DK147225B - Fremgangsmaade til fremstilling af intravenoest indgivelige immunogammaglobulinderivater - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af intravenoest indgivelige immunogammaglobulinderivater Download PDFInfo
- Publication number
- DK147225B DK147225B DK029681AA DK29681A DK147225B DK 147225 B DK147225 B DK 147225B DK 029681A A DK029681A A DK 029681AA DK 29681 A DK29681 A DK 29681A DK 147225 B DK147225 B DK 147225B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- immunogammaglobulin
- immunoglobulin
- derivatives
- sodium
- reaction
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 18
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 18
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L sodium sulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])=O GEHJYWRUCIMESM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 5
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 5
- 230000002391 anti-complement effect Effects 0.000 description 5
- 108010008730 anticomplement Proteins 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- LSVVNVHHHMEPJZ-UHFFFAOYSA-L [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)SS([O-])(=O)=O Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)SS([O-])(=O)=O LSVVNVHHHMEPJZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 235000010265 sodium sulphite Nutrition 0.000 description 4
- HAEPBEMBOAIUPN-UHFFFAOYSA-L sodium tetrathionate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[O-]S(=O)(=O)SSS([O-])(=O)=O HAEPBEMBOAIUPN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- -1 trithionate ions Chemical class 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 3
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 3
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 3
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 2
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 2
- DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M sodium;dodecane-1-sulfonate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCS([O-])(=O)=O DAJSVUQLFFJUSX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid group Chemical group S(O)(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HPQYKCJIWQFJMS-UHFFFAOYSA-L tetrathionate(2-) Chemical class [O-]S(=O)(=O)SSS([O-])(=O)=O HPQYKCJIWQFJMS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004133 Sodium thiosulphate Substances 0.000 description 1
- 101100020289 Xenopus laevis koza gene Proteins 0.000 description 1
- WAIZSJUARDIDFV-UHFFFAOYSA-L [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)SS([O-])(=O)=O Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)SS([O-])(=O)=O WAIZSJUARDIDFV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 description 1
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003171 anti-complementary effect Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 238000000760 immunoelectrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L potassium sulfite Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])=O BHZRJJOHZFYXTO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019252 potassium sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L sulfite Chemical compound [O-]S([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000006277 sulfonation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- KRURGYOKPVLRHQ-UHFFFAOYSA-L trithionate(2-) Chemical compound [O-]S(=O)(=O)SS([O-])(=O)=O KRURGYOKPVLRHQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
- C07K16/065—Purification, fragmentation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/39566—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against immunoglobulins, e.g. anti-idiotypic antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Description
147225
Teknisk område
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af intravenøst indgivelige immunogammaglobulinderivater, specielt en forbedret fremgangsmåde til fremstilling af S-sulfoneret im-05 munogammaglobulin.
Teknik, hvorpå opfindelsen bygger
Immunoglobulin omfatter antistoffer mod forskellige former for sygdomme og anvendes tii profylakse og terapi af disse sygdomme, 10 men anvendelsen af immunoglobulinpræparater har været begrænset til intramuskulær injektion. Når et immunoglobuiinpræparat injiceres intravenøst, bindes det nemlig til komplementet og sænker serum-komplementkoncentrationen og fremkalder en bivirkning kaldet anti-komplementær virkning, som resulterer i, at der iagttages blodtryks-15 fald, legemstemperaturforøgelse, forstyrrelse af kredsløbssystemet og andet. Der er derfor foretaget mange undersøgelser for at nå det mål at holde immunoglobulin stabilt ved intravenøs administrering.
Den første metode er at afskære den del, som menes at binde 20 til komplementet, fra humant immunoglobulin ved anvendelse af et enzym. Fx. har A. Nisonoff foreslået at anvende pepsin som enzym (c.f. Science 132, 1770 (1970)), og en anden metode, der benytter plasminogen i serum, cathepsin og andre materialer som enzym, beskrives i japansk patentskrift 47-37529 (1972). Disse enzymbehand-25 lede immunoglobuliner har imidlertid mangler ved, at deres halveringstid er kort, og den tid, hvor de er effektive, er følgelig kort som vist af E. Merler og B. Jager in deres artikler i hhv. Vox Sang 13, 102 (1967) og Arch. Intora. Med. 119, 60 (1967).
Den anden metode er at behandle humant immunoglobulin med 30 et proteinacyleringsreagens. Fx. er det beskrevet i japansk patentoffentliggørelsesskrift 49-6119 (1974), at acylering af humant immunoglobulin gav et modificeret immunoglobulin med reduceret antikompie-ment aktivitetsniveau. Men der er risiko for, at det ved denne fremgangsmåde dannede acylerede immunoglobulin foranlediger antigenicitet 35 i menneskelegemer, og administreringen af store mængder er blevet anset for vanskelig.
Den tredje metode er at reducere disulfid-bindingerne i humant
H722B
2 immunoglobulin efterfulgt af alkylerlng. Fx. gav denne metode ifølge japansk patentoffentliggørelsesskrift 48-103723 (1973) et modificeret immunoglobulin med samme tilsyneladende molekylvægt som det umodi-ficerede immunoglobulin og et reduceret antikomplement aktivitets-05 niveau. Denne fremgangsmåde er imidlertid en to-trins-fremgangs-mlde, og operationerne er betydeligt komplicerede og er derfor ufordelagtige industrielt.
Den fjerde metode er at S-sulfonere interkæde disulfidbindin-gerne i humant immunoglobulin med tetrathionation og sulfition til 10 frembringelse af immunoglobulinderivater, som er egnede til intravenøs injektion (c.f. de japanske patentoffentliggørelsesskrifter 50-121421 (1975), 51-1630, 51-76418 og 51-112512 (1976), og det til de to førstnævnte svarende danske fremlæggelsesskrift nr. 141.432).
Denne metode er den bedste af de kendte. Men ved denne fremgangs-15 måde anvendes ustabilt tetrathionatsalt som oxidationsmiddel. Det er derfor nødvendigt med en stor mængde af tetrathionatsaltet for at fremme den fuldstændige omsætning, hvilket ofte forårsager bireaktioner, og som en mangel der må afhjælpes, yderligere fremkalder denaturering af proteinet, si tilstrækkelig reduktion af antikomple-20 mentaktivitetsniveauet inhiberes. Desuden er tetrathionationens oxidationsevne så forholdsvis stærk, at der er mulighed for, at såvel in-trakædedisulfidbindinger som interkædedisulfidbindinger brydes, og arbejdet besværliggøres af den forsigtighed, som er nødvendig for at styre omsætningen.
25
Forklaring af opfindelsen
Opfinderne af den foreliggende opfindelse har rettet deres forskningsarbejde mod en afhjælpning af sådanne mangler, og de har fundet ud af, at, når trithionation, som har høj stabilitet og 30 passende reaktivitet, og sulfition anvendes sammen, spaltes interkæ-dedisuffidbindinger i humant immunogammaglobulin, og de opspaltede svovlatomer S-sulfoneres (-S-SOg") samtidig til fremstilling af immuno-gammaglobulinderivater, som er egnede til intravenøs injektion, fordi de er fri for ovenstående mangler.
35 Den foreliggende opfindelse angår således en fremgangsmåde til fremstilling af intravenøst indgivelige immunogammaglobulinderivater, ved hvilken humant immunogammaglobulin i vand omsættes med to ak- 147225 3 tive stoffer til opspaltning af næsten alle interkædedisulfidbindinger og til S-sulfonéring (S-SQg) af de siledes tilgængeliggjorte svovl-atomer, og hvor det ene stof er et, der er i stand til i vand at danne sulfitioner, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved, at der 05 som det andet stof anvendes et, der i vand er i stand til at danne trithionationer.
Kort beskrivelse af tegningerne
Figur 1 (a), (b) og (c) viser mønsteret i- elektroforetisk migre-10 ring af hhv. immunogammaglobulin (IG), sulfoneret immunogammaglo-bulin (GGS) opnået ifølge eksempel 1 og et andet sulfoneret immunogammaglobulin opnået ifølge referenceeksemplet på natriumdodecylsul-fonatplader. Figur 1 (d) viser forholdet mellem hvert af båndene i ovenstående mønstre og molekylvægten.
15 Figur 2 (a) og (b) viser gelfiltreringsmønsteret for hhv. sul foneret immunogammaglobulin (GGS) opnået ifølge eksempel 1 og et andet sulfoneret immunogammaglobulin (GGS) opnået ifølge referenceeksemplet under anvendelse af "Sephadex G200".
20 Bedste udførelsesform for opfindelsen
En hvilken som helst forbindelse kan anvendes som trithionat-ionkilde, hvis den kan danne trithionationer i vand, men et alkalimetalsalt af trithionat, såsom natriumtrithionat eller kaliumtrithionat, foretrækkes.
25 En hvilken som helst forbindelse kan anvendes som sulfition- kilde, hvis den kan danne sulfition i vand, men et foretrukket eksempel er svovlsyrling, natriumsulfit, natriumbisulfit, kaliumsulfit eller natriumpyrobisulfit.
Mængden af forbindelsen, som er i stand til at danne sulfition, 30 er to gange eller mere, fortrinsvis mere end 10 gange den molære mængde af de interkædedisulfidbindinger i immunoglobulinet, som skal spaltes. Mængden af forbindelsen, som er i stand til at danne trithionation, er mere end 1 mol, fortrinsvis 2 eller flere mol per mol af de interkædedisulfidbindinger i immunoglobulinet, som skal 35 spaltes. Omsætningen gennemføres i vand, og pH holdes fortrinsvis i intervallet fra 6,0 til 10,0 under omsætningen.
4 147225
Reaktionstemperaturen er 50°C eller lavere, fortrinsvis i området fra 10 til 45°C. Når temperaturen overstiger 50°C, bliver im-munogammaglobulinmolekylet uønskværdigt mere modtageligt for proteindenaturering, mens temperaturer, som er lavere end 10°C, retar-05 derer reaktionsforløbet ekstremt og dermed er industrielt uanvendelige.
Reaktionstiden, under hvilken næsten alle interkædedisulfid-bindingerne i immunogammaglobulinet spaltes og S-sulfoneres, afhænger af mængden af oxidationsmiddel og reaktionstemperaturen. Den udvælges i almindelighed i området fra \ til 24 timer.
10 I overensstemmelse med opfindelsen spaltes immunogammaglobulin i næsten alle interkædedisulfidbindingerne, og disulfidet omdannes til S-sulfonatgrupper (-S-S03~) til frembringelse af H-kæden og L-kæ-den. Omsætningsproduktet adskilles ved sædvanlige oprensningsmetoder såsom dialyse, udsaltning eller søjlekromatografi. Fx. dialyse-15 res reaktionsblandingen med normal saltvandsopløsning til frembringelse af det omhandlede stof i normal saltvandsopløsning.
Den foreliggende opfindelse illustreres yderligere i de efterfølgende eksempler.
20 Fremstilling af udgangsmaterialer, der anvendes i eksemplerne 1. Fremstilling af natriumtrithionat.
Den pågældende forbindelse opnåedes ud fra natriumthiosulfat og 30% vandig hydrogenperoxid ved en fremgangsmåde, der er beskrevet i en ny serie eksperimentel kemi ("Shin Jikken Kagaku Koza"), 25 bind 8, Syntheses of Inorganic Compounds (II), p. 482, Maruzen Tokyo.
Der blev i det væsentlige ikke iagttaget nogen ændring ved henstand ved stuetemperatur i adskillige måneder. Desuden fremkaldte opvarmning af den vandige opløsning til 45°C i 4½ timer næ-30 sten ikke nogen ændringer.
2. Fremstilling af natriumtetrathionat.
Natriumtetrathionat fremstilledes ud fra natriumthiosulfat og iod efter en metode, der er beskrevet i Handbuch der Praparativen Anor-ganischen Chemie, bind 1, side 362, Ferdinand Enke Verlag, Stutt-35 gart 1960.
Produktets renhed faldt til 85% ved henstand ved stuetemperatur i en uge, og der udvikledes svovldioxidlugt. Ydermere resulte- 147225 5 rede opvarmning af den vandige opløsning til 45°C i 4,5 timer i reduktion af renheden til under 50%.
Eksempel 1
En opløsning af humant immunogammaglobulin med en koncentra-05 tion på 16% i normal saltvandsopløsning forpufret til pH 7,5 med phosphatopløsning (5 ml) kombineredes med normal saltvandsopløsning (5 ml) indeholdende natriumsulfit (0,1616 g, 6,4 gange den molære mængde af interkædedisulfidbindingerne i immunogammaglobulin) og natriumtrithionat (0,076 g, 16 gange den molære mængde af interkæ-10 dedisulfidbindingerne) og forpufret til pH 7,5 med phosphatopløsning, og omsætning udvirkedes ved en temperatur på 45°C i 4,5 time. Efter afslutning af omsætningen dialyseredes reaktionsblandingen med normal saltvandsopløsning, indtil koncentrationen af reaktanterne blev 0,1 mmol/l eller lavere, til opnåelse af 11 ml sulfoneret immuno-15 gammeglobulinopløsning med en koncentration på 7% i normal saltvandsopløsning .
Antikomplementaktivitetsniveauet CH^q bestemtes på den 5%ige opløsning i overensstemmelse med den af Kabat og Mayer beskrevne metode (Experimental Immunochemistry, side 221, 1961) og fandtes 20 at være 14,9%.
CH5q for den 5%ige opløsning af human immunogammaglobulin, udgangsmaterialet, var 90%.
Produktets anti-diphtheria titer fandtes at være 0,8 enheder/ml, hvilket var det samme niveau som for human immunogammaglobulin, 25 udgangsmaterialet.
Produktet underkastedes desuden natriumdodecylsulfonat-plade- elektroforese i overensstemmelse med en fremgangsmåde ifølge Weber og Osborne (J. Biol. Chem. 244, 446, 1969). Resultatet er anført i figur 1 (b), som klart viser, at produktet næsten er sammensat af 30 H-kæden og L-kæden, og at interkædedisulfidbindingerne er blevet sulfoneret.
I mellemtiden gennemførtes samme omsætning under anvendelse 35 af S-mærket natriumsulfit til bekræftelse af, at der indførtes 7-8,5 mol -S-SOg grupper per mol af immunogammaglobulinet.
35 Immunoelektroforesemønsteret fandtes at være helt sammenfald ende med mønsteret af det ved anvendelse af natriumtetrathionat opnåede produkt (jvf. figur 1 (c)).
6 147225
Som reference er mønsteret for humant immunogammaglobulin anført I figur 1 (a).
Desuden er gelfiltreringsmønsteret ved anvendelse af "Sephadex G-200" vist som figur 2 (a).
05
Eksempel 2
Omsætningen gennemførtes pi samme mide som i eksempel 1 bortset fra, at der anvendtes 0,015 g (3,2 gange den molære mængde af interkæde sulfidbindingerne) natriumtrithionat til dannelse af sulfone-10 ret immunogammaglobulin med antikomplement aktivitetsniveau CHgg på 15,2%.
Reference
En opløsning af humant immunogammaglobulin med en koncentra-15 tion pi 16% i phosphat-forpufret normal saltvandsopløsning (5 ml) kombineredes med en anden normal saltvandsopløsning forpufret til pH 7,5 med phosphatopløsning (5 ml) indeholdende natriumsulfit (0,1616 g, 64 gange den. molære mængde af interkæde disulfidbin-dingerne i Fmmunoglobulinet) og natriumtetrathionatdihydrat (0,098 20 g, 16 gange den molære mængde af interkæde disulfidbindingerne), og omsætning udvirkedes ved en temperatur pi 45°C i 4½ time. Efter afslutning af omsætningen dialyseredes reaktionsblandingen med normal saltvandsopløsning, indtil reaktantkoncentrationen blev lavere end 0,1 mmol/l til frembringelse af 11 ml sulfoneret immunogammaglo-25 bulinopløsning med en koncentration på 7% i normal saltvandsopløsning.
Antikomplementaktivitetsniveauet CH5q for den 5%ige opløsning fandtes at være 20,2%.
Mønsteret for natriumdodecylsulfat-pladeelektroforesen af produktet er anført i figur 1 (c), og gelfiltreringsmønsteret under an-30 vendelse af "Sephadex G-200" er vist i figur 2 (b).
Industriel anvendelighed
Ved den foreliggende opfindelse anvendes forholdsvis stabil tri-thionation og sulfition som sulfoneringsreagenser, og uønskværdig 35 dekomponering af disse reagenser kan undgås. Store mængder reagenser bliver således unødvendige, og det medfører færre bireaktioner. Den foreliggende opfindelse er følgelig fordelagtig ved at
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7900131 | 1979-05-23 | ||
| PCT/JP1979/000131 WO1980002561A1 (en) | 1979-05-23 | 1979-05-23 | Process for preparing immune ypsilon-globulin derivative |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK29681A DK29681A (da) | 1981-01-22 |
| DK147225B true DK147225B (da) | 1984-05-21 |
| DK147225C DK147225C (da) | 1984-11-26 |
Family
ID=13677660
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK29681A DK147225C (da) | 1979-05-23 | 1981-01-22 | Fremgangsmaade til fremstilling af intravenoest indgivelige immunogammaglobulinderivater |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4347179A (da) |
| CH (1) | CH644131A5 (da) |
| DE (1) | DE2953674C2 (da) |
| DK (1) | DK147225C (da) |
| SE (1) | SE425348B (da) |
| WO (1) | WO1980002561A1 (da) |
Families Citing this family (48)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4432895A (en) * | 1982-11-24 | 1984-02-21 | Hoffmann-La Roche Inc. | Monomeric interferons |
| AU590754B2 (en) * | 1985-05-01 | 1989-11-16 | Commonwealth Serum Laboratories Commission | Novel molecular weight standards and methods of use thereof |
| NZ215967A (en) * | 1985-05-01 | 1988-05-30 | Commw Serum Lab Commission | Composition of peptides of known weight for determining weight of unknown peptide |
| US4877868A (en) * | 1986-03-12 | 1989-10-31 | Neorx Corporation | Radionuclide antibody coupling |
| US6221134B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-04-24 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US6228260B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-05-08 | G. B. D. Corp. | Apparatus for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US6231645B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-05-15 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow utilizing a movable access member associated with a cyclonic separator |
| US6440197B1 (en) | 1999-07-27 | 2002-08-27 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method separating particles from a cyclonic fluid flow including an apertured particle separation member within a cyclonic flow region |
| US6251296B1 (en) | 1999-07-27 | 2001-06-26 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US6228151B1 (en) | 1999-08-18 | 2001-05-08 | G.B.D. Corp. | Apparatus and method for separating particles from a cyclonic fluid flow |
| US9888817B2 (en) | 2014-12-17 | 2018-02-13 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US11857142B2 (en) | 2006-12-15 | 2024-01-02 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus having an energy storage member and a charger for an energy storage member |
| US10165912B2 (en) | 2006-12-15 | 2019-01-01 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US20210401246A1 (en) | 2016-04-11 | 2021-12-30 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9192269B2 (en) | 2006-12-15 | 2015-11-24 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9265395B2 (en) | 2010-03-12 | 2016-02-23 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9211044B2 (en) | 2011-03-04 | 2015-12-15 | Omachron Intellectual Property Inc. | Compact surface cleaning apparatus |
| US10722086B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-07-28 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US9591958B2 (en) | 2013-02-27 | 2017-03-14 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9027198B2 (en) | 2013-02-27 | 2015-05-12 | G.B.D. Corp. | Surface cleaning apparatus |
| US20140237764A1 (en) | 2013-02-28 | 2014-08-28 | G.B.D. Corp. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9238235B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-01-19 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9295995B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-03-29 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9227201B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-01-05 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9820621B2 (en) | 2013-02-28 | 2017-11-21 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9227151B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-01-05 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclone such as for use in a surface cleaning apparatus |
| US9451855B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-09-27 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9326652B2 (en) | 2013-02-28 | 2016-05-03 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US9420925B2 (en) | 2014-07-18 | 2016-08-23 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US9451853B2 (en) | 2014-07-18 | 2016-09-27 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US9585530B2 (en) | 2014-07-18 | 2017-03-07 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US9314139B2 (en) | 2014-07-18 | 2016-04-19 | Omachron Intellectual Property Inc. | Portable surface cleaning apparatus |
| US10251519B2 (en) | 2014-12-17 | 2019-04-09 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US10136778B2 (en) | 2014-12-17 | 2018-11-27 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US11950745B2 (en) | 2014-12-17 | 2024-04-09 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus |
| US11445878B2 (en) | 2020-03-18 | 2022-09-20 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment member assembly |
| US10702113B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-07-07 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10842330B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-11-24 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10750913B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-08-25 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10537216B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-01-21 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US10631693B2 (en) | 2017-07-06 | 2020-04-28 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US11730327B2 (en) | 2020-03-18 | 2023-08-22 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment assembly |
| US10506904B2 (en) | 2017-07-06 | 2019-12-17 | Omachron Intellectual Property Inc. | Handheld surface cleaning apparatus |
| US11666193B2 (en) | 2020-03-18 | 2023-06-06 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment member assembly |
| US11766156B2 (en) | 2020-03-18 | 2023-09-26 | Omachron Intellectual Property Inc. | Surface cleaning apparatus with removable air treatment member assembly |
| US11192122B2 (en) | 2018-08-13 | 2021-12-07 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclonic air treatment member and surface cleaning apparatus including the same |
| US11013384B2 (en) | 2018-08-13 | 2021-05-25 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclonic air treatment member and surface cleaning apparatus including the same |
| US11006799B2 (en) | 2018-08-13 | 2021-05-18 | Omachron Intellectual Property Inc. | Cyclonic air treatment member and surface cleaning apparatus including the same |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2508132C3 (de) * | 1974-03-08 | 1980-10-16 | Teijin Ltd., Osaka (Japan) | Verfahren zur Herstellung von Humanimmunglobulin-Derivaten und parenteral applizierbare Lösung hiervon |
| JPS51112512A (en) * | 1975-03-27 | 1976-10-05 | Teijin Ltd | A process for preparing immunoglobulin derivative |
-
1979
- 1979-05-23 WO PCT/JP1979/000131 patent/WO1980002561A1/ja unknown
- 1979-05-23 CH CH78581A patent/CH644131A5/de not_active IP Right Cessation
- 1979-05-23 DE DE2953674T patent/DE2953674C2/de not_active Expired
- 1979-05-23 US US06/233,611 patent/US4347179A/en not_active Expired - Fee Related
-
1981
- 1981-01-22 DK DK29681A patent/DK147225C/da not_active IP Right Cessation
- 1981-01-22 SE SE8100368A patent/SE425348B/sv not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK29681A (da) | 1981-01-22 |
| DK147225C (da) | 1984-11-26 |
| SE425348B (sv) | 1982-09-27 |
| WO1980002561A1 (en) | 1980-11-27 |
| CH644131A5 (en) | 1984-07-13 |
| DE2953674C2 (de) | 1986-04-24 |
| SE8100368L (sv) | 1981-01-22 |
| US4347179A (en) | 1982-08-31 |
| DE2953674T1 (da) | 1982-01-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK147225B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af intravenoest indgivelige immunogammaglobulinderivater | |
| Jensen | Sulfhydryl-Disulfide Interchange: This biological chain reaction explains aspects of protein denaturation, blood clotting, and mitosis | |
| Lindahl et al. | Interaction of recombinant human cystatin C with the cysteine proteinases papain and actinidin | |
| Ram et al. | Preparation of antibody-ferritin conjugates for immuno-electron microscopy | |
| Cecil et al. | The reactions of inter-and intra-chain disulphide bonds in proteins with sulphite | |
| Hui et al. | Monoclonal antibodies to a synthetic fibrin-like peptide bind to human fibrin but not fibrinogen | |
| Berggård | Studies on the plasma proteins in normal human urine | |
| Sumino et al. | A role of selenium against methylmercury toxicity | |
| Bjoerk et al. | Immunologic evidence for insertion of the reactive-bond loop of antithrombin into the A. beta.-sheet of the inhibitor during trapping of target proteinases | |
| DE3061547D1 (en) | Process of preparation of an intravenous immunoglobulin solution, containing concentrated igm | |
| IL92012A (en) | A process for activating proteins produced by genetic technology expressed in prokaryotes | |
| Gorevic et al. | [1] Immunoglobulin G (IgG) | |
| PL99599B1 (pl) | Sposob otrzymywania tolerowanej srodzylnie gammaglobuliny | |
| NO144111B (no) | Fremgangsmaate ved fremstilling av immunoglobulinderivater | |
| DE3062792D1 (en) | A process in purification and concentration of the factor viii-complex | |
| Laurell et al. | Complexes in plasma between light chain κ immunoglobulins and α1-antitrypsin respectively prealbumin | |
| JPS6139930B2 (da) | ||
| DK151610B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af human-immunoglobulinpraeparater med formindsket komplementaktivitet og god antistofaktivitet | |
| JPS647050B2 (da) | ||
| Morgan et al. | Acquired factor XI inhibitors in two patients with hereditary factor XI deficiency | |
| SE435787B (sv) | Forfarande for framstellning av immunoglobulinderivat | |
| Simson et al. | Clinical evaluation of cryoprecipitated factor VIII | |
| US3318771A (en) | Process for the recovery of plasminogen from animal blood serum or animal blood plasma, preferably from pig's blood | |
| CS195693B2 (cs) | Způsob přípravy imunaglobulinových derivátů | |
| Wilson et al. | The effect of reduction and alkylation on the primary phase of rennin action on unheated and heated milk |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PUP | Patent expired |