MXPA02010539A - Tratamiento diario para la disfuncion erectil utilizando un inhibidor de la fosfodiesterasa tipo 5 (pde5). - Google Patents

Abstract

La presente invencion se relaciona con inhibidores de la enzima fosfodiesterasa (PDE) y con su uso en articulos farmaceuticos de manufactura. En particular, la presente invencion se relaciona con inhibidores potentes de la fosfodiesterasa tipo 5 (PDE5) especifica del 3', 5' -monofosfato de guanosina ciclica que, cuando se incorpora en un producto farmaceutico en una dosis unitaria de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg son utiles para el tratamiento de la disfuncion sexual mediante la administracion diaria del inhibidor de la PDE5. Los articulos de manufactura descritos aqui se caracterizan por la inhibicion de la PDE5, y en consecuencia proporcionan un beneficio en areas terapeuticas donde la inhibicion de la PDE5 es deseable, especialmente la disfuncion erectil, con minimizacion o eliminacion de los efectos laterales adversos resultantes de la inhibicion de otras enzimas fosfodiesterasas y con un mejoramiento del acondicionamiento vascular.

Description

TRATAMIENTO DIARIO PARA LA DISFUNCION ERECTIL UTILIZANDO UN INHIBIDOR DE LA FOSFODIESTERASA TIPO 5 (PDE5) CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con inhibidores de la enzima fosfodiesterasa (PDE) y con su uso en artículos de la manufactura farmacéuticos. En particular, la presente invención se relaciona con inhibidores potentes de la fosfodiesterasa tipo 5 (PDE5) especifica del 3' , 5' -monofosfato especifica cíclica de guanosina, que cuando se incorporan en un producto farmacéutico son útiles para el tratamiento de la disfunción sexual.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los efectos bioquímicos, fisiológicos y clínicos de los inhibidores de la fosfodiesterasa especifica del 3' , 5' -monofosfato de guanosina cíclico (PDE especifica del cGMP) sugieren su utilidad en una variedad de estados de enfermedad en los cuales es deseada la modulación del músculo liso, la función renal, hemostática, inflamatoria y/o endocrina. La fosfodiesterasa especifica del cGMP tipo 5 (PDE5) es la enzima hidrolizante de cGMP mayor en músculo liso vascular, y ha sido reportada su expresión en el cuerpo cavernoso penial (Taher et al., J. Urol . , 149 : 285A (1993) ) . De este modo, la PDE5 es un objetivo atractivo en el tratamiento de la disfunción sexual (Murray, DN&P 683) :150-56 (1993) ) . Un producto farmacéutico que proporciona un inhibidor de la PDE5 se encuentra actualmente disponible, y es comercializado bajo la marca comercial de VIAGRA®.

El ingrediente activo en el VIAGRA es el sildenafil. Un producto vendido como un articulo de manufactura que incluye tabletas de 25, 50 y 100 mg de sildenafil y un inserto en forma de paquete. El inserto en forma de paquete proporciona que el sildenafil es un inhibidor más potente de la PDE5 que otras fosfodiesterasas conocidas (más de 80 veces para la inhibición de la PDE1, más de 1,000 veces para la inhibición PDE2, PDE3, y PDE4) . La CI50 para el sildenafil contra la PDE 5 ha sido reportada como 3 nM {Drugs of the Future, 222) , pp. 128-143 (1997) ) , y como 3. 9 nM (Boolell et al . , Int. J. of Impotence Res . , 8 p. 47-52 (1996)). Se describe que el sildenafil tiene una selectividad de 4,000 veces por la PDE contra la PDE3, y únicamente una selectividad de 10 veces para la PDE5 contra la PDE6. Tiene la teoría de que su ausencia relativa por la selectividad por la PDE6 se basa en anormalidades relacionadas con la visión a color.

Aunque el sildenafil ha sido obtenido con un éxito comercial significativo, aún existen problemas en el tratamiento de la disfunción eréctil (ED) . Primero, la terapia del ED utilizando el sildenafil se basa en una terapia de la demanda o PRN. La dosificación "sobre demanda" se define como una administración aguda de un fármaco para tratar la disfunción eréctil antes de la actividad sexual esperada. El usuario por lo tanto debe planear de antemano, y, como está marcado actualmente, ingerir una dosis oral relativamente grande (es decir de al menos 25 mg) de sildenafil al menos una hora antes de entrar en actividad sexual. La aparición de los efectos benéficos pueden ser retrasada cuando el sildenafil sea administrado con el alimento. En segundo lugar, la dosis sobre demanda relativamente grande del sildenafil da como resultado efectos laterales adversos significativos, incluyendo rubor facial (con un porcentaje de incidencia del 10%) . De este modo, aún con la disponibilidad del sildenafil, sigue existiendo la necesidad de identificar productos farmacéuticos mejorados que sean útiles y más convenientes para tratar la disfunción sexual. La presente invención proporciona un articulo de manufactura para uso farmacéutico en humanos, que comprende un inserto en forma de paquete, un recipiente, y una forma de dosificación oral que comprende un inhibidor de la PDE5 a dosis unitarias de entre aproximadamente 1 y aproximadamente 10 mg/forma de dosificación. El inserto en forma de paquete proporciona un régimen de dosificación caracterizado por una administración crónica del inhibidor de la PDE5. Los efectos benéficos de un régimen de dosificación crónico fueron observados en estudios clínicos y a través del descubrimiento de que la administración del inhibidor de la PDE5 mejora o acondiciona la vasculatura de modo que el tejido del músculo liso del cuerpo cavernoso responda a la terapia a dosis menores que las requeridas para producir la misma respuesta con la terapia sobre demanda o aguda. Los beneficios de una administración crónica, baja, del inhibidor de la PDE5 incluyen respuesta vascular mejorada a la relajación estimulada por el cGMP en el tejido de músculo liso del cuerpo cavernoso, baja toxicidad atribuida a una menor dosis de inhibidor de PDE5, y un retorno a la normalidad, es decir, que no se requiere que el paciente planee actividad sexual cerca de la administración del inhibidor de la PDE5. El régimen de dosificación de la presente invención permite espontaneidad de la actividad sexual deseada por el paciente.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona artículos de manufactura para uso farmacéutico en humanos, que comprende un inserto en forma de paquete, un recipiente, y una forma de dosificación oral que comprende de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5 por forma de dosificación para la dosificación crónica, y de manera preferible diariamente. La presente invención proporciona además un método para tratar la disfunción eréctil masculina que comprende administrar a un paciente que necesite del mismo una forma de dosificación oral que contenga de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5, crónicamente, hasta una dosis total de 10 mg/dia. La presente invención proporciona además un método para mejorar la respuesta relajante en el tejido de músculo liso del cuerpo cavernoso, que comprende administrar crónicamente una dosis de 1 mg/dia a 10 mg/dia de un inhibidor de la PDE5. La presente invención proporciona un articulo de manufactura para uso farmacéutico en humanos, que comprende un inserto en forma de paquete, un recipiente, y una forma de dosificación oral que comprende de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor selectivo de la PDE5, el inserto en forma de paquete que proporciona una administración crónica del inhibidor de la PDE5 para tratar a un paciente que sufra de disfunción eréctil. La presente invención proporciona un articulo de manufactura para uso farmacéutico, que comprende un inserto en forma de paquete, un recipiente, y la forma de dosificación oral de un inhibidor selectivo de la PDE5; el inserto en forma de paquete proporciona una administración crónica del inhibidor de la PDE5 para tratar a un paciente que sufra de disfunción eréctil. La presente invención proporciona además un articulo de manufactura para uso farmacéutico en humanos que comprende : (a) una forma de dosificación oral que comprende de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5 que tiene una CI50 menor de 10 nM, y una biodisponibilidad suficiente para ser efectivas dosis orales unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg; (b) un inserto en forma de paquete que proporciona el inhibidor de la PDE5 que es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo, y que tiene un régimen de dosificación crónica de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg/dia donde el régimen de dosificación crónica mejora el acondicionamiento muscular; y (c) un recipiente; La presente invención proporciona además un articulo de manufactura para uso farmacéutico en humanos que comprende : (a) una forma de dosificación oral que comprende de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5 que tiene (i) una CI.o de menos de 10 nM, y (ii) una biodisponibilidad suficiente para ser efectiva en dosis orales unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg; (b) un inserto en forma de paquete que proporciona el inhibidor de la PDE5 útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite el mismo, y que tiene un régimen de dosificación crónica de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg/dia, donde el régimen de dosificación crónica mejora el acondicionamiento vascular; y (c) un recipiente.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Para los propósitos de la presente invención como se revela y describe aqui, los siguientes términos y abreviaciones se definen como sigue. El término "recipiente" significa cualquier receptáculo y cierre del mismo adecuado para almacenar, transportar, distribuir y/o manejar un producto farmacéutico . El término "CI50" es la medida de la potencia de un compuesto para inhibir una enzima PDE particular (por ejemplo, PDElc, PDE5 o PDE6) . La CI50 es la concentración de un compuesto que da como resultado la inhibición de la enzima en un 50% en un solo experimento de dosis-respuesta. La determinación del valor del CI50 para un compuesto se lleva a cabo fácilmente por una metodología in vitro, conocida, descrita de manera general en Y. Cheng et al., Biochem, Pharmacol . , 22, pp. 3099-3108 (1973) . El término "inserto en forma de paquete" significa la información que acompaña al producto que proporciona una descripción de cómo administrar el producto, junto con los datos de seguridad y eficacia requeridos para permitir al médico, farmacéutico y paciente tomar una decisión informada con respecto al uso del producto. El inserto en forma de paquete generalmente es considerado la "etiqueta" para un producto farmacéutico. El término "forma de dosificación oral" se utiliza en un sentido general para referirse a productos farmacéuticos administrados oralmente. Las formas de dosificación orales son reconocidas por aquellos expertos en la técnica, e incluyen formas como lo son formulaciones liquidas, tabletas, cápsulas y gelcaps . El término "dia" y "diariamente" se refiere a la administración del producto una o más veces, de manera general una a tres veces, de manera aún más preferible una vez, durante un periodo de aproximadamente 24 horas. "Periodo de aproximadamente 24 horas" se refiere a un intervalo de tiempo de aproximadamente 20 hasta aproximadamente 28 horas. El término "crónica- o crónicamente" se refiere a la administración regular del producto en intervalos no relacionados con el inicio de la actividad sexual. Para recibir el beneficio completo de la presente invención, la administración crónica generalmente se refiere a la administración regular durante un periodo prolongado, de manera preferible diariamente durante tres o más dias, y de manera aún más preferible, diariamente en tanto el paciente sufra de disfunción eréctil (en ausencia de terapia) . El término administración "crónica" abarca otros regímenes además de la dosificación diaria. Por ejemplo, la administración crónica abarca la administración de una formulación de liberación sostenida que proporciona suficiente inhibidor de la PDE5 sobre una base regular, y no relacionada con el inicio de la actividad sexual. Contrario a la administración aguda o sobre demanda, la administración crónica no liga la administración del inhibidor de la PDE5 al inicio de la actividad sexual (por ejemplo, una hora antes de una relación) . El término "inhibidor de la PDE5" se refiere a compuestos que tienen un valor de CI50 para la inhibición de PDE5 de menos de 10 nM. Los inhibidores de la PDE5 preferidos, son selectivos para la inhibición de la PDE5, como lo son aquéllos que tienen: (1) un valor de CI50 para la inhibición de la PDE5 al menos 100 veces menor que el valor de la CI50 para la inhibición de la PDE6; (2) un valor de CI50 para la inhibición de la PDE5 al menos 1000 veces menor que el valor de la CI50 para la inhibición de la PDElc; y (3) un valor de CI50 para la inhibición de la PDE5 menor de 10 nM. Los inhibidores de la PDE5 varían significativamente en estructura química, y su use en la presente invención no depende de la estructura química, si no más bien de los parámetros de potencia descritos aquí . El término "anormalidades de la visión" significa visión anormal caracterizada por visión azul- verde, que se cree es causada por la inhibición de la PDE6. El término "fármaco libre" significa partículas sólidas de fármaco no íntimamente incluidas en un coprecipitado polimérico. Como se estableció anteriormente, la presente invención está dirigida a un artículo de manufactura para uso farmacéutico en humanos que comprende un inserto en forma de paquete, un recipiente y una forma de dosificación que comprende de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5 por forma de dosificación unitaria. Un inhibidor de la PDE5 útil en la presente invención es un inhibidor de la PDE5 que tiene un valor de CI50 para la inhibición de la PDE5 de menos de 10 nM, y está suficientemente disponible para ser efectivo en dosis unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg. Los inhibidores de la PDE5 preferidos, inhiben selectivamente la PDE5 contra la PDE6 y la PDElc. La selectividad es cuantificada por la diferencia en la 1 ? I=o. La diferencia se expresa como una relación de PDE6/PDE5 de los valores de la CI50, es decir, la relación del valor de la CI50 contra la PDE6 al valor de la CI50 contra la PDE5 (PDE6/PDE5) es mayor que 100, de manera más preferible mayor de 300, y de manera más preferible mayor de 500. De manera similar, la relación del valor de la IC50 contra la PDElc al valor de la IC50 contra la PDE5 (PDElc/PDE5) es mayor de 1000. Los inhibidores de la PDE5 preferidos tienen una preferencia mayor de 3000 veces entre la inhibición de PDE5 y la PDElc, de manera más preferible una diferencia mayor de 5000 veces entre el valor de la IC50 contra la PDE5 y la PDElc. La potencia del inhibidor, de acuerdo a lo representado por el valor de la IC50 contra la PDE5, es menor de 10 nM, de manera preferible menor de 5 nM, de manera más preferible menor de 2 nM, y de manera más de preferible menor de 1 nM. El inserto en forma de paquete proporciona una descripción de como administrar un producto farmacéutico, junto con los datos de seguridad y eficacia requeridos para permitir al médico, farmacéutico y paciente to ar una decisión informada con respecto al uso del producto. El inserto en forma de paquete generalmente es configurado como la etiqueta del producto farmacéutico. El inserto en forma de paquete incorporado en el presente artículo de manufactura indica que el inhibidor de la PDE5 es útil en el tratamiento de condiciones donde se desea la inhibición de la PDE5, particularmente la disfunción sexual, y particularmente la disfunción eréctil masculina y el trastorno de excitación sexual femenino. El inserto en forma de paquete también proporciona instrucciones para administrar una o más formas de dosificación unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg, crónicamente, y de manera preferible diariamente, durante al menos tres días, hasta una dosis total máxima de 10 mg por día. La dosis administrada, de manera típica es de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg/día, de manera más preferible de aproximadamente 2 hasta aproximadamente 10 mg, y de manera más preferible una forma de dosificación de aproximadamente 5 mg hasta aproximadamente 10 mg administrada diariamente. Debido a que el artículo de manufactura actualmente reclamado proporciona un régimen de dosificación crónica que es más eficaz que la dosis de demanda o aguda equivalente, la incidencia de efectos laterales se reduce notablemente. Por lo tanto, el articulo de manufactura preferido proporciona un inserto en forma de paquete que tiene incidencias reportadas de rubor inferiores a 2%, de manera preferible inferiores al 1%, y de manera más preferible inferiores a 0.5%, de los pacientes a los que se les administró la forma de dosificación. El porcentaje de incidencia de rubor muestra un mejora notable sobre los productos farmacéuticos anteriores que contienen un inhibidor de la PDE5. El recipiente utilizado en el presente articulo de manufactura es convencional en las técnicas farmacéuticas. De manera general, el recipiente es un paquete de ampollas, paquete en forma de hoja, botella de vidrio o plástico y una tapa o cierre acompañante, u otro de esos artículos adecuados para ser utilizados por el paciente o farmacéutico. De manera preferible, el recipiente está dimensionado para acomodar 1-1000 formas de dosificación sólidas, de manera preferible 1 a 500 formas de dosificación sólidas, y de manera más preferible, de 5 a 30 formas de dosificación sólidas. Las formas de dosificación orales son reconocidas por aquellos expertos en la técnica e incluyen, por ejemplo, formas como formulaciones liquidas, tabletas, cápsulas y gelcaps. De manera preferible, las formas de dosificación son formas de dosificación sólidas, particularmente, tabletas que comprenden de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5. Cualquier excipiente farmacéuticamente aceptable para uso oral es adecuado para la preparación de esas formas de dosificación. Las formas de dosificación farmacéuticas adecuadas incluyen formas coprecipitadas descritas, por ejemplo, en Butler, Patente Estadounidense No. 5,985,326, incorporada aquí como referencia. En modalidades preferidas, la forma de dosificación unitaria de la presente invención es una forma libre de sólidos de un coprecipitado del inhibidor de la PDE5, pero que contiene además un inhibidor de la PDE5 sólido como un fármaco libre. De manera preferible, las tabletas comprenden excipientes farmacéuticos generalmente reconocidos como seguros como lo son la lactosa, celulosa microcristalina, almidón, carbonato de calcio, estearato de magnesio, ácido esteárico, talco y dióxido de silicio coloidal, y se preparan por técnicas de manufactura farmacéuticas estándar de acuerdo a lo descrito en Remington' s Pharmaceutical Sciences, 18ava. Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (1990) . Esas técnicas incluyen, por ejemplo, granulación en húmedo seguida por secado, molienda, y compresión en tabletas con o sin recubrimiento de película; granulación seca seguida por molienda, compresión en tabletas con o sin recubrimiento de película; combinación en seco seguida por compresión en tabletas, con o sin recubrimiento de película; tabletas moldeadas; granulación en húmedo, secado y llenado en cápsulas de gelatina; combinación en seco llenado en cápsulas de gelatina, o suspensión o solución llenadas en cápsulas de gelatina. De manera general, las formas de dosificación sólidas tiene marcas de identificación que están estampadas o impresas sobre la superficie. La formas de dosificación oral también pueden estar en forma de una formulación de liberación sostenida que proporciona crónicamente de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg/día del inhibidor de la PDE5 a un individuo durante el curso de unos cuantos a varios días. La presente invención se basa en experimentos y ensayos clínicos detallados, y las observaciones inesperadas de que disfunción sexual puede ser tratada utilizando una dosis baja, crónica de un inhibidor de PDE5 que tiene un valor de CI50 para la inhibición de la PDE5 menor de 10 nM. Un régimen de dosificación crónico, de manera preferible diariamente de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg de un inhibidor de la PDE5 también proporciona otros beneficios incluyendo (a) espontaneidad en las relaciones sexuales, (b) eficacia inesperada de tal dosis oral baja del inhibidor de la PDE5, incluyendo una información de una mayor respuesta al inhibidor de la PDE5 de una dosis de inhibidor de PDE5 crónica menor que la dosis aguda, sobre demanda de 25 mg actualmente marcada del sildenafil, y (c) sin bajar los efectos adversos atribuidos al inhibidor de la PDE5 selectivo y una dosis menor. En total, se ha demostrado que la dosificación crónica del inhibidor de la PDE5 que tiene las propiedades enumeradas anteriormente proporciona la misma o mejor eficacia a aproximadamente 1 mg a 10 mg que una dosis sobre demanda, aguda mayor, actualmente administrada. La mejor eficacia demostrada por la dosificación diaria baja de un inhibidor de la PDE5 en el tratamiento de la disfunción eréctil no depende de la acumulación de fármaco, si no de los resultados de la respuesta vascular mejorada cuando el inhibidor de la PDE5 está presente continuamente, o de manera esencialmente continua, en el plasma. El efecto de "acondicionamiento vascular" no ha sido demostrado anteriormente con los inhibidores de la PDE5 en particular, o los inhibidores de la PDE en general. En particular, el acondicionamiento vascular no ha sido observado en la dosificación sobre demanda de un inhibidor de la PDE5, o en individuos que tomen una dosis de inhibidor de la PDE5 aguda durante un intervalo de tiempo previo de dos a tres días. Se espera que el lí acondicionamiento vascular ocurra después de la administración crónica del inhibidor de la PDE5, por ejemplo, después de aproximadamente tres dosis diarias de más de 10 mg, de manera preferible después de la dosificación diaria, y de manera más preferible después de siete días de dosificación diaria. Además, después de aproximadamente tres días de dosificación diaria, la falta intermitente de una dosis crónica puede conducir a la reducción en el acondicionamiento vascular, pero no a una pérdida completa del acondicionamiento. Se tiene la teoría, pero no divulgada aquí, de que el acondicionamiento vascular es causado por una reversión parcial o completa de las disfunciones circulatorias en la circulación penial de condiciones que surgen como la diabetes, ateroesclerosis, fumar, hipertensión, o una combinación de esos factores. Esas condiciones dan como resultado el engrosamiento de la pared arterial, disminución arterial, y disminución de la respuesta a vasodilatadores endógenos, como el óxido nítrico. Los inhibidores de la PDE5 varían significativamente en la estructura química, y el uso de un inhibidor de la PDE5 como se define en la presente invención no depende de una estructura química particular, si no de parámetros críticos expuestos aquí.

Sin embargo, los compuestos preferidos que tienen la potencia requerida y la selectividad preferida pueden ser fácilmente identificados por pruebas descritas aquí a partir de compuestos descritos en Daugan, Patente Estadounidense No. 5,859,006, Daugan et al., Patente Estadounidense No. 5,981,527, y Daugan et al., Patente Estadounidense No. 6,001,847, cada una de las cuales se incorpora aquí como referencia. Los compuestos preferidos de Daugan, Patente Estadounidense No. 5,859,006 y Daugan et al., Patente Estadounidense No. 5,981,527 están representados por la fórmula estructural (I) : ( donde R° se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, halógeno y alquilo de C?-¿; R1 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo de C?_6, alquenilo de C.-_ñ, alquinilo de C2-6, haloalquilo de C?-ß, cicloalquilo de C3_8, cicloalquil de C3-8 alquilo de C?_3, arilalquilo de C?- , donde el arilo es fenilo o fenilo sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de C?_6, alcoxi de C?_6, metilendioxi y mezclas de los mismos y heteroaril de C?_3 alquilo, donde el heteroarilo es tienilo, furilo, o piridilo, cada uno opcionalmente sustituido con uno a tres sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de halógeno, alquilo de C?-6, alcoxi de C?-6 y mezclas de los mismos; R2 representa un anillo aromático monocíclico opcionalmente sustituido seleccionado del benceno, tiofeno, furano y piridina o un anillo bicíclico opcionalmente sustituido unido al resto de la molécula vía uno de los átomos de carbono del anillo del benceno y donde el anillo fusionado A es un anillo de 5 ó 6 miembros, saturado o parcial o completamente insaturado, y comprende átomos de carbono y opcionalmente uno o dos heteroátomos seleccionados del grupo que consiste de oxígeno, azufre y nitrógeno; R3 representa hidrógeno o alquilo de C?_3, o R1 y R , juntos representan una cadena de alquilo o alquenilo de 3 ó 4 miembros; y sales y solvatos de los mismos . Otros compuestos preferidos son aquéllos de fórmula (I), donde: R° es hidrógeno, halógeno, o alquilo de C?-_6; R1 es hidrógeno o alquilo de C?_6; R2 es el anillo bicíclico el cual puede estar opcionalmente sustituido por uno o más grupos seleccionados de halógeno y alquilo de C?-3; y R3 es hidrógeno o alquilo de C?-3. Los compuestos preferidos son: (6R, 12aR) -2,3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2-metil-ß~ (3, 4-metilendioxifenil)piracino[2' ,1' : 6, 1] pirido [3, -b] indol-1, -diona; y 2; (3s, 6R,12aR)-2,3, 6, 7 , 12, 12a-hexahidro-2, 3- dimetil-6- (3, 4-metilendioxifenil) piracino [2' , 1' : 6, 1] - pirido [3, 4-b] indol-1, 4-díona; y sales y solvatos (por ejemplo, hidratos) de los mismos fisiológicamente aceptables. Un inhibidor útil de la PDE5 selectivo especialmente preferido en la presente invención es (6R-trans) -6- (1, 3-benzodioxol-5-il) -2, 3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2-metilpíracino [1' , 2' : 1, 6] pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona, alternativamente nombrado (6R-12aR) -2 , 3, 6, 7 , 12, 12a-hexahidro-2-metil~6~ ( 3, 4-metilen-dioxifenil) piracino-[2 ' , V : 6, l]pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona, que se describe en Daugan, Patente Estadounidense No. 5,859,006, y representado por la fórmula estructural (II) : di : Otros compuestos ejemplares útiles en la presente invención son descritos en Daugan et al., Patente Estadounidense No. 6,001,847, WO 97/43287, y WO 00/15639, incorporadas aquí como referencia. Además, el sildenafil y el vardenafil pueden ser utilizados como el inhibidor de la PDE5 para la dosificación diaria. sildenafil C Con respecto al sildenafil y vardenafíl, la dosis para la administración crónica es de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 25 mg/día, y de manera preferible de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 20 mg/día. Otros inhibidores de la PDE5 útiles que pueden ser utilizados en un régimen de dosificación crónica de la presente invención incluyen, pero no se limitan a: 5- (2-etoxi-5-morfolinoacetilfenil) -l-metil-3-n- propil-1, 6-dihidro-7H-pirazolo [ , 3-d] pirimidin-7-ona; 5- (5-morfolinoacetil-2-n-propoxifenil) -1-metil- 3-n-propil-l, 6-dihidro~7H-pirazolo [4 , 3-d] pirimidin-7-ona; 5- [2-aliloxi-5- (4-metil-l-piperacinilsulfonil) - fenil] -l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo- [4, 3-d] pirimidin-7-ona; 5-{2-etoxi-5-[4- (2-propil) -1-piperacinil-sulfonil] -fenil } -l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo- [4, 3-d] pirimidin-7-ona ; 5-{2-etoxi-5- [4- (2-hidroxietil) -1-piperacinil-sulfonil) fenil } -l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d] pirimidin-7-ona; 5-{5- [4- (2-hidroxietil) -1-piperacinilsulfonil] -2-n-propoxifenil} -1-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pira~olo [4, 3-d]pirimídin-7-ona; - [2-etoxi-5- (4-metil-l-piperacinílcarbonil) - fenil] -l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo- [4,3- d]pirimidin-7-ona; y 5- [2-etoxi-5- (l-metil-2-imidazolil) feníl] -1- metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d] pirimidin- 7-ona.

PREPARACIONES Preparación de la PDE5 Humana Se llevó a cabo la reproducción recombinante de PDE5 humana, esencialmente como se describe en el Ejemplo 7 de la Patente Estadounidense No. 5,702,936, incorporada aquí como referencia, excepto que se empleó el vector de transformación de levadura, el cual se derivó del plásmido ADH2, descrito en V. Price et al., Methods in Enzymology, 1995, páginas 308-318 (1990), promotor de ADH2 de levadura incorporado y secuencias terminadoras en lugar del promotor ADHl y las secuencias terminadoras y el huésped Saccharomyces cerevisiae fue la cepa deficiente en proteasa BJ2-54, depositada en Agosto 31, 1998 con la American Type Culture Collection, Manassas, Virginia, bajo el número de acceso ATCC 74465. Las células huésped transformadas se hicieron crecer en medio SC-leu 2X, pH 6.2, con metales en trazas, y vitaminas. Después de 24 horas, se agregó medio YEP que contenía glicerol a una concentración final de 2X de YEP/3% de glicerol. Aproximadamente 24 horas después, las células fueron cosechadas, lavadas y almacenadas a -70 °C. Las masas celulares (29 g) fueron congeladas sobre hielo con un volumen igual de amortiguador de lisis (tris-Cl 25 mM, pH 8, MgCl2 5mM, ditiotreitol 0.25 mM, benzamidina 1 mM y ZnS04 10 µM) . Las células fueron usadas en un microfluizador con N2 a 14062 kgf/cm2 (20,000 psi). En lisado fue centrifugado y filtrado a través de filtros desechables de 0.45 µm. El filtrado fue aplicado a una columna de 150 ml de Q Sepharose Fast Flow (Pharmacia). La columna fue lavada con 1.5 volúmenes de amortiguador A (Bis-Tris propano 20 mM, pH 6.8 MgCl2 1 mM, ditiotreitol 0.25 mM, ZnS04 10 µM) y eluido con un gradiente de un paso de NaCl 125 mM en amortiguador A seguido por un gradiente lineal de NaCl 125-1000 mM en Amortiguador A. Las fracciones activas del gradiente lineal fueron aplicadas a una columna de hidroxiapatita de 180 L en Amortiguador B (Bis-Tris Propano 20 mM (pH 6.8), MgCl2 1 mM, ditiotreitol 0.25 M, ZnS04 10 µM, y KCl 250 mM) . Después de la carga, la columna fue lavada con dos volúmenes de Amortiguador B y eluida con un gradiente lineal de fosfato de potasio 0-125 mM en Amortiguador B. Se reunieron las fracciones activas, se precipitaron con sulfato de amonio al 60% y se resuspendieron en Amortiguador C (Bis-Tris propano 20 M, pH 6.8, NaCl 125 mM, ditiotreitol 0.5 mM, y ZnS04 10 µM) . Lo reunido fue aplicado a una columna de 140 mL de Sephacryl S-300 HR y eluido con Amortiguador C. Las fracciones activas fueron diluidas a glicerol al 50% y almacenadas a -20 °C. Las preparaciones resultantes fueron aproximadamente 85% puras por SDS-PAGE.

Ensayo para la Actividad de la PDE La actividad de la PDE5 puede ser medida por ensayos estándar en la técnica. Por ejemplo, la actividad especifica de cualquier PDE puede ser determinada como sigue. Los ensayos de PDE que utilizan la técnica de separación con carbón fueron efectuados esencialmente como se describe en Loughney et tal., (1996), The Journal of Biological Chemistry, 271:796-806. En este ensayo, la actividad de la PDE5 convierte [3P]GMPc a [32P]5'GMP en proporción a la cantidad de PDE5 presente. El [32P]5'GMP es entonces convertido cuantitativamente a fosfato libre [32P] y adenosina no marcada mediante la acción del veneno de víbora 5' -nucleotidasa. En consecuencia, la cantidad de fosfato [32P] liberado es proporcional a la actividad de la enzima. El ensayo se efectúa a 30 C en una mezcla de reacción de 100 µl que contiene (concentraciones finales) Tris-Cl 40 mM (pH 8.0), ZnS04 1 µM, MgCl2 5 mM, y sercalbúmina bovina 0.1 mg/mL. La PDE5 está presente en cantidades que producen <30% de hidrólisis total del sustrato (condiciones de ensayo lineales) . El ensayo es iniciado mediante la adición del sustrato ([32P]GMPc 1 mM) , y la mezcla es incubada durante 12 minutos. Se agregan entonces setenta y cinco (75) µg de veneno de Crotal us a trox, y se continúa incubando durante 3 minutos más (15 minutos en total) . La reacción es detenida mediante la adición de 200 L de carbón activado (suspensión 25 mg/mL en NaH2P04 0.1 M, pH 4) . Después de la centrifugación (750 x g durante 3 minutos) para sedimentar el carbón, se tuvo una muestra del sobrenadante para la determinación de la radiactividad en un contador de destellos y se calcula la actividad de la PDE5. Las preparaciones tuvieron actividades específicas de aproximadamente 3 µmoles de GMPc hidrolizado por minuto por miligramo de proteína.

Preparación de la PDE6 Bovina La PDE6 bovina fue proporcionada por Dr. N.

Virmaux, INSERM U338, Estrasburgo. Se prepararon retinas bovinas de acuerdo a lo descrito por Virmaux et al., FEBS Letters, 12(6), pp. 325-328 (1971) y véase también, A. Sitaramayya et al., Exp. Eye Res., 25, pp. 163-169 (1977) . De manera breve, a menos que se establezca otra cosa, todas las operaciones se efectuaron en frío y en luz roja débil. Los ojos fueron mantenidos en el frío y en oscuridad durante hasta 4 horas después del sacrificio. La preparación del segmento externo retinal bovino (ROS) básicamente siguió los procedimientos descritos por Schichi et al., J. Biol. Chem., 224:529 (1969) . En un experimento típico, se trituraron 35 retinas bovinas en un mortero con 35 mL de amortiguador de fosfato 0.066 M, pH 7.0, elaborado hasta el 40% con sucrosa, seguido por homogeneización en un homogenizador de Potter (20 desplazamientos hacia arriba y hacia abajo). La suspensión fue centrifugada a 25,000 x g durante 20 minutos. La masa fue homogeneizada en 7.5 L de amortiguador de fosfato 0.006 M (40% en sucrosa), y colocada cuidadosamente bajo 7.5 L de amortiguador de fosfato (que no contenía sucrosa) . La centrifugación se condujo en un rotor giratorio a 45,000 x g durante 20 minutos, y produjo un sedimento que es negro en el fondo, y también una banda roja en la interfaz de fosfato 0.066 M-sucrosa 40%/fosfato 0.066 M (ROS crudo). El material rojo en la interfaz fue removido, diluido con amortiguador de fosfato, centrifugado hasta una masa o sedimento, y redistribuido en sucrosa al 40% amortiguada como se describió anteriormente. Este procedimiento se repitió 2 ó 3 veces hasta que se formo una masa. El ROS purificado fue lavado en amortiguador de fosfato y finalmente centrifugado hasta una masa 25,000 x g durante 20 minutos. Todos los materiales fueron entonces mantenidos congelados hasta su uso. Se prepararon extractos hipotónicos suspendiendo ROS aislado en Trís-Cl 10 M, pH 7.5, EDTA 1- mM, y ditioeritriol 1 M, seguido por centrifugación a 100,000 x g durante 30 minutos. Se reportó que la preparación tiene una actividad específica de aproximadamente 35 nmoles de GMPc hidrolizado por minutos por miligramo de proteína.

Preparación de PDElc de Células de Spodoptera fugiperda. (Sf9) Las masas celulares (5g) fueron congeladas sobre hielo con 20ml de amortiguador de lisis (MOPS 50 mM, pH 7.4, ZnS04 10 µM, CaCl2 0.1 mM, DTT lmM, benzamidina HCl 2mM, 5µg/ml de cada una de pepstatina, leupeptina, y aprotenina) . Las células fueron usadas haciéndolas pasar a través de una célula de presión Francesa (SLM-Aminco) mientras las temperaturas eran mantenidas debajo de 10 °C. El homogeneizado celular resultante fue centrifugado a 36,000 rpm a 4°C durante 45 minutos en una ultracentrífuga de Beckman utilizando un rotor tipo TI45. El sobrenadante fue desechado y la masa resultante fue suspendida con 40ml de Amortiguador de Solubilización (Amortiguador de Lisis que contenía NaCl 1M, MgCl2 0.1M, CaCl2 lmM, 20 µg/ml de calmodulina y Sulfobetaína SB12 (Z3-12) al 1% por sonicación utilizando un sintonizador VibraCell con una micropunta durante 3 x 30 segundos. Esto se efectuó en una mezcla de hielo triturado/sal para enfriar. Después de la sonicación, la mezcla fue mezclada lentamente durante 30 minutos a 4°C para la solubilización final de las proteínas unidas a la membrana. Esta mezcla fue centrifugada en una ultracentrífuga de Beckman utilizando un rotor tipo TI45 a 36,000 rpm durante 45 minutos. El sobrenadante fue diluido con amortiguador de lisis con un contenido de 10 µg/ml de inhibidor I y II de calpaína. La proteína precipita fue centrifugada durante 20 minutos a 9,000 rpm en un rotor Beckman JA-10. El sobrenadante recuperado fue entonces sometido a Cromatografía sobre Agarosa Mimetic Blue AP. Para correr la Columna de Agarosa Mimetic Blue AP, la resina fue protegida inicialmente mediante la aplicación de 10 volúmenes del lecho de polivínilpirrolidona al 1% (es decir, con un MW de 40,000) para bloquear los sitios de unión no específicos. La PVP-40 débilmente unida fue removida lavando con 10 volúmenes de lecho de NaCl 2M, y citrato de sodio 10 mM, pH 3.4. Justo antes de la adición de la muestra de PDElc solubilizada, la columna fue equilibrada con 5 volúmenes de lecho de Amortiguador de Columna A (MOPS 50 mM pH 7.4, ZnS04 10 µM, MgCl2 5 mM, CaCl2 0.1 M, DTT 1 mM, benci idina HCl 2 mM) . La muestra solubilizada fue aplicada a la columna a una velocidad de flujo de 2 ml/min con reciclaje, de modo que la muestra total fue aplicada 4 a 5 veces en 12 horas. Después de que la carga fue completa, la columna fue lavada con 10 volúmenes de columna de Amortiguador de Columna A, seguidos por 5 volúmenes de columna de Amortiguador de Columna B (Amortiguador de Columna A con un contenido de 5' -AMP 20 mM) , y seguidos por 5 volúmenes de columna de Amortiguador de Columna C (MOPS 50 mM pH 7.4, ZnS04 10 µM, CaCl2 0.1 mM, ditiotreitol 1 mM, y bencimidina HCl 2mM) . La enzima fue eluida en tres grupos sucesivos. El primer grupo consistió de enzima de un lavado de 5 volúmenes de lecho con Amortiguador de Columna C que contenía cAMP 1 mM. El segundo grupo consistió de enzima de un lavado de 10 volúmenes de lecho con Amortiguador de Columna C que contenía NaCl lmM. El grupo final de enzima consistió de un lavado de 5 volúmenes de lecho con Amortiguador de Columna C que contenía NaCl 1M y cAMP 20 mM.

Los grupos activos de enzimas fueron recolectados y los nucleótidos cíclicos removidos vía cromatografía por filtración en gel convencional o cromatografía sobre resina de hidroxiapatita. Después de la remoción de los nucleótidos cíclicos, los grupos de enzimas fueron dializados contra amortiguador de diálisis que contenía MOPS 25 mM, pH 7.4, ZnS04 10 µM, NaCl 500 mM, CaCl2 1 mM, ditiotreitol 1 mM, benzamidina HCl 1 mM, seguido por diálisis contra amortiguador de Diálisis que contenía glicerol al 50%. La enzima fue congelada rápidamente con la ayuda de hielo seco y almacenada a -70°C. Las preparaciones resultantes fueron aproximadamente >90% puras por SDS-PAGE. Esas preparaciones tuvieron actividades específicas de aproximadamente 0.1 a 1.0 µmol de CaMP hidrolizadas por minuto por miligramo de proteína.

Determinaciones del Valor de la Cl 50 El parámetro de interés en la evaluación de la potencia de un inhibidor enzimático competitivo de la PDE5 y/o PDElc y PDE6 es la constante de inhibición, es decir, Ki. Este parámetro puede ser aproximado determinando la CI50 la cual es la concentración de inhibidor que da como resultado la inhibición de la enzima en un 50%, en un solo experimento dosis-respuesta bajo las siguientes condiciones. La concentración de inhibidor es siempre mucho mayor que la concentración de enzima, de modo que la concentración de inhibidor libre (la cual es desconocida) es aproximada por la concentración de inhibidor total (la cual es conocida) . Se elige un intervalo adecuado de concentraciones de inhibidor (es decir, están presentes concentraciones de inhibidor al menos varias veces mayores y varias veces menores que la Ki en el experimento) . Típicamente, las concentraciones de inhibidor fluctúan de 10 nM a 10 µM. Las concentraciones de enzima y sustrato son elegidas de modo que sea consumido menos del 20% del sustrato en ausencia de inhibidor (proporcionando, por ejemplo, hidrólisis de sustrato máxima de 10 a 15%) , de modo que la actividad enzimática sea aproximadamente constante a través del ensayo. La concentración de sustrato es menos de un décimo de la constante de Michaelis (Km) . Bajo esas condiciones, la CI50 se aproximará mucho a la Ki. Esto se debe a que la ecuación de Cheng-Prusoff que relaciona esos parámetros: CI50 = Ki(l+S/Km), con (1+S/Km) aproximadamente 1 a valores bajos de S/Km.

El valor de la CI50 es estimado a partir de los puntos de los datos ajustando los datos a un modelo adecuado de interacción enzima-inhibidor. Cuando se sabe que esta interacción implica una competencia simple del inhibidor con el sustrato, puede ser utilizado un modelo de dos parámetros: Y = A/(l+x/B) donde la Y es la actividad de la enzima medida a una concentración de inhibidor de x, A es la actividad en ausencia de inhibidor y B es la CI50. Véase, Y. Cheng et al., Biochem . Pharmacol . , 22: 3099-3108 (1973). Los efectos de los inhibidores de la presente invención sobre la actividad enzimática de preparaciones de PDE5 y PDE6 como se describió anteriormente, fueron evaluados en cualquiera de dos ensayos que difirieron entre sí principalmente sobre la base de la escala y proporcionaron esencialmente los mismos resultados en términos de los valores de la CI50. Ambos ensayos implicaron la modificación del procedimiento de Wells et al., Biochim . Biophys, Acta , 384 : A30 (1975). El primero de los ensayos se efectúo en un volumen total de 200 µl con un contenido de Tris 50 mM, pH 7.5, acetato de Mg 3 mM, EDTA 1 mM, 50 µg/mL de nucleotidasa de veneno de serpiente y [3H]-GMPc 50 nM (Amercham) . Los compuestos de la invención fueron disueltos en DMSO finalmente presente al 2% en el ensayo. Los ensayos fueron incubados durante 30 minutos a 30 °C y se detuvieron mediante la adición de 800 µl de Tris 10 mM pH 7.5, EDTA 10 mM, tiofilina 10 mM, adenosina 0.1 mM, y guanosina 0.1 mM. Las mezclas fueron cargadas sobre columnas de QAE Sephadex de 0.5 mL, y eluidas con 2 mL de formiato 0.1 M (pH 7.4). La radioactividad eluida fue medida por conteo de destellos en Optiphase Hisafe 3. Se efectúo un segundo ensayo de microplaca en PDE, utilizando placas Multiscreen y un múltiple de vacío. El ensayo (100 µl) contenía Tris 50 mM pH 7.5, acetato de Mg 5 mM, EDTA 1 mM y 250 µg/mL de nucleotidasa de veneno de serpiente. Los otros componentes de la mezcla de reacción fueron como se describió anteriormente. Al final de la incubación, el volumen total del ensayo fue cargado sobre una placa de icrocolumna de QAE Sephadex por filtración. La radioactividad libre fue eluida con 200 µl de agua de la cual se analizaron alícuotas de 50 µl por conteo de destellos como se describió anteriormente. Los ejemplos siguientes se presentan para ilustrar mejor la preparación reclamada. El alcance de la presente invención no debe entenderse como si únicamente consistiera de los siguientes ejemplos.

Ejemplo 1 El compuesto de fórmula estructural (I) fue preparado como se describe en la Patente Estadounidense No. 5,859,006 y formulado en tabletas utilizando granulación en húmedo. Se disolvió povidona en agua para hacer una solución al 10%. Se agregaron al compuesto activo, celulosa microcristalina, croscarmelosa sódica y lauril sulfato de sodio a un mezclador de alto corte y se mezclaron durante 2 minutos. Los polvos fueron granulados en húmedo con la solución de povidona y agua extra según lo requerido para completar la granulación. La mezcla resultante fue secada en un secador de lecho fluido con aire de entrada a 70 °C ± 5°C, hasta que la pérdida por secado fue del 2.5%. Los granulos se hicieron pasar a través de un Cornil con una rejilla (o tamiz) adecuado, y se agregaron a un mezclador adecuado. La croscarmelosa sódica extragranular y el sulfato de laurilo, y la sílice anhidra coloidal se hicieron pasar a través de un tamiz adecuado (por ejemplo, 500 micrones) y se agregaron al mezclador y se mezclaron 5 minutos. Se agregó estearato de magnesio y se mezcló durante 2 minutos. La mezcla fue comprimida a una compresión/peso objetivo de 250 mg utilizando una herramienta cóncava normal redonda de 9 mm. Las tabletas del núcleo fueron recubiertas con una suspensión acuosa de Opadry OY-S-7322 utilizando una Accelacota (o bandeja de recubrimiento similar) utilizando aire de entrada de 50 °C a 70 °C hasta que el peso de la tableta se incrementó aproximadamente 8 mg. El Opadry OY-S-7322 contiene metilhidroxipropilcelulosa Ph. Eur., dióxido de titanio Ph. Eur., Triacetína USP. El Opadry incrementa el peso de cada tableta en aproximadamente 258 mg. La cantidad de recubrimiento de película aplicado por tableta puede ser menor que el establecido dependiendo de la eficiencia del proceso. Las tabletas son llenadas en paquetes de ampollas y acompañadas por un inserto en forma de paquete que describa la seguridad y eficacia del compuesto. 1) Compuesto de fórmula estructural (I) Ejemplo 2 La siguiente fórmula se utilizó en la preparación de una forma de dosificación terminada que contiene 10 mg del compuesto de fórmula estructural (I) .

Se utilizó agua purificada, USP en la mana de las tabletas. El agua es removida durante el procesamiento y permanece en niveles mínimos en el producto terminado. Las tabletas son manufacturadas utilizando un proceso de granulación en húmedo. Una descripción paso por paso del proceso es como sigue. El fármaco y excipientes a ser granulados son tamizados de manera segura. El inhibidor de PDE5 selectivo es mezclado en seco con monohidrato de lactosa (secado por roció) , hidroxipropilcelulosa, croscarmelosa sódica y monohidrato de lactosa. La mezcla de polvo resultante es granulada con una solución acuosa de hidroxipropilcelulosa y lauril sulfato de sodio utilizando un Powrex u otro granulador de corte alto adecuado. Puede ser agregada agua adicional para alcanzar el punto final deseado. Puede ser utilizado un molino para romper los grumos para la granulación en húmedo y facilitar el secado. La granulación en húmedo es secada utilizando un secador de lecho fluido o un horno de secado. Una vez que el material está seco, éste puede ser dimensionado para eliminar cualesquier aglomerados grandes. La celulosa microcristalina, croscarmelosa sódica y estearato de magnesio son tamizados de manera segura y agregados a los granulos dimensionados secos. Esos excipientes y la granulación seca son mezclados hasta uniformarse utilizando una bandeja vibradora, mezclador de listón, u otro tipo de mezclado adecuado. El proceso de mezclado puede ser separado en dos fases. La celulosa microcristalina, croscarmelosa sódica y la granulación seca son agregadas al mezclador y mezcladas durante la primera fase, seguido por la adición del estearato de magnesio a esta granulación y una segunda fase de mezclado. La granulación mezclada es entonces comprimida en tabletas utilizando una máquina de compresión giratoria. Las tabletas de núcleo son recubiertas con pelicula con una suspensión acuosa de la mezcla de color apropiado en una bandeja de recubrimiento (por ejemplo, Accela Cota). Las tabletas recubiertas pueden ser ligeramente polveadas con talco para mejorar las características de manejo de la tableta. Las tabletas son llenadas en recipientes de plástico (30 tabletas/recipiente) y acompañadas por un inserto en forma de paquete que describe la seguridad y eficacia del compuesto.

Ejemplo 3 Se utilizó la siguiente fórmula en la preparación de formas de dosificación terminadas de 5 mg del compuesto de fórmula estructural (I).

La forma de dosificación del Ejemplo 3 fue preparada en una forma idéntica a la forma de dosificación del Ejemplo 2. Ejemplo 4 ? ? Las cápsulas de gelatina son llenadas con precisión bombeando un volumen de llenado exacto de formulación de fármaco predisuelto en la cavidad sellada parcialmente de la cápsula. Inmediatamente después del llenado por inyección de la formulación de solución de fármaco, la cápsula es sellada térmicamente por completo. Las cápsulas son llenadas en recipientes de plástico y acompañadas por un inserto en forma de paquete.

Ejemplo 5 En dos estudios controlados con placebo doblemente ciegos, aleatorios, el compuesto de fórmula estructural (I), a un intervalo de dosis en una dosificación diaria y para una terapia sobre demanda para encuentros y relaciones sexuales en casa, fue administrado a los pacientes que necesitaban del mismo. Dosis de 5 a 20 mg del compuesto de fórmula estructural (I) fueron eficaces y demostraron ausencia de rubor y sin reportes de anormalidades de visión. Se encontró que una dosis de 10 mg del compuesto de fórmula estructural (I) fue completamente eficaz y demostró efectos laterales mínimos (sin rubor y sin reportes de visión azul).

La función eréctil fue evaluada por el índice Internacional de Función Eréctil (IIEF) (Rosen et al., Urology, 49, pp. 822-830 (1997)), diarios de intentos sexuales, y preguntas de satisfacción global. El compuesto de fórmula estructural (I) mejoró significativamente la función eréctíl de acuerdo a lo evaluado por todos los puntos finales. En los regímenes de dosificación, tanto "sobre demanda" como diariamente, el compuesto de fórmula estructural (I) mejoró significativamente la función eréctil en dosis de entre 1 y 20 mg.

Ejemplo 6 Se integraron los datos de cinco estudios clínicos para mostrar la eficacia de la dosificación diaria de 5 mg y 10 mg de un compuesto de fórmula estructural (I) (Fármaco de Estudio) . Un estudio fue de una duración de ocho semanas, y los otros cuatro estudios fueron de doce semanas de duración. El Fármaco de Estudio fue administrado "diariamente" a pacientes con disfunción eréctil masculina. La "Disfunción Eréctil (ED) " se define como la incapacidad persistente para lograr y/o mantener una erección adecuada para permitir el desarrollo sexual satisfactorio.

La población de estudio consistió de cuatro subgrupos como sigue: (a) Fármaco de Estudio tomado menos del 30% del tiempo durante el estudio; (b) Fármaco de Estudio tomado del 30% al 50% del tiempo durante el estudio; (c) Fármaco de Estudio tomado del 50% al 70% del tiempo del estudio; y (d) Fármaco de Estudio tomado más del 70% del tiempo durante el estudio. El Fármaco de Estudio fue administrado oralmente como tabletas de copreciprtado de Fármaco de Estudio hecho de acuerdo con Butler, Patente Estadounidense No. 5,985,326 y como tabletas que contenían el Fármaco de Estudio como un fármaco libre. El Fármaco de Estudio fue administrado en dosis de 5 mg y 10 mg, "diariamente" y no más de una vez cada 24 horas. No se permitieron otros medicamentos, tratamiento o dispositivos aprobados o experimentales para tratar la ED. Las dos principales variables de eficacia fueron la capacidad de un sujeto para penetrar a su pareja y su capacidad para mantener una erección durante la relación, de acuerdo a lo medido por el índice Internacional de Función Eréctil (IIEF) . El Cuestionario de IIEF contiene quince preguntas, y es una medida breve, confiable, de la función eréctil. Véase, R. C. Rosen et al., Urology, 49, pp. 822-830 (1997).

Las variables de eficacia secundaria fueron puntajes de dominio de IIEF para la función eréctil, función orgásmica, deseo sexual, satisfacción en , la relación, y satisfacción total; la capacidad del paciente para lograr una erección, capacidad para insertar su pene en la vagina de su pareja, conclusión de la relación con eyaculación, satisfacción con la dureza de su erección y satisfacción total, todo de acuerdo a lo medido por el diario del Perfil de Encuentros Sexuales (SEP) , especialmente, la Pregunta 2 y la Pregunta 3. El SEP es un instrumento diario del paciente que documenta cada encuentro sexual durante el curso del estudio. El análisis de seguridad del estudio incluyó todos los sujetos enrolados, y se evaluó, evaluando todos los eventos adversos reportados y cambios en los valores clínicos de laboratorio, signos vitales, resultados del examen físico y resultados de electrocardiogramas. En total, la integración de los cinco estudios demostró una tendencia hacia una mejor respuesta con un incremento en la frecuencia de la dosis, tanto en el grupo de 5 mg y 10 mg, y en las tres variables de eficacia principales. Los resultados se resumen en las siguientes Tablas 2-4.

Tabla 2. Resumen del Dominio de Función Eréctil de IIEF Por ciento del tiempo que se tomó fármaco durante el estudio Dosis Estadísticas <30% 30% al 50% 50% al 70% >70% 5 mg Ñ 97 54 28 13 Línea Base Promedio 13.2 13.5 14.1 13.1 Punto Final Promedio 17.4 17.5 20.9 22.1 Cambio Promedio 4.3 4.0 6.8 9.0 0 mg N 164 75 41 13 Línea Base Promedio 14.1 14.4 13.9 14.8 Punto Final Promedio 20.0 21.4 21.5 22.2 Cambio Promedio 5.9 6.9 7.6 7.4 Tabla 3. Resumen de la Pregunta 2 del SEP (Capacidad para insertar el pene) Por ciento del tiempo que se tomó fármaco durante el estudio Dosis Estadísticas <30% 30% al 50% 50% al 70% >70í mg N 98 54 28 13 Línea Base Promedio 42.7 40.8 47.9 42.8 Punto Final Promedio 57.2 57.2 69.3 68.2 Cambio Promedio 14.4 16.5 21.4 25.5 mg N 164 76 41 45 Línea Base Promedio 44.7 47.5 43.6 45.9 Punto Final Promedio 66.2 69.0 73.4 75.6 Cambio Promedio 21.5 21.5 29.9 29.7 Tabla 4. Resumen de la Pregunta 3 del SEP (Erección suficientemente prolongada para una relación exitosa) Por ciento del tiempo que se tomó fármaco durante el estudio Dosis Estadísticas <30% 30% al 50% 50% al 70% >70% mg N 98 54 28 13 Línea Base Promedio 21.8 16.7 18.7 18.4 Punto Final Promedio 38.2 40.4 53.5 54.6 Cambio Promedio 16.4 23.7 33.8 36.2 mg N 164 76 41 45 Línea Base Promedio 24.6 26.5 20.2 25.3 Punto Final Promedio 53.5 56.3 63.2 63.9 Cambio Promedio 28.9 29.7 43.0 38.6 Ejemplo 7 Un estudio controlado con placebo, doblemente ciego, evaluó la seguridad y la eficacia del tratamiento diario utilizando un compuesto de fórmula (I) (Fármaco de Estudio) en hombres de 21-72 años de edad y que experimentaban disfunción eréctil de media a moderada. Los hombres que tenían una historia de prostatectomia radical o diabetes mellitus fueron excluidos. En este estudio, después de un periodo libre de tratamiento de tres semanas, los sujetos fueron distribuidos aleatoriamente a un tratamiento diario durante tres semanas con placebo o fármaco de estudio (10, 25, 50, o a 100 mg) . Todos los participantes en el estudio estuvieron de acuerdo en intentar cuatro encuentros sexuales durante los periodos libres y el tratamiento. Se colectaron los puntajes del índice Internacional de la Línea Base de la Función Eréctil (IIEF) , datos del diario del perfil de encuentros sexuales (SEP), y la cuenta de evaluación global (GAQ) durante el periodo de tratamiento. Los puntos finales principales fueron el cambio de la línea base en las Preguntas 3 (efecto del tratamiento sobre la capacidad de penetración) y 4 (efecto del tratamiento sobre el mantenimiento de la erección) del IIEF. Los puntos finales secundarios incluyeron el cambio de la línea base en todos los dominios de IIEF y en la SEP y las respuestas GAQ. Los resultados para el grupo administrado con 10 mg del Fármaco de Estudio diariamente fueron comparables con, o mejor aún que, los resultados de los grupos administrados con 25, 50 y 100 mg de Fármaco de Estudio diariamente. En comparación con el placebo, el Fármaco de Estudio mejoró significativamente la función eréctil evaluada por todos los puntos finales de estudio. Por ejemplo, en grupos tratados con el Fármaco de Estudio, el cambio en la Pregunta 3 del IIEF fue de aproximadamente 1.4 (en comparación con el placebo) con un tratamiento diario de 10 mg. El cambio en la Pregunta 4 fue de aproximadamente 1.8 (compuesto a placebo) con un tratamiento diario de 10 mg. Los porcentajes de relaciones exitosas utilizando el Fármaco de Estudio, de acuerdo a lo reportado en los diarios de SEP, fueron desde el 82% con 10 mg de terapia diaria, en comparación con 40.4 para el placebo. Además, el 90% de los sujetos que recibieron una dosis diaria de 10 mg de Fármaco de Estudio reportaron erección mejorada en la GAQ en comparación con el 30% de los sujetos a los que se les administro placebo. Los eventos adversos estuvieron relacionados con la dosis, y atenuados con un tratamiento diario continuo. Los eventos adversos más comunes fueron la cefalea, dolor de espalda, mialgia y dispepsia. La cefalea relacionada con el tratamiento, el evento adverso más común, fue observada en el 13% al 46% de los sujetos que recibieron fármaco de estudio diariamente en comparación con el 3% para el placebo. No hubo cambios relacionados con el tratamiento en los signos vitales, ECG, o mediciones de laboratorio. De acuerdo con la presente invención, una dosis unitaria diaria de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg, de manera preferible de aproximadamente 2 hasta aproximadamente 10 mg, y de manera más preferible de aproximadamente 5 hasta aproximadamente 10 mg, administrada diariamente hasta un máximo de 10 mg por día durante al menos 3 días, trata efectivamente la ED, reduce la mínimo o elimina la ocurrencia de efectos laterales adversos, y mejora el acondicionamiento vascular. De manera importante, el paciente responde espontáneamente con respecto a actividades sexuales y regresa más rápidamente a un estado previo a la excitación. De manera sorprendente, además de tratar la ED en individuos, se observó una mayor respuesta utilizando una dosis diaria baja en comparación con una dosis sobre demanda mayor del inhibidor de la PDE5, además de los casos de eventos adversos atribuidos a dosis más bajas. Los principios, modalidades preferidas, y modos de operación de la presente invención han sido descritos en la especificación anterior. Se pretende que la invención a ser protegida aquí, sin embargo, no sea limitada a las pruebas particulares descritas, debido a que ellas son consideradas como ilustrativas más que como restrictivas. Expertos en la técnica pueden hacer variaciones y cambios sin apartarse del espíritu de la invención. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (22)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes REIVINDICACIONES 1. Un artículo de manufactura para uso farmacéutico en humanos, caracterizado porque comprende: (a) una forma de dosificación oral que comprende un inhibidor de la PDE5 que tiene una CI50 para la inhibición de la PDE5 menor de 10 nM, y suficiente biodisponibilidad para ser efectivo en dosis orales unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg; (b) un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo utilizando un régimen de dosificación crónica; y (c) un recipiente.
2. 2. Un artículo de manufactura para uso farmacéutico en humanos, caracterizado porque comprende: (a) una forma de dosificación oral que comprende un inhibidor de la PDE5 que tiene una CI50 menor de 10 nM, y una biodisponibilidad suficiente para ser efectivo en dosis orales unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg; (b) un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo utilizando un régimen de dosificación crónica; donde el régimen de dosificación crónica mejora el acondicionamiento vascular; y (c) un recipiente.
3. 3. Un artículo de manufactura para uso farmacéutico en humanos, caracterizado porque comprende: (a) una forma de dosificación oral que comprende un inhibidor de la PDE5 que tiene una CI50 menor de 10 nM, y suficiente biodisponibilidad para ser efectivo en dosis orales unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg; (b) un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo utilizando un régimen de dosificación crónica; donde el régimen de dosificación crónica mejora el acondicionamiento vascular en comparación con una dosificación aguda o sobre demanda de sildenafil; y (c) un recipiente.
4. 4. Un artículo de manufactura para uso farmacéutico en humanos, caracterizado porque comprende: (a) una forma de dosificación oral que comprende un inhibidor de la PDE5 que tiene una CI50 menor de 10 nM, y una biodisponibilidad suficiente para ser efectivo en dosis orales unitarias de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg; (b) un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo utilizando un régimen de dosificación crónica; donde el régimen de dosificación crónica mejora el acondicionamiento vascular en comparación con una dosificación aguda o sobre demanda de vardenafil; y (c) un recipiente.
5. 5. El artículo de manufactura de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el inhibidor de la PDE5 tiene además (i) al menos una diferencia de 100 veces en los valores de CI50 para la inhibición de PDE5 contra PDE6, y (ii) al menos una diferencia de 1000 veces en los valores de CI50 para la inhibición de PDE5 contra PDElc.
6. 6. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque la forma de dosificación oral comprende aproximadamente 1 mg, aproximadamente 2 mg, aproximadamente 5 mg, o aproximadamente 10 mg, del inhibidor de la PDE5.
7. 7. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el régimen de dosificación crónica es un régimen de dosificación diaria.
8. 8. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el régimen de dosificación crónica comprende la administración de aproximadamente 1 mg/día hasta aproximadamente 10 mg/día del inhibidor de la PDE5.
9. 9. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el inserto en forma de paquete proporciona una dosis máxima del inhibidor de la PDE5 de aproximadamente 10 mg por día.
10. 10. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el inhibidor de la PDE5 es seleccionado del grupo que consiste de (6R, 12aR) -2,3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2-metil-6-(3, 4-metilendioxifenil) piracino [2' , 1' : 6, 1] pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona; (3s, 6R,12aR)-2,3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2, 3- dimetil-6- (3, 4-metilendioxif enil) piracino [2r , 1' : 6, 1] - pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona; 5- (2-etoxi-5-morfolinoacetilfenil) -l-metil-3-n- propil-1, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d]pirimidin-7-ona; 5- (5-morfolinoacetil-2-n-propoxifenil) -1-metil- 3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d]pirimidin-7-ona; 5- [2-aliloxi-5- (4-metil-l-piperacinilsulfonil) - fenil] -l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo- [4, 3-d] pirimidin-7-ona; 5-{2-etoxi-5-[4-(2-propil)-l-piperacinil- s ulf onil] -fenil }-l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H- pirazolo- [4, 3-d] pirimidin- 7 -ona; 5-{2-etoxi-5- [4- (2-hidroxietil) -1-piperacinil- sulfonil) fenil}-l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d]pirimidin-7-ona; 5-{ 5- [4- (2-hidroxietil) -1-piperacinilsulfonil] -2-n-propoxifenil} -1-met il-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d] pirimidin-7-ona; 5- [2-etoxi-5- (4-metil-l-piperacinilcarbonil) -fenil] -l-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo- [4,3-d]pirimidin-7-ona; y 5- [2-etoxi-5- (l-metil-2-imidazolil) fenil] -1-metil-3-n-propil-l, 6-dihidro-7H-pirazolo [4, 3-d]pirimidin-7-ona.
11. 11. El artículo de conformidad con la reivindicación 10, caracterizado porque el régimen de dosificación crónica comprende la administración de aproximadamente 1 mg/día hasta aproximadamente 10 mg/día del inhibidor de la PDE5.
12. 12. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el inhibidor de la PDE5 es seleccionado del grupo que consiste de sildenafil y vardenafil.
13. 13. El artículo de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4, caracterizado porque el inhibidor de la PDE5 tiene la estructura
14. 14. Un método para tratar la disfunción sexual, caracterizado porque comprende utilizar un artículo de manufactura de conformidad con las reivindicaciones 1 hasta 4.
15. 15. Un método para tratar la disfunción sexual, caracterizado porque comprende una administración crónica a un individuo que necesite de la misma de una o más formas de dosificación orales de un inhibidor de la PDE5 en una cantidad de aproximadamente 1 mg/día hasta aproximadamente 10 mg/día durante al menos tres días.
16. 16. El método de conformidad con la reivindicación 15, caracterizado porque la administración crónica de un inhibidor de la PDE5 es una administración diaria .
17. 17. Un método para mejorar una respuesta relajante en el músculo liso del cuerpo cavernoso que comprende una administración crónica de un inhibidor de la PDE5 seleccionado de (6R, 12aR) -2, 3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2-metil-6- (3, 4-metilendioxifenil) piracino- [2' , 1' : 6, 1] pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona durante al menos tres días.
18. 18. El método de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado porque comprende la administración crónica de aproximadamente 1 mg/día hasta aproximadamente 25 mg/día del inhibidor de PDE5.
19. 19. El uso de un inhibidor de la PDE5 seleccionado de (6R, 12aR) -2, 3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2- metil-6- (3, 4-metilendioxifenil) piracino[2',l' : 6, 1] - pirido [3, 4-b] indol-1, -diona y vardenafil para la manufactura de un medicamento que tiene un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo mediante la dosificación crónica de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg del inhibidor de la PDE5 durante al menos tres días.
20. 20. El uso de un inhibidor de la PDE5 seleccionado de (6R, 12aR) -2, 3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2- metil-6-(3, 4 -metilendioxifenil) piracino[2',l' : 6, l - pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona y vardenafil para la manufactura de un medicamento que tiene un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite de lo mismo mediante la dosificación crónica de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg del inhibidor de la PDE5 durante al menos tres días, y que el tratamiento es acompañado por un acondicionamiento vascular mejorado.
21. 21. El uso de un inhibidor de la PDE5 seleccionado de (6R, 12aR) -2, 3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2-metil-6- (3, 4 -metilendioxifenil) piracino [2' , 1' : 6, 1] -pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona y vardenafil para la manufactura de un medicamento que tiene un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite de lo mismo mediante la dosificación crónica de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg del inhibidor de la PDE5 durante al menos tres dias, y mejora el acondicionamiento vascular en comparación con una dosificación crónica o sobre demanda de sildenafil.
22. 22. El uso de un inhibidor de la PDE5 seleccionado de (6R, 12aR) -2, 3, 6, 7, 12, 12a-hexahidro-2-metil-6- ( 3 , 4-metilendioxifenil ) iracino[2' ,1' : 6 , 1] -pirido [3, 4-b] indol-1, 4-diona para la manufactura de un medicamento que tiene un inserto en forma de paquete que establece que el inhibidor de la PDE5 es útil para tratar la disfunción sexual en un paciente que necesite del mismo mediante la dosificación crónica de aproximadamente 1 hasta aproximadamente 10 mg del inhibidor de la PDE5 durante al menos tres días, y mejora el acondicionamiento vascular en comparación con una dosificación crónica o sobre la demanda de vardenafil.