SI9620043A - Variante humane DNaze I - Google Patents

Abstract

Predloženi izum se nanaša na variante amino kislinske humane DNaze I, ki imajo zmanjšano vezivno afiniteto za aktin. Izum zagotavlja sekvence nukleinske kisline, ki kodirajo takšne proti aktinu odporne variante, s čimer omogoča produkcijo teh variant v količinah, ki so dovoljšnje za klinično uporabo. Izum se nanaša tudi na farmacevtske sestavke in terapevtske uporabe proti aktinu odpornih variant humane DNaze I.ŕ

Description

Variante humane DNaze I

Področje izuma

Predloženi izum je povezan z rezultati, pridobljenimi pri raziskavi humane deoksiribonukleaze I (DNaze I), fosfodiesteraze, ki je sposobna hidrolizirati polideoksiribonukleinsko kislino. Splošno se nanaša na modificirane (variantne) oblike humane DNaze I in na njihovo pripravo z rekombinantnimi DNA metodami, na farmacevtske sestavke, s katerimi lahko klinično izkoriščamo njihovo uporabnost, in na postopke uporabe teh variant DNaze I in njihovih sestavkov.

Ozadje izuma

DNaza I je fosfodiesteraza, ki je sposobna hidrolizirati polideoksiribonukleinsko kislino. DNazo I smo očistili iz različnih vrst do različnih stopenj.

Govejo DNazo I so obširno biokemijsko preučevali. Glej npr. Moore, v The Enzvmes (Boyer, P.D., ed) str. 281-296, Academic press, New York (1981). Znana je popolna aminokislinska sekvenca za govejo DNazo I (Liao, et al., J. Biol. Chem. 248:14891495 (1973); Oefner, et al., J. Mol. Biol. 192:605-632 (1986); Lahm, et al., J. Mol. Biol. 221:645-667 (1991)), in klonirali ter izrazili so DNA, ki kodira govejo DNazo I (Worrall, et al., J. Biol. Chem 265:21889-21895 (1990)). Zgradbo goveje DNaze I so določili z radioaktivno kristalografijo. Suck, et al., EMBO J. 3:2423-2430 /(1984); Suck, et al., Nature 321:620-625 (1986); Oefner, et al., J. Mol. Biol. 192:605-632 (1986).

Izolirali in sekvencirali so DNA, ki kodira humano DNazo I, in to DNA so izrazili v rekombinantnih gostiteljskih celicah, s čimer so omogočili produkcijo humane DNaze I v tržno uporabnih količinah. Shak, et al., Proč. Nat. Acad. Sci. 87:9188-9192 (1990).

DNaza I ima številne znane uporabe in se uporablja za terapevtske namene. Njena osnovna terapevtska uporaba je ta, da zniža viskoelastičnost pljučnih izločkov (sluzi) pri takšnih boleznih, kot sta pljučnica in cistična fibroza (CF), s čimer pripomore k čiščenju respiratornih zračnih poti. Glej npr. Lourenco, et al., Arch. Intern. Med. 142:2299-2308 (1982); Shak, et al., Proč. Nat. Acad. Sci. 87:9188-9192 (1990); Hubbard, et al., New Engl. J. Med. 326:812-815 (1992); Fuchs, et al., New Engl. J. Med. 331:637-642 (1994); Bryson, et al., Drugs 48:894-906 (1994). Sluz prispeva tudi k morbidnosti kroničnega bronhitisa, astmatičnega bronhitisa, bronhiektaze, emfizma, akutnega in kroničnega sinusitisa in celo običajnega prehlada.

Pljučni izločki oseb, ki imajo takšne bolezni, so kompleksni materiali, ki vključujejo sluzne glikoproteine, mukopolisaharide, proteaze, aktin in DNA. Nekateri izmed materialov v pljučnih izločkih se sprostijo iz levkocitov (nevtrofilcev), ki infiltrirajo pljučno tkivo v odzivu na prisotnost mikrobov (npr. sevi Pseudomonas, Pneumococcus, ali Staphylococcus bacterij) ali drugih iritantov (npr. tobačnega dima, cvetnega prahu). Med reagiranjem s takšnimi mikrobi ali iritanti lahko levkociti degenerirajo in sprostijo svojo vsebino, kar prispeva k viskoelastičnosti pljučnih izločkov.

Sposobnost DNaze I, da zniža viskoelastičnost pljučnih izločkov, pripisujejo njeni encimatski razgradnji velikih količin DNA, katero sprostijo nevtrofilci. Shak, et al., Proč. Nat. Acad. Sci. 87:9188-9192 (1990); Aitken, et al., J. Am. Med. Assoc. 267:1947-1951 (1992).

Nedavno je bil predlagan drugačen mehanizem za mukolitični učinek DNaze I, ki vključuje deagregacijo aktina. Vasconcellos, et al., Science 263:969-971 (1994). Aktin je eden izmed najbolj obilnih proteinov v evkariotičnih celicah (npr. aktin obsega okoli 10 % celotnega levkocitnega proteina) in je bil obsežno preučevan. Kabsch, et al., Ann. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 21:49-76 (1992); Sheterline, et al., Prot. Profile 1:1-121 (1994). Aktin obstaja v dveh oblikah, v monomerni obliki (G-aktin) in v filamentni obliki (F-aktin), ki je sestavljena iz G-aktinskih monomerov. Polimerni filamenti aktina so visoko viskoelastični in pomembno prispevajo k viskoznosti pljučnih izločkov. Mornet, et al., Proč. Nat. Acad. Sci. 81:3680-3684 (1984); Newman, et al., Biochemistry 24:1538-1544 (1985); Janmey, et al., Biochemistry 27:8218-8226 (1988); Vasconcellos, et al., Science 263:969-971 (1994).

Ker je znano, da se DNaza I veže na aktin, (Lazarides, et al., Proč. Nat. Acad. Sci. 71:4742-4746 (1974); Kabsch, et al., Nature 347:37-44 (1990)) in da depolimerizira aktinske filamente (kot tudi inhibira polimerizacijo G-aktina v filamente) (Mannherz, et al., FEBS Lett. 60:34-38 (1975); Hitchcock, et al., Celi 7:531-542 (1976); Pinder, et al., Biochemistry 21:4886-4890 (1982); Weber, et al., Biochemistry 33:4780-4786 (1994)) so domnevali, da je mukolitični učinek DNaze I na sputum in druge pljučne izločke bolj posledica deagregacije aktina (depolimerizacije), kot hidrolize DNA. Vasconcellos, et al., Science 263:969-971 (1994). Skladno s tem stališčem je tudi znano, da je v prisotnosti aktina inhibirana DNA-hidrolitična aktivnost DNaze I. Lazarides, et al., Proč. Nat.Acad.Sci. 71:4742-4746 (1974); Mannherz, et al., Eur. J. Biochem. 104:367-379 (1980). Skladno s tem stališčem so tudi poročali, da so proteini, ki razgrajujejo aktin (npr. gelsolin), učinkoviti pri zniževanju viskoelastičnosti sputuma cistične fibroze. Vasconcellos, et al., Science 263:969-971 (1994); Stossel, et al., objavljena PCT prijava št. WO 94/22465 (objavljena 13. oktobra, 1994).

Predloženi izum delno temelji na raziskavi izumiteljev, da bi določili biokemijsko osnovo mukolitične aktivnosti DNaze I. Ta raziskava je vključevala oblikovanje in sintezo različnih variant humane DNaze I in analizo teh variant, da bi določili njihovo sposobnost, da hidrolizirajo DNA, da se vežejo na aktin in da znižajo viskoleastičnost sputuma in vitro. Izumitelji so izdelali več razredov variant humane DNaze I. En razred variant (variante, odporne proti aktinu) je zmanjšal sposobnost za vezavo aktina, toda še vedno je imel mukolitično aktivnost in v nekaterih primerih je povečal mukolitično aktivnost v primerjavi z nativno humano DNazo I. Te, proti aktinu odporne variante imajo približno enako DNA-hidrolitično aktivnost, kot nativna humana DNaza I, toda takšna aktivnost je manj dovzetna za inhibiranje z aktinom. Drugi razred variant veže aktin z afiniteto, ki je podobna tisti, ki jo najdemo pri nativni humani DNazi I, ima pa zmanjšano mukolitično aktivnost in zmanjšano DNA-hidrolitično aktivnost v primerjavi z nativno humano DNazo I.

Ti rezultati kažejo, da je terapevtska učinkovitost humane DNaze I v zniževanju viskoelastičnosti pljučnih izločkov prej posledica njene katalitične, DNA-hidrolitične aktivnosti, kot pa njene sposobnosti, da depolimerizira filamentni aktin. Potemtakem bi morale biti variante humane DNaze I, ki vežejo aktin z nižjo afiniteto kot nativna humana DNaza I, toda ki imajo še vedno DNA-hidrolitično aktivnost, uporabna terapevtska sredstva, še zlasti za zdravljenje pacientov, ki imajo pljučne izločke, ki vsebujejo razmeroma velike količine aktina. Ker imajo takšne variante zmanjšano afiniteto za aktin, je njihova DNA-hidrolitična aktivnost manj inhibirana v prisotnosti aktina, tako da imajo te variante, v primerjavi z nativno humano DNazo I, v prisot4 nosti aktina večjo mukolitično aktivnost.

Potemtakem je predmet predloženega izuma zagotoviti variante humane DNaze 1, ki imajo DNA-hidrolitično aktivnost, toda ki vežejo aktin z nižjo afiniteto, kot nativna humana DNaza I.

Še en predmet izuma je zagotoviti nukleinske kisline, ki kodirajo takšne proti aktinu odporne variante humane DNaze I, rekombinantne vektorje, ki obsegajo takšne nukleinske kisline, rekombinantne gostiteljske celice, transformirane s takimi nukleinskimi kislinami ali vektorji, in postopke za proizvodnjo variant humane DNaze I s pomočjo rekombinatne DNA tehnologije.

Izum je prav tako usmerjen k farmacevtskim sestavkom, ki obsegajo proti aktinu odporne variante humane DNaze I, po želji skupaj s farmacevtsko sprejemljivim ekscipientom.

Izum je usmeijen tudi k postopku za zniževanje viskoelastičnosti ali viskozne konsistentnosti materiala, ki vsebuje DNA, v pacientu, ki obsega dajanje terapevtsko učinkovite doze proti aktinu odporne variante DNaze I pacientu.

Izum je še zlasti usmerjen k postopku zdravljenja pacienta, ki ima bolezen, kot je cistična fibroza, kronični bronhitis, pljučnica, bronhiektaza, emfizem, astma ali sistemski lupus eritematozus, ki obsega dajanje terapevtsko učinkovite količine proti aktinu odporne variante DNaze I pacientu.

Izum je usmerjen tudi k uporabi proti aktinu odpornih variant humane DNaze I v in vitro diagnostičnih testih viskoznega materiala (npr. sputuma) pacienta, da izmerimo količino prisotnega aktina in da določimo, ali je pacient ustrezen kandidat za zdravljenje z varianto DNaze I, kije odporna proti aktinu.

Ti in drugi predmeti izuma bodo jasni običajnemu strokovnjaku po proučitvi opisa kot celote.

Kratek opis slik

Slika 1 kaže aminokislinsko sekvenco humane zrele DNaze I (SEQ. ID. NO: i). Številke označujejo sekvenčni položaj aminokislinskih ostankov znotraj sekvence.

Slike 2-6 kažejo podatke za naslednje variante:

A114C	(SEQ. ID. NO	68,	D53R	(SEQ.	ID.	NO	13)
A114B	(SEQ. ID. NO	69}	D53Y	(SEQ.	ID.	NO	14)
A114G	(SEQ. ID. NO	70)	D58T	(SEQ.	ID.	NO	80)
A114H	(SEQ. ID. NO	71)	E13A	(SEQ.	ID.	NO	2)
Al 14 K	(SEQ. ID. NO	72)	E13H	(SEQ.	ID.	NO	3)
Al 14 L	(SEQ. ID. NO	73,	E13R	(SEQ.	ID.	NO	4)
A114K	(SEQ. ID. NO	74)	E13W	(SEQ.	ID.	NO	5)
A114Q	(SEQ. ID. NO	75)	Β13Υ	(SEQ.	ID.	NO	6)
A114R	(SEQ. ID. NO	76)	B69A	(SEQ.	ID.	NO	65)
A114M	(SEQ. ID. NO	77)	B69C	(SEQ.	ID.	NO	66)
Α114Υ	(SEQ. ID. NO	78)	Β69Χ	(SEQ.	ID.	NO	21)
D53A	(SEQ. ID. NO	U,	E69M	(SEQ.	ID.	NO	67,
D53C	(SEQ. ID. NO	43)	B69R	(SEQ.	ID.	NO	22)
D53K	(SEQ. ID. NO	12)	G49C	(SEQ.	ID.	NO	35)
D53L	(SEQ. ID. NO	44)	G49I	{SEQ.	ID.	NO	36)
D53M	(SEQ. ID. NO	45)	G49K	(SEQ.	ID.	NO	37)
G49R	(SEQ. ID. NO	38)	V67A	(SEQ.	ID.	NO	18)
G49Y	(SEQ. ID. NO	39)	V67C	(SEQ.	ID.	NO	55)
H44A	(SEQ. ID. NO	7,	V67D	(SEQ.	ID.	NO	56)
H44C	(SEQ. ID. NO	28)	V67B	(SEQ.	ID.	NO	19)
H44D	(SEQ. ID. NO	8)	V67H	(SEQ.	ID.	NO	57)
H44B	(SEQ. ID. NO	86)	V67K	(SEQ.	ID.	NO	20)
H44N	(SEQ. ID. NO	79)	V67M	(SEQ.	ID.	NO	58)
H44Q	(SEQ. ID. NO	29)	V67F	(SEQ.	ID.	NO	59)
K44W	(SEQ. ID. NO	10)	V67R	(SEQ.	ID.	NO	60)
Η44Υ	(SEQ. ID. NO	9)	V67S	(SEQ.	ID.	NO	61)
L45C	(SEQ. ID. NO	30)	Υ65Α	(SEQ.	ID.	NO	15)
L45K	(SEQ. ID. NO	31)	Y65C	(SEQ.	ID.	NO	51)
L45R	(SEQ. ID. NO	32)	Υ65Β	(SEQ.	ID.	NO	87)
LS2C	(SEQ. ID. NO	40)	Υ65Κ	(SEQ.	ID.	NO	52)
L52K	(SEQ. ID. NO	41)	Υ65Μ	(SEQ.	ID.	NO	53)
L52M	(SEQ. ID. NO	42)	Υ65Ρ	(SEQ.	ID.	NO	97)
L52N	(SEQ. ID. NO	90)	Y65R	(SEQ.	ID.	NO	16)
L52R	(SEQ. ID. NO	91)	Y65S	(SEQ.	ID.	NO	54,
N56C	(SEQ. ID. NO	46)	Y65W	(SEQ.	ID.	NO	17)
N56C	(SEQ. ID. NO	92)	D53R:E69R	(SEQ.	ID.	NO	25)
N56F	(SEQ. ID. NO	47)	D53R:H44A	(SEQ.	ID.	NO	23)
N56F	(SEQ. ID. NO	93)	D53R:Y65A	(SEQ.	ID.	NO	24)
N56K	(SEQ. ID. NO	94)	H64N:V66T	(SEQ.	ID.	NO	81)
N56K	(SEQ. ID. NO	48)	S68N:P70T	(SEQ.	ID.	NO	98)

N56R	(SEQ.	ID.	NO:	49)
N56R	(SEQ.	ID.	NO:	95)
N56W	(SEQ.	ID.	NO:	50)
N56W	(SEQ.	ID.	NO:	96)
S68K	(SEQ.	ID.	NO:	62)
S68M	(SEQ.	ID.	NO:	63)
S68R	(SEQ.	ID.	NO:	64)
V48C	(SEQ.	ID.	NO:	33)
V48K	(SEQ.	ID.	NO:	34)
V48R	(SEQ.	ID.	NO:	89)
V66N	(SEQ.	ID.	NO:	83)

S94N:Y96T	(SEQ.	ID.	NO:	85)
V67N:E69T	(SEQ.	ID.	NO:	84)
Y65N:V67T	(SEQ.	ID.	NO:	82)
D53R:Y65A:	E69R (SEQ.	ID.	NO:

88)

H44A:D53R:Y65A (SEQ. ID. NO: 26)

H44A:Y65A:E69R (SEQ. ID. NO: 27)

Slike 2A-D kažejo relativno specifično aktivnost nativne humane DNaze I in variant. Stolpci, ki prikazujejo napako, predstavljajo standardno deviacijo (n-vrednoteno). Relativno specifično aktivnost humane DNaze I Pulmozyme® (Genentech, Inc., South San Francisco, Kalifornija ZDA) je definirana kot 1,0. Relativna specifična aktivnost nativne humane DNaze I je večja od tiste, ki jo ima Pulmozyme®, zaradi pojava deamidirane oblike humane DNaze I v Pulmozyme®-u, ki zniža DNAhidrolitično aktivnost (Frenz, et al., objavljena PCT prijava št. WO 93/25670, objavljena 23 decembra, 1993).

Slika 3 kaže DNA-hidrolitično aktivnost nativne humane DNaze I in variant humane DNaze I z enim ostankom v prisotnosti aktina, kot smo jo določili v hiperkromitnostnem testu. Odstotna aktivnost je odstotek DNA-hidrolitične aktivnosti DNaze I (nativne ali variantne), izračunan, kot je opisano v primeru 3; DNA-hidrolitična aktivnost DNaze I v odsotnosti aktina je definirana kot 100 %-na aktivnost. Stolpci, ki prikazujejo napako, predstavljajo standardno deviacijo.

Slika 4 kaže DNA-hidrolitično aktivnost nativne humane DNaze I in variante humane DNaze I z multiplimi ostanki v prisotnosti aktina, kot smo jo določili v hiperkromitnostnem testu ali testu z metil zelenim. Odstotna aktivnost je odstotek DNA-hidrolitične aktivnosti DNaze I (nativne ali variantne), izračunan, kot je opisano v primeru 3; DNA-hidrolitična aktivnost DNaze I v odsotnosti aktina je definirana kot 100 %-na aktivnost. Stolpci, ki prikazujejo napako, predstavljajo standardno deviacijo.

Slike 5A-D kažejo relativno vezivno afiniteto variant humane DNaze I za aktin, kot smo jo določili v testu vezave aktina ELISA (kot je opisan v primeru 3). EC_S0 vrednost je koncentracija DNaze I (nativne ali variantne), ki je potrebna, da da v testu polovico maksimalnega signala. Stolpci, ki prikazujejo napako, predstavljajo standardno deviacijo. EC₅₀-vrednosti za Pulmozyme® in nativno humano DNazo I so 67 ± 23 pM (n = 31) oziroma 87 ± 14 pM (n = 32). Relativna vezivna afiniteta, prikazana na sliki, je EC₅₀-vrednost, določena za varianto humane DNaze I, deljena z EC₅₀-vrednostjo, določeno za nativno humano DNazo I. Variante, kjer je bila EC₅₀vrednost večja kot smo jo lahko izmerili v testu, so označene, kot da imajo razmerje (EC₅₀ (varianta DNaze I)/EC₅₀ (nativna DNaza I)) večje od določene vrednosti (npr., >10, >100, >300, >2000, >20000, >35000).

Slika 6 kaže mukolitično aktivnost nativne humane DNaze I in variant humane DNaze I v vzorcih sputuma pacientov s cistično fibrozo, kot smo jo določili s testom kompaktnosti. Stolpci, ki prikazujejo napako, predstavljajo standardno napako povprečja.

Slika 7 kaže shematsko predstavitev testa vezave aktina ELISA, opisanega v primeru 3.

Podroben opis

I. Definicije

Kot uporabljamo tukaj, se izrazi humana DNaza I, nativna humana DNaza I, in DNaza I divjega tipa nanašajo na polipeptid, ki ima aminokislinsko sekvenco humane zrele DNaze I, kije predstavljena na sliki 1.

Varianta ali varianta aminokislinske sekvence humane DNaze I je polipeptid, ki obsega aminokislinsko sekvenco, ki je drugačna od tiste, ki jo ima nativna humana DNaza I. Splošno bo imela varianta vsaj 80 %-no identičnost sekvenc (homologijo), prednostno vsaj 90 % identničnost sekvenc, bolj prednostno vsaj 95 % identičnost sekvenc in najbolj prednostno vsaj 98 %-no identičnost sekvenc z nativno humano DNazo I. Odstotek identičnosti sekvenc določimo, npr., po Fitch-u, et al., Proc.Nat. Acad. Sci. USA 80:1382-1386 (1983), verzija algoritma, ki so ga opisali Needleman, et al., J. Mol. Biol. 48:443-453 (1970), potem, ko smo razvrstili sekvence, da smo zagotovili maksimalno homologijo.

Izrazi varianta humane DNaze I, odporna proti aktinu, proti aktinu odporna varianta in proti aktinu odporna varianta humane DNaze I se nanašajo na varianto nativne humane DNaze I, ki ima (1) DNA-hidrolitično aktivnost in (2) znižano vezivno afiniteto za aktin.

DNA-hidrolitična aktivnost se nanaša na encimatsko aktivnost nativne humane DNaze I ali variante humane DNaze I pri hidroliziranju (cepitvi) substratne DNA, da dobimo 5’-fosforilirane oligonukleotidne končne produkte. DNA-hidrolitično aktivnost zlahka določimo s katerokoli izmed večih različnih metod, ki so znane v stroki, vključno z analitsko elektroforezo s poliakrilamidnim in agaroznim gelom, hiperkromitnostim testom (Kunitz, J. Gen. Physiol. 33:349-362 (1950); Kunitz, J. Gen. Physiol. 33:363-377 (1950)), ali s testom z metil zelenim (Kumick, Arch. Biochem. 29:41-53 (1950); Sinicropi, et al., Anal. Biochem. 222:351-358 (1994)).

Vezivna afiniteta za aktin nativne humane DNaze I ali variante humane DNaze I, odporne proti aktinu, se nanaša na sposobnost DNaze I, da se nekovalentno veže na aktin. Vezivno afiniteto lahko določimo s katerokoli izmed različnih metod, ki so znane v stroki, npr., kot je opisano v Mannherz, et al., Eur. J. Biochem. 104:367-379 (1980). Alternativno določimo relativne vezivne afinitete različnih DNaz (npr. nativne humane DNaze I in njenih variant) z merjenjem vezave DNaz na imobiliziran aktin v testu ELISA (opisan v primeru 3) ali s primerjavo DNA-hidrolitične aktivnosti DNaz v prisotnosti in odsotnosti aktina (tudi opisano v primeru 3). Metode, opisane v primerih, so še zlasti primerne za skrining variant humane DNaze I, za hitro identifikacijo tistih variant, ki imajo zmanjšano vezivno afiniteto za aktin.

Proti aktinu odporna varianta humane DNaze I, ki ima zmanjšano vezivno afiniteto za aktin, je tista, ki ima takšno vezivno afiniteto za aktin, ki je razmeroma manjša od afinitete, s katero nativna humana DNaza I veže aktin, kot to določimo pod primerljivimi pogoji. Če za določitev vezivne afinitete humane DNaze I (nativne ali variantne) za aktin uporabimo test vezave aktina ELISA, kot je opisano v primeru 3, potem bo proti aktinu odporna varianta, ki ima zmanjšano vezivno afiniteto za aktin tista, ki ima EC₅₀ vrednost, katera je večja od tiste, ki jo ima nativna humana DNaza I. V tem testu bo imela proti aktinu odporna varianta značilno 5-krat do 100krat večjo EC₅₀ vrednost od tiste, ki jo ima nativna humana DNaza; toda zlahka proizvedemo tudi proti aktinu odporne variante, ki imajo EC₅₀ vrednost več kot 500krat večjo od tiste, ki jo ima nativna humana DNaza I, še zlasti s spreminjanjem mul9 tiplih aminokislinskih ostankov aminokislinske sekvence nativne humane DNaze I (glej npr. slike 5A-5D).

Mukolitična aktivnost se nanaša na znižanje viskoelastičnosti (viskoznosti) sputuma ali drugega biološkega materiala, npr., kot ga opazimo po obdelavi materiala z nativno humano DNazo I ali varianto humane DNaze I. Mukolitično aktivnost zlahka določimo s katerokoli izmed večih različnih metod, ki so znane v stroki, vključno s testom kompaktnosti sputuma (objavljena PCT prijava št. WO 94/10567, objavljena 11. maja 1994), s testi, ki uporabljajo torzijsko nihalo (Janmey, J. Biochem. Biophys. Methods 22:41-53 (1991) ali z drugimi reološkimi metodologijami.

Polimerazna verižna reakcija ali PCR se splošno nanaša na metodo za pomnoževanje želene nukleotidne sekvence in vitro, kot je opisano npr. v U.S. Pat. št. 4, 683,195. Splošno PCR metoda vključuje ponavljajoče cikluse sinteze ekstenzije primerja z uporabo oligonukleotidnih primerjev, ki so sposobni hibridiziranja, prednostno v šablonsko nukleinsko kislino.

Celica, gostiteljska celica, celična linija in celična kultura tukaj uporabljamo izmenično in razumeti gre, da vsi takšni izrazi vključujejo zarod, ki je posledica rasti ali gojenja celice. Transformacija in transfekcija uporabljamo izmenično za sklicevanje na postopek uvedbe DNA v celico.

Operabilno vezan se nanaša na kovalentno združevanje dveh ali več DNA sekvenc s pomočjo encimatske ligiacije ali drugače, v takšni konfiguraciji, da sta medsebojno povezani tako, da se lahko izvaja normalna funkcija sekvenc. Npr., DNA za predsekvenco ali sekretorni uvodnik je operabilno vezana na DNA za polipeptid, če je izražena kot predprotein, ki sodeluje v izločanju polipeptida; promotor ali pospeševalec je operabilno vezan na kodirno sekvenco, če vpliva na transkripcijo sekvence; mesto vezave ribosoma je operabilno vezano na kodirno sekvenco, če je nameščena tako, da omogoči translacijo. Splošno operabilno vezan pomeni, da so si DNA sekvence, ki so vezane, sosednje, in v primeru sekretornega uvodnika, sosednje in v bralni fazi. Vezavo dosežemo z ligacijo pri ustreznih restrikcijskih mestih. Če takšna mesta ne obstajajo, potem uporabimo sintetične oligonukleotidne adaptorje ali linkerje skupaj s standardnimi rekombinantnimi DNA metodami.

Aminokisline so tu identificirane s tročrkovnimi ali enočrkovnimi označbami, kot sledi:

Asp	D	aspartinska kislina	Ile	I	izoievcin
Thr	T	treonin	Leu	L	levcin
Ser	S	serin	Tyr	Y	tirozin
Glu	E	glutaminska kislina	Phe	F	fenilalanin
Pro	P	prolin	His	H	histidin
Gly	G	glicin	Lys	K	lizin
Ala	A	alanin	Arg	R	arginin
Cys	C	cistein	Trp	W	triptofan
Val	V	valin	Gin	Q	glutamin
Met	M	metionin	Asn	N	asparagin

II. Selekcija variant, odpornih proti aktinu

Predloženi izum temelji na študiju strukture, lastnosti vezave aktina DNAhidrolitične aktivnosti in mukolitične aktivnosti variant aminokislinske sekvence humane DNaze I. Proti aktinu odporne variante v smislu predloženega izuma imajo DNA-hidrolitično aktivnost, toda aktin vežejo z manjšo afiniteto, kot nativna humana DNaza I. Zmanjšanje v vezavi aktina prednostno dosežemo z izdelavo mutacij pri in/ali okoli teh aminokislinskih ostankov znotraj nativne humane DNaze I, za katere se zdi, da vplivajo na vezavo aktina, vključno z npr. , Glul3, His44, Leu45, Val48, Gly49, Leu52, Asp53, Asn56, Asp58, His64, Tyr65, Val66, Val67, Ser68, Glu69, Pro70, Ser94, Tyr96 in Alall4 ostanki nativne humane DNaze I (številka, ki sledi tročrkovni označbi aminokisline, kaže na specifičen položaj aminokislinskega ostanka znotraj sekvence na sliki 1).

Obstaja množica poti, po katerih lahko pripravimo proti aktinu odporne variante humane DNaze I. V eni izvedbi tega izuma pripravimo proti aktinu odporno varianto z uvedbo bodisi posamezne ali multiplih aminokislinskih substitucij, insercij in/ali delecij ob ali v soseščino (t.j. znotraj okoli 5 aminokislinskih ostankov) tistih aminokislinskih ostankov nativne humane DNaze I, ki vplivajo na vezavo aktina. Nekateri ilustrativni primeri takšnih mutacij so, kot sledi: D53R, D53K, D53Y, D53A, Υ65Α, Υ65Ε, Y65R, V67E, V67K, E69R, D53R:Y65A, D53R:E69R, H44A:D53R:Y65A, H44A:Y65A:E69R (glej slike 2-6).

V še eni izvedbi tega izuma pripravimo proti aktinu odporno varianto z uvedbo mutacije(ij), ki ustvarijo) novo glikozilacijsko mesto ob ali v soseščini (t.j. znotraj okoli 5 aminokislinskih ostankov) aminokislinskih ostankov nativne humane DNaze I, ki vplivajo na vezavo aktina. Npr., na mesto usmerjeno mutagenezo uporabimo za uvedbo ene izmed tripeptidnih sekvenc, asparagin-X-serin ali asparagin-X-treonin (pri čemer je X katerakoli aminokislina razen prolina), ki so prepoznavne sekvence za encimatsko povezavanje ogljikovohidratnega dela na asparaginsko stransko verigo. Creighton, Proteins, str. 76-78 (W.H. Freeman, 1984). Sterično oviranje, ki se pojavi med ogljikovohidratnim delom nastale N-glikozilirane variante DNaze I in aktinom lahko zmanjša ali prepreči vezavo aktina in posledično inhibicijo DNAhidrolitične aktivnosti DNaze I v primerjavi z nativno humano DNazo I. Nekateri ilustrativni primeri takih mutacij za uvedbo novega glikozilacijskega mesta so kot sledi: H44N, D58S, D58T, V66N, H44N:T46S, H64N:V66S, H64N:V66T, Y65N:V67S, Y65N:V67T, V66N:S68T, V67N:E69S, V67N:E69T, S68N:P70S, S68N:P70T, S94N:Y96S, S94N:Y96T..

Po želji lahko skupaj s takšnimi mutacijami, za kreiranje novega glikozilacijskega mesta, izbrišemo naravno navzoče glikozilacijsko mesto pri položajih 18 in/ali 106 znotraj aminokislinske sekvence nativne humane DNaze I, pač v odvisnosti od obsega želene glikozilacije v varianti, odporni proti aktinu.

V nadaljnji izvedbi izuma uporabimo na mesto-usmerjeno mutagenezo (site-directed mutagenesis) za uvedbo ostankov ob ali v soseščino (t.j. znotraj okoli 5 aminokislinskih ostankov) tistih aminokislinskih ostankov nativne humane DNaze I, ki so vpleteni v vezavo aktina, ki so primerni za bodisi biološko ali kemijsko potranslacijsko modifikacijo (glej spodaj). Means, et al., Chemical Modification of Proteins (Holden-Day, 1971); Glazer, et al., Chemical Modification of Proteins: Selected Methods and Analvtical Procedures (Elsevier, 1975); Creighton, Proteins, str. 70-87 (W.H. Freeman, 1984); Lundblad, Chemical Reagents for Protein Modification (CRC Press, 1991). Takšne po-translacijske modifikacije lahko v DNazo I uvedejo sterično oviranje ali spremenjene elektrostatične lastnosti, ki bodo zmanjšale ali preprečile vezavo aktina in posledično inhibicijo DNA-hidrolitične aktivnosti v primeijavi z nativno humano DNazo I. Npr., cisteinski ostanek lahko uvedemo ob ali v soseščino ostanka nativne humane DNaze I, kije vpleten v vezavo aktina. Prosti tiol cisteinskega ostanka lahko tvori intermolekularno disulfidno vez z drugo takšno varianto DNaze I, da se tvori DNazni I dimer, ali pa ga lahko modificiramo npr. z alkilacijskim sredstvom, specifičnim za tiol. Nekateri ilustrativni primeri takšnih mutacij so kot sledi: H44C, L45C, V48C, G49C, L52C, D53C, N56C, Y65C, V67C, E69C, A114C.

Primerno substitucije, insercije in/ali delecije v aminokislinski sekvenci nativne humane DNaze I običajno izvedemo z uvedbo mutacij v ustrezno nukleotidno sekvenco DNA, ki kodira nativno humano DNazo I, npr. z na mesto-usmerjeno mutagenezo. Ekspresija mutirane DNA ima nato za posledico produkcijo variantne humane DNaze I, ki ima želeno (ne-nativno) aminokislinsko sekvenco.

Medtem ko lahko za izvedbo na mesto - usmerjene mutageneze uporabimo katerokoli tehniko, ki je znana v stroki, kot je npr. opisano v Sambrook, et al., Molecular Cloning: A Laboratorv Manual, Second Edition (Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York (1989)), pa je oligonukleotidno usmerjena mutageneza prednostna metoda za pripravo variant humane DNaze I v smislu izuma. Ta metoda, ki je v stroki dobro znana, (Zoller, et al., Meth. Enz. 100:4668-500 (1983); Zoller et al., Meth. Enz. 154:329-350 (1987); Carter, Meth. Enz. 154:382-403 (1987); Kunkel, et al., Meth. Enzymol. 154:367-382 (1987); Honvitz, et al., Meth. Enz. 185:599-611 (1990)), je še zlasti primerna za izdelavo substitucijskih variant, čeprav jo lahko uporabimo tudi za prikladno pripravo delecijskih in insercijskih variant.

Tehnika na mesto - usmerjene mutageneze značilno uporablja fagni vektor, ki obstaja tako v enojnoverižni, kot v dvojnoverižni obliki. Tipični vektorji, ki so uporabni v na mesto- usmerjeni mutagenezi, vključujejo vektorje, kot je fag M13 in plazmidne vektorje, ki vsebujejo enojnoverižni fagni izvor replikacije (Messing, et al., Meth. Enzymol. 101:20-78 (1983); Veira et al., Meth. Enzymol. 153:3-11 (1987); Short, et al., Nuc. Acids. Res. 16:7583-7600 (1988)). Replikacija teh vektorjev v ustreznih gostiteljskih celicah ima za posledico sintezo enojnoverižne DNA, ki jo lahko uporabimo za na mesto - usmerjeno mutagenezo.

Na kratko, pri izvedbi na mesto - usmerjene mutageneze DNA, ki kodira nativno humano DNazo I (ali njeno varianto), spremenimo DNA tako, da najprej hibridiziramo oligonukleotid, ki kodira želeno mutacijo v enojno verigo DNA. Po hibridizaciji uporabimo DNA polimerazo, da sintetiziramo celotno drugo verigo, pri čemer kot primer uporabimo hibridizirni oligonukleotid in enojno verigo DNA kot šablono. Tako je oligonukleotid, ki kodira želeno mutacijo, vključen v nastalo dvojnoverižno DNA.

Oligonukleotide za uporabo kot hibridizacijskih sond ali primerjev lahko pripravimo s katerokoli primerno metodo, kot je čiščenje naravno navzoče DNA ali z in vitro sintezo. Npr., oligonukleotide zlahka sintetiziramo z uporabo različnih tehnik v organski kemiji, kot so opisali Narang, et al., Meth. Enzymol. 68:90-98 (1979); Brown, et al., Meth. Enzymol. 68:109-151 (1979); Caruthers, et al., Meth. Enzymol. 154:287-313 (1985). Splošen pristop za izbiro ustrezne hibridizacijske sonde ali primerja je dobro znan. Keller, et al., DNA Probes, str. 11-18 (Stockton Press, 1989). Značilno bo hibridizacijska sonda ali primer vsebovala 10-25 ali več nukleotidov in vključevala bo vsaj 5 nukleotidov na obeh straneh sekvence, ki kodira želeno mutacijo, tako da zagotovimo, da bo oligonukleotid prednostno hibridiziral pri želeni lokaciji v šablonsko molekulo enojnoverižne DNA.

Seveda lahko na mesto - usmerjeno mutagenezo uporabimo za uvedbo multiplih substitucijskih , insercijskih ali delecijskih mutacij v izhodno DNA. Če so mesta, ki jih želimo mutirati, locirana blizu skupaj, lahko mutacije uvedemo simultano z uporabo posameznega oligonukleotida, ki kodira vse izmed želenih mutacij. Če pa so mesta, kijih želimo mutirati, locirana v določeni razdalji drugo od drugega (ločena z več kot okoli 10 nukleotidi), je posamezen oligonukleotid, ki kodira za vse želene spremembe, težje generirati. Namesto tega lahko uporabimo eno izmed dveh alternativnih metod.

Po prvi metodi za vsako želeno mutacijo generiramo ločen oligonukleotid. Oligonukleotide nato simultano aneliramo na enojnoverižno šablonsko DNA in druga veriga DNA, ki se sintetizira iz šablone, bo kodirala vse želene aminokislinske substitucije.

Alternativna metoda vključuje za proizvodnjo želene variante dva ali več krogov mutageneze. Prvi krog je tak, kot smo opisali za uvedbo posamezne mutacije. Drugi krog mutageneze uporablja mutirano DNA, ki je v prvem krogu mutageneze proizvedena kot šablona. Tako ta šablona že vsebuje eno ali več mutacij. Oligonukleotid, ki kodira dodatno(e) želeno(e) aminokislinsko(e) substitucijo(e) nato aneliramo na to šablono in nastala veriga DNA sedaj kodira mutacije tako iz prvega, kot drugega kroga mutageneze. Nastalo DNA lahko uporabimo kot šablono v tretjem krogu mutageneze itd.

PCR mutageneza (Higuchi, in PCRProtocols, str. 177-183 (Academic Press, 1990); Vallette, et al., Nuc. Acids Res. 17:723-733 (1989)) je primerna tudi za izdelavo variant humane DNaze I. Če povzamemo, kadar v PCR kot izhodni material uporabimo majhne količine šablonske DNA, lahko uporabimo primerje, ki se rahlo razlikujejo v sekvenci od ustrezne regije v šablonski DNA, zato da generiramo razmeroma velike količine specifičnega DNA fragmenta, ki se razlikuje od šablonske sekvence le v položajih, kjer se primerji razlikujejo od šablone. Za uvedbo mutacije v plazmidno DNA, npr. sekvenca enega od primerjev vključuje želeno mutacijo in je oblikovana za hibridiziranje na eno verigo plazmidne DNA pri položaju mutacije; sekvenca drugega primerja mora biti identična nukleotidni sekvenci znotraj nasprotne verige plazmidne DNA, toda ta sekvenca je lahko locirana kjerkoli vzdolž plazmidne DNA. Prednostno je, da je sekvenca drugega primerja locirana znotraj 200 nukleotidov tiste sekvence iz prvega primerja, tako da lahko na koncu celotno pomnoženo regijo DNA, ki je vezana s primerji, zlahka sekvenciramo. PCR pomnoževanje z uporabo primerskega para, ima, kot tisto, ki smo ga pravkar opisali, za posledico populacijo DNA fragmentov, ki se razlikujejo pri položaju mutacije, določenim s primerjem, in verjetno pri drugih položajih, saj je šablonsko kopiranje nekako nagnjeno k napakam. Wagner, et al., in PCR Topics, str. 69-71 (Springer-Verlag, 1991).

Če je razmerje šablonska proti produktni, pomnoženi DNA izredno nizko, potem večina fragmentov produktne DNA vključuje želeno(e) mutacijo(e). Z uporabo standardnih rekombinantnih DNA metod to produktno DNA uporabimo za nadomestitev ustrezne regije v plazmidu, ki je služila kot PCR šablona. Mutacije pri ločenih položajih lahko uvedemo bodisi simultano ali z uporabo mutantnega drugega primerja, ali pa z izvedbo druge PCR z različnimi mutantnimi primerji in simultanim ligiranjem obeh nastalih PCR fragmentov na plazmidni fragment v tro (ali več) - delni ligaciji.

Druga metoda za pripravo variant, kasetna mutageneza, temelji na tehniki, ki so jo opisali Wells et al., Gene, 34:315-323 (1985). Izhodni material je plazmid (ali drug vektor), ki obsega DNA sekvenco, ki jo želimo mutirati. V izhodni DNA, ki jo želimo mutirati, identificiramo kodon(e). Na vsaki strani identificiranega(ih) mutacijskega(ih) mesta(ih) mora obstajati unikatno restrikcijsko endonukleazno mesto. V kolikor restrikcijskih mest ni, jih lahko generiramo z uporabo zgoraj opisane metode, z oligonukleotidom-posredovano mutagenezo, da jih uvedemo ob ustrezne lokacije v DNA. Plazmidno DNA pri teh mestih razrežemo, da jo lineariziramo. Dvojnoverižni oligonukleotid, ki kodira sekvenco DNA med restrikcijskimi mesti, toda ki vsebuje želeno(e) mutacijo(e), sintetiziramo z uporabo standardnih postopkov, pri čemer obe verigi oligonukleotida sintetiziramo ločeno in nato hibridiziramo skupaj z uporabo standardnih tehnik. Ta dvojnoverižni oligonukleotid imenujemo kaseta. Ta kaseta je oblikovana tako, da ima 5’ in 3’ konca, ki sta kompatibilna s konci lineariziranega plazmida, tako da jo lahko neposredno ligiramo na plazmid. Nastali plazmid vsebuje mutirano DNA sekvenco.

Prisotnost mutacije(ij) v DNA določimo z metodami, dobro znanimi v stroki, ki vključujejo restrikcijsko mapiranje in/ali DNA sekvenciranje. Prednostna metoda za DNA sekvenciranje je metoda dideoksi verižne terminacije Sanger-ja, et al., Proč. Nat. Acad. Sci. USA 72:3918-3921 (1979).

DNA, ki kodira varianto humane DNaze I, vključimo v replikabilni vektor za nadaljnje kloniranje ali ekspresijo. Vektorji so plazmidi in druge DNA, ki so sposobni replikacije znotraj gostiteljske celice in so kot taki uporabni za izvedbo dveh funkcij skupaj s kompatibilnimi gostiteljskimi celicami (sistem vektor-gostitelj). Ena funkcija je, da omogočijo kloniranje nukleinske kisline, ki kodira varianto humane DNaze I, t.j., da proizvedejo uporabne količine nukleinske kisline. Druga funkcija je, da usmerijo ekspresijo variante humane DNaze I. Eno ali obe ti dve funkciji izvaja vektor v določeni gostiteljski celici, ki jo uporabimo za kloniranje ali ekspresijo. V odvisnosti od funkcije, ki naj jo izvajajo, bodo vektorji vsebovali različne komponente.

Za proizvodnjo variante humane DNaze I bo ekspresijski vektor obsegal DNA, ki kodira varianto, kot je opisana zgoraj, operabilno vezano na promotor in mesto vezave ribosoma. Varianta se nato neposredno izrazi v rekombinantno celično kulturo, bodisi kot fuzija s heterolognim polipeptidom, prednostno s signalno sekvenco, bodisi z drugim polipeptidom, ki ima specifično cepitveno mesto na spoju med heterolognim polipeptidom in varianto humane DNaze I.

Prokarionti (npr. E. coli in druge bakterije) so prednostne gostiteljske celice za začetne korake kloniranja v smislu izuma. Še zlasti so uporabni za hitro proizvodnjo velikih količin DNA, za proizvodnjo šablon enojnoverižne DNA, uporabljanih za na mesto - usmerjeno mutagenezo in za DNA sekvenciranje generiranih variant. Prokariotične gostiteljske celice lahko uporabimo tudi za ekspresijo DNA, ki kodira varianto humane DNaze I. Polipeptidi, ki se proizvajajo v prokariotičnih celicah, bodo značilno ne-glikozilirani.

Poleg tega lahko variante humane DNaze I v smislu izuma izrazimo v evkariotičnih gostiteljskih celicah, vključno evkariotičnih mikrobih (npr. kvasovkah) ali celicah, iz16 vedenih iz živalskega ali drugega večceličnega organizma (npr. ovarijske celice kitajskega hrčka in druge celice sesalcev) ali v živih živalih (npr. kravah, kozah, ovcah).

Klonirne in ekspresijske metodologije so v stroki dobro znane. Primeri prokariotičnih in evkariotičnih gostiteljskih celic in ekspresijskih vektorjev, ki so primerni za uporabo v proizvodnji variant humane DNaze I v smislu predloženega izuma, so npr. tiste, opisane v Shak, objavljena PCT prijava št. WO 90/07572 (objavljena 12. julija 1990).

Če kot gostitelje uporabimo prokariotične celice ali celice, ki vsebujejo čvrste konstrukcije celične stene, sta prednostni metodi transfekcije celic z DNA metoda obdelave s kalcijem, ki so jo opisali Cohen et al., Proč. Natl. Acad. Sci. 69:2110-2114 (1972) ali polietilenglikolna metoda Chung-a et al., Nuc. Acids, Res. 16:3580 (1988). Če uporabimo kot gostitelja kvasovke, transfekcijo splošno dosežemo z uporabo polietilenglikola, kot je podal Hinnen, Proč. Natl. Acad. Sci., U.S.A., 75:1929-1933 (1978). Če kot gostiteljske celice uporabimo celice sesalcev, transfekcijo splošno izvedemo z metodo obarjanja s kalcijevim fosfatom, Graham, et al., Virology 52:546 (1978), Gorman, et al., DNA and Protein Eng. Tech. 2:3-10 (1990). Seveda pa so za uporabo v predloženem primeru primerne tudi druge znane metode za uvedbo DNA v prokariotične in evkariotične celice, kot je nuklearna injekcija, elektroporacija ali protoplastna fuzija.

V predloženem izumu so še zlasti uporabni ekspresijski vektorji, ki v celicah sesalcev skrbijo za začasno ekspresijo DNA, ki kodira variante humane DNaze I. Splošno začasna ekspresija vključuje uporabo ekspresijskega vektorja, ki se je sposoben učinkovito replicirati v gostiteljski celici, tako da gostiteljska celica akumulira mnogo kopij ekspresijskega vektorja, in po drugi strani, sintetizira visoke nivoje želenega polipeptida, ki ga je kodiral ekspresijski vektor. Začasni ekspresijski sistemi, ki obsegajo ustrezen ekspresijski vektor in gostiteljsko celico, dopuščajo prikladno pozitivno identifikacijo polipeptidov, ki so kodirani s kloniranimi DNA, kakor tudi hiter skrining takšnih polipeptidov za želenimi biološkimi ali fiziološkimi lastnostmi. Wong, et al., Science 228:810-815 (1985); Lee, et al., Proč. Nat Acad. Sci. USA 82:4360-4364 (1985); Yang, et al., Celi 47:3-10 (1986). Torej začasne ekspresijske sisteme pripravno uporabljamo za ekspresijo DNA, ki kodira variante aminokislinske sekvence nativne humane DNaze I, skupaj s testi za identifikacijo tistih variant, ki vežejo aktin z nižjo afiniteto, kot nativna DNaza I, kakor tudi s testi za merjenje tistih variant z DNA-hidrolitično aktivnostjo.

Prednostno se varianta humane DNaze I izloča iz gostiteljske celice, v kateri se izraža in v takem primeru varianto ponovno pridobimo iz gojitvenega medija, v katerem gojimo gostiteljske celice. V takem primeru je lahko želeno, da celice gojimo v gojitvenem mediju brez seruma, saj lahko odsotnost serumskih proteinov in drugih serumskih komponent v mediju olajša čiščenje variante. Če se le-ta ne izloča, potem varianto humane DNaze I ponovno pridobimo iz lizatov gostiteljskih celic. Kadar se varianta izraža v gostiteljski celici, ki ni humanega izvora, bo varianta popolnoma brez proteinov humanega izvora. V vsakem primeru bo potrebno varianto očistiti rekombinantnih celičnih proteinov, zato da pridobimo v bistvu homogene preparate variante humane DNaze I. Za terapevtske uporabe bo očiščena varianta prednostno več kot 99 %-no čista (t.j. kakršnikoli drugi proteini bodo obsegali manj kot 1 % celokupnega proteina v očiščenem sestavku).

Splošno čiščenje variante humane DNaze I dosežemo tako, da izkoristimo prednost razlikovalnih fizikokemijskih lastnosti variante v primerjavi s kontaminanti, s katerimi je lahko povezana. Npr., kot prvi korak, gojitveni medij ali lizat gostiteljskih celic centrifugiramo, da odstranimo določen celični debris. Varianto humane DNaze I nato očistimo kontaminantnih topnih proteinov in polipeptidov, npr. z obarjanjem z amonijevim sulfatom ali etanolom, gelsko filtracijo (molekularno izključitveno kromatografijo), ionsko izmenjevalno kromatografijo, hidrofobno kromatografijo, imunoafinitetno kromatografijo (npr. z uporabo kolone, ki vsebuje anti-humana DNazna I protitelesa sklopljena s sefarozo), tentaktilno kationsko izmenjevalno kromatografijo (Frenz, et al., objavljena PCT prijava, št. WO 93/25670, objavljena 23. decembra 1993), reverzno fazno HPLC in/ali gelsko elektroforezo.

Seveda bo strokovnjak upošteval, da lahko metode čiščenja, ki jih uporabimo za nativno humano DNazo I, zahtevajo nekatere modifikacije, da bi bile uporabne v čiščenju variante humane DNaze I, da razložimo strukturne in druge razlike med nativnimi proteini in variantnimi proteini. Npr., v nekaterih gostiteljskih celicah (zlasti bakterijskih gostiteljskih celicah), je lahko varianta humane DNaze I izražena prvotno v netopni, agregirani obliki (v stroki navajana kot refraktilna telesa ali inkluzijska telesa), pri čemer je v takem primeru potrebno, da med čiščenjem solubiliziramo in renaturiramo varianto humane DNaze I. Postopki za solubilizacijo in renaturacijo rekombinantnih proteinskih refraktilnih teles so v stroki znani (glej npr. Builder, et al., U.S. patent št. 4,511,502).

V še eni izvedbi tega izuma pripravimo variante humane DNaze I z neposredno izdelavo kovalentnih modifikacij v proteinu nativne ali variantne humane DNaze I. Take modifikacije izvedemo zato, da vplivamo na vezavo aktina ali na kako drugo lastnost proteina (npr. stabilnost, biološki razpolovni čas, imunogenost) in jih lahko izvedemo namesto ali dodatno k substituciji aminokislinske sekvence, inserciji in deleciji mutacij, ki so opisane zgoraj.

Kovalentne modifikacije lahko uvedemo s presnovo ciljanih aminokislinskih ostankov nativne ah variantne humane DNaze I z organskim derivatizirnim sredstvom, ki je sposobno reagirati z izbranimi aminokislinskimi stranskimi verigami ali N- ali C-terminalnimi ostanki. Ustrezna derivatizirna sredstva in postopki so v stroki dobro znani.

Npr., cisteinilne ostanke najbolj običajno presnovimo z α-haloacetati (in ustreznimi amini), kot je klorocetna kislina ali kloracetamid, da dobimo karboksimetilne ali karboksiamidometilne derivate.

Cisteinilne ostanke lahko derivatiziramo tudi z reakcijo z bromo trifluoroacetonom, a-bromo-/3-(5-imidozoil)propionsko kislino, kloroacetilfosfatom, N-alkilmaleimidi,

3-nitro-2-piridil disulfidom, metil-2-piridil disulfidom, p-kloroživosrebrovim benzoatom, 2-kloroživosrebrovim-4-nitrofenolom ali kloro-7-nitrobenzo-2-oksa-l,3diazolom.

Histidilne ostanke derivatiziramo z reakcijo z dietilpirokarbonatom pri pH 5,5-7,0, ker je to sredstvo razmeroma specifično za histidilno stransko verigo. Uporaben je tudi para-bromofenacilbromid; reakcijo prednostno izvedemo v 0,1 M natrijevim kakodilatu pri pH 6,0.

Lizinilne in amino terminalne ostanke presnovimo z anhidridom jantarne ali druge karboksilne kisline. Derivatizacija s temi sredstvi ima učinek obrnitve naboja lizinilnih ostankov. Drugi primerni reagenti za derivatizacijo α-amino-vsebujočih ostankov vključujejo imidoestre, kot je metil pikolinimidat; piridoksalfosfat; piridoksal; kloroborohidrid; trinitrobenzensulfonska kislina; O-metilizosečnina; 2,4-pentandion; in reakcijo z glioksilatom, katalizirano s transminazo.

Arginilne ostanke modificiramo z reakcijo z enim ali več običajnimi reagenti, med njimi s fenilglioksalom, 2,3-butandionom, 1,2-cikloheksandionom in ninhidrinom. Derivatizacija argininskih ostankov zahteva, da reakcijo izvedemo v alkalnih pogojih, ker ima gvanidinska funkcionalna skupina visok pK_a. Nadalje lahko ti reagenti reagirajo s skupinami lizina, kakor tudi z argininsko epsilon-amino skupino.

Karboksilne stranske verige (aspartil ali glutamil) selektivno modificiramo z reakcijo s karbodiimidi (R’-N=C=N-R’), kjer sta R in R’ različni alkilni skupini, kot je l-cikloheksil-3-(2-morfolinil-4-etil)karbodiimid ali l-etil-3-(4-azonia-4,4-dimetilpentiljkarbodiimid. Nadalje aspartilne in glutamilne ostanke pretvorimo v asparaginilne in glutaminilne ostanke z reakcijo z amonijevimi ioni.

Kovalentno sklapljanje glikozidov na aminokislinske ostanke proteina lahko uporabimo za modificiranje ali povečanje števila ali profila ogljikovohidratnih substituentov, še zlasti ob ali v soseščini tistih ostankov, ki so vpleteni v vezavo aktina. V odvisnosti od uporabljenega načina sklopitve je(so) lahko sladkorji) vezani na (a) arginin in histidin (b) proste karboksilne skupine, (c) proste sulfhidrilne skupine, kot so tiste cisteina (d) proste hidroksilne skupine, kot so tiste serina, treonina ali hidroksiprolina (e) aromatske ostanke, kot so tisti fenilalanina, tirozina ali triptofana ali (f) amidno skupino glutamina. Primerne metode so opisane npr. v objavljeni PCT prijavi št. WO 87/05330 (objavljena 11. septembra 1987) in v Aplin, et al., CRC Crit. Re. Biochem., str. 259-306 (1981).

Kovalentna vezava sredstev, kot je polietilenglikol (PEG) ali humani serum albumin, na variante humane DNaze I lahko zniža imunogenost in/ali toksičnost variante in/ali podaljša njeno razpolovno dobo, kot je bilo opaženo z drugimi proteini. Abuchowski, et al., J. Biol. Chem. 252:3582-3586 (1977); Poznansky, et al., FEBS Letters 239:1822 (1988); Goodson, et al., Biotechnology 8:343-346 (1990); Katre, J. Immunol. 144:209-213 (1990); Harris, Polvethvlene Glvcol Chemistrv (Plenum Press, 1992). Poleg tega ima lahko modifikacija nativne humane DNaze I ali njene variante s temi sredstvi ob ali v soseščini (t.j. znotraj okoli 5 aminokislinskih ostankov) aminokislinskega ostanka, ki vpliva na vezavo aktina, za posledico varianto, ki je odporna proti aktinu. V nadaljnji izvedbi lahko proti aktinu odporna varianta humane DNaze I obsega mutacijo pri ostanku Asn, ki se pojavi pri položaju 74 aminokislinske sekvence nativne humane DNaze I (npr. mutacija N74D, N74K, ali N74S), z namenom, da zmanjšamo ali preprečimo deamidacijo variante DNaze I. Frenz, et al., obljavljena PCT prijava št. WO 93/25670, objavljena 23. decembra 1993. Kot še en primer lahko proti aktinu odporna varianta humane DNaze I obsega mutacijo aminokislinske sekvence ali drugo kovalentno modifikacijo, ki zmanjša susceptibilnost variante za degradacijo s proteazami (npr. nevtrofilno elastazo), ki so lahko prisotne v sputumu in drugih bioloških materialih.

DNA-hidrolitično aktivnost in afiniteto vezave aktina variant humane DNaze I, pripravljenih, kot je opisano zgoraj, zlahka določimo z uporabo testov in metod, ki so znane v stroki in kot so opisane tukaj. Kakršnakoli takšna varianta, ki ima DNAhidrolitično aktivnost in zmanjšano vezivno afiniteto za aktin (kot je definirano zgoraj), je proti aktinu odporna varianta znotraj obsega predloženega izuma.

Proti aktinu odporne variante humane DNaze I v smislu izuma uporabljamo za zniževanje viskoelastičnosti materiala, ki vsebuje DNA, kot je sputum, sluz ali drugi pljučni izločki. Takšne variante so še zlasti uporabne za zdravljenje pacientov s pljučno boleznijo, ki imajo nenormalno viskozne ali zgoščene izločke in s stanji, kot je akutna ali kronična bronhialna pljučna bolezen, vključno z infekcijsko pljučnico, bronhitisom ali traheobronhitisom, bronhiektazo, cistično fibrozo, astmo, tuberkulozo in glivičnimi infekcijami. Za takšna zdravljenja raztopino ali fino porazdeljen suh pripravek variante, odporne proti aktinu, na običajen način vkapamo v zračne poti (npr. bronhije) ali pljuča pacienta, npr. z aerosolizacijo.

Variante, odporne proti aktinu, so uporabne tudi za dodatno zdravljenje abscesov ali resnih notranjih infekcij v stanjih, kot je empiem, meningitis, absces, peritonitis, sinusitis, otitis, periodontitis, perikarditis, pankreatitis, holelitiaza, endokarditis in septični artritis, kakor tudi za lokalna zdravljenja pri množici vnetnih in inficiranih lezij, kot so inficirane lezije kože in/ali sluzničnih membran, kirurške rane, ulcerativne lezije in opekline. Varianta, odporna proti aktinu, lahko izboljša učinkovitost antibiotikov, ki jih uporabimo v zdravljenju takšnih infekcij (npr. aktivnost gentamicina se znatno zmanjša z reverzibilno vezavo na intaktno DNA).

Nativna humana DNaza I in njene variante, odporne proti aktinu, so lahko uporabne tudi za zdravljenje sistemskega lupus eritematozusa (SLE), življenje ogrožajoče autoimunske bolezni, za katero je značilna produkcija raznolikih protiteles. DNA je poglavitna antigenska komponenta imunskih kompleksov. V tem primeru lahko humano DNazo I (nativno ali variantno) dajemo sistemsko, npr. z intravenoznim, subkutanim, intratehalnim ali intramuskularnim dajanjem prizadetemu pacientu.

Nativna humana DNaza I in njene variante, odporne proti aktinu, so lahko uporabne tudi za preprečevanje novega razvoja in/ali eksacerbacije respiratornih infekcij, kot se lahko pojavijo pri pacientih s cistično fibrozo, kroničnim bronhitisom, astmo, pljučnico ali drugimi pljučnimi boleznimi, ali pri pacientih, katerih dihanje je podprto z ventilatorjem ali drugo mehansko napravo, ali pri drugih pacientih z rizikom razvoja respiratornih infekcij, npr. pri post-operativnih pacientih.

Variante, odporne proti aktinu, lahko formuliramo skladno z znanimi metodami, tako da pripravimo terapevtsko uporabne sestavke. Prednostni terapevtski sestavek je raztopina proti aktinu odporne variante v pufrani ali nepufrani vodni raztopini in prednostno je to izotonična raztopina soli, kot je 150 mM natrijev klorid, ki vsebuje 1,0 mM kalcijevega klorida pri pH 7. Te raztopine so zlasti uporabne za uporabo v tržno razpoložljivih razpršilnikih, ki vključujejo razpršilnike s šobo in ultrazvočne razpršilnike, ki so uporabni za neposredno dajanje v zračne poti ali pljuča prizadetega pacienta.

V še eni izvedbi terapevtski sestavek obsega suh prah variante, odporne proti aktinu, prednostno pripravljen z razpršilnim sušenjem raztopine variante, odporne proti aktinu, v bistvu kot je opisano v U.S. patentni prijavi 08/206,020, ki je istočasno v postopku (vložena 4. marca 1994).

V nadaljnji izvedbi terapevtski sestavek obsega celice, ki aktivno proizvajajo proti aktinu odporno varianto humane DNaze I. Takšne celice lahko neposredno uvedemo v tkivo pacienta, ali pa so lahko vkapsulirane znotraj poroznih membran, ki jih nato implantiramo v pacienta, v obeh primerih pa zagotovimo dostavo proti aktinu odporne variante v področja znotraj telesa pacienta, ki potrebuje povečane koncentracije DNA-hidrolitične aktivnosti. Npr., pacientove lastne celice lahko transformiramo ali in vivo ali exvivo z DNA, ki kodira proti aktinu odporno varianto humane DNaze I, in jih nato uporabimo za proizvodnjo DNaze I neposredno v pacientu.

Terapevtsko učinkovita količina proti aktinu odporne variante humane DNaze I bo odvisna npr., od količine DNA in aktina v materialu, ki ga želimo obdelati, od terapevtskih okoliščin, poti dajanja in stanja pacienta. Skladno s tem bo potrebno, da bo terapevt titriral dozo in prilagodil pot dajanja, ki je potrebna, da bo dobil optimalni terapevtski učinek. Z ozirom na njeno zmanjšano vezivno afiniteto za aktin in posledično povečano DNA-hidrolitično aktivnost v prisotnosti aktina v primerjavi z nativno humano DNazo I, je lahko količina proti aktinu odporne variante, ki je potrebna, da dosežemo terapevtski učinek, manjša od količine nativne humane DNaze I, kije potrebna za to, da dosežemo enak učinek pod enakimi pogoji. Splošno bo terapevtsko učinkovita količina proti aktinu odporne variante doza od okoli 0,1 μ-g do okoli 5 mg variante na kg telesne mase pacienta, dajana znotraj farmacevtskega sestavka, kot je opisano tukaj.

Proti aktinu odporno varianto DNaze I po želji združimo z ali dajemo skupaj z enim ali več drugimi farmakološkimi sredstvi, ki se uporabljajo za zdravljenje zgoraj navedenih stanj, kot so antibiotiki, bronhodilatatorji, protivnetna sredstva, mukolitiki (npr. n-acetil-cistein), proteini, ki vežejo aktin ali ki razgrajujejo aktin (npr. gelsolin; Matsudaira et al., Celi 54:139-140 (1988); Stossel, et al., objavljena PCT prijava št. WO 94/22465 (obljavljena 13. oktobra 1994)), proteazni inhibitorji ali produkt genske terapije (npr. ki vsebujejo gen za regulacijo transmembranske prevodnosti cistične fibroze, Riordan, et al., Science 245:1066-1073 (1989)).

Naslednji primeri so podani za ilustracijo in ni mišljeno, da bi na kakršenkoli način omejevali izum. Izrecno so vključene vse tu citirane reference patentov in literature.

PRIMER 1

Mutageneza humane DNaze I

Sev E. coli CJ236 (BioRad Laboratories, Richmond, Kalifornija ZDA) transformiramo s plazmidom pRK.DNaza.3 z uporabo metode Chung-a et al. (Nuc. Acids. Res. 16:3580 (1988). Plazmid, pRK.DNaza.3, uporabljen v izvedbi predloženega izuma, je tak, kot je opisan v objavljeni PCT prijavi št. WO 90/07572 (objavljena 12. julija 1990), razen da je nukleotidna sekvenca, ki kodira humano DNazo I, kot je prikazana na sliki 1. Transformirane celice zasadimo na LB agarske plošče, ki vsebujejo 50 /ig/ml karbenicilina in jih gojimo preko noči pri 37 °C. Brozgo 2ΥΤ (5 ml), ki vsebuje 50 gg/ml karbenicilina in 10 μΐ pomožnega faga VCSM13 (Stratagene, La Jolla, Kalifornija ZDA), inokuliramo s posamezno kolonijo iz agarske plošče in ob stresanju gojimo preko noči pri 37 °C. Iz te kulture izoliramo enojnoverižno DNA ter jo uporabimo kot šablono za naknadno mutagenezo.

Na mesto - usmerjeno mutagenezo dosežemo z uporabo sintetičnih oligonukleotidov skladno z metodo po Kunkel-u, et al. (Meth. Enzymol. 154: 367-382 (1987). Mutagenski oligonukleotidi so 21-meri ali 24-meri, ki imajo bodisi 9 ali 12 eksaktnih baznih ujemanj 5’ glede na neujemajoči kodon in 9 eksktnih baznih ujemanj 3’ glede na neujemajoči kodon. Po mutagenezi izpostavimo enojnoverižne DNA iz posameznih klonov dideoksi sekvenciranju (Sanger, et al., Proc.Nat. Acad. Sci. USA 74:54635467 (1977)). DNA, ki ima nukleotidne sekvence variante, nato transformiramo, kot je opisano zgoraj, v sev E. coli XL1 Blue MRF’ (Stratagene). Po zasaditvi in izolaciji posamezne kolonije kot predhodno, posamezne kolonije uporabimo za inokulacijo 0,5 1 brozge LB, ki vsebuje 50 /xg/ml karbenicilina. Po gojitvi ob stresanju preko noči pri 37 °C celice zberemo s centrifugiranjem in variantno DNA (v ekspresijskem vektorju) očistimo z uporabo kolon Qiagen tipa 500 (Qiagen Inc., Chatsworth, Kalifornija ZDA).

Slike 2-6 ponazarjajo različne izdelane variante humane DNaze I. Na slikah in skozi ves opis je(so) mutacija(e) aminokislinske substitucije, kije(so) prisotna(e) v varianti DNaze I, okrajšana(e) s prvo črko, številko in drugo črko. Prva črka je enočrkovna okrajšava aminokislinskega ostanka v nativni (divjega tipa) humani zreli DNazi I, številka kaže položaj tega ostanka v nativni humani zreli DNazi I (številčenje, kot je prikazano na sliki 1) in druga črka je enočrkovna okrajšava aminokislinskega ostanka pri tem položaju v varianti DNaze I. Npr., v varianti DNaze I, ki ima mutacijo D53R, je bil ostanek aspartinske kisline (D) pri položaju 53 v nativni humani zreli DNazi I zamenjan z argininskim ostankom (R). Multiple mutacije v posamezni varianti so označene podobno, pri čemer (:) loči vsako od različnih mutacij, ki so prisotne v varianti. Npr. poimenovanje D53R:Y65A pomeni, da ima varianta mutacijo D53R in mutacijo Υ65Α.

PRIMER 2

Ekspresija variant humane DNaze I

Humane embrionalne ledvične celice 293 (ATCC CRL 1573, American Type Culture Collection, Rockville, Maryland ZDA) gojimo v mediju, ki vsebuje serum, v 150 mm plastičnih petrijevkah. Log fazne celice začasno kotransfektiramo z 22,5 gg očiščene variantne DNA (pripravljene, kot je opisano zgoraj) in 17 gg adenovirusne DNA z uporabo metode obarjanja s kalcijevim fosfatom (Gorman, et al., DNA in Protein Eng. Tech. 2:3-10 (1990)). Približno 16 ur po transfekciji celice speremo s 15 ml fosfatno napufrane slanice in medij zamenjamo z medijem brez seruma. Iz vsake plošče vzamemo dva zbira celičnega gojitvenega medija, prvega bodisi 24 ali 72 ur in zadnjega 96 ur po menjavi medija brez seruma. Na ta način dobimo skupno pribl. 50 ml supernatanta celične kulture, ki vsebuje varianto DNaze I. Pool supernatanta kulture, ki smo ga zbrali iz vsake plošče, 5 do 50-krat koncentriramo z uporabo koncentratorjev Centriprep 10 in koncentrate testiramo, da določimo različne biokemijske in biološke aktivnosti variant DNaze I.

Koncentrat, ki vsebuje nativno humano DNazo I, pripravimo po enakem postopku, kot je opisan zgoraj, razen da celice 293 začasno transfektiramo s plazmidom pRK.DNaza.3.

PRIMER 3

Biokemijska in biološka aktivnost variant humane DNaze I

I. Relativna specifična aktivnost

Relativno specifično aktivnost variant DNaze I določimo s primerjavo aktivnosti variante s tisto, ki jo ima nativna humana DNaza I v dveh različnih testih. Natančneje, relativna specifična aktivnost variant je definirana kot koncentracija variante (v jug/ml), določena v testu aktivnosti z metil zelenim (Sinicropi, et al., Anal. Biochem. 222:351-358 (1994); Kurnick, Arch. Biochem. 29:41-53 (1950)), deljena s koncentracijo variante (v Mg/ml), določena v testu DNaze I ELISA (opisan spodaj). V obeh, testu aktivnosti z metil zelenim in testu DNaze I ELISA, določimo standardne krivulje z uporabo humane DNaze I Pulmozyme®. Relativna specifična aktivnost relativne humane DNaze I in variant so prikazane na slikah 2A-D.

Test aktivnosti z metil zelenim (Sinicropi, et al., Anal. Biochem. 222:351-358 (1994); Kurnick, arch. Biochem. 29:41-53 (1950) uporablja barvilo metil zeleno, ki se vrine v DNA približno vsakih 10 baz, kar ima za rezultat zelen substrat. Ko DNaza I cepi DNA, se barvilo metil zeleno sprosti in oksidira do brezbarvne oblike. Tako je izguba zelene barve proporcionalna s količino DNaze I, ki je dodana testnemu vzorcu. Količino DNaze I, ki je prisotna v testu, nato kvantificiramo s primerjavo s standardno krivuljo, ki jo pripravimo s testiranjem znanih količin DNaze I.

Test DNaze I ELISA vključuje premazovanje mikrotitrskih plošč s kunčjim antiDNaza I poliklonalnim protitelesom, dodajanje vzorca, ki ga želimo testirati in detekcijo kakršnekoli nastale vezave DNaze I s kunčjim anti-DNaza I poliklonalnim protitelesom, ki je konjugirano na hrenovo peroksidazo (HRP). Kadar dodamo substrat HRP in reagent za razvijanje barve, je barva, ki se razvije, proporcionalna s količino DNaze I, prisotne v vzorcu. Količino v testu prisotne DNaze I nato kvantificiramo s primerjavo s standardno krivuljo, ki jo pripravimo s testiranjem znanih količin DNaze I.

V obeh testih smo analizirali večkratne razredčitve vzorcev in tiste vrednosti, ki so padle v srednje območje standardne krivulje, smo povprečili in izračunali standardne deviacije.

Koncentracijo DNaze I, kot smo jo določili s testom DNaze I ELISA, smo uporabili tudi za standardizacijo koncentracij DNaze I v drugih testih, v katerih smo okarakterizirali variante DNaze I (npr. v testih inhibicije z aktinom, opisani spodaj).

II. Aktinska inhibicija hidrolitične aktivnosti DNaze I

G-aktin (Kabsch, et al., Ann. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 21:49-76 (1992)) pripravimo z dializiranjem preko noči 1 mg/ml raztopine aktina (pridobljenega bodisi tržno (Sigma, St. Louis, Missouri ZDA) ali z metodo Pardee-ja, et al., Meth. Anzymol. 85:164-181 (1982)) proti 5 mM HEPES, pH 7,2, 0,2 mM CaCl₂,0,5 mM ATP, 0,5 mM β-merkaptoetanola pri 4 °C. Po centrifugiranju 5 minut pri 13000 x g 5 kvantificiramo količino G-aktina z merjenjem absorbance pri 290 nm; 1 mg/ml raztopina ima absorbanco 0,66 OD. Količino pripravka G-aktina, ki je potrebna, da v bistvu (več kot 50 %-na inhibicija), toda ne povsem, inhibira DNA-hidrolitično aktivnost nativne humane DNaze I, določimo v preliminarnih poizkusih pod enakimi uporabljenimi pogoji za vsak test.

Občutljivost na aktinsko inhibicijo smo določili z merjenjem DNA-hidrolitične aktivnosti variant v prisotnosti in odsotnosti aktina v kateremkoli od dveh različnih testov, predhodno opisanem testu z metil zelenim in hiperkromitnostnem testu, ki temelji na povečanju absorbance pri 260 nm po denaturaciji in depolimerizaciji DNA (Kunitz, J. Gen. Physiol. 33:349-362 (1950); Kunitz, J. Gen. Physiol. 33:363-377 (1950)). Odstotna inhibicija izbranih variant v teh testih, je prikazana na slikah 3 in 4.

V hiperkromitnostnem testu inkubiramo koncentrirane supernatante kulture (pripravljene, kot opisano zgoraj, ki vsebujejo variante DNaze I) bodisi brez dodatka, ali z 2- do 3-kratnim molarnim prebitkom aktina v pufru A (25 mM HEPES, pH 7,5, mM CaCl₂, 4 mM MgCl₂, 0,1 % BSA) 1 uro pri sobni temperaturi, predno jih dodamo v kiveto, ki vsebuje 40 /ig DNA v celokupnem testnem volumnu 1,0 ml. Končna koncentracija variante DNaze I v testu je približno 26 nM, kot to določimo s testom DNaze I ELISA. Merimo hitrosti hidrolize DNA z variantami DNaze I v prisotnosti in odsotnosti aktina. Odstotno aktivnost, ki je prikazana na slikah 3 in 4, izračunamo z določitvijo razmerja DNA hidrolitične aktivnosti humane DNaze I (nativne ali variantne) v prisotnosti aktina, proti njeni DNA-hidrolitični aktivnosti v odsotnosti aktina in to razmerje pomnožimo s 100.

V testu z metil zelenim koncentrirane supernatante kulture (pripravljene, kot je opisano zgoraj, ki vsebujejo variante DNaze I), inkubiramo bodisi brez dodanega aktina, ali s 1000-molamim prebitkom aktina v pufru B (25 mM HEPES, pH 7,5, 4 mM CaCl₂, 4 mM MgCl₂, 0,1 % BSA, 0,01 % timerosal in 0,05 % Tween 20) pri 37 °C 16 ur. Koncentracijo aktivnega encima v vsakem primeru ocenimo s primerjavo s standardno krivuljo Pulmozyme®-a. Preostala odstotna aktivnost variante se nanaša na 100-kratno razmerje aktivnosti v prisotnosti aktina, proti aktivnosti v odsotnosti aktina.

Kot je prikazano na slikah 3 in 4, je DNA-hidrolitična aktivnost nativne humane DNaze v prisotnosti aktina znatno zmanjšana. Za primerjavo, različne variante nativne humane DNaze, z enim ali multiplimi ostanki, so razmeroma odporne na inhibicijo z aktinom, kar se kaže z njihovo večjo DNA-hidrolitično aktivnostjo v prisotnosti aktina, kot jo ima nativna humana DNaza I.

III. Vezava aktina ELISA

Za merjenje vezave nativne humane DNaze I in variant DNaze I na imobiliziran aktin, smo razvili test, ki temelji na mikrotitru. Najprej jamice plošče MariSorp (Nune, Inc., Naperville, Illinois, ZDA) prekrijemo s 100 μ\ na jamico humanega GC globulina (Calbiochem, La Jolla, Kalifornija ZDA), s proteinom, ki veže aktin (Goldschmidt-Clermont, et al, Biochem. J. 228:471-477 (1985), McLeod, et al., J. Biol. Chem. 264:1260-1267 (1989), Houmeida, et al., Eur. J. Biochem. 203:499-503 (1992)), v koncentraciji 10 μ-g/ml v 25 mM HEPES, 4 mM MgCl₂, 4 mM CaCl₂, pH 7,2, pri 4 °C za 16-24 ur. Potem, ko zavržemo globulin GC, blokiramo prebitna reaktivna mesta z dodatkom 200 μΐ na jamico pufra C (pufer C je enak kot pufer B zgoraj, z dodatkom 0,5 mM adenozin trifosfata; pufer C uporabimo kot testno razredčilo v vseh naknadnih korakih, v kolikor ni navedeno drugače) in inkubiramo ploščo na stresalniku za 1-2 uri pri sobni temperaturi. Vsak naslednji inkubacijski korak izvajamo pri sobni temperaturi 1 uro na mini orbitalnem stresalniku(Bellco Biotechnology, Vineland, New Jersey ZDA); med vsakim korakom ploščo spraznimo in 6-krat speremo s fosfatno napufrano slanico, ki vsebuje 0,05 % Tween 20, s pralnikom plošč Microwash II (Skatron A/S, Norveška). Nato G-aktin, pripravljen kot je opisano zgoraj, razredčimo do 50 /ig/ml v pufru C in v vsako jamico dodamo 100 μΙ. Plošče inkubiramo in speremo ter v jamice dodamo 100 μΐ različnih razredčin Pulmozyme®-a in celične gojitvene medije, ki vsebujejo bodisi nativno humano DNazo I ali njene variante, in plošče inkubiramo ter speremo. Končno dodamo v vsako jamico 100 /xl 1/25000 razredčine konjugata anti-humana DNaza I kunčje poliklonalno protitelo-hrenova peroksidaza (koncentracija originalne zaloge je 465 gg/ml). Po inkubaciji in spiranju iniciiramo razvijanje barve z dodatkom 100 μΐ na jamico reagenta za razvijanje barve (Sigma Fast o-fenilendiamin in sečnina/H₂O₂ tablete solubilizirane skladno s priporočilom proizvajalca) in ustavimo z dodatkom 100 μΐ na jamico 4,5 N H₂SO₄. Snemamo absorbanco pri 492 nm in jo izrišemo proti koncentraciji DNaze I, ki smo jo prvotno dodali v jamico. Dobimo sigmoidne krivulje za nativno humano DNazo I in tiste variante, ki se vežejo na aktin; te krivulje smo fitali po enačbi s štirimi parametri z nelinearno regresijsko analizo (Marquardt, J. Soc. Industr. Appl. Math. 11:431-441 (1963); koncentracijo vsake DNaze I (nativne ali variantne), ki je potrebna, da da polovico maksimalnega signala v testu, izračunamo iz krivulj in je navedena kot EC₅₀ vrednost. Molekulsko maso nativne humane DNaze I in variant smo ocenili na 37000 daltonov.

Relativno vezivno afiniteto vsake variante humane DNaze I izračunamo z deljenjem EC_S0 vrednosti variante z EC₅₀ vrednostjo nativne humane DNaze I, določene v testu ELISA in rezultati so prikazani na slikah 5A-D. Za ponazoritev, če izračunamo, da je relativna vezivna afiniteta variante humane DNaze I 5, ta vrednost kaže na to, da je EC₅₀ vrednost variante 5-krat večja od EC₅₀ vrednosti nativne humane DNaze ali z drugimi besedami, da ima varianta afiniteto za aktin, ki je 5-krat manjša od afinitete nativne humane DNaze I za aktin v tem testu ELISA.

IV. Testi kompaktnosti sputuma

Test kompaktnosti sputuma (objavljena PCT prijava št. WO 94/10567, objavljena 11. maja 1994) uporabimo za merjenje relativne viskoelastičnosti sputuma pri pacientih s cistično fibrozo (CF sputum) pred in po inkubaciji z nativno humano DNazo I in različnimi variantami DNaze I. Po mešanju CF sputuma z vzorcem DNaze I in in28 kubaciji 20 minut pri sobni temperaturi, pol-trdne raztopine vložimo v kapilarne cevke, katere nato centrifugiramo pri 12000 obr/min 20 minut. Po centrifugiranju izmerimo višino pelete in jo primerjamo z višino raztopine + peleta. Te meritve nato uporabimo za izračun odstotne kompaktnosti sputuma, ki korelira z viskoelastičnostjo sputuma.

Odstotna kompaktnost, določena po obdelavi CF sputuma z nativno humano DNazo I in variantami humane DNaze I, odpornimi proti aktinu, je prikazana na sliki 6. Ti rezultati kažejo, da so proti aktinu-odporne variante humane DNaze I bolj učinkovite v zniževanju viskoelastičnosti CF sputuma, kot nativna humana DNaza I, kot to določimo s testom kompaktnosti.

SEZNAM SEKVENC (1) GENERAL INFORMATION:

(i) APPLICANT: Genentech, Inc.

(ii) TITLE OF INVENTION: HUMAN DNASE I VARIANTS (iii) NUMBER OF SEQUENCES: 98 (iv) CORRESPONDENCE ADDRESS:

(A) ADDRESSEE: Genentech, Inc.

(B) STREET: 460 Point San Bruno Blvd (C) CITY: South San Francisco (D) STATE: Califomia (E) COUNTRY: USA (F) ZIP: 94080 (v) COMPUTER READABLE FORM:

(A) MEDIUM ΤΥΡΕ: 3.5 inch, 1.44 Mb floppy disk (B) COMPUTER: IBM PC compatible (C) OPERATING SYSTEM: PC-DOS/MS-DOS (D) SOFTWARE: NinPatin (Genentech) (vi) CURRENT APPLICATION DATA:

(A) APPLICATION NUMBER:

(B) FILING DATE:

(C) CLASSIFICATION:

(vii) PRIOR APPLICATION DATA:

(A) APPLICATION NUMBER: PCT/US95/02366 (B) FILING DATE: 02/24/95 (viii) ATTORNEY/AGENT INFORMATION:

(A) NAME: Johnston, Sean A.

(B) REGISTRATION NUMBER: 35,910 (C) REFERENCE/DOCKET NUMBER: P0925P1PCT1 <ix) TELECOMMUNICATION INFORMATION:

(A) TELEPHONE: 415/225-3562 (B) TELEFAX: 415/952-9881 (C) TELEX: 910/371-7168 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:1:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (ii) MOLECULE ΤΥΡΕ: Amino Acid (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:1:

Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:2:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (ii) MOLECULE ΤΥΡΕ: Amino Acid

<xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:2:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Ala Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245 Glu Val Met Leu Lys 260	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR. SEQ ID NO:3:

(i) SEQUEh-J CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 250 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(ii) MOLECULE ΤΥΡΕ;	; Amino Acid
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:3:
Leu Lys Ile Ala Ala	Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly His Thr Lys
1 5	10 15
Met Ser Asn Ala Thr	Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20	25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu
35	40 45
Thr Ala Val Gly Lys	Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro
50	55 60
Asp Thr Tyr His Tyr	Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65	70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr	Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser
80	85 90
Ala Val Asp Ser Tyr	Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95	100 105
Asn Asp Thr Phe Asn	Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser
110	115 120
Arg Phe Thr Glu Val	Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala
125	130 135
Ala Pro Gly Asp Ala	Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val
140	145 150
Tyr Leu Asp Val Gin	Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu
155	160 165
Met Gly Asp Phe Asn	Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170	175 ·180
Trp Ser Ser Ile Arg	Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185	190 195
Ile Pro Asp Ser Ala	Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala
200	205 210
Tyr Asp Arg Ile Val	Val Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val
215	220 225
Val Pro Asp Ser Ala	Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly
230	235 240
Leu Ser Asp Gin Leu	Ala Gin Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val

245 250 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:4:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(ii) MOLECULE ΤΥΡΕ: Amino Acid
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:4:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Arg Thr Lys
15 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu
35 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser
80 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala
125 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu
155 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala
200 205 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:5:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:5:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Trp Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 95 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180

Trp

Ser

Ser

_j.e

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Pne

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:6:

(1) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:6:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Tyr Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150

Tyr Leu Asp Gin Glu Lys

Trp

Gly Leu Glu Asp Val Met Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:7:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:7:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Ala Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Sier 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120

Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:8:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:8:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Asp Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90

Ala

Val

Asp ber

Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:9:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:9:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Tyr Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

lle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

lle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

lle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:10:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear . (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:10:

Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 20 25 30

Arg

Tyr

Asp

·. _e

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Abp

Ser

Trp

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:11:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:11:

Leu 1	Lys Ile	. .a	Ala 5	Phe Asn Ile Gin	Thr Phe u./ Glu Thr Lys
10	15
Met	Ser Asn	Ala	Thr	Leu Val Ser Tyr	Ile Val Gin Ile Leu	Ser
			20		25	30
Arg	Tyr Asp	Ile	Ala	Leu Val Gin Glu	Val Arg Asp Ser His	Leu
			35		40	45
Thr	Ala Val	Gly	Lys	Leu Leu Ala Asn	Leu Asn Gin Asp Ala	Pro
			50		55	60
Asp	Thr Tyr	His	Tyr	Val Val Ser Glu	Pro Leu Gly Arg Asn	Ser
			65		70	75
Tyr	Lys Glu	Arg	Tyr	Leu Phe Val Tyr	Arg Pro Asp Gin Val	Ser
			80		85	90
Ala	Val Asp	Ser	Tyr	Tyr Tyr Asp Asp	Gly Cys Glu Pro Cys	Gly
			95		100	105
Asn	Asp Thr	Phe	Asn	Arg Glu Pro Ala	Ile Val Arg Phe Phe	Ser
			110		115	120
Arg	Phe Thr	Glu	Val	Arg Glu Phe Ala	Ile Val Pro Leu His	Ala
			125		130	135
Ala	Pro Gly Asp	Ala	Val Ala Glu Ile	Asp Ala Leu Tyr Asp	Val
			140		145	150
Tyr	Leu Asp	Val	Gin	Glu Lys Trp Gly	Leu Glu Asp Val Met	Leu
			155		160	165
Met	Gly Asp	Phe	Asn	Ala Gly Cys Ser	Tyr Val Arg Pro Ser	Gin
			170		175	180
Trp	Ser Ser	Ile	Arg	Leu Trp Thr Ser	Pro Thr Phe Gin Trp	Leu
			185		190	195
Ile	Pro Asp	Ser	Ala	Asp Thr Thr Ala	Thr Pro Thr His Cys	Ala
			200		205	210
Tyr	Asp Arg	Ile	Val	Val Ala Gly Met	Leu Leu Arg Gly Ala	Val
			215		220	225
Val	Pro Asp	Ser	Ala	Leu Pro Phe Asn	Phe Gin Ala Ala Tyr	Gly
			230		235	240
Leu	Ser Asp	Gin	Leu	Ala Gin Ala Ile	Ser Asp His Tyr Pro	Val
			245		250	255
Glu	Val Met	Leu	Lys
			260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:12:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LE ΓΗ: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGV: Linear (Xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:12:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Lys Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

⁴³

Glu Val Met ju Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:13:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:13:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Arg Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe Gin 235

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser Asp 250

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:14:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:14:

Leu 1

Lys

Ile

Ala

Ala 5

Phe

Asn

Ile

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Tyr

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Tnr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:15:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:15:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
15 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu
35 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Ala Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser
80 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala
125 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140 145 150

Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 155 160 165

Met

Gly Asp

,4e

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

A-g

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:16:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:16:

Leu 1

Lys

Ile

Ala

Ala 5

Phe

Asn

Ile

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Arg 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:17:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid
(D) TOPOLOGY:	Linear
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:17:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala 5	Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr 20	Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala 35	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys 50	Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Trp 65	Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr 80	Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr 95	Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cyš Gly 100 105

Asn

Asp Thr

Phe

Asn Arg 110

Glu

Pro' Ala

lle Val Arg Phe Phe Ser

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

lle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

lle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:18:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEGUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:18:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Ala 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

lle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

lle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

lle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:19:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:19:

Leu 1

Lys

lle

Ala

Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

lle

Val

Gin

lle

Leu

Ser

20

25

30

Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45

Thr Ala Val wly Lys

Leu

Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Glu

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:20:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:20:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 is

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Lys

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 9S

Tyr

Tyr Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys' 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:21:

(i) SEQUENCE CHARACTERIST1CS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:21:
Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn 1 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Lys Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
lle Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg lle Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245 Glu Val Met Leu Lys 260	Ala lle Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:22 (i) SEQUEN^- CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:22:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu	Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:23:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

	(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn	SEQ Ile	ID NO:23:	Thr	Lys
Gin Thr Phe	Gly	Glu
10	1 5		10				15
	Met Ser Asn Ala Thr Leu Val	Ser	Tyr Ile Val	Gin	Ile	Leu	Ser
	20		25				30
	Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val	Gin	Glu Val Arg	Asp	Ser	Ala	Leu
	35		40				45
15	Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu	Arg	Asn Leu Asn	Gin	Asp	Ala	Pro
	50		55				60
	Asp Thr Tyr His Tyr Val Val	Ser	Glu Pro Leu	Gly Arg	Asn	Ser
	65		70				75
	Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe	Val	Tyr Arg Pro	Asp	Gin	Val	Ser
20	80		85				90
	Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr	Asp	Asp Gly Cys	Glu	Pro	Cys	Gly
	95		100				105
	Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu	Pro	Ala Ile Val	Arg	Phe	Phe	Ser
	110		115				120
25	Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu	Phe	Ala Ile Val	Pro	Leu	His	Ala
	125		130				135
	Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala	Glu	Ile Asp Ala	Leu	Tyr Asp	Val
	140		145				150
	Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys	Trp	Gly Leu Glu	Asp	Val	Met	Leu
30	155		160				165
	Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly	Cys	Ser Tyr Val	Arg	Pro	Ser	Gin
	170		175				180
	Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp	Thr	Ser Pro Thr	Phe	Gin	Trp	Leu
	185		190				195
35	Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr	Thr	Ala Thr Pro	Thr	His	Cys	Ala
	200		205				210
	Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala	Gly	Met Leu Leu	Arg	Gly	Ala	Val
	215		220				225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:24:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:24:

Leu 1

Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5

10

15

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile

Val

Gin

Ile

Leu

Ser

20

25

30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala

Leu

Val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Arg

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

20

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Ala

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

25

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

• 110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

30

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

35

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:25:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:25:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Arg Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly	Cys	Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
	170	175	180
Trp	Ser Ser lle Arg Leu Trp 185	Thr	Ser Pro Thr Phe 190	Gin Trp Leu 195
lle	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr	Ala Thr Pro Thr 205	His Cys Ala 210
Tyr	Asp Arg lle Val Val Ala 215	Gly	Met Leu Leu Arg 220	Gly Ala Val 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe	Asn Phe Gin Ala 235	Ala Tyr Gly 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala 245 Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:26:	lle Ser Asp His 250	Tyr Pro val 255

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:26:
Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn 1 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Ala Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Arg Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Ala Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:27:

(i) SEOUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid
(D) TOPOLOGY:	Linear
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:27:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala 5	Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr 20	Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala 35	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Ala Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys 50	Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Ala 65	Val Val Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr 80	Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr 95	Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

Asn Arg

Asp Thr pne

Asn Arg

Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser

110 Val 125

Arg

115

120 His Ala 135

Phe

Thr

Glu

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

S

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

10

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

15

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

20

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:28:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

25	(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear
	(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:28:
30	Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 1 5 10 15
	Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30
	Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Cys Leu 35 40 45
35	Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 50 55 60
	Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140'

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:29:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:29:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Gin Leu 40 45

Thr Ala Val Gly Lys

Leu

Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

.100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

lle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

lle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

lle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:30:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:30:

Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

lle 25

Val

Gin

lle

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

lle

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Cys 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

lle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

lle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

lle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

ASP

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:31:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:31:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Lys 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Zle Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245 Glu Val Met Leu Lys 260 -	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:32:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:32:
Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn 1 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Arg 40 45
« Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 . 195
lle Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg lle Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala lle Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

Glu Val Met Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:33:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

5	(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear
	(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:33:
10	Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15
	Met Ser.Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30
	Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45
15	Thr Ala Cys Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 50 55 60
	Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75
20	Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 80 85 90
	Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 95 100 105
	Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 110 115 120
25	Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 125 130 135
	Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 140 145 150
30	Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 155 160 165
	Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 170 175 180
	Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 185 190 195
35	Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 200 205 210
	Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 215 220 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:34:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:34:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Lys Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 170 175 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 185 190 195

lle

Pro

Asp

Šer

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:35:

(i) SEOUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:35:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Cys Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 60	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:36:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:36:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Ile Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:37s (i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:37:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Lys Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

Asn

Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:38:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid
	(D) TOPOLOGY:	Linear
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:38:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala 5	Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr 20	Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala 35	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Arg Lys 50	Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr 65	Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

Tyr

Lys

Glu

„rg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:39:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEOUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:39:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5 10 ' 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser

25 30

Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu

40 45

Thr

Ala

Val

Tyr

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:40:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:40:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

val

Gly

Lys 50

Leu

Cys

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val'

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro'

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:41:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ	ID NO:41:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile	Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser	Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin	Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Lys 50	Asp	Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser	Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val	Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp	Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro	Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe	Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu	Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lvs 155	Trp	Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys	Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr	Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr	Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly	Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe	Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245 Glu Val Met Leu Lys 260	Ala	Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:42:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:42:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Met 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asii Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu	Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:43:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:43:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Cys Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro S5 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser lle Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
lle	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg lle Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225

Tl

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe Gin 235

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser Asp 250

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:44:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:44:

Leu 1	Lys	lle Ala	Ala 5	Phe	Asn	lle Gin	Thr Phe Gly Glu Thr Lys
10	15
Met	Ser	Asn Ala	Thr	Leu	Val	Ser Tyr	lle Val Gin lle Leu	Ser
			20				25	30
Arg	Tyr	Asp lle	Ala	Leu	Val	Gin Glu	Val Arg Asp Ser His	Leu
			35				40	45
Thr	Ala	Val Gly	Lys	Leu	Leu	Leu Asn	Leu Asn Gin Asp Ala	Pro
			50				55	60
Asp	Thr	Tyr His	Tyr	Val	Val	Ser Glu	Pro Leu Gly Arg Asn	Ser
			65				70	75
Tyr	Lys	Glu Arg	Tyr	Leu	Phe	Val Tyr	Arg Pro Asp Gin Val	Ser
			80				85	90
Ala	Val	Asp Ser	Tyr	Tyr	Tyr	Asp Asp	Gly Cys Glu Pro Cys	Gly
			95				100	105
Asn	Asp	Thr Phe	Asn	Arg	Glu	Pro Ala	lle Val Arg Phe Phe	Ser
			110				115	120
Arg	Phe	Thr Glu	Val	Arg	Glu	Phe Ala	lle Val Pro Leu His	Ala
			125				130	135
Ala	Pro	Gly Asp	Ala	Val	Ala	Glu lle	Asp Ala Leu Tyr Asp	Val
			140				145	150
Tyr	Leu	Asp Val	Gin	Glu	Lys	Trp Gly	Leu Glu Asp Val Met	Leu
			155				160	165
Met	Gly Asp Phe	Asn	Ala	Gly	Cys Ser	Tyr Val Arg Pro Ser	Gin
			170				175	180
Trp	Ser	Ser lle	Arg	Leu	Trp	Thr Ser	Pro Thr Phe Gin Trp	Leu
			185				190	195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:45:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:45:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Met Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:46:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:46:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Cys Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp, Gly Cys Glu Pro Cys Gly 95 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

160

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:47:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:47:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Phe Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

Asn

Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala lle Val Arg Phe

Phe Ser 120

110

115

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

lle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

lle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

-

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:48:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amir.o (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:48:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Lys Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 60

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:49:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:49:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 1 5 10 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30

Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45

Thr

Ala

Val

Giy Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Arg

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly Cys 100

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

• Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:50:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:50:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 1 5 10 15

8Η

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala

Leu

val

Gin

Glu

Val

Arg

Asp

Ser

His

Leu

35

40

45

S

Thr

Ala

Val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Trp

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

10

60

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

15

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

20

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

25

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

30

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:51:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(Xi) SEOUENCE DESCRIPTION: SEQ	ID NO:51:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile 1 5	Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser 20	Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin 35	Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp 50	Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Cys Val Val Ser 65	Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val 80	Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp 95	Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro 110	Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe 125	Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu 140	Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp 155	Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys 170	Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr 185	Ser Pro Thr Phe Gin trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala.Asp Thr Thr 200	Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala Gly 215	Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe 230	Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala 245 Glu Val Met Leu Lys 260	Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:52:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:52:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Lys Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe eo	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 ’ 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu	Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:53:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:53:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Met Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe Gin 235

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser Asp 250

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:54:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:54:

Leu 1	Lys lle Ala	Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
5	10	15
Met	Ser Asn Ala	Thr Leu Val Ser	Tyr lle	Val Gin lle Leu Ser
		20	25	30
Arg	Tyr Asp lle	Ala Leu Val Gin	Glu Val	Arg Asp Ser His Leu
		35	40	45
Thr	Ala Val Gly	Lys Leu Leu Asp	Asn Leu	Asn Gin Asp Ala Pro
		50	55	60
Asp	Thr Tyr His	Ser Val Val Ser	Glu Pro	Leu Gly Arg Asn Ser
		65	70	75
Tyr	Lys Glu Arg	Tyr Leu Phe Val	Tyr Arg	Pro Asp Gin Val Ser
		80	85	90
Ala	Val Asp Ser	Tyr Tyr Tyr Asp	Asp Gly	Cys Glu Pro Cys Gly
		95	100	105
Asn	Asp Thr Phe	Asn Arg Glu Pro	Ala lle	Val Arg Phe Phe Ser
		110	115	120
Arg	Phe Thr Glu	Val Arg Glu Phe	Ala lle	Val Pro Leu His Ala
		125	130	135
Ala	Pro Gly Asp	Ala Val Ala Glu	lle Asp	Ala Leu Tyr Asp Val
		140	145	150
Tyr	Leu Asp Val	Gin Glu Lys Trp	Gly Leu	Glu Asp Val Met Leu
		155	160	165
Met	Gly Asp Phe	Asn Ala Gly Cys	Ser Tyr	Val Arg Pro Ser Gin
		170	175	180
Trp	Ser Ser lle	Arg Leu Trp Thr	Ser Pro	Thr Phe Gin Trp Leu
		185	190	195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:55:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:55:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu
35 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Cys Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser
80 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Zle Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala
125 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu
155 160 165

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:56:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(Xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:56:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Asp 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135

Ala Pro Gly Asp Ala Val

91

Ile Asp Ala 145

Leu Tyr

Asp

Val 150

Ala

Glu

140

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:57:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:57:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val His 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

Asn Asp Thr Phe Asn

Arg Glu Pro Ala

lle Val Arg Phe Phe Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

lle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

lle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

•

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:58:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:58:
Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn 1 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Met 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

lle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

lle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

lle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:59:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:59:

Leu 1

Lys

lle

Ala

Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys

5

10

15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr

Leu

Val

Ser

Tyr

lle

Val

Gin

lle

Leu

Ser

20

25

30

Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45

Thr Ala Asp Thr

Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro

Tyr His

50 Tyr Val 65

Pro Ser

Glu

55

60 Arg Asn Ser 75

Pro 70

Leu

Gly

5

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

10

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

15

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

20

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

25

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

•

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

30

260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:60:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:60:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met Ser Asn Ax'a Thr	Leu Val Ser	Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
	20	25	30
Arg	Tyr Asp Ile Ala	Leu Val Gin	Glu Val Arg	Asp Ser His Leu
	35		40	45
Thr	Ala Val Gly Lys	Leu Leu Asp	Asn Leu Asn	Gin Asp Ala Pro
	50		55	60
Asp	Thr Tyr His Tyr	Val Arg Ser	Glu Pro Leu	Gly Arg Asn Ser
	65		70	75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr	Leu Phe Val	Tyr Arg Pro	Asp Gin Val Ser
	80		85	90
Ala	Val Asp Ser Tyr	Tyr Tyr Asp	Asp Gly Cys	Glu Pro Cys Gly
	95		100	105
Asn	Asp Thr Phe Asn	Arg Glu Pro	Ala Ile Val	Arg Phe Phe Ser
	110		115	120
Arg	Phe Thr Glu Val	Arg Glu Phe	Ala Ile Val	Pro Leu His Ala
	125		130	135
Ala	Pro Gly Asp Ala	Val Ala Glu	Ile Asp Ala	Leu Tyr Asp Val
	140		145	150
Tyr	Leu Asp Val Gin	Glu Lys Trp	Gly Leu Glu	Asp Val Met Leu
	155		160	165
Met	Gly Asp Phe Asn	Ala Gly Cys	Ser Tyr Val	Arg Pro Ser Gin
	170		175	180
Trp	Ser Ser Ile Arg	Leu Trp Thr	Ser Pro Thr	Phe Gin Trp Leu
	185		190	195
Ile	Pro Asp Ser Ala	Asp Thr Thr	Ala Thr Pro	Thr His Cys Ala
	200		205	210
Tyr	Asp Arg Ile Val	Val Ala Gly	Met Leu Leu	Arg Gly Ala Val
	215		220	225
Val	Pro Asp Ser Ala	Leu Pro Phe	Asn Phe Gin	Ala Ala Tyr Gly
	230		235	240
Leu	Ser Asp Gin Leu	Ala Gin Ala	Ile Ser Asp	His Tyr Pro Val
	245		250	255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:61:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(xi) SEQUkrtCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:61:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Ser 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245 Glu Val Met Leu Lys 260	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:€2 (i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEOUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:62:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Lys Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser lle Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
lle	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Ašp Arg lle Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu	Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala lle Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:63:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:63:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Met Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 230 235 240

Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 245 250 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:64:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:64:

Leu 1

Lys

Ile

Ala

Ala 5

Phe

Asn

Ile

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Arg

Glu

Pro 70

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

T}T

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro Asp Ser

100

Thr His Cys

Ala 210

Ala 200

Asp Thr Thr

Ala

Thr 205

Pro

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser'

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:65:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS: (A) LENGTH: 260 amino acids

(B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:

SEQ

ID NO:65:

Leu 1

Lys

Ile Ala

Ala 5

Phe

Asn

ile

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Ala

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

101

Met Gly Asp Phe Asn Ala

Gly Cys

Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:66:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:66:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Cys Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 95 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135

102

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

150

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:67:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:67:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Met Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

103

Asn

Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe

Phe Ser 120

110

115

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:68:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi> SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:68:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 ' 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

104

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 60

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Cys

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:69:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:69:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 1 5 10 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30

Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45

105

Thr

Ala

val

Gly

Lys

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro

50

55

60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly

Arg

Asn

Ser

65

70

75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Glu

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:70:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D, TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:70:

Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

106

Met Ser Asn Ala

Arg Tyr Asp Ile .5 Thr Ala Val Gly

Asp Thr Tyr His

Tyr Lys Glu Arg

Ala Val Asp Ser

Asn Asp Thr Phe

Arg Phe Thr Glu

Ala Pro Gly Asp

Tyr Leu Asp Val

Met Gly Asp Phe

Trp Ser Ser Ile

Ile Pro Asp Ser

Tyr Asp Arg Ile

Val Pro Asp Ser 30

Leu Ser Asp Gin

Glu Val Met Leu

Thr Leu Val Ser Tyr Ile
20	25
Ala	Leu	Val	Gin	Glu	Val
35					40
Lys	Leu	Leu	Asp	Asn	Leu
50					55
Tyr	Val	Val	Ser	Glu	Pro
65					70
Tyr	Leu	Phe	Val	Tyr	Arg
80					85
Tyr	Tyr	Tyr	Asp	Asp	Gly
95					100
Asn	Arg	Glu	Pro	Gly	Ile
110					115
Val	Arg	Glu	Phe	Ala	Ile
125					130
Ala	Val	Ala	Glu	Ile	Asp
140					145
Gin	Glu	Lys	Trp	Gly	Leu
155					160
Asn	Ala	Gly	Cys	Ser	Tyr
170.					175
Arg	Leu	Trp	Thr	Ser	Pro
185					190
Ala	Asp	Thr	Thr	Ala	Thr
200					205
Val	Val	Ala	Gly	Met	Leu
215					220
Ala	Leu	Pro	Phe	Asn	Phe
230					235
Leu	Ala	Gin	Ala	Ile	Ser
245					250
Lys
260

Val Gin Ile Leu Ser 30

Arg Asp Ser His Leu 45

Asn Gin Asp Ala Pro 60

Leu Gly Arg Asn Ser 75

Pro Asp Gin Val Ser 90

Cys Glu Pro Cys Gly 105

Val Arg Phe Phe Ser 120

Val Pro Leu His Ala 135

Ala Leu Tyr Asp Val 150

Glu Asp Val Met Leu 165

Val Arg Pro Ser Gin 180

Thr Phe Gin Trp Leu 195

Pro Thr His Cys Ala 210

Leu Arg Gly Ala Val 225

Gin Ala Ala Tyr Gly 240

Asp His Tyr Pro Val 255 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:71:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

107 (xi) SEQUENuE DESCRIPTION: SEQ ID NO:71:

Leu Lys Ile Ala Ala	Phe Asn	Ile	Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1	5	10	15
Met Ser	Asn Ala Thr 20	Leu Val	Ser	Tyr Ile 25	Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr	Asp Ile Ala 35	Leu Val	Gin	Glu Val 40	Arg Asp Ser His Leu 45
Thr Ala	Val Gly Lys 50	Leu Leu	Asp	Asn Leu 55	Asn Gin Asp Ala Pro 60
Asp Thr	Tyr His Tyr 65	Val Val	Ser	Glu Pro 70	Leu Gly Arg Asn Ser 75
Tyr Lys	Glu Arg Tyr 80	Leu Phe	Val	Tyr Arg 85	Pro Asp Gin Val Ser 90
Ala Val	Asp Ser Tyr 95	Tyr Tyr	Asp	Asp Gly 100	Cys Glu Pro Cys Gly 105
Asn Asp	Thr Phe Asn 110	Arg Glu	Pro	His Ile 115	Val Arg Phe Phe Ser 120
Arg Phe	Thr Glu Val 125	Arg Glu	Phe	Ala Ile 130	Val Pro Leu His Ala 135
Ala Pro	Gly Asp Ala 140	Val Ala	Glu	Ile Asp 145	Ala Leu Tyr Asp Val 150
Tyr Leu	Asp Val Gin 155	Glu Lys	Trp	Gly Leu 160	Glu Asp Val Met Leu 165
Met Gly Asp Phe Asn 170	Ala Gly	Cys	Ser Tyr 175	Val Arg Pro Ser Gin 180
Trp Ser	Ser Ile Arg 185	Leu Trp	Thr	Ser Pro 190	Thr Phe Gin Trp Leu 195
Ile Pro	Asp Ser Ala 200	Asp Thr	Thr	Ala Thr 205	Pro Thr His Cys Ala 210
Tyr Asp	Arg Ile Val 215	Val Ala	Gly	Met Leu 220	Leu Arg Gly Ala Val 225
Val Pro	Asp Ser Ala 230	Leu Pro	Phe	Asn Phe 235	Gin Ala Ala Tyr Gly 240
Leu Ser	Asp Gin Leu 245	Ala Gin	Ala	Ile Ser 250	Asp His Tyr Pro Val 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:72

108 (i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:72:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Lys Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu	Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245	Ala ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

109

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:73:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:73:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Leu lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu·Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser' Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser lle Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
lle	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg lle Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225

110

Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly
	230	235	240
Leu Ser	Asp Gin Leu Ala Gin Ala lle	Ser Asp His Tyr Pro	Val
	245	250	255
Glu Val	Met Leu Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:74:

(i) SEOUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEOUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:74:
Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn 1 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe so	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Met lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp 1B5	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195

111

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:75:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids

(B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:

SEQ

ID NO:75:

Leu 1

Lys

Ile Ala

Ala 5

Phe

Asn

Ile

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Gin

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

112

Met GlyAsp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:76:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:76:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Arg lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135

113

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

ISO

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

Kis

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:77:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SE0UENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:77:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 95 100 105

114

Asn

Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Trp Ile Val Arg Phe

Phe Ser 120

110

115

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:78:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:78:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

115

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Tyr

Ile

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:79:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:79:
Leu 1	Lys Zle Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Asn Leu 40 45

116

Thr Ala Val Gly Lys	Leu	Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro
	50	55	60
Asp Thr Tyr	His Tyr	Val	Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn	Ser
	65		70	75
Tyr Lys Glu	Arg Tyr	Leu	Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val	Ser
	80		85	90
Ala Val Asp	Ser Tyr	Tyr	Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys	Gly
	95		100	105
Asn Asp Thr	Phe Asn	Arg	Glu Pro Ala lle Val Arg Phe Phe	Ser
	110		115	120
Arg Phe Thr	Glu Val	Arg	Glu Phe Ala lle Val Pro Leu His	Ala
	125		130	135
Ala Pro Gly Asp Ala	Val	Ala Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp	Val
	140		145	150
Tyr Leu Asp	Val Gin	Glu	Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met	Leu
	155		160	165
Met Gly Asp	Phe Asn	Ala	Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser	Gin
	170		175	180
Trp Ser Ser	lle Arg	Leu	Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp	Leu
	185		190	195
lle Pro Asp	Ser Ala	Asp	Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys	Ala
	200		205 ’	210
Tyr Asp Arg	lle Val	Val	Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala	Val
	215		220	225
Val Pro Asp	Ser Ala	Leu	Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr	Gly
	230		235	240
Leu Ser Asp	Gin Leu	Ala	Gin Ala lle Ser Asp His Tyr Pro	Val
	245		250	255
Glu Val Met	Leu Lys
	260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:80:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEOUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:80:

Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn lle'Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

117

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Thr

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:81:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

118 (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:81:

Leu 1

Lys

lle

Ala

Ala 5

Phe

Asn

lle

Gin

Thr 10

Phe

Gly

Glu

Thr

Lys 15

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

lle 25

Val

Gin

lle

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

lle

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

Asn

Tyr 65

Thr

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

lle 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

lle 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

lle

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Ar9

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:82:

119 (i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

(xi) SEOUENCE DESCRIPTION: SEQ	ID NO:82:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile 1 5	Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser 20	Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin 35	Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp 50	Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Asn Val Thr Ser 65	Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val 80	Tyr Arg Pro Asp Gin val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp 95	Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro 110	Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe 125	Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala Glu 140	Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp 155	Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys 170	Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr 185	Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr Thr 200	Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala Gly 215	Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro Phe 230	Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Ala 245	Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

120

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:83:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:83:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Asn Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 22S

121

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe Gin 235

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

lle

Ser Asp 250

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:84:

(i) SEQOENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:84:

	Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
5	10	15
15	Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser 20	Tyr lle Val 25	Gin lle Leu Ser 30
	Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val Gin 35	Glu Val Arg 40	Asp Ser His Leu 45
20	Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu Asp 50	Asn Leu Asn 55	Gin Asp Ala Pro 60
	Asp	Thr Tyr His Tyr Val Asn Ser 65	Thr Pro Leu 70	Gly Arg Asn Ser 75
	Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe Val 80	Tyr Arg Pro 85	Asp Gin Val Ser 90
25	Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp 95	Asp Gly Cys 100	Glu Pro Cys Gly 105
	Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro 110	Ala lle Val 115	Arg Phe Phe Ser 120
30	Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe 125	Ala Zle Val 130	Pro Leu His Ala 135
	Ala	Pro Gly Asp Ala val Ala Glu 140	lle Asp Ala 145	Leu Tyr Asp Val 150
	Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp 155	Gly Leu Glu 160	Asp Val Met Leu 165
35	Met	Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys 170	Ser Tyr Val 175	Arg Pro Ser Gin 180
	Trp	Ser Ser lle Arg Leu Trp Thr 185	Ser Pro Thr 190	Phe Gin Trp Leu 195

122

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys 10 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:85:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B, ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:85:

	Leu 1	Lys	Ile Ala	Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
5	• 10	15
	Met	Ser	Asn Ala	Thr Leu Val	Ser Tyr Ile	Val Gin Ile Leu Ser
20				20	25	30
	Arg	Tyr	Asp Ile	Ala Leu Val	Gin Glu Val	Arg Asp Ser His Leu
				35	40	45
	Thr	Ala	Val Gly	Lys Leu Leu	Asp Asn Leu	Asn Gin Asp Ala Pro
				50	55	60
25	Asp	Thr	Tyr His	Tyr Val Val	Ser Glu Pro	Leu Gly Arg Asn Ser
				65	70	75
	Tyr	Lys	Glu Arg	Tyr Leu Phe	Val Tyr Arg	Pro Asp Gin Val Ser
				80	85	90
	Ala	Val	Asp Asn	Tyr Thr Tyr	Asp Asp Gly	Cys Glu Pro Cys Gly
30				95	100	105
	Asn	Asp	Thr Phe	Asn Arg Glu	Pro Ala Ile	Val Arg Phe Phe Ser
				110	115	120
	Arg	Phe	Thr Glu	Val Arg Glu	Phe Ala Ile	Val Pro Leu His Ala
				125	130	135
35	Ala	Pro	Gly Asp	Ala Val Ala	Glu Ile Asp	Ala Leu Tyr Asp Val
				140	145	150
	Tyr	Leu	Asp Val	Gin Glu Lys	Trp Gly Leu	Glu Asp Val Met Leu
				155	160	165

123

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:86:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:86:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser Glu Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135

124

Ala

Pro

Gly Asp

Ala Val Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val

140

145

ISO

Tyr

Leu Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:87:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:87:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Glu Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

125

Asn

Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe

Phe Ser 120

110

115

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

Ile

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly

Asp

Phe

Asn

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

185

190

195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

•

225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:88:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid
	(D) TOPOLOGY:	Linear
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:88:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala 5	Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr 20	Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala 35	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Ala Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys 50	Leu Leu Arg Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Ala 65	Val Val Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

126

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr 80

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:89:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:89:

Leu Lys ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

Met Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30

Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45

127

Thr

Ala

Arg

Gly

Lys 50

Leu

Leu

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr

Val

Val

Ser

Glu

Pro

Leu

Gly Arg

Asn

Ser

65

70

75

S

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg

Pro

Asp

Gin

Val

Ser

80

85

90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr

Tyr

Tyr

Asp Asp

Gly

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly

95

100

105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn

Arg

Glu

Pro

Ala

lle

Val

Arg

Phe

Phe

Ser

10

110

115

120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val

Arg

Glu

Phe

Ala

lle

Val

Pro

Leu

His

Ala

125

130

135

Ala

Pro

Gly Asp

Ala

Val

Ala

Glu

lle

Asp

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val

140

145

150

15

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu

Glu

Asp

Val

Met

Leu

155

160

165

Met

Gly Asp

Phe

Asn

Ala

Gly Cys

Ser

Tyr

Val

Arg

Pro

Ser

Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

lle

Arg

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu

20

185

190

195

lle

Pro

Asp

Ser

Ala

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr

Pro

Thr

His

Cys

Ala

200

205

210

Tyr

Asp

Arg

lle

Val

Val

Ala

Gly

Met

Leu

Leu

Arg

Gly

Ala

Val

215

220

225

25

Val

Pro

Asp

Ser

Ala

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly

230

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

lle

Ser

Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu

val

Met

Leu

Lys

30

260

(2) .INFORMATION FOR SEQ ID NO:90:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:90:

Leu Lys lle Ala Ala Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15

128

Met

Ser

Asn

Ala

Thr 20

Leu

Val

Ser

Tyr

Ile 25

Val

Gin

Ile

Leu

Ser 30

Arg

Tyr

Asp

Ile

Ala 35

Leu

Val

Gin

Glu

Val 40

Arg

Asp

Ser

His

Leu 45

Thr

Ala

Val

Gly

Lys 50

Leu

Asn

Asp

Asn

Leu 55

Asn

Gin

Asp

Ala

Pro 60

Asp

Thr

Tyr

His

Tyr 65

Val

Val

Ser

Glu

Pro 70

Leu

Gly Arg

Asn

Ser 75

Tyr

Lys

Glu

Arg

Tyr BO

Leu

Phe

Val

Tyr

Arg 85

Pro

Asp

Gin

Val

Ser 90

Ala

Val

Asp

Ser

Tyr 95

Tyr

Tyr

Asp

Asp

Gly 100

Cys

Glu

Pro

Cys

Gly 105

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

Ala

Pro

Gly

Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:91:

(i) SEOUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

129

(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:91:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Arg 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165
Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val Pro Asp Ser Ala Leu Pro 230	Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin 245 Glu Val Met Leu Lys 260	Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

(2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:92

130 (i) SEOUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid
(D) TOPOLOGY:	Linear
(xi) SEOUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:92:
Leu 1	Lys lle Ala Ala 5	Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr 20	Leu Val Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala 35	Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys 50	Leu Leu Asp Asn Leu Cys Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr 65	Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr 80	Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr 95	Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn 110	Arg Glu Pro Ala lle Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val 125	Arg Glu Phe Ala lle Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala 140	Val Ala Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin 155	Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160. 165
Met	Gly Asp Phe Asn 170	Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin 175 180
Trp	Ser Ser lle Arg 185	Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu 190 195
lle	Pro Asp Ser Ala 200	Asp Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys Ala 205 210
Tyr	Asp Arg lle Val 215	Val Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala Val 220 225
Val	Pro Asp Ser Ala 230	Leu Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly 235 240
Leu	Ser Asp Gin Leu 245	Ala Gin Ala lle Ser Asp His Tyr Pro Val 250 255

131

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:93:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear

	(xi) SEQUENCE DESCRIPTION: Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn	SEQ Ile	ID NO:93:
Gin Thr Phe	Gly	Glu Thr Lys
10	1 5		10		15
	Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser	Tyr Ile Val 25	Gin	Ile Leu Ser 30
	Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin	Glu Val Arg 40	Asp	Ser His Leu 45
15	Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp	Asn Leu Phe 55	Gin	Asp Ala Pro 60
	Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser	Glu Pro Leu 70	Gly	Arg Asn Ser 75
20	Tyr Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val	Tyr Arg Pro 85	Asp	Gin Val Ser 90
	Ala Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp	Asp Gly Cys 100	Glu	Pro Cys Gly 105
	Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro	Ala Ile Val 115	Arg	Phe Phe Ser 120
25	Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe	Ala Ile Val 130	Pro	Leu His Ala 135
	Ala Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu	Ile Asp Ala 145	Leu	Tyr Asp Val 150
30	Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp	Gly Leu Glu 160	Asp	Val Met Leu 165
	Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly 170	Cys	Ser Tyr Val 175	Arg	Pro Ser Gin 180
	Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp 185	Thr	Ser Pro Thr 190	Phe	Gin Trp Leu 195
35	Ile Pro Asp Ser Ala Asp Thr 200	Thr	Ala Thr Pro 205	Thr	His Cys Ala 210
	Tyr Asp Arg Ile Val Val Ala 215	Gly	Met Leu Leu 220	Arg	Gly Ala Val 225

132

Val

Pro Asp Ser Ala 230

Leu

Pro Phe

Asn Phe Gin Ala Ala Tyr Gly

235

240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser Asp

His

Tyr

Pro

Val

245

250

255

Glu Val Met Leu Lys 260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:94:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino acids (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION: SEQ ID NO:94:

Leu 1	Lys Ile Ala	Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
5	10	15
Met	Ser Asn Ala	Thr Leu Val Ser	Tyr Ile	Val Gin ile Leu Ser
		20	25	30
Arg	Tyr Asp Ile	Ala Leu Val Gin	Glu Val	Arg Asp Ser His Leu
		35	40	45
Thr	Ala Val Gly	Lys Leu Leu Asp	Asn Leu	Lys Gin Asp Ala Pro
		50	55	60
Asp	Thr Tyr His	Tyr Val Val Ser	Glu Pro	Leu Gly Arg Asn Ser
		65	70	75
Tyr	Lys Glu Arg	Tyr Leu Phe Val	Tyr Arg	Pro Asp Gin Val Ser
		80	85	90
Ala	Val Asp Ser	Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly	Cys Glu Pro Cys Gly
		95	100	105
Asn	Asp Thr Phe	Asn Arg Glu Pro	Ala Ile	Val Arg Phe Phe Ser
		110	115	120
Arg	Phe Thr Glu	Val Arg Glu Phe	Ala Ile	Val Pro Leu His Ala
		125	130	135
Ala	Pro Gly Asp	Ala Val Ala Glu	Ile Asp	Ala Leu Tyr Asp Val
		140	145	150
Tyr	Leu Asp Val	Gin Glu Lys Trp	Gly Leu	Glu Asp Val Met Leu
		155	160	165
Met	Gly Asp Phe	Asn Ala Gly Cys	Ser Tyr	Val Arg Pro Ser Gin
		170	175	180
Trp	Ser Ser Ile	Arg Leu Trp Thr	Ser Pro	Thr Phe Gin Trp Leu
		185	190	195

133

Ile

Pro

Asp Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:95:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:95:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Zle Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Arg Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val Ala 140	Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp Val 145 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu Lys 155	Trp Gly Leu Glu Asp Val Met Leu 160 165

134

Met Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin

170

175

180

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Ile

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

Glu

Val

Met

Leu

Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:96:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(Xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:96:
Leu 1	Lys Ile Ala Ala Phe Asn 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Trp Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105
Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu 110	Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe Ser 115 120
Arg	Phe Thr Glu Val Arg Glu 125	Phe Ala Ile Val Pro Leu His Ala 130 135

135

Ala	Pro	Gly Asp	Ala Val Ala Glu lle Asp Ala Leu Tyr Asp Val
140	145	150
Tyr	Leu	Asp Val	Gin Glu Lys Trp	Gly Leu Glu Asp Val	Met Leu
			155	160	165
Met	Gly	Asp Phe	Asn Ala Gly Cys	Ser Tyr Val Arg Pro	Ser Gin
			170	175	180
Trp	Ser	Ser lle	Arg Leu Trp Thr	Ser Pro Thr Phe Gin	Trp Leu
			185	190	195
lle	Pro	Asp Ser	Ala Asp Thr Thr	Ala Thr Pro Thr His	Cys Ala
			200	205	210
Tyr	Asp	Arg lle	Val Val Ala Gly	Met Leu Leu Arg Gly	Ala Val
			215	220	225
Val	Pro	Asp Ser	Ala Leu Pro Phe	Asn Phe Gin Ala Ala	Tyr Gly
			230	235	240
Leu	Ser	Asp Gin	Leu Ala Gin Ala	lle Ser Asp His Tyr	Pro Val
			245	250	255
Glu	Val	Met Leu	Lys

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:97:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

	(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear	acids
(xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	SEQ ID NO:97:
Leu 1	Lys lle Ala Ala Phe Asn 5	lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met	Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser 25 30
Arg	Tyr Asp lle Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr	Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp	Thr Tyr His Pro Val Val 65	Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 70 75
Tyr	Lys Glu Arg Tyr Leu Phe 80	Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser 85 90
Ala	Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr 95	Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly 100 105

136

Asn	Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ala Ile Val Arg Phe Phe	Ser 120
110 ·	115
Arg	Phe Thr Glu Val Arg 125	Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu His 130	Ala 135
Ala	Pro Gly Asp Ala Val 140	Ala Glu Ile Asp Ala Leu Tyr Asp 145	Val 150
Tyr	Leu Asp Val Gin Glu .155	Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Met 160	Leu 165
Met	Gly Asp Phe Asn Ala 170	Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser 175 .	Gin 180
Trp	Ser Ser Ile Arg Leu 185	Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp 190	Leu 195
Ile	Pro Asp Ser Ala Asp 200	Thr Thr Ala Thr Pro Thr His Cys 205	Ala 210
Tyr	Asp Arg Ile Val Val 215	Ala Gly Met Leu Leu Arg Gly Ala 220	Val 225
Val	Pro Asp Ser Ala Leu 230	Pro Phe Asn Phe Gin Ala Ala Tyr 235	Gly 240
Leu Glu	Ser Asp Gin Leu Ala 245 Val Met Leu Lys	Gin Ala Ile Ser Asp His Tyr Pro 250	Val 255

260 (2) INFORMATION FOR SEQ ID NO:98:

(i) SEQUENCE CHARACTERISTICS:

(A) LENGTH: 260 amino (B) ΤΥΡΕ: Amino Acid (D) TOPOLOGY: Linear (xi) SEQUENCE DESCRIPTION:	acids SEQ ID NO:98:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn 1 5	Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 10 15
Met Ser Asn Ala Thr Leu Val 20	Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val 35	Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu 50	Asp Asn Leu Asn Gin Asp Ala Pro 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65	Asn Glu Thr Leu Gly Arg Asn Ser 70 75

137

Tyr Lys Ala Val

Glu Arg Tyr Leu Phe Val Tyr Arg Pro Asp Gin Val Ser

Asp Ser

80 Tyr Tyr 95

Tyr Asp

Asp

85

Cys

90 Gly 105

Gly 100

Cys

Glu

Pro

5

Asn

Asp

Thr

Phe

Asn 110

Arg

Glu

Pro

Ala

Ile 115

Val

Arg

Phe

Phe

Ser 120

Arg

Phe

Thr

Glu

Val 125

Arg

Glu

Phe

Ala

Ile 130

Val

Pro

Leu

His

Ala 135

10

Ala

Pro

Gly Asp

Ala 140

Val

Ala

Glu

Ile

Asp 145

Ala

Leu

Tyr

Asp

Val 150

Tyr

Leu

Asp

Val

Gin 155

Glu

Lys

Trp

Gly

Leu 160

Glu

Asp

Val

Met

Leu 165

Met

Gly Asp

Phe

Asn 170

Ala

Gly

Cys

Ser

Tyr 175

Val

Arg

Pro

Ser

Gin 180

15

Trp

Ser

Ser

Ile

Arg 185

Leu

Trp

Thr

Ser

Pro 190

Thr

Phe

Gin

Trp

Leu 195

Zle

Pro

Asp

Ser

Ala 200

Asp

Thr

Thr

Ala

Thr 205

Pro

Thr

His

Cys

Ala 210

20

Tyr

Asp

Arg

Ile

Val 215

Val

Ala

Gly

Met

Leu 220

Leu

Arg

Gly

Ala

Val 225

Val

Pro

Asp

Ser

Ala 230

Leu

Pro

Phe

Asn

Phe 235

Gin

Ala

Ala

Tyr

Gly 240

Leu

Ser

Asp

Gin

Leu 245

Ala

Gin

Ala

Ile

Ser 250

Asp

His

Tyr

Pro

Val 255

25

Glu

Val

Met

Leu

Lys 260

Za

Claims (22)

1. PATENTNI ZAHTEVKI

   1. Proti aktinu odporna varianta humane DNaze I.
2. 2. Varianta po zahtevku 1, označena s tem, da ima vezivno afiniteto za aktin, ki je vsaj 5-krat manjša od tiste, ki jo ima nativna humana DNaza I.
3. 3. Varianta po zahtevku 1, označena s tem, da ima vezivno afiniteto za aktin, ki je vsaj 100-krat manjša od tiste, ki jo ima nativna humana DNaza I.
4. 4. Varianta po zahtevku 1, označena s tem, da obsega aminokislinsko sekvenco, ki ima vsaj 90 %-no identičnost z aminokislinsko sekvenco nativne humane DNaze I, prikazane na sliki 1.
5. 5. Varianta po zahtevku 1, označena s tem, da obsega aminokislinsko sekvenco, ki ima vsaj 95 %-no identičnost z aminokislinsko sekvenco nativne humane DNaze I, prikazane na sliki 1.
6. 6. Proti aktinu odporna varianta humane DNaze I, označena s tem, da ima aminokislinsko sekvenco, ki se razlikuje od aminokislinske sekvence, prikazane na sliki 1, v substituciji ene amino kisline z drugo aminokislino pri le enem položaju znotraj sekvence s slike 1.
7. 7. Varianta po zahtevku 6, označena s tem, da aminokislinska substitucija ustvari znotraj variante glikozilacijsko mesto, ki ni prisotno v nativni humani DNaze I.
8. 8. Varianta po zahtevku 6, označena s tem, daje aminokislinska substitucija pri enem od naslednjih položajev znotraj sekvence s slike i: His44, Leu45, Val48, Gly49, Leu52, Asp53, Asn56, His64, Tyr65, Val66, Val67, Ser68, Glu69 ali Alall4.
9. 9. Proti aktinu odporna varianta humane DNaze I, označena s tem, da ima aminokislinsko sekvenco, ki se razlikuje od aminokislinske sekvence, prikazane na sliki 1, v substituciji ene aminokisline z drugo pri dveh ali večih položajih znotraj sekvence s slike 1.

   139
10. 10. Varianta po zahtevku 9, označena s tem, da je vsaj ena od aminokislinskih substitucij izvedena pri enem od naslednjih položajev znotraj sekvence s slike 1: His44, Leu45, Val48, Gly49, Leu52, Asp53, Asn56, His64, Tyr65, Val66, Val67, Ser68, Glu69, Ser94, Tyr96 ali Alall4.
11. 11. Varianta po zahtevku 9, označena s tem, da vsaj ena od aminokislinskih substitucij ustvari znotraj variante glikozilacijsko mesto, ki ni prisotno v nativni humani DNazil.
12. 12. Izolirana nukleinska kislina, označena s tem, da kodira proti aktinu odporno varianto humane DNaze I.
13. 13. Nukleinska kislina po zahtevku 12, označena s tem, da obsega nukleinsko sekvenco, ki kodira aminokislinsko sekvenco, ki ima vsaj 90 %-no identičnost z aminokislinsko sekvenco nativne humane DNaze I, prikazane na sliki 1.
14. 14. Nukleinska kislina po zahtevku 12, označena s tem, da obsega nukleinsko sekvenco, ki kodira aminokislinsko sekvenco, ki ima vsaj 95 %-no identičnost z aminokislinsko sekvenco nativne humane DNaze, prikazane na sliki 1.
15. 15. Nukleinska kislina po zahtevku 12, označena s tem, da obsega nukleotidno sekvenco, ki kodira aminokislinsko sekvenco, ki se razlikuje od aminokislinske sekvence, prikazane na sliki 1, v substituciji ene aminokisline za drugo pri le enem položaju znotraj sekvence s slike 1.
16. 16. Nukleinska kislina po zahtevku 12, označena s tem, da obsega nukleotidno sekvenco, ki kodira aminokislinsko sekvenco, ki se razlikuje od aminokislinske sekvence, prikazane na sliki 1, v substituciji ene aminokisline z drugo pri le dveh položajih znotraj sekvence s slike 1.
17. 17. Uporaba proti aktinu odporne variante humane DNaze I za pripravo zdravila za pljučno bolezen ali motnjo.
18. 18. Uporaba po zahtevku 17, označena s tem, da je bolezen ali motnja cistična fibroza.

    140
19. 19. Uporaba po zahtevku 17, označena s tem, da je bolezen ali motnja kronični bronhitis.
20. 20. Farmacevtski sestavek, označen s tem, da obsega proti aktinu odporno varianto humane DNaze I in po želji farmacevtsko sprejemljiv eksdpient.
21. 21. Sestavek po zahtevku 20, označen s tem, daje v tekoči obliki.
22. 22. Sestavek po zahtevku 21, označen s tem, daje v obliki prahu.