SK12872002A3

SK12872002A3 - Cielené antineoplastické lieky a ich terapeutické použitie

Info

Publication number: SK12872002A3
Application number: SK1287-2002A
Authority: SK
Inventors: Robert A. Copeland; Charles F. Albright; Andrew P. Combs; Radine L. Dowling; Nilsa R. Graciani; Wei Han; C. Anne Higley; Pearl S. Huang; Eddy W. Yue; Susan V. Dimeo
Original assignee: Bristol-Myers Squibb Pharma Company
Priority date: 2000-03-15
Filing date: 2001-03-15
Publication date: 2003-05-02
Also published as: AU4583601A; EE200200522A; CN1418112A; WO2001068145A3; NO20024238D0; TR200202183T2; KR20030009388A; IL151400A0; US20020103133A1; AU2001245836A1; CA2401873A1; US6844318B2; WO2001068145A2; PL360826A1; CZ20022998A3; EP1263473A2; JP2003526683A; HUP0300590A2; MXPA02009019A; BR0109266A

Description

Oblasť techniky

Tento vynález sa týka antineoplastických látok konjugovaných s peptidmi štiepitelnými enzýmom a obsahujúcimi aminokyselinovú rozpoznávaciu sekvenciu membránovo viazanej a/alebo bunečne sekretovanej peptidázy, a použitie takých konjugovaných zlúčenín ako chemoterapeutických látok v cielenej liečbe nádorov.

Doterajší stav techniky

Použitie vela protinádorových zlúčenín je obmedzené kvôli ich úzkemu terapeutickému indexu, čo znamená, že vyvolané toxické účinky po podaní určitých dávkových hladín prevažujú prospešné účinky. Terapia antracyklínom (napríklad doxorubicínom) je napríklad obmedzená tým, že podanie lieku presahujúce kumulatívnu dávku 500 až 550 mg doxorubicínu/m²vedie k významnému riziku kardiotoxicity a myelosupresie (von Hoff et al.). Avšak zlúčeniny, ako je napríklad doxorubicín, často zostávajú liekom volby pre konkrétne formy chemoterapie; preto by bolo užitočné vyvinúť prostriedok znižujúci toxicitu liekov pri udržaní ich terapeutického potenciálu.

Jeden prostriedok k dosiahnutiu tohto ciela, ktorý bol skúšaný niekoľko desaťročí, je návrh proliekových molekúl, ktoré sú diferenciálne aktivované v nádorovom tkanive. To znamená, že molekuly lieku, ktoré sú neaktívne alebo významne menej aktívne, sú selektívne spracované v nádorovom tkanive tak, aby tu boli terapeuticky aktívne. Leu-Dox (aminokyselina Leucín konjugovaná k antracyklínu doxorubicínu) je napríklad proliek, u ktorého bolo zistené, že vyžaduje hydrolýzu

01-2362-02-Ce aminokyseliny od prolieku pomocou intracelulárnych proteáz, aby došlo k uvolneniu antracyklínu (Boven et al. (1990)) . K premene Leu-Dox na Dox u myší dochádza rýchlo, hoci nekompletné, do približne 20% celkovej konverzie (de Jong et al. (1992a)). Podobné pozorovanie bolo zistené po podaní LeuDox človeku (de Jong et al. (1992b); Canal et al.); vo fáze I klinickej štúdie došlo rýchlo v nádorovom tkanive približne k 25% konverzii Leu-Dox na Dox. Naviac bolo preukázané na myšacom modeli xenotransplantátu ludského ovariálneho tkaniva, že Leu-Dox je účinnejšia protinádorová látka ako volný doxorubicín pri rovnakých toxických dávkach (Boven et al. (1992)).

Konjugácia ďalších aminokyselín k Leu-Dox môže ďalej znížiť dostupnosť tejto zlúčeniny bunkám, ktoré nesekretujú príslušnú proteázu a teda ďalej obmedzujú aktivitu zlúčeniny mimo nádor. V tomto ohľade preukázali napríklad Denmeade et al, že proliek peptid-doxorubicín je cielený k antigénu špecifickému pre prostatu (PSA). Ac-HSSKLQ-Leu-Dox je substrát pre PSA proteázu a je aktívny proti nádorovým bunkám prostaty, ktoré exprimujú proteázovú aktivitu. Ďalej bolo preukázané, že ďalšie mono a dipeptidové konjugáty antracyklínov naviac k Leu-Dox majú biologickú aktivitu (Masquelier et al.; Baurain, et al.). Hoci detailná analýza dipeptidových antracyklínových konjugátov nebola prevedená, bolo preukázané, že zlúčeniny obsahujúce Leu-Leu-Daunorubicín, Ala-Leu-Daunorubicín a Leu-Ala-Daunorubicín majú významnú biologickú aktivitu.

Boli popísané rôzne metaloproteinázy bunečnej matrice (MMP) a s nimi bola asociovaná identif ikovatelná peptidmi štiepitelná miesta (Nagase et al.; McGeehan et al.). Naviac bola zistená asociácia medzi metastatickou progresiou nádoru. V tomto ohľade preukázalo veľa výskumných pracovníkov, že

01-2362-02-Ce enzýmy MMP-2, MMP-9 a v nedávnej dobe zistený MMP-14 (MT1-MMP) sú združené s nádorovou progresiou (viď napríklad McDonnell a Fingleton; MacDougall a Matrisian). Zvýšená expresia MMP-2 bola tiež zaznamenaná v karcinómoch pľúc, žalúdka a prsníka v

I zrovnaní s odpovedajúcimi normálnymi tkanivami. Zvýšená expresia MMP nie je obmedzená na samotný nádor. Zvýšená expresia MMP-2 a MMP-14 bola pozorovaná u stromálnych a endoteliálnych buniek, ktoré sú umiestnené proximálne k nádoru (napríklad Soini, Brummer). Hladina exprimovaných MMP je teda zvýšená v mieste nádoru.

Zvýšená expresia MMP v nádore a podporných tkanivách znamená, že je prítomná tiež zvýšená aktivita. Zatial čo proformy MMP-2 a MMP-9 enzýmu sú sekretované bunkami a sú lahko detekovatelné v ludskom sére a moči (Garbisa et al.; Mores et al.), je aktívna forma enzýmu nachádzaná na bunečnom povrchu. V prípade MMP-2 môže byť proforma aktivovaná na bunečnom povrchu transmembránovým enzýmom MMP-14 (Sato et al.; Kurschatt et al.). Bolo tiež popísané, že sa aktivácia proMMP2 vyskytuje prostredníctvom väzby proformy enzýmu k integrínu (Brooks et al.). Bolo preukázané, že sa aktivácia MMP-9 vyskytuje prostredníctvom špecifickej väzby k antigénu bunečného povrchu CD-44 (Yu a Stamenkovic). Na základe týchto nálezov je predpokladané, že zvýšená aktivita MMP proteázy bude najvyššia v mieste nádoru.

Safavy et al. (A. Safavy et al. (J. Med. Chem. 42:49194924 (1999)) popisujú pripojenie syntetického peptidu o siedmich aminokyselinách k protinádorovej látke paclitaxel.

Trouet a Baurain popisujú v patente US Patent 5962216, vydanom 5. októbra 1999, nádorom aktivované proliekové zlúčeniny.

01-2362-02-Če

V dokumentoch WO 99/02175, WO 98/18493 a WO 98/10651 je popísaný konjugát určitých štiepitelných peptidov antigénu špecifického pre prostatu (PSA) k cytotoxickým látkam.

Dokument WO 98/16240 popisuje pripojenie i peptidov k lipidom pre následnú inklúziu výsledných konjugátov do lipozómov, aby došlo k cielenému dopraveniu obsahu vezikúl s cytotoxickou látkou k nádorom.

Dokument WO 00/33888 popisuje peptidové konjugáty doxorubicínu, ktoré sú spracovávané enzýmom nazývaným trouáza.

Dokument WO 00/21571 popisuje použitie FAP (Proteín aktivujúci fibroblasty) k dopraveniu doxorubicínu k nádorom.

Dokument WO 00/64486 nárokuje konjugáty aktivované pomocou MMP pre transport látok k nádorom.

Zostáva však potreba vyvinúť chemoterapeutické proliekové zlúčeniny, ktoré sú neaktívne alebo významne menej aktívne po podaní, čím sa znižuje toxicita zlúčenín, ktoré sú selektívne spracovávané v nádorovom tkanive alebo v jeho blízkosti, takže sa stávajú terapeuticky aktívnymi protinádorovými látkami.

Predkladaný vynález uvádza nové zlúčeniny užitočné v liečbe nádorov, tieto zlúčeniny obsahujú peptid štiepitelný enzýmom metaloproteinázou bunečnej matrice (MMP), tento peptid je konjugovaný k doxorubicínu. Ďalej predkladaný vynález uvádza nové zlúčeniny užitočné pre liečbu nádorov, tieto zlúčeniny po naštiepení metaloproteinázou bunečnej matrice produkujú druhý peptidový doxorubicínový substrát, ktorý môže byť ďalej naštiepený alebo spracovaný aminopeptidázou exprimovanou v okolí nádoru. Žiadny z odkazov uvedených vyššie

01-2362—02-Ce nenavrhuje zlúčeniny, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu.

Popis vynálezu

Tento vynález poskytuje zlúčeninu obsahujúcu peptid štiepitelný enzýmom, ktorý je konjugovaný k antineoplastickej látke, napríklad antracyklínu, vinea alkaloidu, bleomycínu, mitomycínu, taxánu, cytotoxickému nukleotidu, pteridínu alebo podofylotoxínu. Peptid štiepitelný enzýmom je peptid obsahujúci aminokyselinovú sekvenciu, ktorá je selektívne rozpoznávaná a štiepená membránovo viazanou a/alebo bunečne sekretovanou peptidázou, napríklad metaloproteinázou bunečnej matrice. Také zlúčeniny sú užitočné v liečbe nádorov.

Tiež je tu poskytnutý farmaceutický preparát obsahujúci spomínané zlúčeniny a farmaceutický prijateľný nosič. Ďalej je tu poskytnutý spôsob dopravy zlúčenín tohto vynálezu k cicavčím bunkám postihnutým nádorom alebo iným ochorením, tento spôsob zahrnuje kontakt buniek so zlúčeninou v prítomnosti peptidázy schopnej štiepenia peptidu.

Je oceňované, že určité rysy vynálezu, ktoré sú pre jasnosť popísané v kontexte s oddelenými formami vynálezu, môžu byť tiež poskytnuté v kombinácii v jednej forme vynálezu. Naopak rôzne rysy vynálezu, ktoré sú pre stručnosť popísané v kontexte s jednou formou vynálezu, môžu byť tiež poskytnuté pre separátnu formu vynálezu alebo akoukoľvek vhodnú kombináciu.

01-2362-02-Ce

Detailný popis vynálezu

Vynález poskytuje zlúčeninu zahrnujúcu antineoplastickú látku konjugovanú k peptidu štiepitelnému enzýmom.

V prvej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú

Vzorcom (I) :

E^cp-A

G) alebo jej farmaceutický prijateľnú sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom konjugovaný k A a vybraný z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-; a

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc alebo prolínové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

01-2362-02-Ce

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- nebo -Sar-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná u Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, a-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nvá, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, 0-(Ci~C₄ alkyl)-Tyr, 0-(fenyl (Ci-C₄ alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylová kyselina;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je amino uzatvárajúca skupina; a

A je antineoplastická látka.

(2) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú

Vzorcom (I), kde A je doxorubicín, doxorubícínový derivát alebo doxorubicínový analóg.

(3) V prednostnejšej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde A je doxorubicín.

(4) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la):

(b)

01-2362-02-Ce alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-; a

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolínové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O- (C1-C4 alkyl)-Tyr, O-(fenyl (C1-C4 alkyl)-)-Tyr, (C3-C8 alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylová kyselina;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

01-2362-02-Ce

Xa4- je aminokyselina;

R je vybrané z H₃CC(=O)-;

HOC (=0)- (CH_2vC (=0) kde v je 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0)-,

HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) _t“CH₂C (=0) -,

H₂N-(CH₂CH₂O)_t-CH₂C(=O)-, a

H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2, 3, alebo 4;

1^-0(=0)-,R¹-S (=0)₂-;

R¹-NHC(=O)-;

R^la-CH₂C (=0)-;

prolín substituovaný pomocou -OR³;

Ci-C₄ alkyl substituovaný pomocou 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

-(0=) C-fenyl —C(=0)—;

R¹ je C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný O, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómami vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH, metoxy alebo -CO₂H;

fenyl substituovaný O, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; alebo

C1-C6 alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, Ci-C3 alkyl, Ci-C« alkoxy, -CO2H, N (CH2CH2) 2N-R², SO3H;

C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný

01-2362-02-Ce heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH; , ¹

R² je H, H₂N(C2-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, alebo acetyl;

R³ je H, Ci-C₄ alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl, fenyl alebo benzyl;

R⁴ je OH, Ci-C₃ alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂) ₂N-R²;

C3-C6 cykloalkyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH; alebo

C₆-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a OH.

(5) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (ľa) alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc alebo prolínové mimetikum;

01-2362-02-Če

Xa2 je aminokyselina;

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, β -Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Phe, Bip, Tyr,

O-benzyl-Tyr; a

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je vybrané z H₃CC(=O)-;

HOC(=O)-(CH₂)vC(=O)-, kde v je 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

HO2CCH2O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

H₂N- (CH2CH2O) _t-CH₂C (=0) -, a H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2 nebo 3;

1^-0(=0)-:

r^x-s(=o)2-;

R¹-NHC(=O)-;

R^la-CH₂C (=0)-;

prolin substituovaný pomocou -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný pomocou 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

- (0=) C-fenyl -C(=0)-;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N,

01-2362-02-Ce

O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH, metoxy alebo -CO2H;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO2H; alebo

Ci-Cô alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, C1-C3 alkyl, Ci~C4 alkoxy, -CO2H, N (CH2CH2) 2N-R², SO3H;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je t

nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je volitelne substituovaný 1 alebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, alebo acetyl;

R³ je H, Ci-C₄ alkyl, C3-C6 cykloalkyl, fenyl alebo benzyl;

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, Ci-C₄ alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂) ₂N-R²;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je volitelne substituovaný 1 alebo 2 -OH; alebo

C6-C10 karbocyklus substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a OH.

01-2362-02-Če (6) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanou Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(7) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanou Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(8) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú

Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom MMP-14.

(9) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú

Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteľnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(10) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc alebo prolínové mimetikum definované vzorcom:

01-2362-02-Če

kde R⁵ je vybrané z H, halogénu, Cj-Cs alkylu, -OH, Ci-C₆ alkoxy a benzyloxy; a n je 2, 3, 4 alebo 5;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktám, N,Ndimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, Nmetylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

Xpl je aminokyselina vybraná z Hof, Leu, Bip, Phe, nor-Leu, Tha, Phg, Val, Glu, Asn, Ser, Ala, homo-Tyr, Aze, 4-aza-Hof, O-(3-pyridyl)-Tyr, O-(4-pyridyl)-Tyr, O-benzyl-Tyr, O-benzylThr, O-benzyl-Ser, O-metyl-Ser, O-alyl-Ser, 4-nitro-Hof, Nmetyl-Leu, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr, 4-hydroxyfenyl-Gly, fenylpropyl-Gly, styryl-Ala alebo 2 Nal;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetyl-Lys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, íle, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, 0-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazínpropyl-Gly;

Xp3 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Hof, Arg, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Dpa, Gin, Glu, Gly, His, Hyp, íle,

01-2362-02-Ce

Irg, Lys, Met, Orn, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp a Val;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, β-Ala, Cha, Cba, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, Abu, Aib, Iva, Nva a Phe;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg, Ala, Arg, Asn, Asp, β-Asp, Aze, Cha, Cys, Dpa, Gin, Glu, His, Hyp, íle, Irg, Leu, Lys, Met, Orn, Phe, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, alebo Val;

R je vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃C0CH₂CH₂0CH₂C (=0)-;

H₃COCH2CH2OCH2CH₂OCH₂C (=0) -;

HO₂CCH2OCH2CH₂OCH₂C (=0)-;

H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0) - ;

H₃CC (=0) HN-CH2CH₂0CH₂CH20CH₂C (=0)-;

H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂nch₂c (O) -;

H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N(CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) 2NCH2C (0)~;

O (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) - ;

HO₂CCH₂C (CO₂H) (OH) CH₂C (=0) - ;

HO₂CCH₂C (CH₃) (OH) CH₂C (=0) -;

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)-;

01-2362-02-Ce karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzénsulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridínkarbonyl;

2-pyrazínkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolín a

4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

(11) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(12) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(13) V prednostne forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú

Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

(14) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepiteňú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(15) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľnú sol, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraným z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Laa-;

01-2362-02-Če

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Leu-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Hof-Laa-; Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-; Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-; Cap-Gly-Leu-Xp2-Laa-; a Cap-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvori väzbu štiepitelnú matrixínom;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, alebo Npa;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Xp2 je aminokyselina	vybraná z	Tyr,	Ala,	Ser, Leu,	Gin,	Val
Glu, His, Lys, Arg,	Orn, Aze,	Hof,	homo-	Tyr, Cit,	4-aza-	-Phe
Ν,Ν-dimetyl-Lys, Dap,	Dap, Asn,	Asp,	Aze,	Cha, Cys,	Gly,	Hyp
íle, Irg, Met, Phe,	Phe (4-fluoro),	Pro,	Sar, Thr,	Trp,	Cya

Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Cha, Nie a Hol;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4~; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

01-2362-02-Ce

R j e vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH2CH2CH2CH2C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH2CH2OCH₂C (=0)

HO2CCH2OCH2CH2OCH2C (=0) - ;

H2NCH2CH2OCH2C (=0)

H₂NCH2CH2OCH₂CH₂OCH2C (=0)

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)

H₃CC (=0) HN-CH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) H₂NCH₂CH₂N (CH2CH2) 2NCH2C (O) - ;

H₃CC (=0) HNCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (O) -;

H₃CC (=0) N (CH2CH2) 2NCH2C (O) -;

O (CH2CH2) 2NCH2CH2NHC (O)

HO2CCH2C (CO₂H) (OH)CH₂C(=0)

HO2CCH2C (CH₃) (OH) CH₂C (=0) -; 2-karboxýcyklohexyl-C(=0)-;

2- karboxycyklopentyl-C(=0) karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzénsulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridínkarbonyl;

2-pyraz ínkarbony1;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolín a

4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

01-2362-02-Ce (16) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(17) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(18) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

(19) V prednostnej forme. vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(20) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijatelnú sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Cha;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Nie;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Hol;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha- ;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

01-2362-02-Ce

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, alebo Npa;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktám, N, N dimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N metylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys

Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Ser

Thr, Trp a Tyr;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val

Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe Ν,Ν-dimetyl-Lys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp íle, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a N metylpiperazínpropyl-Gly;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R je vybrané z:

H₃CC(=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

H3C0CH₂CH₂0CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH_:C (=0) -;

01-2362-02-Ce

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)-; a tetrazolacetyl.

(21) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(22) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(23) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom MMP-14.

(24) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(25) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraný z:

Cap-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Cha;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Nle;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Hol;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-;

01-2362-02-Ce

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-; a

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepiteínú matrixínom;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Äbu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktám, N,Ndimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, Nmetylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys,

Glu, Gly, Hyp, Thr, Trp a Tyr;	Irg,	Met,	Phe,	Phe (	4-fluoro),	Pro, Sar,	Ser,
Xp2 je aminokyselina	vybraná z	Tyr,	Ala, Ser,	Leu, Gin,	Val,
Glu, His, Lys,	Arg,	Orn,	Aze,	Hof,	homo-Tyr,	Cit, 4-aza-	-Phe,
N,N-dimetyl-Lys	, Dap,	Dap,	Asn,	Asp,	Aze, Cha,	Cys, Gly,	Hyp,
íle, Irg, Met,	Phe,	Phe (	4-fluoro),	Pro, Sar,	Thr, Trp,	Cya,

Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, 0-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazínpropyl-Gly;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R je vybrané z:

H₃CC(=O) -;

HOC(=O)CH₂CH₂C(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

01-2362-02-Ce

H₃COCH2CH₂OCH₂C (=0)

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)a tetrazolacetyl.

(26) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(27) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(28) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

(29) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(30) V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľnú sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraný z:

Identifikačné číslo sekvencie: 185:

R-Y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikační číslo sekvencie: 186:

R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

01-2362-02-Ce

Identifikačné čislo sekvencie: 187: R- γ -E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné čislo sekvencie: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné čislo sekvencie: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikačné čislo sekvencie: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikačné čislo sekvencie: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikačné čislo sekvencie: 192:

R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikačné čislo sekvencie: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné čislo sekvencie: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné čislo sekvencie: 195: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikačné čislo sekvencie: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikačné čislo sekvencie: 197: R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikačné čislo sekvencie: 198:

01-2362-02-Če

R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 201: R-P-L-G-Hof-Y-Hol-,· a

Identifikačné číslo sekvencie: 202: R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R je vybrané z:

H₃CC(=0)-;

HOC (=0) - (CH₂) _VC (=0)-;

kde v je l_z 2, 3, 4, 5, nebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0)-;

H0₂CCH₂0- (CH₂CH₂0) _t-CH₂C (=0)

H₂N- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -; a

H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -; kde v je 1, 2, 3, nebo 4;

R^C^O)-;

rM^oJz-;

R^NHC^O)-;

R^la-CH₂C (=0)-;

prolín substituovaný -OR³;

Ci-C₄ alkyl substituovaný 0-1 R⁴; 2-karboxyfenyl-C(=0)-; a -(0=)C-fenyl-C(=0)-;

01-2362-02-Ce

R¹ je C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO2H;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH, metoxy alebo -CO₂H;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; alebo

C1-C6 alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, C1-C3 alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO₂H, N (CH₂CH₂) ₂N-R², SO3H;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je volitelne substituovaný 1 alebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, alebo acetyl;

R³ je H, Ci~C₄ alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl, fenyl alebo benzyl;

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, Ci-C₄ alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂) ₂N-R²;

01-2362-02-Ce

Cô-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a OH.

(31) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijatelnú sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraný z:

Identifikačné čislo sekvencie: 185: R- γ -E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 186: R- γ -E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 187: R- γ -E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 192: R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 193:

01-2362-02-Če

R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Nle-;

194:

195:

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

196:

197:

198:

199:

200:

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikačné číslo sekvencie: R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R je vybrané z:

H₃CC(=O) -;

HOC (=0) CH2CH2C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

201:

202:

01-2362-02-Če

H3COCH2CH2OCH2C (=0) —;

H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) -;

HO2CCH2OCH2CH2OCH2C (=0)

H2NCH2CH2OCH2C (=0)-;

H2NCH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) - ;

H₃CC (=0) HN-CH2CH2OCH2C (=0)

H₃CC (=0) HN-CH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) - ;

H2NCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (0)

H₃CC (=0) HNCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (0)

H₃CC (=0) N (CH2CH2) 2NCH2C (0) (CH2CH2) 2NCH2CH2NHC (O)

HO2CCH₂C(CO₂H) (OH) CH₂C (=0)

HO₂CCH₂C(CH₃) (ÓH)CH₂C(=0)

2-karboxycyklohexyl-C(=0)

2- karboxycyklopentyl-C(=0)-;

karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzénsulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridínkarbonyl;

2-pyrazínkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolín a

4- (2-(5, 6,7, 8-tetrahydronaftenyl))butyl.

(32) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľnú sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraný z:

Identifikačné číslo sekvencie: 185:

01-2362-02-Če

R-Y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 186: R- γ -E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 187: R- γ -E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 192: R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 195: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 197:

R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 198:

R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 199:

R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 200:

R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 201:

R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikačné číslo sekvencie: 202:

R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R j e vybrané z:

H₃CC(=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH2CH2CH2C (=0) -;

HOC (=0) CH2CH2CH2CH2C (=0) -;

H₃C0CH₂CH20CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-; a tetrazolacetyl.

(33) V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu vybranú

Identifikačné číslo sekvencie: 1:

4-metoxy-benzénsulfonyl-p-Ala-G-Hof-Y-L-Dox;

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 2:

1,2-C₆H₄ (C0₂-H-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 3: acetyl-P-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 4: acetyl-P-(R)L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 5: acetyl-P-(β-Ala)-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 6: acetyl-P-( γ -Abu)-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 7: acetyl-P-Cha-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 8: P-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 9: MeOCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 10: MeOCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 11: H2NCH2CH2N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 12:

AcHNCH₂CH₂N(CH₂CH₂)₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 13:

01-2362-02-Ce

AcN(CH₂CH₂) 2NCH2C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 17: Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 18: acetyl-P-H-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 19: acetyl-P-Orn-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 20: acetyl-P-Dap-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 21: acetyl-P-Cit-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 22: acetyl-P-L-G-(0-(3-pyridyl-))Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 23: acetyl-P-L-G-(0-(4-pyridyl-))Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 24: acetyl-P-L-G-(4-aza-)Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 25: acetyl-P-L-G-(O-benzyl-)S-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 26: Cbz-P-L-G-(0-(4-pyridylmetyl-))Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 27: acetyl-P-L-Sar-L-L-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 28:

acetyl-P-(N-Me-)L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 29: acetyl-P-L-G-(N-Me-)L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 30: acetyl-Hyp-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 31: acetyl-Tzc-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 32: acetyl-(Homo-P)-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 33: acetyl-(Homo-P)-L-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 34: acetyl-(Homo-P)-Orn-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 35: acetyl-Nipekotát-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 36: acetyl-Aze-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 37: acetyl-Chg-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 38:

acetyl-P-valerolaktám-G-L-L-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 41:

acetyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 42: cyklopropylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 43:

cyklobutylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 44:

pivaloyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 45:

Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 46:

acetyl-P-L-G-L-A-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 47:

acetyl-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 48:

Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 49:

H₃CC(=0)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 50:

AcHNCH₂CH₂N(CH2CH2)2NCH2C (=0) -P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 51:

acetyl-P-L-G-L-S-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 52:

01-2362-02-Ce acetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 53:

(CH₂CH₂) NCH₂CH₂NHC (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 55:

acetyl-P-L-G-L-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 58:

Cbz-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 59:

AcHNCH₂CH₂N (CH2CH2) 2NCH2C (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 60:

H2NCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (=0) -0-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 61: Dmg-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 62: acetyl- γ -E-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 65: metoxyacetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 66: Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 67: Dmg-P-L-G-Phg-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 68:

Dmg-P-L-G-(O-benzyl-Y)-L-Dox

01-2362-02-Če

Identifikačné číslo sekvencie: 69:

Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 77: acetyl-G-P-Q-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 78: acetyl-G-P-R-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 82: acetyl-G-P-L-G-V-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 83: acetyl-G-P-L-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 84: acetyl-G-P-L-A-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 85: Dmg-P-I-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 86: Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 87: acetyl-G-P-V-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 88: Dmg-P-I-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 89:

Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné čislo sekvencie: 91:

acetyl-G-P-L-G-E-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 92: Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 95: Dmg-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 96: Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 97: Dmg-P-R-G-Bip-R-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 98: acetyl-G-P-L-G-N-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 99: acetyl-G-P-L-G-S-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 100: acetyl-G-P-L-G-(4-hydroxy-fenyl-G)-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 101: acetyl-P-L-G-Hof-H-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 102: acetyl-P-L-G-Hof-A-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 103: acetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné čislo sekvencie: 104:

01-2362-02-Ce acetyl-P-L-G-Hof-(morfolinylpropyl-G)-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 105:

acetyl- y -E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 106:

sukcinyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 107:

acetyl-P-L-G-Hof-(0(4-pyridylmetyl)-Y)-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 108:

acetyl-P-L-G-(homo-Y)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 109:

acetyl-P-L-G-(4-aza-Hof)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 110:

acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-)-Y)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 111:

acetyl-P-L-G-(fenylpropyl-G)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 112:

acetyl-P-L-G-(styryl-A)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 113:

acetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 114: acetyl-P-(N,N-dimetyl-K)-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 115:

acetyl-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 116:

acetyl-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 117: Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 118: acetyl- γ -E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 119: γ -E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 120: acetyl-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 121: acetyl-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 122: acetyl-Y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 123: acetyl-P-Orn-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 124: acetyl-P:(4-aza-F)-G-L,Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 125: acetyl-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 126:

acetyl-P-L-G-Hof-K-L-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 127:

acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 128: Dmg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 129: Peg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 130: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 131: γ -E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 132: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 133: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Cha-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 134: acetyl-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 135: acetyl- γ -E-P-L-O-Hof-Cit-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 136: acetyl-P-L-G-Hof-Q-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 137:

acetyl-P-L-G-Hof-(4-aza-F)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 138:

01-2362-02-Če acetyl-P-L-G-Hof-V-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 139: acetyl- y -E-P-L-G-Hof-E-L-Dox;

I

Identifikačné číslo sekvencie: 140: acetyl-G-Aze-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 141: acetyl-(4-fluoro-F)-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 142: acetyl-(homo-P)-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 143: acetyl-(homo-P)-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 144: acetyl-Aze-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 145: acetyl-Aze-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 154: acetyl-P-L-G-L-L-A-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 155: acetyl-P-L-G-L-Y-A-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 156: acetyl-G-P-L-G-L-A-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 157:

acetyl-P-L-G-L-A-A-L-Dox;

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 158:

acetyl-P-L-G-L-A-L-L-Dox;

I

Identifikačné číslo sekvencie: 159:

acetyl-P-L-G-L-L-S-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 160:

acetyl-P-L-G-L-L-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 161:

Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 162:

Dmg-P-R-G-Phg-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 163:

acetyl-G-P-L-G-L-R-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 164:

4-(2-(5, 6, 7, 8-tetrahydronaftenyl))butyl-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 165:

acetyl-P-L-G-Hof-(N-metylpiperazínpropyl-G)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 166:

tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

'( *

Identifikačné číslo sekvencie: 167:

tetrazolacetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 168:

tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox;

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 169:

P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 170: acetyl-P-L-G-Hof-(homoY)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 171: acetyl-P-AzaHof-G-AzaHof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 172: acetyl-P-L-G-(O-allyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 173: acetyl-P-L-G-(4-nitro-Hof )-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 174: acetyl-P-L-G-Hof-AzaHof-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 175: acetyl-P-L-G-(O-metyl-S}-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 176: acetyl-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 177: acetyl-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 178:

3-pyridínkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 179:

2-pyrazinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 180:

01-2362-02-Ce acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 182:

acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 183:

acetyl-P-L-G-Thr(O-Benzyl)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 184:

acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-L-Dox;

(34) V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu vybranú z:

Identifikačné číslo sekvencie: 39:

acetyl-G-P-L-G-L-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 40:

acetyl-G-P-L-G-F-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 54:

acetyl-G-P-L-G-L-Y-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 56:

acetyl-G-P-L-G-Bip-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 57:

acetyl-G-P-L-G-Nle-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 63:

acetyl-G-P-L-G-Tha-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 64:

acetyl-G-P-L-G-Phg-F-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 70:

acetyl-G-P-L-G-F-Bip-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 71: acetyl-G-P-L-G-L-Bip-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 72: acetyl-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 73: acetyl-G-P-L-G“F-A-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 74: acetyl-G-P-L-G-Bip-A-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 75: acetyl-G-P-L-G-L-A-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 76: acetyl-G-P-L-G-(O-benzyl-Y)-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 79: acetyl-G-P-L-G-L-(4-pyridyl-A)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 80: acetyl-G-P-L-G-L-R-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 81: acetyl-G-P-L-G-L-W-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 90: acetyl-G-P-L-G-L-(O-benzyl-Y)-Dox

01-2362-02-Ce

Identifikačné číslo sekvencie: 93:

acetyl-G-P-L-G-L-E-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 94: acetyl-G-P-L-G-Bip-E-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 146: acetyl-P-L-G-L-Y-G-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 147: acetyl-P-L-G-Hof-Y-G-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 148: acetyl-P-L-G-L-Y-(β-homo-L)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 149: acetyl-P-L-G-Hof-Y-( β -homo-L)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 150: acetyl-P-L-G-L-Y-(. β -Ala)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 151: acetyl-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 152: acetyl-P-L-G-L-Y-Aph-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 153: acetyl-P-L-G-L-Y-Amh-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 181: acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hos-Dox

01-2362-02-Ce (35) V druhej forme vynález poskytuje farmaceutický preparát obsahujúci zlúčeninu definovanú Vzorcom (I) alebo (la) a farmaceutický prijateľný nosič.

(36) V tretej forme vynález poskytuje spôsob liečby, cicavca postihnutého nádorom, tento spôsob zahrnuje podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny definované Vzorcom (I) alebo (I a) cicavcovi postihnutému nádorom.

(37) V prednostnej forme vynález poskytuje spôsob liečby cicavca postihnutého nádorom, kde nádorom je nádor prsníka, vaječníka, mozgu, žalúdka, pľúc, hrubého čreva, prostaty alebo pečene, alebo kde nádorom je leukémia, lymfóm, karcinóm, sarkóm alebo melanóm.

(38) V štvrtej forme vynález poskytuje spôsob dopravenia zlúčeniny k bunkám cicavca postihnutého nádorom, tento spôsob zahrnuje kontakt buniek cicavca postihnutého nádorom so zlúčeninou definovanou Vzorcom (I) alebo (I a) , kde tento kontakt je uskutočnený v prítomnosti peptidázy zahrnujúcej matrixín.

(39) V prednostnej forme vynález poskytuje spôsob liečby, kde nádorom je nádor prsníka, vaječníka, mozgu, žalúdka, plúc, hrubého čreva, prostaty alebo pečene, alebo kde nádorom je leukémia, lymfóm, karcinóm, sarkóm alebo melanóm.

(40) V piatej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I) :

E^cp-A (I)

01-2362-02-Ce obsahujúci peptid štiepiteľný enzýmom, E^cp, konjugovaný s antineoplastickou látkou A.

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde antineoplastickou látkou je antracyklín, vinea alkaloid, bleomycín, mitomycín, taxán, cytotoxický nukleotid, pteridín alebo podofylotoxín.

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde antineoplastickou látkou je antracyklín.

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde antineoplastickou látkou je antracyklín doxorubicín.

V prednostnej Vzorcom (I), kde skupiny zloženej PLGLAAL, PLGLLSL, PLG-(O-benzyl)-S,

GPLGLAL.

forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú aminokyselinová sekvencia je vybraná zo z PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLYAL, PLGLLAL, PLGLLYL, GPLGL, GPLGLL, PLGHof,

PLGHofYL, PLG-(O-benzyl)-SYL, PLGHofEL a

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde aminokyselinová sekvencia je vybraná zo skupiny zloženej z PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLLAL, PLGLLYL, GPLGL, GPLGLL a GPLGLAL.

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde peptid štiepiteľný enzýmom obsahuje aminokyselinovú sekvenciu rozpoznávanú peptidázou, kde peptidázou je matrixín.

01-2362-02-Če

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde peptidázou je matrixín obsahujúci MMP-2, MMP9, alebo MMP-14.

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde látkou je doxorubicín, a kde peptid štiepitelný enzýmom obsahuje aminokyselinovú sekvenciu vybranú zo skupiny zloženej z PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLLAL, PLGLLYL, PLGLYAL, GPLGL, GPLGLL a GPLGLAL.

V prednostnej forme vynález poskytuje zlúčeninu definovanú Vzorcom (I), kde látkou je doxorubicín, a kde peptid štiepitelný enzýmom obsahuje aminokyselinovú sekvenciu rozpoznávanú peptidázou vybranou zo skupiny obsahujúcej MMP-2, MMP-9, alebo MMP-14.

V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje farmaceutický preparát obsahujúci zlúčeninu definovanú Vzorcom (I) a farmaceutický prijateľný nosič.

V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje spôsob dopravenia zlúčeniny k bunkám cicavca postihnutého nádorom, tento spôsob zahrnuje kontakt buniek cicavca postihnutého nádorom so zlúčeninou definovanou Vzorcom (I), kde tento kontakt je uskutočnený v prítomnosti peptidázy zahrnujúcej matrixín.

V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje spôsob dopravenia zlúčeniny k bunkám cicavca postihnutého nádorom, kde nádorom je nádor prsníka, vaječníka, mozgu, žalúdka, pľúc, hrubého čreva, prostaty alebo pečene, alebo kde nádorom je leukémia, lymfóm, karcinóm, sarkóm alebo melanóm.

01-2362-02-Ce

V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje spôsob dopravenia zlúčeniny definované Vzorcom (I) k bunkám cicavca postihnutého nádorom, kde antineoplastickou látkou je antracyklín, vinea alkaloid, bleomycín, mitomycín, taxán, cytotoxický nukleotid, pteridín alebo podofylotoxín.

V ďalšej prednostnej forme vynález poskytuje spôsob dopravenia zlúčeniny definované Vzorcom (I) k bunkám cicavca postihnutého nádorom, kde antineoplastickou látkou je antracyklín, vinea alkaloid, bleomycín, mitomycín, taxán, cytotoxický nukleotid, pteridín alebo podofylotoxín, a kde látkou je antracyklín doxorubicin.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, kde peptid štiepitelný enzýmom je selektívne rozpoznávaný matrixínom, ktorý zahrnuje MMP-2, MMP-9 a/alebo MMP-14 a neselektívne rozpoznávaný enzýmom, proteínom, ktorý aktivuje ludské fibroblasty (FAPa).

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, kde aminokyselina Laa nie je prolín alebo prolómový analóg, kde substituenty na alfa dusíku a substituenty na alfa uhlíku tvoria cyklickú skupinu.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že amino uzatváracia skupina, Cap, nie je polyhydroxyalkanoyl, čo znamená, kde hydroxyalkanoyl uzatváracie skupiny sú obmedzené na skupiny s jedným hydroxyl substituentom na alkanoylovéj skupine.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, kde peptid štiepitelný enzýmom je selektívne rozpoznávaný matrixínom, ktorý zahrnuje MMP-2, MMP-9 a/alebo MMP-14 a neselektívne rozpoznávaný enzýmom Trouázou.

01-2362-02-Ce

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že aminokyselina Xa2 je prirodzená aminokyselina.

i

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že Cap nie je neprirodzená aminokyselina alebo sukcinyl.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, kde peptid štiepitelný enzýmom je selektívne rozpoznávaný matrixínom, ktorý zahrnuje MMP-2, MMP-9 a/alebo MMP-14 a neselektívne rozpoznávaný antigénom špecifickým pre prostatu (PSA).

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp neobsahuje nasledujúcu dipeptidovú väzbu: -Tyr-Ser-; -Tyr-Thr-; -Phe-Ser-; -Gln-Ser-; -Gln-Thr-; a -Asn-Ser-.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp nie je -Gly-Gly-Arg-Leu.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp nie je -Gly-Val-Phe-ArgTiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp nie je -Ala-Pro-Gly-Leu

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp nie je 2-tienylalanínGly-Ala-Leu-.

01-2362-02-Ce

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp nie je 2-naftylalanínGly-Ala-Leu-.

Tiež zahrnuté v predkladanom vynáleze sú zlúčeniny, ako sú uvedené vyššie, za predpokladu, že E^cp nie je -Gly-Leu-Gly-LeuAntineoplastické látky, ako sú tu použité, znamenajú látky, ktoré majú cytotoxický účinok na nádorové bunky; tieto látky zahrnujú zlúčeniny, ako sú napríklad alkylačné látky, tubulin viažuce látky a antiproliferačné látky, rovnako tak ako bielkoviny, napríklad tumor nekrotizujúci faktor, interferóny a rôzne rastové faktory, ktoré môžu negatívne > , w ovplyvniť rast nádorových buniek. Špecifické antineoplastické látky vhodné pre použitie tu zahrnujú bez obmedzenia: antracykliny, bleomycin, vinea alkaloidy (napríklad vinkristin a vinblastín)), mitomycin, cytotoxické nukleotidy, taxány (napríklad paclitaxel a taxoter (viď DeGroot), pteridíny, podofylotoxíny a deriváty kyseliny listovej (viď Lu). Tieto zlúčeniny môžu byť modifikované, napríklad k zvýšeniu potenciálnej terapeutickej účinnosti zlúčenín, alebo k uľahčeniu ich konjugácie s peptidmi v rôznych miestach ich štruktúry prostriedkami dobre známymi osobám znalým odboru.

Ako je tu používané, zahrnujú antineoplastické látky, ktorými sú antracykliny, doxorubicín, deriváty doxorubicínu a analógy doxorubicínu (adriamycín), daunorubicín (daunomycín), epirubicín, detorubicín, karminorubicin, rovnako tak idarubicín, ezorubicín a ako mitoxantrón. Prednostným antracyklínom je doxorubicín, odkazovaný tu ako Dox alebo dox.

01-2362-02-Ce granzýmy, aktivátory,

Peptidy štiepiteľné enzýmom zahrnujú aminokyselinové sekvencie rozpoznávané a štiepené membránovo viazanými a/alebo bunkami dekretovanými peptidázami, ktoré sú enzýmami štepiacimi peptidy dobre známymi v odbore ako rozpoznávajúce konkrétne aminokyselinové sekvencie a štepiacimi spomínané sekvencie medzi špecifickými aminokyselinami (viď napríklad Ames a Quigley et al.; Knauper et al., McGeehan et al., Nagase et al., Nakajima et al., Oraje et al.). Tieto enzýmy zahrnujú napríklad a bez obmedzenia metaloproteinázy matrice čiže ”MMP (tiež tu nazývané ako matrixíny), napríklad MMP-2, MMP-9, MMP14, serínové proteázy, cysteínové proteázy, elastázu, stromelyzíny, ľudské kolagenózy, katepsíny, dipeptidyl peptidázy, plazmíny, plazminogén lyzozýmy a napríklad aminopetidázu P, aminopeptidázu A a aminopeptidázu N. Peptidy s vhodnou substrátovou selektivitou pre MMP vhodnou pre konjugáciu s cytotoxickými látkami tu zahrnujú napríklad a bez obmedzenia peptidy majúce aminokyselinové sekvencie: PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL,

PLGLAL, PLGLALL, PLGLLLL, PLGLLYL, PLGLYAL, PLGLAAL, PLGLLSL, GPLGL, GPLGLY, GPLGLL, GPLGLAL, DPLGL, PEQGL, PQGL a PLGL-DpaAR a podobné sekvencie (Nagase). Každá z týchto aminokyselinových sekvencii zahrnuje akúkolvek z rôznych modifikovaných aminokyselín, napríklad hydroxyprolín tu popísaný, a každá zo sekvencii je voliteľne modifikovaná akoukoľvek z amino alebo karboxy terminálnych modifikácií, napríklad acetyl tu popísaný. Teda naviac k tu uvedeným špecifickým aminokyselinovým sekvenciám, poskytuje tento vynález odpovedajúce verzie obsahujúce jednu alebo viacej prirodzených, modifikovaných, alebo neprirodzených aminokyselín, a jednu alebo viacej terminálnych modifikácií, napríklad tento vynález poskytuje peptidy obsahujúce aminokyselinovú sekvenciu PLGLYL, rovnako tak ako Hyp-PLGLYL, AcPLGLYL a AcHypPLGLYL.

01-2362-02-Ce

Ako je tu používané, je termín matrixín zamýšľaný, aby generický popísal metaloproteinázy matrice čiže MMP ako triedu enzýmov, ktoré rozpoznávajú peptidy zlúčenín, ktoré sú predmetom vynálezu, štiepitelné enzýmom. Prednostnými MMP sú MMP-2, MMP-9 a/alebo MMP-14. Matrixín nepopisuje enzým neprilyzín.

Ako je tu používané, väzba štiepitelná matrixínom je zamýšlaná, aby popísala amidovú väzbu peptidu štiepitelného enzýmom, ktorý podlieha proteolytickému štiepeniu matrixínom in vitro, ako je tu definované. Je zamýšlané, že matrixíny, ako sú tu definované, sú prednostne selektívne pre väzbu štiepitelnú matrixínom. Je tiež chápané, že proteolytická degradácia peptidu štiepitelného enzýmom sa môže vyskytnúť v akékoľvek väzbe na peptide štiepitelnom enzýmom po podaní zlúčeniny in vivo.

Peptidy štiepitelné enzýmom musia obsahovať minimálny počet aminokyselín, ich substitúcií alebo modifikácií, pre rozpoznanie a štiepenie odpovedajúcou peptidázou (napr. PLGL, AA). Aminokyselinové sekvencie peptidov môžu alternatívne obsahovať jednu alebo k aminokyselinám minimálne sprostredkované peptidázou viacej aminokyselín naviac nezbytných pre štiepenie (napríklad peptidy obsahujúce v poradí aminokyseliny P, L, G a L môžu mať aminokyselinovú sekvenciu PLGLL a peptidy obsahujúce aminokyselinovú sekvenciu AA môžu mať skutočne sekvenciu AAPV). Také dodatočné aminokyseliny sú zahrnuté v peptidoch na amino a/alebo karboxy terminálnych koncoch pre celý rad dôvodov dobre známych osobám bežne znalých odboru, ktorí sa zoznámia s metodikou tohto vynálezu, napríklad k ďalšiemu zníženiu dostupnosti zlúčenín, ku ktorým je peptid konjugovaný pre bunky nesekretujúce peptidázu. Naviac aminokyselinová sekvencia zostávajúca na cytotoxickej látke po zahájení štiepenia peptidázou musí byť

01-2362-02-Ce zložená zo sekvencii, ktoré môžu byť odstránené alebo spracované bunečnými aminopeptidázami po štiepení peptidázou združenou s nádorom, (napríklad LL-Dox alebo LAL-Dox).

Mieni sa, že zlúčeniny, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu a ktoré sú konjugované k peptidom štiepitelným enzýmom a rozpoznávaných a štiepených metaloproteinázami matrice MMP-2, MMP-9 a/alebo MMP-14 rozpoznávajú konkrétne aminokyselinové sekvencie štiepi spomínané sekvencie obsahujúce glycín alebo sarkocín v mieste štiepenia. Preto peptidy štiepitelné enzýmom, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, obsahujú dipeptidy -Gly-Xpl- alebo -Sar-Xplv mieste štiepenia, kde Xpl je aminokyselina, ktorá tvorí väzbu s Gly alebo Sar štiepitelnú volným matrixínom čiže metaloproteinázou matrice. Prednostné príklady Xpl zahrnujú, ale nie sú obmedzené na Leu, Hof, azaHof, Ser (Ometyl) a Ser (Obenzyl). Naviac k vyššie uvedeným dipeptidom sa mieni, že MMP-2, MMP-9 a/alebo MMP-14 rozpoznávajú aminokyselinové sekvencie -Paa-Xaa-Gly-Xpl- a a štiepia -PAA-Xaa-SarXpl-, kde Paa je prolín, derivát prolínu alebo prolínové

Prednostné príklady Paa na Pro a Hyp. Naviac MMP-2, MMP-9 a mimetikum a Xaa je aminokyselina zahrnujú, ale nie sú obmedzené k metaloproteinázam matrice (MMP) MMP-2, MMP-9 a MMP-14 uvedených vyššie zamýšľa predkladaný vynález v spôsobu cielenia za použitia konjugátu s cytotoxickým peptidom tiež použitia matrixínov MMP-13 a MMP-8. Páry enzýmových/aminokyselinových rozpoznávacích sekvencii zahrnujú napríklad MMP-13 rozpoznávajúci sekvenciu PLGL (viď napríklad Knauper et al.) a MMP-8 rozpoznávajúci sekvencie AAPF alebo AAPM, obzvlášť tie, kde tieto sekvencie boli modifikované v oblasti N-konca sukcinylom alebo metoxysukcinylom (viď napríklad Nakajima et al.) . Obsah týchto popisov je tu začlenený ako referencia.

01-2362-02-Ce

Také peptidy, rovnako tak ako ďalšie peptidy štiepitelné enzýmom, vrátane peptidov obsahujúcich substituované, modifikované alebo prirodzené aminokyseliny v ich sekvenciach, rovnako tak ako peptidy modifikované na ich amino alebo karboxy konci, sú vytvorené z ich komponentných aminokyselín pomocou radu spôsobov dobre známych osobám bežne znalých odboru a pripravené za použitia lahko dostupných materiálov a vybavenia (viď napríklad The Practice of peptide synthesis (2nd ed.), M. Bodanskzy a A. Bodanskzy, Springer-Verlag, New York, NY (1994), pričom obsah tejto publikácie je týmto tu začlenený ako referencia). Tieto metódy zahrnujú napríklad a bez obmedzenia: syntézu na pevnej fáze za použitia protokolu Fmoc (viď napríklad Change a Meienhofer, Int. J. Pept. Protein Res. 11:246-9 (1978)). Ďalšie dokumenty popisujúce syntézu peptidov zahrnujú napríklad a bez obmedzenia: Miklos Bodamský, Peptide Chemistry, A Practical Textbook lSpringer-Verlag, N.Y; Peptide Synthesis Protocols, Michael W. Pennington a Ben M. Dunn editors, 1994, Humana Press Totowa, N.J.

Ako je tu popísané vyššie, peptidy štiepitelné enzýmom obsahujú aminokyselinovú sekvenciu, ktorá slúži ako rozpoznávacie miesto pre peptidázu schopnú neštiepenia peptidu. Aminokyseliny zahrnujúce peptidy štiepitelné enzýmom môžu zahrnovať prirodzené, modifikované alebo neprirodzené aminokyseliny, kde prirodzené, modifikované alebo neprirodzené aminokyseliny môžu byť buď to v D alebo L konfigurácii. Prirodzené aminokyseliny zahrnujú aminokyseliny alanín, cysteín, kyselinu aspartovú, kyselinu glutámovú, fenylalanín, glycín, histidín, izoleucín, lyzín, leucín, metionín, asparagín, prolín, glutamín, arginín, serín, treonín, valín, tryptofán a tyroxín. Prirodzené aminokyseliny, ako sú tu používané, majú nasledujúce skratky:

01-2362-02-Ce

Jednopísmenový kód	Trojpísmenový kód	Názov
A	Ala	Alanín
C	Cys	Cysteín
D	Asp	Kyselina aspartová
E	Olu	Kyselina glutámová
E	Phe	Fenylalanín
G	Gly	Glycín
H	His	Histidín
I	íle	Izoleucín
K	Lys	Lyzín
L	Leu	Lucín
M	Met	Metionín
N	Asn	Asparagín
P	Pro	Prolín
Q	Gin	Glutamín
R	Arg	Arginín
S	Ser	Serín
T	Thr	Treonín
U	Scy	Selenocysteín
v	Val	Val í n
w	Trp	Tryptofán
Y	Tyr	Tyroxín

Peptidy štiepitelné enzýmom môžu tiež obsahovať celý rad neprirodzených alebo modifikovaných aminokyselín vhodných pre substitúciu do peptidu podía vynálezu štiepitelného enzýmom. Úplný zoznam neprirodzených aminokyselín je uvedený v Roberts a Vellacio, The Peptides, Sv. 5, 341-449 (1983 Academic Press, New York, a je týmto tu začlenený ako referencia pre tento účel. Príklady neprirodzených alebo modifikovaných aminokyselín tu použitých zahrnujú bez obmedzenia:

Trojpísmenový kód Názov Aaa alfa-aminokyselina

Aad 2-aminoadipová kyselina (2-aminohexándiová kyselina)

Aan alfa-asparagín

Abu 2-aminobutánová kyselina číže 2-aminomaslová kyselina

01-2362-02-Ce yAbu

Aca

Acp Agn Ahe Ahx Aib 3-Aib . β-Ala aHyl alle

Amh

Aph

Apm

App

Asu

Aze

Bal

Bas

Bip

Bly

Bua

Bux

Cap

Cba

Cha

Chg

Cit

Cpa

Cta

Cya

Dab

Dap

Dbu

Dpa

Dmg

Dpm

Dpr

Edc E t Asn EtGly Faf Fph

4-aminomáslová kyselina

2-aminokaprínová kyselina (2-aminodekánová kyselina)

6-aminokaprónová kyselina alfa-glutamín

2- aminoheptánová kyselina

6-aminohexánová kyselina alfa-aminoizomáslová kyselina (2-aminoalanín)

3- aminoizomáslová kyselina beta-alanín allo-hydroxylyzín allo-izoleucín

4- amino-7-metylheptánová kyselina

4-amino-5-fenylpentánová kyselina

2-aminopimelová kyselina (2-aminoheptándiová kyselina) gamma-amino-beta-hydroxybenzénpentánová kyselina 2-aminošuberová kyselina (2-aminooctándiová kyselina)

2- karboxyazetidín beta-alanín beta-aspartová kyselina

Bifenylalanín

3,6-diaminohexánová kyselina (beta-lyzín) butánová kyselina

4- amino-3-hydroxybutánová kyselina gamma-amino-beta-hydroxycyklohexánpentánová kyselina) cyklobutyl alanín

Cyklohexylalanín

Cyklohexylglycín

N5-aminokarbonylornitín cyklopentyl alanín cyklopropyl alanín

3- sulfoalanín čiže cysteínová kyselina

2.4- diaminobutánová kyselina diaminopropiónová kyselina

2.4- diaminomaslová kyselina difenyl alanín

N,N-dimetylglycín diaminopimelová kyselina

2,3-diaminopropánová kyselina alebo 2,3diaminopropiónová kyselina

5- eyltiocysteín

N-etylasparagín

N-etylglycín

4- aza-fenylalanín

4-fluoro-fenylalanín

01-2362-02-Če

Ggu	gama-glutámová kyselina čiže(y-E)	čiže(y -Glu)
Gla	gamma-karboxyglutámová kyselina
Glc	hydroxyoctová kyselina (glykolová	kyselina)
Glp	pyroglutámová kyselina
Har	homoarginín
Hca	homocysteínová kyselina
Hcy	homocysteín
Hhs	homohistidín
Hiv	2-hydroxyizovalerová kyselina
Hof	homofenylalanín
Hol	homoleucín čiže homo-L
Hop	homoprolín čiže homo-P
Hos	homoserín
Hse	homoserín
Hva	2-hydroxypentánová kyselina
Hyl	5-hydroxylyz in
Hyp	4-hydroxypro1ín
Inc	2-karboxyoktahydroindol
Iqc	3-karboxyizochinolín
Iva	izovalín
Lac	2-hydroxypropánová kyselina (kyselina mliečna)
Maa	merkaptooctová kyselina
Mba	merkaptobutánová kyselina
MeGly	N-metylglycín čiže sarkozín
Mhp	4-metyl-3-hydroxyprolín
Mpá	merkaptopropánová kyselina
Nie	norleucín
Npa	nipekotová kyselina
Nty	nortyrozín
Nva	norvalín
Oaa	omega-aminokyselina
Om	ornitín
Pen	penicilamín (3-merkaptovalín)
Phg	2-fenylglycín
Pip	2-karboxypiperidín
Sar	sarkozín (N-metylglycín)
Spa	2-amino-3-(4-sulfofenyl)propiónová	. kyselina
Spg	1-amino-1-karboxycyklopentán
Sta	statín (4-amino-3-hydroxy-6-metylheptánová kyselina)
Tha	3-tienylalanín
Tmi	epsilón-N-trimetyllyzín
Tza	3-tiazolylalanín
Tzc	tiazolidín 4-karboxylová kyselina
Und	neidentifikované
Xaa	akákoľvek aminokyselina
Wil	alfa-amino-2,4-dioxopyrimidínpropánová kyselina
2Nal	2-naftylalanín

01-2362-02-Ce skupinou, skupinou, metylaspartová metylglutámová

Peptidy štiepiteľné enzýmom môžu tiež obsahovať celý rad modifikovaných aminokyselín, kde amínová alebo hydroxylová funkcia aminokyseliny bola chemicky modifikovaná alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou, fenylovou fenylalkylovou skupinou, heterocyklickou heterocyklickou alkylovou skupinou, karbocyklickou skupinou, alebo karbocyklickou alkylovou skupinou. Príklady substituentov pre chemické modifikácie zahrnujú, ale nie sú obmedzené na metyl, etyl, propyl, butyl, allyl, fenyl, benzyl, pyridyl, pyridylmetyl a imidazolyl. The Peptides” Zv. 3, 3-88 (1981 uvádza početné vhodné funkčné skupiny vytvárajúce postranné reťazce pre modifikácii aminokyselín a sú tu začlenené pre tento účel. Príklady modifikovaných aminokyselín zahrnujú, ale nie sú obmedzené na N-metylované aminokyseliny, N-metylglycín, N-etylglycín, N-etylasparagín, N,Ndimetyllyzín, N'-(2-imidazolyl) lyzin, O-metyltyrozín, 0benzyltyrozín, O-pyridyltyrozín, O-pyridylmetyltyrozín, etylserín, O-t-butylserín, O-allylserín, O-benzylserín, metyltreonín, O-t-butyltreonín, O-benzyltreonín, kyselina, O-t-butylaspartová kyselina, kyselina, O-t-butylglutámová kyselina a

0O—

000benzylglutámová kyselina.

Peptidy štiepiteľné enzýmom môžu tiež obsahovať modifikovanú aminokyselinu, ktorou je 4-azahydroxyfenylalanín (4-azaHof, alebo aza-Hof), 4-aminometylalanín, 4pyridylalanín, 4-azafenylalanín, morfolinylglycín, piperazinylpropyl glycín, N-metylpiperazinylpropyl glycín, 4nitro-hydroxyfenylalanín, 4-hydroxyfenylglycín alebo 2-(4,6dimetylpyrimidinyl) lyzin.

Peptidy štiepiteľné enzýmom môžu tiež obsahovať aminokyselinu označenú Paa, ktorou je neutrálna aminokyselina

01-2362-02-Če prolín, alebo to môže byť modifikovaná alebo neprirodzená aminokyselina, ktorá napodobňuje prolín. Prolínové mimetiká, ako je tu používané, majú obecný vzorec kde R⁵ je vybraný zo skupiny obsahujúcej H, halogén, Ci-C6 alkyl, -OH, Ci-C6 alkoxy, hydroxymetyl-, fenoxy, a benzyloxy; R⁶ je vybraný zo skupiny obsahujúcej H, Ci-C6 alkyl, -OH, Ci-C₆alkoxy; a n je 2, 3, 4 alebo 5. Prednostné prolínové mimetiká majú obecný vzorec kde R⁵ je vybraný zo skupiny obsahujúcej H, halogén, Ci-G₀alkyl, -OH, Οι-Οβ alkoxy a benzyloxy; a n je 2, 3, 4 alebo 5. Prednostnejšie n je 3 alebo 4. Príklady prolínových mimetík sú

4-hydroxyprolín, 5-metylpŕolín, 4,4-dimetylprolín, 4fluoroprolín, 4,4-difluoroprolín, 4-bromoprolín,

4chloroprolín, 4-hydroxymetylprolín, 3-hydroxyprolín, 3hydroxy-5-metylprolín, 3,4-dihydroxyprolín, 3-fenoxyprolín, .2azetidínkarboxylová kyselina, 4-metyl-2-azetidínkarboxylová kyselina, pipekolová kyselina, 5-hydroxypipekolová kyselina a

4,5-dihydroxypipekolová kyselina. Prednostnými príkladmi prolínových mimetík sú 4-hydroxyprolín, 2-azetidínkarboxylová kyselina a pipekolová kyselina. Príklady Paa zahrnujú, ale nie sú obmedzené na Pro, 4-hydroxyprolín, dihydroxyprolín, 2karboxyazetidín, homo-Pro, cyklohexylglycín, 401-2362-02-Ce fluorofenylalanín, nipekotovú kyselinu a tiazolidín 4karboxylovú kyselinu.

Peptidy štiepitelné enzýmom majú aminokyselinové sekvencie, kde jedna alebo viacej aminokyselín sú volitelne substituované homológnymi alebo izoterickými aminokyselinami tak, že rozpoznávanie a štiepenie peptidov peptidmi dekretovanými bunkami nie je nepriaznivo ovplyvnené. Napríklad, a bez obmedzenia, môžu byť uskutočnené nasledujúce substitúcie (v každom smere): A - G; R - K - Orn; N -Q; D E; I - V - L - M - Nie; F - W - Y; a S T.

Peptidy štiepitelné enzýmom sú naviac volitelne modifikované na konci nekonjugovanom k antineoplastickej látke uzatváracou skupinou známou pod týmto názvom v odbore; napríklad N-terminus peptidu štiepitelného enzýmom je modifikovaný uzatváracou skupinou N-terminu čiže amino uzatváracou skupinou. Použitie týchto modifikácií má vela dôvodov; napríklad k zvýšeniu stability peptidu v plazme proti enzymatickej degradácii neselektívnymi enzýmami v plazme, alebo k zvýšeniu rozpustnosti.

Amino uzatváracie skupiny sú známe v odbore a vyskytujú sa v celom radu formách, napríklad rôzne acyl, tioacyl, alkyl, sulfony, fosfory a fosfinyl skupiny obsahujúce 1 až 20 uhlíkových atómov; kde substituenty na týchto skupinách môžu byť buď to alkyl, aryl, alkylaryl atď., ktoré môžu obsahovať heteroatómy 0, S a N ako substituenty alebo reťazcové komponenty. Osoby znalé odboru peptidovej syntézy znajú celý rad amino uzatváracích skupín. Gross a Meinhoffer, eds., The Peptides, Sv. 3; 3-88 (1981), Academic Press, New York, a Greene a Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 315-405 (1991), J. Wiley and Sons, Inc., New York, uvádzajú celý rad vhodných amino chrániacich skupín užitočných pre tu

01-2362-02-Ce predkladaný vynález a tieto publikácie sú tu začlenené pre tento dôvod ako referencie.

Naviac k vyššie uvedenému môžu byť prednostnejšími amino uzatváracími skupinami alkanoyly, hydroxylované alkanoyly, polyhydroxylované alkanoyly, aroyly, hydroxylované aroyly, polyhydroxylované aroyly, cykloalkyloyly, heterocykloyly, polyetylénglykoly, glykozyláty, cukry, karboxy cukry, aminokyseliny, čikarboxylové kyseliny a korunné étery; každý naviazaný k N-terminálnemu konci peptidu amidovou väzbou. Príklady amino uzatvárajúcich skupín zahrnujú, ale nie sú obmedzené na acetyl (Ac), pivaloyl, metoxyacetyl, malonyl, sukcinyl (Suc), glutaryl, benzoyl, metoxysukcinyl (MeO-Suc), pyridínkarbonyl, pyrazínkarbonyl, benzyloxykarbonyl (Cbz) a tbutoxykarbonyl. Amino uzatvárajúce skupiny obsahujúce amino funkciu, ako sú rôzne karboxy cukry a aminokyseliny obsahujúce bázické amíny môžu byť alternatívne naviazané k N-terminu peptidového konjugátu močovinovou väzbou.

Polyetylénglykoly ako trieda zlúčenín známych ako amino uzatvárajúce skupiny a etylénoxy zlúčeniny definované obecným vzorcom H3CO- (CH₂CH₂O) _t ^-CH2C (=0)-, kde t je 1 až 10. Prednostnými polyetylénglykolmi sú tiež polyetylénglykoly, kde t je 1, 2, 3 alebo 4; prednostnejšie, kde t je 1 alebo 2. Iba pokial je špecifikované inak, znamená polyetylénglykol čiže PEG, čiže, Peg amino uzatvárajúcu skupinu definovanú vzorcom H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2 (=0) -. Polyetylénglykoly ako amino uzatvárajúce skupiny môžu byť modifikované tak, aby zahrnovali amino-polyetylénglykoly definované vzorcom N2H-(CH2CH2O) t^_CH2C(=O)-, kde t je 1, 2, 3 alebo 4, rovnako tak ako karboxymetyl-polyetylénglykoly definované vzorcom HO₂CCH₂O (CH₂CH₂O)--CH₂C (=0)-, kde t je 1, 2, 3 alebo 4.

01-2362-02-Ce

Amino uzatvárajúcimi skupinami môžu byť voliteľne aminokyseliny modifikované alkanoylom, dikarboxylovou kyselinou, trikarboxylovou kyselinou alebo esterom dikarboxylovej kyseliny. Príklady zahrnujú, ale nie sú obmedzené na acetyl (Ac), metoxyacetyl, malonyl, sukcinyl (Suc), glutaryl, 3-hydroxy-3-metylglutaryl (HMG), citryl, metoxysukcinyl (MeO-Suc), metoxy-malonyl, alebo metoxyglutaryl skupiny modifikované na amino termíne napríklad seríne alebo kyseline gama-glutámovej. Príkladom sú napríklad acetyl-serín (Ac-Ser), metoxysukcinyl-serín (MeO-Suc-Ser) a sukcinyl-serín (Suc-Ser).

Peptidy sú konjugované k antineoplastickým látkam tak, aby boli získané zlúčeniny tu poskytnuté; spomínaná konjugácia môže byť buď to cez amino alebo karboxy terminus peptidu. Termín konjugácia, ako je tu používaný, znamená väzbu peptidu k bioaktívnej látke. Taká väzba môže byť priama prostredníctvom kovalentnej väzby medzi peptidom a látkou prostredníctvom a za použitia činidiel dobre známych osobám bežne znalým odboru. Kovalentná väzba medzi peptidom a látkou zahrnuje tvorbu amidovej väzby medzi voľnou aminoskupinou na antineoplastickej látke a karboxylovou skupinou na C termíne peptidu, alebo medzi N-terminálnou aminoskupinou peptidu a karboxylovou skupinou látky. Naviac môžu byť vytvorené esterové väzby medzi C-terminálnou karboxylovou skupinou peptidu a voľnou hydroxylovou skupinou na antineoplastickej látke alebo vice verša.

Alternatívne môžu byť peptid a antineoplastická látka konjugované nepriamo prostredníctvom väzobnej skupiny majúcej voľné, aktívne skupiny dostupné pre separátne interakcie s peptidom aj látkou. Také väzobné skupiny zahrnujú napríklad a bez obmedzenia biskarbonylové alkylové diradikály majúce skupinu dostupnú k tvorbe amidovej skupiny s voľnou

01-2362-02-Če aminoskupinou na antineoplastickej látke, rovnako tak ako druhou voľnou skupinu dostupnou k tvorbe amidovej väzby s Nterminálnou amino skupinou peptidu. Vhodné väzobné skupiny tiež zahrnujú diaminoalkylradikály majúce voľné aminoskupiny dostupné pre tvorbu amidové skupiny s peptidovou C-terminálnou skupinou aj voľnou karboxylovou skupinou na látke. Spôsoby tvorby takých amidov, esterov a ďalších väzieb medzi peptidmi a cytotoxickými látkami, buď to priamo alebo prostredníctvom väzobných skupín, sú dobre známe osobám bežne znalým odboru.

Prednostne je antineoplastikou látkou tu používanou doxorubicin a peptid štiepitelný enzýmom obsahuje aminokyselinovú sekvenciu rozpoznávanú a štiepenú matrixínom, napríklad MMP-2, MMP-9 alebo MMP-14. Peptid prednostnejšie obsahuje aminokyselinovú sekvenciu PLGL a môže zahrnovať sekvencie PLGL, prednostnejšie PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYAL, PLGLAAL, PLGLLSL, PLGLLAL, PLGLLYL, PLGLLYL, GPLGL, GPLGLL, PLGHof, PLG-(O-benzyl)-S, alebo GPLGAL a ďalšie sekvencie, ako sú uvedené príkladom v Tabuľkách Príkladov prevedenia vynálezu.

Ako je tu používané, sú termíny alkyl alebo alkylén zamýšľané, aby zahŕňali vetvené aj nevetvené nasýtené alifatické uhľovodíkové skupiny majúce špecifikovaný počet uhlíkových atómov; napríklad, C1-C6 alkyl znamená alkyl majúci 1 až 6 uhlíkových atómov. Príklady alkylu zahrnujú súhrnne alebo individuálne, avšak bez obmedzenia, metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, sec-butyl, t-butyl, npentyl, n-hexyl, 2-metylbutyl, 2-metylpentyl, 2-etylbutyl, 3metylpentyl a 4-metylpentyl. Príklady C1-C4 alkylu zahrnujú súhrnne alebo individuálne metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, nbutyl, i-butyl, sec-butyl a t-butyl.

01-2362-02-Ce

Termíny alkenyl alebo alkenylén sú zamýšľané, aby zahrnovali nevetvené aj vetvené konfigurácie majúce špecifikovaný počet uhlíkových atómov a jednu alebo viacej nenasýtených uhlíkových väzieb, ktoré sa môžu vyskytnúť v akomkoľvek ' stabilnom bode v reťazci. Príklady alkenylu zahrnujú, avšak bez obmedzenia, etenyl, 1-propenyl, 2propenyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-pentenyl, 3-pentenyl, 4pentenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl, 4—hexenyl, 5-hexenyl, 2-metyl2-propenyl, 4-metyl-3-pentenyl, a podobne.

Termíny alkynyl alebo alkenylén sú zamýšlané, aby zahrnovali uhľovodíkové reťazce buď to nevetvené alebo vetvené konfigurácie a jednu alebo viacej uhlíkových trojitých väzieb, ktoré sa môžu vyskytnúť v akomkoľvek stabilnom bode v reťazci, ako sú napríklad etynyl, propynyl, butynyl, pentynyl, hexynyl, a podobne.

Termín cykloalkyl” je zamýšľaný, aby zahrnoval nasýtené kruhové skupiny majúce špecifikovaný počet uhlíkových atómov. C3-C6 cykloalkyl napríklad znamená cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, alebo cyklohexyl.

Termíny alkoxy alebo alkyloxy predstavujú alkylovú skupinu, ako je definované vyššie s uvedeným počtom uhlíkových atómov pripojených prostredníctvom kyslíkového mostíka. Príklady alkoxy zahrnujú, ale nie sú obmedzené na metoxy, etoxy, n-propoxy, i-propoxy, n-butoxy, s-butoxy, t-butoxy, npentoxy a s-pentoxy. Podobne termíny alkyltio” alebo tioalkoxy predstavujú alkylovú skupinu, ako je definované vyššie s uvedeným počtom uhlíkových atómov pripojených prostredníctvom sírového mostíka.

Termíny halo alebo halogén, ako sú tu používané, sa týkajú fluóru, chlóru, brómu, a jódu; a termín protiión

01-2362-02-Če predstavuje malé negatívne nabité skupiny, ako sú napríklad chloridy, bromidy, hydroxidy, acetáty, sulfáty, a podobne.

Ako je tu používané, znamená termín karbocyklus akýkoľvek stabilný 3- až 7—členný monocyklus alebo bicyklus, alebo 7- až 13- členný bicyklu alebo tricyklus, z ktorých každý môže byť nasýtený, čiastočne nenasýtený alebo aromatický. Príklady takých karbocyklov zahrnujú, ale nie sú obmedzené na cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, adamantyl, cyklooktyl, [3.3.0] bicyklooktán, [4.3.0] bicyklodekán (dekalín), [2.2.2] bicyklooktán, fluórenyl, fenyl, naftyl, indanyl, adamantyl alebo tetrahydronaftyl (tetralín).

Ako je tu používané, znamenajú termíny heterocyklus alebo heterocyklický kruh stabilný 5- až 7- členný monocyklus alebo bicyklus, alebo 7- až 14- členný bicyklický heterocyklický kruh, ktorý je nasýtený, čiastočne nenasýtený, alebo nenasýtený (aromatický) , a ktorý sa skladá z uhlíkových atómov a 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómov nezávisle vybraných zo skupiny obsahujúcej N, 0 a S, a zahrnujúcej bicyklickú skupinu, v ktorej akýkoľvek z vyššie definovaných heterocyklických kruhov je zfúzovaný k benzénovému kruhu. Heteroatómy dusíka a síry môžu byť voliteľne oxidované. Heterocyklický kruh môže byť pripojený k jeho navešanej skupine v mieste akéhokoľvek heteroatómu alebo uhlíkového atómu, čo vedie k vzniku stabilnej štruktúry. Heterocyklické kruhy tu popísané môžu byť substituované na uhlíkovom alebo na dusíkovom atóme, pokial je výsledná zlúčenina stabilná. Pokiaľ je špecificky poznamenané, môže byť dusík v heterocykle voliteľne kvartenalizovaný. Je preferované, aby, pokiaľ celkový počet Sa O atómov v heterocykle prekročí číslo 1, nepriliehali potom tieto heteroatómy k sebe. Je preferované,

01-2362-02-Ce aby celkový počet S a O atómov v heterocykle nebol viacej ako

1.

Príklady heterocyklov zahrnujú, ale nie sú obmedzené na 1H indazol, 2-pyrolidonyl, 2H, 6H-1,5,2-ditiazinyl, . 2H-pyrolyl, 3Hindolyl, 4-piperidonyl, 4aH-karbazol, 4H-chinolizinyl, 6H-1,2,5tiadiazinyl, akridinyl, azocinyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzotiofuranyl, benzotiofenyl, benzoxazolyl, benzoxazolinyl, benztiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzizoxazolyl, benzizotiazolyl, benzimidazalonyl, karbazolyl, 4aH-karbazolyl, bkarbolinyl, chromanyl, chromenyl, cinnolinyl, dekahydrochinolinyl, 2H,6H-1,5,2-ditiazinyl, dihydrofuro [2,3-b] tetrahydrofurán, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, imidazolopyridinyl, 1H-indazolyl, indolenyl, indolinyl, indolizinyl, indolyl, izochromanyl, izoindazolyl, izochinolinyl, izotiazolyl, izotiazolopyridinyl, izoxazolyl, izoxazolopyridinyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydroizochinolinyl, oxadiazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, ' 1,3,4-oxadiazolyl, oxazolidinyl, oxazolyl, oxazolopyridinyl, oxazolidinylpyrimidinyl, oxindolyl, izatinoyl, izobenzofuranyl, izoindolinyl, izoindolyl, fenantridinyl, fenotiazinyl, piperazinyl, piperidonyl, pyrazolidinyl, pyridazinyl, pteridinyl, pyrazolinyl, pyridooxazol, fenantrolinyl, fenarzazinyl, fenazinyl, fenoxatiinyl, fenoxazinyl, ftalazinyl, piperidinyl, pteridinyl, piperidonyl, 4purinyl, pyranyl, pyrazinyl, pyrazolopyridinyl, pyrazolyl, pyridoimidazol, pyridotiazol, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrolidinyl, pyrolinyl, pyrolyl, chinazolinyl, chinolinyl, 4H-chinolizinyl, chinoxalinyl, chinuklidinyl, karbolinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydroizochinolinyl, tetrahydrochinolinyl, 6H-1,2,5tiadiazinyl, 1,2,3-tiadiazolyl, 1,2,4-tiadiazolyl, 1,2,5tiadiazolyl, 1,3,4-tiadiazolyl, tiantrenyl, tiazolyl, tiazolopyridinyl, tienyl, tienotiazolyl, tienooxazolyl,

01-2362-02-Ce tienoimidazolyl, tiophenyl, triazinyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4triazolyl, 1,2,5-triazolyl, 1, 3, 4-triazolyl a xantenyl. Prednostné héterocykly zahrnujú, ale nie sú obmedzené na pyridinyl, furanyl, tienyl, pyrolyl, pyrazolyl, pyrazinyl, piperazinyl, imidazolyl, indolyl, benzimidazolyl, lH-indazolyl, oxazolidinyl, benzotriazolyl, benzizoxazolyl, benzoxazolyl, oxindolyl, benzoxazolinyl, benztiazolyl, benzizotiazolyl, izatinoyl, izoxazolopyridinyl, izotiazolopyridinyl, tiazolopyridinyl, oxazolopyridinyl, imidazolopyridinyl a pyrazolopyridinyl. Prednostné 5 až 6 členné héterocykly zahrnujú, ale nie sú obmedzené na pyridinyl, furanyl, tienyl, pyrolyl, pyrazolyl, pyrazinyl, piperazinyl, imidazolyl a oxazolidinyl. Tiež zahrnuté sú fúzované kruhové a spiro zlúčeniny obsahujúce napríklad vyššie uvedené héterocykly.

Ak je tu používané, znamená termín aryl, čiže aromatické rezíduum, aromatickú skupinu obsahujúcu špecifikovaný počet uhlíkových atómov, ako sú napríklad fenyl a naftyl.

Tiež poskytnuté sú tu farmaceutické preparáty obsahujúce zlúčeniny tu poskytnuté a farmaceutický prijateľný nosič. Takými nosičmi sú média obecne prijaté v odbore transportu biologicky aktívnych látok živočíchom, obzvlášť cicavcom. Farmaceutický prijateľné nosiče sú obecne formulované podľa celého radu faktorov, ktoré sú v dosahu rozpoznania a vysvetlenia osôb bežne znalých odboru. Tieto faktory zahrnujú bez obmedzenia: typ a charakter aktívnej látky, ktorá má byť formulovaná; subjekt, ktorému má byť preparát obsahujúci látku podávaný; zamýšľaný spôsob podania; a cielená terapeutická indikácia.

Termín farmaceutický prijateľný je tu použitý na zlúčeniny, materiály, preparáty a/alebo dávkovacie formy, ktoré sú v rozsahu platnej lekárskej mienky vhodnej pre

01-2362-02-Ce použitie v kontakte s tkanivami ľudských jedincov a živočíchov bez nadmernej toxicity, iritácie, alergických reakcií alebo iných problémov či komplikácií s primeraným pomerom prospechu/rizika.

Ako je tu používané, predstavujú farmaceutický prijatelné soli deriváty uvedených zlúčenín, kde materská zlúčenina je modifikovaná vytvorením kyslých alebo zásaditých solí. Príklady farmaceutický prijatelných solí zahrnujú, ale nie sú obmedzené na minerálne alebo organické kyslé soli bázických rezíduí, ako sú napríklad amíny, alkalické alebo organické soli kyslých rezíduí, ako sú napríklad karboxylové kyseliny, a podobne. Farmaceutický prijatelné soli zahrnujú vytvorené konvenčné netoxické soli alebo kvartérne amóniové soli materskej zlúčeniny, napríklad netoxické neorganické alebo organické kyseliny. Také konvenčné netoxické soli napríklad zahrnujú soli odvodené od anorganických kyselín, ako sú napríklad kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina sulfámová, kyselina fosforečná, kyselina dusičná, a podobne; soli pripravené z organických kyselín, ako sú napríklad kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina jantárová, kyselina glykolová, kyselina stearová, kyselina mliečna, kyselina jablčná, kyselina vínna, kyselina citrónová, kyselina askorbová, kyselina pámoová, kyselina maleínová, kyselina hydroxymaleínová, kyselina fenyloctová, kyselina glutámová, kyselina benzoová, kyselina salicylová, kyselina sulfanilová, kyselina 2-acetoxybenzoová, kyselina fumarová, kyselina toluénsulfónová, kyselina metánsulfónová, kyselina etán disulfónová, kyselina šťavelová, kyselina izotiónová, a podobne.

Farmaceutický prijatelné soli, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, môžu byť syntetizované pomocou konvenčných chemických metód z materskej zlúčeniny, ktorá

01-2362-02-Ce obsahuje bázickú alebo kyslú skupinu. Obecne môžu byť také soli pripravené reakciou volnej kyseliny alebo bázy týchto zlúčenín so stechiometrickým množstvom príslušnej bázy alebo kyseliny v organickom rozpúšťadle alebo vo zmesi dvoch; obecne sú preferované nevodné médiá ako napríklad éter, etylacetát, etanol, izopropanol, alebo acetonitril. Zoznam vhodných solí môže byť nájdený v publikácii Remington's Pharmaceutical Science, 17. vydanie, Mack Publishing Copany, Easton, PA, 1985, str. 1418, ktorej uvedenie je týmto začlenené ako referencia.

Farmaceutický prijatelné nosiče zahrnujú vodná aj nevodná tekutá médiá, rovnako tak ako celý rad pevných a polopevných dávkových foriem. Také nosiče môžu zahrnovať naviac k aktívnej látke celý rad rôznych zložiek a aditiv, také dodatočné zložky môžu byť zahrnuté v preparáte pre celý rad dôvodov, napríklad k stabilizácii aktívnej látky, tieto dôvody sú dobre známe osobám bežne znalým odboru. Popisy vhodných farmaceutický prijateľných nosičov a faktorov hrajúcich rolu v ich výbere, môžu byť nájdené v celom rade lahko dostupných zdrojov, napríklad v publikácii Remington's Pharmaceutical Science, 17. vydanie, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, ktorej uvedenie je týmto začlenené ako referencia. Zlúčeniny, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, môžu byť podávané napríklad parenterálne v rôznych vodných médiách, ako sú napríklad vodná dextróza a salinické roztoky; glykolové roztoky sú tiež užitočnými nosičmi. Roztoky pre parenterálne podávanie prednostne obsahujú vo vode rozpustnú sol aktívnej zložky, vhodné stabilizačné látky, a pokial je to nezbytné pufrovacie látky. Vhodnými stabilizujúcimi látkami sú antioxidačné látky, ako sú napríklad bisulfit sodný, sulfit sodný, alebo kyselina askorbová, buď to samotné alebo v kombinácii. Používané sú tiež kyselina citrónová a jej soli, a EDTA. Parenterálne roztoky môžu naviac obsahovať konzervačné

01-2362-02-Ce látky, ako sú napríklad benzalkónium chlorid, metyl alebo propyl parabel, a chlórambutol.

Alternatívne sú zlúčeniny podávané perorálne v pevných dávkovacích formách, ako sú napríklad kapsuly, tablety a prášky; alebo v tekutých formách, ako sú napríklad elixíry, sirupy, a/alebo suspenzie. Želatínové kapsuly môžu byť použité tak, aby obsahovali aktívnu zložku a vhodný nosič, ako sú napríklad, ale bez obmedzenia, laktóza, škrob, magnézium steatit, kyselina stearová, alebo deriváty celulózy. Podobné riediace látky môžu byť použité k vytvoreniu komprimovaných tabliet. Tablety aj kapsuly môžu byť vyrobené ako produkty s trvalým uvoľňovaním, aby sa zaistilo priebežné uvoľňovanie lieku po určitú dobu. Komprimované tablety môžu byť potiahnuté cukrom alebo filmom, aby sa zamaskovala nepríjemná chuť, alebo aby sa chránili aktívne zložky pred atmosférou, alebo aby sa umožnila. selektívna dezintegrácia tablety v gastrointestinálnom trakte.

Ďalej poskytnutý tu je spôsob dopravenia zlúčeniny, ktorá je predmetom tohto vynálezu k bunkám cicavca potrebujúceho antineoplastickú liečbu, kde spomínaný spôsob zahrnuje kontakt buniek s terapeuticky účinnými množstvami zlúčenín v prítomnosti odpovedajúcej peptidázy. Terapeuticky účinné množstvá sú akékoľvek množstvá zlúčeniny účinné zmierniť, oslabiť alebo inhibovať príznaky, progresiu manifestácie konkrétneho ochorenia, poruchy alebo stavu; terapeuticky účinné množstvá pre in vivo liečbu sú od zhruba 0,1 mg zlúčeniny na kg telesnej hmotnosti cicavca, ktorý má byť liečený, do zhruba 1000 mg/kg. Spomínané cicavce môžu mať ťažkosti ako nádory prsníka, vaječníkov, mozgu, žalúdka, pľúc, hrubého čreva, prostaty alebo pečene, alebo leukémie, lymfómy, karcinómy, sarkómy alebo melanómy, rovnako tak ako ďalšie typy nádorov.

01-2362-02-Ce

Konjugované zlúčeniny, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, sú užitočné ako chemoterapeutické látky v cielenej liečbe nádorov. Napríklad v liečbe nádorov sú peptidy a antineoplastické látky konjugované za vzniku stabilných konjugátov, ktoré môžu byť podané cicavcom a ktoré cirkulujú v krvnom riečišti v stabilnom stave voči nešpecifickej enzymatickej degradácii, napríklad voči neprolyzínu. Konjugácia tiež znižuje schopnosť antineoplastických látok vykonávať svoj efekt na tkanivá, tzn. zdravé nedelené tkanivo, takže toxicita látky je výrazne znížená v zrovnaní s použitím jej nekonjugovanej, volnej formy. Avšak ako náhle je peptid odštiepený z antineoplastické látky jednou alebo kombináciou membránovo viazaných a/alebo bunečne dekrétovaných peptidáz, látka je uvolnená, takže môže vykonávať svoj požadovaný terapeutický účinok na okolitú oblasť. Zatial pre odstraňovanie alebo spracovávanie aminokyselín z antineoplastickej látky môže byť použité mnoho peptidáz, je k aktivácii týchto konjugátov vyžadované otváracie štiepenie peptidázou. Peptidázy, ako sú napríklad matrixíny MMP-2 a MMP9 a MMP-14 sú nachádzané v okolí nádorov. Teda konjugácia peptidu štiepitelného matrixínom čiže MMP k antineoplastickej látke ponúka nový prostriedok dopravenia látky ako terapeutickej antityšpecificky k nádorom pri znížení toxicity látky na zdravé nedelené tkanivo. Konjugát je však tiež navrhnutý tak, že produkt prvej proteolýzy je prijateľným substrátom pre aminopeptidázy exprimované v nádorovom tkanive, ktoré ďalej odstraňujú alebo spracovávajú ostávajúce aminokyseliny z antineoplastickej látky. Je známe, že také aminopeptidázy, napríklad dipeptidyl aminopetidáza a neutrálna aminopeptidáza, sú exprimované v nádorovom tkanive (Pasqualini). Zlúčeniny, ktoré sú vynálezu, nie sú teda po prvom predmetom predkladaného proteolytickom štiepení

01-2362-02-Ce metalôproteinázou matrice zamýšľané, aby ich činnosťou vznikal nekonjugovaný Dox.

Konjugáty peptidu/antineoplastické látky, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu sú stabilné v plazme, táto stabilita môže byť demonštrovaná celým radom spôsobov známych v odbore, napríklad inkubáciou rôznych médií (viď napríklad Príklad prevedenia vynálezu 6 nižšie). Konjugáty, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, môžu byť teda účinne použité ako terapeutické entity pre podanie cicavcom. Je známe, že matrixíny a aminopeptidázy sú produkované v nádorových bunkách a sú nachádzané v bunkách alebo v ich blízkosti. Endoteliálne a stromálne bunky. Endoteliálne a stromálne bunky, ktoré môžu byť nájdené v blízkosti nádoru, môžu tiež obsahovať peptidázové aktivity, ktoré sa spolupodielajú na dopravení terapeutických entít k nádoru. Bolo demonštrované, že také matrixíny a aminopeptidázy, ako sú popísané vyššie, rozpoznávajú a štiepia peptidy štiepitelné enzýmom konjugované k cytotoxickým látkam (viď Príklad prevedenia vynálezu 7 nižšie) uvoľňujúce peptid v úplnej alebo skomolenej forme, a látku s alebo bez pripojených aminokyselín. Štiepenie uvoľňuje antineoplastickú látku z konjugátu, takže môže vykonávať svoj prospešný terapeutický účinok na neoplastické bunky. Preto konjugácia peptidu štiepitelného matrixínom alebo MMP s cytotoxickou látkou umožňuje cielené dopravenie látky ako terapeutickej entity špecifickej voči nádorom pri minimalizácii nežiadúceho dopadu na zdravé necielené tkanivo.

Nasleduje bibliografická informácia pre vyššie citované dokumenty.

Ames, R. a Quigley, J., J. Biol Chem. 270:5872-5876 (1995); Baurain, R., et.al., J. Med. Chem. 23:1170-1174 (1980);

Boven, E., et al., Eur. J. Cancer 26:983-986 (1990);

Boven, E., et al., Br. J. Cancer 66:1044-1047 (1992);

01-2362-02-Ce

Brooks, P., et al., Celí 85:683-693 (1996);

Brummer, 0., et al., Virchows Árch. 435: 566-573 (1999);

Canal, P., et al., Clin. Pharmacol. Therp. 51: 249-259 (1992); de Groot, F. M. H. et al., J. Med. Chem. 43: 3093-3102 (2000); Denmeade, et al., Cancer Res. 58:2537-2540 (1998);

de Jong, J., et al., Cancer Chemother Pharmacol 31:156-160 (1992a);

de Jong, J., et al, J. Clin. Oncology 10:1897-1906 (1992b); Garbisa, S., et al., Cancer Res., 53:4548-4549 (1992);

Kandukuri, S. P. et al., J. Med. Chem. 28: 1079-1088 (1985); Knauper, V., et al., J. Biol. Chem. 271:1544-1550 (1996);

Kurschatt, P., et al., J. Biol. Chem. 274:21056-21062 (1999);

Li, C. et al., J. Biol. Chem., 270: 5723-5728(1995);

Lu, J.Y. et.al., J. Drug Targeting 7(1)43-53 (1999);

Liotta, L., et al., Celí 64:327-336 (1991);

MacDougall, J. a Matrisian, L., Cancer and Metastasis Reviews 14:351-362 (1995);

Masquelier, M., et al., J. Med. Chem. 23:1166-1170 (1980); McDonnell, S. a Fingleton, B., Cytotechnology 12:367-384 (1993); McGeehan, G., et al., J. Biol Chem. 269:32814-32820 (1994);

Nagase, H., et al., Biopolymers 40:399-416 (1996);

Moses, M., et al., Cancer Res. 58:1395-1399 (1998);

Nakajima, K., et al., J. Biol Chem. 254:4027-4032 (1979);

Odake, S.,-et al., Biochemistry 30: 2217-2227 (1991);

R. Pasqualini, Cancer Research 60: 722-727 (2000);

A. Safavy et al. J. Med. Chem. 42:4919-4924 (1999);

Sato, J., et al., Náture 370:61-65 (1994);

Trouet and Baurain, U.S. Patent No. 5,962,216 (vydaný v 5. ŕí jna 1999);

Soini, Y. et al., J. Histochem. Cytochem. 42: 945-951 (1994);

Sundfor, K. et al., Br. J. Chem. 7.8:822 (1998);

von Hoff, D., et al·., Ann. Intern. Med. 91:710-717 (1979);

01-2362-02-Ce

Yu, Q. a Stamenkovic, L, Genes and Dev. 13:35-48 (1999). Rhusolahti, Cancer Research

V ďalšej forme vynález popisuje spôsob liečby nádorov u pacientov potrebujúcich túto liečbu, tento spôsob zahrnuje podanie farmaceutický účinného množstva zlúčeniny, ako je uvedené vyššie spomínanému pacientovi, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, kde nádor je vybraný zo skupiny zloženej z karcinómu mechúra, prsníka, hrubého čreva, obličiek, pečene, pľúc vrátane malobunkového karcinómu pľúc, pažeráka, žlčníka, vaječníka, podžalúdkovej žľazy, žalúdka, krčka maternicového, štítnej žľazy, prostaty a kože vrátane dlaždicobunkového karcinómu; hematopoetických nádorov lymfoidnej línie vrátane leukémie, akútnej lymfocytovej leukémie, akútnej lymfoblastovej leukémie, B bunkového lymfómu, T bunkového lymfómu, Hodgkinova lymfómu, non-Hodgkinského lymfómu, lymfómu z vlasatých buniek a Burkettova lymfómu; hematopoetických nádorov myeloidnej línie zahrnujúcich akútne a chronické myelogenné leukémie, myelodysplastický syndróm a promyelocytovú leukémiu; nádorov mezenchymálneho pôvodu vrátane fibrosarkómu a rhabdomyosarkómu; nádorov centrálneho a periférneho nervového systému vrátane astrocytómu, neuroblastómu, gliómu a schwanómov; ďalších nádorov vrátane melanómu, seminómu, teratokarcinómu, osteosarkómu, xeroderma pigmentosum, keratoakantómu, thyroidného folikulárneho nádoru a Kaposiho sarkómu.

V ďalšej forme vynález popisuje spôsob liečby nádorov u pacientov potrebujúcich túto liečbu, tento spôsob zahrnuje podanie farmaceutický účinného množstva zlúčeniny definovanej Vzorcom (I) alebo (la), ako je uvedené vyššie spomínanému alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, (podaných spolu alebo sekvenčne) so známou protinádorovou terapiou, ako je napríklad radiačná liečba, alebo s cytostatickými alebo cytotoxickými látkami, kde také látky sú pacientovi, v kombinácii

01-2362-02-Ce vybraté zo skupiny obsahujúcej: s DNA interagujúce látky, ako sú napríklad cisplatina alebo doxorubicín; inhibitory topoizomerázy II, ako je napríklad CPT-11 alebo topotecan; s tubulínom interagujúce látky, ako sú napríklad paclitaxel, docetaxel alebo epotilóny; hormonálne látky, ako je napríklad tamoxifén; inhibitory tymidilát syntázy, ako je napríklad 5-fluorouracil; a antimetabolity, ako je napríklad metotrexát.

pacientovi, v kombinácii ipŕoplatinu, fludarabín, karboplatinu, tetraplatinu, aminoglutetimid, lobaplatinu, flutamid,

V ďalšej forme vynález popisuje spôsob liečby nádorov u pacientov potrebujúcich túto liečbu, tento spôsob zahrnuje podanie farmaceutický účinného množstva zlúčeniny definované Vzorcom (I) alebo (la), ako je uvedené vyššie spomínanému alebo jej farmaceutický prijateľnej soli, (podaných spolu alebo sekvenčne) so známymi antiproliferačnými látkami vybranými zo skupiny obsahujúcej: altretamín, busulfán, chlórambucil, cyklofosfamid, itofosfamid, mechlóretamín, melfalán, tiotepa, cladribín, fluorouracil, floxuridín, gemcitabín, tioguanín, pentostatín, metotrexát, 6merkaptopurín, cytarabín, carmustín, lomustín, streptozocín, cisplatinu, oxaliplatinu,

JM216, JM335, goserelín, leuprolid, megestrol acetát, cyproterón acetát, tamoxifén, anastrozol, bicalutamid, dexametazón, dietylstilbestrol, prednizón, bleomycin, daktinomycín, daunorubicín, doxirubicín, idarubicín, mitoxantrón, losoxantrón, mitomycín-c, plicamycín, paclitaxel, docetaxel, CPT-11, epotilóny, topotekán, irinotekán, 9-amino camptotekán, 9-nitro camptotekán, GS-211, etopozid, tenipozid, vinblastín, vincristín, vinorelbín, procarbazín, aspariginázu, pegasparagázu, metotrexát, octreotid, estramustín a hydroxyureu.

Ako je tu používané, znamená termín účinné množstvo množstvo zlúčeniny (preparátu podľa predkladaného vynálezu,

01-2362-02-Ce ktoré je účinné pre navodenie požadovaného terapeutického účinku.

Ako je tu používané, znamená termín liečba: (i) prevenciu objavenia sa choroby, poruchy alebo stavu u živočícha, ktorý môže byť predisponovaný k ochoreniu, poruche a/alebo stavu, ale ktoré neboli diagnostikované; (ii) inhibíciu ochorenia, poruchy a/alebo stavu, tzn. zastavenie ich vývoja; a (iii) zmiernenie ochorenia, poruchy a/alebo stavu, tzn. spôsobenie regresie ochorenia, poruchy a/alebo stavu.

Ako je tu používané, zahrnuje termín pacient človeka aj iných cicavcov.

Ako je tu používané, znamená termín farmaceutický preparát preparát obsahujúci zlúčeninu definovanú Vzorcom (I) alebo (la), a aspoň jednu zložku vybranú zo skupiny obsahujúcej farmaceutický prijatelné nosiče, riediace látky, adjuvantné látky, excipientné látky, alebo vehikulá, ako sú napríklad konzervačné látky, plniace látky, dezintegračné látky, zvlhčujúce látky, emulzifikujúce látky, suspendujúce látky, sladiace látky, dochucujúce látky, parfemizačné látky, antibakteriálne látky, protipliesňové látky, lubrikačné látky a uvoľňujúce látky, v závislosti od charakteru a spôsobu podania a dávkových formách. Príklady suspendujúcich látok zahrnujú etoxylované izostearyl alkoholy, polyoxyetylén sorbitol a sorbitan estery, mikrokryštalickú celulózu, alumínium metahydroxid, bentonit, agar-agar a tragakant, alebo zmesi týchto substancií. Prevencia účinku mikroorganizmov môže byť zaistená rôznymi antibakteriálnymi a protipliesňovými látkami, napríklad parabény, chlórambutolom, fenolom, kyselinou sorbovou, a podobne. Môže byť tiež žiadúce zahrnúť izotonické látky, napríklad cukry, chlorid sodný, a podobne. Predĺžená absorpcia injekčnej farmaceutickej formy môže byť dosiahnutá použitím

01-2362-02-Ce látok spomaľujúcich absorpciu, napríklad alumínium monostearátom a želatínou. Príklady vhodných nosičov, riediacich látok, rozpúšťadiel alebo vehikúl zahrnujú vodu, etanol, polyoly, ich vhodné zmesi, rastlinné oleje (ako je napríklad olivový olej) a injekčné organické estery, ako je napríklad etyloleát. Príklady excipientných látok zahrnujú laktózu, mliečny cukor, citrát sodný, uhličitan vápenatý, fosforečnan vápenatý. Príklady dezintegračných látok zahrnujú škrob, kyseliny albínove a určité komplexné silikáty. Príklady lubrikačných látok zahrnujú magnézium stearát, lauryl sulfát sodný, mastenec, rovnako tak ako polyetylén glykoly o vysokej molekulovej hmotnosti.

Tomuto vynálezu bude lepšie porozumené vo svetle nasledujúcich Príkladov prevedenia vynálezu. Osoby znalé odboru však budú lahko rozumieť, že príklady sú čisto ilustráciou vynálezu, ako je definovaný v Patentových nárokoch, ktoré nasledujú po Príkladoch prevedenia vynálezu.

Príklady prevedenia vynálezu

Konjugácia peptidov k antineoplastickým látkam

Príklad 00. Syntéza Ac-PLGL-Dox.

Peptid bol syntetizovaný na pevnej fáze z komerčne dostupnej živice Fmoc-Leu-Wang (0,40 g, 0,6 mmol). Syntéza bola prevedená na peptidovom syntetizačnom zariadení ABI 433A za použitia štyroch ekvivalentov aminokyselín chránených Fmoc a HBTU aktivácie. Peptidová živica bola acetylovaná kyslým anhydridom. Peptid bol štiepený z živice pomocou 90% TFA vo vode po dobu 2 hodín. Po odstránení rozpúšťadla bol peptid rozpustený vo H₂O:CH₃CN a lyofilizovaný. Produkt bol potvrdený pomocou ES MS 496,3 (M-H). Pomocou analytickej HPLC na kolóne s reverznou fázou Metachem Monochrom C18 (50 x 4,6 mm) bolo

01-2362-02-Ce preukázané, že hrubý peptid je z 80% čistý. K tomuto medziproduktu (0,0199 g, 0,04 mmol) rozpustenom v DMF (0,2 ml) v malej fľaštičke z tmavého skla bol pridaný Pybop (0,0208 g, 0,04 mmol). Bol pridaný doxorubicín hydrochlorid (0,0186 g, 0, 032 mmol) ako suspenzia v DMF (0,1 ml) nasledovaný diizopropyletylamínom (DIEA) (0,0139 ml, 0,08 mmol). Reakčná zmes bola premiešavaná po dobu 2 hodín. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Vzorka bola rozpustená v H₂O:CH₃CN a purifikovaná za použitia kolóny s reverznou fázou Dynamax C18 (41,4 x 250 mm) s lineárnym gradientom 30-50% acetonitrilu, 0,05% octanu amónneho po dobu 20 minút s prietokom 45 ml/minútu. Frakcie boli zozbierané a zlyofilizované za vzniku purifikovaného konjugátu peptid-Dox (ES MS 964,6 (M-H)).

Syntéza konjugátov doxorubicínu na pevnej fáze.

Príklad 47: Syntéza Ac-PLGLYL-Dox.

Peptidová kyselina bola syntetizovaná na pevnej fáze z komerčne dostupnej živice Fmoc-Leu-Wang (0,42 g, 0,25 mmol)). Syntéza bola prevedená na peptidovom syntetizačnom zariadení 433A za použití štyroch ekvivalentov aminokyselín chránených pomocou Fmoc a aktivácie pomocou HBTU. Peptidová živica bola acetylovaná pomocou kyslého anhydridu. Peptid bol štiepený z živice pomocou 90% TFA vo vode po dobu 2 hodín. Po odstránení rozpúšťadla bol peptid rozpustený vo H₂O:CH₃CN a lyofilizovaný. Produkt bol potvrdený pomocou ES MS 496,3 (ΜΗ) . Pomocou analytickej HPLC na kolóne s reverznou fázou Metachem Monochrom C18 (50 x 4, 6 mm) bolo preukázané, že hrubý peptid je z 80% čistý. K tomuto medziproduktu (0,0286 g, 0,04 mmol) rozpustenom v DMF (0,2 ml) v malej skúmavke z tmavého skla bol pridaný PyBop (0,0208 g, 0,04 mmol). Bol pridaný doxorubicín hydrochlorid (0,0186 g, 0,032 mmol) ako suspenzia

01-2362-02-Ce v DMF (0,1 ml) nasledovaný diizopropyletylamínom (DIEA) (0,0139 ml, 0,08 mmol). Reakčná zmes bola premiešavaná po dobu 2 hodín. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Vzorka bola rozpustená v H₂O:CH₃CN a purifikovaná za použitia kolóny s reverzní fázou Dynama C18 (41,4 x 250 mm) s lineárnym gradientom 30-55% acetonitrilu, 0,05% octanu amónneho po dobu 20 minút s prietokom 45 ml/minútu. Frakcia boli zozbierané a zlyofilizované za vzniku purifikovaného konjugátu peptid-Dox (ES MS 1240,7 (M-H) ) .

Príklad 116: Syntéza Ac-PLG-Hof-Orn-L-Dox.

Peptidová kyselina (Ac-PLG-Hof-Orn(alyl)-L-COOH) bola syntetizovaná na pevnej fáze z komerčne dostupnej živice FmocLeu-Wang (0,28 g, 0,25 mmol)). Syntéza bola prevedená na peptidovom syntetizačnom zariadení ABI433A za použitia štyroch ekvivalentov aminokyselín chránených pomocou Fmoc a aktivácie pomocou HBTU. Peptidová živica bola acetylovaná pomocou kyslého anhydridu. Peptid bol štiepený z živice pomocou 90% TFA vo vode po dobu 2 hodín. Po odstránení rozpúšťadla bol peptid rozpustený vo H₂O:CH₃CN a lyofilizovaný. Produkt bol potvrdený pomocou ES MS 800,7 (M+H)⁺, 822,7 (M+Na)⁺. Pomocou analytickej HPLC na kolóne s reverznou fázou Metachem Monochrom C18 (50 x 4,6 mm) bolo preukázané, že hrubý peptid je z 90% čistý. K tomuto medziproduktu (0,320 g, 0,4 mmol) rozpustenom v DMF (2 ml) v malé skúmavke z tmavého skla bol pridaný PyBop (0,204 g, 0,4 mmol). Bol pridaný doxorubicín hydrochlorid (0,148 g, 0,26 mmol) ako suspenzia v DMF (1,0 ml) nasledovaný diizopropyletylamínom (DIEA) (0,28 ml, 1,6 mmol). Reakčná zmes bola premiešavaná po dobu 2,5 hodín. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Vzorka bola rozpustená v H₂O:CH₃CN a purifikovaná za použitia kolóny s reverznou fázou Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárnym gradientom 45-55% acetonitrilu, 0,05% octanu amónneho po dobu 20 minút

01-2362-02-Ce s prietokom 18 ml/minútu. Frakcie boli zozbierané a zlyofilizované za vzniku purifikovaného PLG-Hof-Orn(alyl)-LDox (ES MS 1325,4 (M+H-414)⁺). Peptid s chráneným postranným reťazcom (0,076 g, 0,06 mmol) bol rozpustený v suchom DCM (7 ml) pod Ar₂. Bolo pridané [(Ph₃)P]₄Pd (0,014 g, 0,012 mmol) v DCM (1 ml) nasledované pridaním morfolínu (0,052 ml, 0,6 mmol). Reakčná zmes bola premiešavaná pri izbovej teplote po dobu 2 hodín a monitorovaná pomocou HPLC. Produkt bol precipitovaný z EtOAc a premytý pomocou EtOAc (2x). Rozpúšťadlo bolo odstránené prúdom N₂. Nechránený konjugát (AcPLG-Hof-OrnL-Dox) bol purifikovaný za použitia kolóny s reverznou fázou Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárnym gradientom 25-40% acetonitrilu, 0,05% octanu amónneho po dobu 30 minút s prietokom 18 ml/minútu. Frakcie boli zozbierané a zlyofilizované za vzniku purifikovaného produktu (95% čistota) (ES MS 1241,9 (M+H)⁺, 827, 7 (M+H-414)⁺).

Náhradná syntéza konjugátov doxorubicínu na pevnej fáze.

Príklad 11: Syntéza Acp-PLGLL-Dox.

Acp = 4-(2-aminoetyl) -1- karboxymetyl piperazín.

Peptidová kyselina chránená pomocou Fmoc (Fmoc-Acp-PLGLL-COOH) bola syntetizovaná na pevnej fáze z komerčne dostupnej živice Fmoc-Leu-Wang (1,6 g, 1,0 mmol). Syntéza živice PLGLL bola prevedená na peptidovom syntetizačnom zariadení ABI433A za použitia troch ekvivalentov aminokyselín chránených pomocou Fmoc a aktivácie pomocou HBTU. Časť peptidovej živice (0,18 g, 0,1 mmol) bola naviazaná k Fmoc-Acp dihydrochloridu (0,193 g, 0,4 mmol) pomocou HBTU (0,152 g, 0,4 mmol) a DIEA (0,143 ml, 0,8 mmol) v DMF (2 ml) po dobu 2 hodín. Peptid bol štiepený z živice pomocou 90% TFA vo vode po dobu 2 hodín. Po odstránení rozpúšťadla bol peptid rozpustený v H₂O:CH₃CN a

01-2362-02-Ce lyofilizovaný. K tomuto medziproduktu (0, 036 g, 0,04 mmol) rozpustenom v DMF (0,2 ml) v malej skúmavke z tmavého skla bol pridaný PyBop (0,021 g, 0,04 mmol). Bol pridaný doxorubicín hydrochlorid (0,018 g, 0,032 mmol) ako suspenzia v DMF (0,1 ml) nasledovaný diizopropyletylamínom (DIEA) (0,014 ml, 0,08 mmol) . Reakčná zmes bola premiešavaná po dobu 2 hodín. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Vzorka bola rozpustená v H₂O:CH₃CN a purifikovaná za použitia kolóny s reverznou fázou Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárnym gradientom 2050% acetonitrilu, 0,05% octanu amónneho po dobu 30 minút s prietokom 18 ml/minútu. Frakcie boli zozbierané a zlyofilizované za vzniku Fmoc-Acp-PLGLL-Dox (ES MS 1428,9 (M+H)⁺). Peptid chránený pomocou Fmoc (0,020 g, 0,014 mmol) bol rozpustený v studenom roztoku 50% dietylamínu v DCM (6 ml) . Reakčná zmes bola premiešavaná chránená pred svetlom pri teplote 0° po dobu 3 hodín. Rozpúšťadlo bolo odstránené vo vákuu. Bol pridaný DCM, aby sa opäť rozpustila vzorka a DCM bol odstránený 4 x vákuom. Vzorka bola ďalej vysušená prúdom dusíka. Vzorka bola potom 5 x premytá pomocou Hex:Et₂O, 1:1 s následným odparením vo vákuu a finálnym prúdom dusíka. Vzorka bola rozpustená v acetátovom pufri: CH₃CN a purifikovaný za použitia kolóny s reverznou fázou Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárnym gradientom 15-50% acetonitrilu, 0,05% octanu amónneho po dobu 35 minút s prietokom 18 ml/minútu. Frakcie boli zozbierané a zlyofilizované za vzniku purifikovaného (90% čistota) Acp-PLGLL-Dox (ES MS 1207 (M+H)⁺, 793 (M+H-414)⁺).

U príkladov tohto vynálezu, kde sú k chemoterapeutickej látke naviazané neobvyklé aminokyseliny, napríklad doxorubicín, nie je potrebný pevný nosič často komerčne dostupný. Nasledujúce príklady ilustrujú, ako je pripravený v týchto prípadoch modifikovaný pevný nosič.

01-2362-02-Ce

Príklad 182: Syntéza Ac-PLG-Hof-Y-Hol-Dox.

Naviazanie neprírodných aminokyselín k pevnému nosiču

Trifenyl fosfín (4,78 g, 18,25 mmol) bol rozpustený v DMF (100 ml) a roztok bol ochladený na 0°C. Bola pridaná Langova živica(5,2 g, 4,45 mmol), reakcia bola premiešavaná po dobu 10 minút s následným pridaním tetrabrómmetánu (6,06 g, 18,25 mmol). Reakčná zmes bola premiešavaná po dobu 5 hodín. Živica bola premytá a vysušená. Časť živice (0,281 g, 0,25 mmol) bola namočená v DMF (2,5 ml), bolo pridané Fmoc-Hol (0,138 g, 0,375 mmol) nasledované DIEA (0,065 ml, 0,375 mmol) a Cézium jodidom (0,065 g, 0,25 mmol). Reakčná zmes bola premiešavaná cez noc. Živica bola premytá a dokončenie reakcie bolo potvrdené ninhydrínovým testom. Živica bola potom prenesená do peptidového syntetizačného zariadenia pre následné naviazanie. Naviazanie k doxorubicínu bolo prevedené ako v Príklade 47. Ac-PLG-Hof-Y-Hol-Dox (ES MS 1326,3 (M+Na)⁺, 890, 4 (M+H-414)⁺).

01-2362-02-Ce

Schéma 1

Syntéza konjugátov doxorubicínu na pevnej fáze

Syntéza konjugátov v roztoku

Príklad 104: Syntéza Ac-Pro-Leu-Gly-Hof-Gly (morfolinylpropyl) -Leu-Dox

Schéma 2) (Krok la): Ku zmesi Z-Leu-OH (2,65 g, 10 mmol), H-Gly-OtBu hydrochloridu (1,7 g, 10 mmol) a EDCI (2,3 g, 12 mmol) v 200 ml CH2CI2 bol pridaný pomaly pri teplote 0°C

01-2362-02-Ce diizopropyletylamín (3,0 ml). Výsledná zmes bola premiešavaná a bola premiešavaná pri tejto teplote po dobu 30 minút a pri izbovej teplote po dobu 2 hodín. Potom bola reakčná zmes nariedená pomocou CH₂C1₂, premytá IN roztokom HCI, nasýteným NaHCCb, vodou a solným roztokom, a vysušená pomocou MgSO₄. Po filtrácii a skoncentrovaní bol získaný požadovaný dipeptid ZLeu-Gly-OtBu vo forme bielej pevnej látky (3,75 g, viacej ako 95%. Zistená MS (M+l)⁺ 379,2.

(Krok lb): Dipeptid získaný z kroku la (3,75 g, 10 mmol) bol rozpustený v metanole (200 ml) a zmes bola hydrogénovaná v prítomnosti katalytického množstva Pd/C (0,1 mol%) a niekolkých kvapiek 4N HCI v dioxíne pri Ϊ átm po dobu 3 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná, skoncentrovaná a vysušená.

Vyššie získaný amín bol rozpustený v CH₂C1₂ (500 ml) a k tejto zmesi bol pridaný Ac-Pro-OH (1,57 g, 10 mmol), EDCI (2,3 g, 12 mmol), katalytické množstvo HOBT (100 mg) a diizopropyletylamínu (4,0 ml). Zmes bola premiešavaná pri izbovej teplote po dobu 3,5 hodín. Potom bola reakčná zmes nariedená pomocou CH₂C1₂, premytá IN roztokom HCI, nasýteným NaHCO3, vodou a solným roztokom a vysušená pomocou MgSO₄. Chromatografia na silikagéle (20% EtOAc v hexáne) viedla k získaniu požadovaného tripeptidu Ac-Pro-Leu-Gly-OtBu vo forme bielej pevnej látky (3,63 g, 95%). Zistené MS (M+l)⁺

384,3 (Krok lc): Tripeptid získaný z kroku lb (3,63 g, 9,5 mmol) bol rozpustený v CH₂C1₂ (100 ml) a pomaly bola pridaná pri teplote 0°C TFA (100 ml) . Zmes bola premiešavaná pri teplote 0°C po dobu 15 minút a pri izbovej teplote po dobu 2 hodín. Odparenie rozpúšťadla poskytlo požadovanú kyselinu Ac-Pro-LeuGly-OH vo forme bielej pevnej látky (3,08 g, viacej ako 95%). Zistené MS (M+l)⁺ 328,2.

01-2362-02-Če (Krok 2a): Zmes Z-Glu-OtBu (3,0 g, 8,9 mmol), morfolínu (2,0 ml, 23 mmol), EDCI (2,22 g, 11,6 mmol), katalytického množstva HOBT (50 mg) a diizopropyletylamínu (2,0 ml) v THF (60 ml) bola premiešavaná pri izbovej teplote po dobu 3 hodín. Väčšina rozpúšťadla bola odstránená, rezíduum bolo rozpustené v EtOAc (100 ml) a premyté IN roztokom HCl, nasýteným NaHCO₃, vodou, soľným roztokom a vysušená pomocou MgSO₄. Odparenie rozpúšťadla poskytlo požadovanú zlúčeninu vo forme bielej pevnej látky (3,6 g, viacej ako 95%). Zistené MS (M+l)⁺ 407,2.

(Krok 2b): Materiál z kroku 2a (3,5 g, 8,62 mmol) bol rozpustený v THF (50 ml) . K tejto zmesi bol pridaný BH₃ THF (1,0 M, 10 ml) a výsledná zmes premiešavaná pod spätným chladením po dobu 1,5 hodiny a pri izbovej teplote po dobu 30 minút. Rozpúšťadlo bolo odstránené, rezíduum bolo rozpustené v EtOAc (100 ml) a premyté nasýteným NaHCO₃, vodou, soľným roztokom. Chromatografia na silikagéle (60% EtOAc v hexáne) viedla k získaniu požadovanej látky Z-Gly (morfolinylpropyl)OtBu vo forme bielej pevnej látky (2,7 g, 81%. Zistenej MS (M+l)⁺ 393,1.

(Krok 2c) : Podľa postupu analogickému postupu z kroku lc (2,7 g, 6,89 mmol), bol materiál z kroku 2b podrobený reakcii s TFA za vzniku kyslej Z-Gly(morfolinylpropyl)-OH vo forme bielej pevnej látky (2,3 g, viacej ako 95%. Zistené MS (M-l) 335, 1.

(Krok 2d): Materiál získaný z Kroku 2c) (392 mg, 1,0 mmol) bol rozpustený v DMF (10 ml) . K tejto zmesi bola pridaná hydrochloridová sol H-Leu-OMe (182 mg, 1,0 mmol), BOP (442 mg, 1,0 mmol) a DIEA (0,52 ml, 3,0 mmol). Výsledná zmes bola premiešavaná pri izbovej teplote po dobu 2 hodín. Väčšina rozpúšťadla bola odstránená a rezíduum bolo nariedené pomocou

01-2362-02-Ce

EtOAc (80 ml), premyté IN roztokom HCI, nasýteným NaHCO3, vodou, soľným roztokom a vysušené pomocou MgSO₄. Po purifikácii pomocou HPLC (CNCH3/H2O) bol získaný požadovaný dipeptid ZGly(morfolinylpropyl)-Leu-OMe vo forme bielej pevnej látky (393 mg, 85%). Zistené MS (M+l)⁺ 464,6.

(Krok 2e) : Dipeptid získaný z Kroku 2d) (393 mg, 0,85 mmol) bol rozpustený v metanole (100 ml) a zmes bola hydrogénovaná v prítomnosti katalytického množstva Pd/C (0,1 mol%) a niekoľkých kvapiek 4N HCI v dioxíne pri 1 atmosfére po dobu 3 hodín. Reakčná zmes bola sfiltrovaná, skoncentrovaná a vysušená.

Podľa postupu analogickému postupu z kroku 2d bol materiál z vyššie uvedených krokov naviazaný k Boc-Hof-OH za vzniku požadovaného tripeptidu Boc-Hof-Gly(morfolinylpropyl)Leu-OMe vo forme bielej pevnej látky (381 mg, 76%). Zistené MS (M+)⁺591,4.

(Krok 2f) : Podía postupu analogickému postupu z kroku lc bol materiál z kroku 2e (381 mg, 0,65 mmol) podrobený reakcii s TFA za vzniku odpovedajúceho amínu. Zistené MS (M+l) 491,4.

Podľa postupu analogickému postupu z kroku 2d bol materiál z vyššie uvedených krokov naviazaný k tripeptidu Ac-Pro-LeuGly-OH za vzniku požadovaného hexapeptidu Ac-Pro-Leu-Gly-HofGly(morfolinylpropyl)-Leu-OMe vo forme bielej pevnej látky (437 mg, 84%). Zistené MS (M+l)⁺ 800,5.

(Krok 2g): K roztoku materiálu (400 mg, 0,5 mmol) získaného z kroku 2f v THF (5 ml) pri teplote 0°C bol pridaný IN roztok LiOH (5 ml) . Po premiešaní pri tejto teplote po dobu 3 hodín bola reakčná zmes acidifikovaná pomocou IN HCI (5 ml) na pH 5. Rozpúšťadlo bolo odstránené a zmes bola puri f ikovaná

01-2362-02-Ce pomocou HPLC (CNCH₃/H₂O) . Požadovaný hexapeptid bol získaný vo forme bielej pevnej látky (337 mg, 86%). Zistené MS (M-l) 784,5.

(Krok 2h) : K roztoku materiálu získaného z kroku 2g (39 mg, 0,05 mmol) v DMF (5 ml) pri teplote 0°C bol pridaný BOP (27 mg, 0,06 mmol) a DIEA (0,05 ml). Po premiešaní pri tejto teplote po dobu 5 minút bol k vyššie uvedenej zmesi pridaný doxorubicín hydrochlorid (30 mg, 0,05 mg, 0,05 mmol). Výsledná zmes bola premiešavaná v temne pri teplote 0° C po dobu 1 hodiny a pri izbovej teplote po dobu 2 hodín. Väčšina rozpúšťadla bola odstránená a rezíduum bolo purifikované pomocou HPLC (CH₃CN (0,1% NH₄Ac)/H₂0 (0,1% NH₄Ac) ]) . Zistené MS (M-l) 1309,1. (Poznámka: Pri HPLC analýze sa zobrazujú v oblasti požadovanej zlúčeniny dva vrcholy. Môže sa jednať o dva diastereoméry vzniklé racemizáciou počas naviazania).

01-2362-02-Ce

Schéma 2: Syntéza vzorového konjugátu doxorubicínu v roztoku

EDCI

2-L&Ľ-OH+ H»Cly.oaa··-^· CHjC3j

Zieu-GtyOlBu__H* _r

PtVC,MtOH BOP.DEA DMF

Aďtó-Uu-Gíy-OtBa

TFA

CK₂Cb

Ac-Pro-Uu-Gty-OH^;

OtBu

Korroiía

EDCI

DBA *<Λ

OtSu BHj.THF o

zhNsA

TFA

CHjOí

OH JULeo-OM»

BOKDffiA

Bw-Hof-HN

LiOH

OIBu

L TFA bop.wea

Ac-Pro-Lfu-Gly-Hof- HN

V^Uu-Oi ku^pďc

ΣΒοο-HofOH

BOP.DIEA

,g. Ac-hv-LíuX3Jy-Hof- HM X

DrawfuUciíÍ

Dox bop.diea o

01-2362-02-Ce

V literatúre je známa metodológia syntézy pre selektívnu acyláciu dôležitej chemoterapeutickej látky paclitaxelu. Napríklad bol na 2'-hydroxylovú skupinu paclitaxelu naviazaný L-alanín (Sundfor, 1998). Pretože bolo preukázané, že estery majú suboptimálnu stabilitu, je známe v odbore, že stratégia založená na karbamátovej väzbovej látke vedie k stabilnejším konjugátom (de Groot). Táto metodológia bola skoršie použitá k dopravovaniu paclitaxelu k nádorom za použitia plaskánu; avšak príslušná úprava peptidovej sekvencie, ako je uvedené v tomto vynáleze, by mala vytvoriť konjugáty, ktoré sú štiepitelné pomocou MMP.

Schéma 3: Syntéza konjugátov paclitaxelu

O-peptid-NH₂

1) uzatvorenie

2) štiepenie n° ÔBz ŽAc

Cap-KK-peptíd-COOH naviazanie

AoO .0 OH

Čap-KK-peptld

01-2362-02-Ce

V literatúre bolo popísané, že peptidy môžu byť pripojené k Vinea alkaloidom, ako sú napríklad vinblastín a vineristín. Karbometoxy skupina vinblastínu môže byť napríklad selektívne aktivovaná a pripojená k N-terminu peptidového reťazca (Kandukuri). Osoba znalá odboru môže kombinovať túto technológiu s peptidovými sekvenciami tohto vynálezu za vzniku konjugátov s vinea alkaloidy štiepitelnými MMP.

Príklad 1000: Posúdenie stability konjugátov v krvi

Stabilita peptidov konjugovaných s doxorubicínom v krvi človeka alebo holých myši bola posúdená pomocou HPLC na reverznú fázu s fluorescenčnou detekciou po extrakcii 80% acetonitrilom. Jednotlivé peptidy sú pripravené ako 60 nmolárne roztoky v Hepes pufri o pH 7,5 (50 mM) s CaCl2 (10 mM) , Brij-35 (0,1%) s následným nariedením na 10 n-molárnu koncentráciu v čerstvej heparinizovanej plnej krvi alebo pufra. Roztoky sú inkubované (37°C) s pomalým kontinuálnym pretriasaním. Reakčné zmesi o objeme 50 ul sú ukončené v určených časoch v rozmedzí od 1 minúty do 24 hodín vortexovaním do 200 ul acetonitrilu. Po krátkej centrifugácii (1 minúta, 14000 x g), aby sa speletizoval precipitát, je stiahnutý acetonitril a odparený do sucha pod prúdom dusíka. Extrahované vzorky sú nesuspendované do 50 ul acetonitrilu, následne 100 ul destilovanej H₂O a prenesené do HPLC autoinjekčných ampuliek. Vzorky boli chromatografované za použitia kolóny Nova-Pak C18 (3,9 x 150 mm; Wat086344, Waters Corp., Milford, Ma) s 12 minútovým lineárnym gradientom od

33,3 do 77,7% acetonitrilu, 0,1% TFA za použitia prietoku 1 ml/minútu. Skenovaný fluorescenčný detektor (* 474, Waters Corp) monitorujúci excitáciu pri 480 nm a emisiu pri 580 nm umožnil kvantifikáciu AUC vrcholov, ktoré boli predmetom záujmu; množstvo bolo extrapolované zo štandardnej krivky

01-2362-02-Ce vytvorenej za zrovnateľných podmienok. Výsledky sú prezentované v Tabulke 1 nižšie

Tabúlka 1

Súhrnné výsledky stability konjugátov v krvi po 5,5 hodinách (percento kontroly (v pufri, T = 0))

	Pufor	Ľudská krv	Krv holých myší
Ac-PLG-LYAL- DOX	91,3%	37,5%	20, 0%
Ac-PLG-LLAL- Dox	102,0	55, 6	19,2
Ac-PLG-LAL-Dox	96,8	49,1	9,0
Ac-PLG-LYL-Dox	112	90,1	—
Ac-PLG-LL-Dox	106	87,2	63,8
Ac-GPLG-LL-Dox	105	42, 6	25, 8
Ac-GPLG-LAL- Dox	92,2	15,4	5, 8
Ac-PLG-L-Dox	99,2	74,7	68,2
Ac-GPLG-L-Dox	106	10,2	5,9

Vyhodnotenie konjugátov ako substrátov pre MMP a Neprilyzín

Zlúčeniny, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, by mali byť dobrými substrátmi pre špecifické MMP, ale nemali by byť substrátmi pre príbuzné proteázy, ktoré nie sú exkluzívne exprimované v okolí nádoru. Príkladom takej nechcenej proteázovej aktivity je neprolyzín, ktorý bol identifikovaný ako hlavná metaloproteáza v niekolkých ľudských nádorových

01-2362-02-Če líniách. Neprilyzín je exprimovaný v obličkách, makrofágoch a mozgovom tkanive (Li et al.). Ku zvýšeniu cielenia konjugátov do nádorového tkaniva boli konjugáty testované ako substráty pre MMP a neprilyzín. Zlúčeniny, ktoré sú predmetom tohto vynálezu, majú k_cat/K_m väčší ako 1000 ak nie sú analyzované za použitia relevantnej MMP a k_cat/K_m menšej ako 1000 mM^_1s^_1, ak nie sú analyzované za použitia neprilyzínu.

Príklad 1001

Štiepenie konjugátov doxorubicín-peptid pomocou MMP a Neprilyzínu

Konjugáty peptidu s doxorubicínom boli rozpustené v DMSO do objemu 10 ml v pufri pre reakciu s metaloproteázou (50 mM Herpes pH 7,5, 0,1% Brij 35, 10 mM CaCl2) . MMP2, 9 alebo 14, alebo neprilyzín boli nariedené do finálnej koncentrácie 10 uM pufrom pre reakciu s metaloproteázou plus 400 mM NaCI. V reakčnom objeme 1 ml bol dox-konjugát nariedený do 1 uM pufrom pre reakciu s metaloproteázou. Reakcia bola ekvilibrovaná na teplotu 37°C. K zahájeniu reakcie bol pridaný enzým, 2 nM MMP-9 alebo 4 nM MMP-2, alebo 2,5 nM MMP-14 alebo 10 nM neprilyzínu. V stanovených časových bodoch boli odobraté 100 uL alikvóty (0, 5, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60) a reakcia bola ukončená 10 ul 0,5 M roztokom s EDTA. Konjugáty a produkty boli separované pomocou HPLC s reverznou fázou na HPLC systéme Waters Aliance (separačný modul 2690 sa skenovacím fluorescenčným detektorom 474) . Vzorka o objeme 20 uL bola nanesená na kolónu Waters C18 Novapak o rozmeroch 3,9 mm x 150 ml a eluovaná 12 minútovým gradientom od 27% do 63% acetonitrilu/0,1% TFA pri prietoku 1 ml/minútu. Vrcholy obsahujúce doxorubicín boli detekované fluorescenčné pri excitácii pri 480 nm a emisii pri 580 nm. Plochy vrcholov boli integrované a substrátová plocha vrcholu bola vynesená proti

01-2362-02-Ce času. Dáta boli zanesené do jednoduchej exponenciálnej rozpadovej krivky, kde y = A_oe[-kt], A_o je úvodná hodnota y, plocha substrátového vrcholu a k je konštanta rýchlosti reakcie. Pretože reakcia bola uskutočnená za podmienok prvého rádu (substrát je o veľa menší ako Km), k_cat/K_m môžu byť vypočítané z k_cat/K_m = k/ [E_t] . Výsledky sú prezentované v Tabulke 2.

	Enzým*
MMP-9	MMP-2	MMP-14	Neprilyzín
AcPLG-LYL-Dox	390,000	88,000	—	22, 00
AcPLG-LYAL- Dox	296, 000	190,000	134,000	38,000
AcPLG-LAAL- Dox	165,000	110,000		120,000
AcPLG-LLSL- Dox	149,000	103,000		82,000
AcPLG-LLAL- Dox	130,000	63,000		100,000
AcPLG-LL-Dox	130,000	18,000	4,100	22,000
AcGPLG-LL-Dox	95,000	30,000	—	20,000
AcPLG-LY-Dox	110,000	40,000	—	19,000
AcPLG-LAL-Dox	24,000	53,000	—	49,000
AcGPLG-LAL- Dox	19,000	86, 000		42,000
AcPLG-HofYL- Dox	34,000	Viacej ako 120,000	Viacej ako 120,000	Menej akolOOO
SucPLG-HofYL- Dox	Viacej ako 120,000	Viacej ako 120,000	Viacej ako 120,000	Menej ako 1000
AcPLG- HofOrnL-Dox	26, 000	136,000	Viacej ako 120,000	Menej ako 1000

01-2362-02-Ce * Kde bolo prevedené viacej ako jedno meranie, je hodnota uvedená ako priemer viacej meraní

Príklad 1002

Zhodnotenie konjugátov ako substrátov pre aminopeptidázu.

Konjugáty boli inkubované s 1 nM MMP2 po dobu 3 hodín pri 37° C v 50 mM HEPES, 10 mM CaCl₂, 0,1% Brij, pH 7,5, aby došlo ku vzniku LYL-Dox, produktu MMP. Potom bola pridaná k 12,5 milí jednotkám/ml aminopeptidáza N (Boehringer Mannheim č. 102768) aby došlo k post-MMP spracovaniu. V rôznych časoch (za 3, 6, 9, 15, 20, 30 a 100 minút) boli odobraté alikvóty reakčnej zmesi (0, 045 ml) a boli pridané do skúmaviek s 0,005 ml 0,5 mM EDTA, aby došlo k inhibícii aminopeptidázovej aktivity. Jedna polovina každého odberu bola separovaná na kolóne Novapak C18 (3,9 x 150 mm) pri prietoku 1 ml/minútu za použitia gradientu popísanom v Tabuľke 3. HPLC gradienty: Rozpúšťadlo A je 14 mM NaPi, 0,5 mM trietylamín, pH 4,2; Rozpúšťadlo B je 50% A, 50% acetonitril; a rozpúšťadlo C je acetonitril. Frakčné zloženie bolo určené za použitia integrovaných plôch vrcholov.

Tabulka 3. Gradient pre HPLC

Čas, minúty	A, %	B, %	C, %
0	50	50	0
12	0	100	0
18	0	100	0
19	0	0	100
22	0	0	100
22, 5	50	50	0
27	50	50	0

01-2362-02-Ce

Príklad 1003

Zhodnotenie cytotoxicity konjugátov

Konjugáty boli testované na cytotoxický efekt voči bunečnej línii HT1080, ktorá exprimuje veľa MMP. Bunky sa môžu líšiť významne v expresii aktívnych MMP; daná bunečná línia nemusí byť teda optimálna pre zhodnotenie daného konjugátu. Bunky HT1080 v kultúre majú významné koncentrácie MMP 2, 9 a 14, a sú preto obzvlášť vhodné pre zhodnotenie pre hodnotenie konjugátov, ktoré sú substrátmi pre tento enzým.

Bunečná línia bola inkubovaná v tkanive MEM s Earlovými sólami obsahujúcimi 10% fetálne bovinné sérum (FBS). Prvý deň bolo umiestnené 500 buniek do 96 jamkových doštičiek v 200 ul média pre bunečnú kultúru, ktorá obsahovala 10% FBS bez bovinných gelatináz odstránených na kolóne gelatín-sefaróza. Druhý deň boli pridané do doštičiek konjugáty peptidylDoxorubicín a Doxorubicín ako kontrola. Bunky boli inkubované tri dni pri teplote 37°C, v prítomnosti 5% C0₂ v inkubátore v tkanivovej kultúre. Do každej jamky mikrodoštičky bolo pridané činidlo MTS za použitia inštrukcií výrobca (ref.). Doštičky boli inkubované po dobu 2 hodín pri teplote 37°C, v prítomnosti 5% C0₂. Doštičky boli odpočítané na odčítacom zariadení Molecular Device Spectromax 250 pri 490 nm. Potom bola pre každú koncentráciu testovanej zlúčeniny vypočítaná viabilita buniek, a táto vlastnosť bola zrovnaná s kontrolnými bunkami, kde nebola pridaná žiadna zlúčenina. U reprezentatívnych zlúčenín, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, bola touto analýzou zistená EC50 pre smrť bunky 10 uM alebo menej; prednostnejšie u reprezentatívnych zlúčenín, ktoré sú predmetom predkladaného vynálezu, bola touto analýzou zistená EC50 pre smrť bunky 1 uM alebo menej.

01-2362-02-Ce

Tabúlka 4

Cytotoxicita konjugátov voči bunkám HT1080

Zlúčenina	EC₅₀ (nM)
Doxorubicín	8-9
Ac-PLG-LYAL-Dox	Menej ako 10,000
Ac-PLG-LLAL-Dox	Menej ako 10,000
Ac-PLG-LL-Dox	Menej ako 10,000
Ac-PLG-LAL-Dox	Menej ako 10,000

Transport aktívnej cytotoxickej látky môže byť alternatívne posúdený inkubáciou konjugátov s bunkami a analýzou koncentrácií aktívnych látok pomocou HPLC. Príklady tohto spôsobu hodnotenia nasledujú.

Príklad 1004: Analýza spracovania kultúr HT1080

Aktívne rastúce bunky HT1080 sú umiestnené do 12-jamkovej doštičky v koncentrácii 2 x 10⁵ buniek na jamku v DMEM s 10% séru. Nasledujúci deň je médium odstránené a bunky sú dva razy premyté pomocou PBS. Potom je do každej jamky pridané 1,5 DMEM obsahujúce 0,1% BSA, 1 uM Ac-PLG-HofK (Me2) L-Dox, a 40 nM PMA. K niektorým vzorkám je pridané široké spektrum MMP inhibítorov, takže môže byť určený stupeň spracovania spôsobený MMP. V uvedených časoch sú odobraté 0,1 ml alikvóty, je pridané 0,4 ml acetonitrilu, zmes je zvortexovaná a centrifugovaná po dobu 2 minút. Je odobraté 0,4 číreho supernatantu, ktorý je vysušený za použitia prúdu dusíka. Vysušená peleta je suspendovaná v 0,12 ml HPLC pufri A a analyzovaná ako v Príklade 1000.

Výsledky z typickej analýzy sú sumarizované v Tabuľke 5. V časoch použitých v tomto experimente je jediným

01-2362-02-Če

100 detekováteIným metabolitom L-Dox. HofK(Me2)L-Dox a K(Me2)L-Dox nie sú detekované, pretože sú rýchlo premenené na L-Dox. Neskoršie je z L-Dox vytvorený Dox. Spracovanie je výrazne znížené inhibítorom MMP, čo ukazuje, že MMP sú hlavnými spracovávajúcimi enzýmami v týchto bunkách.

Tabulka 5.

Analýza spracovania v kultúrach HT1080

Čas, hodiny	Frakcie L-Dox
Mínus inhibítor MMP	Plus inhibítor MMP
0	0	0
3	0,10	0, 004
5, 5	0,20	0,01
8	0,46	0,02

Príklad 1005: Nižšie sú popísané chromatografické štúdie navrhnuté k zhodnoteniu preferenčnej akumulácie Dox v HT1080 xenograftoch príbuzných tkanivu srdca a plazme.

Podanie konjugátu a zber tkaniva:

Nádory HT1080 sú transplantované naivným Weiss holým myšiam z nádorových xenograftových fragmentov a sú ponechané rásť po dobu 1 týždňa. Experimentálne Dox-konjugáty sú rozpustené v N,N-dimetylacetamidu (DMAC) a potom nariedené \

vodou za vzniku požadovanej koncentrácie konjugátu v 10% DMAC. potom je do chvostových žíl injekčné aplikované 0,2 ml roztoku konjugátu. V rôznych časoch po injekčnej aplikácii sú tri myši anestetizované pomocou CO₂ a srdcovou punkciou je odobratá do

01-2362-02-Ce

101 striekačky obsahujúcej 0,1 ml Na citrátu. Krv je odoberaná do mikrocentrifugačnej skúmavky, ktorá je centrifugovaná po dobu 2 minút v centrifúge Eppendorf. Potom je prenesené 0,3 ml plazmy do čerstvej skúmavky a táto plazma je zamrazená za použitia tekutého dusíka. Po usmrtení je odobratý nádor, ľavá

I oblička a srdce a tieto tkanivá sú zamrazené tekutým dusíkom. Tkanivá sú zamrazené pri teplote -80°C do extrakcie.

Extrakcia tkanív:

Vzorky sú rozmrazené, zvážené a rozstrihané nožnicami a je pridaná studená, citrátová myšacia plazma (Cocalico Biological (č. 30-0931) . Ľadové sedimenty sú homogenizované 1 minútu homogenizátorom IKA Ultra-Turrex a 0,5 ml je potom prenesené do mikrocentrifugačnej skúmavky. Okamžite po homogenizácii je pridané 0,1 ml 33% dusičnanu strieborného. Potom je pridané 0,5 acetonitrilu a výsledná zmes je krátko zvortexovaná, premiešavaná po dobu 15 minút a centri f ugovaná po dobu 5 minút. Supernatant je prenesený do novej skúmavky, vysušený prúdom dusíka pri teplote 37°C a uskladnený pri teplote -80°C.

Separácia, identifikácia a kvantifikácia Dox a Dox obsahujúcich zlúčenín v extrahovaných vzorkách:

0,06 ml acetonitrilu je pridané k rozmrazeným suchým vzorkám a zmes,je krátko zvortexovaná. Potom je pridané 0,6 ml pufra A, zmes je krátko zvortexovaná a následne podrobená 1 minútovej sonikácii vo vodnom kúpeli. Vzorky sú centrifugované po dobu 10 minút, aby sa odstránil nerozpustný materiál a čistý supernatant je nariedený pomocou 60 UL pufra A, aby sa dosiahlo zloženia pufra pre HPLC pre injekčnú aplikáciu. 0,1 ml vzorky je potom injekčné aplikované na kolónu Novapak C18

01-2362-02-Ce

102 (3,9 x 150 mm) prietokom 1 ml/min a eluované nasledujúcim gradientom

Čas	%A	%B	%C
0	50	50	0
12	0	100	0
18	0	100	0
19	0	0	100
33	0	0	100
34	50	50	0
40	50	50	0 koniec analýzy

Pufor A: 14 mM NaPi, 0,5 mM Trietylamín, pH 4,2 Pufor B: 50% pufor A, 50% Acetonitril Pufor C: 100% Acetonitril

Detekčným spôsobom je fluorescencia s excitáciou pri 48,0 nm a emisiou pri 580 nm

Vzorky z myšacích tkanív typicky ukazujú tri hlavné vrcholy, ktoré putujú spolu s materským konjugátom, autentickým Leu-Dox a doxorubicínom. K výpočtu množstva týchto látok sú plochy vrcholov z tkanivových vzoriek skonvertované na pmol/injekciu za použitia rovnice odvodenej zo štandardnej krivky pre Dox. Hodnoty pmol/injekcia sú potom vynásobené číslom 2,4, aby bolo dosiahnuté jednotiek pmol/vzorka. Hodnoty pmol/vzorka sú rozdelené analyzovanou veľkosťou tkaniva (plazma = 0,3 ml, nádor = 0,086 mg, srdca, obličky, pečeň = 0,042 mg) za vzniku jednotiek pmol/veľkosť tkaniva. Potom sú z hodnôt pmol/veľkosť tkaniva vypočítané priemerné a štandardné chyby pre tri vzorky pre každý čas a tkanivo. Krivky koncentrácia-čas, parametre PK a relatívne tkanivové

01-2362-02-Ce

103 distribúcie sú určené z týchto priemerných hodnôt pmol/veľkosť tkaniva.

Ďalšie príklady tohto vynálezu boli pripravené za použitia spôsobov tu uvedených a hodnotených metodológiou popísanou v Príkladoch prevedenia vynálezu uvedených vyššie. Reprezentatívne zlúčeniny podlá tohto vynálezu sú uvedené v Tabuľke 6a až 6g.

Tabuľka 6a Príklad	Cap—Pl—Pl'—P2X-Doxorubicín	M/Z:
Príklad	164	4-(2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl -G-	Ho f-Y-
		L-Dox	1256.6 (M+H+H₂0)
Tabuľka	6b
Príklad		Cap—P2—Pl—PP2X—Doxorubicín	M/Z:
Príklad	1	4-metoxy-benzénsulfonyl-8-Ala-G	-Hóf-Y-L-Dox 1277.1	(M-H)
Príklad	2	1, 2-CsH₄ (CO) 2-H-G-H0f-Y-L-Dox	1305.5	(M+H)
Príklad	41	acetyl-L-G-L-Y-L-Dox	1145.8	(M+H)
Príklad	42	cyklopropylkarbony1 - L-G-L-Y-	-L-Dox 1171.7	(M+H)
Príklad	43	cyklobutylkarbonyl - L-G-L-Y-:	L-DOX 1185.7	(M+H)
Príklad	44	pivaloyl - L-G-L-Y-L-Dox

1187.8 (M+H)

01-2362-02-Ce

104

Tabulka 6c

Príklad Cap—P3—P2—Pl—Pl'—Χ-Doxorubicín M/Z:

Príklad 3

Príklad 4

Príklad 5

Príklad 6

Príklad 7 .

Príklad 8

Príklad 9

Príklad 10

Príklad 11

Príklad 12

Príklad 13

Príklad 17

Príklad 18

Príklad 19

Príklad 20

Príklad 21

Acetyl-P-L-G-L-L-Dox

Acetyl-P-(R )L-G-L-L-Dox

Acetyl-P-(β-Ala)-G-L-L-Dox

Acetyl-P-(γ-Abu)-G-L-L-Dox

Acetyl-P-Cha-G-L-L-Dox

P-L-G-L-L-Dox

MeOCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

1079

1037

1051

1119 (M+Na)

1059.5 (M+Na)

1153

MeOCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

1197.9 (M+H)

H₂NCH₂CH₂N(CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox 1206

AcHNCH₂CH₂N(CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-DOX 1248

AcN {CH₂CH₂) 2NCH2C (=0) P-L-G-L-L-Dox

1205

Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox 1227

Acetyl-P-H-G-Hof-L-Dox

1151.2 (M+H)

Acetyl-P-Orn-G-Hof-L-Dox

1128.4 (M+H)

Acetyl-P-Dap-G-Hof-L-Dox 1100

Acetyl-P-Cit-G-Hof-L-Dox

1171

01-2362-02-Ce

105

Príklad

Príklad (Mt-Na)

Príklad (MtNa)

Príklad (Mt-Na)

Príklad

Acetyl-P-L-G-(O-(3-pyridyl-))Y-L-Dox

1206,523 (M+H)

23	Acetyl-P-L-G-(0-(4-pyridyl-))	Y-L-Dox 1206.524(M+H)
24	Acetyl-P-L-G-(4-aza-)Hof-L-Dox	1128.517 (M+H)
25	Acetyl-P-L-G-(O-benzyl-)S-L-Dox	1141.5(M-H)
26	Cbz-P-L-G-(O-(4-pyridylmetyl-))Y	-L-Dox 1312.8 (M+H)
27	Acetyl-P-L-Sar-L-L-Dox	1093.534 (M+H)
28	Acetyl-P-(N-Me-)L-G-L-L-Dox	1115.518 (M+Na)
29	Acetyl-P-L-G-(N-Me-)L-L-Dox	1115.517
30	Acetyl-Hyp-L-G-L-L-Dox	1117.494
31	Acetyl-Tzc-L-G-L-L-Dox	1119.454
32	Acetyl-(Homo-P)-L-G-L-L-Dox	1115.516
33	Acetyl-(Homo-P)-L-G-Hof-L-Dox	1163.516 (Mt-Na)
34	Acetyl-(Homo-P)-Orn-G-Hof-L-Dox	1142.529 (MtNa)
35	Acetyl-Nipekotát-L-G-L-L-Dox	1142.529 (Mt-Na)
36	Acetyl-Aze-L-G-L-L-Dox	1087.485 (MtWa)
37	Acetyl-Chg-L-G-L-L-Dox	1143.548 (MtNa)
38	Acetyl-P-valerolaktám-G-L-L-Dox	1085.468 (MtNa)
39	Acetyl-G-P-L-G-^L-F-Dox	1170.9 (M+H)
40	Acetyl-G-P-L-G-F-F-Dox	1204.9 (MtH)

Príklad 141 Acetyl- (4-fluoro-F) -L-G-L-L-Dox 1226.528 (Mt-Na)

01-2362-02-Ce

106

Tabulka 6d

Príklad Cap—P3—P2—Pl—PlP2Χ-Doxorubicín M/Z:

Príklad	46	acetyl-P-L-G-L-A-L-Dox	1148.8	(M-H)
Príklad	47	acetyl-P-L-G-L-Y-L-Dox	1240.9	(M-H)
Príklad	48	Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox	1360.9	(M+H)
Príklad	49	H₃CC(=0)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox	1388
Príklad	50	AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-	-Y-L-Dox 1411.8	(M+H)
Príklad	51	acetyl-P-L-G-L-S-L-Dox	1166 '
Príklad	55	acetyl-P-L-G-L-L-L-Dox	1193.4	(M+H)
Príklad	101	acetyl-P-L-G-Hof-H-L-Dox

1264.3 (M+H)

Príklad 102 acetyl-P-L-G-Hof-A-L-Dox

1196.8 (M-H)

Príklad 103 acetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

1288.8 (M-H)

Príklad 104 acetyl-P-L-G-Hof-(morfolinylpropyl-G)-L-Dox

1311.6 (M+H)

Príklad 106 sukcinyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox 1349.6 (M+H)

Príklad 107 acetyl-P-L-G-Hof-(O-(4-pyridylmetyl)-Y)-L-Dox

1381.8 (M+H)

Príklad 108 acetyl-P-L-G-(homo-Y)-Y-L-Dox

1304.6 (M-H)

Príklad 109 acetyl-P-L-G-(4-aza-Hof)-Y-L-Dox 1291.8 (M+H)

Príklad 110 acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-)-Y)-Y-L-Dox

1367.6 (M-H)

Príklad 111 acetyl-P-L-G-(fenylpropyl-G)-Y-L-Dox

01-2362-02-Ce

107

1302.4 (M-H)

Príklad 112 acetyl-P-L-G-(styryl-A)-Y-L-Dox

1300.5 (M-H)

Príklad	113	acetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox	1367.6	(M-H)
Príklad	114	acetyl- P-(N,N-dimetyl-K)-G-Hof-Y-	L-Dox 1333
Príklad	115	acetyl-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox	1213.4	(M+H)
Príklad	116	acetyl-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox	1241.6	(M+H)
Príklad	117	Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox	1359.9	(M+H)
Príklad	120	acetyl-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox	1242
Príklad	121	acetyl-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox	1351
Príklad	123	acetyl-P-Orn-G-L-Y-L-Dox	1243,3(M+H)
Príklad	124	acetyl-P-(4-aza-F)-G-L-Y-L-Dox	1277
Príklad	125	acetyl-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox	1227.6	(M+H)
Príklad	126	acetyl-P-L-G-Hof-K-L-Dox	1254
Príklad	127	acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-	L-Dox

1283.6 (M+H)

Príklad 129 Peg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox 1401 Príklad 132 acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox 1283 Príklad 133 acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Cha-Dox 1323 Príklad 134 acetyl-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox 1284.4 (M+H)

Príklad 136 acetyl-P-L-G-Hof-Q-L-Dox 1255.8 (M+H)

Príklad 137 acetyl-P-L-G-Hof-(4-aza-F)-L-Dox 1275.6 (M+H)

Príklad 138 acetyl-P-L-G-Hof-V-L-Dox 1224.1 (M-H)

Príklad 142 acetyl-(homo-P)-L-G-L-Y-L-Dox

1278.578 (M+Na)

01-2362-02-Če

108

Príklad	143	acetyl-(homo-P)-L-G-Hof-Orn-L-Dox 1256.624 (M+Na)
Príklad	144	acetyl-Aze-L-G-L-Y-L-Dox 1250.549 (M+Na)
Príklad	145	acetyl-Aze-L-G-Hof-Orn-L-Dox 1227.585 (M+Na)
Príklad	146	acetyl-P-L-G-L-Y-G-Dox 1208.5020(M+Na)
Príklad	147	acetyl-P-L-G-Hof-Y-G-Dox 1256.5040(M+Na)
Príklad	148	acetyl-P-L-G-L-Y-(β-homo-L)-Dox 1278.5830(M+Na)
Príklad	149	acétyl-P-L-G-Hof-Y-(β-homo-L)-Dox 1326.5810(M+Na)
Príklad	150	acetyl-P-L-G-L-Y- (β -Ala)-Dox 1222.5150(M+Na)
Príklad	151	acetyl-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox 1264.5650(M+Na)
Príklad	152	acetyl-P-L-G-L-Y-Aph-Dox 1326.5820(M+Na)
Príklad	153	acetyl-P-L-G-L-Y-Amh-Dox 1292.5950(M+Na)

Príklad 165 acetyl-P-L-G-Hof-(N-metylpiperazinpropyl-G)-L-Dox

1324.6 (M+H)

Príklad 166 tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox 1356.4 (M-H)

Príklad 167 tetrazolacetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox

1372.5 (M-H)

Príklad 168 tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox

1356.5 (M-H)

Príklad 169 P-L-G- (O-benzyl-S)-Y-L-Dox 1264.5 (M+H)

Príklad 170 acetyl-P-L-G-Hof-(homoY)-L-Dox 1302.5 (M-H)

Príklad 171 acetyl-P-AzaHof-G-AzaHof-Y-L-Dox 1340.4 (M+H)

Príklad 172 acetyl-P-L-G-(O-allyl-S)Y-L-Dox 1254.6 (M-H) Príklad 173 acetyl-P-L-G-(4-nitro-Hof)-Y-L-Dox

01-2362-02-Ce

109

Príklad 174

Príklad 175

Príklad 178

Príklad 179

Príklad 180

Príklad 181

Príklad 182

Príklad 183 acetyl-P-L-G-Hof-AzaHof-L-Dox acetyl-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-Dox

3-pyridínkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

2-pyrazínkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Ac-P-L-G-Hof-K(ME2)-Nle-Dox

Ac-P-L-G-Hof-Y-Hos Dox

Ac-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox

Ac-P-L-G-Thr(OBzl)-Y-L-Dox

1333.4 (M-H)

1289.6 (MtH)

1228.6 (M-H)

1353.6 (M+H)

1352.7 (M-H)

1283.5 (M+H)

1300.5 (MtNa)

1326.2 (M+Na)

1342.4 (MtNa)

Tabuľka	6e
Príklad		Cap-P4—P3—P2—Pl—PlX-Doxorubicín	M/Z:
Príklad	45	Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox	1207
Príklad	52	acetyl-G-P-L-G-L-L-Dox	1136
Príklad	53	0 (CH₂CH₂) NCH₂CH₂NHC (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox	1250
Príklad	54	acetyl-G-P-L-G-L-Y-Dox	1208.5 (MtNa)
Príklad	56	acetyl-G-P-L-G-Bip-ľ-Do?;	1280
Príklad	57	acetyl-G-P-L-G-Nle-F-Dox	1170
Príklad	58	Cbz-G-P-L-G-L-L-Dox	1251
Príklad	59	ACHNCH2CH2N (CH₂CH₂) 2NCH2C (=0) -G-P-L-G-L-L-DOX	1306
Príklad	60	H₂NCH₂CH₂N(CH₂CH₂)₂NCH₂C( = O)-G-P-L-G-L-L-Dox	1262 ,
Príklad	61	Dmg-P-L-G-L-L-Dox	1122
Príklad	62	acetyl-γ-Ε +P-L-G-L-L-Dox	1208

01-2362-02-Ce

110

Príklad 63 acetyl-G-P-L-G-Tha-F-Dox 1210

Príklad 64 acetyl-G-P-L-G-Phg-F-Dox 1190.8(M+H)

Príklad 65 metoxyacetyl-G-P-L-G-L-L-Dox 1166

Príklad 66 Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox 1220

Príklad 67 Dmg-P-L-G-Phg-L-Dox 1199

Príklad 68 Dmg-P-L-G-(0-benzyl-Y)-L-Dox 1319

Príklad 69 Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox 1289

Príklad 70 acetyl-G-P-L-G-ľ-Bip-Dox 1279

Príklad 71 acetyl-G-P-L-G-L-Bip-Dox 1247

Príklad 72 acetyl-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox 1130

Príklad 73 acetyl-G-P-L-G-F-A-Dox 1127

Príklad 74 acetyl-G-P-L-G-Bip-A-Dox 1204

Príklad 75 acetyl-G-P-L-G-L-A-Dox 1094

Príklad 7 6 acetyl-G-P-L-G-(0-benzyl-Y)-F-Dox 1310

Príklad 77 acetyl-G-P-Q-G-L-L-Dox 1151.8(M+H)

Príklad 78 acetyl-G-P-R-G-L-L-Dox 1179

Príklad 79 acetyl-G-P-L-G-L-(4-pyridyl-A)-Dox 1171

Príklad 80 acetyl-G-P-L-G-L-R-Do?: 1178

Príklad 81 acetyl-G-P-L-G-L-W-Dox 1208

Príklad 82 acetyl-G-P-L-G-V-L-Dox '1121

Príklad 83 acetyl-G-P-L-G-Hof-L-Dox 1184.8(M+H)

Príklad 84 acetyl-G-P-L-A-L-L-Dox 1150

Príklad 85 Dmg-P-I-G-Bip-L-Dox 1232.8 (M+H)

Príklad 8 6 Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Do:·: 1258

Príklad 87 acetyl-G-P-V-G-L-L-Dox 1122

Príklad 88 Dmg-P-I-G-L-L-Dox

1122

01-2362-02-Ce

111

Príklad	89	Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox	1274
Príklad	90	acetyl-G-P-L-G-L-(O-benz y1-Y)-Dox	1276
Príklad	91	acetyl-G-P-L-G-E-L-Dox	1152
Príklad	92	Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox	1247
Príklad	93	acetyl-G-P-L-G-L-E-Dox	1152
Príklad	94	acetyl-G-P-L-G-Bip-E-Dox	1262
Príklad	98	acetyl-G-P-L-G-N-L-Dox	1137
Príklad	99	acetyl-G-P-L-G-S-L-Dox	1110.3 (M+H)
Príklad	100	acetyl-G-P-L-G-(4-hydroxy-fenyl-G)-L-Dox	1172
Príklad	140	acetyl-G-Aze-L-G-L-L-Dox	1144.5 (Mrtía)

Tabulka 6f

Príklad

Príklad 95

Príklad 96 Príklad 97 Príklad 105 Príklad 118

Príklad 119 Príklad 122 Príklad 128 Príklad 130

Príklad 131 Príklad 135 Príklad 139

Príklad 156 Príklad 161

Cap-P4-P3—P 2—Pl—PlP2 ' —X-Doxorubicín M/Z:

Dmg-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox

Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox

Dmg -P-R-G-Bip-R-L-Dox acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox γ-Ε-Ρ-L-G-Hof-Orn-L-Dox acetyl-γ-Ε-Ρ-Orn-G-Hof-E-L-Dox

1384

1370

1432

1419.8 (M+H) 1370

1328

1386

Dmg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox 1326 acetyl-y-E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox 1410 γ-Ε-Ρ-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox 1370 acetyl-γ-Ε-Ρ-L-G-Hof-Cit-L-Dox 1413 acetyl-y-E-P-L-G-Hof-E-L-Dox acetyl-G-P-L-G-L-A-L-Dox

Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox

1407.4 (M+Na)

1207

1285

01-2362-02-Ce

112

Príklad	162	Dmg-P-R-G-Phg-Y-L-Dox 1348
Príklad	163	acetyl-G-P-L-G-L-R-L-Dox 1292
Príklad	176	acetyl-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox	1433.5 (M-H)
Príklad	177	acetyl-g-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-Dox	1433.5

(M-H)

Príklad	184	Ac-y-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox	1419.9 (M+H)
Tabulka	6g
Príklad		Cap-P3—P2—Pl—Pl '-P2 '-P3' -X-Doxorubicín M/Z
Príklad	154	acetyl-P-L-G-L-L-A-L-Dox	1263
Príklad	155	acetyl-P-L-G-L-Y-A-L-Dox	1313
Príklad	157	acetyl-P-L-G-L-A-A-L-Ďox	1221
Príklad	158	acetyl-P-L-G-L-A-L-L-Dox	1263
Príklad	159	acetyl-P-L-G-L-L-S-L-Dox	1279
Príklad	160	acetyl-P-L-G-L-L-L-L-Dox	1306

01-2362-02-Če

Claims

1. Zlúčenina definovaná Vzorcom (I)

E^cp-A (I) alebo jej farmaceutický prijateľná sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom konjugovaným k A z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa~; a

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, prolínové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

a vybraným

Tzc alebo

01-2362-02-Ce

114

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná u Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O-(Ci~C₄ alkyl)-Tyr, 0-(fenyl (C1-C4 alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylová kyselina;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je amino uzatvárajúca skupina; a

A je antineoplastická látka.

2. Zlúčenina podía patentového nároku 1, kde A je doxorubicín, doxorubicínový derivát alebo doxorubicínový analóg.

3. Zlúčenina podía patentového nároku 2, kde A je doxorubicín.

4. Zlúčenina podľa patentového nároku 3 definovaná Vzorcom (la) :

(la)

01-2362-02-Ce

115 alebo jej farmaceutický prijateľná sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraným z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa~;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-; a

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc alebo prolínové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- alebo -Sar-Xpl- tvoria väzbu štiepitelnú matrixínom;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O- (C1-C4 alkyl)-Tyr, O-(fenyl (C1-C4 alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylová kyselina;

01-2362-02-Ce

116

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4~; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je vybrané z H₃CC(=O)-;

HOC (=0) - (CH_2vC (=0)-, kde vje 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

H₂N- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0)-, a H₃CC (=0) HN- (CH2CH2O) t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2, 3, alebo 4;

R¹-C(=O)-;

R^1_S (=0) ₂-;

R¹-NHC(=O)-;

R^la-CH₂C (=0)-;

prolín substituovaný pomocou -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný pomocou 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

-(0=) C-fenyl -C(=0)-;

R¹ je C3-C6 cykloalkyl substituovaný O, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;

C1-C6 alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, C1-C3 alkyl, Cx-C4 alkoxy, -CO2H, N(CH2CH2) 2N-R², SO3H;

01-2362-02-Ce

117

C₃-C₆ cykloalkyl' substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo .4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je volitelne substituovaný 1 alebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (Η)Ν(Ο₂-Ο₄ alkyl)-, alebo acetyl;

R³ je H, Ci-C₄ alkyl, C3-C6 cykloalkyl, fenyl alebo benzyl;

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, Οχ-Ο4 alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂) ₂N-R²;

5. Zlúčenina podlá patentového nároku 4 alebo jej farmaceutický prijateľná sol, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraným z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

01-2362-02-Ce

118

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc alebo prolinové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, íle, Nie, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, β -Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridýl-Ala, 3-pyridýl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Phe, Bip, Tyr,

O-benzyl-Tyr; a

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je vybrané z H₃CC(=O)-;

HOC (=0) - (CH₂) _VC (=0) -, kde vje 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH2CH2O) _t-CH₂C (=0) - ,

H₂N- (CH₂CH₂O) t^-CH₂C (=0)-, a H₃CC (=0) HN- (CH2CH2O) t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2 alebo 3;

R¹-C(=O)-;

R¹-S(=O)₂-;

rXnhc(=0) -;

R^la-CH₂C (=0) - ;

prolín substituovaný pomocou -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný pomocou 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

-(0=) C-fenyl -C(=0)-;

01-2362-02-Ce

119

R¹ je C3-C6 cykloalkyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -CO2H;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH, metoxy alebo -CO2H;

Ci-Cô alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, C1-C3 alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO2H, N (CH2CH2) 2N-R², SO3H;

C3-C6 cykloalkyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, alebo acetyl;

R³ je H, C1-C4 alkyl, C3-C6 cykloalkyl, fenyl alebo benzyl;

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂) ₂N-R²;

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtný; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je voliteľne substituovaný 1 alebo 2 -OH; alebo

01-2362-02-Ce

120

6. Zlúčenina podlá patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

7. Zlúčenina podľa patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

8. Zlúčenina podía patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

9. Zlúčenina podía patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

10. Zlúčenina podía patentového nároku 5 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná sol, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraným z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom;

01-2362-02-Ce

121 kde R⁵ je vybrané z H, halogénu, Ci-C₆ alkylu, -OH, Ci-C₆ alkoxy a benzyloxy; a n je 2, 3, 4 alebo 5;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γAbu, Cha, (phg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktám, Ν,Νdimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, Nmetylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

Xpl je aminokyselina vybraná z Hof, Leu, Bip, Phe, nor-Leu, Tha, Phg, Val, Glu, Asn, Ser, Ala, homo-Tyr, Aze, 4-aza-Hof, O-(3-pyridyl)-Tyr, O-(4-pyridyl)-Tyr, O-benzyl-Tyr, O-benzylThr, O-benzyl-Ser, O-metyl-Ser, O-alyl-Ser, 4-nitro-Hof, Nmetyl-Leu, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr, 4-hydroxyfenyl-Gly, fenylpropyl-Gly, styryl-Ala nebo 2 Nal;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val,

Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, Ν,Ν-dimetyl-Lys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, íle, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro) , Pro, Sar, Thr, Trp, Cya,

01-2362-02-Če

122

Irg, Lys, Met, Orn, Phe, Phe (4-fluoro) , Pro, Sar, Thr, Trp a Val;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg, Ala, Arg, Asn, Asp, β-Asp, Aze, Cha, Cys, Dpa, Gin, Glu, His, Hyp, íle, Irg, Leu, Lys, Met, Orn, Phe, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, nebo Val;

R je vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃COCH2CH₂OCH₂CH2OCH₂C (=0) -;

HO₂CCH2OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H2NCH2CH2OCH2C (=0)

H2NCH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) -;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂0CH₂CH₂0CH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂nch₂c (O) -;

H₃CC (=0) HNCH2CH2N (CH₂CH₂) >nch₂c (O)-;

H₃CC (=0) N (CH2CH2) ₂NCH₂C (O) - ;

O(CH₂CH2)2NCH2CH₂NHC (O)-;

HO2CCH2C (CO₂H) (OH) CH₂C (=0)-;

HO2CCH2C (CH₃) (OH) CH₂C (=0)-;

2-karboxycyklohexyl-C(=0)

01-2362-02-Ce

123

2- karboxycyklopentyl-C(=0)-;

karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzénsulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridínkarbonyl;

2-pyrazínkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolín a

4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

11. Zlúčenina podľa patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

12. Zlúčenina podľa patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvori väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

13. Zlúčenina podľa patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

14. Zlúčenina podľa patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

15. Zlúčenina podľa patentového nároku 10 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, kde;

E^cp je peptid štiepitelný enzýmom vybraným z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gľy-Leu-Xp2-Laa-;

01-2362-02-Ce

124

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa~;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Leu-Xp2-Laa-; a

Cap-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepiteľnú matrixínom;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, alebo Npa;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N, N dimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N metylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys

Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Ser

Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val

Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe Ν,Ν-dimetyl-Lys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp íle, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro) , Pro, Sar, Thr, Trp, Cya Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, 0-(4-pyridylmetyl)-Tyr a N metylpiperazínpropyl-Gly;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Cha, Nie a Hol;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R je vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

01-2362-02-Ce

125

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

HO₂CCH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) - ;

H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H₂NCH₂CH2OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃CC (=0)HN-CH₂CH₂0CH₂C (=0) -;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂N{CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

O (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) -;

HO₂CCH₂C (CO₂H) (OH) CH₂C (=0) -;

HO₂CCH₂C(CH₃) (OH)CH₂C(=O)

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2- karboxycyklopentyl-C(=0) karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzénsulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridínkarbonyl;

2-pyrazínkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolín a

4- (2-(5,6,7, 8-tetrahydronaftenyl))butyl.

16. Zlúčenina podľa patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 MMP-9 a MMP-14.

01-2362-02-Ce

126

17. Zlúčenina podľa patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

18. Zlúčenina podľa patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

19. Zlúčenina podľa patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

20. Zlúčenina podľa patentového nároku 15 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraným z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Cha;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Nle;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Hol;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu~;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, alebo Npa;

01-2362-02-Ce

127

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γAbu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktám, N,Ndimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, Nmetylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp a Tyr;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val,

Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetyl-Lys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, íle, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya,

Kca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazínpropyl-Gly;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R je vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH2CH2C (=0)

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)

HOC (=0) CH2CH2CH2CH2C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0)

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)-; a tetrazolacetyl.

21. Zlúčenina podlá patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

01-2362-02-Ce

128

22. Zlúčenina podlá patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9.

23. Zlúčenina podľa patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

24. Zlúčenina podľa patentového nároku 20/ kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

25. Zlúčenina podľa patentového nároku 15 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná sol, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraným z:

Cap-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Cha;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Nle;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Hol;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-; a

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom;

01-2362-02-Če

129

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, íle, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktám, N,N dimetyl-Lys, 4-aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N metylpiperazínpropyl-Gly, 4-aza-Hof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Ser Thr, Trp a Tyr;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val

Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe Ν,Ν-dimetyl-Lys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp íle, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya

Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a N metylpiperazínpropyl-Gly;

Cap je N-terminálna skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R je vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH2CH2C (=0)-;

HOC (=0) CH2CH2CH2C (=0)-;

HOC (=0) CH2CH2CH2CH2C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C(=O)-;

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)-; a tetrazolacetyl.

26. Zlúčenina podľa patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 MMP-9 a MMP-14.

01-2362-02-Ce

130

27. Zlúčenina podľa patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a - Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom vybraným z MMP-2 a MMP-9. 28. Zlúčenina podľa patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a -

Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú matrixínom MMP-14.

29. Zlúčenina podlá patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a Gly-Hof- tvorí väzbu štiepitelnú MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

30. Zlúčenina podľa patentového nároku 4 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná sol, kde;

E^cp je peptid štépitelný enzymem vybraný z:

Identifikačné číslo sekvencie: 185: R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 186: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 187: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

01-2362-02-Če

131

Identifikačné číslo sekvencie: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 192: R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 195: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 197: R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 201: R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikačné číslo sekvencie: 202:

01-2362-02-Ce

132

R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R je vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) - (CH₂) _vC (=0) -;

kde v je 1, 2, 3, 4, 5, alebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -;

HO₂CCH₂O- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0)-;

H₂N- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0) -; a

H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) t“CH₂C (=0)-;

kde v je 1, 2, 3, alebo 4;

R^C^O)-;

r¹-s(=0)₂-;

R^NHC^O)

R^la-CH₂C (=0) prolín substituovaný -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C(=0)a

-(0=)C-fenyl-C(=0)

5-6 členný heterocyklus; kde spomínaný heterocyklus je nasýtený, čiastočne nasýtený alebo nenasýtený; kde spomínaný heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 alebo 4 heteroatómy vybrané z N, O a S; kde spomínaný heterocyklus je volitelne substituovaný 1 alebo 2 -OH, metoxy alebo -CO₂H;

fenyl substituovaný O, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z -OH, metoxy a -C0₂H; alebo

C1-C6 alkyl substituovaný 0-4 R^la;

01-2362-02-Ce

133

R^la je -OH, C1-C3 alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO2H, N (CH2CH2) 2N-R², SO3H;

fenyl substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, alebo acetyl;

R³ je H, Ci-C₄ alkyl, C3-C6 cykloalkyl, fenyl alebo benzyl;

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, Ci-C₄ alkoxy, -CO₂H, -N(CH₂CH₂) ₂N-R²;

Cg-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 alebo 2 substituentmi vybranými z metoxy a OH.

31. Zlúčenina podľa patentového nároku 30 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraným z:

Identifikačné číslo sekvencie: 185: R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

01-2362-02-Če

134

Identifikačné číslo sekvencie: 186: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 187: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 192:

R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 195: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 197:

01-2362-02-Če

135

R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 200: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 201: R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikačné číslo sekvencie: 202: R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R je vybrané z:

H₃CC(=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H3COCH₂CH2OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

HO2CCH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0) - ;

H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂0CH₂C (=0)

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂0CH₂CH₂0CH₂C (=0)-; H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0) -;

H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0) -; H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0)

0 (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (0) -;

HO₂CCH₂C (C0₂H) (OH) CH₂C (=0)-;

01-2362-02-Ce

136

HO2CCH2C (CH₃) (OH)CH₂C (=0)-;

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2- karboxycyklopentyl-C(=0)-;

karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzénsulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridínkarbonyl;

2-pyrazínkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolín a

4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

32. Zlúčenina podía patentového nároku 30 definovaná Vzorcom (la) alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, kde;

E^cp je peptid štiepiteľný enzýmom vybraným z:

Identifikačné číslo sekvencie: 185:

R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 186:

R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 187:

R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 188:

R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 189:

01-2362-02-Če

137

R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 192:

R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikačné číslo sekvencie: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 195: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 197: R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikačné číslo sekvencie: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikačné číslo sekvencie: 200:

R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Hol-;

01-2362-02-Ce

138

Identifikačné číslo sekvencie: 201:

R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikačné číslo sekvencie: 202:

R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R j e vybrané z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH2CH2CH2C (=0) -;

HOC (=0) CH2CH2CH2CH2C (=0)

H3COCH2CH2OCH2C (=0)

H3COCH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) -; a tetrazolacetyl.

33. Zlúčenina podlá patentového nároku 1 vybraná z

Identifikačné číslo sekvencie: 1:

4-metoxy-benzénsulfonyl-p-Ala-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 2:

1,2-C₆H₄(CO₂ ) -H-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 3:

acetyl-P-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 4:

acetyl-P-(R)L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 5:

acetyl-P-(β-Ala)-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 6:

01-2362-02-Ce

139 acetyl-P- (γ-Abu)-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 7: acetyl-P-Cha-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 8: P-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 9: MeOCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 10: MeOCH₂CH₂OCH2CH₂OCH2C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 11: H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) 2NCH2C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 12: AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie:13:

AcN (CH2CH2) 2NCH2C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 17: Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 18: acetyl-P-H-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 19: acetyl-P-Orn-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 20:

acetyl-P-Dap-G-Hof-L-Dox

01-2362-02-Ce

140

Identifikačné číslo sekvencie: 21:

acetyl-P-Cit-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 22: acetýl-P-L-G-(O-(3-pyridyl-))Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 23: acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-))Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 24: acetyl-P-L-G-(4-aza-)Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 25: acetyl-P-L-G-(O-benzyl-)S-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 26: Cbz-P-L-G-(O-(4-pyridylmetyl-))Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 27: acetyl-P-L-Sar-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 28: acetyl-P-(N-Me-)L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 29: acetyl-P-L-G-(N-Me-)L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 30: acetyl-Hyp-L-G-L-L-Dox

Identifikačné Číslo sekvencie: 31:

acetyl-Tzc-L-G-L-L-Dox

01-2362-02-Če

141

Identifikačné číslo sekvencie: 32:

acetyl-(Homo-P)-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 33: acetyl-(Homo-P)-L-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 34: acetyl-(Homo-P)-Orn-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 35: acetyl-Nipecotát-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 36: acetvl-Aze-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 37: acetyl -Chg -L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 38: acetyl-P-valerolaktám-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 41: acetyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 42: cyklopropylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 43: cyklobutylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 44: pivaloyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 45:

01-2362-02-Ce

142

Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 46:

acetyl-P-L-G-L-A-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 47:

acetyl-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 48:

Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 49:

H₃CC(=0)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 50:

AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 51:

acetyl-P-L-G-L-S-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 52:

acetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 53:

0 (CH₂CH₂) NCH₂CH₂NHC (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 55:

acetyl-P-L-G-L-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 58:

Cbz-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 59:

AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

01-2362-02-Ce

143

Identifikačné číslo sekvencie: 60:

H₂NCH₂CH₂N (CH2CH2) 2NCH2C (=0) -O-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 61: Dmg-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 62: acetyl-y-E-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 65: metoxyacetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 66: Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 67: Dmg-P-L-G-Phg-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 68: Dmg-P-L-G-(O-benzyl-Y)-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 69: Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 77: acetyl-G-P-Q-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 78: acetyl-G-P-R-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 82:

acetyl-G-P-L-G-V-L-Dox

01-2362-02-Če

144

Identifikačné číslo sekvencie: 83:

acetyl-G-P-L-G-Hof-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 84: acetyl-G-P-L-A-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 85: Dmg-P-I-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 86: Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 87: acetyl-G-P-V-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 88: Dmg-P-I-G-L-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 89: Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 91: acetyl-G-P-L-G-E-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 92: Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 95: Dmg-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 96: Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 97:

01-2362-02-Ce

145

Dmg-P-R-G-Bip-R-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 98:

acetyl-G-P-L-G-N-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 99:

acetyl-G-P-L-G-S-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 100: acetyl-G-P-L-G-(4-hydroxy-fenyl-G)-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 101: acetyl-P-L-G-Hof-H-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 102:

acetyl-P-L-G-Hof-A-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 103:

acetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 104:

acetyl-P-L-G-Hof-(morfolinylpropyl-G)-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 105:

acetyl-D-E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 106:

sukcinyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 107:

acetyl-P-L-G-Hof-(O(4-pyridylmetyl)-Y)-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 108:

acetyl-P-L-G-(homo-Y)-Y-L-Dox

01-2362-02-Ce

146

Identifikačné číslo sekvencie: 109:

acetyl-P-L-G-(4-aza-Hof)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 110: acetyl-P-L-G-(0-(4-pyridyl-)-Y)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 111: acetyl-P-L-G-(fenylpropyl-G)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 112: acetyl-P-L-G-(styryl-A)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 113: acetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 114: acetyl-P-(N,N-dimetyl-K)-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 115: acetyl-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 116: acetyl-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 117: Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 118: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 119:

γ-Ε-Ρ-L-G-Hof-Orn-L-Dox

01-2362-02-Ce

147

Identifikačné číslo sekvencie: 120:

acetyl-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 121: acetyl-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 122: acetyl-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 123: acetyl-P-Orn-G-L-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 124: acetyl-P:(4-aza-F)-G-L,Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 125: acetyl-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 126: acetyl-P-L-G-Hof-K-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 127: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 128: Dmg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 131:

Identifikačné číslo sekvencie: 129: Peg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 130:

acetyl-y-E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox

01-2362-02-Ce

148 γ-Ε-Ρ-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 132: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 133: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Cha-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 134: acetyl-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 135: acetyl-y-E-P-L-O-Hof-Cit-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 136: acetyl-P-L-G-Hof-Q-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 137: acetyl-P-L-G-Hof-(4-aza-F)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 138: acetyl-P-L-G-Hof-V-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 139: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-E-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 140: acetyl-G-Aze-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 141: acetyl-(4-fluoro-F)-L-G-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 142:

acetyl-(homo-P)-L-G-L-Y-L-Dox;

01-2362-02-Če

149

Identifikačné číslo sekvencie: 143:

acetyl-(homo-P)-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 144: acetyl-Aze-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 145: acetyl-Aze-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 154: acetyl-P-L-G-L-L-A-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 155: acetyl-P-L-G-L-Y-A-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 156: acetyl-G-P-L-G-L-A-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 157: acetyl-P-L-G-L-A-A-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 158: acetyl-P-L-G-L-A-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 159: acetyl-P-L-G-L-L-S-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 160: acetyl-P-L-G-L-L-L-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 161:

Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox;

01-2362-02-Ce

150

Identifikačné číslo sekvencie: 162:

Dmg-P-R-G-Phg-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 163:

acetyl-G-P-L-G-L-R-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 164:

4-(2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 165:

acetyl-P-L-G-Hof-(N-metylpiperazínpropyl-G)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 166:

tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 167:

tetrazolacetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné čislo sekvencie: 168:

tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 169:

P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 170:

acetyl-P-L-G-Hof-(homoY)-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 171:

acetyl-P-AzaHof-G-AzaHof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 172:

acetyl-P-L-G-(O-allyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 173:

01-2362-02-Ce

151 acetyl-P-L-G-(4-nitro-Hof )-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 174: acetyl-P-L-G-Hof-AzaHof-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 175: acetyl-P-L-G-(O-metyl-S}-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 176: acetyl-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 177: acetyl-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 178:

3-pyridínkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 179: 2-pyrazínkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 180: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 182: acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 183: acetyl-P-L-G-Thr(O-Benzyl)-Y-L-Dox;

Identifikačné číslo sekvencie: 184: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-L-Dox;

34. Zlúčenina podía patentového nároku 1 vybraná z

01-2362-02-Če

152

Identifikačné číslo sekvencie: 39:

acetyl-G-P-L-G-L-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 40: acetyl-G-P-L-G-F-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 54: acetyl-G-P-L-G-L-Y-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 56: acetyl-G-P-L-G-Bip-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 57: acetyl-G-P-L-G-Nle-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 63: acetyl-G-P-L-G-Tha-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 64: acetyl-G-P-L-G-Phg-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 70: acetyl-G-P-L-G-F-Bip-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 71: acetyl-G-P-L-G-L-Bip-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 72: acetyl-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 73: acetyl-G-P-L-G-F-A-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 74:

01-2362-02-Če

153 acetyl-G-P-L-G-Bip-A-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 75: acetyl-G-P-L-G-L-A-Dox

Identifikačné číslo sekvenčie: 76: acetyl-G-P-L-G-(O-benzyl-Y)-F-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 79: acetyl-G-P-L-G-L-(4-pyridyl-A)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 80: acetyl-G-P-L-G-L-R-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 81: acetyl-G-P-L-G-L-W-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 90: acetyl-G-P-L-G-L-(O-benzyl-Y)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 93: acetyl-G-P-L-G-L-E-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 94: acetyl-G-P-L-G-Bip-E-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 146: acetyl-P-L-G-L-Y-G-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 147: acetyl-P-L-G-Hof-Y-G-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 148: acetyl-P-L-G-L-Y-(β-homo-L)-Dox

01-2362-02-Ce

154

Identifikačné číslo sekvencie: 149:

acetyl-P-L-G-Hof-Y-(β-homo-L)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 150:

acetyl-P-L-G-L-Y-(β-Ala)-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 151:

acetyl-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 152:

acetyl-P-L-G-L-Y-Aph-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 153:

acetyl-P-L-G-L-Y-Ainh-Dox

Identifikačné číslo sekvencie: 181:

acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hos-Dox .

35. Farmaceutický preparát obsahujúci zlúčeninu podľa jedného z patentových nárokov 1-34 a farmaceutický prijateľný nosič.

36. Spôsob liečby cicavca postihnutého nádorom, tento spôsob zahŕňa podanie terapeuticky účinného množstva zlúčeniny podľa jedného z patentových nárokov 1-34.

37. Spôsob podľa patentového nároku 36, kde nádorom je nádor prsníka, vaječníka, mozgu, žalúdka, pľúc, hrubého čreva, prostaty alebo pečene, alebo kde nádorom je leukémia, lymfóm, karcinóm, sarkóm alebo melanóm.

38. Spôsob dopravy zlúčeniny k bunkám cicavca postihnutého nádorom, tento spôsob zahŕňa kontakt buniek cicavca postihnutého nádorom so zlúčeninou podľa jedného z patentových

01-2362—02-Če

155 nárokov 1-34, kde tento kontakt je uskutočnený v prítomnosti peptidázy zahrnujúcej matrixín.

39. Spôsob podlá patentového nároku 38, kde nádorom je nádor prsníka, vaječníka, mozgu, žalúdka, pľúc, hrubého čreva, prostaty alebo pečene, alebo kde nádorom je leukémia, lymfóm, karcinóm, sarkóm alebo melanóm.