | Tyr | Val | Phe | Arg | íle | Arg | Cys | Met | Lys | Glu |
| 290 | 295 | 300 | |||||||||||||
| Asp | Gly | Lys | Gly | Tyr | Trp | Ser | Asp | Trp | Ser | Glu | Glu | Ala | Ser | Gly | íle |
| 305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
| Thr | Tyr | Glu | Asp | Arg | Pro | Ser | Lys | Ala | Pro | Ser | Phe | Trp | Tyr | Lys | íle |
| 325 | 330 | 335 | |||||||||||||
| Asp | Pro | Ser | His | Thr | Gin | Gly | Tyr | Arg | Thr | Val | Gin | Leu | Val | Trp | Lys |
| 340 | 345 | 350 | |||||||||||||
| Thr | Leu | Pro | Pro | Phe | Glu | Ala | Asn | Gly | Lys | íle | Leu | Asp | Tyr | Glu | Val |
| 355 | 360 | 365 | |||||||||||||
| Thr | Leu | Thr | Arg | Trp | Lys | Ser | His | Leu | Gin | Asn | Tyr | Thr | Val | Asn | Ala |
| 370 | 375 | 380 | |||||||||||||
| Thr | Lys | Leu | Thr | Val | Asn | Leu | Thr | Asn | Asp | Arg | Tyr | Leu | Ala | Thr | Leu |
| 385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
| Thr | Val | Arg | Asn | Leu | Val | Gly | Lys | Ser | Asp | Ala | Ala | Val | Leu | Thr | íle |
| 405 | 410 | 415 | |||||||||||||
| Pro | Ala | Cys | Asp | Phe | Gin | Ala | Thr | His | Pro | Val | Met | Asp | Leu | Lys | Ala |
| 420 | 425 | 430 | |||||||||||||
| Phe | Pro | Lys | Asp | Asn | Met | Leu | Trp | Val | Glu | Trp | Thr | Thr | Pro | Arg | Glu |
| 435 | 440 | 445 | |||||||||||||
| Ser | Val | Lys | Lys | Tyr | íle | Leu | Glu | Trp | Cys | Val | Leu | Ser | Asp | Lys | Ala |
| 450 | 455 | 460 | |||||||||||||
| Pro | Cys | íle | Thr | Asp | Trp | Gin | Gin | Glu | Asp | Gly | Thr | Val | His | Arg | Thr |
| 465 | 470 | 475 | 480 | ||||||||||||
| Tyr | Leu | Arg | Gly | Asn | Leu | Ala | Glu | Ser | Lys | Cys | Tyr | Leu | íle | Thr | Val |
| 485 | 490 | 495 | |||||||||||||
| Thr | Pro | Val | Tyr | Ala | Asp | Gly | Pro | Gly | Ser | Pro | Glu | Ser | íle | Lys | Ala |
| 500 | 505 | 510 | |||||||||||||
| Tyr | Leu | Lys | Gin | Ala | Pro | Pro | Ser | Lys | Gly | Pro | Thr | Val | Arg | Thr | Lys |
| 515 | 520 | 525 | |||||||||||||
| Lys | Val | Gly | Lys | Asn | Glu | Ala | Val | Leu | Glu | Trp | Asp | Gin | Leu | Pro | Val |
| 530 | 535 | 540 |
| Asp | Val | Gin | Asn | Gly | Phe | Zle | Arg | Asn | Tyr | Thr | íle | Phe | Tyr | Arg | Thr |
| 545 | 550 | 555 | 560 | ||||||||||||
| íle | íle | Gly | Asn | Glu | Thr | Ala | Val | Asn | Val | Asp | Ser | Ser | His | Thr | Glu |
| 565 | 570 | 575 | |||||||||||||
| Tyr | Thr | Leu | Ser | Ser | Leu | Thr | Ser | Asp | Thr | Leu | Tyr | Met | Val | Arg | Met |
| 580 | 585 | 590 | |||||||||||||
| Ala | Ala | Tyr | Thr | Asp | Glu | Gly | Gly | Lys | Asp | Gly | Pro | Glu | Phe | Thr | Phe |
| 595 | 600 | 605 | |||||||||||||
| Thr | Thr | Pro | Lys | Phe | Ala | Gin | Gly | Glu | Zle | Glu | Ala | íle | Val | Val | Pro |
| 610 | 615 | 620 | |||||||||||||
| Val | Cys | Leu | Ala | Phe | Leu | Leu | Thr | Thr | Leu | Leu | Gly | Val | Leu | Phe | Cys |
| 625 | 630 | 635 | 640 | ||||||||||||
| Phe | Asn | Lys | Arg | Asp | Leu | Zle | Lys | Lys | His | Zle | Trp | Pro | Asn | Val | Pro |
| 645 | 650 | 655 | |||||||||||||
| Asp | Pro | Ser | Lys | Ser | His | Zle | Ala | Gin | Trp | Ser | Pro | His | Thr | Pro | Pro |
| 660 | 665 | 670 | |||||||||||||
| Arg | His | Asn | Phe | Asn | Ser | Lys | Asp | Gin | Met | Tyr | Ser | Asp | Gly | Asn | Phe |
| 675 | 680 | 685 | |||||||||||||
| Thr | Asp | Val | Ser | Val | Val | Glu | íle | Glu | Ala | Asn | Asp | Lys | Lys | Pro | Phe |
| 690 | 695 | 700 | |||||||||||||
| Pro | Glu | Asp | Leu | Lys | Ser | Leu | Asp | Leu | Phe | Lys | Lys | Glu | Lys | Zle | Asn |
| 705 | 710 | 715 | 720 | ||||||||||||
| Thr | Glu | Gly | His | Ser | Ser | Gly | Zle | Gly | Gly | Ser | Ser | Cys | Met | Ser | Ser |
| 725 | 730 | 735 | |||||||||||||
| Ser | Arg | Pro | Ser | Zle | Ser | Ser | Ser | Asp | Glu | Asn | Glu | Ser | Ser | Gin | Asn |
| 740 | 745 | 750 | |||||||||||||
| Thr | Ser | Ser | Thr | Val | Gin | Tyr | Ser | Thr | Val | Val | His | Ser | Gly | Tyr | Arg |
| 755 | 760 | 765 | |||||||||||||
| His | Gin | Val | Pro | Ser | Val | Gin | Val | Phe | Ser | Arg | Ser | Glu | Ser | Thr | Gin |
| 770 | 775 | 780 | |||||||||||||
| Pro | Leu | Leu | Asp | Ser | Glu | Glu | Arg | Pro | Glu | Asp | Leu | Gin | Leu | Val | Asp |
| 785 | 790 | 795 | 800 | ||||||||||||
| His | Val | Asp | Gly | Gly | Asp | Gly | íle | Leu | Pro | Arg | Gin | Gin | Tyr | Phe | Lys |
| 805 | 810 | 815 | |||||||||||||
| Gin | Asn | Cys | Ser | Gin | His | Glu | Ser | Ser | Pro | Asp | Zle | Ser | His | Phe | Glu |
| 820 | 825 | 830 | |||||||||||||
| Arg | Ser | Lys | Gin | Val | Šer | Ser | Val | Asn | Glu | Glu | Asp | Phe | Val | Arg | Leu |
| 835 | 840 | 845 | |||||||||||||
| Lys | Gin | Gin | íle | Ser | Asp | His | Zle | Ser | Gin | Ser | Cys | Gly | Ser | Gly | Gin |
| 850 | 855 | 860 | |||||||||||||
| Met | Lys | Met | Phe | Gin | Glu | Val | Ser | Ala | Ala | Asp | Ala | Phe | Gly | Pro | Gly |
| 865 | 870 | 875 | 880 | ||||||||||||
| Thr | Glu | Gly | Gin | Val | Glu | Arg | Phe | Glu | Thr | Val | Gly | Met | Glu | Ala | Ala |
| 885 | 890 | 895 | |||||||||||||
| Thr | Asp | Glu | Gly | Met | Pro | Lys | Ser | Tyr | Leu | Pro | Gin | Thr | Val | Arg | Gin |
| 900 | 905 | 910 | |||||||||||||
| Gly | Gly | Tyr | Met | Pro | Gin | ||||||||||
| 915 |
<210> 5 <211 >862 <212> PRT <213> neznámy <220>
<223> Opis neznámeho organizmu: primát; pravdepodobne Homo sapiens
-74<400> 5
| Met Ala His 1 | Thr Phe Arg 5 | Gly | Cys | Ser Leu Ala Phe Met Phe íle | íle | ||||||||||
| 10 | 15 | ||||||||||||||
| Thr | Trp | Leu | Leu | íle | Lys | Ala | Lys | íle | Asp | Ala | Cys | Lys | Arg | Gly | Asp |
| 20 | 25 | 30 | |||||||||||||
| Val | Thr | Val | Lys | Pro | Ser | His | Val | íle | Leu | Leu | Gly | Ser | Thr | Val | Asn |
| 35 | 40 | 45 | |||||||||||||
| íle | Thr | Cys | Ser | Leu | Lys | Pro | Arg | Gin | Gly | Cys | Phe | His | Tyr | Ser | Arg |
| 50 | 55 | 60 | |||||||||||||
| Arg | Asn | Lys | Leu | íle | Leu | Tyr | Lys | Phe | Asp | Arg | Arg | íle | Asn | Phe | His |
| 65 | 70 | 75 | 80 | ||||||||||||
| His | Gly | His | Ser | Leu | Asn | Ser | Gin | Val | Thr | Gly | Leu | Pro | Leu | Gly | Thr |
| 85 | 90 | 95 | |||||||||||||
| Thr | Leu | Phe | Val | Cys | Lys | Leu | Ala | Cys | íle | Asn | Ser | Asp | Glu | íle | Gin |
| 100 | 105 | 110 | |||||||||||||
| íle | Cys | Gly | Ala | Glu | íle | Phe | Val | Gly | Val | Ala | Pro | Glu | Gin | Pro | Gin |
| 115 | 120 | 12 5 | |||||||||||||
| Asn | Leu | Ser | Cys | íle | Gin | Lys | Gly | Glu | Gin | Gly | Thr | Val | Ala | Cys | Thr |
| 130 | 135 | 140 | |||||||||||||
| Trp | Glu | Arg | Gly | Arg | Asp | Thr | His | Leu | Tyr | Thr | Glu | Tyr | Thr | Leu | Gin |
| 145 | 150 | 155 | 160 | ||||||||||||
| Leu | Ser | Gly | Pro | Lys | Asn | Leu | Thr | Trp | Gin | Lys | Gin | Cys | Lys | Asp | íle |
| 165 | 170 | 175 | |||||||||||||
| Tyr | Cys | Asp | Tyr | Leu | Asp | Phe | Gly | íle | Asn | Leu | Thr | Pro | Glu | Ser | Pro |
| 180 | 185 | 190 | |||||||||||||
| Glu | Ser | Asn | Phe | Thr | Ala | Lys | Val | Thr | Ala | Val | Asn | Ser | Leu | Gly | Ser |
| 195 | 200 | 205 | |||||||||||||
| Ser | Ser | Ser | Leu | Pro | Ser | Thr | Phe | Thr | Phe | Leu | Asp | íle | Val | Arg | Pro |
| 210 | 215 | 220 | |||||||||||||
| Leu | Pro | Pro | Trp | Asp | íle | Arg | íle | Lys | Phe | Gin | Lys | Ala | Ser | Val | Ser |
| 225 | 230 | 235 | 240 | ||||||||||||
| Arg | Cys | Thr | Leu | Tyr | Trp | Arg | Asp | Glu | Gly | Leu | Val | Leu | Leu | Asn | Arg |
| 245 | 250 | 255 | |||||||||||||
| Leu | Arg | Tyr | Arg | Pro | Ser | Asn | Ser | Arg | Leu | Trp | Asn | Met | Val | Asn | Val |
| 260 | 265 | 270 | |||||||||||||
| Thr | Lys | Ala | Lys | Gly | Arg | His | Asp | Leu | Leu | Asp | Leu | Lys | Pro | Phe | Thr |
| 275 | 280 | 285 | |||||||||||||
| Glu | Tyr | Glu | Phe | Gin | íle | Ser | Ser | Lys | Leu | His | Leu | Tyr | Lys | Gly | Ser |
| 290 | 295 | 300 | |||||||||||||
| Trp | Ser | Asp | Trp | Ser | Glu | Ser | Leu | Arg | Ala | Gin | Thr | Pro | Glu | Glu | Glu |
| 305 | 310 | 315 | 320 | ||||||||||||
| Pro | Thr | Gly | Met | Leu | Asp | Val | Trp | Tyr | Met | Lys | Arg | His | íle | Asp | Tyr |
| 325 | 330 | 335 | |||||||||||||
| Ser | Arg | Gin | Gin | íle | Ser | Leu | Phe | Trp | Lys | Asn | Leu | Ser | Val | Ser | Glu |
| 340 | 345 | 350 | |||||||||||||
| Ala | Arg | Gly | Lys | íle | Leu | His | Tyr | Gin | Val | Thr | Leu | Gin | Glu | Leu | Thr |
| 355 | 360 | 365 | |||||||||||||
| Gly | Gly | Lys | Ala | Met | Thr | Gin | Asn | íle | Thr | Gly | His | Thr | Ser | Trp | Thr |
| 370 | 375 | 380 | |||||||||||||
| Thr | Val | íle | Pro | Arg | Thr | Gly | Asn | Trp | Ala | Val | Ala | Val | Ser | Ala | Ala |
| 385 | 390 | 395 | 400 | ||||||||||||
| Asn | Ser | Lys | Gly | Ser | Ser | Leu | Pro | Thr | Arg | íle | Asn | íle | Met | Asn | Leu |
| 405 | 410 | 415 | |||||||||||||
| Cys | Glu | Ala | Gly | Leu | Leu | Ala | Pro | Arg | Gin | Val | Ser | Ala | Asn | Ser | Glu |
| 420 | 425 | 430 | |||||||||||||
| Gly | Met | Asp | Asn | íle | Leu | Val | Thr | Trp | Gin | Pro | Pro | Arg | Lys | Asp | Pro |
| 435 | 440 | 445 |
| Ser Ala Val | Gin | Glu | Tyr | Val Val Glu Trp Arg Glu Leu | His | Pro | Gly | ||||||||
| 450 | 455 | 460 | |||||||||||||
| Gly | Asp | Thr | Gin | Val | Pro | Leu | Asn | Trp | Leu | Arg | Ser | Arg | Pro | Tyr | Asn |
| 465 | 470 | 475 | 480 | ||||||||||||
| Val | Ser | Ala | Leu | íle | Ser | Glu | Asn | íle | Lys | Ser | Tyr | íle | Cys | Tyr | Glu |
| 485 | 490 | 495 | |||||||||||||
| íle | Arg | Val | Tyr | Ala | Leu | Ser | Gly | Asp | Gin | Gly | Gly | Cys | Ser | Ser | íle |
| 500 | 505 | 510 | |||||||||||||
| Leu | Gly | Asn | Ser | Lys | His | Lys | Ala | Pro | Leu | Ser | Gly | Pro | His | íle | Asn |
| 515 | 520 | 525 | |||||||||||||
| Ala | íle | Thr | Glu | Glu | Lys | Gly | Ser | íle | Leu | íle | Ser | Trp | Asn | Ser | íle |
| 530 | 535 | 540 | |||||||||||||
| Pro | Val | Gin | Glu | Gin | Met | Gly | Cys | Leu | Leu | His | Tyr | Arg | íle | Tyr | Trp |
| 545 | 550 | 555 | 560 | ||||||||||||
| Lys | Glu | Arg | Asp | Ser | Asn | Ser | Gin | Pro | Gin | Leu | Cys | Glu | íle | Pro | Tyr |
| 565 | 570 | 575 | |||||||||||||
| Arg | Val | Ser | Gin | Asn | Ser | His | Pro | íle | Asn | Ser | Leu | Gin | Pro | Arg | Val |
| 580 | 585 | 590 | |||||||||||||
| Thr | Tyr | Val | Leu | Trp | Met | Thr | Ala | Leu | Thr | Ala | Ala | Gly | Glu | Ser | Ser |
| 595 | 600 | 605 | |||||||||||||
| His | Gly | Asn | Glu | Arg | Glu | Phe | Cys | Leu | Gin | Gly | Lys | Ala | Asn | Trp | Met |
| 610 | 615 | 620 | |||||||||||||
| Ala | Phe | Val | Ala | Pro | Ser | íle | Cys | íle | Ala | íle | íle | Met | Val | Gly | íle |
| 625 | 630 | 635 | 640 | ||||||||||||
| Phe | Ser | Thr | His | Tyr | Phe | Gin | Gin | Lys | Val | Phe | Val | Leu | Leu | Ala | Ala |
| 645 | 650 | 655 | |||||||||||||
| Leu | Arg | Pro | Gin | Trp | Cys | Ser | Arg | Glu | íle | Pro | Asp | Pro | Ala | Asn | Ser |
| 660 | 665 | 670 | |||||||||||||
| Thr | Cys | Ala | Lys | Lys | Tyr | Pro | íle | Ala | Glu | Glu | Lys | Thr | Gin | Leu | Pro |
| 675 | 680 | 685 | |||||||||||||
| Leu | Asp | Arg | Leu | Leu | íle | Asp | Trp | Pro | Thr | Pro | Glu | Asp | Pro | Glu | Pro |
| 690 | 695 | 700 | |||||||||||||
| Leu | Val | íle | Ser | Glu | Val | Leu | His | Gin | Val | Thr | Pro | Val | Phe | Arg | His |
| 705 | 710 | 715 | 720 | ||||||||||||
| Pro | Pro | Cys | Ser | Asn | Trp | Pro | Gin | Arg | Glu | Lys | Gly | íle | Gin | Gly | His |
| 725 | 730 | 735 | |||||||||||||
| Gin | Ala | Ser | Glu | Lys | Asp | Met | Met | His | Ser | Ala | Ser | Ser | Pro | Pro | Pro |
| 740 | 745 | 750 | |||||||||||||
| Pro | Arg | Ala | Leu | Gin | Ala | Glu | Ser | Arg | Gin | Leu | Val | Asp | Leu | Tyr | Lys |
| 755 | 760 | 765 | |||||||||||||
| Val | Leu | Glu | Ser | Arg | Gly | Ser | Asp | Pro | Lys | Pro | Glu | Asn | Pro | Ala | Cys |
| 770 | 775 | 780 | |||||||||||||
| Pro | Trp | Thr | Val | Leu | Pro | Ala | Gly | Asp | Leu | Pro | Thr | His | Asp | Gly | Tyr |
| 785 | 790 | 795 | 800 | ||||||||||||
| Leu | Pro | Ser | Asn | íle | Asp | Asp | Leu | Pro | Ser | His | Glu | Ala | Pro | Leu | Ala |
| 805 | 810 | 815 | |||||||||||||
| Asp | Ser | Leu | Glu | Glu | Leu | Glu | Pro. | Gin | His | íle | Ser | Leu | Ser | Val | Phe |
| 820 | 825 | 830 | |||||||||||||
| Pro | Ser | Ser | Ser | Leu | His | Pro | Leu | Thr | Phe | Ser | Cys | Gly | Asp | Lys | Leu |
| 835 | 840 | 845 | |||||||||||||
| Thr | Leu | Asp | Gin | Leu | Lys | Met | Arg | Cys | Asp | Ser | Leu | Met | Leu | ||
| 850 | 855 | 860 |
Claims (2)
1. V podstate čistý rekombinantný polypeptid, ktorý obsahuje aspoň desať po sebe idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2.
2. Polypeptid podľa nároku 1, ktorý
a) obsahuje aspoň 25 po sebe idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2;
b) je rekombinantný, obsahuje vnútrobunkovú časť sekv. č. 2;
c) ďalej obsahuje aspoň desať po sebe idúcich aminokyselín inej ako vnútrobunkovej časti sekv. č. 2;
d) obsahuje aspoň 25 aminokyselín extracelulárnej časti sekv. č. 2;
e) obsahuje zrelú sekv. č. 2; alebo
f) je v podstate čistým prirodzeným proteínom.
3. Rekombinantný polypeptid podľa nároku 1, ktorý
a) pozostáva zo zrelej sekvencie podľa tabuľky 1;
b) je neglykozylovaným polypeptidom;
c) je z človeka;
d) obsahuje aspoň 40 po sebe idúcich aminokyselín sekv. č. 2;
e) obsahuje aspoň tri neprekrývajúce sa segmenty s aspoň pätnástimi po sebe idúcimi aminokyselinami sekv. č. 2;
f) je prirodzeným polymorfným variantom sekv. č. 2;
g) má dĺžku aspoň 30 aminokyselín;
h) obsahuje aspoň dva neprekrývajúce sa epitopy, ktoré sú špecifické pre primátovú DCRS5;
i) má molekulovú hmotnosť aspoň 30 kD s prirodzenou glykozyláciou;
j) je syntetickým polypeptidom;
k) je v sterilnej forme;
l) je vo vodnom alebo tlmivom roztoku;
m) je pripojený na tuhý substrát;
n) je konjugovaný s inou chemickou skupinou; alebo
-77o) je fyzikálne spojený s IL-12RP1 polypeptidom.
4. Zmes, vyznačujúca sa tým, že obsahuje látky vybrané zo skupiny:
a) v podstate čistý alebo rekombinantný polypeptid obsahujúci aspoň dva odlišné neprekrývajúce sa segmenty s aspoň šiestimi po sebe idúcimi aminokyselinami vnútrobunkovej časti sekv. č. 2;
b) v podstate čistý alebo rekombinantný polypeptid obsahujúci 12 po sebe idúcich aminokyselín vnútrobunkovej časti sekv. č. 2; alebo
c) v podstate čistý polypeptid s prirodzenou sekvenciou obsahujúci zrelú sekv. č. 2.
5. Polypeptid:
1) podľa nároku 4a), v ktorom:
a) odlišné neprekrývajúce sa segmenty:
i) zahŕňajú jeden segment s aspoň dvanástimi aminokyselinami;
ii) zahŕňajú jeden segment s aspoň siedmimi aminokyselinami a druhý segment s aspoň deviatimi aminokyselinami;
iii) zahŕňajú tretí odlišný segment s aspoň šiestimi aminokyselinami; alebo iv) obsahujú segment vybraný z R355-L373, P378-L405, V407D426, K428-D439, P441-V452, I454-G460, I465-T587 alebo N592-606; alebo
b) polypeptid ďalej obsahuje aspoň dva rozličné neprekrývajúce sa segmenty s aspoň šiestimi po sebe idúcimi aminokyselinami extracelulárnej časti sekv. Č. 2;
2) podľa nároku 4b), v ktorom:
a) segment s aspoň dvanástimi po sebe idúcimi aminokyselinami zahŕňa segment vybraný z R355-L373, P378-L405, V407-D426, K428-D439, P441-V452, I454-G460,1465-T587 alebo N592-606; alebo
b) polypeptid ďalej zahŕňa aspoň dva rozličné neprekrývajúce sa segmenty s aspoň šiestimi po sebe idúcimi aminokyselinami extracelulárnej časti sekv. č. 2; alebo
-783) podľa nároku 4c), ktorý ďalej obsahuje purifikačný alebo detekčný epitop.
6. Polypeptid podľa nároku 4, ktorý:
a) pozostáva zo zrelej sekvencie podľa tabuľky 1;
I
b) je neglykozylovaným polypeptidom;
c) je z človeka;
d) obsahuje aspoň 40 po sebe idúcich aminokyselín sekv. č. 2;
e) obsahuje aspoň tri neprekrývajúce sa segmenty s aspoň pätnástimi po sebe idúcimi aminokyselinami sekv. č. 2;
f) je prirodzeným polymorfným variantom sekv. č. 2;
g) má dĺžku aspoň 30 aminokyselín;
h) obsahuje aspoň dva neprekrývajúce sa epitopy, ktoré sú špecifické pre primátovú DCRS5;
i) má molekulovú hmotnosť aspoň 30 kD s prirodzenou glykozyláciou;
j) je syntetickým polypeptidom;
k) je v sterilnej forme;
l) je vo vodnom alebo tlmivom roztoku;
m) je pripojený na tuhý substrát;
n) je konjugovaný s inou chemickou skupinou; alebo
o) je fyzikálne spojený s IL-12Rpi polypeptidom.
7. Prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:
a) v podstate čistý polypeptid podľa nároku 4 v kombinácii s IL-12Rp1 proteínom; alebo
b) polypeptid podľa nároku 4 a nosič, kde nosičom je:
i) vodná zlúčenina vrátane vody, fyziologického roztoku a/alebo tlmivého roztoku; a/alebo ii) je formulovaný na orálne, rektálne, nazálne, topické alebo parenterálne podanie.
8. Kit, vy z n a č u j ú c i sa t ý m , že obsahuje polypeptid podľa nároku 4, a:
-79a) kompartment obsahujúci uvedený polypeptid;
b) kompartment obsahujúci IL-12Rpi polypeptid;
c) kompartment obsahujúci p40, IL-B30 alebo p40/IL-B30 polypeptid; alebo
d) inštrukcie na použitie alebo odpadovú nádobu pre reakčné činidlá.
9. Väzobná zlúčenina obsahujúca antigénové viažuce miesto z protilátky, ktorá sa špecificky viaže na vnútrobunkovú časť polypeptidu podľa nároku 1, pričom:
a) väzobná zlúčenina je v nádobe;
b) polypeptid je z človeka;
c) väzobnou zlúčeninou je Fv, Fab alebo Fab2 fragment;
d) väzobná zlúčenina je konjugovaná s inou chemickou skupinou; alebo
e) protilátka:
i) je vyvolaná proti peptidovej sekvencii zrelého polypeptidu podľa tabuľky 1;
ii) je vyvolaná proti zrelej DCRS5;
iii) je vyvolaná proti purifikovanej ľudskej DCRS5;
iv) je imunoselektovaná;
v) je polyklonálnou protilátkou; fluorescenčné značenou;
vi) viaže sa na denaturovanú DCRS5;
vii) má Kd voči antigénu aspoň 30 μΜ;
viii) je pripojená na tuhý substrát vrátane guľôčky alebo plastickej membrány;
ix) je v sterilnom prostriedku; alebo
x) je detegovateľne značená, vrátane rádioaktívnej alebo fluorescenčnej značky.
10. Kit, v y z n a č u j ú c i sa t ý m , že obsahuje väzobnú zlúčeninu podľa nároku 9 a:
a) kompartment obsahujúci väzobnú zlúčeninu;
b) kompartment obsahujúci:
i) p40 polypeptid;
ii) IL-B30 polypeptid;
-80iii) DCRS5 polypeptid; a/alebo iv) IL-12Rpi polypeptid;
c) kompartment obsahujúci protilátku, ktorá sa selektívne viaže na:
i) p40 polypeptid;
ii) IL-B30 polypeptid;
iii) DCRS5 polypeptid; a/alebo
v) IL-12Rpi polypeptid; alebo
d) inštrukcie na použitie alebo odpadovú nádobu na reakčné činidlá.
11. Spôsob výroby komplexu antigén/protilátka, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa uvedenie primátového DCRS5 polypeptidu do kontaktu s protilátkou podľa nároku 9, v príslušných podmienkach na umožnenie vytvorenia komplexu.
12. Spôsob podľa nároku 11,vyznačujúci sa tým, že:
a) komplex je očistený od iných cytokínových receptorov;
b) komplex je očistený od inej protilátky;
c) uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje so vzorkou obsahujúcou interferón;
d) uvádzanie do kontaktu umožňuje kvantitatívnu detekciu antigénu;
e) uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje so vzorkou obsahujúcou protilátku; alebo
f) uvádzanie do kontaktu umožňuje kvantitatívnu detekciu protilátky.
13. Prostriedok, vy z n a č u j ú c i sa t ý m , že obsahuje:
a) sterilnú väzobnú zlúčeninu podľa nároku 9, alebo
b) väzobnú zlúčeninu podľa nároku 9 a nosič, ktorým je:
i) vodná zlúčenina vrátane vody, fyziologického roztoku a/alebo tlmivého roztoku; a/alebo ii) je formulovaný na orálne, rektálne, nazálne, topické alebo parenterálne podanie.
14. Izolovaná alebo rekombinantná nukleová kyselina, ktorá kóduje polypeptid obsahujúci aminokyseliny 1 až 606 zo sekv. č. 2.
-81 15. Bunka alebo tkanivo obsahujúce rekombinantnú nukleovú kyselinu podľa nároku 14.
16. Bunka podľa nároku 15, ktorá je:
a) prokaryotickou bunkou;
b) eukaryotickou bunkou;
c) bakteriálnou bunkou;
d) kvasinkovou bunkou;
e) hmyzou bunkou;
f) cicavčou bunkou;
g) myšacou bunkou;
h) primátovou bunkou; alebo
í) ľudskou bunkou.
17. Kit, vy z n a č u j ú c i sa t ý m , že obsahuje nukleovú kyselinu podľa nároku 14 a:
a) kompartment obsahujúci nukleovú kyselinu;
b) kompartment obsahujúci nukleovú kyselinu, ktorá kóduje:
i) p40 polypeptid;
ii) IL-B30 polypeptid;
iii) DCRS5 polypeptid; a/alebo iv) IL-12Rp1 polypeptid;
c) kompartment obsahujúci:
i) p40 polypeptid;
ii) IL-B30 polypeptid;
iii) DCRS5 polypeptid; a/alebo iv) IL-12R31 polypeptid;
d) kompartment obsahujúci protilátku, ktorá sa selektívne viaže na:
i) p40 polypeptid;
ii) IL-B30 polypeptid;
iii) DCRS5 polypeptid; a/alebo iv) IL-12Rpi polypeptid; alebo
-82e) inštrukcie na použitie alebo odpadovú nádobu na reakčné činidlá.
18. Spôsob modulácie fyziológie alebo vývoja bunky, vyznačujúci sa t ý m , že zahŕňa uvedenie bunky do kontaktu s:
a) p40/IL-B30 antagonistom, ktorý je komplexom obsahujúcim:
i) extracelulárnu časť primátovej DCRS5; a/alebo ii) extracelulárnu časť primátovej IL-12Rpi;
b) p40/IL-B30 antagonistom, ktorým je protilátka viažuca sa na komplex obsahujúci:
i) primátovú DCRS5; a/alebo ii) primátovú IL-12Rpi;
c) p40/IL-B30 antagonistom, ktorým je protilátka, ktorá sa viaže na DCRS5;
d) p40/IL-B30 antagonistom, ktorým je protilátka proti IL-12Rpi;
e) p40/IL-B30 antagonistom, ktorým je antisense nukleová kyselina proti DCRS5 alebo IL-12Rpi; alebo
f) p40/IL-B30 agonistom, ktorým je protilátka, ktorá sa viaže na komplex obsahujúci:
i) primátovú DCRS5; a/alebo ii) primátovú IL-12Rpi.
19. Spôsob podľa nároku 18, vy z n a č u j ú c i sa t ý m , že uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje s antagonistom a:
a) uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje v kombinácii s antagonistom proti:
i) IL-12;
ii) IL-18;
iii) TNF; alebo iv) IFNy; alebo
b) bunka je z hostiteľa, ktorý:
i) vykazuje známky alebo symptómy chronického Th1 sprostredkovaného ochorenia;
-83ii) vykazuje symptómy alebo známky sklerózy multiplex, reumatoidnej artritídy, osteoartritídy, zápalového ochorenia čriev, cukrovky, psoriázy alebo sepsy; alebo iii) dostáva alogénny transplantát.
20. Spôsob podľa nároku 18, vy z n a č u j ú c i sa t ý m , že uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje s agonistom, a;
a) uvádzanie do kontaktu sa uskutočňuje v kombinácii s:
i) IL-12;
ii) IL-18;
iii) TNF; alebo iv) IFNy; alebo
b) bunka je z hostiteľa, ktorý:
i) vykazuje známky alebo symptómy chronickej TH2 odpovede;
ii) trpí nádorom, vírusovou infekciou alebo rastom plesní;
iii) dostáva vakcínu; alebo iv) trpí alergickou reakciou.
21. Nukleová kyselina podľa nároku 14, ktorá obsahuje nukleotidy 188 až 2005 zo sekv. č. 1.
22. V podstate čistý alebo rekombinantný antigénny polypeptid so sekv. č. 2.
23. Polypeptid podľa nároku 22, ktorý obsahuje:
a) zvyšky 1 až 101 sekv. č. 2;
b) zvyšky 102 až 195 sekv. č. 2;
c) zvyšky 196 až 297 sekv. č. 2;
d) zvyšky 1 až 328 sekv. č. 2; alebo
e) zvyšky 1 až 606 sekv. č. 2.
24. Heterodimérna zmes, vyznačujúca sa tým, že obsahuje polypeptid podľa nároku 22 a IL-12Rpi.
-8425. Zmes podľa nároku 24, vyznačujúca sa tým, že je schopná viazať IL-B30/p40.
26. Kit, vyznačujúci sa tým, že obsahuje polypeptid podľa nároku 22 a inštrukcie na použitie.
27. Kit, vy z n a č u j ú c i sa t ý m , že obsahuje aj:
a) IL-12β1 polypeptid; a
b) p40, IL-B30 alebo IL-B30/p40 polypeptidy.
28. Väzobný prostriedok, vyznačujúci sa tým, že sa špecificky viaže na polypeptid podľa nároku 22.
29. Väzobný prostriedok podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že
a) je polyklonálnou protilátkou;
b) monoklonálnou protilátkou; alebo
c) Fab, Fab2 alebo Fv fragmentom.
30. Väzobný prostriedok podľa nároku 28, vyz n a č u j ú c i sa tým, že sa špecificky viaže na polypeptid podľa nároku 23.
31. Väzobný prostriedok podľa nároku 30, v y z n a č u j ú c i sa tým, že ním je:
a) polyklonálna protilátka;
b) mónoklonálna protilátka; alebo
c) Fab, Fab2 alebo Fv fragment.
32. Kit, vyznačujúci sa tým, že obsahuje väzobný prostriedok podľa nároku 28 a inštrukcie na použitie.
-8533. Spôsob produkcie komplexu antigén/protilátka, vyznačujúci sa t ý m , že zahŕňa kontaktovanie protilátky podľa nároku 29 v podmienkach vhodných na vytvorenie komplexu.
34. Izolovaný alebo rekombinantný polynukleotid, ktorý kóduje polypeptid podľa nároku 22.
35. Polynukleotid podľa nároku 34, ktorý kóduje polypeptid podľa nároku 23.
36. Polynukleotid podľa nároku 34, ktorý obsahuje sekv. č. 1.
37. Expresný vektor, ktorý obsahuje polynukleotid podľa nároku 34.
38. Hostiteľská bunka, ktorá obsahuje expresný vektor podľa nároku 37.
39. Hostiteľská bunka podľa nároku 38, ktorou je:
a) cicavčia bunka;
b) hmyzia bunka;
c) bakteriálna bunka; alebo
d) kvasinková bunka.
40. Spôsob produkcie antigénneho polypeptidu so sekv. č. 2, vyznačujúci sa t ý m , že zahŕňa:
a) kultiváciu hostiteľskej bunky podľa nároku 38 v podmienkach vhodných na expresiu polypeptidu; a
b) izoláciu alebo purifikáciu polypeptidu.
41. Spôsob modulácie fyziológie alebo vývoja bunky, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa uvedenie bunky do kontaktu s agonistom alebo antagonistom so sekv. č. 2.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US20342600P | 2000-05-10 | 2000-05-10 | |
| PCT/US2001/015057 WO2001085790A2 (en) | 2000-05-10 | 2001-05-10 | Mammalian cytokine receptor subunit proteins, related reagents and methods |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK15742002A3 true SK15742002A3 (sk) | 2003-03-04 |
| SK287984B6 SK287984B6 (sk) | 2012-08-06 |
Family
ID=22753958
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1574-2002A SK287984B6 (sk) | 2000-05-10 | 2001-05-10 | Substantially pure or recombinant polypeptide, nucleic acid, host cell, method for the preparation of polypeptide, binding compound, kit, composition comprising an antibody and use thereof |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (7) | US6756481B2 (sk) |
| EP (3) | EP1918377B1 (sk) |
| JP (6) | JP5073909B2 (sk) |
| KR (1) | KR100869621B1 (sk) |
| CN (2) | CN101654479A (sk) |
| AT (1) | ATE396264T1 (sk) |
| AU (2) | AU6135101A (sk) |
| CA (1) | CA2408571C (sk) |
| CY (1) | CY1108545T1 (sk) |
| CZ (1) | CZ304022B6 (sk) |
| DE (1) | DE60134136D1 (sk) |
| DK (1) | DK1287130T3 (sk) |
| ES (1) | ES2307618T3 (sk) |
| HK (1) | HK1049862B (sk) |
| HU (1) | HUP0302339A3 (sk) |
| IL (2) | IL152414A0 (sk) |
| MX (1) | MXPA02011081A (sk) |
| NO (2) | NO331408B1 (sk) |
| NZ (1) | NZ522146A (sk) |
| PL (1) | PL209128B1 (sk) |
| PT (1) | PT1287130E (sk) |
| SI (1) | SI1287130T1 (sk) |
| SK (1) | SK287984B6 (sk) |
| WO (1) | WO2001085790A2 (sk) |
| ZA (1) | ZA200208795B (sk) |
Families Citing this family (32)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20030082734A1 (en) * | 1999-06-01 | 2003-05-01 | Dowling Lynette M. | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods |
| PT1188830E (pt) | 1999-06-02 | 2010-04-09 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Nova proteína nr10 receptora da hemopoietina |
| WO2001023556A1 (fr) * | 1999-09-27 | 2001-04-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Nouvelle proteine receptrice d'hemopoietine (nr12) |
| US7422743B2 (en) | 2000-05-10 | 2008-09-09 | Schering Corporation | Mammalian receptor protein DCRS5;methods of treatment |
| NZ522146A (en) * | 2000-05-10 | 2004-10-29 | Schering Corp | Mammalian receptor-like proteins, designated DNAX cytokine receptor subunits (DCRS), in particular DCRS5 |
| NZ539271A (en) | 2002-10-30 | 2008-12-24 | Genentech Inc | Inhibition of the production of proinflammatory cytokine interleukin-17 (IL-17) by T cells, using an antagonist of interleukin-23 (IL-23) |
| EP1587834B1 (en) | 2002-12-23 | 2011-07-06 | Schering Corporation | Uses of il-23 mammalian cytokine; related reagents |
| US20040219150A1 (en) * | 2003-02-06 | 2004-11-04 | Cua Daniel J. | Uses of mammalian cytokine; related reagents |
| WO2004081190A2 (en) * | 2003-03-10 | 2004-09-23 | Schering Corporation | Uses of il-23 agonists and antagonists; related reagents |
| CN101052726A (zh) | 2003-05-09 | 2007-10-10 | 森托科尔公司 | IL－23p40特异性免疫球蛋白衍生蛋白、组合物、方法和用途 |
| BRPI0507794A (pt) * | 2004-02-17 | 2007-07-17 | Schering Corp | métodos de modular a atividade de il-23, reagentes relacionados |
| US20050287593A1 (en) | 2004-05-03 | 2005-12-29 | Schering Corporation | Use of cytokine expression to predict skin inflammation; methods of treatment |
| MXPA06012754A (es) * | 2004-05-03 | 2007-02-19 | Schering Corp | El uso de la expresion de il-17 para predecir la inflamacion de la piel: metodos de tratamiento. |
| AR051444A1 (es) * | 2004-09-24 | 2007-01-17 | Centocor Inc | Proteinas derivadas de inmunoglobulina especifica de il-23p40, composiciones, epitopos, metodos y usos |
| EP2292758A3 (en) * | 2004-12-20 | 2013-12-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Uses of mammalian cytokine; related reagents |
| JP2009501006A (ja) | 2005-06-30 | 2009-01-15 | セントカー・インコーポレーテツド | 抗ｉｌ−２３抗体、組成物、方法および用途 |
| PL1971366T3 (pl) * | 2005-12-29 | 2015-01-30 | Janssen Biotech Inc | Ludzkie przeciwciała skierowane przeciw IL-23, kompozycje, sposoby i zastosowanie |
| BRPI0712426B1 (pt) | 2006-06-08 | 2021-10-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Usos de um anticorpo anti-nr10/il-31ra com atividade neutralizante de nr10/il-31ra, de um fragmento e/ou um fragmento quimicamente modificado do anticorpo e de um agente |
| TWI426918B (zh) | 2007-02-12 | 2014-02-21 | Merck Sharp & Dohme | Ｉｌ-２３拮抗劑於治療感染之用途 |
| NZ579297A (en) * | 2007-02-28 | 2012-03-30 | Schering Corp | Combination therapy comprising an il-23 antagonist and a cytokine antagonist for treatment of immune disorders |
| BRPI0807991A2 (pt) * | 2007-02-28 | 2014-06-17 | Schering Corp | Anticorpos anti-il-23r elaborados. |
| EP2241332A4 (en) | 2007-12-05 | 2011-01-26 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | THERAPEUTIC AGENT AGAINST PRITURE |
| KR20110025649A (ko) | 2008-05-05 | 2011-03-10 | 노비뮨 에스 에이 | 항-ｉｌ-１７ａ／ｉｌ-１７ｆ 교차-반응성 항체 및 그의 사용 방법 |
| WO2010027767A1 (en) * | 2008-08-27 | 2010-03-11 | Schering Corporation | Engineered anti-il-23r antibodies |
| WO2010112458A1 (en) * | 2009-03-31 | 2010-10-07 | Novartis Ag | Composition and methods of use for therapeutic antibodies specific for the il-12 receptore betal subunit |
| CN102458437B (zh) | 2009-05-05 | 2015-06-10 | 诺维莫尼公司 | 抗il-17f抗体及其使用方法 |
| RS55161B1 (sr) | 2010-11-04 | 2017-01-31 | Boehringer Ingelheim Int | Anti-il-23 antitela |
| NZ700802A (en) | 2012-05-03 | 2017-06-30 | Boehringer Ingelheim Int | Anti-il-23p19 antibodies |
| EP3708679A1 (en) | 2014-07-24 | 2020-09-16 | Boehringer Ingelheim International GmbH | Biomarkers useful in the treatment of il-23a related diseases |
| TWI711629B (zh) | 2014-09-03 | 2020-12-01 | 德商包林格因蓋爾漢國際股份有限公司 | 靶向IL-23A與TNF-α之化合物及其用途 |
| MX2021005905A (es) | 2018-11-20 | 2021-06-23 | Janssen Biotech Inc | Metodo seguro y eficaz para tratar la psoriasis con el anticuerpo especifico anti-il-23. |
| AU2020279987A1 (en) | 2019-05-23 | 2021-11-18 | Janssen Biotech, Inc. | Method of treating inflammatory bowel disease with a combination therapy of antibodies to IL-23 and TNF alpha |
Family Cites Families (22)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1319315A (en) | 1969-06-19 | 1973-06-06 | Citizen Watch Co Ltd | Calendar timepiece |
| US3940475A (en) | 1970-06-11 | 1976-02-24 | Biological Developments, Inc. | Radioimmune method of assaying quantitatively for a hapten |
| NL154598B (nl) | 1970-11-10 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking. |
| US3817837A (en) | 1971-05-14 | 1974-06-18 | Syva Corp | Enzyme amplification assay |
| US3939350A (en) | 1974-04-29 | 1976-02-17 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation |
| US3996345A (en) | 1974-08-12 | 1976-12-07 | Syva Company | Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays |
| US4275149A (en) | 1978-11-24 | 1981-06-23 | Syva Company | Macromolecular environment control in specific receptor assays |
| US4277437A (en) | 1978-04-05 | 1981-07-07 | Syva Company | Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay |
| US4366241A (en) | 1980-08-07 | 1982-12-28 | Syva Company | Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays |
| US4659678A (en) | 1982-09-29 | 1987-04-21 | Serono Diagnostics Limited | Immunoassay of antigens |
| US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
| US4859609A (en) | 1986-04-30 | 1989-08-22 | Genentech, Inc. | Novel receptors for efficient determination of ligands and their antagonists or agonists |
| US5789192A (en) | 1992-12-10 | 1998-08-04 | Schering Corporation | Mammalian receptors for interleukin-10 (IL-10) |
| US5888774A (en) | 1994-12-19 | 1999-03-30 | Cangene Corporation | Recombinant DNA molecules and expression vectors for erythropoietin |
| US6060284A (en) | 1997-07-25 | 2000-05-09 | Schering Corporation | DNA encoding interleukin-B30 |
| JPH11273358A (ja) | 1998-03-26 | 1999-10-08 | Kawasaki Steel Corp | 半導体記憶装置 |
| US20030082734A1 (en) | 1999-06-01 | 2003-05-01 | Dowling Lynette M. | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods |
| SI1181366T2 (sl) * | 1999-06-01 | 2013-10-30 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Sesalski receptorski proteini; sorodni reagenti in postopki |
| WO2001018051A2 (en) * | 1999-09-09 | 2001-03-15 | Schering Corporation | Mammalian interleukin-12 p40 and interleukin b30, combinations thereof, antibodies, uses in pharmaceutical compositions |
| WO2001023556A1 (fr) | 1999-09-27 | 2001-04-05 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Nouvelle proteine receptrice d'hemopoietine (nr12) |
| JP2008099690A (ja) | 1999-09-27 | 2008-05-01 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 新規ヘモポエチン受容体蛋白質、ｎｒ１２ |
| NZ522146A (en) * | 2000-05-10 | 2004-10-29 | Schering Corp | Mammalian receptor-like proteins, designated DNAX cytokine receptor subunits (DCRS), in particular DCRS5 |
-
2001
- 2001-05-10 NZ NZ522146A patent/NZ522146A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-05-10 SK SK1574-2002A patent/SK287984B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-05-10 ES ES01935242T patent/ES2307618T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-10 EP EP07122991.8A patent/EP1918377B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-10 EP EP10177160A patent/EP2275548A1/en not_active Withdrawn
- 2001-05-10 IL IL15241401A patent/IL152414A0/xx unknown
- 2001-05-10 PT PT01935242T patent/PT1287130E/pt unknown
- 2001-05-10 WO PCT/US2001/015057 patent/WO2001085790A2/en active Application Filing
- 2001-05-10 US US09/853,180 patent/US6756481B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-10 AU AU6135101A patent/AU6135101A/xx active Pending
- 2001-05-10 JP JP2001582389A patent/JP5073909B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2001-05-10 MX MXPA02011081A patent/MXPA02011081A/es active IP Right Grant
- 2001-05-10 AU AU2001261351A patent/AU2001261351B2/en not_active Ceased
- 2001-05-10 CN CN200910159449A patent/CN101654479A/zh active Pending
- 2001-05-10 DK DK01935242T patent/DK1287130T3/da active
- 2001-05-10 AT AT01935242T patent/ATE396264T1/de active
- 2001-05-10 CN CNA018124119A patent/CN1575337A/zh active Pending
- 2001-05-10 CA CA2408571A patent/CA2408571C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-05-10 PL PL365177A patent/PL209128B1/pl unknown
- 2001-05-10 HU HU0302339A patent/HUP0302339A3/hu not_active Application Discontinuation
- 2001-05-10 EP EP01935242.6A patent/EP1287130B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-10 CZ CZ20023698A patent/CZ304022B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-05-10 KR KR1020027015017A patent/KR100869621B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2001-05-10 DE DE60134136T patent/DE60134136D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-10 SI SI200130835T patent/SI1287130T1/sl unknown
-
2002
- 2002-10-22 IL IL152414A patent/IL152414A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-10-30 ZA ZA200208795A patent/ZA200208795B/en unknown
- 2002-11-08 NO NO20025354A patent/NO331408B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-03-10 HK HK03101704.2A patent/HK1049862B/zh not_active IP Right Cessation
- 2003-09-18 US US10/667,290 patent/US7411041B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2003-09-18 US US10/667,289 patent/US7510853B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-04-11 JP JP2008104044A patent/JP2008273961A/ja not_active Withdrawn
- 2008-07-24 CY CY20081100773T patent/CY1108545T1/el unknown
- 2008-07-28 US US12/180,778 patent/US7749718B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2010
- 2010-06-17 US US12/817,430 patent/US7964703B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-05-31 US US13/149,643 patent/US8110378B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-08-12 NO NO20111147A patent/NO20111147L/no not_active Application Discontinuation
- 2011-10-28 JP JP2011237542A patent/JP2012070740A/ja active Pending
-
2012
- 2012-01-13 US US13/350,627 patent/US20120121601A1/en not_active Abandoned
- 2012-05-24 JP JP2012118337A patent/JP2012187111A/ja active Pending
-
2014
- 2014-10-15 JP JP2014210974A patent/JP2015057396A/ja active Pending
- 2014-12-16 JP JP2014254055A patent/JP2015110576A/ja not_active Withdrawn
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US8110378B2 (en) | Nucleic acids encoding DCRS5 | |
| AU2001261351A1 (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| EP1303604A2 (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| WO1999040195A1 (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| CA2392109A1 (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| CA2374391C (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| US20030082734A1 (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| AU2007202362B2 (en) | Mammalian receptor proteins; related reagents and methods | |
| MXPA00008848A (en) | Human receptor proteins;related reagents and methods |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TC4A | Change of owner's name |
Owner name: MERCK SHARP & DOHME CORP., RAHWAY, NJ, US Effective date: 20121108 |
|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees |
Effective date: 20160510 |