HU222665B1 - Humán DNáz I variánsok - Google Patents

Humán DNáz I variánsok Download PDF

Info

Publication number
HU222665B1
HU222665B1 HU9702147A HUP9702147A HU222665B1 HU 222665 B1 HU222665 B1 HU 222665B1 HU 9702147 A HU9702147 A HU 9702147A HU P9702147 A HUP9702147 A HU P9702147A HU 222665 B1 HU222665 B1 HU 222665B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
leu
actin
ser
dnase
tyr
Prior art date
Application number
HU9702147A
Other languages
English (en)
Inventor
Robert A. Lazarus
Steven Shak
Jana S. Ulmer
Original Assignee
Genentech, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/US1995/002366 external-priority patent/WO1996026278A1/en
Application filed by Genentech, Inc. filed Critical Genentech, Inc.
Publication of HUP9702147A2 publication Critical patent/HUP9702147A2/hu
Publication of HUP9702147A3 publication Critical patent/HUP9702147A3/hu
Publication of HU222665B1 publication Critical patent/HU222665B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

A találmány a humán dezoxiribonukleáz-I (DNáz-I) aktinnal szembencsökkentett kötési affinitású aminosavszek- vencia-variánsairavonatkozik. A találmány magában foglalja az aktinrezisztensvariánsokat kódoló nukleinsavszekvenciákat is. A találmánnyalkapcsolatban a leírás ismerteti a variánsok klinikai felhasználásraalkalmas mennyiségeinek előállítási eljárásait, és a humán DNáz-Iaktinrezisztens variánsait tartalmazó gyógyszerkészítmények, valaminta va- riánsok és gyógyszerkészítményeik gyógyászati alkalmazásait is. ŕ

Description

A találmány a humán dexoxiribonukleáz-I (DNáz-I)enzimmel kapcsolatos kutatások során nyert eredményekre vonatkozik. A DNáz-I egy olyan foszfodiészteráz, amely képes a polidezoxiribonukleinsavat hidrolizálni. A találmány tárgyát képezik a humán DNáz-I módosított (variáns) formái.
A leírás ismerteti a DNáz-variánsok rekombináns DNS-módszerekkel végzett előállításait, gyógyszerkészítményeket, amelyek révén a humán DNáz-I-variánsok klinikai felhasználást nyerhetnek, valamint a DNázI-variánsok és készítményeik alkalmazási eljárásait.
A DNáz-I egy olyan foszfodiészteráz, amely képes a polidezoxiribonukleinsavat hidrolizálni. A DNáz-I-et különféle fajokból, különböző mértékben tisztították.
A szarvasmarha-DNáz-I-et biokémiailag igen alaposan vizsgálták a korábbiakban [lásd például: Moore, The Enzyimes (Boyer, P. D., ed.), pp. 281-296, Academic Press, New York (1981)]. A szarvasmarha-DNáz-I teljes aminosavszekvenciája ismert [Liao et al., J. BIOL. CHEM., 248, 1489-1495 (1973); Geíner et al., J. MÓL. BIOL., 192, 605-632 (1986); Lahm et al., J. MÓL. BIOL., 221, 645-667 (1991)]. A szarvasmarha-DNázI-et kódoló DNS-t már klónozták és expresszálták [Worrall et al., J. BIOL. CHEM., 265, 21 889-21 895 (1990)]. A szarvasmarha-DNáz-I szerkezetét röntgenkrisztallográfia alkalmazásával határozták meg [Suck et al., EMBO J„ 3, 2423-2430 (1984); Suck et al., NATÚRÉ, 321, 620-625 (1986); Geíner et al., J. MÓL. BIOL., 192, 605-632 (1986)].
A humán DNáz-I-et kódoló DNS-t a korábbiakban már izolálták, és meghatározták a szekvenciáját. Ezt a DNS-t rekombináns gazdasejtekben expresszálták, miáltal lehetővé vált a humán DNáz-I ipari mennyiségekben történő termelése is [Shak et al., PROC. NAT. ACAD. SCI., 87, 9188-9192 (1990)].
A DNáz-I számos felhasználási lehetőséggel rendelkezik, és a korábbiakban már alkalmazták is gyógyászati célokra. Leglényegesebb terápiás felhasználási lehetősége azt a tulajdonságát használja ki, hogy a DNáz-I csökkenti a pulmonalis váladékok (mucus) viszkoelaszticitását az olyan betegségekben, amilyen például a pneumonia és a cisztikus fibrózis (CF), és ezáltal elősegíti a légutak tisztulását [lásd például: Lourenco et al., ARCH. INTERN. MED., 142, 2299-2308 (1982); Shak et al., PROC. NAT. ACAD. SCI., 87, 9188-9192 (1990); Hubbard et al., NEW ENGL. J. MED., 326, 812-815 (1992); Fuchs et al., NEW ENGL. J. MED., 331, 637-642 (1994); Bryson et al., DRUGS, 48, 894-906 (1994)]. A mucus jelentős mértékben hozzájárul a krónikus bronchitis, az asztmatikus bronchitis, a bronchiectasia, az emphysema, az akut és krónikus sinusitis, sőt még az egyszerű megfázás morbiditásához is.
Az ilyen betegségekben szenvedő személyek pulmonalis váladékai összetett anyagok, amelyek nyálkaglikoproteineket, mukopoliszacharidokat, proteázokat, aktint és DNS-t tartalmaznak. A pulmonalis váladékokban lévő anyagok közül néhány azokból a leukocitákból (neutrofilekből) szabadul fel, amelyek a mikrobák (például Pseudomonas, Pneumococcus törzsek vagy
Staphylococcus baktériumok), illetve más irritánsok (például dohányfüst, pollen) jelenlétére adott válaszreakcióban beszűrődnek a tüdőszövetbe. Az ilyen mikrobákkal vagy irritánsokkal történő reakció során az említett mikrobák vagy irritánsok degenerálódhatnak, és szabaddá tehetik tartalmukat, amely növeli a pulmonalis váladékok viszkoelaszticitását.
A DNáz-I-nek a pulmonalis váladékok viszkoelaszticitását csökkentő képességét a korábbiakban annak tulajdonították, hogy a DNáz-I enzimatikusan degradálja a neutrofílek által szabaddá tett nagy mennyiségű DNS-t [Shak et al., PROC. NAT. ACAD. SCI., 87, 9188-9192 (1990); Aitken et al., J. AM. MED. ASSOC., 267, 1947-1951 (1992)].
A közelmúltban a DNáz-I mukolitikus aktivitására egy eltérő, az aktin dezintegrációját magában foglaló mechanizmust javasoltak [Vasconcellos et al., SCIENCE, 263, 969-971 (1994)]. Az aktin az eukariótasejtekben lévő egyik legnagyobb mennyiségű protein (például az aktin a leukocitaprotein összmennyiségének körülbelül 10%-át teszi ki), amelyet a korábbiakban már igen alaposan vizsgáltak [Kabsch et al., ANN. RÉV. BIOPHYS. BIOMOL. STRUCT., 21, 49-76 (1992); Sheterline et al., PROT. PROFILE, 1, 1-121 (1994)]. Az aktin két formában lehet: ezek egyike a monomer forma (Gaktin), míg a másik a G-aktin-monomerekből felépülő fonalas (fílamentous, F-aktin) forma. Az aktin polimer filamentumai rendkívül nagy viszkoelaszticitásúak, amelyek jelentősen megnövelik a pulmonalis váladékok viszkozitását [Momet et al., PROC. NAT. ACAD. SCI., 81, 3680-3684 (1984); Newman et al., BIOHEMISTRY, 24, 1538-1544 (1985); Janmey et al., BIOCHEMISTRY, 27, 8218-8226 (1988); Vasconcellos et al., SCIENCE, 263, 969-971 (1994)].
Mivel a DNáz-I-ről ismert, hogy egyrészt hozzákapcsolódik az aktinhoz [Lazarides et al, PROC. NAT. ACAD. SCI., 71, 4742-4746 (1974); Kabsch et al, NATÚRÉ 347, 37-44 (1990)], másrészt depolimerizálja az aktinfilamentumokat (valamint gátolja a G-aktin filamentumokká történő polimerizációját) [Mannherz et al, FEBS LETT., 60, 34-38 (1975); Hitchcock et al, CELL, 7, 531-542 (1976); Pinder eí al, BIOHEMISTRY, 21, 4886-4890 (1982); Weber et al, BIOHEMISTRY, 33, 4780-4786 (1994)], feltételezték, hogy a DNáz-I-nek a köpette vagy más pulmonális váladékokra gyakorolt mukolitikus hatása inkább az aktin dezintegrációjával (depolimerizálódásával) áll összefüggésben, semmint a DNS hidrolízisével [Vasconcellos et al, SCIENCE, 263, 969-971 (1994)]. Ezzel a nézettel összhangban áll az a megfigyelés, hogy aktin jelenlétében a DNáz-I DNS-hidrolizáló aktivitása gátolt [Lazarides et. al., PROC. NAT. ACAD. SCI., 71, 4742-4746 (1974); Mannherz et al., EUR. J. BIOCHEM., 104, 367-379 (1980)]. Ugyancsak ezt az elméleti megfontolást támasztják alá azok a közlemények, amelyek arról számoltak be, hogy az aktinbontó proteinek (például a gelzolin) hatásosan csökkentik a cisztikusfibrózis-köpet viszkoelaszticitását [Vasconcellos et al, SCIENCE, 263, 969-971 (1994); WO 94/22465 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés].
HU 222 665 Bl
A jelen találmány részben azokon a vizsgálatokon alapul, amelyeket a DNáz-I mukolitikus aktivitás biokémiai alapjainak meghatározása érdekében folytattunk.
A vizsgálat magában foglalta különféle humán DNáz-Ivariánsok tervezését és szintézisét, valamint a varián- 5 sok DNS-hidrolizáló, aktinkötő és a köpet viszkoelaszticitását csökkentő képességének in vitro meghatározását. A humán DNáz-I-variánsok számos osztályát hoztuk létre. A variánsok egyik ilyen osztálya (aktinrezisztens variánsok) csökkent mértékben kötődik az ak- 10 tinhoz, de még rendelkezik mukolitikus aktivitással, és bizonyos esetekben a natív humán DNáz-I-hez képest fokozott mukolitikus aktivitást mutat. Ezek az aktinrezisztens variánsok körülbelül ugyanolyan DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkeznek, mint a natív humán 15 DNáz-I, de ez az aktivitásuk kevésbé érzékeny az aktinnal történő gátlásra. A variánsoknak egy második osztálya körülbelül ugyanolyan affinitással köti az aktint, mint a natív humán DNáz-I, viszont a natív humán DNáz-I-gyel összehasonlítva kisebb mukolitikus aktivi- 20 tással és csökkentett DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkezik.
Ezek az eredmények azt jelzik, hogy pulmonalis váladékok viszkoelaszticitásának csökkentésében a humán DNáz-I terápiás hatékonysága a humán DNáz-I- 25 nek a fonalas aktint depolimerizáló képességével szemben inkább a protein katalitikus, DNS-hidrolizáló aktivitásához kapcsolódik. Azok a humán DNáz-I-variánsok, amelyek az aktint a natív humán DNáz-I-nél kisebb affinitással kötik, de amelyek még rendelkeznek 30 DNS-hidrolizáló aktivitással, gyógyászati felhasználást nyerhetnek különösen az olyan betegek kezelésében, akiknek a pulmonalis váladékai viszonylag nagy mennyiségben tartalmaznak aktint. Mivel az ilyen variánsok az aktin iránt mérsékelt affinitást mutatnak, a 35 DNS-hidrolizáló aktivitásukat az aktin jelenléte kevésbé gátolja, így ezeknek a variánsoknak aktin jelenlétében nagyobb a mukolitikus aktivitása, mint a natív humán DNáz-I-é.
A találmány egyik tárgya olyan humán DNáz-I-va- 40 riánsokra vonatkozik, amelyek DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkeznek, de amelyek az aktint a natív humán DNáz-I-nél kisebb affinitással kötik.
A találmány magában foglalja továbbá a humán DNáz-I-nek az ilyen aktinrezisztens variánsait kódoló 45 nukleinsavakat, és a leírás ismerteti az ezeket a nukleinsavakat tartalmazó rekombináns vektorokat, a nukleinsavakkal vagy vektorokkal transzformált rekombináns gazdasejteket, valamint a humán DNáz-I-variánsok rekombináns DNS-technológiai alkalmazásával 50 végzett előállítási eljárásait.
A leírás foglalkozik továbbá egy olyan gyógyszerkészítménnyel, amely a humán DNáz-I aktinrezisztens variánsokat tartalmazza, adott esetben egy gyógyszerészetileg elfogadható segédanyaggal együtt. 55
A leírás ismertet továbbá egy eljárást DNS-tartalmú anyag viszkoelaszticitásának vagy viszkózus konzisztenciájának csökkentésére egy betegben, amelynek során egy DNáz-I aktinrezisztens variáns gyógyászatilag hatásos mennyiségét adjuk be a betegnek. 60
Ugyancsak ismertet a leírás egy eljárást cisztikus fibrózisban, krónikus bronchitisben, pneumoniában, bronchiectasiában, emphysemában, asztmában vagy szisztémás lupus erythematosusban szenvedő beteg kezelésére, amelynek során egy DNáz-I aktinrezisztens variáns gyógyászatilag hatásos mennyiségét adjuk be a betegnek.
A leírás ismertet továbbá humán DNáz-I aktinrezisztens variánsoknak egy betegtől nyert viszkózus anyag (például köpet) diagnosztikai vizsgálataiban történő felhasználását a viszkózus anyagban lévő aktin mennyiségének mérésére és annak meghatározására, hogy egy aktinrezisztens DNáz-I-variánssal végzett kezelés szempontjából a beteg megfelelő alany-e.
Az ábrák rövid ismertetése
Az 1. ábra a humán érett DNáz-I aminosavszekvenciáját (1. számú szekvencia) mutatja be. A számok az aminosavcsoportoknak a szekvencián belüli szekvenciális helyzetét jelölik.
A 2-6. ábra a következő variánsok adatait mutat-
ja be:
A114C (68. számú szekvencia)
A114E (69. számú szekvencia)
A114G (70. számú szekvencia)
A114H (71. számú szekvencia)
Α114Κ (72. számú szekvencia)
A114L (73. számú szekvencia)
A114M (74. számú szekvencia)
AU4Q (75. számú szekvencia)
A114R (76. számú szekvencia)
A114W (77. számú szekvencia)
A114Y (78. számú szekvencia)
D53A (11. számú szekvencia)
D53C (43. számú szekvencia)
D53K (12. számú szekvencia)
D53L (44. számú szekvencia)
D53M (45. számú szekvencia)
D53R (13. számú szekvencia)
D53Y (14. számú szekvencia)
D58T (80. számú szekvencia)
E13A (2. számú szekvencia)
E13H (3. számú szekvencia)
E13R (4. számú szekvencia)
E13W (5. számú szekvencia)
E13Y (6. számú szekvencia)
E69A (65. számú szekvencia)
E69C (66. számú szekvencia)
E69K (21. számú szekvencia)
E69M (67. számú szekvencia)
E69R (22. számú szekvencia)
G49C (35. számú szekvencia)
G49I (36. számú szekvencia)
G49K (37. számú szekvencia)
G49R (38. számú szekvencia)
G49Y (39. számú szekvencia)
H44A (7. számú szekvencia)
H44C (28. számú szekvencia)
H44D (8. számú szekvencia)
H44E (86. számú szekvencia)
H44N (79. számú szekvencia)
HU 222 665 Bl
H44Q (29. számú szekvencia)
H44W (10. számú szekvencia)
H44Y (9. számú szekvencia)
L45C (30. számú szekvencia)
L45K (31. számú szekvencia) 5
L45R (32. számú szekvencia)
L52C (40. számú szekvencia)
L52K (41. számú szekvencia)
L52M (42. számú szekvencia)
L52N (90. számú szekvencia) 10
L52R (91. számú szekvencia)
N56C (46. számú szekvencia)
N56C (92. számú szekvencia)
N56F (47. számú szekvencia)
N56F (93. számú szekvencia) 15
N56K (94. számú szekvencia)
N56K (48. számú szekvencia)
N56R (49. számú szekvencia)
N56R (95. számú szekvencia)
N56W (50. számú szekvencia) 20
N56W (96. számú szekvencia)
S68K (62. számú szekvencia)
S68M (63. számú szekvencia)
S68R (64. számú szekvencia)
V48C (33. számú szekvencia) 25
V48K (34. számú szekvencia)
V48R (89. számú szekvencia)
V66N (83. számú szekvencia)
V67A (18. számú szekvencia)
V67C (55. számú szekvencia) 30
V67D (56. számú szekvencia)
V67E (19. számú szekvencia)
V67H (57. számú szekvencia)
V67K (20. számú szekvencia)
V67M (58. számú szekvencia) 35
V67P (59. számú szekvencia)
V67R (60. számú szekvencia)
V67S (61. számú szekvencia)
Y65A (15. számú szekvencia)
Y65C (51. számú szekvencia) 40
Y65E (87. számú szekvencia)
Y65K (52. számú szekvencia)
Y65M (53. számú szekvencia)
Y65P (97. számú szekvencia)
Y65R (16. számú szekvencia) 45
Y65S (54. számú szekvencia)
Y65W (17. számú szekvencia)
D53R.E69R (25. számú szekvencia)
D53R:H44A (23. számú szekvencia)
D53R.Y65A (24. számú szekvencia) 50
H64N: V66T (81. számú szekvencia)
S68N:P70T (98. számú szekvencia)
S94N: Y96T (85. számú szekvencia)
V67N.E69T (84. számú szekvencia)
Y65N: V67T (82. számú szekvencia) 55
D53R:Y65A:E69R (88. számú szekvencia)
H44A:D53R:Y65A (26. számú szekvencia)
H44A:Y65A:E69R (27. számú szekvencia)
A 2A-D. ábra a natív humán DNáz-I és a variánsok relatív fajlagos aktivitását mutatja be. A hibaszakaszok 60 a standard (n-súlyozott) deviációt jelzik. A pulmozim humán DNáz-I [(Pulmozyme®) Genentech, Inc., South
San Francisco, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok] relatív fajlagos aktivitását választottuk 1,0-nek.
A natív humán DNáz-I relatív fajlagos aktivitása nagyobb, mint a pulmozimé, ami annak tulajdonítható, hogy a pulmozimban a humán DNáz-I dezamidált formában van jelen, amely kisebb DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkezik (WO 93/25670 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés).
A 3. ábra a natív humán DNáz-I-nek és a humán DNáz-I egycsoportos (azaz egyetlen csoportban eltérő) 4 variánsainak az aktin jelenlétében kifejtett, hiperkromicitási vizsgálattal meghatározott DNS-hidrolizáló aktivitását mutatja be. A „Százalékos aktivitás” definíció a (natív vagy variáns) DNáz-I-nek a 3. példában ismertetett módon kiszámított százalékos DNS-hidrolizáló aktivitására vonatkozik; a DNáz-I-nek az aktin nélkül kifejtett DNS-hidrolizáló aktivitását definiáltuk 100%-os aktivitásként. A hibaszakaszok a standard deviációt jelzik.
A 4. ábra a natív humán DNáz-I-nek és a humán DNáz-I többcsoportos (azaz egynél több csoportban eltérő) variánsainak az aktin jelenlétében kifejtett, hiperkromicitási vizsgálattal vagy metilzöldvizsgálattal meghatározott DNS-hidrolizáló aktivitását mutatja be.
A „Százalékos aktivitás” definíció a (natív vagy variáns) DNáz-I-nek a 3. példában ismertetett módon kiszámított százalékos DNS-hidrolizáló aktivitására vonatkozik; a DNáz-I-nek az aktin nélkül kifejtett DNShidrolizáló aktivitását definiáltuk 100%-os aktivitásként. A hibaszakaszok a standard deviációt jelzik.
Az 5A-D. ábra a humán DNáz-I-variánsoknak az aktinnal szembeni, aktinkötési ELISA-vizsgálattal (3. példa) meghatározott relatív kötési affinitását mutatja be. Az EC50-érték a (natív vagy variáns) DNáz-I-nek azt a koncentrációját fejezi ki, amely a vizsgálatban a maximális szignál félértékének megfelelő eredményt biztosít. A hibaszakaszok a standard deviációt jelzik.
Az EC50 a pulmozim esetén 67±23 pM (n=31), míg a natív humán DNáz-I esetén 87±14 (n=32) értékű. Az ábrán látható relatív kötési affinitás a humán DNáz-Ivariáns esetén meghatározott EC50-érték és a natív humán DNáz-I esetén meghatározott EC50-érték hányadosának felel meg. Azokat a variánsokat, amelyeknél az EC50-érték nagyobb volt a vizsgálatban mérhetőnél, a grafikonon úgy jelöljük, mint amelyek bizonyos értéknél nagyobb (például >10, >100, >300, >2000, >20 000, >35 000) EC50 (DNáz-I-variáns)/EC50 (natív DNáz-I) aránnyal rendelkeznek.
A 6. ábra a natív humán DNáz-I-nek és a humán DNáz-I-variánsoknak a cisztikus fibrózisban szenvedő betegektől nyert köpetmintáiba kifejtett, kompakciós vizsgálattal meghatározott mukolitikus aktivitását mutatja be. A hibaszakaszok a középérték szórását jelentik.
A 7. ábra vázlatos formában a 3. példában ismertetett aktinkötési ELISA-vizsgálatot mutatja be.
I. Definíciók
A jelen leírásban alkalmazott „humán DNáz-Γ, „natív humán DNáz-I” és „vad típusú DNáz-I” kifejezés a humán érett DNáz-I-nek az 1. ábrán bemutatott ami4
HU 222 665 Bl nosavszekvenciájával rendelkező polipeptidre vonatkozik.
A humán DNáz-I esetén egy „variáns” vagy „aminosavszekvencia-variáns” egy olyan polipeptidet jelent, amely egy, a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájától eltérő aminosavszekvenciából áll. Általában egy variáns a natív humán DNáz-I-gyel összehasonlítva legalább 80%-os szekvenciaazonossággal (homológiával), előnyösen legalább 90%-os szekvenciaazonossággal, még előnyösebben legalább 95%-os szekvenciaazonossággal és legelőnyösebben legalább 98%-os szekvenciaazonossággal rendelkezik. A százalékos szekvenciaazonosságot a szekvenciáknak a maximális homológiát biztosító egymás mellé illesztése után például a Needleman által ismertetett algoritmus [Needleman et al., J. MÓL. BIOL., 48, 443-453 (1970)] Fitch által módosított változatának [Fitch et al., PROT. NAT. ACAD. USA, 80, 1382-1386 (1983)] alkalmazásával határozzuk meg.
A „humán DNáz-I aktinrezisztens variáns”, az „aktinrezisztens variáns” és „a humán DNáz-I-nek egy aktinrezisztens variánsa” kifejezés a natív humán DNázI-nek egy olyan variánsára vonatkozik, amely (1) DNShidrolizáló aktivitással és (2) az aktinnal szemben csökkentett kötési affinitással rendelkezik.
A „DNS-hidrolizáló aktivitás” kifejezés a natív humán DNáz-I-nek vagy a natív humán DNáz-I egy variánsának egy DNS-szubsztrát hidrolízisében (hasításában) kifejtett, 5’-foszforilált oligonukleotid végtermékeket eredményező enzimatikus aktivitására vonatkozik. A DNS-hidrolizáló aktivitás számos különféle, a szakterületen ismert eljárással, köztük analitikai poliakrilamidés agaróz-gélelektroforézissel, hiperkromicitási vizsgálattal [Kunitz, J. GÉN. PHYSIOL., 33, 349-362 (1950); Kunitz, J. GÉN. PHYSIOL., 33, 363-377 (1950)] vagy metilzöldvizsgálattal [Kumick, ARCH. BIOCHEM., 29, 41-53 (1950); Sinicropi et al., ANAL. BIOCHEM., 222, 351-358 (1994)] egyszerűen meghatározható.
A natív humán DNáz-I-nek vagy egy humán DNázI aktinrezisztens variánsnak az aktinra vonatkozó „kötési affinitása” a DNáz-I-nek az aktinhoz nemkovalens kötéssel történő kapcsolódási képességére vonatkozik. A kötési affinitást számos különféle, a szakterületen ismert eljárással, például a Mannherz által ismertetett módszer [Mannherz et al., EUR. J. BIOCHEM., 104, 367-379 (1980)] alkalmazásával egyszerűen meghatározhatjuk. Alternatív módon a különféle DNáz-ok (például a natív humán DNáz-I és variánsainak) relatív kötési affinitásait úgy határozzuk meg, hogy egy ELISAvizsgálatban (3. példa) megméijük a DNáz-oknak az immobilizált aktinhoz történő kötődését, illetve összehasonlítjuk a DNáz-oknak az aktin jelenlétében és hiányában kifejtett DNS-hidrolizáló aktivitását (3. példa). A példákban ismertetett eljárások különösen alkalmasak a humán DNáz-I-variánsainak szkrínelésére, amelynek során gyorsan azonosíthatjuk azokat a variánsokat, amelyek az aktinra nézve csökkent mértékű kötési affinitással rendelkeznek.
Egy „az aktinra nézve csökkent mértékű kötési affinitás”-sal rendelkező humán DNáz-I aktinrezisztens variáns egy olyan variánst jelent, amely összehasonlítható körülmények között meghatározva az aktinra nézve viszonylag kisebb kötési affinitással rendelkezik, mint amilyen affinitással a natív humán DNáz-I köti az aktint. Amennyiben egy (natív vagy variáns) humán DNáz-I aktinra vonatkozó kötési affinitásának meghatározásához a 3. példában ismertetett aktinkötési ELISAvizsgálatot alkalmazzuk, akkor az aktinra nézve csökkent mértékű kötési affinitással rendelkező aktinrezisztens variánsok közé azok a variánsok tartoznak, amelyek nagyobb EC50-értékkel rendelkeznek, mint amekkora a natív humán DNáz-I EC50-értéke. Ebben a vizsgálatban egy aktinrezisztens variáns jellegzetesen 5-100-szor nagyobb EC50-értékkel rendelkezik, mint a natív humán DNáz; azonban a natív humán DNáz-Iénél 500-szor vagy még nagyobb EC50-értékkel rendelkező aktinrezisztens variánsok is könnyen előállíthatok, különösen a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájának többszörös aminosavcsoport-változtatásával (lásd például az 5A. és 5D. ábrát).
A „mukolitikus aktivitás” kifejezés egy köpet vagy más biológiai anyag viszkoelaszticitásának (viszkozitásának) csökkenésére vonatkozik, amelyet például akkor figyelünk meg, amikor az anyagot natív humán DNáz-Igyel vagy egy humán DNáz-I-variánssal végzett kezelés során figyelünk meg. A mukolitikus aktivitás számos különféle, a szakterületen jól ismert eljárással, köztük a köpet kompakciós vizsgálattal (WO 94/10567 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés), torziós inga [Janmey, J. BIOCHEM. BIOPHYS. METHODS, 22, 41 -53 (1991)] vagy más Teológiai módszerek alkalmazásával végzett vizsgálattal egyszerűen meghatározható.
A „polimeráz-láncreakció” kifejezés vagy.J’CR” rövidítés általában egy kívánt nukleotidszekvencia in vitro kiterjesztésére (amplifikációjára) szolgáló eljárásra vonatkozik; ilyen eljárást ismertetnek például a 4 683 195 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban. Általában a PCR-eljárás primer extenziós szintézisek ismételt ciklusaiból áll, amelynek során olyan oligonukleotid primereket alkalmaznak, amelyek elsődlegesen egy templát nukleinsavhoz képesek hibridizálódni.
A „sejt”, „gazdasejt”, „sejtvonal” és „sejttenyészet” kifejezések a jelen leírás szerinti értelmezésnek megfelelően egymással felcserélhetők, és valamennyi ezzel kapcsolatos kifejezés úgy értendő, hogy az egy sejt növesztésének vagy tenyésztésének termékét foglalja magában. A „transzformáció” és a „transzfekció” kifejezések ugyancsak felcserélhetők, és azt a folyamatot jelölik, amelynek során egy sejtbe DNS-t vezetünk be.
A „működőképesen kötött” kifejezés két vagy több DNS-szekvenciának, például enzimatikus kapcsolással vagy más módon kialakított, egymáshoz viszonyítva olyan konfigurációban lévő kovalens kapcsolódására vonatkozik, amely lehetővé teszi a szekvenciák normális funkciójának ellátását. Például egy preszekvencia vagy szekréciós vezető-DNS akkor kötődik működőképesen egy polipeptid DNS-hez, ha egy olyan preprotinként expresszálódik, amely szerepet játszik a polipeptid szekréciójában; egy promoter vagy fokozó (enhancer) akkor kötődik működőképesen egy kódolószek5
HU 222 665 Β1 venciához, ha befolyást gyakorol a szekvencia transzkripciójára; vagy egy riboszómakötő hely akkor kapcsolódik működőképesen egy kódolószekvenciához, ha úgy helyezkedik el, hogy elő tudja segíteni a transzlációt. Általában a „működőképesen kötött” kifejezés azt jelenti, hogy a kötött DNS-szekvenciák egymással szomszédos helyzetűek, valamint egy szekréciós vezető esetében egymással szomszédos helyzetűek, és a leolvasási (reading) fázisban helyezkednek el. A kötést a szokásos restrikciós helyeknél végzett kapcsolással alakítjuk ki. Amennyiben ilyen helyek nincsenek, standard rekombináns DNS-eljárásokkal együtt szintetikus oligonukleotid adaptereket vagy linkereket alkalmazunk.
Az aminosavakat a leírásban a következő hárombetűs vagy egybetűs rövidítésekkel azonosítjuk:
Asp D aszparaginsav He I izoleucin
Thr T treonin Leu L leucin
Ser s szerin Tyr Y tirozin
Glu E glutaminsav Phe F fenil-alanin
Pro P prolin His H hisztidin
Gly G glicin Lys K lizin
Alá A alanin Arg R arginin
Cys C cisztein Trp W triptofán
Val V valin Gin Q glutamin
Met M metionin Asn N aszparagin
II. Az aktinrezisztens variánsok kiválasztása
A jelen találmány a humán DNáz-I aminosavszekvencia-variánsok szerkezetének, aktinkötési tulajdonságainak, DNS-hidrolizáló aktivitásának és mukolitikus aktivitásának vizsgálatán alapul. A találmány szerinti aktinrezisztens variánsok DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkeznek, de az aktint kisebb affinitással kötik, mint a natív humán DNáz-I. Az aktinkötés csökkentését előnyösen úgy éljük el, hogy a natív humán DNázI-en belül mutációkat végzünk azoknál az aminosavcsoportoknál, vagy azok körül az aminosavcsoportok körül, amelyek feltehetően befolyásolják az aktin kötését; a natív humán DNáz-I ilyen csoportjai közé tartoznak - egyebek mellett - például a következők: Glul3, His44, Leu45, Val48, Gly49, Leu52, Asp53, Asn56, Asp58, His64, Tyr65, Val66, Val67, Ser68, Glu69, Pro70, Ser94, Tyr96 és Alall4 (a hárombetűs aminosavrövidítés utáni szám az aminosavcsoportnak az 1. ábra szerinti szekvenciában elfoglalt specifikus helyzetét jelöli).
A humán DNáz-I aktinrezisztens variánsainak előállítására számos lehetőség kínálkozik. Az egyik találmány szerinti megoldás értelmében úgy állítunk elő egy aktinrezisztens variánst, hogy egyszeres vagy többszörös aminosavszubsztitúciót, -inszerciót és/vagy -deléciót vezetünk be a natív humán DNáz-I azon aminosavcsoportjainál vagy azon aminosavcsoportjainak a közvetlen környezetében (azaz körülbelül 5 aminosavnyi körzetében), amelyek befolyást gyakorolnak az aktinkötésre. Az ilyen mutációk néhány illusztratív példáját jelentik a következők: D53R, D53K, D53Y, D53A, Y65A, A65E, Y65R, V67E, V67K, E69R, D53R:Y65A, D53R:E69R, H44A:D53R:Y65A, H44A: Y65A: E69R (lásd a 2-6. ábrát).
Egy másik találmány szerinti megoldás értelmében úgy állítunk elő egy aktinrezisztens variánst, hogy egy vagy több, új glikozilezési helyet kialakító mutációt vezetünk be a natív humán DNáz-I azon aminosavcsoportjainál, vagy azon aminosavcsoportjainak a közvetlen környezetében, amelyek befolyást gyakorolnak az aktinkötésre. Például helyre irányuló mutagenezist alkalmazunk azoknak az aszparagin-X-szerin vagy aszparaginX-treonin (ahol X bármely aminosav lehet a prolin kivételével) tripeptid-szekvenciáknak a bevezetésére, amelyek felismerési szekvenciákként szolgálnak egy szénhidrátegységnek az aszparagin-oldallánchoz történő kapcsolódásához [Creighton, Proteins, pp. 76-78 (W. H. Freeman, 1984)]. Az így nyert A-glikozilezett DNáz-Ivariáns szénhidrátcsoportja és az aktin között fellépő szférikus gátlás csökkenti vagy megakadályozza az aktin kötését, és ennek következtében a natív humán DNáz-Ihez képest gátolja a DNáz-I DNS-hidrolizáló aktivitását. Az új glikozilezési hely bevezetésére alkalmas mutációk illusztratív példái közé tartoznak a következők: H44D, D58S, D58T, V66N, H44N:T46S, H64N:V66S, H64V:V66T, Y65N: V67S, Y65N:V67T, V66N: S68T, V67N:E69S, V67N:E69T, S68N:P70S, S68N:P70T, S94N:Y96S, S94N:Y96T.
Adott esetben - az aktinrezisztens variánsban kívánt glikozilezés mértékétől függően - az új glikozilezési helyet kialakító mutációkkal egyidejűleg törölhetjük a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciában a 18 és/vagy 106 pozícióban lévő, természetes előfordulású glikozilezési helyet.
Egy további, találmány szerinti megoldás szerint helyre irányuló mutagenezist alkalmazunk olyan csoportok bevezetésére a natív humán DNáz-I azon aminosavcsoportjainál, vagy azon aminosavcsoportjainak a közvetlen környezetében (azaz körülbelül 5 aminosavnyi körzetében), amelyek befolyást gyakorolnak az aktinkötésre, amely bevezetett csoportok alkalmasak biológiai vagy kémiai úton (lásd később) történő poszttranszlációs módosításra [Means et al., Chemical Modification of Proteins (Holden-Day, 1971); Glazer etal., Chemical Modification of Proteins: SelectedMethods and Analytical Procedures (Elsevier, 1975); Creoghton, Proteins, pp. 70-87 (W. H. Freeman, 1984); Lundblad, Chemical Reagenst fór Protein Modification (CRC Press, 1991)]. Ezek a poszttranszlációs módosítások olyan szférikus gátlást vagy megváltoztatott elektrosztatikus tulajdonságokat visznek be a DNáz-I-be, amelyek csökkentik vagy megakadályozzák az aktin kötését, és ennek következtében a natív humán DNáz-I-hez képest gátolják a DNáz-I DNS-hidrolizáló aktivitását. Például egy ciszteincsoportot vezethetünk be a natív humán DNáz-I azon aminosavcsoportjainál, vagy azon aminosavcsoportjainak a közvetlen környezetében, amelyek befolyást gyakorolnak az aktinkötésre. A ciszteincsoport szabad merkaptocsoportja intermolekuláris diszulfidhidat képezhet egy másik ilyen DNáz-I-variánssal, amelynek eredményeként egy DNáz-I-dimer képződhet, illetve a ciszteincsoport szabad merkaptocsoportja módosítható, például egy merkaptospecifikus alkilezőszerrel. A ilyen mutációk il6
HU 222 665 Bl lusztratív példái közé tartoznak - egyebek mellett - a következők: H44C, L45C, V48C, G49C, L52C, D53C, N56C, Y65C, V67C, E69C, A114C.
A natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájában történő szubsztitúciókat, inszerciókat és/vagy deléciókat szokásosan úgy hajtjuk végre, hogy a natív humán DNáz-I-et kódoló DNS megfelelő nukleotidszekvenciájába például helyre irányuló mutagenezissel mutációkat vezetünk be. A mutált DNS expresszálása a kívánt (nem natív) aminosavszekvenciával rendelkező variáns humán DNáz-I képződését eredményezi.
Jóllehet a helyre irányuló mutagenezis megvalósítására a szakterületen ismert bármely technikát felhasználhatjuk {lásd például: Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition [Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York (1989)]}, a találmány szerinti humán DNáz-I-variánsok előállítására az oligonukleotid-irányított mutagenezis az előnyös eljárás. Ez az eljárás {amely a szakterületen jól ismert [lásd például: Zoller et al., METH. ENZ., 100, 4668-5008 (1983); Zoller et al., METH. ENZ., 154, 329-350 (1987); Carter, METH. ENZ. 154, 382-403 (1987); Kunkel et al., METH. ENZYMOL., 154, 367-382 (1987); Horwitz et al., METH. ENZ., 185, 599—611 (1990)]} különösen szubsztitúciós variánsok előállítására alkalmas, bár felhasználható deléciós és inszerciós variánsok előállítására is.
A helyre irányuló mutagenezis-technika szokásosan egy olyan fágvektort használ fel, amely egyszálú és kétszálú formában egyaránt létezik. A helyre irányuló mutagenezisben felhasználható jellegzetes vektorok közé tartoznak - egyebek mellett - például az olyan vektorok, amilyen az Ml3 fág, valamint olyan plazmidvektorok, amelyek egy replikációs eredetű egyszálú fágot tartalmaznak [Messing et al, METH. ENZYMOL., 101, 20-78 (1983); Veira et al., METH. ENZYMOL., 153, 3-11 (1987); Short et al, NUC. ACIDS. RÉS., 16, 7583-7600 (1988)]. Ezeknek a vektoroknak alkalmas gazdasejtekben végzett replikácíója az olyan egyszálú DNS szintézisét eredményezi, amely DNS felhasználható a helyre irányuló mutagenezisben.
A natív humán DNáz-I-et (vagy egy variánsát) kódoló DNS helyre irányuló mutagenezisének végrehajtása során a DNS-t úgy módosítjuk, hogy először egy, a kívánt mutációt kódoló oligonukleotidot a DNS egyik szálához hibridizálunk. A hibridizációt követően egy DNS-polimerázt használunk a teljes második szál szintéziséhez, amelynek során primerként a hibridizált oligonukleotidot, míg templátként a DNS első szálját alkalmazzuk. Ennek eredményeként a kívánt mutációt kódoló oligonukleotid beépül az így nyert kettős szálú DNS-be.
A hibridáziós próbákként vagy primerekként történő felhasználásra szolgáló oligonukleotidokat bármely alkalmas eljárással, például egy természetes előfordulású DNS tisztításával vagy in vitro szintézissel előállíthatjuk. Például oligonukleotidokat egyszerűen szintetizálhatunk különféle, a szerves kémia területén jól ismert módszerek alkalmazásával [lásd például: Narang et al., METH. ENZYMOL., 68, 90-98 (1979); Brown et al,
METH. ENZYMOL., 68, 109-151 (1979); Caruthers et al, METH. ENZYMOL., 154, 287-313 (1985)]. Az alkalmas hibridizációs próbák vagy primerek kiválasztására szolgáló általános megoldás jól ismert [Keller et al, DNA Probes, pp. 11-18 (Stockton Press, 1989)]. A hibridizációs próba vagy primer jellegzetesen 10-25 vagy több nukleotidot tartalmaz, továbbá magában foglal legalább 5 nukleotidot a kívánt mutációt kódoló szekvencia egyik oldalán, biztosítva azt, hogy az oligonukleotid túlnyomórészt a kívánt lokációnál hibridizálódjon az egyszálú DNS-templát molekulához.
Természetesen a helyre irányuló mutagenezist többszörös szubsztitúciós, inszerciós vagy deléciós mutációknak egy kiindulási DNS-be történő bevezetésére is felhasználhatjuk. Amennyiben a mutálandó helyek egymáshoz közel helyezkednek el, a kívánt mutációk mindegyikét kódoló egyetlen oligonukleotid alkalmazásával a mutációkat egyidejűleg is bevezethetjük. Ha viszont a mutálandó helyek egymástól bizonyos távolságban helyezkednek el (körülbelül 10 nukleotidnál több választja el egymástól a mutálandó helyeket), már lényegesen nehezebb előállítani egyetlen olyan oligonukleotidot, amely a kívánt változások mindegyikét kódolná. Ehelyett az alábbi két alternatív eljárás valamelyikét alkalmazzuk.
Az első eljárásban mindegyik kívánt mutációhoz egy egyedi oligonukleotidot hozunk létre. Az oligonukleotidokat ezt követően egyidejűleg az egyszálú templát DNS-sé kapcsoljuk, és a templátból szintetizált második DNS-szál kódolja az összes kívánt aminosavszubsztitúciót.
Az alternatív megoldás a kívánt variáns előállításához két- vagy többfordulós mutagenezist alkalmaz. Az első kör azonos a fentiekben az egyszeres mutáció bevezetésére ismertetettel. A mutagenezis második fordulójában a mutagenezis első körében termelt mutált DNS-t alkalmazzuk templátként. Ez a templát már egy vagy több mutációt tartalmaz. A további kívánt aminosavszubsztitúció(ka)t kódoló oligonukleotidot ezt követően hozzákapcsoljuk ehhez a templáthoz, majd az így nyert DNS-szál már a mutagenezis első és második köréből származó mutációkat kódolja. Az így nyert DNS-t templátként alkalmazhatjuk a mutagenezis harmadik fordulójában és így tovább.
A humán DNáz-I-variánsainak előállítására a PCRmutagenezis [Higuchi, PCR Protocols, pp. 177-183 (Academic Press, 1990); Vallette et al., NUC. ACIDS RÉS., 17, 723-733 (1989)] ugyancsak felhasználható. Ha egy PCR-ben kiindulási anyagként a templát DNS kis mennyiségeit alkalmazzuk, a templát DNS megfelelő szakaszától a szekvenciájában kismértékben eltérő primereket használhatunk egy olyan, specifikus DNSfragmentum viszonylag nagy mennyiségének előállításához, amely a templát szekvenciájától csak azokban a pozíciókban tér el, ahol a primerek eltérnek a templáttól. Egy mutációnak egy plazmid DNS-be történő bevezetése esetén a primerek egyikének a szekvenciája magában foglalja a kívánt mutációt, és a primer úgy van megtervezve, hogy a mutáció pozíciójánál hibridizálódjon a plazmid DNS egyik szálához; a másik primer
HU 222 665 Bl szekvenciájának azonosnak kell lennie a plazmid DNS ellentétes szálának a nukleotidszekvenciájával, de ez a szekvencia a plazmid DNS mentén bárhol elhelyezkedhet. Előnyösen azonban a második primemek a szekvenciája az elsőtől 200 nukleotidnyi távolságon belül helyezkedik el, és így végül a primerekkel kötött DNS teljes amplifikált szakasza könnyen sorba állítható. A közelmúltban írtak le olyan PCR-t, amelyben egyetlen primer helyett egy primerpárt alkalmaztak; ennek eredményeként DNS-ffagmentumoknak egy olyan populációját nyerték, amelynek tagjai a primer által meghatározott mutáció helyénél és - a templátmásolás némi hibája miatt - esetleg más pozíciókban különböztek [Wagner et al., PCR Topics, pp. 69-71 (Springer-Verlag, 1991)].
Ha a templát/amplifikált DNS-termék arány szélsőségesen kicsi, a tennék DNS-fragmentumok nagyobb része tartalmazza a kívánt mutáció(ka)t. Ezt a DNSterméket standard rekombináns DNS-módszerek alkalmazásával felhasználhatjuk a PCR-templátként szolgáló plazmidban a megfelelő szakasz helyettesítésére. Külön álló pozíciókban lévő mutációkat oly módon vezethetünk be egyidejűleg, hogy vagy egy mutáns második prímért alkalmazunk, vagy pedig eltérő mutáns primerekkel egy második PCR-t hajtunk végre, majd egy három- (vagy több-) lépéses kapcsolás során a két képződött PCR-fragmentumot egyidejűleg hozzákapcsoljuk a plazmid fragmentumhoz.
Egy, a variánsok előállítására alkalmas másik eljárást, az úgynevezett kazetta-mutagenezist, Wells ismertette [Wells et al., GENE, 34, 315-323 (1985)]. A kiindulási anyag a mutálandó DNS-szekvenciát tartalmazó plazmid (vagy más vektor). Meghatározzuk a mutálandó kiindulás DNS-ben a kodont (kodonokat). Az azonosított mutációs hely(ek) egyik oldalán egyetlen restrikciós endonukleázhelynek kell lennie. Amennyiben nincsenek ilyen restrikciós helyek, a fentiekben ismertetett oligonukleotid-mediált mutageneziseljárás alkalmazásával létrehozhatjuk, és bevezethetjük a DNS-be a megfelelő pozícióknál az említett restrikciós helyeket. A plazmid DNS-t ezeknél a helyeknél vágjuk ki ahhoz, hogy linearizálhassuk. Egy, a restrikciós helyek közötti, de a kívánt mutáció(ka)t tartalmazó DNS szekvenciáját kódoló kétszálú oligonukleotidot szintetizálunk standard eljárások alkalmazásával, amelynek során az oligonukleotid két szálát egymástól elkülönítetten szintetizáljuk, majd standard módszerekkel a két szálat egymáshoz hibridizáljuk. Ezt a kétszálú oligonukleotidot nevezzük kazettának. A kazettát úgy tervezzük meg, hogy a linearizált plazmid végeivel kompatibilis 5’- és 3’-végekkel rendelkezzen, és így a kazetta közvetlenül hozzákapcsolható a plazmidhoz. Az ily módon nyert palzmid tartalmazza a mutált DNS-szekvenciát.
Egy DNS-ben a mutáció(k) jelenlétét a szakterületen jól ismert eljárásokkal, köztük restrikciós térképezéssel és/vagy DNS-szekvencia-meghatározással azonosítjuk. A DNS-szekvencia-meghatározás egyik előnyös eljárása a Sanger-féle didezoxilánc terminációs módszer [Sanger et al., PROC. NAT. ACAD. SCI. USA, 72, 3918-3921 (1979)].
A további klónozáshoz vagy expresszáláshoz egy humán DNáz-I-variánst kódoló DNS-t egy replikálható vektorba inszertálunk. A „vektorok” olyan plazmidok és más DNáz-ok, amelyek replikációra képesek egy gazdasejtben, és így felhasználhatók a kompatibilis gazdasejtekkel együtt két funkció ellátására (vektor-host rendszer). Az egyik funkciót azon nukleinsav klónozásának elősegítése jelenti, amely egy humán DNáz-I-variánst kódol, és ezáltal lehetővé teszi a nukleinsav alkalmas mennyiségekben történő termelését. A másik funkció egy humán DNáz-I-variáns expressziójának az irányítására vonatkozik. Az említett funkciók egyikét vagy mindegyikét a klónozáshoz vagy expresszáláshoz alkalmazott egyedi gazdasejtben a vektor valósítja meg. A vektorok a végrehajtandó funkciótól függően különféle komponenseket tartalmazhatnak.
Egy humán DNáz-I-variáns termeléséhez egy expressziós vektornak tartalmaznia kell a variánst kódoló DNS-t, amely működőképesen egy promoterhez és egy riboszómakötő helyhez kapcsolódik. A variánst ezt követően egy rekombináns sejttenyészetben közvetlenül expresszáljuk, vagy egy heterológ polipeptiddel, előnyösen egy szignálszekvenciával vagy más olyan polipeptiddel fuzionáljuk, amely specifikus hasítási hellyel rendelkezik a heterológ polipeptid és a humán DNáz-Ivariáns közötti találkozásnál.
A találmány szerinti kezdeti klónozási lépések szempontjából a prokarióták (például az Escherichia coli és más baktériumok) az előnyös gazdasejtek. Ezek különösen alkalmasak nagy mennyiségű DNS gyors termelésére, a helyre irányuló mutagenezisben történő felhasználásra szolgáló egyszálú DNS-templátok termelésére, valamint az előállított variánsok DNS sorrendjének kialakítására. A prokarióta gazdasejteket felhasználhatjuk továbbá egy humán DNáz-I-variánst kódoló DNS expresszálására is. A prokarióta gazdasejtekben termelt polipeptidek jellegzetesen nem glikozilezettek.
Ezenkívül a találmány szerinti humán DNáz-I-variánsokat eukarióta gazdasejtekben, köztük eukarióta mikrobákban (például élesztőben) vagy állati eredetű, illetve más többsejtű organizmusból származó sejtekben (például kínaihörcsög-petefészeksejtekben vagy más emlőssejtekben), továbbá élő emlősökben (például szarvasmarhákban, kecskékben, juhokban) is expresszálhatjuk.
A klónozási és expressziós metodológiák a szakterületen jól ismertek. A találmány szerinti humán DNáz-Ivariánsok előállításában történő felhasználásra alkalmas prokarióta- és eukariótasejtek, valamint expressziós vektorok példái megtalálhatók - egyebek mellett - a WO 90/07572 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben.
Amennyiben gazdasejtekként prokariótasejteket vagy lényeges sejtfalkonstrukciókat tartalmazó sejteket használunk, a sejtek DNS-sel végzett transzfekciójának az előnyös módszere a Cohen-féle kalciumkezelési eljárás [Cohen et al., PROC. NATL. ACAD. SCI., 69, 2110-2114 (1972)] vagy a Chung-féle polietilénglikolos módszer [Chung et al., NUC. ACIDS RÉS., 16, 3580 (1988)]. Ha gazdaszervezetként élesztőt alkalmazunk, a transzfekciót Hinnen módszere [Hinnen, PROC. NATL. ACAD. SCI.
HU 222 665 Bl
USA, 75, 1929-1933 (1978)] szerint polietilénglikollal hajtjuk végre. Amennyiben gazdasejtekként emlőssejteket használunk, a transzfekciót a kalcium-foszfát precipitációs eljárás [Graham et al., VIROLOGY, 52, 546 (1978); Gorman et al., DNA AND PROTEIN ENG. TECH., 2, 3-10 (1990)] alkalmazásával hajtjuk végre. A találmány szerinti megoldásban azonban más ismert eljárásokat is felhasználhatunk a DNS prokarióta- és eukariótasejtekbe történő bevezetésére; az ilyen egyéb módszerek körébe tartozik például a sejtmaginjektálás, az elektroporáció vagy a protoplasztfuzió.
A találmány szerinti megoldásnál különösen jól alkalmazhatók azok az expressziós vektorok, amelyek lehetővé teszik a humán DNáz-I-variánsokat kódoló DNS emlőssejtekben történő átmeneti (tranziens) expresszióját. Az átmeneti expresszió során általában egy olyan expressziós vektort használunk, amely egy gazdasejtben hatékony replikációra képes, a gazdasejtben az expressziós vektor nagyszámú másolata akkumulálódik, majd ezt követően az expressziós vektor által kódolt kívánt polipeptid nagy mennyiségekben képződik. Az átmeneti expressziós rendszerek egy alkalmas expressziós vektorból és egy gazdasejtből állnak, amelyek lehetővé teszik a klónozott DNS-ek által kódolt polipeptidek pozitív azonosítását, valamint ezeknek a polipeptideknek a kívánt biológiai vagy fiziológiás tulajdonságokra irányuló gyors szkrínelését [Wong eí al., SCIENCE, 228, 810-815 (1985); Lee et al., PROC. NAT. ACAD. SCI. USA, 82, 4360-4364 (1985); Yang et al., CELL, 47, 3-10 (1986)]. Az átmeneti expressziós rendszerek jól alkalmazhatók a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciavariánsait kódoló DNS expresszálására, különösen olyan vizsgálatokkal együttesen, amelyek azoknak a variánsoknak az azonosítására szolgálnak, amelyek kisebb affinitással kötik az aktint, mint a natív humán DNáz-I, valamint amelyek a DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkező variánsok mérésére alkalmasak.
Egy humán DNáz-I-variáns előnyösen kiválasztódik (szekretálódik) abból a gazdasejtből, amelyben expresszálódik, és ebben az esetben a variánst abból a táptalajból nyeljük ki, amelyben a gazdasejtek növekednek. Ezekben az esetekben a sejteket előnyösen szérummentes táptalajon növesztjük, mivel a szérumproteinek és más szérumkomponensek hiánya megkönnyíti a variáns tisztítását. Amennyiben egy humán DNáz-I-variáns nem szekretálódik, akkor a variánst a gazdasejtek lizátumaiból nyerjük ki. Ha a variáns egy nem humán eredetű gazdasejtben expresszálódik, a variáns humán eredetű proteinektől tökéletesen mentes. A humán DNáz-I-variáns alapvetően homogén preparátumainak az előállításához valamennyi esetben szükség van a variánsnak a rekombináns sejtproteinektől történő megtisztítására. A gyógyászati felhasználásokhoz a tisztított variánsnak 99%-osnál nagyobb tisztaságúnak kell lennie (azaz a tisztított kompozícióban csak a teljes proteintartalom 1%-ánál kisebb mennyiségben lehetnek más proteinek).
Egy humán DNáz-I-variáns tisztítása során általában a variáns és a vele együtt esetlegesen előforduló szennyező anyagok eltérő fizikai-kémiai tulajdonságait használjuk fel. Például első lépésként a táptalajt vagy a gazdasejtlizátumot a szemcsés sejttöredékek eltávolítása érdekében centrifugáljuk. Ezt követően a humán DNáz-I-variánst megtisztítjuk a szennyező oldható proteinektől és polipeptidektől; erre a célra - egyebek mellett - például a következő módszereket használhatjuk fel: ammóniumszulfátos vagy etanolos precipitáció, gélszűrés (molekulakizárásos kromatográfia), ioncserélő kromatográfia, hidrofób kromatográfia, immunaffinitási kromatográfia (amelynek során például egy Sepharose-hoz kapcsolt antihumán DNáz-I-antitesteket tartalmazó oszlopot használunk), karos (tentacle) kationcserélő kromatográfia (WO 93/25670 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés), reverz (fordított) fázisú HPLC és/vagy gélelektroforézis.
Természetesen az ezen a területen jártas szakember számára nyilvánvaló, hogy a natív humán DNáz-I esetén felhasználható tisztítási eljárásokat a natív és a variáns proteinek közötti strukturális és egyéb eltérések figyelembevételével, szükség esetén bizonyos mértékben módosítani kell. Például bizonyos gazdasejtekben (különösen a bakteriális gazdasejtekben) a humán DNáz-I-variáns kezdetben oldhatatlan, aggregált formában expresszálódhat (a szakterületen ezt a formát „refraktilis test” vagy „zárványtest” néven is említik), és ebben az esetben a tisztítási eljárás során szükségessé válik a humán DNáz-I-variáns oldhatóvá tétele és renativálása. A rekombináns protein zárványtestek szolubilizálási és renativálási eljárásai a szakterületen jól ismertek (lásd például a 4 511 502 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást).
Egy másik találmány szerinti megoldás értelmében humán DNáz-I-variánsokat úgy állítunk elő, hogy kovalens módosításokat hajtunk végre közvetlenül egy natív vagy variáns humán DNáz-I-proteinben. Az ilyen módosítások befolyást gyakorolnak a protein aktinkötő képességére vagy más tulajdonságára (például stabilitására, biológiai felezési idejére, immunogenicitására). A kovalens módosításokat az aminosavszekvencia fentiekben ismertetett szubsztitúciós, inszerciós és deléciós mutációi helyett vagy mellett egyaránt alkalmazhatjuk.
A kovalens módosításokat úgy vezetjük be a molekulába, hogy a natív vagy variáns humán DNáz-I megcélzott aminosavcsoportjait egy olyan szerves reagenssel reagáltatjuk, amely a kiválasztott aminosav-oldalláncokkal vagy N-, illetve C-terminális csoportokkal reakcióba tud lépni. Az alkalmas reagensek és eljárások a szakterületen jól ismertek.
Például a ciszteinilcsoportokat leggyakrabban ahalogén-acetátokkal (és a megfelelő aminokkal), például klór-ecetsavval vagy klór-acetamiddal reagáltatják, amelynek eredményeként karboxi-metil- vagy karboxiamido-metil-származékok képződnek. A ciszteinilcsoportok átalakítását elvégezhetjük ezenkívül a következő reagensekkel: bróm-trifluor-aceton, a-bróm-p-(5-imidazoil)-propionsav, klór-acetil-foszfát, /V-alkil-maleinimidek, 3-nitro-2-piridil-diszulfid, metil-2-piridil-diszulfid, higany(II)-4-klór-benzoát, higany(II)-2-klór-4-nitro-fenolát vagy klór-7-nitro-benzo-2-oxa-l,3-diazol.
HU 222 665 Β1
A hisztidilcsoportokat dietil-pirokarbonáttal 5,5-7,0 pH-η reagáltatva alakítjuk át, mivel ez a reagens viszonylag specifikus a hisztidiloldalláncokra. 4Bróm-fenacil-bromidot is alkalmazhatunk; ezt a reakciót előnyösen 0,1 M nátrium-kakodilát-oldatban, 6,0os pH-η hajtjuk végre.
A lizinilcsoportokat és az A-terminális csoportokat borostyánkősavanhidriddel vagy más karbonsavanhidriddel reagáltatjuk. Az ezekkel a reaagensekkel végzett átalakítás hatására ellentétesre változik a lizinilcsoportok töltése. Az α-amino-csoportot tartalmazó csoportok átalakítására alkalmas további reagensek közé tartoznak - egyebek mellett - például a következők: imido-észterek, például metil-pikolinimidát; piridoxál-foszfát; piridoxál; klór-bór-hidrid; trinitro-benzolszulfonsav; Ometil-izokarbamid; 2,4-pentándion; valamint glioxiláttal végzett, transzaminázkatalizált reakció.
Az arginilcsoportokat számos szokásosan alkalmazott reagenssel módosíthatjuk; az ilyen reagensek közé tartoznak - egyebek mellett - például a következők : fenil-glioxál, 2,3-butándion, 1,2-ciklohexándion és ninhidrin. Az arginilcsoportok átalakítását lúgos körülmények között kell végrehajtani, mivel a guanidin funkciós csoport nagy pKa értékkel rendelkezik. Ezeket a reagenseket felhasználhatjuk továbbá a lizin csoportjainak, valamint az arginin epszilon-amino-csoportjának az átalakítására is.
Az aszparaginsav és a glutaminsav-oldallánc karboxicsoportjait szelektíven módosíthatjuk R-N=C=N-R’ általános képletű karbodiimidekkel végzett reakcióval, ahol az általános képletben R és R’ egymástól eltérő alkilcsoportokat jelent; ilyen karbodiimid például az 1ciklohexil-3-(2-morfolino-etil)-karbodiimid vagy az l-etil-3-(4-azonia-4,4-dimetil-pentil)-karbodiimid. Az aszpartil- és glutamilcsoportokat ezenkívül ammóniumionokkal végzett reakcióval a megfelelő aszparaginil- és glutaminilcsoportokká konvertálhatjuk.
Glikozidoknak a protein aminosavcsoportjaihoz történő kovalens kapcsolásával módosíthatjuk vagy növelhetjük a szénhidrát-szubsztituensek számát vagy profilját, különösen azoknál a csoportoknál, vagy azoknak a csoportoknak a közelében, amelyek részt vesznek az aktin kötésében. Az alkalmazott kapcsolási módszertől függően az egy vagy több cukor a következő csoportokhoz kapcsolódhat: (a) arginin és hisztidin; (b) szabad karboxicsoportok; (c) szabad merkaptocsoportok, például a cisztein szabad merkaptocsoportja; (d) szabad hidroxicsoportok, például a szerin, a treonin és a hidroxi-prolin szabad hidroxicsoportja; (e) aromás csoportok, például a fenil-alanin, a tirozin vagy a triptofán aromás csoportja; vagy (f) a glutamin amidcsoportja. Az alkalmas eljárások ismertetése megtalálható - egyebek mellett - például a WO 87/06330 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben.
Különféle reagenseknek, például polietilénglikolnak (PEG) vagy humán szérumalbuminnak a humán DNázI-variánsokhoz történő kovalens kötése csökkentheti a variáns immunogenicitását és/vagy toxicitását, és/vagy meghosszabbíthatja a felezési idejét, annak megfelelően, ahogyan azt a korábbiakban más proteinek esetén megfigyelték [Abuchowski et al., J. BIOL. CHEM., 252, 3582-3586 (1977); Poznansky et al., FEBS LETTERS, 239, 18-22,13. oldal (1988); Goodson et al., BIOTECHNOLOGY, 8, 343-346 (1990); Katre, J. IMMUNOL., 144, 209-213 (1990); Harris, Polyethylene Glycol Chemistry (Plenum Press, 1992)]. Ezenkívül a natív humán DNáz-I-nek vagy egy variánsának az ilyen szerekkel végzett módosítása azon aminosavcsoportjainál vagy azon aminosavcsoportjainak a közvetlen környezetében (azaz körülbelül 5 aminosavnyi körzetében), amelyek befolyást gyakorolnak az aktinkötésre, egy aktinrezisztens variánst eredményezhet.
Egy további megoldás értelmében egy humán DNázI aktinrezisztens variáns a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájának 74-es pozíciójában lévő Asn csoportnál egy mutációt (például egy N74D, N74K vagy N74S mutációt) tartalmazhat annak érdekében, hogy csökkentsük vagy megakadályozzuk a DNáz-I-variáns dezamidálását (WO 93/25670 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés). Egy másik példában egy humán DNáz-I aktinrezisztens variáns olyan aminosavszekvencia-mutációt vagy más kovalens módosítást tartalmazhat, amely csökkenti a variánsnak a köpetben vagy más biológiai anyagokban jelen lévő proteázok (például neutrofil elasztáz) által okozott degradációval szembeni érzékenységét.
A fentiekben ismertetett eljárásokkal előállított humán DNáz-I-variánsok DNS-hidrolizáló aktivitását és aktinkötési aktivitását a szakterületen jól ismert, és a jelen leírásban bemutatott vizsgálatok és eljárások alkalmazásával egyszerűen meghatározhatjuk. A fentiekben meghatározott DNS-hidrolizáló és az aktinnal szemben csökkentett kötési affinitással rendelkező variánst a találmány oltalmi körébe tartozó aktinrezisztens variánsnak tekintünk.
A találmány szerinti humán DNáz-I aktinrezisztens variánsokat DNS-tartalmú anyagok, például köpet, mucus vagy más pulmonalis váladékok viszkoelaszticitásának csökkentésére alkalmazzuk. Ezek a variánsok különösen jól használhatók pulmonalis betegségekben szenvedő olyan betegek kezelésére, akik abnormis módon viszkózus vagy besűrűsödött váladékokat szekretálnak, illetve akik a következő betegségek valamelyikében szenvednek : akut és krónikus brochialis pulmonalis betegségek, köztük fertőző tüdőgyulladás, bronchitis vagy tracheobronchitis, bronchiectasia, cisztikus fibrózis, asztma, tuberkulózis és gombafertőzések. Az ilyen gyógyászati kezelések során az aktinrezisztens variánsnak egy oldatát vagy finoman eloszlatott száraz preparátumát juttatjuk be hagyományos módon, például aeroszol formájában egy beteg légutaiba (például hörgőibe) vagy tüdejébe.
Az aktinrezisztens variánsokat felhasználhatjuk az olyan betegségekben fellépő tályogok vagy zárt terű fertőzések kiegészítő kezelésére is, amilyenek például a következők: empyema, meningitis, abscessus, peritonitis, sinusitis, otitis, periodontitis, pericarditis, pancreatitis, colelithiasis, endocarditis és szeptikus arthritis. Ezenkívül az aktinrezisztens variánsokat különféle gyulladásos és fertőzéses sérülések topikális (helyi) ke10
HU 222 665 Bl zelésére is alkalmazhatjuk; az ilyen jellegű állapotok, illetve betegségek közé tartoznak - egyebek mellett - a bőr és/vagy a nyálkahártya fertőzéses károsodásai, műtéti sebek, fekélyek és égési sérülések. Az aktinrezisztens variánsok jelentősen javíthatják az említett fertőzések kezelésében alkalmazott antibiotikumok hatékonyságát (például a gentamicin aktivitását jelentős mértékben csökkenti az intakt DNS-hez történő reverzibilis kapcsolódás).
A natív humán DNáz-I-et és aktinrezisztens variánsait felhasználhatjuk a szisztémás lupus erythematosus (SLE) kezelésére is. A szisztémás lupus erythematosus életveszélyes autoimmun-betegség, amelyet különféle autoantitestek képződése jellemez. Az immunkomplexek egyik elsődleges komponense DNS. Ebben az esetben a natív vagy variáns humán DNáz-I-et szisztémásán, például intravénásán, szubkután, intrathecalis vagy intramuszkuláris úton adhatjuk be a betegnek.
A natív humán DNáz-I-et és aktinrezisztens variánsait felhasználhatjuk az olyan légúti fertőzések kifejlődésének és/vagy súlyosbodásának megelőzésére is, amilyenek például a cisztikus fibrózisban, krónikus bronchitisben, asztmában, pneumoniában vagy más pulmonalis betegségekben szenvedő betegek, a légzésüket ventilátorral vagy más mechanikus eszközzel segítő betegek, valamint a légzőszervi fertőzések veszélyének fokozottan kitett, például a műtét utáni állapotban lévő betegek esetén fordulhatnak elő.
Az aktinrezisztens variánsokat a gyógyászati felhasználásra szolgáló készítmények előállítására szokásosan alkalmazott eljárásoknak megfelelően formálhatjuk. Az egyik előnyös gyógyszerkészítmény egy olyan oldat, amelyet úgy állítunk elő, hogy az aktinrezisztens variánst feloldjuk egy adott esetben puffereit vizes oldatban, előnyösen egy izotóniás nátrium-klorid-oldatban, például 1,0 mM kalcium-kloridot tartalmazó, 7-es pH-értékű 150 mM nátrium-klorid-oldatban. Ezek az oldatok különösen alkalmasak a kereskedelmi forgalomban kapható aeroszolkészülékekben, köztük a sűrített levegős és az ultrahangos aeroszolkészülékekben történő felhasználásra, amelyek segítségével a hatóanyag közvetlenül eljuttatható a beteg légutaiba vagy tüdejébe.
Egy másik megoldás értelmében a gyógyszerkészítmény az aktinrezisztens variánsnak egy száraz porából áll, amelyet előnyösen az 1994. március 4-én 08/206,020 sorozatszámon benyújtott amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben ismertetett eljárással lényegében azonos módon, az aktinrezisztens variáns oldatának a porlasztva szárításával állítunk elő.
Egy további megoldás szerint a gyógyszerkészítmény olyan sejteket tartalmaz, amelyek aktívan termelnek egy humán DNáz-I aktinrezisztens variánst. Az ilyen sejteket közvetlenül bejuttathatjuk egy beteg szövetébe, illetve a sejteket porózus membránokba kapszulázva implantálhatjuk egy betegbe; mindkét megoldás biztosítja, hogy az aktinrezisztens variáns a beteg testének abba a részébe jusson, ahol fokozott nagyságú DNS-hidrolizáló aktivitásra van szükség. Például a beteg saját sejtjeit transzformálhatjuk in vivő vagy ex vivő egy humán DNáz-I aktinrezisztens variánst kódoló DNS-sel, majd ezeket a transzformált sejteket használhatjuk a DNáz-I termelésére közvetlenül a beteg testében.
Egy humán DNáz-I aktinrezisztens variáns gyógyászatilag hatásos mennyisége - egyebek mellett - például a kezelendő anyagban lévő DNS és aktin mennyiségétől, a kezelendő betegségtől, a beadási módtól és a beteg általános állapotától függ. Az optimális terápiás hatás elérése érdekében a kezelést végző orvosnak meg kell határozni a beadandó mennyiséget, illetve szükség esetén módosítani kell a választott beadási módot. Mivel a natív humán DNáz-I-hez képest az aktinrezisztens variánsok az aktinnal szemben kisebb kötési affinitással, illetve ebből következően aktin jelenlétében fokozott DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkeznek, egy aktinrezisztens variánsnak egy adott terápiás hatás eléréséhez szükséges mennyisége kisebb lehet, mint ha ugyanolyan körülmények között natív humán DNáz-I-et alkalmazva kívánjuk elérni ugyanazt a hatást. Általában az aktinrezisztens variáns terápiásán hatásos mennyisége a beteg testtömegére vonatkoztatva körülbelül 0,1 pg/kg és körülbelül 5 mg/kg közötti értékű, amelyet gyógyszerkészítmények formájában adunk be a betegnek.
Egy DNáz-I aktinrezisztens variánst adott esetben egy vagy több más, a fentiekben felsorolt betegségek kezelésére szokásosan alkalmazott hatóanyaggal kombinálva vagy azokkal egyidejűleg is felhasználhatjuk; az ilyen egyéb hatóanyagok körébe tartoznak például a következők: antibiotikumok, bronchodilatatorok, gyulladásgátló hatóanyagok, mukolitikumok (például A-acetilcisztein), aktinkötő vagy aktinbontó proteinek {például gelzolin [Matsudaira et al., CELL, 54, 139-140 (1988); WO 94/22465 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés]}, proteázinhibitorok vagy génterápiás termékek {például a cisztikus fibrózis transzmembrán vezetést szabályozó (CFTR) gént [Riordan et al., SCIENCE, 245, 1066-1073 (1989)] tartalmazó termék}.
Az alábbi példák csak a találmány illusztrálására szolgálnak. A példák a találmány terjedelmét, illetve oltalmi körét nem korlátozzák.
1. példa
A humán DNáz-I mutagenezise
Chung eljárásának [Chung et al., NUC. ACIDS RÉS., 16, 3580 (1988)] megfelelően CJ236 E. coli törzset (BioRad Laboratories, Richmont, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok) pRK.DNáz.3 plazmiddal transzformáltunk. A találmány szerinti megoldásban alkalmazott pRK.DNáz.3 plazmid leírása a WO 90/07572 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben található, azzal az eltéréssel, hogy a humán DNáz-I-et kódoló nukleotidszekvencia az 1. ábrán láthatónak felel meg. A transzformált sejteket 50 pg/ml karbenicillint tartalmazó LB agarlemezekre helyeztük, majd a sejteket egy éjszakán keresztül 37 °C hőmérsékleten növesztettük. Az agarlemezről nyert egyedi telepekkel 50 pg/ml karbenicillint és 10 pl VCSM13 segítő (helper)-fágot tartalmazó 2YT táptalajt (5 ml) (Stratagene, La Jolla, Kali11
HU 222 665 Bl fomia, Amerikai Egyesült Államok) inokuláltunk, majd egy éjszakán keresztül, 37 °C hőmérsékleten, mozgatás közben tenyésztést végeztünk. A tenyészetből egyszálú DNS-t izoláltunk, majd ezt használtuk templátként a következő mutagenezisben.
A helyre irányuló mutagenezist Kunkel eljárásának [Kunkel et al., METH. ENZYMOL., 154, 367-382 (1987)] megfelelően, szintetikus oligonukleotidok alkalmazásával hajtottuk végre. A mutagén oligonukleotidok 21 vagy 24 tagúak voltak, amelyek a hibásan illeszkedő kodonhoz 9 vagy 12 pontos 5’ bázisilleszkedéssel, és a hibásan illeszkedő kodonhoz 9 pontos 3’ bázisilleszkedéssel rendelkeztek. A mutagenezist követően az egyedi klónokból nyert egyszálú DNS-t didezoxiszekventálásnak [Sanger et al., PROC. NAT. ACAD. SCI. USA, 74, 5463-5467 (1977)] vetettük alá. A variáns nukleotidszekvenciákkal rendelkező DNS-t a fentieknek megfelelően XL1 Blue MRF’ E. coli törzsbe (Stratagene, La Jolla, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok) transzformáltuk. A sejteket lemezre vittük, majd egyedi telepeket izoláltunk. Ezekkel az egyedi telepekkel 50 pg/ml karbenicillint tartalmazó LB táptalajt (0,5 liter) inokuláltunk. Mozgatás közben egy éjszakán keresztül 37 °C hőmérsékleten tenyésztést végeztünk, ezt követően a sejteket centrifügálással kinyertük, majd az expressziós vektorban lévő variáns DNS-t Qiagen tip-500 oszlopok (Qiagen Inc., Chatsworth, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok) alkalmazásával tisztítottuk.
A 2-6. ábra azonosítja az így előállított különféle humán DNáz-I-variánsokat. Az ábrákon és a leírásban egy DNáz-I-variáns aminosavszubsztitúciós mutációját (mutációit) egy első betűvel, egy számmal és egy második betűvel jelölve rövidítettük. Az első betű a natív (vad típusú) humán érett DNáz-I-ben lévő amínosavcsoport egybetűs rövidítésének felel meg, a szám az adott aminosavcsoportnak a natív humán DNáz-I-ben elfoglalt pozícióját jelöli (a számozást lásd az 1. ábrán), míg a második betű a variáns DNáz-I-ben az adott helyen lévő aminosavcsoport egybetűs rövidítése. Például ha a DNáz-I-variáns egy D53R mutációval rendelkezik, ez azt jelenti, hogy a natív, humán, érett DNáz-I 53-as helyzetében lévő aszparaginsav (D) a variáns DNázI-ben argininre (R) lett cserélve. Ha egyetlen variánsban többszörös mutáció fordul elő, hasonló jelölést alkalmazunk; a variánsban lévő különböző mutációk mindegyikét kettősponttal (:) választjuk el egymástól. Például a D53R: Y65A rövidítés egy olyan variánst jelöl, amely egy D53R mutációval és egy Y65A mutációval rendelkezik.
2. példa
A humán DNáz-I-variánsok expresszálása
150 mm-es műanyag Petri-csészékben szérumtartalmú táptalajon humán embrionális 293 vesesejteket (ATCC CRL 1573, American Type Culture Collection, Rockville, Maryland, Amerikai Egyesült Államok) tenyésztettünk. A lóg fázisú sejteket a kalcium-foszfát precipitációs eljárás [Gorman et al., DNA AND PROTEIN ENG. TECH., 2, 3-10 (1990)] alkalmazásával átmenetileg 22,5 pg (a fentiekben előállított) tisztított variáns DNS-sel és 17 pg adenovírus DNS-sel kotranszfektáltuk. A transzfekció után körülbelül 16 óra elteltével a sejteket 15 ml foszfátpufferelt nátrium-klorid-oldattal mostuk, majd a médiumot szérummentes közegre cseréltük. A sejttenyésztő közeget a szérummentes közegre történő csere után először 24 vagy 72 órával, másodszor pedig 96 órával két alkalommal leszedtük valamennyi lemezről. Ily módon összesen hozzávetőleg 50 ml mennyiségben nyertük a DNáz-I-variánst tartalmazó sejttenyészet-felülúszót. Az egyes lemezekről nyert tenyészet-felülúszókat egyesítettük, majd Centriprep 10 koncentrátor alkalmazásával 5-50-ed résznyi térfogatra töményítettük. A koncentrátumokat vizsgáltuk annak érdekében, hogy meghatározzuk a DNáz-Ivariánsok különféle biokémiai és biológiai aktivitásait.
A natív humán DNáz-I-et tartalmazó koncentrátumot ugyanilyen eljárással állítottuk elő, azzal az eltéréssel, hogy ebben az esetben a 293 sejtek átmeneti transzfekcióját pRK.DNáz.3 plazmiddal végeztük.
3. példa
A humán DNáz-I-variánsok biokémiai és biológiai aktivitásai
I. Relatív fajlagos aktivitás
A DNáz-I-variánsok relatív fajlagos aktivitását úgy határoztuk meg, hogy két egymástól eltérő vizsgálattal összehasonlítottuk a variáns aktivitását és a natív humán DNáz-I aktivitását. A variánsok relatív fajlagos aktivitását úgy definiáljuk, hogy a variánsnak egy metilzöld aktivitási vizsgálattal [Sinicropi et al., ANAL. BIOCHEM., 222, 351-358 (1994); Kumick, ARCH. BIOCHEM., 29, 41-53 (1950)] meghatározott koncentrációját (pg/ml) elosztjuk a variánsnak egy DNáz-I ELISA-vizsgálattal (lásd később) meghatározott koncentrációjával (pg/ml). Mind a metilzöld-, mind pedig az ELISA-vizsgálatban Pulmozyme® humán DNáz-I alkalmazásával határoztuk meg a standard görbéket. A natív humán DNáz-I és variánsainak a relatív fajlagos aktivitását a 2A-D. ábrákon mutatjuk be.
A metilzöld aktivitási vizsgálatban [Sinicropi et al., ANAL. BIOCHEM., 222, 351-358 (1994); Kumick, ARCH. BIOCHEM., 29, 41-53 (1950)] metilzöld festéket használunk, amely a DNS hozzávetőleg minden 10. bázisába beágyazódva egy zöld szubsztrátot eredményez. Amikor a DNáz-I hasítja a DNS-t, a metilzöld festék szabaddá válik, és egy színtelen formává oxidálódik. A zöld szín elvesztése arányos a vizsgálati mintához hozzáadott DNáz-I mennyiségével. Ezt követően a vizsgálatban jelen lévő DNáz-I mennyiségét egy, a DNáz-I ismert mennyiségeinek vizsgálatával elkészített standard görbével végzett összehasonlítás útján határozzuk meg.
A DNáz-I ELISA-vizsgálat során mikrotiter lemezeket kecske anti-DNáz-I poliklonális antitesttel vonunk be, a bevont lemezekhez hozzáadjuk a vizsgálandó mintát, majd torma-peroxidázzal (HRP) konjugált nyúl anti-DNáz-I poliklonális antitesttel detektáljuk a képződött kötött DNáz-I-et. Amennyiben a vizsgálathoz HRP-szubsztrátot és színkifejlesztő reagenst adunk, a
HU 222 665 Bl képződő szín arányos a mintában lévő DNáz-I mennyiségével. Ezt követően a vizsgálatban jelen lévő DNáz-I mennyiségét egy, a DNáz-I ismert mennyiségeinek vizsgálatával elkészített standard görbével végzett összehasonlítás útján határozzuk meg.
Mindkét vizsgálatban a minták többszörös hígításait vizsgáltuk, majd a standard görbe középső sávjába eső értékeket átlagoltuk, és standard deviációt számoltunk.
A DNáz-I ELISA-vizsgálattal meghatározott DNáz-I-koncentrációt alkalmaztuk azokban az egyéb vizsgálatokban a DNáz-I-koncentrációk standardizálására, amelyekben a DNáz-I-variánsokat jellemeztük (például az aktin által okozott gátlás alábbiakban ismertetett vizsgálatában).
II. A DNáz-I hidrolizálóaktivitásának az aktin által okozott gátlása
Kereskedelmi úton (Sigma, St. Louis, Missouri, Amerikai Egyesült Államok) aktint vásároltunk, illetve Pardee eljárásával [Pardee et al., METH. ENZYMOL., 85, 164-181 (1982)] aktint állítottunk elő. Egy 1 mg/ml koncentrációjú aktinoldatot 5 mM HEPES, pH 7,2, 0,2 mM kalcium-klorid, 0,5 mM ATP, 0,5 mM βmerkapto-etanol-oldattal szemben egy éjszakán keresztül, 4 °C hőmérsékleten dializálva G-aktint [Kabsch et al., ANN. RÉV. BIOPHYS. BIOMOL. STRUCT., 21, 49-76 (1992)] állítottunk elő. Öt percen keresztül 13 000 xg értékkel centrifúgálást végeztünk, majd meghatároztuk a G-aktin mennyiségét a 290 nm hullámhossznál mért abszorbancia alapján. Egy 1 mg/ml koncentrációjú oldat abszorbanciája 0,66 CD. A G-aktinpreparátumnak azt a mennyiségét, amely a natív humán DNáz-I DNS-hidrolizáló aktivitásának lényeges (>50%), de nem teljes gátlásához szükséges, előzetes kísérletekben határoztuk meg, ugyanolyan körülmények között, mint amelyeket az egyes vizsgálatokban alkalmaztunk.
Az aktingátlási érzékenységet úgy határoztuk meg, hogy két eltérő vizsgálat valamelyikével mértük aktin jelenlétében és aktin nélkül a variánsok DNS-hidrolizáló aktivitását. A két vizsgálat egyike a fentiekben ismertetett metilzöldvizsgálat, míg a másik egy hiperkromicitási vizsgálat, amely a 260 nm hullámhosszon mért abszorbanciának a DNS denaturációja és depolimerizációja során történő növekedésén alapul [Kunitz, J. GÉN. PHYSIOL., 33, 349-362 (1950); Kunitz, J. GÉN. PHYSIOL., 33, 363-377 (1950)]. A kiválasztott variánsoknak az ebben a vizsgálatban mért százalékos gátlását a 3. és a 4. ábra mutatja be.
A hiperkromicitási vizsgálatban a fentiek szerint előállított, DNáz-I-variánsokat tartalmazó koncentrált tenyészet-felülúszókat aktin nélkül vagy 2-3-szoros moláris feleslegben lévő aktin hozzáadásával A pufferben (25 mM HEPES, pH 7,5, 4 mM kalcium-klorid, 4 mM magnézium-klorid, 0,1% bovin-szérumalbumin) egy órán keresztül, szobahőmérsékleten inkubáltuk, majd összesen 1,0 ml-es vizsgálati térfogatban bemértük egy 40 pg DNS-t tartalmazó küvettába. A vizsgálatban a DNáz-I-variáns végkoncentrációja a DNáz-I ELISA-vizsgálattal meghatározva körülbelül 26 nM volt. Ezt követően aktin jelenlétében vagy aktin nélkül mértük a DNáz-I-variánsok által okozott DNS hidrolízissebességét. A 3. és 4. ábrán látható százalékos aktivitást úgy számítottuk ki, hogy meghatároztuk a natív vagy variáns humán DNáz-I aktin jelenlétében mért DNS-hidrolizáló aktivitásának és az aktin nélküli DNShidrolizáló aktivitásnak az arányát, majd ezt az arányszámot megszoroztuk százzal.
A metilzöldvizsgálatban a fentiek szerint előállított, DNáz-I-variánsokat tartalmazó koncentrált tenyészet-felülúszókat aktin nélkül vagy 1000-szeres moláris feleslegben lévő aktin hozzáadásával B pufferben (25 mM HEPES, pH 7,5, 4 mM kalcium-klorid, 4 mM magnézium-klorid, 0,1% bovin-szérumalbumin, 0,01% thimerosal és 0,05% Tween 20) 16 órán keresztül, 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk. Az aktív enzim koncentrációját a Pulmozyme® standard görbéjével történő összehasonlítással állapítottuk meg. A variánsok „százalékos aktivitás”-a az aktin jelenlétében mért aktivitás és az aktin nélkül mért aktivitás arányának a százszorosára vonatkozik.
Ahogyan az a 3. és 4. ábrán látható, a natív humán DNáz-I DNS-hidrolizáló aktivitása aktin jelenlétében lényegesen csökken. Ehhez képest a natív humán DNáz-I különféle egy- és többcsoportos variánsai viszonylag rezisztensek az aktingátlással szemben, amit az is jelez, hogy a variánsok aktin jelenlétében nagyobb DNS-hidrolizáló aktivitással rendelkeznek, mint a natív humán DNáz-I.
III. Az aktinkötés ELISA-vizsgálata
A natív humán DNáz-I-nek és a DNáz-I-variánsoknak az immobilizált aktinhoz történő kötésének mérésére kifejlesztettünk egy mikrotiteralapú vizsgálatot. Először egy MaxiSorp lemez (Nunc, Inc., Naperville, Illinois, Amerikai Egyesült Államok) vájatait 16-24 órán keresztül, 4 °C hőmérsékleten bevontuk vájatonként 100 pl humán GC globulinnal (Calbiochem, La Jolla, Kalifornia, Amerikai Egyesült Államok) (10 pg/ml, a következő összetételű pufferben: 25 mM HEPES, 4 mM magnézium-klorid, 4 mM kalcium-klorid, pH 7,2); a humán GC-globulin egy aktinkötő protein [Goldschmidt-Clermont et al., BIOCHEM. J., 228, 471-477 (1985); McLeod et al., J. BIOL. CHEM., 264, 1260-1267 (1989); Houmeida et al., EUR. J. BIOCHEM., 203, 499-503 (1992)]. A GC-globulin eltávolítása után a felesleges reaktív helyeket vájatonként 200 pl C puffer (a C puffer ugyanaz, mint a fenti B puffer, azzal az eltéréssel, hogy a C puffer 0,5 mM adenozin-trifoszfátot is tartalmaz; amennyiben másképpen nem jelezzük, a következő lépések mindegyikében a C puffért használtuk vizsgálati hígítószerként) hozzáadásával blokkoltuk, majd a lemezt rázógépen, 1-2 órán keresztül, szobahőmérsékleten inkubáltuk. A következő inkubációs lépések mindegyikét egy órán keresztül, szobahőmérsékleten egy Mini Orbital Shaker (Bellco Biotechnology, Vineland, New Jersey, Amerikai Egyesült Államok) rázógépen hajtottuk végre. Az egyes lépések között a lemezt kiürítettük, és egy Microwash II (Skatron A/S, Norvégia) lemezmosó alkalmazásával 0,05% Tween 20-at tartalmazó foszfátpufferelt nát13
HU 222 665 Β1 rium-klorid-oldattal hatszor mostuk. A fentiek szerint előállított G-aktint a C pufferrel 50 pg/ml koncentrációra hígítottuk, majd minden egyes vájathoz hozzáadtuk a hígított G-aktin 100 μΐ-es mennyiségét. A lemezeket inkubáltuk és mostuk, majd a vájatokhoz hozzá- 5 adtuk előbb a Pulmozyme® különböző hígításainak 100 μΐ-nyi mennyiségét, ezt követően pedig a natív humán DNáz-I-et vagy variánsait tartalmazó sejttenyészet-táptalajt, majd a lemezeket inkubáltuk és mostuk. Végül minden egyes vájathoz hozzáadtuk egy antihu- 10 mán DNáz-I nyúl-poliklonálisantitest/torma-peroxidáz konjugátum 1/25 000 hígításának 100 μΐ-nyi mennyiségét (az eredeti törzsoldat koncentrációja 465 μg/ml volt). Inkubálás és mosás után vájatonként 100 μΐ színkifejlesztő reagens (Sigma Fást; o-fenilén-diamint és karbamid/hidrogén-peroxid tablettákat oldunk a gyártó használati utasításának megfelelően) hozzáadásával iniciáltuk, majd vájatonként 100 μΐ 2,25 M kénsavoldat hozzáadásával állítottuk le a színfejlődést. Rögzítettük a 492 nm hullámhossznál mért abszorbanciát, amelyet 20 ezt követően a vájatokhoz eredetileg hozzáadott DNázI-koncentrációjának függvényében ábrázoltunk. A natív humán DNáz-I és az aktinhoz kötődő variánsainak esetében szigmoid görbéket nyertünk; a görbéket nemlineáris regressziós analízissel [Marquardt, J. SOC. IN- 25 DÚST. APPL. MATH. 11, 431-441 (1963)] egy négyparaméteres egyenletnek megfelelően illesztettük; a görbék alapján minden egyes natív vagy variáns DNázI esetén kiszámítottuk a maximális jel félértékének eléréséhez szükséges koncentrációt, azaz az EC50-érté- 30 két. A natív humán DNáz-I és a variánsok molekulatömegét 37 000 daltonnak mértük.
Az egyes humán DNáz-I-variánsok relatív kötési affinitását úgy számítottuk ki, hogy a variáns EC50-értékét elosztottuk a natív humán DNáz-I-nek az ELISAvizsgálat során meghatározott EC50-értékével; az eredményeket az 5A-D. ábrákon mutatjuk be. Például ha a humán DNáz-I-variáns relatív kötési affinitását 5-ös értékre számítottuk ki, ez az érték azt jelenti, hogy a variáns EC50-értéke ötször nagyobb, mint a natív humán DNáz-I EC50-értéke. Más szavakkal: az ELISA-vizsgálatban a variáns aktinnal szembeni affinitása ötször kisebb, mint a natív humán DNáz-I-nek az aktinnal szembeni affinitása.
IV. Köpet kompakciós vizsgálata
Egy köpet-kompakciósvizsgálatot (WO 94/10567 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés) alkalmaztunk cisztikus fibrózisban szenvedő betegektől nyert 15 köpetek („CF köpet”) relatív viszkozitásának a mérésére; a méréseket natív humán DNáz-I-gyel és különböző DNáz-I-variánsokkal végzett inkubálás előtt és után hajtottuk végre. A CF-köpetet összekevertük egy DNáz-Imintával, ezt követően a keveréket 20 percen keresztül, szobahőmérsékleten inkubáltuk, majd a félszilárd oldatokat kapilláriscsövekbe töltöttük, és 20 percen keresztül 12 000xg érték mellett centrifugáltuk. A centrifügálás után megmértük az üledék magasságát, majd összehasonlítottuk az oldat és az üledék együttes magasságával. Ezeket a méréseket használtuk fel a köpet százalékos kompakciójának a kiszámításához. A százalékos kompakció értéke arányos a köpet viszkoelaszticitásának értékével.
A CF-köpet natív humán DNáz-I-gyel és humán DNáz-I aktinrezisztens variánsokkal végzett kezelése során meghatározott százalékos kompakcióértékeket a 6. ábrán mutatjuk be. Az eredmények azt jelzik, hogy a kompakciós vizsgálat szerint a humán DNáz-I aktinrezisztens variánsok hatékonyabban csökkentik a CFköpet viszkoelaszticitását, mint a natív humán DNáz-I.
SZEKVENCIÁK JEGYZÉKE
AZ 1. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 1. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le A1 a A1 a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn A1 a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val G1 u Ile Leu Ser 30
Arg Ty r Asp I le A1 a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr A1 a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p A1 a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
11 e Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a G1 y Me t Leu Leu Arg Gly Alá Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Alá I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 2. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 2. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Ly s I le Alá Al a Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly Al a Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp 11 e Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin As p Alá Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser Glu Pro Le u Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 As p Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Se r Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 3. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 3. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁS A:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Hi s Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val As p Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser 11 e Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg 11 e Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a 11 e Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 4. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 4. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys 11 e Al a Alá 5
Me t Ser Asn Alá Thr 20
Arg Tyr As p I le Alá 35
Thr Al a Va 1 Gly Ly s 50
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65
Phe Asn I le Gin Thr 10
Leu Val Ser Tyr I le 25
Leu Val Gin Glu Val 40
Leu Leu Asp Asn Leu 55
Val Va 1 Ser Glu Pro 70
Phe Gly Arg Thr Ly s 15
Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Asn Gin Asp Al a Pro 60
Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 As p Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cys Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu I le Asp Alá Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser 11 e Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg 11 e Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pr o Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp His Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
AZ 5. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI :
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 5. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn I le Gin Thr 10 Phe Gly Trp Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Va 1 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Va 1 Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 6. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 6. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys I le
1
Me t Ser Asn
Arg Tyr Asp
Thr Alá Val
Asp Thr Tyr
Al a Al a 5 Phe
Al a Thr 20 Leu
11 e Al a 35 Leu
Gly Ly s 50 Leu
Hi s Tyr 65 Va 1
Asn I1e Gin
Val Ser Tyr
Val Gin Glu
Leu Asp Asn
Val Ser Glu
Thr 10 Phe Gly
I le 25 Val Gin
Val 40 Arg Asp
Leu 55 Asn Gin
Pro Leu Gly
Tyr Thr Lys 15
I le Leu Ser 30
Ser Hi s Leu 45
Asp Al a Pro 60
Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
A1 a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
A1 a Pro Gly Asp A1 a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Alá I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 7. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 7. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s 11 e Al a Al a 5 Phe Asn I le Gin Thr 10 Phe Gly Gin Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Al a Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin As p Alá Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gin Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Asp Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Alá Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 8. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 8. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Asp Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Ph e Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Alá Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp G1 y Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 9. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 9. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s 11 e Al a Al a 5 Phe Asn I le Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Tyr Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
í 10 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cys Alá
200 205 210
Tyr Asp Arg 11 e Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 10. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 10. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu Lys 1 Ile Alá Alá Phe Asn 5 Ile
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val 35 Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Trp Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu 50 As p Asn Leu 55 As n Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65 Ser Glu Pro 70 Le u Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Alá Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Le u Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Lys
260
All. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi)All Leu Lys 1 . SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
11 e Alá Alá 5 Phe Asn I le Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I1e Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser His Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys 50 Leu Leu Al a Asn Leu 55 As n Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg G1 u Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg 11 e Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Le u Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 12. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 12, Leu Lys 1 . SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA: Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys 50 Leu Leu Lys Asn Leu 55 As n Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Le u Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Le u Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Se r Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cys Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Se r Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 13. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 13. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys I le Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15
Met Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Arg Asn Leu Asn Gin Asp Alá Pro 50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cys Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu Ile Asp Alá Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp G1 y Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Alá Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Alá
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 14. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 14. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Ly s Ile Al a Al a Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Le u Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu Tyr Asn Leu As n Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Va 1 Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pr o Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro G1 y Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser 11 e Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Ala Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Va 1 Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe As n Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 15. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 15. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Leu 1 Ly s I1e Ala Ala 5 Phe Asn He Gin
Me t Ser Asn Ala Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Ala 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Le u Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Ala 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Alá Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr G1 u Val Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Alá Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 16. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI :
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 16. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Leu Lys 1 I le Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I1e Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Va 1 Gly Lys 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Arg 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr G1 u Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pr o Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Alá
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Le u Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 17. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav (xi) A 17. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Ly s 11 e Al a Al a Phe Asn 11 e Gin Thr Phe Gly Glu Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu Asp Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Trp Val Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
65 70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Alá
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 18. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav
(xi) A 18. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn He Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
As p Thr Tyr His Tyr Val Alá Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Alá Va 1 As p Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Le u Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Met Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp His Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 19. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 19. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Alá Al a 5
Me t Ser Asn Al a Thr 20
Arg Tyr Asp Ile Al a 35
Thr Al a Val Gly Ly s 50
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65
Phe Asn I le Gin Thr 10
Leu Val Ser Tyr I1e 25
Leu Val Gin Glu Val 40
Leu Leu Asp Asn Leu 55
Val Glu Ser Glu Pro 70
Phe Gly Glu Thr Lys 15
Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Asn Gin Asp Al a Pro 60
Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá Ile Val Pro Leu Hi s Alá
125 130 135
Al a Pr o Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 20. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 20. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys Ile Al a Al a Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Ly s Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Alá Thr Pro Thr His Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 21. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 21. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁS A:
Leu Lys I le Alá Alá Phe Asn I le Gin Thr Phe G1 y G1 u Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Ly s Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Va l Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Alá Thr Pro Thr Hi s Cys Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 22. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 22. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu 1 Ly s Ile Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser His Leu 45
Thr Alá Val Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Alá Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Va 1 Va 1 Ser Arg Pro Leu Gly Asp Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val As p Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Alá Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg 11 e Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pro Va 1
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 23. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 23. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys 1 I le Alá Alá Phe Asn 5 11 e Gin Thr 10 Ph e Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Ser Tyr I le 25 Va 1 Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I1e Alá Leu Val 35 Gin Glu Val 40 Arg As p Ser Al a Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu 50 Arg Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Le u Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 24. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 24. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Va 1 Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Leu Arg Asn Leu 55 Asn Gin As p Alá Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Al a 65 Va 1 Va 1 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
A1 a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro A1 a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe A1 a Ile Val Pro Leu Hi s A1 a
125 130 135
A1 a Pro Gly Asp A1 a Val A1 a Glu Ile Asp A1 a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn A1 a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser A1 a Asp Thr Thr A1 a Thr Pro Thr Hi s Cy s A1 a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val A1 a Gly Me t Leu Leu Arg G1 y A1 a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser A1 a Leu Pro Phe Asn Phe Gin A1 a A1 a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu A1 a Gin A1 a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 25. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 25. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile A1 a A1 a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe G1 y Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn A1 a Thr Leu Va 1 Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr A1 a Val Gly Ly s Leu Leu Arg Asn Leu Asn G1 n Asp A1 a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Va 1 Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Alá Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Asp Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Va 1 Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe As n Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a G1 y Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe As n Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 26. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 26. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Al a Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu Arg Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Al a 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Alá Val As p Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a lle Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a lle Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Alá Glu lle Asp Alá Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
lle Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cys Al a
200 205 210
Tyr As p Arg lle Val Val Alá Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pr o Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Alá lle Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 27. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ : 260 amino
(B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: : lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA .: aminosav
(xi) A 27 . SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁS A:
Leu Ly s lle Al a Al a Phe Asn lle Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr lle Val Gin lle Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp lle Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Al a Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu Asp Asn Leu As n Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Al a Val Val Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pr o Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Se r Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 28. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 28. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Alá Al a 5
Me t Ser Asn Al a Thr 20
Arg Tyr Asp Ile Al a 35
Thr Al a Val Gly Ly s 50
As p Thr Tyr Hi s Tyr 65
Phe Asn Ile Gin Thr 10
Leu Val Ser Tyr Ile 25
Leu Val Gin Glu Val 40
Leu Leu As p Asn Leu 55
Val Va 1 Ser Glu Pro 70
Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Asp Ser Cy s Leu 45
Asn Gin As p Al a Pro 60
Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Se r Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pr o Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 29. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 29. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn 11 e Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Gin Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Va 1 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Alá Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t G1 y Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cys Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Alá Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 30. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 30. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys I le Alá Alá Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Cys
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val As p Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Ala Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 31. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 31. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁS A:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn Ala Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Lys
35 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Alá As p Thr Thr Al a Thr Pr o Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Alá Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Va 1
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 32. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI :
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 32. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly G1 u Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Arg
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val As p Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al e I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Va 1 Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 33. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 33. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁS A:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly G1 u Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val G1 n Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Cys Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Ph e Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 34. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D)TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 34. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Lys Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu As n Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Asp Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 35. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 35. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn I le Gin
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp 11 e Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Cy s Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 36. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 36. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys I le Alá Alá Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly Glu Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val I le Lys Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pr o Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Alá Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 37. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 37. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Lys Ly s Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg G1 u Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 38. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 38. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly G1 u Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Al a Leu Va 1 Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Arg Ly s Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pr o Asp Gin Va 1 Ser 90
Alá Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Alá Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Va 1 Alá Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 39. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 39. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys 1 Ile Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Tyr Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
A1 a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro A1 a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe A1 a I le Val Pro Leu Hi s A1 a
125 130 135
A1 a Pro Gly As p A1 a Val Alá Glu I le Asp A1 a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn A1 a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser 11 e Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser A1 a Asp Thr Thr Alá Thr Pro Thr Hi s Cy s A1 a
200 205 210
Tyr As p Arg 11 e Va 1 Val A1 a Gly Me t Leu Leu Arg Gly A1 a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser A1 a Leu Pro Phe Asn Phe Gin A1 a A1 a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Le u A1 a Gin A1 a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 40. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 40. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Ly s I le A1 a A1 a Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly Glu Thr Ly s
1 5 10 15
Me t Ser Asn A1 a Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le A1 a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr A1 a Val Gly Ly s Leu Cy s As p Asn Leu Asn Gin As p A1 a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pr o Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Pro Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro G1 y Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Le u As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe As n Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Se r Ser Ile Arg Leu Trp Th r Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Va 1 Al a G1 y Me t Leu Leu Arg Gly Alá Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Se r Asp Gin Leu Al a Gin Alá Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 41. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 41. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Alá Alá Phe Asn 5 Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Va 1 35 Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys Leu Lys 50 Asp Asn Leu 55 Asn Gin As p Alá Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val 65 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
A1 a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro A1 a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe A1 a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
A1 a Pro Gly Asp A1 a Val A1 a Glu Ile Asp A1 a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn A1 a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Alá Asp Thr Thr A1 a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val A1 a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Alá Leu Pro Ph e Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu A1 a Gin A1 a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 42. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI: (A) HOSSZ: 260 amino
(B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav (xi) A 42. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Me t Asp Asn Leu 55 As n Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pr o Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 As p Ser Tyr Tyr Tyr Asp As p Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg G1 u Phe Alá Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Alá
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pr o As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 43. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 43. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu Lys 1 Ile Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin
Met Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser His Leu 45
Thr Alá Val Gly Ly s 50 Leu Leu Cy s Asn Leu 55 Asn Gin Asp Alá Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser G1 u Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser 11 e Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Se r Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Alá I le Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 44. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI: (A) HOSSZ: 260 amino
(B)TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 44. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Leu Lys I le Alá Alá Phe Asn I le 1 5 Gin Thr 10 Phe Gly G1 u Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Alá Leu Val 35 Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu 50 Leu Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser 11 e Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 45. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 45. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu Lys 1 I1e Alá Al a 5 Phe Asn I le Gin
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp 11 e Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Ly s 50 Leu Leu Me t Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser G1 u Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Alá Leu Pro Phe As n Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Va 1
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 46. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 46. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu Lys 1 Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Le u Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Cy s Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a lle Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a lle Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Alá Val Al a Glu lle Asp Al a Leu Tyr Asp Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
lle Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg lle Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a lle Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 47. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 47. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys lle Al a Al a 5 Phe Asn lle Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr lle 25 Va 1 Gin lle Leu Ser 30
Arg Tyr As p I le Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Phe Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Va 1 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pr o Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Alá Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 48. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 48. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr As p Ile Al a Leu Val G1 n Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu Asp Asn Leu Ly s Gin Asp Al a Pro
50 55 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr Va 1 Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá I le Val Pro Leu His Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp I le Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 49. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 49. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys I le Al a Al a 5 Phe Asn 11 e Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Va 1 Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp 11 e Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Arg Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Aly As p Al a Va 1 Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Lys
260
AZ 50. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) AZ 50. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Ala Ala Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Ala Thr Leu Val Se r Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Ala Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Ala Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Trp Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Alu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro As p Ser Alá Leu Pro Phe Gin Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
AZ 51. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 51. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Se r Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Va 1 Gly Ly s Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Cy s Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Se r Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Se r Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pr o Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Lys
260
AZ 52. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 52. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Lys 65 Val Va 1 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Alá Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr Asp Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Alá Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
AZ 53. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 53. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Leu As p As n Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
As p Thr Tyr His Me t Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro G1 y Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Va 1 Val Al a G1 y Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Alá Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
AZ 54. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI: (A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 54. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys 1 I1e Alá Alá Phe Asn 5 I le Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I1e Alá Leu Val 35 Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser His Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu 50 Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Alá Pro 60
Asp Thr Tyr His Ser Val Val 65 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe As n Alá Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Alá Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
AZ 55. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 55. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn 11 e Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin Asp Al a Pro 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr 65 Va 1 Cy s Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp G1 y Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Alá Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Va 1 Al a G1 y Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
AZ 56. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav
(xi) AZ 56. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val As p Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Se r Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg G1 u Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Alá
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Se r Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Va 1 Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
AZ 57. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 57. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys 1 Ile Alá Alá Phe Asn 5 Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val 35 Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser His Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu 50 As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Alá Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val His Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
AZ 58. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D)TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 58. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Alá Pro 50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Met Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Alá
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
AZ 59. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) AZ 59. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Pro Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
A1 a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Le u Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Alá Val Al a G1 u I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn A1 a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro As p Ser A1 a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg 11 e Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro As p Ser A1 a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu A1 a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 60. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 60. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys I le Alá Alá Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15
Met Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser 20 25 30
Arg Tyr Asp I le Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu 35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Alá Pro 50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Arg Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cys Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 61. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 61. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Va 1 Ser Ser Glu Pro 70 Leu G1 y Arg As n Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Se r Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 62. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino
(B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav
(xi) A 62. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys I1e Ala Ala Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Met Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ly s Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Alu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Alu Val Arg Glu Phe Al a I le Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Alá Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Se r Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Se r Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 63. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 63. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Leu Lys 1 I1e Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Alá Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Me t Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 64. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 64. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Arg Glu Pro Le u Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr 95 Tyr Tyr As p Asp Gly 100 Cy s Glu Pro Cys Gly 105
Asn As p Thr Phe Asn 110 Arg Glu Pro Al a Ile 115 Va 1 Arg Phe Phe Ser 120
Arg Phe Thr Glu Val 125 Arg Glu Phe Alá Ile 130 Val Pro Leu Hi s Al a 135
Al a Pro Gly Asp Al a 140 Va 1 Alá Glu Ile Asp 145 Al a Leu Tyr As p Val 150
Tyr Leu Asp Val Gin 155 Glu Ly s Trp Gly Leu 160 Glu As p Val Me t Leu 165
Me t Gly Asp Phe Asn 170 Al a Gly Cy s Ser Tyr 175 Val Arg Pro Ser Gin 180
Trp Ser Ser Ile Arg 185 Leu Trp Thr Ser Pro 190 Thr Phe Gin Trp Leu 195
Ile Pro Asp Ser Al a 200 Asp Thr Thr Al a Thr 205 Pro Thr Hi s Cys Al a 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 215 Val Al a Gly Me t Leu 220 Leu Arg Gly Al a Va 1 225
Va 1 Pro Asp Ser Al a 230 Leu Pro Phe Asn Phe 235 Gin Al a Al a Tyr Gly 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Alá 245 Glu Val Me t Leu Lys 260 A 65. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI: (A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 65. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Ile Ser 250 As p Hi s Tyr Pro Val 255
Leu 1 Lys Ile Alá Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Al a Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a lle Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a lle Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Alá Glu lle Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
lle Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg lle Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Al a lle Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 66. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 66. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s lle Al a Al a 5 Phe Asn lle Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr lle 25 Va 1 Gin lle Leu Ser 30
Arg Tyr Asp lle Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Va 1 Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr 65 Va 1 Val Ser Cys Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Alá Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 67. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 67. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn I le Gin Thr 10 Phe Gly G1 u Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Va 1 Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Me t Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cys Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Alá Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Va 1
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 68. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 68. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr As p Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Cys Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 69. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 69. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Se r Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp G1 y Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Glu Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Ala Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Ala Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pr o As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Ala Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 70. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 70. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys Ile Al a Al a Phe Asn I le Gin Thr Phe Gly G1 u Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Va 1 Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg As n Ser
65 70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Gly Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Asp Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu Ile Asp Alá Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 71. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI: (A) HOSSZ: 260 amino
(B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 71. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Va 1 Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Hi s Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Alá Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I 1 e Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 72. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 72. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Thr 10 Phe G1 y
Ile 25 Val Gin
Val 40 Arg Asp
Leu 55 Asn Gin
Pro Leu Gly
Glu Thr Lys 15
Ile Leu Ser 30
Ser His Leu 45
Asp Alá Pro 60
Arg Asn Ser 75
Leu Ly s Ile
1
Me t Ser Asn
Arg Tyr Asp
Thr Al a Val
Asp Thr Tyr
Al a Al a 5 Phe
Al a Thr 20 Leu
Ile Al a 35 Leu
Gly Ly s 50 Leu
Hi s Tyr 65 Val
Asn Ile Gin
Val Ser Tyr
Val Gin Glu
Leu Asp Asn
Val Ser Glu
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Ly s Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Va 1 Al a Gly Me t Leu Le u Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 73. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 73. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Leu I le Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu I le Asp Alá Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Va 1 Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Alá Val
215 220 225
Va 1 Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr G1 y
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 74. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 74. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s I le Al a Al a 5 Phe Asn 11 e Gin Thr 10 Phe G1 y Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Va 1 Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp I le Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Me t Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Le u Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a G1 y Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Se r Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Val Al a G1 y Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Se r Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 75. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 75. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Asp Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Va 1 Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe As n Arg Glu Pro Gin I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a Glu I le As p Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Se r Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg I le Val Va 1 Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Se r Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Alá I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 76. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 76. Leu Lys 1 . SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Gly Glu Thr Ly s 15
I le Alá Al a 5 Phe Asn I le Gin Thr 10 Phe
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr I le 25 Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Tyr Asp 11e Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser G1 u Pro Leu G1 y Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Arg Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Alá Glu Ile As p Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Va 1 Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser G1 n
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Al a G1 y Me t Leu Le u Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Se r Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 77. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D)TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 77. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Alá Alá Phe 5 Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu 20 Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu 35 Val Gin Glu Va 1 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys Leu 50 Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val 65 Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Trp Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Alá Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Alá Alá Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 78. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 78. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
As p Thr Tyr Ile Tyr 65 Val Va 1 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Tyr Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Alá
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr G1 y
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Alá Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 79. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 79. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Al a Al a 5
Me t Ser Asn Al a Thr 20
Arg Tyr Asp Ile Al a 35
Thr Alá Val Gly Ly s 50
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65
Phe Asn Ile Gin Thr 10
Leu Val Ser Tyr Ile 25
Leu Val Gin Glu Val 40
Leu Leu Asp Asn Leu 55
Val Val Ser Glu Pro 70
Phe Gly Glu Thr Lys 15
Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Asp Ser Asn Leu 45
Asn Gin Asp Al a Pro 60
Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr AIu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu G1 u Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Va 1
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 80. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 80. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu 1 Lys Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin Thr Al a Pro 60
As p Thr Tyr His Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Se r Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Alá Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Asp Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr G1 y
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 81. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 81. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Al a Al a 5
Me t Ser Asn Al a Thr 20
Arg Tyr Asp Ile Al a 35
Thr Al a Val Gly Ly s 50
As p Thr Tyr Asn Tyr 65
Phe Asn Ile Gin Thr 10
Leu Val Ser Tyr Ile 25
Leu Val Gin Glu Val 40
Leu Leu As p Asn Leu 55
Thr Val Ser Glu Pro 70
Phe Gly Glu Thr Lys 15
Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Asn Gin As p Al a Pro 60
Leu Gly Arg As n Ser 75
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Alu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cys Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Va 1
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Ile Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Va 1
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 82. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI :
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 82 Leu Lys 1 . SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Ile Alá Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Alá Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Alá 35 Leu Va 1 Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys 50 Leu Leu As p As n Le u 55 Asn G1 n Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Asn Val Thr Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Va 1 Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile As p Al a Leu Tyr Asp Va 1
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Va 1 Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 83. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMYŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 83. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe G1 y Glu Thr Ly s 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr 65 Asn Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr 95 Tyr Tyr As p Asp Gly 100 Cy s Glu Pro Cys Gly 105
Asn Asp Thr Phe Asn 110 Arg Glu Pro Al a I le 115 Va 1 Arg Phe Phe Ser 120
Arg Phe Thr Glu Val 125 Arg Glu Phe Al a I le 130 Val Pro Leu Hi s Al a 135
Al a Pro Gly As p Al a 140 Val Al a Glu I le As p 145 Al a Leu Tyr Asp Val 150
Tyr Leu As p Val Gin 155 Glu Ly s Trp Gly Leu 160 Glu Asp Val Me t Leu 165
Me t Gly Asp Phe Asn 170 Al a Gly Cys Ser Tyr 175 Val Arg Pro Ser Gin 180
Trp Ser Ser I le Arg 185 Leu Trp Thr Ser Pro 190 Thr Phe Gin Trp Leu 195
I le Pro Asp Ser Al a 200 Asp Thr Thr Al a Thr 205 Pro Thr Hi s Cy s Al a 210
Tyr As p Arg I le Va 1 215 Val Al a Gly Me t Leu 220 Leu Arg Gly Al a Val 225
Val Pro As p Ser Al a 230 Leu Pro Phe Asn Phe 235 Gin Al a Al a Tyr Gly 240
Leu Ser Asp Gin Leu 245 Al a Gin Al a I le Ser 250 Asp Hi s Tyr Pro Val 255
Glu Val Met Leu Lys 260
A 84. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 84. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s 11 e Al a Al a 5 Phe Asn I1e Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Va 1 Ser Tyr I le Val Gin I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Leu Asp Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr Val Asn Ser Thr Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr 95 Tyr Tyr As p Asp Gly 100 Cy s Glu Pro Cy s Gly 105
Asn As p Thr Phe Asn 110 Arg Glu Pro Al a Ile 115 Val Arg Phe Phe Ser 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 125 Arg Glu Phe Al a Ile 130 Val Pro Le u Hi s Al a 135
Al a Pro Gly Asp Al a 140 Va 1 Al a Glu Ile As p 145 Al a Leu Tyr Asp Val 150
Tyr Leu As p Val Gin 155 Glu Ly s Trp Gly Leu 160 Glu Asp Val Me t Leu 165
Me t Gly Asp Phe Asn 170 Al a Gly Cy s Ser Tyr 175 Val Arg Pro Ser Gin 180
Trp Ser Ser Ile Arg 185 Leu Trp Thr Ser Pro 190 Thr Phe Gin Trp Leu 195
Ile Pro Asp Ser Al a 200 As p Thr Thr Al a Thr 205 Pro Thr Hi s Cy s Alá 210
Tyr As p Arg Ile Val 215 Val Al a Gly Me t Leu 220 Leu Arg Gly Al a Val 225
Val Pro Asp Ser Al a 230 Leu Pro Phe Asn Phe 235 Gin Alá Al a Tyr Gly 240
Leu Ser Asp Gin Leu 245 Al a Gin Al a I le Ser 250 Asp Hi s Tyr Pro Val 255
Glu Val Me t Leu Lys 260
A 85. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 85. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin Glu Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Val Gly Lys 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Va 1 Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Asn Tyr Thr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly As p Al a Val Al a G1 u Ile As p Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr As p Arg Ile Va 1 Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pr o Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 86. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav
(xi) A 86. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁS A:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Met Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Alu Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Asn Gin Asp Alá Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Le u Gly Arg As n Ser
65 70 75
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Al a Val As p Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Alá lle Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a lle Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a G1 u lle Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser lle Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
lle Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe As n Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a lle Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 87. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 87. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Leu Lys 1 lle Alá Alá Phe Asn 5 lle
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val 20 Se r Tyr lle 25 Val Gin lle Leu Ser 30
Arg Tyr Asp lle Alá Leu Val 35 Gin Glu Va 1 40 Arg As p Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu 50 Asp Asn Leu 55 Asn Gin As p Al a Pro 60
Asp Thr Tyr His Glu Val Val 65 Ser Glu Pro 70 Le u Gly Arg Asn Ser 75
100
HU 222 665 Β1
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cys Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cys Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Alá Leu Pro Phe Asn Phe Gin Alá Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 88. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav
(xi) A 88. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Ly s
1 5 10 15
Met Ser Asn Alá Thr Leu Va 1 Ser Tyr Ile Va 1 Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Al a Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Arg Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Alá Val Val Ser Arg Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
101
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Alá Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pr o Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro As p Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg G1 y Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser As p Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 89. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 89. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Al a Alá 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Val Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Va 1 Gin Glu Val 40 Arg As p Ser Hi s Leu 45
Thr Al a Arg Gly Ly s 50 Leu Leu Asp Asn Leu 55 Asn Gin Asp Al a Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65 Val Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg Asn Ser 75
102
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Alá
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a G1 u Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I 1 e Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Alá Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 90. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI :
(A) HOSSZ: 260 amino
(B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav
(xi) A 90. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg As p Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Asn As p Asn Leu Asn Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Va 1 Va 1 Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
103
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu As p Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Alá Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu Glu As p Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cys Ser Tyr Va 1 Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro As p Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 91. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 91. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Al a Val Gly Ly s Leu Arg As p Asn Leu Asn Gin Asp Al a Pro
50 55 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
65 70 75
104
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Va 1 Ser 90
Ala Val As p Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Ala Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Ala Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Ala Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe As n Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Le u Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 92. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI :
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 92. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Thr 10 Phe Gly
Ile 25 Val Gin
Val 40 Arg Asp
Leu 55 Cy s Gin
Pro 70 Leu G1 y
Glu Thr Lys 15
Ile Leu Ser 30
Ser Hi s Leu 45
Asp Ala Pro 60
Arg Asn Ser 75
Al a Al a 5 Phe
Al a Thr 20 Leu
Ile Ala 35 Leu
Gly Ly s 50 Leu
Hi s Tyr 65 Val
Asn I1e G1n
Val Ser Tyr
Val Gin Glu
Leu Asp Asn
Val Ser Glu
Leu Ly s Ile
1
Me t Ser Asn
Arg Tyr Asp
Thr Al a Val
As p Thr Tyr
105
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe As n Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Alá I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le As p Alá Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe As n Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Se r Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Va 1 Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Alá Tyr G1 y
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Lys
260
A 93. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 93. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu 1 Lys 11 e Al a Al a 5
Me t Ser Asn Al a Thr 20
Arg Tyr Asp I le Al a 35
Thr Alá Val Gly Ly s 50
Asp Thr Tyr Hi s Tyr 65
Phe Asn I le Gin Thr 10
Leu Val Ser Tyr I1e 25
Leu Val Gin Glu Val 40
Leu Leu Asp Asn Leu 55
Val Val Ser Glu Pro 70
Phe Gly Glu Thr Lys 15
Val Gin I le Leu Ser 30
Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Phe Gin Asp Al a Pro 60
Le u Gly Arg Asn Ser 75
106
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Va 1 Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a I le Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Al a I le Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu I le Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu As p Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe As n Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser I le Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
I le Pro Asp Ser Al a As p Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg I le Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Alá Leu Pro Phe Asn Phe G1 n Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser As p Gin Leu Al a Gin Al a I le Ser Asp Hi s Tyr Pr o Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 94. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 94. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Ly s I le Al a Al a Phe Asn I le Gin Thr Phe G1 y Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Al a Thr Leu Val Ser Tyr I le Val Glu I le Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp I le Al a Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Ly s Gin Asp Al a Pro
50 55 60
As p Thr Tyr Hi s Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
107
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn Asp Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Val Arg Glu Phe Al a Ile Val Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr Asp Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly As p Phe Asn Alá Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Alá Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Va 1
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Va 1 Me t Leu Ly s
260
A 95. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA : aminosav
(xi) A 95. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEIRASA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu Arg Gin As p Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser
70 75
108
HU 222 665 Bl
Tyr Lys Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr Asp Asp Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Va 1 Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg Glu Phe Alá Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pro Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Ly s Trp Gly Leu Glu Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t Gly Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Alá Asp Thr Thr Alá Thr Pro Thr Hi s Cy s Alá
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Al a Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Ly s
260
A 96. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI:
(i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 96. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys Ile Alá Alá Phe Asn Ile Gin Thr Phe Gly Glu Thr Lys 15 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser 20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Glu Glu Val Arg Asp Ser His Leu 35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu Asp Asn Leu Trp Gin Asp Alá Pro 50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Ser Glu Pro Leu Gly Arg Asn Ser 65 70 75
109
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Alá Val Asp Ser Tyr 95 Tyr Tyr Asp Asp Gly 100 Cy s Glu Pro Cy s Gly 105
Asn As p Thr Phe Asn 110 Arg Glu Pro Alá Ile 115 Va 1 Arg Phe Phe Ser 120
Arg Phe Thr Glu Val 125 Arg Glu Phe Al a Ile 130 Va 1 Pro Leu Hi s Alá 135
Al a Pro Gly Asp Al a 140 Val Al a Glu Ile Asp 145 Al a Leu Tyr As p Val 150
Tyr Leu Asp Val Gin 155 Glu Lys Trp Gly Leu 160 Glu As p Va 1 Me t Leu 165
Me t Gly Asp Phe Asn 170 Al a Gly Cy s Ser Tyr 175 Val Arg Pro Ser Gin 180
Trp Ser Ser Ile Arg 185 Leu Trp Thr Ser Pro 190 Thr Phe Gin Trp Leu 195
Ile Pro As p Ser Al a 200 As p Thr Thr Al a Thr 205 Pro Thr Hi s Cy s Al a 210
Tyr Asp Arg I le Val 215 Val Alá Gly Me t Leu 220 Leu Arg Gly Alá Val 225
Val Pro Asp Ser Al a 230 Leu Pro Phe Asn Phe 235 Gin Al a Al a Tyr Gly 240
Leu Ser Asp Gin Leu Alá Gin Alá 245 Glu Val Me t Leu Lys 260 A 97. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI: (A) HOSSZ: 260amino (B) TÍPUS: aminosav (D) TOPOLÓGIA: lineáris (ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 97. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA: Ile Ser 250 Asp Hi s Tyr Pro Val 255
Leu 1 Ly s Ile Al a Al a 5 Phe Asn Ile Gin Thr 10 Phe Gly Glu Thr Lys 15
Me t Ser Asn Al a Thr 20 Leu Val Ser Tyr Ile 25 Va 1 Gin Ile Leu Ser 30
Arg Tyr Asp Ile Al a 35 Leu Val Gin G1 u Val 40 Arg Asp Ser Hi s Leu 45
Thr Alá Val Gly Ly s 50 Leu Leu As p Asn Leu 55 As n Gin As p Alá Pro 60
Asp Thr Tyr Hi s Pro 65 Va 1 Val Ser Glu Pro 70 Leu Gly Arg As n Ser 75
110
HU 222 665 Bl
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr Arg 85 Pro As p Gin Va 1 Ser 90
Al a Val Asp Ser Tyr Tyr Tyr As p As p Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
95 100 105
Asn As p Thr Phe Asn Arg Glu Pro Al a Ile Val Arg Phe Phe Ser
110 115 120
Arg Phe Thr Glu Va 1 Arg G1 u Phe Al a Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
125 130 135
Al a Pr o Gly Asp Al a Val Al a Glu Ile Asp Al a Leu Tyr As p Val
140 145 150
Tyr Leu Asp Val Gin Glu Lys Trp Gly Leu G1 u Asp Val Me t Leu
155 160 165
Me t G1 y Asp Phe Asn Al a Gly Cy s Ser Tyr Val Arg Pro Ser Gin
170 175 180
Trp Ser Ser Ile Arg Leu Trp Thr Ser Pro Thr Phe Gin Trp Leu
185 190 195
Ile Pro Asp Ser Al a Asp Thr Thr Al a Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
200 205 210
Tyr Asp Arg Ile Val Val Alá Gly Me t Leu Leu Arg Gly Al a Val
215 220 225
Val Pro Asp Ser Al a Leu Pro Phe Asn Phe Gin Al a Al a Tyr Gly
230 235 240
Leu Ser Asp Gin Leu Al a Gin Al a Ile Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
245 250 255
Glu Val Me t Leu Lys
260
A 98. SZÁMÚ SZEKVENCIA ADATAI: (i) A SZEKVENCIA JELLEMZŐI:
(A) HOSSZ: 260 amino (B) TÍPUS: aminosav
(D) TOPOLÓGIA: lineáris
(ii) A MOLEKULA TÍPUSA: aminosav (xi) A 98. SZÁMÚ SZEKVENCIA LEÍRÁSA:
Leu Lys I1e Ala Ala Phe Asn Ile G1 n Thr Phe Gly Glu Thr Lys
1 5 10 15
Me t Ser Asn Alá Thr Leu Val Ser Tyr Ile Val Gin Ile Leu Ser
20 25 30
Arg Tyr Asp Ile Alá Leu Val Gin Glu Val Arg Asp Ser Hi s Leu
35 40 45
Thr Alá Val Gly Lys Leu Leu As p Asn Leu As n Gin Asp Al a Pro
50 55 60
Asp Thr Tyr His Tyr Val Val Asn Glu Thr Leu Gly Arg As n Ser
70 75
111
HU 222 665 Β1
Tyr Ly s Glu Arg Tyr 80 Leu Phe Val Tyr
Al a Val As p Ser Tyr 95 Tyr Tyr Asp As p
Asn Asp Thr Phe Asn 110 Arg Glu Pro Al a
Arg Phe Thr Glu Val 125 Arg Glu Phe Al a
Al a Pro Gly Asp Al a 140 Val Alá Glu Ile
Tyr Leu Asp Val Gin 155 Glu Ly s Trp Gly
Me t Gly Asp Phe Asn 170 Al a Gly Cy s Ser
Trp Ser Ser Ile Arg 185 Leu Trp Thr Ser
Ile Pro Asp Ser Al a 200 Asp Thr Thr Al a
Tyr Asp Arg Ile Va 1 215 Val Al a Gly Me t
Val Pro Asp Ser Al a 230 Leu Pro Phe Asn
Leu Ser Asp G1 n Leu 245 Al a Gin Al a Ile
Glu Va 1 Me t Leu Lys
260
Arg 85 Pro Asp Gin Val Ser 90
Gly Cy s Glu Pro Cy s Gly
100 105
Ile Val Arg Phe Phe Ser
115 120
Ile Va 1 Pro Leu Hi s Al a
130 135
As p Al a Leu Tyr Asp Val
145 150
Leu Glu Asp Val Me t Leu
160 165
Tyr Val Arg Pro Ser Gin
175 180
Pro Thr Phe Gin Trp Leu
190 195
Thr Pro Thr Hi s Cy s Al a
205 210
Leu Leu Arg G1 y Alá Val
220 225
Phe Gin Alá Al a Tyr Gly
235 240
Ser Asp Hi s Tyr Pro Val
250 255
SZABADALMI IGÉNYPONTOK

Claims (10)

1. Humán DNáz-I aktinrezisztens variánsa, ahol az említett variáns legalább egy aminosavszubsztitúciót tartalmaz az alábbiak közül: E13A, E13H, E13R, E13W, E13Y, H44A, H44D, H44Y, H44W, H44C, H44Q, H44N, H44E, L45C, L45K, L45R, V48C, V48K, V48R, G49C, G49I, G49K, G49R, G49Y, L52C, L52K, L52M, L52N, L52R, D53A, D53K, D53R, D53Y, D53C, D53L, D53M, N56C, N56F, N56K, N56R, N56W, D58T, H64N, Y65A, Y65R, Y65W, Y65C, Y65K, Y65M, Y65S, Y65N, Y65E, Y65P, V66T, V66N, V67A, V67E, V67K, V67C, V67D, V67H, V67M, V67P, V67R, V67S, V67T, V67N, S68K, S68R, S68M, S68N, E69K, E69R, E69A, E69C, E69M, E69T, P70T, S94N, Y96T, A114C, A114E, A114G, A114H, A114K, Al 14L, Al 14M, Al 14Q, Al 14R, Al 14W és Al 14Y.
2. Az 1. igénypont szerinti variáns, ahol a legalább egy aminosavszubsztitúció az alábbiak közül kerül ki : E13A, E13H, E13R, E13W, E13Y, H44A, G49R, D53K, D53R, D53K, D53Y, D53A, D53C, N56R, Y65A, Y65R, Y65W, V67E, V67K, E69K, E69R, A114G ésA114H.
3. A 1. igénypont szerinti variáns, ahol a legalább egy aminosavszubsztitúció az alábbiak közül kerül ki: H44A:D53R:Y65A, H44A:Y65A:E69R, D53R: Y65A, D53R:E69R, S94N: Y96T, V67N:E69T, Y65N: V67T és H64N: V66T.
4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti variáns, amelynek legalább 90% azonossága van a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájával.
5. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti variáns, amelynek legalább 95% azonossága van a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájával.
112
HU 222 665 Bl
6. Humán DNáz-I aktinrezisztens variánsa, ahol az említett variáns a natív humán DNáz-I aminosavszekvenciájával és legalább egy aminosavszubsztitúcióval bír az alábbiak közül: E13A, E13H, E13R, E13W, E13Y, H44A, H44D, H44Y, H44W, H44C, H44Q, H44N, H44E, L45C, L45K, L45R, V48C, V48K, V48R, G49C, G49I, G49K, G49R, G49Y, L52C, L52K, L52M, L52N, L52R, D53A, D53K, D53R, D53Y, D53C, D53L, D53M, N56C, N56F, N56K, N56R, N56W, D58T, H64N, Y65A, Y65R, Y65W, 10 Y65C, Y65K, Y65M, Y65S, Y65N, Y65E, Y65P, V66T, V66N, V67A, V67E, V67K, V67C, V67D, V67H, V67M, V67P, V67R, V67S, V67T, V67N, S68K, S68R, S68M, S68N, E69K, E69R, E69A, E69C, E69M, E69T, P70T, S94N, Y96T, A114C, A114E, 15
A114G, A114H, A114K, A114L, A114M, A114Q, A114R, A114W és A114Y.
7. A 6. igénypont szerinti variáns, ahol a legalább egy aminosavszubsztitúció az alábbiak közül kerül ki: E13A,
5 E13H, E13R, E13W, E13Y, H44A, G49R, D53K, D53R, D53K, D53Y, D53A, D53C, N56R, Y65A, Y65R, Y65W, V67E, V67K, E69K, E69R, A114G és A114H.
8. A 6. igénypont szerinti variáns, ahol a legalább egy aminosavszubsztitúció az alábbiak közül kerül ki: H44A:D53R:Y65A, H44A:Y65A:E69R, D53R:Y65A, D53R:E69R, S94N: Y96T, V67N:E69T, Y65N: V67T és H64N: V66T.
9. Izolált nukleinsav, amely a humán DNáz-I valamely, az 1-8. igénypontok bármelyike szerinti aktinrezisztens variánsát kódolja.
113
HU 222 665 Β1
Int. Cl.7: C 12 N 15/55
10 20 30 40 50
LKIAAFNIQTFGETKMSNATLVSYIVQILSRYDIALVQEVRDSHLTAVGK
60 70 80 90 100
LLDNLNQDAPDTYHYWSEPLGRNSYKERYLFVYRPDQVSAVDSYYYDDG
110 120 130 140 150
CEPCGNDTFNREPAIVRFFSRFTEVREFAIVPLHAAPGDAVAEIDALYDV
160 170 180 190 200
YLDVQEKWGLEDVMLMGDFNAGCSYVRPSQWSSIRLWTSPTFQWLIPDSA
210 220 230 240 250
DTTATPTHCAYDRIWAGMLLRGAWPDSALPFNFQAAYGLSDQLAQAIS
HU9702147A 1995-02-24 1996-02-21 Humán DNáz I variánsok HU222665B1 (hu)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/US1995/002366 WO1996026278A1 (en) 1995-02-24 1995-02-24 HUMAN DNase I VARIANTS
US54052795A 1995-10-10 1995-10-10
PCT/US1996/002421 WO1996026279A1 (en) 1995-02-24 1996-02-21 Human dnase i variants

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP9702147A2 HUP9702147A2 (hu) 1999-07-28
HUP9702147A3 HUP9702147A3 (en) 1999-09-28
HU222665B1 true HU222665B1 (hu) 2003-09-29

Family

ID=26789529

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9702147A HU222665B1 (hu) 1995-02-24 1996-02-21 Humán DNáz I variánsok

Country Status (20)

Country Link
EP (2) EP1980618A2 (hu)
JP (1) JP4549439B2 (hu)
AR (1) AR003926A1 (hu)
AT (1) ATE397073T1 (hu)
AU (1) AU695863B2 (hu)
BR (1) BR9607328A (hu)
CA (1) CA2211413C (hu)
DE (1) DE69637548D1 (hu)
DK (1) DK0854927T3 (hu)
ES (1) ES2308775T3 (hu)
HU (1) HU222665B1 (hu)
IL (1) IL117218A (hu)
NO (1) NO326616B1 (hu)
NZ (1) NZ334762A (hu)
PL (1) PL184951B1 (hu)
RO (1) RO118886B1 (hu)
SI (1) SI9620043A (hu)
SK (1) SK284191B6 (hu)
TR (1) TR199700842T1 (hu)
WO (1) WO1996026279A1 (hu)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6391607B1 (en) * 1996-06-14 2002-05-21 Genentech, Inc. Human DNase I hyperactive variants
US20150010527A1 (en) * 2012-02-01 2015-01-08 Protalix Ltd. Dnase i polypeptides, polynucleotides encoding same, methods of producing dnase i and uses thereof in therapy
US10988745B2 (en) 2013-10-31 2021-04-27 Resolve Therapeutics, Llc Therapeutic nuclease-albumin fusions and methods
CN104131093B (zh) * 2014-07-23 2015-12-09 哈尔滨工程大学 DNA蛋白结合位点的DNase高通测序检测信号处理方法
EP3240896A1 (en) 2015-01-04 2017-11-08 Protalix Ltd. Modified dnase and uses thereof
WO2022074656A1 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Protalix Ltd. Long-acting dnase

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4511502A (en) 1982-12-22 1985-04-16 Genentech, Inc. Purification and activity assurance of precipitated heterologous proteins
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
WO1987005330A1 (en) 1986-03-07 1987-09-11 Michel Louis Eugene Bergh Method for enhancing glycoprotein stability
DE68929551T2 (de) 1988-12-23 2008-03-06 Genentech, Inc., South San Francisco Menschliche DNase
US5464817A (en) * 1990-04-11 1995-11-07 Brigham And Women's Hospital Method for reducing the viscosity of pathological mucoid airway contents in the respiratory tract comprising administering actin-binding compounds with or without DNASE I
US5279823A (en) 1992-06-08 1994-01-18 Genentech, Inc. Purified forms of DNASE
ATE155581T1 (de) 1992-11-02 1997-08-15 Genentech Inc Verdichtungsprüfung zur bewertung einer therapie für eine atmungskrankheit
CA2210871C (en) * 1995-02-24 2009-04-07 Genentech, Inc. Human dnase i variants

Also Published As

Publication number Publication date
EP0854927B1 (en) 2008-05-28
NO973877L (no) 1997-10-24
AU695863B2 (en) 1998-08-27
ATE397073T1 (de) 2008-06-15
JP4549439B2 (ja) 2010-09-22
SK114897A3 (en) 1998-03-04
BR9607328A (pt) 1997-12-30
SK284191B6 (sk) 2004-10-05
TR199700842T1 (xx) 1998-01-21
WO1996026279A1 (en) 1996-08-29
PL322002A1 (en) 1998-01-05
HUP9702147A2 (hu) 1999-07-28
DK0854927T3 (da) 2008-09-08
RO118886B1 (ro) 2003-12-30
AR003926A1 (es) 1998-09-30
SI9620043A (sl) 1998-06-30
IL117218A0 (en) 1996-06-18
DE69637548D1 (de) 2008-07-10
EP1980618A2 (en) 2008-10-15
AU5026396A (en) 1996-09-11
NO973877D0 (no) 1997-08-22
PL184951B1 (pl) 2003-01-31
JPH11503004A (ja) 1999-03-23
NZ334762A (en) 2000-10-27
ES2308775T3 (es) 2008-12-01
EP0854927A1 (en) 1998-07-29
IL117218A (en) 2004-06-01
CA2211413C (en) 2010-06-22
HUP9702147A3 (en) 1999-09-28
NO326616B1 (no) 2009-01-19
CA2211413A1 (en) 1996-08-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US6348343B2 (en) Human DNase I variants
US7407785B2 (en) Human DNase I hyperactive variants
HU222665B1 (hu) Humán DNáz I variánsok
EP0811068B1 (en) HUMAN DNase I VARIANTS
JP4624380B2 (ja) ヒトｄｎアーゼ変異体
JP2009060900A (ja) ヒトｄｎアーゼｉ変異体
NZ505985A (en) Human DNase I variants with a lower binding affinity for actin that native human dnase

Legal Events

Date Code Title Description
HFG4 Patent granted, date of granting

Effective date: 20030724

MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees