SA519410730B1 - أغذية صحية مضادة للشيخوخة وطريقة لإنتاج عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب - Google Patents

أغذية صحية مضادة للشيخوخة وطريقة لإنتاج عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب Download PDF

Info

Publication number
SA519410730B1
SA519410730B1 SA519410730A SA519410730A SA519410730B1 SA 519410730 B1 SA519410730 B1 SA 519410730B1 SA 519410730 A SA519410730 A SA 519410730A SA 519410730 A SA519410730 A SA 519410730A SA 519410730 B1 SA519410730 B1 SA 519410730B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
aging
amount
grape seed
cells
derived
Prior art date
Application number
SA519410730A
Other languages
English (en)
Inventor
تسوكاسا ناجو
Original Assignee
تسوكاسا ناجو
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by تسوكاسا ناجو filed Critical تسوكاسا ناجو
Publication of SA519410730B1 publication Critical patent/SA519410730B1/ar

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/87Vitaceae or Ampelidaceae (Vine or Grape family), e.g. wine grapes, muscadine or peppervine
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789Magnoliopsida [dicotyledons]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/30Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00Food ingredients
    • A23V2250/20Natural extracts
    • A23V2250/21Plant extracts
    • A23V2250/2132Other phenolic compounds, polyphenols
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30Extraction of the material
    • A61K2236/39Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بتوفير أغذية صحية ومستحضرات تجميل مضادة للشيخوخة لها تأثير أفضل مضاد للشيخوخة من أي مادة معروفة يتوقع أن يكون لها تأثير مضاد للشيخوخة، مثل ريسفيراترول resveratrol ، وطريقة لتصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتسم بتأثير مضاد للشيخوخة أفضل. يتكون الغذاء الصحي المضاد للشيخوخة ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة وفقًا للاختراع الحالي من مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتكون من 60% بالوزن أو أكثر من بولي فينول polyphenol مشتق من بذور العنب المنقى ببساطة. الشكل 1

Description

أغذية صحية مضادة للشيخوخة وطريقة لإنتاج عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب ‎Anti-aging healthy foods and the way of producing an anti-aging element derived‏ ‎from grape seeds‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بالأغذية الصحية ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة؛ وطريقة لتصنيع مكونات مضادة للشيخوخة مشتقة من بذور العنب؛ على ‎dag‏ الخصوص» الأغذية ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة التي لها تأثير مضاد للشيخوخة أفضل من رسفيراترول ‎resveratrol‏ وطريقة تصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب له تأثير أفضل مضاد للشيخوخة. كشفت دراسة سابقة حول الوقاية من الشيخوخة والتحكم في الحياة أنه من المتوقع أن يتسم المركب» على سبيل المثال» رسفيراترول (ترانس- 3 4 5 -تراي هيدروكسي-ستيلبين) ‎(trans-3, 4, 5-trihydroxy-stillbene)‏ تأثير مضاد للشيخوخة. على سبيل المثال» ذكر ‎196-191Konrad T.
Howitz et al., Nature425, and‏ (2003) أنه في خميرة متبرعمة ‎«(Saccharomyces cerevisiae)‏ حفز رسفيراترول 5112 من إنزيم من ‎Caenorhabditis elegans‏ لضبط فترة الحياة لتحسين ثبات ‎DNA‏ للخميرة الناشئة؛ وبالتالى مد فترة عمر الخميرة المتبرعمة بنسبة 9670. ومع ذلك؛ كما هو موضح في ‎Richard A.
Miller et al., Journal of Gerontology:‏ ‎BIOLOGICAL SCIENCES 191-201 5‏ )2010(¢ ورد أن رسفيراترول لا يطيل مدى عمر ذكور وإناث الفتران ولا يتسم بأي تأثير مضاد للشيخوخة. وفقا لذلك» حيث أنه من المتوقع أن ييتسم ريسفيراترول بتأثير مضاد للشيخوخة؛ إلا أنه لم يتم تأكيد ما إذا كان لرسفيراترول تأثير مضاد للشيخوخة.
الوصف العام للاختراع
كما هو موضح أعلاه؛ لم يتم تأكيد ما إذا كان من المتوقع أن يكون لرسفيراترول تأثير مضاد
للشيخوخة أنه في الواقع له تأثير مضاد للشيخوخة.
وفقا ‎col‏ توجد حاجة إلى وجود مادة لها تأثير أكثر موثوقية وأفضل كمضاد للشيخوخة من
الا ا
بعد دراسة جادة؛ وجد المخترعون أن مستخلص يتكون من بولي فينول ‎polyphenol‏ مشتق من
بذور العنب له تأثير مضاد للشيخوخة أفضل من رسفيراترول.
تكمن المشكلة المراد حلها بواسطة الاختراع الحالي في توفير مكون مضاد للشيخوخة مشتق من
بذور العنب له تأثير أفضل في مقاومة الشيخوخة من ربسفيراترول المتوقع أن يكون له تأثير مضاد 0 للشيخوخة؛ وطريقة لتصنيع هذا المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب؛ وتوفير الغذاء
الصحى لمكافحة الشيخوخة ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة ‎Al‏ تحتوي على مكون
مكافحة الشيخوخة.
طرق لحل المشكلات: يتعلق الاختراع الحالي ‎Bay‏ للجانب الأول بالأغذية ومستحضرات التجميل
الصحية المضادة للشيخوخة؛ والتى تشتمل على مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب 5 يتكون من 1660 بالوزن أو أكثر من بولي فينول المشتق من بذور العنب ‎all‏ ببساطة.
يتعلق الاختراع الحالي وفقًا للجانب الثاني بطريقة لتصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور
‎cial)‏ تشتمل على:
‏(الخطوة 1) المعالجة المسبقة لواحدة أو أكثر من بذور العنب المختارة من مجموعة تتكون من
‎«.Vitis amurensis ‏كناالككى ا‎ coignetiae ‏ا‎ ¢.Vitis labrusca ‏كقالى ا‎ vinifera L ‏لدفع استنبات بذور العنب هذه وتجفيف بذور العنب لدفع الاستنبات عند‎ Vitis shiragai ‏وا‎ 20
‏5 درجة ‎Liste‏ - 60 درجة مثوية؛
‏(الخطوة 2) سحق بذور العنب المجففة في الخطوة 1؛
(الخطوة 3) الحصول على ‎gia‏ مستخلص يحتوي على بولي فينول مشتق من بذور العنب عن طريق غمر بذور العنب المسحوقة التي تم الحصول عليها في الخطوة 2 في أي من ‎cole‏ إيثانول ‎ethanol‏ أو مذيب مختلط من الماء والإيثانول ‎ethanol‏ ؛ و (الخطوة 4) تجفيف وسحق الجزءِ المستخلص المحتوي على بولي فينول مشتق من بذور العنب تم الحصول عليه في الخطوة 3. يتعلق الاختراع الحالي ‎Bay‏ للجانب الثالث بالأغذية ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة وفقاً للجانب الأول أو للطريقة وفقاً للجانب الثاني حيث تكون بذرة العنب عبارة عن بذرة من واحد أو ‎JST‏ من أصناف العنب المستنبتة المختارة من مجموعة تتكون من ‎AGIOrgitiko‏ ‎«Carignan (Gamay (Cabernet Franc (CabernetSauvignon (Viognier‏ ‎«Colombard (Kerner («Gewurztraminer (Grenache (Xinomavro (Carmenere 0‏ ‎«Syrah (Chenin Blanc (Chardonnay (Sangiovese (Sultana (Koshu‏ ‎«Tempranillo «Zweigelt <Tannat (Sauvignon Blanc (Semillon (Zinfandel‏ ‎Pinot (Pinot Noir (Pinotage (Barbera (Nero D'Avola (Nebbiolo (Trebbiano‏ ‎«Malbec (Muscat Bailey A (Black Queen (Petit Verdot (Pinot Blanc (Gris‏ ‎«Merlot (Melon de Bourgogne (Meunier «Mourvedre (Muller-Thurgau 15‏ ‎(Riesling <Yama-Sauvignon (Moscato‏ و ‎.Ruby Cabernet‏ [تأثير الاختراع الحالي] : وفقًا للاختراع الحالي من الجانب الأول؛ يتكون الغذاء الصحي ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة من مكونات مضادة للشيخوخة مشتقة من بذور العنب تتكون من 1660 بالوزن أو أكثر من بولي فينول المشتقة من بذور العنب المنقى ببساطة ويالتالي؛ ‎(Ka 0‏ توفير الغذاء الصحي لمكافحة الشيخوخة ومستحضرات التجميل التي لها تأثير جيد لمكافحة الشيخوخة. وفقًا للاختراع الحالي من الجانب الثاني؛ يتم تصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب بواسطة (الخطوة 1) المعالجة المسبقة لواحدة أو أكثر من بذور العنب المختارة من مجموعة تتكون من ا ‎¢.Vitis vinifera‏ ا ‎¢.Vitis labrusca‏ ا ‎coignetiae‏ قلات ‎Vitis amurensis‏
ا.؛ وا ‎Vitis shiragai‏ لدفع استنبات بذور العنب هذه وتجفيف بذور العنب لدفع الاستنبات عند 35 درجة مثوية - 60 درجة مثوية؛ (الخطوة 2) سحق بذور العنب المجففة في الخطوة 1؛ (الخطوة 3) الحصول على ‎ia‏ مستخلص يحتوي على بولي فينول مشتق من بذور العنب عن طريق غمر بذور العنب المسحوقة التي تم الحصول عليها في الخطوة 2 في أي من ‎cole‏ إيثانول أو مذيب مختلط من الماء والإيثانول؛ و (الخطوة 4) تجفيف وسحق الجزءِ المستخلص المحتوي على بولي فينول مشتق من بذور العنب تم الحصول عليه في الخطوة 3. وبالتالي» يمكن تصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب وله تأثير جيد على مقاومة الشيخوخة. 0 وف للاختراع الحالي من الجانب الثالث؛ حيث تكون بذور العنب المستخدمة في الأغذية ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة في الجانب الأول أو لطريقة من الجانب الثاني عبارة عن بذرة من واحد أو أكثر من أصناف العنب المستنبتة المختارة من مجموعة تتكون من ‎«Gamay (Cabernet Franc (CabernetSauvignon Viognier (Agiorgitiko‏ ‎«Kerner (Gewurztraminer (Grenache (Xinomavro (Carmenere (Carignan‏ «Chenin Blanc (Chardonnay (Sangiovese (Sultana (Koshu (Colombard 15
Zweigelt <Tannat (Sauvignon Blanc (Semillon (Zinfandel (Syrah «Pinotage (Barbera (Nero D'Avola (Nebbiolo (Trebbiano (Tempranillo
Muscat (Black Queen (Petit Verdot (Pinot Blanc «Pinot Gris «Pinot Noir
Melon de (Meunier (Mourvedre (Muller-Thurgau (Malbec (Bailey A ‎Ruby , (Riesling (<Yama-Sauvignon (Moscato (Merlot <Bourgogne 0‏ ‎.Cabernet‏ وبالتالي؛ يمكن تصنيع أغذية ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة التي تتسم بتأثير أفضل لمكافحة الشيخوخة؛ أو يمكن تصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب وله تأثير أفضل لمكافحة الشيخوخة. شرح مختصر للرسومات
[الشكل1] يمثل الشكل 1 ‎mags Wily Lay‏ مقدار الخلايا السُسنة المحسوبة في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 وعينة مقارنة. (أ) يُظهر مقدار الخلايا المُسنة في الخلايا المستزرعة لمدة 7 أيام»؛ (ب) يُظهر مقدار الخلايا المسنة في الخلايا المستزرعة لمدة 14 ‎clase‏ و(ج) يُظهر مقدار ‎LAY‏ السُسنة في ‎LIAN‏ المستزرعة لمدة 21 ‎Lag‏ أيام. علاوة على ذلك؛ بافترارض أن مقدار الخلية المُسنة المحسوبة في عينة مقارنة يبلغ 96100؛ يتم توضيح كميات الخلايا المسنة في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 ‎Fas‏ إلى مقدار الخلية ‎Ail)‏ في عينة المقارنة. [الشكل2] الشكل 2 عبارة عن رسم بياني يوضح مقدار الميتوكوندريا ‎mitochondria‏ المُقاسة في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1( وعينة مقارنة. )1( يُظهر مقدار الميتوكوندريا في الخلايا المستزرعة لمدة 7 ‎oll‏ (ب) يُظهر مقدار الميتوكوندريا في الخلايا المستزرعة لمدة 14 يومًاء (ج) 0 يُظهر مقدار الميتوكوندريا في الخلايا المستزرعة لمدة 21 ‎ag‏ علاوة على ذلك؛ بافترارض أن مقدار الميتوكوندريا المحسوبة في عينة مقارنة يبلغ 96100؛ يتم توضيح كميات الميتوكوندريا في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 ‎dans‏ إلى كمية الميتوكوندريا في عنة المقارنة. [الشكل3] الشكل 3 عبارة عن رسم بياني يوضح حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا المقاسة في الأمثلة 3-1( والمثال المقارن 1 وعينة مقارنة (أ) يُظهر حمل العمل على كمية معينة من 5 الميتوكوندريا في الخلايا المستزرعة لمدة 7 ‎all‏ (ب) يُظهر حمل العمل على كمية معينة من الميتوكوندريا في الخلايا المستزرعة لمدة 14 ‎clase‏ و(ج) يُظهر حمل العمل كمية معينة من الميتوكوندريا في ‎WAN‏ المستزرعة لمدة 21 ‎Lag‏ علاوة على ذلك؛ بافتررض أن حمل العمل على كمية معينة من الميتوكوندريا المحسوية في عينة مقارنة يبلغ 96100؛ يتم توضيح حمل العمل على كمية معينة من الميتوكوندريا في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 نسبةً إلى حمل العمل لكمية 0 معينة من الميتوكوندريا في عينة مقارنة. [الشكل4] الشكل 4 عبارة عن رسم بياني يوضح مقدار خلايا موت الخلايا المبرمج في الأمثلة 1- 3 والمثال المقارن 1؛ وعينة مقارنة. (أ) يُوضح مقدار خلايا موت الخلايا المبرمج في الخلايا المستزرعة لمدة 7 أيام؛ (ب) يُظهر مقدار ‎WA‏ موت الخلايا المبرمج في الخلايا المستزرعة لمدة 4 يومّاء و(ج) يُظهر مقدار خلايا موت الخلايا المبرمج في الخلايا المستزرعة لمدة 21 يومًا. 5 علاوة على ذلك. بافتراض أن كمية ‎WIS‏ موت الخلية المبرمج المحسوبة في عينة مقارنة تبلغ
0م يتم توضيح كميات خلايا موت الخلايا المبرمج في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 ‎Lad‏ ‏إلى كمية خلايا موت الخلية المبرمج في عينة المقارنة. [الشكل5] الشكل 5 عبارة عن رسم بياني يوضح مقدار ‎WDA‏ النخر المقاسة في الأمثلة 3-1 والمتال المقارن 1 ‎duc,‏ مقارنة . 0( يوضح مقدار خلايا النخر فى الخلايا المستزرعة لمدة 7 أيام؛ (ب) يُوضح مقدار ‎WIA‏ النخر في الخلايا المستزرعة لمدة 14 يومّاء و(ج) يُوضح مقدار خلايا النخر فى الخلايا المستزرعة لمدة 21 يومًا. علاوة على ذلك» بافتراض أن مقدار خلايا النخر المحسوية في ‎die‏ المقارنة يبلغ 100 %« يتم توضيح كميات ‎WIA‏ النخر في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 نسبةً إلى كمية خلايا النخر فى عينة المقارنة. الوصف التفصيلى: فيما يلى ¢ يتم تحديد الغذاء الصحى ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة ‘ وطريقة تصنيع مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب ‎Gy‏ للاختراع الحالي. علاوة على ذلك؛ في هذه المواصفة؛ يشير مصطلح "الشيخوخة” إلى ‎Alla‏ تتناقص فيها مضاعفة قدرة الخلية أو حالة تتوقف فيها الخلية عن النمو بشكل لا رجعة فيه في طور 61. وبشارك قمع جين يعمل على تسهيل تقدم دورة الخلية؛ وزيادة التعبير عن جينات ‎pl6INKda‏ و3دم لتثبيط 5 دورة الخلية وعامل النسخ المستهدف الخاص ‎gy‏ 0216101 في هذه الحالات. بالإضافة إلى ‎cell‏ تقاوم الخلية المُسنة تكاثر الخلايا الناتج عن الجين المسبب للانقسام الفتيلي؛ ‎lly‏ تنمو ضخمة وتتسطح. تُظهر الخلية ‎dill‏ مرقم كيميائي ‎(goon‏ مشترك؛ ‎Jie‏ نشاط جالاكتوسيداز ‎galactosidase‏ 3 المرتبط بالشيخوخة ‎(SA PB Gal)‏ بينما تتميز ظاهرة الشيخوخة هذه بخلية مزروعة ¢ ثبت حدوثها حتى في الجسم الحي ‎٠‏ ‏20 يحتوي الغذاء الصحي ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة ‎Bg‏ للاختراع الحالي على مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتكون من 1660 بالوزن أو أكثر من بولي فينول مشتق من بذور العنب المنقى ببساطة.
يتم الحصول على مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتكون من البولي فينول المشتق من بذور العنب الموجودة فى الأغذية ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة ‎lady‏ ‏للاختراع ‎dad‏ من خطوات التصنيع التالية. <الخطوة 1 > الخطوة 1 ‎Ble‏ عن ‎dallas‏ مسبقة لبذرة العنب لدفع الاستنبات وتجفيف بذور العنب التي تدفع الاستنبات. يُعد نوع العنب لبذور العنب المستخدمة في الاختراع الحالي» على سبيل المثال لا الحصر؛ عبارة عن واحد أو أكثر من العنب المختار من المجموعة التى تتكون من ‎Vitis «Vitis vinifera L‏ ا ‎¢.labrusca‏ ا ‎¢.Vitis coignetiae‏ ا ‎¢.Vitis amurensis‏ و ‎Vitis shiragai L‏
Jie ‏من بين أشياء أخرى؛ يعتبر العنب المفضل نوعًا من أنواع نبيذ العنب المستنبت؛‎ 10 «Gamay (Cabernet Franc (Cabernet Sauvignon Viognier (Agiorgitiko «Kerner (Gewurztraminer (Grenache (Xinomavro (Carmenere (Carignan «Chenin Blanc (Chardonnay (Sangiovese (Sultana (Koshu (Colombard
Zweigelt <Tannat (Sauvignon Blanc (Semillon (Zinfandel (Syrah «Pinotage (Barbera (Nero D'Avola (Nebbiolo (Trebbiano (Tempranillo 5
Muscat (Black Queen (Petit Verdot (Pinot Blanc «Pinot Gris «Pinot Noir
Melon de (Meunier (Mourvedre (Muller-Thurgau (Malbec (Bailey A
Ruby , (Riesling <Yama-Sauvignon (Moscato (Merlot <Bourgogne «Syrah Merlot Cabernet Sauvignon ‏على وجه الخصوص؛ يفضل أكثر‎ .Cabernet ‎.Pinot Noir; 0‏ في هذه المواصفة؛ تشير كلمة ‎add‏ الاستنبات" إلى دفع بذرة العنب إلى الحالة التي تبدأ فيها هذه البذور في الاستنبات. ويشكل أكثر تحديدًاء فهي تشير إلى الحالة التي يكون فيها ‎ohn‏ الجنين من بذرة العنب منتفحًا قليلاً ومتورماً.
تكون درجة الانتفاخ؛ على سبيل ‎JE‏ لا الحصر 6 على سبيل المتال هي الحالة التي يكون فيها سطح ‎gia‏ الجنين قد برز بمقدار 2-1 مم عن بذرة العنب قبل دفع الاستنبات. بالإضافة إلى ذلك؛ في الاختراع الحالي؛ لا تفضل بذور العنب في حالة الاستنبات التي تشكل ‎led‏ ‏بذرة العنب برعمًا لأنها ذات ميل منخفض لتأثير مضاد للشيخوخة مقارنة ببذرة العنب في حالة دفع الاستنبات. في الاختراع الحالي؛ تشتمل طريقة المعالجة المسبقة لبذور العنب لدفع استنبات بذور العنب؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ على أي طرق تستخدم تقليديًا لدفع استنبات البذور النباتية؛ على سبيل المتال» الطرق الفيزيائية ‎Jie‏ المعالجة بدرجة حرارة منخفضة ودافئة؛ المعالجة بحمام دافئ والتدمير الميكانيكي؛ والطرق الكيميائية مثل معالجة بغاز (أسيتيلين ‎acetylene‏ ؛ إيثر ‎Sle «ether‏ 0 الهيدروجين ‎hydrogen‏ » الى اخره)؛ المعالجة بأوكسين ‎AUXIN.‏ والمعالجة بجبربلين ‎.gibberellin‏ ‏كما هو موضح أعلاه؛ في الاختراع الحالي؛ لا تعد طريقة المعالجة المسبقة لبذور العنب لدفع استنبات بذور العنب قاصرة بشكل خاص. على سبيل ‎(JU)‏ بشكل أكثر تحديدًا؛ من الممكن دفع استنبات بذرة العنب بواسطة طريقة المعالجة المسبقة التالية. ‎Yl 5‏ يتم غمس بذرة العنب في الماء عند 60-30 درجة مئوية. يتراوح زمن ‎J‏ لانغماس 3 على سبيل المثال لا الحصر 4 بشكل مفضل من 20 إلى 80 ساعة. ثانياً؛ يتم إزالة بذور العنب المغمورة في الماء عند 30 إلى 60 درجة مئوية من الماء وتجفيفها يبشكل طبيعى فى الهواء . تتراوح درجة حرارة التجفيف الطبيعية؛ على سبيل المثال لا الحصرء بشكل مفضل من 10 إلى 50 درجة مثئوية. يتراوح زمن التجفيف الطبيعي؛ على سبيل المثال لا 0 الحصرء بشكل مفضل من 1 إلى 10 ساعات. ثم؛ يتم غمس بذور العنب المجففة بشكل طبيعي في الهواء في الماء عند 45-15 درجة مثوية. يتراوح زمن ‎J‏ لانغماس ‘ على سبيل ‎JE‏ لا الحصر ‘ بشكل مفضل من 10 إلى 200 دقيقة.
— 0 1 — ‎Ls‏ يتم إزالة بذور العنب المغمورة في الماء عند 45-15 درجة مئوية من الماء؛ وتجفيفها بشكل طبيعي في الهواء. تتراوح درجة حرارة التجفيف الطبيعية ‘ على سبيل المثال لا الحصر ¢ يبشكل مفضل من 10 إلى 50 درجة مثوية.
يتراوح زمن التجفيف الطبيعي على سبيل المثال لا الحصر ¢ بشكل مفضل من 3 إلى 2 ساعة. يتم تكرار خطوة غمر بذرة العنب في الماء عند درجة حرارة تتراوح من 45-15 درجة ‎Augie‏ وخطوة تجفيفها بشكل طبيعي في الهواء (أي غمر بذور العنب بشكل متقطع في الماء) حتى يتم انتفاخ جزء الجنين من بذرة العنب وانتفاخه قليلاً بعد التجفيف الطبيعي.
عندما يكون جزءِ الجنين من بذرة العنب منتفحًا قليلاً وينفخ بعد التجفيف الطبيعي؛ تتم إزالة بذور 0 العنب وتجفيفها لمدة يومين إلى 5 أيام عند درجة حرارة كافية لتعقيم العديد من الجراثيم (80 درجة مئوية أو أقل). يمكن تغيير وقت التجفيف بشكل مناسب حسب الموسم» درجة الحرارة المحيطة أو الرطوية. يعمل هذا التحفيز للمعالجة بواسطة دفع الاستنبات على تقشير جزيء الفينول ‎phenol‏ من طبقة رقيقة من الفينول في بذور العنب. ثم؛ يتم ربط الجزيء بشكل مضاعف لإنتاج بولي فينول. 5 على الرغم من أن رسفيراترول» وهو نوع من بولي فينول» له وزن جزيئي حوالي 250 فإن هذا المكون المُنتج ‎Baas‏ يتسم بهيكل بوليمر ‎polymer‏ كبير يحتوي على مكون الوزن الجزيئي يبلغ 4000 <الخطوة 2< الخطوة 2 عبارة عن سحق بذور العنب في حالة دفع الاستنبات مجففة في الخطوة 1. 0 يمكن أن تستخدم طريقة السحق؛ على سبيل المثال لا الحصرء؛ الطرق القياسية ‎Jie‏ السحق باستخدام مطحنة. <الخطوة 3>
— 1 1 — الخطوة 3 عبارة عن استخلاص بذور العنب المجفف باستخدام مذيب. بواسط هذه الخطوة 3( يمكن الحصول على مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتكون من بولي فينول مشتق من بذور العنب. يمكن استخدام الماء؛ إيثانول أو مذيب مختلط من الماء والإيثانول كمذيب. يمكن إجراء عملية الاستخلاص بواسطة إضافة مذيب يتراوح بين 1000-50 ‎er»‏ بالوزن إلى بذرة
العنب المسحوقة التي تبلغ 100 جزء بالوزن. كما هو موضح أعلاه؛ يحتوي المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب والذي يتكون من بولي فينول مشتق من بذور العنب على مكو بوليمر يبلغ وزنه الجزيئي حوالي 4000 (3500- 00
0 <الخطوة 4> بعد ذلك؛ يتم تجفيف المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من ‎Hedy‏ العنب ‎Allg‏ تتكون من بولي فينول المشتق من بذور العنب والتي تم الحصول عليها في الخطوة 3 وتوفيرها. تستخدم طريقة التجفيف بشكل مفضل على سبيل المثال لا الحصرء التجفيف بفك الضغط. يمكن أن تستخدم طريقة المسحوق؛ على سبيل المثال لا الحصرء الطرق القياسية ‎Jie‏ السحق
5 باستخدام المطحنة. يمكن أن توفر الخطوات المذكورة أعلاه مكوئًا مضادًا للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتكون من بولي فينول المشتق من بذور العنب المسحوقة. يحتوي المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب والذي تم الحصول عليه بواسطة الخطوات المذكورة أعلاه على 9680-50 بالوزن من بولى فينول المنقى ببساطة.
من وجهة نظر توفير تأثير ملحو ‎Lh‏ مضاد للشد للشيخو خة » يحتوي المكو المضاد شب للشيخو خة الم لمشتو من بذور العنب بشكل مرغوب فيه على 9660 بالوزن أو أكثر من بولي فينول النقي ببساطة.
— 2 1 — يكون بولي فينول الموجود في المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب عبارة عن بولي فينول الموجود فى بذرة كل مستنبت من العنب ¢ على سبيل ‎JE‏ ربسفيراترول ¢ تانين 0ك أو ما شابه ذلك. يمثل 50- 1580 بالوزن من بولي فينول الموجودة في مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب بوليمر بروأنثوسيانيدين ‎proanthocyanidin‏ . أكد المخترعون أن المكون الضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب والذي يحتوي على المكون المذكور أعلاه يوفر تأثيرًا مضادًا للشيخوخة. يشير المصطلح 'منقى ببساطة" 3 فى هذه الوثيقة إلى حالة يتم فيها تجفيف مستخلص ودتمم إدراج مسحوقه فقط» والمواد الغريبة؛ ولا تتم المعالجة ‎Mie‏ لا يتم التركيز. تتم تنقية المكون المضاد 0 للشيخوخة المشتق من بذور العنب والذي تم الحصول عليه في الخطوات من 4-1 ببساطة. يمكن أن يوفر احتواء مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب في الغذاء الصحي على الغذاء الصحي المضاد للشيخوخة في الاختراع الحالي. مع المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب الموجود في الغذاء الصحي؛ من الممكن تناول المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب بسهولة ويشكل روتيني. 5 يمكن تصنيع الغذاء الصحي المضاد للشيخوخة الخاص بالاختراع الحالي بالطريقة المعتادة عن طريق إضافة عوامل إضافة مناسبة تستخدم كمواد خام غذائية شائعة؛ على سبيل ‎(JU‏ جلوكوز ‎(glucose‏ فركتوز ‎fructose‏ ؛ سكروز ‎sucrose‏ ؛ مالتوز ‎maltose‏ ؛ سوربيتول ‎sorbitol‏ « ستيفيوسيد ‎stevioside‏ « روبوسوسيد ‎rubusoside‏ وشراب الذرة؛ لاكتوز ‎lactose‏ ؛ حمض سترات ‎citrate acid‏ ¢ حمض طرطريك ‎tartaric acid‏ « حمض ماليك ‎Malic acid‏ ؛ حمض مكسينيك ‎succinic acid‏ ¢ حمض لاكتيك ‎lactic acid‏ ¢ حمض ‎—L‏ أسكورييك- ا ‎«ascorbic acid‏ اك — ‎wi‏ توكوفيرول ‎dl-alpha-tocopherol‏ « إريثوريات صوديوم ‎sodium erythorbate‏ جلسرين ‎glycerin‏ « بروبيلين جليكول ‎propylene glycol‏ « جلسريول إستر الحمض الدهني ‎«glycerol fatty acid ester‏ حمض بولى جليسرين الدهنى ‎polyglycerol fatty acid ester‏ ¢ حمض السكرات الدهنى ‎sucrose fatty acid ester‏ «
— 1 3 —
إسترات حمض سوربيتان الدهني ‎sorbitan fatty acid ester‏ ؛ الصمغ العربي من إستر
« propylene glycol fatty acid ester gum arabic ‏الحمض الدهنى بروييلين جليكول‎
كاراجينان ‎carragheenan‏ ؛ كازين ‎casein‏ « جيلاتين ‎gelatin‏ ؛ بكتين ‎pectin‏ ¢ أجار
1 فيتامين ب 8 ‎Vitamin‏ ¢ أميد حمض تيكوتينيك ‎nicotinic acid amide‏ ؛ بانتوثينات الكالسيوم ‎calcium pantothenate‏ ¢ حمض أمين ‎amino acid‏ ؛ ملح الكالسيوم ‎calcium‏
‎salt‏ ¢ خضاب ‎pigment‏ » عامل إكساب نكهة ‎flavoring agent‏ ؛ ومادة حافظة
‎.preservative
‏يمكن أن يوفر احتواء المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب فى مستحضرات التجميل
‏مستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي.
‏10 مع المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب الموجود في مستحضرات التجميل» يمكن تطبيق المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب بشكل روتيني. يفضل أن يكون شكل المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب الموجود في مستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة ‎Bg‏ للاختراع الحالي؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ عبارة عن كبسولة صغيرة ذات طبقة متعددة» من وجهة نظر سهولة تغلغل الجلد.
‏5 يمكن تصنيع مستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة الخاصة بالاختراع الحالي بالطريقة المعتادة عن طريق إضافة عوامل إضافة شائعة الاستخدام؛ ‎Jie‏ عامل التبييض ‎whitening agent‏ ومزبل الأكسجين النشط ‎active oxygen remover‏ ¢ مضاد أكسدة ‎antioxidant‏ ومثبط الأشعة فوق البنفسجية ‎ultraviolet inhibitor‏ » الى اخره. يبلغ تناول مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب في الأغذية ومستحضرات التجميل
‏0 الصحية المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ بشكل مفضل على ‎JS)‏ 50 مجم أو أكثر ‎clay‏ من وجهة نظر توفير ‎sale‏ ذات تأثير ملحوظ مضاد للشيخوخة. إذا كان مقدار تناول مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب فى الغذاء الصحى ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي أقل من 50 مجم ‎lags‏ لا يمكن عندئذٍ ممارسة التأثير المضاد للشيخوخة بشكل كاف؛ وبالتالى؛ يكون التناول غير مرغوباً فيه.
— 1 4 —
علاوة على ذلك؛ حتى إذا كان تناول المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب فى
الأغذية ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي أكثر من 7500
مجم ‎JS) Gags‏ وزن جسم يبلغ 60 كجم)؛ فإن معدل زيادة التأثير يكون صغراً.
لذلك؛ يُفضل أن يبلغ مقدار المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب في الغذاء الصحي
ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة في ا لاختراع الحالي 7500-50 مجم يوميًا .
بناءً على التطبيق؛ ‎(So‏ إضافة سواغ؛ معدل رقم هيدروجيني ‎sale « pH adjuster‏ حافظة
‎«preservative‏ عامل خلابى ‎chelating agent‏ أو مثبت ‎stabilizer‏ أو ما شابه ذلك بشكل
‏مناسب إلى الأغذية الصحية ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي.
‏علاوة على ذلك يبشكل مفضل» يبلغ على سبيل ‎JG‏ لا الحصر ‘ تناول مكون مضاد للشيخوخة 0 1 مشتق من بذور العنب الموجودة فى المواد الغذائية الصحية ومستحضرات التجميل المضادة
‏للشيخوخة؛ على سبيل المثال لا الحصرء على سبيل المثال» 125-0,8 مجم/ كجم/ ‎cag‏ من
‏وجهة نظر توفير تأثير ملحوظ مضاد للشيخوخة.
‏إذا بلغ مقدار المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب في الغذاء الصحي ومستحضرات
‏التجميل المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي أقل من 0,8مجم/ كجم/ ‎cass‏ لا يمكن ممارسة 5 تأثير مضاد للشيخوخة بشكل ‎(IS‏ وبالتالي يُعد التناول غير مرغوياً فيه.
‎Lad‏ حتى إذا كان تناول مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب فى الغذاء الصحى
‏ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة في الاختراع الحالي أكثر من 125 مجم/ كجم/ يوم؛ لا
‏يمكن بذل تأثير إضافي.
‏لذلك؛ ‎aly‏ بشكل مفضل تناول المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب في الأغذية 0 ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة من الاختراع الحالي 125-0,8 مجم/ كجم/
‎٠ ‏يوم‎
‏[المثال]
— 1 5 —
يتم وصف المواد الغذائية الصحية ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة والمكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقًا للاختراع الحالي بالتفصيل بناءً على الأمثلة التالية؛ ولكن لا تقتصر طريقة تصنيع الأغذية ومستحضرات التجميل الصحية المضادة للشيخوخة»؛ ومكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب ‎Gy‏ للاختراع الحالي على الأمثلة.
<المثال 1: تصنيع مكون مضاد للشيخوخة ‎(Fide‏ من بذور العنب> تم غمر بذرة ‎Cabernet Sauvignon‏ في الماء عند حوالي 40 درجة ‎Logic‏ لمدة 45 إلى 60 ساعة؛ ثم تمت إزالة بذرة العنب هذه من الماء وتجفيفها بشكل طبيعي في الهواء عند درجة حرارة الغرفة (حوالي 25 درجة مثوية) لمدة 3 إلى 5 ساعات (يتم تخزينها في غرفة). تم غمس بذور ‎all‏ المجففة يبشكل طبيعي في الماء من 25 إلى 30 درجة ‎Lge‏ لمدة 60 إلى
0 1 80 دقيفة؛ ثم تمت إزالة بذور ‎all‏ هذه من الماء وتجفيفها بشكل طبيعى فى الهواء عند درجة حرارة الغرفة (حوالي 25 درجة مئوية) لمدة 3 ساعات (يتم تخزينها في غرفة). تم تكرار الغمر فى ‎ell‏ عند درجة حرارة 30 درجة مثوية والتجفيف الطبيعى لمدة 3 ساعات 3 مرات؛ ثم لوحظت بذور العنب المجففة. وتم التأكيد بأن حوالي 9615-5 من جزءٍ الجنين من بذور العنب انتفخ حوالي 1 مم. يشار إلى الإجراءات المذكورة أعلاه بالمعالجة لدفع الاستنبات.
5 .تم الانتهاء من متابعة دفع الاستنبات عند تأكيد انتفاخ ‎gia‏ الجنين من بذور العنب؛ وتم تجفيف بذرة العنب بدرجة أكبر عند 45 درجة ‎digi‏ لمدة 3 أيام باستخدام مجفف بالأشعة تحت الحمراء البعيدة. بعد تجفيف بذور العنب لمدة 3 ‎call‏ تم سحق البذرة باستخدام مطحنة لإنتاج مسحوق بذور العنب. بعد ذلك؛ تمت إضافة مسحوق بذور العنب المكون من 50 جزءًا بالوزن إلى الماء البالغ 100
0 جزًا بالوزن؛ وتم استخلاص ‎gall‏ المذاب في الماء لتوفير عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب . بعد التجفيف بفك ضغط المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب الذي تم الحصول عليه؛ تم سحقه باستخدام مطحنة لتوفير مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب.
— 6 1 — تم حساب الكمية الإجمالية لبولي فينول الموجود في مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب. تم إجراء القياس الكمي باستخدام الطريقة الرسمية ل ‎AOAC official ( AOAC International‏ ‎(method 952.03, 15th Ed‏ (يشار إليها أيضًا باسم طريقة ‎.(Folin-Denis‏
تحدد طريقة ‎Folin-Denis‏ الكمية الإجمالية ‎ded‏ فينول عن طريق قياس اللون الأزرق (الطول الموجي يتراوح من 770-700 نانو متر) باستخدام مقياس الطيف الضوئي؛ حيث يتم الحصول على اللون الأزرق عن طريق تقليل حمض فوسفوتنجستيك ‎phosphotungstic acid‏ ؛ حمض الموليبديك مع هيدروكسيل الفينول في حالة قلوية ‎molybdic acid with phenolic‏ ‎.hydroxyl in alkaline condition‏
‎dag 10‏ للحساب الكمي؛ وجد أن مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يحتوي على 9بالوزن من بولي فينول. أيضاء تم تأكيد أن 9671 بالوزن من مادة بولى فينول الموجودة في مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب (أي 1649 بالوزن من مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب) كان عبارة عن بوليمر بروأنثوسيانيدين ‎proanthocyanidin polymer‏ .
‏5 فيما يلى فى هذه الوثيقة؛ يُشار إلى المكون المضاد لشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎Wy‏ لهذا المثال ‎(JS‏ وبشار إلى ريسفيراترول (المصنعة بواسطة ‎SIGMA‏ رقم المنتج: 45010) المستخدم كهدف مقارنة ‎JES‏ مقارن . في الأمثلة التالية 5-3؛ تم فحص التأثير المضاد للشيخوخة لمكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب ‎Gag‏ للاختراع الحالى .
‏0 <«المثال 2: تحضير الأرومات الليفية البشرية الطبيعية ‎normal human fibroblasts‏ « المثال؛ ومثال مقارن > تحضير الأرومات الليفية البشرية الطبيعية
— 7 1 — تم تحضير الأرومات الليفية البشرية الطبيعية لكل اختبار في البداية. بعد ‎cond)‏ تمت زراعة الأرومات الليفية البشربة الطبيعية ( ‎KURABO INDUSTRIES LTD.,‏ ‎(product No.: KF-4109‏ فى وسط أساسى ‎Nacalai Tesque, Inc., ) DMEM)‏ ‎«((product No.: 08456-65‏ %10 من ‎BioWest, product No.:S1820, ) FBS‏ ‎«(Lot NO.516536 5‏ ومضاد حيوي بنسبة 901 (محلول مختلط من بنسلين- ستريتومايسين
‎((Nacalai Tesque, Inc., product No.:26253-84)‏ في حاضنة ‎CO2‏ (965 من ‎«CO2‏ 37 درجة مئوية) حتى تم الحصول على عدد الخلايا المطلوب. بعد المزرعة؛ تم إطلاق الأرومات الليفية البشرية الطبيعية بواسطة تريسين/ ‎EDTA‏ (محلول 2.5 ‎[aba‏ 1-تريسين/ 1 مللى مول/ لتر من- ‎Nacalai Tesque, Inc., product ) EDTA‏
‎«(No. :32777-44 10‏ واستخدم لكل اختبار بعد حساب عدد الخلايا . مستحضر من المثال والمثال المقارن تم عندئذٍ تحضير المثال والمثال المقارن. تم قياس المثال والمتال المقارن على الترتيب وتنقيتهم في وسط قاعدي ليصبح تركيز يبلغ 1 % (وزن/ حجم).
‏5 بعد التنقية؛ تم الطرد المركزي للمثال والمثال المقارن في وسط قاعدي على الترتيب )120000 دورة في الدقيقة )2000 ثانية-1)؛ 10 دقائق) لإزالة المواد غير القابلة للذويان. بعد الفصل بالطرد المركزي؛ تم جمع المادة الطافية؛ وترشيحها وتعقيمها من خلال مرشح تعقيم لاستخدامه في كل اختبار. <المثال 3: اختبار لتأكيد التأثير المضاد للشيخوخة>
‏0 تتم اختبار التأثير المضاد للشيخوخة في المثال والمثال المقارن عن طريق قياس نشاط ‎—B‏ ‏جالاكتوسيداز ‎f-galactosidase‏ ((م] -جالاكتوسيداز المرتبط بالشيخوخة؛ ‎(SA-B-gal‏
— 8 1 — تم ‎ash‏ الإفراط في التعبير عن ‎SA-B-gal‏ في الخلايا المُسنة. تم التأكيد على أن عملية شيخوخة الخلايا المقاسة بعلامة الشيخوخة لا تحدث فقط فى الخلايا المستزرعة ولكن أيضًا فى ‎call‏ الحى. تشير كمية الخلايا ‎ddl‏ التي تم التعرف عليها بواسطة الاختبار لتأكيد تأثير مكافحة الشيخوخة على ‎ang‏ التحديد تأثير مكافحة الشيخوخة؛ كمرقم شامل. إجراء اختبار: تم زرع الأرومات الليفية البشرية الطبيعية المحضرة باستخدام وسط قاعدي على طبق به 96 عين لتكون عبارة عن 1* 10 4 خلية/ 0,1ملليلتر/ عين (طبق أسود لمراقبة التألق ‎((Sumitomo Bakelite Co., Ltd. product No.: MS-8096F)‏ وزراعته لمدة 24 ساعة. 0 بعد المزرعة؛ تم استبدال مواد المزرعة الطافية على الترتيب بالأوساط المذكورة أدناه مع ظروف ‎dling‏ وتمت زراعة الأرومات الليفية البشرية الطبيعية مرة أخرى. ترد ظروف كل وسط على النحو التالي. يُشار إلى كل خلية مزروعة باستخدام الأوساط مع كل ‎AL dls‏ 3-1( المثال المقارن 1؛ وعينة مقارنة على الترتيب. المثال 1: ‎dang‏ قاعدي يشتمل على 160.002 بالوزن من المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة 5 من بذور العنب من الاختراع الحالي. المثال 2: وسط قاعدي يشتمل على 160.01 بالوزن من المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب من الاختراع الحالي. المثال 3: وسط قاعدي يشتمل على 160.05 بالوزن من المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب من الاختراع الحالي. 0 المثال المقارن 1: وسط أساسي يحتوي على %0.0023 بالوزن من ريسغيراترول. عينة المقارنة: عبارة عن وسط قاعدي (لا يشتمل على مكونات مضادة للشيخوخة مشتقة من بذور العنب من الاختراع الحالي ولا ريسفيراترول).
— 9 1 — ‎Lad‏ يلي؛ تم استخدام الأمثلة 3-1 المذكورة أعلاه والمثال المقارن 1 وعينة المقارنة أيضًا في الأمثلة 5-4. تم تعيين تركيز ريسفيراترول في المثال المقارن 1 ليكون 60.0023 بالوزن؛ لأن خلايا النخر تزداد ‎BES‏ بحيث يكون القياس الصحيح صعبًا في اختبار قياس النخر المذكور أدناه إذا كان تركيز الرسفيراترول أكثر من %0.0023 بالوزن. تم زرع الأرومات الليفية البشرية الطبيعية على الترتيب مع الظروف لمدة تصل إلى 21 ‎ag‏ ‏تم تبادل الأوساط كل يومين إلى 3 أيام. بعد المزرعة؛ تمت إزالة المواد الطافية للمزرعة وتم غسل الخلايا مرتين باستخدام ‎Nissui ( PBS‏ ‎.(Pharmaceutical Co., Ltd., product No.: 05913‏ إلى الأرومات الليفية البشرية الطبيعية المغسولة تمت إضافة وسط قاعدي يحتوي على بافيلوميسين ‎Bafilomycin‏ مخفف 1000 مرة؛ وتمت زراعة الأرومات الليفية البشرية الطبيعية عند 37 درجة ‎Lise‏ لمدة 60 دقيقة. إلى المزرعة تمت بعد ذلك إضافة محلول قاعدي إلى وسط أساسي يشتمل على محلول ‎dallas‏ ‎SPIDER-[3 Gal‏ مخفف 100 مرة ومحلول 33342 ‎Hoechist‏ مخفف 100 مرة ‎(DOJINDO LABORATORIES, product No.: 346-07951( 5‏ بمثابة كاشف تلطيخ ‎coll‏ وتمت أيضاً زراعة الأرومات الليفية البشرية الطبيعية عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. بعد المزرعة؛ تم غسل الأرومات الليفية البشرية الطبيعية في وسط قاعدي. بعد الغسل؛ تمت إضافة الوسط القاعدي إلى الأرومات الليفية البشرية الطبيعية؛ والتلطيخ النوى (الخلايا الحية) وتم التقاط الصور الملطخة للخلايا المُسنة بواسطة مجهر ومضي ) ‎Keyence‏ ‎.(Corporation, product No.: BZ-X7000 0‏ تم حساب كمية الخلايا المُسنة بناءً على الصور الوامضة ذات الصلة.
— 2 0 —
Cellular Senescence ‏من‎ SPIDER-f Gal ‏و‎ Bafilomycin Al ‏ورد محلول المعائجة‎
DOJINDO LABORATORIES, product No.: ) Detection Kit-SPiDER-BGal .(8G03 النتائج: يوضح الشكل 1 رسم بياني يوضح كمية الخلايا السُسنة المحسوية للأمثلة 1- 3 المثال المقارن 1 وعينة مقارنة. في الشكل 1؛ (أ) توضح كمية الخلايا السُسنة من بين الخلايا المزروعة لمدة 7 ‎ald‏ (ب) توضح كمية الخلايا السُسنة من بين ‎WAY‏ المزروعة لمدة 14 ‎cas‏ (ج) توضح كمية الخلايا المُسنة من بين الخلايا المزروعة لمدة 21 يوم. فى الشكل 1 بافتراض أن كمية الخلايا المسنة فى عينة مقارنة تبلغ 00 %1 يتم توضيح كمية الخلايا المُسنة فى الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 ‎Lows‏ إلى كمية ‎WAY‏ السُسنة فى عينة المقارنة. بلغت كمية الخلايا السُسنة في المثال المقارن المزروعة 1 لمدة 7 أيام 96519 بالنسبة إلى عينة مقارنة (انظر الشكل 1()). بلغت كمية ‎LIAN‏ العُسنة في المثال 1 المزروعة لمدة 7 أيام 9685؛ بلغت كمية الخلايا المُسنة 5 فى المثال الثانى 96137؛ وبلغت كمية الخلايا المُسنة فى المثال الثالث 9673 بالنسبة إلى عينة مقارنة (انظر الشكل 1()). بلغت كمية الخلايا المُسنة في المثال 1 المزروعة لمدة 14 يوم 96102 بالنسبة إلى ‎due‏ مقارنة (انظر الشكل 1(ب)). بلغت كمية الخلايا السُسنة في المثال 1 المزروعة لمدة 14 يوم 9611؛ بلغت كمية الخلايا السُسنة 0 فى المثال الثانى 969؛ وبلغت كمية الخلايا الحُسنة فى المثال الثالث 967 بالنسبة إلى ‎due‏ مقارنة (انظر الشكل 1(ب)). بلغت كمية الخلايا المُسنة في المثال 1 المزروعة لمدة 21 يوم 9664 بالنسبة إلى ‎due‏ مقارنة (انظر الشكل 1(ج)).
— 1 2 — بلغت كمية الخلايا المُسنة في المثال 1 المزروعة لمدة 21 يوم 964؛ بلغت كمية الخلايا السُسنة فى المثال الثانى 963؛ ويلغت كمية الخلايا العُسنة فى المثال الثالث 962 بالنسبة إلى ‎due‏ مقارنة (انظر الشكل 1(ج)). وفقاً لهذه النتائج» تم اكتشاف أن رسفيراترول به المزبد من الخلايا المُسنة من بين الخلايا المزروعة لمدة 7 أيام عن ‎die‏ المقارنة وعزز شيخوخة الخلايا. بالتالي» يوضع في الاعتبار أن
ررسفيراترول له تأثير لتعزيز الشيخوخة على المدى القصير. كذلك» تم اكتشاف أن كمية الخلايا السشسنة في اليوم 21 من زراعة الخلايا تم كبتها بحوالى 9664 بالنسبة لعينة المقارنة؛ وبالتالي كبت شيخوخة الخلايا. وحيث تمثل المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب من هذا الاختراع تقريباً نفس
0 كمية الخلايا ‎ie dull)‏ عينة مقارنة في الخلايا المزروعة لمدة 7 أيام في المتوسط؛ فإنها تسبب كبت لكمية ‎dill WAY‏ في الخلايا المزروعة لمدة 21 يوم يبلغ حوالي 962 إلى 964 بالنسبة لعينة المقارنة؛ وبالتالي كبت شيخوخة الخلايا أكبر بكثير مما يقوم به رسفيراترول. بالتالي؛ تتسم المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب بتأثير مضاد للشيخوخة أفضل من ريسفيراترول» يتسم غذاء صحي ومستحضرات تجميل مضادة للشيخوخة تشتمل على هذه
5 المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب بتأثير ملحوظ مضاد للشيخوخة. <المثال 4: اختبار لقياس الميتكوندريا وحمل عمل كمية معينة من الميتوكوندريا> بعد اختبار تأكيد التأثير المضاد للشيخوخة؛ تم تأكيد تأثير المثال والمثال المقارن على كمية الميتوكندريا وحمل العمل لكمية معينة الميتوكندريا في الخلايا. ‎Lali‏ تم وضع في الاعتبار أن ريسفيراترول له تأثير على كمية الميتوكوندريا أو حمل العمل
0 لكمية معينة من الميتوكوندريا لتوفير تأثيرها المضاد للشيخوخة. وبالتالي؛ تم تأكيد تأثير المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب على كمية الميتوكوندريا أو حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا.
— 2 2 — تم قياس كمية الميتوكوندريا باستخدام مسبارات ‎Mito Tracker Mitochondrion—Selective‏ ‎(Invitrogen, product No.: M7512)‏ التى يمكن أن تعمل على ترقيم الميتوكوندريا في تم قياس حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا بواسطة اختبار ‎Mito Tracker MTT‏ ‎Mitochondrion—-Selective 5‏ وحيث يكون الهدف الوحيد لاختبار ‎MTT‏ هو نشاط ديهيدروجيناز ‎dehydrogenase‏ للميتوكوندريا؛ تعكس نتيجة اختبار ‎MTT‏ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا. إجراء اختبار: بعد إزالة المواد الطافية للمزرعة من الأرومات البشرية الطبيعية المزروعة في المثال 2؛ تم غسل الأرومات ‎Lyi)‏ الطبيعية مرتين باستخدام ‎Nissui ( PBS‏ ‎.(Pharmaceutical Co., Ltd., product No.: 05913 10‏ إلى الخلايا المغسولة تمت إضافة وسط أساسى يشتمل على محلول 33342 ‎Hoechist‏ مخفف 00 مرة (346-07951 ‎(DOJINDO LABORATORIES, product No.:‏ ومسبارات ‎Mito Tracker Mitochondrion—Selective‏ مخففة 2000 مرة ) ‎Invitrogen, product‏ ‎(NOL: M7512‏ وتمت زراعة الأرومات الليفية البشرية الطبيعية عند 37 درجة مئوية لمدة 30 ‎dads 5‏ بعد ‎cde all‏ تمت إزالة المواد الطافية للمزرعة وتم غسل الأرومات الليفية البشرية الطبيعية مرتين باستخدام ‎.(Nissui Pharmaceutical Co., Ltd., product No.: 05913) PBS‏ بعد الغسل» تمت إضافة ‎Nissui Pharmaceutical Co., Ltd., product No.: ) PBS‏ ‎as (05913‏ إلى الأرومات الليفية البشرية الطبيعية؛ وتلطيخ الأنوية (الخلايا الحية) وتم التقاط 0 صور الميتوكوندريا بواسطة مجهر ضوئي دقيق ( ‎Keyence Corporation, product No.:‏ ‎.(BZ=X7000‏ ‏بعد ذلك؛ تم قياس كل شدة وميض باستخدام قارئ طبق وامض ) ‎Thermo Fisher‏ ‎:Hoechis) (Scientific, product No.: VARIOSKAN FLASH‏ الطول الموجي للإثارة
— 3 2 — 6 نانو مترء الطول الموجى للوميض 465 نانو مترء ‎:Mito Tracker‏ الطول الموجى للإثارة 9 نانو ‎jie‏ ¢ الطول الموجي للوميض 599 نانو متر). بعد قياس شدة الوميض» تمت إزالة المواد الطافية؛ وتم غسل الأرومات الليفية البشرية الطبيعية مرة واحدة باستخدام ‎.(Nissui Pharmaceutical Co., Ltd., product No.: 05913) PBS‏ بعد غسل الأرومات الليفية البشربة الطبيعية؛ تم استبدالها ب ‎PBS‏ )100 ميكرو لتر/ عين) تشتمل على 0.5 مجم/ مل من ‎Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (SIGMA, ) MTT‏ ‎(product No.: M5655-1G)‏ وتفاعلت عند 37 درجة مئوية لمدة 5 ساعات. بعد ذلك؛ تمت إضافة 100 ميكرو لتر من 0.01 مولار من ‎SIGMA, product No.: ) HCI‏ 13-1690( 5 %10 من ‎Wako Pure Chemical Corporation, product No.: ( SDS‏ 0 191-07145) إلى كل عين وتفاعلت عند درجة حرارة الغرفة ‎sad‏ 24 ساعة. بعد التفاعل» تمت تنقية فورمازون من ‎MTT‏ ‏بعد تثقية فورمازان» تم قياس الامتصاص باستخدام 58( طبق ) ‎Thermo Fisher Scientific,‏ ‎(product No.: VARIOSKAN FLASH‏ (الطول الموجي للقياس 550 نانو مترء الطول الموجي المرجعي 660 نانو متر). 5 النتائج: الشكل 2 يوضح رسم بياني يوضح كمية الميتوكوندريا المُقاسة في الأمثلة 1- 3؛ المثال المقارن 1 ¢ ‎duc,‏ مقارنة. في الشكل 2؛ (أ) يوضح كمية الميتوكوندريا في ‎WIA‏ مزروعة لمدة 7 أيام؛ (ب) يوضح كمية الميتوكوندريا في خلايا مزروعة لمدة 14 ‎am‏ و(ج) يوضح كمية الميتوكوندريا في ‎WA‏ مزروعة لمدة 21 يوم 0 في الشكل 2 بافتراض أن كمية الميتوكوندريا في ‎die‏ مقارنة تبلغ 96100؛ يتم توضيح كميات الميتوكوندريا في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 نسبةً إلى كمية الميتوكوندريا في عينة المقارنة.
— 2 4 —
في المثال المقارن 1 المزروع لمدة 7 ‎all‏ بلغت كمية الميتوكوندريا 191 بالنسبة لعينة المقارنة
(انظر الشكل 2()).
بلغت كمية الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع لمدة 7 أيام 96116 بالنسبة لعينة المقارنة؛ بلغت
كمية الميتوكوندريا في المثال الثاني 906126؛ وبلغت كمية الميتوكوندريا في المثال الثالث 96143
(()2 ‏الشكل‎ kil) 5
بلغت كمية الميتوكوندريا في المثال المقارن 1 المزروع لمدة 14 يوم 96228 بالنسبة لعينة المقارنة
(انظر الشكل 2(ب)).
بلغت كمية الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع ‎saad‏ 14 يوم 90123؛ بلغت كمية الميتوكوندريا في
المثال الثانى 96128؛ و بلغت كمية الميتوكوندريا فى المثال الثالث 96172؛ بالنسبة لعينة 0 المقارنة (انظر الشكل 2(ب)).
بلغت كمية الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع لمدة 21 يوم 96246 بالنسبة لعينة المقارنة (انظر
الشكل 2 (ج)).
بلغت كمية الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع ‎saad‏ 21 يوم 90115؛ بلغت كمية الميتوكوندريا في
المثال ‎SEN‏ 96124؛ وبلغت كمية الميتوكوندريا فى المثال الثالث 96178 بالنسبة لعينة المقارنة (انظر الشكل 2 (ج)).
وفقاً لهذه النتائج» تم استنتاج أن رسفيراترول يتسم بتأثير لزيادة كمية الميتوكوندريا.
تم أيضاً استنتاج أن المكونات المضادة للشيخوخة المشتقة من بذور العنب من هذا الاختراع تتسم
بتأثير زيادة كمية الميتوكوندريا.
الشكل 3 يوضح رسم بياني يوضح حمل عمل كمية معينة من الميتوكوندريا الفقاسة في الأمثلة 1 - 3 المثال المقارن 1 6 ‎duc,‏ مقارنة.
— 5 2 — في الشكل 3؛ )1( يوضح حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في ‎WIA‏ مزروعة لمدة 7 أيام؛ (ب) يوضح حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في ‎WIA‏ مزروعة لمدة 14 يوم؛ و(ج) يوضح حمل العمل لكمية ‎dime‏ من الميتوكوندريا في ‎LOA‏ مزروعة لمدة 21 يوم. في الشكل 3 بافتراض أن حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في عينة مقارنة يبلغ 96100؛ يتم توضيح حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن 1 نسبة إلى حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في عينة المقارنة. بلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا 9622 بالنسبة للمثال المقارنة 1 المزروع لمدة 7 أيام (انظر الشكل 3()). بلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع لمدة 7 أيام 90674؛ بلغ حمل 0 العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال الثاني 9658؛ وبلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا 9638 في المثال 3 بالنسبة لعينة المقارنة (انظر الشكل 3()). بلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال المقارن 1 المزروع لمدة 14 يوم 9620 ‎dually‏ لعينة المقارنة (انظر الشكل 3 (ب)). بلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع لمدة 14 يوم %77 ¢ بلغ حمل 5 العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال الثاني 9663؛ وبلغ حمل العمل لكمية معينة من ‎Lyi Sail‏ في المثال الثالث 9634 بالنسبة لعينة المقارنة (انظر الشكل 3 (ب)). بلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال المقارن 1 المزروع ‎saad‏ 21 يوم 9649 بالنسبة لعينة المقارنة (انظر الشكل 3 (ج)). بلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال 1 المزروع لمدة 21 يوم 88 %« بلغ حمل 0 العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال الثاني 9676؛ وبلغ حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا في المثال الثالث 9662 بالنسبة لعينة المقارنة (انظر الشكل 3 (ج)). أوضحت هذه النتائج أن ربسفيراترول يتسم بتأثير لخفض حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا.
— 2 6 —
علاوة على ذلك؛ يتم استنتاج أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقاً للاختراع الحالي أيضاً يتسم بتأثير خفض حمل العمل لكمية معينة من الميتوكوندريا. أوضحت النتيجة من المثال 4 أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور ‎call‏ وفقاً للاختراع الحالي أيضاً يتسم بتأثير زيادة كمية الميتوكوندريا وخفض حمل العمل لكمية معينة من
الميتوكوندريا. بزيادة كمية الميتوكوندريا؛ تنخفض كمية ‎ATP‏ (أي حمل العمل ‎(workload‏ المراد إنتاجها في كمية معينة من الميتوكوندريا. يعتبر أن خفض حمل العمل لكمية معينة من الميتوكندريا التي تم تأكيدها في المثال 4 ترجع إلى زيادة كمية الميتوكوندريا وخفض كمية إنتاج ‎ATP‏ لكل كمية معينة من الميتوكندريا.
0 تعمل قدرة معالجة الميتوكوندريا الزائدة هذه على خفض إنتاج أكسجين نشط متولد بواسطة الميتوكندريا» وتزيد من إنتاج فوق أكسيد ديسميوتاز ‎(SOD) superoxide dismutase‏ الذي يعد إنزيماً لإزالة الأكسجين النشطء وبذلك تقليل كمية الأكسجين النشط التي تؤدي إلى تلف الميتوكوندريا والخلايا. وحيث يتم توليد حوالي 9690 من الأكسجين النشط بواسطة الميتوكوندرياء يمكن اعتبار أن خفض كمية الأكسجين النشط الناتج بواسطة الميتوكونندريا باستخدام مكون مضاد
5 للشيخوخة مشتق من بذور العنب وفقاً للاختراع الحالي يمكن أن يحمي الخلايا والأعضاء؛ وما إلى ذلك التى تتكون من خلايا من التلف والوصول إلى تأثير مضاد للشيخوخة. ‎Jad‏ 5 : اختبار لقياس الموت المبرمج والنخر > بعد ذلك؛ تم تأكيد التأثير على كمية خلايا الموت المبرمج وكمية خلايا النخر في الأمثلة والمثال المقارن.
‎ads 0‏ حيث اعتقد أن ررسفيراترول يتسم بتأثير مضاد للشيخوخة بواسطة حث الموت المبرمج؛ تم تأكيد تأثير المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقاً للاختراع الحالي على كمية خلايا الموت المبرمج.
— 7 2 — بالإضافة إلى ذلك؛ تم أيضاً تأكيد تأثير المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقاً للاختراع الحالي على كمية خلايا النخر المشابهة لموت الخلية مثل الموت المبرمج. تم قياس كمية خلايا الموت المبرمج باستخدام ‎١/‏ 000877 الذي استخدم تقليدياً كمرقم للموت المبرمج ومضياً بصورة انتقائية بواسطة ‎ANNeXin V‏ مُرقم ومضياً؛ باستخدام خصائصه حيث يرتبط ‎Annexin ١/‏ بفوسفاتيديل سيرين الذي يظهر ‎We‏ على سطح خلايا الموت المبرمج. تم قياس كمية خلايا النخر باستخدام دايمر إيثيديوم متجانس ‎ethidium )5010-١١1( 11١!‏ ‎homodimer [lI‏ الذي تم استخدامه تقليدياً كمرقم نخر. بمزيد من التفصيل؛ يُعد ‎1010-١١‏ ‏عبارة عن مسبار ‎aan‏ نووي غير منفذ للغشاء وتم قياس كمية خلايا النخر بواسطة استخدام 0 خصائصه حيث لا يتم تلطيخ أي من الخلايا الحية أو خلايا الموت المبرمج ولكن يتم تلطيخ خلايا النخر بالأحمر القاتم باستخدام ‎.5010-١١١‏ ‎sha)‏ تجرببي: بعد إزالة المادة الطافية للمزرعة للأرومات البشرية الطبيعية التي تمت زراعتها في المثال 2؛ تم غسل الأرومات البشرية الطبيعية مرتين باستخدام ‎NISSUI ( PBS‏ ‎.(PHARMACEUTICAL CO., LTD., product No.:05913‏ 5 إلى الأرومة الليفية البشرية الطبيعية المغسولة تمت إضافة محلول ارتباط منظم مرة واحدة يحتوي على محلول 33342 ‎Hoechist‏ مخفف 1000 مرة ( ‎DOJINDO LABORATORIES,‏ ‎١١ 0-0000 V ¢(product No.: 3466-1‏ مخفف 20 مرة؛ و ‎010-١١١‏ مخفف 0 مرة. ثم تمت زراعة الأرومة الليفية البشرية الطبيعية عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ثم بعد إزالة مادة المزرعة الطافية؛ تم غسل الأرومة الليفية البشرية الطبيعية مرتين في محلول 0 ارتباط منظم مرة واحدة. تمت إضافة محلول ارتباط منظم مرة واحدة إلى الأرومة الليفية البشربة الطبيعية بعد الغسل؛ وتم التقاط صور للتلطيخ النووي (خلايا حية)؛ تلطيخ ‎Annexin ١/‏ (الموت المبرمج)؛ وتلطيخ ‎010-١١‏ (النخر) بواسطة المجهر الضوئي الدقيق.
— 8 2 — تم حساب كمية خلايا الموت المبرمج وكمية خلايا النخر من صور الملاحظة الضوئية. علاوة على ذلك كان ‎V‏ 106-0080 اح ‎000-١١‏ و محلول الارتباط المنظم مرة واحدة المستخدم في الأمثلة من طاقم الموت المبرمج/ ‎«A‏ الكشف عن الخلايا الصحية ( ‎Takara‏ ‏7 : .مل ‎.(Bio, Inc. product‏ النتيجة: الشكل 4 عبارة عن رسم بياني يوضح كمية ‎IA‏ الموت المبرمج التي تم قياسها في الأمثلة 3-1( المثال المقارن 1 وعينة مقارنة. في الشكل 4؛ (أ) يوضح كمية خلايا الموت المبرمج في الخلايا المزروعة لمدة 7 ‎call‏ (ب) يوضح كمية ‎WA‏ الموت المبرمج في الخلايا المزروعة لمدة 14 ‎cps‏ و(ج) يوضح كمية خلايا الموت المبرمج في الخلايا المزروعة لمدة 21 يوم. في هذه الوثيقة؛ في الشكل 4؛ بافترارض أن 0 كمية خلايا الموت المبرمج في عينة المقارنة تبلغ 96100؛ وكمية خلايا الموت المبرمج في الأمثلة 3-1 وبتم توضيح المثال المقارن نسبة إلى كمية خلية الموت المبرمج في عينة المقارنة. مقارنةٌ بعينة المقارنة؛ بلغت كمية ‎LA‏ الموت المبرمج المزروعة لمدة 7 أيام في المثال المقارن الأول 962184 (انظر الشكل 4 (أ)). من ناحية أخرى؛ مقارنة بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج المزروعة لمدة 7 أيام في 5 المثال الأول 164 بلغت كمية خلايا الموت المبرمج في المثال الثاني 96102؛ وبلغت كمية ‎LA‏ الموت المبرمج في المثال الثالث 96483 (انظر الشكل 4 ()). مقارنة بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج المزروعة لمدة 14 أيام في المثال المقارن الأول 961400 (انظر الشكل 4(ب)). من ناحية أخرى؛ ‎Lae‏ بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج المزروعة لمدة 14 يوم 0 في المثال الأول 96107؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج في المثال الثاني 96313؛ و بلغت كمية خلايا الموت المبرمج في المثال الثالث 96226 (انظر الشكل 4 (ب)). مقارنة بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج في المثال المقارن 1 المزروعة لمدة 21 يوم 964525 (انظر الشكل 4 (ج)).
— 9 2 — من ناحية أخرى؛ ‎Lae‏ بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج المزروعة لمدة 21 يوم في المثال الأول 9659؛ بلغت كمية خلايا الموت المبرمج في المثال الثاني 96558؛ وبلغت كمية ‎WIA‏ الموت المبرمج في المثال الثالث 96668 (انظر الشكل 4 (ج)). أوضحت هذه النتائج أن ربسفيراترول يتسم بتأثير زيادة كمية خلايا موت الخلايا المبرمج. علاوة على ذلك؛ اتضح أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقًا للاختراع الحالي له ‎Lad‏ تأثير على زيادة كمية ‎DA‏ موت الخلايا المبرمج. الشكل 5 عبارة عن رسم بياني يوضح مقدار خلايا النخر المقاسة في الأمثلة 3-1؛ والمثال المقارن 1؛ وعينة المقارنة. في الشكل 5؛ (أ) يوضح مقدار خلايا النخر في الخلايا المستزرعة لمدة 7 أيام؛ (ب) يُظهر مقدار خلايا النخر في الخلايا المستزرعة لمدة 14 ‎clogs‏ (ج) يُظهر مقدار خلايا النخر في الخلايا المستزرعة لمدة 21 يوماً. بالإضافة إلى ذلك؛ في الشكل 5؛ تبلغ كمية خلية النخر في ‎due‏ ‏المقارنة 96100؛ ويتم توضيح كمية خلية النخر في الأمثلة 3-1 والمثال المقارن كنسبة مئوية لمقدار خلية النخر فى عينة المقارنة. مقارنةٌ بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا النخر المستزرعة لمدة 7 أيام في المثال المقارن الأول 5 6125 (انظر الشكل 5 ()). من ناحية ‎gal‏ مقارنةٌ بعينة المقارنة؛ بلغت كمية ‎WIA‏ النخر المستزرعة لمدة 14 يومًا في المثال الأول 9647؛ وبلغت كمية خلايا النخر في المثال الثاني 9647؛ وبلغت كمية خلايا ‎DA‏ ‏في المثال الثالث 96100 (انظر الشكل 5 ()). مقارنة بعينة المقارنة؛ تبلغ كمية خلايا النخر المستزرعة لمدة 14 يومًا في المثال المقارن الأول 0 %801 (انظر الشكل 5 (ب)). من ناحية ‎«(aT‏ مقارنةٌ بعينة المقارنة؛ بلغت كمية ‎WIA‏ النخر المستزرعة لمدة 14 يومًا في المثال الأول 96109؛ ويلغت كمية خلايا النخر فى المثال الثانى 96108؛ ويلغت كمية خلايا النخر في المثال الثالث 9695 (انظر الشكل 5 (ب)).
— 0 3 — مقارنة بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا النخر المستزرعة لمدة 21 يومًا في المثال المقارن الأول 8 (انظر الشكل 5 ‎((z)‏ ‏من ناحية ‎ga]‏ مقارنةً بعينة المقارنة؛ بلغت كمية خلايا النخر المستزرعة لمدة 21 ‎Gag‏ فى المثال الأول 9655؛ وبلغت كمية ‎WIA‏ النخر فى الاختبار ‎SE‏ 9628؛ وبلغت كمية خلايا النخر في المثال الثالث 9624 (انظر الشكل 5 (ج)). أظهرت هذه النتائج أن ريسفيراترول له تأثير في زيادة كمية خلايا النخر في جميع الفترات. من ناحية أخرى؛ اتضح أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقًا للاختراع الحالى له تأثير فى تقليل كمية ‎WIA‏ النخر. أظهرت نتيجة المثال 5 أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎Bg‏ للاختراع الحالي 0 لله تأثير في زيادة كمية خلايا موت الخلايا المبرمج وتقليل كمية خلايا النخر. يُعد موت الخلايا المبرمج عبارة عن آلية تعمل على حث موت الخلية لخلية ضارة أو خلية غير ضرورية للكائن ‎(all‏ وتزيل هذه الخلاياء مما يؤدي إلى توليد خلايا جديدة عن طريق إزالة الخلايا القديمة والخلايا المُعطلة على الفور. يعمل موت الخلايا المبرمج بشكل طبيعي لإزالة الخلايا السسنة؛ مما يؤدي إلى زيادة ‎WAY‏ السليمة في مستوى الخلية. يُعد العضو الذي يتكون من خلايا 5 صحية صغرراً. علاوة على ‎cell‏ يؤدي موت الخلايا المبرمج أيضًا إلى إزالة الخلايا المناعية مما يؤدي إلى تفاعل مناعي ذاتي؛ وهو عبارة عن آلية لمرض المناعة الذاتية؛ ويمكن توقع خفض مرض المناعة الذاتية من خلال عمله الصحيح. من ‎al‏ أخرى؛ يكون للنخر تأثير ضارء مثل التفاعل الالتهابى على الأنسجة المحيطة؛ نظرًا لأن الخلايا ‎sadn‏ دون معالجة مسبقة للإنزيم ‎enzyme‏ داخل الخلاياء وما إلى ذلك؛ مما يؤدي إلى إطلاق محتوى خلية يحتوي على إنزيم خارج الخلية؛ إلخ. يعزز هذا التأثير العكسي تدهور الخلايا وسبب التهاب في الجسم مما يزيد من الشيخوخة. وبالتالي» يسبب النخر أضرارًا للخلايا من خلال التأثير ‎Gla‏ على الأنسجة المحيطة؛ مثل التفاعل الالتهابى.
— 1 3 — لذلك؛ يعزز النخر شيخوخة الخلايا. وبالتالي؛ فهو يُعد فعالاً للغاية لتعزيز موت الخلايا المبرمج وقمع النخرء لقمع شيخوخة الخلايا. لهذا السبب؛ يتم إدراك أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎By‏ للاختراع الحالي والذي له تأثير في تعزيز موت الخلايا المبرمج وقمع النخر له تأثير ملحوظ في مكافحة الشيخوخة. من ناحية أخرى؛ اتضح أن ررسفيراترول لا يعزز موت الخلايا المبرمج فقطء ولكن يعزز النخر أيضاً. كما هو موضح أعلاه؛ يُعد قمع النخر مطلوباً لقمع شيخوخة الخلايا. لذلك» يعتبر أن ريسفيراترول لا يعزز موت الخلايا المبرمج فقط» ولكن أيضًا يكون للنخر تأثير مضاد للشيخوخة أقل من المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقًا للاختراع الحالي. 0 <«المثال 6: اختبار السمية> لتأكيد سمية المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎Bag‏ للاختراع الحالي؛ تم إجراء اختبار السمية عن طريق الفم الحاد (اختبار الحد) )2 على إرشادات ‎OECD‏ لاختبار المواد الكيميائية 420 (2001)) باستخدام إناث الفئران. طريقة الاختبار: تم تعليق مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب المسحوق طبقًا للاختراع 5 الحالي بالماء للحقن لتحضير محلول اختبار يبلغ 100 ‎[ane‏ ملليلتر. تم شراء إناث فثران بالغة من العمر خمسة أسابيع من سلالة ‎ICR‏ من شركة ‎SLC‏ اليابانية؛ وتم تربيتها بشكل أولي لمدة أسبوع تقريبًا. بعد التأكد من عدم وجود خلل في الحالة العامة؛ تم استخدامها للاختبار . تم إيواء خمس ‎Gh‏ إناث ليتم استخدامها للاختبار في قفص بولي كريونات؛ على الترتيب وتم 0 إطعامهن في غرفة ‎dup‏ عند درجة حرارة الغرفة )23 درجة مئوية + 2 درجة مثئوية)؛ ‎Ay‏ وقت إضاءة يبلغ 2 1 ساعة/ ‎cps‏
— 3 2 —
Nosan Corporation, a product name: lab MR stock) ‏تم إطعام الفئران أكل المختبر‎ (كرية ‎«all‏ الجرذ)) ومياه الشرب (مياه الصنبور). تم تعيين مجموعة اختبار ليتم إعطاؤها 2000 مجم/ كجم من مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور ‎all‏ ومجموعة المقارنة المراد إعطائها مياه للحقن كعينة مقارنة للمذيب ¢ وتم استخدام خمس فنران إناث لكل مجموعة على الترتيب. صامت إناث الفئران المستخدمة للاختبار لمدة 4 ساعات قبل الإعطاء. ا لاختبار عن طريق الغم وماء للحقن بجرعة فردية تبلغ 20 ملليلتر/ كجم ‘ على الترتيب ‘ باستخدام 0 - لوحظت الفتران الإناث ‎sad‏ 14 يوما بعد الإعطاء. وقد لوحظت ‎hal‏ الإناث في كثير من الأحيان في يوم الإعطاء ومرة واحدة في اليوم من اليوم التالى. تم قياس وزن ‎Ohl)‏ الإناث في اليوم 7 واليوم 14 بعد الإعطاء؛ وتمت مقارنة المجموعات عن طريق اختبار ‎At‏ 965 من مستوى الأهمية. 5 .تم تشريح جميع إناث ‎Ohl‏ بعد نهاية فترة الملاحظة. النتيجة: فى أي من مجموعات ‎celle)‏ لم ترد أية وفيات خلال فترة الملاحظة. في أي من مجموعات الإعطاء؛ لم يوجد أي خلل خلال فترة الملاحظة. يوضح الجدول 1 نتيجة تغير وزن مجموعة الاختبار ومجموعة المقارنة. في قياس وزن الجسم في اليومين 7 و 14 من اليوم التالي للإعطاء؛ اتضح أن مجموعة الاختبار 0 الم يكن لها اختلاف كبير في الوزن مقارنة بمجموعة التحكم. لم يوجد أي خلل في جميع الفئران الإناث في تشريح الجثة بعد نهاية فترة الملاحظة.
— 3 3 — [الجدول 1[ مجموعات المعالجة | الوزن قبل الإعطاء | الوزن بعد الإعطاء الإعطاء 4 1.1 )5( |5)1.0£29.0( |5)1.7£30.8( 427.0 1.1 )5( |5)2.1£29.4( 30.21 + 2.5 (5) يتم توضيح الوزن بمتوسط القيمة +الاتحراف المعياري (الوحدة: جم). يتم توضيح عدد الفتران الإناث التي تم قياس وزنها بين قوسين. أظهرت هذه النتائج أنه عند إعطاء ‎deja‏ واحدة عن طريق الفم للفتران الإناث» فإن قيمة ‎LD50‏ ‏5 للمكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎Gay‏ للطلب الحالي تجاوزت 2000 مجم/ كجم فى الفئران الإناث. أظهرت نتائج الأمثلة 5-3 أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب وفقًا للاختراع الحالي يزيد من كمية الميتوكوندريا؛ ويقلل حمل العمل على كمية معينة من الميتوكوندريا؛ ويزيد من كمية ‎WIA‏ موت الخلايا المبرمج عن خلايا نخر؛ وبالتالي يكون له تأثير ملحوظ لمكافحة 0 الشيخوخة. علاوة على ذلك؛ ‎aig‏ للمقارنة مع ربسفيراترول بمفرده المتوقع أن يكون له تأثير مضاد للشيخوخة؛ اتضح أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎Gy‏ للاختراع الحالي له تأثير مضاد للشيخوخة بشكل ملحوظ أكثر بكثير من ريسفيراترول بمفرده. بالإضافة إلى ذلك؛ أظهرت نتيجة المثال 6 أن المكون المضاد للشيخوخة المشتق من بذور العنب ‎Gy 5‏ للاختراع الحالي له سمية خلوية أقل وسلامة أكثر وضدحًا. ويالتالي؛ تتسم المواد الغذاثية الصحية ومستحضرات التجميل التي تحتوي على مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب ‎Big‏ للاختراع الحالي بتأثير مضاد للشيخوخة وسلامة ملحوظة.
— 4 3 — قابلية التطبيق الصناعي: ‎Gy‏ للاختراع الحالي» حيث تحتوي المواد الغذائية الصحية ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة على مكون مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب يتكون من 9660 بالوزن أو أكثر بالوزن من بولي فينول مشتق من بذور العنب النقية ببساطة؛ يمكن توفير الأطعمة الصحية ومستحضرات التجميل المضادة للشيخوخة ذات التأثير المضاد للشيخوخة. لذلك؛ يتم استخدام الاختراع الحالي بشكل مناسب كغذاء صحي ومستحضرات تجميل لها تأثير مضاد للشيخوخة.

Claims (1)

  1. عناصر الحماية 1- طريقة لتصنيع مكون مشتق من بذور العنب لدفع الاستنبات لزيادة كمية خلايا الموت المبرمج ‎apoptosis cells‏ وخفض كمية خلايا النخر ‎necrosis cells‏ ؛ تشتمل على: ( الخطوة 1) غمس واحدة أو أكثر من بذور العنب المختارة من مجموعة تتكون من ‎Vitis‏ ‏ا ‎«vinifera‏ .ا ‎(Vitis labrusca‏ .ا ‎«.Vitis amurensis L (Vitis coignetiae‏ و ‎Vitis‏
    ‎.shiragaiL 5‏ في ماء عند 30 درجة مثوية-60 درجة مئوية لمدة 20- 80 ساعة؛ (الخطوة 2) إزالة بذرة العنب المغمورة من الماء في الخطوة المذكورة 1 وتجفيفها بصورة طبيعية في الهواء ؛ (الخطوة 3) غمس بذرة العنب المجففة طبيعياً في الخطوة 2 المذكورة في الماء عند 15 درجة مثوية-45 درجة مئوية لمدة 100-10 دقيقة؛ 0 (الخطوة 4) إزالة بذرة العنب المغمورة من الماء في الخطوة المذكورة 3 وتجفيفها بصورة طبيعية في الهواء ؛ (الخطوة 5) تكرار الخطوات المذكورة 3 و4 لدفع استنبات بذرة العنب حتى ينتفخ ‎gall‏ الجنيني ‎embryonic portion‏ لبذور العنب المجففة طبيعياً في الخطوة المذكورة 4 وبتورم؛ (الخطوة 6) تجفيف بذرة العنب لدفع الاستنبات عند 35 درجة مئوية - 60 درجة مئوية؛ (الخطوة 7) سحق بذرة العنب المجففة في الخطوة المذكورة 6؛ (الخطوة 8( الحصول على ‎gia‏ مستخلص يحتوي على بولي فينول ‎polyphenol‏ مشتق من بذرة العنب بواسطة غمس بذرة العنب المسحوقة التي تم الحصول عليها في الخطوة المذكورة 7 في أي من الماء؛ إيثانول ‎ethanol‏ أو مذيب مختلط من الماء وإيثانول ‎ethanol‏ ؛ و (الخطوة 9( تجفيف وسحق ‎gall‏ المستخلص الذي يحتوي على بولي فينول ‎polyphenol‏ مشتق
    0 .من بذرة العنب الذي تم الحصول عليه في الخطوة المذكورة 8.
    0 {<) ‏الا الا ال تاي وهو‎ : ‏الا‎ : 3 » thee ‏ال‎ 3 A 3 CBE Jy ; 5 ns DER ER { 8 4 i ‏ةا‎ ‎4 Tv wh Bn, 0 eid os 7 i 2 = PE OB AE 1 5 3 COUR OB = : 1B
    A . = i oo BB y i 2 sone > HI 8 ‏احج اتات لأا بوت ا ا اول يايد حصي‎ Y ox BE ‏امتح ا‎ ‏تت‎ BE OB = 8 2 Nr ‏اخ ب‎ +8 ses ‏ها ع‎ © OB OB HOE ‏سن «م‎ 5 ‏يجا‎ EB OB OB = 8 8 8 8 RIFE WE. = on BR 5 a ER BR BL PE ‏ا م ا احم رض ا‎ Sg ‏وح وض‎ 44444 34434 vw TD DITO ew TN TOIT La ‏احج‎ oe te Ly ‏اح 1[ حي‎ pe i gt dq 4 ‏ا‎ ‏ال باد ا‎ hy ‏لن له‎ ‏احم‎ = {z) Ea + 0 NW gp ‏وطق‎ PR i i FAR vn % 3 *« « ‏ل د ا ب‎ 4 8 “1% : x5 +4 : ‏ل الوه‎ ; RE ON 7 ER OR 1 ‏اي‎ ‎3 ‏با‎ So ‏الس ل‎ 4 ‏ةلقل«‎ ‎~~ TE OB to (EB a EOE CN ees aa Te LEBEL we Demon iE lay il : 5 KX ٍ 3 J FE fed 7 7-7 ‏سات د‎ a ded + 3 4 : i Ty i ‏ا‎ 0 i 5 i In bog ‏نشكا‎
    —_ 3 7 —_ 00 (=) © fo. ‏واج ا‎ gg Ta pr ‏ألا 8 0 ض‎ Pe } : 8 WB ‏اساسا‎ ‏ولا ل وال‎ Ne SR : 0 EEN : NX sa : 8 wv \ A > ‏ااي‎ ‎; | 0 i. : X % ¥ Rp Ne As yp rr ‏ا ا‎ 3 vy eh 3 3 : \ & ih CY. a8 ‏له‎ 0 Xe ‏ل 8 ا‎ 0 ‏ل‎ : 8 gm BR - : 8 x ‏اين اح‎ bo NX. rn SRR : X ‏ا‎ 0 any = : 8 £22 La NN ‏ا : ين‎ 1 8 0 : : Xx iy an RR 1: 8 i ‏ل‎ x : 8 EES 1 9 3 ‏مال 3 ااا اس‎ ei NL iE 52 ; \ vow 3 : 8 8 RX nN pos v 1 : 8 8 RB = x +2 : 8 ‏ا بج‎ RR NEE RE BE NYE ‏ا ا نا نا‎ #« 8 ‏ل لذ & ل يا‎ : DN N BE OB oN . ‏ا اه‎ B88 ‏لعي‎ : 8 8 8 ©» . ™y : 8 N = SR BR 1 i 8 8 8 8 8 ‏ا 0 \ \ ل‎ 3 ٍ \ \ EE ‏ا 0 \ \ 3 نا‎ ‏ال‎ AAR 3 ‏ل م‎ % : x hs 8 ‏ا 77" لي‎ Eee 3 ‏ا ا‎ © XYii:. ‏ا‎ NB EERE ‏لخم‎ Se NY TT ‏هي ا اذ الج‎ NY: § © 2 NY! | ‏د‎ ‎= ‏ا‎ 3 Ce CNN EEE = NN PRR TET Domi Bam ‏ل‎ EE Ven Tae Fem dad ‏ا اا يم لال ليا‎ ‏ل‎ 34444 34344 : 4 : Ey ag ٍ a pe he : 5 a : he fal : 33 J 1 3 4 Co i <> ‏ب‎ ‏ب رك لاي 4 يح«‎ 5 CU Ey ey ‏الشكل ؟‎ ‏م 34 ا ربخ يم‎ ّ
    0 (=) (2) 4 130 ro 1 ties frosts 1 X ‏ل و‎ - FN 0 i “8 : 8 rex 3 0 : 3 1 3 oo \ 8 ‏ا‎ ‎30 PN 4 0 ‏قَْ عه‎ A cA AN 8 TN = ‏لي‎ EB ts : NX RR . J i N ‏ا 8 : الم"‎ BR ava ‏:ات اا‎ N By i 8 ‏ا ال‎ 4 - : NX OR ‏ب‎ ‏ص‎ BE Yo NN Rx a NLRB a : \ = 0 + 0 A 3 = Sa i Yow : . ‏م‎ 0 0 0 ‏ل نا © 1 .م.م © 2 ا‎ NEE B Da is 5 i 3 de A SI EEE R] 393 Yel ‏الا‎ 0m OY ‏اا‎ = YY oi 9 0 4 SN BEE dv NN - § oo MOVXY IED LN N11 = 0 8 a.
    DD X Y = = = = X 3 BE BB Joe NN.
    ELK & 9 «NN ERE TF ‏ه‎ aE ARR So Ads dd > 0933 ‏دواد‎ ~~ 3 J ‏ال ليوات‎ ‏تم‎ 4 4 54.4 CF 3da8d8 ‏ج‎ 33 444 ' ٠ 53 317 ‏ا مك إطا<‎ 3 3 roe ‏ال‎ ‎: 4 A i i 4 3 ٍ ‏ا‎ i dD Cd 3 ‏له‎ ‎PPLE ‏ل من‎ 7 ‏ومع‎ nd ¥ ‏الشكل‎ ‏خخ‎ Dey aad
    — 3 9 — { 3 Sa (=) Sad ( ) Rex Y gE $ Kg penne ‏وا واو يها‎ pen ا | \ ال ' : \ : =X : 8 i 8 : 3 X : 8 A 3 8 3 X Swe ‏ا‎ ‎Shee RT i 4 “8 ‏ولا‎ ٍ N
    5 . 3 ‏ا‎ » a Eo 9 ١ ‏م‎ \ ooo Y + EN Po 3 wd ‏ا = : ا‎ ol ws BN 43 ‏ا ٍْ 3 اا‎ . 3 To vey Tr TN Tres idl) 1 ْ ‏ل‎ ‎8 : INE : BN ‏ب‎ ٍْ BN . a : iid “8 ُ 8 ‏م‎ 8 3 5: : RR 2 3 Hotei ‏ال‎ BR 4 foci BBY 3 : RN X 5 : ‏خم‎ 8 7 3 i. N : RR NX ‏ا‎ : 3% Bs I i RR 8 8 ‎i : 8 8 3 BOB 8 3 : 8g 8 ©‏ ‎BRN‏ 2 لا ل ‎w= : = \ = CL‏ ‎egg 3.0 210‏ ا . ‎Te.‏ ‏8 ا ‎Yor‏ ,7 \ ا 1 ال اط ‎ee‏ 88 = = إٍْ ‎NEE EX pt‏ بسر ل ل ا يح ‎aan‏ تي ا 2 ةع 2 0 ا#د, = ل ماوق © ‎SON BRREN‏ ‎J3434‏ 3 #4444 ال ‎dee‏ الوا الى راض ا ا ‎od A Ld 4 RN 4‏ نا نا ‎a “y : BN “8 = : 2 . 3 ‎Fpl iw . & § . FED at % i J ) ! Fra ‏وعم‎ ok 8 4
    ٍ i ‏إن‎ - XK 2 ‏ااا او ملم‎ © Con 4 ٍْ \ ٍْ \ ‏ات يج‎ 5 a ER be Ne : ‏اللا بج«‎ 1 8 ‏إٍْ‎ : 8 Cy 0 Nk ‏الا عا‎ 8 0 8 4 $reg NJ ٍ 0 ‏مض‎ 0 3 0 ١ of : \ 1 Ani \ ‏ا المت ب‎ ‏د ا ال اي‎ . == IN 5 8 = : : 5 { + 8 ‏ا وخ اص‎ 2 ٌ \ 2 = 3 8 4 Lo i } i X 4 : 0 i X ‏ل‎ FRET 8 ‏مات‎ ; : 1 iy I) 1 X x 0 i 8 8 0 ‏ل‎ NX iE NX 5 Yel R Ra) ‏ل‎ + INS ‏الأ‎ ‏محم‎ i \ ‏ا يح‎ 8 8 Ta : X x OR OR 8 ‏حيصي‎ : 8 |; a 18 we fa NE BEB — th : 8 = FF = \ = NE Be 8 8 Ng ‏ا ا ا‎ = NE § ‏ا‎ Ce. XE 1 ‏ا 8 8 : ميا‎ BR 8 Nw ‏ال‎ 0 BBY ‏ا‎ Ey ‏ا‎ i ‏منت‎ ‎; NX BORO \ : N BN OR OB \ i X BR OR 8 3 TE Loan CARER ABER LN ‏ال ل‎ 3433 43333 A443 TAREE TN ‏لاط‎ IT Jy 3a Ea | 3 4, CNG 33 LY Ee J ! q BR fae wo ‏رح‎ 3 ‏لعن‎ Ty 3 ‏اح‎ ‎Ea a 3 + ‏ا‎ > {
    && . ] ‏الس‎ ‎TELE ‏ال‎ 3 2 ; ‏ماي لوم »جع‎ §
    الحاضهة الهيلة السعودية الملضية الفكرية ‎Swed Authority for intallentual Property pW‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § ام 5 + < ‎Ne‏ ‎ge‏ ”بن اج > عي كي الج دا لي ايام ‎TEE‏ ‏ببح ةا ‎Nase eg‏ + ‎Ed - 2 -‏ 3 .++ .* وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. »> صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > ”+ ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ uo‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA519410730A 2017-12-15 2019-12-05 أغذية صحية مضادة للشيخوخة وطريقة لإنتاج عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب SA519410730B1 (ar)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/JP2017/045207 WO2019116574A1 (ja) 2017-12-15 2017-12-15 抗老化健康食品及び化粧品並びにブドウ種子由来抗老化成分の製造方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA519410730B1 true SA519410730B1 (ar) 2022-11-10

Family

ID=66819198

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA519410730A SA519410730B1 (ar) 2017-12-15 2019-12-05 أغذية صحية مضادة للشيخوخة وطريقة لإنتاج عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب

Country Status (15)

Country Link
US (2) US20200306334A1 (ar)
EP (1) EP3607835B1 (ar)
JP (2) JP6929528B2 (ar)
KR (1) KR20200005595A (ar)
CN (1) CN111432660A (ar)
AU (1) AU2017442781B2 (ar)
BR (1) BR112020002163B1 (ar)
CA (1) CA3054498C (ar)
ES (1) ES2910095T3 (ar)
MX (1) MX395586B (ar)
NZ (1) NZ756986A (ar)
RU (1) RU2744299C1 (ar)
SA (1) SA519410730B1 (ar)
WO (1) WO2019116574A1 (ar)
ZA (1) ZA201907308B (ar)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX395586B (es) * 2017-12-15 2025-03-25 Tsukasa Nagao Alimento y cosméticos saludables para aumentar la cantidad de células apoptóticas y para disminuir la cantidad de células necróticas y un método de fabricación de un ingrediente derivado de semilla de uva con crecimiento forzado de brotes para aumentar la cantidad de células apoptóticas y para disminuir la cantidad de células necróticas.
JP2021109836A (ja) * 2020-01-07 2021-08-02 司 永尾 癌化学療法に伴う副作用を軽減するための組成物
JP2022058005A (ja) * 2020-09-30 2022-04-11 司 永尾 過剰な免疫応答を軽減するための組成物
CN112553288B (zh) * 2020-12-09 2022-06-07 汤臣倍健股份有限公司 一种筛选具有抗衰老潜力天然产物的方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4729660B2 (ja) * 2005-01-07 2011-07-20 株式会社 シードライフテック ブドウ種子を原材料としたポリフェノールの製造方法
US20070003644A1 (en) * 2005-04-16 2007-01-04 Unitel Technologies, Inc. Concentrated polyphenolic product and process for making the same
JP4739161B2 (ja) * 2005-10-26 2011-08-03 花王株式会社 持久力向上剤
EP1993522A2 (en) * 2005-10-26 2008-11-26 Kao Corporation Resveratrol and/or grape leaf extract as i.a. endurance improver, anti-aging agent, muscle strength improver
CA2732426C (en) * 2008-07-31 2018-05-15 Shaklee Corporation Method of preparing a muscadine pomace extract
JP5852557B2 (ja) * 2009-04-10 2016-02-03 チー,ハイヤン 新規抗老化剤及びそれらを同定する方法
JP5759438B2 (ja) * 2012-10-04 2015-08-05 司 永尾 機能性組成物並びに該組成物を含有する健康食品及び化粧品
ITMI20130397A1 (it) * 2013-03-15 2014-09-16 Giuliani Spa Composizione a base di flavonidi per uso farmaceutico, nutrizionale o cosmetico con potenziata azione antiossidante
CN103509642A (zh) * 2013-05-24 2014-01-15 天津国纳科技发展有限公司 一种富含白藜芦醇葡萄籽油的生产工艺
MX395586B (es) * 2017-12-15 2025-03-25 Tsukasa Nagao Alimento y cosméticos saludables para aumentar la cantidad de células apoptóticas y para disminuir la cantidad de células necróticas y un método de fabricación de un ingrediente derivado de semilla de uva con crecimiento forzado de brotes para aumentar la cantidad de células apoptóticas y para disminuir la cantidad de células necróticas.

Also Published As

Publication number Publication date
ZA201907308B (en) 2022-03-30
US20220347253A1 (en) 2022-11-03
AU2017442781A1 (en) 2019-09-26
WO2019116574A1 (ja) 2019-06-20
CA3054498C (en) 2022-08-02
NZ756986A (en) 2023-06-30
JP6929528B2 (ja) 2021-09-01
CN111432660A (zh) 2020-07-17
EP3607835A1 (en) 2020-02-12
CA3054498A1 (en) 2019-06-20
ES2910095T3 (es) 2022-05-11
MX2019011489A (es) 2019-11-01
EP3607835A4 (en) 2020-12-02
KR20200005595A (ko) 2020-01-15
BR112020002163A2 (pt) 2020-07-28
JP2021178850A (ja) 2021-11-18
BR112020002163B1 (pt) 2023-02-07
US20200306334A1 (en) 2020-10-01
JPWO2019116574A1 (ja) 2020-04-30
AU2017442781B2 (en) 2020-10-01
EP3607835B1 (en) 2022-01-12
MX395586B (es) 2025-03-25
RU2744299C1 (ru) 2021-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA519410730B1 (ar) أغذية صحية مضادة للشيخوخة وطريقة لإنتاج عنصر مضاد للشيخوخة مشتق من بذور العنب
Singh et al. Green synthesis of gold and silver nanoparticles from Cannabis sativa (industrial hemp) and their capacity for biofilm inhibition
Ghagane et al. In vitro antioxidant and anticancer activity of Leea indica leaf extracts on human prostate cancer cell lines
Kim et al. Antioxidant and antiproliferative activities of mango (Mangifera indica L.) flesh and peel
Wang et al. Chemical characterization and therapeutic properties of Achillea biebersteinii leaf aqueous extract synthesized copper nanoparticles against methamphetamine‐induced cell death in PC12: a study in the nanotechnology and neurology fields
Zhang et al. Effect of edible carboxymethyl chitosan-gelatin based coating on the quality and nutritional properties of different sweet cherry cultivars during postharvest storage
Hwang et al. Anti-oxidant and anti-inflammatory properties of methanol extracts from various crops
Assemian et al. Garcinia mangostana leaf extracts from ivory coast possess remarkable antioxidant, anti-inflammatory, and cytotoxicological properties
JP7232642B2 (ja) 抗老化方法及び抗老化剤
Bošnjak-Neumüller et al. Nepeta rtanjensis (Lamiaceae), a plant endemic to the Balkans: Phenolic composition, antioxidant activity, and in vitro antigenotoxic effects in triiodothyronine-induced DNA damage in human lymphocytes.
Abbaszadeh et al. Antioxidant activity, phenolic and flavonoid contents of Echium species from different geographical locations of Iran
Paosen et al. Control of biomaterial‐associated infections through biofabrication of gold nanoparticles using Musa sapientum extract
Ali et al. Qualitative phytochemical screening and antifungal activity of ethanol extract of young papaya seeds (Carica papaya L.) against candida albicans
Namdevrao et al. Formulation and Optimization of Selenium Nanoparticles Using Passiflora edulis Leaf Extract: Permeation and in Vitro Release Kinetic Study
Limsitthichaikoon et al. Improvement of chemical stability and activities of anthocyanins by complexation
Arora et al. TPC, TFC & antioxidant activities of Crepidium acuminatum (D. Don) Szlach
Ahmad et al. TOTAL FLAVONOID CONTENT, MICROSCOPIC AND MICROBIAL EVALUATION OF SYRIAN GINKGO BILOBA PRODUCTS
Ramadan et al. Protection of soybean by orange peel extract and its nanocapsules against ethyl methanesulfonate damages
Semangoen et al. Antioxidant effects of unpolished Sung-Yod sticky rice on prevention of ethylene glycol-induced renal pathology in rats
Singh et al. Study on correlation of Antioxidant activities with presence of phenolic and Flavanoid contents in Emblica officinalis and Terminalia chebula
Ivanov et al. Tripleurospermum inodorum–mayweed without scent but with range of bioactivities
Zia Drying of blueberry (Vaccinium spp.) and cornelian cherry (Cornus mas L.) using different methods and determination of bactericidal effect of the dried product on e. coli (Escherichia coli) under in vitro conditions
Adu et al. Micromorphology and Histology of the Secretory Apparatus of Diospyros villosa (L.) de Winter Leaves and Stem Bark. Plants 2022, 11, 2498
Fahmawati et al. The evaluation of antioxidant activity of cinnamon bark (Cinnamomum burmannii) nanopowder in comparison with extracts
Muhamet et al. Antioxidant activity of different polar parts of Salix caprea flower extract.