SA110310369B1 - أجسام مضادة تخص dkk-1 واستخداماتها - Google Patents

أجسام مضادة تخص dkk-1 واستخداماتها Download PDF

Info

Publication number
SA110310369B1
SA110310369B1 SA110310369A SA110310369A SA110310369B1 SA 110310369 B1 SA110310369 B1 SA 110310369B1 SA 110310369 A SA110310369 A SA 110310369A SA 110310369 A SA110310369 A SA 110310369A SA 110310369 B1 SA110310369 B1 SA 110310369B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
antibody
arrangement
antibodies
amino acid
bone
Prior art date
Application number
SA110310369A
Other languages
English (en)
Inventor
Mei Li
Vishwas Madhavparalkar
Jaume Pons
Donna Marie Stone
Original Assignee
Pfizer
Rinat Neuroscience Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer, Rinat Neuroscience Corp filed Critical Pfizer
Publication of SA110310369B1 publication Critical patent/SA110310369B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/12—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis
    • A61P3/14—Drugs for disorders of the metabolism for electrolyte homeostasis for calcium homeostasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة (antibodies) (Abs) وبأجزاء (fragments) منها ترتبط مع Dkk-1 و، بصفة خاصة، بأجسام مضادة مكتسبة السمة الآدمية (humanized antibodies) (HAbs) وأجزاء منها ترتبط مع Dkk-1 و، أيضا بتحديد أكثر ترتبط مع أجسام مضادة مكتسبة السمة الآدمية كليا وبأجزاء وظيفية مناعيا منها ترتبط مع Dkk-1. تتوافر أيضا أجسام مضادة وأجزاء منها تتنافس مع ارتباط الجسم المضاد أحادي النسخ مضاد Dkk-1 فأري للارتباط مع خلايا Dkk-1+. تتوافر أيضا nucleic acids تشفر أجسام مضادة مضادة Dkk-1 أو أجزاء منها، بالإضافة إلى نواقل إظهار (expression vectors) وخلايا عائلة (host cells) تتضمن هذه nucleic acids للإظهار التخليقي لأجل أجسام مضادة مضادة Dkk-1 وأجزاء منها. تتوافر أيضا طرق لتحضير الأجسام المضادة وأجزاء منها تابعة للاختراع. تتوافر أيضا عوامل ابتنائية (anabolic agents) للعظم. تتوافر أيضا تركيبات دوائية (pharmaceutical compositions) تشمل اجسام مضادة أو أجزاء منها من الاختراع. تتوافر أيضا طرق (methods) لعلاج أمراض، حالات واضطرابات، مثل اضطرابات العظم، التي تسبب فقدان للعظم. تتوافر أيضا طرق لعلاج أو منع فقد كتلة عظمية، طرق حث كتلة عظمية زائدة، وطرق حث نشاط Wnt.

Description

أجسام مضادة تخص 0166-1 واستخداماتها 0 ‎Antibodies specific for DKK-1 and their uses‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع يتعلق الاختراع الحالي بأجسام مضادة ‎(Abs) (antibodies)‏ وبأجزاء ‎(fragments)‏ منها ترتبط مع ‎Dkk-1‏ و؛ بصفة خاصة؛ بأجسام مضادة مكتسبة السمة الآدمية ‎(humanized‏ ‎(HAD) antibodies)‏ وأجزاء منها ترتبط مع ‎pie‏ وء أيضا بتحديد أكثر يتعلق ب ‎HAbs‏ ‎٠‏ كليا وبأجزاء منها ترتبط بصفة خاصة مع ‎(Dik.‏ تحديدا 2106-1 آدمي. تتوافر 206166 ‎acids‏ تشفر ‎Dkk-1 alias Abs‏ أو أجزاء منهاء؛ بالإضافة إلى نواقل إظهار ‎(expression‏ ‎vectors)‏ وخلايا ‎(host cells) bile‏ تتضمن هذه ‎nucleic acids‏ للإظهار التخليقي لأجل ‎Abs‏ ‏المضادة ‎.Dkk-1‏ تتوافر أيضا عوامل ابتنائية ‎(anabolic agents)‏ للعظم. تتوافر أيضا تركيبات دوائية ‎(pharmaceutical compositions)‏ تشمل ‎Abs‏ أو أجزاء منها من الاختراع. تثوافر ‎La)‏ ‎٠‏ طرق ‎(methods)‏ لعلاج أمراض؛ حالات واضطرابات , مثل اضطرابات العظم؛ التي تسبب فقدان للعظم. تتوافر أيضا طرق لعلاج أو منع فقد كتلة عظمية؛ طرق حث كتلة عظمية زائدة؛ وطرق حث نشاط ‎Wnt‏ ‏إن 1770156 هي ‎proteins‏ سكرية ‎(glycoproteins)‏ مفرزة ترتبط مع وتنشط معقد مستقبل ‎(receptor complex)‏ يتضمن ‎protein‏ قليل الكثافة متعلق بالمستقبل ‎proteins 5 (LRP5/6)‏ ‎١‏ الناضجة. ‎Cadigan, K.M. and Y.I Liu (2005) Journal of Cell Science 11 9, 395-402; Nusse, R.‏ ‎Development 1 30(22):5297-305. ; and Pinson, K I. (2000) Nature 2000‏ )2003( .407(6803):535-8 تم الكشف عن أن 170105 ينظم كتلة العظم و أن؛ تتشيط مسارات إشارات ‎Wnt‏ ‏»© يؤدي إلى تراكم كتلة عظمية. ‎Boyden, L.M. et al. (2002) N Engl J Med 346:1513-1 521; Little, R.D. et al. (2002)‏ ‎Am J Hum Genet 70:1 1-19; and Gong, Y. et al. (2001) Cell 107:51 3-523.‏ إن إشارات ‎Wit‏ تنظمها بصورة محكمة مضادات ‎“(antagonists)‏ تتضمن جزيئات مفرزة مثل ‎Dickkopf 1 (Dkk-1). Tian, E. ef al, (2003) N Engl J Med 349:2483-2494‏ إن النوع
. الشكلي ‎key‏ 4 العظمية الكبيرة ‎(HBM)‏ الملحوظ في الآدميين اتضح أنه بسبب طفرة 0 ‎(mutation)‏ نقطة واحدة في ‎LRps (GI71V)‏ التي ‎Lis‏ قدرة 0101 على ربط ‎-LRPS5‏ : ‎Zhang, 37. et al. (2004) Mol Cel Biof. 24(11):4677-84.‏ إن الدور الحرج لإشارات 11708 في تكوين العظم ونمو العظم يجعل 1100-1 هدفا مفيدا ‎٠‏ لمعالجة أمراض أو حالات يكون فيها النشاط الزائد لخلايا التعظم (كثافة كتلة عظمية زائدة؛ تكوين عظمي زائد بدون زيادة مقابلة في امتصاص العظم) مفيدا للمريض؛ متضمنة؛ على سبيل المثال» تقليل عدد الكسور التي تحدث؛ ‎ia‏ نتيجة لهشاشة عظام غير معالجة. تكشف ‎W0O2006/015373 (US2006/0127393)‏ عن ‎Abs‏ من أجل ‎Dike]‏ لعلاج أمراض عديدة؛ متضمنة اضطرابات العظم. ‎acs‏ 1152008/0193449 عن ‎Abs‏ تخص 7106-1 التي تثبط ‎٠‏ ارتباط 1010-1 مع 5 تركيبات تشمل تلك ‎Abs‏ لإثارة نمو العظم؛ وتركيبات تشمل تلك ‎Abs‏ لعلاج اضطرابات العظم ‎fia‏ هشاشة العظام. لا تزال هناك حاجة لعوامل جديدة ابتنائية للعظم تعارض شاط 0119-1 وبذلك تزيد نشاط خلايا التعظم» لعلاج أمراض؛ حالات واضطرابات» مثل مشاشة العظام» حيث يكون ذلك التكوين الزائد للعظم مفيدا للمريض٠‏ ‎vo‏ إلوصف العام للاختراع ّ يتعلق الاختراع الحالي ب ‎Abs‏ وبأجزاء ‎Sie)‏ أقسام تربط مولد مضاد) منها ترتبط مع 21 و بصفة خاصة؛ ب ‎Ap‏ مكتسبة السمة الآدمية وبأجزاء منها ترتبط مع 1006-1 9“ بصفة خاصة أكثر أيضا ب ‎Abs‏ مكتسبة السمة الآدمية كليا وبأجزاء وظيفية مناعيا ترتبط مع ‎Dkk-1‏ إن ‎Abs‏ والأجزاء منها تعارض قدرة ‎ppg‏ على تثبيط نشاط ‎Wnt‏ إن ‎Abs‏ ‏آٍّ ‎٠‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا منها تعارض ,3 ‎Dik-1‏ على تثبيط مسار إشارات 1708 في العظم مع زيادة مقابلة في كتلة العظمة. تتضمن ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا منها ‎Abs‏ لها بناء طبيعي الوجود ؛ بالإضافة إلى ‎polypeptides‏ بها مجال سيطرة ربط مولد مضاد ‎Ab Mie)‏ مجال سيطرة) | يمكن استخدام ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا منها لعلاج تشكيلة من الأمراض» الحالات والاضطرابات؛ متضمنة بلك المتعلقة بفقد كتلة العظم؛ مثل هشاشة العظام. يمكن ‎vo‏ أيضا استخدام ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا منها لعلاج ‎coal‏ حالات» أو اضطرابات تتعلق بفقد ثانوي للعظم؛ مثل؛ فقد العظم الناتج من أو الملازم مع؛ ‎Dis‏ معالجة مزمنة مع
¢ ‎corticosteroids‏ مثبطات ‎caromatase‏ أو ‎¢thiazolidinethiones (TZDs)‏ فقدان الشهية؛ أو فقد العظم المرتبط بانخفاض نشاط الغدد التناسلية أو سوء التغذية العظمية الكلوية. تتيضمن بعض ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية منها المتوافرة: 0( واحدة أو أكثر من مناطق محددة للتكملة ‎(complementarity determining regions)‏ ‎(CDRs) o‏ سلسلة خفيفة ‎(LC) (light chain)‏ المنتقاة من المجموعة المتكونة من: ‎CDR] -١‏ مع ‎Jil‏ ترتيب على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ ‎CDR2 -Y‏ مع تمائل ترتيب ‎TA‏ على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ؛ ؛ و ‎CDRS +١ |‏ مع تمائل ترتيب 240 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ١؟!‏ (ب) واحدة أو أكثر من مناطق محددة للتكملة ‎(complementarity determining (CDRs)‏ ‎regions) ٠‏ سلسلة ثقيلة ‎(HC) (heavy chain)‏ تنتقى من المجموعة المتكونة من: ‎-١‏ 0081 مع تماثل ترتيب ‎٠‏ على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ‎Sega ٠‏ ‎٠‏ 0 ‎CDR2 -Y‏ مع تمائل ترتيب ‎JAY‏ على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١©؛‏ و ‎CDR3 -+“‏ مع تمائل ترتيب ‎٠‏ على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ؛ أو 7©؛ أو. ‎Vo‏ )=( واحدة أو أكثر من ‎CDRs‏ من () وواحدة أو أكثر من ‎CDRs‏ من (ب). يمكن ‎Abs wal‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا منها أن تربط بصفة خاصة ‎-Dkk-1 polypeptide‏ تتضمن بعض هذه ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية ‎Lelie‏ منها ‎of oF oY 0٠‏ 0 أو كل الستة ‎CDRs‏ ‏السابقة. ‏تتوافر ‎Lad‏ تعديلات حامية للترتيبات المتوافرة. ‎ve‏ إن و1 وه©11 لأجل ‎Abs‏ متوافرة إضافية وأجزاء وظيفية مناعيا منها لها تمائل ترتيب ‎٠‏ على الأقل مع الترتيب السابقة. تتوافر إضافيا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها بها ‎LC‏ فيها ‎CDRI‏ لها ترتيب ‎amino‏ ‎LS acid‏ هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎«YY‏ 0082 لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎VE‏ و/أو ‎CDR3‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في ‎Yo‏ تعريف الترتيب رقم: ‎7١‏ ‏تتوافر إضافيا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها بها ‎Les HC‏ 0011 لها ترتيب 0طتهة ... ‎acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎ov.‏ ؟ أو ‎»٠‏ 012 لها ترتيب ‎amino‏
ه ‎acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: "© أو ‎©١‏ و/أو ‎CDR3‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 4 أو ‎OY‏ ‏تتوافر إضافيا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها بها ‎LC‏ فيها 00181 لها ترتيب ‎amino‏ ‎LS acid‏ هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎CDR2 (YY‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو 0 مذكور في تعريف الترتيب رقم: 4 7 ‎CDR3 Ms‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 71. وتتوافر إضافيا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها بها ‎Led HC‏ ‎CDR]‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 070 49 أو © ‎CDR2‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: أو ‎0١‏ و/أو ‎CDR3‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 7 أو ‎OY‏ ‎٠١‏ تتوافر إضافيا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية ‎Lelie‏ منها بها ‎LC‏ فيها 0011 لها ترتيب ‎Mino‏ ‎acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎CDR2 (YY‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YE‏ و/أو ‎CDR3‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 7. وتتوافر إضافيا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها بها ‎HC‏ فيها ‎CDR]‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم :62 £9 أو 0 ‎٠٠‏ 0082 لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎vy‏ أو ‎0١‏ و/أو ‎CDR3‏ لها ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 4 أو ‎OF‏ ‏تتوافر أيضا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها تتضمن: 0( منطقة متغيرة ‎(variable‏ ‎(VL) region)‏ سلسلة خفيفة ‎(LC)‏ لها تماثل ترتيب ‎٠‏ على الأقل مع الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎٠‏ (ب) منطقة متغيرة ‎(HC) (variable region) (VH)‏ ‎vy.‏ سلسلة ثقيلة لها تمائل ترتيب ‎TA‏ على الأقل مع الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 8 ؛ أو (ج) ‎VL‏ من 0( ‎VHS‏ من (ب). تتوافر أيضا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها مشابهة في البناء لكن ‎VE‏ لها ‎JL‏ ترتيب ‎٠‏ على الأقل مع الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎VH ٠١‏ لها تماثل ترتيب 7490 على الأقل مع الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ ‎Yo‏ تتوافر أيضا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها مشابهة في البناء لكن ‎VL‏ لها تماثل تريب 05 على الأقل مع الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎VL 7١‏ لها تماثل ترتيب 7495 على الأقل مع الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏
. تتوافر أيضا ‎Abs‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها تتضمن ‎VL‏ لها ترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎VHS ٠١‏ لها الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ ‏إن البعض من ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية منّها المتوافرة بها ‎LC‏ تشمل أو تتكون من ترتيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: أو تعريف الترتيب رقم: ‎EY‏ و/أو ‎٠‏ 116 تشمل أو تتكون من ‎amino acid CHES‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎TN‏ أو تعريف الترتيب رقم: ‎Ee‏ ‏إن البعض من ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية منها المتوافرة بها ‎LC‏ تتكون من تريب 201100 0 كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ أو تعريف الترتيب رقم: ‎¢£Y‏ و116 تتكون من ترثيب ‎amino acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: © أو تعريف ‎util‏ رقم: ‎de.‏ ‏ثتوافر ‎Abs Lad‏ وأجزاء وظيفية مناعيا منها تتنافس مع 108 فأري للارتباط مع خلايا ‎-Dkk-1*‏ في تجسيد يوفر الاختراع جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية ‎(HAb)‏ أو جزء ‎cade‏ حيث يرتبط بصفة خاصة ‎Ab‏ أو الجزء المذكور مع مولد مضاد ‎Dkk-1‏ آدمي؛ حيث تكون ‎CDRs‏ للمنطقة المتغيرة ‎CDRs (CDR3 5 CDR2 “CDR1) LC‏ للمنطقة المتغيرة ‎‘HC‏ ‎(CDR3, CDR2 «CDR1) eo‏ لها ترتيبات ‎amino acid‏ التالية وحيث يمكن أن يتنافس ‎Ab‏ أو الجزءِ مع 1/8608 فأري للارتباط مع خلايا ‎CDRI (i) :Dkke1*‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎CDR2 (ii) « (YY‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎CDR3 (ii) 5 (Y¢‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎(YT‏ ‎(i) HC,‏ 00181 (تعريف الترتيب رقم: ‎ove‏ 54 أو 0( ‎CDR2 Gi‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎vy‏ أو ١0)؛‏ 5 ‎(iii)‏ 00183 (تعريف الترتيب رقم: 4 أو ‎(OY‏
7 يوفر الاختراع ‎HAD Lad‏ أو جزء ‎dia‏ حيث يرتبط بصفة خاصة ‎Ab‏ أو الجزءٍ المذكور مع مولد مضاد ‎Dkk-1‏ آدمي؛ حيث تكون للمناطق المحددة للتكملة ‎CDR2 «CDR1)‏ و0083) في المنطقة المتغيرة ‎LC‏ والمناطق المحددة للتكملة ) ‎CDR2 «CDR]‏ و ‎(CDR3‏ في المنطقة المتغيرة ‎HC‏ لها ترتيبات ‎amino acid‏ التالية: ‎(i)‏ 0011 (تعريف الترتيب رقم: ‎(YY‏ ‎CDR2 (ii)‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎CDR3 (ii) (Y€‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎¢(Y1‏ و110: (0
‎CDRI Yo‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎(vu‏ £9 أو +0(« ‎CDR2 (ii)‏ (تعريف الترتيب رقم: 7 أو
‎(iii) 5 (0)‏ 00183 (تعريف الترتيب رقم: 4 ؟ أو 2*7)؛ والتي يحتوي فيها إطار مجال السيطرة المتغير في .1 إطار خط الجرثومة ‎IGKV3-11‏ الآدمي والمنطقة ‎IGKJ4‏
ا يوفر الاختراع أيضا ‎HAb‏ أو جزء منه؛ ‎Cum‏ يرتبط بصفة خاصة ‎Ab‏ أو الجزء المذكور مع مولد ‎Dkk-1 alas‏ أدمي؛ حيث تكون للمناطق المحددة للتكملة ‎CDR2 «CDR1)‏ ‎(CDR3,‏ في المنطقة المتغيرة ‎LC‏ والمناطق المحددة للتكملة ) ‎(CDR3 5 CDR2 CDR]‏ في المنطقة المتغيرة ‎go‏ لها ترثيبات ‎amino acid‏ التالية: ‎(i)‏ 00181 (تعريف الترتيب رقم: ‎(YY‏
م ‎CDR2 (ii)‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎CDR3 (iii) (Y¢‏ (تعريف الترتيب رقم: ¥1(¢ ‎HC‏ © 1 (تعريف الترتيب رقم: ‎ov,‏ £9 أو +( ‎(ii)‏ 00182 (تعريف الترتيب رقم: 7 أو ‎(iii) 5 «(0‏ 3ه (تعريف الترتقيب رقم: ‎ws‏ أو 507) والتي فيها يحتوي إطار مجال السيطرةٍ المتغير في ‎ge‏ إطار خط الجرثومة 161173-07 الآدمي (مع طفرة خلفية واحدة: ‎R100‏ إلى ‎(T‏ والمنطقة 10611[6.
‎ve‏ يوفر الاختراع أيضا ‎HAD‏ أو ‎cic gia‏ حيث يرتبط بصفة خاصة نهم أو الجزء المذكور مع مولد مضاد ‎Dkk-1‏ أدمي؛ حيث تكون للمناطق المحددة للتكملة ‎CDR2 «CDR1)‏ ‎(CDR3,‏ في المنطقة المتغيرة ‎1c‏ والمناطق المحددة للتكملة ) ‎CDR2 CDR]‏ و ‎(CDR3‏ في
‏المنطقة المتغيرة ‎HC‏ لها ترتيبات ‎amino acid‏ التالية: ( 00101 (تعريف الترتيب رقم: ‎(YY‏ ‎CDR2 (i)‏ (تعريف الترتيب رقم: 4 ) , ‎(iii)‏ 00183 (تعريف الترتيب رقم: ‎(YT‏ 00 ‎ve‏ 081 (تعريف الترتيب رقم: ‎ov,‏ £4 أو ‎(ii) (or‏ 00182 (تعريف الترتيب رقم: 7” أو ‎CDR3 (iii) 5 «(0‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎vg‏ أو ‎(oy‏ والتي تحتوي فيها إطار مجال السيطرة المتغير في ‎Lc‏ إطار خط الجرثومة ‎IGKV3-1]‏ الآدمي والمنطقة 4 والتي فيها يحتوي إطار مجال السيطرة المتغير في 116 إطار خط الجرثومة 101173-07 الآدمي (مع طفرة خلفية واحدة: 0 إلى ‎(T‏ والمنطقة ‎-IGHJ6‏ ‎Ye‏ تتوافر إضافيا ‎proteins‏ اندماج تشمل واحدا أو أكثر من أجزاء أو مناطق من 408 من الاختراع. في تجسيد يتوافر ‎polypeptide‏ اندماج يشمل على الأقل ‎amino acids ٠‏ متجاورة من المنطقة المتغيرة ‎LC‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎٠٠‏ و/أو على الأقل ‎٠١‏ ‎amino acids‏ من المنطقة المتغيرة ‎HC‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ ‏في تجسيد آخرء يشمل ‎protein‏ الاندماج منطقة متغيرة ‎LC‏ كما هو مذكور في تعريف ‎ve‏ الترتيب رقم: ‎٠١‏ و/أو منطقة متغيرة 110 كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: 74. في تجسيد آخر يشمل ‎polypeptide‏ الاندماج واحدة أو أكثر من:
A
(complementarity determining regions) ‏واحدة أو أكثر من مناطق محددة للتكملة‎ (00 ‏المنتقاة من المجموعة المتكونة من:‎ © (light chain) ‏سلسلة خفيفة‎ (CDRs)
VY ‏ترتيب 7840 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ Sila ‏مع‎ CDR1 -١ ‏و‎ VE ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ JA ‏مع تمائل ترتيب‎ CDR2 -"
SOY ‏مع تمائل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ CDR3 -* ° (complementarity determining (CDRs) ‏(ب) واحدة أو أكثر من مناطق محددة للتكملة‎ ‏تنتقى من المجموعة المتكونة من:‎ (HC) (heavy chain) ‏سلسلة ثقيلة‎ regions) ‏54؛ أو‎ 7١ ‏مع تماثل ترتيب 7/0 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ CDRI -١ 0". ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١©؛ و‎ 0٠ ‏ترتيب‎ Jil ‏مع‎ CDR2 -" ٠
OY ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 4 أو‎ JA ‏مع تمائل ترتيب‎ CDR3 -٠ (oF ‏(تعريف الترتيب رقم: 4 أو‎ HC CDR3 ‏الاندماج‎ protein ‏في تجسيد آخر يشمل‎ (YT ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ LC ‏و0013‎ ‏من الاختراع وترتيب‎ Abs ‏الاندماج واحدا أو أكثر من‎ protein ‏في تجسيد آخرء يشمل‎ ‏ترتيب مغاير أو ترتيب مشابه من‎ lia ‏غير مرتبط معه في الجزيء الأصلي‎ amino acid ٠ ‏ينتقى من‎ Gale ‏منطقة أخرى. في أحد التجسيدات يكون الترتيب المغاير عبارة عن جزءٍ‎ -6His Tag sl FLAGtag ‏وأجزاء وظيفية مناعيا منها متحدة مع عامل يسهل الاقتران مع دعامة‎ Abs ‏تتوافر أيضا‎ ‏مع عامل يسهل الاقتران مع‎ Leia ‏والأجزاء‎ Abs ‏في تجسيد تتصل‎ «(solid support) ‏صلبة‎ ‏أى متفتاة.‎ biotin ‏دعامة صلبة. في تجسيد تكون الدعامة الصلبة هي‎ © (labeling agent) ‏منها متصلة مع عامل تعليم‎ Lelie ‏وأجزاء وظيفية‎ Abs ‏تتوافر أيضا‎ ‏في أحد التجسيدات يكون عامل التعليم هو جزيء استشعاعي أو جزيء نشط إشعاعيا.‎ ‏واحدة؛‎ HC ‏أو‎ LC ‏المختلفة المتوافرة‎ gia ‏والأجزاء الوظيفية مناعيا‎ Abs ‏يمكن أن تتضمن‎ ‏والأجزاء‎ Abs ‏متغير واحد. إن‎ J ‏أو مجال سيطرة خفيف متغير واحد و/أو مجال سيطرة‎ ‏الأخرى المتوافرة يمكن أن تتضمن ؟ من 105 و/أو ؟ من 1108 حيث؛ في بعض التجسيدات؛‎ Yo
HCs ‏الاثنتان مماثلتين مع بعضهما؛ و/أو حيث؛ في بعض التجسيدات؛ تكون‎ LCs ‏تكون‎ ‏المتوافرة؛ مثلاء أجسام مضادة أحادية النسخ‎ Abs ‏الاثنتان متمائلتين مع بعضهما. تتضمن‎
Abs ‏هجين؛ أو ط8هتا. تتضمن الأجزاء الوظيفية مناعيا من‎ Ab ‏آدمي؛‎ Ab «(mAbs) ‏مجال سيطرة. في أحد‎ Ab ‏أو‎ ((FAB)2 cFab' Fab «scFv ‏المتوافرة؛ لكن بدون تحديد؛‎
التجسيدات يتفكك ‎Ab‏ من ‎Dkk-1 polypeptide‏ مع ‎Kd‏ حوالي ‎٠٠١‏ 14م أو أقل. تتوافر أيضا تشكيلة من ‎nucleic acids‏ تشفر ‎Abs‏ وأجزاء منها. إن بعض ‎«nucleic acids‏ ‎٠‏ على سبيل المثال؛ تشفر ‎LC CDR‏ مع ترتيب ‎nucleic acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YE (YY‏ أو 77؛ بحيث تشفر ‎CDR‏ المشفرة ‎Ab‏ أو جزءٍ وظيفي ‎Lelie‏ منه يرتبط بصفة خاصة مع ‎.Dkk-1 polypeptide‏ تتوافر أيضا تشكيلة من ‎nucleic acids‏ تشفر ‎Abs‏ وأجزاء منها. إن بعض ‎enucleic acids‏ على سبيل المثال؛ تشفر ‎HC CDR‏ مع ترتيب ‎nucleic acid‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎WY oF‏ أو ؛؟؛ بحيث تشفر ‎CDR‏ ‎٠‏ المشفرة طاه أو جزء وظيفي مناعيا منه يرتبط بصفة خاصة مع ‎-Dkk-1 polypeptide‏ في بعض التجسيدات تشمل ‎nucleic acids‏ أو تتكون من ترتيب يشفر منطقة ‎VL‏ و/أو 1 من ‎Ab‏ أو جزء وظيفي ‎Lelie‏ منه حيث تكون ‎VL‏ لها تماثل ترتيب ‎Av Ve‏ 790 أو ‎Zao‏ ‏على الأقل مع الترتيب المذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎VH Yo‏ لها تماثل ترتيب 716 ‎٠‏ 240 أو 745 على الأقل مع الترتيب المذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ في بعض ‎١‏ التجسيدات تتضمن ‎nucleic acids‏ ترتيب يشفر ‎VL‏ تشمل أو تتكون من الترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎Yo‏ و/أو ترتيب يشفر ‎VH‏ تشمل أو تتكون من ترتيب كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ تجسيدات ‎(gyal‏ تتضمن ‎nucleic acids‏ ترتيبات
تشفر كلا من ‎VL‏ و1711 مع سمات الترتيب السابقة.
تتوافر إضافيا ‎polynucleotides‏ تشفر أيا مما يلي: 0( ‎huMabJC18‏ أو أشكاله ‎FRE‏ ‎٠‏ المبينة في جدول ؛؛ (ب) جزء أو منطقة من جسم 1014801018 أو أشكاله المتباينة ‎Lind)‏ ‏في جدول ؛؛ (ج) سلسلة خفيفة من جسم مضاد 10/801018 أو أشكاله المتباينة المبينة في جدول $6 (ج) سلسلة ثقيلة من جسم مضاد 1014801018 أو أشكاله المتباينة المبينة في جدول ؛؛ (د) منطقة (مناطق) متغيرة واحدة أو أكثر من ‎LC‏ و/أو ‎HC‏ من جسم مضاد 808 أو أشكاله المتباينة المبينة في جدول ؛؛ (ه) واحدة أو أكثر من ‎CDR(s)‏ (1؛ ‎Yo‏ »4 © أو ‎(CDRs ١‏ من جسم مضاد 1014801018 أو أشكاله ‎Lindl Lula)‏ في جدول ؛؛ (و) 133 ‎CDR‏ من ‎HC‏ من جسم مضاد ‎thuMabJC18‏ (ز) ‎CDR HI‏ من ‎HC‏ من جسم مضاد 014801018؛ (ح) 112 ‎CDR‏ من ‎HC‏ من جسم مضاد ‎huMabJC18‏ حيث
Ye
Q59 sls ‏أو نت‎ MY «GL F ‏مر‎ F58 ‏لات ر/أر‎ Jf 6 ‏هو‎ amino acid G57 ‏يكون‎ ‎chuMabJC18 ‏من الجسم المضاد‎ HC ‏من‎ CDR H3 ‏(ط)‎ ¢W ‏أو‎ (R <G <H © «Q ‏هو‎ ‏و/أو‎ <Y JL ‏هر‎ amino acid L102 ‏و/أو‎ S ‏أو‎ T ‏هو‎ amino acid 1100 ‏يكون‎ Cua ‏من الجسم المضاد‎ LC ‏من‎ CDR LI ‏أو 1؛ (ي)‎ © «Q R 8 ‏هو‎ amino acid E103 ‏أو‎ D ‏هو‎ amino acid 0 ‏و/أو‎ «Q «E ‏هو‎ amino acid E27 ‏حيث يكون‎ chuMabJC18 © amino ‏هو ”أو ى و/أو‎ amino acid 2 ‏ى و/أو‎ J D ‏هو‎ amino acid 1 ‏و/أو‎ 58 ‏هو 8 أو‎ amino acid 835 l/s ‏هو 1 أو نآ»‎ amino acid 34 ‏هو 6 أو لت و/أى‎ acid 3
CDR L2 ‏(ك)‎ tM ‏هو 1 أو‎ amino acid 137 ‏و/أو‎ «W J ‏هو‎ amino acid 6 ‏و/أو‎ A ‏و/أو‎ (A sl 6 ‏هر‎ amino acid G55 ‏حيث يكون‎ huMabJC18 ‏من جسم مضاد‎ LC ‏من‎ ‎chuMabJC18 ‏من الجسم المضاد‎ LC ‏من‎ CDR 13 (J) ¢T ‏هو 8 أو‎ amino acid S56 ٠ «G ‏قي أر‎ ¢L ‏هر‎ amino acid 5 ‏هر و أر 11 و/أو‎ amino acid Q94 ‏حيث يكون‎ :D J E ‏هو‎ amino acid 7 ‏أر ي و/أو‎ 11 «W ‏ل‎ «I ‏مر كل‎ amino acid 6 ‏و/أو‎ ‎amino acid ‏أو ب و/أو‎ P ‏هو‎ amino acid P99 ‏و/أو‎ «L ‏أو‎ V ‏هو‎ amino acid 8 ‏و/أو‎ ‏من‎ LC ‏من‎ CDRs ¥ ‏أو آ؛ (م)‎ Y «T ‏هو‎ amino acid T101 ‏أو ©» و/أو‎ S ‏هو ص‎ 0
HC ‏من‎ CDRs ¥ ‏جسم مضاد 501480018 أو أشكاله المتباينة المبينة في جدول ££ (ن)‎ ٠
LC ‏من‎ CDRs ¥ ‏أو أشكاله المتباينة المبينة في جدول ؛؛ (س)‎ huMabJC18 ‏لجسم مضاد‎ ‏لجسم مضاد 101480018 أو أشكاله المتباينة المبينة في جدول 4؛‎ HC ‏من‎ CDRs ‏و7‎ ‏و(ع) جسم مضاد يشمل أي واحد من (ب) حتى (ع).‎ ‏تلك. يمكن أن تكون‎ nucleic acid ‏مكملة لأي من ترتيبات‎ polynucleotides ‏تتوافر أيضا‎ ‏فردية الشريط (تشفيرية أو مضادة للإحساس) أو ثنائية- الشريط» وقد تكون‎ polynucleotides ٠٠ (RNA ‏تتضمن جزيئات‎ RNA ‏أو مصنع) أو‎ cDNA ‏(جينومي»‎ DNA ‏عبارة عن جزيثئات‎ ‏بطريقة واحد- إلى- واحدء‎ DNA ‏وتقابل جزيء‎ introns ‏تحتوي على‎ (HNRNA ‏جزيئات‎ lie ‏هناك ترتيبات تشفير أو عدم تشفير إضافية؛ لكن‎ introns ‏لا تحتوي على‎ «mRNA ‏وجزيئات‎ ‎«polynucleotide ‏متوافرء وقد يكون‎ polynucleotide ‏بدون حاجة لذلك؛ قد تكون موجودة في‎ ‏متصلا مع جزيئات و/أو مواد دعامة أخرى.‎ (lla dala ‏لكن بدون‎ YO ‏أو قسم منه)ء‎ Ab ‏تشمل ترتيب أصلي (أي؛ ترتيب داخلي يشفر‎ polynucleotides ‏تتوافر‎ ‏أو تشمل شكل متباين من ذلك الترتيب. يمكن أن تحتوي أشكال متباينة 0017001601106 على‎
١١ ‏واحدة أو أكثر من الاستبدالات؛ الإضافات؛ الإزالات و/أو الإدخالات بحيث لا يقل النشاط‎ ‏المشفر» مقارنة بجزيء أصلي نشط مناعيا. يفضل أن تظهر‎ polynucleotide ‏المناعي لأجل‎ ‏يفضل‎ «JWI ‏على‎ TAs ‏على الأقل؛ يفضل أكثر حوالي‎ 77٠0 ‏الأشكال المتباينة تمائل حوالي‎ ‏يشفر‎ polynucleotide ‏على الأقل؛ والأكثر تفضيلا حوالي £90 مع ترتيب‎ 0٠ ‏أكثر حوالي‎ . . ‏0م أصلي أو قسم منه.‎ ٠ ‏منه‎ ga ‏أو‎ HAb ‏لأجل‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏جزيء‎ La ‏يوفر الاختراع‎ ‏يشمل:‎ ‏تنتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحدة أو أكثر من‎
YY ‏ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ Bla ‏مع‎ CDRI -١ ‏ترتيب 7850 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 74؛ و‎ BLS ‏مع‎ CDR2 -" ٠١
EV ‏مع تمائل ترتيب 7780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 00783 -* ‏تنتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) واحدة أو أكثر من‎ ‏49؛ أو‎ 7١ ‏مع تماثل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ CDRI -١ . $0 a ‏مع تمائل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 77 أو ١©؛ و‎ CDR2 -" ‏7©؛ أو‎ SIE ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ ZA ‏مع تماتل ترتيب‎ CDR3 —Y ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحدة أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحدة أو أكثر من‎
IGKV3-11 ‏على إطار خط الجرثومة‎ LC ‏يحتوي فيها إطار مجال السيطرة المتغير من‎
JGKJ4 ‏الآدمي ومنطقة‎ ‏منه‎ gia ‏أو‎ HAb ‏لأجل‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏جزيء‎ Lal ‏يوفر الاختراع‎ 7. ‏يشمل:‎ ‏تنتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحدة أو أكثر من‎
EVY ‏مع تمائل ترتيب 77850 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 0081 -١ ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 4؛7؛ و‎ JA ‏ترتيب‎ BLS ‏مع‎ CDR2 -" ‏مع تماتل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 77؛‎ 00183 -* Yo ‏تنتقى من المجموعة المتكونة من:‎ 110 CDRs ‏(ب) واحدة أو أكثر من‎
VY
‏مع تماثل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 8 59؛ أو‎ 00181 -١ 2.٠. ‏ترتيب 770 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١©؛ و‎ ila ‏مع‎ CDR2 -7 ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 4" أو 7©؛ أو‎ JAY ‏له تمائل ترتيب‎ 0083 )©( ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحد أو أكثر من‎ °
IGHV3-07 germline ‏يحتوي على إطار‎ HC ‏الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من‎ .101116 ‏ومنطقة‎ (T ‏إلى‎ R100 ‏الآدمي (مع طفرة خلفية فردية:‎ ‏للجسم المضاد المكتسب‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏يوفر الاختراع أيضا جزيء‎ ‏منه؛ يشتمل على:‎ gia ‏السمة الآدمية أو‎ ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏من‎ SST ‏(أ) واحد أو‎ ve ‏له تمائل ترتيب 7780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 77؛‎ CDRI )١( ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 4 ؛ و‎ JAY ‏ترتيب‎ Bila ‏له‎ CDR2 (Y) ‏ترتيب 770 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 776؛‎ Jil ‏له‎ CDR3 )©( 0 ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) واحد أو أكثر من‎ 00 ‏له تمائل ترتيب 770 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 70 £9 أو‎ 0081 )١( ‏أو ١0؛ و‎ YY ‏له تماتل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 0082 (Y) ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 94 أو 7©؛ أو‎ ZA ‏له تماتل ترتيب‎ CDR3 ‏(؟)‎ ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحد أو أكثر من‎ 101073-11 germline ‏يحتروي على إطار‎ LC ‏الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من‎ 161173-07 ‏يحتوي على إطار‎ HC ‏الأآدمي ومنطقة 161614 وإطار مجال السيطرة المتغير من‎ ٠ .101116 ‏ومنطقة‎ (T ‏إلى‎ R100 ‏الآدمي (مع طفرة خلفية فردية:‎ germline ‏للجسم المضاد المكتسب‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏الاختراع أيضا جزيء‎ jig ‏منه؛ يشتمل على:‎ oda ‏السمة الآدمية أو‎ ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحد أو أكثر من‎ ‏(تعريف الترتيب رقم: 7؟)؛‎ 0011 )١( Yo ‏(تعريف الترتيب رقم: ؟١)؛ و ض‎ CDR2 )7( ؛)١7 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDR3 (Y)
ص (ب) واحد أو ‎JST‏ من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎CDRI (V)‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎7٠0‏ 49 أو ‎٠‏ )؛ ‎CDR2 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: 7؟ أو ١2)؛‏ و ‎CDR3 (V)‏ (تعريف الترتيب رقم: 4 ؟ أو 27)؛ أو © (ج) واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (أ) وواحد أو أكثر من 001755 من (ب)؛ الذي فيه إطار مجال السيطرةٍ المتغير من ‎LC‏ يحتوي على إطار ‎IGKV3-11 germline‏ الآدمي ومنطقة 161614 وإطار مجال السيطرةٍ المتغير من ‎HC‏ يحتوي على إطار 1061173-07 ‎germline‏ الآدمي (مع طفرة خلفية فردية: ‎R100‏ إلى ‎(T‏ ومنطقة 101116. في بعض تجسيدات ‎DNA lia‏ تكون ترتيبات ‎nucleotide‏ من ‎LC CDRs‏ كما يلي: ‎٠‏ 011: كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ ‏2 : كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ ‎WS :CDR3‏ هو مذكور في تعريف الترّيب رقم: ‎Yo‏ ‏في بعض تجسيدات جزيئات ‎DNA‏ تكون ترتيبات ‎nucleotide‏ من ‎HC CDRs‏ كما يلي: ‎LS :CDRI‏ هو مذكور في تعريف الترتيب ‎Yad)‏ ‎LSICDR2 ٠‏ هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎3١‏ ‎LS :CDR3‏ هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ في بعض تجسيدات جزيئات ‎DNA‏ تكون ترتيبات ‎nucleotide‏ من منطقة متغيرة ‎LC‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب ‎Nad)‏ ‏في بعض تجسيدات جزيئات ‎DNA‏ تكون ترتيبات ‎nucleotide‏ من منطقة متغيرة ‎HC‏ كما ‎Ye‏ هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ ‏في بعض تجسيدات جزيثات ‎DNA‏ تكون ترتيبات ‎nucleotide‏ من ‎LC‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YV‏ أو تعريف الترتيب رقم: ‎EY‏ ‏في بعض تجسيدات جزيئات ‎DNA‏ تكون ترتيبات ‎nucleotide‏ من ‎HC‏ كما هو مذكور في تعريف الترتيب رقم: ‎YO‏ أو تعريف الترتيب رقم: 99. ‎Yo‏ تتوفر إضافيا نواقل؛ مثلا؛ نواقل إظهار؛ تشتمل على أي من ترتيبات ‎polynucleotide‏ أو جزيئات ‎DNA‏ تشفر الأجسام المضادة أو أجزائها.
٠ ‏للجسم المضاد المكتسب السمة‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏في تجسيد يتوفر جزيء‎ ‏الآدمية أو جزء منه؛ يشتمل على:‎ ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحد أو أكثر من‎
VY ‏له تماتل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 00181 )١( ‏له تمائل ترتيب 770 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ؛ ؟؛ و‎ CDR2 )7( °
YT ‏له تماتل ترتيب 7/80 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 0083 )©( ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏من‎ SST ‏(ب) واحد أو‎ ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 78 59 أو 0؛‎ JAY ‏له تمائل ترتيب‎ 0281 )١( ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١©؛ و‎ JA ‏له تمائل ترتيب‎ CDR2 (Y) ‏له تمائل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 4 ؟ أو 7©؛ أو‎ CDR3 )©( Ve ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏واحد أو أكثر من‎ (2)
IGKV3-11 germline ‏يحتوي على إطار‎ LC ‏الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من‎ ‏إظهار.‎ Jib ‏الآدمي ومنطقة 1061614؛ في شكل‎ ‏للجسم المضاد المكتسب السمة‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏في تجسيد يتوفر جزيء‎ ‏الآدمية أو جزء منه؛ يشتمل على:‎ ٠ ioe ‏منتقى من المجموعة المتكونة‎ LC CDRs ‏(أ) واحد أو أكثر من‎ ‏له تمائل ترتيب 7850 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 7؟؛‎ 0081 )١( ‏و‎ VE ‏له تمائل ترتيب 780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ CDR2 )7( : EY ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ JA ‏له تماتل ترتيب‎ 0083 (Y) ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) واحد أو أكثر من‎ 7 ‏؛‎ ٠0 ‏أو‎ £9 (Fu ‏له تمائل ترتيب 7780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 001 )١( ‏و‎ ؛0١‎ IVY ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ ZA ‏ترتيب‎ Bila ‏له‎ 0082 (Y) ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: ؛ 3 أو 7©؛ أو‎ ZA ‏له تمائل ترتيب‎ CDR3 (Y) ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحد أو أكثر من‎ 101273-07 germline ‏يحتوي على إطار‎ HC ‏الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من‎ Yo ‏ومتطقة 1061116 في شكل ناقل إظهار.‎ (T ‏(مع طفرة خلفية فردية: 1100 إلى‎ oY)
‘eo ‏للجسم المضاد المكتسب السمة‎ amino acid ‏يشفر ترتيب.‎ DNA ‏في تجسيد يتوفر جزيء‎ ‏الآدمية أو جزء منه؛ يشتمل على:‎ ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحد أو أكثر من‎ ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 77؛‎ ZA ‏له تمائل ترتيب‎ 00881 )١( ‏له تماتل ترتيب 7780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 4 7؛ و‎ CDR2 (Y) °
YT ‏له تمائل ترتيب 7780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 0083 )( ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) واحد أو أكثر من‎ ؛٠0 ‏أو‎ 59 Fe ‏له تمائل ترتيب 7780 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم:‎ 0081 )١( ‏على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١©؛ و‎ JA quip ‏له تمائل‎ CDR2 )7( ‏له تمائل ترتيب 77850 على الأقل مع تعريف الترتيب رقم: 74 أو 7©؛ أو‎ CDR3 )©( ٠١ ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحد أو أكثر من‎
IGKV3-11 germline ‏يحتوي على إطار‎ LC ‏الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من‎
IGKV3-07 ‏يحتوي على إطار‎ HC ‏الآدمي ومنطقة 101614 وإطار مجال السيطرة المتغير من‎ ‏ومنطقة 1061116 في شكل ناقل‎ (T ‏إلى‎ R100 ‏الآدمي (مع طفرة خلفية فردية:‎ germline ‏إظهار.‎ ٠ ‏للجسم المضاد المكتسب السمة‎ amino acid ‏يشفر ترتيب‎ DNA ‏في تجسيد يتوفر جزيء‎ ‏الآدمية أو جزء منه؛ يشتمل على:‎ ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحد أو أكثر من‎ ‏(تعريف الترثيب رقم: 7)؛‎ 00181 )١( ‏(تعريف الترتيب رقم: 4 )؛ و‎ CDR2 (Y) Ye ¢(Y7 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDR3 )©( ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) واحد أو أكثر من‎ ‏(تعريف الترتيب رقم: 78 £3 أو 60 )؛‎ 0011 )١( ‏و‎ ؛)2١‎ YY ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDR2 )7( ‏07)؛ أو‎ Sve ‏(تعريف الترتّيب رقم:‎ CDR3 (T) Yo ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏واحد أو أكثر من‎ (2)
الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من ‎LC‏ يحتوي على إطار ‎germline‏ 1061673-11 الآدمي ومنطقة 101614 وإطار مجال السيطرة المتغير من ‎HC‏ يحتوي على إطار 161673-07 ‎germline‏ الآدمي (مع طفرة خلفية فردية: ‎R100‏ إلى ‎(T‏ ومنطقة 161116 في شكل ناقل إظهار.
° يتوفر أيضا عائل متحول مع ناقل إظهار من الاختراع. في تجسيد يتوفر عائل متحول مع ناقل إظهار يشتمل على جزيء ‎DNA‏ يشفر ترتيب ‎amino acid‏ للجسم المضاد المكتسب السمة الآدمية أو ‎gia‏ منه؛ يشتمل على:
(أ) واحد أو أكثر من ‎LC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: )0 21 (تعريف الترتيب رقم: ‎¢(YY‏ ‎CDR2 (Y) Ye‏ (تعريف الترتيب رقم: 5 ؟)؛ و ‎(Y)‏ 00183 (تعريف الترتيب رقم: 77)؛ (ب) واحد أو ‎SST‏ من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: )0( 1 (تعريف الترتيب رقم: ‎3٠0‏ £9 أو 0*)؛ ‎CDR2 )" )‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ أو )540 ‎CDRS )©(‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎YE‏ أو 27)؛ أو )=( واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (أ) وواحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (ب)؛ الذي فيه إطار مجال السيطرة المتغير من ‎LC‏ يحتوي على إطار ‎IGKV3-11 germline‏ الآدمي ومنطقة 161214 وإطار مجال السيطرةٍ المتغير من ‎HC‏ يحتوي على إطار 101673-07 ‎germline‏ الآدمي (مع طفرة خلفية فردية: ‎R100‏ إلى 1) ومنطقة 10611[6.
‎Ye‏ يتوفر أيضا خلية عائل تشتمل على نظام إظهار ‎Blan‏ يشفر السلاسل الخفيفة والثقيلة للجسم المضاد المكتسب السمة الآدمية أو جزء منه؛ حيث يرتّبط الجسم المضاد المذكور أو ‎gia‏ بصفة خاصة مع ‎alge‏ مضاد ‎Dkk-1‏ آدمي؛ وحيث يكون ‎CDRs‏ من ‎LC‏ و110 لهم ترتيبات ‎amino acid‏ التالية:
‏(أ) واحد أو أكثر من ‎LC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من:
‎| ¢(YY ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ ©0181 (V) Yo ‏(تعريف الترتيب رقم: ؛ ١)؛ و‎ CDR2 (Y) ‏(تعريف الترتيب رقم: 77)؛‎ CDR3 79)
لا (ب) واحد أو أكثر من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎CDRI )١(‏ (تعريف الترتيب رقم: 670 49 أو +٠)؛‏ ‎CDR2 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١2)؛‏ و ‎CDR3 )©( |‏ (تعريف الترتيب رقم: 4 7 أو 27)؛ أو ° (ج) واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (أ) وواحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (ب)؛ تتوفر أيضا عملية لتحضيرجسم مضاد مكتسب السمة الآدمية او جزء منه؛ حيث يرتبط الجسم المضاد المذكور أو ‎oa‏ بصفة خاصة مع مولد مضاد 1106-1 آدمي؛ وحيث يكون ‎CDRs‏ من ‎HC 5 LC‏ لهم ترتيبات ‎amino acid‏ التالية: (أ) واحد أو أكثر من ‎LC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎)١( Ve‏ 00181 (تعريف الترتيب رقم: ‎¢(YY‏ ‎CDR2 (V)‏ (تعريف الترتيب رقم: ؛١)؛‏ و ‎CDR3 )(‏ (تعريف الترتيب رقم: 76)؛ (ب) واحد أو أكثر من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎(V)‏ 00181 (تعريف الترتيب رقم: ‎Fe‏ £3 أو 0)؛ : ‎CDR2 (Y) vo‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎SY‏ ١*2)؛‏ و ‎CDR3 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎Sve‏ 27)؛ أو (ج) واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (أ) وواحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (ب)؛ حيث تشتمل العملية على توفير عائل متحول سواء مع ‎)١(‏ ناقل إظهار أول الذي يشفر السلسلة الخفيفة من الجسم المضاد المكتسبة السمة الآدمية أو جزءٍ منه وناقل إظهار ثان الذي ‎٠‏ يشفر السلسلة الثقيلة من الجسم المضاد المكتسبة السمة الآدمية أو جزءٍ منه؛ أو ‎(Y)‏ ناقل إظهار فردي الذي يشفر كلا من السلسلة الخفيفة والسلسلة الثقيلة من الجسم المضاد المكتسب السمة الادمية أو جزءٍ منة؛ والعائل المذكور المتبقي تحت هذه الشروط حيث يتم إظهار كل سلسلة تعزل الجسم المضاد المكتسب للسمة الآدمية أو جزءٍ منه المتشكل بتجمع السلاسل الظاهرة بتلك الطريقة. ‎Yo‏ تتوفر إضافيا طريقة لإنتاج جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية أو جزء منه؛ التي ترتبط بصفة خاصة مع مولد مضاد 1106-1 آدمي؛ وحيث يكون ‎CDRs‏ من ‎HC 5 LC‏ لهم ترتيبات ‎amino acid‏ التالية:
YA
‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) واحد أو أكثر من‎ ¢(YY ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDRI )١( : ‏و‎ 4(YE ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDR2 (Y) ... ‏(تعريف الترتيب رقم: 77)؛‎ CDR3 (Y) ‏منتقى من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) واحد أو أكثر من‎ o (or ‏أو‎ £9 7٠0 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDRI (V) 360) ‏(تعريف الترتيب رقم: 37 أو‎ CDR2 (Y) ‏(تعريف الترتيب رقم: 4 3 أو 27)؛ أو‎ CDR3 )©( ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحد أو أكثر من‎ ‎٠‏ تشتمل الطريقة المذكورة على زراعة خلية عائل؛ حيث تشتمل خلية العائل المذكورة على نظام إظهار مُخلق يشفر ‎HCH LC‏ من الجسم المضاد المذكور أو جزءٍ منه؛ ويسترجع الجسم المضاد المذكور أو جزءٍ منه. ‏يوفر الاختراع جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية أو جزء منه؛ يشتمل على زراعة خلية عائل تشمل نظام إظهار مُخلق يشفر السلاسل الخفيفة والثقيلة للجسم المضاد المكتسب السمة ‎٠‏ الآدمية أو ‎gia‏ منه؛ حيث يرتبط الجسم المضاد المذكور أو ‎sia‏ بصفة خاصة مع ‎alge‏ مضاد ‎DKk-1‏ أدمي؛ وحيث يكون ‎CDRs‏ من ‎HC 5 LC‏ لهم ترتيبات ‎amino acid‏ التالية: ‏(أ) واحد أو أكثر من ‎LC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎CDRI )١(‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎(YY‏ ‎CDR2 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: ؛ 7)؛ و ‎Y.‏ (؟) ‎CDR3‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎¢(YT‏ ‏(ب) واحد أو أكثر من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎CDRI (V)‏ (تعريف الترتيب رقم: 70 £9 أو 0(( ‎CDR2 )7( |‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ أو ١#)؛‏ و ‎(T)‏ 00183 (تعريف الترتيب رقم: 74 أو 27)؛ أو ‎: ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحد أو أكثر من‎ CDRs ‏(ج) واحد أو أكثر من‎ Yo ‏وحيث يمكن أن يُنافس الجسم المضاد المكتسب السمة الآدمية المذكور أو جزءِ منه مع‎ ‏للارتباط مع مواد مضاد 0106-1 آدمي.‎ muMabJC18
كن تتوفر أيضا تركيبة دوائية تشتمل على جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية أو جزء منه؛ حيث يرتبط الجسم المضاد المذكور أو ‎gia‏ بصفة خاصة مع ‎alse‏ مضاد 1106-1 آدمي؛ وحيث يكون ‎CDRs‏ من ‎HC 5 LC‏ لهم ترتيبات ‎amino acid‏ التالية: (أ) واحد أو أكثر من ‎LC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎)١( °‏ 0181© (تعريف الترتيب رقم: ١١)؛‏ : ‎CDR2 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: ؛ 7)؛ و (؟) ‎CDR3‏ (تعريف الترتيب رقم: 77)؛ (ب) واحد أو أكثر من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎CDRI )١(‏ (تعريف الترتيب رقم: 70 £9 أو ‎gor‏ ‎CDR2 (Y) Ye‏ (تعريف الترتيب رقم: 7 أو )540 ‎CDR3 (V)‏ (تعريف الترتيب رقم: ؛ 7 أو 57)؛ أو (ج) واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (أ) وواحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (ب)؛ ومادة مسوغة ‎(excipient)‏ مادة مخففة ‎(diluent)‏ أو مادة حاملة ‎(carrier)‏ مقبولة دوائيا. تتوفر أيضا تركيبة دوائية تشتمل على جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية أو جزء ‎ie‏ ‎١‏ حيث يرتبط الجسم المضاد المذكور أو جزءٍ بصفة خاصة مع مولد مضاد 1106-1 آدمي؛ وحيث يكون ‎CDRs‏ من ‎LC‏ و116 لهم ترتيبات ‎amino acid‏ التالية: (أ) واحد أو أكثر من ‎LC CDRs‏ منتقى من المجموعة المتكونة من: ‎CDRI )١(‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎¢(YY‏ ‎CDR2 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: ؟١)؛‏ و ‎CDR3 (¥) ٠.‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎¢(Y1‏ ‏(ب) واحد أو أكثر من ‎HC CDRs‏ منتقى من المجموغة المتكونة من: ‎)١(‏ 00181 (تعريف الترتيب رقم: ‎7١0‏ £9 أو #0)؛ ‎CDR2 (Y)‏ (تعريف الترتيب رقم: 77 أو ١5)؛‏ و (؟) ‎CDR3‏ (تعريف الترتيب رقم: ‎Ve‏ أو 57)؛ أو ‎Yo‏ (ج) واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (أ) وواحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من (ب)؛
Yo ‏الجسم المضاد المكتسب السمة الآدمية المذكور أو جزءٍ منه مع‎ Gal ‏حيث يمكن أن‎ ‏مادة‎ ¢(excipient) ‏أدميء ومادة مسوغة‎ Dkk-1 ‏للارتباط مع مولد مضاد‎ muMabJC18 ‏مقبولة دوائيا.‎ (carrier) ‏أو مادة حاملة‎ (diluent) ‏مخففة‎ ‏تتوفر أيضا طريقة لإنتاج جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية أو جزء منه؛ تشتمل على‎ : ‏من طلم الآدمي أو جزء‎ HC LC ‏زراعة خلية عائل مشتملة على نظام إظهار مُخلق يشفر‎ ©
CDRs ‏الآدمي؛ حيث يكون‎ 2106-1 alias ‏المذكور أو جزءٍ منه مع مولد‎ Ab ‏منه؛ حيث يرتبط‎ ‏تعريف الترتيب التالي:‎ HCH LC ‏من‎ ‏واحدة أو أكثر من المجموعة المتكونة من:‎ LC CDRs ‏(أ) تنتقى‎ (YY ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ 0011 -١ ‏(تعريف الترتيب رقم: ؛ )؛ و‎ CDR2 -" Ve : ¢(Y1 ‏(تعريف الترتيب رقم:‎ CDR3 -* ‏واحدة أو أكثر من المجموعة المتكونة من:‎ HC CDRs ‏(ب) تنتقى‎ to ‏(تعريف الترتيب رقم: 38 £9 أو‎ 0011 -١ ‏(تعريف الترتيب رقم: 7 أو ١0)؛ و‎ CDR2 -" ‏(تعريف الترتيب رقم: 4 ؟ أو 27)؛ أو‎ CDR3 -*“ Vo ‏من (ب)؛‎ CDRs ‏من (أ) وواحدة أو أكثر‎ CDRs ‏واحدة أو أكثر‎ (2) 1106-1 ‏أو الجزءٍ منه المذكور مع 001180018 للارتباط مع مولد مضاد‎ HAD ‏حيث يتنافس‎ ‏أو الجزءٍ المذكور منه.‎ HAD ‏آدمي؛ ويتم استرجاع‎ ‏يوفر الاختراع أيضا طريقة لعلاج أو منع فقد كتلة عظمية تشمل إعطاء مريض بحاجة‎ ‏من الاختراع وأجزاء منها. في أحد التجسيدات يكون المريض هو‎ HAbs ‏لذلك كمية مؤثرة من‎ Yo ‏مريض يعاني من سرطان منتشر إلى العظام. في أحد التجسيدات يكون المريض هو مريض‎ ‏يعاني من ورم نخاعي متعدد. في أحد التجسيدات ينتقى المريض من مرضى يعانون من‎ ‏التهاب حول الأسنان؛ التهاب مفصلي‎ (Paget ‏هشاشة العظام؛ نقص النسيج العظمي؛ مرض‎ ‏روماتويدي وفقد العظم بسبب عدم الحركة. في أحد التجسيدات يعاني المريض من هشاشة‎ estrogen ‏العظام. في أحد التجسيدات يعاني المريض من نقص في‎ Ye ‏يوفر الاختراع طريقة تتضمن حث كتلة عظمية زائدة تشمل إعطاء مريض بحاجة لذلك‎ ‏والأجزاء منها من الاختراع. في أحد التجسيدات يكون المريض هو‎ HAS ‏كمية مؤثرة من‎
AR
‏مريض يعاني من سرطان منتشر إلى العظام. في أحد التجسيدات يكون المريض هو مريض‎ ١ ‏يعاني من ورم نخاعي متعدد. في أحد التجسيدات ينتقى المريض من مرضى يعانون من‎ ‏التهاب حول الأسنان؛ التهاب مفصلي‎ Paget ‏هشاشة العظام؛ نقص النسيج العظمي؛ مرض‎ ‏روماتويدي وفقد العظم بسبب عدم الحركة. في أحد التجسيدات يعاني المريض من هشاشة‎ ‏العظام. في أحد التجسيدات يكون المريض مستقبل لرقعة عظمية أو مريض يعاني من كسر‎ ٠ ‏عظمي. في أحد التجسيدات يعاني المريض من فقد ثانوي للعظم بسبب: معالجة مزمنة مع‎ ‏فقدان الشهية؛ أو بسبب نقص نشاط الغدد‎ ¢TZDs ‏أو‎ «aromatase ‏مثبطات‎ corticosteroids ‏التناسلية أو سوء التغذية العظمية الكلوية.‎ ‏تشمل إعطاء مريض بحاجة لذلك كمية مؤثرة‎ Wit ‏يوفر الاختراع أيضا طريقة لحث نشاط‎ ‏من طهل1 أو جزءٍ منه من الاختراع.‎ ٠ ‏معادلة مضادة-2106-1 وأجزاء وظيفية مناعيا منها. في أحد‎ mAbs ‏يوفر الاختراع أيضا‎ ‏14م. في أحد‎ ٠٠١ > Kd ‏التجسيدات يرتبط الجسم المضاد أو جسم منه مع 1102 آدمي مع‎ ‏نانوجزيئي جرامي في‎ ٠٠١ > ‏أو جزء منه تأثير 0106-1 مع و16‎ Ab ‏التجسيدات يعارض‎ ‏اختبارات وظيفية معتمدة على خلية. في أحد التجسيدات يكون للجسم المضاد أو جزء منه نمط‎ ‏بعد‎ (BMD) ‏تعرض آدمي متوقع من المفترض أن يزيد مقاييس الكثافة المعدنية العظمية‎ 5 ‏مجم.‎ You < ‏تجريع مرة في الشهر‎ ‏و حسب‎ Wit ‏تتوافر أيضا عوامل ابتنائية للعظم تعارض قدرةٍ 1106-1 على تثبيط نشاط‎
Lalas Jie ‏ذلك؛ تسبب زيادة في كتلة العظم؛ تفيد في علاج أمراض؛ حالات واضطرابات؛‎ «corticosteroids ‏العظام؛ وتلك الناتجة من فقد ثانوي للعظم (مثلاء بسبب: معالجة مزمنة مع‎ ‏فقدان الشهية؛ أو بسبب نقص نشاط الغدد التناسلية أو سوء‎ ¢TZDs ‏أو‎ caromatase ‏مثبطات‎ ٠ ‏التغذية العظمية الكلوية)؛ حيث يكون ذلك التكوين الزائد للعظم مفيدا للمريض.‎ ‏والأجزاء منها من الاختراع في اتحاد مع عوامل دوائية أخرى (تحديد؛‎ Abs ‏يمكن إعطاء‎ ‏عوامل تستخدم لعلاج أو منع فقد أولي وثانوي للعظم؛ نقص في كتلة العظم؛ وتلك التي‎ ‏ا تضعف متانة العظم حسب الوصف هنا أدناه). يمكن إعطاء علاج الاتحاد بأي طريقة‎ ‏منه من الاختراع‎ gia ‏أو‎ HAb ‏مناسبة؛ على سبيل المثال؛ (أ) تركيبة دوائية واحدة تشمل‎ Yo ‏الحالي؛ عامل دوائي إضافي واحد على الأقل موصوف هنا ومادة مسوغة؛ مادة تخفيف؛ أو‎ )١( ‏مادة حاملة مقبولة دوائيا؛ أو (ب) مثل 7 من التركيبات الدوائية المنفصلة والتي تشمل‎
YY sale ‏تخفيف؛ أو‎ sale ‏ومادة مسوغة؛‎ Mall ‏أو جزء منه من الاختراع‎ HAD ‏تركيبة أولى تشمل‎ ‏حاملة مقبولة دوائياء و(7) تركيبة ثانية تشمل عامل دوائي إضافي واحد على الأقل موصوف‎ ‏هنا ومادة مسوغة؛ مادة تخفيف؛ أو مادة حاملة مقبولة دوائيا. يمكن إعطاء التركيبات الدوائية‎
Clie ‏بصورة متزامنة أو متعاقبة وبأي ترتيب‎ ‏أو تشمل‎ eg EY ‏و/أو الأجزاء منها التي يوفرها‎ Abs ‏تتوافر إضافيا مجموعات تشمل‎ ° ‏التركيبات الدوائية التي يوفرها الاختراع. في أحد التجسيدات تتضمن المجموعات الإضافية‎ ‏أو الجزء منه. في تجسيد‎ Ab ‏إرشادات عن كيفية تحضير طلم أو الجزء و/أو كيفية إعطاء‎ ‏آخر تستخدم المجموعة كمجموعة تشخيصية لتحديد ما إذا كان لدى المريض المقدرة على‎ “Wnt ‏زيادة كتلة العظم بتثبيط مسار إشارات‎
V4 ‏في‎ (under the terms of the Budapest Treaty) ATCC ‏يتوافر أيضا إيداعان من‎ Ve ‏من‎ HC ‏به منطقة متغيرة‎ plasmid ‏يحمل‎ E.coli 11150» ‏تم إيداع‎ .٠٠0909 ‏مارس‎ ‎:huMabJC18 ‎pCR2. 1 TOPO from E. coli in host E. coli DH5a, UC 25553, ATCC Patent Deposit
Designation PTA-9835. thuMabJC18 ‏من‎ LC ‏به منطقة متغيرة‎ plasmid ‏يحمل‎ E.coli 7115© ‏تتم إيداع‎ Ve pCR2.1 TOPO from E. coli in host E. coli DH5a, UC 25554, ATCC Patent Deposit
Designation PTA-9836. ‏المودعة هكذا للعامة عند إصدار براءة‎ plasmids ‏كل القيود على توافر‎ Liles ‏سوف تزول‎ ‏الاختراع من مواصفة الاختراع الحالي.‎ ‏سوف تتضح سمات ومزايا أخرى للشرح الحالي من الوصف التفصيلي التالي والأمثلة التي‎ Ye ‏براءات الاختزاع‎ «Genbank ‏لا يجب اعتبارها مقيدة. إن محتويات كل المراجع؛ إدخالات‎ ‏وطلبات براءات الاختراع المنشورة والمذكورة طوال هذا الوصف مندمجة هنا بصورة ظاهرة‎ ‏بالإشارة الكاملة.‎ ‏شرح مختصر للرسومات‎ ‏مضاد 0106-1 فأري (1018) في نموذج فأر سليم.‎ mAb ‏يبين الشكلان ١(أ) و١(ب) تأثير‎ Yo
JS ‏الكلية للأطراف البعيدة لعظام الفخذ بالمعالجة مع 1018 عند‎ BMD ‏تزداد بدرجة ملحوظة‎
Yy ‏مستويات الجرعة (الشكل ١لأ)). إن 1018 يزيد أيضا معدلات تكوين العظم بدرجة ملحوظة‎ .))ب(١ ‏مجم/ كجم في الفئران (الشكل‎ ٠١ ‏عند مستوى جرعة‎ ‏هجين فأري (جسم مضاد هجين فأري- هجين آدمي-‎ Dkk-1 mAb ‏تأثير‎ Y ‏يبين شكل‎ ٠١ ‏إلى‎ ١ ‏الكلية عند جرعات من‎ BMD ‏فأري) في نموذج فأر سليم. إن الهجائن الفأرية تزيد‎ ‏مجم/ كجم مقارنة مع وسط حامل(الكثافة المعدنية العظمية الإجمالية(عظم الفخد البعيد)).‎ ©
OVX ‏في نموذج فأر‎ estrogen ‏نقص‎ ding ‏يبين شكل 7 أن 1018 يمنع فقد العظم الذي‎ ‏أسابيع‎ A ‏حسب التوقع» تظهر الفئران المعالجة مع وسط حامل نقصا في النسيج العظمي عند‎ ‏الكلية. إن 1018 يزيد بصورة مستجيبة‎ BMD ‏بالنقص الملحوظ في‎ aca sill ‏حسب‎ OVX ‏بعد‎ ‎١ ‏عند الأجزاء البعيدة لعظام الفخذ بمقدار‎ pQCT ‏الكلية حسب القياس بواسطة‎ BMD ‏للجرعة‎ ‏في الفئران المعالجة مع 1018 عند‎ .0VX ‏مقارنة مع معالجة وسط حامل لفثران‎ 27٠0 ‏إلى‎ ٠
OVX ‏الكلية تصبح ليست فقط أكبر من تلك للفئران‎ BMD ‏مجم/ كجم مرتين أسبوعيا فإن‎ ٠ ‏المعالجة بوسط حامل لكنها تستبقى أيضا عند مستوى المثال المقارن الوهمي؛ مما يدل على‎ ‏أنه عند هذه الجرعة وهذا النظام للتجريع فإن 1018 يمنع كليا حدوث نقص في النسيج العظمي‎ ‏في فثران 01776(الكثافة المعدنية العظمية الإجمالية(عظم الفخد البعيد)).‎
Dkk-4 5 0106-3 «Dkk-1 ‏يبين شكل ؛ خصوصية ارتباط 1018 مع مماثلات آدمية‎ Vo ‏آدمي وعدم‎ Dkk-4 ‏ميكروجرام/ ملليلتر). يظهر 1018 ارتباطا ضعيفا مع‎ ١ ‏بتركيز‎ DKK's) ‏ارتباط مع 11063 آدمي حتى ما يصل إلى © ميكروجرام/ ملليلتر.‎ -Target Mediated Drug Disposition (TMDD) ‏يبين شكل © نموذج‎ ‏في حيوان‎ V5-His ‏به‎ Bale h-DKK-1 ‏رسم بياني لتركيزات المصل من‎ ١ ‏يبين شكل‎ ‏ميكروجرام/ كجم. عند نقاط زمنية‎ ٠٠0١و‎ ٠١ 00 ١ ‏قارض؛ بعد إعطاء وحيد في الوريد عند‎ © ‏مجم/ كجم؛ > ساعة واحدة عند 0.0600 مجم/ كجم و> ساعتين‎ 60١ ‏نصف ساعة عند‎ > ‏عند 6,01 و١ مجم/ كجم تكون العينات دون الحد الممكن تقديره كميا لطريقة الاختبار ولا‎ ‏يتم تضمنها في الرسم البياني.‎ ‏الحرة/ الحرة جزئيا الملحوظة والتي يتوقعها النموذج‎ huMabJC18 ‏تركيزات‎ ١ ‏يبين شكل‎ .Sprague-Dawley ‏لقوارض‎ huMabJC18 ‏مقابل الزمن بعد إعطاء في الوريد أسبوعيا من‎ Ye ‏وتمثل الخطوط الأنماط المتوقعة من النموذج.‎ (SD=) ‏تمثل الرموز المتوسط للبيانات الملحوظة‎
Y¢ ‏تبين الأشكال 8(أ)-(ه) رسومات بيانية لتركيزات 7106-1 الحرة الملحوظة والتي يتوقعها‎
Sprague- ‏لقوارض‎ huMabJC18 ‏النموذج مقابل الزمن بعد إعطاء في الوريد أسبوعيا من‎ ‏وتمثل الخطوط الأنماط المتوقعة‎ (SD) ‏تمثل الرموز المتوسط للبيانات الملحوظة‎ Dawley ‏تتم إزالتها من التحليل.‎ huMabJC18 ‏مضادة‎ Abs ‏من النموذج. إن العينات المحددة بها‎ ° يبين الشكلان 4(أ)-(ب) رسومات بيانية لتركيزات 1014801018 الحرة/ الحرة جزئيا الملحوظة والتي يتوقعها النموذج مقابل الزمن بعد إعطاء وحيد في الوريد من ‎huMabJC18‏ ‏لقردة ‎.Cynomolgous‏ (أ) قردة ذكور. (ب) قردة إناث. تمثل الرموز البيانات الملحوظة لقرد منفرد وتمثل الخطوط الأنماط المتوقعة من النموذج. تبين الأشكال ‎٠١‏ (أ)-(ه) تركيزات 0106-1 الحرة الملحوظة والمتوقعة من النموذج مقابل ‎٠‏ الزمن بعد إعطاء وحيد في الوريد من ‎huMabJC18‏ لقردة ‎.Cynomolgous‏ تمثل الرموز البيانات الملحوظة وتمثل الخطوط الأنماط المتوقعة من النموذج. يبين شكل ‎١١‏ رسم بياني لمتوسط تركيزات ‎calcin‏ العظمي ‎(SE)‏ عند 51,0 0,¥ أسبوع عقب الجرعة الأولى بعد إعطاء في الوريد أسبوعيا من ‎huMabJC18‏ لقوارض ‎Sprague-‏ ‎Dawley‏ العلامة * تدل على م > ‎٠.٠.06‏ مقابل وسط ‎dela‏ ‎Vo‏ يبين ‎VY JSS‏ رسم بياني لتركيزات 0106-1 الحرة المتوقعة في آدميين عقب إعطاء تحت الجلد من 1014801018 مرة/ شهر لمدة 7 شهور. تم اختبار “ جرعات مختلفة: ‎١007‏ مجم/ كجم تمثل ‎٠١/١‏ من ‎MABEL‏ أو جرعة ليس لها تأثيرء؛ ‎١07‏ مجم/ كجم تمثل ‎MABEL‏ ‎¥,0V‏ مجم/ كجم ‎Jidi‏ جرعة فعالة متوقعة لهشاشة العظام. يبين شكل ‎١١‏ رسم بياني لتركيزات ‎huMabJC18‏ الحرة المتوقعة في آدميين عقب إعطاء ‎Ye‏ تحت الجلد من 1014801018 مرة/ شهر لمدة 7 شهور. تم اختبار ؟ جرعات مختلفة: ‎٠.8607‏ ‏مجم/ كجم تمثل ‎٠١/١‏ من ‎MABEL‏ أو جرعة ليس لها تأثير؛ 5607© مجم/ كجم تمثل ‎MABEL‏ و ‎¥,0Y‏ مجم/ كجم تمثل جرعة فعالة متوقعة لهشاشة العظام. إن حد التقدير الكمي المتوقع ‎(LOQ)‏ للاختبار التحليلي الحيوي يمثقل عدم جدوى التجريع الأقل من ‎MABEL‏ ‏المتوقع. ‎Yo‏ يبين شكل ‎VE‏ رسم بياني لحسابات انشغال المستقبل من أجل 101801018 مقابل جرعة آدمية متوقعة اعتمادا على )1( طريقة اتزان حالة ثابتة ‎(Y) 5 (Y+ + Duff)‏ نموذج ‎PK/PD‏ ‏حركي ‎(TMDD)‏
Yo ‏يتعلق الشرح الحالي بأجسام مضادة معزولة وبأجزاء (مثلا؛ أقسام تربط مولد مضاد) منهاء‎ ‏بصفة خاصة أجسام مضادة أحادية النسخ مكتسبة السمة الآدمية وأجزاء منهاء ترتبط بصفة‎ ‏والأجزاء منها من هذا الشرح من ترتيبات‎ Abs ‏في بعض التجسيدات تشتق‎ .Dkk-1 ‏خاصة مع‎
CDR ‏خط جرثومة سلسلة ثقيلة وخفيفة خاصة و/أو تشمل سمات بنائية خاصة مثل مناطق‎ © ‏معزولة وأجزاء منهاء طرق‎ Abs ‏خاصة. يوفر الشرح؛ مثلاء‎ amino acid ‏تشمل ترتيبات‎ ‏والأجزاء منها. يتعلق الشرح‎ Abs ‏أو الأجزاء منهاء وتركيبات دوائية تحث‎ Abs ‏لتحضير تلك‎ ‏لتحديد 0106-1 بالإضافة إلى علاج أمراض؛‎ Mis ‏وبأجزاء منهاء‎ Abs ‏أيضا بطرق استخدام‎ ‏حالات أو اضطرابات مختلفة؛ تؤدي إلى فقد في العظم. تتوافر أيضا طرق لعلاج أو منع فقد‎
Wnt ‏كتلة العظم» طرق لحث كتلة عظمية زائدة» وطرق لحث نشاط‎ ٠ ‏التعريفات‎ ‏إذا لم يحدد خلاف ذلك هناء فإن المصطلحات العلمية والفنية المستخدمة في سياق‎ ‏سوف تكون لها المعاني التي يدركها شيوعا أصحاب المهارةٍ العادية في الفن.‎ all ‏الاختراع‎ ‏إضافة لذلك؛ إذا لم يتطلب السياق خلاف ذلك سوف تتضمن أشكال المفرد الإشارة إلى الجمع‎ ‏وسوف تتضمن أشكال الجمع الإشارة إلى المفرد.‎ ١٠ ‏بصفة عامة؛ فإن التسميات المستخدمة في السياق مع؛ وتقنيات؛ مزرعة خلية ونسيج؛ علم‎ nucleic acid s protein ‏وكيمياء وتهجين‎ Ll ‏أحياء جزيثية؛ علم المناعة؛ علم الأحياء؛‎ ‏الموصوفة هنا هي تلك المعروفة جيدا والمستخدمة شيوعا في الفن. إن الطرق والتقنيات‎ ‏للاختراع الحالي تجرى عامة طبقا لطرق تقليدية معروفة جيدا في الفن وحسب الوصف في‎ ‏عديدة وخاصة أكثر مذكورة ومشروحة طوال المواصفة الحالية إذا لم يشار خلاف‎ dle ‏مراجع‎ ٠٠ ‏ذلك. انظر؛ مثلا:‎
Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2d ed., Cold Spring
Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989) and Ausubel et al.,
Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1992), and
Harlow and Lane Antibodies: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Yo
Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1990),
كه المنتدمجة هنا كمرجع. تجرى تقنيات التقنية والتفاعل الإنزيمي طبقا إلى مواصفات الصانع؛ كما يتم انجازها عموما في الفن أو موصوفة هنا. إن المصطلح المستخدم ‎cae‏ وإجراءات وتقنيات معملية؛ الكيمياء ‎Adal‏ كيمياء التخليق العضوي؛ والكيمياء الدوائية والطبية الموصوفة هنا هي تلك المصطلحات المعروفة جيدا والمستخدمة عموما في الفن. يمكن استخدام تقنيات © قياسية في التخليق الكيميائي, التحليل الكيميائي؛ التحضير الدوائي؛ المستحضرات؛ وتوصيلها ومعالجة المريض. سوف يتم فهم المصطلحات التالية المستخدمة في هذا الكشف؛ مالم يحدد خلاف ذلك؛ إن يكون لها المعاني التالية: يتضمن "0106-1" كما هو مستخدم ‎(ln‏ على سبيل المثال؛ أشكال فطرية فأرية وآدمي من ‎٠‏ 010-1. تتضح ترتيبات ‎Dkk-1 nucleotide s protein‏ التمثيلية؛ ‎Mw‏ في ‎(WO2006/015373) US2006/0127393‏ 5 1152008/0193449. يتضمن المصطلح أيضا أشكال ‎Aline‏ من هذه الترتيبات الأصلية المتفاعلة تقاطعيا مناعيا مع هذه ‎proteins‏ الأصلية. تستطيع هذه ‎proteins‏ أن تثبط التفاعل البيني بين 1875 أو 6 مع ‎Wnt‏ قد يشير المصطلح أيضا إلى جزءء من شكل أصلي أو شكل متباين من ‎Dkk-1‏ والذي يحتوي على ‎epitope Ve‏ الذي يستطيع الجسم المضاد خصوصا أن يرتبط به. يعني المصطلح ‎"polynucleotide"‏ أو ‎polymers "nucleic acid"‏ فردي الشريط ومزدوج الشريط. قد تكون ‎nucleotides‏ المشتملة على ‎polynucleotide‏ هي ‎ribonucleotides‏ أو ‎deoxyribonucleotides‏ أو شكل معدل من أي من نوعي ع01101010. تتضمن التعديلات المذكورة تعديلات قاعدة ‎Jie‏ مشتقات ‎¢inosine s bromouridine‏ تعديلات ‎ribose‏ مثل -:2:,3 ‎cdideoxyribose |. ٠‏ وتعديلات وصلة ‎nucleotide‏ بيني ‎«phosphorothioate Jie‏ ‎«phosphorodiselenoate 010501010510031 010500100111016‏ ‎phoshoraniladate ¢<phosphoroanilothioate‏ و ‎.phosphoroamidate‏ ‏يعني المصطلح " ‎polynucleotide "oligonucleotide‏ يشمل ‎nucleotide ٠٠١‏ أو أقل. في بعض التجسيدات؛ يكون طول ‎٠١ oligonucleotides‏ إلى ‎٠١‏ قاعدة. في تجسيدات ‎Yo‏ أخرى؛ يكون طول ‎oligonucleotides‏ آل “أل كا ذلك ‎AT‏ لالء هاء 14 أو ‎٠١‏ إلى ‎nucleotides ٠‏ قد تكون ‎oligonucleotides‏ فردية الشريط أو مزدوجة الشريط؛ مثلاء للاستخدام في تشييد جين طفري. قد تكون ‎oligonucleotides‏ من الاختراع عبارة عن
Yv ‏من‎ oligonucleotide ‏إحساس أو مضادة للإحساس . يمكن أن يتضمن‎ oligonucleotides ‏أو علامة مولدة لمضادء‎ hapten ‏متضمنة علامة مشعة؛ علامة استشعاعية»‎ Ade ‏الاختراع‎ ‎(PCR ‏من الاختراع؛ مثلاء كمواد أولية‎ oligonucleotides ‏لاختبارات الكشف. يمكن استخدام‎ ‏مواد أولية نسخية؛ أو مجسات تهجين.‎
° يعني "جزيء تع ‎nucleic‏ معزول" ‎DNA‏ أو ‎RNA‏ من مصدر جينومي» ‎«mRNA‏ ‎«cDNA‏ أو مصنع أو بعض اتحاد من هذا غير مصاحب مع كل أو قسم من ‎polynucleotide‏ موجود فيه ‎polynucleotide‏ المعزول في الطبيعة؛ أو يكون متصلا مع ‎polynucleotide‏ غير متصل معه في الطبيعة. لأغراض هذا الشرح؛ لابد من إدراك أن “جزيء ‎nucleic acid‏ يشمل" ترتيب ‎nucleotide‏ معين لا يشمل كروموسومات سليمة. يمكن
‎٠‏ أن تتضمن جزيئات ‎nucleic acid‏ معزول ‎"Jedd‏ ترتيبات ‎nucleic acid‏ مخصصة؛ بالإضافة إلى الترتيبات المخصصة؛ ترتيبات تشفير من أجل ما يصل على ‎٠١‏ أو أيضا ما يصل إلى ‎protein ٠‏ آخر أو أقسام من ذلك؛ أو يمكن أن يتضمن ترتيبات تنظيمية متصلة تشغيليا تتحكم في إظهار منطقة تشفير ترتيبات ‎nucleic acid‏ المذكورة؛ و/أو يمكن أن يتضمن ترتيبات ناقل إظهار.
‏و إذا لم يحدد خلاف هذاء يكون الطرف ناحية اليد اليسرى لأي ترتيب ‎polynucleotide‏ ‏فردي الشريط مشروح هنا هو الطرف 00 يشار إلى اتجاءه اليد اليسرى لترتيبات ‎polynucleotide‏ مزدوج الشريط بأنه الاتجاه ‎Lo‏ يشار إلى اتجاه إضافة ‎ro‏ إلى ؟ لنسخ ‎RNA‏ الأصلية بأنه اتجاه النسخ؛ يشار إلى مناطق ترتيب على شريط ‎DNA‏ لها نفس الترتيب ‎Jie‏ نسخة ‎RNA‏ التي هي ©' على الطرف ©' من نسخة ‎Lal RNA‏ 'ترتيبات تيار صاعد"؛
‎٠‏ يشار إلى مناطق الترتيب على شريط ‎DNA‏ التي لها نفس الترتيب ‎Jie‏ نسخة ‎RNA‏ التي هي إلى الطرف “ لنسخة ‎RNA‏ بأنها 'ترتيبات تيار هابط".
‏يشير المصطلح 'ترتيب تحكم ‎"(control sequences)‏ إلى ترتيبات ‎polynucleotide‏ يمكن أن يؤثر على إظهار ومعالجة ترتيبات التشفير المرتبط معها. يمكن أن تعتمد طبيعة ترتيبات التحكم تلك على الكائن الحي العائل. في تجسيدات خاصة؛ يمكن أن تتضمن ترتيبات تحكم
‎٠‏ لبدائيات النواة ترتيب محث؛ مكان ربط ‎eribosomal‏ وترتيب إنهاء نسخ. على سبيل المثال؛ تتضمن ترتيبات تحكم لسويات النواة ‎cline‏ تشمل واحد أو عدد من أماكن إدراك لعوامل
YA
‏النسخ؛ ترتيبات معززة للنسخ؛ وترتيب إنهاء نسخ. تتضمن "ترتيبات تحكم" طبقا للاختراع‎ ‏ترتيبات قائدة و/أو ترتيبات شريك اندماج.‎ «plasmid «nucleic acid Mis) ‏أي جزيء أو كيان‎ "(vector) ‏يعني المصطلح 'تاقل‎ ‏إلى داخل خلية عائل.‎ protein ‏ملتهم جراثيم أو فيروس) مستخدم لنقل معلومة‎ (expression ‏إظهار‎ Aun ‏أو‎ "(expression vector) ‏إظهار‎ JEU ‏يشير المصطلح‎ ° ‏تباشر‎ nucleic acid ‏إلى ناقل مناسب لتحويل خلية عائلة ويحتوي على ترتيبات‎ "construct) ‏و/أو تتحكم في (في اتحاد مع الخلية العائلة) إظهار واحدة أو أكثر من مناطق تشفير غير‎ ‏متماثلة متصلة معها تشغيليا. يمكن أن تتضمن بنية إظهار؛ لكن بدون تحديد؛ ترتيبات تؤثر‎ ‏لمنطقة تشفير‎ RNA ‏تؤثر على جدل‎ cintrons ‏و؛ عند وجود‎ chen fi ‏على أو تتحكم في نسخ؛‎ ‏متصلة تشغيليا معها.‎ ٠ ‏حسب الاستخدام هناء فإن 'متصلة تشغيليا" تعني أن المكونات المنطبق عليها المصطلح‎ ‏تكون في علاقة تسمح لها بالقيام بوظائفها المتاصلة تحت شروط مناسبة. على سبيل المثال؛‎ ‏يكون مرتبطا معه بحيث‎ protein ‏فإن ترتيب التحكم في ناقل "متصل تشغيليا" مع ترتيب تشفير‎ ‏متوائمة مع النشاط النسخي للترتيبات المقارنة.‎ Jag pd ‏تحت‎ protein ‏يتم إظهار ترتيب تشفير‎ ‏يعني خلية متحولة؛ أو قادرة على أن تتحول»؛ مع‎ "(host cell) ‏إن المصطلح "خلية عائلة‎ ‏سواء‎ ea) ‏وبذلك يتم إظهار جين هام. يتضمن المصطلح نسل الخلية‎ nucleic acid ‏ترتيب‎ ‏كان النسل متماثلا أم لا في الشكل أو في التكوين الجيني للخلية الأم الأصلية؛ طالما أن‎ ‏الجين الهام موجود.‎ ‏يعني تحويل الجينات من نوع بكتيري واحد إلى نوع‎ (transduction) ‏إن المصطلح '"انتقال‎ ‏بواسطة بلعمة بكتيرية. يشير أيضا 'الانتقال" إلى اكتساب وانتقال ترتيبات خلوية‎ sale ‏آخرء‎ ‏لخلايا سوية النواة بنسخ الفيروسات العكسية الناقصة.‎ ‏غريب‎ DNA ‏امتصاص‎ "(transfection) ‏يعني المصطلح "استقبال حامل الجين من العاثل‎
DNA ‏أو خارجي بواسطة خلية؛ وتكون الخلية 'مستقبلة حامل الجين من العائل" عند إدخال‎ ‏الخارج إلى داخل غشاء الخلية. هناك عدد من تقنيات استقبال حامل الجين من العائل معروفة‎ ‏جيدا في الفن وموضحة هنا. انظر؛ على سبيل المثال؛‎ YO
Graham et al., 1973, Virology 52:456; Sambrook ef al., 2001, Molecular Cloning: A
Laboratory Manual, 1d; Davis et al., 1986, Basic Methods in Molecular Biology,
Elsevier; and Chu et al., 1981, Gene 13:197. ‏خارجية في خلايا عائلة‎ DNA ‏يمكن استخدام تلك التقنيات لإدخال واحد أو أكثر من أجزاء‎ ‏مناسبة.‎ oo يشير المصطلح "تحول ‎(transformation)‏ إلى تغير في السمات الجينية المميزة لخلية؛ : وتكون الخلية متحولة عندما يتم تعديلها لتحتوي على ‎DNA‏ أو ‎RNA‏ جديد. على سبيل المثال؛ تكون الخلية متحولة عندما تكون معدلة جينيا من حالتها الأولية بإدخال مادة جينية جديدة من خلال استقبال حامل الجين من العائل؛ التحويل؛ أو تقنيات أخرى. بعد استقبال ‎٠‏ حامل الجين من العائل؛ أو التحويل؛ يمكن أن يخلق ‎DNA‏ المحول مع ذلك للخلية بالتكامل فيزيائيا في ‎chromosome‏ الخلية؛ أو يمكن استبقائه مؤقتا كعنصر ‎episomal‏ بدون نسخه؛ أو يمكن نسخه بصورة مستقلة ‎plasmid Jie‏ تعتبر الخلية "متحولة بدرجة ثابتة' عند نسخ ‎DNA‏ المحول مع انقسام خلية. إن المصطلح "8017060808" أو ‎"protein’‏ يعني جزيء عياني له ترتيب ‎amino acid‏ من ‎(shal protein ٠‏ ¢ بمعنى أن ‎protein‏ ناتج من خلال خلية طبيعية الوجود وغير مخلقة؛ أو ناتج من خلال خلية معدلة وراثيا أو مخلقة؛ ويشمل جزيئات لها ترتيب ‎amino acid‏ من ‎protein‏ ‏الأصلي؛ أو جزيئات لها محذوفات من؛ إضافات إلى؛ و/أو استبدالات لواحد أو أكثر من ‎amino acids‏ التي لها الترتيب الأصلي. يشتمل المصطلحان ‎"protein’ 5 "polypeptide"‏ على تحديدا أجسام مضادة مضاد ‎(Dkk-1‏ أو ترتيبات لها محذوفات من؛ إضافات إلى» و/أو ‎٠٠‏ استبدالات لواحد أو أكثر من ‎amino acids‏ من الجسم المضاد مضاد 0106-1. يشير المصطلح "جزء ‎"polypeptide‏ إلى ‎polypeptide‏ له محذوف طرفي ‎camino‏ محذوف طرفي ‎«carboxy |‏ و/أو محذوف داخلي كما هو مقارن مع ‎protein‏ | لأصلي كامل الطول ‎٠‏ قد تحتوي أيضا هذه الأجزاء على ‎amino acids‏ معدلة بالمقارنة مع ‎protein‏ الأصلي. في تجسيدات خاصة؛ يكون طول الأجزاء حوالي © إلى ‎amino acids ٠٠‏ على سبيل المثال؛ يمكن أن ‎YO‏ يكون طول الأجزاء على الأقل ‎oA elo‏ نت كل ‎(Yu‏ تفلا صنل يلك عمل ‎(YOu (Yuu‏ بك ‎(Fou‏ اندي أو +£0 ‎camino acid‏ تتضمن أجزاء ‎polypeptide‏ المفيدة لهذا الاختراع أجزاء وظيفية ‎Lelie‏ من أجسام مضادة؛ متضمنة مجالات سيطرة رابطة. في
Ye ‏مجال سيطرة‎ «CDR ‏تتضمن أجزاء مفيدة بدون تحديد منطقة‎ (Dkk-1 ‏حالة جسم مضاد يربط‎ ‏أو خفيفة؛ قسم من سلسلة جسم مضاد أو فقط المنطقة المتغيرة منها‎ ALE ‏متغير من سلسلة‎ ‏إلخ.‎ «CDRs 7 ‏المتضمنة‎ ‏خالي‎ )١( ‏الموضوع‎ protein ‏يعني أن‎ "(isolated protein) ‏معزول‎ protein’ ‏إن المصطلح‎ ‏أخرى قد يكون موجود معها طبيعياء (7) خالي أساسيا من‎ proteins ‏من على الأقل بعض‎ © ‏أخرى من نفس المصدر؛ مثلا من نفس النوع؛ (©) ظاهر بواسطة خلية من نوع‎ 5 «(lipids) ‏الدهون‎ epolynucleotides ‏من‎ 75 ٠ ‏مختلف؛ (4) متفصل عن على الأقل حوالي‎ ‏أو مواد أخرى ملازمة له في الطبيعة؛ )0( ملازم تشغيليا (بتفاعل تساهمي‎ carbohydrates ‏غير ملازم له في الطبيعة؛ أو )1( غير موجود في‎ polypeptide ‏أو غير تساهمي) مع‎ ‏آخرء؛ من مصدر‎ RNA sf mRNA «DNA <genomic DNA id ‏الطبيعة. يمكن أن‎ ٠ ‏المعزول خاليا‎ protein ‏المعزول. يفضل؛ أن يكون‎ protein ‏مصنع؛ أو أي اتحاد من ذلك‎ ‏أو ملوثات أخرى موجودة في بيئته الطبيعية تعوق‎ polypeptides ‏أو‎ proteins ‏جوهريا من‎
AT ‏استخدامه العلاجي؛ التشخيصي؛ الوقائي؛ البحثي أو‎ amino acid ‏جسم مضاد) ترتيب‎ Jia) polypeptide “(variant) ‏يشضمل "شكل متباين‎ ‏مستبدلة في‎ Sls ‏داخلة 8 ¢ مزالة من‎ amino acid ‏يكون فيه واحدة أو أكثر من متخلفات‎ Ve ‏آخر. تتضمن الأشكال المتباينة من الاختراع‎ polypeptide ‏بالنسبة لترتيب‎ amino acid ‏ترتيب‎ ‎.z Lil proteins ‏جسم مضاد) الذي‎ lia) polypeptide ‏هو‎ polypeptide ‏من‎ "(derivative) Gide ‏إن‎ ‏أو استبدال الأشكال المتباينة؛‎ (ada ‏يعدل كيميائيا في بعض الطرق الواضحة من إدخال؛‎ ‏من خلال اقتران جزء كيميائي آخر.‎ Se ٠ ‏إن "استجابة مناعية"؛ كما يفهمها الماهرون في الفن؛ تتضمن لكن بدون تحديد أي تنشيط‎ ‏مساعدة أو‎ T ‏للتباين لاستجابة خلية‎ alge ‏يخص مولد مضاد يمكن الكشف عنه أو تنشيط‎ ‏سامة للخلية؛ إنتاج الأجسام المضادة؛ تتشيط يسببه خليه 7 للتفاعلات‎ T ‏استجابة خلية‎ ‏الحساسة؛ إلخ. يشتمل المصطلح على تأثير مثلا الخلايا الليمفاوية؛ مولد المضاد الذي يقدم‎ ‏الخلايا؛ الخلايا البلعمية؛ الخلايا الحبيبية؛ وجزيئات عيانية قابلة للذوبان ناتجة من خلال‎ Ye ‏ومكمل) وذلك يؤدي إلى تلف‎ coytokines ‏الخلايا أعلاه أو الكبد (متضمنة أجسام مضادة؛‎ ‏انتقائي؛ تدمير؛ أو إزالة؛ من الجسم الآدمي؛ المسببات المرضية المتوغلة؛ الخلايا أو الأنسجة‎
المصابة بالمسببات المرضية؛ الخلايا السرطانية؛ أو في حالات الالتهاب بسبب المناعة الذاتية
أو الالتهاب المرضي؛ ‎WDA‏ أو أنسجة آدمية طبيعية. يشير "مسار نقل إشارة" إلى العلاقة البيوكيميائية بين عدة جزيئات لنقل الإشارة التي ‎ali‏ ‏دورا في إرسال إشارة من قسم واحد من خلية إلى قسم آخر في خلية. كما و مستخدم هناء © تتضمن عبارة 'مستقبل سطح ‎Sle (LIA‏ جزيئات ومعقدات من جزيئات قادرة على استقبال
إشارة وإرسال تلك الإشارة عبر غشاء ‎plasma‏ لخلية. إن "جسم مضاد ‎"(antibody)‏ هو جزيء ‎globulin‏ مناعي يستطيع الارتباط بصفة خاصة مع هدف؛ ‎epolypeptide «lipid «polynucleotide «carbohydrate (fia‏ إلخ؛ من خلال مكان إدراك مولد مضاد واحد على الأقل؛ يقع في المنطقة المتغيرة من جزيء ‎globulin‏ المناعي. ‎٠‏ حسب الاستخدام هنا يشمل المصطلح ليس فقط الأجسام المضادة السليمة؛ عديدة النسخ أو أحادية النسخ» لكن ‎Load‏ أجزاء منها ‎(Fv (F(ab%), Fab® (Fab Jia)‏ أجسام مضادة وحيدة السلسلة ‎(ScFv) (single chain)‏ ومجال سيطرة ‎(domain)‏ يتضمن أجسام مضادة من أسماك القرش والجمال)؛ 5 ‎proteins‏ اندماج ‎(fusion)‏ تشمل قسم جسم ‎colina‏ وأي هيئة معدلة أخرى لجزيء ‎globulin‏ المناعي تشمل مكان إدراك مولد مضاد. يتضمن الجسم الجسم مضاد مضاد ‎٠‏ من أي ‎IgA gC Jie cia‏ أو ‎IgM‏ (أو صنف فرعي من ذلك)؛ وليست هناك حاجة لأن يكون الجسم المضاد من أي صنف خاص. اعتمادا على ترتيب ‎amino acid‏ للجسم المضاد لمجال السيطرةٍ الثابت لسلاسله التقيلة؛ يمكن تقسيم ‎globulins‏ المناعية إلى ‎Glial‏ مختلفة. هناك © أصتناف كبرى من ‎globulins‏ المناعية: ‎IgG ¢IgE «IgD «IgA‏ و1811 ويقسم عديد من هذه إضافيا إلى أصناف فرعية (أنواع مماثلة)؛ ‎dgG2 IgGl Mia‏ 03ع1 04ع1؛ ‎IgAl‏ ‎٠٠‏ و82ع1. تسمى مجالات ‎splay ul)‏ الثابتة السلسلة الثقيلة المقابلة للأصناف المختلفة من ‎globulins‏ المناعية: معطمل ‎cepsilon «delta‏ ممصقع» ‎«mu‏ على الترتيب. إن بناءات الوحدة الفرعية والهيئات ثلاثية الأبعاد من أجل الأصناف المختلفة من ‎globulins‏ المناعية
معروفة جيدا.
قد تشتق الأجسام المضادة طبقا للاختراع فقط من مصدر واحد؛ أو قد تكون "هجينة ‎'(chimeric) Ye‏ بمعنى أن الأقسام المختلفة من الجسم المضاد تشتق من “ من الأجسام المضادة المختلفة. على سبيل المثال؛ قد تشتق ‎CDR‏ من مصدر جرذ أو فأرء بينما تشتق مناطق إطار لمنطقة ‎V‏ من مصدر حيواني مختلف؛ مثلا آدمي. قد تتتج الأجسام المضادة؛ أو
YY
‏مُخلق؛ أو بفصل إنزيمي أو كيميائي لأجسام‎ DNA ‏أجزاء ربط في أورام هجينة؛ بتقنيات‎ (antibody) ‏مضادة سليمة. إذا لم يشار خلاف ذلك يتضمن المصطلح "جسم مضاد‎ ‏كاملة الطول و7 من‎ ALE ‏بالإضافة إلى الأجسام المضادة المشتملة على ؟ من سلاسل‎ ‏سلاسل خفيفة كاملة الطول؛ مشتقات؛ أشكال متباينة؛ أجزاء؛ وطفرات منهاء موصوفة لهم أمثلة‎ ‏أدناه.‎ oe إن المصطلح ‎Aull’‏ خفيفة ‎"(light chain)‏ يتضمن سلسلة خفيفة كاملة الطول وأجزاء منها لها ترتيب منطقة متغيرة كاف لتوفير خصوصية ‎day)‏ تتضمن سلسلة خفيفة كاملة الطول مجال سيطرة منطقة متغيرة؛ ‎«VL‏ ومجال سيطرة منطقة ثابتة؛ ‎(CL‏ إن مجال السيطرة للمنطقة المتغيرة من السلسلة الخفيفة موجود عند النهاية ‎amino‏ من ‎polypeptide‏ تتضمن سلاسل .Jambda ‏وسلاسل‎ kappa ‏خفيفة طبقا للاختراع سلاسل‎ ٠ إن المصطلح "سلسلة ثقيلة ‎"(heavy chain)‏ يتضمن سلسلة ثقيلة كاملة الطول وأجزاء منها بها ترتيب منطقة متغيرة كاف لتوفير خصوصية ربط. تتضمن سلسلة ثقيلة كاملة الطول مجال سيطرة منطقة متغيرة؛ ‎«VH‏ و مجالات سيطرة منطقة ثابتة» ‎.CH3 5 CH2 «CHI‏ يكون مجال السيطرة ‎VH‏ عند النهاية ‎amino‏ من ‎cpolypeptide‏ وتكون مجالات السيطرة ‎CH‏ عند ‎ve‏ النهاية ‎carboxyl‏ ويكون 0113 أقرب إلى نهاية 00013. قد تكون السلاسل الثقيلة من أي نوع مماتل» متضمنا 180 (متضمنا الأنواع الفرعية ‎((IgG4 5 1803 1802 «IgGl‏ طبقا للاختراع ‎VH ‏يمكن أيضا إضافيا تقسيم مناطق‎ IgM «(IgA2 5 TgAT ‏(متضمنا الأنواع الفرعية‎ IgA ‎VL‏ فرعيا إلى مناطق فرط التغير؛ تسمى مناطق تحديد تكملة ‎(CDR)‏ متناثرة فيما بين المناطق المحمية؛ تسمى مناطق إطار ‎(FR)‏ تتكون ‎VL VH JS‏ من ‎CDRs ٠‏ 5 £ معتل ‎٠٠‏ موضوعة من الطرف ‎amino‏ إلى الطرف ‎carboxy‏ بالترتيب التالي: ‎«CDR1 «FRI‏ 2ط ‎FR4 «CDR3 FR3 «CDR2‏ تحتوي المناطق المتغيرة للسلاسل الثقيلة والخفيفة على مجال سيطرة للربط يتفاعل بينيا مع مولد مضاد. قد تتسبب المناطق الثابتة للأجسام المضادة في ربط ‎globulin‏ المناعي مع أنسجة العائل أو العوامل» متضمنة خلايا عديدة من جهاز المناعة ‏(مثلا خلايا مستجيبة) والمكون الأول ‎(Clg)‏ من نظام التكملة التقليدي. في السلاسل الخفيفة ‏© والثقيلة؛ تتصل المناطق المتغيرة والثابتة بالمنطقة "[" بحوالي ‎amino acid VY‏ أو أكثرء ‏وتتضمن السلسلة الثقيلة أيضا المنطقة "0" بحوالي ‎amino acids ٠١‏ أو أكثر. انظر؛ مثلا ‎Fundamental Immunology Ch. 7 (Paul, W., ed., 2nd ed. Raven Press, N,Y,(1989)).
YY
‏من جسم مضاد (أو‎ "(antigen-binding portion) ‏إن المصطلح "قسم يربط مولد مضاد‎ ‏يشير إلى واحد أو‎ cla ‏28005007)")؛ حسب الاستخدام‎ portion) ‏ببساطة 'قسم جسم مضاد‎
Nie) ‏مضاد‎ Age ‏أكثر من أجزاء جسم مضاد تحتفظ بالقدرة على الارتباط بصفة خاصة مع‎ ‏مضاد للجسم المضاد يمكن أن تتم بواسطة أجزاء من‎ alge ‏لقد اتضح أن وظيفة ربط‎ ) 1 ‏يربط مولد‎ aud! ‏جسم مضاد كامل الطول. تتضمن الأمثلة لأجزاء رابطة مشتملة في المصطلح‎ © ‏وهو جزء أحادي التكافؤ‎ «Fab ‏جزء‎ )١( ‏من جسم مضاد:‎ "(antigen-binding portion) ‏مضاد‎ ‏جزء 8072)؛ وهو جزء ثنائي‎ (Y) ¢CHI 5 CL »1711 (VL ‏يتكون من مجالات السيطرة‎
Fd ‏عند منطقة المفصلة؛ (3) جزءٍ‎ disulfide ‏متصلين بجسر‎ Fab shal ‏التكافؤ يشمل 7 من‎ ‏و1711‎ VL ‏يتكون من مجالات السيطرة‎ Fv eda (£) (CHI VH ‏يتكون من مجالات السيطرة‎ ‏الذي‎ (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546) dAb ‏لذراع واحد لجسم مضاد؛ )©( جزء‎ ٠ ‏إضافة لذلك؛‎ (CDR) ‏منطقة محددة للتكملة منفصلة‎ (1) 5 (VH ‏يتكون من مجال سيطرة‎ ‏تشفرهما جينات منفصلة؛ فمن‎ WH VL FV ‏على الرغم من أن مجالي السيطرةٍ للجزء‎ ‏واحدة‎ protein ‏الممكن اتصالهماء بطرق تخليقية؛ بوصلة مُخلقة تمكنهما من تكوين سلسلة‎ ‏سلسلة وحيدة‎ FV ‏و1711 لتكوين جزيئات أحادية التكافؤ (تسمى‎ VL ‏تزدوج فيها مناطق‎ ‏انظر مثلا:‎ ¢((scFv) ٠ (Bird et al., (1988) Science 242:423-426 and Huston et al., (1988) Proc. Natl. Acad.
Sci. USA 85:5879-5883). ‏يربط‎ pad ‏أن يشملها المصطلح‎ Wad ‏إن الأجسام المضادة وحيدة السلسلة تلك من المقصود‎ ‏من جسم مضاد. يمكن الحصول على أجزاء الجسم‎ "(antigen-binding portion) ‏مولد مضاد‎ ‏المضاد باستخدام أي تقنيات مناسبة؛ تتضمن تقنيات معروفة لهؤلاء المهرة في الفن؛ وقد‎ "٠ تفحص الأجزاء لاستخدامها بنفس الطريقة كأجسام مضادة سليمة. يعني "جسم مضاد معزل" ؛ كما هو مستخدم ‎(lin‏ جسم مضاد خالي جوهريا من الأجسام المضادة الأخرى التي لها مستويات مختلفة من الخصوصية المولدة للمضاد (مثلا الجسم المضاد المعزول الذي يربط بصفة خاصة 0106-1 يكون ‎LIA‏ جوهريا من الأجسام المضادة ‎Yo‏ التي تربط بصفة خاصة مولدات المضاد بخلاف 6-1ل01). مع هذاء قد يكون لجسم مضاد معزول يربط بصفة خاصة ‎DKk-1‏ نشاطا متقاطعا مع مولدات مضاد أخرى؛ ‎Jie‏ جزيئات
Y¢ sale ‏من أنواع أخرى. علاوة على هذاء قد يخلو جوهريا الجسم المضاد المعزول من‎ 7106-1 ‏خلوية أخرى و/أو مواد كيميائية.‎ sl) "(immunologically functional fragment) ‏وظيفي مناعيا‎ era ‏إن المصطلح‎ ‏مناعية؛ حسب الاستخدام هناء يشير إلى قسم من‎ globulin ‏لسلسلة‎ "(fragment) ‏ببساطة "جزء‎ ‏الموجودة في‎ amino acids ‏جسم مضاد سلسلة خفيفة أو سلسلة ثقيلة يفتقد على الأقل بعض‎ © ‏سلسلة كاملة الطول لكنه قادر على الارتباط بصفة خاصة مع مولد مضاد. إن تلك الأجزاء‎ ‏نشطة حيويا حيث أنها ترتبط بصفة خاصة مع مولد المضاد المستهدف ويمكن أن تتنافس مع‎ ‏محدد. في أحد الجوانب؛ سوف‎ epitope ‏السليمة؛ للارتباط الخاص مع‎ salad) ‏الأجسام‎ ‏واحدة على الأقل موجودة في سلسلة خفيفة أو ثقيلة كاملة‎ CDR ‏يحتفظ ذلك الجزء بمنطقة‎ ‏و/أو سلسلة خفيفة واحدة أو قسم من‎ ALE ‏الطول؛ وفي بعض التطبيقات سوف يشمل سلسلة‎ ٠ ‏مُخلق؛ أو قد تنتج بفصل إنزيمي‎ DNA ‏ذلك. يمكن إنتاج هذه الأجزاء النشطة حيويا بتقنيات‎ ‏أو كيميائي من أجل أجسام مضادة سليمة. تتضمن من الاختراع أجزاء وظيفية مناعيا‎ ‏أجسام مضادة مجال سيطرة‎ «Fv (F(ab), «Fab' «Fab ‏مناعية؛ بدون تحديد‎ globulin ‏وأجسام مضادة سلسلة واحدة؛ وقد تشتق من أي مصدر ثديي؛ متضمنا بدون تحديد؛ آدمي؛‎ ‏فأرء حيوان قارض»؛ جمل أو أرنب. من المتوقع إضافيا أن القسم الوظيفي من الأجسام‎ ١٠ ‏يمكن أن يرتبط تساهميا مع قسم ثاني‎ «CDRs ‏المضادة من الاختراع؛ مثلاء واحدة أو أكثر من‎ ‏أو مع جزيء صغير لتوليد عامل علاجي موجه لهدف خاص في الجسم؛ له خواص علاجية‎ ‏ثنائية الوظيفية؛ أو له عمر نصف طويل في المصل.‎ ‏من سلسلة خفيفة واحدة و6111 ومناطق متغيرة من‎ "(Fab fragment) Fab ‏'يتكون "جزء‎ ‏مع جزيء‎ disulfide ‏أن تشكل رابطة‎ Fab ‏سلسلة ثقيلة واحدة. لا يمكن للسلسلة الثقيلة لجزيء‎ Ye
AT ‏ثقيلة‎ alll ‏و0112‎ CHI ‏تحتوي منطقة "16" على ¥ من أجزاء سلسلة ثقيلة تشمل مجالات السيطرة‎ disulfide ‏من الجسم المضاد. يرتبط جزبِي السلسلة الثقيلة معا باثنتين أو أكثر من روابط‎ .CH3 ‏وبتفاعلات صادة للماء من مجالات سيطرة‎ ‏على سلسلة خفيفة واحدة وقسم من سلسلة ثقيلة واحدة‎ '(Fab' fragment) Fab' ‏يحتوي "جزء‎ Yo ‏المنطقة بين مجالي السيطرة‎ Lady CHI ‏ومجال السيطرة‎ VH ‏يحتوي على مجال السيطرة‎
Yo ‏من سلاسل ثقيلة‎ ١ ‏بين السلسلة بين‎ disulfide ‏بحيث يمكن أن تتكون رابطة‎ «CH2 5 1
F(ab)2 ‏لتكوين جزيء‎ Fab! ‏من الجزئيين‎ ‏على ؟ من سلاسل خفيفة و١ من سلاسل‎ "126002 fragment) F(ab')2 ‏يحتوي "'جزء‎ ‏و011.517.2؛ بحيث‎ CHI ‏ثقيلة تحتوي على قسم من المنطقة الثابتة بين مجالات السيطرة‎
Y ‏من‎ F(ab) era ‏بين السلسلة بين السلسلتين الثقيلتين. يتكون بذلك‎ disulfide ‏تتكون رابطة‎ © ‏بين السلسلتين الثقيلتين.‎ disulfide ‏متصلان معا برابطة‎ Fab! ‏من أجزاء‎ ‏المناطق المتغيرة من كل من السلاسل الثقيلة والخفيفة؛‎ "(Fv region) Fv ‏تشمل "المنطقة‎ ‏لكنها تفتقد إلى المناطق الثابتة.‎ ‏تتصل‎ Fv ‏هي جزيئات‎ "(single-chain antibodies) ‏إن 'أجسام مضادة وحيدة السلسلة‎ ‏وحيدة؛‎ polypeptide ‏فيها المناطق المتغيرة السلسلة الثقيلة والخفيفة بواصل مرن لتكوين سلسلة‎ ٠ ‏تشكل منطقة ربط مولد مضاد. إن الأجسام المضادة وحيدة السلسلة مشروحة بالتفصيل مثلا:‎
WO 88/01649 and U.S.Pat. Nos. 4,946,778 and 5,260,203. ‏مناعية وظيفي‎ globulin ‏هو جزء‎ "(domain antibody) ‏إن “جسم مضاد مجال سيطرة‎ ‏مناعيا يحتوي فقط على المنطقة المتغيرة لسلسلة ثقيلة أو المنطقة المتغيرة لسلسلة خفيفة. في‎ ‏لتوليد الجسم‎ peptide ‏مع واصل‎ VH ‏بعض الحالات؛ ترتبط تساهميا ؟ أو أكثر من مناطق‎ Ne ‏من الجسم المضاد مجال‎ VH ‏المضاد مجال سيطرة ثنائي التكافؤ. قد تستهدف المنطقتان‎ ‏سيطرةٍ ثنائي التكافؤ نفس مولدات المضاد أو مولدات مضاد مختلفة.‎ ‏من أماكن ربط مولد مضاد. في‎ Y "(bivalent antibody) ‏يشمل "جسم مضاد ثنائي التكافؤ‎ ‏بعض الحالات ؛ يكون لمكاني الربط نفس خصوصيات مولد المضاد. مع ذلك؛ قد تكون‎ ‏أدناه).‎ hail) ‏الأجسام المضادة ثنائية التكافؤ ثنائية الخصوصية‎ ٠ ‏هو ذلك الذي يستهدف‎ "(multispecific antibody) ‏إن "جسم مضاد متعدد الخصوصية‎ ‏واحد.‎ epitope ‏مضاد أو‎ Alga ‏أكثر من‎ "(dual-specific) ‏الخصوصية‎ zs) (bispecific) ‏الخصوصية‎ AE ‏إن الجسم المضاد‎ ‏هو جسم مضاد هجين به 7 من أماكن ربط مولد مضاد‎ (bifunctional) ‏الوظيفية‎ AE ‏أو‎ ‏مختلفة. إن الأجسام المضادة ثنائية الخصوصية هي أنواع من الجسم المضاد متعدد‎ © ‏الخصوصية وقد تنتج بتشكيلة من الطرق متضمنة؛ بدون تحديد؛ اندماج أورام هجينة أو‎ ‏مثلا:‎ «lai Fab! ‏توصيل أجزاء‎
‎Songsivilai & Lachmann, (1990), Clin.
Exp.
Immunol. 79:315-321; and Kostelny ef‏ ‎al., (1992), J.
Immunol. 148:1547-1553.‏ سوف يرتبط المكانان الرابطان في الأجسام المضادة ثنائية الخصوصية مع ¥ من ‎epitopes‏ ‏مختلفة؛ قد يقطنان على نفس أهداف ‎protein‏ أو أخرى مختلفة.
° حسب الاستخدام هناء يشير "جسم مضاد أحادي النسخ ‎"(monoclonal antibody)‏ إلى جسم مضاد ناتج من مجموعة أجسام مضادة متماثلة جوهريا؛ أي؛ أن الأجسام المضادة المنفردة المكونة للمجموعة متماثلة فيما عدا الطفرات الممكنة الطبيعية الحدوث التي قد تكون موجودة بكميات ثانوية. إن الأجسام المضادة أحادية النسخ خاصة للغاية؛ موجهة ضد مكان واحد مولد لمضاد. إضافة لذلك؛ على العكس من مستحضرات جسم مضاد عديد النسخ؛ التي
‎٠‏ تتضمن تموذجيا أجسام مضادة مختلفة موجهة ضد محددات ‎(epitopes)‏ مختلفة؛ فإن كل جسم مضاد أحادي النسخ موجه ضد محدد واحد على مولد المضاد. إن المعدل "أحادي النسخ (ل1100001008" يشير إلى سمة للجسم المضاد حسب الحصول عليه من مجموعة أجسام مضادة ‎pase Alia‏ ولا يجب تقيده بأنه يتطلب إنتاج جسم مضاد بأي طريقة خاصة. على سبيل المثال؛ تحضر الأجسام المضادة أحادية النسخ المستخدمة طبقا للاختراع الحالي بطريقة
‎٠‏ _ الورم الهجين الموصوفة ‎Yl‏ بواسطة
‎Kohler and Milstein, (1975), Nature 256:495,
‏أو يمكن تحضيرها بطرق ‎DNA‏ تخليقية حسب الوصف في براءة الاختراع الأمريكية
‎0811057١‏ . يمكن أيضا عزل الأجسام المضادة أحادية النسخ من مكتبات بلعم متولدة ‎(phage libraries generated)‏ باستخدام التقنيات الموصوفة في
‎McCafferty et al., (1990), Nature 348:552-554, Ye ‏على سبيل المثال.‎
‏إن المصطلح "مشتقات جسم مضاد آدمي ‎"(human antibody derivatives)‏ تشير إلى أي
‏شكل معدل من الجسم المضاد الآدمي؛ مثلا مادة متحدة من الجسم المضاد وعامل آخر أو الجسم المضاد.
‎Yo‏ يعني المصطلح ”الجسم المضاد المكتسب للسمة الآدمية ‎"(humanized antibody)‏ أجسام
‏مضادة يتم فيها ترقيع ترتيبات ‎CDR‏ المشتقة من خط جرثومة من أنواع كائنات تديية أخرى»
و مثل ‎«la‏ ويتم الترقيع على ترتيبات إطار آدمي. قد تجرى تعديلات منطقة إطار إضافية ضمن ترتيبات الإطار الأدمي.
حسب الاستخدام هناء يشير جسم مضاد "'مكتسب السمة الآدمية ‎"(humanized‏ إلى أشكال أجسام مضادة غير آدمية (مثلاء فأرية) عبارة عن ‎globulins‏ مناعية هجينة ‎«(chimeric)‏ ‏© سلاسل ‎globulin‏ مناعية؛ أو أجزاء من ذلك ‎F(ab'), Fab’ Fab Fv Jie)‏ أو ترتيبات ‎Ley‏ ‏أخرى من أجسام مضادة تربط مولد مضاد) تحتوي على ترتيب أدنى ‎Fide‏ من ‎globulin‏ ‏مناعي غير آدمي. بصورة مفضلة؛ تكون الأجسام المضادة مكتسبة السمة الآدمية عبارة عن ‎globulins‏ مناعية آدمية (جسم مضاد مستقبل) مستبدلة ‎Led‏ متخلفات من منطقة تحديد تكملة ‎(CDR)‏ للمستقبل بمتخلفات من ‎CDR‏ من أنواع غير آدمية (جسم مضاد معطي) ‎Jie‏ فأر ‎٠‏ حيوان قارض»ء أو أرنب لها الخصوصية؛ الانجذاب؛ والقدرة المطلوبة. في بعض الحالات؛ تستبدل متخلفات منطقة إطار ‎(FR) (framework region) Fv‏ في ‎globulin‏ مناعي آدمي بمتخلفات غير آدمية مقابلة. إضافة لذلك؛ قد يشمل الجسم المضاد مكتسب السمة الآدمية متخلفات غير موجودة في الجسم المضاد المستقبل ولا في ‎CDR‏ الواردة أو ترتيبات الإطار لكنها متضمنة من أجل تنقية إضافية ولجعل أداء الجسم المضاد في صورة مثلى. بصفة ‎dale Vo‏ سوف ‎Jody‏ الجسم المضاد مكتسب السمة الآدمية جوهريا كل واحد على الأقل؛ ونموذجيا؛ من مجالات سيطرة متغيرة. التي تكون فيها كل أو جوهريا ‎JS‏ مناطق ‎CDR‏ مطابقة لتلك من ‎globulin‏ مناعي غير آدمي وتكون كل أو جوهريا كل مناطق ‎FR‏ هي تلك من ترتيبات ‎globulin‏ مناعي آدمي المتفق عليه. إن الجسم المضاد مكتسب السمة الآدمية سوف يشمل أيضا بصورة مثالية قسما على الأقل من منطقة ثابتة ‎of‏ مجال سيطرة ‎globulin (Fc)‏ ‎Ye‏ مناعي؛ نموذجيا ذلك من ‎globulin‏ مناعي آدمي. تفضل الأجسام المضادة التي بها مناطق ‎Fe‏ معدلة حسب الوصف في 99/58572 ‎WO‏ هناك أشكال أخرى من أجسام مضادة مكتسبة السمة الآدمية بها واحدة أو أكثر من ‎«CDR 111 «CDR 13 «CDR 12 «CDR L1) CDRs‏
‎«CDR 2‏ أو ‎(CDR H3‏ معدلة بالنسبة للجسم المضاد الأصلي. إن المصطلح "الجسم المضاد الآدمي ‎“(human antibody)‏ أو الجسم المضاد الآدمي ‎LS‏ ‎(fully human antibody) ٠‏ كما هو مستخدم هناء يتضمن أجسام مضادة لها مناطق متغيرة تشتق ‎Led‏ مناطق ‎CDR‏ والإطار من ترتيبات ‎globulin‏ مناعي خط جرثومة آدمي. علاوة على هذاء عندما يحتوي الجسم المضاد على منطقة ثابتة؛ تشتق أيضا المنطقة الثابتة من
YA
‏مناعي خط جرثومة آدمي. قد تتضمن الأجسام المضادة الآدمية من هذا‎ globulin ‏ترتيبات‎ ‎globulin ‏غير مشفرة بترتيبات‎ amino acid ‏المضاد منها متخلفات‎ alge ‏الشرح أو أقسام ربط‎ ‏مناعي خط جرثومة آدمي (مثلا الطفرات التي يتم إدخالها بواسطة التوليد الطفري العشوائي أو‎ (Ja ‏الخاص بالموقع في المعمل أو بواسطة الطفرة الجسدية في الجسم الحي). على أية‎ ‏يتضمن المصطلح "الجسم المضاد الآدمي”؛ كما هو مستخدم؛ أجسام مضادة والتي فيها يتم‎ © ‏مثل الفأر؛ على‎ gyal ‏المشتقة من خط جرثومة أنواع كائنات ثديية‎ CDR ‏ترقيع ترتيبات‎ ‏ترتيبات الإطار الآدمية.‎ ‏أو‎ "(human monoclonal antibody) ‏إن المصطلح" جسم مضاد أحادي النسخ آدمي‎ ‏يشير إلى‎ "(fully human monoclonal antibody) ‏آدمي كليا‎ Fell ‏"جسم مضاد أحادي‎
CDR ‏أجسام مضادة تبين خصوصية ربط فردية والتي لها مناطق متغيرة تشتق فيها مناطق‎ ٠ ‏مناعي خط جرثومة آدمي. في أحد التجسيدات؛ تنتج الأجسام‎ globulin ‏والإطار من ترتيبات‎ ‏المضادة أحادية النسخ الآدمية بواسطة ورم هجين متضمن خلية 3 ناتجة من حيوان غير آدمي‎ ‏آدمي وجين عابر سلسلة‎ UE ‏فأر؛ به جينوم مشتمل على جين عابر سلسلة‎ Sie ‏طفري؛‎ ‏مع خلية حية.‎ B ‏خفيفة آدمي؛ حيث تلتحم الخلية‎ ‏كما‎ ¢'(recombinant human antibody) ‏إن المصطلح "الجسم المضاد الآدمي المخلق‎ Vo ‏هو مستخدم هناء يتضمن كل الأجسام المضادة الآدمية المحضرة؛ التي تم إظهارهاء صنعها أو‎ ‏بوسائل تخليقية؛ مثلا (أ) أجسام مضادة معزولة من حيوان (مثل؛ فأر) طفري أو‎ Lelie ‏مناعي آدمية أو ورم هجين محضر منها (موصوفة‎ globulin ‏كروموسومي عابر لجينات‎ ‏إضافيا أدناه)؛ (ب) أجسام مضادة معزولة من خلية عائل متحولة لإظهار الجسم المضاد‎ ‏(ج) أجسام مضادة معزولة من مكتبة جسم مضاد‎ ile ‏من ورم انتقال عدوى‎ Sle ‏الآدمي؛‎ YS ‏آدمي اتحادية مخلقة؛ و(د) أجسام مضادة محضرة؛ تم إظهارها؛ مصنعة أو معزولة بأية وسيلة‎ ‏آخرى. إن الأجسام‎ DNA ‏آدمية مع ترتيبات‎ globulin ‏ترتيبات جين‎ Jaa ‏أخرى تشمل‎ ‏والإطار من ترتيبات‎ CDR ‏المضادة الآدمية المخلقة هذه لها مناطق متغيرة تشتق فيها مناطق‎ glad) ‏يمكن‎ (Ja ‏مناعي خط جرثومة آدمية. في تجسيدات معينة؛ على أية‎ globulin ‏الأجسام المضادة الآدمية المخلقة هذه إلى التوليد الطفري المعملي (أو عند استخدام حيوان‎ Yo . ‏الآدمي؛ تخضع للتوليد الطفري الجسدي في الجسم الحي) ولهذا تكون‎ Ig ‏طفري لترتيبات‎ ‏وآ للأجسام المضادة المخلقة هي ترتيبات قد لا تتواجد‎ VH ‏لمناطق‎ amino acid ‏ترتيبات‎
Ya ‏طبيعيا ضمن مخزون خط جرثومة الجسم المضاد الآدمي في الجسم الحي؛ عندما تكون مشتقة‎ ‏خط جرثومة آدمية ومتعلقة بها.‎ VL ‏و‎ VH ‏من ترقيبات‎
IgM ‏كما هو مستخدم هناء يشير 'نوع مماثل" أو 'صنف” إلى صنف الجسم المضاد (مثلا‎ ‏أو 0ع1) مشفر بجينات منطقة ثابتة سلسلة ثقيلة. لا تتدخل مجالات السيطرة الثابتة للأجسام‎ ‏المضادة في الارتباط مع مولد مضاد؛ لكنها تظهر وظائف المستجيب المتعددة. بناء على‎ © ‏يمكن تعيين جسم مضاد آدمي محدد أو‎ (ALE ‏للمنطقة الثابتة سلسلة‎ amino acid ‏ترتيب‎ ‎IgD (IgA ‏المناعية:‎ globulins ‏مناعي لأجل واحد من خمسة أصناف رئيسية من‎ globulin globulins ‏إن البناءات والهيئات ثلاثية الأبعاد من الأصناف المختلفة من‎ [IgM <IgG «IgE (IgGl ‏المناعي الآدمية المتعددة؛ هناك فقط‎ globulin ‏المناعية معروفة جيدا. من أصناف‎ ‏الآدميين فقط هم المعروفون بتنشيطهم المكمل. إن 1801 و1803‎ IgM 5 18504 <IgG3 1802 ٠ ‏في الآدميين.‎ ADCC ‏الآدميين معروفان بتسببهم في‎ ‏إلى الوصف الخاص ضمن نوع‎ "(subclass) ‏يشير "صنف فرعي‎ (lia ‏كما هو مستخدم‎ ‏أو‎ 1803 »1802 IgGl ‏مثلاء الأصناف الفرعية‎ (AL ‏فرعي من جين منطقة ثابتة سلسلة‎
IgG ‏ضمن النوع المماتل‎ 4 ‏يتضمن المصطلح "مركب (600000080)" أو "مركب دوائي‎ (Lia ‏كما هو مستخدم‎ ‏أجسام مضادة؛ أقسام ربط مولد مضاد منهاء مواد متحدة‎ "(pharmaceutical compound) ‏مناعية؛ وجزيئات ثنائية الخصوصية.‎ ‏تستخدم العبارات "جسم مضاد يدرك مولد مضاد" و"“جسم مضاد يخص مولد مضاد" بنفس‎ ‏المعنى هنا ضمن مصطلح "جسم مضاد يرتبط بصفة خاصة مع مولد مضاد".‎ "ADCC" ‏يشير المصطلح "سمية خلوية التي تسببها خلية معتمدة على جسم مضاد" أو‎ Ys ‏خلايا‎ (NK ‏إلى تفاعل تسببه خلية تقوم فيه خلايا غير نوعية سامة للخلايا (مثلا خلايا‎ ‏متعادلة الصبغ؛ وخلايا بلعمة كبيرة؛ إلخ) بإدراك الجسم المضاد مرتبط على خلية مستهدفة‎
ADCC ‏وتسبب بعد ذلك التحلل للخلية المستهدفة. إن هذه الخلايا السامة التي تتسبب في‎ ‏تظهر‎ (NK ‏إن الخلايا الأولية المسببة ©80©06؛ (خلايا‎ (FcR) Fo ‏تظهر عموما مستقبلات‎ ‏اال إن‎ lf 5 FoyRIIT 2011811 ‏بينما تظهر الخلايا الأحادية تقار‎ adi 208117 ©
Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol ails ‏على الخلايا المكونة للدم‎ FeR ‏إظهار‎ ‏في‎ ADCC ‏يمكن إجراء اختبار‎ ald ‏لجزيء‎ ADCC ‏لتحديد نشاط‎ .9:457-92 (1991)
$a
OAYIYYY ‏المعمل؛ مثل ذلك الموصوف في براءة الاختراع الأمريكية رقم: 77 000 أو‎ (PBMC) ‏تتضمن الخلايا المستجيبة المفيدة لتلك الاختبارات خلايا أحادية النواة من دم طرفي‎ ‏لجزيء هام‎ ADCC ‏يمكن تحديد نشاط‎ (bila) ‏بطريقة بديلة؛ أو‎ (NK) ‏وخلايا قاتلة طبيعية‎
Clynes et al. Proc. Natl. Acad. ‏في نموذج حيوان مثل ذلك المعلن في‎ Da ‏في المعمل»‎ .Sci. (USA) 95:652-656 (1998) © تستخدم المصطلحات "مستقبل ‎"(Fe receptor) Fo‏ أو ‎"FcR"‏ لوصف مستقبل يرتبط مع المنطقة ‎Fo‏ من الجسم المضاد حيث تشتمل منطقة ‎Fo‏ على منطقة مفصلة ومجالات سيطرة ‎CH2‏ و0113 من السلسلة الثقيلة. على سبيل المثال» يمكن أن يكون ‎FeR‏ هو ‎FcR‏ آدمي ‎agi‏ أصلي. إن ‎FR‏ المفضل هو يربط جسم مضاد 180 (مستقبل جاما) ويتضمن ‎٠‏ مستقبلات الأصناف الفرعية 7181© ‎FoyRHI «FoyRII‏ و ‎FoyRIV‏ متضمنة الأشكال المتباينة ‎allelic‏ وبطريقة بديلة أشكال مجدولة من هذه المستقبلات. تتضمن مستقبلات 170111 المستقبل 20/8114 ("مستقبل منشط ‎('(activating receptor)‏ و ‎FoyRIIB‏ ("مستقبل مثبط ‎«('(inhibiting receptor)‏ لهما ترتيبات ‎amino acid‏ متشابهة تختلف أساسيا في مجالات السيطرة ‎cytoplasmic‏ بها. يحتوي المستقبل المتشط 120/8118 على حفاز تنشيط مستقبل ‎VO‏ مناعي معتمد على ‎(ITAM) tyrosine‏ في مجال سيطرته ‎cytoplasmic‏ يحتوي المستقبل المثبط 7078118 على حفاز تثبيط مستقبل مناعي معتمد على ‎(TIM) tyrosine‏ في مجال سيطرته ‎cytoplasmic‏ انظر: ‎Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)). FcRs are reviewed in Ravetch‏ ‎and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods‏ ‎and de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995). Ye‏ ;)1994( 4:25-34 يشمل المصطلح ‎"FoR"‏ هنا ‎FeRs‏ أخرى؛ متضمنة تلك التي سيتم تحديدها في المستقبل. يتضمن المصطلح أيضا مستقبل حديث الولادة؛ ‎(FeRn‏ المسئول عن انتقال 1502 من الأم إلى الجنين (Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) and Kim et al., Eur. J. Immunol. 24:2429 (1994)). Yo
١ ‏المناعي في منطقة المفصلة بين‎ globulin Feo ‏يكمن موقع ربط 708 الأساسي على أجزاء‎
WA ‏و0112. يتفاعل منطقة المفصلة تفاعلا بينيا مع 7011-3 على‎ CHI ‏مجالات السيطرةٍ‎ ‏ويطلق هذه الخلايا للاتجاه نحو الهدف‎ Bae ‏دم بيضاء‎ (Wines et ‏ملة‎ J. Immunol., 164:5313-5318 )2000(. ‏تشتمل منطقة المفصلة؛ بدون تحديد» الترتيبات الموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم‎ © 11 ‏إن المصطلح "قادر على حث السمية الخلوية لخلية معتمدة على جسم مضاد" يشير إلى‎ ‏كما يقيسه الاختبار (الاختبارات) المعروف‎ ADCC ‏قدرة عامل؛ مثلا جسم مضاد؛ على إظهار‎
FcRs ‏مع مناطق‎ Fo ‏لهؤلاء الماهرين في الفن. يتميز نموذجيا هذا النشاط بارتباط منطقة‎ ‏متعددة. بدون تحديد بواسطة أي آلية خاصة؛ حيث سوف يدرك الماهرون في الفن أن قدرة‎ ٠ ‏يمكن أن يرجع سببه إلى مثلا صنفه الفرعي (مثل 1801 أو‎ ADCC ‏جسم مضاد على إظهار‎ ‏أو قد يرجع سببه إلى التعديلات‎ Fe ‏بواسطة الطفرات التي يتم إدخالها إلى منطقة‎ »] 3 ‏من الجسم المضاد. توصف هذه التعديلات‎ Fe ‏في منطقة‎ carbohydrate ‏المجراة على أنماط‎
YY ea 476871 ‏مثلا في نشرة طلب براءة الاختراع الأمريكية رقم‎ ‏إلى جسم مضاد الذي‎ "(neutralizing antibody) ‏يشير المصطلح "جسم مضاد معادل‎ ‏يرتبط مع مركب ترابطي؛ يمنع ارتباط المركب الترابطي مع شريك الارتباط الخاص به ويعوق‎ ‏الاستجابة الحيوية التي تنتج بطريقة ما من ارتباط المركب الترابطي مع شريك ارتباطه. لتحديد‎ shall ‏ارتباط وخصوصية الجسم المضاد أو جزء وظيفي مناعيا منه؛ فإن الجسم المضاد أو‎ ‏يثبط جوهريا ارتباط المركب الترابطي مع شريك ارتباطه عندما تقلل الزيادة من الجسم المضاد‎
Age JY AY ‏كمية شريك الارتباط المرتبط بالمركب الترابطي بمقدار على الأقل حوالي‎ Ye ‏أو أكثر (حسب القياس في‎ 714 JAY Qo ‏.حال‎ AS LA Va ‏بال‎ don ‏سوف يقلل الجسم‎ Dkk-1 ‏اختبار ارتباط تنافسي في المعمل). في حالة الأجسام المضادة إلى‎ ‏بذلك يحدث زيادة قابلية القياس في‎ (LRP6 ‏أو‎ LRPS ‏على ربط‎ Dkk-1 ‏المضاد المعادل قدرة‎
Wnt ‏نشاط‎ ‏لأجسام المضادة تتنافس من‎ ١ ‏عند الاستخدام في سياق‎ "(compete) ‏إن المصطلح 'يتنافس‎ Yo ‏يعني منافسة بين أ لأجسام المضادة محددة باختبار يقوم فيه الجسم المضاد‎ epitope ‏أجل نفس‎ ‏أو جزءِ وظيفي مناعيا منه تحت شروط الاختبار بمنع أو تثبيط الارتباط الخاص من أجل‎
الجسم المضاد المرجعي مع ‎alge‏ مضاد مشترك ‎(dis)‏ 0100-1 أو جزء منه). يمكن استخدام أنواع ‎sae‏ من اختبارات ارتباط تنافسي؛ مثلا؛ اختبار مناعي إشعاعي ‎(RIA) (radioimmunoassay)‏ طور صلب مباشر أو غير مباشرء اختبار مناعي إنزيم ‎(EJA) (enzyme immunoassay)‏ طور صلب مباشر أو غير مباشرء اختبار منافسة ‎sandwich ©‏ انظر» مثلا: ‎(Stahli et al., (1983), Methods in Enzymology 9:242-253);‏ ‎biotin-avidin EIA‏ طور صلب مباشرء انظر» مثلا: ‎(Kirkland et al., (1986), J.
Immunol. 137:3614-3619);‏ اختبار طور صلب معلم مباشر؛ اختبار ‎sandwich‏ طور صلب ‎ales‏ مباشرء انظر ؛ مثلا: ‎(Harlow and Lane, (1988), Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Ve‏ ‎Press);‏ ‎RIA‏ طور صلب معلم مباشر مع علامة 1-125 انظر؛ مثلا: ‎(Morel et al., (1988), Molec.
Immunol. 25:7-15);‏ ‎biotin-avidin EIA‏ طور صلب مباشر؛ انظر» مثلا: ‎(Cheung, et al., (1990), Virology 176:546-552); Vo‏ ‎RIA‏ مباشر معلم: ‎(Moldenhauer et al., (1990), Scand.
J.
Immunol. 32:77-82).‏ نموذجياء يشمل ذلك الاختبار استخدام مولد مضاد نقي مرتبط مع سطح صلب أو خلايا تحمل أيا من هذين» ‎globulin‏ مناعي للاختبار غير ‎globulins alee‏ مناعي مرجعي معلم. يقاس ‎٠‏ التثبيط التنافسي بتحديد كمية العلامة المرتبطة مع السطح الصلب أو الخلايا في وجود ‎globulin‏ مناعي للاختبار. يتواجد ‎globulin sale‏ مناعي للاختبار بكمية زائدة. تتضمن الأجسام المضادة محددة باختبار منافسة (الأجسام المضادة منافسة) الأجسام المضادة ترتبط مع نفس ‎epitope‏ مثل الجسم المضاد المرجعي وا لأجسام المضادة ترتبط مع ‎epitope‏ مجاور قريب بدرجة كافية من ‎epitope‏ المرتبط مع الجسم المضاد المرجعي لحدوث إعاقة تجسيمية. ‎Yo‏ تتوافر في الأمثلة هنا تفاصيل إضافية تخص طرق لتحديد ارتباط تنافسي. عادة؛ عند وجود الجسم المضاد المنافس بكمية زائدة؛ فسوف يثبط الارتباط الخاص من أجل الجسم المضاد المرجعي مع مولد مضاد مشترك بمقدار على ‎IN‏ 660 ذال .من ‎Jeo‏ يخال ‎Ao‏
ل أو 7/0. في بعض الحالات؛ يتم تثبيط الارتباط بمقدار على الأقل ‎a JAS JA‏ 0 أو 797 أو أكثر. يشير المصطلح ‎od‏ مضاد ‎(antigen)‏ إلى جزيء أو قسم من جزيء قادر على ‎LUN‏ ‏بعامل ربط انتقائي؛ مثل الجسم المضاد؛ وإضافيا قادر على أن يستخدم في حيوان لإنتاج © أجسام مضادة قادرة على الارتباط مع ‎alge‏ المضاد ذلك. قد يوجد في مولد المضاد واحد أو أكثر من ‎epitopes‏ قادرة على التفاعل مع أجسام مضادة مختلفة. إن المصطلح "0م1:0م8" يتضمن أي تحديد قادر على الارتباط بصفة خاصة مع ‎globulin‏ مناعي أو مع مستقبل خلية 1. يكون ‎epitope‏ عبارة عن منطقة من مولد مضاد مرتبطة بجسم مضاد يستهدف تحديدا مولد المضاد ذلك؛ وعندما يكون ‎alge‏ المضاد ‎ble‏ عن ‎cprotein ٠‏ 438 يتضمن ‎amino acids‏ نوعية تتلامس مباشرة مع الجسم المضاد. غالبا أكثرء تستقر ‎epitopes‏ على 016105:م» لكن في بعض الحالات يمكن أن تكمن على أنواع أخرى من الجزيئات؛ ‎acids Jie‏ #نهام0. يمكن أن تتضمن مناطق تحديد ‎epitope‏ تجمعات سطحية نشطة كيميائيا من الجزيئات مثل ‎camino acids‏ سلاسل جانبية سكرء ‎phosphoryl ile seas‏ أو ‎esulfonyl‏ ويمكن أن تكون لها سمات بناثية خاصة ثلاثية الأبعاد؛ و/أو سمات شحنة ‎١‏ خاصة. بصفة عامة؛ تقوم الأجسام المضادة الخاصة بمولد مضاد خاص مستهدف بإدراك بصورة مفضلة ‎epitope‏ مع مولد المضاد المستهدف في خليط معقد من ‎proteins‏ و/أو الجزيئات الكبيرة. تعني عبارةٍ 'يرتبط بصفة خاصة ‎"(specifically binds)‏ كما هي مستخدمة هناء مركب مثلا ‎nucleic acid «protein‏ جسم مضاد؛ إلخ؛ والذي يدرك ويربط جزيء خاص؛ لكنه ‎٠‏ جوهريا لا يدرك أو يربط الجزيئات الأخرى في عينة. على سبيل ‎«JE‏ إن جسم مضاد أو مثبط ‎peptide‏ الذي يدرك ويربط مركب ترابطي متجانس التكوين (مثلا جسم مضاد مضاد ‎DKk-1‏ يرتبط مع مولد المضاد متجانس التكوين الخاص به؛ ‎(Dkk-1‏ في ‎die‏ لكنه جوهريا لا يدرك أو يربط الجزيئات الأخرى في العينة. لهذاء تحت شروط الاختبار المجهزة؛ يفضل أن يرتبط جزءٍ الربط الخاص (مثلا جسم مضاد أو جزءٍ منه (مثلا قسم ربط مولد المضاد منه)) ‎YO‏ مع جزيء مستهدف خاص؛ مثلا 0106-1 ولا يرتبط بكمية معينة مع المكونات الأخرى الموجودة في عينة الاختبار. قد تستخدم تشكيلة من هيئات الاختبار لانتقاء جسم مضاد يربط بصفة خاصة جزيء مرغوب. على سبيل المثال؛ إن الاختبار المناعي ‎ELISA‏ طور صلب؛
الترسيب المناعي؛ ‎(FACS «BlAcore‏ وتحليل تبقع ‎«Western‏ من بين ‎cape‏ هي اختبارات عديدة قد تستخدم لتحديد جسم مضاد يتفاعل بصفة خاصة مع 0106-1. نموذجيا؛ إن تفاعل خاص أو انتقائي هو على الأقل ضعفي إشارةٍ الخلفية أو ضوضاء الخلفية ونموذجيا أكثر يكون أكبر من ‎٠١‏ أضعاف الخلفية ويفضل أكثر أيضا أن الجسم المضاد المذكور 'يربط © بصفة خاصة' مولد مضاد عندما يكون ثابت تفكك الاتزان ‎١ = (Kp)‏ ميكروجزيثي جرامي؛ مثلا > ‎٠٠١‏ نانوجزيئي جرامي ‎Lady‏ على سبيل المثال < ‎٠١‏ نانوجزيئي جرامي. يعتقد أن جسم مضاد من الاختراع "يربط بصفة خاصة' ‎alge‏ المضاد المستهدف الخاص به ‎Laie‏ يكون ثابت التفكك ‎(Kd)‏ على نحو مفضل هو حوالي ‎٠٠١‏ بيكو جزيئي جرامي أو أقل؛ حوالي ‎٠١7١‏ * أو أقل؛ أو ‎٠١7١‏ * أو أقل. ‎Ve‏ إن المصطلح ‎(Kop!‏ كما هو مستخدم هناء يعني معدل الانشغال أو معدل الارتباط للتفاعل البيني الخاص بين الجسم المضاد ومولد المضاد؛ بينما مصطلح ‎Kop"‏ كما هو مستخدم هناء يعني معدل الانفصال أو معدل التفكك للتفاعل البيني الخاص بين الجسم المضاد ومولد المضاد. يشير المصطلح ‎"Kp"‏ كما هو مستخدم هناء إلى ثابت التفكك؛ الناتج من نسبة مك1 إلى ‎Kon‏ (أي »مكا/ ‎(Kon‏ ويعبر عنها بتركيز مقاسا بالجزيئي الجرامي (جزيثي جرامي). يمكن ‎٠‏ تحديد قيم ‎Kp‏ للأجسام المضادة باستخدام طرق مرسخة جيدا في الفن. إن إحدى طرق تحديد ‎Kp‏ للجسم المضاد هي استخدام رنين ‎plasmon‏ سطح؛ نموذجيا باستخدام نظام حساس حيوي ‎(Jia‏ نظام ‎.BIAcore®‏ ‏يشير المصطلح "انجذاب ‎“(high affinity) dle‏ للجسم المضاد 180 عموما إلى جسم مضاد له ‎Kp‏ قدره ‎Ae ” ٠١١‏ جرامي أو ‎TY exe (Jal‏ جزيئي جرامي أو أقل؛ أو ‎٠١# YL‏ ” جزيئي جرامي أو أقل لأجل مولد مضاد مستهدف. مع هذاء يمكن أن يتغير الارتباط "عالي الانجذاب" من أجل أنواع مماثلة أخرى للجسم المضاد. على سبيل المثال؛ يشير ارتباط "عالي الانجذاب" لأجل نوع ‎IgM Blas‏ إلى جسم مضاد له ‎Kp‏ قدره ‎٠١‏ ' جزيئي جرامي أو أقل» ‎٠١‏ ” جزيئي جرامي أو أقل أو ‎٠١‏ * جزيئي جرامي أو أقل. يشير المصطلح ‎(identity) JA‏ إلى علاقة بين ترتيبات ؟ أو أكثر من جزيئات ‎polypeptide Ye‏ أو ‎١"‏ أو أكثر من جزيئات ‎nucleic acid‏ حسب التحديد باصطفاف ومقارنة الترتيبيات. يعني 'تماتل 7 ‎"(percent identity)‏ النسبة المئوية للمتخلفات المتماثلة بين ‎amino‏ ‎acids‏ أو ‎nucleotides‏ في الجزيئات المقارنة وتحسب على أساس مقاس أصغر للجزيئات
م
المقارنة. لهذه الحسابات؛ يفضل تحديد الثغرات في الاصطفافات (إذا ‎(Dang‏ بنموذج حسابي خاص أو برنامج حاسوب (أي: "نظام حسابي ((0:80عة)"). تتضمن طرق يمكن استخدامها
لحساب تمائل ‎nucleic acids‏ أو 5ل المصطفة تلك الموصوفة في: ‎Computational Molecular Biology, (Lesk, A.
M., ed.), (1988), New York: Oxford‏ ‎University Press; Biocomputing Informatics and Genome Projects, (Smith, D.
W., °‏ ‎ed.), (1993), New York: Academic Press; Computer Analysis of Sequence Data,‏ ‎Part 1, (Griffin, A.
M., and Griffin, H.
G., eds.), (1994), New Jersey: Humana Press;‏ ‎von Heinje, G., (1987), Sequence Analysis in Molecular Biology, New York:‏ ‎Academic Press; Sequence Analysis Primer, (Gribskov, M. and Devereux, J., eds.),‏
(1991), New York: M.
Stockton Press; and Carillo er al., (1988), SIAM J.
Applied ٠١
‎Math. 48:1073.‏ في حساب التماثل ‎of‏ تصطف الترتيبات المراد مقارنتها بطريقة تعطي أكبر تطابق بين الترتيبات . إن مثالا لبرنامج حاسوب يمكن استخدامه لتحديد التماثل 7 هو مجموعة برنامج ‎All «GCG‏ تتضمن ‎GAP‏ ‎(Devereux et al., (1984), Nucl.
Acid Res. 12:387; Genetics Computer Group, Yo‏ ‎University of Wisconsin, Madison, Wisc).‏ يستخدم النظام الحسابي للحاسوب ‎GAP‏ لاصطفاف ¥ من ‎polypeptides‏ أو ‎polynucleotides‏ مراد تحديد ‎(Bla‏ الترتيب 7 لهما. تصطف الترتيبات من أجل النطاق الأمتل لأجل ‎amino acid‏ أو ‎nucleotide‏ الخاص بهما ("المسافة المتطابقة ‎(matched‏
‎٠‏ (0دمع؟"؛ حسب تحديد النظام الحسابي). يستخدم جزاء فتح ثغرة (المحسوب متل ¥ مرات المتوسط القطري؛ حيث إن "المتوسط القطري ‎"(average diagonal)‏ هو المتوسط القطري لمصفوفة المقارنة المستخدمة؛ إن "القطري (0:880021)" هو درجة أو عدد ينسب إلى كل تطابق ‎amino acid‏ متقن بواسطة المادة البينية المقارنة الخاصة) وجزاء امتداد ثغرة (وهو ‎sale‏ ‎ya ٠٠١‏ من جزاء فتح ثغرة)؛ بالإضافة إلى المادة البينية المقارنة ‎PAM 250 Jie‏ أو
‎Yo‏ 62 51.0504 في اتحاد مع النظام الحسابي. في تجسيدات خاصة؛ يستخدم النظام الحسابي أيضا مادة بينية مقارنة قياسية؛ انظر:
‎Dayhoff et al., (1978), Atlas of Protein Sequence and Structure 5:345-352 for the‏ ‎PAM 250 comparison matrix; Henikoff ef al., (1992), Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
U.S.A.‏ ‎for the BLOSUM 62 comparison matrix.‏ 89:10915-10919 إن أمثلة للمعايير الممكن استعمالها في تحديد التماثل 7 لأجل ‎polypeptides‏ أو ترثيبات ‎nucleotide ©‏ باستخدام برنامج ‎GAP‏ هي التالية: النظام الحسابي: 48:443-453 ‎Needleman et al., (1970), J.
Mol.
Biol.‏ المادة البينية المقارنة: ‎BLOSUM 62 from Henikoff ef al., (1992), supra‏ جزاء الثغرة: ‎١١‏ (لكن بدون جزاء للثغرات الطرفية) جزاء طول الثغرة: 6 ‎Ve‏ القيمة الحرجة للتشابه: صفر هناك برامج اصطفاف خاصة لاصطفاف ¥ من ترتيبات ‎amino acid‏ قد تؤدي إلى تطابق منطقة قصيرة فقط من الترتيبين؛ وقد يكون لهذه المنطقة الصغيرة المصطفة تماثل ترتيب كبير جدا حتى ولو لم تكن هناك علاقة ملحوظة بين الترتيبين كاملي- الطول. طبقا لذلك؛ يمكن ضبط طريقة الاصطفاف ‎slain‏ (برنامج ‎(GAP‏ إذا كان ذلك مطلوبا لينتج اصطفاف يشمل ‎٠‏ على الأقل مسافة تغطي +0 ‎amino acids‏ على الأقل من ‎polypeptide‏ المستهدف. حسب الاستخدام هناء يعني "نقي جوهريا" أن نوع الجزيء الموصوف هو النوع السائد الموجود؛ بمعنى أنه؛ على أساس جزيئي جرامي يكون أكثر وفرة من أي نوع ‎Hite‏ آخر في نفس الخليط. في تجسيدات خاصة؛ يكون الجزيء النقي جوهريا هو تركيبة يشمل فيها النوع المستهدف على الأقل ‎75٠‏ (على أساس جزيئي جرامي) من كل النوع الجزيثي الكبير ‎٠‏ الموجود. في تجسيدات ‎pal‏ تشمل تركيبة نقية جوهريا على الأقل ‎Ao JA‏ يكال 0 أو 794 من كل الأنواع الجزيئية الكبيرة الموجودة في التركيبة. في تجسيدات أخرىء ينقى النوع المستهدف حتى التجانس الأساسي بحيث لا يمكن تحديد أنواع ملوثة في التركيبة بطرق التحديد التقليدية وبذلك تتكون التركيبة من نوع جزيئي كبير واحد يمكن تحديده. يتضمن ‎"amino acid"‏ معناه الطبيعي في الفن. إن العشرين ‎amino acid‏ طبيعية الوجود © واختصاراتها تتبع الاستخدام التقليدي. انظر: ‎Immunology--A Synthesis 2nd Edition, (E. 5. Golub and D.
R.
Gren, Eds.), Sinauer‏ ‎Associates: Sunderland, Mass. (1991),‏
المنتدمجة هنا بالإشارة لأي مرجع. إن ‎stereoisomers‏ (مثلاء ‎(D-amino acids‏ للعشرين ‎amino acids‏ التقليدية ‎amino acids‏ غير الطبيعية ‎«a-,a-disubstituted amino acids Jie‏ ‎amino acids «N-alkyl amino acids‏ أخرى غير تقليدية يمكن أيضا أن تشكل مكونات مناسبة لأجل ‎polypeptides‏ الاختراع الحالي. تتضمن أمثلة ‎amino acids‏ غير تقليدية: -4 ‎hydroxyproline ©‏ عالمسمان[ع بودداتدن-مممصوع» ‎cepsilon-N,N,N-trimethyllysine‏ ‎3-«N-formylmethionine«N-acetylserine «O-phosphoserine «epsilon-N-acetyllysine‏ ‎imino samino acids s¢sigma-N-methylarginine «5-hydroxylysine «methylhistidine‏ ‎acids‏ أخرى مشابهة (مثلاء ‎.(4-hydroxyproline‏ في ذكر ‎polypeptide‏ المستخدم ‎«Lia‏ يكون اتجاه اليد اليسرى هو الاتجاه الطرفي ‎amino‏ واتجاه اليد اليمنى هو الاتجاه الطرفي ‎ccarboxy‏ ‎٠‏ طبقا للاستخدام والعرف القياسيين. يشير مصطلح 'قلة العظم ‎"(osteopenia)‏ إلى مريض مصاب بفقدان عظمي بانحراف معياري واحد على الأقل مقارنة بمريض سليم له كثافة معدنية عظمية ‎(BMD)‏ طبيعية. على سبيل المثال؛ يمكن تحديد القياس بواسطة قياس امتصاص أشعة ‎X‏ مزدوج الطاقة ‎(DEXA)‏ ‏ويقارن ‎BMD‏ للمريض مع سنه والمعيار الذي يتطابق مع نوعه (نتيجة ‎(z‏ لتحديد قلة العظم ‎٠‏ .قد تؤخذ قياسات ‎BMD‏ لواحدة أو أكثر من العظام. يشير المصطلح "كمية مؤثرةٍ ‎"(therapeutically effective amount) Ladle‏ إلى كمية من جسم مضاد مضاد 171061 لإحداث استجابة علاجية في كائن ثديي. يقوم الماهرون في الفن بالتأكد بسهولة من الكميات المؤثرة ‎Ladle‏ المذكورة. يشير "“شكل سكري" إلى بناء ‎oligosaccharide‏ معقد يشمل روابط من وحدات ‎carbohydrate ٠‏ عديدة. توصف هذه البناءات في مثلا: ‎Essentials of Glycobiology Varki et al., eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press,‏ ‎Cold Spring Harbor, NY (1999),‏ والتي توفر أيضا مرجعا للتسمية المعيارية لبيولوجيا السكريات. تتضمن هذه الأشكال السكرية؛ بدون ‎«G2 eal‏ 61؛ ‎¢G-1 «GO‏ و6-2 (انظرء مثلاء 99/22764 ‎(WO‏ ‎Yo‏ يحدد 'نمط ‎"Glycosylation‏ كنمط لوحدات ‎carbohydrate‏ المرتبطة تساهميا مع ‎protein‏ (مثل الشكل السكري) وكذلك مع الموقع (المواقع) المرتبط معها الشكل (الأشكال) السكري تساهميا مع هيكل ‎peptide‏ في 0160+م» تحديدا أكثر مع ‎globulin protein‏ مناعي.
ب من المحتمل أن الأجسام المضادة الظاهرة بخطوط خلية مختلفة أو في حيوانات طفرية لها أشكال سكرية مختلفة و/أو أنماط ‎glycosylation‏ مختلفة مقارنة بكل واحد. على أية حال؛ إن كل الأجسام المضادة التي تشفرها جزيئات ‎nucleic acid‏ المتوافرة ‎(Lia‏ أو المشتملة على ترقيبات ‎amino acid‏ المتوافرة هنا تشكل جزءا من الشرح الحالي؛ بغض النظر عن ‎Glycosylation ©‏ لهذه | لأجسام المضادة. كما هو مستخدم هناء يتضمن مصطلح "لكائن" أي آدمي أو حيوان غير آدمي. يتضمن المصطلح "حيوان غير آدمي" كل الفقاريات؛ مثل الثدييات وغير الثدييات» مثلا حيوانات رئيسية غير آدمية؛ خراف؛ كلاب؛ قطط؛ خيولء ‎JE‏ دواجن؛ برمائيات»؛ زواحف؛ إلخ. كما هو مستخدم هناء 'لمعالجة' تعني تقليل تكرار أعراض المرض التي تظهر على ‎٠‏ مريض. يتضمن المصطلح إعطاء مركبات أو عوامل الشرح الحالي لمنع أو تأخير بداية الأعراض؛ المضاعفات؛ أو العلامات البيولوجية ‎(pap‏ تخفيف الأعراض أو إيقاف أو تثبيط التطور الإضافي للمرض» الحالة؛ أو الاضطراب. قد تكون المعالجة وقائية (لمنع أو تأخير بداية المرض» أو لمنع ظهور الأعراض الإكلينيكية أو دون الإكلينيكية له) أو كبح أو تخفيف علاجي للأعراض بعد ظهور المرض. ‎vo‏ توصف جوانب ‎dale‏ عديدة للشرح بتفصيل أكثر في الأجزاء الفرعية الآتية. نظرة ‎Lele‏ ‏يوفر الاختراع الحالي تركيبات جديدة مشتملة على أجسام مضادة ومواقع ربط مولد المضاد من ‎globulins‏ المناعية التي تخص ‎Dkk-1‏ يمكن أن تتفاعل تقاطعيا هذه الأجسام المضاد وأجزاء الجسم المضاد مع ‎Dkk-1‏ من عدة مصادر ‎GUIS)‏ ثديية؛ متضمنة 1106-1 جرذي؛ ‎٠‏ فأري وآدمي. يكون لبعض من الأجسام المضادة والأجزاء انجذابا أعلى تجاه 1106-1 من نوع واحد لآخر. يوفر الاختراع أيضا أجسام مضادة معادلة جديدة؛ متضمنة أجسام مضادة هجينة؛ مكتسبة السمة الآدمية وآدمية؛ وكذلك أجسام مضادة وأجزاء وظيفية مناعيا منها. تتضح ‎Lad‏ ‎nucleic acids‏ تشفر | لأجسام المضادة والأجزاء ؛ وكذلك تتضح طرق لإظهار ‎١‏ لأجسام المضادة باستخدام هذه ‎nucleic acids‏ في جانب آخرء يتعلق الاختراع بجزيئات (مثلا أجزاء وظيفية ‎Yo‏ مناعيا ‎(polypeptides y‏ قادرة على إظهار خواص ربط مناعي لمواقع ربط مولد مضاد للجسم المضاد.
£9 هناك عدة استخدامات للأجسام المضادة والأجزاء الوظيفية مناعيا المبينة هنا. يستفاد من بعض الأجسام المضادة والأجزاء؛ ‎ie‏ في اختبارات الربط الخاص؛ تنقية انجذاب 0106-1 أو مركباته الترابطية وفي اختبارات فحص لتحديد المضادات الأخرى لنشاط 0106-1. يمكن استخدام أجسام مضادة معينة لمعالجة أمراض متعددة مصاحبة لنشاط ‎Dhk-1‏ يمكن لهذا © استخدام بعض الأجسام المضادة والأجزاء في تشكيلة من علاجات متعلقة بالعظام ‎Jie‏ زيادة ‎(BMD‏ تكوين عظام جديدة؛ معالجة فقدان عظام جهازي (مثلا التآكل العظمي)؛ تصليح العظام» وعلاجات أشكال عديدة من التهاب المفاصل. على أية ‎dla‏ يمكن استخدام الأجسام المضادة والأجزاء المعينة الموضحة لمعالجة تشكيلة من الأمراض المتنوعة غير المتعلقة بأمراض العظام. ‎٠‏ الأجسام المضادة والأجزاء تتوافر تشكيلة من عوامل ربط انتقائي مفيدة في تنظيم نشاط ‎.DRk-1‏ تتضمن هذه العوامل؛ ‎ie‏ أجسام مضادة وأجزاء وظيفية مناعيا منها محتوية على مجال سيطرة ربط ‎alge‏ مضاد (مثل أجسام مضادة سلسلة فردية؛ أجسام مضادة لمجال سيطرة؛ التصاقات مناعية؛ ‎polypeptide 5‏ مع منطقة ربط مولد مضاد) ومرتبطة بصفة خاصة مع ‎DKkk-1 polypeptide‏ ‎٠‏ (مثلا ‎Dkk-1 polypeptide‏ آدمي» جرذي و/أو فأري). ينتفع من بعض العوامل مثلا في تثبيط ربط ‎Dkk-1‏ مع ‎LRPS‏ و/أو ‎(LRP6‏ وبذلك يمكن استخدامها لحث واحد أو أكثر من الأنشطة المصاحبة لإرسال إشارة ‎Wat‏ ‏بناء جسم مضاد طبيعي الوجود لبعض عوامل الربط المتوافرة بناء مصاحبا نموذجيا للأجسام المضادة طبيعية الوجود. ‎٠٠‏ تشتمل الوحدات البنائية لهذه ‎١‏ لأجسام المضادة نموذجيا على واحد أو أكثر من ‎JS tetramers‏ واحد منهم متكون من مزدوجين متماتلين من سلاسل ‎epolypeptide‏ برغم أن بعض أنوا 2 الكائئنات الثديية تنتج أيضا أجسام مضادة لها سلسلة ‎ALE‏ واحدة فقط. في جسم مضاد نموذجي؛ يتضمن زوج أو مزدوج سلسلة "خفيفة" كاملة الطول (في تجسيدات معينة؛ حوالي ‎Yo‏ ‏كيلودالتون) وسلسلة "ثقيلة' كاملة الطول (في بعض التجسيدات؛ حوالي ‎7١-٠‏ كيلودالتون). ‎Yo‏ تتكون كل سلسلة ‎globulin‏ مناعي فردية من عدة "مجالات سيطرةٍ ‎globulin‏ مناعي"؛ تتكون كل واحدة من تقريبا ‎١0‏ إلى ‎amino acid ٠١١‏ وتظهر نمط انثناء مميز. إن مجالات السيطرة هذه هي وحدات قاعدية والتي يتكون منها ‎polypeptides‏ الجسم المضاد. إن القسم الطرفي
0 من كل سلسلة يتضمن نموذجيا مجال سيطرة متغير مسئول لإدراك ‎alse‏ المضاد. إن القسم الطرفي ‎carboxy‏ هو قسم محمي تطوريا أكبر من الطرف الآخر من السلسلة ويشار إليه ب "منطقة ‎"au‏ أو ‎Adland’‏ ©". تصنف عموما السلاسل الخفيفة الآدمية بسلاسل خفيفة ‎kappa‏ ‎lambda‏ وتحتوي كل واحدة منها على مجال سيطرة متغير ومجال سيطرة ثابت. تصنف 6 نموذجيا السلاسل الثقيلة كسلاسل ‎alpha (gamma «delta amu‏ أو ‎epsilon‏ وثقوم هذه السلاسل بتحديد النوع المماثل للجسم المضاد بأنه ‎gM‏ طع1» ‎(IgE 5 IgA «IgG‏ على الترتيب. لدى ‎IgG‏ عدة أنواع ‎ejb‏ متضمنة؛ بدون تحديد» 1801» 1802 1803 5 ‎1gG4‏ ‏إن الأنواع الفرعية من ‎IgM‏ تتضمن ‎IgM‏ و18142. تتضمن الأنواع الفرعية من ‎TEA‏ كل من 1ع و82ع]. في الآدميين» تحتوي الأنواع المماقلة ‎IgD 5 IgA‏ على ؛ سلاسل ثقيلة و؛ ‎٠‏ سلاسل خفيفة؛ وتحتوي الأنواع المماثئلة 180 و1825 على ؟ من السلاسل الثقيلة و7 من السلاسل الخفيفة؛ كما يحتوي النوع المماثل 1804 على © سلاسل ثقيلة وه سلاسل خفيفة. تشتمل منطقة © السلسلة الثقيلة نموذجيا على واحد أو أكثر من مجالات السيطرة التي قد تكون مسئولة لوظيفة مستجيب. يعتمد عدد مجالات السيطرة لمنطقة ثابتة سلسلة ثقيلة على النوع المماثل. تحتوي السلاسل الثقيلة 186 مثلا على ¥ مجالات سيطرة لمنطقة © معروفة بأنها ‎CH2 «CH1 ٠‏ و0113. يمكن أن يكون للأجسام المضادة المتوافرة أي واحد من هذه الأنواع المماثلة والأنواع ‎ae dll‏ في السلاسل الخفيفة والثقيلة كاملة الطول؛ تتصل المناطق المتغيرة والثابتة بمنطقة "1" من حوالي ‎١‏ أو أكثر ‎camino acid‏ مع السلسلة الثقيلة التي تتضمن ‎Wal‏ منطقة "0" من حوالي أكثر من ‎acids ٠١‏ ممتصتة. انظر: ‎Fundamental Immunology 2nd ed: Ch. 7 (Paul, W., ed.), new york: Raven Press, Ye‏ المندمج هنا كمرجع. تشكل المناطق المتغيرة من كل زوج سلسلة ‎AL‏ - خفيفة نموذجياء مكان ارتباط مولد مضاد. تظهر المناطق المتغيرة للسلاسل ‎globulin‏ مناعي نفس البناء العام لمناطق الإطار المحمية نسبيًا ‎(FR)‏ المتصلة بثلاث مناطق مفرطة التغيرء تسمى ‎Wad‏ 'مناطق محددة ‎Yo‏ للتكملة" أو ‎-CDRs‏ إن ‎CDRs‏ من سلسلتين من زوج لسلسلة ثقيلة/ سلسلة خفيفة مذكور ‎Sel‏ ‏تصطف بواسطة مناطق إطار لتشكيل بناء يرتبط بصفة ‎ald‏ مع ‎epitope‏ خاص على ‎protein‏ المستهدف (مثلا 0106-1). من الطرف 17 إلى الطرف ©؛ تتطابق ‎JS‏ من المناطق
١ه‏ المتغيرة للسلسلة الثقيلة والخفيفة طبيعية الوجود مع الترتيب التالي لهذه العناصر: ‎(FRI‏ ‎.FR4 5 CDR3 <FR3 «CDR2 <FR2 «CDRI‏ لقد تم استتباط نظام ترقيم لتخصيص أرقام إلى ‎acids‏ مصتضه التي تشغل أماكن في كل واحد من مجالات السيطرة هذه. يحدد نظام الترقيم هذا في: ‎Kabat Sequences of Proteins of Immunological Interest ))1987 and 1991 ) National e‏ ‎Institutes of Health, Bethesda, Md.) or Chothia & Lesk (1987) J.
Mol.
Biol.‏ ‎Chothia et al. (1989) Nature 342:878-883‏ ;196:901-917 يمكن أن تتحد كل واحدة من السلاسل الخفيفة التي يوفرها الاختراع الحالي مع أي واحدة من السلاسل الثقيلة التي يوفرها الشرح الحالي لتشكيل جسم مضاد. في بعض التجسيدات ‎٠‏ تحتوي الأجسام المضادة على سلسلتين خفيفتين متماتلتين وسلسلتين ثقيلتين متماثلتين. إن الأجسام المضادة الأخرى المتوافرة عبارة عن أشكال متباينة من أجسام مضادة متشكلة باتحاد من السلاسل الثقيلة والخفيفة المتوافر وتشتمل الأجسام المضادة على سلاسل خفيفة و/أو ثقيلة يكون لكل واحدة منها تماثل على الأقل ‎Vy‏ ذال يمال ‎dhe‏ قال ‎SAY Jao‏ 4 مع ترتيبات ‎amino acid‏ من هذه السلاسل. في بعض الحالات؛ تتضمن هذه الأجسام ‎٠‏ المضادة سلسلة ثقيلة واحدة على الأقل وسلسلة خفيفة واحدة على الأقل؛ ‎La‏ في حالات أخرى تحتوي هذه الأشكال المتباينة على سلسلتين خفيفتين ‎GAL‏ وسلسلتين تقيلتين متماثلتين. ‎CDRs‏ للأجسام المضادة قد تعرف مناطق التحديد للتكملة ‎(CDRs)‏ ومناطق الإطار ‎(FR)‏ من الجسم المضاد ‎Ye‏ المعطى باستخدام النظام الموصوف بواسطة ‎kabat‏ وآخرين في: ‎Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed., US Dept. of Health and‏ ‎Human Services, PHS, NIH, NIH Publication no. 91-3242 (1991).‏ تشتمل الأجسام المضادة المعينة المبينة هنا على واحد أو اكثر من ترتيبات ‎amino acid‏ المتمائلة أو التي تكون متماثلة الترتيب جوهريا مع ترتيبات ‎amino acid‏ لواحدة أو أكثر من ‎Yo‏ 001 كما هي متوفرة. تتضمن الأجسام المضادة والأجزاء المتوافرة ‎oF 7 ١‏ 4 0 أو 1 ‎CDRs‏ جميعها. يكون لبعض الأجسام المضادة أشكال متباينة من ‎CDRs‏ المذكورة في جدول ‎of‏ حيث يكون لواحدة oY ‏تماثل ترتيب بنسبة على الأقل 2/850 د‎ CDRs ‏أو 1) من‎ © cf oF oY ‏أو أكثر (أي»‎ ‏خاص متوافر.‎ CDR ‏أو 790 مع ترتيب‎ 6 ‏منافسة الأجسام المضادة والأجزاء‎ ‏تتوافر أيضا الأجسام المضادة والأجزاء الوظيفية مناعيا منها التي تتنافس مع واحد من‎ ‏قد ترتبط أيضا‎ .Dkk-1 ‏الأجسام المضادة أو الأجزاء الوظيفية التمثيلية للارتباط الخاص مع‎ 0 ‏كواحد من الأجسام المضادة التمثيلية.‎ epitope ‏هذه الأجسام المضادة والأجزاء مع نفس‎ ‏لأنه من المتوقع أن يبين الجسم‎ epitope ‏تتنافس الأجسام المضادة والأجزاء أو ترتبط مع نفس‎ ‏المضاد أو الجزءٍ التمثيلي خواص وظيفية مشابهة.‎ ‏أجسام مضادة أحادية النسخ:‎
Dhk-1 ‏تتضمن الأجسام المضادة المتوافرة أجسام مضادة أحادية النسخ التي ترتبط مع‎ ٠١ ‏بواسطة خلايا‎ Sle ‏يمكن إنتاج أجسام مضادة أحادية النسخ بأي تقنية معروفة في الفن؛‎ ‏طحال خالدة البقاء مجموعة من الحيوان الطفري بعد اكتمال برنامج التحصين. يمكن أن تصبح‎ ‏خلايا الطحال خالدة البقاء بأي تقنية معروفة في الفن؛ مثلا؛ باندماجها مع خلايا ورم نخاعي‎ ‏لإنتاج أورام هجينة. يفضل أن تكون خلايا الورم التخاعي للاستخدام في إجراءات اندماج منتج‎ ‎٠‏ _ لورم هجين غير منتجة لأجل أجسام مضادة؛ لها كفاءة اندماج ‎Alle‏ ونقص إنزيم يجعلها غير قادرة على النمو في أوساط انتقائية ‎Lima‏ تدعم النمو فقط للخلايا المندمجة المطلوبة ‎esl)‏ ‏هجينة). تتضمن أمثلة خطوط خلية مناسبة للاستخدام في اندماجات فأرية ‎P3- ¢Sp-20‏ ‎<NS1/1.Ag 4 1 «P3-X63-Ag8.653 8‏ 4اعذ210وي ‎<NSO/U FO‏ 100-11 ‎€S194/5XX0 Bul s MPC11-X45-GTG 1.7‏ تتضمن أمتلة خطوط خلية مستخدمة في ‎Yo‏ اندماجات حيوان قارض 82108073 1.2.3 ‎¢Y3-Ag‏ 189837 و48210. إن خطوط خلية أخرى مفيدة لاندماجات خلية هي 17266 ‎LICR-LON-HMy2 «GM1500-GRG2‏ و0100729-6. ‏في بعض الحالات؛ ينتج خط خلية ورم هجين بتحصين حيوان ‎Sa)‏ حيوان طفري به ‏ترتيبات ‎globulin‏ مناعية آدمي) مع مولد مناعة 0106-1؛ جمع خلايا الطحال من الحيوان ‎Yo‏ المحصن؛ اندماج ‎LDA‏ الطحال المجمعة مع خط خلية ورم نخاعي؛ وبذلك تتولد خلايا ورم هجين؛ ترسيخ خطوط خلية ورم هجين من خلايا الورم الهجين؛ وتحديد خط خلية ورم هجين oy ‏إن خطوط خلية الورم الهجين تلك؛ وأجسام‎ .Dkk-1 polypeptide ‏ينتج جسم مضاد يرتبط مع‎ ‏مضادة أحادية النسخ المضادة 0106-1 الناتجة بواسطتها» من جوانب الاختراع الحالي.‎ ‏يمكن تنقية الأجسام المضادة أحادية النسخ مفرزة بخط خلية ورم هجين بأي تقنية معروفة‎ ‏التي لها خواص خاصة؛‎ Mabs ‏لتحديد‎ Mabs ‏فحص أورام هجينة أو‎ Lilia) ‏في الفن. يمكن‎ ‏تتوافر في الأمثلة أدناه أمثلة لذلك الفحص.‎ Wit ‏مثل القدرة على إخماد نشاط يحثه‎ © ‏أجسام مضادة هجينة ومكتسبة للسمة الآدمية‎ ‏تتوافر أيضا أجسام مضادة هجينة ومكتسبة السمة الآدمية معتمدة على الترتيبات السابقة.‎ ‏يمكن تعديل أجسام مضادة أحادية النسخ للاستخدام كعوامل علاجية بطرق عديدة قبل‎ protein ‏الاستخدام. إن مثالا هو جسم مضاد "هجين"» عبارة عن جسم مضاد يتكون من قطع‎ ‏مناعي‎ globulin ‏من أجسام مضادة مختلفة متصلة تساهميا لإنتاج سلاسل خفيفة أو ثقيلة‎ ٠ ‏وظيفية أو أقسام وظيفية مناعية من هذا. بصفة عامة؛ يكون قسم من السلسلة الثقيلة و/أو‎ ‏السلسلة الخفيفة متماثلا مع أو متشابها مع ترتيب مقابل في أجسام مضادة مشتقة من نوع‎ ‏بينما يكون الباقي من‎ pals ‏خاص أو ينتمي إلى صنف أو صنف فرعي جسم مضاد‎ ‏السلسلة (السلاسل) متماثلا أو متشابها مع تريب مقابل في أجسام مضادة مشتقة من نوع آخر‎ ‏أو ينتمي إلى صنف أو صنف فرعي جسم مضاد آخر. بالنسبة للطرق التي تخص أجسام‎ ٠
CEAYIONY ‏براءة الاختراع الأمريكية رقم‎ (JU ‏مضادة هجينة؛ انظر؛ على سبيل‎ «CDR ‏يوصف تطعيم‎ Morrison ef al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:685 1-6855 5
CTATVIY OTATVIY ‏مثلاء في براءات الاختراع الأمريكية أرقام «لتبخلت‎
L00Y Yu) 5 4 amino ‏بصفة عامة؛ فإن هدف تصنيع جسم مضاد هجين هو توليد هجائن يكون فيها عدد‎ Ye ¢'CDR—pakad’ ‏من نوع المريض المقصود عند قيمة قصوى. إن مثالا هو جسم مضاد‎ acids ‏من نوع خاص أو‎ (CDRs) ‏يشمل فيه جسم مضاد واحدة أو أكثر من مناطق تحديد التكامل‎ ‏تنتمي إلى صنف أو صنف فرعي جسم مضاد خاص؛ بينما يكون الباقي من سلسلة (سلاسل)‎ ‏جسم مضاد مماثلا أو مشابها لترتيب مقابل في أجسام مضادة مشتقة من نوع آخر أو ينتمي‎ ‏إلى صنف أو صنف فرعي جسم مضاد آخر. للاستخدام في الآدميين؛ غالبا ما يتم تطعيم‎ Yo ‏المنتقاة من جسم مضاد حيوان قارض في جسم مضاد آدمي؛ لاستبدال‎ CDRs ‏أو‎ V ‏المنطقة‎ ‏طبيعية الوجود لأجل جسم مضاد الآدمي.‎ CDRs ‏المناطق © أو‎ of ‏إن نوع جسم مضاد هجين مفيد هو جسم مضاد 'مكتسب السمة الآدمية". بصفة عامة؛‎ ‏ينتج جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية من جسم مضاد أحادي النسخ ناشئ أوليا في حيوان‎ ‏خاصة في جسم مضاد هذا أحادي النسخ؛‎ amino acid ‏وليس في آدمي. تكون متخلفات‎ ‏نموذجيا من أقسام من جسم مضاد غير مدركة لمولد مضاد؛ معدلة لتكون مشابهة لمتخلفات‎ ‏باستخدام‎ Sle ‏مقابلة في جسم مضاد آدمي لنوع مماثل مقابل. يمكن إكساب السمة الآدمية؛‎ ٠ ‏طرق عديدة باستبدال قسم على الأقل من منطقة متغيرة حيوان قارض للمناطق المقابلة في‎ 0OA0 AS ‏جسم مضاد آدمي؛ انظر»؛ على سبيل المثال براءتي الاختراع الأمريكيتين رقم‎ ‏ورقم 061479717؛‎
Jones et al., (1986), Nature 321:522-525; Riechmann et al. , (1988), Nature 332:323- 27; Verhoeyen et al., (1988), Science 239:1534-1536. Ye ‏في بعض التجسيدات؛ يمكن استخدام مناطق ثابتة من أنواع بخلاف الآدمية مع المنطقة‎ ‏(المناطق) المتغيرة الآدمية لإنتاج أجسام مضادة هجينة.‎ ‏أجسام مضادة آدمية كليا‎ ‏تتوافر أيضا أجسام مضادة آدمية كليا. تتوافر طرق لتحضير أجسام مضادة آدمية كليا‎ ‏المضاد ("أجسام مضادة آدمية كليا").‎ algal ‏خاصة بمولد مضاد معين بدون خضوع الآدميين‎ Vo ‏إن وسيلة لإنتاج أجسام مضادة آدمية كليا هي 'إكساب السمة الآدمية" لجهاز المناعة التكيفي‎ ‏الداخلية خامدة‎ Ig ‏مناعي آدمي في فئران تكون فيها جينات‎ globulin ‏الفأري. إن إدخال مواقع‎ ‏في فأر؛ وهو حيوان‎ LIK ‏آدمية‎ (Mabs) ‏النشاط هو وسيلة لإنتاج أجسام مضادة أحادية النسخ‎ ‏يمكن تحصينه مع أي مولد مضاد مطلوب. إن استخدام أجسام مضادة آدمية كليا يمكنه تقليل‎ ‏إلى أدنى حد الاستجابات المتولدة مناعيا واستجابات الحساسية التي يمكن أن يسببها أحيانا‎ ٠ ‏فأرية أو مشتقة من فأر للآدميين كعوامل علاجية.‎ Mabs ‏إعطاء‎ ‏فئران) قادرة على‎ sale) ‏يمكن إنتاج أجسام مضادة آدمية كليا بتحصين حيوانات طفرية‎ ‏مناعية داخلي. إن مولدات‎ globulin ‏إنتاج مخزون من أجسام مضادة آدمية في غياب إنتاج‎ ‏وتكون متحدة اختياريا مع‎ « JST ‏متجاورة أو‎ amino acids 7 ‏المضاد لهذا الغرض بها نموذجيا‎ ‏0©م18. انظرء على سبيل المثال؛‎ ie ‏مادة حاملة؛‎ Yo
00 ‎Jakobovits et al., (1993), Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
USA 90:2551-2555; Jakobovits et‏ ‎al., (1993), Nature 362:255-258; and Bruggermann et al., (1993), Year in Immunol.‏ .7:33 في مثال لتلك الطريقة؛ تنتج حيوانات طفرية بإضعاف مواقع ‎globulin‏ مناعية الفأري الداخلية © المشفرة لسلاسل ‎globulin‏ مناعي الثقيلة والخفيفة الفأرية فيهاء وإدخال في جينوم الفأر أجزاء كبيرة من ‎DNA‏ جينوم آدمي يحتوي على مواقع تشفر ‎proteins‏ سلسلة ‎ALE‏ وخفيفة آدمية. إن الحيوانات المعدلة جزثيا؛ التي بها أقل من المكمل الكامل لمواقع ‎globulin‏ مناعية آدمي؛ تتزاوج بينيا للحصول على حيوان به كل تعديلات جهاز المناعة المطلوبة. عند إعطاء مولد مناعة؛ تنتج هذه الحيوانات الطفرية أجسام مضادة خاصة مناعيا بمولد المناعة لكن لها ‎٠‏ ترتيبات ‎amino acid‏ بدلا من الفأرية؛ متضمنة المناطق المتغيرة. لتفاصيل إضافية لتلك الطرق؛ انظرء على سبيل ‎JU‏ 5 و17094/02602 المندمج هنا كمرجع. توصف طرق إضافية تتعلق بفئران طفرية لإنتاج الأجسام المضادة آدمية في براءات الاختراع الأمريكية رقم 6040/809؛ رقم 1713110؛ رقم ‎AAT‏ 13177؛ رقم 1117917؛ رقم /40/6 8©؛ رقم 41700179 رقم ‎¢1Y00£0A‏ رقم ‎OAVYYAY‏ رقم 914 4167© ورقم ‎00EOAT No‏ في منشورات ‎«W090/04036 »117091/10741 PCT‏ وفي 54607331 ‎EP 5 EP‏ ‎.546073A1‏ ‏تحتوي الفئران الطفرية الموصوفة أعلاه؛ المشار إليها هنا فئران ‎"HuMab"‏ تحتوي على موضع صغير جين ‎globulin‏ مناعية آدمي يشفر ترتيبات ‎globulin‏ مناعية سلسلة ثقيلة ‎p)‏ ‎(vs‏ وسلسلة خفيفة » غير معادة الترتيب؛ مع طفرات مستهدفة تخمد نشاط مواقع سلسلة نرى» ‎٠‏ الداخلية )368:856-859 ‎L(Lonberg ef al., (1994), Nature‏ طبقا لهذاء تظهر الفثران إظهار قليل لأجل ‎(oli IgM‏ و» في استجابة للتحصين؛ وتخضع الجينات الطفرية للسلسلة الثقيلة والخفيفة الآدمية الداخلة لتحول نوع وطفرة جسدية لتوليد الأجسام المضادة أحادية النسخ » ‎ca Alle =) IgG‏ ‎(Lonberg et al., supra.; Lonberg and Huszar, (1995), Intern.
Rev.
Immunol. 13: 65-‏ ‎Harding and Lonberg, (1995), Ann.
N.Y Acad.
Sci. 764:536-546). Yo‏ ;93 يوصف تحضير فتران ‎HuMab‏ بالتفصيل في:
0 ‎Taylor et al., (1992), Nucleic Acids Research 20:6287-6295; Chen et al., (1993),‏ ‎International Immunology 5:647-656; Tuaillon et al., (1994), J.
Immunol. 152:2912-‏ ‎Lonberg et al., (1994), Nature 368:856-859; Lonberg, (1994), Handbook of‏ ;2920 ‎Exp.
Pharmacology 113:49-101; Taylor et al., (1994), International Immunology‏ ‎Lonberg and Huszar, (1995), Intern.
Rev.
Immunol. 13:65-93; Harding °‏ ;6:579-591 ‎and Lonberg, (1995), Ann.
N.Y Acad.
Sci. 764:536-546; Fishwild ef al., (1996),‏ ‎Nature Biotechnology 14:845-851;‏ يندمج كل السابق هنا كمرج بالكامل لكل الأغراض. ‎«pail‏ إضافيا براءة الاختراع الأمريكية رقم 34 ده ‎00M9AY0‏ ا ماحد ماحد . محخكالاف لاخ للاطف ‎OAVEYIA OTN NT ٠‏ 47914 0/7؛ ورقم 479 07/90؛ بالإضافة إلى براءة الاختراع الأمريكية رقم 0/0 © ؛ المنشورات العالمية أرقام 93/1227 ‎¢WO 92/22646 ¢WO‏ و ‎WO‏ ‏8. إن التقنيات المستعملة لإنتاج أجسام مضادة آدمية في هذه الفئران الطفرية معلنة ‎Lad‏ في 3 0ل 5 15:146-156 ‎«Mendez et al., (1997), Nature Genetics‏ المندمجة هنا كمرجع. على سبيل المثال؛ يمكن استخدام سلالات فثران طفرية 7م1160 ‎١٠‏ و110012 لتوليد أجسام مضادة مضاد 2106-1 آدمية. باستخدام تقنية ورم هجين» يمكن إنتاج 5 أآدمية خاصة بمولد مضاد لها الخصوصية المطلوبة ويمكن انتقائها من ‎hash‏ الطفرية مثل تلك الموصوفة أعلاه. يمكن نسخ وإظهار أجسام مضادة تلك باستخدام ناقل مناسب وخلية عائلة مناسبة؛ أو يمكن جمع أجسام مضادة من خلايا ورم هجين مزرعة. ‎Ye‏ يمكن أيضا اشتقاق أجسام مضادة آدمية كليا من مكتبات إظهار بلعم (كما هو مشروح في ‎Hoogenboom et al., (1991), J.
Mol.
Biol. 227:381‏ و ‎Marks et al., 1991, 7 Mol.‏ 1 م220). إن تقنيات إظهار بلعم تحاكي انتقاء مناعي من خلال إظهار مخزون جسم مضاد على سطح ملتهم جراثيم خيطي؛ وانتقاء تالي للبلعم بالارتباط مع مولد المضاد موضع الاختيار. توصف تلك التقئنية في 4 ‎WO‏ (المندمج هنا كمرجع)؛ الذي يصف عزل ‎Yo‏ أجسام مضادة عالية الانجذاب ومعضدة وظيفية من أجل مستقبلات ‎msk y MPL‏ باستخدام تلك الطريقة. أجسام مضادة ثنائية الخصوصية أو ثنائية الوظيفية
لاه تتضمن أيضا الأجسام المضادة المتوافرة أجسام مضادة ثنائية الخصوصية وثنائية الوظيفية التي تتضمن واحدة أو أكثر من ‎CDRs‏ أو واحدة أو أكثر من مناطق متغيرة حسب الوصف أعلاه. إن جسم مضاد ثنائي الخصوصية أو الوظيفية هو جسم مضاد هجين صناعي به ؟ من أزواج سلسلة ثقيلة/ خفيفة مختلفة و7 من أماكن ربط مختلفة. يمكن إنتاج أجسام مضادة ‎٠‏ ثنائية الخصوصية بتشكيلة من الطرق المتضمنة؛ لكن بدون تحديد؛ اندماج أورام هجينة أو توصيل أجزاء ‎Fab’‏ انظرء على سبيل المثال؛ ‎Songsivilai and Lachmann, (1990), Clin.
Exp.
Immunol. 79:315-321; Kostelny et al,‏ ‎J.
Immunol. 148:1547-1553.‏ ,)1992( أشكال أخرى متنوعة ‎٠‏ > إن بعض من الأجسام المضادة أو أجزاء وظيفية مناعية المتوافرة هي أشكال متباينة من الأجسام المضادة والأجزاء المعلنة أعلاه. يمكن تقسيم ‎amino acids‏ طبيعية الوجود إلى أنواع معتمدة على خواص سلسلة جانبية مشتركة: ‎«Met ¢norleucine :hydrophobic ([0149] 1‏ على ‎¢Ile <Leu «Val‏ ‎hydrophilic ([0150] 2 Vo‏ متعادلة: ‎«Thr «Ser «Cys‏ صف ‎¢Gln‏ ‎¢Glu «Asp :acidic [0151] 3‏ 4 ) قاعدية: ‎¢Arg «Lys «His‏ 5) متخلفات تؤثر على توجيه السلسلة: ‎¢Pro «Gly‏ و ‎-Phe «Tyr «Trp :Aromatic ([0154] 6‏ ‎Ye‏ .قد تشمل استبدالات ‎amino acid‏ واقية استبدال عضو من ‎daly‏ من هذه الأنواع مع عضو آخر من نفس النوع. قد تشمل استبدالات ‎amino acid‏ واقية متخلفات ‎amino acid‏ غير طبيعية الوجود؛ مدمجة نموذجيا بتخليق ‎peptide‏ كيميائية بدلا من تخليق في أنظمة حيوية. تتضمن هذه مماثلات ‎peptide‏ وأشكال أخرى معكوسة أو مقلوبة من أجزاء ‎.amino acid‏ قد تشمل استبدالات غير واقية استبدال عضو من واحد من الأنواع أعلاه لعضو من نوع آخر. ‎Yo‏ يمكن إدخال تلك المتخلفات المستبدلة في مناطق الجسم المضاد المتشابهة مع أجسام مضادة آدمية؛ أو في المناطق غير المتشابهة من الجزيء.
oA ‏أن يوضع في الاعتبار مؤشر الاعتلال‎ WY ‏لإجراء تلك التغييرات؛ طبقا لتجسيدات معينة؛‎ amino ‏بتحديد وكل‎ protein ‏لأجل‎ Sal ‏يحسب نمط الاعتلال‎ camino acids ‏لأجل‎ ll ‏قيمة عددية ("مؤشر اعتلال مائي") وعندئذ حساب المتوسط بصورة متكررة لهذه القيمة‎ acid ‏مؤشر اعتلال مائي على أساس سمات صده‎ amino acid ‏ينسب لكل‎ peptide ‏بطول سلسلة‎ ¢(Y,A+) leucine ¢(£,Y+) valine ¢(£,0+) isoleucine ‏للماء وشحتتهة. أنهيا:‎ © alanine ¢(),4+) methionine ¢(Y,0+) cysteine/cystine ¢(¥, A+) phenylalanine ¢(+,4-) tryptophan ¢(+,A=) serine ¢(+,V—) threonine ¢(+,£-) glycine ¢(1,At) glutamine ¢(Y,0=) glutamate ¢(Y',Y=) histidine ¢(),1-) proline ¢(1,Y-) tyrosine -(£,0=) arginine 5 ¢(¥,4-) lysine ¢(¥,0-) asparagine ¢(¥,0-) aspartate ¢(¥,0-) ‏مدركة في‎ protein ‏إن أهمية نمط الاعتلال المائي في توفير وظيفة حيوية نشطة لأجل‎ ١ ‏من‎ (Kyte ef al, 1982, J.
Mol.
Biol. 157:105-131 ‏الفن (انظرء على سبيل المثال»‎ ‏أخرى لها‎ amino acids ‏يمكن أن تكون مستبدلة لأجل‎ Lima amino acids ‏المعروف أن هناك‎ ‏مؤشر أو درجة اعتلال مائي مشابه واستبقاء نشاط حيوي مشابه أيضا. لإجراء تغييرات معتمدة‎ ‏مع‎ amino acids ‏على مؤشر الاعتلال المائي؛ في تجسيدات خاصة؛ يتم إدخال استبدال‎ ‏مؤشرات اعتلال مائي في نطاق +7. في بعض الجوانب من الاختراع؛ يتم إدخال تلك في‎ Ve .٠,9+ ‏يتم إدخال تلك في نطاق‎ op RY) ‏وفي جوانب أخرى من‎ VE ‏نطاق‎ ‏متشابهة يمكن أن يتم بدرجة مؤثرة‎ amino acids ‏من المفهوم أيضا في الفن أن استبدال‎ ‏الوظيفي حيويا المتولد بواسطتها‎ peptide ‏أو‎ protein ‏على أساس امتصاص الماء؛ تحديدا مع‎ ‏المقصود به الاستخدام في تجسيدات مناعية؛ كما في الحالة الحالية. في بعض التجسيدات؛‎ ‏الذي يحكمه امتصاص الماء‎ protein ‏فإن المتوسط الموضعي الأكبر لامتصاص الماء لأجل‎ ‏المجاورة له؛ تتطابق مع توليده للمناعة وربطه لمولد مضاد أو التولد‎ amino acids ‏لأجل‎ ‎protein ‏المناعي ؛ بمعنى» أنه يتطابق مع الخاصية الحيوية لأجل‎ lysine ¢(Y+) arginine :amino acid ‏تنسب قيم امتصاص الماء التالية لنفس متخلفات‎ ¢(+,Y+) asparagines ¢(+,¥+) serine ¢(V¥+) glutamate ؛)١+7+(‎ aspartate ¢(¥+) alanine ¢(Y++,0=) proline ¢(+,¢—) threonine ‏(إصفر)؛‎ glycine ¢(,Y +) glutamine ٠ ¢(1,0=) valine ¢(),¥~) methionine ¢()-) cysteine ¢(+,o=) histidine ¢(+,0-) (Y,o-) phenylalanine ¢(Y,¥-) tyrosine ¢(),A-) isoleucine ¢(Y,A-) leucine
‎tryptophan 4‏ )-€,¥(+ في إجراء تغييرات اعتمادا على قيم امتصاص ماء مشابهة؛ في بعض التجسيدات؛ يتم إدخال استبدال ‎amino acids‏ مع قيم امتصاص ماء في نطاق ‎VE‏ في تجسيدات أخرى يتم إدخال تلك في نطاق 2 وفي تجسيدات أخرى أيضاء يتم إدخال تلك في نطاق ‎.٠,9+‏ في بعض الحالات؛ يمكن أيضا تحديد ‎epitopes‏ من ترتيبات ‎amino acid‏ أولية © على أساس امتصاص الماء. يشار أيضا إلى هذه المناطق ‎Jie‏ "مناطق لب عأدماام»". سيكون للصانع الماهر المقدرة على تحديد أشكال ‎Lilie‏ مناسبة لأجل ‎polypeptides‏ كما هو مذكور هنا باستخدام تقنيات معروفة جيدا. يمكن للماهر في الفن تحديد مناطق مناسبة من الجزيء يمكن تغييرها بدون إعاقة النشاط باستهداف مناطق لا يعتقد أنها هامة للنشاط. سيكون الصانع الماهر قادرا أيضا على تحديد متخلفات وأقسام من الجزيشات محمية بين ‎polypeptides ٠‏ متشابهة. في تجسيدات إضافية؛ فقد تخضع أيضا المناطق الهامة للنشاط الحيوي أو للبناء لاستبدالات ‎amino acid‏ واقية بدون إعاقة النشاط الحيوي أو بدون التأثير بصورة ضارة على بناء ‎.polypeptide‏ ‏بالإضافة إلى هذاء يمكن للماهر في الفن مراجعة دراسات ‎oly‏ وظيفة تحدد متخلفات في ‎polypeptide‏ متشابهة هامة للنشاط أو للبناء. على ضوء تلك المقارنة؛ يمكن التنبؤ بأهمية ‎٠‏ متخلفات ‎acid‏ مصنصه في قسم مطابقة لمتخلفات ‎amino acid‏ هامة للنشاط أو البناء في ‎proteins‏ متشابهة. يمكن للماهر في الفن أن يختار استبدالات ‎amino acid‏ متشابهة كيميائيا لتلك متخلفات ‎amino acid‏ الهامة المتوقعة. يمكن أيضا للماهر في الفن أن يحلل البناء ثلاثي الأبعاد وترتيب ‎amino acid‏ بالنسبة لذلك البناء في ‎polypeptides‏ متشابهة. على ضوء تلك المعلومات؛ يمكن للماهر في الفن ‎٠‏ التتبؤ باصطفاف متخلفات ‎amino acid‏ لأجل جسم مضاد بالنسبة لبنائه ثلاثي الأبعاد. قد © يختار الماهر في الفن عدم ‎shal‏ تغييرات جذرية لمتخلفات ‎amino acid‏ متوقع وجودها على سطح هم ‎oY‏ تلك المتخلفات قد تكون داخلة في تفاعلات هامة مع جزيئات أخرى. علاوة على ‎clin‏ يمكن للماهر في الفن توليد أشكال متباينة اختبار تحتوي على استبدال ‎amino acid‏ واحد عند متخلف ‎amino acid‏ مطلوب. يمكن عندئذ فحص هذه الأشكال ‎vo‏ المتباينة باختبارات للنشاط المعادل 0106-1 (انظر الأمثلة أدناه) وبذلك تنتج معلومات متعلقة لأجل ‎amino acids‏ الممكن تغييرها وتلك التي لا يجب تغييرها. بطريقة أخرى؛ اعتمادا على
Te amino ‏معلومات مجمعة من تجارب روتينية؛ يمكن للماهر في الفن أن يحدد بسهولة أماكن‎ ‏التي يجب عندها تفادي استبدالات إضافية أو في اتحاد مع طفرات أخرى.‎ 5 ‏هناك عدد من المطبوعات العلمية مكرسة للتتبؤ ببناء ثانوي. انظرء‎
Moult, (1996), Curr. Op. in Biotech. 7:422-427; Chou et al., (1974),
Biochem. 13:222-245; Chou et al., (1974), Biochemistry 113:211-222; Chou et al., ° (1978), Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol. 47:45-148; Chou et al., (1979), Ann.
Rev. Biochem. 47:251-276; and Chou et al., (1979), Biophys. J. 26:367-384. ‏بالإضافة إلى هذاء هناك برامج حاسوب متوافرة حاليا للمساعدة في التنبؤ ببناء ثانوي. تعتمد‎ ‏طريقة للتنبؤ ببناء ثانوي على تكوين نماذج تشابه. على سبيل المثال؛ فإن اثنين من‎ ‏يمكن‎ 75٠60 ‏تماثل ترتيب أكبر من أو تشابه أكبر من‎ Led proteins ‏أو‎ polypeptides ٠ ‏أن تكون لهما تضاريس بنائية متشابهة. إن التطور الحديث لقاعدة البيانات البنائية لأجل‎ ‏ثانوي؛ متضمنة العدد الممكن للتضاعفات في‎ olin ‏قد وفر إمكانية تنبؤ زائدة‎ (PDB) protein -Holm et al., (1999), Nucl. Acid. Res. 27:244-247 ‏انظ‎ .protein sl polypeptide ‏بناء‎ ‏بأن هناك عدد‎ (Brenner er al., (1997), Curr. Op. Struct. Biol. 7:369-376) ‏هناك اقتراح‎ ‏معين وبمجرد حل عدد حرج من‎ protein ‏أو‎ polypeptide ‏محدود من التضاعفات في‎ ١ ‏البناءات؛ سوف يصبح التنبؤ بالبناء دقيق أكثر بدرجة كبيرة جدا.‎ (Jones, (1997), Curr. ‘(threading) Japa ‏تتضمن طرق إضافية للتنبؤ ببناء ثانوي‎ ‏'تحليل نمط‎ «Opin. Struct. Biol. 7:377-387; Sippl et al., (1996),Structure 4:15-19) "(profile analysis) (Bowie et al., (1991), Science 253:164-170; Gribskov et al., (1990), Meth. Enzym. Ye 183:146-159; Gribskov et al., (1987), Proc. Nat. Acad. Sci. 84:4355-4358), «Brenner 5 ‏أعلا‎ ¢Y444 Holm « ‏(انظر‎ "(evolutionary linkage) ‏و'وصلة تطورية‎ ‏أعلاه).‎ 14١9 ‏تقلل الحساسية‎ )١( amino acid ‏في بعض التجسيدات من الاختراع؛ يتم إجراء استبدالات‎ ‏تغير انجذاب الارتباط لتكوين‎ )3( coxidation ‏تقلل الحساسية لأجل‎ (Y) ‏_للتحلل البريتوني؛‎ vo ‏تغير انجذابات ارتباط مركب ترابطي أو مولد مضاد؛ و/أو )8( توفر أو‎ )4( «protein ‏معقدات‎ ‏على سبيل المثال؛ يمكن‎ polypeptides ‏تعدل خواص فيزيائية كيميائية أو وظيفية أخرى لتلك‎
إجراء استبدالات ‎amino acid‏ واحدة أو متعددة (في تجسيدات خاصة؛ استبدالات ‎amino acid‏ واقية) في الترتيب طبيعي الوجود. يمكن إجراء استبدالات في ذلك القسم مع جسم مضاد الواقع خارج مجال (مجالات) السيطرة المشكل لتلامسات بين الجزيء). في هذه التجسيدات؛ يمكن استخدام استبدالات ‎amino acid‏ واقية لا تغير جوهريا السمات البنائية للترتيب الأصلي ‎Ha)‏ ‎aly ©‏ أو أكثر من ‎amino acids‏ استبدالية لا تمزق البناء الثانوي المميز للجسم المضاد الأصلي أو الأولي) . توصف أمثلة بناءات ‎polypeptide‏ ثانوية وثالثية مدركة في الفن في: ‎Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton, Ed.), (1984), W.
H.
New‏ ‎York: Freeman and Company; Introduction to Protein Structure (Branden and‏ ‎Tooze, eds.), (1991), New York: Garland Publishing; and Thornton et al., (1991),‏ ‎Nature 354:105, Ye‏ يشتمل الاختراع ‎Lia‏ على أشكال متباينة من ‎glycosylation‏ للأجسام المضادة من الاختراع حيث قد تم تعديل عدد و/أو نوع موقع (مواقع) ‎glycosylation‏ بالمقارنة مع ترتيبات ‎amino acid‏ في ‎polypeptide‏ | لأصلي ‎٠‏ في تجسيدات معينة؛ تشتمل الأشكال المتباينة من ‎protein‏ الجسم المضاد على عدد من مواقع ‎glycosylated‏ المرتبطة مع ‎1١‏ أكبر أو أقل من الجسم المضاد الأصلي. يتميز موقع ‎glycosylation‏ مرتبط مع ‎N‏ بهذا الترتيب: ‎Asn-X-Ser‏ ‏أو ‎Gua ¢Asn-X-Thr‏ قد يكون متخلف ‎amino acid‏ المشار إليه بالرمز 36 هو أي متخلف ‎amino acid‏ باستثناء عدنلو«م. إن استبدال متخلفات ‎amino acid‏ لمخلق هذا الترتيب يوفر موقع جديد محتمل لإضافة سلسلة ‎carbohydrate‏ مرتبط مع 11. بصورة بديلة؛ إن هذه الاستبدالات التي تزيل أو تغير هذا الترتيب تمنع إضافة سلسلة ‎carbohydrate‏ المرتبط مع ‎N‏ ‎٠‏ الموجودة في ‎polypeptide‏ الأصلي. على سبيل المثال؛ يمكن تقليل ‎glycosylation‏ بحذف ‎Asn‏ أو باستبدال ‎Asn‏ مع ‎amino acid‏ مختلف. في تجسيدات ‎coal‏ يتم خلق واحد أو أكثر من مواقع مرتّبطة مع ‎N‏ جديدة. يكون نموذجيا لدى الأجسام المضادة موقع ‎glycosylation‏ ‏مرتبط مع ‎AN‏ منطقة ‎Fc‏ ‏تتضمن أشكال متباينة للجسم المضاد إضافية مفضلة أشكال متبايئة ‎cysteine‏ يتم ‎Le‏ ‎Yo‏ حذف واحدة أو أكثر من متخلفات ‎cysteine‏ في ترتيب ‎J amino acid‏ لأصلي أو ا لأولي من أو استبدالها مع ‎amino acid‏ آخر (مثلا ‎(serine‏ . إن الأشكال المتباينة ‎cba cysteine‏ ضمن آخرين عندما تجب إعادة مضاعفة الأجسام المضادة في البنية النشطة حيويا. قد توجد في
الأشكال المتباينة ‎cysteine Jay‏ متخلفات ‎cysteine‏ أقل من الجسم المضاد الأول؛ ويكون بها تموذجيا أيضا عدد يكفي لتقليل إلى أدنى حد للتفاعلات الناتجة من ‎cysteines‏ غير مزدوجة. يمكن استخدام السلاسل الثقيلة والخفيفة» مجال سيطرة مناطق متغيرة و0015 المعلنة لتحضير ‎polypeptides‏ تحتوي على ربط ‎Age‏ مضاد يمكن أن ترتبط بصفة خاصة مع ‎Dkk-‏ ‎polypeptide ©‏ 1. على سبيل ‎Sa «JE‏ دمج واحدة أو أكثر من ‎CDRs‏ المذكورة في جدول ؛ في جزيء ‎(polypeptide ic)‏ تساهميا أو بصورة غير تساهمية لحدوث التصاق مناعي. قد يتضمن الالتصاق المناعي ‎CDR(s)‏ كجزءٍ من سلسلة ‎polypeptide‏ أكبر؛ أو يتضمن ‎CDR(s)‏ بصورة غير تساهمية. إن 0876 تمكن الالتصاق المناعي من الارتباط بصفة خاصة مع مولد مضاد خاص له أهمية (مثلاء ‎DKk-1 polypeptide‏ أو ‎epitope‏ من هذا).
‎١‏ تتوافر ‎Lind‏ مواد مماثلة ‎Sia)‏ 'مماثلات ببتيد ‎"(peptide mimetics)‏ أو 'مماثلات ببتيدية ‎("(peptidomimetics)‏ معتمدة على مجالات سيطرةٍ المنطقة المتغيرة 5 ‎CDRs‏ الموصوفة هنا. يمكن أن تكون هذه المماثلات هي ‎peptides- ye «peptides‏ أو اتحادات مناطق ‎peptides‏ ‏وغير ‎-peptides-‏
‎Fauchere, (1986), Adv.
Drug Res. 15:29; Veber and Freidinger, (1985), TINS p.
‎392; and Evans et al., (1987), J.
Med.
Chem. 30:1229, Yo ‏المندمجة هنا بالمرجع لأي غرض.‎ ‏لينتج تأثير‎ Ladle ‏المفيدة‎ peptides ‏لأجل‎ Lily ‏مشابهة‎ peptide ‏يمكن استخدام مماثلات‎ ‏علاجي أو وقائي مشابه. يتم غالبا تطوير تلك المركبات بمساعدة تشكيل نموذج جزيئي‎ ‏مشابهة‎ proteins ‏من الاختراع عبارة عن‎ peptide ‏حاسوبي. بصفة عامة؛ تكون المماثلات‎
‎٠‏ بنائيا لأجل جسم مضاد يظهر نشاطًا حيويًا مرغوباء مثل القدرة هنا على ربط 1106-1 بصفة خاصة؛ لكن مع وجود واحدة أو أكثر من وصلات ‎peptide‏ مستبدلة اختياريا بوصلة تتتقى من: ‎«(trans 5 cis) =CH-CH= «=CH,-CH,= «=CH,S= «=CH,NH=‏ -ي007-؛ ‎=CH,SO- 5 <=CH(OH)CH=‏ بطرق معروفة جيدا في الفن. يمكن إجراء استبدال نظامي لوحد أو أكثر من ‎amino acids‏ لترتيب متفق عليه مع ‎D-amino acid‏ من نفس النوع (مثلا؛
‎D-lysine Yo‏ بدلا من ‎(L-lysine‏ في تجسيدات خاصة من الاختراع الحالي لتوليد ‎proteins‏ ثابتة أكثر. بالإضافة لذلك؛ يمكن توليد ‎peptides‏ مفيدة تشتمل على ترتيب متفق عليه أو تباين ترتيب متفق عليه ‎Blas‏ جوهريا بطرق معروفة في الفن
‎(Rizo and Gierasch, 1992, Ann.
Rev.
Biochem. 61:3 87),‏ المندمجة هنا بالمرجع» على سبيل المثال؛ بإضافة متخلفات ‎cysteine‏ داخلية قادرة على تكوين قناطر ‎disulfide‏ داخل الجزيء تسبب تحلق ‎-peptide‏
تتوافر ‎Lad‏ مشتقات الأجسام المضادة والأجزاء الوظيفية المناعية الموصوفة هنا. يمكن أن © يشمل الجسم المضاد أو الجزء المشتق أي جزيء أو مادة توفر خاصية مطلوبة للجسم المضاد أو جزء؛ ‎Jie‏ عمر- نصف زائد في استخدام معين. يمكن أن يشمل الجسم المضاد المشتق؛ ‎Dia‏ جزءِ يمكن تحديده (أو علامة) ‎lie)‏ جزيء نشط إشعاعيًا؛ يقيس اللون؛ مولد لمضاد أو إنزيمي» خرزة يمكن تحديدها (مثلا خرزة مغناطيسية أو كثيفة كهربيًا (مثلاء 1م8))؛ أو جزيء يرتبط مع جزيء ‎biotin Sa) HAT‏ أو ‎(streptavidin‏ جزء ‎=e‏ أو تشخيصي ‎lie)‏ ‎٠‏ جزءٍ نشط إشعاعيًا؛ سام للخلايا أو نشط دوائيًا)؛ أو جزيء يزيد ملاءمة الجسم المضاد لاستخدام خاص ‎Nie)‏ إعطاء لكائن؛ مثل كائن آدمي؛ أو استخدامات أخرى في الجسم أو معملية). تتضمن الأمثلة للجزيئات التي يمكن استخدامها لاشتقاق الجسم المضاد: ‎albumin‏ ‏(مثلاء ‎albumin‏ مصل آدمي) 5 ‎JPEG‏ يمكن تحضير مشتقات متصلة بواسطة ‎albumin‏ ‎PEGylated‏ من أجسام مضادة بتقنيات معروفة جيدًا في الفن. في أحد التجسيدات؛ يكون ‎١٠‏ الجسم المضاد ‎(diate‏ أو بطريقة أخرى متصلا مع ‎(TTR) transthyretin‏ أو شكل متباين ‎TTR‏ يمكن أن يكون ‎TTR‏ أو الشكل المتباين ‎TTR‏ معدلا كيميائيًا مع؛ ‎Die‏ مادة كيميائية تنتقى من المجموعة ‎«polyethylene glycols ¢poly(n-vinyl pyrrolidone) «dextran‏ ‎ethylene oxide co- [polypropylene oxide <propropylene glycol homopolymers‏
-polyvinyl alcohols 3 polyoxyethylated polyols ¢polymers ‏تتضمن المشتقات الأخرى الاتحادية التساهمية أو التجمعية من الأجسام المضادة مضاد‎ Ys ‏اندماج‎ proteins ‏مثل إظهار‎ (gyal polypeptides ‏أو‎ proteins ‏أو أجزاء منه مع‎ Dkk-1 ‏غير متماثلة مندمجة مع النهاية-17 أو -© من جسم مضاد مضاد‎ polypeptide ‏مُخلقة تشمل‎ ‏إشارة (أو قائد)‎ polypeptide ‏المتحد عبارة عن‎ peptide ‏على سبيل المثال؛ قد يكون‎ .Dkk-1 ‏جزء ملحق 6م1:0م©. يمكن أن‎ Jie peptide ‏غير متماثل؛ مثلا؛ قائد عامل ألفا الخميرة؛ أو‎ ‏مضافة لتسهيل تنقية‎ peptides 1106-1 ‏اندماج تحتوي على جسم مضاد مضاد‎ proteins ‏تشمل‎ Yo ‏عديد-1118). يمكن أيضًا أن يكون الجسم‎ Dia) 0106-1 ‏أو تحديد الجسم المضاد مضاد‎
المضاد مضاد ‎Dkk-1‏ متصلا مع ‎FLAG peptide‏ حسب الوصف في
1¢ ‎Hopp et al., Bio/Technology 6:1204 (1988); and United States Patent No. 5,011,912.‏ إن ‎FLAG peptide‏ مولد لمضاد للغاية ويوفر ‎epitope‏ مرتبط عكسيًا مع جسم مضاد أحادي النسخ خاص ‎(mab)‏ وذلك يمكن من إجراء اختبار سريع ويسهل تنقية ‎protein‏ المُخلق الظاهر. إن العوامل الكاشفة المفيدة لتحضير ‎proteins‏ اندماج مندمج ‎FLAG peptide Led‏ © مع ‎polypeptide‏ معين متوافرة ‎-(Sigma, St.
Louis, MO) [lad‏ يمكن استعمال ‎Oligomers‏ تحتوي على واحد أو أكثر من ‎polypeptides‏ جسم مضاد مضاد ‎Dkk-1‏ كمضادات ‎.Dkk-1‏ قد تكون ‎Oligomers‏ في شكل ‎«trimers «dimers‏ أو ‎ef oligomers‏ مرتبطة تساهميًا أو غير مرتبطة بطريقة غير تساهمية. إن ‎Oligomers‏ التي تشمل ¥ أو أكثر من ‎polypeptides‏ جسم مضاد مضاد ‎DKk-1‏ متوقعة للاستخدام؛ والمثال لها ‎٠‏ هو ‎dimer‏ المتشابه. تتضمن ‎Oligomers‏ الأخرى ‎dimers‏ مغايرة؛ ‎trimers «dg Lie trimers‏ مغايرة؛ ‎tetramers‏ متشابهة؛ ‎tetramers‏ مغايرة؛ إلخ. يتعلق تجسيد لأجل ‎Oligomers‏ تشمل ‎polypeptides‏ متعددة تربط جسم مضاد مضاد 10101 متصلة من خلال تفاعلات تساهمية أو غير تساهمية بين أجزاء ‎peptide‏ مندمجة مع ‎awa polypeptides‏ مضاد مضاد ‎.Dkk-1‏ قد تكون تلك ‎peptides‏ وصلات ‎peptide‏ ‎١٠‏ (مباعدات) ¢ أو ‎peptides‏ لها خاصية حث ‎oligomerization‏ إن المواد المثبتة لأجل ‎polypeptides s Leucine‏ الخاصة مشتقة من أجسام مضادة من بين ‎peptides‏ التي يمكن أن تحث ‎oligomerization‏ من ‎polypeptides‏ جسم مضاد مضاد 0106-1 المرتبطة معهاء حسب الوصف أدناه بتفصيل أكثر. في تجسيدات خاصة؛ تشمل ‎Oligomers‏ من ؟ إلى ؛ ‎polypeptides‏ جسم مضاد مضاد ‎.Dkk-1 ٠‏ قد تكون أجزاء جسم مضاد مضاد ‎Dkk-1‏ لأجل ‎oligomers‏ في أي من الأشكال الموصوفة أعلاه؛ مثلاء أشكال متباينة أو أجزاء. يفضل»؛ أن تشتمل ‎oligomers‏ على ‎polypeptides‏ جسم مضاد مضاد ‎Dkk-1‏ لها نشاط ربط ‎-Dkk-1‏ ‏في ‎punt‏ يحضر ‎Oligomer‏ باستخدام ‎polypeptides‏ مشتقة من ‎globulins‏ مناعية. لقد تم وصف تحضير ‎proteins‏ اندماج تشمل ‎polypeptides‏ غير متماثلة معينة مندمجة مع ‎Yo‏ أقسام مختلفة من ‎polypeptides‏ مشتقة من الجسم المضاد (متضمنة مجال سيطرة ‎is (Fe‏ بواسطة
م ‎Ashkenazi et al, (1991), PNAs USA 88:10535; Byrn et al., (1990), Nature 467:‏ ‎and Hollenbaugh et al., (1992) "Construction of Immunoglobulin Fusion Proteins",‏ ‎in Current Protocols in Immunology, Suppl. 4, pages 10.19.1-10.19.11.‏ يتعلق تجسيد من الاختراع الحالي ب ‎dimer‏ يشمل ¥ من ‎proteins‏ مندمجة متولدة باندماج © جزءٍ ربط ‎Dkk-1‏ من جسم مضاد مضاد ‎Dkk-1‏ مع منطقة ‎Fe‏ من جسم مضاد. يمكن تحضير ‎Nia «dimer‏ بإدخال جين اندماج يشفر ‎protein‏ الاندماج في ناقل إظهار ملائم؛ إظهار جين الاندماج في ‎LNA‏ عائلة متحولة مع ناقل الإظهار المُخلق؛ والسماح بتجميع ‎protein‏ الاندماج الظاهر بدرجة كبيرة مثل جزيئات الجسم المضاد؛ وعند ذلك تتكون روابط ‎disulfide‏ بين السلسلة بين الأجزاء ‎Fo‏ لينتج :01:0106. ‎IR‏ يتضمن المصطلح ‎"Fe polypeptide”‏ حسب الاستخدام هنا أشكال أولية و ‎mutein‏ من ‎polypeptides‏ مشتقة من المنطقة ‎Fo‏ من الجسم المضاد. إن الأشكال المبتورة من تلك التي تحتوي منطقة المفصلة التي تحث ‎dimerization‏ متضمنة أيضًا. أن ‎proteins‏ الاندماج المشتملة على ‎Oligomers 5) Fe shal‏ المتكونة من ذلك) توفر ميزةٍ التنقية السهلة بتحليل كروماتوجرافي بالانجذاب فوق أعمدة ‎Protein G sl Protein A‏ ‎Yo‏ إن ‎Fe polypeptide‏ المناسب؛ الموصوف في ‎PCT application WO 93/10151 and United States Patent.
No. 5,426,048 and No.‏ ,5,262,522 هو ‎polypeptide‏ وحيد السلسلة يمتد من منطقة المفصلة الطرفية-7 إلى ‎Catal)‏ الأولية لمنطقة ‎Fe‏ من جسم مضاد 1501 آدمي. إن ‎JAY) Fe polypeptide‏ المفيد هو ‎Fc mutein‏ ‎٠‏ الموصوف في ‎United States Patent No. 5,457,035, and in Baum et al., (1994), EMBO J. 13:3992-‏ .4001 إن ترتقيب ‎amino acid‏ لهذا ‎mutein‏ مماثل لذلك لترتيب ‎Fe‏ الأولي الموجود في ‎WO‏ ‏1 باستتثناء تغيير ‎١1 amino acid‏ من ‎Leu‏ إلى ‎«Alu‏ تغير ‎٠١ amino acid‏ من ‎Lu Yo‏ إلى ‎«Glu‏ وتغير ‎YY amino acid‏ من ‎Gly‏ إلى ‎Alu‏ يظهر ‎mutein‏ انجذابًا قليلاً لمستقبلات ‎Feo‏
في تجسيدات أخرى. قد يكون القسم المتغير من السلاسل الثقيلة و/أو الخفيفة من جسم ‎Dkk-1 alias alias‏ كما هو معلن هنا مستبدلا من أجل القسم المتغير من سلسلة ثقيلة و/أو خفيفة جسم مضاد. بطريقة ‎«alia‏ يكون ‎Oligomers‏ عبارة عن ‎protein‏ اندماج يشمل ‎polypeptides‏ جسم © مضاد مضاد ‎Dkk-1‏ متعددة» مع أو بدون واصلات ‎peptides) peptide‏ مباعدة). من ضمن واصلات ‎peptides‏ المناسبة تلك الموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية رقم: 470511786 ورقم: 4470777 ‎Jo‏ طريقة أخرى لتحضير مشتقات جسم مضاد مضاد 1106-1 ‎oligomeric‏ استخدام زمام 06اهد»1. إن مجالات سيطرة زمام ‎leucine‏ هي ‎peptides‏ تحث ‎oligomerization‏ من ‎٠‏ أجل ‎proteins‏ الموجودة فيها. تحددت زمامات ‎leucine‏ أصليا ‎proteins‏ عديدة تربط ‎DNA‏ ‎¢(Landschulz et al., (1988), Science 240:1759)‏ ومنذ ذلك تم اكتشافها في تشكيلة من ‎proteins‏ المختلفة. من ضمن زمامات ‎peptides 485 yall leucine‏ طبيعية الوجود والمشتقات منها التي تخفضع لأجل ‎dimerize‏ أو 6دن:ع«ة. إن أمثلة مجالات سيطرة زمام ‎leucine‏ ‏المناسبة لإنتاج ‎oligomeric proteins‏ قابلة للذوبان موصوفة في 94/10308 170؛ وزمام ‎leucine Vo‏ المشتق من ‎protein‏ منشط سطح رثة ‎(SPD) D‏ الموصوف في ‎Hoppe et al.,‏ ‎FEBS Letters 344:191‏ ,)1994(¢ المندمج بالإشارةٍ الكاملة كمرجع. يوصف استخدام ‎ple)‏ ‎leucine‏ معدل يسمح ب ‎trimerization‏ ثابتة لأجل ‎protein‏ غير متماثل مندمج معه في ‎-Fanslow et al, (1994), Semin.
Immunol. 6:267-278‏ في طريقة»؛ تظهر ‎proteins‏ ‏الاندماج المُخلقة التي تشمل جزء أو مشتق جسم مضاد مضاد ‎Dkk-1‏ مندمج مع ‎peptide‏ ‎٠‏ زمام ‎leucine‏ في خلايا عائلة مناسبة؛ ويتم استرجاع أجزاء أو مشتقات جسم مضاد ‎oligomeric‏ مضاد ‎DRk-1‏ القابلة للذويان المتكونة بتلك الطريقة من مادة المزرعة الطافية. ‎nucleic acids‏ تتوافر أيضًا ‎nucleic acids‏ التي تشفر واحدًا من أو كل من سلاسل الجسم المضاد من الاختراع؛» أو ‎cea‏ مشتق» 016:0 أو شكل متباين من ذلك؛ ‎polynucleotides‏ كافية ‎vo‏ للاستخدام كمجسات تهجين» مواد أولية ‎PCR‏ أو مواد أولية ترتيبية لتحديد» تحليل» إجراء طفرة أو تكبير ‎polynucleotide‏ يشفر ‎nucleic acids «polypeptide‏ مضاد للإحساس لتثبيط إظهار ‎polynucleotides‏ وترتيبات مكملة لما سبق. قد يكون لأجل ‎nucleic acids‏ أي طول. يمكن
في أن يكون طولها على ميل ‎(JU‏ فى بف فت ‎(Yu‏ مت ‎(FO‏ £4( ميم ‎(VO‏ ‎¢1YO ٠٠‏ فل قات ‎(YOu (Yuu‏ بك ‎(YOu‏ نبب £00( ‎(Vou Onn‏ .ل ‎(You‏ ص .ده أو أكثر ‎«nucleotide‏ و/أو يمكن أن تشمل واحدًا أو أكثر من الترتيبات الإضافية؛ ‎lie‏ الترتيبات التنظيمية؛ و/أو تكون جزءًا من ‎nucleic acid‏ أكبر؛ ‎ia‏ ‏© ناقل. قد تكون ‎nucleic acids‏ فردية الشريط أو مزدوجة الشريط ويمكن أن تشمل ‎RNA‏ ‎nucleotides‏ و/أو ‎(DNA nucleotides‏ وأشكال متباينة صناعية من ذلك ‎nucleic Mia)‏ ‎(peptide acids‏ تتوافر أيضا ‎Nucleic acids‏ تشفر ‎proteins‏ اندماج تتضمن تلك ‎peptides‏ ‏يمكن ‎DNA Jie‏ الذي يشفر ‎polypeptides‏ لجسم مضاد (مثل ؛ سلسلة ثقيلة أو خفيفة؛ مجال سيطرةٍ متغير فقط؛ أو كامل الطول) من خلايا ‎B‏ من فأر مناعي مع ‎Dil‏ أو جزءٍ ‎٠‏ مولد للمناعة منها. يمكن ‎DNA Jie‏ بإجراءات تقليدية مثل تفاعل سلسلة ‎polymerase‏ ‏(©00. إن عرض للالتهام هو مثال آخر على تقنية معروفة حيث يمكن تحضير مشتقات من أجسام مضادة. في هدف ‎canals‏ تظهر ‎polypeptides‏ مكونة لجسم مضاد معين في أي ‎plas‏ ‏إظهار مخلق مناسب؛ ويسمح بتجميع ‎polypeptides‏ ظاهرة لتكوين جزيئات جسم مضاد. تتوفر ‎nucleic acids‏ التمثيلية لتشفير سلاسل خفيفة وثقيلة؛ مناطق متغيرة 5 ‎CDRs‏ من ‎٠‏ الأجسام المضادة والأجزاء الوظيفية ‎Lelie‏ نتيجة انحلال الشفرةٍ الجينية؛ يتشفر أيضا كل ترتيب ‎polypeptide‏ بوإسطة عدد كبير من ترتيبات ‎nucleic acid‏ بجانب المدرجين يوفر الاختراع ‎Mall‏ كل ترتيب ‎nucleotide‏ للانحلال يشفر كل جسم مضاد من الاختراع. يوفر جانب إضافي من الاختراع ‎nucleic acids‏ تتهجن مع ‎nucleic acids‏ أخرى تحت شروط تهجين خاصة. إن طرق تهجين ‎nucleic acids‏ معروفة جيدًا في الفن. انظر؛ مثلا ‎Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, N.Y. (1989), 6.3.1- Ye‏ .6.3.6 تستخدم شروط تهجين صارمة بدرجة متوسطة محلول غسيل مسبق © مرات يحتوي على ‎١ «SDS /+,0 «(SSC) sodium citrate /sodium chloride‏ مللي جزيثي جرامي ‎EDTA‏ ‏(عند أس هيدروجيني ‎(A‏ ؛ مثبت أس هيدروجيني تهجين من حوالي ‎«formamide 75 ٠‏ 1 ‎YO‏ مرات ‎SSC‏ ودرجة حرارة تهجين **"مئوية (أو محاليل تهجين أخرى مشابهة مثل محلول يحتوي على حوالي ‎formamide 725 ٠‏ مع درجة حرارة تهجين 47 “مئوية)؛ وشروط غسيل ‎٠‏ مثوية؛ في 0,+ مرة ‎SDS (SSC‏ 0.1 7. تقوم شروط التهجين الصارمة بالتهجين في +
1A rar, Y SSC ‏مرة‎ 0,١ ‏عند 0 "مئوية؛ ثم 530 أو أكثر من مرات الغسيل في‎ SSC ‏مرات‎ ‏عند 18”مثوية. إضافة لذلك؛ يمكن للماهر في الفن التعامل مع شروط التهجين و/أو‎ SSC ‏المشتملة على ترتيبات‎ nucleic acids ‏الغسيل لزيادة أو تقليل صرامة التهجين بحيث تظل‎ ‏أو‎ 4148 Jao ‏قال‎ JAS JA Jive ‏ممائلة على الأقل فيان .اال‎ nucleotide ‏لبعضها البعض نموذجيا متهجنة مع بعضها البعض.‎ 744٠ ‏إن المعايير الأساسية المؤثرة على اختيار شروط التهجين ودليل اختيار الشروط المناسبة‎ ‏مذكور بواسطة؛ مثلاء‎
Sambrook, Fritsch, and Maniatis (1989), Molecular Cloning: A Laboratory Manual,
Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y, chapters 9 and 11; and Current Protocols in Molecular Biology, (1995), Ausubel et al., eds., John Wiley | ٠ & Sons, Inc., sections 2.10 and 6.3-6.4), ‏ويمكن لأصحاب المهارة العادية في الفن تحديدها بسهولة على أساس؛ مثلاء طول و/أو تركيبة‎ .DNA ‏قاعدة‎ ‎amino ‏وبذلك تتتج تغييرات في ترتيب‎ anucleic acid ‏يمكن إدخال التغييرات بطفرةة في‎ ‏جسم مضاد من الاختراع) يشفره. يمكن‎ (Fide ‏(مثلاء جسم مضاد أو‎ polypeptide ‏لأجل‎ acid ٠ ‏إدخال طفرات بأي تقنية معروفة في الفن. في تجسيد؛ تتغير واحدة أو أكثر من متخلفات‎ ‏خاصة باستخدام؛ مثلا؛ بروتوكول تكوين طفري خاص بمكان. في أحد‎ amino acid lie ‏تتغير واحدة أو أكثر من متخلفات منتقاة عشوائيا باستخدام؛‎ (pa) ‏التجسيدات‎ ‏الطفري يمكن‎ polypeptide ‏بروتوكول تكوين طفري عشوائي. أيا كانت طريقة تحضيره؛ فإن‎ ‏إظهاره وفحصه من أجل خاصية مطلوبة.‎ Yo ‏بدون تغيير درجة ملحوظة في النشاط الحيوي لأجل‎ nucleic acid ‏يمكن إدخال طفرات في‎ ‏تؤدي إلى‎ nucleotide ‏يمكن إجراء استبدالات‎ «JU ‏الذي يشفره. على سبيل‎ polypeptide ‏غير أساسية. بطريقة بديلة؛ يمكن إدخال‎ amino acid ‏عند متخلفات‎ amino acid ‏استبدالات‎ ‎polypeptide ‏تغير انتقائيا النشاط الحيوي لأجل‎ nucleic acid ‏واحدة أو أكثر من الطفرات في‎ ‏النشاط الحيوي. تتضمن‎ Ui ‏»الذي يشفره. على سبيل المثال؛ يمكن للطفرة أن تغير كميا أو‎ ‏أمثلة تغييرات كمية زيادة؛ تقليل أو إزالة النشاط. تتضمن أمثلة تغييرات نوعية تغيير خصوصية‎ ‏مولد المضاد للجسم المضاد.‎
يوفر جاتب ‎AT‏ من الاختراع الحالي جزيئات ‎nucleic acid‏ مناسبة للاستخدام كمواد أولية أو مجسات تهجين لتحديد ترتيبات ‎nucleic acid‏ من الاختراع. يمكن أن يشمل جزيء ‎nucleic‏ ‏120 من الاختراع فقط ‎Good‏ من ترتيب ‎nucleic acid‏ يشفر ‎polypeptide‏ كامل الطول من الاختراع؛ مثلاء جزء يمكن استخدامه كمجس أو مادة أولية أو ‎eda‏ يشفر القسم النشط ‎lia)‏ ‏© قسم يربط ‎(Dkk-1‏ من ‎polypeptide‏ من الاختراع الحالي. يمكن استخدام المجسات المعتمدة على ترتيب ‎nucleic acid‏ من الاختراع لتحديد ‎nucleic‏ ‏8 أو ‎nucleic acids‏ المشابهة؛ على سبيل المثال؛ نسخ تشفر ‎polypeptide‏ من الاختراع. يمكن أن يشمل المجس مجموعة علامة؛ ‎Mie‏ نظير ‎catia‏ مركب استشعاعي؛ إنزيم؛ أو عامل مساعد إنزيم. يمكن استخدام تلك المجسات لتحديد خلية ‎-polypeptide edi‏ ‎Ye‏ يوفر جاتب آخر من الاختراع الحالي نواقل ‎polypeptide Lids nucleic acid Jai‏ أو قسمًا منه (مثلاء جزء يحتوي على واحدة أو أكثر ‎CDRs‏ أو واحدة أو أكثر من مجالات سيطرة منطقة متغيرة). تتضمن أمثلة النواقل؛ بدون تحديد؛ نواقل إظهار مُخلقة. يمكن أن تشمل نواقل الإظهار المُخلقة ‎nucleic acid‏ في شكل مناسب لإظهار ‎acid‏ 0001616 في خلية عائلة. تتضمن نواقل الإظهار المُخلقة واحدًا أو أكثر من ترتيبات تنظيمية؛ منتقاة على اساس الخلايا ‎١‏ العائلة المستخدمة للإظهار؛ متصلة تشغيليًا مع ترتيب ‎nucleic acid‏ المراد إظهاره. تتضمن الترتيبات التنظيمية تلك التي تباشر الإظهار التكويني لترتيب ‎nucleotide‏ في أنوا ع خلايا ‎Alle‏ كثيرة ‎Ola)‏ معزز جين مبكر 517740؛ محث فيروس سرقوم ‎Rous‏ ومحث 017)؛ تلك التي باشر إظهار ترتيب ‎nucleotide‏ فقط في خلايا ‎Alle‏ خاصة (مثلا؛ ترتيبات تنظيمية خاصة بنسيج؛ انظر
Voss et al., (1986), Trends Biochem. Sci. 11:287, Maniatis et al., (1987), Science Ye 236:1237, nucleotide ‏المدمج بالإشارة الكاملة كمرجع هنا)؛ وتلك التي تباشر إظهار قابل للحث لترتيب‎ ‏في خلايا ثديية والمحث المستجيب‎ mammalian ‏خاصة مثلاء محث‎ Alls ‏استجابة لمعالجة أو‎ ‏في كل من الأنظمة بدائية وسوية النواة (انظرء‎ streptomycin ‏و/أو المستجيب لأجل‎ tet- ‏شرحه) سيدرك المهرة في الفن أن نظام ناقل الإظهار يعتمد على تلك العوامل مثل اختيار‎ Yo ‏المطلوب؛ إلخ. يمكن إدخال نواقل‎ protein ‏مستوى إظهار‎ (Lelia ‏الخلية العائلة المراد‎
Ye peptides ‏أو‎ proteins ‏تتضمن‎ «peptides ‏أو‎ proteins ‏الإظهار في خلايا عائلة لتنتج بذلك‎ ‏حسب الوصف هنا.‎ nucleic acids ‏اندماج؛ تشفرها‎ ‏يوفر جانب آخر من الاختراع الحالي خلايا عائلة يتم فيها إدخال ناقل إظهار مُخلق. قد‎ ‏خلية خميرة؛‎ (Dl) ‏أو خلية سوية النواة‎ (B-coli ‏تكون الخلية العائلة خلية بدائية النواة (مثلاء‎ ‏ناقل في خلايا بدائية أو سوية النواة‎ DNA ‏حشرة؛ أو ثديية (مثلا خلايا 0110)). يمكن إدخال‎ © ‏خارجي ثابت‎ DNA ‏خارجي تقليدية. بالنسبة لإدخال‎ DNA ‏من خلال تقنيات تحويل أو إدخال‎ ‏خارجي‎ DNA ‏في خلايا ثديية؛ من المعلوم أنه؛ اعتمادا على ناقل الإظهار وتقنية إدخال‎ ‏دخيل في جينومها.؛ لتحديد‎ DNA ‏المستخدمين؛ يقوم فقط جزء صغير من الخلايا بتكامل‎ ‏وانتقاء هذه البنيات التكاملية؛ يتم عامة إدخال جين يشفر دلالة يمكن انتقاؤها (مثلا؛ لمقاومة‎ ‏مضادات حيوية) في الخلايا العائلة إلى جانب الجين الهام. تتضمن الدلالات المفضلة القابلة‎ ٠ ‏إن الخلايا‎ .methotrexate 5 hygromycin )6418 ‏للانتقاء تلك التي توفر مقاومة لعقاقير؛ مثل‎ ‏الداخل يمكن تحديدها بانتقاء عقار‎ nucleic acid ‏خارجي بدرجة ثابتة مع‎ DNA ‏المستقبلة‎ ‏فإن خلايا مدمج بها جين الدلالة القابلة للانتقاء يمكن أن تظل حية؛ بينما أن الخلايا‎ Ol) ‏الأخرى تموت).‎ ‏تحضير الأجسام المضادة‎ ١ ‏من أي حيوان ينتج‎ (JB ‏اشتقاق الأجسام المضادة غير آدمية متوافرة» على سبيل‎ (Say ‏حيوان قارض؛ أرنب؛ ماعزء قردء أو حيوان رئيس (مثل قرد (مثلاء قرد‎ «lh ‏جسم مضادء مثل‎ ‏سينومولجس أو ريسس) أو القردة العليا (مثل» شيمبانزي). يمكن استخدام الأجسام المضادة‎ ‏غير آدمية؛ مثلا؛ في مزرعة خلية في المعمل وتجسيدات معتمدة على مزرعة خلية؛ أو أي‎ ‏استخدام آخر لا تحدث فيه استجابة مناعية للجسم المضاد أو تكون غير ملحوظة؛ يمكن‎ Ye ‏منعهاء ليست هامة؛ أو مطلوبة. في تجسيدات خاصة من الاختراع الحالي؛ يمكن إنتاج أجسام‎ ‏قد تكون‎ .Dkk-1 ‏من‎ carboxy ‏كامل الطول أو مع نصف طرفي‎ Dkk-1 ‏مضادة بتحصين مع‎ ‏الأجسام المضادة عديدة النسخ؛ أحادية النسخ؛ أو قد تكون مصنعة في خلايا عائلة بإظهار‎ ‏مُخلق.‎ DNA ‏يمكن تحضير أجسام مضادة آدمية كليا حسب الوصف أعلاه بتحصين حيوانات طفرية‎ Yo ‏مناعي آدمي أو بانتقاء مكتبة إظهار بلعم تظهر ذخيرةٍ أجسام‎ globulin ‏تحتوي على مواقع‎ ‏مضادة آدمية.‎
نف يمكن إنتاج أجسام مضادة أحادية النسخ ‎(Mabs)‏ من الاختراع الحالي بتشكيلة من التقنيات» متضمنة طريقة ‎mAb‏ التقليدية؛ مثلا؛ تقنية تهجين خلية جسدية قياسية ‎Kohler and Milstein, (1975), Nature 256:495. |‏ بطريقة بديلة؛ يمكن استعمال تقنيات أخرى لإنتاج أجسام مضادة أحادية النسخ؛ ‎Mie‏ التحويل © الفيروسي أو المولد لورم لخلايا ليمفاوية ‎JB‏ إن نظام الحيوان المناسب لتحضير أورام هجينة هو النظام ‎(lil‏ وهو ‎shal‏ راسخ بصورة جيدة جدًا. إن بروتوكولات التحصين وتقنيات عزل خلايا طحال محصنة للاندماج معروفة جيدا في الفن. بالنسبة لتلك الإجراءات؛ تندمج ‎B WA‏ من ‎Gh‏ محصنة مع قرين اندماج مناسب خالد البقاء؛ ‎Jie‏ خط خلية ورم شوكي فأري. عند ‎ella‏ يمكن تحصين قوارض أو ثدييات ‎(al‏ بدلا من الفثران ويمكن أن تندمج خلايا ‎B‏ من ‎٠‏ تلك الحيوانات مع خط خلية الورم النخاعي الفأري لتكوين أورام هجينة. بطريقة بديلة؛ يمكن استخدام خط خلية ورم نخاعي من مصدر بخلاف الفأر. إن إجراءات الاندماج لتحضير أورام هجينة معروفة جيدًا أيضا. تتكون أجسام مضادة وحيدة السلسلة المتوافرة بتوصيل أجزاء مجال سيطرة متغير سلسلة ثقيلة وخفيفة (منطقة ‎(By‏ من خلال قنطرة ‎amino acid‏ (واصل ‎peptide‏ قصير)؛ لتنتج سلسلة ‎polypeptide ٠‏ واحدة. يمكن تحضير 708 وحيدة السلسلة تلك ‎(scFvs)‏ بدمج ‎DNA‏ يشفر واصل ‎peptide‏ بين ‎DNAs‏ تشفر الاثنين ‎polypeptide‏ لمجال السيطرة المتغير ‎VL)‏ و711). يمكن أن تتضاعف ‎polypeptides‏ الناتجة لتكوين ‎monomers‏ تربط ‎alge‏ مضادء أو يمكن أن تشكل ‎multimers‏ (مثلاء ‎«trimers «dimers‏ أو ‎«(tetramers‏ اعتمادا على طول الواصل المرن بين مجالي السيطرة المتغيرين: ‎(Kortt et al., (1997), Prot.
Eng. 10:423; Kortt et al., (2001), Biomol.
Eng. 18:95- Ye‏ .)108 باتحاد ‎polypeptides‏ مختلفة تشمل ‎«VH 3 VL‏ يمكن تكوين ‎multimeric scFvs‏ ترتبط مع ‎epitopes‏ مختلفة )18:31-40 ‎et al., (2001), Biomol.
Eng.‏ سماع080. تتضمن تقنيات مطورة لإنتاج أجسام مضادة وحيدة السلسلة تلك الموصوفة في: براءة الاختراع الأمريكية رقم: ‎¢£9¢TVYYA Yo‏ vy
Bird, 1988, Science 242:423; Huston et al., (1988), Proc. Natl. Acad. Sci.
U.S.A. 85:5879; Ward et al., (1989), Nature 334:544, de Graaf et al., (2002),
Methods Mol Biol. 178:379-387. ‏إن الأجسام المضادة المتوافرة هنا المنتمية لنوع فرعي يمكن تغيرها إلى الأجسام المضادة‎ ‏أجسام‎ IgG ‏من نوع فرعي مختلف باستخدام طرق تحويل نوع فرعي. لذلك؛ يمكن أن تشتق‎ © ‏جسم مضاد؛ على سبيل المثال؛ والعكس بالعكس. تسمح تلك التقنيات‎ IgM ‏مضادة من‎ ‏بتحضير أجسام مضادة جديدة لها خواص ربط مولد الجسم المضاد مضاد معين (جسم مضاد‎ ‏الأصلي)؛ لكن تظهر أيضا خواص حيوية ملازمة لنوع مماثل أو نوع فرعي جسم مضاد‎ ‏مُخلق. يمكن استعمال‎ DNA ‏مختلف عن ذلك الجسم المضاد الأصلي. يمكن استخدام تقنيات‎ ‏يشفر‎ DNA Sle ‏خاصة في تلك الإجراءات؛‎ alias ‏جسم‎ polypeptides ‏متسوخ يشفر‎ DNA ٠
Lantto et al., ‏مجال السيطرة الثابت من جسم مضاد النوع المماثل المطلوب. انظرء مثلا:‎ .)2002(, Methods Mol. Biol. 178:303-316 ‏إضافة لذلك؛ فإن تقنيات اشتقاق الأجسام المضادة لها خواص مختلفة (أي؛ انجذابات‎ ‏مختلفة لمولد مضاد ترتبط معه) معروفة أيضا. تقنية كتلك؛ يشار إليها تعديل سلسلة؛ تشمل‎ ‏مناعي على سطح جرثومة بكتيرية خيطية؛‎ globulin ‏إظهار مخزون جين مجال سيطرة متغير‎ ٠ ‏يشار إليها غالبا إظهار بلعم. لقد تم استخدام تعديل سلسلة لتحضير الأجسام المضادة عالية‎ ‏حسب وصف:‎ chapten 2-phenyloxazol-5-one ‏الانجذاب لأجل‎
Marks et al., (1992), BioTechnology 10:779. ‏(وتعديلات‎ ١ ‏يمكن إجراء تعديلات واقية للسلاسل الثقيلة والخفيفة الموصوفة في جدول‎ ‏له سمات مميزة‎ Dkk-1 ‏التشفيرية) لإنتاج جسم مضاد مضاد‎ amino 5 Jal ‏مقابلة‎ vo ‏وظيفية وكيميائية حيوية. إن طرق إجراء تلك التعديلات موصوفة أعلاه.‎ ‏يمكن إضافيا تعديل الأجسام المضادة والأجزاء الوظيفية منه طبقا للاختراع بطرق كثيرة.‎ (pegylated) polyethylene glycol ‏فقد تتحد مع‎ (dade ‏عند الاستخدام لأغراض‎ Sle ‏بطريقة بديلة؛ يمكن أن تندمج‎ protein ‏لإطالة نصف العمر في المصل أو لزيادة توصيل‎ ‏من جزيء جسم مضاد‎ Fe ‏من الجسم المضاد الموضوع أو أجزاء منها مع المنطقة‎ V ‏المنطقة‎ Yo ‏المستخدمة لهذا الغرض معدلة بحيث لا تربط مكمل؛ وبذلك يقل‎ Fe ‏مختلف. قد تكون المنطقة‎ ‏الاندماج كعامل علاجي. إضافة‎ protein ‏احتمال حث تحلل خلية في مريض عند استخدام‎ yy ‏مصل آدمي‎ albumin ‏لذلك؛ قد تتحد الأجسام المضادة الموضوعة أو أجزاء وظيفية منها مع‎ ‏لزيادة نصف العمر في المصل للجسم المضاد أو جزءٍ منه. إن قرين اندماج آخر مفيد من‎ ‏له القدرة‎ TTR ‏إن‎ .transthyretin (TTR) ‏الاختراع من أجل أجسام مضادة أو أجزاء منها هى‎ ‏جسم مضاد‎ TTR ‏اندماج جسم مضاد-‎ protein ‏وبذلك يمكن أن يشكل‎ ctetramer ‏على تكوين‎ ‏عديد التكافؤ يزيد نهم الارتباط له.‎ ‏يمكن إجراء تعديلات جوهرية في السمات الوظيفية و/أو الكيميائية الحيوية‎ Aly ‏بطريقة‎ ‎amino acid ‏من أجل الأجسام المضادة أو الأجزاء الموصوفة هنا بإجراء استبدالات في ترتيب‎ ‏للسلاسل الثقيلة والخفيفة المختلفة بدرجة ملحوظة في تأثيرها على استبقاء (أ) بناء الهيكل‎ ‏كهيئة صفحة أو حلزونية؛ (ب) شحنة أو صد‎ Ole ‏الأساسي الجزيئي في منطقة الاستبدال؛‎ ‏الماء للجزيء عند المكان المستهدف؛ أو (ج) ضخامة السلسلة الجانبية. قد يشمل "استبدال‎ ٠ ‏أصلي مع متخلف غير أصلي له تأثير‎ amino acid ‏واقي" استبدال متخلف‎ amino acid ‏عند ذلك المكان. إضافة‎ amino acid ‏ضئيل أو ليس له تأثير على قطبية أو شحنة متخلف‎ ‏حسب الوصف‎ alanine ‏مع‎ polypeptide ‏يمكن أيضا استبدال أي متخلف أصلي في‎ cella) .alanine ‏مسبقا لتكوين فطرة ماسح‎ ‏(سوا ء واقية أو غير واقية) لأجسام مضادة الموضوع‎ amino acid ‏يمكن إجراء استبدالات‎ Vo ‏لتحديد‎ amino acid ‏بواسطة المهرة في الفن بتقنيات روتينية. يمكن استخدام استبدالات‎ ‏أو لزيادة أو تقليل انجذاب الأجسام المضادة‎ (Lin ‏متخلفات هامة للأجسام المضادة المتوافرة‎
Dkk-1 ‏هذه من أجل 21061 آدمي أو لتعديل انجذاب الارتباط من أجل أجسام مضادة مضاد‎ ‏أخرى موصوفة هنا.‎
Dkk-1 ‏إظهار أجسام مضادة مضاد‎ ٠ ‏يمكن تحضير أجسام مضادة مضاد 0106-1 وأجزاء وظيفية مناعية بأي من تشكيلة تقنيات‎ dala ‏تقليدية. على سبيل المثال؛ يمكن إنتاج أجسام مضادة مضاد 0106-1 بأنظمة إظهار‎ ‏باستخدام أي تقنية معروفة في الفن. انظر؛ مثلا:‎
Monoclonal Antibodies, Hybridomas: A New Dimension in Biological Analyses,
Kennet et al. (eds.) Plenum Press, New York (1980); and Antibodies: A Laboratory Yo
Manual, Harlow and Lane (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring
Harbor, N.Y. (1988).
يمكن إظهار أجسام مضادة من الاختراع الحالي في خطوط خلية ورم هجين أو في خطوط خلية بخلاف الأورام الهجينة. يمكن استخدام بنيات إظهار تشفر الأجسام المضادة لتحويل خلية عائلة ثديية؛ حشرة أو ميكروبية. يمكن إجراء التحويل بأي طريقة معروفة لإدخال ‎polynucleotides‏ في خلية عائلة؛ متضمن؛ ‎Mia‏ تعبثة ‎polynucleotide‏ في فيروس أو ملتهم © جراثيم وتحويل خلية عائلة مع البنية بإجراءات استقبال ‎DNA‏ خارجي معروفة في ‎all‏ حسب التمثيل بواسطة براءة الاختراع الأمريكية رقم ‎ETAT‏ رقم 44917646 رقم 451 6746؛ رقم £00 909؛. سوف يعتمد إجراء التحويل الأمثل المستخدم على نوع الخلية العائلة المراد تحويلها. إن طرق إدخال ‎polynucleotides‏ مغايرة في خلايا ثديية معروفة جيدا في الفن وتتضمن» لكن بدون تحديد؛ استقبال ‎DAN‏ خارجي من خلال ‎dextran‏ ترسيب ‎calcium‏ ‎phosphate ٠‏ استقبال ‎DNA‏ خارجي من خلال ‎cpolybrene‏ اندماج ‎¢protoplast‏ تثقيب كهربي؛ كبسلة ‎polynucleotide(s)‏ في أجسام دهنية؛ خلط ‎nucleic acid‏ مع دهون موجبة الشحنة؛ء وحقن دقيق مباشر لأجل ‎DNA protein‏ في ‎-nuclei‏ ‏تشمل نموذجيا بنيات إظهار مُخلقة من الاختراع جزيء ‎nucleic acid‏ يشفر ‎polypeptide‏ ‏يشمل واحدة أو أكثر مما يلي: منطقة ثابتة سلسلة ثقيلة؛ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة؛ منطقة ‎١‏ ثابتة سلسلة خفيفة؛ منطقة متغيرة سلسلة خفيفة؛ واحد أو أكثر من ‎CDRs‏ من سلسلة خفيفة أو ثقيلة من جسم مضاد مضاد 0106-1. يتم إدخال ترتيبات ‎nucleic acid‏ هذه في ناقل إظهار ملاثم بتقنيات ربط قياسية. ينتقى الناقل نموذجيا ليكون وظيفيا في الخلية العائلة الخاصة المستعملة (أي؛ يكون الناقل متوائما مع آلية الخلية العائلة؛ يسمح بحدوث تكبير و/أو إظهار للجين). في بعض التجسيدات؛ تستخدم نواقل تستعمل اختبارات تكملة ‎ej -protein‏ باستخدام ‎٠‏ مخبرين ‎dihydrofolate reductase Jie ¢protein‏ (انظرء مثلا؛ براءة الاختراع الأمريكية رقم 17764 المندمجة هنا كمرجع). يمكن شراء نواقل إظهار قياسية؛ ‎Ole‏ من: ‎Invitrogen Life Technologies or BD Biosciences (formerly "Clontech™).‏ تتضمن نواقل أخرى مفيدة لنسخ وإظهار أجسام مضادة وأجزاء من الاختراع تلك الموصوفة في: ‎Bianchi and McGrew, Biotech.
Biotechnol.
Bioeng. 84:439-44, (2003) Yo‏ المندمج هنا كمرجع. إن نواقل إظهار إضافية قياسية موضحة؛ ‎Sle‏ في:
vo
Methods Enzymol, vol. 185 (D. V. Goeddel, ed.), (1990), New York: Academic
Press. ‏نموذجيا؛ سوف تحتوي نواقل إظهار مستخدمة في أي من الخلايا العائلة ترتيبات لاستبقاء‎ ‏خارجية. إن هذه الترتيبات؛ المشار‎ nucleotide ‏أو الفيروس ولنسخ وإظهار ترتيبات‎ plasmid nucleotide ‏'ترتيبات تفرع جانبي" تتضمن نموذجيا واحد أو أكثر من ترتيبات‎ Jie ‏إليها كليا‎ © ‏متصلة تشغيليا التالية: محثة؛ واحد أو أكثر من ترتيبات معززة؛ ترتيب إنهاء نسخ؛ مصدر‎ ‏كامل يحتوي على مكان جدل معطى ومستلم؛ ترتيب تشفير ترتيب قائد‎ intron ‏نسخ؛ ترتيب‎ ‏منطقة واصل متعدد‎ polyadenylation ‏ترتيب‎ cribosome ‏مكان ربط‎ polypeptide ‏لإفراز‎ ‏المراد إظهاره» وعنصر دلالة يمكن انتقائها.‎ polypeptide ‏المشفر لأجل‎ nucleic acid ‏لإدخال‎ ‏يقع‎ oligonucleotide ‏اختيارياء قد يحتوي الناقل ترتيب- يشفر "جزء ملحق"؛ أي» جزيء‎ ١ ‏(مثل‎ polyHis ‏المشفر‎ oligonucleotide ‏عند النهاية ©' أو “" من ترتيب التشفير؛ ترتيب‎ ‏فيروس أنفلونزا)؛ أو‎ hemaglutinin) HA (FLAG® Jie ‏أو 'جزء ملحق" آخر‎ ¢(hexaHis ‏الموجودة لها أجسام مضادة متوافرة تجاريا. يندمج هذا الجزء الملحق نموذجيا مع‎ »06 ‏الجسم المضاد عند الإظهار؛ ويمكن أن يخدم كوسيلة لتنقية بانجذاب الجسم المضاد‎ protein ‏بتحليل كروماتوجرافي عمودي‎ Qa ‏من الخلية العائلة؛ يمكن أن تتم التنقية بالانجذاب؛‎ ٠ ‏باستخدام الأجسام المضادة مضادة للجزءٍ الملحق كمادة بينية للانجذاب. اختيارياء يمكن بعد‎ peptidases ‏بوسائل عديدة مثل استخدام‎ Al ‏ذلك إزالة الجزء الملحق من الجسم المضاد‎ ‏خاصة للفصل.‎ ‏قد تكون ترتيبات التفرع الجانبي في نقل الإظهار متشابهة (أي؛ من نفس النوع و/أو‎ ‏العائلة)؛‎ Adal) ‏بخلاف نوع أو سلالة‎ HAT ‏الخلية العائلة)» مغايرة (أي؛ من نوع‎ Jie ‏السلالة‎ ٠ ‏هجينة (أي؛ اتحاد من ترتيبات تفرع جانبي من أكثر من مصدر واحد)؛ مصنعة أو أولية.‎ ‏حسب ذلك؛ فقد يكون مصدر ترتيب تفرع جانبي هو أي كائن حي بدائي النواة أو سوي النواة؛‎ ‏أو أي نبات؛ بشرط أن يكون ترتيب التفرع الجانبي وظيفيا في؛‎ clay ‏أي كائن فقاري أو‎ ‏ويمكن تنشيطه بواسطة» آلية الخلية العائلة.‎ ‏يمكن الحصول على ترتيبات تفرع جانبي من الاختراع مفيدة في النواقل بأي من الطرق‎ Yo ‏الكثيرة المعروفة جيدا في الفن. نموذجياء فإن ترتيبات التفرع الجانبي المفيدة هنا يتم تحديدها‎ ‏داخلي تحديد ويمكن لذلك عزلها من مصدر النسيج‎ nuclease ‏مسبقا بتخطيط و/أو بهضم‎
الأمثل بواسطة ‎nuclease‏ تحديد داخلية ملائمة. في بعض الحالات؛ قد يكون ترتيب ‎nucleotide‏ الكامل لترتيب تفرع جانبي معروفا. ‎cla‏ قد يصنع ترتيب التفرع الجانبي باستخدام الطرق الموصوفة هنا لتصنيع أو نسخ ‎-nucleic acid‏ سواء كان كل أو فقط قسم من ترتيب التفرع الجانبي معروفاء فمن الممكن الحصول عليه © باستخدام ‎PCR‏ و/أو بفحص مكتبة جينومية مع ‎oligonucleotide‏ مناسب و/أو جزءٍ ترتيب تفرع جانبي من نفس النوع أو آخر. عندما لا يكون ترتيب التفرع الجانبي معروفاء يمكن عزل ‎53a‏ من ‎DNA‏ يحتوي على ترتيب تفرع جانبي من قطعة أكبر من ‎DNA‏ قد تحتوي؛ مثلاء تريب تشفير أو أيضا جين آخر أو جينات أخرى. يمكن أن يتم العزل بهضم ‎nuclease‏ تحديد داخلي لإنتاج جزء ‎DNA‏ الأمثل ‎Logie‏ بعزل بتنقية هلام ‎cagarose‏ تحليل كروماتوجرافي ‎٠‏ عمودي ‎(Chatsworth, CA) Qiagen®‏ أو طرق أخرى معروفة لدى الصانع الماهر. إن انتقاء إنزيمات مناسبة لتحقيق هذا الغرض سيتضح تماما لمن له مهارة عادية في الفن. إن مصدر نسخ هو نموذجيا جزء من تلك تواقل الإظهار بدائية النواة خاصة المباعة تجارياء ويساعد المصدر في تكبير الناقل في الخلية العائلة. إذا كان الناقل موضع الاختيار لا يحتوي على مصدر مكان نسخ؛ فمن الممكن تصنيعه كيميائيا اعتمادا على ترتيب معروف»؛ ‎Ve‏ وربطة في الناقل. على سبيل المثال؛ فإن مصدر النسخ من ‎pBR322 (New plasmid‏ ‎England Biolabs, Beverly, MA)‏ مناسب لمعظم البكتريا سالبة الجرام» ومصادر فيروسية عديدة (مثلاء 0م ورم متعدد؛ فيروس غديء فيروس التهاب الفم الحويصلي (78177)؛ أو فيروسات ورم حليمي مثل ‎HPV‏ أو ‎(BPV‏ مفيدة لنسخ نواقل في خلايا ثديية. بصفة ‎ale‏ ‏فإن المصدر الثديي النسخ غير مطلوب لنواقل الإظهار الثديية (مثلاء يستخدم غالبا مصدر ‎٠‏ 8740 فقط لأنه يحتوي أيضا المحث المبكر الفيروس). سوف يحتوي الإظهار ونواقل النسخ من الاختراع نموذجيا محث يدركه الكائن الحي العائل ومتصل تشغيليا مع ‎nucleic acid‏ المشفر الجسم المضاد مضاد 2106-1 أو أجزاء وظيفية مناعية منها. إن المحثات هي ترتيبات غير منسوخة تقع في تيار صاعد (أي؛ 0( لأجل ‎codon‏ البداية للجين البنائي (عامة في حدود حوالي ‎٠٠١‏ إلى ‎٠٠٠١‏ زوج قاعدة) تتحكم في ‎Yo‏ نسخ الجين البنائي. تقسم المحثات عامة إلى واحد من صنفين: محثات قابلة للحث ومحثات تكوينية. ‎fag‏ المحثات القابلة للحث مستويات زائدة من النسخ من ‎DNA‏ تحت تحكمها استجابة لبعض التغير في شروط المزرعة؛ ‎Jie‏ وجود أو غياب مادة غذائية أو تغير في درجة الحرارة.
yy ‏يبدأ إنتاج منتج لجين بصورة مستمرة؛ بحيث»؛ بمعنى»‎ ‘ Al ‏إن المحثات التكوينية؛ على صعيد‎ ‏مع تحكم ضئيل أو عدم تحكم في إظهار الجين. هناك عدد كبير من المحثات تدركها تشكيلة‎ ‏يشفر‎ DNA ‏العائلة الممكنة؛ معروفة جيدا. إن المحث المناسب متصل تشغيليا مع‎ WAY ‏من‎ ‏المصدر بهيضم إنزيم أو بتكبير المحث‎ DNA ‏بإزالة المحث من‎ Dkk-1 ‏مضاد‎ alias ‏جسم‎ ‏تحديد وإدخال ترتيب المحث المطلوب في الناقل.‎ polymerase ‏بواسطة تفاعل سلسلة‎ © ‏إن المحثات المناسبة للاستخدام مع عوائل مميزة معروفة أيضا جيدا في الفن. تستخدم‎ ‏معززات مميزة بدرجة مفيدة مع محثات مميزة. إن المحثات المناسبة للاستخدام مع خلايا عائلة‎ ‏ثديية معروفة جيدا وتتضمن؛ لكن بدون تحديد؛ تلك الناتجة من جينومات الفيروسات مثل‎ ‏فيروس ورم‎ oY ‏فيروس ورم متعدد؛ فيروس جديري الدجاج؛ فيروس غدي (مثل فيروس غدي‎ ‏حليمي بقري؛ فيروس سرقوم طيري» فيروس مضخم للخلاياء فيروسات ارتجاعية؛ فيروس‎ ٠ ‏تتضمن محثات ثديية أخرى‎ Simian Virus 40 (SV40) ‏الالتهاب الكبدي ب؛ ويفضل أكثر‎ .actin ‏مغايرة؛ مثلاء محثات صدمة حرارة ومحث‎ dud ‏مناسبة محثات‎ ‏إن محثات معينة تفيد في أداء نواقل إظهار مخلقة من الاختراع تتضمن؛ لكن دون‎
SV40 ‏اقتصار؛ منطقة حث مبكرة‎ (Benoist and Chambon (1981) Nature 290: 304-10); Yo
Rous ‏المحث الموجود في التكرار الطرفي الطويل "' من فيروس سرقوم‎ «CMV ‏المحث‎ ‎(Yamamoto et al., (1980), Cell 22:787-797); ‏القوباء‎ thymidine kinase ‏محث‎ ‎(Wagner et al., (1981), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78:1444-1445); metallothionine ‏ترتيبات تنظيمية من جين‎ ٠ (Prinster et al., (1982), Nature 296:39-42); beta-lactamase ‏نواقل إظهار بدائية النواه متل محث‎ (Villa-Kamaroff et al., (1978), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 75:3727-3731); ‏من‎ «(DeBoer et al., (1983), Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 80:21-25) tac ‏أو محث‎ ‏مناطق التحكم النسخي الحيوانية التالية؛ التي تظهر خصوصية نسيج وتستعمل في‎ Wal ‏المهم‎ Yo ‏النشطة في خلايا عنبية بنكرياسية:‎ elastase] ‏حيوانات طفرية: منطقة تحكم جين‎
VA
(Swift et al., (1984), Cell 38:639-646; Ornitz et al., (1986), Cold Spring Harbor
Symp. Quant. Biol. 50:399-409; MacDonald, (1987), Hepatology 7:425-515); ‏بنكرياسية:‎ beta ‏منطقة تحكم جين الأنسولين النشطة في خلايا‎ (Hanahan, (1985), Nature 315:115-122); ‏منطقة تحكم فيروس ورم ثديي فأري النشطة في خلايا خفيفة؛ ثدي؛ شبيهة ليمفاوية وماست‎ © ‏النشطة في الكبد:‎ albumin ‏منطقة تحكم جين‎ ¢(Leder et al., (1986), Cell 45:485-495) alpha-feto ‏منطقة تحكم جين‎ «(Pinkert et al., (1987), Genes and Devel. 1 :268-276) ‏النشطة في الكبد‎ protein (Krumlauf et al., (1985), Mol. Cell. Biol. 5:1639-1648; Hammer et al., (1987),
Science 253:53-58); Ye ‏النشطة في الكبد‎ trypsin ‏مضاد‎ alpha 1 ‏منطقة تحكم جين‎ (Kelsey et al., (1987), Genes and Devel. 1:161-171); ‏النشطة في خلايا شبيهة نخاعية‎ beta-globin ‏منطقة تحكم جين‎ (Mogram et al., (1985), Nature 315:338-340; Kollias et al., (1986), Cell 46:89-94); ‏تفرع الخلية في المخ:‎ ALE ‏النشطة في خلايا‎ myelin ‏قاعدي‎ protein ‏منطقة تحكم جين‎ ١ (Readhead et al., (1987), Cell 48:703-712); ‏النشطة في عضلة هيكلية‎ myosin ‏منطقة تحكم جين سلسلة خفيفة-؟ في‎ (Sani, (1985), Nature 314:283-286); hypothalamus ‏ومنطقة تحكم جين هرمون إطلاق انتحائي للغدد التناسلية النشطة في‎ (Mason et al., (1986), Science 234:1372-1378). Ye ‏مناعي النشطة في خلايا ليمفاوية‎ globulin ‏وعلى الأخص المنطقة المتحكمة في جين‎ (Grosschedl et al. (1984) Cell 38: 647-58; Adames et al. (1985) Nature 318: 533- 38; Alexander et al. (1987) Mol. Cell Biol. 7: 1436-44). ‏يمكن إدخال ترتيب معزز في الناقل لزيادة النسخ في خلايا سوية النواة أعلى لأجل‎ ‏يشفر جسم مضاد لمضاد 1106-1 أو جزء وظيفي مناعي منه من الاختراع‎ nucleic acid Yo ‏زوج قاعدة‎ ٠٠-٠١ sa sale (DNA ‏من‎ Cis— jis ‏الحالي. إن المعززات هي عناصر‎ (Olly ‏في الطول؛ تؤثر على المحث لزيادة النسخ. إن المعززات لا تعتمد نسبيا على الاتجاه‎ va ‏وموجودة عند الأماكن ©' و" لوحدة النسخ. هناك ترتيبات معززة كثيرة متوافرة من جينات ثديية‎ ‏يستخدم ترتيب‎ (insulin s alpha-feto-protein «albumin elastase ¢globin ‏معروفة (مثلاء‎ ‏معزز من فيروس. إن معزز 5740؛ معزز محث مبكر فيروس مضخم للخلايا؛ معزز ورم‎ ‏متعدد؛ ومعززات فيروس غدي هي عناصر تعزيز تمثيلية لتنشيط المحثات سوية النواة. برغم‎ ‏نموذجيا‎ aly ‏فإنه‎ 0001616 acid ‏مكان ©' أو ' للجزيء‎ Ly Jal ‏أن المحث قد يتواجد في‎ ‏عند المكان *' من المحث.‎ ‏في نواقل الإظهار» إن ترتيب إنهاء النسخ يقع نموذجيا " لطرف منطقة تشفير‎ ‏ويخدم لإنهاء النسخ. يكون ترتيب إنهاء النسخ المستخدم للإظهار في خلايا‎ polypeptide ‏غني ©-6 متبوعا بترتيب 0017-1. برغم أن الترتيب ينسخ‎ sha ‏بدائية النواة نموذجيا هو‎ ‏بسهولة من مكتبة أو يباع أيضا تجاريا كجزءٍ من ناقل؛ فمن الممكن تصنيعه أيضا بسهولة‎ ٠ ‏مثل تلك الموصوفة هنا.‎ nucleic acid ‏بطرق تكوين‎ ‏ضروري لإبقاء حياه ونمو خلية عائلة‎ protein ‏للانتقاء يشفر‎ ALE ‏إن عنصر جين دلالة‎ proteins ‏نامية في وسط مزرعة انتقائي. تستخدم جينات دلالات انتقاء في نواقل إظهار تشفر‎ ‏أو‎ dtetracycline ampicillin ‏أخرى؛ مثلا‎ toxins ‏توفر مقاومة لمضادات حيوية أو‎ (00 ‏لخلايا عائلة بدائية النواه؛ (ب) تكمل النقص في التغذية الأوكسينية لخلية؛ أو‎ kanamycin ٠ ‏(ج) توفر مواد غذائية حرجة غير متوافرة من أوساط معقدة. أمثلة على دلالات قابلة للانتقاء‎ ‏يمكن‎ tetracycline ‏وجين مقاومة‎ campicillin ‏جين مقاومة‎ kanamycin ‏تشمل جين مقاومة‎ ‏للانتقاء في كل من الخلايا العائلة بدائية‎ bacterial neomycin ‏أيضا استخدام جين مقاومة‎ ‏وسوية النواه.‎ ‏للانتقاء لتكبير الجين الذي سيتم إظهاره. إن التكبير هو‎ ALE ‏يمكن استخدام جينات أخرى‎ To ‏إجراء حيث الجينات التي لا يمكن إظهارها في نسخة مفردة عند مستويات عالية تكفي للسماح‎ ‏بحياة ونمو الخلايا تحت شروط انتقاء معينة يعاد تكرارها ترادفيا داخل كروموسومات أجيال‎ ‏تالية أو خلايا مخلقة. تتضمن أمثلة دلالات مناسبة قابلة للانتقاء للخلايا الثديية جينات‎ ‏توضع مواد تحول‎ .promoterless thyrnidine kinase ‏و‎ dihydrofolate reductase (DHFR) ‏خلية ثديية تحت ضغط انتقاء حيث تكون الخلايا المتحولة فقط متكيفة بدرجة مميزة للبقاء على‎ Yo ‏قيد الحياة بفعل الجين القابل للانتقاء الموجود في الناقل. إن ضغط الانتقاء ينتج من زراعة‎ ‏الخلايا المتحولة تحت شروط يكون فيها تركيز عامل الانتقاء في الوسط متزايدا بدرجة متعاقبة؛‎
Ae ‏فإن‎ cig hall ‏بذلك يسمح بنجاة تلك الخلايا فقط التي فيها تم تكبير جين الانتقاء. تحت هذه‎ ‏يشفر جسم مضاد من الاختراع؛» هو مساعد مكبر مع‎ DNA Jie ‏مجاور لجين الانتقاء؛‎ DNA
DNA ‏من‎ Dkk-1 alias polypeptide ‏جين الاتتقاء. نتيجة لذلك؛ تصنع كميات زائدة من‎ ‏المكبر.‎ ‎Shine- ‏ويتميز بترتيب‎ mRNA ‏ضروري عادة لابتداء ترجمة‎ ribosome ‏إن مكان ربط‎ ° ‏(سويات النواة). يقع العنصر نموذجيا “" للمحث‎ Kozak ‏(بدائيات النواة) أو ترتيب‎ Dalgamo ‏المراد إظهاره.‎ polypeptide ‏و©' لترتيب التشفير لأجل‎ ‏سوية‎ Alle ‏مطلوبة في نظام إظهار خلية‎ glycosylation ‏في بعض الحالات؛ عندما تكون‎ ‏أو الإنتاجية. على‎ glycosylation ‏النواة؛ يمكن التعامل مع ترتيبات سلفية مختلفة لتحسين‎ ‏أو إضافة‎ (ala ‏إشارة‎ peptide ‏لأجل‎ peptidase ‏يمكن تعديل مكان فصل‎ «JEN ‏سبيل‎ ٠ ‏النهائي؛‎ protein ‏قد يكون في منتج‎ glycosylation ‏أيضا على‎ igs ‏ترتيبات أولية؛ التي قد‎ amino ‏واحد أو أكثر من‎ ٠ ‏الناضج)‎ protein ‏الأول من‎ amino acid ‏في المكان-١ (بالنسبة ل‎ ‏الإضافية العرضة للإظهارء والتي قد لا تتم إزالتها بصورة كلية. على سبيل المثال؛ قد‎ 5 ‏موجودة في مكان فصل‎ amino acid ‏أو " من متخلفات‎ ١ ‏النهائي‎ protein ‏يكون في منتج‎ ‏بطريقة بديلة؛ فإن استخدام بعض أماكن فصل‎ camino ‏مرتبطة مع النهاية-‎ 0660008866 ٠ ‏المطلوب؛ إذا كان‎ polypeptide ‏الإنزيم قد يؤدي إلى إنتاج شكل مشذب بدرجة بسيطة ل‎ ‏الناضج.‎ polypeptide ‏الإنزيم يفصل عند تلك المنطقة في‎ ‏عندما يفتقد ناقل إظهار متاح تجاريا بعض ترتيبات التطويق المطلوبة مثل الموصوف‎ ‏يمكن تعديل الناقل بواسطة ربط تلك الترتيبات بصورةٍ مفردة داخل الناقل. بعد اختيار‎ code
Dkk-1 ‏يشفر جسم مضاد مضاد‎ nucleic acids ‏الناقل وتعديله كما هو مطلوب؛ يدخل جزيء‎ ٠ ‏أو جزء وظيفي مناعي منه داخل الموقع الملائم من الناقل.‎
Lelie ‏يدخل ناقل مكتمل يشمل ترتيبات تشفر الجسم المضاد من الاختراع أو جزء وظيفي‎ ‏إظهار من أجل‎ Jil ‏إن تحويل‎ polypeptide ‏منه في خلية عائلة مناسبة لتكبير و/أو إظهار‎ ‏الجسم المضاد مضاد 2106-1 وأجزاء وظيفية مناعية منها إلى خلية عائلة منتقاة يمكن تحقيقه‎ ‏مسامية كهربية؛‎ calcium chloide ‏بطرق معروفة جيدا تتضمن طرق مثل نقل عدوى» عدرى»‎ YO ‏أو تقنيات أخرى معروفة. إن الطريقة‎ (DEAB-dextran ‏حقن دقيق؛ عدوى دهنية؛ طريقة‎
A
‏المنتقاة سوف تكون جزئيا وظيفة نوع الخلية العائلة المراد استخدامها. إن هذه الطرق وطرق‎ ‏أخرى مناسبة معروفة جيدا للصانع الماهر.‎ ‏إن الخلية العائلة المتحولة؛ عند زراعتها تحت شروط ملائمة؛ تصنع جسم مضاد مضاد‎ ‏أو أجزاء وظيفية منها يمكن جمعه بعد ذلك من وسط المزرعة (إذا أفرزته الخلية العائلة‎ 0106-1 ‏في الوسط) أو مباشرة من الخلية العائلة المنتجة له (إذا لم يتم إفرازه). يعتمد انتقاء خلية عائلة‎ © ‏مطلوبة‎ polypeptide ‏مستويات الإظهار المطلوب؛ تعديلات‎ Jia ‏ملائمة على عوامل مختلفة؛‎ ‏وسهولة التضاعف في جزيء‎ (phosphorylation ‏أو‎ glycosylation Jie) ‏أو ضرورية للنشاط‎ ‏إن خطوط خلية ثديية متوافرة كعائلات للإظهار معروفة جيدا في الفن وتتضمن؛ لكن بدون‎ «(ATCC) American Type Culture Collection ‏تحديدء خطوط خلية خالدة البقاء متوافرة من‎ ٠ ‏خلايا كلية‎ HeLa ‏خلايا‎ (CHO) ‏متضمنة لكن بدون تحديد خلايا مبيض هامستر صيني‎ ie) ‏خلايا كلية قرد (009)؛ خلايا سرطان كبدي خلوي آدمي‎ (BHK) ‏هامستر رضيع‎ ‏وعدد من خطوط خلية أخرى. في تجسيدات خاصة؛ يمكن انتقاء إن أفضل خط‎ (Hep G2 ‏معين يمكن انتقاؤه باختبار خطوط خلية متعددة لتحديد أي منها لها‎ DNA ‏خلية لإظهار بناء‎ ‏أعلى المستويات من مستويات إظهار وتنتج أجسام مضادة مع خصائص ربط 0106-1 أساسية.‎ Vo ‏تركيبات دوائية‎ ‏في جانب آخرء يوفر الشرح الحالي تركيبة؛ مثل تركيبة دوائية؛ تشمل جسم مضاد أحادي‎ ‏تربط مولد مضاد منهاء من الشرح الحالي؛ تصيغ مع‎ protein(s) ‏النسخ واحد أو متحدء أو‎ ‏هذه التركيبات يمكن أن تتضمن واحد أو اتحاد من‎ Jie ‏بعضها مع مادة حاملة مقبولة دوائيا.‎ ‏(مثلء؛ اثنين أو أكثر مختلفين) أجسام مضادة؛ أو اتحادات مناعية أو جزيئات ثنائية‎ ve ‏فإن تركيبة دوائية من الشرح يمكن أن تشمل اتحاد‎ (JE ‏الخصوصية من الشرح. على سبيل‎ ‏مختلفة‎ epitopes ‏من أجسام مضادة (أو اتحادات مناعية أو ثنائية الخصوصية) ترتبط إلى‎ ‏على المولد المضاد المستهدف أو لها تأثيرات تكميلية.‎ ‏يمكن أيضا إعطاء تركيبات دوائية من الشرح في علاج متحد؛ أي؛ متحد مع عوامل كاشفة‎ ‏من‎ 1106-1 alias alias ‏يمكن أن يتضمن العلاج المتحد جسم‎ JU ‏أخرى؛ على سبيل‎ Yo ‏الشرح الحالي متحد مع على الأقل عامل مضاد للالتهاب أو عامل مثبط للمناعة آخر. إن‎
AY
‏أمثلة على عوامل علاجية يمكن أن تستخدم في علاج متحد توصف بتفصيل أكبر أدناه في‎ ‏قسم استخدام الأجسام المضادة من الشرح.‎ ‏كما هو مستخدم في الموضوع؛ إن "مواد حاملة مقبولة دوائيا" تتضمن أي وكل المذيبات؛‎ ‏أوساط التشتيت؛ مواد التغليف؛ عوامل مضادة للبكتريا أو مضاد للفطريات»؛ عوامل متساوية‎ ‏التي تنسجم فسيولوجيا. نموذجيا؛ فإن المادة الحاملة‎ Gly ‏التواتر؛ وعوامل تأخير الامتصاص؛‎ ٠ ‏تناسب الإعطاء في الوريدء في العضل؛ تحت الجلد؛ عن غير الطريق المعوي» في الحبل‎
OH ‏الشوكي أو في الآدمة (مثل؛ بواسطة الحقن أو تشريب). اعتمادا على طريقة الإعطاء؛‎ ‏اتحاد مناعي» أو جزيء‎ (die ‏يربط مولد مضاد‎ protein ‏المركب النشط» أي؛ جسم مضاد؛‎ ‏ثنائي الخصوصية؛ يمكن تغليفه في مادة لحماية المركب من تأثير أحماض وظروف طبيعية‎ ‏أخرى يمكن أن يخمد نشاط المركب.‎ ٠ ‏في بعض التجسيدات؛ إن الأجسام المضادة من الشرح الحالي يمكن أن توجد في شكل‎ ‏إيجابية أو سلبية الشحنة. في بعض‎ Glial ‏أو‎ (zwitter onic ‏متعادل (يتضمن شكل‎ ‏مضاد لعمل ملح مقبول دوائيا. لذلك؛ فإن‎ fon ‏الحالات؛ يمكن أن تتعقد الأجسام المضادة مع‎ ‏مركبات دوائية من الشرح يمكن أن تتضمن ملح واحد أو أكثر مقبول دوائيا.‎ ‏يشير إلى ملح يستبقي‎ "(pharmaceutically acceptable salt) ‏إن 'ملح مقبول دوائيا‎ Yo ‏النشاط البيولوجي المطلوب من المركب الأصلي (مثل؛ جسم مضاد) وليس له تأثيرات سامة‎ ‏غير مطلوبة؛ انظر؛ مثلاء‎
Berge, S.M,, et al. (1977) J. Pharm. Sci. 66:1-19. "(pharmaceutically acceptable salt) ‏على سبيل المثال؛ إن المصطلح "ملح مقبول دوائيا‎ ions ‏حيث تشتق‎ ¢ HAS ‏واحد أو‎ alias ions ‏يتضمن معقد يشمل جسم مضاد واحد أو أكثر‎ Yo ‏مضادة من قواعد وأحماض عضوية وغير عضوية مقبولة دوائيا.‎ ‏إن أمثلة على هذه الأملاح تتضمن أملاح إضافة حمض وأملاح إضافة قاعدة. إن أملاح‎
Jie ‏إضافة حمض تتضمن تلك المشتقة من أحماض غير عضوية غير سامة؛‎ chydroiodic ~~ ¢<hydrobromic ‏مسقل‎ ~~ «phosphoric ~~ «¢nitric ~~ <hydrochloric aliphatic mono- ‏إلخ؛ إضافة إلى من أحماض عضوية غير سامة مثل‎ «phosphorous ~~ Yo chydroxy alkanoic acids ¢phenyl-substituted alkanoic acids «dicarboxylic acids_s ‏إلخ. إن أملاح إضافة قاعدة‎ caromatic sulfonic acids s aliphatic <aromatic acids
AY
«magnesium «potassium «sodium (ie ‏تتضمن تلك المشتقة من فلزات أرضية قلوية؛‎
N,N'- ‏عضوية غير سامة؛ مثل‎ amines ‏إلخ؛ إضافة إلى هذا من‎ calcium scholine «chloroprocaine «N-methylglucamine «dibenzylethylenediamine ‏إلخ.‎ «procaine «ethylenediamine ‏عمصنسدامصمطاعتل»‎ ‏علاوة على ذلك؛ إن قواعد غير عضوية مقبولة دوائيا تتضمن أيونات فلزية. تتضمن‎ ° ‏أيونات فلزية؛ لكن لا تقتصر على؛ أملاح فلز قلوية مناسبة؛ أملاح فلز أرضي قلوية وأيونات‎ caluminum ‏فلز مقبولة فسيولوجيا. تتضمن قواعد غير عضوية لشكل الملح المشثق‎ «manganese «vanadium ¢molybdenum «nickel «cobalt ¢calcium «ammonium ‏أملاح‎ «magnesium «lithium «ferrous «ferric «copper «tin «¢selenium ¢chromium ‏في تكافؤاتها المعتادة.‎ ezine 5 ¢sodium ¢rubidium «potassium ¢manganous «manganic ٠ ‏يمكن تحضير أملاح إضافة حمض مقبولة دوائيا من مضادات أجسام من الكشف الحالي‎ «acetamidobenzoic «acetic «formic ‏من الأحماض التالية؛ متضمنة؛ بدون تحديد» أحماض‎ «cyclamic «carbonic «camphoric «benzoic «propionic «boric ascorbic «adipic «metaphosphoric «fendizoic «ethylsulfuric «¢edetic «malonic «dehydrocholic ¢nitric «citric «tannic «tartaric «malic «lactic «gluconic «glycolic «succinic ٠ caspartic «pyruvic «propionic «fumaric «folic «maleic «glucuronic «ascorbic «isocitric «lysine <¢hydroiodic <hydrobromic «hydrochloric <benzoic «glutamic coxalic «orotic «¢mesylic c¢anthranilic «propionic «pamoic «trifluoroacetic «p-hydroxybenzoic «silicate <aminosalicylic «salicylic «stearic «oleic ¢oxalacetic «methanesulfonic «sulfonic «embonic «¢mandelic «phenylacetic «nicotinic ٠٠٠ cammonium «ethanedisulfonic ~~ «ethanesulfonic ~~ «phosphonic «phosphoric 2- «oluenesulfonic ¢naphthalenesulfonic «pantothenic ¢benzenesulfonic sulfuric acid «nitrous «nitric «sulfuric «sulfanilic <hydroxyethanesulfonic «glycine «fB-hydroxybutyric ¢«cyclohexylaminosulfonic <monomethyl ester «camphorsulfonic ~~ «diaminohexanoic «cacodylate «glutamic «glycylglycine +٠ «chlorophenoxyacetic «pyridoxal 5-phosphate <oxoglutaric ¢thiocyanic ¢<gluconic .galacturonic 5 galactaric «N-acetyl-L-aspartic «undecanoic
عم تتضمن قواعد عضوية مقبولة دوائيا ‎N,N'- «diethylamine «trimethylamine‏ ‎«dibenzylamine ¢choline «chloroprocaine «dibenzylethylenediamine‏ ‎«procaine «meglumine (N-methylglucamine) «ethylenediamine ¢diethanolamine‏ ‎«caffeine «betaine ¢arginine «quaternary ammonium cations «cyclic amines‏ ‎«2-dimethylaminoethanol ¢«2-diethylaminoethanol «2-ethylaminoethanol ¢clemizole ©‏ ‎«N-ethylmorpholine «ethylenediamine «ethanolamine <butylamine «<ethanediamine‏ ‎<histidine «glucosamine ¢glucamine <ethylglucamine ¢<N-ethylpiperidine‏ ‎«morpholine ¢methylglucamine ¢isopropylamine <imidazole <hydrabamine‏ ‎«polyamine resins «piperidine «neodymium «pyridoxine «pyridine «piperazine‏ ‎«triethanolamine «tripropylamine «triethylamine «<theobromine ¢purines «procaine ٠‏ ‎«6-amino-2-methyl-2-heptanol ¢cholate taurine «methylamine <tromethamine‏ ‎aliphatic mono- ¢2-amino-2-methyl-1-propanol ¢«2-amino-2-methyl-1,3-propanediol‏ ‎<hydroxy alkanoic acids «phenyl-substituted alkanoic acids «and dicarboxylic acids‏ ‎stricine ¢strontium «aliphatic and aromatic sulfonic acids <aromatic acids‏ ‎«2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid ¢<phenylcyclohexylamine <hydrazine Vo‏ ‎bis(2-hydroxyethyl)amino-tris(hydroxymethyl)methane,‏ ‎N-(2-acetamido)-2-aminoethanesulfonic acid,‏ ‎1,4-piperazinediethanesulfonic acid,‏ ‎3-morpholino-2-hydroxypropanesulfonic acid,‏ ‎1,3-bis[tris(hydroxymethyl)methylamino]propane, Ye‏ ‎4-morpholinepropanesulfonic acid, |‏ ‎4-(2-hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid,‏ ‎2-[(2-hydroxy-1,1-bis(thydroxymethyl)ethyl)amino]ethanesulfonic acid,‏ ‎N,N-bis(2-hydroxyethyl)-2-aminoethanesulfonic acid,‏ ‎4-(N-morpholino)butanesulfonic acid, Yo‏ ‎3-(N,N-bis[2-hydroxyethylJamino)-2-hydroxypropanesulfonic acid,‏ ‎2-hydroxy-3-[tris(hydroxymethyl)methylamino]-1-propanesulfonic acid,‏
Ao 4-(2-hydroxyethyl)piperazine-1-(2-hydroxypropanesulfonic acid), piperazine-1,4-bis(2-hydroxypropanesulfonic acid) dihydrate, 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinepropanesulfonic acid,
N,N-bis(2-hydroxyethyl)glycine,
N-(2-hydroxyethyl)piperazine-N'-(4-butanesulfonic acid), °
N-[tris(hydroxymethyl)methyl]-3-aminopropanesulfonic acid,
N-tris(Hydroxymethyl)methyl-4-aminobutanesulfonic acid,
N-(1,1-dimethyl-2-hydroxyethyl)-3-amino-2-hydroxypropanesulfonic acid, 2-(cyclohexylamino)ethanesulfonic acid, 3-(cyclohexylamino)-2-hydroxy-1-propanesulfonic acid, Ve 3-(cyclohexylamino)-1-propanesulfonic acid,
N-(2-acetamido)iminodiacetic acid, 4-(cyclohexylamino)-1-butanesulfonic acid,
N-[tris(hydroxymethyl)methyl]glycine, 2-amino-2-(hydroxymethyl)-1,3-propanediol, Yo .trometamol ‏إن تركيبة دوائية من الشرح يمكن أيضا أن تتضمن مضادات أكسدة مقبولة دوائياء إن أمثلة‎
Fie ‏مضادات أكسدة قابلة للذوبان في الماء؛‎ )١( ‏مضادات الأكسدة المقبولة دوائيا تتضمن:‎ «sodium metabisulfite «sodium bisulfate «cysteine hydrochloride <ascorbic acid ascorbyl Jie ‏مضادات أكسدة قابلة للذوبان في الزيت؛‎ (Y) ‏إلخ؛‎ ¢sodium sulfite ٠ «(BHT) butylated hydroxytoluene ¢«(BHA) butylated hydroxyanisole ¢<palmitate citric fie ‏معدنية؛‎ LDS ‏عوامل‎ (Y) ‏إلخ؛‎ «alpha-tocopherol «propyl gallate lecithin phosphoric «tartaric acid «sorbitol «(EDTA) ethylenediamine tetraacetic acid «acid ‏:؛ إلخ.‎ 0 ‏وغير المائية المناسبة التي يمكن استعمالها في‎ dal) ‏تتضمن الأمثلة للمواد الحاملة‎ Yo «propylene glycol «glycerol ‏(مثل‎ polyols cethanol ‏التركيبات الدوائية للشرح ماء؛‎ ‏إلخ)؛ وخلطات مناسبة من ذلك؛ زيوت نباتية؛ مثل زيت زيتون؛‎ cpolyethylene glycol
تم ‎esters‏ عضوية ‎AL‏ للحقن» مثل ‎oleate‏ انرط0ه. يمكن استبقاء ميوعة جيدة؛ ‎Mie‏ باستخدام مواد تغليف» مثل ‎dlecithin‏ باستبقاء مقاس الجسيم المطلوب في حالة التشتيتات؛ وباستخدام منتشطات سطح. قد تحتوي هذه التركيبات أيضا على مواد مساعدة مثل مواد حافظة؛ عوامل تبلل» عوامل ‎٠‏ استحلاب»؛ وعوامل تشتيت. يمكن تأكيد منع وجود الكائنات الحية الدقيقة بواسطة إجراءات التعقيم؛ أعلاه» وبتضمن عوامل مختلفة مضادة للبكتريا ومضادة للفطريات؛ ‎cparaben «Mie‏ ‎«phenol sorbic acid ¢«chlorobutanol‏ إلخ. قد يطلب أيضا تضمن عوامل تواترء ‎Fie‏ ‏سكريات» ‎sodium chloride‏ إلخ في التركيبات. إضافياء يمكن حدوث امتصاص طويل الأمد للشكل الدوائي القابل للحقن بتضمن عوامل تؤخر الامتصاص مثّل ‎aluminum monostearate‏ ‎.gelating ٠‏ تتضمن المواد الحاملة المقبولة دواثيا محاليل أو تشتيتات ماثية معقمة ومساحيق معقمة للتحضير الارتجالي للمحاليل أو التشتيتات المعقمة القابلة للحقن. إن استخدام تلك الأوساط والعوامل للمواد النشطة دوائيا معروف في الفن. بقدر ما أن أيا من الأوساط أو العوامل التقليدية متوائمة مع المركب النشط» فإن استخدامها في التركيبات الدوائية للاختراع متوقع. ‎٠‏ يمكن أيضا دمج مركبات نشطة تدعيمية في التركيبات. إن التركيبات العلاجية نموذجيا لابد أن تكون معقمة وثابتة تحت شروط التصنيع والتخزين. يمكن صياغة التركيبة كمحلول؛ مستحلب دقيق؛ جسم دهنيء أو بناء منظم آخر مناسب للتركيز العالي من العقار. قد تكون المادة الحاملة عبارة عن مذيب أو وسط تشتيت يحتويء ‎Sia‏ على ماء؛ ‎polyol «ethanol‏ (مثلا ‎polyethylene «propylene glycol «glycerol‏ ‎glycol Ye‏ سائل؛ إلخ)؛ وخلطات مناسبة من ذلك. يمكن استبقاء الميوعة المتلى» باستخدام غلاف ‎decithin Jie‏ باستبقاء مقاس الجسيم المطلوب في حالة التشتيت وباستخدام منشط سطح. في حالات كثيرة؛ يفضل تضمن عوامل تواترء ‎«Mie‏ سكريات» ‎«mannitol i polyalcohols‏ ‎«sorbitol‏ أو ‎sodium chloride‏ في التركيبة. يمكن الحصول على امتصاص طويل الأمد للتركيبات القابلة للحقن بتضمن التركيبة عامل يؤخر الامتصاص؛ مثلاء أملاح ‎monostearate‏ ‎.gelating Ye‏ يمكن تحضير محاليل معقمة قابلة للحقن بدمج المركب النشط بالكمية المطلوبة في مذيب ملاثم مع واحدة من أو اتحاد من المقومات المذكورة ‎code‏ حسب الطلب؛ ويلي ذلك ترشيح
AY pire ‏تحضير التشتيتات بدمج المركب النشط في وسط حامل‎ dale ‏دقيق تحت تعقيم. بصفة‎ ‏يحتوي على وسط تشتيت قاعدي والمقومات الأخرى المطلوبة من تلك المذكورة أعلاه. في حالة‎ ‏المساحيق المعقمة لتحضير محاليل معقمة قابلة للحقن؛ تتضمن طرق التحضير؛ لكن بدون‎ ‏تحديد؛ تجفيف بالشفط وتجفيد (تجفيف تبريدي) لينتج مسحوق للمقوم النشط زائد أي مقوم‎ ‏إضافي مطلوب من محلول مرشح معقما مسبقا من ذلك.‎ © ‏إن كمية المقوم النشط التي يمكن أن تتحد مع مادة حاملة لإنتاج شكل جرعة وحيد سوف‎ ‏تختلف اعتمادا على الكائن المعالج؛ وطريقة الإعطاء الخاصة. إن كمية المقوم النشط التي‎ ‏يمكن أن تتحد مع مادة حاملة لإنتاج شكل جرعة وحيد سوف تكون بصفة عامة تلك الكمية من‎ ‏سوف تتراوح هذه الكمية من‎ 71٠00 ‏التركيبة التي تنتج تأثيرا علاجيا. بصفة عامة؛ من نسبة‎ 79760 ‏إلى حوالي‎ 70.١ ‏إلى حوالي 7249 من المقوم النشط» يفضل من حوالي‎ 720.0٠ ‏حوالي‎ ٠ ‏من المقوم النشط في اتحاد مع مادة حاملة‎ 77٠ ‏إلى حوالي‎ 7١ ‏أكثر تفضيلا من حوالي‎ ‏مقبولة دوائيا.‎ ‏تضبط أنظمة الجرعة لتوفير الاستجابة المتلى المطلوبة (مثلا؛ استجابة علاجية). على‎ ‏سبيل المثال؛ يمكن إعطاء مضغة واحدة؛ يمكن إعطاء جرعات عديدة مقسمة مع الوقت أو‎ ‏يمكن أن تقل أو تزداد الجرعة تناسبيا تبعا لمتطلبات الموقف العلاجي. من المفيد بصفة‎ ١ ‏خاصة صياغة التركيبات عن غير طريق القناة الهضمية في شكل وحدة جرعة لسهولة‎ ‏الإعطاء وتمائل الجرعة. تشير شكل الوحدة حسب الاستخدام هنا إلى وحدات منفصلة فيزيائيا‎ ‏مناسبة كجرعات وحيدة للكائنات المراد علاجها؛ تحت كل وحدة كمية مسبقة التحديد من‎ ‏المركب النشط محسوبة لتنتج التأثير العلاجي المطلوب بمصاحبة المادة الحاملة الدوائية‎ ‏المطلوبة. إن مواصفة أشكال وحدة الجرعة من الاختراع تمليها وتعتمد مباشرة على: (أ)‎ ٠ ‏السمات المميزة الفريدة للمركب النشط والتأثير العلاجي الخاص المراد تحقيقه؛ و(ب) القيود‎ ‏مركب نشط لمعالجة حساسية في أفراد.‎ Jie ‏المتأصلة في الفن للتركيب‎ ‏مجم/ كجم؛ وعادة‎ ٠٠١ ‏إلى‎ ١000٠ ‏تتراوح الجرعات من حوالي‎ (AD ‏بالنسبة لإعطاء‎ ‏قد تكون الجرعات‎ JU ‏إلى © مجم/ كجم من وزن جسم العائل. على سبيل‎ ١509 ‏أكثر‎ ‏مجم/ كجم من وزن الجسم؛ ؟ مجم/ كجم من وزن‎ ١ ‏مجم/ كجم من وزن الجسم؛‎ ١ ‏_بمقدار‎ YO ١ ‏مجم/ كجم من وزن الجسم أو خلال مدى من‎ ٠١ ‏الجسم؛ © مجم/ كجم من وزن الجسم أو‎ ‏مجم/ كجم. يتضمن نظام المعالجة التمثيلي الإعطاء مرةٍ في الأسبوع؛ مرة كل‎ ٠١ ‏إلى‎
AA
٠ ‏شهور أو مرة كل‎ TJS ‏مرة في الشهر» مرة‎ cand © ‏أسبوعين» مرة كل أسابيع» مر كل‎ ‏إلى 7 شهور. تتضمن أنظمة الجرعة لجسم مضاد مضاد-01021 أو قسم منه يربط مولد‎ ‏مجم/ كجم من وزن الجسم أو © مجم/ كجم من وزن‎ ١ ‏مضاد من الاختراع؛ على سبيل المثال‎ ‏كل‎ )١( ‏باستخدام واحد من برامج التجريع التالية:‎ Ab ‏الجسم بالإعطاء تحت الجلد؛ مع إعطاء‎ ‏مجم/ كجم من وزن‎ ¥ (YF) ‏كل ¥ أسابيع؛‎ (Y) ‏؛ أسابيع لستة جرعات؛ ثم كل ¥ شهور؛‎ ‏مجم/ كجم من وزن الجسم كل ¥ أسابيع.‎ ١ ‏واحدة ثم‎ Bre ‏الجسم‎ ‏أو الأجزاء منها لها خصوصيات ارتباط‎ Abs ‏في بعض التجسيدات؛ يعطى * أو أكثر من‎ ‏معطى في النطاقات المشار إليها.‎ Ab ‏مختلفة في نفس الوقت؛ وفي تلك الحالة تقع جرعة كل‎ ‏عادة في مراحل متعددة. قد تكون الفترات الفاصلة بين الجرعات المنفردة؛ مثلاء‎ Abs ‏تعطى‎ ‏أسبوعياء شهرياء كل ¥ شهور أو سنويا. قد تكون الفترات الفاصلة أيضا غير منتظمة حسبما‎ ٠ ‏تدل على ذلك مستويات الدم المقاسة للجسم المضاد لمولد المضاد المستهدف في المريض. في‎ ‏ميكروجرام/‎ ٠٠٠١ ‏إلى‎ ١ ‏في البلازما حوالي‎ Ab ‏بعض الطرق؛ تضبط الجرعة لتحقيق تركيز‎ ‏ميكروجرام/ ملليلتر.‎ 9٠٠ ‏إلى‎ Yo ‏ملليلتر وفي بعض الطرق حوالي‎ ‏كمستحضر طويل بقاء الإطلاق؛ وفي تلك الحالة يطلب‎ Ab ‏بطريقة بديلة؛ يمكن إعطاء‎ ‏إعطاء أقل في معدل التكرار. تختلف الجرعة ومعدل تكرار إعطائها على عمر النصف للجسم‎ 0
Abs (HAbs ‏الآدمية أطول عمر نصف؛ تليها‎ Abs ‏المضاد في المريض. بصفة عامة تظهر‎ ‏الهجينة؛ غير الآدمية. تختلف الجرعة ومعدل تكرار الإعطاء اعتمادا على ما إذا كانت‎ ‏المعالجة وقائية أو علاجية. في الاستخدامات الوقائية؛ تعطى جرعة قليلة نسبيا عند فترات‎ ‏فاصلة غير دائمة التكرار نسبيا عبر مدة زمنية طويلة. قد يستمر بعض المرضى في تلقي‎ ‏المعالجة بقية حياتهم. في الاستخدامات العلاجية؛ تطلب أحيانا جرعة عالية نسبيا عند فترات‎ ٠ ‏فاصلة قصيرة نسبيا حتى يقل تزايد المرض أو ينتهي؛ ويفضل حتى إظهار المريض تحسنا‎ ‏لأعراض المرض. بعد ذلك؛ يمكن إعطاء المريض برنامجا وقائيا.‎ LS ‏أو‎ Lisa ‏قد تختلف مستويات الجرعة الفعلية للمقومات النشطة في التركيبات الدواثية من الاختراع‎ ‏الحالي بحيث يتم الحصول على كمية من المقوم النشط مؤثرةٍ لتحقيق الاستجابة العلاجية‎ ‏وطريقة إعطاء خاصة؛ بدون أن تكون سامة‎ dials ‏المطلوية لمريض خاص» تركيبة‎ © ‏للمريض. سوف يعتمد مستوى الجرعة المنتقى على تشكيلة من العوامل الحركية الدوائية‎ amide ‏الملح أو‎ cester ‏متضمنة نشاط التركيبات الخاصة المستعملة من الاختراع الحالي» أو‎
حم منه؛ طريقة الإعطاء؛ وقت الإعطاء؛ ومعدل إخراج المركب الخاص المستعمل؛ فترةٍ المعالجة؛ عقاقير؛ مركبات و/أو مواد أخرى مستخدمة في اتحاد مع التركيبات الخاصة المستعملة؛ السنء الجنس؛ الوزن؛ الحالة؛ الصحة العامة والتاريخ الطبي السابق للمريض المعالج؛ والعوامل المثيلة المعروفة جيدا في المجالات الطبية.
° إن "جرعات مؤثرةٍ علاجيا ‎"(therapeutically effective dosage)‏ لجسم مضاد مضاد-17106 -1 من الاختراع يفضل أن تؤدي إلى تقليل في شدة أعراض المرض» زيادة في معدل ومدة الفترات الزمنية الخالية من عرض للمرض؛ أو منع التلف أو الإعاقة بسبب الإصابة بالمرض. سيكون لدى صاحب المهارةٍ العادية في الفن القدرة على تحديد تلك الكميات اعتمادا على تلك العوامل مثل التركيبة الخاصة أو طريقة الإعطاء المنتقاة.
‎٠‏ يمكن حساب جرعة ‎Ab‏ مضاد-2102-1 باستخدام تلك الطرق مثل نماذج التخلص من العقار عن طريق هدف ‎(TMDD) PK/PD‏ يمكن استخدام تلك النماذج لحساب علاقة الاستجابة لتركيز طه/. يمكن استخدام نموذج 716/00 لتقدير إزالة ‎Ab‏ عن غير طريق الهدفء استهلاك ‎Ab‏ وتكوين وإزالة المركب. يمكن استخدام نموذج ‎TMDD‏ لترجمة البيانات المحددة باستخدام نموذج حيوان (مثلا حيوان قارض أو قرد) إلى بيانات آدمية لتوقع الجرعة الفعالة.
‎١‏ يمكن استخدام نموذج ‎MABEL‏ لتحديد معدلات الإظهار والاستهلاك. يمكن استخدام نموذج ‎PR/PD‏ لحساب انشغال المستقبل على أساس قيم ‎Kd‏ لحساب انشغال المستقبل يجب الاهتمام بمعدل استهلاك حركيات الهدف و/أو مركب ‎-Ab‏ الهدف. يمكن استخدام نموذج ‎PK/PD‏ لتوقع الأمان والكفاية في دراسات إكلينيكية.
‏يمكن إعطاء تركيبة من الاختراع الحالي بواحدة أو أكثر من طرق الإعطاء باستخدام واحدة
‎٠‏ أو أكثر من تشكيلة طرق معروفة في الفن. كما سيدرك الصانع ‎alll‏ سوف يختلف أسلوب و/أو طريقة الإعطاء اعتمادا على النتائج المطلوبة. تتضمن طرق إعطاء ‎Abs‏ أو أقسام منها تربط ‎alias alse‏ من الاختراع إعطاء في الوريد؛ في العضل؛ في أدمة الجلد؛ في البريتون» تحت الجلد؛ في القناة الشوكية أو طرق ‎(al‏ للإعطاء عن غير الطريق المعوي؛ مثل بالحقن أو بالتشريب. إن ‎Ble‏ "'إعطاء عن غير الطريق المعوي" حسب الاستخدام هنا تعني طرق
‏© إعطاء بخلاف الإعطاء المعوي والسطحي؛ عادة بالحقن؛ وتتضمن؛ بدون تحديد؛ في الوريد؛ في العضل؛ في شريان؛ في غمد؛ في كبسول؛ في المحجرء في القلب؛ في أدمة الجلد؛ في
البريتون؛ عبر القصبة الهوائية؛ تحت الجلد؛ تحت البشرة؛ في المفاصل؛ تحت كبسول؛ تحت الأم العنكبوتية؛ في القناة الشوكية؛ فوق الأم الجافية وفي عظمة القص بالحقن والتشريب. بطريقة بديلة؛ يمكن إعطاء ‎Ab‏ أو قسم منه يربط مولد مضاد من الاختراع عن طريق غير الطريق المعوي؛ مثلا إعطاء سطحيء فوق أدمة الجلد أو عن طريق غشاء مخاطي؛ ‎She‏ في ‎٠‏ الأنفء بالفم؛ ‎liga‏ شرجياء تحت اللسان أو سطحيا. في تطبيقات خاصة؛ يمكن تحضير المركبات النشطة مع مادة حاملة تحمي المركب من إطلاق سريع؛ ‎Jie‏ مستحضر متحكم في إطلاقه؛ متضمنا ازدراعات؛ لصوقات عبر الجلد؛ وأنظمة توصيل دقيقة الكبسلة. يمكن استخدام ‎polymers‏ قابلة للتحلل الحيوي وموائمة حيوياء مثل ‎«collagen «polyglycolic acid «polyanhydrides ¢ethylene vinyl acetate‏ ‎Lpolylactic acid § polyorthoesters ٠‏ هناك طرق كثيرة لتحضير تلك المستحضرات معروفة عامة للمهرة في الفن. انظر ‎Ole‏ ‎Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J.R.
Robinson, ed.,‏ ‎Marcel Dekker, Inc., New York (1978).‏ يمكن إعطاء التركيبات العلاجية مع أدوات طبية معروفة في الفن. على سبيل المثال؛ ‎٠‏ يمكن إعطاء تركيبة علاجية من الاختراع بأداة حقن تحت الأدمة بدون ‎dp)‏ مثل الأدوات المعلنة في براءات الاختراع الأمريكية أرقام: 6744157 6787801 ‎11777٠‏ ‏04147 6146 44؛ 0874 7؟؛ أو 115071 . تتضمن الأمظلة لازدراعات وزجلات معروفة جيدا المفيدة في الاختراع الحالي: براءة الاختراع الأمريكية رقم 07 448976؛ التي تكشف عن مضخة تشريب دقيقة قابلة للازدراع لتوزيع دواء عند معدل متحكم فيه؛ براءة ‎٠‏ الاختراع الأمريكية رقم 871496 التي تكشف عن أداة علاجية لإعطاء أدوية من خلال الجلد؛ براءة الاختراع الأمريكية 4697777 4؛ التي تكشف عن مضخة تشريب دواء لتوصيل دواء عند معدل تشريب دقيق؛ براءة الاختراع الأمريكية ‎CE EEVYYE‏ التي تعلن عن جهاز تشريب متغير التدفق قابل للازدراع لتوصيل مستمر لعقار؛ براءة الاختراع الأمريكية 7 ؟؛ التي تكشف عن نظام توصيل عقار تناضحي به أقسام متعددة الحجرة؛ وبراءة ‎vo‏ الاختراع الأمريكية 75195؛5؛ التي تكشف عن نظام توصيل عقار تناضحي. هناك الكثير من تلك الازدراعات؛ أنظمة التوصيل؛ والزجلات الأخرى معروفة للمهرة في الفن.
في بعض التجسيدات يمكن صياغة ‎Abs‏ أو أجزاء منها من الاختراع لتأكيد التوزيع الأمثل في الجسم . على سبيل ‎JU‏ فإن حاجز الدم- ‎(BBB) Fall‏ يقصي مركبات كثيرة ماصة للماء للغاية. لتأكيد أن المركبات العلاجية من الاختراع تعتبر ‎BBB‏ (عند الطلب)؛ فيمكن صياغتها؛ مثلاء في أجسام دهنية. قد تشمل الأجسام الدهنية واحدا أو أكثر من الأجزاء التي © تنتقل انتقائيا في خلايا أو أعضاء ‎dala‏ وبذلك يزداد توصيل العقار المستهدف (انظرء ‎-(V.V.
Ranade (1989) J.
Clin.
Pharmacol. 29:685 «Mis‏ تتضمن الأجزاء الاستهدافية التمثيلية ‎folate‏ أو ‎biotin‏ (انظرء مثلا؛ براءة الاختراع الأمريكية رقم 41160175 إلى ‎Low‏ ‏وآخرين)؛ ‎mannosides‏ ‎(Umezawa et al., (1988) Biochem.
Biophys.
Res.
Commun. 153:1038);‏ ‎٠‏ أجسام مضادة ‎(P.G.
Bloeman et al. (1995) FEBS Lett. 357:140; M.
Owais et al. (1995)‏ ‎Antimicrob.
Agents Chemother. 39:180);‏ مستقبل ‎protein A‏ منشط سطح ‎Briscoe et al. (1995) Am.
J.
Physiol. 1233:134); 0120 (Schreier et al. (1994) J.
Biol.‏ ‎Chem. 269:9090); see also K.
Keinanen; M.L.
Laukkanen (1994) FEBS Lett.
Vo‏ ‎J.J.
Killion; 1.1. Fidler(1994) Immunomethods 4:273.‏ ;346:123 ‎LS‏ هو متوافر هناء يمكن إعطاء التركيبات الدوائية المتوافرة للمعالجات الوقائية و/أو علاجية. تشير "كمية مؤثرة ‎"(effective amount)‏ بصفة عامة إلى كمية كافية؛ لكنها غير سامة؛ من المقوم النشط (أي؛ ‎Ab‏ مضاد 1106-1 أو جزء وظيفي ‎Lelie‏ منه) لتحقيق التأثير ‎٠‏ المطلوب؛ وهو تقليل أو إزالة في شدة و/أو معدل الأعراض و/أو تحسين أو مداوة تلف. تشير 'كمية مؤثرة علاجيا ‎"(therapeutically effective amount)‏ إلى كمية كافية لمداوة حالة أو أعراض مرض»؛ أو بطريقة أخرى ‎ia‏ إعاقة؛ تأخير أو إشفاء تطور المرض أو أي عرض آخر غير مرغوب. تشير "كمية مؤثرة وقائيا ‎"(prophylactically effective amount)‏ إلى كمية مؤثرة لمنع؛ إعاقة؛ أو تأخير بداية حالة أو أعراض المرض. ‎Yo‏ بصفة عامة؛ يمكن تحديد السمية والكفاية العلاجية للجسم المضاد أو الجزء منه طبقا لإجراءات دوائية قياسية في مزارع الخلية و/أو حيوانات التجارب؛ متضمنة؛ مثلا؛ تحديد 1,050 (الجرعة المميتة لنسبة ‎7596٠‏ من المجموعة المعالجة) و2050 (الجرعة المؤثرة علاجيا في
يب ‎٠‏ من المجموعة). إن نسبة الجرعة بين التأثيرات السامة والعلاجية هي المؤشر العلاجي ويمكن التعبير عنها ‎Jie‏ النسبة 1050/28050. تفضل التركيبات التي لها مؤشرات علاجية يمكن استخدام البيانات الناتجة من دراسات مزرعة الخلية و/أو الحيوان في صياغة نطاق ‎٠‏ الجرعات للآدميين. إن جرعة المقوم النشط تقع نموذجيا في نطاق التركيزات الدوارة في الدم التي تتضمن 2050 مع سمية ضئيلة جدا أو بدون سمية. يمكن أن تختلف الجرعة في هذا النطاق اعتمادا على شكل الجرعة المستعمل وطريقة الإعطاء المستعملة. كما هو مذكور هناء تعتمد الكمية المؤثرة من تركيبة دوائية تشمل ‎Abs‏ مضادة 1016-1 أو أجزاء وظيفية ‎Lelie‏ منها للاستخدام ‎Ladle‏ أو ‎(Lally‏ على سبيل المثال؛ على السياق ‎٠‏ والأهداف العلاجية. سيدرك الماهرون في الفن أن مستويات الجرعة الملائمة للمعالجة؛ طبقا لتطبيقات خاصة؛ سوف تختلف ‎Lag‏ لذلك اعتمادا؛ جزئياء على الجزيء الواصل»؛ داعي الاستعمال المستخدم له ‎Ab‏ المضاد ‎(Dkk-1‏ طريقة الإعطاء؛ الحجم (وزن الجسم؛ مساحة الجسد أو مقاس عضو) و/أو الحالة (السن والحالة الصحية العامة) للمريض. يمكن الطبيب معايرة الجرعة وتعديل طريقة الإعطاء للحصول على التأثير العلاجي الأمتل. ‎Vo‏ يعتمد معدل التجريع على المعايير الحركية الدوائية للجسم المضاد المضاد-01062-1 أو جزء وظيفي ‎Lelie‏ منه في المستحضر. مثلا؛ يعطي الطبيب التركيبة حتى الوصول إلى جرعة تحقق التأثير المطلوب. يمكن لذلك إعطاء التركيبة كجرعة واحدة؛ أو كجرعتين أو أكثر (والتي قد تحتوي وقد لا تحتوي على نفس كمية الجزيء المطلوب) مع الوقت؛ أو كتشريب مستمر من خلال أداة ازدراع أو قسطرة. قد تكون المعالجة مستمرة مع الوقت أو متقطعة. إن التحديد ‎٠‏ الإضافي للجرعة الملائمة يقوم به روتينيا أصحاب المهارة العادية في الفن وهذا عادة في متتاول المهام التي يقومون بها روتينيا. يمكن تأكيد الجرعات الملائمة من خلال بيانات الاستجابة للجرعة الملاثمة. لعلاج اضطراب طبي يتميز بإظهار شاذ أو زائد من 0106-1؛ يمكن إعطاء تركيبة تشمل ‎Abs‏ المضادة 2106-1 أو أجزاء وظيفية مناعيا منها للمريض بكمية ولمدة كافيتين لحث تحسن ‎YO‏ طييل البقاء في مؤشر واحد على الأقل يعكس شدة المرض. يعتبر التحسن "طويل البقاء" إذا أظهر المريض التحسن عند مرحلتين على الأقل يفصلهما على الأقل ‎١‏ إلى 7 أيام؛ أو في بعض الحالات ‎١‏ إلى + أسابيع. تعتمد ‎mal‏ الفاصلة الملائمة بدرجة ما على حالة المرض
ل المراد معالجتها؛ في متناول الطبيب الماهر تحديد الفترة الفاصلة الملائمة لتحديد ما إذا كان التحسن طويل البقاء. تتحدد درجة التحسن على أساس العلامات أو الأعرارض» وقد تستعمل أيضا استطلاعات رأي تعطى للمريض؛ ‎Jie‏ استطلاعات ‎gh)‏ خاصة بنوعية الحياة. يمكن اختبار مؤشرات عديدة تعكس درجة اعتلال المريض من أجل تحديد ما إذا كانت 0 الكمية ووقت المعالجة كافيين. إن قيمة خط القاعدة للمؤشر أو المؤشرات المختارة ترسخها اختبارات للمريض قبل الإعطاء للجرعة الأولى من الجسم المضاد. بصورة مفضلة؛ يجرى اختبار خط القاعدة خلال ‎Te‏ يوم من إعطاء الجرعة الأولى. عند إعطاء ‎Ab‏ لعلاج أعراض ‎ala‏ على سبيل المثال علاج عظمة مكسورة؛ تعطى الجرعة الأولى في الحال إذا أمكن ذلك عمليا بعد حدوث الإصابة. ‎Ve‏ يحث التحسن بإعطاء ‎Abs‏ مضادة 0106-1 أو أجزاء وظيفية مناعيا منها حتى يظهر المريض تحسنا أكثر من خط القاعدة للمؤشر أو المؤشرات المختارة. في معالجة حالات مزمنة؛ يمكن الحصول على هذه الدرجة للتحسن بالإعطاء المتكرر لهذا الدواء عبر مدة لا تقل عن شهر أو أكثر؛ مثلاء ‎١‏ 7 أو ؟ شهور أو أكثر؛ أو لمدة غير محددة. إن مدة من ‎١‏ إلى ‎١‏ أسابيع؛ أو أيضا جرعة واحدة؛ غالبا ما تكون كافية لعلاج الحالات الحادة. بالنسبة للإصابات أو الحالات الحادة؛ قد تكون جرعة واحدة كافية. برغم أن درجة اعتلال المريض بعد المعالجة قد تبدو محسنة طبقا لواحد أو أكثر من المؤشرات؛ فقد تستمر المعالجة لفترةة غير محددة عند نفس المستوى أو عند جرعة أو معدل أقل. بمجردٍ تقليل أو توقف المعالجة؛ يمكن استكمالها لاحقا عند المستوى الأصلي إذا ظهرت أعراض. ‎٠‏ الاستعمالات التمثيلية للأجسام المضادة المضادة-1106-1 التحديد والفحص يمكن استخدام الأجسام المضادة المضادة-0102-1 من الاختراع وأجزاء وظيفية ‎Lelie‏ منها لتحديد 1106-1 في عينات حيوية. تسمح تلك الاستخدامات بالتعرف على خلايا أو أنسجة تنتج ‎protein‏ أو تخدم كأداة تشخيصية لتحديد حالات مرضية ينتج فيها 2106-1 بدرجة زائدة أو ‎Ye‏ بدرجة ناقصة. يمكن أيضا استخدام ‎Abs‏ والأجزاء المتوافرة في طرق لفحص للجزيء الذي يرتبط مع 1-ل01. يمكن استخدام تشكيلة من طرق فحص تنافسية؛ على سبيل المثال؛ في بعض الطرق؛
¢ فإن جزيء ‎Dik-1‏ أو جزءٍ منه يرتبط معه جسم مضاد مضاد-1-©010؛ يتلامس مع جسم أو جزء معلن هنا مع جزيء آخر (مثلاء جزيء مرشح). إن التقليل في الارتباط بين الجسم المضاد أو الجزءِ و1106-1 هو مؤشر على أن الجزيء يربط 106-1. يمكن تحديد ارثباط ‎Ab‏ ‏أو الجزءِ بتشكيلة من الطرق» ‎ELISA «Mie‏ إن تحديد الارتباط بين ‎Ab‏ المضاد 0106-1 أو © جزء 5 ‎Sey DRk-1‏ تبسيطه بتعليم ‎Ab‏ بدرجة يمكن تحديدها. في بعض ‎«hall‏ يجرى تحليل إضافي لجزيء يظهر ارتباطا في الفحص الأولي لتحديد ما إذا كان يثبط نشاط 0106-1 (مثلاء ما إذا كان الجزيء ينشط إشارات ‎(Wnt‏ ‏معالجة الاضطرابات المتعلقة بالعظام في جوانب ‎«ual‏ يمكن استخدام البعض من ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا المتوافرة لعلاج ‎٠‏ مرضى مع تشكيلة من الأمراض المختلفة المتضمنة؛ على سبيل المثال؛ الأمراض المستجيبة ‎Jay fil‏ نشاط 0106-1. يمكن أيضا استخدام هذه ‎Abs‏ والأجزاء لعلاج أمراض مستجيبة لحث إشارات ‎Wnt‏ . يتضمن المصطلح "مريض 080800" حسب الاستخدام هنا الآدميين والحيوانات إذا لم يذكر خلاف ذلك. تتضمن الأمثلة لتلك الأمراض؛ لكن بدون تحديد؛ تشكيلة من الأمراض المشتملة على اضطراب عظمي متضمنا حالات كتلة عظمية ‎(ALB‏ فقد عظمي عام؛ ‎١‏ تكوين عظمي مثبط وتآكلات عظمية. يمكن أيضا استخدام بعض ‎Abs‏ والأجزاء في إصلاح العظام. في بعض التجسيدات؛ يكون لل ‎Abs‏ أو الأجزاء استخداما ‎Ladle‏ في إثارة نشاط خلية بانية للعظم وزيادة الكثافة المعدنية العظمية ‎(BMD)‏ أو كتلة عظمية. إن هذه ‎Abs‏ والأجزاء مفيدة لذلك لعلاج مرضى يعانون من اضطرابات طبية مختلفة تشمل فقد زائد للعظم أو مرضى ‎٠‏ محتاجين لتكوين عظم جديد حتى في حال عدم وجود بالضرورة نشاط زائد لخلية بانية للعظم. إن إخماد نشاط 0106-1 يؤدي إلى تنشيط خلية تعظم من خلال إشارات ‎-Wnt proteins Ledisi‏ إن النشاط الزائد للخلايا الملتهمة للعظم يلازم اضطرابات عديدة لنقص النسيج العظمي يمكن علاجها مع ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية ‎Lelie‏ المتوافرة؛ متضمنة نقص النسيج العظمي؛ هشاشة العظام؛ الالتهاب حول ‎(Ou!‏ مرض ‎Paget‏ فقد عظمي بسبب عدم الحركة؛ انتشارات ‎Yo‏ ورمية عظمية تحللية والتهاب مفصلي؛ متضمنا التهاب مفصلي روماتويدي ‎(RA)‏ التهاب مفصلي صدفيء التهاب الفقرات التصلبي وحالات أخرى تشمل تآكل العظم.
q0 ‏يمكن أيضا معالجة حالات عديدة أخرى لكتلة عظمية قليلة متضمنة تشكيلة من صور‎ ‏هشاشة عظام‎ «glucocorticoid ‏بسبب‎ alae ‏هشاشة العظام؛ متضمنة بدون تحديد؛ هشاشة‎ ‏بعد ازدراع؛ هشاشة عظام ملازمة لعلاج كيميائي (أي؛ هشاشة عظام يحثها علاج‎ Aas ‏كيماوي)؛ هشاشة عظام يحثها عدم الحركة؛ هشاشة عظام بسبب عدم تحميل حركي؛ وهشاشة‎ ‏عظام مصاحبة لاستخدام مضاد للتشنجات. تتضمن أمراض عظمية إضافية يمكن معالجتها‎ © ‏والأجزاء مرض عظمي مصاحب لفشل كلوي وأمراض العظام المصاحبة‎ Abs ‏مع بعض‎ ‏و/أو كبدي.‎ gra ‏لمرض غذائي؛ معدي‎ ‏يمكن أيضا معالجة الأشكال المختلفة للالتهاب المفصلي؛ تتضمن الأمثلة التهاب عظمي‎ ‏والأجزاء لعلاج فقد عظمي‎ Abs ‏مفصلي والتهاب مفصلي روماتويدي. يمكن أيضا استخدام‎ ‏في علاج الالتهاب المفصلي؛ قد يستفيد المرضى‎ (RA ‏.عام ملازم لالتهاب مفصلي (مثلاء‎ ٠ ‏من الحقن حول الإصابة أو داخل الإصابة للأجسام المضادة أو الأجزاء من الاختراع. على‎ ‏أو الجزءِ بجوار أو مباشرة في المفصل الملتهب؛ وبذلك يثار‎ Ab ‏سبيل المثتال؛ يمكن حقن‎ ‏إصلاح العظم عند المكان.‎ ‏هناك بعض السرطانات معروفة بأنها تزيد نشاط الخلايا الملتهمة للعظم وتحث امتصاص‎ ‏في النخاع‎ Lan ‏العظام؛ مثل سرطان الثدي والبروستاتا. إن الورم النخاعي المتعدد؛ الذي‎ ١ ‏البلازماء‎ LDA ‏العظمي؛ يصاحبه أيضا فقد عظمي؛ جزئيا بسبب زيادة إظهار 0106-1 بواسطة‎
Abs ‏بإعطاء‎ Dkk-1 ‏والذي يثبط عندئذ نشاط بناء العظم لخلايا التعظم القريبة. إن تقليل نشاط‎ ‏أو الأجزاء الوظيفية مناعيا منها من الاختراع يمكن أن يؤدي إلى زيادة في نشاط خلايا التعظم‎ ‏التي تخدم في معارضة النشاط الزائد للخلايا الملتهمة للعظم؛ وبذلك تقل شدة الاضطرابات‎ ‏يقل تآكل العظم ويحث تكوين عظم جديد في المريض. إن المعالجة مع أجسام‎ SAN ‏مالفة‎ YS ‏مضادة خاصة مضادة 0106-1 أو أجزاء وظيفية مناعيا منها يمكن أن تحث زيادة مفيدة في‎ ‏في مريض يعاني من اضطراب نقص النسيج العظمي.‎ 0 ‏أو الأجزاء الوظيفية مناعيا الموصوفة هنا يمكن أيضا استخدامه‎ Abs ‏إن تثبيط 0100-1 مع‎ ‏يمكن أن‎ Lima ‏وأجزاء‎ Abs ‏في استخدامات إصلاح عظمي عديدة. على سبيل المثال» هناك‎
All ‏تكون مفيدة في تأخير التحلل العظمي لبقايا التآكل الملازمة للمفاصل الصناعية؛ تعجيل‎ Yo ‏الكسور العظمية؛ وزيادة اندماج الرقع العظمية في العظم الحي المحيط التي تم ترقيعها فيه.‎
حسب التوضيح هناء يمكن إعطاء ‎Abs‏ مضادة 2106-1 أو الأجزاء الوظيفية مناعيا منها بمفردها أو في اتحاد مع عوامل علاجية أخرى؛ مثلاء في اتحاد مع عوامل لعلاج السرطانء مع عوامل تثبط نشاط خلايا التهام العظم أو مع عوامل أخرى تزيد نشاط خلايا التعظم. على سبيل المثال؛ يمكن إعطاء ‎Abs‏ من الاختراع لمرضى سرطان خاضعين لعلاج بالأشعة أو © علاج كيميائي. تتضمن العلاجات الكيميائية المستخدمة في اتحاد مع ‎Abs‏ المخترعة ‎<oxaloplatin ¢5-fluorouracil «doxorubicin <tamoxifene «taxol anthracyclines‏ ‎Velcade® ([(1R)-3-methyl-1-[[(2S)-1-0x0-3-phenyl-2-[(pyrazinylcarbonyl)amino]‏ ‎propyllaminolbutyl] boronic acid)‏ و/أو عقاقير جزيء صغير أخرى تستخدم في علاج السرطان. سوف يستفيد مرضى سرطان الثدي من إعطاء ‎aromatase dais‏ في نفس الوقت ‎٠‏ مع معالجات اتحاد تشمل عامل كيميائي علاجي ‎Abs‏ مضاد 0106-1 أو جزءٍ نشط مناعيا منه. يمكن استخدام ‎Abs‏ المضادة 2100-1 والأجزاء الوظيفية مناعيا منها وحدها لمعالجة الحالات المشار إليها أعلاه التي تؤدي إلى فقد كتلة العظم أو في اتحاد مع كمية مؤثرةٍ علاجيا من عامل محث لنمو العظم (ابتنائي) أو عامل مضاد للامتصاص العظمي متضمنا بدون ‎١‏ تحديد: عوامل مكونة لشكل العظم يشار ‎BMP-1 Jie lel‏ أو 31/0-12؛ عامل تحلل نمو تحويلي-8 وأعضاء عائلة ‎¢TGF-B‏ عوامل نمو خلية ليفية أولية 7017-1 إلى ‎(FGF-10‏ ‏مثبطات 11-1 (متضمنة 11-1:8؛ ‎Abs‏ من أجل 11-1 5 ‎Abs‏ لمستقبلات 11-1)؛ مثبطات 1117-0 (متضمنة ‎adalibumab etanercept‏ و ‎¢(infliximab‏ مثبطات مركب ترابطي ‎RANK‏ ‏(متضمنة ‎RANK‏ قابل للذوبان» ‎protegerin‏ عظمي 5 ‎Abs‏ مضادة تربط بصفة خاصة ‎٠‏ اطع أو مركب ترابطي ‎(RANK‏ هرمون جاردرقي» ‎prostaglandins‏ النوع ‎«E‏ ‎bisphosphonates‏ ومعادن معززة للعظام ‎(Jie‏ 100108 و«”ن08101. تتضمن العوامل الابتنائية التي يمكن استخدامها في اتحاد مع ‎Abs‏ المخترعة والأجزاء الوظيفية منها هرمون جاردرقي وعامل نمو يشبه ‎(IGF) insulin‏ حيث يفضل أن يكون العامل الأخير ‎US jie‏ مع ‎protein‏ ‏يربط ‎IGF‏ يوصف مضاد لمستقبل ‎IL-1‏ مناسب لتلك المعالجة المتحدة في 17089/11540 © ويوصف مستقبل-11071 قابل للذوبان مناسب في 7098/01555. إن مضادات مركب ترابطي ‎RANK‏ التمثيلية معلنة؛ مثلاء في 03/086289 ‎¢WO003/002713 «WO‏ براءات الاختراع
و الأمريكية أرقام: 1756611 و 4979775 1. كل براءات الاختراع وطلبات براءة الاختراع المذكورة مندمجة هنا كمرجع. إضافياء يمكن إعطاء ‎Abs‏ مضادة 0106-1 لمرضى في اتحاد مع ‎Abs‏ ترتبط مع خلايا ورم وتحث التأثير السام للخلية و/أو الموقف لنمو الخلية على نمو الورم. تتضمن أمثلة لتلك ‎Abs ©‏ تلك التي ترتبط مع ‎proteins‏ سطح ‎protein «CDC33 ¢Her2 «CDC20 «Ayla‏ سكري يشبه ‎mucin‏ ومستقبل عامل نمو بشراني ‎(BGFR)‏ موجود على خلايا الورم وتحث التأثير الموقف لنمو الخلية و/أو السام للخلية على خلايا الورم التي تظهر هذه ‎proteins‏ تتضمن أمثلة لتلك ‎HERCEPTIN® :Abs‏ لمعالجة سرطان الشدي 5 ‎RITUXAN®‏ لمعالجة ورم ليمفاوي غير ‎(Hodgkin‏ وتتضمن أيضا عقاقير معتمدة على ‎Ab‏ مثل ‎ERBITUX®‏ ‎٠‏ و©111قذ لاط أيضاء يمكن أن يتضمن علاج الاتحاد كعوامل لعلاج سرطان ‎polypeptides‏ ‏تحث انتقائيا الموت المبرمج في خلايا الورم»؛ مثل ‎polypeptide‏ المتعلق بالعامل ‎‘TNF‏ ‎TRAIL‏ ‏يمكن إعطاء ‎Abs‏ الموضوع أو أجزاء وظيفية ‎Lelio‏ منها بصورة متزامنة مع معالجات وعوامل علاجية أخرى معطاة لنفس الحالة. إن "الإعطاء المتزامن"؛ حسب الاستخدام هناء ‎Vo‏ يشتمل معالجات تعطى بصورة متزامنة أو بصورة متعاقبة. يمكن إعطاء ‎Abs‏ مضادة 0101 أو أجزاء وظيفية مناعيا منها بصورة وقائية لمنع أو إخماد بداية فقد كتلة عظم في سرطان مرحلة مبكرةٍ (المرحلة ‎١‏ أو ‎)١‏ أو يمكن أن تعطى لتحسين ‎Ula‏ فقد كتلة عظمية موجودة بسبب انتشار ورمي إلى العظم. يمكن استخدام ‎Abs‏ المضادة 2106-1 من الاختراع لمنع و/أو معالجة نمو خلايا الورم في ‎٠‏ العظام. إن السرطان المنتشر إلى العظام يمكن أن ينتشر بسهولة لأن خلايا الورم تثير خلايا التهام العظم لكي تمتص البنية العظمية الداخلية. إن المعالجة مع ‎Ab‏ مضاد ‎Dkk-1‏ أو جزء وظيفي ‎Lelie‏ منه سوف تساعد في استبقاء ‎BMD‏ عند مكان تلك الأورام المنتشرة بإثارة نشاط زائد لخلية التعظم. إن أي سرطان من المحتمل أن ينتشر إلى العظم يمكن منعه أو علاجه مع ‎Ab‏ مضاد 110601 يعطى قبل أو بعد حدوث الانتشارات الورمية. ‎Yo‏ إن الورم النخاعي المتعدد مثال لنوع سرطان يمكن منعه و/أو معالجته مع ‎Ab‏ مضاد ‎Dkk-1‏ أو جزءٍ منه يربط مولد مضاد. يظهر المرضى المصابون نموذجيا فقدا في كتلة العظم بسبب التنشيط الزائد لخلية التهام العظم في مناطق متمركزة من العظم. إن خلايا الورم
A
التخاعي تنتج بصورة إما مباشرة أو غير مباشرة مركب ترابطي ‎(RANK‏ وهو ‎protein‏ ينشط ‎WDA‏ الالتهام للعظم مؤديا إلى تحلل للعظم المحيط بخلايا الورم النخاعي المطمورة في فراغات النخاع العظمي. إن خلايا الالتهام العظمي الطبيعية المجاورة لخلية الورم النخاعي في المقابل ‎gi‏ 11-6؛ الذي يؤدي إلى نمو وانقسام خلايا الورم النخاعي. إضافيا تنتج خلايا الورم © النخاعي المتعدد 2106-1 وبذلك تثبط نشاط خلايا التعظم وتحث إضافيا نشاط امتصاص العظم في هذا المرض. إن معالجة حيوان مع ‎Ab‏ مضاد 0106-1 أو جزءٍ وظيفي مناعيا منه سوف يثير نشاط خلايا التعظم؛ وبذلك تزداد الكتلة العظمية عند مكان الأورام. قد تؤدي تلك المعالجة ‎LY‏ تقليل في ألم العظم؛ وقد تخمد الانتشار الورمي الإضافي إلى العظم بمنع النشاط الامتصاصي الذي يطلق مواد مغذية للعظم تستعملها خلايا الورم. في معالجة هذا ‎(papal‏ ‎٠‏ يمكن إعطاء جسم مضاد مضاد-0102-1 أو جزء وظيفي مناعيا منه بصورة متلازمة مع ‎Abs‏ مضادة موجهة ضد مركب ترابطي ‎RANK‏ أو ‎Abs‏ مضادة ‎JL-6‏ معالجة الاضطرابات الأخرى بالإضافة إلى الاستخدامات السابقة المتعلقة باضطرابات العظم؛ يمكن استخدام بعض من ‎Abs‏ والأجزاء الوظيفية مناعيا المتوافرة لعلاج أمراض أخرى. إن دور 1106-1 في هذه ‎٠‏ الأمراض يدعمه جزئيا إظهاره في أنسجة عديدة مختلفة. يمكن استخدام ‎Abs‏ والأجزاء»؛ ‎lie‏ ‏لعلاج أمراض مطلوب فيها حث تجديد خلية جذعية. تتضمن تلك الأمراض؛ لكن بدون تحديد؛ مرض السكرء فشل القلب المزمن وأمرارض عضلة مختلفة ‎Olid]‏ ضمور بسبب سوء الاستخدام ناتج» ‎Dla‏ من عدم حركة؛ أو راحة الفراش)؛ قابلية الكسر المرتبطة بتقدم السن (نقص النسيج العضلي في ‎SUS‏ السن)؛ سوء التغذية العضلية؛ هزال ملازم لسرطان؛ إيدز أو التهاب؛ خلل ‎٠‏ تغذية ‎protein-d8la‏ في الفشل الكلوي/ ارتفاع البولينا في الدم؛ والضعف العضلي في السمنة]. يمكن أيضا معالجة أمراض التهابية عديدة؛ متضمنة؛ على سبيل ‎«JU‏ مرض ‎«Crohn‏ ‏التهاب القولون» ومرض الأمعاء الالتهابي. يمكن أيضا استخدام ‎Abs‏ والأجزاء في معالجة ‎aly‏ عصبية كثيرة (مثلاء مرض ‎cAlzheimer‏ مرض ‎«Parkinson‏ ومرض ‎.(Huntington‏ ‏إن أمراض العين ‎Nig)‏ تحلل البقعة الملونة والاعتلالات الشبكية المتعددة) يمكن أيضا © معالجتها مع بعض ‎Abs‏ والأجزاء. يمكن أيضا معالجة أمراض كلوية مختلفة (مثلاء مرض كلوي في مرحلة ‎(Ailes‏ مرض كلوي مزمن؛ التهاب كلوي كبيبي؛ التهاب كلوي في الأنابيب والنسيج بين الخلايا واعتلال كلوي ‎(IgA‏ مع بعض 808. إضافيا؛ يمكن أيضا معالجة أمراض
رئوية مختلفة (مثلا؛ ‎«COPD‏ تليف رثوي مجهول السبب وتليف كيسي) واضطرابات جلدية متتوعة؛ متضمنة أمراض أدمة الجلد والبشرة. تتضمن الأمثلة لاضطرابات الجلد التي يمكن معالجتها تلف ظهارة الأمعاء (مثلا ‎Cali‏ بسبب علاج كيميائي)؛ وأمراض أخرى مطلوب فيها إثارة نمو وإحياء الظهارة المعوية. ‎٠‏ المجموعات تتوافر ‎Lad‏ مجموعات تتضمن ‎Ab‏ أو ‎ein‏ وظيفي ‎Lelia‏ أو تركيبة دوائية حسب الوصف هنا. تتضمن بعض المجموعات ذلك ‎(Ab‏ الجزءٍ أو التركيبة في حاوية (مثلاء زجاجة أو أمبول)؛ وقد تتضمن ‎Lad‏ إرشادات لاستخدام ‎Ab‏ أو الجزء في الاستخدامات المختلفة للتحديدء للفحص والعلاجية المعلنة أعلاه. يمكن أن يكون ‎Ab‏ الجزءٍ أو التركيبة في أشكال متنوعة؛ ‎٠‏ تتضمن؛ على سبيل المثال؛ كجزء من محلول أو كمادة صلبة (مثلاء مسحوق مجفف بالتبريد). قد تتضمن الإرشادات وصفا لكيفية تحضير (مثلا؛ إذابة أو ‎sale)‏ تعليق) ‎Ab‏ أو الجزء في مائع ملائم و/أو كيفية إعطاء ‎Ab‏ أو الجزءٍ لمعالجة الأمراض الموصوفة أعلاه (مثلاء اضطرابات العظم مثل كتلة عظمية ‎ALB‏ فقد عظمي عام؛ تكوين عظمي مثبط وتأكلات عظمية؛ تجديد خلية جذعية؛ أمراض التهابية؛ أمراض عصبية؛ أمراض العين؛ أمراض الكلى ‎١‏ واضطرابات الجلد). ‏قد تتضمن المجموعات أيضا مكونات أخرى عديدة؛ ‎Jie‏ مواد مثبتة للأس الهيدروجينيء أملاح» ‎fons‏ قلز تركيبية وعوامل أخرى موصوفة أعلاه في جزءٍ التركيبات الدوائية. يمكن تضمن هذه المكونات مع ‎Ab‏ أو الجزء أو قد تكون في حاويات منفصلة. قد تتضمن المجموعات أيضا عوامل علاجية أخرى للإعطاء مع ‎Ab‏ أو الجزء. تتضمن الأمثلة لتلك ‎٠‏ العوامل؛ لكن بدون تحديد» عوامل لعلاج سرطانات»؛ عوامل محثة للعظم ‎Abs‏ تربط خلايا الورم» وعوامل أخرى مذكورة أعلاه. وصف خاص إضافي للأجسام المضادة ‎Dkk-1 alias‏ تعديلات لقسم ‎Foy‏ ‏في الأجسام المضادة المكتسبة للسمة الآدمية المخلقة؛ يمكن تعديل قسم ‎Foy‏ لتجنب تفاعل ‎Dr. Mike ‏ونظام المناعة المكمل. يصمم هذا النوع من التعديل بواسطة‎ Foy ‏بيني مع مستقبل‎ Yo ‏وتوصف تقنيات لتحضير مثل هذه‎ «Cambridge ‏من قسم الأمراض في جامعة‎ Clark
N99 ‏نوفمبر‎ VA ‏المنشور في‎ (WO 99/58572 ‏الأجسام المضادة؛ على سبيل المثال؛ في‎
٠ ‏على سبيل المثال؛ يمكن هندسة المنطقة الثابتة لتحاكي أكثر المناطق الثابتة الآدمية لتجنب‎ ‏استجابة مناعة إذا استخدم الجسم المضاد لعلاج كائنات آدمية. انظر؛ على سبيل المثال؛ براءة‎
LOATIRAY 5 8441/57 ‏الاختراع الأمريكية أرقام‎ huMabJC18 ‏تعديلات لأجل‎ ‏مكتسب السمة الآدمية‎ DKK-1 ‏إن 1011801018 هو جسم مضاد أحادي النسخ مضاد‎ ‏الشرح الحالي تعديلات لأجل 0014801018 تتضمن أجسام مضادة متكافئة‎ Jody ‏تماما.‎ ‏الوظيفية بحيث لا تؤثر التعديلات بصورة واضحة على خصائصهم وأشكالهم المتعددة التي‎ ‏تمكن‎ Gill ‏تحث أو تقلل التأثير و/أو الانجذاب. على سبيل المثال؛ كما يقدر هؤلاء المهرة في‎
Dkk- ‏لإنتاج جسم مضاد مع انجذاب للترابط مع‎ huMabJC18 ‏من‎ amino acid ‏تحويل ترتيب‎ ‏هي إجراء روتيني في الفن ولا يحتاج إلى وصف‎ polypeptides ‏مطلوب. إن تعديلات‎ 1 ٠ ‏على‎ atid ‏إن‎ polypeptides ‏تصف تعديل‎ LB ‏تفصيلي في هذا الموضوع. إن‎ amino acid ‏مع بدائل وقاثية من متخلفات‎ polypeptides ‏معدلة تتضمن:‎ polypeptides ‏التي لا تغير النشاط الوظيفي بوضوح إلى حد‎ amino acids ‏حذف أو إضافة واحد أو أكثر من‎ ‏أو استخدام نظائر كيميائية.‎ «la ‏تتراوح في‎ carboxyl ‏و/أو‎ amino ‏اندماجات طرفية-‎ amino acid ‏تتضمن إدخالات ترتيب‎ Yo ‏متخلف أو أكثر؛ بالإضافة إلى‎ ٠٠١ ‏تحتوي على‎ polypeptides ‏الطول من متخلف واحد إلى‎ ‏وحيدة أو متعددة. تتضمن أمثلة لإدخالات‎ amino acid ‏إدخالات داخل الترتيب لمتخلفات‎
Gale ohn ‏طرفي-11 أو الجسم المضاد مندمج مع‎ methionyl ‏طرفية جسم مضاد مع متخلف‎ ‏تتضمن أشكال متباينة إدخالية أخرى لجزيء الجسم المضاد الاندماج مع النهاية-17‎ epitope ‏يزيد عمر النصف للجسم المضاد في الدورة‎ polypeptide ‏أو -0 للجسم المضاد لإنزيم أو‎ ٠ ‏الدموية.‎ ‏واحد في جزيء جسم‎ amino acid ‏للاستبدال بها على الأقل متخلف‎ Auli, ‏إن أشكال‎ ‏مضاد تمت إزالته وإدخال متخلف بدلا منه. تتضمن الأماكن الأكثر أهمية لتكوين طفري‎ ‏متوقعة أيضا. إن الاستبدالات الحامية‎ FR ‏استبدالي المناطق مفرطة التغير؛ لكن تعديلات‎ ‏تحت العنوان "استبدالات حامية". إذا أدت تلك الاستبدالات إلى تغير في‎ ١ ‏_مبينة في جدول‎ © ‏النشاط الحيوي؛ فهناك عندئذ مزيد من التغيرات الجوهرية؛ تسمى 'استبدالات تمثيلية" في جدول‎
٠١١ ‏يمكن إدخالها ويتم فحص‎ camino acid ‏أدناه بالإشارة إلى أنواع‎ Lila) ‏أو حسب الوصف‎ ١١ ‏المنتجات.‎ ‎amino acid ‏استبدالات‎ :١ ‏جدول‎ ‏م"‎ lle ‏نمك‎ Val val Ala (4)
Asn ¢Gln ¢Lys Lys Arg (R)
Arg ¢Lys ¢Asp ‘His ¢GIn Gln Asn (N)
Asn ‏؛‎ Gh Asp (D)
Ala ¢Ser Ser Cys (©)
Glu ¢Asn Asn Gln )9(
Gln ¢Asp Asp Glu (E)
Ala Ala Gly (G)
Arg (Lys ¢Gln ¢Asn Arg His (H)
Norleucine ¢Phe ¢Ala ¢Met ¢Val ‘Leu Leu Tle (D
Phe ¢tMet ¢Val ¢lle ¢Norleucine Te Leu (L)
Asn ¢GlIn tArg Arg Lys (K)
Ile ¢Phe ¢Leu Leu Met (M)
Tyr ¢Ala ¢Ile ¢Val ¢Leu Tyr Phe (F)
Ala Ala Pro (P)
Thr Thr Ser (S)
Ser Ser Thr (T)
Phe ¢Tyr Tyr Trp (W)
Ser ¢Thr ¢Phe ¢Trp Phe Tyr (Y)
Norleucine ¢Ala ¢Phe ¢Met ‘Leu ¢lle Leu Val (V) ‏تجرى تعديلات جوهرية في الخواص الحيوية للجسم المضاد بانتقاء استبدالات تختلف‎ ‏في‎ polypeptide ‏الأساسي لأجل‎ Jel ‏بدرجة ملحوظة في تأثيرها على استبقاء (أ) بناء‎ ٠ ‏كشكل صفحة أو حلزوني؛ (ب) شحنة أو صد الماء للجزيء عند‎ Ne lagu) ‏منطقة‎ |ّ ‏المكان المستهدف؛ أو (ج) ضخامة السلسلة الجانبية. تقسم المتخلفات طبيعية الوجود إلى‎ ‏مجموعات على أساس خواص السلسلة الجانبية المشتركة:‎
١١ tlle «Leu «Val «Ala <Met «Norleucine ‏غير قطبية:‎ (V) ‘Gln ‏صقف‎ «Thr «Ser «Cys ‏قطبية بدون شحنة:‎ )7( ¢Glu ‏حمضية (سالبة الشحنة): دري‎ (V) ‏عتم؛‎ «Lys ‏قاعدية (موجبة الشحنة):‎ )6( ‏و‎ Pro «Gly ‏متخلفات تؤثر على اتجاه السلسلة:‎ (0) °
His «Phe «Tyr «Trp ‏أرومائية؛‎ () ‏تجرى استبدالات غير محمية باستبدال عضو من واحد من هذه الأنواع بدلا من نوع آخر.‎ ‏غير مشتمل في استبقاء الشكل الجيد للجسم المضاد يمكن أيضا‎ cysteine ‏إن أي متخلف‎ ‏لتحسين الثبات التأكسدي للجزيء ومنع الربط المتقاطع الشاذ. على‎ serine ‏مع‎ dole allan ‏إلى الجسم المضاد لتحسين ثباته؛ تحديدا عندما‎ cysteine ‏العكس» يمكن إضاقة رابطة (روابط)‎ ٠
Fv eda ‏جسم مضاد مثل‎ gia ‏يكون الجسم المضاد هو‎ amino acids ‏من تغيير أو تعديل واحد أو أكثر من‎ amino acid ‏يمكن أن تتراوح تعديلات‎ ‏المنطقة المتغيرة. إن التغييرات في المنطقة المتغيرة يمكن‎ Jie ‏لإكمال أعادة تصميم المنطقة؛‎ © ‏إلى‎ ١ ‏أن تغير انجذاب و/أو خصوصية الارتباط. في بعض التجسيدات؛ لا يجرى أكثر من‎ ‏في تجسيدات أخرى» لا يجري أكثر‎ CDR ‏محمية في مجال سيطرة‎ amino acids ‏استبدالات‎ ٠ ‏في تجسيدات أخرى‎ ‘CDR ‏محمية في مجال سيطرة‎ amino acids ‏إلى ؟ استبدالات‎ ١ ‏من‎ ‎.CDR 13 ‏و/أرو‎ CDR H3 ‏هو‎ CDR ‏يكون مجال سيطرة‎ huMabJC18 ‏من أجل‎ Glycosylation ‏بالإضافة إلى‎ glycosylated ‏وغير‎ glycosylated polypeptides ‏تتضمن تعديلات أيضا‎ ‏مع سكريات مختلفة؛‎ glycosylation ‏مع تعديلات أخرى بعد الترجمة مثل؛‎ polypeptides | ٠ ‏عند أماكن محمية‎ glycosylated ‏تكون الأجسام المضادة‎ phosphorylation ‏و‎ acetylation ‏في مناطقها الثابتة مثل‎ (Jefferis and Lund, (1997), Chem. Immunol. 65:111-128; Wright and Morrison, (1997), TibTECH 15:26-32). protein ‏المناعية تؤثر على وظيفة‎ globulins Ja¥ oligosaccharide ‏إن السلاسل الجانبية‎ Yo (Boyd et al., (1996), Mol. Immunol. 32:1311-1318; Wittwe and Howard, (1990),
Biochem. 29:4175-4180)
YoY
والتفاعل داخل الجزيئات بين أقسام ‎protein‏ السكري؛ والذي يمكن أن يؤثر على الشكل
والسطح المقدم ثلاثي الأبعاد لأجل ‎protein‏ السكري ‎(Jefferis and Lund, supra; Wyss and Wagner, (1996), Current Opin.
Biotech. 7:409-‏ )416 ‎٠‏ .قد تخدم ‎Lad Oligosaccharides‏ لاستهداف ‎protein‏ سكري معين لجزيئات خاصة اعتمادا على بناءات إدراك خاصة. إن ‎Glycosylation‏ مضادات الجسم مقررة أيضا بأنها تؤثر على سمية خلية خلوية تعتمد على جسم مضاد (80©©0). بصفة خاصة؛ تقرر أن خلايا ‎CHO‏ مع إظهار ‎tetracycline‏ من أجل 1 ‎«(GnTIM) B(1,4)-N-acetylglucosaminyltransferase‏ وهو ‎glycosyltransferase‏ يحفز تكوين ‎GIcNAc‏ نصيفية؛ تقرر بان لها نشاط ‎ADCC‏ محسن
.(Umana et al., (1999), Mature Biotech. 17:176-180(0 ٠
إن ‎glycosylation‏ الأجسام المضادة نموذجيا إن متصلة ‎N-‏ أو متصلة -0. تشير متصلة 17 إلى ارتباط جزءٍ ‎carbohydrate‏ مع السلسلة الجانبية لمتخلف ‎-asparagines‏ إن ترتيبات ‎asparagine-X-cysteine s ¢asparagine-X-threonine ¢asparagine-X-serine tripeptide‏ حيث كز هو أي ‎«proline Jac ls amino acid‏ هي ترتيبات الإدراك للارتباط الإنزيمي لجزء
‎carbohydrate ٠‏ مع السلسلة الجانبية لأجل 9:88:068م88. لذلك؛ فإن وجود أي من هذه الترتيبات ‎tripeptide‏ في ‎polypeptide‏ يولد مكان ‎glycosylation‏ ممكن. تشير ‎glycosylation‏ متصلة -0 إلى ارتباط واحد من السكريات ‎«N-acetylgalactosamine‏ ‎«galactose‏ أو 6 مع ‎acid‏ ممتصد يمل نيط أكثر شيرعا ‎serine‏ أو ‎«threonine‏ برغم أنه يمكن أيضا استخدام ‎5-hydroxyproline‏ أى ‎.5-hydroxylysine‏
‎amino. ‏إلى الجسم المضاد تتحقق تقليديا بتعديل ترتيب‎ glycosylation ‏إن إضافة أماكن‎ ٠ ‏الموصوفة أعلاه (لأماكن‎ tripeptide ‏بحيث يحتوي واحد أو أكثقر من الترتيبات‎ 10 ‏إجراء تعديل بإضافقة؛ أو استبدال بواسطة؛ واحد أو‎ Load ‏يمكن‎ . (N- ‏متصلة‎ glycosylation ‏إلى ترتيب الجسم المضاد الأصلي (لأماكن‎ threonine ‏أو‎ serine ‏أكثر من متخلفات‎ .)0- ‏متصلة‎ glycosylation
‎Yo‏ إن ‎glycosylation Jai‏ للأجسام المضادة يمكن أيضا تعديله بدون تعديل لترتيب ‎nucleotide‏ الكائن. تعتمد ‎glycosylation‏ بدرجة كبيرة على الخلية العائلة المستخدمة لإظهار الجسم المضاد. لأن نوع الخلية المستخدمة لإظهار ‎protein‏ سكرية مُخلقة؛ ‎١ Die‏ لأجسام
Yof ‏المضادة؛ كعلاجات ممكنة بصورة نادرة هو الخلية الأولية؛ فمن الممكن أن نتوقع حدوث‎
Hse et al. ,)1997(, J. Biol. «Mie ‏للأجسام المضادة (انظر‎ glycosylation ‏تباينات في نمط‎ .Chem. 272:9062-9070) ‏أثناء الإنتاج‎ glycosylation ‏بالإضافة إلى اختيار الخلايا العائلة؛ فإن العوامل المؤثرة على‎ ‏التخليقي لأجسام مضادة تتضمن طريقة النموء مستحضر الأوساط؛ كثافة المزرعة؛‎ © ‏الأس الهيدروجيني؛ برامج التنقية؛ إلخ. هناك طرق عديدة مقترحة لتعديل نمط‎ coxygenation ‏الموجود في كائن حي عائل خاص متضمنة إدخال أو إظهار زائد لإنزيمات‎ glycosylation 04977706 ‏(براءات الاختراع الأمريكية أرقام‎ oligosaccharide ‏خاصة مشتملة في إنتاج‎ ‏يمكن‎ glycosylation ‏أو أنواع خاصة من‎ «glycosylation ‏إن‎ ٠ ‏و5778799)‎ 817731 ‏إضافياء‎ .(Endo H) endoglycosidase H ‏السكري»؛ مثلا باستخدام‎ protein ‏إزالتها إنزيميا من‎ ٠ ‏فإن الخلية العائلة المُخلقة يمكن تعديلها جينيا لكي تكون ناقصة في معالجة أنواع خاصة من‎ ‏إن هذه التقنيات وأخرى مشابهة معروفة جيدا في الفن.‎ polysaccharides ‏تقنيات ازدواج‎ ‏للتعديل استخدام تقنيات اقتران معروفة في‎ (gyal ‏كما يلاحظ في السابق تتضمن طرق‎ ‏واستخدام عوامل كلابية. يمكن‎ oxidative ‏الفن؛ تتضمن؛ بدون تحديد؛ وسائل إنزيمية؛ استبدال‎ _ ١ huMabJC18 | ‏لارتباط علامات لاختبار مناعي. تحضر‎ Sha ‏استخدام التعديلات؛‎ ‏ويمكن فحصها باختبارات قياسية معروفة في‎ Gill ‏15م معدلة بإجراءات راسخة في‎ ‏بعضها موصوف أدناه وفي الأمثلة. يقدر هؤلاء الماهرون في الفن أي طرق مناسبة‎ (dl ‏لعمل ومسح مثل هذه التعديلات.‎ ‏منطقة ثابتة معدلة‎ ‏منطقة ثابتة‎ Jie ‏في بعض تجسيدات الاختراع؛ يشمل الجسم المضاد منطقة ثابتة معدلة؛‎ ‏لا تثير تحلل بسبب مكمل؛ لا تثير تسمم خلوي تتدخل فيه‎ Ole ‏خاملة مناعيا أو خاملة جزئياء‎ ‏الخلايا غير العصبية؛ أو لها نشاطات‎ han ‏خلية معتمدة على جسم مضاد (©00م)؛ أو لا‎ ‏في أي واحدة أو أكثر مما يلي: إثارة تحلل بسبب‎ (ame ‏قليلة (مقارنة مع جسم مضاد غير‎ ‏أو تنشيط الدبق العصبي‎ (ADCC) ‏._مكمل؛ تحفيز خلية تعتمد على جسم مضاد تسبب تسمم‎ Yo ‏و/أو اتحاد‎ Jil ‏الدقيق. إن التعديلات المختلفة للمنطقة الثابتة يمكن استخدامها لتحقيق مستوى‎ ‏أمتل من الوظائف المستجيبة. انظر على سبيل المثال‎
Yeo
Morgan et al., Immunology 86:319-324, (1995); Lund et al., J. Immunology 157:4963-9 157:4963-4969, (1996); Idusogie et al., J. Immunology 164:4178-4184, (2000); Tao et al., J. Immunology 143: 2595-2601, (1989); and Jefferis et al.,
Immunological Reviews 163:59-76, (1998).
Eur. J. Immunol. (1999), ‏في بعض التجسيدات؛ تعدل المنطقة الثابتة حسب الوصف في‎ ٠ ‏و/أو منشور براءة الاختراع‎ ¢PCT/GB99/01441 ‏رقم‎ PTC ‏29:2613-4؛ منشور‎ 386854217 ‏البريطانية رقم‎ ‏في تجسيدات؛ يشمل الجسم المضاد منطقة ثابتة 150228 سلسلة ثقيلة آدمية تشمل الطفرات‎ ‏إلى ترتيب 18902 النوع البري).‎ amino acid ‏إلى 53305331 (يتم ترقيم‎ A330P331 ‏التالية‎ ‏في تجسيدات أخرى»؛ تكون المنطقة الثابتة غير‎ «Bur. J. Immunol, (1999), 29:2613-2624 | ٠ ‏بتحويل متخلف‎ glycosylated ‏تكون المنطقة الثابتة غير‎ ¢ yal ‏0اح. في تجسيد‎ 0 ‏في المنطقة الثابتة. على سبيل المثال» يمكن إجراء طفرة لمكان‎ glycosylated amino acid ‏أو 11 انظرء مثلاء‎ K «Q «A ‏إلى‎ N-glycosylation 7
Tao et al., J. Immunology 143: 2595-2601 (1989); and Jefferis et al.,
Immunological Reviews 163:59-76 (1998). Vo ‏إنزيميا (مثل إزالة‎ aglycosylated ‏في أحد التجسيدات؛ فإن المنطقة الثابتة تكون غير‎ -(PNGase ‏بواسطة إنزيم‎ carbohydrate ‏مجال سيطرة المستجيب‎
WO ‏تتضمن تعديلات جسم مضاد أخرى أجسام مضادة معدلة حسب الوصف في‎ ‏نوفمبر 1999 تشمل الأجسام المضادة هذه؛ بالإضافة إلى مجال‎ VA ‏المنشور في‎ 99/58572 ٠ amino acid ‏سيطرة ربط موجه عند الجزيء المستهدف؛ مجال سيطرة مستجيب له ترتيب‎ ‏مناعي آدمي.‎ globulin AE ‏جوهريا لكل أو لجزءِ من مجال سيطرة ثابت من سلسلة‎ Blas ‏إن هذه الأجسام المضادة قادرة على ربط الجزيء المستهدف بدون إثارة تحلل ملحوظ معتمد‎ ‏على مكمل؛ أو تحطيم بواسطة خلية للهدف. في بعض التجسيدات؛ يكون مجال السيطرة‎ ‏تعتمد هذه أساسيا على‎ FoyRIIb ‏المستجيب قادرة على ربط بصفة خاصة 80 و/أو‎ © globulin ‏مجالات سيطرة هجينة مشتقة من 7 أو أكثر من مجالات سيطرة 02 سلسلة ثقيلة‎ ‏مناعي آدمي. إن الأجسام المضادة المعدلة بهذه الطريقة مناسبة بصفة خاصة للاستخدام في‎
Yo ‏طويل الأمد؛ لتفادي تفاعلات التهابية والأخرى الضارة لعلاج جسم مضاد‎ alias ‏علاج جسم‎ ‏التقليدي.‎ ‏الانجذاب المكتمل‎ ‏يتضمن الاختراع تجسيدات مكتملة الانجذاب. على سبيل المثال؛ يمكن إنتاج أجسام‎ ‏مضادة مكتملة الانجذاب بإجراءات معروفة في الفن‎ ٠ (Marks et al., 1992, Bio/Technology, 10:779-783; Barbas et al., (1994), Proc Nat.
Acad. Sci, USA 91:3809-3813; Schier et al., (1995), Gene, 169:147-155; Yelton et al., (1995), J. Immunol., 155:1994-2004; Jackson et al., (1995), J. Immunol., 154(7):3310-9; Hawkins et al., (1992), J. Mol. Biol., 226:889-896 ‏فحص تالد الطفرات في مكتبة‎ ٠ ‏يمكن استخدام الطرق التالية لضبط انجذاب جسم مضاد ولتمييز 001. إن طريقة لتمييز‎ ‏مثل جسم‎ polypeptide ‏تحسين) انجذاب ارتباط‎ Dia) ‏من جسم مضاد و/أو تعديل‎ CDR ‏بصفة عامة؛‎ "(library scanning mutagenesis) ‏مضاد؛ تسمى "تكوين طفري ماسح لمكتبة‎ ‏في‎ amino acid ‏يتم التكوين الطفري الماسح للمكتبة كما يلي. يستبدل واحد أو أكثر من أماكن‎
OY AY OY Ve 3 AY ‏ىك عت‎ oF lie) amino acids ‏أر أكثر من‎ ١ ‏مع‎ CDR Vo ‏باستخدام طرق يدركها الفن. يولد هذا مكتبات صغيرة‎ )٠١ ‏أو‎ ١9 OVA OY OT Vo ‏ذا‎ ‏تم تحليله)»؛ لكل منها‎ amino acids ‏من النسخ (في بعض التجسيدات؛ واحدة لكل مكان‎ ‏عند‎ amino acids ‏مجموعة مركبة من ؟ أو أكثر من الأعضاء (عند استبدال ؟ أو أكثر من‎ ‏الأولي (غير‎ amino acid ‏كل مكان). بصفة عامة؛ تتضمن المكتبة أيضا نسخة تشمل‎ ‏نسخة (اعتمادا على تعقيد‎ 80-7١ ‏مستبدل). يتم فحص عدد صغير من النسخ؛ مثلا حوالي‎ ٠ ‏المستهدف (أو هدف‎ polypeptide ‏المكتبة)؛ من كل مكتبة من أجل انجذاب الارتباط مع‎ ‏ارتباط آخر)؛ ويتم تحديد النسخ المرشحة مع ارتباط زائد؛ متماتل؛ ناقص؛ أو عدم ارتباط.‎ ‏تحديد الانجذاب للترايط‎ ‏إن طرق تحديد انجذاب الارتباط معروفة جيدا في الفن. يمكن تحديد انجذاب ارتباط‎ ‏أو 0108 الذي يحدد الاختلافات في‎ Biacore ‏سطح‎ plasmon (pd) ‏باستخدام تحليل‎ Yo ‏انجذاب ارتباط حوالي ضعفين أو أكبر. إن هذه الأنواع من التحاليل مفيد تحديدا عندما يرتبط‎ ‏ناتوجزيئي جرامي‎ ٠١ ‏حوالي‎ Kp ‏الجسم المضاد البادئ بسهولة مع انجذاب كبير نسبيا؛ مثلا‎
لاد أو أقل. يوصف الفحص باستخدام رنين ‎plasmon‏ سطح ‎Biacore‏ أو 0م في الأمثلة؛ هنا. يمكن تحديد انجذاب الارتباط باستخدام اختبارات اقتراب وميض ‎«Kinexa Biocensor‏ اختبارات وميضية تقاربية ‎(ELISA‏ اختبار مناعي ‎(IGEN) ORIGEN‏ إخماد استشعاع؛ © انتقال استشعاع؛ و/أو إظهار خميرة. يمكن ‎Lad‏ فحص انجذاب الارتباط باستخدام اختبار حيوي مناسب. في بعض التجسيدات؛ يستبدل كل مكان ‎amino acid‏ في ‎CDR‏ (في بعض التجسيدات؛ واحد في نفس الوقت) مع كل ‎amino acids ٠١‏ الطبيعية باستخدام طرق تكوين طفري يدركها الفن (بعضها موصوف ‎alg (Lis‏ هذا مكتبات صغيرة من النسخ (في بعض التجسيدات؛ ‎٠‏ واحدة لكل مكان ‎amino acid‏ يتم تحليله)؛ كل منها مركبة من ‎"٠١‏ عضو (عند استبدال كل العشرين ‎amino acid‏ عند كل مكان). في بعض التجسيدات؛ تشتمل المكتبة المطلوب فحصها استبدالات في ‎١‏ أو أكثر من ‎SLY‏ قد تكون في نفس ‎CDR‏ أو في 7 أو أكثر من ‎LCDR‏ لذلك؛ قد تشمل المكتبة استبدالات في ‎١‏ أو أكثر من ‎CDR‏ واحدة. قد تشمل المكتبة استبدال في 7 أو أكثر من ‎١‏ الأماكن في ؟ أو أكثر من ‎LCDRs‏ قد تشمل المكتبة استبدال في ؛ ‎cf‏ ©؛ أو أكثر من الأماكن» حيث تتواجد الأماكن المذكورة في ‎oY‏ ¥ ¢ 4؛ ©؛ أو 1 ‎(CDRs‏ يمكن إجراء الاستبدال باستخدام ‎codons‏ قليلة الوفرة. (انظر ‎Mia‏ جدول "من ,)1993( ‎Balint et al.,‏ ‎.(Gene 137(1):109-18‏ قد تكون ‎CDR‏ هي ‎CDRH3‏ و/أو ‎.CDRL3‏ قد تكون ‎CDR‏ هي واحدة أو أكثر من ‎.CDRH3 l/s <CDRH2 «CDRHI «CDRL3 «CDRL2 «CDRL1 Y:‏ قد تكون ‎CDR‏ هي ‎CDR} «Chothia CDR «Kabat CDR‏ ممتدة. إن النسخ المرشحة مع ارتباط محسن يمكن ترتيبهاء وبذلك يمكن تحديد طفرة استبدال ‎CDR‏ تؤدي إلى انجذاب محسن (يسمى أيضا استبدال "محسن"). إن النسخ المرشحة المرتبطة يمكن أيضا ترتيبهاء وبذلك يتحدد استبدال ‎CDR‏ يحتفظ بالارتباط. ‎Yo‏ يمكن إجراء عدة دورات من الفحص. على سبيل المثال؛ فإن النسخ المرشحة (المشتملة كل منها على استبدال ‎amino acid‏ عند استبدال واحد أو أكثر من واحدة أو أكثر من ‎(CDR‏ مع ارتباط محسن مفيد أيضا لتصميم مكتبة ثانية تحتوي على الأقل ‎amino acid‏ الأصلي
٠١ ‏طفرة‎ odie ‏تظهر‎ CDR ‏في‎ amino acid ‏محسن (أي؛ مكان‎ CDR ‏والمستبدل عند كل مكان‎ ‏استبدال ارتباط محسن). إن تحضير؛ وفحص أو انتقاء هذه المكتبة مشروح إضافيا أدناه.‎ ‏تعدد تكرار النسخ التي لها‎ (CDR ‏يوفر أيضا تكوين طفري ماسح مكتبة وسيلة لتمييز‎ ‏ارتباط محسن» نفس الارتباط؛» الارتباط القليل أو عدم الارتباط فإن ذلك يوفر أيضا معلومات‎ ‏لثبات معقد جسم مضاد مولد مضاد. على سبيل المثال؛‎ amino acid ‏تتعلق بأهمية كل مكان‎ © ‏العشرين» فإن ذلك المكان يتم‎ amino acids ‏بالارتباط عند تغيير كل‎ CDR ‏عندما يحتفظ مكان‎ ‏تحديده كمكان من غير المحتمل أن يكون مطلوب لارتباط مولد مضاد. على النقيض؛ عندما‎ ‏فقط بنسبة مئوية قليلة من الاستبدالات»؛ يحدد ذلك المكان بأنه مكان هام‎ CDR ‏يحتفظ مكان‎ ‏لذلك؛ فإن طرق تكوين طفري ماسح مكتبة تولد معلومات تتعلق بأماكن في‎ LCDR ‏لوظيفة‎ ‏العشرين)؛‎ amino acids ‏كثيرة مختلفة (تتضمن كل‎ amino acids ‏يمكن تغييرها مع‎ CDRs ٠ ‏قليلة العدد.‎ amino acid ‏لا يمكن تغييرها أو يمكن تغييرها فقط مع‎ CDRs ‏وأماكن في‎ amino acid ‏إن النسخ المرشحة مع انجذاب محسن قد تتحد في مكتبة ثابتة؛ تتضمن‎ ‏وقد تتضمن إضافيا استبدالات إضافية عند‎ «lal ‏الأصلي عند ذلك‎ amino acid ‏المحسن»‎ ‏ذلك المكان؛ اعتمادا على تعقيد المكتبة المطلوبة؛ أو المسموح بها باستخدام طريقة الفحص أو‎ ‏مجاور يمكن أن يكون عشوائيا‎ amino acid ‏عند الطلب؛ فإن مكان‎ (lila) ‏الانتقاء المطلوبة.‎ ١ ‏متجاورةٍ قد‎ amino acids ‏إن العشوائية لأجل‎ camino acid ‏من‎ JST ‏من أجل ؟ على الأقل أو‎ ‏الطفرية؛ والذي؛ في المقابل» يسمح أو يسهل إدخال‎ CDR ‏تسمح بمرونة بنائية إضافية في‎ ‏عدد كبير من طفرات التحسين. قد تشمل المكتبة أيضا استبدالات عند أماكن لا تظهر انجذاب‎ ‏محسن في الجولة الأولى من الفحص.‎ ‏يتم فحص أو انتقاء المكتبة الثانية من أجل أعضاء المكتبة التي لها انجذاب ارتباط محسن‎ Ye ‏و/أو معدل باستخدام أي طريقة معروفة في الفن؛ متضمنة الفحص باستخدام تحليل رنين‎ ‏متضمنة إظهار‎ (oD ‏وانتقاء باستخدام أي طريقة معروفة في الفن‎ Beore ‏سطح‎ 0 ribosome ‏بلعم»؛ إظهار خميرة؛ وإظهار‎ ‏اندماج‎ Proteins ‏اندماج مشتملة على واحد‎ proteins ‏كما هو مذكور فيما سبق؛ يشتمل أيضا الاختراع على‎ Yo ‏من‎ polypeptides ‏أو‎ (huMabJC18) ‏أو اكثر من الأجزاء أو المناطق من الأجسام المضادة‎ ‏على‎ cil ‏اندماج 10/801018 بطرق معروفة في‎ polypeptide ‏أن يتولد‎ (Say ‏هذا الاختراع.‎
سبيل المثال» صناعيا أو تخليقيا. نموذجياء تحضر ‎proteins‏ الاندماج 11011801018 من هذا الاختراع بتحضير وإظهار ‎polynucleotide‏ يشفرهم باستخدام طرق تخليقية موصوفة هنا؛ برغم أنه يمكن تحضيرهم أيضا بطرق أخرى معروفة في الفن» متضمنة؛ ‎Sle‏ تصنيع كيميائي. اتحاد ° كما هو مذكور ‎Lad‏ سبق؛ يوفر هذا الاختراع أيضا تركيبات تشمل أجسام مضادة ‎huMabJC18‏ أو ‎polypeptides‏ متحدة (مثلاء متصلة) مع عامل يسهل الاقتران مع دعامة صلبة (مثل ‎biotin‏ أو ‎(avidin‏ للتبسيط» ستتم الإشارة بصفة عامة إلى 5014801018 أو أجسام مضادة منع إدراك أن هذه الطرق تنطبق على أي من تجسيدات ارتباط 1106-1 حسب الوصف هنا. يشير الاتحاد بصفة عامة إلى توصيل هذه المكونات حسب الوصف هنا. إن ‎٠‏ التوصيل (وهو بصفة عامة تثبيت هذه المكونات في تلازم قريب على الأقل للإعطاء) يمكن أن يتم بأي عدد من الطرق. مثلاء يمكن حدوث تفاعل مباشر بين عامل وجسم مضاد عندما يمتلك كل منهما بديلا لديه القدرة على التفاعل مع الآخر. مثلاء فقد تكون مجموعة محبة للنواة» ‎Jie‏ مجموعة ‎amino‏ أو ‎sulfhydryl‏ على واحد قادرة على التفاعل مع مجموعة تحتوي على ‎«carbonyl‏ مثل ‎cacid halide | anhydride‏ أو مع مجموعة ‎alkyl‏ تحتوي على مجموعة ‎AE Vo‏ جيدة؛ (مثلا؛ ‎(halide‏ على الآخر. عوامل التعليم كما هو مذكور فيما سبق؛ قد يتصل الجسم المضاد أو ‎polypeptide‏ من هذا الاختراع مع عامل تعليم مناسب (بطريقة تبادلية 'معلم")» مثل جزيء استشعاعي» جزيء نشط إشعاعيا أو أي علامات أخرى معروفة في الفن. إن العلامات معروفة في الفن وتوفر عامة (إما بصورة ‎٠‏ مباشرةٍ أو غير مباشرة) إشارة. تركيبات كما هو مذكور ‎Lad‏ سبق؛ يوفر الاختراع أيضا تركيبات (تتضمن تركيبات دواثئية) ومجموعات ‎«Die calli‏ 101801018 حسب التوضيح في هذا الشرح. أيا من أو كل أجسام مضادة و/أو ‎polypeptide‏ الموصوفة هنا. ‎cPolynucleotide Yo‏ النواقل ‎Daa)‏ للإظهار) وخلايا العائل كما هو مذكور ‎Lad‏ سبق بالنسبة لعدة تجسيدات خاصة متوافرة» يوفر الاختراع أيضا ‎polynucleotides‏ معزولة تشفر ‎١‏ لأجسام المضادة 5 ‎polypeptides‏ من الاختراع (تتضمن
١١٠ ‏للمناطق المتغيرة سلسلة خفيفة وسلسلة ثقيلة‎ polypeptide ‏أجسام مضادة تشتمل على ترتيب‎ -polynucleotide ‏والنواقل وخلايا العائل المشتملة على‎ o((V) ‏مبينة في شكل‎ ‏لأجسام المضادة (متضمنة‎ ١ ‏تشفر أيا من‎ polynucleotides ‏يوفر الاختراع‎ AT ‏في جانب‎ ‏إمكانية‎ (dll ‏موصوفة هنا. سوف يدرك الماهرون في‎ polypeptides 5 ‏أجزاء جسم مضاد)‎ ‏المتوفرة بإجراءات معروفة في الفن.‎ polynucleotides ‏صنع‎ © ‏يوفر الاختراع تركيبات (مثل تركيبات دوائية موصوفة بتفصيل أكثر في‎ AT ‏في جانب‎ ‏الاختراع. في أحد التجسيداتء‎ polynucleotides ‏الجزء السابق أدناه) المشتملة على أية من‎ ‏يشفر 101801018 حسب الوصف‎ polynucleotide ‏تشمل التركيبة ناقل إظهار مشتمل على‎ ‏يشفر‎ polynucleotide ‏هنا. في أحد التجسيدات؛ تشتمل التركيبة على ناقل إظهار مشتمل على‎ ‏الموصوفة هنا. لا يزال في تجسيدات أخرى؛ تشمل‎ polypeptides ‏أي من الأجسام المضادة أو‎ ٠ ‏وتعريف‎ V9 ‏المبينة في تعريف الترتيب رقم‎ polynucleotides ‏التركيبة أيا من أو كلا من‎ ‏هنا.‎ Lilia) ‏موصوف‎ polynucleotide ‏إن نواقل الإظهار واعطاء تركيبات‎ YA ‏الترتيب رقم‎ ‏الموصوفة هنا.‎ polynucleotides ‏في جاتب آخرء يوفر الاختراع طرق لتحضير أي من‎ ‏مكملة لأي من تلك الترتيبات. قد تكون‎ polynucleotide Lua ‏يشمل الاختراع الحالي‎ ‏فردية الشريط (تشفيري أو مضاد للإحساس) أو ثنائية الشريط» وقد تكون‎ polynucleotide ٠
RNA ‏تتضمن جزيئات‎ RNA ‏أو مصنع) أو‎ cDNA ‏(جينومي»‎ DNA ‏عبارة عن جزيئات‎ - ‏بطريقة واحد- إلى‎ DNA ‏وتطابق جزيء‎ introns ‏جزيثات 1118118 التي تحتوي على‎ ‏التي لا تحتوي على 0005:. هناك ترتيبات تشفيرية أو غير تشفيرية‎ amRNA ‏واحدء وجزيئات‎ ‏من الاختراع‎ polynucleotide ‏موجودة في‎ ell dala ‏إضافية قد تكون؛ لكن ليست هناك‎ ‏برغم عدم الحاجة إلى ذلك؛ متصلا مع جزيئات أخرى‎ cpolynucleotide ‏الحالي؛ وقد تكون‎ ٠ ‏و/أو مواد تدعيم أخرى.‎ ‏ترتيب أولي (أي؛ ترتيب داخلي يشفر جسم مضاد أو قسم منه)‎ polynucleotide ‏قد تشمل‎ ‏واحدة أو‎ polynucleotide ‏أو قد تشمل شكل متباين من ذلك الترتيب. تحتوي أشكال متباينة‎ ‏أكثر من الإستبدالات؛ الإضافات؛ الإزالات و/أو الإدخالات بحيث لا يقل النشاط المناعي‎ ‏المشفرء مقارنة بجزيء أصلي نشط مناعيا. إن التأثير على النشاط‎ polypeptide ‏لأجل‎ © ‏مشفر يمكن تحديده عامة حسب الوصف هنا. يفضل أن تظهر‎ polypeptide ‏المناعي لأجل‎
Lad ‏الأشكال المتباينة تمائل حوالي 7978 على الأقل؛ يفضل أكثرء حوالي 780 على الأقل؛‎
١١١ ‏يشفر جسم مضاد‎ polynucleotide ‏مع ترتيب‎ ٠ ‏على الأقل‎ ٠ ‏يفضل أكثر تماثل حوالي‎ ‏أصلي أو قسم منه.‎ ‏'متماثلان" إذا كان ترتيب‎ polypeptide ‏أو‎ polynucleotide ‏يقال أن اثنين من ترتيبات‎ ‏في الترتيبن هو نفسه عند الاصطفاف من أجل التطابق‎ amino acids ‏أو‎ nucleotides ‏الأقصى حسب الوصف أدناه. تجرى المقارنات بين ترتيبين نموذجيا بمقارنة الترتيبات عبر‎ ٠ ‏نطاق مقارنة لتحديد ومقارنة المناطق الموضعية لتشابه الترتقيب. إن 'نطاق مقارنة "'حسب‎ ٠١ ‏على الأقل مكان متجاور على الأقل؛ عادة‎ ٠١ ‏يشير إلى قطعة من حوالي‎ clin ‏الاستخدم‎ ‏مقارنة ترتيب مع ترتيب مرجعي له نفس‎ Led ‏©؛ يمكن‎ ٠ ‏إلى حوالي‎ 5٠0 ‏إلى حوالي 75 أو‎ ‏العدد من الأماكن المتجاورة بعد اصطفاف الترتيبين بصورة مثالية.‎ ‏في‎ Megalign ‏للمقارنة باستخدام برنامج‎ Jie ‏يمكن إجراء اصطفاف‎ Ye
Lasergene suite of bioinformatics software (DNASTAR, Inc., Madison, WI), ‏باستخدام معايير الفقد. يجسد هذا البرنامج برامج اصطفاف عديدة في المراجع التالية:‎
Dayhoff, M.O., 1978, A model of evolutionary change in proteins - Matrices for detecting distant relationships. In Dayhoff, M.O. (ed.) Atlas of Protein Sequence and Structure, National Biomedical Research Foundation, Washington DC Vol. 5, Yo
Suppl. 3, pp. 345-358; Hein J., 1990, Unified Approach to Alignment and
Phylogenes pp. 626-645 Methods in Enzymology vol. 183, Academic Press, Inc.,
San Diego, CA; Higgins, D.G. and Sharp, P.M., 1989, CABIOS 5:151-153; Myers,
E.W. and Muller W., 1988, CABIOS 4:11-17; Robinson, E.D., 1971, Comb. Theor. : 11:105; Santou, N., Nes, M., 1987, Mol. Biol. Evol. 4:406-425; Sneath, P.H.A. and Ye
Sokal, R.R., 1973, Numerical Taxonomy the Principles and Practice of Numerical
Taxonomy, Freeman Press, San Francisco, CA; Wilbur, W.J. and Lipman, D.J., 1983, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:726-730. بصورة مفضلة؛ تتحد 'تماثل الترتيب 7 بمقارنة ترتيبين مصطفين بصورة مثلى عبر نطاق ‎Yo‏ مقارنة ‎Yo‏ مكان على الأقل؛ حيث يشمل قسم ‎polynucleotide‏ أو ‎polypeptide‏ في نطاق المقارنة إضافات أو إزالات ‎gl)‏ ثغرات) ‎77١‏ أو أقل؛ عادة © إلى 215 أو ‎٠١‏ إلى ‎JAY‏ ‏مقارنة بالترتيبات المرجعية (التي لا تشمل إضافات أو إزالات). من أجل الاصطفاف الأمثل
١١١ ‏أو متخلف‎ nucleic acid ‏قواعد‎ Baie ‏للترتيبين . تحسب 7 بتحديد عدد الأماكن الموجود‎ ‏متماثلة في كل من الترتيبين لينتج عدد الأماكن المتطابقة؛ قسمة عدد الأماكن‎ amino acid ‏المتطابقة على العدد الكلي للأماكن في الترتيب المرجعي (أي؛ مقاس النطاق) وضرب الناتج‎ .7 ‏الترتيب‎ Bla ‏لتنتج‎ ٠٠١ x ‏قد تكون الأشكال المتباينة أيضاء أو بطريقة بديلة؛ مماثلة جوهريا لجين أصلي؛ أو قسم أو‎ ° ‏على التهجين تحت شروط‎ 350 polynucleotide ‏مكمل من ذلك. إن تلك الأشكال المتباينة‎ ‏طبيعي الوجود المشفر للجسم المضاد الأصلي (أو‎ DNA ‏صارمة بدرجة متوسطة لترتيب‎ ‏ترتيب مكمل).‎
SDS (SSC 5 ‏تتضمن 'شروط متوسطة الصرامة' مناسبة غسيل مسبق في محلول‎ ‏*"مئوية إلى‎ ٠ ‏تهجين عند‎ f(A ‏جرامي (أس هيدروجيني‎ As ‏مللي‎ ١ EDTA +0 ٠ ‏دقيقة مع‎ ٠١0 ‏طوال الليل؛ ويلي ذلك غسيل مرتين عند *أ“مثوية لمدة‎ «SSC x0 (dye .7 0١ SDS ‏يحتوي على‎ SSC X +, Y 3X ٠,8 XY ‏كل من‎ ‏صارمة للغاية" أو "شروط عالية الصرامة" هي تلك التي:‎ Jag pd ‏حسب الاستخدام هناء فإن‎ ‏ع‎ sodium chloride Sie ‏تستعمل شدة أيونية قليلة ودرجة حرارة عالية للغسيل»‎ (0) / ١ sodium dodecyl sulfate ‏جزيئي جرامي/‎ ٠.٠0 ١٠١ sodium citrate ‏جزيثي جرامي/‎ ٠ ‏مثلا‎ «formamide Jie ‏#**مثوية؛ (7) تستعمل أثناء التهجين عامل مغير للطبيعة؛‎ ٠ ‏عند‎ ‎/7 ١ Ficoll /7 ٠.١ ‏مصل بقري‎ albumin ‏(حجم/ حجم) مع‎ 75 ٠ formamide ‏مللي جزيثي‎ © ٠ sodium phosphate ‏مثبت أس هيدروجيني‎ J +, polyvinylpyrrolidone sodium ‏مللي جزيثي جرامي؛‎ 75 sodium chloride ‏جرامي عند أس هيدروجيني 1,0 مع‎ x 0 «Jo. formamide ‏تستعمل‎ (V) ‏مللي جزيئي جرامي عند 47 "مثوية؛ أو‎ Yo citrate Ye sodium ¢( aba ‏جزيئي‎ +, YO sodium citrate ‏جزيثي جرامي»‎ ٠,20 NaCl) SSC sodium pyrophosphate ¢«(1,A ‏هيد روجيني‎ ol) ‏مللي جزيثي جرامي‎ © phosphate 0+) ‏منوي سالمون معالج بالموجات الصوتية‎ DNA ‏608:015؛‎ X © ‏محلول‎ 8١ ‏عند 67؟*مثوية؛ مع غسيل عند‎ 7٠١ dextran sulfates 70.1 SDS ‏ميكروجرام/ ملليلتر)؛‎ ‏عند‎ 75٠ formamide s (sodium citrate [sodium chloride) SSC X +,¥ ‏تمثوية في‎ 47 Yo
EDTA ‏يحتوي على‎ SSC X +, 0) ‏الصرامة يتكون من‎ Mo ‏ويلي ذلك غسيل‎ ¢dy5000
١١١ ‏عند © *"مئوية. سيدرك الصانع الماهر كيفية ضبط درجة الحرارة؛ الشدة الأيونية؛ إلخ» حسب‎ ‏الضرورة للتكيف مع العوامل مثل طول المجس» إلخ.‎ ‏العادية في الفن أنه؛ نتيجة لإنحلال الشفرة الجينية؛ توجد ترتيبات‎ led) ‏سيدرك أصحاب‎ polynucleotides ‏حسب الوصف هنا. تحمل بعض هذه‎ polypeptide ‏كثيرة تشفر‎ nucleotide ‏التي‎ polynucleotides ‏لأي جين أصلي. برغم ذلك؛ فإن‎ nucleotide ‏تشابه أدتنى مع ترتيب‎ oe ‏متوقعة بصفة خاصة في الاختراع الحالي.‎ codon ‏تتنوع بسبب الاختلافات في استخدام‎ ‏المتوافرة هنا في نطاق‎ polynucleotide ‏الجينات المشتملة على ترتيبات‎ alleles ‏إضافيا؛ فإن‎ ‏داخلية معدلة نتيجة لواحدة أو أكثر من الطفراتء‎ cilia ‏هي‎ Alleles ‏الاختراع الحالي. إن‎ ‏الناتجانء‎ protein yg mRNA ‏قد يكون‎ nucleotides ‏مثل إزالات؛ إضافات و/أو استبدالات‎ ‏بتقنيات قياسية (متل‎ Alleles ‏ا لكن بدون حاجة لذلك؛ لهما بناء أو وظيفة متغيران. يمكن تحديد‎ ٠ ‏تهجين؛ تكبير و/أو مقارنة ترتيب قاعدة بيانات).‎ ‏هذا الاختراع باستخدام تصنيع كيميائي» طرق‎ polynucleotides ‏يمكن الحصول على‎ ‏معروفة جيدا في الفن‎ polynucleotide ‏إن الطرق للتصنيع الكيميائي لأجل‎ PCR ‏تخليقية؛‎ ‏ولا حاجة لوصفها هنا بالتفصيل. يمكن للماهر في الفن استخدام الترتيبات المتوافرة هنا وأداة‎ ‏مطلوب.‎ DNA ‏تجارية لإنتاج ترتيب‎ DNA ‏تصنيع‎ ٠ ‏يشمل‎ polynucleotides ‏باستخدام طرق تخليقية؛ يمكن إدخال‎ polynucleotides ‏لتحضير‎ ‏ترتيب مطلوب في ناقل مناسب»؛ ويمكن إدخال الناقل في المقابل في خلية عائلة مناسبة للنسخ‎ ‏في خلايا عائلة بأي وسيلة‎ polynucleotides ‏والتكبير» حسب الشرح إضافيا هنا يمكن إدخال‎ ‏خارجي بامتصاص مباشر؛ بلعمة‎ polynucleotides ‏معروفة في الفن. تتحول الخلايا بإدخال‎ ‏خلوية؛ استقبال حامل الجين من العائل؛ تطابق-7 أو تثقيب كهربي. بمجرد الدخول؛ يمكن‎ ve ‏أو متكامل‎ (plasmid ‏الخارجية في خلية كناقل غير تكاملي (مثل‎ polynucleotides ‏استبقاء‎ ‏المكبر بتلك الطريقة من الخلية العائلة‎ polynucleotide Jie ‏في جينوم الخلية العائلة. يمكن‎ -Sambrook et al., 1989 Mia ‏بطرق معروفة جيدا في الفن. انظر‎ ‏معروفة جيدا في‎ PCR ‏إن تقنية‎ DNA ‏بإعادة إنتاج ترتيبات‎ PCR ‏بطريقة بديلة؛ يسمح‎ ‏ىل مكعم‎ 109 (ETAYYA0 ‏الفن وموصوفة في براءة الاختراع الأمريكية أرقام‎ Yo ‏و187707؛ بالإضافة إلى‎
"١6
PCR: The Polymerase Chain Reaction, Mullis et al. eds., Birkauswer Press, Boston, 1994. ‏المعزول في ناقل ملاثم وإدخاله في خلية‎ RNA ‏باستخدام‎ RNA ‏يمكن الحصول على‎
RNA ‏يمكن عندئذ عزل‎ (RNA ‏إلى‎ DNA ‏عائلة مناسبة. عندما يتم نسخ الخلية ويتم نسخ‎ ٠588 «Sambrook et al ‏باستخدام طرق معروفة جيدا للمهرة في الفن» كما مذكور في‎ © يمكن تشييد نواقل نسخ مناسبة طبقا لتقنيات قياسية؛ أو يمكن انتقائهم من عدد كبير من نواقل النسخ المتوافرة في الفن. برغم أن ناقل النسخ المنتقى يمكن أن يختلف طبقا للخلية العائلة المعني استخدامهاء فإن نواقل النسخ المفيدة ستكون لها عامة القدرة على النسخ الذاتي؛ وقد يكون لها هدف واحد لأجل ‎endonuclease‏ داخلي خاص للتحديد؛ و/أو قد تحمل جينات من ‎٠‏ أجل دلالة يمكن استخدامها في انتقاء نسخ تحتوي على الناقل. تتضمن أمثلة مناسبة وفيروسات بكتيرية مثلا ‎Bluescript ¢pUC19 «pUCI8‏ (مثلا +1 ‎(pBS‏ ‏ومشتقات من ذنك؛ 18مس 1019 ‎(RP4 «pCR1 «ColE1 «pMB9 «(pBR322‏ بلعمة ‎(DNAS‏ ونواقل مكوكية ‎.pAT28 5 pSA3 Jie‏ إن هذه النواقل ونواقل نسخ أخرى كثيرة متوافرة من باعة تجاريين ‎.BioRad, Strategene, and Invitrogen Jie‏ ‎Ye‏ إن نواقل الإظهار بصفة ‎dale‏ هي بنيات ‎ALE polynucleotide‏ للنسخ تحتوي على ‎ila polynucleotide‏ للاختراع. من الضروري أن يكون ناقل الإظهار قابلا للنسخ في الخلايا العائلة إما ‎episomes Jie‏ أو كجزء متكامل من ‎DNA‏ الكروموسومي. تتضمن نواقل إظهار مناسبة لكن بدون تحديد 01890108 نواقل فيروسية؛ متضمنة فيروسات غدية؛ فيروسات ملازمة لغدة؛ فيروسات ارتجاعية» ‎cosmids‏ وناقل (نواقل) إظهارء حسب الإعلان في ‎WO‏ ‎٠‏ 8704462. تتضمن مكونات الناقل عامة؛ بدون تحديد؛ واحد أو أكثر مما يلي: ترتيب إشارة؛ مصدر نسخ؛ واحد أو أكثر من جينات دلالة؛ عناصر مناسبة للتحكم في النسخ (مثل محثاتء معززات وعنصر إنهاء). للإظهار (أي؛ الترجمة)؛ هناك حاجة ‎sale‏ أيضا لواحد أو أكثر من عناصر التحكم في الترجمة؛ ‎Jie‏ أماكن ربط ‎cribosome‏ أماكن بداية ترجمة؛ 5 ‎codons‏ إيقاف. ‎Yo‏ يمكن إدخال النواقل التي تحتوي على ‎polynucleotides‏ الهامة في الخلية العائلة بأي عدد من الوسائل الملائمة؛ متضمنة تثقيب كهربي؛ استقبال حامل الجين من العائل باستعمال ‎chloride‏ ستاعلقه» ‎«DEAE-dextran ¢calcium phosphate <rubidium chloride‏ أو مواد
١١ ‏عندما يكون الناقل هو عامل‎ Did) ‏أخرى؛ تصادم دافع دقيق؛ إدخال دهن خارجي؛ وعدوى‎ ‏سوف يعتمد‎ polynucleotides ‏معدي مثل فيروس جدري البقر). إن خيار إدخال نواقل أو‎ ‏دائما على سمات الخلية العائلة.‎ ‏الموصوفة هنا. يمكن‎ polynucleotides ‏عائلة تشمل أيا من‎ LDA ‏يوفر الاختراع أيضا‎ ‏مغايرة بغرض عزل الجينات‎ DNAs ‏استخدام أي خلية عائلة قادرة على إظهار زائد لأجل‎ © ‏هام. تتضمن أمثلة غير مقيد لخلايا عائلة‎ protein ‏أو‎ «polypeptide ‏المشفرة للجسم المضادء‎ ‏رقم‎ PCT ‏و0110. انظر أيضا طلب‎ (HeLa «COS ‏من كائن ثديي لكن بدون تحديد خلايا‎
E. coli Jia) ‏بدائيات النواة‎ dh AS ‏مناسبة من غير‎ Alle ‏تتضمن خلايا‎ .170 2 ‏.ك1). بصورة مفضلة؛‎ lactis ‏أو‎ ¢S. pombe 5. cerevisae ‏وخميرة (مثل‎ (B. subtilis ‏أو‎ ‏عند مستوى أعلى حوالي © مرات؛ يفضل أكثر؛ أعلى حوالي‎ cDNAs ‏تظهر الخلايا العائلة‎ ٠ ‏الهام‎ protein ‏مرةٍ من ذلك للجسم لمضاد أو‎ ٠١ ‏مرات»؛ أيضا يفضل أكثرء أعلى حوالي‎ ٠ ‏الداخلي المقابل؛ عند وجوده في خلايا عائلة. إن فحص الخلايا العائلة للارتباط الخاص مع‎ ‏يمكن تحديد خلية تظهر بدرجة زائدة الجسم‎ FACS ‏يتم انجازه باختبار مناعي أو‎ AB1-40 ‏الهام.‎ protein ‏المضاد أو‎ ‏يتضح إضافيا الشرح الحالي من خلال الأمثلة التالية التي لا يجب اعتبارها مقيدة لنطاقه‎ ‏إلى حد أبعد. تندمج بوضوح محتويات كل الأشكال» الجداول وكل المراجع؛ براءات الاختراع‎ ‏وطلبات براءة الاختراع المنشورة المذكورة طوال هذا الشرح كمرجع بالكامل هنا.‎ ‏الأمثلة‎ ‎muMabJCI8 ‏مثال 1: توليد‎ ‏التحضير‎ ٠ ‏(أ) مولد مناعي‎ 1096-DK/CF ‏(كتالوج رقم‎ R&D ‏آدمي مخلق (6100106-1 ناتج من أنظمة‎ Dkk-1 ‏يتحد‎ ‎KLH ‏مع‎ (C ‏عند الطرف‎ 10X His ‏ملحق‎ ja ‏يقابل 2252-266 من 1106-1 آدمي مندمج مع‎ .)77622 ‏(كتالوج رقم‎ mcKLH ‏مع‎ Pierce Imject Immunogen EDC ‏باستخدام مجموعة‎ ‏ويستخدم كمولد مناعي لاندماج‎ Genovac GmbH ‏بواسطة‎ KLH ‏المتحد‎ protein ‏يحضر‎ Yo .)1018( 109133 ‏والذي يظهر نسخة فرعية‎
١٠١ ‏بحروف مائلة سوداء‎ amino acids) ‏آدمي‎ Dkk1-(10His) aa ‏ترتيب‎ ١ ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ‏المنقى)‎ protein ‏الفعلي من‎ N ‏ثخينة تمتل الطرف‎
MALGAAGATRVFVAMVAAALGGHPLLGVSATLNSVLNSNAIKNLPPPLG
GAAGHPGSAVSAAPGILYPGGNKYQTIDNYQPYPCAEDEECGTDEYCA
SPTRGGDAGVQICLACRKRRKRCMRHAMCCPGNYCKNGICVSSDQNH °
FRGEIEETITESFGNDHSTLDGYSRRTTLSSKMYHTKGQEGSVCLRSSD
CASGLCCARHFWSKICKPVLKEGQVCTKHRRKGSHGLEIFQRCYCGEG
LSCRIQKDHHQASNSSRLHTCQRHHHHHHHHHH
‏حيث أن‎ nucleotide ‏(ترثيب‎ = Dkk1-(10His) nt ‏تعريف الترتيب رقم: ¥ ترتيب‎ ‏لا يوفر معلومات‎ R&D ‏بحروف مائلة سوداء ثخينة هي مجرد تقدير للترتيب لأن‎ nucleotide ٠ ‏عن الترتيب)‎
ATGGCTCTGGGCGCAGCGGGAGCTACCCGGGTCTTTGTCGCGATGGTAG
CGGCGGCTCTCGGCGGCCACCCTCTGCTGGGAGTGAGCGCCACCTTGAA
CTCGGTTCTCAATTCCAACGCTATCAAGAACCTGCCCCCACCGCTGGGCG
GCGCTGCGGGGCACCCAGGCTCTGCAGTCAGCGCCGCGCCGGGAATCCT Yo
GTACCCGGGCGGGAATAAGTACCAGACCATTGACAACTACCAGCCGTAC
CCGTGCGCAGAGGACGAGGAGTGCGGCACTGATGAGTACTGCGCTAGTC
CCACCCGCGGAGGGGACGCAGGCGTGCAAATCTGTCTCGCCTGCAGGAA
GCGCCGAAAACGCTGCATGCGTCACGCTATGTGCTGCCCCGGGAATTAC
TGCAAAAATGGAATATGTGTGTCTTCTGATCAAAATCATTTCCGAGGAG Ye
AAATTGAGGAAACCATCACTGAAAGCTTTGGTAATGATCATAGCACCTT
GGATGGGTATTCCAGAAGAACCACCTTGTCTTCAAAAATGTATCACACC
AAAGGACAAGAAGGTTCTGTTTGTCTCCGGTCATCAGACTGTGCCTCAG
GATTGTGTTGTGCTAGACACTTCTGGTCCAAGATCTGTAAACCTGTCCTG
AAAGAAGGTCAAGTGTGTACCAAGCATAGGAGAAAAGGCTCTCATGGAC Ye
TAGAAATATTCCAGCGTTGTTACTGTGGAGAAGGTCTGTCTTGCCGGATA
CAGAAAGATCACCATCAAGCCAGTAATTCTTCTAGGCTTCACACTTGTCA
GAGACACCACCATCACCACCATCACCATCATCAC
‏(ب) التحصين وتوليد ورم هجين‎ rhuDkk-1 protein ‏ميكروجرام/ فأر من‎ © ٠ ‏في البريتون مع جرعة‎ 3815/6 (hi ‏تحضن‎ 9 ‏متحد مع-111]. تكرر هذه الجرعة ؟ مرات خلال ؛ أسابيع. تعطى الفئران يومين ويوم قبل‎ ‏تندمج خلايا ليمفاوية من الطحال‎ protein ‏ميكروجرام من‎ 5٠ ‏التشريب جرعة معززةٍ نهائية‎ ‏حسب الوصف مسبقا‎ HAT ‏غير إفرازي وتخضع لانتقاء‎ sp2/0 ‏مع خط خلية ورم نخاعي‎
IgG ‏يسترجع ورم هجين يفرز‎ .)610© and Milstein, Methods Enzymol 73 3-46 )1981(( ‏ويتحدد باختبارات موصوفة أدناه.‎ Le jb ‏ينسخ‎ «Dkk-1 ‏يخض‎ YO (ELISA ‏(اختبارات‎ Dkk-1 ‏خصوصية‎ ‏التحديد‎ 0
و تحددت ‎Abs‏ تخص ‎Dkk-1‏ باستخدام الطريقة التالية المعتمدة على ‎addy ELISA‏ ‎rhuDkk-1 protein (R&D systems cat no. 1096 DK/CF)‏ حتى ‎١‏ ميكروجرام/ ملليلتر في مثبت أس هيدروجيني تغليف (مثبت أس هيدروجيني ‎carbonate/bicarbonate Sigma‏ عند أس هيدروجيني 9,7 برقم كتالوج 0-3041 مصنع طبقا لإرشادات الصانع). يضاف ‎٠٠١‏ ‏© ميكرولتر من ‎[Dkk-1‏ عين إلى أطباق ‎Nunc Maxisorp‏ بها 97 عين ويحضن طوال الليل عند ‎Aut‏ تغسل العيون ؛ مرات مع ‎YOu‏ ميكرولتر/ عين من مثبت أس هيدروجيني غسيل ((70.,00 (حجم/ ‎Tween-20 (aaa‏ (رقم كتالوج ‎Sigma‏ 02287)) في ‎dPBS‏ بدون ‎Ca/Mg™‏ (رقم كتالوج ‎Sigma‏ 08537)) وتخمد عندئذ مع ‎٠٠١‏ ميكرولتر/ عين من مثبت أس هيدروجيني إخماد ‎PVA)‏ 71 (رقم كتالوج ‎Sigma‏ 363170( (وزن/ حجم) في ‎dPBS‏ ‎٠‏ (قم كتالوج ‎Sigma‏ 08537)) لمدة ساعتين عند درجة حرارة الغرفة. يزال عندئذ مثبت ‎ol‏ ‏هيدروجيني الإخماد بالصفق السريع. تخفف ‎Abs‏ بتخفيفات متسلسلة متعاقبة مرتين في مثبت أس هيدروجيني الإخماد وتوضع على الطبق عند ‎٠٠١‏ ميكرولتر/ عين. تحضن الأطباق لمدة ساعة واحدة عند درجة حرارةٍ الغرفة وتغسل ‎Mae‏ حسب الوصف أعلاه. يتحدد ارتباط ‎Ab‏ من الاختبار مع ‎Dkk‏ بإضافة ‎Ab‏ ثانوي يخص نوع تل. عند اختبار ‎Abs ٠‏ فأرية يستخدم ‎٠٠١‏ ميكرولتر/ عين من مضاد 180 فأري من ماعز متحد مع ‎HRP‏ ‎(HEL)‏ عند تخفيف ‎١‏ في ‎Eves‏ في مثبت أس هيدروجيني إخماد ‎(Jackson‏ ‎ImmunoResearch Cat No. 115-035-146)‏ عند اختبار ‎HAbs‏ يستخدم مضاد ‎IgG‏ عند تخفيف ‎١‏ في 5080860 في مثبت أس هيدروجيني إخماد ‎(Jackson ImmunoResearch Cat No.‏ (109-035-097. تحضن الأطباق لمدة ‎Fe‏ دقيقة عند درجة حرارة الغرفة ثم تغسل مرثين حسب ‎Ye‏ الوصف أعلاه. يضاف ‎٠٠١‏ ميكرولتر من مادة خاضعة حديثة التحضير ‎(KPL ABTS Peroxidase Substrate 2-component Cat No. 50-62-00 prepared‏ ‎according to manufacturers instructions)‏ في العين ويسمح بظهور اللون. بمجرد الظهورء يقاس امتصاص الطبق عند 5605 و5960 نانومتر. تقدم قيم الامتصاص على أنها الفرق بين الامتصاص عند كل من طولي الموجة. ‎Yo‏ يظهر 1018 ارتباطا مع ‎rhuDKK-1‏ حتى ما يصل إلى © ميكروجرام/ ملليلتر. (ب) خصوصية الارتباط مع مماثلات ‎Dkk‏ آدمي أخرى
YA
‏آدمية أخرى باستخدام بروتوكول‎ 010 proteins ‏تختبر قدرة 1018 على الارتباط مع‎ (R&D ‏الموصوف أعلاه باستثناء أن الأطباق تغطى أيضا مع 01023 آدمي مخلق‎ ELISA ‏يظهر‎ (R&D systems Cat No. 1269-DK/CF) Dkk-4 5 systems Cat No. 111 8-DK/CF) 0 ‏آدمي حتى ما يصل إلى‎ Dkk-3 ‏ارتباطا ضعيفا مع 31064 آدمي وعدم ارتباط مع‎ 8 ‏ميكروجرام/ ملليلتر.‎ 0 (OD) ‏آدمي‎ 01064 (OD) «3DKK-3 (OD) ‏(نانوجرام/ | 0106-1 آدمي‎ 8 ‏ملليلتر)‎ ‏لب فى‎ + YAS ‏داكا‎ 9.6
YY 1 ‏م‎ ١٠8 «+, YéoAo oe YY 1,47¢ 9 ‏مرا م7 م7 ل‎ A v,vYAdo Yeo ,Yood ‏ل‎ ‎Er ‏اعد دم‎ 8 ‏مالل عفر م‎ 1 + YVYYo ن١‎ 0 7 oY ‏(ج) النشاط العابر بين الأنواع‎ ‏باستخدام بروتوكول‎ Dkk proteins ‏تختبر قدرة 1018 على الارتباط مع أنوا 2 أخرى من‎ ‏حسب الوصف أعلاه باستثناء أن الأطباق تغطى أيضا مع 0106-1 فأري مخلق‎ ELISA
Dkk-1 (R&D systems Cat No. 4010-DK/CF), mouse Dkk-1 (R&D systems Cat
No. 1765-DK/CF), mouse Dkk-2 (R&D systems Cat No. 2435-DK/CF), and mouse Ve
Dkk-4 (R&D systems Cat No. 3105-DK/CF). ‏آدمي؛ حتى ما‎ Dkk-1 ‏يظهر 1018: )1( ارتباط مشابه مع 0106-1 فأر وحيوان قارض مثل‎ * ‏عدم ارتباط مع 01062 فأري؛ حتى ما يصل إلى‎ (Y) ‏يصل إلى © ميكروجرام/ ملليلتر؛‎ ‏ميكروجرام/ ملليلتر؛ و )7( ارتباط ضعيف مع 01024 فأري؛ حتى ما يصل إلى © ميكروجرام/‎ ‏مليلتر.‎ ve ‏النسخ والترتيب‎
RNA ‏ويستخلص‎ QIAshredder ‏تتجانس مليون خلية ورم هجين باستخدام أعمدة تدويم‎ ‏باستخدام مجموعة‎ cDNA ‏يصنع‎ .QIAGEN ‏من‎ RNAeasy Mini ‏لمجموعة‎ Ligh SI)
‎Superscript 111 RT‏ من ‎Invitrogen‏ تنسخ المناطق المتغيرة من ‎Abs‏ 0106-1 باستخدام مجموعات مادة أولية-180 فأري من ‎(Novagen‏ والتي تتكون من مواد أولية تحللية لنسخ جينات سلسلة ثقيلة ‎IgG‏ فأري وسلاسل خفيفة ‎kappa‏ أو ‎lambda‏ فأرية. شروط تدوير ‎PCR‏ ‏هي: دورة واحدة عند ‎AACE‏ لمدة دقيقتين؛ © دورات عند 4 5*مثوية لمدة ‎Ye‏ ثانية؛ 44تمثئوية لمدة ‎Ye‏ ثانية 5 ‎LATA‏ لمدة ‎٠١‏ ثانية؛ ‎Lig‏ ذلك ‎YO‏ دورة عند 4 ‎sid‏ لمدة ‎٠‏ ثانية؛ ؛ #*"مثوية لمدة ‎Ve‏ ثانية و8ا”مثوية لمدة ‎Tr‏ ثانية. تنسخ منتجات ‎PCR‏ الناتجة في ناقل نسخ ‎Topo-TA‏ من ‎Invitrogen‏ ويتم ترتيبها. يتم التأكد من ترتيبات ‎Ab‏ المنسوخة بمقارنة مباشرة باستخدام تحليل قياس طيف كتلة ‎(MS)‏ لترتيبات ‎Ab‏ المنسوخة 5 ‎Abs‏ الأصلية الناتجة من الاستسقاء. ‎٠‏ يتوافر أدناه ترتيب ‎nucleotide‏ وترتيب ‎amino acid‏ المتوقع للسلاسل الخفيفة والثقيلة للمناطق المتغيرة للجسم المضاد أحادي النسخ 1018 من النوع البري (فأري). تعريف الترتيب رقم: ؟: ترتيب ‎nt‏ لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎JC18‏ ‎GACATTGTGTTGACCCAATCTCCAGCTTCTTTGGCTGTGTCTCTAGGGCAG‏ ‎AGGGCCACCATCTCCTGCAGAGCCAGCGAAAGTGTTGATGACTTTGGCTT‏ ‎AGTTTTATGAACTGGTTCCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAAACTCC Yo‏ ‎TCATCTATGCTGCATCCAAGCAGGGATCCGGGGTCCCTGCCAGGTTTAGG‏ ‎GGCAGTGGGTCTGGGTCAGACTTCAGCCTCACCATCCATCCTGTGGAGGA‏ ‎GGATGATACTGCAATGTATTTCTGTCAGCAAAGTAAGGAGGTTCCTCCCA‏ ‎CGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAA‏ ‎Yo‏ تعريف الترتيب رقم: 6: ترتيب ‎aa‏ لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎JC18‏ ‎DIVLTQSPASLAVSLGQRATISCRASESVDDFGISFMNWFQQKPGQPPKLLIY‏ ‎AASKQGSGVPARFRGSGSGSDFSLTIHPVEEDDTAMYFCQQSKEVPPTFGGG‏ ‎TKLEIK‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 10 ترتيب ‎nt‏ 0011 لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎JC18‏ ‎AGA GCC AGC GAA AGT GTT GAT GAC TTT GGC ATT AGT TTT ATG Yo‏ ‎AAC‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 76: ترتيب ‎aa‏ 00181 لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎JC18‏ ‎RASESVDDFGISFMN‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 7: ترتيب ‎CDR2 nt‏ لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة 1018 ‎TCC AAG CAG GGA TCC A‏ .ذاه ‎GCT‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎tA‏ ترتيب ‎CDR2 aa‏ لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة 1018
AK
AASKQGS
1018 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة‎ CDR3 nt ‏رقم: 19 ترتيب‎ Cai fill ‏تعريف‎ ‏[مطمهغ مم‎ AAGGAGGTITCCTCCC ACG 1018 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة‎ 00183 aa ‏ترتيب‎ :٠١ ‏تعريف الترتيب رقم:‎
QQSKEVPPT ° 1018 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ nt ‏ترتيب‎ :١٠: ‏تعريف الترتيب رقم‎
GAAGTGAAACTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTAGTGAAGCCTGGAGGGT
CCCTGAAACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACTTTCAGTAATTATGCCA
TGTCTTGGGTTCGCCAGACTCCAGAGAAGAGGCTGGAGTGGGTCGCATC
CATTAGTGGTGGTGGTGACACCTACTATCCAGACAGTGTGAAGGGCCGAT ٠
TCACCATCTCCAGAGATAATGTCAGGAACATCCTCTACCTGCAAATGAGC
AGTCTGAGGTCTGAGGACACGGCCATGTATTACTGTGCAACATCCCTTGA
GAACTATGCTATGGACTACTGGGGTCAAGGAACCTCAATCACCGTCTCCT
CA
JC18 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ aa ‏ترتيب‎ IVY : ‏تعريف الترتيب رقم‎ ١
EVKLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSNYAMSWVRQTPEKRLEWVASI
SGGGDTYYPDSVKGRFTISRDNVRNILYLQMSSLRSEDTAMY YCATSLENY
AMDYWGQGTSITVSS
JC18 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ 00181 nt afi i VY: ‏تعريف الترتيب رقم‎
AAT TAT GCC ATG TCT Ye 1018 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ 00181 aa ‏تعريف الترتيب رقم: £ )1 ترتيب‎
NYAMS
1018 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ CDR2 nt ‏تعريف الترتيب رقم: 110 ترتيب‎
TCC ATT AGT GGT GGT GGT GAC ACC TAC TAT CCA GAC AGT GTG
AAG GGC Yo
JC18 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ CDR2 aa ‏ترتيب‎ :1٠: ‏تعريف الترتيب رقم‎
SISGGGDTYYPDSVKG
1018 ‏لمنطقة متغيرة سلسلة ثقيلة‎ CDR3 nt ‏ترتيب‎ :١١ ‏تعريف الترتيب رقم:‎
TCC CTT GAG AAC TAT 001 ATG GAC TAC 1018 alg ‏لمنطقة متغيرة سلسلة‎ CDR3 aa ‏ترتيب‎ VA ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ©
SLENYAMDY
١١ ‏مثال 2: توليد واختبار جسم مضاد أحادي النسخ مضاد- 1106-1 مكتسب السمة الآدمية‎ muMabJC18 dla ‏ناتج من خلال‎ (huMabJC18) ‏وأشكاله المتباينة‎ (HAD) ‏تحديد انجذاب الارتباط للجسم المضاد المكتسب السمة الآدمية‎ ‏الطرق العامة المستخدمة في هذا المثال:‎ ‏إظهار مستخدم في تمييز نسخة‎ alli () ٠ ‏مشابه‎ IPTG ‏قابل للحث مع‎ lacZ ‏يخضع لتحكم محث‎ Abs ‏من‎ Fab ‏إن إظهار الجزء‎ ‏لذلك الموصوف في:‎
Barbas (2001) Phage display: a laboratory manual, Cold Spring Harbor, NY, Cold
Spring Harbor Laboratory Press pg 2.10. Vector pComb3X), ‏على أية حال؛ تتضمن التعديلات إضافة وإظهار مجالات السيطرة الإضافية التالية: مجال‎ ٠ ‏مناعي آدمي‎ globulin ‏من‎ CHI ‏آدمية ومجال سيطرةٍ ثابت‎ Kappa ‏سيطرة ثابت سلسلة خفيفة‎ ‏سلسلة خفيفة‎ ¢protein 201859 ‏رقم الوصول لأجل‎ «Ig gamma-2 ‏؛ منطقة © سلسلة‎ 8 protein CAA09181 ‏رقم الوصول لأجل‎ «(Homo sapiens) ‏على نطاق صغير‎ Fab ‏(ب) تحضير‎ 7. ‏في أطباق بها 97 عين كما يلي. بالبدء من‎ Fabs shad ‏يتم إظهار صغير النطاق‎ Vo + agar LB ) ‏من طبق رئيسي‎ JS ‏تلتقط المستعمرات لتلقيح‎ Fab ‏متحول مع مكتبة‎ coli 176 ‏وطبق عامل (؟ ملليلتر/ عين؛‎ (Glucose 77 + ‏ميكروجرام/ ملليلتر)‎ 04) Ampicillin 77 + ‏ميكروجرام/ ملليلتر)‎ © ١( Ampicillin + LB ‏عين/ طبق تحتوي على 1,0 ملليلتر‎ ‏ساعة. يخزن الطبق الرئيسي‎ ١7-48 sad Ages ‏ينمو كل من الطبقين عند‎ (Glucose ‏دورة في الدقيقة ويعاد تعليقها مع‎ 9٠0٠0٠0 ‏عند 4 "مئوية وتتكور الخلايا من الطبق العامل عند‎ Ye
IPTG ‏مللي جزيئي جرامي‎ ١ + ‏ميكروجرام/ ملليلتر)‎ © ١( LB+Ampicillin ‏ملليلتر من‎ ١
Fabs ‏لحث إظهار‎ ‏**مئوية؛ ثم يعاد تعليقها‎ ١ ‏تجمع الخلايا بالطرد المركزي بعد زمن إظهار © ساعات عند‎
HEPES ١,4 ‏(مثبت أس هيدروجيني‎ HBS-EP ‏في 00 ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني‎ ‏مللي جزيثئي جرامي؛ 70506059 020). يمكن الوصول‎ ١٠١ NaCl ‏مللي جزيئي جرامي؛‎ ٠٠١ Yo ‏بدورة واحدة من التبريد (-#"مثوية) ثم الذوبان‎ HBS-EP ‏إلى تحلل الخلايا المعاد تعليقها مع‎ ٠١ ‏دورة في الدقيقة لمدة‎ ©00١0 ‏عند ١7*مثوية. تعالج مواد تحلل الخلية بالطرد المركزي عند‎
١7١ ‏ترشح المواد الطافهة‎ Fabs ‏دقيقة لفصل بقايا الخلية عن المواد الطافية التي تحتوي على‎ (Millipore, cat# ‏بها 7 عين‎ Multiscreen 1118 ‏باستخدام أطباق مرشح‎ ‏للحصول‎ BIAcore plasmon ‏تحقن المواد الطافية عندئذ في جهاز رنين‎ .MSFBN6B50) ‏من الطبق الرئيسي لترتيب‎ Fabs ‏تسترد النسخ التي تظهر‎ Fab ‏على معلومات الانجذاب لكل‎ ‏كبير النطاق والتمييز المفصل حسب الوصف أدناه.‎ Fab ‏ولإنتاج‎ DNA © ‏على نطاق كبير‎ Fab ‏(ج) تحضير‎ ‏وتتقى من مزارع كبيرة. تلقح دوارق‎ Fabs ‏للحصول على معايير حركية تفصيلية؛ تظهر‎ 77 + ‏ميكرولتر/ ملليلتر)‎ ٠ ) LB+Ampicillin ‏ملليلتر‎ ٠٠١ ‏تحتوي على‎ Erlenmeyer ‏تحضن‎ (Fab ‏منتقاة تظهر‎ EB, coli ‏ملليلتر من مزرعة طوال الليل من نسخة‎ © as Glucose ‏وعندئذ تحث باستبدال الأوساط‎ ١ ‏مقدارها‎ ODssonn ‏حتى الوصول إلى‎ Lief + ‏النسخ عند‎ ٠ ‏مللي جزيئي جرامي‎ ١ + ‏ميكروجرام/ ملليلتر)‎ © ١( LBHAmpicillin ‏ملليلتر؛ من‎ ٠٠٠ ‏مع‎ ‏**مثوية؛ تتكور الخلايا بالطرد المركزي؛ ثم يعاد‎ ٠ ‏بعد زمن إظهار 0 ساعات عند‎ .06 ‏يتم تحلل الخلايا بدورتين من التجمد/‎ (A = ‏(أس هيدروجيني‎ PBS ‏ملليلتر‎ ٠١ ‏تعليقها في‎ ‏على الترتيب).‎ ؛ةيوثم”"7١7و‎ Lich = ‏الذويان (عند‎
Ni-NTA ‏فائقة التدفق‎ sepharose ‏تحمل المادة الطافية من مواد تحلل الخلية فوق أعمدة‎ ١ ‏ثم تغسل مع 0 أحجام‎ (A ‏عند أس هيدروجيني‎ (PBS ‏متزنة مع‎ (Qiagen, Valencia. CA)
PBS ‏المنفردة في أقسام مختلفة مع‎ Fabs ‏تنفصل‎ A = ‏عند أس هيدروجيني‎ (PBS ‏عمود من‎ ‏تجمع الأقسام التي‎ Imidazol ‏مللي جزيثي جرامي‎ 700 F(A = ‏(عند أس هيدروجيني‎ ‏قبل تمييز الانجذاب.‎ ELISA ‏ثم تقدر كميا بواسطة‎ (PBS ‏وتجرى لها ديلزة في‎ Fabs ‏تحتوي‎ ‏(د) تحضير جسم مضاد كامل‎ Ye ‏الثقيلة والخفيفة في نواقل إظهار ثديية‎ ALL ‏كاملة؛ تنسخ المناطق المتغيرة‎ Abs ‏لإظهار‎ ‏من أجل‎ HEK 293 Wa ‏في‎ lipofectamine ‏وتستقبل حامل الجين من العائل باستخدام‎ ‏إظهار مؤقت.‎ ‏بطرق قياسية.‎ protein A ‏مع‎ Abs ‏تنقى‎ ‎BlAcore ‏اختبارات‎ © ‏يتحدد انجذاب 1034857018 إلى 0106-1 آدمي؛ فأري أو من حيوان قارض باستخدام نظام‎ ‏مجهز‎ «(BlAcore Inc., Piscataway, NJ) BIAcore3000™ (SPR) ‏سطح‎ plasmon ‏رنين‎
مع رقاقة أداة إحساس ‎AB, Uppsala, Sweden) CMS‏ ©814001. بالنسبة لتحليل ‎Jeli‏ ‎Dkk-1-huMabJC18‏ آدمي» تتولد أسطح تفاعل باقتران ‎amine‏ من أجل 1011801018 مع ‎Y‏ ‏خلايا تدقق ‎«Fe2)‏ 703 و2644). تنفط رقاقات ‎CM5‏ مسعم ‎N-ethyl-N'-(3-‏ ‎dimethylaminopropyl)-carbodiinide hydrochloride (EDC)‏ و ‎N-hydroxy succinimide‏ ‎(NHS) ©‏ طبقا لإرشادات الموردين. يخفف ‎huMabJC18 IgG‏ في ‎٠١ sodium acetate‏ مللي جزيثي جرامي عند أس هيدروجيني ؛ وتحقن فوق الرقاقة النشطة عند تركيز ‎Yo‏ ميكروجرام/ باستخدام زمن تدفق متغير عبر قنوات الرقاقة المنفردة؛ يتحقق نطاق من كتافة ‎Ab‏ ‎0-٠‏ وحدة استجابة (81). تتشبع عندئذ أسطح ‎[9G‏ والمرجعية مع مضاد ‎Fo‏ آدمي ‎Fab2 ٠‏ ماعز )55053 ‎(Cappel‏ لمنع الارتباط غير الخاص بواسطة 1106-1 مع سطح الرقاقة. تخمد الرقاقة عندئذ مع ‎ethanolamine‏ تجرى الاختبارات عند 0 ‎APY‏ مع مثبت أس هيدروجيني متدفق ‎BIAcore‏ يتكون من ‎0,0٠ HEPES) HBS-EP‏ جزيئي جرامي؛ أس هيدروجيني 4 ,/اء ‎EDTA 0.٠ NaCl‏ ؟ مللي ‎Ava‏ جرامي 702006 ‎(Surfactant P20‏ ‎[ase Y BSA +‏ ملليلتر + ‎١ CM Dextran‏ مجم/ ملليلتر. يحقن ‎Dkk-1 protein‏ نقي ‎(R&D Systems) ٠‏ مع سلسلة تخفيفات ¥ أضعاف خماسية الأعضاء ‎fag‏ عند 7,9 نانوجزيئي ‎aba‏ لمدة ‎٠,5‏ دقيقة عند ‎٠٠١‏ ميكرولتر/ دقيقة؛ ويراقب التفكك لمدة ‎A‏ ساعات. تنتج في نفس الوقت معدلات التلازم ‎(kon)‏ والتفكك ‎(on)‏ الحركي في نفس الوقت بمطابقة البيانات مع نموذج ارتباط ‎٠:١ Langmuir‏
(Karlsson, R.
Roos, H.
Fagerstam, L.
Petersson, B. (1994). Methods Enzymology 6. 99-110) Ye
باستخدام برنامج ‎.BIAevaluation‏ تحسب ‎af‏ ثابت تفكك الاتزان ‎(KD)‏ بالصيغة ‎Kon/kor‏ ‏بالنسبة لتحليلات تفاعل 1014801018 مع 0106-1 فأري أو حيوان قارض؛ يتم إمساك المستويات القليلة من 1:0:71851018 (نموذجيا؛ ‎50٠-٠٠١‏ وحدة استجابة) على خلايا تدفق منفردة بواسطة ‎Fo alias‏ آدمي ‎Fab2‏ ماعزء المسبق تسكينه على سطح الرقاقة 0145. تخدم ‎Yo‏ خلية تدفق مشبعة مع مضاد ‎Fo‏ آدمي ‎Fab2‏ ماعز لا تحتوي على ‎BLES HAD‏ مرجعية. يعاير 0106-1 فأري أو حيوان قارض ‎(R&D Systems)‏ فوق الرقاقة باستخدام ‎Va,‏ نانوجزيئي جرامي أو ‎YY‏ نانوجزيئي جرامي كتركيز قمي؛ على الترتيب؛ لسلسلة تخفيفات ‎١‏ أضعاف.
تراقب حالات التلازم والتفكك عند ‎٠٠١‏ ميكرولتر/ دقيقة لمدة ‎٠٠0‏ ثانية و١٠ ‎ARE‏ على الترتيب. تتجدد أسطح الإمساك لكل التجارب مع نبضتين ‎Yo‏ ثانية من ‎HPO,‏ 76 نانوجزيئي ‎aha‏ ¢ باستثناء سطح ‎huMabJC18‏ المقترن بواسطة ‎amine‏ في تجربة ‎Dkk-1‏ ‏الآدمي الذي لا يتم تجديده. ° إن استجابات الارتباط تتم مقارنتها بصورة ثنائية وتتطابق بصورة شاملة مع نموذج بسيط باستخدام برنامج ‎.BiaEvaluation v.4.0‏ يتم استنتاج الانجذابات من خارج قسمة ثوابت المعدل الحركي (مماممدض. huMabJC18 ‏لاختبارات الفحص لتحديد معدلات الارتباط والتفكك لأشكال متبايئة‎ dually مع ‎Dkk-1‏ آدمي؛ يستخدم نظام إما ‎BlAcore‏ أو 6 ‎(BioRad, Inc.) ProteOn‏ بالنسبة
SA (streptavidin) ‏على رقاقات‎ biotinylated ‏آدمي‎ Dkk-1 ‏الاختبار ©:51800؛ يتم إمساك‎ ٠ «HBS-EP ‏في‎ 10 = DKk-1 protein ‏طبقا لإرشادات المورد. يخفف‎ BIAcore ويحقن فوق الرقاقة عند تركيز © ميكروجرام/ ملليلتر. تنتقى أزمنة التدفق عبر قنوات الرقاقة المنفردة لتتحقق كثافة مولد مضاد ‎100-8٠‏ وحدة استجابة تقريبا. يستخدم مثبت أس هيدروجيني ‎HBS-EP‏ كمثبت أس هيدروجيني متدفق. تحقن مواد تحلل خلية 2.2077 مخلقة ‎٠‏ مرشحة عند درجة حرارة عالية (7١”"مثوية)‏ لمدة دقيقة واحدة عند ‎7٠‏ ميكرولتر/ دقيقة؛ مع ‏السماح بطور ‎9-١ ASE‏ دقائق. تتجدد الأسطح مع ‎A‏ مللي جزيئي جرامي ‎IA + NaOH‏ ‎ethanol‏ يحقن ‎Fab‏ مقارن موجب (نسخة ؛ ‎)١‏ مرتين عند بداية التجربة؛ ومرة ثانية عند نهاية الاختبار لتحديد تجدد الإنتاجية. ‏بالنسبة لاختبار ‎ProteOn‏ يحقن ‎DKk-1‏ آدمي ‎biotinylated‏ لمدة دقيقة واحدة عند ‎-155( ‏تخفيفات متسلسلة عدة مرات تجريبيا محددة لإنتاج مستويات مختلفة من التسكين‎ ٠ ‎(RU ٠‏ على © قنوات من رقاقة إحساس 11800871010 ‎NLC‏ «2:0060. تترك القناة ‏السادسة بدون تعديل لتخدم كسطح مرجعي. تحقن ‎Fabs‏ مخلقة في مواد تحلل ‎E. coli‏ مرشحة ‏عند درجة حرارة عالية (٠"”مثوية)‏ لمدة ‎٠‏ ثائية عند ‎To‏ ميكرولتر/ دقيقة. يتكون مثبت ‎Tween-20 /+,+ +0 + BSA ‏ملليلتر‎ [ase ١ + PBS ‏الأس الهيدروجيني المتدفق من‎ ‎YO‏ يصمم ‎ProteOn‏ بحيث يتدفق كل مرةٍ حقن فوق كل واحدة من قنوات ‎Dkk-1‏ الخمسة ‏بالإضافة إلى القناة المرجعية؛ ويمكن حقن 6 عينات ‎Fab‏ في نفس الوقت. يراقب تفكك ‎Fab‏ ‏من سطح 1106-1 لمدة ‎٠١‏ دقيقة. يتجدد سطح الرقاقة مع حقن لمدة ‎Yo‏ ثانية مع ‎A EtOH‏
١١٠ ‏؛ 7 كمثال مقارن. إن مستوى الارتباط‎ Fab ‏جزيئي جرامي. تستخدم نسخة‎ A A NaOH ‏أثناء التلازم» ومعدل التفكك لكل نسخة متطابق جدا بين قنوات المركب الترابطي المختلفة.‎ 1106-1 ‏وأشكاله المتباينة مع‎ huMabJCI ‏انجذاب ارتباط‎ ‏من أجل 1014801018 هي كما هي مذكورة في تعريف الترتيب‎ amino acid ‏إن ترتيبات‎ ‏إن انجذاب‎ (LC ‏(منطقة متغيرة‎ £Y ‏وتعريف الترتيب رقم:‎ (HC ‏رقم: 50 (منطقة متغيرة‎ © ‏حسب الوصف أعلاه مبين‎ BIAcore ‏المحدد باستخدام‎ Dkk-1 ‏مع‎ 1014802018 IgG ‏ارتباط‎ ‏في جدول “ أدناه.‎ ‏مع 1106-1 من آدمي» فأر وحيوان قارض‎ 1011801018 IgG ‏جدول : انجذاب ارتباط‎ ‏وك (نانوجزيئي‎ (ely) Typ )5/( kor (Ms /١( kon 0106-1 ‏أنواع‎ ‏جرامي)‎ ‎TS ‏ركد > 77ر1‎ xy > * ‏آدمي > ار ا‎
Ger << £4¢< ‏را أو ا* حو “ناد‎ > Jl o> VAY Thx ‏ل‎ HUXLEY ali ‏حيوان‎ ‏في المعدل: سريع جدا لقياسه‎ * ‏خارج المعدل: بطيء جدا لقياسه‎ * ٠ kon [kor = Kp ‏ثانية)‎ /١( Kor [YS = Tip ‏متباينة 10480018 في جدول £ أدناه.‎ JIS ‏من‎ CDRs amino acid ‏تتضح ترتيبات‎ -huMabJC18 ‏في جدول ؛ بالنسبة إلى ترتيب‎ Lund) amino acid ‏توصف كل استبدالات‎ ‏وأشكاله المتباينة.‎ huMabIC18 ‏لأجل‎ hDkk-1 ‏_يتبين أيضا في جدول 4 انجذاب ربط‎ ١٠
اكد الخمسة بالإضافة إلى القناة المرجعية؛ ويمكن حقن + عينات ‎Fab‏ في نفس الوقت. يراقب تفكك ‎Fab‏ من سطح ‎Dike‏ لمدة ‎٠١‏ دقيقة. يتجدد سطح الرقاقة مع حقن لمدة ‎Wo‏ ثانية مع ‎A NaOH 2/8 EtOH‏ مللي جزيئي جرامي. تستخدم نسخة ‎YE Fab‏ كمثال مقارن. إن مستوى الارتباط أثناء التلازم؛ ومعدل التفكك لكل نسخة متطابق جدا بين قنوات المركب الترابطي المختلفة. انجذاب ارتباط ‎huMabJCT‏ وأشكاله المتباينة مع 1102-1 إن ترثيبات ‎amino acid‏ من أجل ‎huMabJC18‏ هي كما هي مذكورة في تعريف الترتيب رقم: 460 (منطقة متغيرة ‎(HC‏ وتعريف الترتيب رقم: ‎£Y‏ (منطقة متغيرة ‎(LC‏ إن انجذاب ارتباط ‎huMabJC18 IgG‏ مع ‎Dkk-1‏ المحدد باستخدام ‎BlAcore‏ حسب الوصسف ‎٠‏ أعلاه مبين في جدول “ أدناه. جدول ‎=F‏ انجذاب ارتباط ‎huMabJC18 IgG‏ مع ‎Dkk-1‏ من آدمي؛ فأر وحيوان قارض أنواع ‎(Ms /Y) kon ~~ Dkk-1‏ »ما ‎Kp (els) Tip (s /Y)‏ (نانوجزيئي جرامي) آدمي > ‎I ALYY > ATTY oxY > Flix‏ فأر > ار جك ا* حو يا < £48 ‎A‏ ‏حيوان قارض ‏ > ‎..١< AY hex Ya *' ١.9‏ * في المعدل: سريع جدا لقياسه * خارج المعدل: بطيء جدا لقياسه ‎kon [Kote = Kp‏ ‎NV) Kor [YA =Tip ٠‏ ثانية) تتضح ترتيبات ‎CDRs amino acid‏ من أشكال متباينة ‎huMabJC18‏ في جدول ؛ أدناه. توصف كل استبدالات ‎amino acid‏ المبينة في جدول § بالنسبة إلى ترتيب 0231801018. يتبين أيضا في جدول ؛ انجذاب ربط 5106-1 لأجل ‎huMabIC18‏ وأشكاله المتباينة.
١ 4 0 ‏لمر لم — ب‎ 35 = OR 2 Boaz aa < : 2 on on 0 © ‏تم © © م‎ ‏بل‎ 3 Tr g§ 58 SS = Sd + © 3 8 5 BF 8 # 4
JJ
= + 9 w Sw ow
Q ‏و م ذا قي مه هي‎ RR ‏م فجي‎
S wv 2m non ‏بم م‎ 2 ‏ل © ا لم‎ AD = ‏لم لم‎ 92 2 = ToT E5323 383 = HOOSIER OARS w= = £8 For ‏ق©‎ ‎2 ‎313 ‎23 ‎> ‎J ‏ص كم‎ oO A re NM = on on Nn cn on no 12 S oS S oS oS © oi — ‏بح‎ - -- 1 m [84] 0 [2a] Mm om val 4 “0 0 58 ‏بم‎ “enn
Q Of = 2 own > 8 ~ ‏ا‎ ‎Ss am = mao = a)
J
7 ‏يم‎ ‎= ‏لم‎ ‎3 ‎5 ‎3 ‎4 ‎on ‎a3 ‎> ‎3 ‎0 ‎3 2 4 ‏ب خم‎ +4 fx 7 _ ‏ب حي‎ 0
FSET ‏حو خا - بم هي‎
CS 4 - = ‏ب‎ »¥ rr ‏بم‎ ‎Fx Ba ‏؟ ؟‎ 8 E xx ‏؟ ؟‎ 4 1, xy = = J = = = ‏با د‎ © $m
Q a 3 oO o Oo o 2 — A a < 3 «a oa a < ‏بع ايم‎ ~~ X < > ~- << << < ‏و بم‎ m ‏ل م يوي‎ xX X X X xX XX
YD Ba > ‏ارات صا ات‎ + ‏ا‎ ! O | 1 1 1 1 7 6 ‏ب في‎ 6 6 a o > % 3 = hall A oO ~~ . . 2 a 3 A > Z > I a - T . . ‏ب الي و‎ - - - gM A 3S 7 . . . . . s . +
د ~~ ا ~~ ~~ = ‎zs‏ 3 :3 3 ؟ ‎a < nm‏ 3 ٍِ ٍِ ‎o> . . Al‏ ب 4 5 3 = = 3 4 = د +< ‎N‏ ‎$B. 8‏ ومو ‎wy‏ با 5009 ا حم لم ‎E2388‏ 25+ 308 نأ ير ا ا حاص 2 = ضح نح 0 كح م ‎x‏ = ‎S > = 3‏ ‎m m‏ 0 0 ‎m m‏ ‎nN wn wn‏ ب و م + ‎x803% 8‏ 3883238032580 8 ما ‎2R A‏ فى ىه اي يا ‎A oN oon 2 2 nn‏ و يي با م وي ل ب و وى ل بو و و تيت و5 2 بم با با لا ‎Z‏ بط كا ‎on‏ ا ا ‎xox‏ بج ماج حا ب ات د ب ب ل ات د اب ‎mann‏ جضت مج ‎NRCC‏ مض مد ات قي 0 0 م كي 0 ه وم كوت 0 و2 وى د م قي > ‎Tr > =‏ ب ‎pk : :‏ - 2 ع 5 ‎y‏ 2 > ‎z : ~ = =‏ ِِ “2 و ‎r‏ ~ < 0 > ‎a hd a < < 7.‏ ‎r‏ — سي يج —- ‎X X X x 1‏ ; < < < —- وي = = = 3 > ~ > = 0 ويح
‎I~ 32 o‏ بت ب 3 0 ‎o~ on‏ ‎as Boom 0 =z‏ ب 2 5 ‎A‏ ‏4 ب > ‎<x‏ ا ‎N N‏ ب ب ‎on on J 3 on on S‏ - 3 3 3 ل 8 5 ‎a‏ _ = ‎BE BE BE.
LB. 5232 33. 33‏ ,3 ل م له لي هه الى مركا ا ى ل م يي بن م اي بكر م جه بكر ض كم اك اه[ © الم ‎gaa aa‏ نت لا © ‎HEA dod dA‏ ماد اد د« ت وات +بد<يد<ى<+5 0+ ‎YEE VER”‏ م واي طخ 5ح 7 5م07 0 0 © ~ 0 © 0 0
- بجع نو ‎x‏ م ‎o NM‏ ص ‎on on on‏ ب ‎on on on on‏ ‎S 2 5 5 = 2 5‏ 5 ‎m m m m mm mM m‏ 3 3 9 93 3 3 3 3 3
= = 8 ‏ب‎ o = o 8
‎Et +‏ 2 = .»| = 8 >( ا
‏0 الي اي —-
‎x x % 2 x x x 7 x
‎w 0 0 ao > ‏سن‎ ~ 3 <
‎Id 0 ‏برا‎ > 3 w
‎—~ 7 0 a 8*9 ‏الك‎ a .
١ a —- 9 a oa 2 = 9 wy — — — ‏ب بم‎ > x BF EEC 2 ‏هي‎ 4 EEA ‏م ثم 0ه ا‎ en en 070 ‏مم‎ wn © © ‏م‎ wn wm +2 ++ ‏يد كت د ايد كت م ا د‎ Moe Boge Ee Be ‏كع‎ ‏ا لق اا ذا لق قا اق اق اا ف وض‎ 2 ‏نل 0 يت 0 لت 00 0 لت 0 0 لات ناج د‎
I
‏تدج‎ + +43 +0 + +0 +5 +0 +0 +0 + 4 ‏م 5 7ط حت‎ 2 ER ‏م كر م‎ ERR ER ‏ا‎ ‏نت‎ Be SOR ‏با أ يا أ'بم ابم “بم با‎ انب‎ Re ‏با | بنا]‎ ‏م‎ ‎> ‎33 ‏ب‎ — =m 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 ‏جه‎ ‎FE 5 8&8 8&8 BE BE BE | | ‏م‎ BE © on Y— on on on on on on on on on on
Yond ‏ادا سم‎ ed Jd pees pt ‏نب‎ mand ‏نس نس‎ : < >> ‏بع‎ < |» |» |» >>» |» | > wn wy Oo wu wy un un wv wy ‏رض‎ wy wn ‏مم م‎ wn wn wy Ie) wy wy Ww wy
Oo UU wm ‏5ت‎ vo Oo Uv Uv Uv Uv © oo vw wv © on SS ‏به © يخ 2 م‎ 2 ‏ما ص‎ von =X Ep ‏كا‎ 2 IH 0 ‏يي جا ها ا د د د‎ w ‏ل‎ ZA a a a ‏م‎ a ‏به‎ ‎— ‏اع ل‎ hb ‏ها سم‎ ‏هد _ هد _ 9 9 © يه‎ vv ‏و وو و هه‎ I ‏ع‎ 8 3 8 8 g & ‏و و 4 4 فوقو‎ 8 >. © 22 4 sow ‏؟ة‎ ELF = ‏ا‎ ‎<£ — — < a 0 < a Q = — xX x x 7 x x x X 7 x X x x ‏سي 12 سي سي سي حي 7 َ سي ب سي سي سي‎ 0 ‏لي * لال ال ال 0 0 اال اله ال اال‎ < wz < ‏حي > > سو 7 ~~ وي‎ < oS > = TM a > ‏و 3 > م‎
S - cw a - - - ~ . ‏سي يج‎ < a” Q < . Q -—
YY
<r 0 2 ‏يدا‎ — <r oman wy ‏م احا‎ ‏بط‎ x, vy ‏ما — سما‎ “5 ‏م 2 ؤ؟ 5 8 يط ؟‎ 22 4 ‏اين‎ on : on on on on on : — — i 7 0 ‏لم ل‎ | a a 2 m5 2 2 2 2 ‏2ه‎ 3 © 9 A
Bf gp yy ‏يد كت يي كت د كت اكت‎ Bg ‏ب يه كت‎ ‏ص 8 ل قا 2 5 2ت 2 ضا2 ق 2 ف 2 فد قدت‎ 52 wy ‏ما وق مه كه م و دك ى 2ه لم 0ه ص ص ص ص ص ص صم‎ ‏لاب لا ناا لناب اباب‎ TAHT SIE RAE RAT 0+0 +040 +0 +0 +5 + + ‏4ك 0ك 0+ ا‎ 526252626656655 06 ‏ذم‎ Re 2d ‏با نا ا سا ابم اننا ايا كط نك‎ 9 EH = = ‏ع‎ - ‏ب‎ on 2 m Mm = = = 2 2 2 2 22 Z 2 2 2 ~ =~ =~ ~ = ~ =~ ~ = =~ ~ on on on on on on on on on on on on foun | |] ‏)سر‎ Ln] Lal J Jed oi re] Pi Ii Ln < >» << |» << CC <<< < < < wv wy vy ‏ا‎ wy wv ‏م‎ wy wv wy wy wy wv wv) wy wr ‏م م م م‎ wv wy wv vy © © 0 © 0 UU © © © Q 0 QO ‏او‎ wn © 3 = 2 Q Q 2 yA a XR SO wm w wn 7 2 88% I 2% 4B m5 0&7 wn 2 2 2 ‏ل 3 2 4 2 2 ود‎ - A 2 [= 9 AN 2 2 ‏لم لم لم ل = ل‎ 9 <9 9 9 9 9 ov 9 ‏به 0و و‎ gg ‏ةو & & ةوه‎ &€ d&g & & 8 3 3
Sf srr EE oS 3 < + 3+ oo > TT. =< ¥ ‏و‎ 2 > -— >» - - - - 0 ‏عو‎ - - - - -
Zr > > > > Tr >; ‏د‎ > o
‏ب‎ ‎= O O m 2 O = © = = = = ‏نج‎ 3 5 = 5 a — 3 3 — 3 N a ‏ل ل‎ — wm) 2
BE 3. 8. .3% 3.5082. 38 33 83 ‏ل يا له لىر م ى ل ض كه م رهما هم م جه الى ف هه م مه جه ته كه ات‎ 225059505939359 ‏ل‎ ‎80088 ‎wy ‎O 5 [0 = A 3 5 3 g 2 9 2 4 s 2 5 8 & 50 . m 3 m = = = => 2 = = 2 2 ~ ~ = = = = = =~ = on on on on on on on on on ‏سم أ أ بن سر‎ pt — ‏ب‎ — < < < < < < < < < wy wv wy wy wn wn wn wy wn wy wy wy wy wy wy wn wy wy) 3 O & 3 3 3 3 3 3 wn wn 72 72 nn wv ‏ري 7 او‎ ‏وم‎ wy wy uy ‏وها‎ wy wy wv wy
AN AN AN AN AN AN AN 0 AN ‏ا ل ل — ل ل‎ pd ~~ ‏لب‎ ‏و و 9 و09 © 9< << $< يه‎ = «= = = = = = = = > > a o ‏و‎ — ~ > — 2 2 0 w > 2 > + i >» 3 > 3 3 Q ‏يي 0 و‎ xX X xX xX X xX x x X ‏7ل ل 7ل 7ل َل ل 7ل 7ل" 7ل‎ ‏سر‎ > Q 0 ~ -— ‏سي سر صر‎ 2 2 a, w > a > > > >» po > 3 3 ٠ >» a ‏في‎
Q ‏ب بم‎ 4 < 8 ‏ب‎ x 3 ‏يم ل-م‎ ‏لم لم‎ < + 53 3 ‏ما تا‎ \O ny © ‏بم م كذ بم‎ 9 2 2 B ‏م ل‎ OF ~ O 7 ‏ماب ما‎ 0 0 1 3
A J on on 2) 3 = = mm on 9 ‏“يب‎ ‎z ; o 9 2 8 8 3 3 ] < > < wv wy wy ‏بض را‎ wy © © oO wn wv wn 8 & 5 ‏لم لم‎ hi < I 3 = 8 = 0 ‏ريح‎ ‎2 ~- > > O >» xX x X + 7 1 3 3 < a wl < >. >» Oo >
Ye
إن 0015 هي ‎CDRs‏ ممتدة؛ تتضمن كلا من تعريفات ‎¢Chothia y Kabat‏ باستثناء ‎CDR HI‏ فهي بتعريف ‎Kabat‏ يتم ترقيم متخلفات ‎amino acid‏ بالتسلسل (انظر تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ لترقيم المتخلفات في الأعمدة 112 و113؛ وتعريف الترتيب رقم: ‎٠١‏ لترقيم المتخلفات في الأعمدة 1.1 12 و13). إن كل النسخ لها ترتيبات إطار ‎CDR Hi‏ مماثلة ‎Kp = Komkon -huMabJC18‏ تتحدد كل قيم ‎kor‏ بطريقة الفحص باستثناء تلك التي تحتها خطء والتي تنتج بتحليل شامل لسلسلة تركيز 1106-1 المتدفقة عبر ‎IgGs‏ الممسوكة على رقاقة ‎BlAcore‏ أو سطح ‎-ProteOn‏ إن قيم ‎Kp‏ التي تحتها خط تتحدد لذلك تجريبيا بقياس ‎Kon‏ إن قيم ‎Kp‏ الأخرى نظرية؛ وتعتمد على قيمة يما المقدرة من ‎(Ms /١( '٠١ * ١‏ لأن معدلات التدفق لكل النسخ المحللة سريعة جدا وبالتالي محدودة الانتشار (> ‎9١ ١‏ وسريعة جدا لقياسها بدقة)؛ فإن الانجذابات بصورة غالبة أكثر أعلى أيضا من المبينة. تفاعل 101851018 مع مماثلات ‎Dkk‏
يحلل ‎huMabJC18‏ للارتباط مع مماثلات ‎Dkk‏ أخرى متوافرة» متضمنة ‎DKk-3‏ آدمي؛ ‎Dik-4‏ آدمي» ‎Dkk-2‏ فأري 5 ‎Dkk-4‏ فأري ‎L(R&D Systems)‏ إن النتائج ملخصة في جدول 0. جدول 10 تفاعل ‎huMabJC18‏ مع مماثلات ‎Dkk‏ ceil) Kp (Rel) Tip (s V) ‏هما‎ (Ms /١( kon ~~ Dkk ‏مماثلات‎ ‏جرامي)‎
‎hDkdk-3‏ = - - غير مرتبط ‎١١ VAY YOOX YY fax) on hDkk-4‏ ‎q VA ¢ “yx 4 50x) As mDkk-2‏ ‎EN XY > mDkk-4‏ كوأ ركم < 9¢,£ ‎I‏ ‏* في تطاق المعدل: سريعة جدا للقياس ‎A‏ خارج المعدل: بطيئة جدا للقياس
‏تجرى تحليلات تفاعل 1014801018 مع مماثلات ‎Dkk-1‏ حسب الوصف أعلاه باستخدام مضاد ‎Fo‏ آدمي ‎Fab2‏ ماعز كعامل كاشف للإمساك مسبق تسكينه. ‎Dkk-4 play‏ آدمي؛ 0102 فأري» أو 7100-4 فأري فوق الرقاقة؛ باستخدام ‎AAA VY‏ 77,7 نانوجزيئي
جرامي كتركيز قمي» على الترتيب؛ في سلسلة تخفيف © مرات. لا يظهر 0106-3 آدمي استجابة ارتباط خاص. جسم مضاد يربط ‎Dkk-1‏ 1018 يبين جدول 1 أدناه انجذابات ‎Lala)‏ جسم مضاد فأري 1018 مع 0106-1 آدمي» فأري؛ أو حيوان قارض ‎(R&D Systems)‏ حسب التحديد عند © 7*مئوية بتحليل ‎.BIAcore‏ لهذا الاختبارء فإن مضاد ‎IgG‏ فأري عديد النسخ يقترن مع ‎amine‏ مع رقاقة ‎.BIAcore‏ إن ‎Ab‏ ‏المضاد-1106-1 1018 يكون عند 6,57 ميكروجرام/ ملليلتر؛ ويتم إمساكه لمدة دقيقة واحدة عند © ميكرولتر/ دقيقة. يحقن تخفيف متسلسل © مرات من 0106-1 آدمي؛ فأري أو حيوان قارض ‎(R&D Systems)‏ من ‎YO ٠-04‏ نانوجزيئي جرامي) لمدة دقيقة واحدة عند ‎٠٠١-*٠‏ ‏ميكرولتر/ دقيقة. يراقب التفكك لمدة ‎٠-١‏ دقائق. تتجدد ‎ABE‏ مع نبضتين ‎١٠‏ ثانية من ‎٠‏ مللي > جرامي ‎-H3PO4‏ ‏جدول +: البيانات الحركية لارتباط ‎ball Ab‏ 8 مع ‎Dkk-1‏ أدمي؛ ‎(ld‏ أو حيوان قارض حسب التحديد بواسطة ‎BIAcore‏ عند © 7*مثوية أنواع ‎(s /) koff (Ms /١( kon Dkk-1‏ 0 (ناتوجزيئي جرامي) ‎dl‏ منض ‎TY‏ لخر ري 16" فأري ‎REPRE:‏ ند ا م حيوان قارض ‎VY Ty.
XY,Yo a XY, A‏ ترتيبات ‎rhuMabJC18‏ ‏تعريف الترتيب ‎:١9 tad)‏ ترتيب ‎nt‏ لمنطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎huMabJC18‏ ‎GAGATCGTGCTGACCCAGAGCCCCGCCACCCTGAGCCTGAGCCCTGGCG‏ ‎AGCGGGCCACCCTGTCCTGCCGGGCCAGCGAGAGCGTGGACGACTTCGG‏ ‎CATCAGCTTCATCAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCCAGA‏ ‎CTGCTCATCTACGCCGGCAGCAAGCAGGGCAGCGGCATCCCCGCCAGGT‏ ‎TCAGCGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTC‏ ‎GAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCTGAAAGAGGTGC‏ ‎CCCCCACCTTCGGCGGTGGGACCAAGGTGGAAATCAAA‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎٠١‏ 101481018 ترتيب 88 منطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDDFGISFINWYQQKPGQAPRLLIYA‏ ‎GSKQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLKEVPPTFGGGTK‏ ‎VEIK‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎7١‏ 101801018 ترتيب ‎nt‏ 60181 منطقة متغيرة سلسلة خفيفة
‎CGGGCCAGCGAGAGCGTGGACGACTTCGGCATCAGCTTCATCAAC‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎huMabJC18 YY‏ ترتيب ‎aa‏ 00181 منطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎RASESVDDFGISFIN‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 77 ‎huMabJC18‏ ترتيب ‎CDR2 nt‏ منطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎GCCGGCAGCAAGCAGGGCAGC‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ؛ 7 1014851018 ترتيب ‎CDR2 aa‏ منطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎AGSKQGS‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎huMabJC18 YO‏ ترتيب ‎CDR3 nt‏ منطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎CAGCAGCTGAAAGAGGTGCCCCCCACC‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 77 1011801018 ترتيب ‎CDR3 aa‏ منطقة متغيرة سلسلة خفيفة ‎QQLKEVPPT‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎YV‏ 1014801018 ترتيب ‎nt‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎GAGGTGCAGCTGGTCGAGTCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGC‏ ‎GGCAGCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCCAGCGGCTTCACCTTCAGCA‏ ‎GCTACGCCATCAGCTGGGTGCGGCAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGG‏ ‎AATGGGTGGCCAGCGTGAGCGGCACCGGCCTGGGCTTCCAGACCTA‏ ‎CTACCCCGACAGCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAAC‏ ‎GCCAAGAACAGCCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGCGGGCCGAGG‏ ‎ACACCGCCGTGTACTACTGCGCCACCTCCCTGGAAAACTACGCCTTC‏ ‎GACTACTGGGGCCAGGGAACCACGGTCACCGTCTCCTCA‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎YA‏ 1014801018 ترتيب 88 منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAISWVRQAPGKGLEWVASV‏ ‎SGTGLGFQTYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCATSL‏ ‎ENYAFDYWGQGTTVTVSS‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 79 ‎huMabJC18‏ ترتيب ‎nt‏ 0011 منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎AGCAGCTACGCCATCAGC‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎Yo‏ 1011801018 ترتيب 8ه 0011 منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎SSYAIS‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 549 ‎huMabJC18‏ ترتيب ‎aa‏ 0171© منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎(Kabat)‏ ‎SYAIS‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎huMabJCl8 © ٠‏ ترتقيب ‎aa‏ 00171 منطقة ‎aie‏ )5 سلسلة ثقيلة ‎(Chothia)‏ ‎GFTFSSY‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎huMabJC18 VY‏ ترتيب ‎CDR2 nt‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎AGCGTGAGCGGCACCGGCCTGGGCTTCCAGACCTACTACCCCGACAGCG‏ ‎TGAAGGGC :‏
وا تعريف الترتيب رقم: ‎YY‏ 10180018 ترتيب ‎CDR2 aa‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎SVSGTGLGFQTYYPDSVKG‏ ‏تعريف الترتيب رقم: )© ‎huMabJCI8‏ ترتيب 8ه ‎CDR2‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎(Chothia)‏ ‎SVSGTGLGFQTY‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎huMabJC18 YY‏ ترتيب ‎CDR3 nt‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎TCCCTGGAAAACTACGCCTTCGACTAC‏ ‏تعريف الترتيب رقم: 4 ؟ 101801018 ترتيب ‎CDR3 aa‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎TSLENYAFDY‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎huMabJC18 OY‏ ترتيب ‎CDR3 aa‏ منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة (قصير) ‎SLENYAFDY‏ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎Yo‏ 1011801018 ترتيب ‎nt‏ سلسلة ‎ALE‏ مع ترتيب رئيسي ‎ATGGAATGGAGCTGGGTCTTTCTCTTCTTCCTGTCAGTAACTACAGG‏ ‎TGTCCACTCCGAGGTGCAGCTGGTCGAGTCTGGCGGCGGACTGGTGCAG‏ ‎CCTGGCGGCAGCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCCAGCGGCTTCACCTTCA‏ ‎GCAGCTACGCCATCAGCTGGGTGCGGCAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGA‏ ‎ATGGGTGGCCAGCGTGAGCGGCACCGGCCTGGGCTTCCAGACCTACTAC‏ ‎CCCGACAGCGTGAAGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACGCCAAGA‏ ‎ACAGCCTGTACCTGCAGATGAACAGCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGT‏ ‎GTACTACTGCGCCACCTCCCTGGAAAACTACGCCTTCGACTACTGGGGCC‏ ‎AGGGAACCACGGTCACCGTCTCCTCAGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGT‏ ‎CTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCGGCCC‏ ‎TGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGG‏ ‎AACTCAGGCGCTCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACA‏ ‎GTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTAGTGACCGTGCCCTCCAGCA‏ ‎ACTTCGGCACCCAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAA‏ ‎CACCAAGGTGGACAAGACAGTTGAGCGCAAATGCTGTGTCGAGTGCCCA‏ ‎CCGTGCCCAGCACCACCTGTGGCAGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCC‏ ‎AAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGC‏ ‎GTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGT‏ ‎ACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCACGGGAGG‏ ‎AGCAGTTCAACAGCACGTTCCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCGTGCAC‏ ‎CAGGACTGGCTGAACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAG‏ ‎GCCTCCCATCCTCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAACCAAAGGGCAGCC‏ ‎CCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACC‏ ‎AAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCG‏ ‎ACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACA‏ ‎AGACCACACCTCCCATGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGC‏ ‎AAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCAT‏ ‎GCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCT‏ ‎CTCCCTGTCTCCGGGTAAA‏
*Aa ‏مع ترتيب رئيسي (طفرات‎ AL ‏سلسلة‎ aa ‏تعريف الترتيب رقم: 77 1014851018 ترتيب‎ ‏(83295؛ 03305) مبينة في الخط العريض المائل)‎
MEWSWVFLFFLSVTTGVHSEVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSY
AISWVRQAPGKGLEWVASVSGTGLGFQTYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYL
QMNSLRAEDTAVYYCATSLENYAFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPC
SRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSS
WTVPSSNFGTQTYTCNVDHKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSV
FLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKP
REEQFNSTFRWSVLTWHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKTKGQPR
EPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPP
MLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG
K
-N296 <HC :Glycosylation ‏موقع‎ ‏سلسلة خفيفة مع ترتيب رئيسي‎ nt ‏ترتيب‎ huMabJC18 YV ‏تعريف الترتيب رقم:‎
ATGAGTGTGCCCACTCAGGTCCTGGGGTTGCTGCTGCTGTGGCTTA
CAGATGCCAGATGTGAGATCGTGCTGACCCAGAGCCCCGCCACCCTGA
GCCTGAGCCCTGGCGAGCGGGCCACCCTGTCCTGCCGGGCCAGCGAGAG
CGTGGACGACTTCGGCATCAGCTTCATCAACTGGTATCAGCAGAAGCCC
GGCCAGGCCCCCAGACTGCTCATCTACGCCGGCAGCAAGCAGGGCAGCG
GCATCCCCGCCAGGTTCAGCGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTG
ACCATCTCCAGCCTCGAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCA
GCTGAAAGAGGTGCCCCCCACCTTCGGCGGTGGGACCAAGGTGGAAATC
AAACGAACTGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGA
GCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCT
ATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATC
GGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCAC
CTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAA
CACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGT
CACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT
‏سلسلة خفيفة مع ترتيب رئيسي‎ aa ‏ترتيب‎ huMabJC18 Kappa YA ‏تعريف الترتيب رقم:‎
MSVPTQVLGLLLLWLTDARCEIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDDF
GISFINWYQQKPGQAPRLLIYAGSKQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPED
FAVYYCQQLKEVPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCL
LNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADY
EKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC huMabJC18: 1gG2(Aa)*, Kappa ‏أنواع متمائلة من‎ huMabJC18: G2(n-), Km3 ‏أنواع مغايرة من‎ ‏سلسلة ثقيلة بدون ترتيب رئيسي‎ nt ‏ترتيب‎ huMabJC18 Y4 : ‏تعريف الترتيب رقم‎
GAGGTGCAGCTGGTCGAGTCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCA
GCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCCAGCGGCTTCACCTTCAGCAGCTACGCC
ATCAGCTGGGTGCGGCAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGCCA
GCGTGAGCGGCACCGGCCTGGGCTTCCAGACCTACTACCCCGACAGCGT
GAAGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACGCCAAGAACAGCCTGTAC
CTGCAGATGAACAGCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCG
CCACCTCCCTGGAAAACTACGCCTTCGACTACTGGGGCCAGGGAACCAC
GGTCACCGTCTCCTCAGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGG
CGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTG
GTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGC
TCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGAC
TCTACTCCCTCAGCAGCGTAGTGACCGTGCCCTCCAGCAACTTCGGCACC
CAGACCTACACCTGCAACGTAGATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGG
ACAAGACAGTTGAGCGCAAATGCTGTGTCGAGTGCCCACCGTGCCCAGC
ACCACCTGTGGCAGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGG
ACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACGTGCGTGGTGGTGGAC
GTGAGCCACGAAGACCCCGAGGTCCAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCG
TGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCACGGGAGGAGCAGTTCAACA
GCACGTTCCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCGTGCACCAGGACTGGCTG
AACGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGGCCTCCCATCCT
CCATCGAGAAAACCATCTCCAAAACCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACA
GGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTC
AGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTACCCCAGCGACATCGCCGTGGA
GTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACACCTCCC
ATGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGA
CAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCAT
GAGGCTCTGCACAACCACTACACACAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGG
GTAAA
‏سلسلة ثقيلة بدون ترتيب رئيسي (طفرات‎ aa ‏تعريف الترتيب رقم: +£ 1014861018 ترتيب‎ ‎(P330S »83295( *Aa‏ مبينة في الخط العريض المائل) ‎EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAISWVRQAPGKGLEWVASYV‏ ‎SGTGLGFQTYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLOQMNSLRAEDTAVYYCATSL‏ ‎ENYAFDYWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFP‏ ‎EPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSWTVPSSNFGTQTYTCNVD‏ ‎HKPSNTKVDKTVERKCCVECPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVT‏ ‎CVWDVSHEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTFRWSVLTWHQ‏ ‎DWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKTKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQ‏ ‎VSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPMLDSDGSFFLYSKLTVDK‏ ‎SRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK‏ ‎N296 «HC :Glycosylation ‏موقع‎ ‏تعريف الترتيب رقم: ‎54١‏ 1014801018 ترتيب ‎nt‏ سلسلة خفيفة بدون ترتيب رئيسي ‎GAGATCGTGCTGACCCAGAGCCCCGCCACCCTGAGCCTGAGCCCTGGCGA ‎GCGGGCCACCCTGTCCTGCCGGGCCAGCGAGAGCGTGGACGACTTCGGC ‎ATCAGCTTCATCAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCCAGACT ‎GCTCATCTACGCCGGCAGCAAGCAGGGCAGCGGCATCCCCGCCAGGTTC ‎AGCGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTCGA ‎ACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCTGAAAGAGGTGCCC
CCCACCTTCGGCGGTGGGACCAAGGTGGAAATCAAACGAACTGTGGCTG
CACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGA
ACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAA
AGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAG
AGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCA
CCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTG
CGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAAC
AGGGGAGAGTGT
تعريف الترتيب رقم: 57 ‎huMabJC18 Kappa‏ ترتيب ‎aa‏ سلسلة خفيفة بدون ترتيب رئيسي ‎EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDDFGISFINWYQQKPGQAPRLLIYA‏ ‎GSKQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLKEVPPTFGGGTKV‏ ‎EIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASWCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSG‏ ‎NSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSF‏ ‎NRGEC‏ ‏مثال 3: التشاط الوظيفي في المعمل من أجل ‎thuMablCI8‏ تحديد تأثير 1018 في نشاط ‎Wnt‏ في اختبار وظيفي معتمد على خلية تم اختيار خط خلية 1205 ثابت ‎(U20S TF)‏ يحتوي على جين مخبر ‎Luciferase‏ تحت تحكم محث ‎TK‏ مع أماكن ربط ‎TCF‏ للاختبار الوظيفي المعتمد على خلية. ينشط ‎Conall‏ من خلال مسار إشارات ‎(Wnt‏ عند معالجة الخلايا مع أوساط مشروطة 170138. يعارض هذا التتنشيط 106-1. إن تثبيط إشارات ‎Wnt‏ بواسطة ‎(DKk-1‏ في ‎(JWG)‏ يمكن عكسه بإضافة ‎mAb‏ معادل ‎Dkk-1‏ ‏بصفة خاصة؛ فإن 1018 هو جسم مضاد أحادي النسخ ‎(mAb)‏ يرتبط مع ‎Dkk-1‏ الفأري و ‎LY‏ مع انجذاب كبير . إن قدرته على عكس تتبيط إشارات ‎Wnt 3a‏ بواسطة ‎Dkk-1‏ يختبر في خلايا ‎TOPFlash‏ 11208. نحصل على خلايا 10205 من ‎ATCC‏ وتستقبل بدرجة ثابتة حامل الجين من العائل مع ‎«TOPFlash plasmid (Upstate)‏ وهي بنية مخبر ‎TCF-‏ ‏©11015688. تستبقى الخلايا عند ١؟"مئوية»‏ م0 © 7 في أوساط ‎McCoys 5A‏ مدعمة مع مصل جنين بقري ‎١ Glutamine 5 «Pen Strep ZY 7٠0‏ مللي جزيئي جرامي. توضع خلايا ‎U20S TOPFlash‏ في أوساط نمو منتظمة عند كثافة ‎3٠75٠‏ خلية/ سم" وتحضن طوال الليل. تعالج الخلايا مع ‎Y0‏ ,+ ميكروجرام/ ملليلتر من ‎thDkk-1 protein‏ أو وسط حامل ‎(PBS, Gibco)‏ وتركيزات مختلفة من ‎Dkk-1 mAbs‏ في ‎(Gibco) Optimem‏ بعد حضانة طوال الليل؛ تتحلل الخلايا مع مثبت أس هيدروجيني تحلل ‎(Promega) Reporter‏ ويقدر كميا إظهار 10016856 باستخدام عامل كأشف ‎Luciferase (Promega)‏
١٠١ ‏يظهر فعالية‎ LIK ‏مكتسب السمة الأدمية‎ DKk-1 ‏مضاد‎ mAb ‏وهو‎ chuMabJC18 ‏إن‎ ‎AV ‏نانوجزيئي جرامي (جدول‎ ٠,7 ‏بمقدار‎ 1050 dad ‏جيدة في الاختبار الوظيفي مع‎ ‏جدول 7: قيم 1050 لجسم مضاد 1106-1 في اختبار وظيفي معتمد على خلية‎ 1050 Ab ‏نانوجزيئي جرامي‎ ٠١ huMabJC18 ‏مثال 4: التقييم في الجسم للفعالية العظمية للجسم المضاد 0041801018 وهجائن فأرية‎ ‏في‎ Dkk-1 ‏تستخدم فأرات بالغة 0571/6 لتقييم التأثير الهيكلي لأجسام الاختبار المضاد‎ ‏ساعة ظلام ويسمح لها‎ VY ‏ساعة ضوء/‎ ١١ ‏مع دورة‎ LV die ‏الجسم. تسكن الحيوانات‎ ‏بالوصول بحرية للماء ولنظام غذائي تجاري‎ (Purina laboratory Rodent Chow 5001, Purina-Mills, St. Louis, MO). ‏وتستبقى الحيوانات‎ Pfizer ‏تجرى التجارب طبقا لبروتوكولات مصرح بها من رعاية حيوان‎ ‏واستخدام حيوانات‎ dole) ILAR (Institute of Laboratory Animal Research) Jus! ‏طبقا‎ ‏بواسطة أنبوب فمي مرة أو مرتين في‎ Abs ‏المعامل. تعالج الفأرات مع إما وسط حامل أو‎ ‏الأسبوع لعدة أسابيع. عند نهاية الدراسة؛ تقتل الفأرات برفق ويجمع المصل من أجل قياسات‎ ‏لاختبار التغيرات في كتلة‎ adhe ‏الحر. إضافيا؛ تجمع عينات‎ Dkk-15 ‏الحر‎ Ab ‏مستويات‎ ‎«micro-CT «(pQCT) ‏العظم وتكوين العظم بواسطة تصوير طبقي حاسوبي كمي طرفي‎ ‏وقياس شكل نسيجي.‎ ‏يتم مسح عظام الفخذ اليمنى بواسطة‎ pQCT (Stratec XCT Research M; Norland 5 Medical Systems, Fort Atkison, W1,
USA) ‏مم من كل جزءِ تحت كردوس عظمة‎ ١ ‏مع برنامج من طراز 335.540 قطاع عرضي سمكه‎ ‏مم من صفحة النموء‎ V0 ‏فخذ سفلي عند ©,؟ مم إلى الداخل من الطرف السفلي (حوالي‎ ‏مم‎ A ‏مم من كل جسم عظمة فخذ عند‎ ١ ‏مكان غني بالعظم المسامي)؛ وقطاع عرضي سمكه‎ ‏مم. يتحدد‎ ١,١ voxel ‏إلى الداخل من الطرف السفلي (مكان غني بالعظم القشري) مع مقاس‎ ‏محتوى؛ كثافة ومساحة العظم القياسي الحجمي من أجل العظم الكلي»؛ الحويجزي والقشري.‎ ‏يتم مسح عظام الفخذ اليمنى بماكينة‎ microCT (Micro-CT40, Scanco Medical, Auenring 6-8, Bassersdorf, Switzerland)
VEY
‏مع برنامج من طراز 3.1. يؤخذ قطاع عرضي من الجزء تحت كرودس عظمة الفخذ السفلي‎ ‏إلى‎ 7,١ ‏عند‎ (ae ١8 = ‏ميكرومتر؛ مع سمك كلي‎ ١١ ‏شريحة سمك كل منها‎ 5٠ la) ‏مم من صفحة النمو) لتحديد‎ 7,١ ‏إلى‎ ٠,7 ‏مم إلى الداخل من الطرف السفلي (حوالي‎ ١ ‏حجم العظم الجويجزي.‎ ‏تعالج عظام الفخذ اليسرى لاختبار شكلي نسيج على عظم مسامي. باختصار؛ تجفف‎ ‏وتغمس بدون إزالة الكالسيوم في‎ ethanol ‏عظام الفخذ اليسرى في تركيزات متدرجة من‎ ‏تقطع قطاعات أمامية طولية من الجزءٍ البعيد من عظمة الفخذ عند‎ .methyl methacrylate ‏سمك ؛ و١٠ ميكرومتر باستخدام‎
Reichert-Jung Polycut S 20 microtome (Leica Corp., Heidelberg, Germany). ‏معدلة وتظل‎ Masson's Trichrome ‏تصبغ القطاعات التي سمكها ؛ ميكرومتر مع صبغة‎ ‏ميكرومتر بدون صباغة. تجرى كل القياسات الشكلية النسيجية في نسيج العظم‎ ٠١ ‏القطاعات‎ ‏مم إلى الداخل‎ AVE 5 ٠,١70 ‏المسامي تحت الكردوس لعظمة الفخذ السفلي في مساحة بين‎ ‏من اتصال صفحة النمو- الكردوس باستخدام نظام تحليل صورة‎ (Osteomeasure, Inc., Altanta, GA). ‏يقاس حجم العظم المسامي كنسبة مثوية لمساحة نسيج العظم وسطح خلية التهام العظم كنسبة‎ ‏مثوية للمحيط المسامي الكلي في القطاعات المصبوغة التي سمكها ؛ ميكرومتر. يحسب‎ ‏السمك والفصل الحويجزي. نحصل على مؤشرات معتمدة على صبغ استشعاعي لتكوين‎ canal ‏العظم متضمنة سطح العظم المسامي# مع علامة صبغ استشعاعي مزدوجة (سطح تمعدن)؛‎ ‏معدل التقارب المعدني؛ معدلات تكوين العظم (إسطح عظمي وحجم نسيج مرجعي) في‎ ‏ميكرومتر.‎ ٠١ ‏القطاعات غير المصبوغة التي سمكها‎ ‏بروتوكول الدراسة والنتائج في نموذج فأر سليم‎ ‏مضاد 0106-1 فأري (1018) في نموذج فأر سليم‎ mAb ‏(أ) تأثير‎
Vo ‏بالغة مع وسط حامل أو 1801 فأري أو 1018 عند‎ C57BL/6 ‏تجرع بالفم فأرات‎ ‏و10 مجم/ كجم؛ مرةٍ في الأسبوع لمدة + أسابيع. تجمع كل من عظام الفخذ اليمنى‎ ٠٠ ‏وتحلل عظام‎ pQCT ‏الفخذ اليمنى باستخدام‎ allie ‏واليسرى من كل فأر عند التشريح. تحلل‎ ‏الكلية للأجزاء السفلية من عظام الفخذ‎ BMD ‏الفخذ اليسرى بطريقة قياس شكلي نسيجي. إن‎ ‏إن 1018 يزيد‎ .))(١ ‏تزداد بدرجة ملحوظة بمعالجة 1018 وعند كل مستويات الجرعة (الشكل‎
VEY
‏مجم/ كجم في الفئران‎ ٠١ ‏أيضا معدلات تكوين العظم بدرجة ملحوظة عند مستوى جرعة‎ .))ب(١ ‏(شكل‎ ‏هجين آدمي-‎ Ab ‏(ب) تأثير هجائن فأرية لجسم مضاد أحادي النسخ 0106-1 (هجائن فأرية‎ ‏فأري) في نموذج فأر سليم‎ ‏تغرف‎ ned) hia ‏تعالج فأرات 6 سليمة عند ؛ شهور مع هجائن فأرية عند‎ ‏مجم/ كجم أسبوعيا لمدة 1 أسابيع. تعالج مجموعة من الفأرات مع‎ Yoga Ve) ‏ا‎ ‏هجائن فأرية عند © مجم/ كجم؛ مرتين في الأسبوع لمدة > أسابيع. يحلل الجزءٍ السفلي من‎ ‏فإن الهجاثئن‎ oF ‏كما هو مبين في شكل‎ pQCT ‏لكل حيوان باستخدام‎ ted) ‏عظمة الفخذ‎ ‏مجم/ كجم مقارنة بالمعالجة مع وسط‎ 7٠ ‏إلى‎ ١ ‏الكلية عند جرعات من‎ BMD ‏الفأرية تزيد‎ ‏حامل.‎ ‎huMabJC18Lvar-4,8 kappa aa ‏ترتيب‎ :(mu-hu) ‏هجين‎ Ab : 47 ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ‏هجين‎ ‎EIVLTQSPATLSLSPGERATLSCRASESVDDFGISFINWYQQKPGQAPRLLIYA ‎GSKQGSGIPARFSGSGSGTDFTLTISSLEPEDFAVYYCQQLKEVPPTFGGGTKV ‎EIKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASWCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNG ‎VLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNR ‎NEC ‏فأري‎ IgGl ‏لمنطقة ثابتة‎ aa ‏ترتيب‎ (mu-hu) ‏هجين‎ Ab :44 ‏تعريف الترتيب رقم:‎ ‏هجين‎ huMabJC18Hvar-
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYAISVWRQAPGKGLEWVASV
SGTGLGFQTYYPDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCATSL
ENYAFDYWGQGTTVTVSSAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGY
FPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVA
HPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCV
WDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWL
NGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQWTIPPPKEQMAKDKVSLTC
MITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMNTNGSYFVY SKLNVQKSNW
EAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSH SPGK huMabJC18Lvar nt ‏ترتيب‎ (mu-hu) ‏هجين‎ Ab : 40 ‏تعريف الترتيب رقم:‎
GAGATCGTGCTGACCCAGAGCCCCGCCACCCTGAGCCTGAGCCCTGGCG
AGCGGGCCACCCTGTCCTGCCGGGCCAGCGAGAGCGTGGACGACTTCGG
CATCAGCTTCATCAACTGGTATCAGCAGAAGCCCGGCCAGGCCCCCAGA
CTGCTCATCTACGCCGGCAGCAAGCAGGGCAGCGGCATCCCCGCCAGGT
TCAGCGGCAGCGGCTCCGGCACCGACTTCACCCTGACCATCTCCAGCCTC
GAACCCGAGGACTTCGCCGTGTACTACTGCCAGCAGCTGAAAGAGGTGC
CCCCCACCTTCGGCGGTGGGACCAAGGTGGAAATCAAA
‏فأري‎ kappa nt ‏ترتيب‎ :(hu-mu) ‏تعريف الترتيب رقم: £71 جسم مضاد هجين‎
GCTGATGCTGCACCAACTGTATCCATCTTCCCACCATCCAGTGAGCAGTT
AACATCTGGAGGTGCCTCAGTCGTGTGCTTCTTGAACAACTTCTACCCCA
AAGACATCAATGTCAAGTGGAAGATTGATGGCAGTGAACGACAAAATG
GCGTCCTGAACAGTTGGACTGATCAGGACAGCAAAGACAGCACCTACAG
CATGAGCAGCACCCTCACGTTGACCAAGGACGAGTATGAACGACATAAC
AGCTATACCTGTGAGGCCACTCACAAGACATCAACTTCACCCATTGTCAA
GAGCTTCAACAGGAATGAGTGTTAG huMabJC18Hvar nt ‏ترتيب‎ :(hu-mu) ‏جسم مضاد هجين‎ £V ‏تعريف الترتيب رقم:‎
GAGGTGCAGCTGGTCGAGTCTGGCGGCGGACTGGTGCAGCCTGGCGGCA
GCCTGAGACTGAGCTGCGCCGCCAGCGGCTTCACCTTCAGCAGCTACGCC
ATCAGCTGGGTGCGGCAGGCCCCTGGCAAGGGCCTGGAATGGGTGGCCA
GCGTGAGCGGCACCGGCCTGGGCTTCCAGACCTACTACCCCGACAGCGT
GAAGGGCCGGTTCACCATCAGCCGGGACAACGCCAAGAACAGCCTGTAC
CTGCAGATGAACAGCCTGCGGGCCGAGGACACCGCCGTGTACTACTGCG
CCACCTCCCTGGAAAACTACGCCTTCGACTACTGGGGCCAGGGAACCAC
GGTCACCGTCTCCTCA
‏فأري‎ 1gG1 CHI-CH2-CH3 nt ‏ترتيب‎ :(hu-mu) ‏جسم مضاد هجين‎ £A ‏تعريف الترتيب رقم:‎
GCCAAAACGACACCCCCATCTGTCTATCCACTGGCCCCTGGATCTGCTGC
CCAAACTAACTCCATGGTGACCCTGGGATGCCTGGTCAAGGGCTATTTCC
CTGAGCCAGTGACAGTGACCTGGAACTCTGGATCCCTGTCCAGCGGTGTG
CACACCTTCCCAGCTGTCCTGGAGTCTGACCTCTACACTCTGAGCAGCTC
AGTGACTGTCCCCTCCAGCCCTCGGCCCAGCGAGACCGTCACCTGCAACG
TTGCCCACCCGGCCAGCAGCACCAAGGTGGACAAGAAAATTGTGCCCAG
GGATTGTGGTTGTAAGCCTTGCATATGTACAGTCCCAGAAGTATCATCTG
TCTTCATCTTCCCCCCAAAGCCCAAGGATGTGCTCACCATTACTCTGACTC
CTAAGGTCACGTGTGTTGTGGTAGACATCAGCAAGGATGATCCCGAGGTC
CAGTTCAGCTGGTTTGTAGATGATGTGGAGGTGCACACAGCTCAGACGC
AACCCCGGGAGGAGCAGTTCAACAGCACTTTCCGCTCAGTCAGTGAACT
TCCCATCATGCACCAGGACTGGCTCAATGGCAAGGAGTTCAAATGCAGG
GTCAACAGTGCAGCTTTCCCTGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAAC
CAAAGGCAGACCGAAGGCTCCACAGGTGTACACCATTCCACCTCCCAAG
GAGCAGATGGCCAAGGATAAAGTCAGTCTGACCTGCATGATAACAGACT
TCTTCCCTGAAGACATTACTGTGGAGTGGCAGTGGAATGGGCAGCCAGC
GGAGAACTACAAGAACACTCAGCCCATCATGAACACGAATGGCTCTTAC
TTCGTCTACAGCAAGCTCAATGTGCAGAAGAGCAACTGGGAGGCAGGAA
ATACTTTCACCTGCTCTGTGTTACATGAGGGCCTGCACAACCACCATACT
GAGAAGAGCCTCTCCCACTCTCCTGGTAAATGA
‏نموذج فأرة مستأصلة المبايض‎ (=) ‏لتقييم‎ (OVX) ‏بالغة لجراحة وهمية أو لاستئصال المبايض‎ C57BL/6 ‏تخضع فأرات‎ ‏فقد‎ Slay ‏وذلك‎ cestrogen ‏نقص‎ Alla ‏التأثير الهيكلي للأجسام المضادة 21021 للاختبار في‎
Yeo ١١ ‏ساعة ضوء/‎ ١١ ‏العظم بعد سن انقطاع الطمث. تسكن الحيوانات عند 4 7*مئوية مع دورة‎ ‏ساعة ظلام ويسمح لها بالوصول بحرية للماء ولنظام غذائي تجاري‎ (Purina laboratory Rodent Chow 5001, Purina-Mills, St.
Louis, MO).
تجرى التجارب طبقا لبروتوكولات مصرح بها من رعاية حيوان ‎Pfizer‏ وتستبقى الحيوانات طبقا لدليل ‎dole) ILAR (Institute of Laboratory Animal Research)‏ واستخدام حيوانات المعامل. تعالج الفأرات مع إما وسط حامل أو ‎Abs‏ بواسطة أنبوب فمي ‎Bye‏ أو مرتين في الأسبوع لعدة أسابيع. عند نهاية الدراسة؛ تقتل الفأرات برفق وتجمع عينات العظم لتحديد التغيرات في كتلة العظم بواسطة ‎emicroCT «(pQCT)‏ والقياس الشكلي النسيجي. إن طرق هذه القياسات تم وصفها في الجزء السابق. بروتوكول الدراسة والنتائج ‎mAb‏ مضاد ‎Dkk-1‏ فأري ‎(JC18)‏ يمنع فقد العظم بسبب نقص ‎Estrogen‏ في نموذج فأرة ‎OVX‏
تخضع فأرات ‎C57BL/6‏ عند ؛ شهور من العمر لجراحة إما وهمية أو لاستتصال المبايض ‎(OVX)‏ وتعالج مع إما وسط ‎dala‏ أو 1018 عند 6,7 )0 ‎٠١ oF‏ و١7‏ مجم/ كجم ‎cle gun‏ أو 8 عند ‎VO‏ مجم/ كجم مرتين في ‎١‏ لأسبوع لمدة ‎A‏ أسابيع بداية من اليوم بعد الجراحة. حسب التوقع» تظهر الفأرات المعالجة مع وسط حامل نقصا في النسيج العظمي عند ‎A‏ أسابيع بعد ‎OVX‏ حسبما يتضح بالنقص الملحوظ في ‎BMD‏ الكلية (شكل ). إن 1018 بصورة مستجيبة للجرعة يزيد ‎BMD‏ الكلية حسب القياس بواسطة ‎pQCT‏ عند الأجزاء السفلية من عظام الفخذ بمقدار ‎١7‏ إلى ‎77٠0‏ مقارنة مع الفأرات ‎OVX‏ المعالجة بوسط حامل. في الفأرات المعالجة مع 1018 عند ‎fans ١١‏ كجم مرتّين أسبوعيا فإن ‎BMD‏ الكلية لا تكون فقط أعلى منها في الفأرات المعالجة بوسط حامل لكنها أيضا تدوم عند المستوى المقارن للعلاج الوهمي؛ مما يدل على أنه عند هذه الجرعة ونظام التجريع هذا فإن 1018 يمنع كليا حدوث نقص في النسيج العظمي في الفأرات ‎OVX‏ (شكل ‎(VF‏ ‏مثال 5: 103480018 يزيد كتلة العظم في نموذج جرذ سليم
تعطى جرذان بالغة مرة أسبوعيا في الوريد 1011801018 عند صفر؛ ‎٠١ ٠ 6,١‏ أو ‎٠‏ مجم/ كجم لمدة ‎١‏ أسابيع. يزداد ‎calein‏ العظمي في المصل وهو الدلالة الحيوية لتكوين العظم بمقدار ‎7٠‏ 77؛ و7750 في الجرذان المعالجة مع 1014801018 عند ‎Vergy Veo)‏
مجم/ كجم؛ على الترتيب؛ عند أسبوعين بعد المعالجة ولا يختلف عن القيمة المقارنة عند ؛ أسابيع بعد المعالجة. لا يظهر ‎CTX‏ المصل؛ وهو دلالة امتصاص العظم؛ تغييرات مطابقة بعد المعالجة. إن هذه التغيرات في الدلالات الحيوية في المصل تدعم التأثير ‎Sly)‏ للجسم المضاد 1014801018 على العظم. تزداد بدرجة ملحوظة ‎BMD‏ في الجزء السفلي من عظمة الفخذ و3140 (المحتوى المعدني العظمي) لساق عظمة الفخذ بمقدار ‎١١‏ و2176 أو ‎١‏ و8 على الترتيب؛ في الجرذان المعالجة مع 1011801018 عند جرعات ‎٠١‏ و١0٠٠‏ مجم/ كجم؛ مما يدل على زيادة في كتلة العظم المسامي والقشري في هذه الحيوانات. مثال 6: طرق لفهم ديناميكيات النظام الخاصة بعلاج جسم مضاد أحادي النسخ يستهدف مولد المضاد القابل للذوبان ‎Dkk-1‏ وهو مضاد لمسار إشارات +170: استخدام نموذجي حركي إكلينيكي تمهيدي للحركية الدوائية/ الديناميكية الدوائية ‎(PK/PD)‏ لانتقاء أولا في الآدميين ‎(FIH)‏ الجرعات البادئة للجسم المضاد 1802 إن هشاشة العظام مرض عظمي يتميز بكثافة معدنية عظمية قليلة تؤدي إلى قصافة العظام وبعد ذلك كسور عظمية. إن غالبية العلاجات الفارماكولوجية لهشاشة العظام»؛ متضمنة ‎HRT «calcitonin «bisphosphonates‏ ومواد ضابطة انتقائية لمستقبل ‎«(SERM) estrogen‏ تمنع فقد العظم بتقليل امتصاص العظم. إن امتصاص كتلة العظم في مرضى يعانون من هشاشة العظام يمثل هدفا لحاجة طبية لم تتحقق بعد. إن ارتباط 0106-1 مع مستقبل 1185/6 ومستقيل مساعد ‎Kremen-1/2‏ يحث تذوت مركب المستقبل لينتج تثبيط لإشارة ‎-(Diarra et al. (2007) Nat Med 13:156-163) Wnt‏ هناك دليل وراثي على وجود دور مركزي لمسار ‎Wnt‏ في استبقاء كثلة العظم ثبت من تحديد كل من طفرات تنشيطية وإخمادية للنشاط في مستقبل ‎LRPS Wnt‏ إن إخماد نشاط يؤدي إلى نقص في كتلة العظم ويسبب الاضطراب المتتحي الجسدي الذاتي: عرض هشاشة عظام ورم دبقي كاذب ‎(OPPG)‏ في الآدميين: ‎(Gong et al. (2001) Cell 107:513-523)‏ ونوع شكلي مشابه في فثران ناقصة ‎LRP5‏ ‎(Holmen et al. (2004) J Bone Miner Res 19:2033-2040).‏ الأفراد مع ‎HBM‏ تقل لديهم بدرجة كبيرة احتمالات حدوث كسور عظمية
و إن جسم مضاد 0106-1 معادل من المتوقع أن يزيد كتلة العظم بسبب زيادة تكوين العظم بواسطة خلايا التعظم و» لذلك؛ يمنع كسور هشاشة العظام. إن ‎huMabJC18‏ هو جسم مضاد أحادي النسخ نوع أولي مكتسب السمة الآدمية مضاد 0106-1 لمعالجة هشاشة العظام؛ من بين اضطرابات أخرى. إنه يربط 0100-1 الآدمي» الفأري؛ الجرذان وقرد سينومولجس في المعمل مع انجذابات عالية ‎٠٠١< Kd)‏ بيكوجزيئي جرامي). إنه يزيد كتلة العظم في ‎i‏ سليمة ويستعيد كتلة العظم للهيكل ناقص النسيج العظمي في فأرات ‎OVX‏ وهو نموذج لفقد عظمي بعد سن انقطاع الطمث ‎-(Li et al., 2009; manuscript in preparation)‏ برغم العدد الكبير من الأجسام المضادة الخاضعة للتطوير؛ فقد تم فقط نشر قدر ضئيل من التقارير باستخدام بيانات إكلينيكية تمهيدية للتنبؤ بالحركيات الدوائية الإكلينيكية أو الجرعة الفعالة من الأجسام المضادة: ‎(Lobo et al. (2004) J Pharm Sci 93:2645-2668; Agoram, (2009) Br J Clin Pharmacol‏ .)67:153-160 تستخدم شيوعا نماذج قدرةٍ متباينة القياس في تقدير النطاق بين الأنواع المختلفة للحركيات الدوائية للجسم المضاد عندما تكون ‎PK‏ الخطية متوقعة. ‎(Wang et al. (2008) Clin Pharmacol Ther 84:548-558).‏ على أية ‎Ja‏ على العكس من الجزيئات الصغيرة؛ فإن تفاعل الجسم المضاد مع هدفه غالبا ما يؤثر على ‎PK‏ للجسم المضاد. إن ‎PK‏ و71 مرتبطة بدرجة لصيقة ويحتاج فهم ‎PK/PD‏ ‏معرفة الجسم المضاد؛ الهدف وتفاعل الجسم المضاد- هدف. تنتج أعلى قيمة من اتصال ‎PK‏ ‏مع استجابة 70 لتوقع تأثير الخضوع للعقار والتأثير بعد جرعة معطاة: ‎(Agoram et al. (2007) Drug Discov Today 20 12:1018-1024).‏ إن تكوين نماذج 716/00 حركية توفر بذلك وسائل منطقية ومؤثرة لتوقع كل من ‎PK‏ آدمية والجرعة المؤثرة إكلينيكيا من الأجسام المضادة. في هذه الدراسة؛ فإن التمييز المتزامن لجسم مضاد ‎-huMabJC18‏ هدف ‎(DKk-1)‏ في جرذ وقرد يمكن من الفهم العميق للحركيات الدوائية والديناميكيات الدوائية للاستجابة. يقترن هذا مع معرفة مستوى الهدف في الكائئات السليمة مقابل المريضة؛ معدلات تحول الهدف ومعدلات تلازم/ تفكك الجسم المضاد- هدف للتوقعات الحركية 017/0 في العيادات الإكلينيكية.
إن غرض الدراسة مقارنة وتوضيح الجرعات البادئة الإكلينيكية المتوقعة من الجسم المضاد 2 مضاد ‎(huMabJC18) Dkk-1‏ الناتجة بواسطة الحسابات التالية: ‎)١(‏ عدم وجود مستوى تأثير ضار ‎(NOAEL)‏ في نوع السمية؛ ‎(Y)‏ مستوى تأثير حيوي أدني متوقع ‎(MABEL)‏ باستخدام معادلة ‎Duff‏ التقليدية 5 )¥( ‎MABEL‏ باستخدام نموذج تخلص من عقار بواسطة هدف ‎(TMDD)‏
تستخدم دراسات أمان إكلينيكية تمهيدية في جرذ وقرد لتحديد ,110/11. يستخدم عامل أمان ‎٠٠١‏ مرة من أجل ‎NOAEL‏ لتوليد جرعة بادئة موصى بها. تستخدم ‎Duff {alas‏ التقليدية لحساب انشغال مستقبل ويحدد ‎MABEL‏ بأنه الجرعة التي تؤدي إلى انشغال مستقبل بنسبة ‎.71٠‏ يستخدم نموذج ‎TMDD‏ لمطابقة تركيزات 0106-1 والجسم المضاد الحرة مع الوقت في دراسات الجرذ والقرد. يتم استقرار النموذج للّدميين ويقدر ‎MABEL‏ بأنه الجرعة التي تعطي تقليل ‎7٠8‏ في ‎Dkk-1‏ ‏مواد الاختبار
تصنع ‎١‏ لأجسام المضادة أحادية النسخ مضادة ‎Dkk-1‏ عند ‎(Germany) Genovac‏ بتحصين ‎(hi‏ 8815/0 مع ‎Dkk-1 protein‏ آدمي مخلق كامل الطول ‎(R&D Systems,‏ ‎.Minneapolis, MN)‏ يكون الجسم المضاد نوع مماثل ‎IgG1/kappa‏ فأري وحيد مكتسب للسمة الآدمية ومكتمل الانجذاب باستخدام سياسة تكوين طفري ماسح لمكتبة ‎(Pons et al.,‏ ‎manuscript in preparation)‏ :2009. بالمقارنة مع الجسم المضاد الفأري الأصلي » يظهر الجسم المضاد مكتسب السمة الآدمية ‎(huMabJC18)‏ زيادة ‎٠٠١>‏ مرةٍ في الانجذاب لكل من ‎Dkk-1‏ الآدمي والفأري.
يستخدم ‎HDkk-1-V5-6His‏ (آدمي) 5 ‎rDKk-1-TEV-V5-6His‏ (جرذ) في ‎ally‏ حركية 0106-1 ويتم نسخه وإظهاره في مكانه ويقدر ‎La‏ كوظيفي بواسطة اختبار ‎(Ai TOPFLASH‏ ‎.et al., 2005)‏ تجربة ‎BIAcore‏
يحلل التفاعل بين 1014801018 و ‎Dl-1‏ آدمي أو فأري أو جرذ أو قرد سينومولجس باستخدام نظام 3000114 ‎BIAcore‏ مجهز مع رقاقة ‎(BIAcore AB, Uppsala, CM5 ulus‏ ‎Sweden)‏ تراقب حالات التلازم والتفكك أثناء تحليل التفاعل. إن استجابات الارتباط تتم مقارنتها بصورة مزدوجة وتطابق بصورة شاملة مع نموذج بسيط باستخدام برنامج
‎.BiaEvaluation 0‏ يتم استتباط الانجذابات من خارج قسمة ثوابت المعدل الحركي (مالوماحم1. دراسات الحيوان
‏تجرى كل دراسات الحيوان طبقا لبروتوكولات رعاية واستخدام الحيوان المصرح بها من ‎Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC)‏ دراسة حركية ‎Dkk-1‏ في الجرذان
‏يعطى ‎hDKK-1-V5-6His‏ كجرعة مضغة واحدة في الوريد لجرذان ذكور ‎Sprague‏ ‎Dawley‏ (العدد = ‎/١‏ جرعة) عند ١؛‏ 5؛ ‎٠١‏ و١٠٠٠‏ ميكروجرام/ كجم. تجمع عينات دم متسلسلة قبل الجرعة وعند 6.087 18 00,0 )6 7 ‎YE 5 A 1 cf‏ ساعة بعد الجرعة. يعطى ‎rDKk-1-TEV-V5-6His‏ كجرعة مضغة واحدة في الوريد لجرذان ذكور ‎Sprague‏ ‎Dawley‏ (العدد = ¥/ الجرعة) عند ‎٠٠١‏ ميكروجرام/ كجم. تجمع عينات دم متسلسلة ‎Yoo)‏ ‏ميكرولتر) قبل الجرعة وعند كي ىأرف ‎oY 0) 8 co FY‏ 4 و١‏ ساعات بعد الجرعة. نحصل على المصل بالطرد المركزي ويخزن عند ‎BY‏ حتى التحليل. دراسة ‎PD/PK‏ في الجرذان
‏تجرى التجارب في جرذان ‎Sprague Dawley‏ إناث (العدد = ‎e+‏ وزن الجسم ‎You=You‏ ‏جم طوال مدة الدراسة ‎.((Charles River Laboratories, Wilmington, MA)‏ يعطى 111808 مرة أسبوعيا عن طريق الوريد لمدة ‎١‏ أسابيع متتالية لجرذان إناث ‎Sprague‏ ‎Dawley‏ (العدد = ‎[A‏ الجرعة) عند ١,0؛ ‎٠٠١ ٠١ ١‏ مجم/ كجم. تعطى مجموعة واحدة من الجرذان (العدد = ‎(A‏ وسط حامل مقارن ‎٠١ histidine)‏ مللي جزيثي جرامي أس هيدروجيني 1,8 مع ‎VE NaCl‏ مللي جزيئي جرامي).
‏تجمع عينات دم متسلسلة قبل الجرعة رعند ‎YE VTA VY CEA YE GAY ١‏ كلل مك كدف كلاف الات ‎Afr VEE‏ 117 و#١٠٠‏ ساعة بعد أول جرعة من كل مجموعة معالجة. ينتج المصل بالطردٍ المركزي ويخزن عند -١٠"مثئوية‏ حتى التحليل من أجل تركيزات ‎.HuMabJC18_5 Dkk-1‏ تقدير الكثافة المعدنية العظمية في الجرذان
‏لتحديد تأثير معالجة الجسم المضاد أحادي النسخ المضاد 0106-1 على كتلة العظم» يجرى مسح لعظام الفخذ اليمنى المستأصلة بواسطة ‎:pQCT‏
Yo. (pQCT, Stratec XCT Research M, Norland Medical Systems, Fort Atkinson, WI) ‏مم من كل جزءٍ تحت كردوس‎ ١ ‏مع برنامج من طراز 5.40. يجرى مسح لقطاع عرضي سمكه‎ ‏السفلى عند ©,؟ مم إلى الداخل من الطرف البعيد؛ وهو مكان غني بالعظم‎ dal) ‏عظمة‎ ‏الكلية القياسية للحجم حسب الوصف مسبقا‎ BMD ‏مم. تقدر‎ ١,١ ‏المسامي؛ مع مقاس فوكسل‎ (Ke 6) 81., 2001) ‏في قردة سينومولجس‎ PD/PK ‏دراسة‎ ‎US. ‏إن رعاية الحيوان والإجراءات التجريبية في هذه الدراسة تجرى طبقا لتعليمات‎ ‏والشروط المحددة في:‎ Animal Welfare Act
The Guide for Care and Use of Laboratory Animals (Institute of Laboratory
Animal Research, 1996). «(Macaca fascicularis) ‏تستخدم في هذه الدراسة © قردة سينومولجس ذكور 5 © إناث‎ ‏كجم:‎ 0,Y 5 VY ‏أعمارهم من 7 إلى © أعوام وأوزانهم بين‎ (Charles River Primates, BioResearch Facility, Houston, Texas).
HuMabJC18 ‏جنس/ المجموعة) إلى © مجموعات. يعطى‎ /١ = ‏تقسم الحيوانات (العدد‎ ‏ذكر و١ أنثى عند‎ ١ ‏بالحقن في الوريد ببطء كجرعة واحدة لعدد ؛ مجموعات من القردة‎ ‏مقارن بنفس‎ Jala ‏مجم/ كجم. تعطى بقية المجموعات وسط‎ ٠٠١ ‏أو‎ ٠١ ٠ 0,١ ‏جرعات‎ ‏الطريقة.‎ ‎YE AT) ‏تجمع عينات دم كلي (حوالي ؟ ملليلتر) قبل المعالجة رعند رت درت‎ ‏نكك كك لف .ف كلاه و77١1 ساعة بعد المعالجة من كل‎ VTA YY ‏لف‎ ‏مجموعة معالجة من خلال ثقب في الوريد الفخذي. يفصل المصل من الدم كله بالطرد‎ ‏المركزي وبعد ذلك تخزن العينات عند -80"متوية حتى التحليل. تحلل العينات لاحقا من أجل‎
HuMabJC18 5 Dkk-1 ‏تركيزات‎ ‏الحر‎ Dkk-1 ‏اختبار‎ ‏إن:‎ ‎Assay Designs (Ann Arbor, Michigan) human Dkk-1 ELISA System (Cat# 900-
١٠١١
صالح لقياس 1106-1 الكلي في مصل آدمي طبقا لإرشادات الصانع مع تعديل طفيف: يستخدم ‎Dkk-1‏ = مخلق من ‎(Cat# 1096-dk-10/cf) (Minneapolis, MN) R&D Systems‏ كمعايير قياسية للاختبار. ض
لتحديد 01061 ‎al)‏ (غير المرتبط مع الأجسام المضادة العلاجية) في مصل جرذ وقردء تستخدم أجسام مضادة مضاد 1106-1 لإمساك ‎Dkk-1‏ في المصل غير المرتبط» وتستخدم عوامل كاشفة من ‎(Catalog # 900-151) Assay Designs human Dkk-1 ELISA System‏ للخطوات الباقية طبقا لإرشادات المجموعة مع التعديلات التالية: يستخدم 1716-1 جرذ مخلق ‎(Cat# 4010-dk-10/cf) (Minneapolis, MN) R&D Systems‏ و ‎Dkk-1‏ آدمي -1096 ‎(Cat#‏ ‎di-10/cf)‏ كمعايير قياسية للاختبار لاختبارات ‎cally Ball‏ على الترتيب.
تشترى عينات مصل = من أفراد أصحا ء ومرضى من ‎(Nassau, Bioreclamation Inc.‏ ‎NY)‏ ‏اختبار ‎Gale Dkk-1‏ به ‎V5‏
تقدر تركيزات المصل من 1106-1 الملحق به ‎V5‏ بطريقة ‎(ELISA‏ تخفف العينات في مثبت أس هيدروجيني ‎BSA sing) PBS‏ 77 و20 ‎Tween‏ 74,00( حتى نطاق التخفيف الأدنى النهائي المطلوب ‎(MRD)‏ ١/؛‏ إلى ١/50؛‏ ويستخدم لتقليل القيمة الأساسية وتمكين التركيزات من أن تكون في النطاق الخطي للاختبارات (حوالي 180 ‎You,‏ نانوجرام/ ملليلتر على طبق الاختبار). تخفف المعايير القياسية لمعايرة ورقابة جودة ‎hDKk=1-V5-6His‏ أو ‎rDkk-1-TEV-V5-6His‏ في نفس تركيبة البنية كعينات. تغطى أطباق اختبار امتصاص مناعي بها 41 عين ‎(Nalgene Nunc, Rochester, NY)‏ طوال الليل عند ؛*مثوية مع ‎ov‏ ‏ميكرولتر من جسم مضاد مضاد ‎(Invitrogen, Carlsbad, CA) V5‏ عند ؟ ميكروجرام/ ملليلتر ثم تغسل عندئذ مع مثبت أس هيدروجيني ‎PBS‏ يحتوي على 70.06 20 10600 ثم يتم الإخماد مع مثبت أس هيدروجيني ‎PBS‏ يحتوي على ‎ZY BSA‏ و20 ‎Tween‏ 0.00 7. تضاف العينات المخففة والقياسية إلى الأطباق )00 ميكرولتر/ عين) وتحضن مع الرج عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة. تغسل الأطباق عندئذ مع دورتين للغسيل؛ ثم تحضن مع جسم مضاد ثانوي مضاد 1106-1 متحد مع ‎Jad peroxidase‏ حار ‎(Assay Designs kit, Ann Arbor,‏ ‎MI)‏ لمدة ساعة. بعد الغسيل» يحدث تفاعل لون في الأطباق لمدة حوالي ‎٠١‏ دقائق مع مادة خاضعة ‎(KPL, Gaithersburg, MD) (TMB) 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine‏ ثم يتوقف مع
YoY
‎Y HoSO4‏ جزيئي جرامي. تطرح من قيم 00 البنية الخالية الخلفية الأساسية بعد تحديد قراءة ‎OD‏ للامتصاص عند طول موجة £00 نانومتر (مع طرح من 150 نانومتر). تستخدم المعايير القياسية لمعايرة 0102-1 الملحق معه ‎V5‏ لتشييد منحنى قياسي باستخدام مطابقة ؛ معايير مع وزن متماثل في 4.8 ‎SoftMax Pro‏ يتم استقراء تركيزات المصل من ‎Dkk-1‏ ‏الملحق به 5 في عينات غير معروفة من هذا المنحنى القياسي. اختبار ‎Calcin‏ عظمي
‏تقاس تركيزات 081610 العظمي في المصل باستخدام مجموعة ‎Rat-MIDTM Osteocalcin‏ ‎Bioscience Diagnostics A/S, Herlev, Denmark) ELISA‏ 2101016). اختبار جسم مضاد ‎huMabJC18‏ حر/ حر ‎Win‏ لعينات ‎PK/PD‏ جرذ
‏يقدر تركيز المصل من ‎huMabJC18‏ بطريقة إضاءة كهربية كيميائية ‎(BCL)‏ باستخدام نظام ‎(Gaithersburg, MD) (MSD) Meso Scale Discovery‏ تخفف العينات في مثبت أس هيدروجيني ‎PBS‏ يحتوي على ‎7١1 BSA‏ حتى تخفيف أدنى نهائي مطلوب ‎(MRD)‏ من ‎7/١‏ ‏إلى ‎١50/١‏ ثم يليه تخفيف إضافي ‎4000-٠١‏ مرةٍ لتقليل تدخل ‎LAY‏ الأساسية وليكون في النتطاق الخطي للاختبارات (حوالي ‎VY emo‏ نانوجرام/ ملليلتر على طبق اختبار). تخفف العينات القياسية لمعايرة ومراقبة جودة 101801018 في نفس تركيبة البنية كعينات. تغطى طوال الليل أطباق ‎MSD‏ عالية الارتباط بها 97 عين ‎(Cath L11XB-3)‏ عند ‎Aft‏ مع ‎hDkk-1-V5-6His‏ (متولد داخليا) عند © ميكروجرام/ ملليلتر. بعد قلب الطبق لإزالة الغطاء؛ تخمد الأطباق مع ‎BSA‏ 71 في ‎PBS‏ تضاف العينات المخففة والعينات القياسية إلى الأطباق (* ميكرولتر/ عين) وتحضن مع الرج عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تغسل الأطباق عندئذ مع ¥ دورات غسيل مع مثبت أس هيدروجيني ‎PBS‏ يحتوي على 70.06 20 ‎Tween‏ ثم تحضن مع جسم مضاد ‎IgG alias‏ أدمي ‎MSD ruthinylated‏ من ‎(Cat# R32AJ-1) j=l‏ لمدة ساعة. بعد الغسيل» يضاف مثبت أس هيدروجيني قراءة ‎T MSD‏ (؛ مرات) مع منشط سطح ‎(Cath R92TC-1)‏ لكل عين وتتم القراءة في الحال على 6000 ‎-MSD Sector Imager‏ تطرح من قيم البنية الخالية الخلفية الأساسية من قيم العينة. تستخدم العينات القياسية لمعايرة جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية مضاد 1106-1 لتشييد منحنى قياسي باستخدام مطابقة ؛ معايير مع وزن ‎١‏ 51 في برنامج 3.0 ‎MSD Discovery Workbench v‏ يتم إستقراء تركيزات yoy المصل من جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية مضاد ‎Dkk-1‏ في عينات غير معلومة من هذا المنحنى القياسي. اختبار جسم ‎alias‏ 10180018 حر/ حر ‎Wis‏ لعينات 28 تقدر تركيزات المصل من 101801018 بطريقة 81188. تخفف العينات في مثبت أس هيدروجيني ‎PBS‏ (يحتوي على ‎BSA‏ 77 و10600-20 14,40( حتى تخفيف نهائي أدنى مطلوب ‎(MRD)‏ من ‎4/١‏ إلى ‎٠٠١/١‏ يليه تخفيف إضافي ‎00-٠١‏ مرةٍ لتقليل تدخل الخلفية الأساسية وليكون في النطاق الخطي للاختبارات (حوالي ‎٠٠١-‏ نانوجرام/ ملليلتر على طبق الاختبار). تخفف العينات القياسية لمعايرة ورقابة جودة 1101801018 في نفس تركيبة البنية كعينات. تغطى طوال الليل أطباق اختبار امتصاص مناعي بها 97 عين من ؟“مثوية مع ‎hDKK-1-V5-6His‏ (متولد داخليا) عند ‎٠,5‏ ميكروجرام/ ملليلتر وعندئذ تخمد مع (يحتوي على ‎Tween-205 77 BSA‏ © 70,4( بعد الغسيل مع مثبت أس هيدروجيني 5 يحتوي على ‎Tween-20‏ 0.06 7. تضاف العينات المخففة والقياسية إلى الأطباق ‎٠٠١(‏ ‏ميكرولتر/ عين) وتحضن مع الرج عند درجة حرارة الغرفة ‎sad‏ ساعة. تغسل الأطباق عندئذ ¥ مرات؛ ثم تحضن مع مضاد 1802 = فأري ‎(Invitrogen, Carlsbad, CA) biotinylated‏ لمدة ساعة وبعدها يضاف ‎streptavidin‏ متحد مع ‎peroxidase‏ فجل حار ‎(Jackson‏ ‎ImmunoResearch, West Grove, PA)‏ ويحضن الطبق إضافيا لمدة ‎٠‏ دقيقة. بعد الغسيل» يحدث تفاعل لون في الأطباق ‎sad‏ حوالي ‎٠١‏ دقائق مع مادة خاضعة -3,3,5,5 ‎(TMB) tetramethylbenzidine‏ ثم يتوقف مع ,11:50 ؟ جزيئي جرامي. تطرح قيم الخلفية الأساسية من ‎OD af‏ للبنية الخالية بعد قراءة ‎OD‏ للامتصاص عند طول موجة £04 نانومتر (مع طرح من ‎١00‏ نانومتر). تستخدم المعايير القياسية لمعايرة جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية المضاد 1106-1 لتشييد منحنى قياسي باستخدام مطابقة ؛- معايير مع وزن متماتل في ‎Pro 8‏ «50021. يتم استقراء تركيزات المصل من جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية المضاد 0106-1 في عينات غير معروفة من هذا المنحنى القياسي. اختبار جسم مضاد ‎alias‏ عقار ‎(ADA)‏ يقاس وجود أجسام مضادة مضادة لعقار ‎(ADA)‏ ضد 1011801018 في جرذ وقرد مع اختبار ربط مركب ترابطي قنطرة ‎(LBA)‏ باستخدام:
Meso Scale Discovery (MSD) platform (Gaithersburg, MD).
نل تضاف عينات مصل ‎YO)‏ ميكرولتر) مخففة ‎٠١-١‏ مع مادة تخفيف اختبار ‎LY BSA)‏ ‎(PBS 5 Tween 0‏ إلى طبق ‎Je‏ الارتباط ‎MSD‏ به 97 ‎(pe‏ مغطى مع ‎huMabJC18‏ عند ‎١‏ ميكروجرام/ ‎all‏ في مثبت أس هيدروجيني ‎carbonate‏ مع أس هيدروجيني 9,71. بعد الحضانة ساعة عند درجة حرارة الغرفة تغسل الأطباق ويضاف 1011008 معلم مع ‎YO ruthenium‏ ميكرولتر لكل عين عند ‎١‏ ميكروجرام/ ملليلتر وتحضن مرةٍ أخرى لمدة ساعة عند درجة حرارة الغرفة. يغسل الطبق وبعد إضافة ‎You‏ ‏ميكرولتر من مثبت أس هيدروجيني قراءة ‎MSD‏ (مرتين)» تتم قراءة الطبق على ‎MSD Sector‏ ‎.Imager 6000‏ تحليل حركية دوائية غير قسمية يجرى تحليل ‎PK‏ باستخدام:
WinNonLin Enterprise Edition computer software, Version 5.2 (Pharsight Corp.,
Cary, NC). يتحدد ثابت معدل الطور النهائي ‎(ke)‏ بالتراجع الخطي لنمط لوغاريتم تركيز البلازما- الزمن. يحسب عمر نصف الإزالة النهائية )12( من ‎Kaif ٠,157‏ تحسب قيم ‎Tmax Cmax‏ يس مباشرة من البيانات المسجلة. تحسب المنطقة تحت منحنى تركيز المصل- الزمن (ينه4170) باستخدام قاعدة شبه المنحرف الخطية ويتم الاستقراء إلى ما لا نهاية (.:معت1ه) باستخدام ‎ke‏ تحسب الإزالة من الجسم ‎(CL)‏ باستخدام العلاقة: الجرعة/ ممو0تآه. يحسب حجم التوزيع ‎(Vo)‏ باستخدام العلاقة ‎.CL/kg‏ يحسب ‎Cave‏ بأنه ©آ لفت التجريع الفاصلة 1,91 ‎tlast/(‏ )854 التجريع الفاصلة الأولى. في دراسة حركية 1106-1 في الجرذان؛ فإن قيمة عمر نصف الإزالة المحسوبة من أجل ‎h-‏ ‎Dkk-1‏ هي متوسط قيم عمر- النصف المحددة عند مستويات جرعة #؛ ‎٠١‏ و١٠٠٠‏ ميكروجرام/ كجم. تتوافر نقاط بيانات غير كافية لحساب قيمة عمر- نصف الإزالة عند مستوى جرعة ‎١‏ ميكروجرام/ كجم. من أجل 1100-1+ يحسب عمر نصف الإزالة من تحليل تجميع أصلي لثلاثة جرذان عند ‎٠٠١‏ ميكروجرام/ كجم؛ وهي الجرعة الوحيدة المعطاة. تحليل ‎PK/PD‏ يجرى تحليل أولي غير تقسيمي )1992 ‎(Jusko,‏ لبيانات التركيز مقابل الزمن لجسم مضاد من جرذ وقرد على ‎abil‏ ويكشف عن ‎PKs‏ غير خطية للجسم المضاد. يستخدم نموذج حركي
Yoo ‏من أجل‎ PK/PD ‏لوصف نمط‎ (Mager and Jusko, 2001) ‏للتخلص من عقار بواسطة هدف‎ ‏أن ارتباط‎ TMDD ‏8ن في جرذان وقردة (شكل 0( بإيجاز» يفترض نموذج‎ ‏مسئول عن‎ (Dkk-1) ‏مع الهدف‎ (huMabJC18) ‏الانجذاب الكبير القابل للتشبع للجسم المضاد‎ ‏(ثابت‎ (V1 ‏غير الخطي الملحوظ. يرتبط الجسم المضاد في القسم المركزي (حجم‎ PK ‏سلوك‎ ‏مع 0106-1 حر لتكوين مركب مستقبل 1710-1 جسم مضاد. بمجرد التكوين قد‎ (Kon ‏المعدل؛‎ ‏يتفكك المركب (ثابت المعدل؛ م,) أو قد يزال مركب الجسم المضاد 2106-1 (ثابت المعدل»‎ ‏يمكن أيضا مباشرة إزالة الجسم المضاد غير المرتبط من القسم المركزي عند معدل‎ ٠ (Ket, complex ‏مقدار أول (0. يمتد النموذج ليشمل توزيع الجسم المضاد إلى أماكن نسيج غير خاصة‎ korg kip ‏موصوقة بثوابت المعدل‎ ‏يتم تنفيذ النموذج في شكل المجموعة التالية من المعادلات التبيانية:‎ dc (nM) mAbserum = - - * 27 ky *C mAbserum k 12 0 mAdbserum
Tk 21 *C mAbtissue 7 *C mAbserum. 0 target tk of tC complex ac... (nM) . 2 mAbtissye = — * * (2) dt ky 1 8 ‏42م‎ k 12 < mAbserum
AC peut M) _ ve oy (3) a el, target target, el, target
TC targer Tk on 0 ‏ل‎ 0 target * kor TC complex 4 pmpie "MM ) =-k *C +E *C (4) ai off comp lex on ~~ mAbserum tC target kel complex tC complex = [mAbotal] 5 Kon/Kofr = ky <huMabJC18 ‏هو التركيزات الحرة من‎ CmAbserum ‏حيث أن‎ ‏ا‎ + Ci arget [T arg etrotar] Ceomplex + CrnAbserum ‏الذي يتم في‎ eV ‏طراز‎ (NONMEM ‏إن نظام المعادلات التبيانية محلول عدديا في برنامج‎ ‏يستخدم‎ Compaq Visual Fortran version 6.6 ‏باستعمال‎ Windows XP ‏تحت‎ DOS ‏غلاف‎ ‏الحر مع جرعة وحدة عند‎ Dkk-1 ‏لهذه المشكلة الصعبة. يثم ابتداء قسم‎ ADVAN 8 TOL=3 yo ‏صفر. إن‎ = t ‏الحر المقدر عند‎ Dkk-1 ‏حر) إلي تركيز‎ Dkk-1) F3 ‏صفر وبضبط‎ - 4 ‏التباين في استجابة 0106-1 في قردة الوسط الحامل يتميز باستخدام نموذج عديد التحديد مقدار‎ : ‏رابع‎ ‎Y= A* 11118704 -B*TIME"3 +C*TIME 2 -D*TIME +DKKO ‏و0 هي الثوابت المحددة من بيانات الوسط الحامل والثابتة في النموذج‎ © BA ‏حيث أن‎ $ERROR ‏قبل الجرعة (© = صفر ساعة). يتم تتفيذ هذا في قالب‎ Dkk-1 ‏تركيز‎ = DKKO ‏مع تأثير إضافي للعقار.‎ NONMEM ‏في‎ ‏يتميز التباين في استجابة 0106-1 في جرذان الوسط الحامل باستخدام وظيفة جيب تمام‎ ‏بسيطة:‎ ‎F= Baseline + Amplitude*Cos((Time-Peak Time)*(2*n/24)) (Chakraborty et al. (1999) J Pharmacokinet Biopharm 27:23-43) ‏مع تأثير مضاعف للعقار.‎ ‏تتحدد جودة المطابقة من دقة تقدير المعيار وقالب التفسير للمعايير المتوافرة بواسطة‎ ‏الرسومات البيانية للفحص البصري للانتشار‎ (NONMEM ‏الروتين الثانوي 5001 في‎ ‏العشوائي لمادة متخلفة موزونة مقابل الزمن والتركيزات المتوقعة؛ إلى جانب الفحص البصري‎ ‏للكائن المنفرد المتوقع مقابل زمن التركيز الحقيقي لنقص الميل التخطيطي عند أي نقاط في‎ ‏الزمن.‎ ‏في مرضى هشاشة العظام باستخدام نموذج‎ huMabJC18 5 Dkk-1 ‏تجرى محاكاة لتركيزات‎ ‏في:‎ 0
Berkeley-Madonna (v8.3.9, University of California, Berkeley, CA). ‏يتحدد نطاق درجي لمعايير‎ VE ‏إن المعايير المستخدمة في المحاكاة الآدمية مبينة في جدول‎ ‏الهدف والمركب من جرذ وقردٍ بالنسبة لآدمي من خلال مبادئ القياس المتباين باستخدام‎ (PK ‏هو وزن‎ BW ‏حيث أن 7 هو المعيار الهام؛‎ oY = a BWP ‏نموذج قدرة بسيطة بالصيغة:‎ ‏الجسم؛ 8 هو معامل القياس المتباين و5 هو أس القياس المتباين. بالنسبة لتحديد نطاق درجي‎ (kets ket) ‏وبالنسبة لثوابت معدل الإزالة والامتصاص‎ or, Yo = 5 ‏لعمر النصف يفترض أن‎ (Wang etal, 2008) ١ = b ‏ولحجم التوزيع يفترض أن‎ +, Yo - 5 ‏يفترض أن‎
١٠ ‏إن تقديرات الجرعة البادئة الإكلينيكية المتوقعة المشتقة من هذه الأساليب الثلاثة تختلف‎ ‏مجم/ كجم). تشتق‎ ١( NOAEL ‏جرعة بادئة مشتقة من حساس‎ Jef ‏بمقدار يزيد عن 0 إن‎ ‏مجم/ كجم).‎ +0 0 0 4X) Duff ‏الذي يستعمل معادلة‎ MABEL ‏أقل جرعة بادئة من حساب‎ ‏تقع قرب وسط‎ TMDD ‏الذي يستعمل نموذج‎ MABEL ‏إن الجرعة البادئة المشتقة من حساب‎ ‏مجم/ كجم).‎ +, 0 YF) ‏هذا النطاق‎
BlAcore ‏بيانات‎ ‎huMabJC18 ‏ملخص لحركيات ربط 1106-1 في المعمل للجسم المضاد‎ A ‏يبين جدول‎ ‏يربط‎ BlAcore ‏مقابل 0106-1 آدمي؛ فأري» جرذ 338 المحددة مع تقنية ارتباط سطحي‎ ‏بيكوجزيئي جرامي؛‎ Y> Kg) ‏آدمي» فأري» وجرذ مع انجذاب كبير‎ Dkk-1 HuMabJC18 ‏بيكوجزيئي جرامي؛ على التوالي). في معظم الحالات؛ تكون‎ ٠٠١<و‎ aba ‏بيكوجزيئي‎ Te ‏سريعة جدا ومعدلات التفكك 00 بطيئة جدا لقياسها بدقة بواسطة‎ (Kon) ‏معدلات التلازم‎ ‏قرد سينومولجس؛ ورغم ذلك لا يمكن‎ Dkk-1 Lay ayy HuMabJC18 ‏إن‎ .BlAcore ‏أدوات‎ ‎Dkk-1 ‏بسبب عدم نقاء عينة‎ Kg ‏تحديد‎ ‎huMabJC18 ‏جدول /: حركيات ربط 1106-1 في المعمل بواسطة‎ ‏يك (نانوجزيئي‎ (Bel) 1 )ةيناث‎ /١( kor ‏دقيقة)‎ /١( ‏أصناف 01061 .مم1‎ ‏جرامي)‎ ‎Gees q1,Yv< bq —eY> Me), > ‏آدمي‎ ‎I £,4¢< Po—e¥,4> Me), ¥< ‏فأري‎ ‎GY ‏جرذ <¥ ع2 <ا ران ا‎ ‏ل‎ o< bo—e1> 2 ‏قرد‎ ‏؟ معدل التلازم سريع جدا لقياسه بدقة‎ ‏معدل التفكك بطئ جدا لقياسه بدقة‎ © ‏معدل التلازم لا يمكن تحديده بسبب قيود نقل الكتلة والعينة غير النقية‎ © ‏غير محدد‎ ‏في سيدات قبل سن انقطاع الطمث؛ بعد سن انقطاع الطمث؛ مع نقص نسيج‎ Dkk-1 leds) ‏عظمي ومع هشاشة عظام‎
٠١ ‏يبين جدول 9 تركيزات 0106-1 في عينات مصل من سيدات قبل سن انقطاع الطمث‎ = ‏(العدد = +0( بعد سن انقطاع الطمث (العدد = 00( مع نقص النسيج العظمي (العدد‎ ‏ومع هشاشة عظام (العدد = 00( لا يوجد اختلاف ملحوظ في تركيزات 1106-1 بين‎ (00 ‏السيدات قبل وبعد سن انقطاع الطمث في جرعة العينة المختبرة؛ وذلك يقترح أن العمر لا يؤثر‎ ‏بين مستويات 0106-1 في السيدات‎ )٠.0٠ > ‏على تركيزات 0106-1. هناك اختلاف ملحوظ (م‎ ‏من سيدات مع‎ lilly ‏قبل سن انقطاع الطمث (المتوسط 7,7 نانوجرام/ ملليلتر) مقارنة‎ ‏نانوجرام/ ملليلتر) والسيدات‎ 4 = Dk-1 ‏نقص النسيج العظمي (درجة 1 = -7,7؛ متوسط‎ ‏نانوجرام/ ملليلتر). إن هذه القيم‎ ٠١# = 1106-1 ‏مع هشاشة العظام (درجة 7 = -7؛ متوسط‎ ‏في سيدات مع هشاشة‎ HuMabJC18 ‏بالجرعة الفعالة من‎ 5050 PK/PD ‏متضمنة في نموذج‎ ‏عظام.‎ ‏جدول 4: تركيزات 0106-1 في إنات قبل سن انقطاع الطمث؛ بعد سن اتقطاع الطمث؛ مع‎ ‏نقص النسيج العظمي ومع هشاشة عظام‎ ‏قيمة.طم‎ Serum Dkk-1 ‏السن درجةق]*‎ N ‏الشخص‎ ‏(نانوجرام/‎ ‏ملليلتر)‎ ‎—- YY + X,Y ١> WE ‏قبل سن انقطاع 6 ال‎ ‏الطمث‎ ‏م"‎ £,Y + Y,4 ١-> ‏ء‎ £O8Y ou ‏بعد سن انقطاع‎ ‏الطمث‎ ‏مع نقص نسيج 8 ارال أن حار حم 4+ 7 <اء,.‎ ‏عظمي‎ ‏<جلاعى‎ 0 + ٠ ‏م‎ + ¥- V,Y + Vv, ¢ on ‏مع هشاشة عظام‎ ‏وتحدد‎ ¥,0-< 5 ١-< ‏النسيج العظمي مع درجة-1‎ ali ‏إن درجة-1 طبيعية >-٠؛ يحدد‎ * ‏هشاشة العظام كدرجة-17 -7,5 أو أقل.‎ ‏في جرذ‎ Dkk-1 ‏حركيات هدف‎
Sprague- ‏و 0102-1 () جرذ لجرذان ذكور‎ V5-His ‏ملحق به‎ al (h) Dkk-1 ‏يعطى‎ ‏أو‎ (h-DKk-1) ‏ميكروجرام/ كجم‎ ٠٠٠١و‎ ٠١ 0 »١ ‏بإعطاء مضغة في الوريد عند‎ Dawley
١٠4 ‏خطية عبر نطاق الجرعة المختبر.‎ h-Dkk-1 ‏إن حركيات‎ o(r-Dkk-1) ‏ميكروجرام/ كجم‎ ٠ ‏(شكل 3( و4 ؟ دقيقة‎ h-Dkk-1 ‏إن متوسط عمر نصف الإزالة 77,3 + 1,6 دقيقة من أجل‎ 1-Dkk-1 ‏من أجل‎ ‏و0159 جرذ‎ PKs ‏الحر/ الحر جزئيا مقابل الزمن عقب‎ HuMabJC18 ‏أنماط متوسط تركيز‎ V ‏يبين شكل‎ ‏غير‎ PK ‏معايير‎ ٠١ ‏إناث. يبين جدول‎ Sprague-Dawley ‏إعطاء في الوريد أسبوعيا لجرذان‎ ‏للجسم المضاد 11011801018 غير خطية عبر نطاق الجرعة مع زيادات‎ PKs ‏تقسيمية. إن‎ ‏مجم/ كجم. يدل هذا على وجود معدل أكبر‎ ٠١ ‏مع جرعة تصل إلى‎ AUC ‏تناسبية فائقة في‎
Vo) ‏للإزالة من الجسم عند الجرعات الأقل (1. و١ مجم/ كجم) مقارنة مع الجرعات الأعلى‎ ‏مجم/ كجم). عند نقاط زمنية لاحقة؛ تكون تركيزات 11014801018 في المصل في‎ ٠٠١و‎ ‏بعض الجرذان أقل من المتوقع أو تحت حد التقدير الكمي للاختبار. إن الأجسام المضادة‎ ‏مضاد 11011801018 جرذ تتأكد في هذه العينات باستخدام اختبار جسم مضاد مضاد عقار‎ ‏نوعي وتزال البيانات من هذه الجرذان من التحليل والرسومات البيانية.‎ (ADA) ‏الحرة/ الحرة جزئيا في جرذان‎ HuMabJC18 ‏غير تقسيمية لتركيزات‎ PK ‏معايير‎ :٠١ ‏جدول‎ ‎HuMabJC18 ‏عقب إعطاء في الوريد من‎ Sprague-Dawley 4Cmin “Cave ‏عمس‎ AUC ‏الجرعة (مجم/‎ ‏(ميكروجرام/ | (ميكروجرام/ | (ميكروجرام/‎ | 68 be ‏كجم)‎ ‏ساعة ملليلتر) ملليلتر) ملليلتر)‎ ‏(ميكروجرام.ساعة/‎ ‏ملليلتر)‎ ‎<LLOQ + 4, NYY + 1 1,٠١ + ١7 1 ‏ا‎ 1,١ +6 + 7 ‏ارك + ,ا‎ AAA + Ao ١ ‏م "لل‎ ‏قفرا‎ £ TAY 0,9¢ + 4 Y4,Y + YoY + 7٠ Ya
Youu
MT 4 Me 2 AEY FIFE YT £18) ea Yoo
Ve
YAY eu ‏قيم مسجلة كمتوسط حسابي + الحيود القياسي‎ * ‏ساعات‎ ¥ = Tmax ‏أن‎ Cus ‏مجم/ كجم‎ ٠٠١ ‏ساعة لكل جرذ ما عدا في مجموعة‎ = Toy ® ‏للجرذ الواحد.‎ ‏إفت التجريع الأول الفاصئة)©ل25//1 لفترة التجريع الأولى الفاصلة (ليس لمدة الدراسة كلها‎ = Cave © ‏بسبب أخذ العينات المقترن).‎ ‏نم = الفترةٍ الأولى الفاصلة للتجريع (صفر-68١ ساعة).‎ © ~(NA ‏إن المتوسط لتركيزات 1106-1 الحر في نفس الدراسة مرسوم بيانيا في الأشكال‎ ‏تقل بسرعة بعد إعطاء 11:14801018 للجرذ. على الإطلاق‎ all Dkk-1 ‏48(ه). إن تركيزات‎ ‏باستثناء الجرعة الأقل؛ تظل تركيزات 0106-1 الحر مثبطة طوال فترة الدراسة.‎ ‏لقرد سينومولجس‎ PDs 5 PKs ‏المنفرد في المصل مقابل الزمن في قدرة‎ Lise ‏الحر/ الحر‎ HuMabJC18 ‏إن أنماط تركيز‎ ‏غير التقسيمية للجسم المضاد‎ PK ‏سينومولجس مبينة في الأشكال 4(أ) و؟(ب)؛ وإن معايير‎
HuMabJC18 ‏من أجل‎ PKs ‏إن‎ .١١ ‏في 3,3 سينومولجس مبينة في جدول‎ HuMabJC18 ‏غير خطية عبر نطاق الجرعة المختبر وتلاحظ قيم معدلات إزالة أكبر من الجسم وأعمار‎ ‏في قردة‎ HuMabJC18 ‏نصف أقصر عند الجرعات الأقل. يتراوح عمر النتصف من أجل‎ ‏يوم عبر نطاق الجرعة.‎ ١-١ ‏سينومولجس من‎ ‏الحرة/ الحرة جزثيا في‎ HuMabJC18 ‏غير التقسيمية لتركيزات‎ PK ‏متوسط معايير‎ :١١ ‏جدول‎ ‏الجنس/ مجموعة الجرعة)‎ /١ = ‏قردة سينومولجس عقب إعطاء وحيد في الوريد (العدد‎
Cmax ‏طرف‎ [A)Ve cp AUC ~~ AUC ةعرجلا‎ ‏(ميكروجرام/‎ (ps) 11/2 ‏(ليلتر/ . كجم)‎ (inf) (tls) | ‏(مجم/‎ ‏كجم) | (ميكروجرام. (ميكروجرام. . يوم/ كجم) ملليلتر)‎ ‏ساعة/ ساعة/‎ ‏مليلتر)‎ (sbi ‏نكل‎ 2 ~ BEY 0 AY, Y ¥1,¢ 1 ‏ادل ل 1 قف‎ YAY YY. ١ bsg
١١ ‏نكن‎ ١ 11 81 6 ‏ل‎ Ya
Foto VY, ¥ ¥Y,o YAO Afovis EY You .AUC(0-tlast) ZY + > AUC(0-inf) ‏لأن‎ ١ =n? ‏قيم 11/2 منفردة مسجلة بسبب حسابات من فترات زمنية مختلفة.‎ 0 ٠١ ‏يوم وفي قرد واحد في مجموعة‎ VE ‏مجم/ كجم عند‎ ١ ‏إن فقد التعرض في مجموعة‎ ‏مجم/ كجم عند ١؟ يوم بعد الجرعة ربما يكون بسبب تكوين أجسام مضادة مضادة‎ ‏وتزال هذه البيائات من التحليل والرسومات البيانية. على أية حال» لا يمكن‎ HuMabJC18 ‏نوعي.‎ ADA ‏تأكيد هذا باستخدام اختبار‎ ‏في نفس الدراسة في قردة سينومولجس مبين‎ al) 1106-1 ‏إن متوسط تركيزات المصل من‎ ‏إن‎ HuMabJC18 ‏في الأشكال ١٠(أ)-١٠(ه). يقل بسرعة تركيز 0106-1 الحر عقب تجريع‎ ‏مدة إخماد 0106-1 تعتمد على الجرعة وتعود إلى خط القاعدة عند الجرعات الأقل. عند أعلى‎ ‏الجرعات» يظل 0106-1 خامدا طوال 5538 التجريع كلها.‎
PK/PD ‏تكوين نموذج‎ ‏لمطابقة متزامنة لتركيزات‎ (Mager and Jusko, 2001) ‏حركي‎ TMDD ‏يستخدم نموذج‎ ‏مع الوقت (شكل 0( في كل من قرد وجرذ. يتم اختيار هذا‎ all Dkk-15 ‏الحر‎ HuMabJC18 ‏النموذج لأنه يمثل إزالة خاصة للجسم المضاد بدون هدف؛ تكوين وتحول هدف» وتكوين‎ 1106-1 ‏الملحوظة مقابل المتوقعة من أجل 11014801018 و‎ PK/PD ‏مركب وإزالته. إن أنماط‎ -)(٠١و ‏و*«(اأ)-(ه) وفي القرد مبينة في الأشكال 4(أ)-(ب)‎ ١ ‏في جرذ مبينة في الأشكال‎
AY ‏لجرذ 385 مبينة في جدول‎ TMDD ‏(ه). إن تقديرات المعيار من نموذج‎ ‏المقدرة في قرد وجرذ‎ PK/PD ‏معايير‎ VY ‏جدول‎ ‎(%) cv ‏قيم مقدرة من‎ (%) cv ‏المعيار قيم مقدرة من‎ ‏نموذج جرذ نموذج قرد‎ ‏(لتر/ و لأ 7 دا‎ 71 map (ps
V,0¢ 1 ‏ا م‎ (es) 1 ‏همه‎ ‏مشتق 1 مشتق‎ Y,0 ‏(يوم)*‎ ti2 mad ‏دنا (يوم ') يا 8,7 م م‎ yy
V,Yo ‏كل لا لالخلا‎ (Tas) kat ‏ثابت‎ Yi ‏(تاتوجزيثي ¢,£9 ثابت‎ Kon ”)' ‏جرامي ' يوم‎ ‏ثابت‎ YY ‏جم[ (يوم )ا لاا ثابت‎
Fide ‏(بيكوجزيئي ا مشتق ال‎ Ky (eb
YA v4 Y,.0 971 )' ‏(يوم‎ Kel target ‏مشتق أ مشتق‎ ١١ ‏(دقيقة)؟‎ t1/2 target
Y,0V GUY ‏ملا‎ q,0¢ )' ‏(يوم‎ Kel complex ‏مشتق‎ ARTE: Ba ‏لاا‎ 11/2 complex ‏(ساعة)"‎ ‎Kaif ٠197 = ‏معيار ثانوي محسوب مثل ين‎ ® ‏يتم تحديدهما في تجربة سابقة عندما لا يمكن الحصول على 50017 في‎ Kors Kon " ‏وجا ثابتة عند هذه القيم ويتحقق‎ Kon ‏في التجربة النهائية؛ تكون تقديرات‎ .4 .$COV
KotKon = Kg Jie ‏معيار 5588( محسوب‎ © ‏في الجرذ والقرد متطابقة‎ PK/PD ‏وعمر النصف من نموذج‎ (V1) ‏إن تقديرات حجم التوزيع‎ ‏للجسم المضاد 1502 في الجرذ والقرد:‎ PKs ‏مع‎ ‎(Peppard and Orlans, 1980; Hinton et al., 2004). ‏بيكوجزيئي جرامي) متطابق مع القيمة الناتجة‎ YEA = Ko) Dall ‏إن تقدير الفعالية في الجسم‎ ‏أعلاه). إن‎ BlAcore ‏بيكوجزيئي جرامي؛ انظر بيانات‎ ٠٠١< Kg) Dall ‏في المعمل في‎
DKk- ket ‏دقيقة في القرد و١١ دقيقة في الجرذ) المحددة من‎ 7+( Dkk-1 ‏تقديرات عمر نصف‎
YY,Y) V5-His ‏و106-1+ الملحق به‎ h-Dkk-1 ‏مشابهة للقيم المقدرة من دراسات استهلاك‎ 1 ‏حركيات الهدف أعلاه). إن عمر النصف للمركب‎ ora ‏دقيقة على الترتيب؛ انظر‎ VE ‏دقيقة‎ ‎11011801018 ‏للمركب) في الوسط بين عمر النصف المقدر للجسم المضاد؛‎ Kop ‏(المقدر من‎ .Dkk-1 ‏والهدف»‎ ‏العلامات الحيوية للعظم في الجرذ‎
بالإضافة إلى 121061 المستهدف؛ تقدر كميا علامات حيوية أخرى في دراسة الجرذ تتضمن ‎calcin‏ عظمي » وهو دلالة حيوية راسخة جيدا لتكوين العظم؛ والكثافة المعدنية العظمية ‎«(BMD)‏ وهي علامة حيوية ‎dalla‏ لهشاشة العظام؛ انظر» مثلا: ‎(Primer on the Metabolic Bone Diseases and Disorders of Mineral Metabolism‏ ‎(Rosen CJ ed) pages 152-163 and 174-179, American Society for Bone and‏ ‎Mineral Research, Washington D.C).‏ يبين ‎١١ JSS‏ رسم بياني لتركيز ‎caloin‏ العظمي مقابل الجرعة عند ‎١,5‏ و5,؟ أسبوع بعد أول جرعة في دراسة الجرذ. هناك زيادة مفيدة إحصائيا (م > ‎(v.00‏ في تركيزات ‎calcin‏ ‏العظمي في مجموعة جرعة ‎١‏ مجم/ كجم/ الأسبوع عند 7,5 أسبوع بعد أول جرعة وفي مجموعات جرعة ‎٠١‏ و١٠٠٠‏ مجم/ كجم/ الأسبوع عند 1,0 أسبوع بعد الجرعة. كما هو مبين في جدول ‎OV‏ تزداد بدرجة ملحوظة ‎BMD‏ الكلية في الجرذان المعالجة مع 58 عند ‎٠١‏ و١٠٠‏ مجم/ كجم/ أسبوع بنسبة ‎VN 71١1‏ على الترتيب»؛ مقارنة بالوسط الحامل المقارن. جدول ؟١:‏ التغيرات في ‎BMD‏ الكلية عند الأجزاء السفلية من عظام الفخذ في جرذان إناث معالجة لمدة > أسابيع مع ‎*HuMabJC18‏ ‏المجموعة الوسط ‎١.9 Jalal‏ مجم ‎١‏ مجم ‎٠‏ مجم ‎٠‏ مجم ‎pvp‏ #لاح حل ‎XY VY‏ الام ‎YEE VET‏ عرب 14 * تتمثل البيانات كمتوسط حسابي + ‎SE‏ ‏“: ع <0.,. مقابل وسط حامل؛ ‎.,١1< pt‏ مقابل وسط حامل. تعالج جرذان إناث مع 12014801018 عند جرعات مختلفة أسبوعيا لمدة 6 أسابيع بالحقن في الوريد. تقاس ‎BMD‏ عند نهاية الدراسة. محاكاة ‎PK/PD‏ آدمية يستخدم نموذج ‎PK/PD‏ المعتمد على الآلية (شكل 0( لمحاكاة ‎PR/PD‏ للجسم المضاد 58 في الآدميين وللتتبؤ بالجرعحة الفعالة لمعالجة هشاشة العظام؛ من بين اضطرابات أخرى. تجمع القيم المسجلة في المؤلف لمعايير ‎PK‏ جسم مضاد 1802 (عن غير طريق هدف) مع معلومات حركيات هدف ‎Dkk-1‏ وحركيات مركب ‎HuMabJC18-Dkk-1‏ ‏الناتجة من ‎giles‏ 216/010 القردٍ والجرذ (جدول ‎Sled (VE‏ عن محاكاة ‎PR/PD‏ الآدمية.
جدول 4 ‎:٠‏ مقادير المعيار المستخدمة في محاكاة ‎PK/PD‏ آدمية المعيار القيمة المرجع/ المصدر توافر حيوي ‎(Tang et al., 2004) vo ( ) mAb SC‏ ثابت معدل امتصاص ‎(Tang et al., 2004; "8 mAb‏ ‎Agoram etal., 2007) )١٠-موي( SC‏ حجم توزيع ‎mAb‏ (ملليلتر/ ‎(Tang et al., 2004; or‏ كجم) )2007 ‎Agoram etal.,‏ تقدير نطاق قياسي ‎Clie‏ من جرذ وقرد معدل ثابت إزالة ‎mAb‏ (غير ‎(Tang etal., 2004; eV‏ خاص) (يوم-٠)‏ )2007 ‎Hayashi etal.,‏ تقدير نطاق قياسي متباين من جرذ وقرد مستويات 1106-1 في مرضى ‎٠1‏ + قرا هشاشة عظام (نانوجرام/ ملليلتر) نصف عمر ‎Dkk-1‏ )4583( £9 تقدير نطاق قياسي متباين من جرذ وقرد معدل تلازم ‎mAb-Dkk-1‏ 1 بيانات ‎BlAcore‏ = ‎hon)‏ نانوجزيئي جرامي-١‏ ‎(me‏ ‏معدل تفكك ‎mAb-Dkk-1‏ ااخلت بيانات ‎BlAcore‏ آدمي ‎kor)‏ يوم ‎)١٠-‏ ‏معدل ثابت إزالة اذ تقدير نطاق قياسي متباين من ‎mAb-Dkk-1‏ (يوم-١)‏ قرد تشير تجارب سابقة في نموذج مرض فأر ‎OVX‏ أن هناك تقليل ‎75٠‏ في 1106-1 مطلوب للزيادة الهامة إحصائيا في ‎BMD‏ (البيانات غير مبينة). إن الجرعة الفعالة المتوقعة من
Vio
‎HuMabJC18‏ لتقليل ‎Dkk-1‏ بمقدار ‎٠>‏ 75 عبر فترة التجريع هي ‎Y,0V‏ مجم/ كجم معطاة مرة واحدة شهريا. إن الجرعة الظاهرة غير مصاحبة لها بالضرورةٍ نظرا لعدم التأكد من حركيات 2106-1 داخلي والحساسية الكبيرة لإخماد 2106-1 (وبالتالي الجرعة) لهذا المعيار. إن الجرعة الظاهرة لإعطاء تأثير حيوي أدنى متوقع ‎(MABEL)‏ هي ‎١07‏ مجم/ كجم. من المتوقع لهذه الجرعة أن تقلل مؤقتا مستويات ‎Dkk-1‏ بمقدار >+ 77 متبوعة بالعودة إلى خط القاعدة. إن جرعة 0.007 مجم/ كجم ‎٠١/١(‏ من ‎(MABEL‏ من المتوقع أن يكون لها تأثير. إن هذه المحاكيات الآدمية لتركيز 2106-1 مبينة في شكل ‎١١‏ ولابد أن تكون لها فائدة عالية في ضبط الجرعة في الممارسة الإكلينيكية.
‏إن ‎PKs‏ غير الخطية من أجل ‎HuMabJC18‏ متوقعة عبر نطاق الجرعة المشتمل ‎[ane 0 7( MABEL‏ كجم) والجرعة الفعالة المتوقعة ‎¥,0V)‏ مجم/ كجم). إن هذا بسبب ‎TMDD‏ وذلك مبين في شكل ‎AY‏ ‏إدراك الهدف
‏تدل البيانات في ‎cy‏ على أن ‎DKk-1‏ منظم رئيسي لإعادة تشكيل العظم ‎(Diarra et al.‏ ‎Nat Med 13:156-163)‏ )2007( وأن مستويات خط القاعدة من ‎Dkk-1‏ أعلى © مرات في حالة المرض (استئصال المبايض» ‎(OVX‏ في الفئران مقارنة مع ‎oy‏ سليمة (بيانات داخلية). اتضح أيضا أن مستويات 0106-1 ترتفع في بلازما نخاع عظمي ودم طرف في مرضى ورم نخاعي متعدد مع إصابات عظمية )2003 ‎(Tian et al.,‏ يظهر تحليل حساسية أن جرعة آدمية متوقعة لجسم مضاد أحادي النسخ مضاد ‎(HuMabJC18) Dkk-1‏ حساسة للغاية لمستويات خط قاعدة من 06-1ا0. كلما كانت مستويات 2103-1 خط القاعدة أعلى؛ كلما زاد تركيز الجسم المضاد المطلوب لتقليل 106-1. إن مستويات خط القاعدة للهدف معروفة غالبا من قياسات إكلينيكية سابقة؛ وعلى أية حال فإن نقص هذه المعلومات من أجل 1106-1 يفرض ترسيخ نطاقات مرجعية لمستويات 01021 الآدمي في كل من الأصحاء والمرضى (مرضى نقص النسيج العظمي وهشاشة العظام) يمكن استخدامها من أجل توقعات أكثر إعلاما بالجرعة عند مراحل مختلفة من التطوير الإكلينيكي. يبين التحليل أن مستويات 1106-1 أعلى في السيدات مع نقص نسيج عظمي وهشاشة عظام (درجة-1 > ‎(Y=‏ مقارنة مع السيدات الصحيحات الجسم.
إن معدل استهلاك المركبات الترابطية للهدف يمكن أن يختلف من دقائق إلى أيام وذلك يمكن أن يكون له تأثير ملحوظ على الجرعة الفعالة وأيضا إمكانية أن يسبب الهدف اضطراب للفائدة الإكلينيكية. هناك بعض المركبات الترابطية لها حركيات متشابهة عبر الأنواع؛ لكن بالنسبة لأخرى لا يمكن التنبؤ بمعدل الاستهلاك مسبقا. يبين: ‎(Meno-Tetang and Lowe (2005) Basic Clin Pharmacol Toxicol 96:182-192)‏ أن معدلات استهلاك 1815 تتراوح من ©-/ ساعات في الفأر إلى ‎YY‏ أيام في الإنسان وذلك يؤثر بدرجة كبيرة على التنبؤات بالتأثير الآدمي للجسم المضاد المضاد ‎IgE‏ بالنسبة للهدف 0166-1 يؤكد تحليل حساسية أن الجرعة المتوقعة من الجسم المضاد أحادي النسخ مضاد ‎(HuMabJC18) Dkk-1‏ حساسة من أجل عمر نصف ل-1106 مع زيادة مولارية ‎ST‏ من الجسم المضاد مطلوبة عند معدلات استهلاك أعلى للهدف. لا تتوافر معلومات عن معدلات استهلاك ‎Dkk-1‏ من المؤلف ولذلك تمر أكمال التجارب بخصوص ذلك باستخدام ‎Dkk-1‏ ‏آدمي وجرذ ‎Gale‏ به ‎V5-His‏ معطى في الوريد لجرذ. تدل هذه التجارب على أن 0106-1 له معدل استهلاك كبير (عمر- النصف 77,9 دقيقة من أجل ‎h-Dkk-1‏ و4 ؟ دقيقة من أجل ‎r-‏ ‎(DKk-1‏ وأن الأشكال الآدمية والجرذ من 2106-1 لها معدلات استهلاك متشابهة في الجرذ. إن معدل الاستهلاك السريع من أجل 0106-1 تم تأكيده لاحقا باستخدام نماذج 21/0 لتقدير عمر نصف 0106-1 في الجرذان والقردة المجرعة مع ‎.HuMabJC18‏ ‏إدراك ‎PK/PD‏ للجسم المضاد 11014801018 في جرذ وقرد في دراسات الجرذ والقرد؛ يظهر ‎HuMabJC18‏ حركيات دواثية غير خطية مع معدلات أعلى للإزالة من الجسم وقيم نصف عمر إزالة أقصر عند جرعات أقل. يدل هذا على ‎TMDD‏ ‏حيث يؤثر تفاعل الجسم المضاد مع هدفه الفارماكولوجي على التخلص من العقار عند جرعات أقل: ‎(Tabrizi et al. (2006) Drug Discov Today 11:81-88.; Wang et al. (2008) Clin‏ ‎Pharmacol Ther 84:548-558).‏ يتشبع هذا المسار عند جرعات أعلى بسبب الإظهار المحدود للهدف. عند تشبع المسار الذي يتوسطه الهدف؛ تسود آليات الإزالة من الجسم الهدمية من أجل ‎(IgG FeRn‏ وذلك يعطي نصف العمر الطويل المميز للجسم المضاد. إن ‎TMDD‏ شائع أكثر للأجسام المضادة أحادية النسخ الموجهة ضد ‎proteins‏ ظاهرة على أغشية خلية حيث تؤدي البلعمة الداخلية بسبب yy ‏مع أهداف قابلة‎ TMDD ‏مستقبل إلى إزالة العقار. على أية حال؛ يمكن أيضا ملاحظة‎ ‏ومنشط‎ IgE) ‏أجسام مضادة للأهداف القابلة للذوبان‎ denosumab ‏و‎ omalizumab ‏للذوبان: إن‎ ‏على الترتيب) تظهر حركيات إزالة غير خطية:‎ (NFKB ‏مستقبل من أجل‎ (Hayashi et al., 2007; Marathe et al., 2008). ‏لوصف التركيزات العمومية‎ PK ‏التجريبية التي تتكون من نموذج‎ PK/PD ‏إن نماذج‎
TMDD ‏غالبا ما تكون غير ملاثمة لتمييز‎ PD ‏للعقارء والذي يستخدم كوظيفة دافعة لوصف‎ ‏يقترح:‎ PD PK ‏لأنها لا تمثل الاعتماد المتبادل بين‎
Mager at al (Mager and Jusko (2001) J Pharmacokinet Pharmacodyn 28:507-532) ‏عقار؛ ديناميكيات هدف وتفاعلهما. يمثل هذا النموذج التوزيع الخاص‎ PK ‏نموذج واحد يصف‎ ‏وغير الخاص والإزالة لجزيء العقار بالإضافة إلى توفير مرونة لتمثيل ديناميكيات هدف. في‎ ‏ثم استخدام هذا النموذج لتوفير ارتباط‎ PD 5 PK ‏حالات أخرى يتم فيها بصورة متزامنة تحليل‎ ‏مباشر بين الجرعة؛ التعرض للعقار والاستجابة:‎ (Meno-Tetang and Lowe (2005) Basic Clin Pharmacol Toxicol 96:182-192); Ng et al. (2006) Pharm Res 23:95-103.; Wu et al. (2006) J Pharm Sci 95:1258-1268). <HuMabJC18 ‏لمطابقة متزامنة لتركيزات جسم مضاد‎ TMDD ‏في هذه الحالة يستخدم نموذج‎ ‏عند مستويات‎ HuMabJC18 ‏في الجرذ والقرد عقب إعطاء في الوريد من‎ «Dkk-1 ‏والهدف»؛‎ ‏بسبب غير هدف من أجل 11014801018 متطابق‎ PKs ‏جرعة عديدة. يعطى النموذج تقدير‎ ‏نموذجية في كل نوع:‎ 1502 PKs ‏تماما مع‎ (Peppard and Orlans (1980) Immunology 40:683-686; 5 Hinton et al. (2004) J Biol
Chem 279:6213-6216). ‏لذلك؛ يكون عمر- نصف الإزالة يومين ونصف في الجرذان و6,١ يوم في القرد. إن حجم‎ ‏من حجم البلازماء‎ Jef ‏التوزيع مساوي تقريبا لحجم البلازما في القرد )007 ,+ لتر/ كجم) لكنه‎ ‏كجم).‎ ERE ‏في الجرذ‎ ‏دقيقة في القرد‎ YT ‏دقيقة في الجرذان‎ ١١ ‏إن عمر نصف إزالة 2106-1 الهدف مقدر بأنه‎
V5-His ‏الملحق به‎ h-Dkk-1 ‏نصف إزالة‎ joo Jie ‏إن هذا بنفس المقدار‎ PK/PD ‏من نماذج‎
HuMabJC18- ‏دقيقة). إن عمر النصف لمركب‎ YO = ‏النصف‎ jee) ‏المقاس في الجرذان‎ ‏والذي‎ Dkk-1 ‏مقدر بأنه في الوسط بين عمر- نصف 11011801018 وعمر نصف‎ Dkk-1
ف ربما يعكس آلية الإزالة من الجسم عن طريق الهدف. على أية حال؛ يمكن أن يعوق ارتباط الهدف مع جسم مضاد ارتباط جسم مضاد مع ‎FeRn‏ وهناك دراسات يتم إكمالها بهذا الصدد لاختبار هذه الفرضية. في الجرذان؛ تلاحظ زيادة في الدلالات الحيوية لتكوين العظم ‎calcin)‏ عظمي ‎(BMD‏ ‏بالإضافة إلى تقص في الدلالة الحيوية للهدف» 6-1ل010. تعطي هذه البيانات دعما إضافيا لاستخدام ‎HuMabJC18‏ لمعالجة اضطرابات هيكيلية ‎Jie‏ هشاشة العظام. التتبؤ بالجرعة الفعالة للآدميين وحساب ‎MABEL‏ ‏بالنسبة إلى أجسام مضادة أحادية النسخ؛ فمن المدرك الآن بدرجة كبيرة أن الانتقاء المنطقي لجرعات آمنة أولا في آدمي؛ على أساس نماذج 016/00 أمر ضروري؛ انظر؛ مثلا: ‎(the UK government website on Publications policy and guidance : Department of‏ ‎Health - Publications).‏ يشمل معيار جديد وهو مستوى التأثير الحيوي الأدنى المتوقع ‎(MABEL)‏ استقراء بيانات ‎PR/PD‏ الإكلينيكية الأولية الملحوظة من أجل التوقع الإكلينيكي على أساس طريقة تكوين نموذج 010/00. إن ‎MABEL‏ مقترح بأهميته بالإضافة إلى مستوى التأثير غير الضار ‎(NOAEL)‏ في تحديد مستويات جرعة أولا في آدمي للعلاجات عالية الخطورة في: ‎recent European regulatory guidance (EMEA (2007) Guideline on strategies to‏ ‎identify and mitigate risks for first-in-human clinical trials with investigational‏ ‎medicinal products., in (EMEAed), London).‏ للتنبؤؤ بالجرعة الفعالة من ‎(HuMabJC18‏ يتم تعديل نموذج ‎TMDD‏ الحركي المستخدم لمطابقة البيانات الإكلينيكية الأولية في الجرذان والقرد من أجل محاكاة ‎PR/PD‏ آدمية. إن قيم المؤلف المقررة لمعايير جسم مضاد حركية 1802 (عن طريق غير- هدف) تتحد مع معلومات حركيات الهدف ‎Dkk-1‏ وحركيات مركب ‎HuMabJC18-Dkk-1‏ الناتجة من نماذج ‎PK/PD‏ ‏جرذ وقرد. تستخدم قيم 318008 المعملية من أجل 0106-1 آدمي لتحديد معدلات التلازم والتفكك للمركب ‎(Kors Kon)‏ في النموذج. يجرى تحليل حساسية على ‎kon‏ وجا وعلى معدلات التلازم السريعة ومعدلات التفكك البطيئة المتوقع لهذا جسم مضاد في الآدميين؛ إن إخماد 1106-1 وبالتالي الجرعة غير حساس لتغيرات الكبيرة في ‎Ky‏ في الواقع عند قيم ‎٠١< Ky‏ بيكوجزيئي
جرامي؛ لا يحدث تغير في الجرعة المتوقعة. إن هذا بسبب أن معدل استهلاك مركب ‎HuMabJC18-Dkk-1‏ أسرع من معدل التفكك من المستقبل. في تلك ‎celal)‏ يمكن تلافي خطوات اكتمال الانجذاب في انتقاء مرشح.
يستخدم متوسط تركيزات خط قاعدة 0106-1 المقاسة في العينات من مرضى هشاشة عظام (انظر ‎ya‏ النتائج) في المحاكاة. يفترض أن 1106-1 له معدل استهلاك ‎Uf‏ في الآدميين مقارنة بالقرد أو الجرذ. ‎lA‏ يحسب عمر نصف 2106-1 آدمي باستخدام نطاق درجي متباين القياس لقيم عمر النصف للقردٍ والجرذ. يعطي هذا تقدير لعمر نصف ‎DKK-1‏ في الآدميين مقداره £9 دقيقة. لابد من ملاحظة أنه بسبب أن 1106-1 يتحول بسرعة إلى ‎alge‏ مضاد؛ فإن الإخماد الكلي من ‎0106-١‏ وبالتالي الجرعة؛ حساس للغاية لقيمة ‎jae‏ نصف ‎Dkk-1‏ ‏المستخدمة في المحاكاة.
إن عمر النصف لمركب ‎HuMabJC18-Dkk-1‏ في الآدميين متوقع أن يكون 7,7 يوم ‎١,7 = kel)‏ يوم-١)‏ بالتقدير الدرجي متباين القياس لعمر نصف المركب المقدر بواسطة نموذج ‎PK/PD‏ للقرد. يمكن توقع عمر نصف مركب أقصر في الآدميين بواسطة التقدير الدرجي متباين القياس لعمر نصف المركب المقدر بواسطة نموذج 216/00 لجرذ. على ‎i‏ ‎ela‏ أجرى تحليل حساسية وكان إخماد 2106-1 (وبالتالي الجرعة) غير حساس للتغير في عمر نصف المركب المتوقع من الجرذ مقابل القرد.
‎Ju‏ تجارب سابقة في فثران ‎OVX‏ وهو نموذج فقد عظمي بعد سن انقطاع الطمث؛ على أنه يحدث تقليل ‎٠‏ 75 تقريبا في مستويات ‎Dkk-1‏ مصاحب لزيادة هامة إحصائيا في ‎BMD‏ ‏(البيانات غير مبينة). لذلك؛ تجرى توقعات جرعة ‎HuMabJC18‏ على أساس أن مستويات ‎Dik-1‏ بحاجة لإخمادها بمقدار > 705 من خط القاعدة عبر فترة التجريع (شهر واحد). بموجب هذا الاقتراح ومع الافتراضات المذكورة أعلاه فإن الجرعة الفعالة المتوقعة من ‎HuMabJC18‏ هي ‎7,0١7‏ مجم/ كجم تعطى تحت الجلد مرةٍ في الشهر. بالمحاكاة؛ فإن الجرعة المتوقعة لإعطاء تأثير أدنى ‎(MABEL)‏ في الآدميين (تقليل ‎ZY ١<‏ في ‎(Dkk-1‏ هي ‎٠,١7‏ ‏مجم/ كجم. إن ‎PKs‏ غير الخطية متوقعة في الاستخدام الإكلينيكي (شكل ‎(VY‏ حيث يظهر ‎HuMabJC18‏ إزالة أكبر من الجسم وعمر نصف أقصر عند جرعات ‎Jif‏ بسبب 13000.
‏إن طريقة بديلة للتنبوؤ بالفارماكولوجيا في الآدميين هي توقع الانشغال الأقصى للمستقبل ‎(RO)‏ باستخدام صيغة تعتمد على نظرية تفاعل عقار- ائزان:
٠
RO) ‏_أففتل‎ 100
K, + [mab] (Figure 14, (Duff (2006) Expert Scientific Group on Phase One Clinical Trials:
Final Report, in, Department of Health, UK, London)). ‏وحدها ولا يهتم بحركيات الهدف أو مركب‎ Kd ‏باستخدام هذه الطريقة يرتكز على‎ RO ‏إن تقدير‎ ‏هدف-طه. أظهر 0710-1 بأن له معدل استهلاك أكبر و» إن ارتباط 0106-1 بواسطة‎ ‏بقيمة‎ ul) ‏تحت هذه الشروط؛ لا يمكن دائما‎ (TMDD) ‏يغير حركيات الهدف‎ HuMabJCl18 ‏بسيطة توقعا فائقا‎ Kd ‏تعتمد على‎ RO ‏بطرق الاتزان الفارماكولوجي وتظهر حسابات‎ RO ‏عند جرعة خاصة:‎ RO ‏جوهريا بقيمة‎ (Agoram (2009) Br J Clin Pharmacol 67:153-160). ٠٠0٠٠0٠ ‏بمقدار‎ EDsp ‏المحسوبة باستخدام صيغة الاتزان تقدر‎ RO ‏فإن‎ Dkk-1 ‏من أجل‎ ‏إن‎ (VE ‏مجم/ كجم (شكل‎ ١00 EDso ‏مجم/ كجم؛ بينما يقدر نموذج 216/01 الحركي قيمة‎ ‏استخدام حساب الاتزان يمكن أن يؤدي إلى انتقاء جرعات قليلة جدا في الحالات الأكلينيكية‎ ‏الملحوظ في الجرذان‎ NOAEL ‏أخرى» فإن‎ dea ‏تطور الدراسة أولا- في- آدمي. من‎ ja, ‏للهدف مع الجسم المضاد‎ 7٠٠١ ‏مجم/ كجم) يزيد عن ذلك المطلوب لارتباط‎ ٠٠١( ‏والقردة‎ ‏وقد لا يمكن التوصية به لتوفير تقديرات جرعة بادئة أكلينيكية. إن طريقة تعتمد على نموذج‎ ‏يعتقد أنها أكثر احتمالا للتنبؤ بالنسبة للهدف 0106-1 وتؤكد‎ MABEL ‏لحسايات جرعة‎ PK/PD ‏أمان وكفاية الدراسات الإكلينيكية.‎
Dkk- ‏للهدف‎ 7٠٠ ‏مجم/ كجم) يزيد عن المطلوب لارتباط‎ ٠٠١( ‏الملحوظ‎ NOAEL ‏إن‎ ‏يمثل‎ Lay) Duff ‏المحسوب طبقا لمعادلة‎ MABEL ‏مع الجسم المضاد. من جهة أخرى؛ فإن‎ 1 ‏حسب ذلك؛ فإن هذه‎ Dkk-1 ‏تقدير دوني شديد بسبب افتقاد أهمية التحول السريع للهدف‎ (anil) ‏الطرق لا تمثل أساليب مقبولة لضبط الجرعة الإكلينيكية البادئة في هذه الحالة. على‎ ‏يوفر تمييز ممتاز للبيانات الإكلينيكية التمهيدية التي تشير إلى دور تحول‎ TMDD ‏فإن نموذج‎ ‏المشتق من نموذج‎ MABEL ‏لذلك؛ فإن تقدير‎ .Dkk-1 ‏الهدف في تحديد الارتباط 7 من أجل‎ .1111 ‏مجم/ كجم) سوف يؤكد كلا من الأمان والكفاية لدراسات‎ ١.07( TMDD
Dkk-1 ‏ختاماء فإن 11014801018 هو جسم مضاد مكتسب السمة الآدمية نوع أولي مضاد‎ ‏حركي لتمييز‎ TMDD ‏لمعالجة هشاشة العظام» من بين اضطرابات أخرى. يستخدم نموذج‎
١7١ ‏في جرذ وقرد. يترجم هذا النموذج إلى‎ Dkk-1 ‏مقابل‎ HuMabJC18 ‏علاقة الاستجابة لتركيز‎ ‏بدمج معلومات عن إظهار الهدف ومعدلات‎ MABEL 5 ‏آدمي للتنبؤ بالجرعة الفعالة‎ ‏الاستهلاك. اتضح أن هذه المعايير لها تأثير أكثر على علاقة الاستجابة للجرعة من الانجذاب‎ ‏لهذه الآلية.‎ ‏معلومات الإيداع‎ ‏أودع المقدمون للطلب مناطق متغيرة سلسلة ثقيلة وخفيفة للجسم المضاد المشار إليه‎ ‏هنا مع:‎ HuMabJC18
American Type Culture Collection (ATCC) Manassas, VA 20110-2209 U.S.A.
Yo rd ‏مارس‎ ١1 ‏في‎ HuMabJC18 HC ‏كما هو مذكور فيما سبق تم إيداع منطقة متغيرة‎ ١٠1 ‏في‎ HuMabJC18 LC ‏وكان لها رقم إيداع ©7©6م: 74-9835©,؛ وتم إيداع منطقة متغيرة‎ ‏تمت هذه الإيداعات تحت شروط:‎ .018-9836 (ATCC gla ‏مارس 7009 وكان لها رقم‎
Budapest Treaty on the International Recognition of the Deposit of Microorganisms for the Purpose of Patent Procedure and the Regulations thereunder (Budapest
Treaty). © ‏لمدة 0 عام؛ أو‎ ATCC ‏إن هذه الإيداعات سيتم استبقائها بدون 3538 في المودع لديها‎ ‏أعوام بعد الطلب الأكثر حداثة؛ أو طوال العمر المؤثر لبراءة الاختراع؛ أيهما أطول؛ وسيتم‎ ‏استبدالها إذا أصبحت الإيداعات غير صالحة أثناء هذه الفترة. إن توافر المواد المودعة لا‎ ‏يجب اعتباره تصريحا بممارسة أي جوانب من الاختراع الحالي في تناقص مع الحقوق المكفولة‎ ‏تحت سلطة أي حكومة طبقا لقوانين براءة الاختراع بها. تعتبر المواصفة المكتوبة السابقة كافية‎ ‏لتمكين الماهر في الفن من ممارسة كل جوانب الكشف الحالي. إن الكشف الحالي لا يجب‎ ‏تقيده في نطاقه بالمواد المودعة لأن التجسيد المودع يقصد به توضيح فقط لجوانب خاصة من‎ ‏الكشف وأي بنيات مكافئة وظيفيا واقعة في نطاق هذا الكشف. إن إيداع المادة هنا لا يشكل‎ ‏تسليما بأن الوصف المكتوب هنا غير كاف للتمكين من ممارسة أي جانب من الكشف؛‎ ‏ولا يجب اعتباره مقيدا لنطاق عناصر الحماية بالتوضيحات الخاصة‎ al ‏متضمنا أفضل طريقة‎ ‏التي تمثلها. في الواقع؛ هناك تعديلات عديدة للكشف بالإضافة إلى تلك المبينة والموصوفة هنا‎ ‏سوف تتضح للمهرة في الفن من الوصف السابق وهي في نطاق عناصر الحماية المكملة‎ ‏للموضوع.‎
إن عناوين الجزء المستخدمة هنا هي لأغراض التنسيق فقط ولا يجب اعتبارها مقيدة لمادة الموضوع الموصوف بأية طريقة. لابد من إدراك وجود "حوالي" واجبة قبل درجات الحرارة؛ التركيزات؛ الأزمنة؛ ‎cad]‏ المشروحة في التعاليم ‎Alla‏ بحيث تكون الحيودات البسيطة وغير الجوهرية في نطاق التعاليم الحالية هنا. في هذا الطلب؛ يتضمن استخدام المفرد معنى الجمع إذا لم يذكر خلاف ذلك بصفة خاصة. أيضاء فإن استخدام 'يشملون”؛ 'يشمل"؛ "مشتمل"؛ 'يحتوون"؛ 'يحتوي"؛ 'محتويا"؛ ‎Costes‏ 'يتضمن"؛ و"متضمنا" لا يقصد به التحديد. لابد من إدراك أن كلا من الوصف العام السابق والوصف التفصيلي التالي تمثيلي وتوضيحي فقط وغير مقيد للاختراع.
إن كل المراجع المذكورة هناء متضمنة براءات الاختراع؛ طلبات براءة الاختراع؛ الأبحاث؛ المراجع؛ ‎oid)‏ والإشارات المدونة فيهاء في المواضع غير المندمجة هنا بالفعل كمرجع. في حال اختلاف أو تعارض واحدة أو أكثر من مواد المؤلف الداخلة ومواد مشابهة لها عن أو مع هذا الطلب» متضمنة بدون تحديد المصطلحات المعرفة؛ استخدام المصطلح. التقنيات الموصوفة؛ إلخ؛ فإن السيطرة تؤول لهذا الطلب.
قائمة الترتيب
‎>٠٠١<‏ رينات نيوروساينس كوربوريشن ‎>١١<‏ أجسام مضادة تخص ‎DKK-1‏ واستخداماتها ‎PC33877A <\Y.>‏
US 61/177,650 >١٠١<
Yerd—-0—-3YY >١١ ‏<اه‎ ‎US 61/244,638 <\o.>
Yee4-9-YY >١ها<‎ o Y <YH.«>
Patentln version 3.5 <\V.> ١ > ٠١<
YVE ‏؟>‎ ١ا<‎
PRT <Y\Y> ‏الجنس البشري‎ >7١< . ١ <¢ee>
Met Ala Leu Gly Ala Ala Gly Ala Thr Arg Val Phe Val Ala Met Val ١ ° Ye Yo
Ala Ala Ala Leu Gly Gly His Pro Leu Leu Gly Val Ser Ala Thr Leu
Y ٠ Y o Y ٠
Asn Ser Val Leu Asn Ser Asn Ala Ile Lys Asn Leu Pro Pro Pro Leu ‏ل‎ o $a $ Oo
Gly Gly Ala Ala Gly His Pro Gly Ser Ala Val Ser Ala Ala Pro Gly
Oe 00 Te
Ile Leu Tyr Pro Gly Gly Asn Lys Tyr Gln Thr Ile Asp Asn Tyr ‏ماه‎ ‎“0 ‏ولا‎ Yo Aa
Pro Tyr Pro Cys Ala Glu Asp Glu Glu Cys Gly Thr Asp Glu Tyr Cys
ّ Ao 9. 30
Ala Ser Pro Thr Arg Gly Gly Asp Ala Gly Val Gln Ile Cys Leu Ala ١ ١٠١. ٠
Cys Arg Lys Arg Arg Lys Arg Cys Met Arg His Ala Met Cys Cys Pro ١١ ١٠١٠١ Ye
Gly Asn Tyr Cys Lys Asn Gly Ile Cys Val Ser Ser Asp Gln Asn His ١١٠ ٠ ٠68
Phe Arg Gly Glu Ile Glu Glu Thr Ile Thr Glu Ser Phe Gly Asn Asp
Yéo You Yoo ٠
His Ser Thr Leu Asp Gly Tyr Ser Arg Arg Thr Thr Leu Ser Ser Lys
Vio Ve ‏دل‎ ‎Met Tyr His Thr Lys Gly Gln Glu Gly Ser Val Cys Leu Arg Ser Ser
YA YAo Yq.
Asp Cys Ala Ser Gly Leu Cys Cys Ala Arg His Phe Trp Ser Lys Ile ‘do Yoo ١
Cys Lys Pro Val Leu Lys Glu Gly ‏ماه‎ Val Cys Thr Lys His Arg Arg
YY. Yio YY.
Lys Gly Ser His Gly Leu Glu Ile Phe Gln Arg Cys Tyr Cys Gly Glu
YYo YY. YYo ٠
Gly Leu Ser Cys Arg Ile Gln Lys Asp His His Gin Ala Ser Asn Ser
Y¢o Yo. Yoo
Ser Arg Leu His Thr Cys Gin Arg His His His His His His His His
Yi. Yo YY.
His His
Y <YV.>
AYY > ١١<
DNA <Y\Y> ye ‏الجنس البشري‎ >١7١١<
Y <¢4a> atggetetgg gegeageggg agetacecgg gtetttgteg cgatggtage ggeggctete “6 ggeggecace ctetgetggg 2518228068666 accttgaact cggttctcaa ttccaacgcet 1Y. atcaagaacc tgcccccace getgggegge getgegggge acccaggete tgeagtcage YA geegegeegg gaatectgta ccegggeggg aataagtace agaccattga caactaccag 7 ccgtacccgt gegeagagga cgaggagtge ggeactgatg agtactgege ‏مممعممعا22‎ Yuu cgeggagggg acgeaggegt geaaatctgt ctcgectgea ggaagegeeg aaaacgcetge 1. atgegtcacg ctatgtgetg ccccgggaat tactgcaaaa atggaatatg tgtgtcttet $Y. gatcaaaatc atttccgagg agaaattgag gaaaccatca ctgaaagctt tggtaatgat $A catagcacct tggatgggta ttccagaaga accaccttgt cttcaaaaat gtatcacacc ‏ىم‎ 2 aaaggacaag aaggttctgt ttgtctccgg tcatcagact gtgectcagg ‏ع‎ Tas getagacact tctggtccaa gatctgtaaa cctgtcctga aagaaggtca agtgtgtace 1. aagcatagga gaaaaggctc tcatggacta gaaatattcc agcegttgtta ctgtggagaa VY. ggtetgtctt gecggataca gaaagatcac catcaageca gtaattcttc taggcettcac VA acttgtcaga gacaccacca tcaccaccat caccatcatc ac AY Y ١ <YY.> 777 >؟"١ا١ا<‎
DNA <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus <YV\Y> 7 <¢vu> gacattgtgt tgacccaatc tccagettct ttggetgtgt ctctagggea gagggecace 1.
atctcctgca gagecagega aagtgttgat gactttgget tagttttatg aactggttcee VY. aacagaaacc aggacagcca cccaaactcc tcatctatge tgcatccaag cagggatceg YA gggtccetge caggtitagg ggcagtgggt ctgggtcaga cttcagectc accatccate 7 ctgtggagga ggatgatact gcaatgtatt tctgtcagca aagtaaggag 001608 Yeo cgttcggagg ggggaccaag ctggaaataa aa wry ¢ <Y).> ١1١١ >١١<
PRT >< ‏عضلة‎ Mus > ١< ‏ل‎ ‎Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly \ ‏هت‎ ١ ٠ ١ 0 ‏ماه‎ Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe
XY. Yo Ye
Gly Ile Ser Phe Met Asn Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gin Pro Pro
Yo 4 ¢o
Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Lys Gln Gly Ser Gly Val Pro Ala 84 oo Te
Arg Phe Arg Gly Ser Gly Ser Gly Ser Asp Phe Ser Leu Thr Ile His
Ye Yo Ae
Pro Val Glu Glu Asp Asp Thr Ala Met Tyr Phe Cys Gin Gln Ser Lys
Ac 9. q0
Glu Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Glu \ “a 3 «0 ١ ١ ٠
للا © <Y\V\.> ¢o <YVY>
DNA <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus >7 ١7< ‏دا ا‎ a> agagccagcg 322388150158 tgactttgge attagtttta tgaac $0 ‏أ‎ > ٠١<
Yo ><
PRT <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus <YVY> ‏أ‎ >...
Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe Gly Ile Ser Phe Met Asn Arg ١ o Yo Vo ‎١٠١.<‏ 77> لا ‎YY ><‏ ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‎iliac Mus >7١١<‏ ‎<¢ea>‏ لا
YYA getgeatcca agcagggate C 71١ ‏7ك م‎ ٠١< ‏؟> لا‎ ١١<
PRT <Y\Y> iliac Mus <YVY>
A <¢ yh >
Ala Ala Ser Lys Gln Gly Ser ١ ° 4 <Y)Y.>
YV > ١ا<‎
DNA <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus <YVY> 4 <¢ea> cagcaaagta aggaggticc tcccacg yy ٠١ > ٠١< 4 >ا١١<‎
PRT <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus >7 ١< ١ ٠ <$ rd
Gln Gln Ser Lys Glu Val Pro Pro Thr ١ 0
YY >< ٠١١ ><
DNA <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus > ١١<
YY ‏<ء..>‎ ‎gaagtgaaac tggtggagtc tgggggaggc ttagtgaage ctggagggtc 01288801 1 fcctgtgecag cetetggatt cactttcagt aattatgeca tgtcttgggt tcgecagact 1Y ccagagaaga ggctggagtg ggtegeatce attagtggtg gtggtgacac ctactatcca YA gacagtgtga agggccgatt caccatctcc agagataatg tcaggaacat cctctacctg 76 caaatgagca gtctgaggtc tgaggacacg gecatgtatt actgtgcaac atcccttgag Yao aactatgcta tggactactg gggtcaagga acctcaatca ccgtetecte 2 yo)
YY <YY.> ١١١7 ><
PRT > ١< ‏عضلة‎ Mus >7 ١١< ١١ >6١ >
Glu Val Lys Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly ١ o ١ ٠ ١ Oo
م ‎Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr‏ ‎Y ٠ Y o Y ٠‏ ‎Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val‏ ‎Yo $e ¢o‏ ‎Ala Ser Tle Ser Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys‏ ‎Ou 00 Te‏ ‎Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Val Arg Asn Ile Leu Tyr Leu‏ ‎Vo Yo A‏ 0“ ‎Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala‏ ‎Ao 9٠ q0‏ ‎Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser‏ ‎Yao YO ١ ١ ٠‏ ‎Ile Thr Val Ser Ser‏ ‎١٠٠‏ ‎٠١ >7١٠١<‏ ‎Yo > ١١<‏ ‎DNA <Y\Y>‏ ‎Mus <YVY>‏ عضلة ‎VY >64.‏ ‎aattatgcca tgtct yo‏ ‎٠١ <YY.>‏ <١١؟>ه‏ ‎PRT <Y\Y>‏
YAY
‏عضلة‎ Mus >7١ ١<
VE >.
Asn Tyr Ala Met Ser ١ ‏5ت‎ ‎Yo > ٠١<
EA <YYVY>
DNA <Y\)Y> ‏عضلة‎ Mus >7١ ١<
YO <§ a> tccattagtg gtggtggtega cacctactat ccagacagtg tgaagggce $A ٠١ <YY.> ٠١ >؟١<‎
PRT <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus <YVY> ٠١ <g>
Ser Ile Ser Gly Gly Gly Asp Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys Gly ١ ‏م‎ ١ ٠ ١ o
YY <YY.>
YAY
YV ‏7؟>‎ ١١<
DNA > ١< ‏عضلة‎ Mus >١7 ١<
VV ‏<برع>‎ ‎10018888 20121201 ggactac ‏إل‎ ‎YA >77 ٠١< 1 <YVY>
PRT <Y\Y> ‏عضلة‎ Mus >١7 ١١< ‏حير > ريد‎
Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Met Asp Tyr ١ ‏هه‎ ‎٠١ <YY.> 7777 >" ١<
DNA <Y\Y> ‏ترتيب صناعي‎ >7١< <YY.> ‏مكتسب السمة الآدمية‎ Qin <YYY> ٠١ ‏<ي.؛>‎
YAY gagatcgtge tgacccagag ccccgecace ctgagectga geectggega gegggecace 1. ctgtectgee gggecagega gagegtggac gacttcggea tcagettcat caactggtat 7 cagcagaagec ccggecagge 00022089015 ctcatctacg 222008038 geagggeage YA. ggcatcceeg ccaggttcag cggeagegge teeggeaccg acttcaccet gaccatctee 76 agcctcgaac ccgaggactt cgecgtgtac tactgccage agcetgaaaga ggtgecccee You accttcggeg gtgggaccaa ggtggaaate aaa Pry
Yo > ١< ١١١ >؟١١<‎
PRT >< ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
Y « < ¢ “>
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly \ ° Yo ١١
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe ١ Yo Ye
Gly Ile Ser Phe Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly ‏عله‎ Ala Pro ‏هه ل‎ $e $0
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Gly Ser Lys Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
On oo Te
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
YAS
1 Oo Ya Vo A ٠
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Lys
Ao 4. {0
Glu Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Glu ١ ١٠١ YY
YY <YV.> (o ><
DNA <Y\Y> ‎<Y ١ y>‏ ترتيب صناعي ‎<YY.> ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية ‎YY <¢en> ‎cgggcecageg agagegtgga cgacttcgge atcagcttca tcaac $0 ‎YY > ٠٠< ‎Yo > ١١< ‎PRT >< ‎١<‏ 7> ترتيب صناعي ‎<YY.> ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية ‎YY >.
مضا ‎Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe Gly Ile Ser Phe Ile Asn Arg‏ ‎١١‏ أ ° ‎١‏ ‎YY >١7٠٠<‏ <ا١"> ‎YY‏ ‎١<‏ ؟> ‎DNA‏ ‎١١ <‏ ؟> ترتيب صناعي ‎<YY.>‏ ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الأدمية <ي.)> ‎YY‏ ‎gecggeagea agecagggeag c ١‏ ‎>١٠٠<‏ ا ‎١١<‏ ؟> لا ‎PRT ><‏ ‎١<‏ 7> ترتيب صناعي ‎<YY.>‏ ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة ‎١‏ لأدمية ‎YE >).‏ ‎Gly Ser‏ ماه ‎Ala Gly Ser Lys‏
تح ١ o
Yo > ٠١<
YV > ١١<
DNA <Y\Y> ‏7؟> ترتيب صناعي‎ ١١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
Yo Sava cagcagctga aagaggtgce 0600806 ‏بال‎ ‎7 <Y\V\.> >ا١١<‎
PRT >< ‏صناعي‎ aii > ١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY> 771 >.
Gln GIn Leu Lys Glu Val Pro Pro 3 0
YAY
YV <YV.e>
Ye <YVY>
DNA <Y\Y> ‏؟> ترتيب صناعي‎ ١< <YY.> ‏مكتسب السمة الآدمية‎ Qin <YYY>
YV >. gaggtgcage tggtcgagtc tggeggegga ctggtgeage ctggeggcag cctgagactg 1 agctgegecg ccageggett caccttcage agetacgeca tcagetgggt geggeaggec 1Y. cctggeaagg geetggaatg ggtggccage gtgageggea ceggectggg cttccagace YA tactaccccg acagegtgaa gggecggttc accatcagec gggacaacge caagaacagc 76 ctgtacctge agatgaacag cctgegggee gaggacaccg ccgtgtacta ctgegecace Yoo tccctggaaa actacgectt cgactactgg ggecagggaa ccacggtcac cgtctectca vi.
YA <YVY.> ١٠١ > ١١<
PRT >< ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١١ < <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
Y A < ‏حا ع‎
YAA
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly ١ ‏هه‎ Ye Yo
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
AC Yo Yo
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
Yo $n $0
Ala Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr Tyr Pro Asp
Ou oo Ta
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 0 Va Yo Ae
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
AO q ٠ q o
Tyr Cys Ala Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin ١ “ae 3 «0 ١ ١ ٠
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser ١٠ ١١٠
Yq >" ٠١<
YA > ١<
DNA <Y\Y> ‏ترتيب صناعي‎ < XY ١ 7 <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
Yq <g> agcagctacg ccatcagce YA
Ye <YY > <ا "> أ
PRT >< ‎١١ <‏ ؟> ترتيب صناعي ‎<YY.> ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية ‎Ye <$0 > ‎Ser Ser Tyr Ala Ile Ser ١ ‏هه‎ ‎7١ > ٠١< ‎ov >” ١١< ‎DNA ‏7؟>‎ ١< ‎١١<‏ 7> ترتيب صناعي ‎<YY.> ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية ‎YY ‏><ءء)؛>‎ ‎agegtgageg geaccggect gggettccag acctactacc ccgacagegt gaaggeoc ov
٠
YY > ٠٠< ٠١ > ١١<
PRT <Y\Y> ‏؟> ترتيب صناعي‎ ١١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
YY >).١<
Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe ‏عله‎ Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser ١ 2 Ye \o
Val Lys Gly
YY <YV.>
YV > ١ا٠<‎
DNA > ١< ‏ترتيب صناعي‎ >7١١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
YY >عء١<‎ 100158338 01262001 cgactac ‏بال‎ ‏ا‎ <Y).>
Yo <YVY>
PRT <Y\Y> ‎١١ <‏ 7> ترتيب صناعي ‎<YY.> ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية ‎Ye <g> ‎Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr ١ ° Yo ‎Yo <Y\Y.> ‎١7١ > ١١< ‎DNA ‏؟>‎ ١< ‎١١ <‏ 7؟> ترتيب صناعي ‎<YY.> ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية ‏حر .ع > ‎Yo‏ ‎atggaatgga gctgggtett tetettettc ctgtcagtaa ctacaggtgt ccactccgag 1. gtgeagetgg tegagtetgg cggeggactg gtgcagectg geggeagect gagactgage YY. tgegeegeca geggettcac cttcageage tacgcecatca getgggtgeg geaggeecct YA ggcaagggee tggaatggot ggccagegtg ageggeaccg geetgggctt ccagacctac 7 taccccgaca gegtgaaggg ccggttcace atcagecggg acaacgecaa gaacagectg Yeo tacctgcaga tgaacagcct gegggeegag gacaccgecg tgtactactg cgecacctce Ya. ctggaaaact acgecttcga ctactgggge cagggaacca cggtcaccgt ctectcagee $Y + tccaccaagg geccateggt cttceceetg gegeccetget ccaggageac ctcegagage $A 26886880606 tgggetgeet ggtcaaggac tacttccccg aaccggtgac ggtgtegtgg of. aactcaggeg ctctgaccag cggegtgeac accttccegg ctgtectaca gtectcagga Ta ctetactcce tcageagegt agtgaccgtg ccctccagea acttcggeac ccagacctac “1. acctgeaacg tagatcacaa gcccageaac accaaggtgg acaagacagt tgagegcaaa ‏ب‎ 0 18-1515166 agtgeccace gtgeccagea ccacetgtgg 2262640816 agtettecte VA ttccceccaa aacccaagga caccetcatg atctccegga cecctgaggt cacgtgegtg Af gtggtggacg tgagccacga agaccccgag gtccagttca actggtacgt ggacggegtg qu gaggtgcata atgccaagac aaagccacgg gaggageagt tcaacageac ‏ع‎ av. gtcagegtce tcaccgtegt geaccaggac tggetgaacg gcaaggagta caagtgcaag ٠ gtctccaaca aaggectcce atcetccatc gagaaaacca tctccaaaac caaagggeag 76 ccccgagaac cacaggtgta caccetgeee ccatcecggg aggagatgac caagaaccag ١6 gtcagectga cctgectggt caaaggette taccccageg acatcgecgt ggagtgggag 1Y agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacacctc ccatgetgga ctcegacgge XT tecttettce tetacageaa getcaccgtg gacaagagea ggtggeagea ggggaacgtc IVY. tictcatget ccgtgatgea tgaggcetctg cacaaccact acacacagaa gagcectetee TFA ctgtetecegg gtaaa ‏مو‎ ‎7١ >” ٠< ‏ف2؛‎ > ١<
PRT > ١< ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الأدمية‎ <YYY>
7١ >..<
Met Glu Trp Ser Trp Val Phe Leu Phe Phe Leu Ser Val Thr Thr Gly ١ 2 ‏أ‎ ١١
Val His Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln
Y ٠ Y o ‏لا‎ ٠
Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe ‏ل‎ o $ ٠ ¢ Oo
Ser Ser Tyr Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
On oc Ta
Glu Trp Val Ala Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr 1 o Va Yo A ٠
Tyr Pro Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala
AO ]. qo
Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr ١ YO ٠
Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr ١١٠ YY. \Yo
Trp Gly GIn Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly 7 ١١٠ Yeo
Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser
Yéo Yo. Yoo "٠
Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val
Vio ٠ ‏ولا‎ ‎Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe
YAS YAo ٠8
Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val ١ Yoo Y.O
Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val 7٠ Yio YY.
Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys
YYo 77 YYo 7.٠
Cys Cys Val Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro
Yé¢o You Yoo
Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser
Yi. Yio ‏احا‎ ‎Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp ‏له دلا‎ YAo
Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn
Yq. Ydo Yoo
Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val 7. YY. 7١ YY.
Val Ser Val Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 7١١ YY. Yvo
Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys 7٠ Yéo Yo.
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr
Yoo 56 Yio
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 17٠ ‏د‎ YA
Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu
YAo Ya. Y4o0 Lon
Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu ¢ «0 ¢ ١ ٠ ¢ ١ ‏هه‎
١5
Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys
EY ¢Yo EY.
Ser Arg Trp Gln ‏ماه‎ Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu ‏م 6 د‎
Ala Leu His Asn His Tyr Thr ‏ماه‎ Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly £0. $00 $9
Lys to ‏يا‎ > ١< ‏الا‎ >7١٠١<
DNA > ١< ‏؟> ترتيب صناعي‎ ١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
YV <¢va> atgagtgtge ccactcaggt cctggggttg ctgetgetgt ggettacaga tgecagatgt 1. gagatcgtge tgacccagag ccccgecace ctgagectga gecetggega gegggecace VY. ctgtectgee gggecagega gagegtggac gacttcggea tcagettcat caactggtat YA cagcagaagec ccggccagge ccccagactg ctcatctacg ccggeagcaa gecagggeage 7 ggcatcceeg ccaggttcag cggecagegge tcecggeaccg 011000061 gaccatctce Youu agectcgaac ccgaggactt cgecgtgtac tactgccage agcetgaaaga 216600006 ‏يا‎ ‎accttcggeg gtgggaccaa ggtggaaatc aaacgaactg tggetgcace atctgtettc $Y + atcttccege catctgatga gcagttgaaa tctggaactg cctetgttgt gtgectgetg $A
+ aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacgce cctccaateg of. ggtaactcce aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcctcage “4.6 ageaccctga cgctgagecaa agcagactac gagaaacaca aagtctacgc ctgcgaagtc 17. acccatcagg gcctgagete geeegteaca aagagcttca acaggggoaga gtat 71
YA >١١ ٠<
YYA >" ا١<‎
PRT <Y\Y> ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١ < <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ >77 <
YA <g>
Met Ser Val Pro Thr Gln Val Leu Gly Leu Leu Leu Leu Trp Leu Thr ١ o ١ ٠ ١
Asp Ala Arg Cys Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser
Y. Yo You
Leu Ser Pro Gly Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser
Yo $a £0
Val Asp Asp Phe Gly Ile Ser Phe Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro
On 00 Te
Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Gly Ser Lys Gln Gly Ser
Ya Yo Ao
Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr
Ao 9. 0
ا ‎Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys‏ ‎You Y.o0 ١٠‏ ‎Gln Gin Leu Lys Glu Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val‏ ‎١١٠ ١١ ١١٠‏ ‎Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro‏ ‎١ ٠ ١ Y 2 ١ ¢ ٠‏ ‎Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu‏ ‎Yo.
Yoo “٠‏ م ‎١٠‏ ‎Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn‏ ‎‘Veo‏ لاا ‎١٠١٠‏ ‎Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser‏ ‎YA YAo ١‏ ‎Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala‏ ‎١ 9 2 Y [3 Y «0‏ ‎Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly‏ ‎٠ Yio YY.‏ ‎Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys Leu Ser‏ ‎YYo vy.
YYo‏ ‎Yq <YY.>‏ ‎١177 ><‏ ‎١ <‏ 7؟> ‎DNA‏ ‎>7١ ١<‏ ترتيب صناعي ‎<YY.>‏ ‎<YYY>‏ ترتيب مكتسب السمة الآدمية
Ya <tr> gaggtgeage tggtegagte tggeggegga ctggtgcage ctggeggeag cctgagactg 6 agetgegeeg ccageggett caccttcage agetacgeca tcagetgggt geggeaggee 1Y cctggeaagg gectggaatg ggtggccage gtgageggea ccggectggg cttecagace YA tactaccccg acagegtgaa gggeeggttc accatcagec gggacaacge caagaacage TR ctgtacctge agatgaacag cctgegggee gaggacaceg ccgtgtacta ctgegecace Yeo fceetggaaa actacgectt cgactactgg ggecagggaa ccacggtcac 101008 ‏ا‎ 806016080068 3859000816 610160666 ‏عه‎ getccaggag cacctccgag $Y agcacagegg ccoctgggetg cetggtcaag gactacttcc ccgaaccggt gacggtgteg $A tggaactcag gcgcetetgac cageggegtg cacaccttee cggetgtect acagtectca ‏مه‎ $ ggactctact ccctcageag cgtagtgace gtgeecteca gcaacttcgg cacccagacc “6 tacacctgea acgtagatca caagcccage aacaccaagg tggacaagac agttgagegce Me aaatgetgtg tcgagtgece accgtgecca geaccacctg tggcaggace gtcagtcttc VY. ctettccece caaaacccaa 2880800016 atgatcteec ggaccectga ggtecacgtge VA 51551551586 acgtgageca cgaagaccee gaggtccagt tcaactggta cgtggacgge Af gtggaggtge ataatgccaa gacaaagcca cgggaggage agttcaacag cacgttccgt 4.4 gtggtcageg tectcaccgt cgtgeaccag 2022088 acggcaagga gtacaagtgc + aaggtctcca 3008826606 021601066 atcgagaaaa ccatctccaa aaccaaaggg yy, cagcecegag aaccacaggt gtacaccctg cccccatcee gggaggagat gaccaagaac Y eA caggtcagee tgacctgect ggtcaaagge ttctacccca gegacatege cgtggagtegs 6١6 gagagcaatg ggcagecgga gaacaactac aagaccacac 1 ggactecgac IY. ggcetecttet tectctacag caagctcace gtggacaaga gecaggtggca gecaggggaac YY. gtcttetcat getcegtgat geatgagget ctgcacaace actacacaca 88888860616 yyy, tceetgtete cgggtaaa VEYA
Ee <YY>
£61 >7١١<
PRT ‏؟>‎ ١ < ‏ترتيب صناعي‎ >7١3< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY> « < $ Pd
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly ١ ‏هه‎ Yo Yo
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
Y ٠ Y ° ‏ل‎ ٠
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
Yo 4 ‏م‎ ‎Ala Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr Tyr Pro Asp
Ou 00 Ta
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser
Ya Yo Aa
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
AO 4 ٠ 9 °
Tyr Cys Ala Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln ١ va ١ «0 ١ ١ ٠
Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val ١٠٠ ١١ ١7٠
Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala 7 ١١١٠© ١8
7 va
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser ١٠5 You Yoo ٠
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val ٠١ ‏حلا‎ \Vo
Leu ‏ماه‎ Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
YA Ao 14.
Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys ١٠٠ Yoo ‏.أ‎ ‎Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys Val ٠ Yio YY.
Glu Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe
YYo YY. YYo Yeo
Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro
Yé¢o You Yoo
Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val ٠ Yo ‏دلا‎ ‎Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
YVo YA ‏عل‎ ‎Lys Pro Arg Glu Glu ‏ماه‎ Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser Val
Ya. Ydo ١
Leu Thr Val Val His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys 2.٠ YY. Ye YY.
Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser 7١ YY. Yvo
Lys Thr Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro
Yeo Yéo Yo.
Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val
Yoo Yo Yio
Ye
Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 713٠ Yvo YA
Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Met Leu Asp Ser Asp ‏عض‎ Va. Ydo 6
Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp ‏م‎ ٠ ٠
Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His ١ ١ Ya
Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Asn His ١ 4 ‏م‎ ‎٠ >ا٠<‎ log > ١<
DNA >7 ١< ‏ترتيب صناعى‎ >7 ١١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <Y YY $Y <g> gagatcgtge tgacccagag ccccgecace ctgagectga gecctggega gegggecace 1. ctgtectgee gggecagega gagegtggac gacttcggea tcagettcat caactggtat 7 cagcagaage ccggecagge ccccagactg ctcatctacg ccggeagceaa 268066 YA ggcatcceeg ccaggttcag cggeagegge tccggeaccg acttcaccet gaccatetee ‏إل‎ ‎agectcgaac ccgaggactt cgecgtgtac 18012060086 agcetgaaaga 516600002 Yao accttcggeg gtgggaccaa ggtggaaatc aaacgaactg tggetgecace atctgtcttc 1.
atcttcccge catctgatga gcagttgaaa tctggaactg ‏اعااعياعاهه‎ gtgectgetg $Y. aataacttct atcccagaga ggccaaagta cagtggaagg tggataacge cctccaatcg $A ggtaactccc aggagagtgt cacagagcag gacagcaagg acagcaccta cagcectcage of. agcaccctga cgetgagcaa agcagactac gagaaacaca aagtctacge ctgegaagtc Te acccatcagg gcctgagetc geccgtcaca aagagcttca acaggggaga gtgt “ot £Y >١٠<
YYA <YHYY>
PRT <Y\Y> ‏؟> ترتيب صناعي‎ ١< <YY.> ‏ترتيب مكتسب السمة الآدمية‎ <YYY>
EY ‏<حر.ءء>‎ ‎Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly ١ ° ٠١ Vo
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe
Yo Ye 7١
Gly Ile Ser Phe Iie Asn Trp Tyr Gin Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
Yo $e £0
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Gly Ser Lys Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala
On oo Te
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
Ya Yo Ae
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Lys
A o 5 ٠ 9 o
Glu Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg
Yao ١٠١٠© ١٠٠
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln ١١٠ YY. \Yo
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr ٠ ١١١ ٠ :
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
Vso You Yoo "٠
Gly Asn Ser ‏ماه‎ Glu Ser Val Thr Glu Gin Asp Ser Lys Asp Ser Thr io Ve ‘vo
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
YA ‏ذا‎ Ya.
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro ١٠5 Yoo ٠١
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 7٠٠ ١٠٠ 9 >7٠< ‏مغلا‎ <YVY>
PRT >< ‏أ < ترتيب صناعي‎ ١ 7 <YY.> ‏ترتيب فأر آدمي هجين‎ <YYY> $Y ><
Yet
Glu Ile Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly ١ 5 Ye ١
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Asp Phe \ Yo Ya
Gly Ile Ser Phe Ile Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro y ‏زم‎ $ ٠ ¢ °
Arg Leu Leu Ile Tyr Ala Gly Ser Lys Gln Gly Ser Gly Ile Pro Ala («2 ‏ده‎ Ta
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
Ye Yo Ae
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys ‏ماه‎ Gln Leu Lys
Ao 9 {0
Glu Val Pro Pro Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg 3 ٠١ ١ «0 ١ ١ ٠
Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro Ser Ser Glu Gin ١١٠٠ ١٠١ ١١٠
Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu Asn Asn Phe Tyr 7 ١١١ ١
Pro Lys Asp lle Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly Ser Glu Arg Gln ١٠ه‎ You ١ ‏ده‎ ٠
Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr ٠١٠ ٠ ‏ذلا‎ ‎Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp Glu Tyr Glu Arg
YA ‏دما‎ 14.
His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr Ser Thr Ser Pro ٠0 Yoo ١١
Ile Val Lys Ser Phe Asn Arg Asn Glu Cys
٠ ١٠١ 6 <YY.> ¢¢¢ <YVV>
PRT >< ‏ترتيب صناعي‎ >7١< <YY.> ‏ترتيب فأر آدمي هجين‎ >717< 2>.
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly ١ 2 ١ ٠ ١ o
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
Ye Yo Ye.
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val ‏ع 0 أ‎ ٠ 2 o
Ala Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr Tyr Pro Asp
On 00 Te
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser 2 ‏زه‎ 7 ٠. 7 2 A ٠
Leu Tyr Leu ‏ماه‎ Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr
Ao 9. 90
Tyr Cys Ala Thr Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gin ١١ ١٠١ ‏أ‎ ‎Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val
Yeo ١١ YY. ‘Yo
Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr ٠ ١١٠ ٠8
Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr
Yéo You Yoo "6٠
Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
Vo ERA ‏دلا‎ ‎Leu ‏ماه‎ Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser
YA YAo 14.
Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala
Ydo Yoo Yio
Ser Ser Thr Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys
YY. Yio 7
Lys Pro Cys Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe ١١ YY. YYo 6
Pro Pro Lys Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val
Yeo You Yoo
Thr Cys Val Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Pro Glu Val Gln Phe
Ye Yio ‏دلا‎ ‎Ser Trp Phe Val Asp Asp Val Glu Val His Thr Ala Gln Thr Gin Pro ‏بل دلا‎ YAo
Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Phe Arg Ser Val Ser Glu Leu Pro
Ya. Yd4o Yeo
Ile Met His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Phe Lys Cys Arg Val ‏.ا‎ 7٠ 7١ YY.
Asn Ser Ala Ala Phe Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Thr
YYo 7 YYo
Lys Gly Arg Pro Lys Ala Pro Gin Val Tyr Thr Ile Pro Pro Pro Lys
١ال‎
Yeo Yé¢o You
Glu Gln Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys Met Ile Thr Asp
Yoo Yi Yio
Phe Phe Pro Glu Asp Ile Thr Val Glu Trp Gln Trp Asn Gly Gln Pro 1٠ Yve YA
Ala Glu Asn Tyr Lys Asn Thr Gln Pro Ile Met Asn Thr Asn Gly Ser ‏دير‎ 1 ١-٠ ‏فم‎ ‎Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val Gln Lys Ser Asn Trp Glu Ala $0 ٠ ١١
Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val Leu His Glu Gly Leu His Asn His ٠ ¢Yo EY.
His Thr Glu Lys Ser Leu Ser His Ser Pro Gly Lys ١ 4 ¢ o< Y 3 >
YYY ‏<اا">‎ ‎DNA <Y\Y> ‏؟> ترتيب صناعى‎ ١١< >١١١< ‏ترتيب فأر آدمي هجين‎ >777< fo < Cea > gagatcgtge tgacccagag cccegecace ctgagectga gecctggega gegggecace 16 ctgtectgee gggecagega gagegtggac gactteggea tecagettcat 1 7 cagcagaage ccggecagge ccccagactg ctcatctacg ccggcageaa 5068662608820 YA
٠١ ggcatcceeg ccaggticag cggeagegge teccggeaceg 01160060061 gaccatctee ‏6ل‎ ‎agectcgaac ccgaggactt cgecgtgtac tactgecage 0201533388 ggtgceceece Yeo accttcggeg gtgggaccaa ggtggaaate aaa ‏باب‎ ‎£1 <YY.>
YYY >" ا٠<‎
DNA <Y\Y> ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١< <YY.> ‏ترتيب فأر آدمي هجين‎ <YYYS> :, >. 801212016 8000201826 10210116 020031608 gtgagcagtt 28 ‏ف‎ ‎ggtgcctcag tegtgtgett cttgaacaac ttctacccca aagacatcaa tgtcaagtgg VY. aagattgatg gcagtgaacg acaaaatggc gtcctgaaca gttggactga tcaggacagce YA aaagacagca cctacagcat gagcagcacc ctcacgttga ccaaggacga gtatgaacga Y§. cataacagct atacctgtga ggccactcac aagacatcaa cttcacccat tgtcaagagce Yeu ttcaacagga atgagtgtta g TY
LY <YY.> 1. ><
DNA <Y\Y> ‏؟> ترتيب صناعي‎ ١ < <YY.>
9ص <؟77> ترتيب فأر آدمي هجين ‎<a>‏ اي .1 5ه ‎gaggtgcage tggtcgagtc tggeggegga ctggtgecage ctggeggeag‏ ‎agctgegecg ccageggett caccttcage agctacgcca tcagetgggt 2655086226 77‏ ‎cctggcaagg gectggaatg ggtggecage gtgageggea ccggeetggg 1160326866 YA‏ ‎tactaccccg acagegtgaa gggecggttc accatcagec gggacaacge caagaacage 76‏ ‎agatgaacag cctgegggee gaggacaccg 51512012 ctgegecace Yu‏ 0151200156 ‎tccctggaaa actacgectt cgactactgg ggecagggaa ccacggtcac 8101060108 wy,‏ ‎EA >7٠<‏ ‎AVY ><‏ ‎DNA <Y\Y>‏ ‎١ <‏ ؟> ترتيب صناعي ‎<YY.>‏ ‎<YYY>‏ ترتيب فأر آدمي هجين ا ا ‎tA‏ ‎gccaaaacga 000000816 1810181608 ctggeccctg gatctgetge ccaaactaac 1.‏ ‎tccatggtga ccctgggatg cctggtcaag — ggctatttce ctgagccagt gacagtgace VY.‏ ‎tggaactctg gatcectgtc cageggtgtg cacaccttcc cagetgtect ggagtctgac YA‏ ‎ctctacactc tgagcagetc agtgactgte ccctccagee cteggeccag cgagaccgte 7‏ ‎acctgcaacg ttgcccacce ggecageage accaaggigg acaagaaaat tgtgeccagg |...‏ ‎gattgtggtt gtaagccttg catatgtaca gtcccagaag tatcatctgt cttcatcttc ww |‏
Yi. cccccaaage ccaaggatgt gotcaccatt actctgactc ctaaggtcac gtgtgttgtg $Y. gtagacatca gcaaggatga tcccgaggtc cagticaget ggttigtaga tgatgtggag $A gtgcacacag ctcagacgca acccegggag gageagttca acageacttt 2018216 0%. agtgaacttc ccatcatgca ccaggactgg ctcaatggca aggagttcaa atgeagggtc aacagtgcag ctttccctge ccccatcgag aaaaccatct ccaaaaccaa aggecagaccg TM. aaggctccac aggtgtacac cattccacct cccaaggage agatggecaa ggataaagtc VY. agtctgacct gcatgataac agacttcttc cctgaagaca ttactgtgga gtggeagtgg VA aatgggcagc cagcggagaa ctacaagaac actcagecca tcatgaacac gaatggetct ‏نيم‎ ‎tacttcgtct acagcaagcet caatgtgcag aagagcaact gggaggcagg — aaatactttc 44 2001201-16 186118032162. gggcectgecac aaccaccata ctgagaagag 010160086 ٠ tetectggta aatga 977 £4 >؟٠<‎ ‏هه‎ <YH)\>
PRT >< ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١١< <YY.> huMabJC18 Kabat ‏سلسلة ثقيلة‎ CDR1 <YYY> $9 <g>
Ser Tyr Ala Ile Ser ١ ‏هه‎ ‎Y 3 «>‏ < .وه ‎١<‏ ؟> لا
١١
PRT >< ‏ترتيب صناعي‎ >7 ١7 < <YY.> huMabJC18 Chothia 41s ‏سلسلة‎ CDR1 ><
Orv <¢ va > ’
Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr ١ o 0) > ١ء<‎
YY > ١١<
PRT >< ‏ترتيب صناعي‎ >7١١< <YY.> huMabJC18 Chothia 41s ‏سلسلة‎ CDR2 <YYY> ‏اه‎ <¢ a>
Ser Val Ser Gly Thr Gly Leu Gly Phe Gln Thr Tyr ١ 2 Ye : oy <Y\.> >؟١١<‎
PRT <Y\Y>
YAY
‏ترتيب صناعي‎ < Y ١ ‏ا‎ ‎<YY.> ‎huMabJC18 Chothia ‏سلسلة ثقيلة‎ CDR3 <YYY> o Y < 2 “>
Ser Leu Glu Asn Tyr Ala Phe Asp Tyr ١ o

Claims (1)

  1. ‏عناصر الحماية‎ ‎-١ ١‏ جسم مضاد معزول ‎(isolated antibody)‏ أو جزء منه وظيفي ‎(Lelie‏ الذي يرتبط بصفة ¥ خاصة مع ‎Dickopf 1 (Dkk-1) polypeptide‏ مشتملة على 0( منطقة متغيرة سلسلة ثقيلة ‎(VH) |"‏ منطقة محددة تكميلية ‎(CDRI1) (complementary determining region)‏ المشتملة ؛ على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في تعريف الترتيب رقم: ‎«Fs‏ £3 أو 560 ‎VH CDR2‏ ‎٠‏ المشتملة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في تعريف الترتيب رقم: ¥¥ أو ١©؛‏ و03 ‎VH‏ ‏1 المشتملة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في تعريف الترتيب رقم: ‎YE‏ أو 7©؛ و(ب) منطقة ‎١"‏ متغيرة سلسلة خفيفة 0101© ‎(VL)‏ مشتملة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في تعريف الترتيب ‎A‏ رقم: ‎VLCDR2 YY‏ مشتملة على ترتيب ‎amino acid 4‏ _المبين في تعريف الترتيب رقم: 74 و6083 ‎VL‏ مشتملة ‎Je‏ ترتيب ‎amino acid ٠‏ المبين في تعريف الترتيب رقم: ‎YT‏ ‎١‏ ؟- الجسم المضاد ‎(antibody)‏ أو جزءٍ منه وظيفي مناعيا من عنصر الحماية ‎١٠‏ حيث " تشتمل المنطقة المتغيرة السلسلة الثقيلة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في تعريف الترتيب " رقم: ‎YA‏ وتشتمل المنطقة المتغيرة السلسلة الخفيفة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في تعريف ؛ الترتيب رقم: ‎.٠١‏ ‎=F)‏ الجسم المضاد ‎(antibody)‏ أو جزء منه وظيفي ‎Lelie‏ من عنصر الحماية 7؛ حيث ‎ Y‏ يشتمل الجسم المضاد المذكور على سلسلة خفيفة مشتملة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في ‎Y‏ تعريف الترتيب رقم: ‎£Y‏ أو ‎YA‏ وسلسلة ثقيلة مشتملة على ترتيب ‎amino acid‏ المبين في ؛ تعريف الترتيب رقم: ‎5٠0‏ أو ‎«YT‏ مع أو بدون ‎lysine‏ طرف-© من تعريف الترتيب رقم: 660 ٠ه‏ أو . ‎nucleic acid —¢ ١‏ يشتمل على ترتيب يشفر الجسم المضاد أو جزء وظيفي ‎belie‏ من عنصر الحماية ؟.
    ‎.4 ‏من عنصر الحماية‎ nucleic acid ‏يشتمل على‎ (expression vector) ‏ناقل إظهار‎ -# ١ ‎١‏ “- خلية معزولة ‎(isolated cell)‏ تشتمل على ناقل إظهار ‎(expression vector)‏ من عنصر " الحماية 0 ‎١‏ 7- طريقة ‎ZY (method)‏ جسم مضاد أو جزء وظيفي مناعيا منه تشتمل على خطوة زراعة خلية طبقا لعنصر الحماية ‎J‏
    ‎١‏ + تركيبة ‎(composition)‏ تشتمل على جسم مضاد أو جزء من أي من عناصر الحماية ؟؛ "0 ؛ء وه ومادة مسوغة ‎¢(excipient)‏ مادة مخففة ‎(diluent)‏ أو مادة حاملة ‎(carrier)‏ مقبولة ¥ دوائيا. ‎١‏ 4- الجسم المضاد ‎(antibody)‏ أو جزء من أي عنصر من عناصر الحماية 7 5؛ و5 للاستخدام في علاج أو منع فقد كتلة عظام في مريض. ‎-٠١ ١‏ جسم المضاد ‎(antibody)‏ أو ‎gia‏ من عنصر الحماية 9؛ حيث ينتقى المريض المذكور " من مرضى يعانون من سرطان منتشر بالعظام وورم نقوي متعدد؛ هشاشة العظام؛ ‎AB‏ العظم؛ " مرض ‎Paget‏ التهاب حول الأسنان؛ التهاب مفصلي روماتويدي وفقد العظم بسبب عدم ؛ الحركة. ‎-١١ ١‏ جسم مضاد ‎(antibody)‏ أو جزء من أي عنصر من عناصر الحماية ‎of‏ 4؛ وك للاستخدام في حث زيادة كتلة العظام في مريض. ‎-١١ ١‏ جسم مضاد ‎(antibody)‏ أو جزءٍ من أي عنصر من عناصر الحماية 7 4 وه " للاستخدام في حث نشاط ‎Wit‏ في مريض. ‎-١“ ١‏ جسم مضاد ‎(antibody)‏ أو ‎gia‏ من عنصر الحماية ‎١١‏ أو ‎OY‏ حيث ينتقى المريض " المذكور من مرضى يعانون من سرطان منتشر بالعظام وورم نقوي متعدد؛ هشاشة العظام؛ قلة ¥ العظي؛ مرض ‎Paget‏ التهاب حول الأسنان؛ التهاب مفصلي روماتويدي وفقد العظم بسبب ؛ ‏ عدم الحركة.
SA110310369A 2009-05-12 2010-05-10 أجسام مضادة تخص dkk-1 واستخداماتها SA110310369B1 (ar)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US17765009P 2009-05-12 2009-05-12
US24463809P 2009-09-22 2009-09-22

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA110310369B1 true SA110310369B1 (ar) 2014-09-02

Family

ID=42315893

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA110310369A SA110310369B1 (ar) 2009-05-12 2010-05-10 أجسام مضادة تخص dkk-1 واستخداماتها

Country Status (20)

Country Link
US (2) US8338576B2 (ar)
EP (1) EP2430048A1 (ar)
JP (1) JP2012526542A (ar)
KR (1) KR101471239B1 (ar)
CN (1) CN102666584A (ar)
AR (1) AR076668A1 (ar)
AU (1) AU2010246981B2 (ar)
BR (1) BRPI1010540A2 (ar)
CA (1) CA2761696A1 (ar)
CO (1) CO6460768A2 (ar)
IL (1) IL216304A0 (ar)
MX (1) MX2011012039A (ar)
NZ (1) NZ596274A (ar)
PE (1) PE20120475A1 (ar)
RU (1) RU2548817C2 (ar)
SA (1) SA110310369B1 (ar)
SG (1) SG175881A1 (ar)
TW (1) TWI411444B (ar)
WO (1) WO2010131185A1 (ar)
ZA (1) ZA201108310B (ar)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101925611A (zh) * 2007-11-21 2010-12-22 安姆根有限公司 Wise结合剂和表位
EP3219725B1 (en) * 2010-10-27 2020-12-16 Amgen Inc. Dkk1 antibodies and methods of use
US9540443B2 (en) 2011-01-26 2017-01-10 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-kit antibodies
WO2012154983A2 (en) 2011-05-10 2012-11-15 Biocare Medical, Llc Systems and methods for anti-pax8 antibodies
US10316103B1 (en) 2012-03-30 2019-06-11 Biocare Medical, Llc Systems and methods for anti-Uroplakin III antibodies
CN104812775B (zh) 2012-07-25 2019-05-03 塞尔德克斯医疗公司 抗kit抗体及其用途
WO2014052672A1 (en) 2012-09-27 2014-04-03 Biocare Medical, Llc Anti-uroplakin ii antibodies systems and methods
WO2014100220A2 (en) 2012-12-18 2014-06-26 Biocare Medical, Llc Antibody cocktail systems and methods for classification of histologic subtypes in lung cancer
JP6445467B2 (ja) 2013-02-28 2019-01-09 バイオケア メディカル， エルエルシー 抗ｐ４０抗体システムおよび方法
GB201312638D0 (en) * 2013-07-15 2013-08-28 King S College London Biomarkers
WO2015051320A2 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Biocare Medical, Llc Anti-sox10 antibody systems and methods
EP3145543A4 (en) 2014-05-23 2017-12-13 Celldex Therapeutics, Inc. Treatment of eosinophil or mast cell related disorders
CN107750254B (zh) * 2015-05-18 2021-08-20 伊莱利利公司 抗Dkk-1-抗RANKL双特异性抗体化合物
JP2021502967A (ja) * 2017-11-14 2021-02-04 中外製薬株式会社 抗Ｃ１ｓ抗体および使用方法
EP3787645A4 (en) * 2018-05-02 2022-06-01 Ortheus, Inc. SYSTEMS AND METHODS FOR LOCAL MODULATION OF THE WNT SIGNALING PATHWAY
CN112180094A (zh) * 2019-07-04 2021-01-05 上海东慈生物科技有限公司 Dkk1抑制剂在预防和/或治疗肿瘤恶病质与糖尿病伴随疾病中的应用
KR102192471B1 (ko) * 2019-10-18 2020-12-17 주식회사 인코스팜 탈모 완화 및 모발 성장을 촉진시키는 펩타이드 및 이를 포함하는 화장료 조성물
KR102494042B1 (ko) * 2020-11-20 2023-02-07 주식회사 하울바이오 인간모유두세포의 성장을 촉진하는 항-dkk-1 항체 및 이의 용도
CN112592402B (zh) * 2020-12-02 2022-04-26 杭州奕安济世生物药业有限公司 抗dkk2抗体、包含该抗dkk2抗体的组合物及其用途

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7057017B2 (en) 1997-04-16 2006-06-06 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Human dickkopf-related protein and nucleic acid molecules and uses therefor
US6391311B1 (en) 1998-03-17 2002-05-21 Genentech, Inc. Polypeptides having homology to vascular endothelial cell growth factor and bone morphogenetic protein 1
DE19747418C1 (de) 1997-10-27 1999-07-15 Deutsches Krebsforsch Inhibitor-Protein des wnt-Signalwegs
US7446181B2 (en) 1998-01-15 2008-11-04 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Antibodies that bind human Dickkopf-1 proteins
JP3868740B2 (ja) 1998-03-10 2007-01-17 ジェネンテック・インコーポレーテッド 新規なポリペプチド及びそれをコードする核酸
US6962797B2 (en) 1998-04-15 2005-11-08 Genentech, Inc. Nucleic acids encoding PRO615
US6344541B1 (en) 1998-09-25 2002-02-05 Amgen Inc. DKR polypeptides
US7193050B2 (en) 2000-02-18 2007-03-20 Genentech, Inc. Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same
US6673549B1 (en) 2000-10-12 2004-01-06 Incyte Corporation Genes expressed in C3A liver cell cultures treated with steroids
KR20030087001A (ko) 2001-02-16 2003-11-12 제넨테크, 인크. Ｄｋｋ－１ 또는 그의 길항제가 관련된 치료법
IL158750A0 (en) * 2001-05-17 2004-05-12 Genome Therapeutics Corp Reagents and methods for modulating dkk-mediated interactions
US20040038860A1 (en) 2002-05-17 2004-02-26 Allen Kristina M. Reagents and methods for modulating dkk-mediated interactions
WO2003053215A2 (en) 2001-11-07 2003-07-03 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Diagnosis prognosis and identification of potential therapeutic targets of multiple myeloma based on gene expression profiling
US7371736B2 (en) 2001-11-07 2008-05-13 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Gene expression profiling based identification of DKK1 as a potential therapeutic targets for controlling bone loss
US7308364B2 (en) 2001-11-07 2007-12-11 The University Of Arkansas For Medical Sciences Diagnosis of multiple myeloma on gene expression profiling
US7894992B2 (en) 2001-11-07 2011-02-22 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Diagnosis and classification of multiple myeloma
WO2004053063A2 (en) 2002-12-05 2004-06-24 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas System Molecular determinants of myeloma bone disease and uses thereof
US7811750B2 (en) 2002-12-05 2010-10-12 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Molecular determinants of myeloma bone disease and use thereof
US7642238B2 (en) 2002-12-05 2010-01-05 Shaughnessy John D Molecular determinants of myeloma bone disease and uses thereof
US8124087B2 (en) 2002-12-05 2012-02-28 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Methods of controlling bone loss by inhibiting DKK1
US20050084494A1 (en) 2003-05-21 2005-04-21 Darwin Prockop Inhibitors of Dkk-1
US8637506B2 (en) 2003-09-22 2014-01-28 Enzo Biochem, Inc. Compositions and methods for bone formation and remodeling
US8343922B2 (en) 2004-05-19 2013-01-01 Enzo Biochem, Inc. Compositions and methods for the stimulation or enhancement of bone formation and the self-renewal of cells
CA2574881C (en) 2004-08-04 2013-01-08 Amgen Inc. Antibodies to dkk-1
AR060017A1 (es) * 2006-01-13 2008-05-21 Novartis Ag Composiciones y metodos de uso para anticuerpos de dickkopf -1
US8501702B2 (en) 2006-12-06 2013-08-06 Broad of Trustees of the University of Arkansas Overexpression of Wnt ligands and treatment of lytic bone diseases
EP2121755A1 (en) * 2007-02-08 2009-11-25 Merck & Co., Inc. Antibodies specific for dkk-1
AR075989A1 (es) 2009-04-10 2011-05-11 Lilly Co Eli Anticuerpo dkk -1 (dickkopf-1) humano disenado por ingenieria

Also Published As

Publication number Publication date
RU2011145435A (ru) 2013-06-20
AU2010246981B2 (en) 2013-12-19
SG175881A1 (en) 2011-12-29
TW201043247A (en) 2010-12-16
US20130071921A1 (en) 2013-03-21
KR20120007078A (ko) 2012-01-19
EP2430048A1 (en) 2012-03-21
BRPI1010540A2 (pt) 2016-03-15
WO2010131185A1 (en) 2010-11-18
IL216304A0 (en) 2012-01-31
NZ596274A (en) 2013-11-29
TWI411444B (zh) 2013-10-11
MX2011012039A (es) 2011-12-14
JP2012526542A (ja) 2012-11-01
KR101471239B1 (ko) 2014-12-09
US8338576B2 (en) 2012-12-25
US20100291076A1 (en) 2010-11-18
AU2010246981A1 (en) 2011-12-08
PE20120475A1 (es) 2012-05-05
RU2548817C2 (ru) 2015-04-20
US8586721B2 (en) 2013-11-19
ZA201108310B (en) 2013-04-24
AR076668A1 (es) 2011-06-29
CO6460768A2 (es) 2012-06-15
CN102666584A (zh) 2012-09-12
CA2761696A1 (en) 2010-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SA110310369B1 (ar) أجسام مضادة تخص dkk-1 واستخداماتها
TWI791519B (zh) 針對淋巴細胞活化基因-3（lag-3）之抗體藥劑及其用途
AU2015305770B2 (en) Anti-LAG3 antibodies and antigen-binding fragments
KR101652125B1 (ko) 헤파린-결합 표피 성장 인자-유사 성장 인자 항원 결합 단백질
CN107522784B (zh) 抗il-23抗体
TWI425005B (zh) 與４－１ｂｂ結合之分子類
CN101835489B (zh) Il-18受体抗原结合蛋白
KR102161460B1 (ko) St2 항원 결합 단백질
CN113754768A (zh) 结合cd39的抗体及其用途
SA516371109B1 (ar) 1a أجسام مضادة خاصة لمركب ترابطي يشبه عامل تنكرز ورم وتركيباتها واستخدامها
TW201041594A (en) Compositions and methods for increasing muscle growth
JP2021177770A (ja) ＣＤ６６ｃに特異的に結合する抗体およびその用途
TW202122423A (zh) 抗ｃｄ７３抗體及組合物
TW202200622A (zh) 用於治療癌症之組成物及方法
JP2022185058A (ja) 配列類似性１９、メンバーａ５抗体を有する抗ファミリー及びその使用方法
JP2024026159A (ja) アクチビン２型受容体結合タンパク質及びその使用
WO2018218068A1 (en) Humanized antibodies against globo h and uses thereof in cancer treatments
EA045545B1 (ru) Средства на основе антитела, направленные против гена 3 активации лимфоцитов (lag-3) и пути их применения