CZ20022998A3 - Cílené antineoplastické léky a jejich terapeutické použití - Google Patents

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká antineoplastických látek konjugovaných s peptidy štěpitelnými enzymem, a obsahujícími aminokyselinovou rozpoznávací sekvenci membránově vázané a/nebo buněčně sekretované peptídázy, a použití takových konjugovaných sloučenin jako chemoterapeutických látek v cílené léčbě nádorů.

Dosavadní stav techniky

Použití mnoha protinádorových sloučenin je omezeno kvůli jejich úzkému terapeutickému indexu, což znamená, že vyvolané toxické účinky po podání určitých dávkových hladin převažují prospěšné účinky. Terapie antracyklinem (například doxorubicinem) je například omezena tím, že podání léku přesahující kumulativní dávku 500 až 550 mg doxorubicinu/m² vede k významnému riziku kardiotoxicity a myelosuprese (von Hof^ et al.). Avšak sloučeniny, jako je například doxorubicin, často zůstávají lékem volby pro konkrétní formy chemoterapie; proto by bylo užitečné vyvinout prostředek snižující toxicitu léků při udržení jejich terapeutického potenciálu.

Jeden prostředek dosažení tohoto cíle, . který byl zkoušen několik desetiletí, je návrh prolékových molekul, které jsou diferenciálně aktivované v nádorové tkáni. To znamená, že molekuly léku, které jsou neaktivní nebo významně méně aktivní, jsou selektivně zpracovány v nádorové tkáni tak, aby zde byly terapeuticky aktivní. Leu-Dox (aminokyselina Leucin konjugovaná k antracyklinu doxorubicinu) je například prolék, u kterého bylo zjištěno, že vyžaduje hydrolýzu aminokyseliny od proléku pomocí intracelulárních proteáz, aby došlo k uvolnění antracyklinu (Boven et al. (1990)). K přeměně Leu-Dox na Dox u myší dochází rychle, ačkoli nekompletně, do přibližně 20% celkové konverze (de Jong et al. (1992a)). Podobné pozorování bylo zjištěno po podání Leu-Dox člověku (de Jong et al. (1992b); Canal et al.); ve fázi I klinické studie došlo rychle v nádorové tkáni přibližně k 25% konverzi Leu-Dox na Dox. Navíc bylo prokázáno na myším modelu xenotransplantátu lidské ovariální tkáně, • « že Leu-Dox je účinnější protinádorová látka než volný doxorubicin při stejných toxických dávkách (Boven et al. (1992)).

Konjugace dalších aminokyselin k Leu-Dox může dále snížit dostupnost této sloučeniny buňkám, které nesekretují příslušnou proteázu a tudíž dále omezují aktivitu sloučeniny mimo nádor. V tomto ohledu prokázali například Denmeade et al, že prolék peptid-doxorubicin je cílen k antigenů specifickému pro prostatu (PSA). Ac-HSSKLQ-LeuDox je substrát pro PSA proteázu a je aktivní proti nádorovým buňkám prostaty, které exprimují proteázovou aktivitu. Dále bylo prokázáno, že další mono a dipeptidové konjugáty antracyklinů navíc k Leu-Dox mají biologickou aktivitu (Masquelier et al.; Baurain, et al.). Ačkoli detailní analýza dipeptidových antracyklinových konjugátů nebyla provedena, bylo prokázáno, že sloučeniny obsahující Leu-LeuDaunorubicin, Ala-Leu-Daunorubicin a Leu-Ala-Daunorubicin mají významnou biologickou aktivitu.

Byly popsány různé metaloproteinázy buněčné matrice (MMP) a s nimi byla asociována identifikovatelná peptidy štěpitelná místa (Nagase et al.; McGeehan et al.). Navíc byla zjištěna asociace mezi metastatickou progresí nádoru. V tomto ohledu prokázalo mnoho výzkumných pracovníků, že enzymy MMP-2, MMP-9 a v nedávné době zjištěný MMP-14 (MT1-MMP) jsou sdruženy s nádorovou progresí (viz například McDonnell a Fingleton; MacDougall a Matrisian). Zvýšená exprese MMP-2 byla také zaznamenána v karcinomech plic, žaludku a prsu ve srovnání s odpovídajícími normálními tkáněmi. Zvýšená exprese MMP neni omezena na samotný nádor. Zvýšená exprese MMP-2 a MMP-14 byla pozorována u stromálních a endoteliálních buněk, které jsou umístěny proximálně k nádoru (například Soini, Brummer). Hladina exprimovaných MMP je tedy zvýšena v místě nádoru.

Zvýšená exprese MMP v nádoru a podpůrných tkáních znamená, že je přítomna také zvýšená aktivita. Zatímco proformy MMP-2 a MMP-9 enzymu jsou sekretovány buňkami a jsou snadno detekovatelné v lidském séru a moči (Garbisa et al.; Mores et al.), je aktivní forma enzymu nacházena ha buněčném povrchu. V případě MMP-2 může být proforma aktivována na buněčném povrchu transmembránovým enzymem tt

MMP-14 (Sáto et al.; Kurschatt et al.). Bylo také popsáno, že se aktivace proMMP-2 vyskytuje prostřednictvím vazby proformy enzymu k integrinů (Brooks et al.). Bylo prokázáno, že se aktivace MMP-9 vyskytuje prostřednictvím specifické vazby k antigenu buněčného povrchu CD-44 (Yu a Stamenkovic). Na základě těchto nálezu je předpokládáno, že zvýšená aktivita MMP proteázy bude nejvyšší v místě nádoru.

Safavy et al. (A. Safavy et al. (J. Med. Chem. 42:4919-4924 (1999)) popisují připojení Syntetického peptidů o sedmi aminokyselinách k protinádorové látce paclitaxel.

Trouet a Baurain popisují v patentu US Patent 5962216, vydaném 5. října 1999, nádorem aktivované prolékové sloučeniny.

V dokumentech WO 99/02175, WO 98/18493 a WO 98/10651 je popsán konjugát určitých štěpitelných peptidů antigenu specifického pro prostatu (PSA) k cytotoxickým látkám.

Dokument WO 98/16240 popisuje připojení peptidů k lipidům pro následnou inkluzi výsledných konjugátů do lipozomů, aby došlo k cílenému dopravení obsahu vezikul s cytotoxickou látkou k nádorům.

Dokument WO 00/33888 popisuje peptidové konjugáty doxorubicinu, které jsou zpracovávány enzymem nazývaným trouáza.

Dokument WO 00/21571 popisuje použití FAP (Protein aktivující fibroblasty) k dopravení doxorubicinu k nádorům.

Dokument WO 00/64486 nárokuje konjugáty aktivované pomocí MMP pro transport látek k nádorům.

Zůstává však potřeba vyvinout chemoterapeutické prolékové sloučeniny, které jsou neaktivní nebo významně méně aktivní po podání, čímž se snižuje toxicita sloučenin, které jsou selektivně zpracovávány v nádorové tkáni nebo v její blízkosti, takže se stávají terapeuticky aktivními protinádorovými látkami.

* ♦ • ·

Předkládaný vynález uvádí nové sloučeniny užitečné v léčbě nádorů, kteréžto sloučeniny obsahují peptid štěpitelný enzymem metaloproteinázou buněčné matrice (MMP), kterýžto peptid je konjugován k doxorubicinu. Dále předkládaný vynález uvádí nové sloučeniny užitečné pro léčbu nádorů, kteréžto sloučeniny po neštěpení metaloproteinázou buněčné matrice produkují druhý peptidový doxorubicinový substrát, který může být dále naštěpen nebo zpracován aminopeptidázou exprimovanou v okolí nádoru. Žádný z odkazů uvedených výše nenavrhuje sloučeniny, které jsou předmětem předkládaného vynálezu.

Popis vynálezu

Tento vynález poskytuje sloučeninu obsahující peptid štěpitelný enzymem, který je konjugován k antineoplastické látce, například antracyklinu, vinca alkaloidu, bleomycinu, mitomycinu, taxanu, cytotoxickému nukleotidu, pteridinu nebo podofylotoxinu. Peptid štěpitelný enzymem je peptid obsahující aminokyselinovou sekvenci, která je selektivně rozpoznávaná a štěpená membránově vázanou a/nebo buněčně sekretovanou peptidázou, například metaloproteinázou buněčné matrice. Takové sloučeniny jsou užitečné v léčbě nádorů.

Také je zde poskytnut farmaceutický preparát obsahující řečené sloučeniny a farmaceuticky přijatelný nosič. Dále -je zde poskytnut způsob dopravy sloučenin tohoto vynálezu k savčím buňkám postiženým nádorem nebo jiným onemocněním, kterýžto způsob zahrnuje kontakt buněk se sloučeninou v přítomnosti peptidázy schopné štěpení peptidu.

Je oceňováno, že určité rysy vynálezu, které jsou pro jasnost popsány v kontextu s oddělenými formami vynálezu, mohou být také poskytnuty v kombinaci v jedné formě vynálezu. Naopak různé rysy vynálezu, které jsou pro stručnost popsány v kontextu s jednou formou vynálezu, mohou být také poskytnuty pro separátní formu vynálezu nebo jakoukoli vhodnou kombinaci.

• · ♦ · • · • · · · • · 4 ·· · · » « · » 4

Detailní popis vynálezu

Vynález poskytuje sloučeninu zahrnující antineoplastickou látku konjugovanou k peptidu štěpítelnému enzymem.

V první formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I):

E^cp-A (I) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem konjugovaný k A a vybraný z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-; a

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- nebo -Sar-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Xp2 je aminokyselina;

··

4-4

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná u Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O-(Ci-C₄ alkyl)-Tyr, O-(fenyl (Ci-C₄ alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylové kyselina;

Cap je N-terminálni skupina vybraná z R-; Xa4~; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je amino uzavírající skupina;

a ..

A je antineoplastická látka.

(2) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde A je doxorubiein, doxorubicinový derivát nebo doxorubicinový analog.

(3) V přednostnější formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde A je doxorubiein.

(4) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la):

nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde; E^cp je peptid štěpítelný enzymem vybraný z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa~;

• ·

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa~;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa~;

Cap-Xa2-Šar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-; a Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mime tikům;

Xa2 je aminokyselina;

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- nebo -Sar-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O-(Ci-C₄ alkyl)-Tyr, O-(fenyl (C1-C4 alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylová kyselina;

Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je vybráno z H₃CC(=O)-;

HOC (=0) - (CH_2vC (=0) kde v je 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0)

H₂N-(CH₂CH₂O)_t-CH₂C(=O)-, a

H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2, 3, nebo 4;

R¹-C(=O)-;

R¹-S (=0)₂-;

R^NHC (=0)-;

R^la-CH₂C (=0)-;

prolin substituoyaný pomocí -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný pomocí 0-1 R⁴; 2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

-(0=) C-fenyl -C(=0)-;

R¹ je C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH, metoxy nebo CO₂H;

fenyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OÉ, metoxy a -CO₂H; nebo

Ci-C₆ alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, Cr-Cs alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO2H, N(CH2CH2) 2N-R², SO3H; ·

C3-C6 cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, nebo acetyl;

R³ je H, C1-C4 alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

R⁴ je OH, Ci-Cg alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂) ₂N-R²;

C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;' ♦ · 99 » 9 9 » 9 9 99

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH; nebo

Cg-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a OH.

(5) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa~;

Cap-Paa.-Xa2-Gly-Xpl-ⁱXp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mimetikum;

Xa2 je aminokyselina;

Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Xp2 je aminokyselina;

Xp3 je aminokyselina;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, β-Ala, Cha, Oba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Phe, Bip, Tyr,

O-benzyl-Tyr; a

Cap jě N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina;

R je vybráno z H₃CC(=O)-;

HOC(=O)-(CH₂)vC(=O)-, kde vjel, 2, 3, 4, 5 nebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -, ♦ Β

HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0)

H₂N- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0)-, a

H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t~CH₂C (=0) kde t je 1, 2 nebo 3;

ϊύ-ϋ(=Ο)-;

R¹-S(=0) ₂-;

Í^-NHC^O)

R^la-CH₂C (=0) -;

prolin substituovaný pomocí -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný pomocí 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

-(0=) C-fenyl -C(=0)-;

R¹ je C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH, metoxy nebo CO₂H;

fenyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; nebo

Ci~C₆ alkyl substituovaný 0-4 R^la;

la je -OH, C1-C3 alkyl, C1-C4 alkoxy,

-CO₂H, N(CH₂CH₂)₂N-R², SO₃H;

C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH;

fenyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H2N(C2-C4 alkyl)-, acetyl (H)N(C2-C4 alkyl)-, nebo acetyl; R³ je H, C1-C4 alkyl, C3-C₆ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

4« ·· • * · • 9 ··· • 4 · · · • · 4 · • · · ·

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, C1-C4 alkoxy, -CO₂H, -N(CH₂CH₂) ₂N-R²;

C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH; nebo

C₆-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a OH.

(6) V přednostní formě vynález poskytuje Vzorcem (la), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(7) V přednostní formě vynález poskytuje vzorcem (la), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu vybraným z MMP-2 a MMP-9.

sloučeninu štěpitelnou definovanou matrixinem sloučeninu štěpitelnou definovanou matrixinem (8) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP14.

(9) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (la), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(10) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

Cap-Xa2-Giy-Xpl-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

99 » * · > · · ·* ·· • 9 9

9 9 99

9 9 9 9 • · · ·

99

Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mimetikum definované vzorcem:

kde R^b je vybráno z H, halogenu, Ci~C₆ alkylu, -OH, Ci~C₆ alkoxy a benzyloxy; a n je 2, 3, 4 nebo 5;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro) , Pro, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

Xpl je aminokyselina vybraná z Hof, Leu, Bip, Phe, nor-Leu, Tha, Phg, Val, Glu, Asn, Ser, Ala, homo-Tyr, Aze, 4-aza-Hof, O-(3pyridyl)-Tyr, O-(4-pyridyl.)-Tyr, O-benzyl-Tyr, O-benzyl-Thr, 0benzyl-Ser, O-metyl-Ser, O-alyl-Ser, 4-nitro-Hof, N-metyl-Leu, 0-{4pyridylmetyl)-Tyr, 4-hydroxyfenyl-Gly, fenylpropyl-Gly, styryl-Ala nebo 2 Nal;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

99

9 9

9 9

9 9 · 9 * 99 9· • 9 ·« «

9 9 9 9

9 ·99 ·

9 9 9 9 ·

9 9 9 9

99 99 9

Xp3 je aminokyselina vybraná 2 Tyr, Ala, Ser, Leu, Hof, Arg, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Dpa, Gin, Glu, Gly, His, Hyp, Ile, Irg, Lys, Met, Orn, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp a Val;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, β-Ala, Cha, Cba, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, Abu, Alb, Iva, Nva a Phe;

Cap je N-terminální skupina vybraná z

R-; Xa4~;

a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg, Ala, Arg, Asn, Asp, β-Asp, Aze, Cha, Cys, Dpa, Gin, Glu, His, Hyp, Ile, Irg, Leu, Lys, Met, Orn, Phe, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, nebo Val;

R je vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃C0CH₂CH₂0CH₂C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

HO₂CCH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH2C (=0) -;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0) -;.

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) - ;

H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O)-;

O (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) -;

HO₂CCH₂C (CO₂H) (OH) CH₂C (=0)-;

HO₂CCH₂C (CH₃) (OH) CH₂C (=0)-;

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)-;

karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzensulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

• tt ·« » · · » tttttttt cyklobutylkarbonyl;

3- pyridinkarbonyl;

2-pyrazinkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolin a

4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

(11) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (Ia), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(12) V přednostní formě vynález poskytuje Vzorcem (Ia), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu vybraným z MMP-2 a MMP-9.

sloučeninu štěpitelnou definovanou matrixinem (13) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (Ia), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP14.

(14) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (Ia), kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(15) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (Ia) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Laa-; Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Leu-Laa-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Laa-; Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-; Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-; Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

	44	44	4 4 «4	4·
*	4	4	4 4	4 4	4 4	4
4	•	4 44	4	4	4 4	4
•
•	4	• 4	4	4	4 4	4
	44	44	44 4	444	4 4	44 4«

Cap-Gly-Leu-Xp2-Laa-; a Cap-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, nebo Npa;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Cha, Nle a Hol;

Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R je vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=O)

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) - ;

HO₂CCH₂0CH₂CH₂0CH₂C (=0)

H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

to

Λ «

• toto· *· · > » 99 99 • 9 99 9 9 9

9 9 9 • 9 9 9 9

999 999 99 9999

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCB₂CH₂OCH₂C (=0) - ; H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH_z) ₂NCH₂C (0) -;

H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0)

H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) - ;

O (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) -;

HO₂CCH₂C(CO₂H) (OH) CH₂C (=0)

HO₂CCH₂C(CH₃) (OH) CH₂C (=0) 2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2- karboxycyklopentyl-C(=0) karboxybenzyloxy;

4-metoxy-benzensulfonyl;

cyklopropylkarbonyl;

cyklobutylkarbonyl;

3- pyridinkarbonyl;

2-pyrazinkarbonyl;

tetrazolacetyl;

pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolin a

4- (2-(5, 6, 7, 8-tetrahydronaftenyl))butyl.

(16) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(17) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(18) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.

(19) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou

MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

** ·* * 0 · • 0 ·»· • · · 0 · • · · · • 0 00

00 *4 * · 0 0 0

0 · 0

0 0 0 ·

0 0 · • 04 00 «400 (20) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-rHof-Cha;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Nle;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Hol;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-;

Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, nebo Npa;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp a Tyr;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sap, Thr, Trp, Gya, Hca, Spa, • · • · ·· • · morfolinylpropyl-Gly, 0-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

R j e vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0)

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

2-karboxycyklopentyl-C(=0)a tetrazolacetyl.

(21) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu děfinovanou

Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpítelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(22) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(23) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (Ia)> kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.

(24) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (la), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(25) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

♦ · ·· • · • ·

E^cp je peptid štěpítelný enzymem vybraný z: Cap-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Leu~;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Cha;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Nle;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Hol;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-; a

Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

Xa2 je aminokyselina vybraná z

Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp a Tyr;

Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

• ·

R je vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

H3COCH2CH2OCH2C (=0)

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)

2-karboxycyklohexyl-C (=0)-;

2-karboxyčyklopentyl-C(=0)a tetrazolacetyl.

(26) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (Ia), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(27) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (Ia), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.

(28) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (Ia), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.

(29) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou

Vzorcem (Ia), kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.

(30) V další přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (Ia) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^op je peptid štěpitelný enzymem vypraný z:

Identifikační číslo sekvence: 185:

R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

4·

Identifikační číslo sekvence: 186: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 187: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 192: R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikační číslo sekvence: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 195: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 196:

R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 197:

R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 198:

• » ► ·· • · • · · · • · · * • · · ·· ····

R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 201: R-P-L-G-Hof-Y-Hol-¹; a

Identifikačni číslo sekvence: 202: R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R j e vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) - (CH₂) _VC (=0)-;

kde v je 1, 2, 3, 4, 5, nebo 6;

H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0)

HO₂CCH₂O- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0)

H₂N- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0) -; a

H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0)-; kde v je 1, 2, 3, nebo 4;

R^x-C(=0)-;

R^x-S (=0) ₂-;

R^X-NHC (=0) -;

R^Xa-CH₂C (=0)-;

prolin substituovaný -OR³;

C1-C4 alkyl substituovaný 0-1 R⁴;

2-karboxyfenyl-C(=0)-; a -(0=)C-fenyl-C(=0)-;

R^x je C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;

··· · « « • · ·· • · '

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH, metoxy nebo CO₂H;

fenyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; nebo

Ci~C₆ alkyl substituovaný 0-4 R^la;

R^la je -OH, Ci-Cs alkyl, C5-C4 alkoxy, -CO2H, N (CH2CH2) 2N-R², SO3H;

C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH;

fenyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

R² je H, H₂N(C₂-C₄ alkyl)-, acetyl (H)N(C₂-C₄ alkyl)-, nebo acetyl;

R³ je H, C_x-C₄ alkyl, Ο₃-Οβ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

R⁴ je OH, C1-C3 alkyl, C_x-C₄ alkoxy, -CO₂H, -N (CH₂CH₂·) ₂N-R²;

C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH; nebo

C₆-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a OH.

(31) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

Identifikační číslo sekvence: 185:

·· ·· • · • · • · • · •to ···· ·

··· *

R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikační číslo sekvence: 186: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 187: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvencé: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 191: R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 192: R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikační číslo sekvence: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 195:

R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 197:

R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

» · · «

I · · « «· ·· • · ··· ·

Identifikační číslo sekvence: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 201:

R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikační číslo sekvence: 202:

R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

R j e vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) —;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

HO₂CCH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -; H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0) -;

H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -; H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) - ;

(CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) -;

HO₂CCH₂C(CO₂H) (OH) CH₂C (=0)-; HO₂CCH₂C(CH₃) (OH)CH₂C (=0)-; 2-karboxycyklohexyl-C(=0)-; 2-karboxycyklopentyl-C(=0)-; karboxyben zy1oxy;

........

4-metoxy-benzensulfonyl; cyklopropylkarbonyl; cyklobutylkarbonyl;

3- pyridinkarbonyl;

2-pyrazinkarbonyl; tetrazolacetyl; pivaloyl;

metoxyacetyl;

hydroxyprolin a

4- (2-(5, 6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

(32) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, kde;

E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

Identifikační číslo sekvence: 185:

R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

Identifikační číslo sekvence: 186:

R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 187:

R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 188:

R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 189:

R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 190:

R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 191:

R-P-L-G-Hof-Y-L-;

Identifikační číslo sekvence: 192:

R-P-L-G-Hof-E-L-;

Identifikační číslo sekvence: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 195: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 197:

R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

Identifikační číslo sekvence: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

Identifikační číslo éekvence: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

Identifikační číslo sekvence: 201:

R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

Identifikační číslo sekvence: 202:

R-P-L-G-Hof-E-Ηθΐτ;

R je vybráno z:

H₃CC(=O)-;

HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

HOC (=0) CH2CH2CH2CH2C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH2C (=0)-; a tetrazolacetyl.

(33) V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu vybranou z:

Identifikační číslo sekvence: 1: 4-metoxy-benzensulfonyl-3-Ala-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 2:

1,2-C₆H₄ (C0₂-H-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 3: acetyl-P-L-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 4:

acetyl-P-(R)L-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 5:

acetyl-P-(β-Ala)-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 6:

acetyl-P- (γ-Abu) -G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 7:

acetyl-P-Cha-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 8:

P-L-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 9:

MeOCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 10:

MeOCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox »· ·· • * · » · • · · • « · »· ····

Identifikační číslo sekvence: 11: H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 12: AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence:13:

AcN (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 17: Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 18: acetyl-P-H-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 19: acetyl-P-Orn-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 20: acetyl-P-Dap-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 21: acetyl-P-Cit-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 22: acetyl-P-L-G-(0-(3-pyridyl-))Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 23: acetyl-P-L-G-(0-(4-pyridyl-))Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 26:

Identifikační číslo sekvence: 24: acetyl-P-L-G-(4-aza-)Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 25:

acetyl-P-L-G-(0-benzyl-)S-L-Dox «< *· • · · φ » ··* • · · • * · «« ·· φ φ • · φ φ ···

Cbz-P-L-G-(Ο-{4-pyridylmetyl-))Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 27: acetyl-P-L-Sar-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 28: acetyl-P-(N-Me-)L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 29: acetyl-P-L-G-(N-Me-)L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 30: acetyl-Hyp-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 31: acetyl-Tzc-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 32: acetyl-(Homo-P)-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 33: acetyl-(Homo-P)-L-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 34: acetyl-(Homo-P)-Orn-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 35: acetyl-Nipekotát-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 36: acetyl-Aze-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 37: acetyl-Chg-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 38: acetyl-P-valerolaktam-G-L-L-Dox • 0 ** • ♦

000 ♦ · 0« • 0 · < 0 0 0«

· · »0 0000

Identifikační číslo sekvence: 41: acetyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 42: cyklopropylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 43: cyklobutylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 44: pívaloyl-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 45: Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 46: acetyl-P-L-G-L-A-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 47: acetyl-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 48: Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 49: H₃CC(=0)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 50:

AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -P-L-G-L-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 51:

acetyl-P-L-G-L-S-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 52:

acetyl-G-P-L-G-L-L-Dox • to «

toto toto • to to • to * ·<

·· ·· toto ·♦ • · * to · J • ♦ ·

Identifikační číslo sekvence: 53:

(CH₂CH2)NCH2CH₂NHC (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 55: acetyl-P-L-G-L-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 58: CbZ-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 59: AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH_z) ₂NCH₂C (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 60: H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -O-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 61: Dmg-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 62: acetyl- y-E-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 65: metoxyacetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 66: Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 67: Dmg-P-L-G-Phg-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 68: Dmg-P-L-G-(0-I?enzyl-Y)-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 69:

Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 77:

·« • ti·

9« • a • ··« • · · * · · »« ·*

acetyl-G-P-Q-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 78: acetyl-G-P-R-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 82: acetyl-G-P-L-G-V-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 83: acetyl-G-P-L-G-Hof-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 84: acetyl-G-P-L-A-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 85: Dmg-P-I-G-Bip-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 86: Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 87: acetyl-G-P-V-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 88: Dmg-P-I-G-L-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 89: Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 91: acetyl-G-P-L-G-E-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 92: Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 95: Dmg-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox *· »

«»·» • · . · ·« ·« • · . · • · • · »· ·« »· • » · • · ♦ • · ·

«. ····

Identifikační číslo sekvence: 96:

Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 97:

Dmg-P-R-G-Bip-R-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 98:

acetyl-G-P-L-G-N-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 99:

acetyl-G-P-L-G-S-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 100:

acetyl-G-P-L-G-(4-hydroxy-fenyl-G)-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 101:

acetyl-P-L-G-Hof-H-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 102:

acetyl-P-L-G-Hof-A-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 103:

acetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox.

Identifikační číslo sekvence: 104:

acetyl-P-L-G-Hof- (morfolinylpropyl-G)-t-Dox

Identifikační číslo sekvence: 105: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 106: sukcinyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 107:

acetyl-P-L-G-Hof-(O(4-pyridylmetyl)-Y)-L-Dox ·· ♦ · * •to • to·· toto·· ··« »·♦ **

Identifikační číslo sekvence: 108:

acetyl-P-L-G-(homo-Y)-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 109: acetyl-P-L-G-(4-aza-Hof)-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 110: acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-)-Y)-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 111: acetyl-P-L-G-(fenylpropyl-G)-Y-L-Dpx

Identifikační číslo sekvence: 112: acetyl-P-L-G-(styryl-A)-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 113: acetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 114: acetyl-P-(N,N-dimetyl-K)-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 115: acetyl-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 116: acetyl-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 117: Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 118: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 119:

y-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 120:

acetyl-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 121: acetyl-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 122: acetyl-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 123: acetyl-P-Orn-G-L-Y-L~Dox

Identifikační číslo sekvence: 124: acetyl-P:(4-aza-F)-G-L,Y-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 125: acetyl-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 126: acetyl-P-L-G-Hof-K-L-Dox

Identifikační číslo sekvence: 127: acetyl-P-L-G-Hof-(Ν,Ν-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 128: Dmg-P-L-G-Hof-(Ν,Ν-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 129: Peg-P-L-G-Hof-(Ν,Ν-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 130: acetyl-y-E-P-L-G-Hof- (Ν,Ν-dimetyl-K) -L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 131: γ-E-P-L-G-Hof-(Ν,Ν-dimetyl-K)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 132,:

acetyl-P-L-G-Hof-(Ν,Ν-dimetyl-K)-Nle-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 133:

acetyl-P-L-G-Hof-(N, N-dimetyl-K)-Cha-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 134: acetyl-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 135: acetyl-y-E-P-L-O-Hof-Cit-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 136: acetyl-P-L-G-Hof-Q-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 137: acetyl-P-L-G-Hof-(4-aza-F)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 138: acetyl-P-L-G-Hof-V-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 139: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-E-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 140: acetyl-G-Aze-L-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 141: acetyl-(4-fluoro-F)-L-G-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 142: acetyl-(homo-P)-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 143: acetyl-(homo-P)-L-G-Hóf-Orn-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 144:

acetyl-Aze-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 145:

acetyl-Aze-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 154:

acetyl-P-L-G-L-L-A-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 155:

acetyl-P-L-G-L-Y-A-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 156:

acetyl-G-P-L-G-L-A-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 157:

acetyl-P-L-G-L-A-A-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 158:

acetyl-P-L-G-L-A-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 159:

acetyl-P-L-G-L-L-S-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 160:

acetyl-P-L-G-L-L-L-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 161:

Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 162:

Dmg-P-R-G-Phg-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 163:

acetyl-G-P-L-G-L-R-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 164:

4-(2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl-G-Hof-Y

L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 165:

acetyl-P-L-G-Hof-(N-metylpiperazinpropyl-G)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 166: tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 167: tetrazolacetyí-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 168: tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 169: P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 170: acetyl-P-L-G-Hof-(homoY)-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 171: acety1-P-AzaHof-G-AzaHof-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 172: acetyl-P-L-G-(O-allyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 173: acetyl-P-L-G-(4-nitro-Hof )-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 174: acetyl-P-L-G-Hof-AzaHof-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 175: acetyl-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 176: acetyl-γ-E-P-L-G- (O-benzyl-S) -Y-L-Dqx;

Identifikační číslo sekvence: 177:

acetyl-γ-E-P-L-G- (O-benzyl-S) -Y-Nle-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 178:

3-pyridinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 179:

2-pyrazinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 180:

acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 182:

acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 183:

acetyl-P-L-G-Thr(O-Benzyl)-Y-L-Dox;

Identifikační číslo sekvence: 184:

pcetyl-y-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-L-Dox;

(34) V další přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu vybranou z:

Identifikační číslo sekvence: 39: acetyl-G-P-L-G-L-F-Dox

Identifikační číslo sekvence: 40: acetyl-G-P-L-G-F-F-Dox

Identifikační číslo sekvence: 54: acetyl-G-P-L-G-L-Y-Dox

Identifikační číslo sekvence: 56: acetyl-G-P-L-G-Bip-F-Dox

Identifikační číslo sekvence: 57:

acetyl-G-P-L-G-Nle-F-Dox • · • * · • · · • · · • · ·· · ·

Identifikační číslo sekvence: 63: acetyl-G-P-L-G-Tha-F-Dox

Identifikační číslo sekvence: 64: acetyl-G-P-L-G-Phg-F-Dox

Identifikační číslo .sekvence: 70: acetyl-G-P-L-G-F-Bip-Dox

Identifikační číslo sekvence: 71: acetyl-G-P-L-G-L-Bip-Dox

Identifikační číslo sekvence: 72: acetyl-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox

Identifikační číslo sekvence: 73: acetyl-G-P-L-G-F-A-Dox

Identifikační číslo sekvence: 74: acetyl-G-P-L-G-Bip-A-Dox

Identifikační číslo sekvence: 75: acetyl-G-P-L-G-L-A-Dox

Identifikační číslo sekvence: 76: acetyl-G-P-L-G-(O-benzyl-Y)-F-Dox

Identifikační číslo sekvence: 79: acetyl-G-P-L-G-L-(4-pyridyl-A)-Dox

Identifikační číslo sekvence: 80: acetyl-G-P-L-G-L-R-Dox

Identifikační číslo sekvence: 81: acetyl-G-P-L-G-L-W-Dox

Identifikační číslo sekvence: 90:

acetyl-G-P-L-G-L-(O-benzyl-Y)-Dox

Identifikační číslo sekvence: 93: acetyl-G-P-L-G-L-E-Dox

Identifikační číslo sekvence: 94: acetyl-G-P-L-G-Bip-E-Dox

Identifikační číslo sekvence: 146: acetyl-P-L-G-L-Y-G-Dox

Identifikační číslo sekvence: 147: acetyl-P-L-G-Hof-Y-G-Dox

Identifikační číslo sekvence: 148: acetyl-P-L-G-L-Y-(β-homo-L)-Dox

Identifikační číslo sekvence: 149: acetyl-P-L-G-Hof-Y- ( β-homo-L)-Dox

Identifikační číslo sekvence: 150: acetyl-P-L-G-L-Y- ( β-Ala) -Dox

Identifikační číslo sekvence: 151: acetyl-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox

Identifikační číslo sekvence: 152: acetyl-P-L-G-L-Y-Aph-Dox

Identifikační číslo sekvence: 153: acetyl-P-L-G-L-Y-Amh-Dox

Identifikační číslo sekvence: 181: acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hos-Dox (35) V druhé formě vynález poskytuje farmaceutický preparát obsahující sloučeninu definovanou Vzorcem (I) nebo (la) a farmaceuticky přijatelný nosič.

(36) V třetí formě vynález poskytuje způsob léčby savce postiženého nádorem, kterýžto způsob zahrnuje podání terapeuticky účipného množství sloučeniny definované Vzorcem (I) nebo (la) savci postiženému nádorem.

(37) V přednostní formě vynález poskytuje způsob léčby savce postiženého nádorem, kde nádorem je nádor prsu, vaječníku, mozku, žaludku, plic, tlustého střeva, prostaty nebo jater, nebo kde nádorem je leukémie, lymfom, karcinom, sarkom nebo melanom.

(38) V čtvrté formě vynález poskytuje způsob dopravení sloučeniny k buňkám savce postiženého nádorem, kterýžto způsob zahrnuje kontakt buněk savce postiženého nádorem se sloučeninou definovanou Vzorcem (I) nebo (la), kde tento kontakt je uskutečněn v přítomnosti peptidázy zahrnující matrixin.

(39) V přednostní formě vynález poskytuje způsob léčby, kde nádorem je nádor prsu, vaječníku, mozku, žaludku, plic, tlustého střeva, prostaty nebo jater, nebo kde nádorem je leukémie, lymfom, karcinom, sarkom nebo melanom.

(40) V páté formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I) :

E^cp-A (I) obsahující peptid štěpitelný enzymem, E^cp, konjugovaný s antineoplastickou látkou A.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde antineoplastickou látkou je antracyklin, vinca alkaloid, bleomycin, mitomycin, taxan, cytotoxický nukleotid, pteridin nebo podofylotoxin.

·· • · ·

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde antineoplastickou látkou je antracyklin.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde antineoplastickou látkou je antracyklin doxorubicin.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I) , kde aminokyselinová sekvence je vybrána ze skupiny složené z PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLYAL, PLGLAAL, PLGLLSL, PLGLLAL, PLGLLYL, GPLGL, GPLGLL, PLGHof, PhG-(O-benzyl)-S, PLGHofYL, PLG-(Obenzyl)-SYL, PLGHofEL a GPLGLAL.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde aminokyselinová sekvence je vybrána ze skupiny složené z PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLLAL, PLGLLYL, GPLGL, GPLGLL a GPLGLAL.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde peptid štěpitelný enzymem obsahuje aminokyselinovou sekvenci rozpoznávanou peptidázou, kde peptidázou je matrixin.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde peptidázou je matrixin obsahující MMP-2, MMP-9, nebo MMP14.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I), kde látkou je doxorubicin, a kde peptid štěpitelný enzymem obsahuje aminokyselinovou sekvenci vybranou ze skupiny složené z PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLLAL, PLGLLYL, PLGLYAL, GPLGL, GPLGLL a GPLGLAL.

V přednostní formě vynález poskytuje sloučeninu definovanou Vzorcem (I) , kde látkou je doxorubicin, a kde peptid štěpitelný enzymem

9 9 9 · * * 9 9 9 ··· «·· »· ··»· obsahuje aminokyselinovou sekvenci rozpoznávanou peptidézou vybranou ze skupiny obsahující MMP-2, MMP-9, nebo MMP-14.

V další přednostní formě vynález poskytuje farmaceutický preparát obsahující sloučeninu definovanou Vzorcem (I) a farmaceuticky přijatelný nosič.

V další přednostní formě vynález poskytuje způsob dopravení sloučeniny k buňkám savce postiženého nádorem, kterýžto způsob zahrnuje kontakt buněk savce postiženého nádorem se sloučeninou definovanou Vzorcem (I), kde tento kontakt je uskutečněn v přítomnosti peptidázy zahrnující matrixin.

V další přednostní formě vynález poskytuje způsob dopravení sloučeniny k buňkám savce postiženého nádorem, kde nádorem je nádor prsu, vaječníku, mozku, žaludku, plic, tlustého střeva, prostaty nebo jater, nebo kde nádorem je leukémie, lymfom, karcinom, sarkom nebo melanom.

V další přednostní formě vynález poskytuje způsob dopravení sloučeniny definované Vzorcem (I) k buňkám savce postiženého nádorem, kde antineoplastickou látkou je antracyklin, vinca alkaloid, bleomycin, mitomycin, taxan, cytotoxický nukleotid, pteridin nebo podofylotoxin.

V další přednostní formě vynález poskytuje způsob dopravení sloučeniny definované Vzorcem (I) k buňkám savce postiženého nádorem, kde antineoplastickou látkou alkaloid, bleomycin, mitomycin, taxan, pteridin nebo podofylotoxin, a kde doxorubicin.

je antracyklin, vinca cytotoxický nukleotid, látkou je antracyklin

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, kde peptid štěpitelný enzymem je selektivně rozpoznáván matrixinem zahrnujícím MMP-2, MMP-9 a/nebo MMP-14 a neselektivně rozpoznáván enzymem, proteinem aktivujícím lidské fibroblasty (FAPa).

4 •4 44 4 4

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, kde aminokyselina Laa není prolin nebo prolomový analog, kde substituenty na alfa dusíku a substituenty na alfa uhlíku tvoří cyklickou skupinu.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že amino uzavírací skupina, Cap, není polyhydroxyalkanoyl, což znamená, kde hydroxyalkanoyl uzavírací skupiny jsou omezeny na skupiny s jedním hydroxyl substituentem na alkanoylové skupině.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, kde peptid štěpitelný enzymem je selektivně rozpoznáván matrixinem zahrnujícím MMP-2, MMP-9 a/nebo MMP-14 a neselektivně rozpoznáván enzymem Trouázou.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že aminokyselina Xa2 je přirozená aminokyselina.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že Cap není nepřirozená aminokyselina nebo sukcinyl.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny, výše, kde peptid štěpitelný enzymem je selektivně rozpoznáván matrixinem zahrnujícím MMP-2, MMP-9 a/nebo MMP-14 a Yléselektivně rozpoznáván antigenem specifickým pro prostatu (PSA) .

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že E^cp neobsahuje následující dipeptidovou vazbu: -Tyr-Ser-; -Tyr-Thr-; -Phe-Ser-; -Gln-Ser-; Gln-Thr-; a -Asn-Ser-.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že E^cp není -Gly-Gly-Arg-Leu-,

9 »

9 ·· · ♦

··· · ♦ 9 · · · «· · · • · 9 ·♦ *·

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že E^op není -Gly-Val-Phe-Arg

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že E^cp není -Ala-Pro-Gly-Leu

Také zahrnúty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za . předpokladu, že E^op není 2-thienylalanin—Gly-AlaLeu-.

Také zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že E^cp není 2-naftylalanin-Gly-Ala-LeuTaké zahrnuty v předkládaném vynálezu jsou sloučeniny, jak jsou uvedeny výše, za předpokladu, že E^op není -Gly-Leu-Gly-Leu-.

Antineoplastické látky, jak jsou zde použity, znamenají látky, které mají cytotoxický účinek na nádorové buňky; tyto látky zahrnují sloučeniny, jako jsou například alkylační látky, tubulin vázající látky a antiproliferační látky, stejně tak jako bílkoviny, například tumor nekrotizující faktor, intetferony a různé růstové faktory, které mohou negativně ovlivnit růst nádorových buněk. Specifické antineoplastické látky vhodné pro použití zde zahrnují bez omezení: antracykliny, bleomycin, vinca alkaloidy (například vinkristin a vinblastin)), mitomycin, cytotoxické nukleotidy, taxany (například paclitaxel a taxoter (viz DeGroot), pteridiny, podofylotoxiny a deriváty kyseliny listové (viz Lu) . Tyto sloučeniny mohou být modifikovány, například ke zvýšení potenciální terapeutické účinnosti sloučenin, nebo k usnadnění jejich konjugace s peptidy v různých místech jejich struktury prostředky dobře známými osobám znalým oboru.

Jak je zde používáno, zahrnují antineoplastické látky, kterými jsou antracykliny, doxorubicin, deriváty doxorubicinu a analoga doxorubicinu (adriamycin), daunotubicin (daunomycin), epirubjcin, detorubicim, idarubicin, esorubicin a karminorubicin, stejně tak

0« ··

00 « 0 0 « 0 0 00 « «

0 0 ·♦ 0 0 ♦

• 00 « 0 *

0·

0 0 » 00 0 0 jako mitoxantron. Přednostním antracyklinem je doxorubicin, odkazovaný zde jako Dox nebo dox.

Peptidy štěpitelné enzymem zahrnují aminokyselinové sekvence rozpoznávané a štěpené membránově vázanými a/nebo buňkami dekretovanými peptidázami, které jsou enzymy štěpícími peptidy dobře známými v oboru jako rozpoznávající konkrétní aminokyselinové sekvence a štěpícími řečené sekvence mezi specifickými aminokyselinami (viz například Ames a Quigley et al.; Knauper et al., McGeehan et al., Nagase et al., Nakajima etal., Oraje et al.). Tyto enzymy zahrnují například a bez omezení metaloproteinázy matrice neboli MMP (také zde nazývány jako matrixiny), například MMP-2, MMP-9, MMP-14, serinové proteázy, cysteinové proteázy, elastázu, stromelysiny, lidské kolagenózy, katepsiny, granzymy, dipeptidyl peptidázy, plasminy, plasminogen aktivátory, lysozymy a například aminopetidázu P, aminopeptidázu A a aminopeptidázu N. Peptidy s vhodnou substrátovou selektivitou pro MMP vhodnou pro konjugaci s cytotoxickými látkami zde zahrnují například a bez omezení peptidy mající aminokyselinové sekvence: PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYL, PLGLAL, PLGLALL, PLGLLLL, PLGLLYL, PLGLYAL, PLGLAAL, PLGLLSL, GPLGL, GPLGLY, GPLGLL, GPLGLAL, DPLGL, PEQGL, PQGL a PLGLDpa-AR a podobné sekvence (Nagase). Každá z těchto aminokyselinových sekvencí zahrnuje jakoukoli z různých modifikovaných aminokyselin, například hydroxyprolín zde popsaný, a každá ze sekvencí je volitelně modifikována jakoukoli z amino nebo karboxy terminálních modifikací, například acetyl zde popsaný. Tedy navíc k zde uvedeným specifickým aminokyselinovým sekvencím, poskytuje tento vynález odpovídající verze obsahující jednu nebo více přirozených, modifikovaných, nebo nepřirozených aminokyselin, a jednu nebo více terminálních modifikací, například tento vynález poskytuje peptidy obsahující aminokyselinovou sekvenci PLGLYL, stejně tak jako HypPLGLYL, AcPLGLYL a AcHypPLGLYL.

Jak je zde používáno, je termín matrixin zamýšlen, aby genericky popsal metaloproteinázy matrice neboli MMP jako třídu enzymů, které rozpoznávají peptidy sloučenin, které jsou předmětem vynálezu, ♦

• 4 ·· ·4

4 4

4 · • · «

4 4 •4 4444 štěpitelné enzymem. Přednostními MMP jsou MMP-2, MMP-9 a/nebo MMP14. Matrixin nepopisuje enzym neprilysin.

Jak je zde používáno, vazba štěpítelná matrixinem je zamýšlena, aby popsala amidovou vazbu peptidu štěpitelného enzymem, který podléhá proteolytickému štěpení matrixinem in vitro, jak je zde definováno. Je zamýšleno, že matrixiny, jak jsou zde definovány, jsou přednostně selektivní pro vazbu štěpitelnou matrixinem. Je také rozuměno, že proteolytická degradace peptidu štěpitelného enzymem se může vyskytnout v jakékoli vazbě na peptidu štěpítelném enzymem po podání sloučeniny in vivo.

Peptidy štěpitelné enzymem musí obsahovat minimální počet aminokyselin, jejich substitucí nebo modifikací, pro rozpoznání a štěpení odpovídající peptidázou (např. PLGL, AA) . Aminokyselinové sekvence peptidů mohou alternativně obsahovat jednu nebo více aminokyselin navíc k aminokyselinám minimálně nezbytných pro štěpení zprostředkované peptidázou (například peptidy obsahující v pořadí aminokyseliny P, L, G a L mohou mít aminokyselinovou sekvenci PLGLL a peptidy obsahující aminokyselinovou sekvenci AA mohou mít skutečně sekvenci AAPV). Takové dodatečné aminokyseliny jsou zahrnuty v peptidech na amino a/nebo karboxy terminálních koncích pro celou řadu důvodů dobře známých osobám běžně znalých oboru, kteří se seznámí s metodikou tohoto vynálezu, například k dalšímu snížení dostupnosti sloučenin, ke kterým je peptid konjugován pro buňky nešekretující peptidázu. Navíc aminokyselinová sekvence zůstávající na cytotoxické látce po zahájení štěpení peptidázou musí být složena ze sekvencí, které mohou být odstraněny nebo zpracovány buněčnými aminopeptidázami po štěpení peptidázou sdruženou s nádorem, (například LL-Dox nebo LAL-Dox).

Míní se, že sloučeniny, které jsou předmětem předkládaného vynálezu a které jsou konjugovány k peptidům štěpítelným enzymem a rozpoznávaných a štěpených metaloproteinázami matrice MMP-2, MMP-9 a/nebo MMP-14 rozpoznávají konkrétní aminokyselinové sekvence a štěpí řečené sekvence obsahující glycin nebo sarkocin v místě štěpení. Proto peptidy štěpitelné enzymem, které jsou předmětem • a • a a

»· ♦

··« ··« aa aaaa

předkládaného vynálezu, obsahují dipeptidy -Gly-Xpl- nebo -Sar-Xplv místě štěpení, kde Xpl je aminokyselina, která tvoří vazbu s Gly nebo Sar štěpitelnou volným matrixinem neboli metaloproteinázou matrice. Přednostní příklady Xpl zahrnují, ale nejsou omezeny na Leu, Hof, azaHof, Ser (Ometyl) a Ser (Obenzyl). Navíc k výše uvedeným dipeptidům se míní, že MMP-2, MMP-9 a/nebo MMP-14 rozpoznávají a štěpí aminokyselinové sekvence -Paa-Xaa-Gly-Xpl- a ΡΑΑ-Xaa-Sar-Xpl-, kde Paa je prolin, derivát prolinu nebo prolinové mimetikum a Xaa je aminokyselina. Přednostní příklady Paa zahrnují, ale nejsou omezeny na Pro a Hyp. Navíc k metaloproteinázám matrice (MMP) MMP-2, MMP-9 a MMP-14 uvedených výše zamýšlí předkládaný vynález ve způsobu cílení za použití konjugátu s cytotoxickým peptidem také použití matrixinů MMP-13 a MMP-8. Páry enzymových/aminokyselinových rozpoznávacích sekvencí zahrnují například MMP-13 rozpoznávající sekvenci PLGL (viz například Knauper et al.) a MMP-8 rozpoznávající sekvence AAPF nebo AAPM, obzvláště ty, kde tyto sekvence byly modifikovány v oblasti N-konce sukcinylem nebo metoxysukcinylem (viz například Nakajima et al.). Obsah těchto popisů je zde začleněn jako reference.

Takové peptidy, stejně tak jako další peptidy štěpitelné enzymem, včetně peptidů obsahujících substituované, modifikované nebo přirozené aminokyseliny v jejich sekvencích, stejně tak jako peptidy modifikované na jejich amino nebo karboxy konci, jsou vytvořeny z jejich komponentních aminokyselin pomocí řady způsobů dobře známých osobám běžně znalých oboru a připraveny za použití snadno dostupných materiálů a vybavení (viz například The Practice of peptide synthesis (2nd ed.), M. Bodanskzy a A. Bodanskzy, SpringerVerlag, New York, NY (1994), přičemž obsah této publikace je tímto zde začleněn jako reference). Tyto metody zahrnují například a bez omezení: syntézu na pevné fázi za použití protokolu Fmoc (viz například Change a Meienhofer, Int. J. Pept. Protein Res. 11:246-9 (1978)). Další dokumenty popisující syntézu peptidů zahrnují například a bez omezení: Miklos Bodamský, Peptide Chemistry, A Practical Textbook ISpringer-Verlag, N.Y; Peptide Synthesis Protocols, Michael W. Pennington a Ben M. Dunn editors, 1994, Humana Press Totowa, N.tJ.

• · φ · · ·· *

4*

Jak je zde popsáno výše, peptidy štěpitelné enzymem obsahují aminokyselinovou sekvenci, která slouží jako rozpoznávací místo pro peptidázu schopnou neštěpení peptidu. Aminokyseliny zahrnující peptidy štěpitelné enzymem mohou zahrnovat přirozené, modifikované nebo nepřirozené aminokyseliny, kde přirozené, modifikované nebo nepřirozené aminokyseliny mohou být buďto v D nebo L konfiguraci. Přirozené aminokyseliny zahrnují aminokyseliny alanin, cystein, kyselinu aspartovou, kyselinu glutamovou, fenylalanin, glycin, histidin, izoleucin, lysin, leucin, methionin, asparagin, prolin, glutamin, arginin, serin, threonin, valin, tryptofan a tyroxin. Přirozené aminokyseliny, jak jsou zde používány, mají následující zkratky:

Jednopísměnový kód Třípísmenový kód Název

A	Ala	Alanin
C	Cys	Cystein
D	Asp	Kyselina aspartová
E	Olu	Kyselina glutamová
F	Phe	Fenylalanin
G	Gly	Glycin
H	His	Histidin
1	Ile	Isoleucin
K	Lys	Lysin
L	Leu	Lučin
M	Met	Methionin
N	Asn	Asparagin
P	Pro	Prolin
Q	Gin	Glutamin
R	Arg	Arginin
S	Ser	Serin
T	Thr	Threonin
u	Scy	Selenocystein
v	Val	Valin
w	Trp	Tryptofan
Y	Tyr	Tyroxin
Peptidy štěpitelné	enzymem mohou	také obsahovat celo	řadu
nepřirozených nebo	modifikovaných	aminokyselin vhodných	pro
substituci do peptidu	podle vynálezu	štěpítelného enzymem.	Úplný

seznam nepřirozených aminokyselin je uveden v Roberts a Vellacio,

The Peptides, Sv. 5, 341-449 (1983 Academie Press, New York, a je tímto zde začleněn jako reference pro tento účel. Příklady

0« ·· » 0 · aminokyselin zde použitých «· »· • · · • · · ·· • · * · · • · · · • 0 ·· •0 ···· nepřirozených nebo modifikovaných zahrnují bez omezení:

Třípísmenový kód Název

Aaa

Aad

Aan

Abu yAbu

Aca

Acp

Agn

Ahe

Ahx

Aib

3-Aib β-Ala aHyl alle

Amh

Aph

Apm

App

Asu

Aze

Bal

Bas

Bip

Bly

Bua

Bux

Cap

Cba

Cha

Chg

Cit

Cpa

Cta

Cya

Dab

Dap

Dbu

Dpa

Dmg

Bpm

Dpr

Edc alfa-aminokyselina

2-aminoadipová kyselina (2-aminohexanedioová kyselina) alfa-asparagin

2-aminobutanová kyselina neboli 2-aminomáselná kyselina 4-aminomáselná kyselina

2-aminokaprinová kyselina (2-aminodekanová kyselina) 6-aminokapronová acid alfa-glutamin

2- aminoheptanová kyselina 6-aminohexanová kyselina alfa-aminoisomáselná kyselina (2-aminoalanin)

3- aminoisomáselná kyselina beta-alanin allo-hydroxylysin allo-isoleucin

4- amino-7-metylheptanová kyselina 4-amino-5-fenylpentanová kyselina

2-aminopimelová kyselina (2-aminoheptanedionová kyselina) gamma-amino-beta-hydroxybenzenpentanová kyselina 2-aminosuberová kyselina (2-aminooctanediová kyselina)

2- karboxyazetidin beta-alanin . beta-aspartová kyselina Bifenylalanin

3,6-diaminohexanová kyselina (beta-lysin) butanová kyselina

4- amino-3-hydroxybutanová kyselina gamma-amino-beta-hydrpxycyklohexanpentanová kyselina) cyklobutyl alanin

Cyklohexylalanin Cyklohexylglycin N5-aminokarbonylornitin cyklopentyl alanin cyklopropyl alanin

3- sulfoalanin neboli cysteinová kyselina

2.4- diaminobutanová kyselina diaminopropionová kyselina

2.4- diaminomáselná kyselina difenyl alanin

N,N-dimetylglycin diaminopimelová kyselina

2,3-diaminopropanová kyselina nebo 2,3-diaminopropionová kyselina

5- etylthiocystein »* «· • » • « • · • · ·· ··»» »

»· ··♦ ·· ··· «♦ ·· » · · • · · · « ·« » «♦ ··

EtAsn

EtGly

Faf

Fph

Ggu

Gla

Glc

Glp

Har

Hca

Hcy

Hhs

Hiv

Hof

Hol

Hop

Hos

Hse

Hva

Hyl

Hyp lne

Iqc

Iva

Lac

Maa

Mba

MeGly

Mhp

Mpa

Nle

Npa

Nty

Nva

Oaa

Om

Pen

Phg

Píp

Sar

Spa

Spg

Sta

Tha

Tmi

Tza

Tzc

Und

N-etylasparagin

N-etylglycin

4-aza-fenylalanin

4- fluoro-fenylalanin gama-glutamová kyselina nebolí (γ-Ε) neboli (γ-Glu) gamma-karboxyglutamová kyselina hydroxyoctová kyselina (glycolová kyselina) pyroglutamová kyselina homoarginin homocysteinová kyselina homocystein homohistidin

2-hydroxyisovalerová kyselina homofenylalanin homoleucin neboli homo-L homoprolin neboli homQ-P homoserin homoserin

2-hydroxypentanová kyselina

5- hydroxylysin

4-hydroxyprolin

2- karboxyoktahydroiridol

3- karboxyisochinolin isovalin

2-hydroxypropanová kyselina (kyselina mléčná) merkaptooctová kyselina mercaptobutanová kyselina N-metylglycin neboli sarkosin

4- metyl-3-hydroxyprolin merkaptopropanová kyselina norleucin nipekotová kyselina nortyrosin norvalin omega-aminokyselina ornitin penicilamin (3-merkaptovalin)

2-fenylglycin

2-karboxypiperidin sarkosin (N-metylglycin)

2- amino-3-(4-sulfofenyl)propionová kyselina 1-amino-l-karboxycyklopentan statin (4-amino-3-hydroxy-6-metylheptanová kyselina)

3- thienylalanin epsilon-N-trimetyllysin

3-thiazolylalanin thiazolidin 4-karboxylová kyselina ne ident i f i kováno

Xaa

WiL

2Nal

jakákoli aminokyselina alfa-amino-2,4-dioxopyrimidinepropanová kyselina 2-naftylalanin

Peptidy štěpitelné enzymem mohou také obsahovat celou řadu modifikovaných aminokyselin, kde aminová nebo hydroxylová funkce aminokyseliny byla chemicky modifikována alkylovou skupinou, alkenylovou skupinou, fenylovou skupinou, fenylalkylovou skupinou, heterocyklickou skupinou, heterocyklickou alkylovou skupinou, karbocyklickou skupinou, nebo karbocyklickou alkylovou skupinou. Příklady substituentů pro chemické modifikace zahrnují, ale nejsou omezeny na metyl, etyl, propyl, butyl, allyl, fenyl, benzyl, pyridyl, pyridylmetyl a imidazolyl. ‘The Peptides Sv. 3, 3-88 (1981 uvádí četné vhodné funkční skupiny vytvářející postranní řetězce pro modifikaci aminokyselin a jsou zde začleněny pro tento účel. Příklady modifikovaných aminokyselin zahrnují, ale nejsou omezeny na N-metylované aminokyseliny, N-metylglycin, N-etylglycin, Netylasparagin, Ν,Ν-dimetyllysin, Ν'-(2-imidazolyl) lysin, 0metyltyrosin, 0-benzyltyrosin, O-pyridyltyrosin, 0pyridylmetyltyrosin, O-etylserin, O-t-butylserin, O-allylserin, Obenzylserin, O-metylthreonin, O-t-butylthreonin, O-benzylthreonin, O-metylaspartová kyselina, O-t-butylaspartová kyselina, 0metylglutamová kyselina, O-t-butylglutamová kyselina a Obenzylglutamová kyselina.

Peptidy štěpitelné enzymem mohou také obsahovat modifikovanou aminokyselinu, kterou je 4-azahydroxyfenylalanin (4-azaHof, nebo aza-Hof), 4-aminometylalanin, 4-pyridylalanin, 4-azafenylalanin, morfolinylglycin, piperazinylpropyl glycin, N-metylpiperazinylpropyl glycin, 4-nitro-hydroxyfenylalanin, 4-hydroxyfenylglycin nebo 2(4,6-dimetylpyrimidinyl) lysin.

Peptidy štěpitelné enzymem mohou také obsahovat aminokyselinu označenou Paa, kterou je neutrální aminokyselina prolin, nebo to může být modifikovaná nebo nepřirozená aminokyselina, která napodobuje prolin. Prolínová mimetika, jak je zde používáno, mají obecný vzorec • · • · · • · ·· •wwr» W ,kJ.CH₂)_n kde R⁵ je vybrán ze skupiny obsahující H, halogen, Ci~C6 alkyl, -OH, Οχ-Οβ alkoxy, hydroxymetyl-, fenoxy, a benzyloxý; R⁶ je vybrán ze skupiny obsahující H, Ci~C6 alkyl, -OH, Ci-C₆ alkoxy; a n je 2, 3, 4 nebo 5. Přednostní prolinová mimetika mají obecný vzorec

kde R⁵ je vybrán ze skupiny obsahující H, halogen, Ci-C₆ alkyl, -OH, Ci-C₆ alkoxy a benzyloxy; a n je 2, 3, 4 nebo 5. Přednostnější n je 3 nebo 4. Příklady prolinových mimetik jsou 4-hydroxyprolin, 5metylprolin, 4,4-dimetylprolin, 4-fluoroprolin, 4,4-difluoroprolin, 4-bromoprolin, 4-chloroprolin, 4-hydroxymetylprolin, 3hydroxyprolin, 3-hydroxy-5-metylprolin, 3,4-dihydroxyprolin, 3fenoxyprolin, 2-azetidinkarboxylová kyselina, 4-metyl-2azetidinkarboxylová kyselina, pípekolová kyselina, 5hydroxypipekolová kyselina a 4,5-dihydroxypipekolová kyselina. Přednostními příklady prolinových mimetik jsou 4-hydroxyprolin, 2azetidinkarboxylová kyselina a pípekolová kyselina. Příklady Paa zahrnují, ale nejsou omezeny na Pro, 4-hydroxyprolin, dihydroxyprolin, 2-karboxyazetidin, homo-Pro, cyklohexylglycin, 4fluorofenylalanin, nipekotovou kyselinu a thiazolidin 4-karboxylovou kyselinu.

Peptidy štěpitelné enzymem mají aminokyselinové sekvence, kde jedna nebo více aminokyselin jsou volitelně substituovány homologními nebo izoterickými aminokyselinami tak, že rozpoznávání a štěpení peptidů peptidy dekretovanými buňkami není nepříznivě ovlivněno. Například, a bez omezení, mohou být učiněny následující substituce (v každém • ·

·..··..· .:. .:. *· směru) : A - G; R - K - Orn; N-Q; D E; I-V-L-M - Nle; F - W Y; a S T.

Peptidy štěpitelné enzymem jsou navíc volitelně modifikovány na konci nekonjugovaném k antineoplastické látce uzavírací skupinou známou pod tímto názvem v oboru; například N-terminus peptidů štěpitelného enzymem je modifikován uzavírací skupinou N-terminu neboli amino uzavírací skupinou. Použití těchto modifikací má mnoho důvodů; například ke zvýšení stability peptidů v plazmě proti enzymatické degradaci neselektivními enzymy v plazmě, nebo ke zvýšení rozpustnosti.

Amino uzavírací skupiny jsou známé v obořu a vyskytují se v celé řadě formách, například různé acyl, thioacyl, alkyl, sulfony, fosfory a fosfinyl skupiny obsahující 1 až 20 uhlíkových atomů; kde substituenty na těchto skupinách mohou být buďto alkyl, aryl, alkylaryl atd., které mohou obsahovat heteroatomy O, S a N jako substituenty nebo řetězcové komponenty. Osoby znalí oboru peptidové syntézy znají celou řadu amino uzavíracích skupin. Gross a Meinhoffer, eds., The Peptides, Sv. 3; 3-88 (1981), Academie Press, New York, a Greene a Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 315-405 (1991), J. Wiley and Sons, lne., New York, uvádějí celou řadu vhodných amino chránících skupin užitečných pro zde předkládaný vynález a tyto publikace jsou zde začleněny pro tento důvod jako reference.

Navíc k výše uvedenému mohou být přednostnějšími amino uzavíracími skupinami alkanoyly, hydroxylované alkanoyly, polyhydroxylované alkanoyly, aroyly, hydroxylované aroyly, polyhydroxylované aroyly, cykloalkyloyly, heterocykloyly, polyetylenglykoly, glykosyláty, cukry, karboxy cukry, aminokyseliny, dikarboxylové kyseliny a korunní étery; každý navázaný k N-terminálůnímu konci peptidů amidovou vazbou. Příklady amino uzavírajících skupin zahrnují, ale nejsou omezeny na acetyl (Ac), pivaloyl, metoxyacetyl, malonyl, succinyl (Suc), glutaryi, benzoyl, metoxysukcinyl (MeO-Suc), pyridinkarbonyl, pyrazinkarbonyl, benzyloxykarbonyl (Cbz) a tbutoxykarbonyl. Amino uzavírající skupiny obsahující amino funkci, jako jsou různé karboxy cukry a aminokyseliny obsahující bázické aminy mohou být alternativně navázány k N-terminu peptidového konjugátu močovinovou vazbou.

Polyetylenglykoly jako třída sloučenin známých jako amino uzavírající skupiny a etylenoxy sloučeniny definované obecným vzorcem H₃CO- (CH₂CH₂O) _t~CH₂C (=0)kde t je 1 až 10. Přednostními polyetylenglykoly jsou také polyetylenglykoly, kde t je 1, 2, 3 nebo 4; přednostněji, kde t je 1 nebo 2. Pouze pokud je specifikováno jinak, znamená polyetylenglykol neboli PEG”, neboli, Peg amino uzavírající skupinu definovanou vzorcem H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂ (=0) -. Polyetylenglykoly jako amino uzavírající skupiny mohou být modifikovány tak, aby zahrnovaly amino-polyetylenglykoly definované vzorcem N₂H-(CH₂CH₂O)_t-CH₂C (=0)-, kde t je 1, 2, 3 nebo 4, stejně tak jako karboxymetyl-polyetylenglykoly definované vzorcem HO₂CCH₂O (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0) -, kde t je 1, 2, 3 nebo 4.

Amino uzavírajícími skupinami mohou být volitelně aminokyseliny modifikované alkanoylem, dikarboxylovou kyselinou, trikarboxylovou kyselinou nebo esterem dikarboxylové kyseliny. Příklady zahrnují, ale nejsou omezeny na acetyl (Ac), metoxyacetyl, malonyl, sukcinyl (Suc), glutaryl, 3-hydroxy-3-metylglutaryl (HMG), citryl, metoxysukcinyl (MeO-Suc), metoxy-malonyl, nebo metoxy-glutaryl skupiny modifikované na amino terminu například šeřinu nebo kyseliny gama-glutamové. Příkladem jsou například acetyl-serin (Ac-Ser), metoxysukcinyl-serin (MeO-Suc-Ser) a sukcinyl-serin (Suc-Ser).

Peptidy jsou konjugovány k antineoplastickým látkám tak, aby byly získány sloučeniny zde poskytnuté; řečená konjugace může být buďto přes amino nebo karboxy terminus peptidu. Termín konjugace, jak je zde používán, znamená vazbu peptidu k bioaktivní látce. Taková vazba může být přímá prostřednictvím kovalentní vazby mezi peptidem a látkou prostřednictvím a za použití činidel dobře známých osobám běžně znalým oboru. Kovalentní vazba mezi peptidem a látkou zahrnuje tvorbu amidové vazby mezi volnou aminoskupinou na antineoplastické látce a karboxylovou skupinou na C terminu peptidu, nebo mezi Nterminální aminoskupinou peptidu a karboxylovou skupinou látky.

·· ·· • 9 • · • ·

Navíc mohou být vytvořeny esterové vazby mezi C-terminální karboxylovou skupinou peptidu a volnou hydroxylovou skupinou na antineoplastické látce nebo vice versa.

Alternativně mohou být peptid a antineoplastické látka konjugovány nepřímo prostřednictvím vazebné skupiny mající volné, aktivní skupiny dostupné pro separátní interakce s peptidem i látkou. Takové vazebné skupiny zahrnují například a bez omezení biskarbonylové alkylové diradikály mající skupinu dostupnou k tvorbě amidové skupiny s volnou aminoskupinou na antineoplastické látce, stejně tak jako druhou volnou skupinu dostupnou k tvorbě amidové vazby s Nterminální amino skupinou peptidu. Vhodné vazebné skupiny také zahrnují diaminoalkylradikály mající volné aminoskupiny dostupné pro tvorbu amidové skupiny s peptidouvou C-terminálni skupinou i volnou karboxylovou skupinou na látce. Způsoby tvorby takových amidů, esterů a dalších vazeb mezi peptidy a cyttotoxickými látkami, buďto přímo nebo prostřednictvím vazebných skupin, jsou dobře známy osobám běžně znalým oboru.

Přednostně je antineoplastikou látkou zde používanou doxorubicin a peptid štěpitelný enzymem obsahuje aminokyselinovou sekvenci rozpoznávanou a štěpenou matrixinem, například MMP-2, MMP-9 nebo MMP-14. Peptid přednostněji obsahuje aminokyselinovou sekvenci PLGL a může zahrnovat sekvence PLGL, přednostněji PLGL, PLGLL, PLGLAL, PLGLYAL, PLGLAAL, PLGLLSL, PLGLLAL, PLGLLYL, PLGLLÝL, GPLGL, GPLGLL, PLGHof, PLG-(O-benzyl)-S, nebo GPLGAL a další sekvence, jak jsou uvedeny příkladem v Tabulkách Příkladů provedení vynálezu.

Jak je zde používáno, jsou termíny 'alkyl nebo alkylen zamýšleny, aby zahrnovaly větvené i nevětvené nasycené alifatické uhlovodíkové skupiny mající specifikovaný počet uhlíkových atomů; například, “CiC₆ alkyl znamená alkyl mající 1 až 6 uhlíkových atomů. Příklady alkylu zahrnují souhrnně nebo individuálně, avšak bez omezení, metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl, i-butyl, sec-butyl, tbutyl, n-pentyl, n-hexyl, 2-metylbutyl, 2-metylpentyl, 2-etylbutyl, 3-metylpentyl a 4-metylpentyl. Příklady Ci-C₄ alkylu zahrnují ·· • · · souhrnně nebo individuálně metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, n-butyl,

1- butyl, sec-butyl a t-butyl.

Termíny 'alkenyl'' nebo alkenylen jsou zamýšleny, aby zahrnovaly nevětvené i větvené, konfigurace mající specifikovaný počet uhlíkových atomů a jednu nebo více nenasycených uhlíkových vazeb, které se mohou vyskytnout v jakémkoli stabilním bodě v řetězci. Příklady alkenylu zahrnují, avšak bez omezení, etenyl, 1-propenyl,

2- propenyl, 2-butenyl, 3-butenyl, 2-pentenyl, 3-pentenyl, 4pentenyl, 2-hexenyl, 3-hexenyl, 4—hexenyl, 5-hexenyl, 2-metyl-2propenyl, 4-metyl-3-pentenyl, a podobně.

Termíny alkynyl nebo alkynylen jsou zamýšleny, aby zahrnovaly uhlovodíkové řetězce buďto nevětvené nebo větvené konfigurace a jednu nebo více uhlíkových trojných vazeb, které se mohou vyskytnout v jakémkoli stabilním bodě v řetězci, jako jsou například etynyl, propynyl, butynyl, pentynyl, hexynyl, a podobně.

Termín cykloalkyl je zamýšlen, aby zahrnoval nasycené kruhové skupiny mající specifikovaný počet uhlíkových atomů. C₃-C₆ cykloalkyl například znamená cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, nebo cyklohexyl.

Termíny alkoxy” nebo alkyloxy představují alkylovou skupinu, jak je definováno výše s uvedeným počtem uhlíkových atomů připojených prostřednictvím kyslíkového můstku. Příklady alkoxy zahrnují, ale nejsou omezeny na metoxy, etoxy, n-propoxy, i-propoxy, n-butoxy, sbutoxy, t-butoxy, n-pentoxy a s-pentoxy. Podobně termíny alkylthio nebo thioalkoxy představují alkylovou skupinu, jak je definováno výše s uvedeným počtem uhlíkových atomů připojených prostřednictvím sírového můstku.

Termíny halo nebo halogen, jak jsou zde používány, se týkají fluoru, chloru, bromu, a jodu; a termín protiiont představuje malé negativně nabité skupiny, jako jsou například chloridy, bromidy, hydroxidy, acetáty, sulfáty, a podobně.

Jak je zde používáno, znamená termín karbocyklus jakýkoli stabilní

3- až 7—členný monocyklus nebo bicyklus, nebo 7- až 13- členný bicyklu nebo tricyklus, z nichž každý může být nasycený, částečně nenasycený nebo aromatický. Příklady takových karbocyklů zahrnují, ale nejsou omezeny na cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, adamantyl, eyklooktyl, [3.3.0] bicyklooktan, [4.3.0] bicyklodekan (dekalin), [2.2.2] bicyklooktan, fluorenyl, fenyl, naftyl, indanyl, adamantyl nebo tetrahydronaftyl (tetralin).

Jak je zde používáno, znamenají termíny heterocyklus” nebo heterocyklický kruh stabilní 5- až 7- členný monocyklus nebo bicyklu, nebo 7- až 14- členný bicyklický heterocyklický kruh, který je nasycený, částečně nenasycený, nebo nenasycený (aromatický), a který se skládá z uhlíkových atomů a 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomů nezávisle vybraných ze skupiny obsahující N, O a S, a zahrnující bicyklickou skupinu, v které jakýkoli z výše definovaných heterocyklických kruhů je zfúzován k benzenovému kruhu. Heteroatomy dusíku a síry mohou být volitelně oxidovány. Heterocyklický kruh může být připojen k jeho zavěšené skupině v místě jakéhokoli heteroatomů nebo uhlíkového atomu, což vede ke vzniku stabilní struktury. Heterocyklické kruhy zde popsané, mohou být substituovány na uhlíkovém nebo na dusíkovém atomu, pokud je výsledná sloučenina stabilní. Pokud je specificky poznamenáno, může být dusík v heterocyklu volitelně kvartenalizován. Je preferováno, aby, pokud celkový počet S a O atomů v heterocyklu překročí číslo 1, nepřiléhaly poté tyto heteroatomy k sobě. Je preferováno, aby celkový počet S a O atomů v heterocyklu nebyl více než 1.

Příklady heterocyklů zahrnují, ale nejsou omezeny na 1H indazole, 2pyrolidonyl, 2H,6H-1,5,2-dithiazinyl, 2H-pyrolyl, 3H-indolyl, 4piperidonyl, 4aH-karbazol, 4H-chinolizinyl, 6H-1,2,5-thiadiazinyl, akridinyl, azocinyl, benzimidazolyl, benzofuranyl, benzothiofuranyl, benzothiofenyl, benzoxazolyl, benzoxazolinyl, benzthiazolyl, benztriazolyl, benztetrazolyl, benzisoxažolyl, benzisothiazolyl, benzimidazalonyl, karbazolyl, 4aH-karbazolyl, b-karbolinyl, chromanyl, chromenyl, cinnolinyl, dekahydrochinolinyl, 2H,6H-1,5,2-dithiazinyl, »· ·· • · · • · * • · ♦ dihydrofuro [2,3-b] tetrahydrofuran, furanyl, furazanyl, imidazolidinyl, imidazolinyl, imidazolyl, imidazolopyridinyl, ΙΗ-indazolyl, indolenyl, indolinyl, indolizinyl, indolyl, isatinoyl, isobenzofuranyl, isochromanyl, isoindazolyl, isoindolinyl, isolndolyl, isochinolinyl, isothiazolyl, isothiazolopyridinyl, isoxazolyl, isoxazolopyridinyl, morfolinyl, naftyridinyl, oktahydraisochinolinyl, oxadiazolyl, 1,2,3oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, oxazolidinyl, oxazolyl, oxazolopyridinyl, oxazolidinylpyrimidinyl, oxindolyl, fenanthridinyl, fenanthrolinyl, fenarsazinyl, fenazinyl, fenothiazinyl, fenoxathiinyl, fenoxazinyl, fthalazinyl, piperazinyl, piperidinyl, pteridinyl, piperidonyl, 4-piperidonyl, pteridinyl, purinyl, pyranyl, pyrazinyl, pyrazolidinyl, pyrazolinyl, pyrazolopyridinyl, pyrazolyl, pyridazinyl, pyridoóxazole, pyridoimidazole, pyridothiazole, pyridinyl, pyridyl, pyrimidinyl, pyrolidinyl, pyrolinyl, pyrolyl, chinazolinyl, chinolinyl, 4Hchinolizinyl, chinoxalinyl, chinuklidinyl, karbolinyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydroisochinolinyl, tetrahydrochinolinyl, 6H1,2,5-thiadiazinyl, 1,2,3-thiadiazolyl, 1,2,4-thiadiazolyl, 1,2,5thiadiázolyl, 1,3,4-thiadiazolyl, thianthrenyl, thiazolyl, thiazolopyridinyl, thienyl, thienothiazolyl, thienooxazolyl, thienoimidazolyl, thiophenyl, triazinyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4triazolyl, 1,2,5-triazolyl, 1,3,4-triazolyl a xanthenyl. Přednostní heterocykly zahrnují, ale nejsou omezeny na pyridinyl, furanyl, thienyl, pyrolyl, pyrazolyl, pyrazinyl, piperazinyl, imidazolyl, indolyl, benzimidazolyl, ΙΗ-indazolyl, oxazolidinyl, benzotriazolyl, benzizoxazolyl, benzoxazolyl, oxindolyl, benzoxazolinyl, benzthiazolyl, benzizothiazolyl, isatinoyl, isoxazolopyridinyl, isothiazolopyridinyl, thiazolopyridinyl, oxazolopyridinyl, imidazolopyridinyl a pyrazolopyridinyl. Přednostní 5 až 6 členné heterocykly zahrnují, ale nejsou omezeny na pyridinyl, furanyl, thienyl, pyrolyl, pyrazolyl, pyrazinyl, piperazinyl, imidazolyl a oxazolidinyl. Také zahrnuty jsou fúzované kruhové a spiro sloučeniny obsahující například výše uvedené heterocykly.

Jak je zde používáno, znamená termín aryl'', neboli aromatické reziduum, aromatickou skupinu obsahující specifikovaný počet uhlíkových atomů, jako jsou například fenyl a naftyl.

·· · ·* ·· ·· • * · • · * • · · · • · · • · · · · ·

Také poskytnuty jsou zde farmaceutické preparáty obsahující sloučeniny zde poskytnuté a farmaceuticky přijatelný nosič. Takové nosiče jsou média obecně přijata v oboru transportu biologicky aktivních látek živočichům, obzvláště savcům. Farmaceuticky přijatelné nosiče jsou obecně formulovány podle celé řady faktorů, které jsou v dosahu rozpoznání a vysvětlení osob běžně znalých oboru. Tyto faktory zahrnují bez omezení: typ a charakter aktivní látky, která má být formulována; subjekt, kterému má být preparát obsahující látku podáván; zamýšlený způsob podání; a cílená terapeutická indikace.

Termín farmaceuticky přijatelný je zde použit na sloučeniny, materiály, preparáty a/nebo dávkovači formy, které jsou v rozsahu platného lékařského mínění vhodné pro použití v kontaktu s tkáněmi lidských jedinců a živočichů bez nadměrné toxicity, iritace, alergických reakcí nebo jiných problémů či komplikací s přiměřeným poměrem prospěchu/rizika.

Jak je zde používáno, představují farmaceuticky přijatelné poli deriváty uvedených sloučenin, kde mateřská sloučenina je modifikována vytvořením kyselých nebo zásaditých solí. Příklady farmaceuticky přijatelných solí zahrnují, ale nejsou omezeny na minerální nebo organické kyselé soli bazických reziduí, jako jsou například aminy, alkalické nebo organické soli kyselých reziduí, jako jsou například karboxylové kyseliny, a podobně. Farmaceuticky přijatelné soli zahrnují vytvořené konvenční netoxické soli nebo kvartérní amoniové soli mateřské sloučeniny, například netoxické neorganické nebo organické kyseliny. Takové konvenční netoxické soli například zahrnují soli odvozené od anorganických kyselin, jako jsou například kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina sulfamová, kyselina fosforečná, kyselina dusičná, a podobně; soli připravené z organických kyselin, jako jsou například kyselina octová, kyselina propionová, kyselina jantarová, kyselina glykolová, kyselina stearová, kyselina mléčná, kyselina jablečná, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina askorbová, kyselina pamoová, kyselina maleinová, kyselina hydroxymaleinová, kyselina kyselina benzoové, kyselina kyselina 2-acetoxybenzoová, toluensulfonová, kyselina kyselina šťavelová, fenyloctová, salicylová, kyselina kyselina kyselina fumarová, glutamová, sulfanilová, kyselina metansulfonová, kyselina etan disulfonová, kyselina isethionová, a podobně.

Farmaceuticky přijatelné soli, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, mohou být syntetizovány pomocí konvenčních chemických metod z mateřské sloučeniny, která obsahuje bázickou nebo kyselou skupinu. Obecně mohou být takové soli připraveny reakcí volné kyseliny nebo báze těchto sloučenin se stechiometrickým množstvím příslušné báze nebo kyseliny v organickém rozpouštědle nebo ve směsi dvou; obecně jsou preferována nevodná média jako například éter, etylacetát, etanol, izopropanol, nebo acetonitril. Seznam vhodných solí může být nalezen v publikaci Remington's Pharmaceutical Science, 17. vydání, Mack Publishing Copany, Easton, PA, 1985, str. 1418, jejíž uvedení je tímto začleněno jako reference.

Farmaceuticky přijatelné nosiče zahrnují vodná i nevodná tekutá média, stejně tak jako celou řadu pevných a polopevných dávkových forem. Takové nosiče mohou zahrnovat navíc k aktivní látce celou řadu různých složek a aditiv, takové dodatečné složky mohou být, zahrnuty v preparátu pro celou řadu důvodů, například ke stabilizaci aktivní látky, kteréžto důvody jsou dobře známy osobám běžně znalým oboru. Popisy vhodných farmaceuticky přijatelných nosičů a faktorů hrajících roli v jejich výběru, mohou být nalezeny v celé řadě snadno dostupných zdrojů, například v publikaci Remington's Pharmaceutical Science, 17. vydání, Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, jejíž uvedení je tímto začleněno jako reference. Sloučeniny, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, mohou být podávány například parenterálně v různých vodných médiích, jako jsou například vodná dextróza a salinické roztoky; glykolové roztoky jsou také užitečnými nosiči. Roztoky pro parenterální podávání přednostně obsahují ve vodě rozpustnou sůl aktivní složky, vhodné stabilizační látky, a pokud je to nezbytné pufrovací látky. Vhodnými stabilizujícími látkami jsou antioxidační látky, jako jsou například bisulfit sodný, sulfit sodný, nebo kyselina askorbová, buďto samotné • Λ ·· • » · • 9 ♦ • · * • · · ·· ··· · nebo v kombinaci. Používané jsou také kyselina citrónová a její soli, a EDTA. Parenterální roztoky mohou navíc obsahovat konzervační látky, jako jsou například benzalkonium chlorid, metyl nebo propyl parabel, a chlorambutol.

Alternativně jsou sloučeniny podávány perorálně v pevných dávkovačích formách, jako jsou například kapsle, tablety a prášky; nebo v tekutých formách, jako jsou například elixíry, sirupy, a/nebo suspenze. Želatinové kapsle mohou být použity tak, aby obsahovaly aktivní složku a vhodný nosič, jako jsou například, ale bez omezení, laktóza, škrob, magnézium steatit, kyselina stearová, nebo deriváty celulózy. Podobné ředící látky mohou být použity k vytvoření komprimovaných tablet. Tablety i kapsle mohou být vyrobeny jako produkty s trvalým uvolňováním, aby se zajistilo průběžné uvolňování léku po určitou dobu. Komprimované tablety mohou být potaženy cukrem nebo filmem, aby se zamaskovala nepříjemná chuť, nebo aby se chránily aktivní, složky před atmosférou, nebo aby se umožnila selektivní dezintegrace tablety v gastrointestinálním traktu.

Dále poskytnutý zde je způsob dopravení sloučeniny, která je předmětem tohoto vynálezu k buňkám savce potřebujícího antineoplastickou léčbu, kde řečený způsob zahrnuje kontakt buněk s terapeuticky účinnými množstvími sloučenin v přítomnosti odpovídající peptidázy. Terapeuticky účinná množství jsou jakákoli množství sloučeniny účinná zmírnit, oslabit nebo inhibovat příznaky, progresi manifestace konkrétního onemocnění, poruchy nebo stavu; terapeuticky účinná množství pro in vivo léčbu jsou od zhruba 0,1 mg sloučeniny na kg tělesné váhy savce, který má být léčen, do zhruba 1000 mg/kg. Řečení savci mohou trpět nádory prsu, vaječníků, mozku, žaludku, plic, tlustého střeva, prostaty nebo . jater, nebo leukémiemi, lymfomy, karcinomy, sarkomy nebo melanomy, stejně tak jako dalšími typy nádorů.

Konjugované sloučeniny, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, jsou užitečné jako chemoterapeutické látky v cílené léčbě nádorů. Například v léčbě nádorů jsou peptidy a antineoplastické látky konjugovány za vzniku stabilních konjugátů, které mohou být podány « · £ C ··♦· · * ♦

Ό O ·· *· ······ ♦* savcům a které cirkulují v krevním řečišti ve stabilním stavu vůči nespecifické enzymatické degradaci, například vůči neprolysinu. Konjugace také snižuje schopnost antineoplastických látek vykonávat svůj efekt na tkáně, tj. zdravou necílenou tkáň, takže toxicita látky je výrazně snížena ve srovnání s použitím její nekonjugované, volné formy. Avšak jakmile je peptid odštěpen z antineoplastické látky jednou nebo kombinací membránově vázaných a/nebo buněčně dekretovaných peptidáz, látka je uvolněna, takže může vykonávat svůj požadovaný terapeutický účinek na okolní oblast. Zatímco pro odstraňování nebo zpracovávání aminokyselin z antineoplastické látky může být použito mnoho peptidáz, je k aktivaci těchto konjugátů vyžadováno zahajovací štěpení peptidázou. Peptfdázy, jako jsou například matrixiny MMP-2 a MMP-9 a MMP-14 jsou nacházeny v okolí nádorů. Tudíž konjugace peptidu štěpitelného matrixinem neboli MMP k antineoplasticé látce nabízí nový prostředek dopravení látky jako terapeutické entityspecificky k nádorů při snížení toxicity látky na zdravou necílenou tkáň. Konjugát je však také navržen tak, že produkt první proteolýzy je přijatelným substrátem pro aminopeptídázy exprímované v nádorové tkáni, které dále odstraňují nebo zpracovávají zbývající aminokyseliny z antineoplastické látky. Je známo, že takové aminopeptídázy, například dipeptidyl aminopetidáza a neutrální aminopeptidáza, jsou exprimovány v nádorové tkáni (Pasqualini). Sloučeniny, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, nejsou tedy po prvním proteolytickém štěpení metaloproteinázou matrice zamýšleny, aby jejich činností vznikal nekonjugovaný Dox.

Konjugáty petidu/antineoplastické látky, které jsou předmětem předkládaného vynálezu jsou stabilní v plazmě, tato stabilita může být demonstrována celou řadou způsobů známých v oboru, například inkubací různých médií (viz například Příklad provedení vynálezu 6 níže). Konjugáty, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, mohou být tedy účinně použity jako terapeutické entity pro podání savcům. Je známo, že matrixiny a aminopeptídázy jsou produkovány v nádorových buňkách a jsou nalézány v buňkách nebo v jejich blízkosti. Endoteliální a stromální buňky. Endoteliální a stromální buňky, které mohou být nalezeny v blízkosti nádoru, mohou také • · ·· · · · • 9 9 9

9 9 9 9

9 9 9 «·· ·· 9999 obsahovat peptidázové aktivity, které se spolupodílejí na dopravení terapeutických entit k nádoru. Bylo demonstrováno, že takové matrixiny a aminopeptidázy, jako jsou popsány výše, rozpoznávají a štěpí peptidy štěpítelné enzymem konjugované k cytotoxickým látkám (viz Příklad provedení vynálezu 7 níže) uvolňujíce peptid v úplné nebo zkomolené formě, a látku s anebo bez připojených aminokyselin. Štěpení uvolňuje antineoplastickou látku z konjugátu, takže může vykonávat svůj prospěšný terapeutický účinek na neoplastické buňky.

Proto konjugace peptidu štěpitelného matrixinem nebo MMP s cytotoxickou látkou umožňuje cílené dopravení látky jako terapeutické entity specifické vůči nádorům při minimalizaci nežádoucího dopadu na zdravou necílenou tkáň.

Následuje bibliografická informace pro výše citované dokumenty.

Ames, R. a Quigley, J., J. Biol Chem. 270:5872-5876 (1995).;

Baurain, R., et.al., J. Med. Chem. 23:1170-1174 (1980);

Boven, E., et al., Eur. J. Cancer 26:983-986 (1990);

Boven, E., et al., Br. J. Cancer 66:1044-1047 (1992);

Brooks, P., et al., Cell 85:683-693 (1996);

Brummer, O., et al., Virchows Arch. 435: 566-573 (1999);

Canal, P., et al., Clin. Pharmacol. Therp. 51: 249-259 (1992);

. de Groot, F. Μ. H. et al., J. Med. Chem. 43: 3093-3102 (2000);

Denmeade, et al., Cancer Res. 58:2537-2540 (1998);

- de Jong, J., et al., Cancer Chemother Pharmacol 31:156-160 (1992a); ... de Jong, J., et al, J. Clin. Oncology 10:1897-1906 (1992b);

Garbisa, S., et al., Cancer Res., 53:4548-4549 (1992);

Kandukuri, S. P. et al., J. Med. Chem. 28: 1079-1088 (1985);

Knauper, V., et al., J. Biol. Chem. 271:1544-1550 (1996); Kurschatt, P., et al., J. Biol. Chem. 274:21056-21062 (1999);

Li, C. et al., J. Biol. Chem., 270: 5723-5728(1995);

Lu, J.Y. et.al., J. Drug Targeting 7(1)43-53 (1999);

Liotta, L., et al., Cell 64:327-336 (1991);

MacDougall, J. a Matrisian, L., Cancer and Metastasis Reviews 14:351-362 (1995);

Masquelier, Μ., et al., J. Med. Chem. 23:1166-1170 (1980);

McDonnell, S. a Fingleton, B., Cytotechnology 12:367-384 (1993);

McGeehan, G., et al., J. Biol Chem. 269:32814-32820 (1994);

0

00· · • 4 ·· • · ♦ • 0 0 00

0 0

Nacfase, Η., et al., Biopolymers 40:399-416 (1996);

Moses, Μ., et al., Cancer Res. 58:1395-1399 (1998);

Nakajima, K., et al., J. Biol Chem. 254:4027-4032 (1979);

Odake, S., et al., Biochemistry 30: 2217-2227 (1991);

R. Pasqualini, Cancer Research 60: 722-727 (2000);

A. Safavy et al. J. Med. Chem. 42:4919-4924 (1999);

Sáto, J., et al., Nátuře 370:61-65 (1994);

Trouet and Baurain, U.S. Patent No. 5,962,216 (vydaný v 5. října 1999);

Soini, Y. et al., J. Histochem. Cytochem. 42: 945-951 (1994);

Sundfor, K. et al., Br. J. Chem. 7.8:822 (1998);

von Hoff, D., et al., Ann. Intern. Med. 91:710-717 (1979);

Yn, Q. a Stamenkovic, L, Genes and Dev. 13:35-48 (1999). Rhusolahti, Cancer Research

V další formě vynález popisuje způsob léčby nádorů u pacientů potřebujících tuto léčbu, kterýžto způsob zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství sloučeniny, jak je uvedeno výše řečenému pacientovi, nebo její farmaceuticky přijatelné soli, kde nádor je vybrán ze skupiny složené z karcinomu měchýře, prsu, tlustého střeva, ledvin, jater, plic včetně malobuněčného karcinomu plic, jícnu, žlučníku, vaječníku, pankreatu, žaludku, hrdla děložního,. štítné žlázy, prostaty a kůže včetně dlaždicobuněčného karcinomu; hematopoetických nádorů lymfoidní linie včetně leukémie, akutní, lymfocytové leukémie, akutní lymfoblastové leukémie, B buněčného lymfomu, T buněčného lymfomu, Hodgkinova lymfomu, non-Hodgkinského. lymfomu, lymfomu z vlasatých buněk a Burkettova lymfomu; hematopoetických nádorů myeloidní linie zahrnujících akutní a chronické myelogenní leukémie, myelodysplastický syndrom a promyelocytovou leukémii; nádorů mezenchymálního původu včetně fibrosarkomu a rhabdomyosarkomu; nádorů centrálního a periferního nervového systému včetně astrocytomu, neuroblastomu, gliomu a schwanomů; dalších nádorů včetně melanomu, seminomu, teratokarcinomu, osteosarkomu, xeroderma pigmentosum, keratoakantomu, thyroidního folikulárního nádoru a Kaposiho sarkomu.

• ·

4 4 4 4 4 4 »4

44 44

4 4 4

4 4 4

4 4 4 ·

4 4 4

444 44 4444

V další formě vynález popisuje způsob léčby nádorů u pacientů potřebujících tuto léčbu, kterýžto způsob zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství sloučeniny definované Vzorcem (I) nebo (Ia), jak je uvedeno výše řečenému pacientovi, nebo její farmaceuticky přijatelné soli, v kombinaci (podaných spolu nebo sekvenčně) se známou protinádorovou terapií, jako je například radiační léčbg, nebo s cytostatickýmí nebo cytotoxickými látkami, kde takové látky jsou vybrány ze skupiny obsahující: s DNA interagující látky, jako jsou například cisplatina nebo doxorubicin; inhibitory topoizomerázy II, jako je například CPT-11 nebo topotecan; s tubulinem interagující látky, jako jsou například paclitaxel, docetaxel nebo epothilony; hormonální látky, jako je například tamoxifen; inhibitory thymidilát syntézy, jako je například 5-fluorouracil; a antimetabolity, jako je například methotrexát.

V další formě vynález popisuje způsob léčby nádorů u pacientů potřebujících tuto léčbu, kterýžto způsob zahrnuje podání farmaceuticky účinného množství sloučeniny definované Vzorcem (I) nebo (Ia), jak je uvedeno výše řečenému pacientovi, nebo její farmaceuticky přijatelné soli, v kombinaci (podaných spolu nebo sekvenčně) se známými antiproliferačními látkami vybranými ze skupiny obsahující: altretamin, busulfan, chlorambucil, cyklofosfamid, itofosfamid, mechloretamin, melfalan, thiotepa, cladribin, fluorouracil, floxuridin, gemcitabin, thioguanin, pentostatin, methotrexát, 6merkaptopurin, cytarabin, carmustin, lomustin, streptozocin, karboplatinu, cisplatinu, oxaliplatinu, lobaplatinu, JM216, JM335, fludarabin, goserelin, leuprolid, megestrol acetát, cyproteron acetát, tamoxifen, anastrozol, bicalutamid, dexamethason, dietylstilbestrol, prednison, bleomycin, daktinomycin, daunorubicin, doxirubicin, idarubicin, mitoxantron, losoxantron, mitomycin-c, plicamycin, paclitaxel, docetaxel, CPT-11, epothilony, topotecan, irinotecan, 9-amino camptotecan, 9-nitro camptotecan, GS-211, etoposid, teniposid, vinblastin, vincristin, vinorelbin, procarbazin, aspariginázu, pegasparagázu, methotrexát, octreotid, estramustin a hydroxyureu.

iproplatinu, tetraplatinu, gminoglutetimid, flutamid, •Φ ·· « φ φ • · φφ φ φ φ • φ φ ·« φ φ φ

«φ φφφφ

Jak je zde používáno,.· znamená termín účinné množství množství sloučeniny (preparátu podle předkládaného vynálezu, které je účinné pro navození požadovaného terapeutického účinku.

Jak je zde používáno, znamená termín léčba: (i) prevenci objevení se nemoci, poruchy nebo stavu.u živočicha, který může být predisponován k onemocnění, poruše a/nebo stavu, ale které nebyly diagnostikovány; (ii) inhibici onemocnění, poruchy a/nebo stavu, tj. zastavení jejich vývoje; a (iii) zmírnění onemocnění, poruchy a/nebo stavu, tj. způsobení regrese onemocnění, poruchy a/nebo stavu.

Jak je zde používáno, zahrnuje termín pacient” člověka i jiné savce.

Jak je zde používáno, znamená termín farmaceutický preparát preparát obsahující sloučeninu definovanou Vzorcem (I) nebo (Ia), a alespoň jednu složku vybranou ze skupiny obsahující farmaceuticky přijatelné nosiče, ředící látky, adjuvantní látky, excipientní látky, nebo vehikula, jako jsou například konzervační látky, plnící látky, dezintegrační látky, zvlhčující látky, emulzifikující látky, suspendující látky, sladící látky, dochucující látky, parfemizační látky, antibakteriální látky, protiplísňové látky, lubrikační látky a uvolňující látky, v závislosti na charakteru a způsobu podání a dávkových formách. Příklady suspendujících látek zahrnují etoxylováné izostearyl alkoholy, polyoxyetylen sorbitol a sorbitan estery, mikrokrystalickou celulózu, aluminium metahydroxid, bentonit, agaragar a tragakanth, nebo směsi těchto substancí. Prevence účinku mikroorganismů může být zajištěna různými antibakteriálními a protiplísňovými látkami, například parabeny, chlorambutolem, fenolem, kyselinou sorbovou, a podobně. Může být také žádoucí zahrnout izotonické látky, například cukry, chlorid sodný, a podobně. Prodloužená absorpce injekční farmaceutické formy může být dosažena použitím látek zpomalujících absorpci, například aluminium monostearátem a želatinou. Příklady vhodných nosičů, ředících látek, rozpouštědel nebo vehikul zahrnují vodu, etanol, polyoly, jejich vhodné směsi, rostlinné oleje (jako je například olivový olej) a injekční organické estery, jako je například etyloleát. Příklady excipientních látek zahrnují laktózu, mléčný cukr, citrát sodný,

ΊΟ

4« ·

444 444

4 444 ·

4 4 4 4 4

4 4 4 4

44 444 4 uhličitan vápenatý, fosforečnan vápenatý. Příklady dezintegračních látek zahrnují škrob, kyseliny albínové a určité komplexní silikáty. Příklady lubrikačních látek zahrnují magnézium stearát, lauryl sulfát sodný, talek, stejně tak jako polyetylén glykoly o vysoké molekulové váze.

Tomuto vynálezu bude lépe rozuměno ve světle následujících Příkladů provedení vynálezu. Osoby znalé oboru však budou snadno rozumět, že příklady jsou čistě ilustrací vynálezu, jak je definován v Patentových nárocích, které následují po Příkladech provedení vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Konjugace peptidů k antineoplastickým látkám

Příklad 00. Syntéza Ac-PLGL-Dox.

Peptid byl syntetizován na pevné fázi z komerčně dostupné pryskyřice Fmoc-Leu-Wang (0,40 g, 0,6 mmol). Syntéza byla provedena na peptidovém syntetizačním zařízení ABI 433A za použití čtyř ekvivalentů aminokyselin chráněných Fmoc a HBTU aktivace. Peptidová pryskyřice byla acetylována kyselým anhydridem. Peptid byl štěpen z pryskyřice pomocí 90% TFA ve vodě po dobu 2 hodin. Po odstranění rozpouštědla, byl peptid rozpuštěn ve H₂O:CH₃CN a lyofilizován. Produkt byl potvrzen pomocí ES MS 496,3 (M-H). Pomocí analytické

HPLC na koloně s reverzní fází Metachem Monochrom C18 (50 x 4,6 mm) bylo prokázáno, že hrubý peptid je z 80% čistý. K tomuto meziproduktu (0,0199 g, 0,04 mmol) rozpuštěném v DMF (0,2 ml) v malé vialce z tmavého skla byl přidán Pybop (0,0208 g, 0,04 mmol). Byl přidán doxorubiein hydrochlorid (0,0186 g, 0,032 mmol) jako suspenze v DMF (0,1 ml) následovaný diizopropyletylaminem (DIEA) (0,0139 ml, 0,08 mmol). Reakční směs byla promíchávána po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Vzorek byl rozpuštěn v H₂O:CH₃CN a purifikován za použití kolony s reverzní fází Dynamax C18 (41,4 x 250 mm) s lineárním gradientem 30-50% acetonitrilu,

0,05% octanu amonného po dobu 20 minut s průtokem 45 ml/minutu. Frakce byly sesbírány a zlyofilizovány za vzniku purifikovaného konjugátu peptid-Dox (ES MS 964,6 (M-H)).

« ·

Syntéza konjugátů doxorubicinu na pevné fázi.

Příklad 47: Syntéza Ac-PLGLYL-Dox.

Peptidová kyselina byla syntetizována na pevné fázi z komerčně dostupné pryskyřice Fmoc-Leu-Wang (0,42 g, 0,25 mmol)). Syntéza byla provedena na peptidovém syntetizačním zařízení 433A za použití čtyř ekvivalentů aminokyselin chráněných pomocí Fmoc a aktivace pomocí HBTU. Peptidová pryskyřice byla acetylována pomocí kyselého anhydridu. Peptid byl štěpen z pryskyřice pomocí 90% TFA ve vodě po dobu 2 hodin. Po odstranění rozpouštědla byl peptid rozpuštěn ve H₂O:CH₃CN a lyofilizován. Produkt byl potvrzen pomocí ES MS 496,3 (ΜΗ) . Pomocí analytické HPLC na koloně s reverzní fází Metachem Monochrom C18 (50 x 4,6 mm) bylo prokázáno, že hrubý peptid je z 80% čistý. K tomuto meziproduktu (0,0286 g, 0,04 mmol) rozpuštěném v DMF (0,2 ml) v malé vialce z tmavého skla byl přidán PyBop (0,0208 g, 0,04 mmol). Byl přidán doxorubicin hydrochlorid (0,0186 g, 0,032 mmol) jako suspenze v DMF (0,1 ml) následovaný diizopropyletylaminem (DIEA) (0,0139 ml, 0,08 mmol). Reakční směs byla promíchávána po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Vzorek byl rozpuštěn v H₂O:CH₃CN a purifikován za použití kolony s reverzní fází Dynama C18 (4.1,4 x 250 .mm) s lineárním gradientem 30-55% acetonitrilu, 0,05% octanu amonného po dobu 20 minut s průtokem 45 ml/minutu. Frakce byly sesbírány a zlyofilizovány za vzniku purifikovaného konjugátu peptid-Dox (ES MS 1240,7 (M-H)).

Příklad 116: Syntéza Ac-PLG-Hof-Orn-L-Dox.

Peptidová kyselina (Ac-PLG-Hof-Orn(alyl)-L-COOH) byla syntetizována na pevné fázi z komerčně dostupné pryskyřice Fmoc-Leu-Wang (0,28 g, 0,25 mmol)). Syntéza byla provedena na peptidovém syntetizačním zařízení ABI433A za použití čtyř ekvivalentů aminokyselin chráněných pomocí Fmoc a aktivace pomocí HBTU. Peptidová pryskyřice byla acetylována pomocí kyselého anhydridu. Peptid byl štěpen z pryskyřice pomocí 90% TFA ve vodě po dobu 2 hodin. Po odstranění rozpouštědla byl peptid rozpuštěn ve H₂O:CH₃CN a lyofilizován. Produkt byl potvrzen pomocí ES MS 800,7 (M+H)⁺, 822,7 (M+Na)⁺. Pomocí analytické HPLC na koloně s reverzní fází Metachem Monochrom C18 (50 ·· • to to toto toto • toto • to tototo • toto · • toto · • to ·· •toto ·«· «to «· to · · • to to • · to • to ··· · x 4,6 mm) bylo prokázáno, že hrubý peptid je z 90% čistý. K tomuto meziproduktu (0,320 g, 0,4 mmol) rozpuštěném v DMF (2 ml) v malé vialce z tmavého skla byl přidán PyBop (0,204 g, 0,4 mmol). Byl přidán doxorubicin hydrochlorid (0,148 g, 0,26 mmol) jako suspenze v DMF (1,0 ml) následovaný diizopropyletylaminem (DIEA) (0,28 ml, 1,6 mmol). Reakční směs byla promíchávána po dobu 2,5 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Vzorek byl rozpuštěn v H₂O:CH₃CN a purifikován za použití kolony s reverzní fází Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárním gradientem 45-55% acetonitrilu, 0,05% octanu amonného po dobu 20 minut s průtokem 18 ml/minutu. Frakce byly sesbírány a zlyofilizovány za vzniku purifikovaného PLG-Hof-Orn(alyl)-L-Dox (ES MS 1325,4 (M+H-414) ⁺ ) .

Peptid s chráněným postranním řetězcem (0,076 g, 0,06 mmol) byl rozpuštěn v suchém DCM (7 ml) pod Ar₂. Bylo přidáno [(Ph₃)P]₄Pd (0,014 g, 0,012 mmol) v DCM (1 ml) následováno přidáním morfolinu (0,052 ml, 0,6 mmol). Reakční směs byla promíchávána při pokojové teplotě po dobu 2 hodin a monitorována pomocí HPLC. Produkt byl precipitován z EtOAc a promyt pomocí EtOAc (2x). Rozpouštědlo bylo odstraněno proudem N₂. Nechráněný konjugát (Ac-PLG-Hof-OrnL-Dox) byl purifikován za použití kolony s reverzní fází Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárním gradientem 25-40% acetonitrilu, 0,05% octanu amonného po dobu 30 minut s průtokem 18 ml/minutu. Frakce byly sesbírány a zlyofilizovány za vzniku purifikovaného produktu (95% čistota) (ES. MS 1241,9 (M+H)\ 827,7 (M+H-414)⁺).

Náhradní syntéza konjugátů doxorubicinu na pevné fázi.

Příklad 11: Syntéza Acp-PLGLL-Dox.

Acp = 4-(2-aminoetyl) -1- karboxymetyl piperazin. Peptidová kyselina chráněná pomocí Fmoc (Fmoc-Acp-PLGLL-COOH) byla syntetizována na pevné fázi z komerčně dostupné pryskyřice Fmoc-Leu-Wang (1,6 g, 1,0 mmol). Syntéza pryskyřice PLGLL byla provedena na peptidovém syntetizačním zařízení ABI433A za použití třech ekvivalentů aminokyselin chráněných pomocí Fmoc a aktivace pomocí HBTU. Část peptidové pryskyřice (0,18 g, 0,1 mmol) byla navázána k Fmoc-Acp dihydrochloridu (0,193 g, 0,4 mmol) pomocí HBTU (0,152 g, 0,4 mmol) • · · • · ··<

• ·4 · · · Φ · ·· ··

4» • Φ ·· • · « • · * • · · · • · · • Φ ·»Φ· a DIEA (0,143 ml, 0,8 mmol) v DMF (2 ml) po dobu 2 hodin. Peptid byl štěpen z pryskyřice pomocí 90% TFA ve vodě po dobu 2 hodin. Po odstranění rozpouštědla byl peptid rozpuštěn ve H₂O:CH₃CN a lyofilizován. K tomuto meziproduktu (0,036 g, 0,04 mmol) rozpuštěném v DMF (0,2 ml) v malé vialce z tmavého skla byl přidán PyBop (0,021 g, 0,04 mmol). Byl přidán doxorubicin hydrochlorid (0,018 g, 0,032 mmol) jako suspenze v DMF (0,1 ml) následovaný diizopropyletylaminem (DIEA) (0,014 ml, 0,08 mmol). Reakční směs byla promíchávána po dobu 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Vzorek byl rozpuštěn v H₂O:CH₃CN a purifikován za použití kolony s reverzní fází Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárním gradientem 20-50% acetonitrilu, 0,05% octanu amonného po dobu 30 minut s průtokem 18 ml/minutu. Frakce byly sesbírány a zlyofilizovány za vzniku FmocAcp-PLGLL-Dox (ES MS 1428,9 (M+H)⁺). Peptid chráněný pomocí Fmoc (0,020 g, 0,014 mmol) byl rozpuštěn ve studeném roztoku 50% dietylaminu v DCM (6 ml). Reakční směs byla promíchávána chráněna před světlem při teplotě 0° po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Byl přidán DCM, aby se znovu rozpustil vzorek a DCM byl odstraněn 4 x vakuem. Vzorek byl dále vysušen proudem dusíku. Vzorek byl poté 5 x promyt pomocí Hex:Et₂O, 1:1 s následným odpařením ve vakuu a finálním proudem dusíku. Vzorek byl rozpuštěn v acetátovém pufru;. CH₃CN a purifikován za použití kolony s reverzní fází Phenomenex LUNA C18 (250 x 21,2 mm) s lineárním gradientem 1550% acetonitrilu, -0,05% octanu amonného po dobu 35 minut s průtokem 18 ml/minutu. Frakce byly sesbírány a zlyofilizovány za vzniku purifikovaného (90% čistota) Acp-PLGLL-Dox (ES MS 1207 (M+H)⁺, 793 (M+H-414)⁺).

U příkladů tohoto vynálezu, kde jsou k chemoterapeutické látce navázány neobvyklé aminokyseliny, například doxorubicin, není potřebný pevný nosič často komerčně dostupný. Následující příklady ilustrují, jak je připraven v těchto připadech modifikovaný pevný nosič.

Příklad 182: Syntéza Ac-PLG-Hof-Y-Bol-Dox.

Navázání nepřírodních aminokyselin k pevnému nosiči ·· ·· • · t

I · ·

Trifenyl fosfin (4,78 g, 18,25 mmol) byl rozpuštěn v DMF (100 ml) a roztok byl ochlazen na 0°C. Byla přidána Langova pryskyřice (5,2 g, 4,45 mmol), reakce byla promíchávána po dobu 10 minut s následným přidáním tetrabrommetanu (6,06 g, 18,25 mmol). Reakční směs byla promíchávána po dobu 5 hodin. Pryskyřice byla promyta a vysušena. Část pryskyřice (0,281 g, 0,25 mmol) byla namočena v DMF (2,5 ml), bylo přidáno Fmoc-Hol (0,138 g, 0,375 mmol) následováno DIEA (0,065 ml, 0,375 mmol) a Cesium jodidem (0,065 g, 0,25 mmol). Reakční směs byla promíchávána přes noc. Pryskyřice byla promyta a dokončení reakce bylo potvrzeno ninhydrinovým testem. Pryskyřice byla poté přenesena do peptidového syntetizačního zařízení pro následné navázání. Navázání k doxorubicinu bylo provedeno jako v Příkladu 47. Ac-PLG-Hof-Y-Hol-Dox (ES MS 1326,3 (M+Na)⁺, 890,4 (M+H-414)⁺).

· · • 9 • · · · ·

Schéma 1

Syntéza konjugátů doxorubicinu na pevné fázi

SPPS (J-OH—O-peptid-NH₂

1) uzavřeni

2) štěpení

Cap-N H-peptide-COOH

Syntéza konjugátů v roztoku

Příklad 104: Syntéza Ac-Pro-Leu-Gly-Hof-Gly (morfolinylpropyl) -LeuDox

Schéma 2) (Krok la): Ke směsi Z-Leu-OH (2,65 g, 10 mmol), H-Gly-OtBu hydrochloridu (1,7 g, 10 mmol) a EDCI (2,3 g, 12 mmol) ve 200 ml CH₂C1₂ byl přidán pomalu při teplotě 0°C diizoprpyletylamin (3,0 ml). Výsledná směs byla promíchávána byla promíchávána při této teplotě po dobu '30 minut a při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Poté byla reakční směs naředěna pomocí CH₂Cl₂, promyta IN roztokem HCI, nasyceným NaHCO₃, vodou a solným roztokem, a vysušena pomocí MgSO₄. Po filtraci a zkoncentrování byl získán požadovaný dipeptid Z-LeuGly-OtBu ve formě bílé pevné látky (3,75 g, více než 95%. Zjištěná MS (M+l)⁺ 379,2.

·· ··

(Krok lb) : Dipeptid získaný z kroku la (3,75 g, 10 mmol) byl rozpuštěn v metanolu (200 ml) a směs byla hydrogenována v přítomnosti katalytického množství Pd/C (0,1 mol%) a několika kapek 4N HCI v dioxinu při 1 atm po dobu 3 hodin. Reakční směs byla zfiltrována, zkoncentrována a vysušena.

Výše získaný amin byl rozpuštěn v CH₂C1₂ (500 ml) a k této směsi byl přidán Ac-Pro-OH (1,57 g, 10 mmol), EDCI (2,3 g, 12 mmol), katalytické množství HOBT (100 mg) a diizopropyletylaminu (4,0 ml). Směs byla promíchávána při pokojové teplotě po dobu 3,5 hodin. Poté byla reakční směs nařgděna pomocí CH₂C1₂, promyta IN roztokem HCI, nasyceným NaHCO₃, vodou a solným roztokem a vysušena pomocí MgSO₄. Chromatografie na silika gelu (20% EtOAc v hexanu) vedla k získání požadovaného tripeptidu Ac-Pro-Leu-Gly-OtBu ve formě bílé pevné látky (3,63 g, 95%). Zjištěné MS (M+l)⁺ 384,3 (Krok lc) : Tripeptid získaný z kroku lb (3,63 g, 9,5 mmol) byl rozpuštěn v CH₂C1₂ (100 ml) a pomalu byla přidána při teplotě 0°C TFA (100 ml) . Směs byla promíchávána při teplotě 0°C po dobu 15 minut a při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Odpaření rozpouštědla poskytlo požadovanou kyselinu Ac-Pro-Leu-Gly-OH ve . formě bílé pevné látky (3,08 g, více než 95%). Zjištěné MS (M+l)⁺ 328,2.

(Krok 2a): Směs Z-Glu-OtBu (3,0 g, 8,9 mmol), morfolinu (2,0 ml, 23 mmol), EDCI (2,22 g, 11,6 mmol), katalytického množství HOBT (50 mg) a diizopropyletylaminu (2,0 ml) v THF (60 ml) byla promíchávána při pokojové teplotě po dobu 3 hodin. Většina rozpouštědla byla odstraněna, reziduum bylo rozpuštěno v EtOAc (100 ml) a prQmyto IN roztokem HCI, nasyceným NaHCO₃, vodou, solným roztokem a vysušena pomocí MgSO₄. Odpaření rozpouštědla poskytlo požadovanou sloučeninu ve formě bílé pevné látky (3,6 g, více než 95%). Zjištěné MS (M+l)⁺ 407,2.

(Krok 2b): Materiál z kroku 2a (3,5 g, 8,62 mmol) byl rozpuštěn v THF (50 ml) . K této směsi byl přidán BH₃ THF (1,0 M, 10 ml) a výsledná směs promíchávána pod zpětným chlazením po dobu 1,5 hodiny

O

O ·· ·· ·· • · • · · · » 4 4 · » * · « ·· ·« ··· · a při pokojové teplotě po dobu 30 minut. Rozpouštědlo bylo odstraněno, reziduum bylo rozpuštěno v EtOAc (100 ml) a promyto nasyceným NaHCO₃, vodou, solným roztokem. Chromatografíe na silika gelu (60% EtOAc v hexanu) vedlo k získání požadované látky Z-Gly (morfolinylpropyl) -OtBu ve formě bílé pevné látky (2,7 g, 81%. Zjištěné MS (M+l)⁺ 393,1.

(Krok 2c): Podle postupu analogickému postupu z kroku lc (2,7 g, 6,89 mmol), byl materiál z kroku 2b podroben reakci s TFA za vzniku kyselé Z-Gly(morfolinylpropyl)-OH ve formě bílé pevné látky (2,3 g, více než 95%. Zjištěné MS (M-1)’ 335,1.

(Krok 2d) : Materiál získaný z Kroku 2c) (392 mg, 1,0 mmol) byl rozpuštěn v DMF (10 ml) . K této směsi byla přidána hydrochloridová sůl H-Leu-OMe (182 mg, 1,0 mmol), BOP (442 mg, 1,0 mmol) a DIEA (0,52 ml, 3,0 mmol). Výsledná směs byla promíchávána při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Většina rozpouštědla byla odstraněna a reziduum bylo naředěno pomocí EtOAc (80 ml), promyto IN roztokem HCI, nasyceným NaHCO₃, vodou, solným roztokem a vysušeno pomocí MgSO₄. Po purifikaci pomocí HPLC (CNCH₃/H₂O) byl získán požadovaný dipeptid Z-Gly(morfolinylpropyl)-Leu-OMe ve formě bílé pevné látky (393 mg, 85%). Zjištěné MS (M+l)⁺· 464,6.

(Krok 2e) : Dipeptid získaný z Kroku 2d) (393 mg, 0,85 mmol) byl rozpuštěn v metanolu (100 ml) a směs byla hydrogenována v přítomností katalytického množství Pd/C (0,1 mol%) a několika kapek 4N HCI v dioxinu při 1 atmosféře po dobu 3 hodin. Reakční směs byla zfiltrována, zkoncentrována a vysušena.

Podle postupu analogickému postupu z kroku 2d byl materiál z výše uvedených kroků navázán k Boc-Hof-OH za vzniku požadovaného tripeptidu Boc-Hof-Gly(morfolinylpropyl)Leu-OMe ve formě bílé pevné látky (381 mg, 76%). Zjištěné MS (M+)⁺ 591,4.

(Krok 2f): Podle postupu analogickému postupu z kroku lc byl materiál z kroku 2e (381 mg, 0,65 mmol) podroben reakci s TFA za vzniku odpovídajícího aminu. Zjištěné MS (M+l)’ 491,4.

• · • * 99 ► · · t · · · 9 .1

Podle· postupu analogickému postupu z kroku · 2d byl materiál z výše uvedených kroků navázán k tripeptidu Ac-Pro-Leu-Gly-OH za vzniku požadovaného hexapeptidu Ac-Pro-Leu-Gly-Hof-Gly (mo-rf olinylpropyl} Leu-OMe ve formě bílé pevné látky (437 mg, 84%). Zjištěné MS (M+l)⁺ 800,5.

(Krok 2g) : K roztoku materiálu (400 mg, 0,5 mmol) získaného z kroku 2f v THF (5 ml) při teplotě 0°C byl přidán IN roztok LiOH (5 ml) . Po promíchání při této teplotě po dobu 3 hodin byla reakční směs acidifikována pomocí IN HC1 (5 ml) na pH 5. Rozpouštědlo bylo odstraněno a směs byla purifikována pomocí HPLC (CNCH₃/H₂O) . Požadovaný hexapeptid byl získán ve formě bílé pevné látky (337 mg, 86%). Zjištěné MS (M-l)‘ 784,5.

(Krok 2h) : K roztoku materiálu získaného z kroku 2g (39 mg, 0,05 mmol) v DMF (5 ml) při teplotě 0°C byl přidán BOP (27 mg, 0,06 mmol) a DIEA (0,05 ml). Po promíchání při této teplotě po dobu 5 minut byl k výše uvedené směsi přidán doxorubicin hydrochlorid (30 mg, 0,05 mg, 0,05 mmol). Výsledná směs byla promíchávána v temnu při teplotě 0° C po dobu 1 hodiny a při pokojové teplotě po dobu 2 hodin. Většina rozpouštědla byla odstraněna a reziduum bylo purifikováno pomocí HPLC (CH₃CN (0,1% NH₄Ac)/H₂O (0,1% NH₄Ac) ] ) . Zjištěné MS (M-l)’ 1309,1. (Poznámka: Při HPLC analýze se požadované sloučeniny dva vrcholy. Může zobrazují v oblasti se jednat o dva diastereomery vzniklé racemizací během navazování).

Schéma 2: Syntéza vzorového konjugátu doxorubicinu v roztoku ♦ * ϊ · • ·· ··· • · · »· ··· ·

EDCI

Z-Leu-OH + H-Gly-OťBu-^^CH₂C1₂

Z-Leu-Gly-OtBu

H₂ Ac-Pro-OH

Pd/C, MeOH BOP, DIEA DMF

TFA

AcPro-Leu-GIy-OtBu --- Ac-Pro-Leu-Gly-OH

CH₂C1₂ ³

O

ZHN.A

OtBu

O ΌΗ

TFA

CH₂C1₂

LiOH morfolin

EDCI

DIEA

O zhn<A

OtBu bh₃.thf

OtBu

O zhn^A

ΌΗ H-Leu-OMe

BOP, DIEA

ZHN

X^SLeu-i

OMe 1. H₂, Pd/C '0

-p

JJTA

2. Ac-Pro-Leu-Gly-OH BOP, DIEA ci

Ac-Pro-Leu-Gly-Hof- HřL JL _

X XeuOH

2. Boc-Hof-OH BOP, DIEA cí

Ac-Pro-Leu-Gly-Hof- Hbk JL _T

X ^-LeuOMe ϋ

Ac-Pro-Leu-Gly-HofDoxorubicin

BOP, DIEA eu-Dox : .) to • ·· • * · · · • * · ·

acylaci na 2' 1998).

: :: :

• · · ·

V literatuře je známa metodologie syntézy pro selektivní důležité chemoterapeutické látky paclitaxelu. Například byl hydroxylovou skupinu paclitaxelu navázán L-alanin (Sundfor,

Protože bylo prokázáno, že estery mají suboptimální stabilitu, je známo v oboru, že strategie založená na karbamátové vazebné látce vede ke stabilnějším konjugátům (de Groot). Tato metodologie byla dřívo použita k dopravování paclitaxelu k nádorům za použití plaskánu; avšak příslušná úprava peptidové sekvence, jak je uvedeno v tomto vynálezu, by měla vytvořit konjugáty, které jsou štěpitelné pomocí MMP.

Schéma 3: Syntéza konjugátů paclitaxelu

V literatuře bylo popsáno, že peptidy mohou být připojeny k Vinca alkaloidům, jako jsou například vinblastin a vincristin. Karbometoxy skupina vinblastinu může být například selektivně aktivována a připojena k N-terminu peptidového řetězce (Kandukuri). Osoba znalá oboru může kombinovat tuto technologii s peptidovými sekvencemi tohoto vynálezu za vzniku konjugátů s vinca alkaloidy štěpitelnými MMP.

I

9· ·· ♦ 9 9

9 · · *

9*· «· ····

Příklad 1000: Posouzení stability konjugátů v krvi

Stabilita peptidů konjugovaných s doxorubičinem v krvi člověka nebo nahých myší byla posouzena pomocí HPLC na reverzní fázi s fluorescenční detekcí po extrakci 80% acetonitrilem. Jednotlivé peptidy jsou připraveny jako 60 umolární roztoky v Hepes pufru o pH 7,5 (50 mM) s CaCl₂ (10 mM), Brij-35 (0,1%) s následným naředěním na 10 umolární koncentraci v čerstvé heparinizované plné krvi nebo pufru. Roztoky jsou inkubovány (37°C) s pomalým kontinuálním protřepáváním. Reakční směsi o objemu 50 ul jsou ukončeny v určených časech v rozmezí od 1 minuty do 24 hodin vortexováním do 200 ul acetonitrilu. Po krátké centrifugaci (1 minuta, 14000 x g), aby se zpeletizoval precipitát, je stažen acetonitril a odpařen do sucha pod proudem dusíku. Extrahované vzorky jsou nesuspendovány do 50 ul acetonitrilu, následně 100 ul destilované H₂O a přeneseny do HPLC autoinjekčních vialek. Vzorky byly chromatografovány za použití kolony Nova-Pak C18 (3,9 x 150 mm; Wat086344, Waters Corp., Milford, Ma) s 12 minutovým lineárním gradientem od 33,3 do 77,7% acetonitrilu, 0,1% TFA za použití průtoku 1 ml/minutu. Skenovaní fluorescenční detektor (* 474, Waters Corp) monitorující excitaci při 480 nm a emisi při 580 nm umožnil kvantifikaci AUC vrcholů, které byly předmětem zájmu; množství bylo extrapolováno ze standardní křivky vytvořené za srovnatelných podmínek. Výsledky jsou prezentovány v Tabulce 1 níže

Tabulka 1

Souhrnné výsledky stability konjugátů v krvi po 5,5 hodinách (procento kontroly (v pufru, T = 0))

	Pufr	Lidská krev	Krev nahých myší
Ac-PLG-LYAL-Dox	91,3%	37,5%	20, 0%
Ac-PLG-LLAL-Dox	102,0	55, 6	19,2
Ac-PLG-LAL-Dox	96, 8	49,1	9,0
Ac-PLG-LYL-Dox	112	90,1
Ac-PLG-LL-Dox	106	87,2	63,8
Ac-GPLG-LL-Dox	105	42, 6	25,8
Ac-GPLG-LAL-Dox	92,2	15,4	5, 8
Ac-PLG-L-Dox	99,2	74, 7	68,2
Ac-GPLG-L-Dox	106	10,2	5,9

• Φ ··

I > *

Vyhodnoceni konjugátů jako substrátů pro MMP a Neprilysin

Sloučeniny, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, by měly být dobrými substráty pro specifické MMP, ale neměly by být substráty pro příbuzné proteázy, které nejsou exkluzivně exprimovány v okolí nádoru. Příkladem takové nechtěné proteázové aktivity je neprolysin, který byl identifikován jako hlavní metaloproteáza v několika lidských nádorových líních. Neprilysin je exprimován v ledvinách, makrofázích a mozkové tkáni (Li et al.). Ke zvýšení cílení konjugátů do nádorové tkáně byly konjugáty testovány jako substráty pro MMP a neprilysin. Sloučeniny, které jsou předmětem tohoto vynálezu, mají kcat/K_m větší než 1000 mM^_1s~¹, jsou-li analyzovány za použití relevantní MMP a k_cat/K_m menší než 1000 mM^_1s^_1, jsou-li analyzovány za použití neprilysinu.

Přiklad 1001

Štěpení konjugátů doxorubicin-peptid pomocí MMP a Neprilysinu Konjugáty peptidů s doxorubicinem byly rozpuštěny v DMSO do objemu 10 ml v pufru pro reakci s metaloproteázou (50 mM Herpes pH 7,5, 0,1% Brij 35, 10 mM CaCl₂) . MMP2, 9 nebo 14, nebo neprilysin byly naředěny do finální koncentrace 10 uM pufrem pro reakci s metaloproteázou plus 400 mM NaCl. V reakčním objemu 1 ml byl doxkonjugát naředěn do 1 uM pufrem pro reakci s metaloproteázou. Reakce byla ekvilibrována na teplotu 37°C. K zahájení reakce byl přidán enzym, 2 nM MMP-9 nebo 4 nM MMP-2, nebo 2,5 nM-MMP-14 nebo 10 nM neprilysinu. Ve stanovených časových bodech byly odebrány 100 uL alikvóty (0, 5, 10, 15, 20, 30, 40, 50, 60) a reakce byla ukončena 10 ul 0,5 M roztokem s EDTA. Konjugáty a produkty byly separovány pomocí HPLC s reverzní fází na HPLC systému Waters Aliance (separační modul 2690 se skenovacim fluorescenčním detektorem 474) . Vzorek o objemu 20 uL byl nanesen na kolonu Waters Cl8 Novapak o rozměrech 3,9 mm x 150 ml a eluován 12 minutovým gradientem od 27% do 63% acetonitrilu/0,1% TFA při průtoku 1 ml/minutu. Vrcholy obsahující doxorubicin byly detekovány fluorescenčně při excitaci při 480 nm a emisi při 580 nm. Plochy vrcholů byly integrovány a subtrátova plocha vrcholu byla vynesena proti času. Data byla zanesena do jednoduché exponenciální rozpadové křivky, kde y = Aoe[kt]. A_o je úvodní hodnota y, plocha substrátového vrcholu a k je n

konstanta rychlosti reakce. Protože reakce byla provedena za podmínek prvního řádu (substrát je mnohem menší než Km), k_cat/K_m mohou být vypočteny z k_cat/K_m = k/ [E_t] . Výsledky jsou prezentovány v Tabulce

2.

	Enzym*
Mmp-9	MMP-2	MMP-14	Neprilysin
AcPLG-LYL-Dox	390,000	88,000	—	22,00
AcPLG-LYAL-Dox	296,000	190,000	134,000	38,000
AcPLG-LAAL-Dox	165,000	110,000	—	120,000
AcPLG-LLSL-Dox	149,000	103,000	—	82,000
AcPLG-LLAL-Dox	130,000	63,000	—	100,000
AcPLG-LL-Dox	130,000	18,000	4,100	22,000
AcGPLG-LL-Dox	95,000	30,000	—	20,000
AcPLG-LY-Dox	110,000	40,000	—	19,000
Ac PLG-LAL-Dox	24,000	53,000	—	49,000
AcGPLG-LAL-Dox	19,000	86,000	—	42,000
AcPLG-HofYL-Dox	34,000	Více něž 120,000	Více než 120,000	Méně než 1000
SucPLG-HofYL-Dox	Vice než 120,000	Více než 120,000	Více než 120,000	Méně než 1000
AcPLG-HofOrnL-Dox	26,000	136,000	Více než 120,000	Méně než 1000

* Kde bylo provedeno více než jedno měření, je hodnota uvedena jako průměr více měření

Přiklad 1002

Zhodnocení konjugátů jako substrátů pro aminopeptidázu.

Konjugáty byly inkubovány s 1 nM MMP2 po dobu 3 hodin při 37° C v 50 mM HEPES, 10 mM CaCl₂, 0,1% Brij, pH 7,5, aby došlo ke vzniku LYLDox, produktu MMP. Poté byla přidána k 12,5 milí jednotkám/ml aminopeptidáza N (Boehringer Mannheim č. 102768) aby došlo k postMMP zpracování. V různých časech (za 3, 6, 9, 15, 20, 30 a 100 minut) byly odebrány alikvóty reakční směsi (0,045 ml) a byly přidány do zkumavek s 0,005 ml 0,5 mM EDTA, aby došlo k inhibici aminopeptidázové aktivity. Jedna polovina každého odběru byla separována na koloně Novapak C18 (3,9 x 150 mm) při průtoku 1 ml/minutu za použití gradientu popsaném v Tabulce 3. HPLC gradienty: Rozpouštědlo A je 14 mM NaPi, 0,5 mM trietylamin, pH 4,2; Rozpouštědlo B je 50% A, 50% acetonitril; a rozpouštědlo C je acetonitril. Frakční složení bylo určeno za použití integrovaných ploch vrcholů.

* ♦ • · ·· ««

Tabulka 3. Gradient pro HPLC

Čas, minuty	A, %	B, %	C, %
0	50	50	0
12	0	100	0
18	0	100	0
19	0	0	100
22	0	0	100
22,5	50	50	0
27	50	50	0

Příklad 1003

Zhodnocení cytotoxicity konjugátů

Konjugáty byly testovány na cytotoxický efekt vůči buněčné linii HT1080, která exprimuje mnoho MMP. Buňky se mohou lišit významně v expresi aktivních MMP; daná buněčná linie nemusí být tedy optimální pro zhodnocení daného konjugátu. Buňky HT1080 v kultuře mají významné koncentrace MMP 2, 9 a 14, a jsou proto obzvláště vhodné pro zhodnocení pro hodnocení konjugátů, které jsou substráty pro tento enzym.

Buněčná linie byla inkubována v tkáni MEM s Earlovými solemi obsahujícími 10% fetální bovinní sérum (FBS). První den bylo umístěno 500 buněk do 96 jamkových destiček v 200 ul média pro buněčnou kulturu, která obsahovala 10% FBS bez bovinních gelatináz odstraněných na koloně gelatin-sepharóza. Druhý den byly přidány do destiček konjugáty peptidyl-Doxorubiein a Doxorubiein jako kontrola. Buňky byly inkubovány tři dny při teplotě 37°C, v přítomnosti 5% CO2 v inkubátoru v tkáňové kultury. Do každé jamky mikrodestičky bylo přidáno činidlo MTS za použití instrukcí výrobce (ref.). Destičky byly inkubovány po dobu 2 hodin při teplotě 37°C, v přítomnosti 5% CO2. Destičky byly odečítány na odečítacím zařízení Molecular Device Spectromax 250 při 490 nm. Poté byla pro každou koncentraci •0 ·· • · ···

• · 0 ··· · testované sloučeniny vypočtena viabilita buněk, a tato vlastnost byla srovnána s kontrolními buňkami, kde nebyla přidána žádná sloučenina. U reprezentativních sloučenin, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, byla touto analýzou zjištěna EC50 pro smrt buňky 10 uM nebo méně; přednostněji u reprezentativních sloučenin, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, byla touto analýzou zjištěna EC50 pro smrt buňky 1 uM nebo méně.

Tabulka 4

Cytotoxicita konjugátů vůči buňkám HT1080

Sloučenina	EC50 (nM)
Doxorubicin	8-9
Ac-PLG-LYAL-Dox	Méně než 10,000
Ac-PLG-LLAL-Dox	Méně než 10,000
Ac-PLG-LL-Dox	Méně než 10,000
Ac-PLG-LAL-Dox	Méně než 10,000

Transport aktivní cytotoxické látky může být alternativně posouzen inkubací konjugátů s buňkami a analýzou koncentrací aktivních látek pomocí HPLC. Příklady tohoto způsobu hodnocení následují.

Přiklad 1004: Analýza zpracování kultur HT1080

Aktivně rostoucí buňky HT1080 jsou umístěny do 12-jamkové destičky v koncentraci 2 χ 10⁵ buněk na jamku v DMEM s 10% séru. Následující den je médium odstraněno a buňky jsou dvakrát promyty pomocí PBS. Poté je do každé jamky přidáno 1,5 DMEM obsahující 0,1% BSA, 1 uM Ac-PLG-HofK(Me2) L-Dox, a 40 nM PMA. K některým vzorkům je přidáno široké spektrum MMP inhibitorů, takže může být určen stupeň zpracování způsobený MMP. V uvedených časech jsou odebrány 0,1 ml alikvóty, je přidáno 0,4 ml acetonitrilu, směs je zvortexována a centrifugována po dobu 2 minut. Je odebráno 0,4 čirého supernatantu, který je vysušen za použití proudu dusíku. Vysušená peleta je suspendována v 0,12 ml HPLC pufru A a analyzována jako v Příkladu 1000.

9» ·* ♦ » * • · · ·· ♦ » 9 *

9 4 9 »

49 499

9 4 * ·

4 · * *

4 4

4494

Výsledky z typické analýzy jsou sumarizovány v Tabulce 5. V časech použitých v tomto experimentu je jediným detekovatelným metabolitem L-Dox. HofK(Me2)L-Dox a K(Me2)L-Dox nejsou detekovány, protože jsou rychle přeměněny na L-Dox. Později je z L-Dox vytvořen Dox. Zpracování je výrazně sníženo inhibitorem MMP, což ukazuje, že MMP jsou hlavními zpracovávajícími enzymy v těchto buňkách.

Tabulka 5.

Analýza zpracovávání v kulturách HT1080

Čas, hodiny	Frakce L-Dox
Minus inhibitor MMP	Plus inhibitor MMP
0	0	0
3	0,10	0,004
5,5	0,20	0,01
8	0,46	0,02

Přiklad 1005: Níže jsou popsány chromatografické studie navržené ke zhodnocení preferenční akumulace Dox v HT1080 xenograftech příbuzných tkáni srdce a plazmě.

Podání konjugátu a sběr tkáně:

Nádory HT1080 jsou transplantovány naivním Weiss nahým myším z nádorových xenograftových fragmentů a jsou ponechány růst po dobu 1 týdne. Experimentální Dox-konjugáty jsou rozpuštěny v N,Ndimetylacetamidu (DMAC) a poté naředěny vodou za vzniku požadované koncentrace konjugátu v 10% DMAC. poté je do ocasních žil injekčně aplikováno 0,2 ml roztoku konjugátu. V různých časech po injekční aplikaci jsou tři myši anestetizovány pomocí CO₂ a srdeční punkcí je odebrána do stříkačky obsahující 0,1 ml Na citrátu. Krev je odebrána do mikrocentrifugační zkumavky, která je centrifugována po dobu 2 minut v centrifuze Eppendorf. Poté je přeneseno 0,3 ml plazmy do čerstvé zkumavky a tato plazma je zamražena za použití tekutého dusíku. Po usmrcení je odebrán nádor, levá ledvina a srdce a tyto tkáně jsou zamraženy tekutým dusíkem. Tkáně jsou zamraženy při teplotě -80°C do extrakce.

··

9

9999

Extrakce tkání:

Vzorky jsou rozmraženy, zváženy a rozstříhány nůžkami a je přidána studená, citrátová myší plazma (Cocalíco Biological (č. 30-0931). Ledové sedimenty jsou homogenizovány 1 minutu homogenizátorem IKA Ultra-Turrex a 0,5 ml je poté přeneseno do mikrocentrifugační zkumavky. Okamžitě po homogenizaci je přidáno 0,1 ml 33% dusičnanu stříbrného. Poté je přidáno 0,5 acetonitrilu a výsledná směs je krátce zvortexována, promíchávána po dobu 15 minut a centrifugována po dobu 5 minut. Supernatant je přenesen do nové zkumavky, vysušen proudem dusíku při teplotě 37°C a uskladněn při teplotě -80°C.

Separace, identifikace a kvantifikace Dox a Dox obsahujících sloučenin v extrahovaných vzorcích:

0,06 ml acetonitrilu je přidáno k rozmraženým suchým vzorkům a směs je krátce zvortexována. Poté je přidáno 0,6 ml pufru A, směs je krátce zvortexována a následně podrobena 1 minutové sonikaci ve vodní lázni. Vzorky jsou cent rif ugovány po dobu 10 minut, aby se odstranil nerozpustný materiál a čistý supernatant je naředěn pomocí 60 UL pufru A, aby se dosáhlo složení pufru pro HPLC pro injekční aplikaci. 0,1 ml vzorku je poté injekčně aplikováno na kolonu Novapak C18 (3,9 x 150 mm) průtokem 1 ml/min a eluováno následujícím gradientem

Čas	%A	%B	%C
0	50	50	0
12	0	100	0
18	0	100	0
19 ‘	0	0	100
33	0	0	100
34	50	50	0
40	50	50	0 konec analýzy

Pufr A: 14 mM NaPi, 0,5 mM Trietylamin, pH 4,2 Pufr B: 50% pufr A, 50% Acetonitril Pufr C: 100% Acetonitril

Detekčním způsobem je fluorescence s excitací při 480 nm a emisí při

580 nm

Vzorky z myších tkání typicky ukazují tři hlavní vrcholy, které putují spolu s mateřským konjugátem, autentickým Leu-Dox a doxorubicinem. K výpočtu množství těchto látek jsou plochy vrcholů z tkáňových vzorků zkonvertovány na pmol/lnjekci za použití rovnice odvozené ze standardní křivky pro Dox. Hodnoty pmol/injekci jsou poté vynásobeny číslem 2,4, aby bylo dosaženo jednotek pmol/vzorek. Hodoty pmol/vzorek jsou rozděleny analyzovanou velikostí tkáně (plazma = 0,3 ml, nádor = 0,086 mg, srdce, ledviny, játra = 0,042 mg) za vzniku jednotek pmol/velikost tkáně. Poté jsou z hodnot pmol/velikost tkáně vypočteny průměrné a standardní chyby pro tři vzorky pro každý čas a tkáň. Křivky koncentrace-čas, parametry PK a relativní tkáňové distribuce jesou určeny z těchto průměrných hodnot pmol/velikost tkáně.

Další příklady tohoto vynálezu byly připraveny za použití způsobů zde uvedených a hodnocených metodologií popsanou v Příkladech provedení vynálezu uvedených výše. Reprezentativní sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou uvedeny v Tabulce 6a až 6g.

Tabulka Příklad	6a	Cap—Pl—Pl'—P2'—X—Doxorubicin	M/Z:
Příklad	164	4-(2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl) )toutyl -S-Hof-Y-	-L-Dox 1256.6
			(M+H+H2O)
Tabulka	6b
Příklad		Cap—P2—Pl—Ρ'—P2 X—Doxorubicin	M/Z:
Příklad	1	4-πιetoxy-benzenesulfonyl-p-JUa-G-Hof-Y-l·-Dox	1277.1 (M-H)
Příklad	2	1,2-0½ (CO) 2-H-G-Hof-Y-L-Dox	1305.5 (M+H)
Příklad	41	acetyl-l-G-l-Y-L-Dox	1145.8 (M+H)

·* tt* • tttt • · tttt* • tt 9 9 tt 9 9 9

99 ·9

9 • * » · tt·· ·

Příklad	42	cyklopropylkarbonyl - L-G-L-Y-I-Dox	1171.7	(M+H)
Příklad	43	cyklobutylkarbonyl - L-G-L-Y-L-Dox	1185.7	(M+H)
Příklad	44	pivaloyl - 1-G-I-Y-l-Dox	1187.8	(M+H)
Tabulka	6c
Příklad		Cap-P3—P2—Pl—Pl'-X-Poxorúbicin	M/Z:
Příklad	3	Acetyl-P-L-G-L-L-Dox	1079
Příklad	4	Acetyl-P-(R ) 1-G-I-l-Dox	1079
Příklad	5	Acetyl-P- (β-Ala)-G-L-L-Dox	1037
Příklad	6	Acetyl-P- (γ-Abu)-G-L-L-Dox	1051
Příklad	7	Acetyl-P-Cha-G-L-L-Dox	1119 (M+Na)
Příklad	8	P-l-G-L-L-Dox	1059.5	(M+Na)
Příklad	9	MeOCH2CH2OCH2C (=O) -P-L-G-L-L-Dox	1153
Příklad	10	MeOCH2CH2OCH2CH2OCH2C (=0) -P-L-G-L-L-Dox	1197.9	(M+H)
Příklad	'11	H2NCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (=O) -P-L-G-I-L-Dox	1206
Příklad	12	AcHNCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (=O) -P-L-G-L-L-Dox	1248
Příklad	13	AcN (CH2CH2) 2NCH2C (=0) P-L-G-L-L-Dox	1205
Příklad	17	Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox	1227
Příklad	18	Acetyl-P-H-G-Hof-L-Dox	1151.2	(M+H)
Příklad	19	Acetyl-P-Om-G-Hof-L-Dox	1128.4	(M+H)
Příklad	20	Acetyl-P-Dap-G-Hof-L-Dox	1100
Příklad	21	Acetyl-P-Cit-G-Hof-L-Dox	1171

»*

4 « * • · ·· » · ♦

4 4 » 44

9 ► ··*·

Příklad 22

Příklad 23

Acetyl-P-L-G-(O-{3-pyridyl-))Y-L-Dox

Acetyl-P-L-G-(0-(4-pyridyl-))Y-L-Dox

1206,523 (M+H)

1206.524 (M+H)

Příklad	24	Acetyl-P-L-G-(4-aza-)Hof-L-Dox	1128.517 (M+H)
Příklad	25	Acetyl-P-L-G-(O-benzyl-)S-L-Dox	1141.5(M-H)
Příklad	26	Cbz-P-L-G-(O-(4-pyridylmetyl-))Y-L-Dox	1312.8 (M+H)
Příklad	27	Acetyl-P-L-Sar-L-L-Dox	1093.534 (M+H)
Příklad	28	Acetyl-P- (N-Me-).L-G-L-L-Dox	1115.518 (M+Na)
Příklad	29	Acetyl-P-L-G-(N-Me-)L-L-Dox	1115.517 (MtNa)
Příklad	30	Acetyl-Hyp-L-G-L-L-Dox	1117.494 (Mt-Na)
Příklad	31	Acetyl-1zc-L-G-L-L-Dox	1119.454 (MHfe)
Příklad	32	Acetyl-(Homo-P)-L-G-L-L-Dox	1115.516 (MtNa)
Příklad	33	Acetyl-(Homo-P)-L-G-Hof-L-Dox	1163.516 Wfe)
Příklad	34	Acetyl-(Homo-P)-Orn-G-Hof-L-Dox	1142.529 (MtNa)
Příklad	35	Acetyl-Nipekotát-L-G-L-L-Dox	1142.529 (MtNa)
Příklad	36	Acetyl-Aze-L-G-L-L-Dox	1087.485 (Mtífe)
Příklad	37	Acetyl-Chg-L-G-L-L-Dox	1143.548 (MtNa)
Příklad	38	Acetyl-P-valerolaktam-G-L-L-Dox	1085.468 (MtNa)
Příklad	39	Acetyl-G-P-L-G-L-F-Dox	3170.9 (M+H)
Příklad	40	Acetyl-G-P-L-G-F-F-Dox	1204.9 (Mffl)
Příklad	141 Acetyl-(4-fluoro-F)-L-G-L-L-Dox	3226.528 (MHfe)

Tabulka 6d

Příklad		Cap—P3—P2—Pl—PlP2X-Doxorubicin	M/Z:
Příklad	46	acetyl-P-L-G-L-A-L-Dox	1148.8	(M-H)
Příklad	47	acetyl-P-L-G-L-Y-L-Dox	1240.9	(M-H)

Příklad 48 Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

1360.9 (M+H) * 4

44*4 • 4 4 • 4 · 94

		91	» 9 4 4 4 4 4 4 4 44 44
Příklad	49	H3CC(=0)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox	1388
Příklad	50	AcHNCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (=0) -P-I-G-L-Y-L-Dox	1411.8	(M+H)
Příklad	51	acetyl-P-L-G-L-S-L-Dox	1166
Příklad	55	acetyl-P-L-G-L-L-L-Dox	1193.4	(M+H)
Příklad	101	acetyl-P-L-G-Hof-H-L-Dox	1264.3	(M+H)
Příklad	102	acetyl-P-L-G-Hof-A-L-Dox	1196.8	(M-H)
Příklad	103	acetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox	1288.8	(M-H)
Příklad	104	acetyl-P-L-G-Hof-(morfolinylpropyl-G)-L-Dox	1311.6	(M+H)
Příklad	106	sukcinyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox	1349.6	(M+H)
Příklad	107	acetyl-P-L-G-Hof-(O-(4-pyridylmetyl)-Y)-L-Dox	1381.8	(M+H)
Příklad	108	acetyl-P-L-G-(homo-Y)-Y-L-Dox	1304.6	(M-H)
Příklad	109	acetyl-P-L-G-(4-aza-Hof)-Y-L-Dox	1291.8	(M+H)
Příklad	110	acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-)-Y)-Y-L-Dox	1367.6	(M-H)
Příklad	111	acetyl-P-L-G-(fenylpropyl-G)-Y-L-Dox	1302.4	(M-H)
Příklad	112	acetyl-P-L-G-(styryl-A)-Y-L-Dox	1300.5	(M-H)
Příklad	113	acetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox	1367.6	(M-H)
Příklad	114	acetyl- P-(Ν,Ν-dimetyl-K)-G-Hof-Y-L-Dox	1333
Příklad	115	acetyl-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox	1213.4	(M+H)
Příklad	116	acetyl-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox	1241.6	ÍM+H)
Příklad	117	Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox	1359.9	(M+H)
Příklad	120	acetyl-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox	1242
Příklad	121	acetyl-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox	1351

» · « · i ♦ · ·· ,··«

Příklad 123 acetyl-P-Orn-G-L-Y-L-Dox

Příklad 124 acetyl-P-(4-aza-F)-g-l-y-l-Dox

Příklad 125 acetyl-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox

Příklad 126 acetyl-P-L-G-Hof-K-L-Dox

Příklad 127 acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox

Příklad 129 Peg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox

Příklad 132 acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox

Příklad 133 acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Cha-Dox

Příklad 134 acetyl-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox

Příklad 136 acetyl-P-L-G-Hof-Q-L-Dox

Příklad 137 acetyl-P-L-G-Hof-(4-aza-F)-L-Dox

Příklad 138 acetyl-P-L-G-Hof-V-L-Dox

Příklad 142 acetyl- (homo-P)-L-G-L-Y-L-Dox

Příklad 143 acetyl- (homo-P) -L-G-Hof-Orp-L-Dox

Příklad 144 acetyl-Aze-L-G-L-Y-L-Dox

Příklad 145 acetyl-Áze-L-G-Hof-Orn-L-Dox

Příklad 14 6 acetyl-P-L-G-L-Y-G-Dox

Příklad 147 acetyl-P-L-G-Hof-Y-G-Dox

Příklad 148 acetyl-P-L-G-L-Y- (p-homo-L) -Dox

Příklad 149 acetyl-P-L-G-Hof-Y-(β-homo-L)-Dox

Příklad 150 acetyl-P-L-G-L-Y- (p-Ala)-Dox

Příklad 151 acetyl-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox

Příklad 152 acetyl-P-L-G-L-Y-Aph-Dox

Příklad 153 acetyl-P-L-G-L-Y-Amh-Dox

Příklad 165 acetyl-P-L-G-Hof-(N-metylpiperazinpropyl-G)

Příklad 166 tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Příklad 167 tetrazolacetyl-P-L-G-(O-benzyl-S) -Y-L-Dox r · « ·· • · · ·· * b · · · · * » B B · *

B« ·· »♦·

1243.3 (M+H)

1277

1227.6 (M+H)

1254

1283.6 (M+H)

1401

1283

1323

1284.4 (M+H)

1255.8 (M+H)

1275.6 (M+H)

1224.1 (M-H)

1278.578 (M+Na)

1256.624 (M+Na)

1250.549 (M+Na)

1227.585 (M+Na)

1208.5020(M+Na)

1256.5040(M+Na)

1278.5830(M+Na)

1326.5810(M+Na)

1222.5150(M+Na)

1264.5650(M+Na)

1326.5820(M+Na)

1292.5950(M+Na) •L-Dox 1324.6 (M+H)

1356.4 (M-H)

1372.5 (M-H) «

*« »» • ·« • · · ·· » · · » »« ·« »· » ·» • · · • · · • · · ·· »··«

Příklad	168
Příklad	169
Příklad	170
Příklad	171
Příklad	172
Příklad	173
Příklad	174
Příklad	175
Příklad	178
Příklad	179
Příklad	180
Příklad	181
Příklad	182
Příklad	183

tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox

P-L-G- (O-benzyl-S) -Y-L-Dox acetyl-P-L-G-Hof-(homoY)-L-Dox acetyl-P-AzaHof-G-AzaHof-Y-L-Dox acetyl-P-Ii-G- (Ο-allyl-S) Y-L-Dox acetyl-P-L-G-(4-nitro-Hof)-Y-L-Dox acetyl-P-L-G-Hof-AzaHof-L-Dox acetyl-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-Dox

3-pyridinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

2-pyrazinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

Ac-P-L-G-Hof-K(ME2)-Nle-Dox

Ac-P-L-G-Hof-Y-Hos Dox

Ac-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox

Ac-P-L-G-Thr(OBzl)-Y-L-Dox

1356.5 (»fl)

1264.5 (Mffl)

1302.5 (M-H)

1340.4 (Mffl)

1254.6 (M-H)

1333.4 (M-H)

1289.6 (Mffl)

1228.6 (M-H)

1353.6 (MtH)

1352.7 (M-H)

1283.5 (M+H)

1300.5 (Mtífa)

1326.2 (M+Na)

1342.4 (MHSa)

Tabulka 6e
Příklad		Cap-P4—P3-P2—Pl—Pl'-X-Doxorubicin	M/Z:
Příklad	45	Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox	1207
Příklad	52	acetyl-G-P-L-G-L-L-Dox	1136
Příklad	53	O(CH2CH2)NCH2CH2NHC(=O)-G-P-L-G-L-L-Dox	1250
Příklad	54	acetyl-G-P-L-G-L-Y-Dox	1208.5 (MtNa)
Příklad	56	acetyl-G-P-L-G-Bip-F-Dox	1280
Příklad	57	acétyl-G-P-L-G-Nle-F-Dox	1170
Příklad	58	Cbz-G-P-L-G-L-L-Dox	1251
Příklad	59	AcHNCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (=0)-G-P-L-G-L-L-Dox	1306
Příklad	60	H2NCH2CH2N (CH2CH2) 2NCH2C (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox	1262

#« ♦ · • · » • · ··!

• · · · ·

9 4 ·

94

44 · ·

4 4

4 4 ·

4 4 .44 4444

Příklad	61 Dmg-P-L-G-L-L-Dox	1122
Příklad	62 acetyl-γ-Ε -P-L-G-L-L-Dox	1208
Příklad	6 3 acetyl-G-P-L-G-Tha-F-Dox	1210
Příklad	64 acety 1-G-P-L-G-Phg-F-Dox	1190.8(M+H)
Příklad	65 metoxyacetyl-G-P-L-G-L-L-Dox	1166
Příklad	66 Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox	1220
Příklad	67 Drag-P-L-G-Phg-L-Dox	1199
Příklad	6 8 Dmg-P-L-G-(O-benzyl-Y)-L-Dox	1319
Příklad	69 Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox	1289
Příklad	7 0 acetyl-G-P-L-G-F-Bip-Dox	1279
Příklad	7 1 acetyl-G-P-L-G-L-Bip-Dox	1247
Příklad	7 2 acetyl-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox	1130
Příklad	73 acetyl-G-P-L-G-F-A-Dox	1127
Příklad	7 4 acetyl-G-P-L-G-Bip-A-Dox	1204
Příklad	7 5 acetyl-G-P-L-G-L-A-Dox	1094
Příklad	76 acetyl-G-P-L-G-(O-benzyl-Y)-F-Dox	3310
Příklad	7 7 acety1-G-P-Q-G-L-L-Dox	1151.8 (M+H)
Příklad	7 8 acetyl-G-P-R-G-L-L-Dox	1179
Příklad	79 acetyl-G-P-L-G-L-(4-pyridyl-A)-Dax	1171
Příklad	80 acetyl-G-P-L-G-L-R-Dox	1178
Příklad	8 1 acetyl-G-P-L-G-L-H-Dox	1208
Příklad	82 acetyl-G-P-L-G-V-L-Dox	1121
Příklad	8 3 acetyl-G-P-L-G-Hof-L-Dox	1184.8 (M+H)
Příklad	8 4 acetyl-G-P-L-A-L-L-Dox	1150
Příklad	85 Dmg-P-I-G-Blp-L-Dox	1232.8 (Mffl)
Příklad	8 6 Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Dox	1258
Příklad	8 7 acetyl-G-P-V-G-L-L-Dox	1122

to· toto to * » • · ··* • to· • ·· ·· *· • 1« ·· • to t · • to • · to· ·· to ····

Příklad.	88 Dmg-P-I-G-L-L-Do?:	1122
Příklad	89 Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox	2274
Příklad	90 acetyl-G-P-L-G-Ii-(0-benzyl-Y)-Dox	2276
Příklad	91 acetyl-G-P-L-G-E-L-Dox	1152
Příklad	92 Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox	1247
Pí klad 93 acetyl-G-P-L-G-L-E-Dos	1152
Příklad	94 acetyl-G-P-L-G-Bip-E-Dox	1262
Příklad	98 acetyl-G-P-L-G-N-L-Dox	1137
Příklad	9 9 acetyl-G-P-L-G-S-L-Dox	1110.3 (M+H)
Příklad	100 acetyl-G-P-l-G-(4-hydroxy-fenyl-G)-I-Dox	1172
Příklad	140 acetyl-G-Aze-IrG-L-L-Dox	1144.5 (MHfe)

Tabulka 6f
Příklad	Cap-P4-P3—P2—Pl—Pl '-P2 '-X-Doxorubicín	M/Z:
Příklad	95	Dmg-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox	1384
Příklad	96	Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox	1370
Příklad	97	Ding -P-R-G-Bip-R-L-Dox	1432
Příklad	105	acetyl-γ-E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox	1419.8 (M+H)
Příklad	118	acetyl -y-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox	1370
Příklad	119	γ-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox	1328
Příklad	122	acetyl-γ-E-P-Orn-G-Hof-E-L-Dox	1386
Příklad	128	Dmg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox	1326
Příklad	130	acetyl-y-E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-	-Dox 1410
Příklad	131	γ-E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox	1370
Příklad	135	acetyl-γ-E-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox	1413
Příklad	139	acetyl-γ-E-P-L-G-Hof-E-L-Dox	1407.4 (M+Na)
Příklad	156	acetyl-G-P-L-G-L-A-L-Dox	1207
Příklad	161	Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox	1285

·· ····

		96	• · · ·· ··
Přiklad	162	Dmg-P-R-G-Phg-Y-l-Dox	1348
Příklad	163	acetyl-G-P-L-G-L-R-L-Dax	1292
Příklad	176	acetyl-γ-E-P-L-G- (O-bertzyl-S) -y-l-Dox	1433.5 (M-H)
Příklad	177	acetyl-g-E-P-L-G-(O-ben,zyl-S)-Y-Nle-Dox	1433.5 (M-H)
Příklad	184	Ac-y-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox	1419.9 (M+H)
Tabulka	6g
Příklad		Cap-P3—P2—Pl-Pl '-P2 '-P3 '-X-Doxorubicin	M/Z:
Příklad	154	acetyl-P-L-G-L-L-A-L-Dox	1263
Příklad	155	acetyl-P-L-G-L-Y-A-L-Ďox	1313
Příklad	157	acetyl-P-L-G-L-A-A-l-Dox	1221
Příklad	158	acetyl-P-L-G-L-A-L-L-Dox	1263
Příklad	159	acetyl-P-L-G-L-L-S-L-Dox	1279
Příklad	160	acetyl-P-L-G-L-L-L-L-Dox	1306

• * ·

Claims (38)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Sloučenina definovaná Vzorcem (I)

   E^cp-A (I) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

   E^cp je peptid štěpitelný enzymem konjugováný k A a vybraný z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa~;

   Cap-Paa-Xh2-Sar-Xpl-Laa-;

   Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laá-;

   Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa~; a

   Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mime tikům;

   Xa2 je aminokyselina;

   Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- nebo -Sar-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

   • ·

   Xp2 je aminokyselina;

   Xp3 je aminokyselina;

   Laa je aminokyselina vybraná u Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pvridvl-Ala, 3-pvridyl-Ala, Glv, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O-(C1-C4 alkyl)-Tyr, 0-(fenyl (Ci-C₄ alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylové kyselina;

   Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4~;

   Xa4- je aminokyselina;

   R je amino uzavírající skupina;

   a

   A je antineoplastická látka.
2. 2. Sloučenina podle patentového nároku 1, kde A je doxorubiein, doxorubicinový derivát nebo doxorubicinový analog.
3. 3. Sloučenina podle patentového nároku 2, kde A je doxorubiein.
4. 4. Sloučenina podle patentového nároku 3 definovaná Vzorcem (la):

   nebo její farmaceuticky přijatelné sůl, kde; E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z: Cáp-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa~;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   • ·

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

   Cap-Xa2-Sar-Xpl-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Sar-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Xa2-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-; a

   Cap-Sar-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Qhg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mimetikům;

   Xa2 je aminokyselina;

   Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- nebo -Sar-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

   Xp2 je aminokyselina;

   Xp3 je aminokyselina;

   Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, α-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, S^-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Ahx, Aph, Amh, Phe, Bip, Glu, Arg, Trp, Tyr, O-(Ci-C₄ alkyl)-Tyr, O-(fenyl (C1-C4 alkyl)-)-Tyr, (C₃-C₈ alkyl)-Gly, a aminoalkylová karboxylová kyselina;

   Cap je N-terminélni skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4~;

   Xa4- je aminokyselina;

   R je vybráno z H₃CC(=O)-;

   HOC (=0) - (CH_2vC (=0)-, kde vjel, 2, 3, 4, 5 nebo 6;

   H₃CO- (CH2CH2O) t-CH₂C (=0)

   HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) t-CH₂C (=0) -,

   H₂N-(CH₂CH₂O)t-CH₂C(=O)-, a

   H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2, 3, nebo 4;

   R^C^O)-;

   r^x-s(=o)2-;

   ··

   1Q0

   I^-NHC (=0)-;

   R^la-CH₂C (=0)-;

   prolin substituovaný pomocí -OR³;

   C1-C4 alkyl substituovaný pomocí 0-1 R⁴;

   2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

   -(0=) C-fenyl —C(=0)—;

   R¹ je C₃-C_G cykloalkyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;
5. 5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený,- kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH, metoxy nebo CO₂H;

   fenyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; nebo

   Ci-Cé alkyl substituovaný 0-4 R^xa;

   R^la je -OH, C1-C3 alkvl, C1-C4 alkoxv, -CO?H, N (CH?CH₂) ?N-R², SÓJÍ;

   C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

   5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH;

   fenyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

   R² je H, H?N(C₂-Ch alkvl)-, acetvl (H)N(C₇-Cd alkyl)-, nebo acetvl;

   R³ je H, C1-C4 alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

   R⁴ je OH, Ci-C₃ alkvl, .C1-C4 alkoxv, -CO₂H, -N (CH?CH?) ?N-R²;

   C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný O, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

   5-6' členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje

   1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH; nebo * · : :.: : · · ιοί ·..··..’ .:. .:·

   C₆-Cio karbocyklus substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a OH.

   5. Sloučenina podle patentového nároku 4 nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

   E^cp je peptid štěpítelný enzymem vybraný z:

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

   Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

   Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mime tikům;

   Xa2 je aminokyselina;

   Xpl je aminokyselina, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

   Xp2 je aminokyselina;

   Xp3 je aminokyselina;

   Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, β-Ala, Cha, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, 3-pyridyl-Ala, Gly, Abu, Aib, Iva, Nva, Phe, Bip, Tyr,

   O-benzyl-Tyr; a

   Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

   Xa4- je aminokyselina;

   R je vybráno z H₃CC(=O)-;

   HOC(=O)-(CH₂)_VC(=O)-, kde vjel, 2, 3, 4, 5 nebo 6;

   H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

   HO₂CCH₂O- (CH₂O- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -,

   H₂N-(CH₂CH₂O)_t-CH₂C (=0)-, a

   H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) kde t je 1, 2 nebo 3;

   ·· * · · • ·

   102 ^-0(=0)-7

   R^X-S(=O)₂-;

   R^NHC^O)

   R^la-CH₂C (=0)-;

   prolin substituovaný pomocí -OR³;

   C1-C4 alkyl substituovaný pomocí 0-1 R⁴;

   2-karboxyfenyl-C (=0)-; a

   -(0=) C-fenyl -C(=O)-;

   R¹ je C^-Ολ cvkloalkvl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H;

   5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený,- kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH, metoxy nebo CO₂H;

   fenyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; nebo

   Ci-C₆ alkyl substituovaný 0-4 R^x°;

   R^la ie -OH, C,-C, alkyl, C,-^ alkoxv, -CO?H, N (CH,CH₇) ?N-R², SO-,Η;

   C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

   5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH;

   fepyl substituovaný 0, 1 nebe 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

   R² ie H, H?N(C?-C4 alkyl)-, acetyl (H)N(C?-Cd alkyl)-, nebo acetyl;

   R³ je H, C1-C4 alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

   R⁴ ie OH, Cn-C, alkyl, Ct-CL alkoxv, -CO₇H, -N (CH?CH?) ?N-R²;

   C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

   103

   5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané ,z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH; nebo

   C₆-C₁₀ karbocyklus substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a OH.
6. 6. Sloučenina podle patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
7. 7. Sloučenina podle patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.
8. 8. Sloučenina podle patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.
9. 9. Sloučenina podle patentového nároku 5, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
10. 10. Sloučenina podle patentového nároku 5 definovaná Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z: Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Laa~; Cap-Xa2-Gly-Xpl-Laa-; Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

    Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Laa-; Cap-Gly-Xpl-Xp2-Laa-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

    Cap-Xa2-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

    Cap-Gly-Xpl-Xp2-Xp3-Laa-;

    kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

    Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, Chg, Fph, Npa, Tzc nebo prolinové mimetikum definované vzorcem:

    0· 00

    0 0 • 0

    104 » 0 0 ♦ « • · ·· • «

    0 0 kde R⁵ je vybráno z H, halogenu, Ci-C_s alkylu, -OH, Ci-C_fi alkoxy a benzyloxy; a n je 2, 3, 4 nebo 5; ,

    Xa2 je aminokyselina vybraná z

    Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, 0-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

    Xpl je aminokyselina vybraná z Hof, Leu, Bip, Phe, nor-Leu, Tha, Phg, Val, Glu, Asn, Ser, Ala, homo-Tyr, Aze, 4-aza-Hof, O-(3pyridyl)-Tyr, 0-(4-pyridyl)-Tyr, O-benzyl-Tyr, O-benzyl-Thr, 0benzyl-Ser, O-metyl-Ser, O-alyl-Ser, 4-nitro-Hof, N-metyl-Leu, O-(4pyridylmetyl)-Tyr, 4-hydroxyfenyl-Gly, fenylpropyl-Gly, styryl-Ala nebo 2 Nal;

    Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

    Xp3 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Hof, Arg, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Dpa, Gin, Glu, Gly, His, Hyp, Ile, Irg, Lys, Met, Orn, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp a Val;

    Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Ile, Nle, β-homo-Leu, Hol, Hos, Ala, 0-Ala, Cha, Cba, Cba, Cta, 4-pyridyl-Ala, Tibu, Aib, Iva, Nva a Phe ;

    Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

    105

    Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, y-Glu, Dmg, Ala, Arg, Asn, Asp, 8-Asp, Aze, Cha, Cvs, Dpa, Gin, Glu, His, Hyp, Ile, Irg, Leu, Lys, Met, Orn, Phe, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, nebo Val;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    HO₂CCH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₂NCH₂CH₂OCH₂C(=O)-;

    H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

    H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

    H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

    O (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) - ;

    HO₂CCH₂C (CO₂H) (OH) CH₂C (=0) - ;

    HO₂CCH₂C(CH₃) (OH) CH₂C (=0)-;

    2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

    2- karboxycyklopentyl-C(=0)—;

    karboxybenzyloxy;

    4-metoxy-benzensulfonyl;

    cyklopropylkarbonyl;

    cyklobutylkarbonyl;

    3- pyridinkarbonyl;

    2-pyrazinkarbonyl;

    tetrazolacetyl;

    pivaloyl;

    metoxyacetyl;

    hydroxyprolin a

    4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.

    106 • · ·· ·· ····
11. 11. Sloučenina podle patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
12. 12. Sloučenina podle patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.
13. 13. Sloučenina podle patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.
14. 14. Sloučenina podle patentového nároku 10, kde -Gly-Xpl- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
15. 15. Sloučenina podle patentového nároku 10 definovaná Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^op je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Laa-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Laa-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Laa-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Laa~;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa~;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Laa-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

    Cap-Gly-Leu-Xp2-Laa-; a

    Cap-Gly-Hof-Xp2-Laa-;

    kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem;

    Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, nebo Npa;

    Xa2 je aminokyselina vybraná z

    Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu,

    Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp, Tyr, Cya, Hca a Spa;

    107

    Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

    Laa je aminokyselina vybraná z Leu, Cha, Nle a Hol;

    Cap je N-terminálni skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-y

    Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    HO₂CCH2OCH₂CH₂OCH₂C (==0)-;

    H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₂NCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

    H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (O) -;

    H₃CC (=O)N(CH₂CH₂)₂NCH₂C (O) -;.

    O(CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (O) -;

    HO₂CCH₂C (CO₂H) (OH) CH₂C (=0) -;

    H0₂CCH₂C (CH₃) (OH) CH₂C (=0)-;

    2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

    2-karboxycyklopentyl-C(=0)-;

    karboxybenzyloxy;

    4-metoxy-benzensulfonyl;

    cyklopropylkarbonyl;

    • ·

    108 ·· ·* • · · • · · ·· • 9 9 9

    9 9 9 9

    99 99 cyklobutylkarbonyl;

    3- pyridinkarbonyl;

    2-pyrazinkarbonyl; tetrazolacetyl; pivaloyl; metoxyacetyl; hydroxyprolin a

    4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.
16. 16. Sloučenina podle patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
17. 17. Sloučenina podle patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.
18. 18. Sloučenina podle patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.
19. 19. Sloučenina podle patentového nároku 15, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
20. 20. Sloučenina podle patentového nároku 15 definovaná Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Leu~;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Cha;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Nle;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Hol;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu~;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

    ·· • · · ·· • · · · ·

    109 ·..··..·

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle-;

    Cap-Paa-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

    kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří varbu štěpitelnou matrixinem;

    Paa je Pro, Hyp, Aze, homo-Pro, nebo Npa;

    Xa2 je aminokyselina vybraná z

    Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lys, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp a Tyr;

    Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu,

    His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met,

    Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, O-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

    Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

    Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

    H3COCH2CH2OCH2C (-0) - ;

    H₃COCH2CH₂OCH₂CH2OCH₂C (=0) - ;

    2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

    2-karboxycyklopentyl-C(=0)-; a

    110

    9« 9* « · « • · · ·· • * · · · • » · · tetrazolacetyl.
21. 21. Sloučenina podle patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
22. 22. Sloučenina podle patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.
23. 23. Sloučenina podle patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.
24. 24. Sloučenina podle patentového nároku 20, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
25. 25. Sloučenina podle patentového nároku 15 definovaná Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Leu-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Cha-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Nle-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Hol-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Leu-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Cha;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Nle;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Hol;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Leu-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Cha-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Nle-;

    Cap-Xa2-Gly-Leu-Xp2-Hol-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Leu-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Cha-;

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Nle~; a

    Cap-Xa2-Gly-Hof-Xp2-Hol-;

    kde -Gly-Leu- a -Gly-Hof- tvoří va?bu štěpitelnou matrixinem;

    111 • r

    4 · <

    • · · ·« • · · · • 4 · *

    4« ··

    94 ·· *» • β 44 9 9 9 • 4 9 · · • 9 9 9 9 ·

    4 · 4 4 4

    4·· «Μ* 4· ·444

    Xa2 je aminokyselina vybraná z

    Hof, Leu, His, Arg, Gin, Ile, Val, Lvs, (R)-Leu, Orn, β-Ala, γ-Abu, Cha, Chg, Dap, Cit, N-metyl-Leu, valerolaktam, N,N-dimetyl-Lys, 4aza-Phe, morfolinylprolyl-Gly, N-metylpiperazinpropyl-Gly, 4-azaHof, Ala, Asn, Asp, Aze, Cys, Glu, Gly, Hyp, Irg, Met, Phe, Phe (4fluoro), Pro, Sar, Ser, Thr, Trp a Tyr;

    Xp2 je aminokyselina vybraná z Tyr, Ala, Ser, Leu, Gin, Val, Glu, His, Lys, Arg, Orn, Aze, Hof, homo-Tyr, Cit, 4-aza-Phe, N,N-dimetylLys, Dap, Dap, Asn, Asp, Aze, Cha, Cys, Gly, Hyp, Ile, Irg, Met, Phe, Phe (4-fluoro), Pro, Sar, Thr, Trp, Cya, Hca, Spa, morfolinylpropyl-Gly, 0-(4-pyridylmetyl)-Tyr a Nmetylpiperazinpropyl-Gly;

    Cap je N-terminální skupina vybraná z R-; Xa4-; a R-Xa4-;

    Xa4- je aminokyselina vybraná z Gly, Pro, γ-Glu, Dmg;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

    2-karboxycyklopentyl-C(=0)-; a tetrazolacetyl.
26. 26. Sloučenina podle patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
27. 27. Sloučenina podle patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem vybraným z MMP-2 a MMP-9.

    • · • · ·· • to ·· ·· ·

    119 ·· toto • * · • · · • to · • * · • · to · · ·
28. 28. Sloučenina podle patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou matrixinem MMP-14.
29. 29. Sloučenina podle patentového nároku 25, kde -Gly-Leu- a -GlyHof- tvoří vazbu štěpitelnou MMP-2, MMP-9 a MMP-14.
30. 30. Sloučenina podle patentového nároku 4 definovaná Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

    Identifikační číslo sekvence: 185: R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 186: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 187: R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 188: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 191:

    R-P-L-G-Hof-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 192:

    R-P-L-G-Hof-E-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 193:

    R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

    113

    Identifikační číslo sekvence: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 195: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 197: R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 201: R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

    Identifikační číslo sekvence: 202: R-P-L-G-Hof-E-Hol- ;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) - (CH₂) _vC (=0) -;

    kde v je 1, 2, 3, 4, 5, nebo 6;

    H₃CO- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) - ;

    HO₂CCH₂O- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=O)-; H₂N-(CH₂CH₂O)_t-CH₂C(=O)-; a H₃CC (=0) HN- (CH₂CH₂O) _t-CH₂C (=0) -;

    114 kde v je 1, 2, 3, nebo 4;

    ^-3(=0),-,rMíHC (=0)-;

    R^la-CH,C (=0) -;

    orolin substituovaný -OR³;

    Ci-C₄ alkyl substituovaný 0-1 R⁴;

    2-karboxyfenyl-C(=0)-; a

    -(0=)C-fenyl-C(=0)-;

    R¹ ie C-í-Cs cvkloalkvl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -C0,H;

    5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH, metoxy nebo CO,H;

    tenyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z -OH, metoxy a -CO₂H; nebo

    Ci-C₆ alkyl substituovaný 0-4 R^x“;

    R^la ie -OH, Ct-C-, alkvl, Ci-C, alkoxv, -CO9H, N ÍCH,CH,) ,N-R², SO-.H;

    C₃-C₆ cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

    5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený? kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH;

    fenyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

    R² je H, H,N(C?-C,, alkvl)-, acetvl (H)N(C9-C^ alkvl)-, nebo acetvl;

    R³ je H, C1-C4 alkyl, C₃-Ce cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

    R⁴ je OH, C-.-C-, alkvl, Ci-C„ alkoxv, -CO,H, -N (CH,CH,) ,N-R²;

    Cj-Ck cykloalkyl substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a -OH;

    €« · · ♦ · · « * ·· ·· • · fc • · · ··

    115

    5-6 členný heterocyklus; kde řečený heterocyklus je nasycený, částečně nasycený nebo nenasycený; kde řečený heterocyklus obsahuje 1, 2, 3 nebo 4 heteroatomy vybrané z N, O a S; kde řečený heterocyklus je volitelně substituován 1 nebo 2 -OH; nebo

    Cg-C-io karbocyklus substituovaný 0, 1 nebo 2 substituenty vybranými z metoxy a OH.
31. 31. Sloučenina podle patentového nároku 30 definovaná Vzorcem (la) nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^cp je peptid štěpítelný enzymem vybraný z:

    Identifikační číslo sekvence: 185:

    R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 186:

    R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 187:

    R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 188:

    R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 189:

    R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 190:

    R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 191:

    R-P-L-G-Hof-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 192:

    R-P-L-G-Hof-E-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 193:

    • 0 • 0

    116

    R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 195: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 196:

    R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 197:

    R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 199: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 200: R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 201:

    R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

    Identifikační číslo sekvence: 202: R-P-L-G-Hof-E-Hol- ;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0) -;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-;

    HO₂CCH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -;

    117 ·· tttt · tttttt tttt · « tttttttt · tt tttt tttt · • tttttt

    ».» tttt ··· ·

    H₂NCH₂CH₂OCH₂C (=0)

    H₂NCH2CH₂OCH₂CH₂OCH2C (=0)

    H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂C (=0)

    H₃CC (=0) HN-CH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)

    H₂NCH₂CH₂N{CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0) -;

    H₃CC (=0) HNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0) -;

    H₃CC (=0) N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (0) - ;

    0 (CH₂CH₂) ₂NCH₂CH₂NHC (0) -;

    HO₂CCH₂C(CO₂H) (OH) CH₂C (=0)-;

    HO₂CCH₂C(CH₃) (OH) CH₂C (=0)

    2-karboxycyklohexyl-C(=0)-;

    2- karboxycyklopentyl-C(=0) karboxybenzyloxy;

    4-metoxy-benzensuiťonyl;

    cyklopropylkarbonyl;

    cyklobutylkarbonyl;

    3- pyridinkarbonyl;

    2-pyrazinkarbonyl;

    tetrazolacetyl;

    pivaloyl;

    metoxyacetyl;

    hydroxyprolin a

    4- (2-(5,6,7,8-tetrahydronaftenyl))butyl.
32. 32. Sloučenina podle patentového nároku 30 definovaná Vzorcem (Ia) nebo jeji farmaceuticky přijatelná sůl, kde;

    E^cp je peptid štěpitelný enzymem vybraný z:

    Identifikační čislo sekvence: 185:

    R-y-E-P-Orn-G-Hof-E-L-;

    Identifikačni čislo sekvence: 186:

    R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

    Identifikačni čislo sekvence: 187:

    R-y-E-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

    118

    Identifikační číslo sekvence: 188:

    R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 189: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 190: R-P-L-G-(azaHof)-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 191:

    R-P-L-G-Hof-Y-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 192: R-P-L-G-Hof-E-L-;

    Identifikační číslo sekvence: 193: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 194: R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 195: R-P-L-G-(Ο-azaHof)-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 196: R-P-L-G-Hof-Y-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 197:

    R-P-L-G-Hof-E-Nle-;

    Identifikační číslo sekvence: 198: R-P-L-G-(O-benzyl-S)-Υ-Hol-,‘

    Identifikační číslo sekvence: 199:

    R-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-Hol-;

    • · 0* k 0 0 » 0 0 00

    119

    Identifikační číslo sekvence: 200:

    R-P-L-G-(O-azaHof)-Y-Hol-;

    Identifikační číslo sekvence: 201:

    R-P-L-G-Hof-Y-Hol-; a

    Identifikační číslo sekvence: 202:

    R-P-L-G-Hof-E-Hol-;

    R je vybráno z:

    H₃CC(=O)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂C (=0)-;

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂C (=0)

    HOC (=0) CH₂CH₂CH₂CH₂C (=0) - ;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂C (=0)- ;

    H₃COCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0)-; a tetrazolacetyl.
33. 33. Sloučenina podle patentového nároku 1 vybraná z:

    Identifikační číslo sekvence: 1:

    4-metoxy-benzensulfonvl-0-Ala-G-Hof-Y-L-Dox; Identifikační číslo sekvence: 2:

    1,2-C₆H₄ (C0₂-H-G-Hof-Y-L-Dox ;

    Identifikační číslo sekvence: 3:

    acetyl-P-L-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 4:

    acetyl-P-(R)L-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 5:

    acetyl-P-(β-Ala)-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 6:

    acetyl-P- (γ-Abu) -G-L-L-Dox;

    120 «· 99

    9 9 ·

    9 9 9 99

    9 9 9

    9 9 9

    9· 9 • 9 99 • 9· 9

    9 9 9

    Identifikační číslo sekvence: 7:

    acetyl-P-Cha-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 8:

    P-L-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 9:

    MeOCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 10: MeOCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 11: H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 12: AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence:13:

    AcN (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 17: Dmg-P-R-Sar-Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 18: acetyl-P-H-G-Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 19: acetyl-P-Orn-G-Hof-L-Dox

    I

    Identifikační číslo sekvence: 20: acetyl-P-Dap-G-Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 21: acetyl-P-Cit-G-Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 22:

    121 ·» tt

    0 0 ♦ 0 0 0 0 04 » 0 0 0 A

    4 · 0 ·

    Μ «* V

    0 ·· ··

    0 0 » 0 0 • 9 9 ·

    4 · 4 0 0 • 0 0» •00 0» 4000 acetyl-P-L-G-(O-(3-pyridvl-))Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 23: acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-))Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 24: acetyl-P-L-G-(4-aza-)Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 25: acetyl-P-L-G-(O-benzyl-)S-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 26: Cbz-P-L-G-(Q-(4-pyridylmetyl-))Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 27: acetyl-P-L-Sar-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 28: acetyl-P-(N-Me-)L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 29: acetyl-P-L-G-(N-Me-)L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 30: acetyl-Hyp-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 31: acetyl-Tzc-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 32: acetyl-(Homo-P)-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 33: acetyl-(Homo-P)-L-G-Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 34:

    acetyl-(Homo-P)-Orn-G-Hof-L-Dox

    122

    Identifikační číslo sekvence: 35:

    acetyl-Nipecotát-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 36: acetyl-Aze-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 37: acetyl -Chg -L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 38: acetyl-P-valerolaktam-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 41: acetyl-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 42: cyklopropylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 43: cyklobutylkarbonyl-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 44: pívaloyl-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 45: Hyp-G-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 46: acetyl-P-L-G-L-A-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 47: acetyl-P-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 48:

    Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

    123 • to ·♦ • toto to totototo » to· · • ·· * • to to· •«tototo*

    Identifikační číslo sekvence: 49:

    H₃CC(=0)NH-Peg-P-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 50:

    AcHNCH₂CH₂N(CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -P-L-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 51:

    acetyl-P-L-G-L-S-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 52:

    acetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 53:

    O (CH₂CH₂)NCH₂CH₂NHC (=0) -G-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 55:

    acetyl-P-L-G-L-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 58:

    Cbz-G-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 59:

    AcHNCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -G-P-L-G-L-L-DOX

    Identifikační číslo sekvence: 60: H₂NCH₂CH₂N (CH₂CH₂) ₂NCH₂C (=0) -0-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 61: Dmg-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 62: acetyl- γ-E-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 65: metoxyacetyl-G-P-L-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 66:

    ♦ ♦

    124 ♦ < ·♦ ♦ to * • » ♦·· ♦ to · · • · · ♦ ··* ♦»

    Dmg-P-L-G-Tha-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 67: Dmg-P-L-G-Phg-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence; 68: Dmg-P-L-G-(O-benzyl-Y)-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 69: Dmg-P-L-G-Bip-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 77: acetyl-G-P-Q-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 78: acetyl-G-P-R-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 82: acetyl-G-P-L-G-V-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 83: acetyl-G-P-L-G-Hof-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 84: acetyl-G-P-L-A-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 85: Dmg-P-I-G-Bip-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 86: Dmg-P-Chg-G-Bip-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 87: acetyl-G-P-V-G-L-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 88: Dmg-P-I-G-L-L-Dox

    125 ·< ·♦

    9 9 9

    9 9 999

    9 9 9 9 • 9 9 · «» ♦ .« • · 9 9

    9 9

    9 9 9

    9 9 *»· 999 • 9 9

    9 « ·

    9 9 9 »

    9 9 9

    9 * ·9 9·

    Identifikační číslo sekvence: 89:

    Dmg-P-R-G-Bip-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 91: acetyl-G-P-L-G-E-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 92: Dmg-P-K-G-Bip-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 95: Dirig-P-R-Sar-Hof-R-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 96: Dmg-P-R-G-Hof-R-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 97: Dmg-P-R-G-Bip-R-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 98: acetyl-G-P-L-G-N-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 99: acetyl-G-P-L-G-S-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 100: acetyl-G-P-L-G-(4-hydroxy-fenyl-G)-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 101: acetyl-P-L-G-Hof-H-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 102: acety1-P-L-G-Hof-A-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 103:

    acetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox • · «

    ·♦ r · <

    » · · ♦«

    126

    Identifikační číslo sekvence: 104:

    acetyl-P-L-G-Hof-(morfolinylpropyl-G)-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 105: acetyl-y-E-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekveftce: 106:

    sukcinyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 107:

    acetyl-P-L-G-Hof-(O(4-pyridylmetyl)-Y)-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 108:

    acetyl-P-L-G-(homo-Y)-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 109:

    acetyl-P-L-G-(4-aza-Hof)-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 110:

    acetyl-P-L-G-(O-(4-pyridyl-)-Y)-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 111:

    acetyl-P-L-G-(fenylpropyl-G)-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 112:

    acetyl-P-L-G-(styryl-A)-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 113:

    acetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 114:

    acetyl-P-(N,N-dimetyl-K)-G-Hof-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 115:

    acetyl-P-L-G-Hof-Dap-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 116:

    • «

    127 • 4 44

    4 · * • 4 · 44 • 4 4 4 · • 4 4 4 acetvl-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 117: Peg-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 118:

    acetvl-Y-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 119: γ-E-P-L-G-Hof-Orn-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 120: acetyl-P-Orn-G-Hof-Orn-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 121: acetyl-P-Orn-G-Hof-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 122:

    acetvl-v-E-P-Orn-G-Hof-E-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 123: acetyl-P-Orn-G-L-Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 124: acetyl-P:(4-aza-F)-G-L,Y-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 125: acetyl-P-L-G-Hof-Dab-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 126: acetyl-P-L-G-Hof-K-L-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 127: acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 128: Dmg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

    ♦ 0 00

    128

    0 0 0 004 0 0 ·

    0 · 0

    0 4

    00 *0

    0 0

    0 0

    0 0

    000 00· ·♦··

    Identifikační číslo sekvence: 129:

    Peg-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 130:

    acetvl-Y-E-P-L-G-Hof- (N,N-dimetvl-K) -L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 131:

    γ-E-P-L-G-Hof-(N,N-dimetvl-K)-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 132:

    acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 133:

    acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Cha-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 134:

    acetyl-P-L-G-Hof-Cit-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 135:

    acetvl-Y-E-P-L-O-Hof-Cit-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 136:

    acetyl-P-L-G-Hof-Q-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 137: acetyl-P-L-G-Hof-(4-aza-F)-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 138: acetyl-P-L-G-Hof-V-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 139:

    acetvl-V-E-P-L-G-Hof-E-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 140:

    acetyl-G-Aze-L-G-L-L-Dox;

    ·♦

    Identifikační číslo sekvence: 141: acetyl-(4-fluoro-F)-L-G-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 142: acetyl-(homo-P)-L-G-L-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 143: acetyl-(homo-P)-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 144: acetyl-Aze-L-G-L-Y-L-Dox;

    Identifikáční číslo sekvence: 145: acetyl-Aze-L-G-Hof-Orn-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 154: acetyl-P-L-G-L-L-A-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 155: acetyl-P-L-G-L-Y-A-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 156: acetyl-G-P-L-G-L-A-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 157: acetyl-P-L-G-L-A-A-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 158: acetyl-P-L-G-L-A-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 159: acetyl-P-L-G-L-L-S-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 160: acetyl-P-L-G-L-L-L-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 161:

    0 ·

    130

    Dmg-P-L-G-L-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 162:

    Dmg-P-R-G-Phg-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 163:

    acetyl-G-P-L-G-L-R-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 164:

    4-(2-(5,6,7, 8-tetrahydronaftenyl))butyl-G-Hof-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 165:

    acetyl-P-L-G-Hof-(N-metylpiperazinpropyl-G)-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 166: tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 167: tetrazolacetyl-P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 168: tetrazolacetyl-P-L-G-Hof-Y-Nle-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 169:

    P-L-G-(O-benzyl-S)-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 170: acetyl-P-L-G-Hof- (hoxnoY) -L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 171: acetyl-P-AzaHof-G-AzaHof-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 172: acetyl-P-L-G-(O-allyl-S)-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 173: acetyl-P-L-G-(4-nitro-Hof )-Y-L-Dox;

    4 · 44 4 4 44 44 >4 4 44 44 *44

    444 4 4 4 4 44 4 • 444* 4 4444 4

    Identifikační číslo sekvence: 174:

    acetyl-P-L-G-Hof-AzaHof-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 175:

    acetyl-P-L-G-(O-metyl-S)-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 176:

    acetvl-v-E-P-L-G- (O-benzvl-S) -Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 177:

    acetvl-v-E-P-L-G-(O-benzvl-S)-Y-Nle-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 178:

    3-pyridinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 179:

    2-pyrazinkarbonyl-P-L-G-Hof-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 180:

    acetyl-P-L-G-Hof-(N,N-dimetyl-K)-Nle-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 182:

    acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hol-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 183:

    acetyl-P-L-G-Thr(O-Benzyl)-Y-L-Dox;

    Identifikační číslo sekvence: 184:

    acetvl-v-E-P-L-G-Hof-Y-Nle-L-Dox;
34. 34. Sloučenina podle patentového nároku 1 vybraná z:

    Identifikační číslo sekvence: 39:

    acetyl-G-P-L-G-L-F-Dox

    Identifikační číslo sekvénce: 40:

    •·» • «

    4 » • ··<

    • 4 99

    132 • · · · « · ·« ·4 ·*· 99· acetvl-G-P-L-G-F-F-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 54: acetyl-G-P-L-G-L-Y-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 56: acetyl-G-P-L-G-Bip-F-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 57: acetyl-G-P-L-G-Nle-F-Dox

    Identifikační číslo Sekvence: 63: acetyl-G-P-L-G-Tha-F-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 64: acetyl-G-P-L-G-Phg-F-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 70: acetyl-G-P-L-G-F-Bip-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 71: acetyl-G-P-L-G-L-Bip-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 72: acetyl-G-P-L-G-(2Nal)-Bip-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 73: acetyl-G-P-L-G-F-A-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 74: acetyl-G-P-L-G-Bip-A-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 75: acetyl-G-P-L-G-L-A-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 76:

    acetyl-G-P-L-G-(O-benzyl-Y)-F-Dox

    133

    44 44 • to· • 4 >4« • · · ♦ · 4 ·« 4« < *· 99

    99 9 9 9

    9 9 9 9

    9 9 9 9 ♦ • · 9 *

    444 44 444·

    Identifikační číslo sekvence: 79: acetyl-G-P-L-G-L-(4-pyridyl-A)-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 80: acetyl-G-P-L-G-L-R-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 81: acetyl-G-P-L-G-L-W-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 90: acetyl-G-P-L-G-L-(O-benzyl-Y)-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 93: acetyl-G-P-L-G-L-E-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 94: acetyl-G-P-L-G-Bip-E-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 146: acetyl-P-L-G-L-Y-G-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 147: acetyl-P-L-G-Hof-Y-G-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 148: acetvl-P-L-G-L-Y-(β-homo-L)-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 149: acetvl-P-L-G-Hof-Y- ( β-homo-L) -Dox

    Identifikační číslo sekvence: 150: acetvl-P-L-G-L-Y-(B-Ala)-Dox

    Identifikační číslo sekvence: 151:

    acetyl-P-L-G-L-Y-Ahx-Dox

    134 Φ» ·· • · · • · ··♦ • · · · · • ♦ · · ·« ·· « · ·· ·· • · • · • · ··· ·*· «· ·« • · · * · · * · · · • · · ···· Identifikační číslo sekvence: acetyl-P-L-G-L-Y-Aph-Dox 152: Identifikační číslo sekvence: acetyl-P-L-G-L-Y-Amh-Dox 153: Identifikační číslo sekvence: acetyl-P-L-G-Hof-Y-Hos-Dox 181: 35. Farmaceutický preparát obsahující sloučeninu podle jednoho

    z patentových nároků 1-34 a farmaceuticky přijatelný nosič.
35. 36. Způsob léčby savce postiženého nádorem, kterýžto způsob zahrnuje podání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle jednoho z patentových nároků 1-34.
36. 37. Způsob podle patentového nároku 36. kde nádorem je nádor prsu, vaječníku, mozku, žaludku, plic, tlustého střeva, prostaty nebo jater, nebo kde nádorem je leukémie, lymfom, karcinom, sarkom nebo melanom.
37. 38. Způsob dopravení sloučeniny k buňkám savce postiženého nádorem, kterýžto způsob zahrnuje kontakt buněk savce postiženého nádorem se sloučeninou podle je.dnoho z patentových nároků 1-34. kde tento kontakt je uskutečněn v přítomnosti peptidázy zahrnující matrixin.
38. 39. Způsob podle patentového nároku 38. kde nádorem je nádor prsu, vaječníku, mozku, žaludku, plic, tlustého střeva, prostaty nebo jater, nebo kde nádorem je leukémie, lymfom, karcinom, sarkom nebo melanom.