SE425348B - Forfarande for framstellning av s-sulfonerat immunogammaglobulin - Google Patents
Forfarande for framstellning av s-sulfonerat immunogammaglobulinInfo
- Publication number
- SE425348B SE425348B SE8100368A SE8100368A SE425348B SE 425348 B SE425348 B SE 425348B SE 8100368 A SE8100368 A SE 8100368A SE 8100368 A SE8100368 A SE 8100368A SE 425348 B SE425348 B SE 425348B
- Authority
- SE
- Sweden
- Prior art keywords
- immunoglobulin
- ion
- sodium
- immunogammaglobulin
- reaction
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 31
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 31
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 11
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 10
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 9
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 3
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 claims description 3
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 2
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 claims 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 10
- 230000002391 anti-complement effect Effects 0.000 description 9
- 108010008730 anticomplement Proteins 0.000 description 9
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 4
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 4
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- -1 alkali metal salt Chemical class 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 2
- DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCS([O-])(=O)=O DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid group Chemical group S(O)(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100020289 Xenopus laevis koza gene Proteins 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 150000004683 dihydrates Chemical class 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L potassium sulfite Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])=O BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019252 potassium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- BZBNMRWYRNTRCV-UHFFFAOYSA-L sodium dithionate dihydrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)S([O-])(=O)=O BZBNMRWYRNTRCV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical compound [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
- C07K16/065—Purification, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39566—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against immunoglobulins, e.g. anti-idiotypic antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
8100368-3) Den andra metoden är att behandla humant immunoglobulin med ett protein-acyleringsreagens. Exempelvis beskrives i den japanska offentliggörandeskriften 49-6119 (1974) att acylering av humant immunoglobulin gav ett modifierat immunoglobulin med reducerad antikomplementaktivitetsnivå. Det acylerade immuno- globulin, som erhålles vid detta förfarande, kan emellertid ge upphov till antigenicitet i människokroppen och administra- tion i stora mängder har ansetts vara svårt.
Den tredje metoden är att reducera disulfidbindningarna i human- immunoglobulinet, följt av alkylering. Enligt exempelvis den japanska offentliggörandeskriften 48-103723 (1973) gav denna metod ett modifierat immunoglobulin med samma synbara molekyl- vikt som den hos omodifierat immunoglobulin och en reducerad antikomplementaktivitetsnivâ. Emellertid innebär denna metod ett tvåstegsförfarande, och förfarandena är förhållandevis kom- plicerade och sålunda industriellt ofördelaktiga.
Den fjärde metoden är att S-sulfonera disulfid-interkedjebind- ningarna i humanimmunoglobulin med tetrationatjon och sulfit- jon till immunoglobulinderivat lämpliga för intravenös injek- tion (jfr. japanska offentliggörandeskrifterna 50-121421 (l975), 51-1630, 51-76418, och 51-ll25l2 (1976)). Denna metod är den bästa av kända metoder. Vid denna metod användes dock icke- stabilt tetrationatsalt som oxidationsmedel. Det erfordras därför en stor mängd av tetrationatsaltet för att befrämja den fullständiga reaktionen, vilket ofta medför sidoreaktioner och ytterligare,som en defekt, som skall förbättras, ger denature- ring av proteinet för att inhibera tillräcklig reduktion i antikomplementaktivitetsnivån. Dessutom är oxidationskraften för tetrationatjonen relativt stark för att ge en möjlighet att bryta disulfidintrakedjebindningarna liksom disulfidinterkedje~ bindningarna, och stor försiktighet erfordras för att kontrol- lera reaktionen.
Uppfinnarna till föreliggande uppfinning har fokuserat sin forsk- ning på on förbättring av sådana defekter och har funnit att när tritionatjon, som har hög stabilitet och tillräcklig reak- 8100368-3 tivitet, och sulfitjon användes tillsammans som oxidanter, spjälkas disulfidinterkedjebindningarna i humanimmunoglobulin och samtidigt S-sulfoneras (-S-S03-) de spjälkade svavelato- merna, för framställning av immunoglobulinderivat, vilka lämp- ligen kan användas för intravenös injektion på grund av att de är fria från de ovan angivna defekterna, vilket utgör före- målet för föreliggande uppfinning.
Föreliggande uppfinning avser sålunda ett förfarande för fram- ställning av immunoglobulinderivat, vilket kännetecknas av en reaktion mellan humanimmunoglobulin och en förening med för- måga att ge tritionatjon och en annan förening med förmåga att ge sulfitjon i vatten för spjälkning av disulfidinterkedjebind- ningarna i humanimmunoglobulinet och samtidig S-sulfonering (-S-SO3~) av de spjälkade svavelatomerna.
Ritningsbeskrivning: Figur l (a), (b) och (c) visar mönstren för elektroforetisk vandring av immunoglubulin (IG), sulfonerat gammaglobulin (GGS) erhållet enligt exempel 1 resp. ett annat sulfonerat gamma- globulin erhållet enligt referensexemplet på natriumdodecylsul- fonatskivor. Figur 1 (d) visar förhållandet mellan varje band i de ovannämnda mönstren och molekylvikten.
Figur 2 (a) och (b) visar gelfiltreringsmönstren för sulfonerat gammaglobulin (GGS) erhållet enligt exempel l resp. ett annat sulfonerat gammaglobulin (GGS) erhållet enligt referensexemplet med användning av Sephadex G 200.
Vilken som helst förening kan användas som tritionatjonkälla, en av oxidanterna som användes enligt föreliggande uppfinning, om den kan bilda tritionatjon i vatten, men ett alkalimetallsalt av tritionat, såsom natriumtritionat eller kaliumtritionat föredrages.
Vilken som helst förening kan användas som sulfitjonkälla, om den kan bilda sulfitjon i vatten, men ett föredraget exempel är svavelsyrlighet, natriumsulfit, natriumbisulfit, kaliumsulfit 8100368-3 eller natriumpyrobisulfit.
Den mängd av föreningen, som kan bilda sulfitjon, är två gånger eller mer, företrädesvis mer än 10 gånger den molara mängden av disulfidinterkedjebindningarna som skall spjälkas i immunoglobulinet. Den mängd av föreningen, som kan bilda tri- tionatjon, är mer än en mol, företrädesvis två eller flera mol per mol av disulfidinterkedjebindningarna som skall spjälkas "i immunoglobulinet. Reaktionen sker i vatten och pH hålles företrädesvis i storleksordningen 6,0 till 10,0 under reak- tionen.
Reaktionstemperaturen är 50°C eller lägre, företrädesvis i storleksordningen l0° till 45°C. När temperaturen överstiger 50°C blir immunoglobulinmolekylen på ett icke önskvärt sätt mera känslig för proteindenaturering, under det att temperatu- rer lägre än 1000 i hög grad fördröjer framskridandet av reak- tionen och sålunda icke är industriellt användbara.
Reaktionstiden, under vilken de mesta av disulfidinterkedje- bindningarna i immunoglobulinet spjälkas och S-sulfoneras, beror på mängden oxidanter och reaktionstemperaturen. I allmän- het väljas en tidsrymd av 0,5-24 timmar.
Enligt föreliggande uppfinning spjälkas immunoglobulin i nästan samtliga disulfidinterkedjebindningar och disulfiden överföres till S-sulfonerade grupper (-S-SO3_) och ger H-kedjan och L-kedjan. Reaktionsprodukten separeras genom sedvanliga renings- metoder såsom dialys, utsaltning eller kolonnkromatografi.
Exempelvis dialyseras reaktionsblandningen med normal saltlös- ning för att ge den avsedda substansen i normal saltlösning.
Uppfinningen åskådliggöres närmare medelst följande exempel. §gEerenscxemEel¿ l. Framställning av natriumtritionat Den avsedda föreningen erhölls från natriumtiosulfat och 30 %ig vattenhaltig väteperoxid enligt enxnetod, som beskrivas i en e1ooz6a-z ny serie beträffande experimentell kemi ("Shin Jikken Kagaku Koza") vol. 8, Syntheses of inorganic compounds (II), P482, Maruzen Tokyo.
Huvudsakligen ingen förändring observerades när den stod vid rumstemperatur i flera månader. Upphettning av vattenlösningen till 45°C i 4,5 timmar gav knappast några förändringar. 2. Framställning av natriumtetrationat Natriumtetrationat framställdes av natriumtiosulfat och jod enligt en metod, som beskrives i Handbuch der Präparativen Anorganischen Chemie, vol. l, p. 362, Ferdinand Enke Verlag Stuttgart 1960.
Produkten utföll med 85 % renhet när den stod vid rumstempera- tur i en vecka och avgav lukten av svaveldioxid. Upphettning av vattenlösningen till 45°C i 4,5 timmar medförde en minskning av renheten till mindre än 50 %.
Exemgel I.
En till 16 % koncentrerad humanimmunoglobulinlösning i normal saltlösning buffrad till pH 7,5 med fosfatlösning (5 ml) kombinerades med normal saltlösning (5 ml) innehållande natri- umsulfit (0,16l6 g; 6,4 gånger den molara mängden av disulfid- interkedjebindningarna i immunoglobulin) och natriumtritionat (0,076 g; 16 gånger den molara mängden av disulfidinterkedje- bindningarna) och buffrades till pH 7,5 med fosfatlösning, och reaktionen genomfördes vid en temperatur av 45°C i 4,5 tim- mar. Efter avslutad reaktion dialyserades reaktionsblandningen med normal saltlösning tills reaktanternas koncentration var 0,1 mmol/liter eller lägre, och gav ll ml av en 7 %ig lösning av sulfonerat gammaglobulin i normal saltlösning.
Antikomplementaktivitetsnivån CHSO bestämdes på den 5 %iga lös- ningen enligt den metod som beskrives av Kabat och Mayer (Experimental lmmunochemistry, p. 221, 1961) och befanns vara 14,9 %. 8100368-5 CH50 för den 5 %iga lösningen av humanimmunoglobulin, utgångs- materialet, var 90 %.
Produktens antidifterititer befanns vara 0,8 enheter/ml, vilket är sama nivå som den hos humanimmunoglobulinutgângs- materialet.
Produkten underkastades dessutom natriumdodecylsulfonat-skive- elektrofores enligt metoden av Weber och Osborne (J. Biol.
Chem. 244, 446, 1969). Resultaten ges som figur 1 (b) och visar klart att produkten nästan helt är sammansatt av H-kedjan och L-kedjan och att disulfidinterkedjebindningarna har sulfonerats.
Samtidigt genomfördes samma reaktion med användning av 358- märkt natriumsulfit för att bekräfta att 7-8,5 mol av -S-S03 - grupperna hade införts per mol av immunoglobulinet.
Immunoelektroforesmönstret befanns helt sammanfalla med mönstret för den produkt som erhålles med användning av natriumtetratio- nat (jfr. figur 1 (c)).
Som referens ges mönstret för humanimmunogammaglobulin i figur l (a).
Vidare visas gelfiltreringsmönstret med användning av Sepha- dex G~200 som figur 2 (a). OD450 för en 5 %ig lösning befanns vara 0,950. ' Exemgel II: Reaktionen genomfördes på samma sätt som i exempel I, förutom att 0,015 g (3,2 gånger den_molara mängden av sulfidinterkedje- bindningarna) natriumtritionat användes till bildning av sulfo- nerat gammaglobulin med en antikomplementaktivitetsnivå CH50 av l5,2 %.
Referens: En till 16 % koncentrerad humanimmunoglobulinlösning i fosfat- _ , _ __.-_. 8100368-3 buffrad normal saltlösning (5 ml) kombinerades med en annan normal saltlösning buffrad till pH 7,5 med fosfatlösning (5 ml) innehållande natriumsulfit (0,l6l6 g; 6,4 gånger den molara mängden av disulfidinterkedjebindningarna i immunoglobulinet) och natriumtetrationatdihydrat (0,098 g; 16 gånger den molara mängden av disulfidinterkedjebindningarna), och reaktionen genomfördes vid en temperatur av 45°C i 4,5 timmar. Efter avslutad reaktion dialyserades reaktionsblandningen med normal saltlösning tills reaktanternas koncentration var lägre än 0,1 mmol/liter, och gav ll ml av en 7 %ig lösning av sulfonerat gammaglobulin i normal saltlösning.
Antikomplementaktivitetsnivân CH50 för den 5 %iga lösningen befanns vara 20,2 % och OD450 var 0,112.
Mönstret för natriumdodecylsulfatskiveelektroforesen för pro- dukten ges i figur l (c) och gelfiltreringsmönstret med använd- ning av Sephadex G-200 visas i figur 2 (b).
Enligt föreliggande uppfinning användes relativt stabila tritionatjoner och sulfitjoner som sulfoneringsreagens och icke önskvärd sönderdelning av dessa reagens kan undvikas.
Stora mängder av reagensen erfordras således inte, vilket med- för färre sidoreaktioner. Följaktligen har föreliggande upp- finning fördelen att ge immunogammaglobulinderivat lämpliga att använda för intravenös injektion på grund av att de har låg antikomplementaktivitetsnivâ och turbiditet och lätt kan renas genom mycket enkla åtgärder.
Det S-sulfonerade immunogammaglobulinet som framställes enligt föreliggande uppfinning återföres till det ursprungliga immuno- globulinet in vivo och motstår sönderdelning i blod utan risk för att ge antigenicitet. Dessutom möjliggör nämnda S-sulfone- rade immunogammaglobulin intravenös injektion på grund av sin reducerade antikomplementaktivitetsnivå utan några negativa effekter på olika slags antikroppsaktiviteter och har en mycket lång verkningstid in vivo. 8100368-3 Referensexemgel II: En till 16 % koncentrerad humanimmunoglobulinlösning i fosfat- buffrad normal saltlösning (5 ml) kombinerades med en annan normal saltlösning buffrad till pH 7,5 med fosfatlösning (5 ml) innehållande natriumsulfit (O,l6l6 g, 64 gånger den molära mängden av disulfidinterkedjebindningarna i immunoglobulinet) och natriumditionatdihydrat Na2$2O6'2H20 (0,076 g, l6 gånger den molära mängden av disulfidinterkedjebindningarna), och reaktionen genomfördes vid en temperatur av 45°C i 4,5 timmar.
Efter reaktionen dialyserades reaktionsblandningen med normal saltlösning tills reaktanternas koncentration var lägre än 0,1 mmol/liter och gav ll ml av en 7 %ig gammaglobulinlösning i normal saltlösning.
Antikomplementaktivitetsnivån CH50 hos den 5 %iga lösningen befanns vara 50 %.
Mönstret för natriumdodecylsulfatskivelektroforesen för produk- ten ges i figur l (e). Av figur l framgår att produkten är nästan helt sammansatt av HZLZ och HZL och endast en del av disulfidinterkedjebindningarna har sulfonerats till bildning av H-kedjan och L-kedjan.
Claims (2)
1. 8100368-3 PATENTKRAV l. Förfarande för framställning av immunogammaglobulin- derivat, k ä n n e t e c k n a t därav, att humanimmunogamma- globulin i vattenlösning bringas att reagera dels med en före- ning med förmåga att bilda tritionatjon och dels med en annan förening med förmåga att bilda sulfitjon i vatten vid pH 6,0-l0,0,i.en mängd av den förra föreningen av mer än en mol och av den senare föreningen av två eller fler mol per mol av disulfidinterkedjebindningarna som skall spjälkas i immunoglo- bulinet, och vid en temperatur av 10-50°C under 0,5-24 timmar för att spjälka disulfidinterkedjebindningarna i nämnda immuno- gammaglobulin och samtidigt S-sulfonera (-S-S03-) de spjälkade svavelatomerna.
2. Förfarande för framställning av immunoglobulinderivat enligt patentkravet l, k ä n n e t e c k n a t därav, att före- ningen med förmåga att bilda tritionatjon 1 vatten väljes bland natriumtritionat, kaliumtritionat eller blandningar därav.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PCT/JP1979/000131 WO1980002561A1 (en) | 1979-05-23 | 1979-05-23 | Process for preparing immune ypsilon-globulin derivative |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SE8100368L SE8100368L (sv) | 1981-01-22 |
| SE425348B true SE425348B (sv) | 1982-09-27 |
Family
ID=13677660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SE8100368A SE425348B (sv) | 1979-05-23 | 1981-01-22 | Forfarande for framstellning av s-sulfonerat immunogammaglobulin |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4347179A (sv) |
| CH (1) | CH644131A5 (sv) |
| DE (1) | DE2953674C2 (sv) |
| DK (1) | DK147225C (sv) |
| SE (1) | SE425348B (sv) |
| WO (1) | WO1980002561A1 (sv) |
Families Citing this family (48)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4432895A (en) * | 1982-11-24 | 1984-02-21 | Hoffmann-La Roche Inc. | Monomeric interferons |
| AU590754B2 (en) * | 1985-05-01 | 1989-11-16 | Commonwealth Serum Laboratories Commission | Novel molecular weight standards and methods of use thereof |
| NZ215967A (en) * | 1985-05-01 | 1988-05-30 | Commw Serum Lab Commission | Composition of peptides of known weight for determining weight of unknown peptide |
| US4877868A (en) * | 1986-03-12 | 1989-10-31 | Neorx Corporation | Radionuclide antibody coupling |
| US6440197B1 (en) | 1999-07-27 | 2002-08-27 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method separating particles from a cyclonic fluid flow including an apertured particle separation member within a cyclonic flow region |
| US6231645B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-05-15 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow utilizing a movable access member associated with a cyclonic separator |
| US6228260B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-05-08 | G. B. D. Corp. | Apparatus for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US6251296B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-06-26 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US6221134B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-04-24 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US6228151B1 (en) | 1999-08-18 | 2001-05-08 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US10165912B2 (en) | 2006-12-15 | 2019-01-01 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US11857142B2 (en) | 2006-12-15 | 2024-01-02 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus having an energy storage member and a charger for an energy storage member |
| US9888817B2 (en) | 2014-12-17 | 2018-02-13 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US20210401246A1 (en) | 2016-04-11 | 2021-12-30 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9192269B2 (en) | 2006-12-15 | 2015-11-24 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9211044B2 (en) | 2011-03-04 | 2015-12-15 | Omachron Intellectual Property Inc. | Compact surface cleaning apparatus |
| US10722086B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-07-28 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US9265395B2 (en) | 2010-03-12 | 2016-02-23 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9591958B2 (en) | 2013-02-27 | 2017-03-14 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9027198B2 (en) | 2013-02-27 | 2015-05-12 | G.B.D. Corp. | Surface cleaning apparatus |
| US9227151B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-01-05 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9295995B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-03-29 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9820621B2 (en) | 2013-02-28 | 2017-11-21 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9451855B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-09-27 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9238235B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-01-19 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9326652B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-05-03 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US20140237764A1 (en) | 2013-02-28 | 2014-08-28 | G.B.D. Corp. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9227201B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-01-05 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9420925B2 (en) | 2014-07-18 | 2016-08-23 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US9314139B2 (en) | 2014-07-18 | 2016-04-19 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US9585530B2 (en) | 2014-07-18 | 2017-03-07 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US9451853B2 (en) | 2014-07-18 | 2016-09-27 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US10136778B2 (en) | 2014-12-17 | 2018-11-27 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US10251519B2 (en) | 2014-12-17 | 2019-04-09 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US11950745B2 (en) | 2014-12-17 | 2024-04-09 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US10537216B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-01-21 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US11445878B2 (en) | 2020-03-18 | 2022-09-20 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment member assembly |
| US10506904B2 (en) | 2017-07-06 | 2019-12-17 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US11766156B2 (en) | 2020-03-18 | 2023-09-26 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment member assembly |
| US11730327B2 (en) | 2020-03-18 | 2023-08-22 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment assembly |
| US10750913B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-08-25 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10631693B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-04-28 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10702113B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-07-07 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10842330B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-11-24 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US11666193B2 (en) | 2020-03-18 | 2023-06-06 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment member assembly |
| US11006799B2 (en) | 2018-08-13 | 2021-05-18 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclonic air treatment member and surface cleaning apparatus including the same |
| US11192122B2 (en) | 2018-08-13 | 2021-12-07 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclonic air treatment member and surface cleaning apparatus including the same |
| US11013384B2 (en) | 2018-08-13 | 2021-05-25 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclonic air treatment member and surface cleaning apparatus including the same |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2508132C3 (de) * | 1974-03-08 | 1980-10-16 | Teijin Ltd., Osaka (Japan) | Verfahren zur Herstellung von Humanimmunglobulin-Derivaten und parenteral applizierbare Lösung hiervon |
| JPS51112512A (en) * | 1975-03-27 | 1976-10-05 | Teijin Ltd | A process for preparing immunoglobulin derivative |
-
1979
- 1979-05-23 DE DE2953674T patent/DE2953674C2/de not_active Expired
- 1979-05-23 WO PCT/JP1979/000131 patent/WO1980002561A1/ja unknown
- 1979-05-23 CH CH78581A patent/CH644131A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-05-23 US US06/233,611 patent/US4347179A/en not_active Expired - Fee Related
-
1981
- 1981-01-22 SE SE8100368A patent/SE425348B/sv not_active IP Right Cessation
- 1981-01-22 DK DK29681A patent/DK147225C/da not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE2953674C2 (de) | 1986-04-24 |
| DE2953674T1 (sv) | 1982-01-28 |
| DK147225B (da) | 1984-05-21 |
| CH644131A5 (en) | 1984-07-13 |
| DK29681A (da) | 1981-01-22 |
| SE8100368L (sv) | 1981-01-22 |
| DK147225C (da) | 1984-11-26 |
| US4347179A (en) | 1982-08-31 |
| WO1980002561A1 (en) | 1980-11-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SE425348B (sv) | Forfarande for framstellning av s-sulfonerat immunogammaglobulin | |
| Cecil | Intramolecular bonds in proteins. I. The role of sulfur in proteins | |
| Cecil et al. | The electroreduction of the disulphide bonds of insulin and other proteins | |
| Cecil et al. | The reactions of inter-and intra-chain disulphide bonds in proteins with sulphite | |
| Hellerman et al. | Urease activity as influenced by oxidation and reduction | |
| Ayrey et al. | 401. The oxidation of organoselenium compounds by ozone | |
| Cecil | The quantitative reactions of thiols and disulphides with silver nitrate | |
| Holmes | Mammalian carbonic anhydrase isozymes: evidence for a third locus | |
| CARR et al. | Thiazolesulfenamides1 | |
| PL99599B1 (pl) | Sposob otrzymywania tolerowanej srodzylnie gammaglobuliny | |
| DK147437B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af humaninsulin eller threoninb30estere af humaninsulin eller et salt eller kompleks deraf | |
| MX167936B (es) | Procedimiento de preparacion industrial de amino-acidos por hidrolisis de proteinas en un medio acido | |
| ES459050A1 (es) | Un procedimiento para la preparacion de nuevos derivados de acido prostanoico. | |
| NO144111B (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av immunoglobulinderivater | |
| SE7906273L (sv) | Sett att framstella en gammaglobulinlosning | |
| ATE66471T1 (de) | Verfahren zur herstellung von retinoylchloriden. | |
| CA1105383A (en) | Immunoglobulin having a reduced complement fixation, a process for its preparation and agents containing this immunoglobulin | |
| DE3273606D1 (en) | Process for the purification or concentration of biologically active proteins, and appropriate means therefor | |
| JPS62501501A (ja) | 相当するｓ−スルホネ−トからインシユリン前駆体の折りたたみに際し得られる反応混合物からのインシユリン前駆体の取得法 | |
| Toennies et al. | Methionine Studies. VIII. Regeneration of Sulfides from Sulfonium Derivatives1 | |
| US3318771A (en) | Process for the recovery of plasminogen from animal blood serum or animal blood plasma, preferably from pig's blood | |
| ATE11794T1 (de) | Verfahren zur herstellung von wasserloeslichen oder selbstdispergierenden harzgerbstoffen fuer die nachgerbung von leder und ihre verwendung. | |
| SE435787B (sv) | Forfarande for framstellning av immunoglobulinderivat | |
| Ely et al. | Accessible intrachain disulfide bonds in hybrids of light chains | |
| BÜLLESBACH et al. | Human Proinsulin, VIII. Studies on the S-Tritylation of Reduced Proinsulin, Insulin A and B Chains and their Detritylation |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| NAL | Patent in force |
Ref document number: 8100368-3 Format of ref document f/p: F |
|
| NUG | Patent has lapsed |
Ref document number: 8100368-3 Format of ref document f/p: F |