SE460907B - Humanmyelomcellinje, komposition innehaallande saadana celler, samt foerfarande foer cellinjens framstaellning - Google Patents
Humanmyelomcellinje, komposition innehaallande saadana celler, samt foerfarande foer cellinjens framstaellningInfo
- Publication number
- SE460907B SE460907B SE8106528A SE8106528A SE460907B SE 460907 B SE460907 B SE 460907B SE 8106528 A SE8106528 A SE 8106528A SE 8106528 A SE8106528 A SE 8106528A SE 460907 B SE460907 B SE 460907B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- cell line
- cell
- human
- cells
- hybrid
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
- C12N5/12—Fused cells, e.g. hybridomas
- C12N5/16—Animal cells
- C12N5/163—Animal cells one of the fusion partners being a B or a T lymphocyte
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
460
907
2
måste bevara båda de mänskliga kromosomer, som bär de om-
lagrade generna för de mänskliga lätta och tunga immuno-
globulinkedjorna, för att vara effektiva. Det är därför
svårt att få arthybridomer, som avsöndrar mänskliga anti-
kroppar.
Det är fördelaktigt att tillhandahålla en hybridom-
cell bildad genom hopsmältning av en människomyelomcell med
en människolymfocyt. En sådan hybridomcell kan producera
mänskliga antikroppar med mindre risk för chock vid upprepad
injektion i en människa. Mänskliga myelomceller smälter
vanligen inte väl ihop med mänskliga lymfocyter.
Det är ett syfte med föreliggande uppfinning att
erbjuda en mänsklig myelomcellinje, som är stabil, kan kulti-
veras och subkultiveras i obegränsad omfattning samt är i
stånd till hybridisering med mänskliga lymfocyter och med
lymfocyter från andra djur för bildning av stabila hop-
smälta cellhybrider.
Det är ett annat syfte med föreliggande uppfin-
ning att erbjuda ett förfarande för framställning av hybrid-
om av mänskliga myelomceller, vilka hybridom är i stånd att
utsöndra användbara antikroppar, som kan accepteras av det
mänskliga immunsystemet.
Det är också ett syfte med föreliggande uppfin-
ning att erbjuda ett förfarande för framställning av anti-
kroppar för användning vid behandling av sjukdomar hos män-
niskor, vilka antikroppar är acceptabla för det mänskliga
immunsystemet.
I enlighet med uppfinningen avses en komposition
innefattande en stabil kontinuerlig mänsklig myelomcell-
linje, vilken är i stånd till hybridflxnfing med antikropps-
producerande celler från människor och andra djur, vilken
är en mutant av mänskliga B-celler GM 1500 samt vilken har
brist pà hypoxantin-fosforibosyltransferas (HPRT).
I en utföringsform av uppfinningen erbjuds förfar-
anden för framställning av hybridceller under användning av
den stabila, HPRT-deficienta mänskliga myelomcellinjen en-
ligt uppfinningen.
460 907
3
En annan utföringsform avser förfaranden för fram-
ställning av antikroppar under användning av dessa hybrid-
celler.
Uppfinningen avser bl.a. förfaranden för framställ-
ning av nya cellinjer, vilka är genetiskt stabila, kan kulti-
veras och subkultiveras i obegränsad omfattning samt produ-
cerar stora mängder antikroppar mot virus, tumörer och främ-
mande ämnen och deras antigeniska determinanter. Dessa
cellinjer är hopsmälta cellhybrider av (a) en stabil, HPRT-
deficient mänsklig myelomcellinje, d.v.s. en malign
cellinje härrörande fràn en primär tumör i benmärgen, och
(b) antikroppsproducerande lymfocyter, såsom sådana frán
mjälten eller lymfnoderna, eller periferíella lymfocyter.
En särskilt föredragen cellinje är en hopsmält cellhybríd
mellan mänskliga periferiella lymfocyter eller mjältceller
och mänskliga myelomceller. Dessa cellinjer kan bibehàllas
i huvudsak obegränsat i ett kulturmedium, såsom hypoxantin-
aminopterin-tymidin-(HAT)-selektivt medium, och kan fort-
sätta under obegränsad tid att producera antikroppar speci-
fika för antigeniska determinanter.
De enligt uppfinningen använda myelomcellerna häntk-
de fråiden mänskliga B-cellinjen GM 1500, vilken togs från
en patient med multipelt myelom. Den mänskliga B-cellinjen
GM 1500 är tillgänglig från Human Genetic Mutant Cell
Repository, Institute for Medical Research, Camden, New
Jersey.
Myelomcellerna GM 1500 behandlades med etylmetyl-
sulfonat för främjande av mutation därav och selekterades
för brist på HPRT (hypoxantinfosforibosyltransferas) i
medium innehållande 6-tioguanin med en koncentration av
ca 30 ug/ml (den principiella selektionstekniken beskrivs
i Nature, vol. 256, H95 - H97 (1975)). Denna process dödar
de flesta av myelomcellerna; mänskliga B-celler dör
normalt i 6-tioguaminhaltigt medium. Vidare är bland de
överlevande cellerna de flesta inta kapabla till hybridi-
sering med lymfocyter.
Två publikationer har beskrivit hybridisering av
460
907
H
mänskliga B-myelomceller GM 1500 med icke mänskliga myelom-
celler. GM 1500-cellerna utsattes inte för mutagenbehand-
ling eller för någon selektionsprocess före hopsmältningen
i de i dessa artiklar beskrivna processerna. Dessa artiklar
är Croce et al i Prcc. Nat. Acad. Sci. U.S.A., vol. 76,
3H16 - 3419 (197ß) och Croce et al i Eur. J. Immunol., vol.
, N86 - H88 (1980).
Ehuru etylmetylsulfonat med fördel kan användas som
mutagen i det ovan beskrivna förfarandet, är det givet att
varje annan känd mutagen kan användas för mutering av mänsk-
liga B-celler GM 1500 så länge som detta medel inte ogynnsamt
påverkar cellerna.
Mutagenbehandlings- och selektionsprocessen gav två
"överlevare" som möjliggjorde fortplantning av modifierade
stabila HPRT-deficienta myelomcellinjer. De båda överlev-
arna betecknades GM 1500 BTG-A1-1 och GM 1500 6TG-A1-2. De
båda överlevarna, som tycks vara funktionellt ömsesidigt
utbytbara, bildar kontinuerliga cellinjer, som är deponer-
ade vid American Type Culture Collection (ATCC), 12301 Parklawn
Drive, Rockville, Maryland, under accessnumren CRL-8032 och
CRL-8038, respektive. Dessa myelomcellinjer har det utmär-
kande kännetecknet, att de är kapabla till hybridisering med
mänskliga lymfocyter såväl som med lymfocyter från andra djur.
Dessa celler avsöndrar IgG
modercellerna GM 1500, och
(Y-2,K-immunoglobulin) liksom
de är positiva för Epstein-Barrs
viruskärnantigen. Cellerna vidmakthölls i Eagles minimala
essentiella medium (HEM) (medium 16H0 från Rosewell Park
Memorial Institute (RPMI) skulle alternativt kunna användas)
innehållande 10 % fosterkalvserum. Myelomcellernas tillväxt
inhiberas av selektivt hypoxantin-aminopterin-tymidin-
medium. Detta medium beskrivs i Science, vol. 145, 709 -
710 (1964). Denna diskussion hänför sig i fortsättningen
till cellerna GM 1500 6TG-A1-2; cellinjen GM 1500 BTG-A1-1
skulle alternativt kunna användas.
De använda lymfocyterna kan vara vilka som helst
lymfocyter från en mänsklig individ som har befunnits ut-
trycka de önskade antikropparna. Det är också möjligt att
460 907
stimulera mänskliga lymfocyter in vitro att uttrycka de
önskade antikropparna. Exempelvis
en patient smittad med ett aktivt
fluensa, mässling, vaccinia eller
kan lymfocyter tas från
virus,,såsom rabies, in-
polio. Det är emellertid
klart, att dessa är endast exempel; lymfocyter uttryckande
antikroppar, som angriper andra virus, eller icke virala
antigener, såsom pollen, kan också användas. Företrädesvis
består lymfocyterna av periferiella lymfocyter separerade
från en patients blod, eller mjältceller.
I en utföringsform av uppfinningen användes hepari-
niserad blodplasma från en mänsklig patient lidande av
subakut skleroserande panencefalit (SSPE), en mässlings-
virusinfektion i hjärnan, som lymfocytkälla. För att veri-
fiera förekomsten av anti-SSPE-lymfocyter i denna blodplasma
spädde man ett serumprov 1:10 000 000 med fosfatbuffert och
konstaterade med hjälp av radioimmunoanalys (RIA), att detta
bands vid mässlingsinfekterade målceller. Dessa data såväl
som indicier på histologiska lesioner i hjärnan, typiska
för sjukdomen, bekräftade den kliniska diagnosen av SSPE.
Ett 10 ml prov av hepariniserad blodplasma från
denna patient togs, och en suspension av Ficoll-renade
lymfocytceller bereddes på det av Gerhard et al, Eur. Immu-
nol., 5, 720 - 725 (1975) angivna sättet. Röda blodkroppar
lyserades genom inkubation av blodprovet under 15 minuter vid
HOC i NHQCI (0,82 %). Den erhållna cellsuspensionen tvätta-
des genom en centrifugering (800Xg) genom värmeinaktiverat
kalvserum och en centrifugering i proteinfritt medium (RPMI
1640, buffrat med 7,5 mM HEPES, pH 7,2).
Produktion av hybrider âstadkommes genom blandning
av ca 10 000 000 modifierade HPRT-deficienta myelomceller
enligt uppfinningen med 1 000 000 til 10 000 000 lymfocyter.
Cellblandningen centrifugerades med 800Xg, och cellerna
omsuspenderades för fusion i en 50-procentig lösning (vikt/vo-
lym) av polyetylenglykol 1000 (PEG) spädd i minimalt essen-
tiellt medium (MBM) utan serum. I enligthet med fusions-
procedurerna enligt Davidson et al, Somat. Cell Genet. 2,
175 - 176, späddes polyetylenglykolen först med HEM utan
460
907
6
serum och sedan med MEM med serum innan cellerna inympades
i fördjupningar i Linbro-plattor i selektivt hypoxantin-
aminopterin-tymidin-medium. Kulturerna inkuberades vid
37°C i en atmosfär av 95 % luft och 5 % C02, och vart
sjunde till tionde dygn utbyttes kulturmediet delvis mot
färskt HAT-medium (1/2 - 1/3).
Femton till tjugoett dygn efter inkubationen av
kulturer producerade genom fusion av lymfocyter med myelom-
celler iakttogs celltillväxt i tjugo av tjugofyra fördjup- §
ningar. All tillväxt i HAT-medium är tecken på framgångs-
rik hybridisering mellan lymfocyter och myelomceller.
Dessa celler fortplantades kontinuerligt i HAT-medium och
klonades i mikroplattor (Linbro) genom limiterande späd-
ning. Varje oberoende klon (härrörande från en oberoende
fördjupning) provades på uttryckande av mänskliga immuno-
globulinkedjan och på förmåga att immunoprecipitera mäs-
slingsvirusprotein. Hybridomen befanns utsöndra IgM speci-
fikt för mässlingsvirusnukleokapsider, såsom visas nedan.
Antikropparnas specificitet för mässlingsvirus be-
stämdes medelst de välkända metoderna för immunoprecipita-
NaDS-polyakrylamid (NaDS
betyder natriumdodecylsulfat). Generellt märktes cellkul-
tion och gelelektmfores på 10 °ø
turerna med 100 uCi 3H-leucin (70 Ci/mmol) per milliliter
lösning genom att utsättes därför under 12 h. De mänskliga
immunoglobulinkedjorna immunoprecipiterades sedan med anti-
humanimmunoglobulinantisera från kanin i enlighet med
vedertagna metoder. De immunoprecipiterade märkta mänskliga
immunoglobulinkedjorna separerades sedan med konventionell
gelehfldrofixes på 10 % NaDS-polyakrylamíd.
En jämförelse gjordes mellan (1) immunoprecipitat av
det av GM 1500 BTG-A1-2-cellerna producerade immunoglo-
bulinet efter reaktion med ett antihuman-Y-antiserum, (2)
immunoprecipitat av immunoglobulinkedjor utsöndrade av
human-human-hybridom (erhållna i den ovan beskrivna fu-
sionsprocessen) efter reaktion med antihuman-u-antiserum,
och (3) immunoprecipitat av immunoglobulinkedjor utsöndrade
av ett human-human-hybridom efter reaktion med antihuman-u-
460 907
7
och Y-kedjespecifika antisera, under användning av den ovan
'beskrivna elektroforetiska separationstekniken. Syftet med
denna jämförelse var att visa, att de enligt uppfinningen
framställda human-human-hybridomen uttrycker både Y- och
u-humanimmunoglobulinkedjor.
Sex prov av hybridcellskloner undersöktes genom
immunoprecipüatàmi av de av hybriderna utsöndrade immuno-
globulinerna med kanin-anti-u-antiserum (IgG1). Alla
hybriderna uttryckte den mänskliga u-immunoglobulinkedjan.
Några av dessa hybridom uttryckte också en lätt immuno-
globulinkedja, som migrerade annorlunda än den av myelom-
klonen GM 1500 BTG-A1-2 uttryckta lätta kedjan. En av dessa
hybridomkloner hade inte förmåga att producera den av cel-
lerna GM 1500 6TG-A1-2 uttryckta lätta immunoglobulin-
kedjan. Hybridomkulturvätskan, som immunoprecipiterades
med både antihuman-u- och antihuman-Y-kedjekaninantiserum,
uttryckte två tunga immunoglobulinkedjor, nämligen för-
äldracellens GM 1500 6TG-A1-2 Y-kedja och föräldracellens
SSPE-B u-kedja.
En annan jämförelse gjordes med hjälp av poly-
akrylamidgelelektrofores för bestämning av de av hybridom
enligt uppfinningen uttryckta antikropparnas specificitet
för mässlingsvirusantigen. Två prov av hybridomkultur-
medier jämfördes med tvâ kontroller. Kontrollerna var (1)
serum erhållet från en mänsklig patient under tillfrisk-
nande från en infektion av atypisk mässling, och (2) kultur-
vätska från den mänskliga cellinjen GM 1500 6TG-A1-2. Serum
frán en patient som hade haft atypisk mässling valdes för
provning av mässlingsvirusantikropparnas korseffektivitet.
Jämförelseresultaten erhölls med konventionella analytiska
metoder. De vid immunoprecipiteringen använda procedurerna
var följande: (1) lysat av med mässlingsvirus infekterade
CV1-celler märkta med 358-metionin användes som antigen;
(2) alikvoter (25 ul) av antigenet blandades med alikvoter
(100 ul) av koncentrerad kulturvätska och inkuberades vid
ca 37oC under 90 min och sedan vid ROC under ca H hg (3)
alikvoter (25 ul) av totalantihumanantikropp från kanin till-
460
907
8
sattes; (U) inkuberingen upprepades; (5) de precipiterade
polypeptiderna uppsamlades genom centrifugering i en Eppen-
dorf-centrifug under 20 min vid 10 000 r/min; (6) den ut-
vunna synliga pärlan omsuspenderades i fosfatbuffert och
tvättades tre gånger; (7) pärlan suspenderades i lysisbuffert
och kokades 3 min; (8) de bildade lösningarna elektrofor-
erades pâ 10 % NaDS-polyakrylamidgel under betingelser en-
ligt Hall et al, Proc. Nat. Acad. Sci., U.S.A., vol. 76,
20N7 - 2051 (1979).
ade gelen mol Cronex-röntgenfilm.
Efter fluorografi exponerades den tork-
Kulturvätshnna från hybridomkulturerna precipi-
terade virus-NP-polypeptiden och varierande mängder av dess
spjälkningsfragment. Antikropparna i kulturvätshnwa är så-
ledes specifika för en enda polypeptid, NP, som är den vik-
tigaste strukturella polypeptiden i virusnukleokapsiden och
det primära mässlingsvirusantigenet.
En annan jämförelse gjordes med hjälp av NaDS-poly-
akrylamidgelelektroforetisk analys mellan (1) mässlings-
viruspolypeptider precipiterade med kulturvätska (okoncen-
trerad) från en hybridomsubklon erhàllen genom limiterande
spädníng och (2) viruspolypeptider precipiterade med samma
atypiska mässlingsserum som ovan. Resultaten bekräftar
specificiteten av antikropparna i kulturvätska fràn hybrid-
omklonen, enär subklonen därav precipiterar NP-polypeptiden
med en aktivitet jämförlig med föräldrahybridomklonens.
Den cellinje, som bildas genom fusion av den stabila
HPRT-deficienta mänskliga myelomcellinjen enligt uppfin-
ningen med mänskliga antikroppsproducerande lymfocyter,
såsom exemplifieras av de i ovanstående utföringsform av
uppfinningen använda anti-SSPE-lymfocyterna, är en hybrid-
kultur, som visar kännetecken för både de normala lymfo-
cyterna och föräldramyelomcellerna, och synes härröra från
en enda fusionshändelse. Cellerna är hybrider till sin natur
av följande skäl:
(a) Hybridcellinjen har odlats flera månader i
selektivt HAT-medium, som inhiberar tillväxt av föräldra-
myelomcellerna, men inte av normala lymfocyter, vilka i sin
460 907
9
tur troligen inte skulle överleva mer än N eller 5 veckor
in vitro.
(b) Antalet kromosomer i hybridcellerna är nära
summan av antalet i normala lymfocyter och i föräldra-
mycelomcellerna.
(c) Hybridomet producerar nya immunoglobulinkedjor,
såsom u-kedjor, och lätta kedjor.
(d) Hybriden producerar specifika antikroppar,
medan föräldramyelomcellerna inte producerar sådana anti-
kroppar. Dessutom är produktionen av dessa antikroppar
större än den man observerar i kulturer av icke hybridi-
serade lymfocyter.
Liknande procedurer kan utföras av fackmannen med
hjälp av andra lymfocyter, inklusive mänskliga lymfocyter,
som uttrycker andra antikroppar, och lymfocyter från andra
djur. Som alternativ till odling av hybridom in vitro kan
man injicera hybridomceller i ett immunosupprimerat djur,
såsom en naken mus för kultur in vivo.
De av hybriderna producerade antikropparna kan ut-
vinnas med hjälp av standardmetoder och kan användas i ana-
lytisk medicinsk forskning för identifikation av antigener
i blodprov och kulturmedier. Antíkropparna är i huvudsak
homogena och är högeligen specifika mot målantígenet. Ett
förråd av diverse homogena antikroppar, vardera synnerligen
specifik för ett speciellt antigen, ger forskarna möjlighet
att snabbt bestämma ett antigens specificitet och/eller
karakterisera antigener. Dessutom kan antikropparna admini-
streras till sjuka människor för att bidra till bekämpning
av sjukdomar.
Claims (20)
1. Komposition innehållande en stabil kontinuerlig human- myelomcellinje, som är i stånd till hybridisering med anti- kroppsproducerande celler för människor eller andra djur, för att bilda en stabil, fusionerad cellhyorid som kan pro- ducera antikroppen, k ä n n e t e c k n a t av att denna cellinje är en mutant av mänskliga 8-celler GM 1500 och är deficient i hypoxantinfosforibosyltransferas.
2. Komposition enligt patentkrav 1, vari cellinjen mot- svarar den som ATCC nr CRL"80}2 deponerade cellinjen.
3. Komposition enligt patentkrav 1,'vari cellinjen mot- svarar den som ATCC nr CRL-8038 deponerade cellinjen.
4. Förfarande för framställning av en hybridcellinje genom fusion av en antikroppsproducerande cell och en mvelomcell för bildning av en antikroppsproducerande fusionerad cell- hybrid, k ä n n e t'e c k n a.t av att man använder en myelomcell, som är en hypoxantinfosforibosyltransferasdefi- cient mutant av en mänsklig B-cell GM 1500.
5. Förfarande enligt patentkravet 4, vari myelomcellen tas från en kontinuerlig cellinje, som produceras genom behand- ling av mänskliga B-celler GM 1500 med etylmetylsulfonat för att befordra cellernas mutationsfrekvens och selektering av cellerna med 6-tioguanin för hypoxantinfosforibosyltrans- ferasdeficiens.
6. förfarande enligt patentkravet G, vari myelomcellen er- hålls från den vid AICC under accessnumret CRL-8032 depone- rade kontinuerliga cellinjen.
7. Förfarande enligt patentkravet 4, vari myelomcellen er- hålls från den vid ATCC under accessnumret CRL-8038 depo- nerade kontinuerliga cellinjen.
8. Färfarande enligt patenikravc! Q, vari den fnzioneradv ccllhybriden odlas och av cellhybriden producerade anli- kroppar uppsamlas.
9. förfarande enligt patentkravet 8, vari hybriden odlas in vitro.
10. förfarande enligt patentkravet 8, vari hybriden odlas i vivo på ett djur. 10 15 20 25 1” É 460 907
11. förfarande enligt patentkravet 8, vari hybriden odlas i ett medium innehållande hypoxantin-aminopterintymidin.
12. producerande cellen är en lymfocyt vald bland mjältceller, förfarande enligt patentkravet A, vari den antikropps- lymfnodceller och periferiella lymfocyter.
13. kroppsproducerande cellen är en periferiell lymfocyt.
10. förfarande enligt patentkravet 12, vari den anti- förfarande enligt patentkravet 4, vari den antikropps- producerande cellen erhålls från en med ett virus infekterad människa.
15. Förfarande enligt patentkravet 14, vari viruset är valt i den av rabies-, mässlings-, influensa-, vaccinia- och policvirus bestående gruppen.
16. förfarande enligt patentkravet 15, vari viruset är mäss- lingsvirus.
17. från en fusionerad cellhybrid av (a) en cell från en för Cellinje, k ä n n e L e c k n a d av att den härrör hypoxantin-aminopterin-tymidinmedium känslig humanmyelom- cellinje GM 1500 och (b) en antikroppsproducerande lymfocyt.
18. Cellinje enligt patentkravet 17, vari myelomcellinjen motsvarar den
19. som ATCC nr CRL-8032 deponerade cellinjen. Cellinje enligt patentkravet 17, vari myelomcellinjen motsvarar den
20. som ATCC nr CRL-8038 deponerade cellinjen. Cellinje enligt patentkravet 17, vari den antikropps- producerande lymfocyten är en human lymfocyt.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US20483280A | 1980-11-07 | 1980-11-07 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SE8106528L SE8106528L (sv) | 1982-05-08 |
SE460907B true SE460907B (sv) | 1989-12-04 |
Family
ID=22759633
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SE8106528A SE460907B (sv) | 1980-11-07 | 1981-11-04 | Humanmyelomcellinje, komposition innehaallande saadana celler, samt foerfarande foer cellinjens framstaellning |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS57126424A (sv) |
AT (1) | AT380898B (sv) |
AU (1) | AU548738B2 (sv) |
BE (1) | BE891003A (sv) |
CA (1) | CA1198066A (sv) |
CH (1) | CH658070A5 (sv) |
DE (1) | DE3144181A1 (sv) |
FR (1) | FR2493865A1 (sv) |
GB (1) | GB2086937B (sv) |
IT (1) | IT1140050B (sv) |
NZ (1) | NZ198851A (sv) |
SE (1) | SE460907B (sv) |
Families Citing this family (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1983002058A1 (en) * | 1981-12-08 | 1983-06-23 | Univ South Carolina | Human monoclonal antibodies or lymphokines in separation of cells or diagnosis of mammary cancer |
CA1247538A (en) * | 1982-05-21 | 1988-12-28 | Mark C. Glassy | Human-human hybridomas for solid tumors |
JPS58201994A (ja) * | 1982-05-21 | 1983-11-25 | Hideaki Hagiwara | 抗原特異的ヒト免疫グロブリンの生産方法 |
US4618577A (en) * | 1983-02-09 | 1986-10-21 | The Regents Of The University Of California | Human-human hybridoma, CLNH5 |
JPS58205773A (ja) * | 1982-05-27 | 1983-11-30 | Canon Inc | インクジエツトプリンタ |
DE3379055D1 (en) * | 1982-06-09 | 1989-03-02 | Asahi Chemical Ind | Method for producing human antibody |
US4744982A (en) * | 1982-08-24 | 1988-05-17 | Hunter Kenneth W | Human monoclonal antibody reactive with polyribosylribitol phosphate |
AU567693B2 (en) | 1982-09-30 | 1987-12-03 | University Of Rochester | Human monoclonal antibodies against bacterial toxins |
US4689299A (en) * | 1982-09-30 | 1987-08-25 | University Of Rochester | Human monoclonal antibodies against bacterial toxins |
CA1214123A (en) * | 1983-01-20 | 1986-11-18 | Masashi Matsui | Cell lines for use in the preparation of hybridoma cells |
US4613576A (en) * | 1983-03-09 | 1986-09-23 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Human monoclonal antibodies to cancer cells |
US4693966A (en) * | 1983-03-11 | 1987-09-15 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Human monoclonal antibodies from lymphocytes of patients with malignant melanoma |
CA1218947A (en) * | 1983-04-06 | 1987-03-10 | Pearl M.J. Chen | Human hybrid cell lines |
JPS6133125A (ja) * | 1984-07-25 | 1986-02-17 | Morinaga & Co Ltd | ヒト単クロ−ン性抗肺ガン細胞抗体 |
JPS61104796A (ja) * | 1984-10-26 | 1986-05-23 | Chemo Sero Therapeut Res Inst | モノクロ−ナル抗体の製造方法 |
US4677070A (en) * | 1985-04-26 | 1987-06-30 | Cetus Corporation | Pseudomonas aeruginosa exotoxin A antibodies, their preparation and use |
EP0239102A3 (en) * | 1986-03-28 | 1989-07-12 | Tsuji, Kimiyoshi | Process for the formation of human-human hybridoma |
WO1989009789A1 (en) * | 1988-04-07 | 1989-10-19 | Farmitalia Carlo Erba S.R.L. | Human monoclonal antibodies against rabies virus |
CA2002067A1 (en) | 1988-11-09 | 1990-05-09 | Tamotsu Fukuda | Parent cell line for producing human hybridomas |
US5750106A (en) * | 1993-01-28 | 1998-05-12 | Novartis Ag | Human monoclonal antibodies to cytomegalovirus |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4196265A (en) * | 1977-06-15 | 1980-04-01 | The Wistar Institute | Method of producing antibodies |
US4172124A (en) * | 1978-04-28 | 1979-10-23 | The Wistar Institute | Method of producing tumor antibodies |
-
1981
- 1981-11-03 NZ NZ198851A patent/NZ198851A/en unknown
- 1981-11-04 CH CH7057/81A patent/CH658070A5/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-11-04 SE SE8106528A patent/SE460907B/sv not_active Application Discontinuation
- 1981-11-04 IT IT24862/81A patent/IT1140050B/it active
- 1981-11-05 GB GB8133387A patent/GB2086937B/en not_active Expired
- 1981-11-05 BE BE0/206450A patent/BE891003A/fr not_active IP Right Cessation
- 1981-11-05 AT AT0476381A patent/AT380898B/de not_active IP Right Cessation
- 1981-11-06 DE DE19813144181 patent/DE3144181A1/de not_active Withdrawn
- 1981-11-06 CA CA000389655A patent/CA1198066A/en not_active Expired
- 1981-11-06 JP JP56178255A patent/JPS57126424A/ja active Pending
- 1981-11-06 FR FR8120798A patent/FR2493865A1/fr active Granted
- 1981-11-06 AU AU77167/81A patent/AU548738B2/en not_active Ceased
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
SE8106528L (sv) | 1982-05-08 |
AU548738B2 (en) | 1986-01-02 |
BE891003A (fr) | 1982-03-01 |
NZ198851A (en) | 1984-07-31 |
FR2493865A1 (fr) | 1982-05-14 |
GB2086937A (en) | 1982-05-19 |
AT380898B (de) | 1986-07-25 |
GB2086937B (en) | 1985-05-30 |
CA1198066A (en) | 1985-12-17 |
IT8124862A0 (it) | 1981-11-04 |
ATA476381A (de) | 1985-12-15 |
CH658070A5 (fr) | 1986-10-15 |
JPS57126424A (en) | 1982-08-06 |
IT1140050B (it) | 1986-09-24 |
AU7716781A (en) | 1982-05-13 |
DE3144181A1 (de) | 1982-09-09 |
FR2493865B1 (sv) | 1984-12-14 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4608337A (en) | Human hybridomas and the production of human monoclonal antibodies by human hybridomas | |
SE460907B (sv) | Humanmyelomcellinje, komposition innehaallande saadana celler, samt foerfarande foer cellinjens framstaellning | |
Taniguchi et al. | Antigen-specific suppressive factor produced by a transplantable IJ bearing T-cell hybridoma | |
US4451570A (en) | Immunoglobulin-secreting human hybridomas from a cultured human lymphoblastoid cell line | |
EP0488470B1 (en) | Method for the production of antibodies | |
US4594325A (en) | High fusion frequency fusible lymphoblastoid cell line | |
FI83538C (sv) | Förfarande för produktion av en hybridomcellinje | |
JPS5845407B2 (ja) | 悪性腫瘍抗体の製造方法 | |
JPH0753110B2 (ja) | 細胞産生物を取得する方法 | |
Dorfman | The optimal technological approach to the development of human hybridomas | |
Sompayrac et al. | Stabilization of the 53,000-dalton nonviral tumor antigen is not required for transformation by simian virus 40 | |
Pistillo et al. | In vitro production of a human HLA alloantibody of restricted specificity (DQw2) via Epstein-Barr virus transformation | |
US8173425B2 (en) | Fusion partner cells | |
US4618585A (en) | Hybridoma cell lines producing monoclonal antibodies directed against cervical cancer cells | |
Howes et al. | Mouse hybrid cell lines produce antibodies to herpes simplex virus type 1 | |
Treves et al. | Establishment of cell lines from somatic cell hybrids between human monocytes and mouse myeloma cells. | |
Yoshida et al. | Ig gene rearrangement and expression in the progeny of B‐cell progenitors in the course of clonal expansion in bone marrow cultures. | |
Scharff et al. | Monoclonal antibodies | |
Witte et al. | Thy-1 antigen is present on B and T lymphocytes of the Syrian hamster. | |
WO1989000607A1 (en) | Preparation of human monoclonal antibodies of selected specificity and isotypes | |
JPH0751600B2 (ja) | モノクローナル抗体およびそれを用いた識別方法 | |
RU2092554C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus l. - продуцент моноклональных антител к вирусу болезни ауески штамм унииэв 18 в | |
RU2012594C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus l - продуцент моноклональных антител к 146s-компоненту вируса ящура азия-1 | |
RU2741095C2 (ru) | Способ получения клеточных линий, стабильно продуцирующих человеческие моноклональные антитела класса igg | |
RU2031117C1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных mus musculus - продуцент моноклональных антител к вирусу простого герпеса i типа |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NAV | Patent application has lapsed |
Ref document number: 8106528-6 Effective date: 19900810 |