SK15392002A3

SK15392002A3 - Denná liečba poruchy erekcie použitím inhibítora PDE5

Info

Publication number: SK15392002A3
Application number: SK1539-2002A
Authority: SK
Inventors: John S. Whitaker; Tejada Inigo Saenz De; Kenneth M. Ferguson
Original assignee: Lilly Icos Llc
Priority date: 2000-04-26
Filing date: 2001-04-13
Publication date: 2003-03-04
Also published as: CA2407519A1; NO20025138D0; CZ20023577A3; US20030100478A1; HUP0300477A3; ZA200208776B; EP1276481A2; KR20030007551A; BR0110373A; NO20025138L; MXPA02010539A; EA200201011A1; AU2001253612A1; HUP0300477A2; CN1446091A; IL152227A0; WO2001080860A2; JP2003531174A; WO2001080860A3; NZ521869A

Description

Denná liečba poruchy erekcie použitím inhibítora PDE5

Táto prihláška čiastočne nadväzuje na U.S. patentovú prihlášku č. 09/558,91 1 podanú 26. apríla 2000, ktorá nárokuje výhody dočasnej patentovej prihlášky č. 60/132,036 podanej 30. apríla 1999.

Oblasť techniky

Predkladaný vynález sa týka inhibítorov enzýmu fosfodiesterázy (PDE) a ich použitia vo farmaceutických výrobkoch. Ďalej sa predkladaný vynález týka účinných inhibítorov cyklického guanozín 3',5'-monofosfátu špecifickej fosfodiesterázy typu 5 (PDE5), ktoré keď sú začlenené do farmaceutického produktu sú vhodné na liečbu sexuálnej dysfunkcie.

Doterajší stav techniky

Biochemické, fyziologické a klinické účinky inhibítorov cyklického guanozín 3',5'-monofosfátu špecifickej fosfodiesterázy (cGMP-špecifická PDE) potvrdzujú ich použiteľnosť pri rôznych chorobných stavoch, v ktorých je požadovaná modulácia hladkých svalov, obličkovej, homostatickej, zápalovej a/alebo endokrinnej funkcie. Typ 5 cGMP-špecifickej fosfodiesterázy (PDE5) je hlavný cGMP hydrolyzujúci enzým vo vaskulárnom hladkom svalstve a bola potvrdená jeho expresia v dutinkovom telese penisu (Taher a kol., J. Urol., 149:285A (1993). Tak je PDE5 atraktívny cieľ v liečbe sexuálnej dysfunkcie (Murray, DN&P 6 (3): 150 - 56 (1993)).

Farmaceutický produkt, ktorý obsahuje PDE5 inhibítor je bežne dostupný a je predávaný pod ochrannou značkou VIAGRA®. Aktívnou zložkou vo

VIAGRA je sildenafil: Produkt je predávaný ako výrobok zahrnujúci 25, 50 a

100 mg tablety sildenafilu a príbalový leták. Príbalový leták informuje, že sildenafil je najúčinnejší inhibítor PDE5 inak nazývanej ako fosfodiesteráza (viac než 80 násobne pre inhibíciu PDE1, viac než 1 000 násobne pre PDE2, PDE3 a PDE4 inhibíciu). Hodnota IC50 pre sildenafil proti PDE5 bola určená ako 3 nM (Drugs of the Future, 22 (2), pp. 128-143 (1997)) a ako 3,9 nM (Boolell a kol., Int. J of Impotence Res., 8 p. 47-52 (1996)). Sildenafil je opísaný, že má 4 000 násobnú selektivitu pre PDE5 oproti PDE3 a len 10 násobnú selektivitu pre PDE5 oproti PDE6. Táto relatívne nedostatočná selektivita pre PDE6 je odvodená na základe abnormalít týkajúcich sa farebného videnia.

Aj keď sildenafil získal dôležitý komerčný úspech, problémy v liečbe poruchy erekcie (ED) ešte pretrvávajú. Prvá ED terapia využívajúca sildenafil je založená na dopyte alebo PRN terapie. „Dopyt(ové)“ dávkovanie je definované ako akútne podanie liečiva na liečbu poruchy erekcie pred očakávanou sexuálnou aktivitou. Užívateľ z tohto dôvodu musí napred plánovať a prijať relatívne veľkú orálnu dávku (napr. 25 mg) sildenafilu aspoň jednu hodinu pred očakávanou sexuálnou aktivitou. Začiatok žiadaných účinkov môže byť oneskorený ak sildenafil bol podávaný s jedlom.

Po druhé, relatívne veľká dopytová dávka sildenafilu má za následok závažné nepriaznivé vedľajšie účinky, zahrnujúce očervenenie v tvári (10 % rýchlosť incidencie). Aj napriek dostupnosti sildenafilu, pretrváva potreba objaviť zlepšené farmaceutické produkty, ktoré sú vhodné a praktickejšie pri liečbe sexuálnej dysfunkcie.

Predkladaný vynález poskytuje výrobok na ľudské farmaceutické použitie, obsahujúci príbalový letáčik, obal a orálnu dávkovú formu obsahujúcu PDE5 inhibítor v dávkových jednotkách medzi 1 a asi 10 mg / dávkovej formy. Príbalový letáčik udáva informácie o dávkovaní charakterizovanom pomocou dlhotrvajúceho podania inhibítora PDE5. Pozitívne účinky dlhotrvajúceho dávkovania boli dokumentované v klinických štúdiách a pomocou objavu, že podanie inhibítora PDE5 zlepšuje alebo ovplyvňuje vaskulatúru tak, že tkanivo dutinkového telieska reaguje na terapiu pri dávke nižšej než je požadovaná na dosiahnutie takej istej odpovede pri dopytovej alebo náhlej terapii. Výhody nízkeho, dlhotrvajúceho podania inhibítora PDE5 zahrnujú zlepšenie vaskulárnej odpovede na cGMP-stimulovanú relaxáciu v tkanive dutinkového telieska, zníženie toxicity prisudzovanej nižšej dávke inhibítora PDE5 a návrat do normálneho stavu, napr. pacient si nemusí plánovať sexuálnu aktivitu pri užívaní inhibítora PDE5. Dávkový režim podľa predkladaného vynálezu umožňuje spontánnosť sexuálnej aktivity požadovanej pacientom.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález poskytuje výrobok na farmaceutické použitie u ľudí, ktorý obsahuje príbalový letáčik, obal a orálnu dávkovú formu obsahujúcu asi 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5 na dávkovú formu na dlhotrvajúce a výhodné denné podanie.

Predkladaný vynález ďalej poskytuje spôsob liečby mužskej poruchy erekcie, ktorý zahrnuje dlhotrvajúce podanie orálnej dávkovej formy obsahujúcej 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5 až do celkovej dávky 10 mg na deň, pacientovi, ktorý túto liečbu potrebuje.

Predkladaný vynález ďalej poskytuje spôsob zlepšenia relaxačnej odpovede v tkanive dutinkového telieska, ktorý zahrnuje dlhotrvajúce podanie dávky 1 mg na deň až 10 mg na deň inhibítora PDE5.

Predkladaný vynález poskytuje výrobok na farmaceutické použitie u ľudí, ktorý obsahuje príbalový letáčik, obal a orálnu dávkovú formu obsahujúcu 1 až asi 10 mg selektívneho inhibítora PDE5, uvedený príbalový leták poskytuje informácie na dlhotrvajúce podanie inhibítora PDE5 na liečbu pacienta trpiaceho poruchou erekcie.

Predkladaný vynález poskytuje výrobok na farmaceutické použitie u ľudí, ktorý obsahuje príbalový leták, obal a orálnu dávkovú formu selektívneho inhibítora PDE5; uvedený príbalový leták poskytuje informácie na dlhotrvajúce podávanie inhibítora PDE5 na liečbu pacienta trpiaceho poruchou erekcie.

Predkladaný vynález ďalej poskytuje výrobok na farmaceutické použitie u ľudí, ktorý obsahuje:

a) orálnu dávkovú formu obsahujúcu asi 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5, ktorý má hodnotu IC50 menšiu než 10 nM a postačujúcu biologickú dostupnosť, aby bol účinný v jednotkových orálnych dávkach asi 1 až asi 10 mg;

b) príbalový leták, ktorý uvádza, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý takúto liečbu potrebuje a má dlhotrvajúci dávkový režim od asi 1 do asi 10 mg na deň, pričom dlhotrvajúci dávkovací režim zlepšuje vaskulárny stav a

c) obal.

a) orálnu dávkovú formu obsahujúcu asi 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5, ktorý má

i) hodnotu IC50 menšiu než 10 nM a ii) postačujúcu biologickú dostupnosť, aby bol účinný v jednotkových orálnych dávkach asi 1 až asi 10 mg;

b) príbalový leták, ktorý uvádza, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý takúto liečbu potrebuje a má dlhotrvajúci dávkovací režim asi 1 až asi 10 mg na deň, pričom dlhotrvajúci dávkovací režim zlepšuje vaskulárny stav; a

c) obal. ,

Podrobný opis

Na účely predkladaného vynálezu, ako je tu opisovaný, sú definované nasledujúce termíny a skratky.

Termín „obal“ predstavuje určitú nádobku a jej uzáver vhodné na uskladnenie, prepravu, rozprašovanie a/alebo manipuláciu s farmaceutickým produktom.

Termín „hodnota IC50“ je výsledkom merania účinnosti zlúčeniny pri inhibícií konkrétne PDE enzýmu (napr. PDElc, PDE5 alebo PDE6). Hodnota IC50 je koncentrácia zlúčeniny, ktorá sa prejavuje v 50% enzýmovej inhibícii v experimente jednotlivá dávka-odpoveď. Určenie hodnoty IC50 pre zlúčeninu je jednoducho vykonávané známymi in vitro metódami všeobecne opísanými v Y. Cheng a kol., Biochem. Pharmacol., 22, pp. 3099 - 3108 (1973).

Termín „príbalový letáčik“ predstavuje informáciu sprevádzajúcu produkt, ktorá poskytuje opis ako podávať produkt, spoločne s bezpečnostnými údajmi a údajmi o účinnosti potrebnými pre lekárov, farmaceutov a pacientov na presné informovanie týkajúce sa použitia produktu. Príbalový letáčik je všeobecne pokladaný za „etiketu“ pre farmaceutický produkt.

Termín „orálna dávková forma“ je používaný vo všeobecnom zmysle na posúdenie farmaceutických produktov podávaných orálne. Orálne dávkové formy sú udávané odborníkmi v odbore a zahrnujú také formy ako kvapalné formulácie, tablety, kapsule a gélové kapsule.

Termíny „deň“ a „denne“ odkazujú na podanie produktu jeden alebo viac krát, všeobecne jeden až tri krát, ešte výhodnejšie jeden krát počas asi 24 hodinovej periódy. „Asi 24 hodinová perióda“ predstavuje časový úsek asi 20 až asi 28 hodín.

Termín „dlhotrvajúci alebo dlhotrvajúco“ sa týka pravidelne sa opakujúceho podania produktu v intervaloch nesúvisiacich zo začiatkom sexuálnej aktivity. Na dosiahnutie plného prospechu z predkladaného vynálezu sa dlhotrvajúce podanie všeobecne týka pravidelne sa opakujúceho podania na rozšírenie periódy, výhodne denne počas troch alebo viacerých dní, a ešte výhodnejšie denne tak dlho ako pacient trpí poruchou erekcie (v neprítomnosti terapie). Termín „dlhotrvajúce“ podanie zahŕňa iné režimy okrem denného dávkovania. Napríklad, dlhotrvajúce podávanie zahŕňa podanie formulácie podporujúcej uvoľňovanie, ktorá poskytuje inhibítor PDE5 na reguláciu hladiny nesúvisiacej so začiatkom sexuálnej aktivity. V kontraste s akútnym alebo dopytovým podaním, dlhotrvajúce podanie nesúvisí s podaním inhibítora PDE5 na začiatku sexuálnej aktivity (napr. jednu hodinu pred pohlavným stykom).

Termín „inhibítor PDE5“ sa týka zlúčenín majúcich hodnotu IC50 na inhibíciu PDE5 nižšiu než 10 nM. Výhodné inhibítory PDE5 sú selektívne na inhibíciu PDE5 a majú:

1) hodnotu IC50 na inhibíciu PDE5 aspoň 100 krát nižšiu než je hodnota IC50 na inhibíciu PDE6;

2) hodnotu IC50 na inhibíciu PDE5 aspoň 1 000 krát menšiu než je hodnota IC50 na inhibíciu PDElc; a

3) hodnotu IC50 na inhibíciu PDE5 menšiu než 10 nM.

Inhibítory PDE5 sa podstatne odlišujú v chemickej štruktúre a ich použitie v predkladanom vynáleze nie je závislé na chemickej štruktúre, ale skôr je závislé od parametrov účinnosti zahrnutých v nasledujúcom texte.

Termín „abnormality videnia“ predstavuje abnormálne videnie charakterizované modro-zeleným videním zapríčineným PDE 6 inhibíciou.

Termín „voľné liečivo“ predstavuje tuhé častice liečiva, ktoré nie sú hneď zapustené do polymérneho ko-precipitátu.

Ako bolo uvedené v predchádzajúcom, predkladaný vynález je zameraný na výrobok na farmaceutické použitie u ľudí, ktorý obsahuje príbalový leták, obal a dávkovú formu obsahujúcu 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5 na jednotkovú dávku. Inhibítor PDE5 používaný v predkladanom vynáleze je inhibítor majúci hodnotu IC50 na PDE5 inhibíciu nižšiu než 10 nM a postačujúcu biologickú dostupnosť, aby bol účinný v množstve 1 až asi 10 mg na jednotkovú dávku.

Preferované inhibítory PDE5 selektívne inhibujú PDE5 oproti PDE6 a PDElc. Selektivita je kvantifikovaná pomocou diferenciálu IC50· Diferenciál je vyjadrený ako pomer hodnôt IC50 PDE6 ku PDE5, napr. pomer IC50 hodnoty oproti PDE6 ku IC50 hodnote oproti PDE5 (PDE6 ku PDE5) je väčší než 100, výhodnejšie väčší než 300, najvýhodnejšie väčší než 500.

Podobne, pomer IC50 hodnoty oproti PDElc ku IC50 hodnote oproti PDE5 (PDElc ku PDE5) je väčší než 1 000. Preferované inhibítory PDE5 majú 3 000 násobne väčší rozdiel medzi inhibíciou PDE5 a PDElc, výhodnejšie 5 000 násobne väčší rozdiel medzi IC50 hodnotou oproti PDE5 a PDElc. Účinnosť inhibítora, predstavovaná prostredníctvom hodnoty IC50 oproti PDE5 je menšia než 10 nM, výhodne menšia než 5 nM, výhodnejšie menšia než 2 nM a najvýhodnejšie menšia než 1 nM.

Príbalový letáčik uvádza opis ako podávať farmaceutický produkt spolu s bezpečnostnými údajmi a údajmi o účinnosti potrebnými na to, aby lekár, farmaceut, pacient mohol presne používať produkt. Príbalový letáčik všeobecne je označovaný ako etiketa pre farmaceutický produkt. Príbalový leták začlenený do výrobku uvádza, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu stavov, v ktorých je žiaduca inhibícia PDE5, konkrétne na liečbu sexuálnej dysfunkcie a najmä mužskej poruchy erekcie a ženskej poruchy vzrušivosti.

Príbalový letáčik tiež uvádza inštrukcie na podávanie jednej alebo viacerých asi 1 až asi 10 mg jednotkových dávok, dlhotrvajúco, výhodne denne počas aspoň troch dní až do maximálnej celkovej dávky 10 mg na deň. Dávka najčastejšie podávaná je asi 1 až asi 10 mg na, výhodnejšie asi 2 až asi 10 mg a najvýhodnejšie asi 5 mg až asi 10 mg dávkovej formy podávanej denne.

Pretože teraz nárokovaný výrobok umožňuje dlhotrvajúci dávkový režim, ktorý je efektívnejší než ekvivalentná dopytová (pred začiatkom) alebo akútna dávka, výskyt vedľajších účinkov je výrazne zredukovaný. Z tohto dôvodu preferovaný výrobok obsahuje príbalový letáčik, ktorý hovorí o výskytoch očervenania pod 2 %, výhodne pod 1 % a najvýhodnejšie pod 0,5 % u pacientov, ktorým je podávaná dávková forma. Výskyt očervenania dokazuje zreteľné zlepšenie u farmaceutických produktoch, ktoré obsahujú inhibítor PDE5.

Obal používaný v predkladanom výrobku je konvenčné používaný vo farmaceutickom priemysle. Všeobecne je obalom krabička s hliníkovej fólie, sklenené alebo plastové fľaštičky s uzáverom alebo zátkou, alebo iné takéto výrobky vhodné na použitie pacientom alebo farmaceutom. Výhodne je obal určený na uskladnenie 1 až 1 000 tuhých dávkových foriem, výhodne 1 až 500 tuhých dávkových foriem a najvýhodnejšie 5 až 30 tuhých dávkových foriem.

Orálne dávkové formy sú známe odborníkom v odbore a zahrnujú, napríklad, také formy ako kvapalné formulácie, tablety, kapsule a gélové kapsule.

I

Výhodne sú dávkové formy tuhé dávkové formy, najmä tablety obsahujúce asi 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5. Určité farmaceutický prijateľné excipienty (prenosové látky) na orálne použitie sú vhodné na prípravu takýchto dávkových foriem. Vhodné farmaceutické dávkové formy zahrnujú koprecipitátové formy opisované, napríklad, v Butlerovom U.S. patente č. 5,985, 326 začlenenom v tomto texte odkazom. V preferovaných uskutočneniach, jednotková dávková forma podľa predkladaného vynálezu je voľná tuhá koprecipitátová forma inhibítora PDE5, ale vhodnejšie obsahuje tuhý inhibítor PDE5 ako voľné liečivo.

Výhodne, tablety obsahujú farmaceutické excipienty (prenosové látky) všeobecne určené na bezpečný prenos, také ako laktóza, mikrokryštalická celulóza, škrob, uhličitan vápenatý, stearát horečnatý, kyselina steárová, mastenec a koloidný oxid kremičitý a sú pripravené štandardnými farmaceutickými technikami opísanými v Remington's Pharmaceutical Sciences, 18^th Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990). Takéto techniky zahrnujú, napríklad, granuláciu za mokra, po ktorej nasleduje sušenie, mletie a lisovanie do tabliet s alebo bez krycieho filmu; granuláciu za sucha, po ktorej nasleduje mletie, lisovanie do tabliet s alebo bez krycieho filmu; homogenizáciu za sucha, po ktorej nasleduje lisovanie do tabliet s alebo bez krycieho filmu; tvarovanie tabliet; granuláciu za mokra, sušenie a plnenie do želatínových kapsúl; spájanie za sucha a plnenie do želatínových kapsúl; alebo plnenie želatínových kapsúl suspenziou a roztokom. Vo všeobecnosti, tuhé dávkové formy majú identifikujúce označenia, ktoré sú vryté alebo otlačené na povrchu.

Orálna dávková forma tiež môže byť forma podporujúca uvoľňovanie formulácie, ktorá dlhodobo poskytuje asi 1 až asi 10 mg na deň inhibítora PDE5 pacientovi počas niekoľkých dní.

Predkladaný vynález je založený na podrobných experimentoch a klinických skúškach a neočakávaných výsledkoch, že sexuálna dysfunkcia môže byť liečená použitím dlhodobej, nízkej dávky inhibítora PDE5 majúceho IC50 hodnotu na inhibíciu PDE5 nižšiu než 10 nM.

Dlhodobý, výhodne denný, dávkovací režim asi 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5 tiež poskytuje aj iné výhody zahrnujúce a) spontánnosť v sexuálnom styku, b) neočakávanú efektívnosť u takej nízkej orálnej dávky inhibítora PDE5, zahrnujúcu pozorovanie väčšej odpovede na inhibítor PDE5 pri nižšej dlhodobej dávke inhibítora PDE5, ktorá v súčasnej dobe zodpovedá 25 mg akútnej, dopytovej dávke sildenafilu a c) zníženie nepriaznivých účinkov prisudzovaných selektivite inhibítora PDE5 a nízkej dávke.

Celkovo bolo dokázané, že dlhodobé dávkovanie inhibítora PDE5, majúceho vlastnosti uvedené vyššie, poskytuje tú istú alebo zlepšenú účinnosť pri 1 až asi 10 mg, než vyššia akútna dopytová dávka podávaná v súčasnosti. Zvýšená účinnosť potvrdená nízkym denným dávkovaním inhibítora PDE5 v liečbe poruchy erekcie nie je závislé na kumulácii liečiva, ale je výsledkom zlepšenej vaskulárnej vnímavosti, ak je inhibítor PDE5 prítomný v plazme kontinuálne alebo v podstate kontinuálne. Efekt „vaskulárne podmieňovanie“ nebolo predtým potvrdené s inhibítormi PDE5 konkrétne alebo inhibítormi PDE5 vo všeobecnosti. Konkrétne, vaskulárne podmieňovanie nebolo potvrdené pri dopytovom dávkovaní inhibítora PDE5 alebo u pacientov užívajúcich akútnu dávku inhibítora PDE5 na krátke časové rozpätie dvoch až troch dní. Očakávalo sa, že vaskulárne podmieňovanie nastáva po dlhodobom podaní inhibítora PDE5, napríklad po asi troch denných dávkach až do 10 mg, výhodne po piatich dňoch denného dávkovania a najvýhodnejšie po siedmich dňoch denného dávkovania. Po asi troch dňoch denného dávkovania, občas chýbajúca jedná dlhodobá dávka môže viesť ku redukcii vo vaskulárnom podmieňovaní, ale nie úplnej strate podmieňovania. Teoreticky sa predpokladá, ale nie je to v tomto vynáleze potvrdené, že vaskulárne zmeny sú spôsobené čiastočnou alebo úplnou zmenou obehových dysfunkcií v penise vyvolanou stavmi takými, ako cukrovka, ateroskleróza, fajčenie, vysoký krvný tlak alebo ich kombináciou. Tieto stavy majú za následok zhrubnutie stien ciev, zníženie pružnosti ciev a zníženie vnímavosti na endogénne vazodilátatory, také ako oxid dusičný.

Inhibítory PDE5 sa podstatne odlišujú v chemickej štruktúre a použitie inhibítora PDE5 ako bolo definované v predkladanom vynáleze nie je závislé na konkrétnej chemickej štruktúre ale skôr na kritických parametroch naznačených v texte. Avšak preferované zlúčeniny majúce požadovanú účinnosť a požadovanú selektivitu môžu byť ľahko identifikované pomocou testov opísaných v tomto texte zo zlúčenín opísaných v U.S. patente č. 5,859,006 od Daugana a v U.S. patente č. 5,981,527 od Daugana a kol., a v U.S. patente č. 6,001,847, ktoré sú začlenené v tomto texte odkazom.

Preferované zlúčeniny v U.S. patente č. 5,859,006 od Daugana a v U.S. patente č. 5,981,527 od Daugana a kol., sú charakterizované štruktúrnym vzorcom (I):

(I) v ktorom substituent R° je vybraný zo skupiny obsahujúcej vodík, halogén a Ci-₆alkyl;

substituent R¹ je vybraný zo skupiny obsahujúcej vodík, Ci-ôalkyl, C₂-6alkenyl, C₂.6alkinyl, halogénCi.galkyl, Ca.gcykloalkyl, C3-8cykloalkylCi.3alkyl, arylCi-3alkyl, pričom aryl je fenyl alebo fenyl substituovaný jedným až troma substituentami vybranými zo skupiny obsahujúcej halogén, Ci.galkyl, Ci.6alkoxy, metyléndioxy a ich zmesi a heteroarylCi.3alkyl, pričom heteroaryl je tienyl, furyl alebo pyridyl, každý voliteľne substituovaný jedným až troma substituentami vybranými zo skupiny obsahujúcej halogén, Cj.ôalkyl, Ci-ealkoxy a ich zmesi.

substituent R² predstavuje voliteľne substituovaný tnonocyklický aromatický kruh vybraný z benzénu, tiofénu, furánu a pyridínu alebo voliteľne substituovaný bicyklický kruh pripojený ku zvyšnej molekule cez jeden z uhlíkových atómov benzénového kruhu a kde fúzovaný kruh A je 5- alebo 6- členný kruh, nasýtený alebo Čiastočne alebo úplne nenasýtený a obsahuje uhlíkové atómy a prípadne jeden alebo dva heteroatómy vybrané zo skupiny obsahujúcej kyslík, síru a dusík;

substituent R³ predstavuje vodík alebo Ci_3alkyl alebo substituent R¹ a substituent R³ spoločne predstavujú 3- alebo 4-členný alkylový alebo alkenylový reťazec; a ich soli a solváty.

Iné preferované zlúčeniny sú tie so vzorcom (I) kde:

substituent R° je vodík, halogén alebo Ci-ôalkyl; substituent R¹ je vodík alebo Ci^alkyl; substituent R² je bicyklický kruh

o—( ktorý môže byť prípadne substituovaný jedným alebo viacerými skupina mi vybranými z halogénu a Cj^alkylu; a substituent R³ je vodík alebo Ci_3alkyl.

Preferované zlúčeniny sú:

(6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-metyl-6-(3,4-metyléndioxyfenyl)pyrazino[2',ľ:6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dión; a (3S,6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2,3-dimetyl-6-(3,4-metyléndioxyfenyl)pyrazino[2',ľ:6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dión;

a ich fyziologicky prijateľné soli a solváty (napr. hydráty).

v

Špeciálne preferovaný selektívny inhibítor PDE5 použitý v predkladanom vynáleze je

I (6R-trans)-6-(l,3-benzodioxol-5-yl)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2metylpyrazino[l',2': 1,6]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dión, alternatívne pomenovaný (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-metyl-6-(3,4-metyléndioxyfenyl)pyrazino[ľ,2':l,6]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dión, ktorý je zahrnutý v U.S. patente č. 5,859,006 od Daugana a predstavovaný štruktúrnym vzorcom (II):

O

O (Π)

Iné príkladné zlúčeniny použité v predkladanom vynáleze sú zahrnuté v U.S. patente č. 6,001,847 od Daugana a kol., WO 97/43287 a WO 00/15639 tu začlenené odkazom.

V ďalšom, môže byť sildenafil a vardenafil použitý ako inhibitor PDE5 na denné dávkovanie.

vardenafil

S ohľadom na sildenafil a vardenafil, dávka na dlhodobé podávanie je asi 1 až asi 25 mg na deň a výhodne asi 1 až asi 20 mg na deň.

Iné použiteľné inhibitory PDE5, ktoré môžu byť použité na dlhodobé dávkovanie podľa predkladaného vynálezu zahrnujú, ale neobmedzujú sa len na ne:

5-(2-etoxy-5-morfoIinoacetylfenyl)-l-metyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón;

5-(5-morfolinoacetyl-2-n-propoxy fenyl)- 1-m ety 1-3-n-propyl-l,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-[2-aly 1 oxy-5-(4-metyl-l-piperazinylsulfonyl)-fenyl]-l-mety 1-3-n-propyl-1,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-{2-etoxy-5-[4-(2-propyl )-l-piperazinyl sulfonyl]-fenyl} -l-metyl-3-n-propyll,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-{2-etoxy-5-[4-(2-hydroxyetyl)-l-piperazinylsulfonyl]-fenyl)-l-metyl-3-npropyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-{5-[4-(2-hydroxyetyl)- l-piperazinylsulfonyl]-2-n-propoxyfenyl} -1 -metyl-3n-propyl- l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-[2-etoxy-5-(4-mety 1-1 -piperazinyl karbony l)-fenyl]-l-mety 1-3-n-propyl-1,6dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón; a

- [2-etoxy-5-(1-mety 1-2-i m idazolyl) fenyl]-1-m ety 1-3-n-propyl- 1,6-dihydro-7Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón.

Prípravky

Príprava ľudského PDE5.

Rekombinantná produkcia ľudského PDE5 bola realizovaná v podstate tak ako je to opísané v príklade 7 v U.S. patente č. 5,702,936, ktorý je tu začlenený odkazom, okrem toho, že bol použitý kvasinkový transformačný vektor, ktorý je odvodený od základného ADH2 plazmidu opísaného v V. Price a koľ, Methods in Enzymology, 1985, strany 308 - 318 (1990), začleňujúceho kvasinkové ADH2 promótorové a terminátorove sekvencie skôr ako ADH1 promótorové a terminátorove sekvencie a hostiteľ Saccharomyces cerevisiase bol kmeň BJ2-54 deficitný na proteázu uložený 31. augusta 1998 v Americkej zbierke kultúr (American Type Culture Collection, Manassas, Virginia) pod úložným číslom ATCC 74465. Transformované hostiteľské bunky rástli v 2X SC-leu médiu, pH 6,2 so stopovými prvkami a vitamínmi. Po 24 hodinách, YEP médium obsahujúce glycerol sa pridalo na konečnú koncentráciu 2X YEP/3 % glycerol. Približne o 24 hodín neskôr sa bunky zozbierali, premyli a uskladnili pri -70 °C.

Bunkové pelety (29 g) sa rozmrazili na ľade s rovnakým objemom lyžujúceho pufru (25 mM Tris-Cl, pH 8, 5 mM MgCty, 0,25 mM ditiotreitol, 1 mM benzamidín a 10 μΜ síranu zinočnatého). Bunky boli lýzované v mikrofluidizéry s N₂ pri 20 000 psi. Lyzát sa centrifugoval a prefiltroval cez 0,45 μπι filtre na jedno použitie. Filtrát sa aplikoval na 150 ml kolónu obsahujúcu Q Sepharose Fast Flow (Pharmacia). Kolóna sa premyla 1,5 objemami pufra A (20 mM Bis-Tris propán, pH 6,8, 1 mM chloridu horečnatého, 0,25 mM ditiotreitol, 10 μΜ síranu zinočnatého) a eluovala krokovým gradientom 125 mM NaCl v pufry A, po ktorom nasledoval lineárny gradient 125 - 1 000 mM NaCl v pufry A.

Aktívne frakcie z lineárneho gradientu sa aplikovali na 180 ml hydroxyapatitovú kolónu v pufry B (20 mM Bis-Tris Propán (pH 6,8), 1 mM chloridu horečnatého, 0,25 mM ditiotreitolu, 10 μΜ síranu zinočnatého a 250 mM chloridu draselného). Po vložení sa kolóna premyla 2 objemami pufra B a eluovala sa lineárnym gradientom 0 -125 mM fosfátu draselného v pufry B. Aktívne frakcie sa združili, vyzrážali sa 60 % síranom amónnym a resuspendovali sa v pufry C (20 mM Bis-Tris propán, pH 6,8, 125 mM NaCl, 0,5 mM ditiotreitolu a 10 μΜ síranu zinočnatého). Združené frakcie sa aplikovali na 140 ml kolónu Sephacryl S-300 HR a eluovali sa pufrom C. Aktívne frakcie sa zriedili na 50 % glycerolom a uskladnili sa pri -20 °C. Výsledné prípravky mali asi 85 % čistotu pomocou SDS-PAGE.

Test na PDE aktivitu

Aktivita PDE5 bola meraná Štandardnými postupmi v danom odbore. Napríklad, špecifická aktivita PDE môže byť určená nasledujúcim spôsobom. PDE testy využívajúce separačnú techniku s uhlím sa vykonávali v podstate tak ako je to opísané v Loughney a kol., (1996), The Journal of Biological Chemistry, 271: 796 - 806. V tomto teste, PDE5 aktivita konvertuje [³²P]cGMP na [³²P] 5' GMP úmerne k množstvu prítomnej aktivity PDE5. [³²P] 5' GMP je potom kvantitatívne konvertované na voľný [³²P] fosfát a neoznačený adenozín pomocou účinku 5'-nukleotidázy z hadieho jedu. Z tohto dôvodu, množstvo voľného [³²P] fosfátu je úmerné enzýmovej aktivite. Test bol vykonávaný pri 30 °C v 100 μΐ reakčnej zmesi obsahujúcej (konečné koncentrácie) 40 mM Tris-Cl (pH 8,0), 1 μΜ síranu zinočnatého, 5 mM chloridu horečnatého a 0,1 mg/ml hovädzieho sérového albumínu. PDE5 je prítomné v množstvách, ktoré dávajú výťažok menej ako 30 % celkovej hydrolýzy substrátu (lineárne podmienky testu). Test začínal pridaním substrátu (1 mM [³²P]cGMP), a zmes sa inkubovala 12 minút. Potom sa pridalo sedemdesiat päť (75) pg jedu z Crotalus atrox a inkubácia pokračovala tri až viac minút (15 minút celkovo). Reakcia sa zastavila pridaním 200 ml aktívneho uhlia (25 mg / ml suspenzie v 0,1 M NaH2PO4, pH

4). Po centrifugácii (750 x g počas 3 minút) na sediment uhlia, vzorke supernatantu sa nechala určiť rádioaktivít v scintilačnom počítači a vypočítala sa aktivita PDE5. Prípravky mali špecifické aktivity asi 3 μΜ cGMP hydrolyzovaného za minútu na miligram proteínu.

Príprava hovädzieho PDE6

Hovädzí PDE6 boli dodávané Dr. N. Virmauxom, INSERM U338, Strasbourg. Hovädzie sietnice sa pripravili tak ako je to opísané Virmauxom a kol., FEBS Letters, 12 (6), pp. 325 - 328 (1971) a tiež A. Sitaramayya(om) a kol., Exp. Eye Res., 25, pp. 163 - 169 (1997). Pokiaľ nie je uvedené inak, všetky operácie prebiehali v chlade a pri tlmenom červenom svetle. Oči boli udržiavané v chlade a v tme počas štyroch hodín po porážke.

Po príprave vonkajšieho segmentu (ROS) hovädzej sietnice v podstate nasledovali postupy opísané Schichi(om) a kol., J. Biol. Chem., 224:529 (1969). V typickom experimente sa 35 hovädzích sietnic rozdrvilo v trecej miske s 35 ml 0,066 M fosfátového pufru, pH 7,0, upravila do 40 % sacharózou, po čom nasledovala homogenizácia v Potterovom homogenizátore (20 kmitov hore a dole). Suspenzia sa centrifugovala pri 25 000 x g počas 20 minút. Pelet sa homogenizoval v 7,5 ml 0,006 M fosfátového pufru (40 % v sacharóze) a opatrne prevrstvil 7,5 ml fosfátového pufra (neobsahujúceho sacharózu). Centrifugácia bola kontrolovaná rotorom pri 45 000 x g počas 20 minút a poskytla na dne čierny pelet a tiež červený pás pri rozhraní 0,006 M fosfátu -40 % sacharózy / 0,066 M fosfát (surový ROS). Červený materiál pri rozhraní sa odstránil, zriedil fosfátovým pufrom, odstredil na pelet a znovu rozdelil v pufrovanej 40 % sacharóze ako je opísané vyššie. Tento postup sa opakoval 2 alebo 3 krát až do kým sa nevytváral žiadny pelet. Prečistený ROS sa premyl vo fosfátovom pufry a nakoniec sa odstredil na pelet pri 25 000 x g počas 20 minút. Všetky materiály sa potom udržiavali mrazené až do použitia.

Hypotonické extrakty sa pripravili suspendovaním izolovaného ROS v 10 mM Tris-Cl pH 7,5, 1 mM EDTA a 1 mM ditioerytritolu, po čom nasledovala centrifugácia pri 100 000 x g počas 30 minút.

Prípravok mal špecifickú aktivitu asi 35 nmólov cGMP hydrolyzovaných za minútu na miligram proteínu.

Príprava PDElc z buniek Spodoptera fugiperda (Sf9)

Bunkové pelety (5 g) sa roztopili na ľade s 20 ml lyžujúceho pufru (50mM MOPS pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 0,1 mM CaCl₂, 1 mM DTT, 2 mM benzamidín HCI, 5 pg / ml pepstatínu, leupeptínu a aprotenínu). Bunky sa lyžovali pomocou pasažovania cez Francúzsku tlakovú jednotku (SLM-Aminco) kým teploty boli udržiavané pod 10 °C. Výsledný bunkový homogenát sa centrifugoval pri 36 000 rpm pri 4 °C počas 45 minút v Beckmanovej ultracentrifúge použitím rotora Typu TI45. Supernatant sa odložil a výsledný pelet sa resuspendoval s 40 ml solubilizačného pufru (lyžujúci pufer obsahujúci IM NaCl, 0,lM MgCl₂, lmM CaCl₂, 20 pg/ml kalmodulínu a 1 % sulfobetaín SB 12 (Z318

12) pomocou sonikácie použitím tuneru VibraCell s mikrotipom počas 3 x 30 sekúnd. Toto bolo vykonávané v rozdrvenej ľad/soľ zmesi kvôli chladeniu. Po sonikácii sa zmes pomaly miešala 30 minút pri 4 °C na ukončenie solubilizácie membránových väzbových proteínov. Táto zmes sa centrifugovala v Beckmanovej ultracentrifúge použitím rotora rýpu TI45 pri 36 000 rpm počas 45 minút. Supernatant sa zriedil lyžujúcim pufrom obsahujúcim 10 μg/ml kalpaínového inhibítora I a II. Vyzrážaný proteín sa centrifugoval 20 minút pri 9 000 rpm v rotory Beckman JA-10. Znovu získaný supernatant sa potom podrobil chromatografii na Mimetic Blue AP Agaróze.

Za účelom fungovania Mimetic Blue AP Agarózovej kolóny bola najprv živica ochránená aplikovaním 10 kolónových objemov 1 % polyvinylpyrolidínu (napr. MW 40 000) na blokovanie nešpecifických väzbových miest. Voľná väzba PVP-40 sa odstránila premytím 10 kolónovými objemami 2M NaCl a 10 mM citrátu sodného pH 3,4. Tesne pred pridaním solubilizovanej PDElc vzorky sa kolóna vyrovnala 5 lôžkovými objemami kolónového pufra A (50 mM MOPS pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 5 mM MgCl₂, 0,1 mM CaCl₂, 1 mM DTT, 2 mM benzamidín HCI).

Rozpustená vzorka bola aplikovaná na kolónu pri prietokovej rýchlosti 2 ml / min s recykláciou, tak že celková vzorka bola aplikovaná 4 až 5 krát počas 12 hodín. Po ukončení aplikácie sa kolóna premyla 10 objemami kolóny kolónového pufra A, po čom nasledovalo 5 kolónových objemov kolónového pufra B (kolónový pufer A obsahujúci 20 mM 5'-AMP), 5 kolónových objemov kolónového pufra C (50 mM MOPS pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 0,1 mM CaCl₂, 1 mM ditiotreitolu a 2 mM benzamidín HCI). Enzým sa eluoval do troch po sebe idúcich kvapiek. Prvá kvapka obsahovala enzým z 5 kolónového objemu premytého kolónovým pufrom C obsahujúcim 1 mM cAMP. Druhá kvapka obsahovala enzým z 10 kolónového objemu premytého kolónovým pufrom C obsahujúcim 1 M NaCl. Konečná kvapka enzýmu obsahovala 5 kolónový objem premytý kolónovým pufrom C obsahujúcim 1 M NaCl a 20 mM cAMP.

Aktívne kvapky enzýmu sa spojili a bol odstránený cyklický nukleotid pomocou konvenčnej gélovej filtračnej chromatografie alebo chromatografie na hydroxy-apatitových živiciach. Po odstránení cyklických nukleotidov sa enzýmové jamky dializovali oproti dializačnému pufru obsahujúcom 25 mM MOPS pH 7,4, 10 μΜ ZnSO₄, 500 mM NaCI, 1 mM CaCb, 1 mM ditiotreitolu, 1 mM benzamidín HCI, po čom nasledovala dialýza oproti dializačnému pufru obsahujúcemu 50 % glycerol. Enzým bol rýchlo zmrazený pomocou suchého ľadu a uskladnený pri -70 °C.

Výsledné prípravky mali asi viac ako 90 % čistotu podľa SDS-PAGE. Tieto prípravky mali špecifické aktivity od asi 0,1 do 1,0 μιηοΐ cAMP hydrolyzovaného za minútu na miligram proteínu.

Určovania hodnoty IC50

Parametrom záujmu vo vyhodnocovaní účinnosti kompetitívneho inhibítora enzýmu PDE5 a/alebo PDElc a PDE6 je inhibičná konštanta, napr. Kj. Tento parameter môže byť aproximovaný určením hodnoty ICso. ktorá je koncentrácia inhibítora a má za následok 50 % inhibíciu enzýmu v jednoduchom experimente typu dávka - odozva za nasledujúcich podmienok.

Koncentrácia inhibítora je vždy väčšia než koncentrácia enzýmu, tak že koncentrácia voľného inhibítora (ktorý je neznámy) je odhadnutá pomocou celkovej koncentrácie inhibítora (ktorá je známa).

Bol zvolený vhodný interval koncentrácií inhibítora (napr. koncentrácie inhibítora aspoň niekoľko krát väčšie a niekoľko krát menšie než Kj sú prítomné v experimente). Typicky, koncentrácie inhibítora sú z intervalu 10 nM až 10 μΜ.

Koncentrácie enzýmu a substrátu sú vybrané tak, že menej než 20 % substrátu bolo spotrebovaných v neprítomnosti inhibítora (poskytujúc napr. maximum substrátovej hydrolýzy od 10 až 15 %), tak že enzýmová aktivita je približne konštanta počas celého testu.

Koncentrácia substrátu je menej než jedna desatina Michaelisovej konštanty (K_m). Za týchto podmienok, hodnota IC50 bude veľmi podobná Kj. To je kvôli tomu, že Cheng-Prusoffov vzťah týkajúci sa týchto dvoch parametrov : IC50 = Ki(l + S/K_m), s (1 + S/K_m) je približne 1 pri nízkych hodnotách S/K_m.

Hodnota IC50 je odhadnutá z údajov umiestnených na vhodný model interakcie inhibítora enzýmu. Ak táto interakcia je známa, zahŕňa jednoduchú kompetíciu inhibítora so substrátom a môže byť použitý dvojparametrový model:

Y = A / (1 + x / B) kde y je enzýmová aktivita meraná pri koncentrácii inhibítora x, A je aktivita v neprítomnosti inhibítora a B je hodnota IC50. Pozri Y. Cheng a kol., Biochem. Pharmacol., 22: 3099 - 3108 (1973).

t

Účinky inhibítorov podľa predkladaného vynálezu na enzýmovú aktivitu prípravkov PDE5 a PDE6 ako boli opísané vyššie sa stanovili akýmkoľvek z dvoch testov, ktoré sa odlišujú od iných najmä na základe stupnice merania a poskytli v podstate tie isté výsledky v hodnotách IC50· Obidva testy zahrňujú modifikáciu postupu Wellsa a kol., Biochim. Biophys. Acta, 384:430 (1975). Prvý z testov bol vykonaný v celkovom objeme 200 μΐ zahrnujúcom 50 mM Tris pH 7,5, 3 mM Mg acetát, 1 mM EDTA, 50 pg / ml nukleotidázy z hadieho jedu a 50 nM [³H]-cGMP (Amersham). Zlúčeniny podľa vynálezu sa rozpustili v DMSO, ktorý bol prítomný v teste v 2 %. Testy boli inkubované 30 minút pri 30 °C a ukončené pridaním 800 μΐ 10 mM Tris pH 7,5, 10 mM EDTA, 10 mM teofylínu, 0,1 mM adenozínu a 0,1 mM guanozínu. Zmesi sa vložili do 0,5 ml QAE Sephades kolón a eluovali sa 2 ml 0,1 M formátu (pH 7,4). Eluovaná rádioaktivita sa merala scintilačným počítačom v Optiphase Hisafe 3.

Druhý, mikroplatňa, PDE test sa vykonal použitím Multiskrínových platní a vákua. Test (100 μΐ) obsahoval 50 mM Tris pH 7,5, 5 mM Mg acetátu, 1 mM EDTA a 250 pg / ml nukleotidázy z hadieho jedu. Iné zložky reakčnej zmesi boli opísané vyššie. Na konci inkubácie sa celkový objem testov vložil na QAE Sephadex mikrokolónovú platňu pomocou filtrácie. Voľná rádioaktivita sa eluovala 200 μΐ vody, z ktorej 50 μΐ alikvóty sa analyzovali scintilačným počítačom ako bolo opísané vyššie.

Nasledujúce príklady sú predkladané na ďalšiu ilustráciu prípravku podľa vynálezu. Predmet predkladaného vynálezu nie je obmedzený len na predkladané príklady.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Zlúčenina štruktúrneho vzorca (I) bola pripravená tak, ako je to opísané v U.S. patente 5,859,006 a formulovaná do tabliet použitím mokrej granulácie. Povidón sa rozpustil vo vode, aby sa vytvoril 10 % roztok. Aktívna zlúčenina, mikrokryštalická celulóza, kroskarmelóza sodná a sulfát lauryl sodný sa pridali do mixéra a miešali sa 2 minúty. Prášky sa granulovali za mokra roztokom povidónu a extra vody, aby došlo k úplnej granulácii. Výsledná zmes sa vysušila v sušičke s prívodom vzduchu pri 70 °C ± 5 °C až do kým došlo k strate vlhkosti pod 2,5 %. Granule sa preosiali cez Comil s vhodnými priehradkami (alebo sitom) a pridali sa do vhodného mixéra. Extragranulárna kroskarmelóza sodná a sulfát lauryl sodný a koloidný bezvodý oxid kremičitý sa preosiali cez vhodné sito (napr. 500 mikrónov) a pridali sa do mixéra a homogenizovali dve minúty. Homogenát sa lisoval s cieľom kompresia/váha 250 mg použitím 9 mm kruhovej matrice.

Jadrové tablety boli pokryté vodnou suspenziou Opadry OY-S-7322 použitím Accelacota (alebo podobným zariadením na poťahovanie) s využitím prúdiaceho vzduchu pri 50 °C až 70 °C až do kým sa váha tabliet zvýšila o 8 mg. Opadry OY-S-7322 obsahuje me'tylhydroxypropylcelulózu Ph. Eur., oxid titaničitý Ph. Eur., Triacetín USP. Opadry zvyšuje hmotnosť každej tablety na si 258 mg. Množstvo filmového poťahu aplikovaného na tabletu môže byť menšie než to, ktoré bolo určené v závislosti od účinnosti.

Tablety sú vkladané do alobalových puzdier doplnených o príbalový letáčik opisujúcich bezpečnosť a účinnosť zlúčeniny.

Zložka	Formulácie (mg na tabletu)
Selektívny inhibítor PDE5¹)	1	5
Hydroxypropylmetylcelulóza ftalát	1	5
Mikrokryštalická celulóza	221,87	213,87
Kroskarmelóza sodná	5,00	5,00
Sulfát lauryl sodný	2,50	2,50
Sulfát Povidón K30	9,38	9,38
Čistená voda USP (voda na zavlažovanie)	q.s.	q.s.
Kroskarmelóza sodná	5,00	5,00
Sulfát lauryl sodný	2,50	2,50
Koloidný bezvodý oxid kremičitý	0,50	0,50
Stearát horečnatý	1,25	1,25
Celkové jadro medzisúčet	250,00	250,00
(Filmový poťah Opadry OY-S-7322)	asi 8 mg	asi 8 mg

1) Zlúčenina štruktúrneho vzorca (I).

Príklad 2

Nasledujúci vzorec bol použitý v príprave a v dokončení dávkovej formy obsahujúcej 10 mg zlúčeniny štruktúrneho vzorca (I).

Zložka	Množstvo (mg)
Granulácia
Selektívny inhibítor ΡΟΕ5^υ	10,00
Laktóza monohydrát	153,80
Laktóza monohydrát (sušiaci spray)	25,00
Hydroxypropyl celulóza	4,00
Kroskarmelóza sodná	9,00
Hydroxypropylcelulóza (EP)	1,75
Sulfát lauryl sodný	0,70.
	35,00
Externé prášky
Mikrokryštalická celulóza (granulovaná-102)	37,50
Kroskarmelóza sodná	7,00
Stearát horečnatý (rastlinný)	1,25
Celkovo	250 mg
Filmový poťah (približne)	11,25

Pri výrobe tabliet sa použila čistená voda, USP. Voda sa odstránila v priebehu výroby a v konečnom produkte zostali minimálne stopy.

' '

Tablety boli vyrobené použitím granulácie za mokra. Opis postupu krok za krokom je uvedený v nasledujúcom texte. Liečivo a excipienty, ktoré majú byť granulované sú bezpečne preosiate. Selektívny inhibítor PDE5 je homogenizovaný za sucha s laktózou monohydrátom (vysušovači spray), hydroxypropylcelulózou, kroskarmelózou sodnou a laktózou monohydrátom. Výsledný práškový homogenát sa granuloval s vodným roztokom hydroxypropylcelulózy a sulfátom lauryl sodným s využitím Powrex alebo iného vhodného vysoko účinného granulátora. Prídavná voda môže byť pridaná na dosiahnutie požado24 vaného ukončenia. Mlyn môže byť použitý na rozdrvenie mokrého granulátu a na uľahčenie sušenia. Mokrý granulát je vysušený použitím buď sušičky s fluidným lôžkom alebo sušiacou pecou. Len čo sa materiál vysušil, mohla byť eliminovaná veľkosť určitých veľkých aglomerátov. Mikrokryštalická celulóza, kroskarmelóza sodná a stearát horečnatý sa bezpečne preosiali a pridali do suchého granulátu s upravenou veľkosťou. Tieto excipienty a suchý granulát sú zmiešané až pokým nie sú uniformné s využitím miešača alebo iného miešacieho zariadenia. Proces miešania môže byť rozdelený do dvoch fáz. Mikrokryštalická celulóza, kroskarmelóza sodná a vysušený granulát sú pridané do mixéra a homogenizované počas prvej fázy, po ktorej nasleduje pridanie stearátu horečnatého ku tomuto granulátu a druhá miešacia fáza.

Zmiešaný granulát je potom lisovaný do tabliet použitím rotačnej lisovacej aparatúry. Jadrá tabliet sú potiahnuté filmom s vodnej suspenzie primeranej farebnej zmesi v poťahovacom zariadení (napr. Accela Cota). Potiahnuté tablety môžu byť ľahko poprášené mastencom, aby sa zlepšili manipulačné charakteristiky tablety.

Tablety sú plnené do plastických obalov (30 tabliet / obal) spolu s príbalovým letáčikom opisujúcim bezpečnosť a účinnosť zlúčeniny.

Príklad 3

Nasledujúci vzorec sa použil v príprave a ukončení dávkovej formy 5 mg zlúčeniny štruktúrneho vzorca (I).

Zložka	Množstvo (mg)
Granulácia
Selektívny inhibítor PDE5^!)	2,5
Laktóza monohydrát	79,395
Laktóza monohydrát (sušiaci spray)	12,50
Hydroxypropylcelulóza	2,00
Kroskarmelóza sodná	4,50
Hydroxypropylcelulóza (EP)	0,875
Sulfát Iauryl sodný	0,35

Externé prášky
Mikrokryštalická celulóza (granulovaná-102)	18,75
Kroskarmelóza sodná	3,50
Stearát horečnatý (rastlinný)	0,63
Celkovo	125 mg
Filmový poťah (približne) 6,875

Dávková forma z príkladu 3 sa pripravila identickým spôsobom ako dávková forma z príkladu 2.

Príklad 4

Roztok kapsule
Zložka	mg / kapsula	Percento (%)
Selektívny inhibítor PDE5^1}	10	2
PEG400 NF	490	98
plniaca váha	500	100

Želatínové kapsule sú presne plnené čerpadlom na presný plniaci objem predrozpustenou liečivou formuláciou do čiastočne uzavretej dutiny kapsule. Ihneď po nasledujúcom injekčnom plnení roztoku liečivej formulácie je kapsula úplne tepelne uzavretá.

Kapsule sú plnené do plastických obalov spolu s príbalovým letáčikom.

Príklad 5

V dvoch náhodných, dvojito slepých placebo kontrolovaných štúdiách bola podávaná zlúčenina štruktúrneho vzorca (I) pacientom, ktorí to potrebujú v intervale dávok pri dennom dávkovaní a pri dopytovej terapii na sexuálne stretnutia a pohlavné styky v domácom prostredí. Dávky od 5 do 20 mg zlúčeniny štruktúrneho vzorca (I) boli účinné a nepotvrdilo sa žiadne očervenanie a žiadne poruchy videnia. Dokázalo sa, že 10 mg dávka zlúčeniny štruktúrneho vzorca (1) bola dostatočne účinná a potvrdili sa minimálne vedľajšie účinky (žiadne očervenanie a žiadne poruchy modrého videnia).

Funkcia erekcie sa stanovila pomocou medzinárodného indexu pre funkciu erekcie (IIEF) (Rosen a kol., Urology, 49, pp. 822 - 830 (1997)), zapisovaním sexuálnych pokusov a celkových uspokojivých výsledkov. Zlúčenina štruktúrneho vzorca (I) významne zlepšuje funkciu erekcie ako bolo určené vo všetkých prípadoch. V obidvoch prípadoch “dopytového,, a denného dávkovacieho režimu, zlúčenina štruktúrneho vzorca (I) výrazne zlepšuje funkciu erekcie v dávkach medzi 1 a 20 mg.

Príklad 6

Údaje z piatich klinických štúdií boli zhrnuté na dokumentáciu účinnosti denného dávkovania 5 mg a 10 mg zlúčeniny štruktúrneho vzorca (I) (študované liečivo). Jedna štúdia prebiehala osem týždňov a ďalšia štyri štúdie prebiehali dvanásť týždňov. Študované liečivo bolo podávané „denne“ pacientom s poruchou erekcie. „Porucha erekcie“ (ED) je definovaná ako trvalá neschop27 nosť dosiahnuť a/alebo udržať erekciu potrebnú na dosiahnutie uspokojivého sexuálneho výkonu.

Študovaná populácia zahrnovala štyri podskupiny; a) študované liečivo bolo podávané menej než 30% z času počas, ktorého prebiehala štúdia; b) študované liečivo bolo podávané 30 až 50 % z času počas, ktorého prebiehala štúdia; c) študované liečivo bolo podávané 50 až 70 % z času počas, ktorého prebiehala štúdia; a d) študované liečivo bolo podávané viac než 70 % z času počas, ktorého prebiehala štúdia.

Študované liečivo bolo podávané orálne ako tablety koprecipitovaného liečiva vyrobenom v súlade s U.S. patentom č. 5,985,326 podľa Butlera a ako tablety obsahujúce študované liečivo ako voľné liečivo. Študované liečivo bolo podávané v „denných“ dávkach 5 mg a 10 mg a nie viac než raz za 24 hodín. Žiadne iné schválené alebo experimentálne liečivá, liečba alebo spôsoby liečby používané na liečbu ED neboli povolené.

Dve primárne premenné účinnosti boli schopnosť subjektu penetrovať partnera a schopnosť udržať erekciu počas pohlavného styku merané podľa Medzinárodného indexu funkcie erekcie (International Index of Erectile Function (IIEF)). Dotazník podľa IIEF zahrnuje 15 otázok a je krátkym, spoľahlivým meraním funkcie erekcie. Pozri R.C. Rosen a kol., Urology, 49, pp. 822 - 830 (1997).

Druhotné premenné účinnosti boli IIEF skóre na funkciu erekcie, funkciu orgazmu, sexuálnu túžbu, uspokojivosť pohlavného styku a celkovú uspokojivosť, pacientovu schopnosť dosiahnuť erekciu, schopnosť prieniku penisu do vagíny partnerky, dokončenie pohlavného styku s ejakuláciou, spokojnosť s tvrdosťou erekcie a celkové uspokojenie, všetky merané podľa profilu sexuálneho styku („Sexual Encounter Profile (SEP)“), konkrétne podľa otázky 2 a otázky 3. SEP je pacientov záznam dokumentujúci každý sexuálny styk počas trvania štúdie.

Bezpečnostná analýza štúdie zahrnovala všetkých katalogizovaných pacientov a bola vyhodnotená ohodnotením všetkých potvrdených nepriaznivých prípadov a zmien v klinických laboratórnych hodnotách, vitálnych znakoch, výsledkov fyzických testov a výsledkov elektrokardiogramu.

Celkovo, integrácia piatich štúdií potvrdila trend smerujúci k lepšej odpovedi so zvýšenou frekvenciou dávky, v obidvoch prípadoch 5 mg a 10 mg skupiny a vo všetkých troch primárnych premenných účinnosti. Výsledky sú zhrnuté v nasledujúcich tabuľkách 2 až 4.

Tabuľka 2. Sumarizácia oblasti funkcie erekcie podľa IIEF

	V ¹ Časové percento užívania liečiva počas štúdie
<30 %	30 % až 50 %	50 % až 70 %	>70 %
Dávka	Štatistiky
5 mg	N	97	54	28	13
	Stredná hodnota základnej línie	13,2	13,5	14,1	13,1
	Stredná hodnota konečného bodu	17,4	17,5	20,9	22,1
	Stredná hodnota zmeny	4,3	4,0	6,8	9,0

10 mg	N	164	75	41	43
	Stredná hodnota základnej línie	14,1	14,4	13,9	14,8
	Stredná hodnota konečného bodu	20,0	21,4	21,5	22,2
	Stredná hodnota zmeny	5,9	6,9	7,6	7,4

Tabuľka 3. Zhrnutie SEP otázky 2 (Schopnosť vniku penisu)

	Časové percento užívania liečiva počas štúdie
<30 %	30 % až 50 %	50 % až 70 %	>70 %
Dávka	Štatistiky
5 mg	N	98	54	28	13
	Stredná hodnota základnej línie	42,7	40,8	14,1	13,1
	Stredná hodnota konečného bodu	57,2	57,2	20,9	22,1
	Stredná hodnota zmeny	14,4	16,5	6,8	9,0

1 0 mg	N	164	76	41	45
	Stredná hodnota základnej línie	44,7	47,5	43,6	45,9
	Stredná hodnota konečného bodu	66.2	6 VO	75.4	75,6
	Stredná hodnota zmeny	21,5	21,5	29,9	29,7

Tabuľka 4. Zhrnutie SEP otázky 3 (uspokojivo dlhá erekcia pre úspešný pohlavný styk)

	Časové percento užívania liečiva počas štúdie
<30 %	30 % až 50 %	50 % až 70 %	>70 %
Dávka	Štatistiky
5 mg	N	98	54	28	13
	Stredná hodnota základnej línie	21,8	16,7	18,7	18,4
	Stredná hodnota konečného bodu	38,2	40,4	53,5	54,6
	Stredná hodnota zmeny	16,4	23,7	33,8	36,2

10 mg	N	164	76	41	45
	Stredná hodnota základnej línie	24,6	47,5	43,6	25,3
	Stredná hodnota konečného bodu	53,5	69,0	73,4	63,9
	Stredná hodnota zmeny	28,9	21,5	29,9	38,6

Príklad 7

Dvojito slepá, placebo kontrolovaná štúdia stanovila bezpečné a účinné denné liečenie použitím zlúčeniny vzorca (I) (študované liečivo) u mužov 21 až 72 rokov starých, ktorá prejavuje mierne oslabenie poruchy erekcie. Muži majúci skúsenosť s radikálnou prostatektómiou alebo cukrovkou boli zo štúdie vylúčený. V tejto štúdii, počas trojtýždňového liečenia vo voľne prebiehajúcej perióde boli subjekty náhodne tri týždne denne liečení placebom alebo študovaným liečivom (10, 25, 50 alebo až 100 mg). Všetci zúčastnení v štúdii súhlasili s pokusom štyri sexuálne styky počas liečebných periód. Základná línia skóre podľa medzinárodného indexu funkcie erekcie (IIEF), údaje profilu sexuálneho styku (SEP) a celkové hodnotenie otázky (GAQ) boli zbierané počas liečebnej periódy. Primárne výsledky boli zmenené od základnej línie v otázkach 3 (liečivý účinok na penetračnú schopnosť) a v otázkach 4 (liečivý účinok na udržanie erekcie) podľa IIEF. Druhotné výsledky zahrnovali zmenu od základnej línie vo všetkých IIEF oblastiach a v SEP a GAQ otázkach. Výsledky skupinovo denne podávaných 10 mg študovaného liečiva boli porovnateľné, alebo lepšie než, výsledky pre skupiny, ktorým bolo denne podávaných 25, 50 a 100 mg študovaného liečiva.

V porovnaní s placebom, študované liečivo zásadne zlepšuje funkciu erekcie ako bolo dokázané vo všetkých výsledkoch štúdie. Napríklad, v skupinách liečených študovaným liečivom, zmena v IIEF otázke 3 bola 1,4 (v porovnaní na placebo) ak bolo podávaných 10 mg liečiva denne. Zmena v otázke 4 bola asi 1,8 (zlúčenina ku placebu) ak bolo podávaných 10 mg liečiva denne. Úspešné pohlavné styky, s využitím študovaného liečiva, ako je uvedené v SEP záznamoch, boli až 82 % ak bolo podávaných 10 mg liečiva denne, v porovnaní s 40,4 % pre placebo. Ďalej 90 % subjektov, ktorí prijali 10 mg denné dávky študovaného liečiva potvrdzujú zlepšenie erekcie v GAQ v porovnaní s 30 % subjektov, ktorým bolo podávaných placebo. Nepriaznivé prípady súviseli s dávkou a boli zmiernené počas plynulej dennej liečby. Najbežnejšie vedľajšie účinky boli bolesť hlavy, bolesť chrbta, bolesť svalov, poruchy trávenia. Bolesť hlavy týkajúca sa liečby, najbežnejšieho vedľajšieho účinku, bola pozorovaná v 13 % až 46 % subjektov prijímajúcich denne študované liečivo v porov31 naní s 3 % subjektov prijímajúcich placebo. Pri liečbe neboli pozorované žiadne zmeny súvisiace s liečbou vo videní, ECG alebo v laboratórnych meraniach.

V súlade s predkladaným vynálezom, denná jednotková dávka asi 1 až asi 10 mg, výhodne asi 2 až asi 10 mg a najvýhodnejšie asi 5 až asi 10 mg, bola podávaná denne až do maxima 10 mg na deň počas najmenej troch dní účinného liečenia ED s minimálnym alebo eliminovaným výskytom vedľajších účinkov a so zlepšením vaskulárneho stavu. Dôležité je, že pacientovi je poskytnutá spontánnosť s ohľadom na sexuálne aktivity a rýchlejší návrat do pôvodného stavu. Prekvapujúce je, že pri liečení ED u jednotlivcov bola pozorovaná väčšia odpoveď pri použití nízkej dennej dávky v porovnaní s vyššou dopytovou dávkou inhibítora PDE5 a nižší výskyt vedľajších účinkov prisudzovaných nižšej dávke.

Princípy, preferované uskutočnenia a kroky operácií podľa predkladaného vynálezu boli opísané vo vyššie uvedenom opise. Vynález má chrániť avšak nie obmedzovať konkrétne zahrnuté formy, ktoré sú uvedené na ilustráciu a nie na limitovanie predmetu vynálezu. Bez odbočenia od predmetu vynálezu môžu byť odborníkmi v odbore vykonané obmeny a zmeny.

Claims

1. Výrobok na farmaceutické použitie človekom, vyznačujúci sa tým, že obsahuje;

a) orálnu dávkovú formu obsahujúcu inhibítor PDE5 majúci hodnotu IC50 na inhibíciu PDE5 menšiu než 10 nM, a dostatočnú biologickú dostupnosť, aby bol účinný v asi 1 až asi 10 mg jednotkových orálnych dávkach;

b) príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý potrebuje takúto liečbu potrebuje pomocou použitia dlhodobého dávkového režimu; a

c) obal.

2. Výrobok na farmaceutické použitie človekom, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

a) orálnu dávkovú formu obsahujúcu inhibítor PDE5 majúci hodnotu IC50 menšiu než 10 nM a dostatočnú biologickú dostupnosť, aby bol účinný v asi 1 až asi 10 mg jednotkových orálnych dávkach;

b) príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý potrebuje takúto liečbu pomocou použitia dlhodobého dávkového režimu, pričom dlhodobý dávkovací režim zlepšuje vaskulárne podmienenie; a

c) obal.

3. , Výrobok na farmaceutické použitie človekom, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

b) príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý potrebuje takúto liečbu pomocou použitia dlhodobého dávkového režimu, pričom dlhodobý dávkovací režim zlepšuje vaskulárne podmienenie v porovnaní s akútnym alebo dopytovým dávkovaním sildenafilu; a '1

c) obal.

4. Výrobok na farmaceutické použitie človekom, vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

b) príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý potrebuje takúto liečbu pomocou použitia dlhodobého dávkového režimu, pričom dlhodobý dávkovací režim zlepšuje vaskulárne podmienenie v porovnaní s akútnym alebo dopytovým dávkovaním vardenafilu; a

c) obal.

5. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že inhibítor PDE5 ďalej má

i) aspoň 100 násobný rozdiel v hodnotách IC50 na inhibíciu PDE5 oproti PDE6, a ii) aspoň 1000 násobný rozdiel v hodnotách IC50 na inhibíciu PDE5 oproti PDE1 c.

6. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že orálna dávková forma obsahuje asi 1 mg, asi 2 mg, asi 5 mg alebo asi 10 mg inhibítora PDE5.

7. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že dlhodobý dávkovací režim je denný dávkovací režim.

8. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že dlhodobý dávkovací režim zahrnuje podanie asi 1 mg na deň až asi 10 mg na deň inhibítora PDE5.

9. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že príbalový leták informuje o maximálnej dávke inhibítora PDE5 asi 10 mg na deň.

10. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že inhibítor PDE5 je vybraný zo skupiny, ktorá zahrnuje (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-mety 1-6-(3,4-mety léndioxyfenyl)pyra-zino[2', 1' : 6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dión;

(3 S,6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2,3-dimetyl-6-(3,4-metyléndioxyfenyl)pyrazino[2',ľ : 6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-dión;

5-(2-etoxy-5-morfolinoacetylfenyl)-l-metyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón;

5-(5-morfo li no acety 1-2-n-propoxy fény 1)- 1-m ety 1-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón;

5-[2-alyloxy-5-(4-metyl - l-piperazinylsulfonyl)-fenyl]-l -mety 1-3-n-propyl-1,6-dih y dro-7H-pyrazolo [4,3-d] pyrimidin-7-ón

5-{2-etoxy-5-[4-(2-propyl)-l-piperazinylsulfonyl]-fenyl} - l-metyl-3-η-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-{2-etoxy-5-[4-(2-hydroxyetyl)-l-piperazinylsulfonyl]-fenyl}-l-metyl-3-n-propyl- l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-{5-[4-(2-hydroxyetyl)-l-piperazinylsulfonyl]-2-n-propoxyfenyl}-l-mety 1-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón

5-[2-etoxy-5-(4-metyl-l-piperazinylkarbonyl)-fenyl]-l-metyl-3Tn-propyl- l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón;

5-[2-etoxy-5-(1 -metyl-2-imidazolyl)fenyl]-l-metyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ón.

11. Výrobok podľa nároku 10, vyznačujúci sa tým, že dlhodobý dávkovací režim zahrnuje podanie asi 1 mg na deň až asi 10 mg na deň inhibítora PDE5.

12. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že inhibítor PDE5 je vybraný zo skupiny zahrnujúcej sildenafil a vardenafil.

13. Výrobok podľa nárokov 1 až 4, vyznačujúci sa tým, že inhibítor PDE5 má štruktúru.

14. Spôsob liečby sexuálnej dysfunkcie, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje použitie výrobku podľa nárokov 1 až 4..

15. Spôsob liečby sexuálnej dysfunkcie, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje dlhodobé podávanie jednotlivcovi, ktorý takúto liečbu potrebuje, jednej alebo viacerých orálnych dávkových foriem inhibítora PDE5 v množstve asi 1 mg na deň až asi 10 mg na deň počas aspoň troch dní.

16. Spôsob podľa nároku 15, vyznačujúci sa tým, že dlhodobé podanie inhibítora PDE5 je denné podávanie.

17. Spôsob zlepšenia relaxačnej odpovede v hladkom svale dutinkového telieska, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje dlhodobé podávanie inhibítora PDE5 vybraného zo (6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-metyl-6-(3,4metyléndioxyfenyl)pyrazino[2',ľ:6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-diónu počas aspoň troch dní.

18. Spôsob podľa nároku 17, vyznačujúci sa tým, že zahrnuje dlhodobé podávanie asi 1 mg na deň až asi 25 mg na deň inhibitora PDE5.

19. Použitie inhibitora PDE5 vybraného z (6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahy dro-2-mety 1-6-(3,4-mety 1 éndioxy fény l)py r azino [2', l':6,l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-diónu a vardenafilu na výrobu liečiva majúceho príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý takúto liečbu potrebuje pomocou dlhodobého dávkovania asi 1 až asi 10 mg inhibitora PDE5 počas aspoň troch dní.

20. Použitie inhibitora PDE5 vybraného z (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-metyl-6-(3,4-metyl éndioxy fény l)py r azino [2', ľ: 6, l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-diónu a vardenafilu na výrobu liečiva majúceho príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý takúto liečbu potrebuje pomocou dlhodobého dávkovania asi 1 až asi 10 mg inhibitora PDE5 počas aspoň troch dní, a že liečba je sprevádzaná zlepšením vaskulárneho podmienenia.

21. Použitie inhibitora PDE5 vybraného z (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-metyl-6-(3,4-metyléndioxyfenyl)pyrazino[2', ľ: 6, l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-diónu a vardenafilu na výrobu liečiva majúceho príbalový leták informujúci, že inhibítor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u pacienta, ktorý takúto liečbu potrebuje pomocou dlhodobého dávkovania asi 1 až asi 10 mg inhibitora PDE5 počas aspoň troch dní, a zlepšuje vaskulárne podmienenie v porovnaní s dlhodobým alebo dopytovým dávkovaním sildenafilu.

22. Použitie inhibítora PDE5 vybraného z (6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-2-mety 1-6-(3,4-mety lénd i oxy fény l)py raži no [2', l':6, l]pyrido[3,4-b]indol-l,4-diónu na výrobu liečiva majúceho príbalový leták informujúci, že inhibitor PDE5 je vhodný na liečbu sexuálnej dysfunkcie u paI cienta, ktorý takúto liečbu potrebuje pomocou dlhodobého dávkovania asi 1 až asi 10 mg inhibítora PDE5 počas aspoň troch dní, a zlepšuje vaskulárne podmienenie v porovnaní s dlhodobým alebo dopytovým dávkovaním vardenafilu.