RU2816256C1 - Фармацевтическая композиция для лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающая переносчик глицина в качестве активного ингредиента - Google Patents
Фармацевтическая композиция для лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающая переносчик глицина в качестве активного ингредиента Download PDFInfo
- Publication number
- RU2816256C1 RU2816256C1 RU2022127834A RU2022127834A RU2816256C1 RU 2816256 C1 RU2816256 C1 RU 2816256C1 RU 2022127834 A RU2022127834 A RU 2022127834A RU 2022127834 A RU2022127834 A RU 2022127834A RU 2816256 C1 RU2816256 C1 RU 2816256C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- disease
- glycine
- vector
- protein
- glyt1
- Prior art date
Links
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 title claims abstract description 40
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 title claims abstract description 38
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 108010063380 Glycine Plasma Membrane Transport Proteins Proteins 0.000 title claims description 39
- 102000010726 Glycine Plasma Membrane Transport Proteins Human genes 0.000 title claims description 36
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 70
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 44
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 39
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 37
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 37
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 37
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 35
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims abstract description 31
- 102000013498 tau Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108010026424 tau Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 20
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 16
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 16
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 claims abstract description 11
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims abstract description 10
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 230000006933 amyloid-beta aggregation Effects 0.000 claims abstract description 8
- 208000005145 Cerebral amyloid angiopathy Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 206010002026 amyotrophic lateral sclerosis Diseases 0.000 claims abstract description 6
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims abstract 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 46
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 46
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 claims description 29
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 claims description 29
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 17
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 17
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 8
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 8
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 8
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 claims description 8
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 claims description 8
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 claims description 6
- 208000027061 mild cognitive impairment Diseases 0.000 claims description 5
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 claims description 4
- 241001655883 Adeno-associated virus - 1 Species 0.000 claims description 3
- 241000702423 Adeno-associated virus - 2 Species 0.000 claims description 3
- 241000202702 Adeno-associated virus - 3 Species 0.000 claims description 3
- 241000580270 Adeno-associated virus - 4 Species 0.000 claims description 3
- 241001634120 Adeno-associated virus - 5 Species 0.000 claims description 3
- 241000972680 Adeno-associated virus - 6 Species 0.000 claims description 3
- 241001164823 Adeno-associated virus - 7 Species 0.000 claims description 3
- 241001164825 Adeno-associated virus - 8 Species 0.000 claims description 3
- 241000649045 Adeno-associated virus 10 Species 0.000 claims description 3
- 241000649046 Adeno-associated virus 11 Species 0.000 claims description 3
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 claims description 3
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000013602 bacteriophage vector Substances 0.000 claims description 2
- 239000013601 cosmid vector Substances 0.000 claims description 2
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 claims description 2
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 claims description 2
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 230000006951 hyperphosphorylation Effects 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 30
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 28
- 208000002267 Anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis Diseases 0.000 description 23
- 238000000034 method Methods 0.000 description 23
- 238000010175 APPswe/PSEN1dE9 Methods 0.000 description 19
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 19
- 208000037259 Amyloid Plaque Diseases 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 13
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 12
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 12
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 10
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 10
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 9
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 8
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 7
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 7
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 7
- 102100028886 Sodium- and chloride-dependent glycine transporter 2 Human genes 0.000 description 6
- 101710083167 Sodium- and chloride-dependent glycine transporter 2 Proteins 0.000 description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 6
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 6
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 5
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 5
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 5
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 5
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 5
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 5
- 239000013607 AAV vector Substances 0.000 description 4
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 4
- DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N amyloid-beta polypeptide 42 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DZHSAHHDTRWUTF-SIQRNXPUSA-N 0.000 description 4
- 230000004193 beta-amyloid degradation Effects 0.000 description 4
- 210000003703 cisterna magna Anatomy 0.000 description 4
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 4
- 210000004263 induced pluripotent stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N (2,4-dichlorophenyl) benzenesulfonate Chemical compound ClC1=CC(Cl)=CC=C1OS(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 OZFAFGSSMRRTDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 3
- 229940123454 Glucose transporter 1 inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 210000001652 frontal lobe Anatomy 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 3
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 3
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 102000002659 Amyloid Precursor Protein Secretases Human genes 0.000 description 2
- 108010043324 Amyloid Precursor Protein Secretases Proteins 0.000 description 2
- 101710137189 Amyloid-beta A4 protein Proteins 0.000 description 2
- 101710151993 Amyloid-beta precursor protein Proteins 0.000 description 2
- 102100022704 Amyloid-beta precursor protein Human genes 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 230000007351 Aβ plaque formation Effects 0.000 description 2
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 2
- 206010029350 Neurotoxicity Diseases 0.000 description 2
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 2
- 206010044221 Toxic encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000003542 behavioural effect Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000004958 brain cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 230000005786 degenerative changes Effects 0.000 description 2
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- -1 ethyl oleate Chemical class 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 2
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000013016 learning Effects 0.000 description 2
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000007135 neurotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000228 neurotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 2
- YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N tribromoethanol Chemical compound OCC(Br)(Br)Br YFDSDPIBEUFTMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950004616 tribromoethanol Drugs 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- ZQVOAGQZHDAFRM-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[4-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-tert-butylphenoxy]ethyl-methylamino]acetic acid;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=C(C(C)(C)C)C(OCCN(C)CC(O)=O)=CC=C1C1=CC=C(OCO2)C2=C1 ZQVOAGQZHDAFRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- 208000031091 Amnestic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003591 Ataxia Diseases 0.000 description 1
- 102000007371 Ataxin-3 Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 229940123150 Chelating agent Drugs 0.000 description 1
- 230000004543 DNA replication Effects 0.000 description 1
- 206010012218 Delirium Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 201000010374 Down Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000014094 Dystonic disease Diseases 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000011240 Frontotemporal dementia Diseases 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 description 1
- 102000011714 Glycine Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010076533 Glycine Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101100412102 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) rec2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000002569 Machado-Joseph Disease Diseases 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- YLEARPUNMCCKMP-DOFZRALJSA-N N-arachidonoylglycine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)NCC(O)=O YLEARPUNMCCKMP-DOFZRALJSA-N 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 102000005665 Neurotransmitter Transport Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010084810 Neurotransmitter Transport Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000014060 Niemann-Pick disease Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920002230 Pectic acid Polymers 0.000 description 1
- 241000009328 Perro Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000555745 Sciuridae Species 0.000 description 1
- 208000009415 Spinocerebellar Ataxias Diseases 0.000 description 1
- 208000036834 Spinocerebellar ataxia type 3 Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 208000034799 Tauopathies Diseases 0.000 description 1
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 1
- 208000000323 Tourette Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000016620 Tourette disease Diseases 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006986 amnesia Effects 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000003935 attention Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000008499 blood brain barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000001218 blood-brain barrier Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 235000014171 carbonated beverage Nutrition 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 230000001149 cognitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 208000010118 dystonia Diseases 0.000 description 1
- 239000003792 electrolyte Substances 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000010304 firing Methods 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229960003180 glutathione Drugs 0.000 description 1
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 210000004558 lewy body Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004630 mental health Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 230000007659 motor function Effects 0.000 description 1
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 230000027405 negative regulation of phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 210000001178 neural stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000626 neurodegenerative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N pectic acid Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O2)C(O)=O)O)[C@@H](C(O)=O)O1 LCLHHZYHLXDRQG-ZNKJPWOQSA-N 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000010318 polygalacturonic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 210000005215 presynaptic neuron Anatomy 0.000 description 1
- 208000022256 primary systemic amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 230000002250 progressing effect Effects 0.000 description 1
- 201000002212 progressive supranuclear palsy Diseases 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000001338 self-assembly Methods 0.000 description 1
- 230000035807 sensation Effects 0.000 description 1
- 235000019615 sensations Nutrition 0.000 description 1
- 230000037152 sensory function Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000002511 suppository base Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000003976 synaptic dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000000946 synaptic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 230000003936 working memory Effects 0.000 description 1
Abstract
Группа изобретений относится к области медицины и раскрывает применение фармацевтической композиции, содержащей белок-переносчик глицина или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, в качестве активного ингредиента, для профилактики или лечения когнитивных нарушений вследствие дегенеративного заболевания головного мозга, где дегенеративное заболевание головного мозга выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, легких когнитивных нарушений, церебральной амилоидной ангиопатии, амилоидного инсульта, сенильной деменции и бокового амиотрофического склероза; где белок-переносчик глицина представляет собой переносчик глицина-1 (GlyT1) и где GlyT1 содержит аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1 (варианты).Техническим результатом группы изобретений является эффективность профилактики и/или лечения различных дегенеративных заболеваний головного мозга, ассоциированных с агрегацией бета-амилоида, агрегацией тау-белка и/или гиперфосфорилированием тау-белка. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 ил., 4 пр.
Description
Область техники
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей переносчик глицина в качестве активного ингредиента.
Предпосылки создания изобретения
Дегенеративные заболевания головного мозга представляют собой заболевания, вызывающие дегенеративные изменения в нервных клетках центральной нервной системы и таким образом приводящие к различным симптомам, таким как нарушение двигательных и сенсорных функций и ингибирование причинно-следственных функций более высокого порядка, таких как память, способность к обучению и арифметическое мышление. Распространенные дегенеративные заболевания головного мозга включают болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, нарушения памяти и т.п. При дегенеративных заболеваниях головного мозга, гибель нейронов происходит из-за быстрого или медленного прогрессирования некроза или апоптоза. Поэтому, для разработки метода профилактики, устранения и лечения заболеваний центральной нервной системы необходимо понимание механизма гибели нейронов.
Между тем, важным патологическим признаком болезни Альцгеймера, представляющей собой дегенеративное заболевание головного мозга, является образование пептидных агрегатов, называемых сенильными бляшками, которые вызывают синаптическую дисфункцию и гибель нейронов. Основным компонентом этих сенильных бляшек является бета-амилоид, имеющий длину в 40-42 аминокислоты. Бета-амилоидные мономеры легко подвергаются самосборке в олигомеры, протофибриллы и фибриллы, богатые бета-складками, и ассоциируются с развитием нейротоксичности.
Корреляция между бета-амилоидными бляшками и нейротоксичностью пока еще не выявлена. Однако считается, что самосборка бета-амилоида в промежуточные олигомеры или агрегаты связана с развитием неврологических заболеваний, таких как болезнь Альцгеймера.
Таким образом, авторами настоящего изобретения было разработано настоящее изобретение, относящееся к лечению дегенеративных заболеваний головного мозга посредством ингибирования образования бета-амилоидных бляшек.
Описание вариантов изобретения
Техническая проблема
В одном своем аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей белок-переносчик глицина, его фрагмент или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую такой белок или его фрагмент, в качестве активного ингредиента.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-переносчик глицина или его фрагмент, в качестве активного ингредиента.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей клетку, трансформированную вектором, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-переносчик глицина или его фрагмент, в качестве активного ингредиента.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающему введение индивидууму, нуждающемуся в этом, белка-переносчика глицина, его фрагмента или молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок или его фрагмент.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к применению белка-переносчика глицина, его фрагмента или молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок или его фрагмент, для приготовления композиции в целях профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга.
Техническое решение проблемы
В одном своем аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей белок-переносчик глицина, его фрагмент или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок или его фрагмент, в качестве активного ингредиента.
Переносчик глицина является переносчиком нейромедиатора и может прекращать передачу сигнала глицина посредством реабсорбции глицина из синаптической щели обратно в пресинаптический нейрон. Соответственно, в одном варианте осуществления изобретения, рецептор глицина может способствовать внутриклеточному транспорту внеклеточного глицина.
В одном варианте осуществления изобретения, переносчиком глицина может быть переносчик глицина-1 (GlyT1), и GlyT1 может включать полинуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 1.
Используемый здесь термин «полинуклеотид» означает одноцепочечный или двухцепочечный полимер, состоящий из дезоксирибонуклеотидов или рибонуклеотидов. Полинуклеотид может включать последовательность генома РНК, ДНК (гДНК и кДНК) и последовательности РНК, транскрибированные с этих последовательностей, и, если это не оговорено особо. может включать аналог природного полинуклеотида.
Полинуклеотид может включать не только нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность белка-переносчика глицина, но также и последовательность, комплементарную нуклеотидной последовательности. Комплементарная последовательность может включать не только полностью комплементарные последовательности, но также по существу комплементарные последовательности. В жестких условиях, известных специалистам, комплементарная последовательность может представлять собой, например, последовательность, способную к гибридизации с нуклеотидной последовательностью, кодирующей аминокислотную последовательность белка.
В одном варианте осуществления изобретения, фармацевтическая композиция может быть введена:
(1) индивидуумам, которые имеют более высокий уровень или более высокий риск агрегации бета-амилоида, чем нормальные индивидуумы, не имеющие дегенеративного заболевания головного мозга;
(2) индивидуумам, которые имеют более высокий уровень или более высокий риск агрегации тау-белка, чем нормальные индивидуумы, не имеющие дегенеративного заболевания головного мозга;
(3) индивидуумам, которые имеют более высокий уровень или более высокий риск фосфорилирования тау-белка, чем нормальные индивидуумы, не имеющие дегенеративного заболевания головного мозга; и
(4) индивидуумам, для которых выполняются условия, соответствующие по меньшей мере одному из (1)-(3).
Уровень агрегации бета-амилоида или тау-белка может относиться к количеству (концентрации) агрегатов бета-амилоида или агрегатов тау-белка, или к отношению агрегатов бета-амилоида или агрегатов тау-белка к общему количеству бета-амилоида или к общему количеству тау-белка.
Уровень фосфорилирования тау-белка может относиться к количеству (концентрации) фосфорилированного тау-белка или к отношению фосфорилированного тау-белка к общему количеству тау-белка.
Человеческий бета-амилоид представляет собой пептидную молекулу, содержащую приблизительно 36-43 аминокислот, и является основным компонентом амилоидных бляшек, экспрессируемых в головном мозге пациентов с болезнью Альцгеймера, при этом, известно, что он участвует в развитии болезни Альцгеймера. Пептидная молекула бета-амилоида может быть получена путем расщепления белка-предшественника амилоида (APP) (UniProtKB P05067) бета-секретазой и гамма-секретазой. Пептидные молекулы бета-амилоида агрегируют с образованием токсичных для нейронов олигомеров, что приводит к дегенеративному заболеванию головного мозга.
Тау-белок состоит из четырех частей, включая выступающий N-конец, домен агрегации пролина, домен, связывающийся с микроорганеллой, и С-конец (Mandelkow et al., Acta. Neuropathol., 103, 26-35, 1996). Известно, что аномальное гиперфосфорилирование или модификация тау-белка в нейронах центральной нервной системы вызывает дегенеративные заболевания головного мозга, такие как болезнь Паркинсона и таупатия.
В одном варианте осуществления изобретения, агрегация бета-амилоида может быть вызвана глицином. Соответственно, переносчик глицина может ингибировать агрегацию бета-амилоида.
Используемый здесь термин «дегенеративное заболевание головного мозга» относится к любому заболеванию, которое связано с дегенеративными изменениями в головном мозге, а, в частности, охватывает все заболевания (заболевания головного мозга), которые могут быть вызваны такими факторами, как агрегация бета-амилоида в головном мозге и/или в нервных клетках головного мозга. В одном варианте осуществления изобретения, дегенеративное заболевание головного мозга может быть выбрано из группы, состоящей из, но не ограничивающейся ими: деменции, болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, легких когнитивных нарушений, церебральной амилоидной ангиопатии, синдрома Дауна, амилоидного инсульта, системного амилоидоза, амилоидоза голландского типа, болезни Нимана-Пика, сенильной деменции, бокового амиотрофического склероза, спиноцеребеллярной атрофии, синдрома Туретта, атаксии Фридриха, болезни Мачадо-Джозефа, деменции, ассоциированной с тельцами Леви, дистонии, прогрессирующего надъядерного паралича и лобно-височной деменции. Дегенеративное заболевание головного мозга может включать любое заболевание, вызываемое агрегацией бета-амилоида.
Используемый здесь термин «нормальный» относится к индивидууму, не имеющему определенного выше «дегенеративного заболевания головного мозга», в отличие от индивидуумов, которым вводят фармацевтическую композицию, и индивидуумов того же вида или тканей или клеток головного мозга (нейронов головного мозга), которые были выделены и/или взяты у этих индивидуумов для культивирования.
В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к вектору аденоассоциированного вируса (AAV), включающему нуклеотидную последовательность, кодирующую белок-переносчик глицина или его фрагмент.
Нуклеотидная последовательность, кодирующая переносчик глицина или его фрагмент, может включать, например, нуклеотидную последовательность, которая по меньшей мере на 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% или 100% идентична SEQ ID NO: 1, где белок, кодируемый нуклеотидной последовательностью, может в значительной степени сохранять функциональную активность белка, представленного SEQ ID NO: 1.
В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к клетке, трансформированной вектором AAV.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей, в качестве активного ингредиента, вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-переносчик глицина или его фрагмент.
В одном варианте осуществления изобретения, вектор может представлять собой любой вектор, выбранный из группы, состоящей, но не ограничивающейся ими, из плазмидного вектора, космидного вектора, бактериофагового вектора, аденовирусного вектора, ретровирусного вектора и аденоассоциированного вирусного вектора. Кроме того, аденоассоциированный вирусный вектор может представлять собой любой вектор, выбранный из группы, состоящей, но не ограничивающейся ими, из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 и AAV11.
В частности, настоящее изобретение млжет относиться к вектору AAV, включающему нуклеотидную последовательность, кодирующую переносчик глицина или его фрагмент. Предпочтительно, вектор AAV присутствует в форме частиц AAV. Способы получения и модификации вирусного вектора и частиц вирусного вектора, например, полученных из AAV, хорошо известны специалистам в данной области.
Вектор AAV может включать геном AAV или его фрагмент или производное. Геном AAV представляет собой полинуклеотидную последовательность, которая кодирует функции, необходимые для образования частицы AAV. Эти функции включают функции, которые участвуют в цикле репликации и упаковки AAV в клетке-хозяине, включая инкапсуляцию генома AAV в частицу AAV. Встречающийся в природе AAV является дефицитным по репликации и зависит от наличия хелперных функций в транс-ориентации, необходимых для завершения цикла репликации и упаковки. Геном AAV может присутствовать в одноцепочечной форме, может иметь плюс- или минус-смысловую цепь, или, альтернативно, он может присутствовать в двухцепочечной форме. Использование двухцепочечной формы позволяет обойти стадию репликации ДНК в клетке-мишени и, таким образом, может ускорить экспрессию трансгена.
Геном AAV может происходить от любого природного серотипа, изолята или кладотипа AAV. Таким образом, геном AAV может представлять собой полный геном природного AAV. Как известно специалистам в данной области, AAV, встречающиеся в природе, могут быть классифицированы в соответствии с различными биологическими системами. Обычно, AAV упоминаются с точки зрения их серотипа. Серотип соответствует вариантному подвиду AAV, который, благодаря профилю экспрессии поверхностных антигенов капсида, обладает характерной реактивностью, которая может быть использована для его отличия от других вариантов подвидов. Обычно, вирус, имеющий определенный серотип AAV, не дает эффективной перекрестной реакции с нейтрализующими антителами, специфичными для любого другого серотипа AAV. Серотипы AAV включают AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 и AAV11, а также включают рекомбинантные серотипы, такие как Rec2 и Rec3, недавно идентифицированные в головном мозге приматов. Любой из этих серотипов AAV может быть использован в настоящем изобретении.
AAV также может характеризоваться по их кладотипам или клонам. AAV относится к филогенетическому родству AAV природного происхождения и обычно относится к филогенетической группе AAV, которая восходит к общему предку и включает всех его потомков. Кроме того, AAV может обозначаться как специфический изолят, то есть, генетический изолят специфического AAV, встречающийся в природе. Термин «генетический изолят» означает популяцию AAV, которая подверглась ограниченному генетическому смешиванию с другими встречающимися в природе AAV, что тем самым позволяет определить явно отличающуюся популяцию на генетическом уровне.
Специалисты в данной области могут выбрать подходящий серотип, кладотип, клон или изолят AAV для их использования в настоящем изобретении исходя их своих общих знаний.
Вектор аденоассоциированного вируса (AAV) конструируют путем введения материалов, способных продуцировать вирус, в конкретную клетку, и экспрессионный вектор, включающий нуклеиновую кислоту в соответствии с настоящим изобретением, может быть введен в клетку способами, известными специалистам в данной области, например, посредством временной трансфекции, микроинъекции, трансдукции, слияния клеток, преципитации фосфатом кальция, трансфекции, опосредуемой липосомами; трансфекции, опосредуемой DEAE-декстраном; трансфекции, опосредуемой полибреном; электропорации, методом выстреливания генов и другими известныеми способами введения нуклеиновых кислот в клетки без каких-либо ограничений. Так, например, после создания экспрессионного вектора путем встраивания переносчика глицина в AAV, вектор переносят в упаковывающие клетки, которые затем культивируют и фильтруют для получения раствора AAV. Затем, ген переносчика глицина может быть введен в клетки путем инфицирования клеток, таких как клетки головного мозга, нейроны и/или нейроны-предшественники, с использованием раствора AAV.
Вектор, включающий AAV, может относиться к средству для экспрессии гена-мишени в клетке-хозяине. Вектор включает элементы для экспрессии гена-мишени и может включать ориджин репликации, промотор, оператор, терминатор транскрипции и т.п., а также может включать соответствующий ферментативный сайт (например, сайт рестриктирующего фермента) для введения в геном клетки-хозяина и/или селективный маркер для определения успешного введения в клетку-хозяина и/или сайт связывания с рибосомой (RBS) для трансляции в белки, внутренний сайт связывания с рибосомой (IRES) и т.п. Вектор может дополнительно включать последовательность регуляции транскрипции (например, энхансер и т.п.), отличающуюся от промотора.
В рекомбинантном векторе, полинуклеотидная последовательность, кодирующая белок, может быть функционально связана с промотором. Термин «функционально связанный» относится к функциональной связи между нуклеотидной последовательностью, регулирующей экспрессию, такой как промоторная последовательность, и другой нуклеотидной последовательностью, в которой регуляторная последовательность регулирует транскрипцию и/или трансляцию другой нуклеотидной последовательности.
Рекомбинантный вектор может представлять собой экспрессионный вектор, способный стабильно экспрессировать белок-переносчик глицина в клетке-хозяине. В качестве экспрессионного вектора может быть использован экспрессионный вектор, обычно применяемый для экспрессии чужеродного белка в растениях, животных или микроорганизмах. Рекомбинантный вектор может быть сконструирован различными способами, известными специалистам в данной области.
Кроме того, вектор может означать экспрессионный вектор для генотерапии. Соответственно, вирусный вектор может означать вирусный вектор, способный доставлять терапевтический ген или генетический материал в желаемую клетку, ткань и/или орган. Термин «генотерапия» может относиться к способу нормализации функций путем введения нормального гена в клетку, имеющую генетическую аномалию, или обеспечения новой функции для лечения различных генетических заболеваний, вызываемых генетической аномалией. Соответственно, рекомбинантный вектор или рекомбинантная клетка согласно изобретению могут быть использованы для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга посредством экспрессии гена-переносчика глицина.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для профилактики или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающей в качестве активного ингредиента клетку, трансформированную вектором, включающим молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-переносчик глицина или его фрагмент.
Используемый здесь термин «трансформация» относится к изменению генетических свойств организма с помощью ДНК, выделенной из другого источника, и может относиться к явлению, при котором генетический признак изменяется, если ДНК, являющаяся типом нуклеиновой кислоты, выделенной из клетки одной линии организма, вводится в живую клетку другой линии и проникает в эту клетку.
В одном варианте осуществления изобретения, трансформированная клетка может представлять собой, но не ограничивается ими, стволовую клетку, клетку-предшественника или клетку животного. Кроме того, стволовая клетка, в частности, может представлять собой эмбриональную стволовую клетку, взрослую стволовую клетку или индуцированную плюрипотентную стволовую клетку (iPS), но не ограничивается ими. Стволовыми клетками могут быть стволовые клетки, дифференцированные из стволовых клеток, например, все мезенхимальные стволовые клетки, полученные из эмбриональных стволовых клеток; мезенхимальные стволовые клетки, полученные из iPS; нервные стволовые клетки, полученные из iPS, и т.п. Кроме того, клетка может быть аутологичной или гетерологичной, аллогенной или ксеногенной.
Используемый здесь термин «лечение» охватывает любое облегчение или ослабление патологических симптомов, уменьшение очага заболевания, задержку или замедление прогрессирования заболевания, ослабление, облегчение или стабилизацию патологического состояния или симптомов, частичное или полное выздоровление, увеличение продолжительности жизни, другие благоприятные результаты лечения и т.п. Используемый здесь термин «профилактика» включает все механизмы и/или эффекты, действующие на индивидуума, не страдающего конкретным заболеванием, для предотвращения развития конкретного заболевания, отсрочки начала развития заболевания или снижения частоты рецидивов.
Термин «фармацевтическая композиция» может относиться к молекуле или к соединению, которые оказывают некоторые полезные эффекты при их введении индивидууму. Такие полезные эффекты включают: возможность принятия диагностических решений; облегчение заболевания, симптома, расстройства или состояния; уменьшение или предотвращение возникновения заболевания, симптома, расстройства или состояния; и, как правило, положительный ответ на лечение заболевания, симптома, расстройствя или состояния.
Фармацевтическая композиция может дополнительно включать, помимо активного ингредиента, по меньшей мере один адъювант, выбранный из группы, состоящей из фармацевтически приемлемого носителя, эксципиента, разбавителя, наполнителя, агента, придающего объем, смачивающего агента, дезинтегрирующего агента, эмульгатора (поверхностно-активного вещества), лубриканта, подсластителя, ароматизатора, суспендирующего агента, консерванта и т.п. Адъювант может быть соответствующийм образом подобран в зависимости от лекарственной формы, в которой применяется фармацевтическая композиция, и может представлять собой один или более адъювантов, выбранных из всех адъювантов, которые обычно используются в фармацевтике. В одном варианте осуществления изобретения, фармацевтически приемлемый носитель может быть выбран из солевого раствора, стерильной воды, раствора Рингера, забуференного физиологического раствора, раствора декстрозы, раствора мальтодекстрина, глицерина, этанола и липосом, а также смеси двух или более из этих компонентов, все из которых которые обычно используются для приготовления лекарственных средств. При необходимости могут быть добавлены и другие традиционные добавки, такие как антиоксидант, буфер и бактериостат. Кроме того, путем дополнительного добавления разбавителя, диспергрующего агента, поверхностно-активного вещества, связующего и лубриканта, фармацевтическая композиция может быть приготовлена в виде лекарственной формы для инъекций, такой как водный раствор, суспензия и эмульсия, пилюля, капсула, гранула или таблетка. Кроме того, для специфического действия на орган-мишень, антитело, специфичное для органа-мишени, или другие лиганды могут быть объединены с носителем. Кроме того, с применением соответствующего метода, известного специалистам в данной области, или метода, раскрытого в руководстве Remington (см., например, Remington's Pharmaceutical Science (последнее издание), Mack Publishing Company, Easton PA), фармацевтическая композиция может быть предпочтительно приготовлена в зависимости от соответствующих заболеваний или компонентов.
Эффективное количество активного ингредиента или фармацевтической композиции может быть введено перорально или парентерально во время лечения и может быть использовано в форме обычного фармацевтического состава. Парентеральное введение может означать такой способ введения, как ректальное, внутривенное, перитонеальное, мышечное, артериальное, трансдермальное, интраназальное введение, введение путем ингаляции, внутриглазное или подкожное введение, кроме перорального введения, и может включать местное введение в пораженный участок и т.п. Для перорального введения, активный ингредиент в фармацевтической композиции может быть покрыт оболочкой для предотвращения разложения в желудке, или фармацевтическая композиция может быть приготовлена в виде лекарственной формы, защищенной от разложения. Если фармацевтическую композицию согласно изобретению используют в качестве лекарственного средства, то в нее может быть дополнительно включен по меньшей мере один активный ингредиент, который обладает такими же или подобными функциями.
Кроме того, используемый здесь термин «активный ингредиент» может относиться к физиологически активному веществу, которое представляет собой вещество, упомянутое в настоящей заявке и используемое для достижения вышеупомянутой фармакологической активности (например, лечения дегенеративного заболевания головного мозга), и отличающееся от упомянутого здесь вещества, которое может быть введено отдельно, в комбинации с другими веществами или дополнительно. То есть, белок-переносчик глицина, его фрагмент или молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая белок и его фрагмент; вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты; и клетка, трансформированная вектором, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты, могут быть введены в виде одного активного ингредиента для прямого терапевтического воздействия на дегенеративное заболевание головного мозга.
Фармацевтическая композиция может быть приготовлена в форме раствора, суспензии, сиропа или эмульсии в водной или масляной среде, либо она может быть приготовлена в виде порошка, гранулы, таблетки, капсулы или т.п. В ее состав могут быть дополнительно включены диспергирующий агент или стабилизатор. При приготовлении фармацевтической композиции обычно используют разбавитель или эксципиент, такой как наполнитель, агент, придающий объем, связующее вещество, смачивающий агент, разрыхлитель и поверхностно-активное вещество. Могут быть также включены составы для парентерального введения, стерильный водный раствор, безводный раствор, суспензия, эмульсия, лиофилизированный состав и суппозиторий. В качестве безводного растворителя и растворителя для суспендирования могут быть использованы пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительное масло, такое как оливковое масло, сложный эфир для инъекций, такой как этилолеат, и т.п. В качестве основы для суппозитория могут быть использованы витепсол, макрогол, Твин 61, масло какао, лауриновое масло, глицерин, желатин или т.п.
Фармацевтическая композиция может быть использована путем смешивания с различными фармацевтически приемлемыми носителями, такими как физиологический раствор или органический растворитель. Для повышения стабильности или абсорбционной способности фармацевтической композиции в качестве лекарственного средства могут быть использованы углеводы, такие как глюкоза, сахароза или декстран, антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота или глутатион, хелатообразующие агенты, низкомолекулярные белки или другие стабилизаторы.
Фармацевтическая композиция может быть введена в фармацевтически эффективном количестве. Вводимая доза не имеет конкретных ограничений, но может варьироваться в зависимости от всасывания в организм, от массы тела, возраста, пола и состояния здоровья пациента, от режима питания, времени введения, способа введения, скорости экскреции, тяжести заболевания и т.п. Фармацевтическую композицию согласно изобретению приготавливают с учетом диапазона эффективного количества. Унифицированная лекарственная форма, приготовленная таким образом, может быть введена с применением специального метода дозирования в соответствии с мнением эксперта, который осуществляет мониторинг или наблюдает за введением лекарственного средства или в соответствии с индивидуальной потребностью по мере необходимости, либо она может быть введена несколько раз через равные промежутки времени. Доза фармацевтической композиции может составлять в диапазоне от 1 мкг/кг/день до 1000 мг/кг/день, но не ограничивается им. Суточная или однократная доза может быть приготовлена в виде одной унифицированной лекарственной формы и может быть приготовлена в соответствующем количестве или путем интернализации в контейнере с дробными дозами.
Индивидуумом может быть млекопитающее, например, человек, корова, лошадь, свинья, собака, овца, коза или кошка. Индивидуум может быть индивидуумом, нуждающимся в лечении дегенеративного заболевания головного мозга.
Если активный ингредиент согласно изобретению представляет собой рекомбинантный вектор, то его эффективное количество может составлять в диапазоне от 0,01 мг до 500 мг, а более конкретно, от 0,1 мг до 300 мг. В случае рекомбинантного вируса, включающего рекомбинантный вектор, эффективное количество может составлять конкретно в диапазоне от 103 МЕ до 1012 МЕ (от 10 БОЕ до 1010 БОЕ), а более конкретно, от 105 МЕ до 1010 МЕ, но не ограничивается ими.
Если активный ингредиент согласно изобретению представляет собой клетку, то эффективное количество может составлять в диапазоне от 103 клеток до 108 клеток, а более конкретно, от 104 клеток до 107 клеток, но не ограничивается ими.
Эффективная доза композиции согласно изобретению может составлять, на 1 кг массы тела, от 0,05 мг/кг до 12,5 мг/кг в случае рекомбинантного вектора, от 107 вирусных частиц до 1011 вирусных частиц (от 105 МЕ до 109 МЕ)/кг в случае рекомбинантного вируса, и от 103 клеток/кг до 106 клеток/кг в случае клетки. В частности, эффективная доза композиции согласно изобретению может составлять в диапазоне от 0,1 мг/кг до 10 мг/кг в случае рекомбинантного вектора, от 108 до 1010 частиц (от 106 МЕ до 108 МЕ)/кг в случае рекомбинантного вируса и от 102 клеток/кг до 105 клеток/кг в случае клетки. Композиция согласно изобретению может быть введена от одного до трех раз в день. Компоненты композиции согласно изобретению не имеют конкретных ограничений и могут варьироваться в зависимости от состояния здоровья пациента и тяжести заболевания.
В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к способу ингибирования агрегации бета-амилоида и/или разложения агрегированного бета-амилоида, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в ингибировании агрегации бета-амилоида и/или в разложении агрегированного бета-амилоида, фармацевтически эффективного количества белка-переносчика глицина, его фрагмента или молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок или его фрагмент; вектора, включающего молекулу нуклеиновой кислоты; или клетки, трансформированной вектором, включающим молекулу нуклеиновой кислоты, в качестве активного ингредиента. Способ может дополнительно включать, перед введением, идентификацию индивидуума, нуждающегося в ингибировании агрегации бета-амилоида и/или разложении агрегированного бета-амилоида.
В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к способу разложения тау-белка (и/или ингибирования его агрегации) и/или ингибирования фосфорилирования тау-белка, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в разложении тау-белка (и/или ингибировании его агрегации) и/или в ингибировании фосфорилирования тау-белка, фармацевтически эффективного количества белка-переносчика глицина, его фрагмента или молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок или его фрагмент; вектора, включающего молекулу нуклеиновой кислоты, или клетки, трансформированной вектором, включающим молекулу нуклеиновой кислоты, в качестве активного ингредиента. Этот способ может дополнительно включать, перед введением, идентификацию индивидуума, нуждающегося в разложении тау-белка (и/или ингибировании его агрегации) и/или ингибировании фосфорилирования тау-белка.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу профилактики и/или лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающему введение индивидууму, нуждающемуся в профилактике и/или в лечении дегенеративного заболевания головного мозга, фармацевтически эффективного количества белка-переносчика глицина, его фрагмента или молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок или его фрагмент; вектора, включающего молекулу нуклеиновой кислоты; или клетки, трансформированной вектором, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты, в качестве активного ингредиента. Этот способ может дополнительно включать, перед введением, идентификацию индивидуума, нуждающегося в профилактике и/или в лечении дегенеративного заболевания головного мозга.
В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к полезному для здоровья пищевому продукту для профилактики или ослабления дегенеративного заболевания головного мозга, где указанный продукт включает, в качестве активного ингредиента, белок-переносчик глицина, его фрагмент или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок или его фрагмент; вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты, или клетку, трансформированную вектором, включающим молекулу нуклеиновой кислоты.
В другом своем варианте, настоящее изобретение относится к полезному для здоровья пищевому продукту для профилактики или ослабления когнитивных нарушений или для улучшения памяти, где указанный продукт включает, в качестве активного ингредиента, белок-переносчик глицина, его фрагмент или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок или его фрагмент; вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты, или клетку, трансформированную вектором, включающим молекулу нуклеиновой кислоты.
Используемый здесь термин «когнитивный» может относиться к умственной деятельности или к процессу приобретения знаний и понимания посредством мышления, опыта и ощущений. В связи с этим, могут упоминаться такие процессы, как знания, внимание, память и рабочая память, суждение и оценка, рассуждение и вычисления, решение проблем и принятие решений, а также понимание и интерпретация языка. Когнитивное нарушение относится к категории нарушений психического здоровья, которые в основном влияют на обучение, память, восприятие и решение проблем и могут включать амнезию, деменцию и делирий.
Улучшение памяти может означать уменьшение последствий повреждения нейроанатомических структур, а также сохранение, поддерживание и воссоздание памяти. Кроме того, улучшение памяти может относиться к устранению нарушений памяти (включая болезнь Альцгеймера), которые могут прогрессировать.
Полезный для здоровья пищевой продукт может относиться к пищевому продукту, приготовленному с использованием сырья или ингредиента, содержащего питательное вещество, которого обычно не хватает в ежедневном рационе, или которое обладает полезной функцией для организма человека (далее этот продукт будет называться «функциональным сырьем»), и может также относится к любому продукту питания, который поддерживает здоровье или предотвращает и/или облегчает определенное заболевание или симптом, и форма такого конечного продукта не имеет конкретных ограничений. Так, например, полезный для здоровья пищевой продукт может быть выбран из группы, состоящей из различных пищевых продуктов, составов напитков, пищевых добавок и т.п., но не ограничивается ими.
Количество активного ингредиента, входящего в состав полезного для здоровья функционального пищевого продукта, соответствующим образом варьируется в зависимости от типа пищевого продукта, желаемого применения и т.п. и не имеет конкретных ограничений. Так, например, такое количество может составлять в пределах от 0,0001 масс.% до 99 масс.%, от 0,0001 масс.% до 95 масс.%, от 0,0001 масс.% до 90 масс.%, от 0,0001 масс.% до 80 масс.%, от 0,0001 масс.% до 50 масс.%, от 0,001 до 99 масс.%, от 0,001% до 95 масс.%, от 0,001 масс.% до 90 масс.%, от 0,001 масс.% до 80 масс.%, от 0,001 масс.% до 50 масс.%, от 0,01 масс.% до 99 масс.%, от 0,01 масс.% до 95 масс.%, от 0,01 масс.% до 90 масс.%, от 0,01 масс.% до 80 масс.%, от 0,01 масс.% до 50 масс.%, от 0,1 масс.% до 99 масс.%, от 0,1 масс.% до 90 масс.%, от 0,1 масс.% до 80 масс.%, от 0,1 масс.% до 50 масс.%, от 0,1 масс.% до 30 масс.%, от 0,1 масс.% до 10 масс.%, от 1 масс.% до 99 масс.%, от 1 масс.% до 95 масс.%, от 1 масс.% до 90 масс.%, от 1 масс.% до 80 масс.%, от 1 масс.% до 50 масс.%, от 1 масс.% до 30 масс.%, от 1 масс.% до 10 масс.%, от 10 масс.% до 99 масс.% , от 10 масс.% до 95 масс.%, от 10 масс.% до 90 масс.%, от 10 масс.% до 80 масс.%, от 10 масс.% до 50 масс.%, от 10 масс.% до 30 масс.%, от 25 масс.% до 99 масс.%, 25 до 95 масс.%, от 25 масс.% до 90 масс.%, от 25 масс.% до 80 масс.%, от 25 масс.% до 50 масс.%, от 25 масс.% до 30 масс.%, от 40 масс.% до 99 масс.%, 40 масс.% до 95 масс.%, от 40 масс.% до 90 масс.%, от 40 масс.% до 80 масс.%, от 40 масс.% до 50 масс.%, от 50 масс.% до 99 масс.%, от 50 масс.% до 95 масс.%, от 50 масс.% до 90 масс.%, от 50 масс.% до 80 масс.%, от 60 масс.% до от 99 масс.%, от 60 масс.% до 95 масс.%, от 60 масс.% до 90 масс.% или от 60 масс.% до 80 масс.% по отношению к общей массе пищевого продукта, но не ограничивается ими.
Полезный для здоровья пищевой продукт может дополнительно включать по меньшей мере один ингредиент, выбранный из группы, состоящей из различных питательных веществ, витаминов, микроэлементов (электролитов), ароматизаторов, таких как синтетические или натуральные ароматизаторы, красителей, загустителей (в случае сыра, шоколада и т.п.), пектиновой кислоты или ее солей, альгиновой кислоты или ее солей, органических кислот, защитных коллоидных загустителей, регуляторов рН, стабилизаторов, консервантов, глицерина, спирта, газирующих реагентов, используемых при приготовлении газированных напитков, и т.п. Соотношение этих добавок обычно выбирают так, чтобы оно составляло, но не ограничивалось ими, от 0,001 частей по массе до приблизительно 20 частей по массе на 100 частей по массе всего полезного для здоровья пищевого продукта.
Технические термины, способы и т.п., описанные в настоящей заявке, могут в равной степени применяться к соответствующим вариантам раскрытия настоящего изобретения.
Преимущественные эффекты изобретения
Композиция, содержащая в качестве активного ингредиента белок-переносчик глицина, его фрагмент или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок или его фрагмент; вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты; или клетку, трансформированную вектором, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты согласно варианту осуществления изобретения, не только может сообщать превосходный(ые) эффект(ы) ингибирования агрегации бета-амилоида и/или разложения агрегированного бета-амилоида, но также разложения тау-белка (и/или ингибирования его агрегации) и ингибирования гиперфосфорилирования тау-белка, и обладает отличной проницаемостью через гематоэнцефалический барьер, что позволяет успешно воздействовать на ткани головного мозга. Следовательно, эта композиция может быть эффективно использована для профилактики и/или лечения различных дегенеративных заболеваний головного мозга, ассоциированных с агрегацией бета-амилоида, агрегацией тау-белка и/или гиперфосфорилированием тау-белка.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 представлены изображения окрашивания тканей, иллюстрирующие результаты подтверждения экспрессии GlyT1 в тканях головного мозга пациентов с деменцией, вызванной болезнью Альцгеймера, что указывает на то, что экспрессия GlyT1 является достаточно низкой в областях головного мозга пациентов, где бляшки аккумулируются в гиппокампе и в лобной доле по сравнению с нормальным контролем.
На фиг. 2 представлены изображения окрашивания тканей, иллюстрирующие результаты значительного повышения образования бляшек бета-амилоида посредством ингибирования GlyT1 у трансгенных животных с деменцией Альцгеймера (APP/PS1 TG), у которых бляшки бета-амилоида еще не сформировались в достаточной степени, и у которых увеличение бляшек посредством ингибирования GlyT2 в качестве контроля не наблюдалось, что указывает на то, что GlyT1 специфически участвует в образовании бляшек бета-амилоида.
На фиг. 3 проиллюстрированы изображения окрашивания тканей, показывающие результаты подтверждения разложения бляшек бета-амилоида у трансгенных животных с деменцией Альцгеймера (APP/PS1 TG) с помощью окрашивания тиофлавином S, где такие результаты указывают на эффект разложения агрегированного бета-амилоида посредством введения AAV-GlyT1.
На фиг. 4 показаны графики, демонстрирующие результаты подтверждения разложения бляшек бета-амилоида у трансгенных животных с деменцией Альцгеймера (APP/PS1 TG) с помощью окрашивания тиофлавином S, и эти результаты продемонстрировали: эффект разложения агрегированного бета-амилоида при введении AAV-GlyT1; и значительно сниженное значение общей площади бляшек бета-амилоида в коре и в гиппокампе полушария головного мозга в группе, которой вводили AAV-GlyT1, по сравнению с мышами TG, которым вводили AAV-GFP в качестве негативного контроля.
На фиг. 5 представлены результаты проведения теста в Y-образном лабиринте (путем оценки с помощью Y-образного лабиринта) на 12 неделе после введения AAV-GlyT1 трансгенным животным с деменцией Альцгеймера (APP/PS1 TG), и эти результаты представляют собой значения, отражающие спонтанное изменение (%), обнаруженное путем измерения относительной частоты, с которой подопытные животные входят в лабиринт последовательно путем определения окружающих подсказок, что указывает на то, что уровень памяти улучшался и был близок к уровню WT-Veh, используемого в качестве позитивного контроля в экспериментальных группах по сравнению с контрольной группой, которой вводили AAV-GFP в качестве негативного контроля.
Вариант раскрытия изобретения
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно со ссылкой на Примеры. Однако, эти Примеры приводятся лишь в иллюстративных целях и не рассматриваются как ограничение объема изобретения. Для специалистов в данной области очевидно, что примеры, описанные ниже, могут быть изменены без отклонения от основных идей настоящего изобретения.
Пример 1: Подтверждение пониженной экспрессии GlyT1 в тканях головного мозга пациентов с деменцией Альцгеймера
1.1. Приготовление тканей головного мозга человека
Посмертные ткани головного мозга пациентов с деменцией Альцгеймера были идентифицированы в лобной доле и в гиппокампе группы пациентов с деменцией и у нормального контроля, и были взяты из Банка образцов головного мозга Сеульского Национального Университета (Таблица 1). Для экспериментов были получены пять образцов тканей для группы пациентов с деменцией Альцгеймера (ДА), и пять образцов тканей для нормального контроля (не-ДА), и пол и возраст этих пациентов различались.
Таблица 1 | |||
Блокирование # (область) | Пол | Возраст | |
ДА | А17-12 | Ж | 75 |
А17-26 | Ж | 85 | |
А18-2 | Ж | 75 | |
А18-3 | М | 80 | |
А18-15 | Ж | 93 | |
не-ДА | А18-10 | М | 56 |
А17-17 | М | 74 | |
А18-17 | М | 75 | |
А19-3 | М | 78 | |
А19-7 | М | 71 | |
А18-11 | Ж | 74 |
1.2. Иммуногистохимическое окрашивание
Фиксированные ткани головного мозга, приготовленные как описано в Примере 1.1., разрезали на срезы толщиной 30 мкм для проведения иммуногистохимического окрашивания. Фиксированные ткани подвергали реакции с 0,5% раствором тиофлавина S в течение 10 минут для окрашивания бляшек Аβ. Кроме того, ткани окрашивали с использованием антитела против GlyT1. После двукратной промывки 50% этанолом и однократной промывки DPBS, окрашенные ткани помещали на предметные стекла и исследовали с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа.
В результате иммуногистохимического окрашивания тканей головного мозга нормальных людей и пациентов с болезнью Альцгеймера как показано на фиг. 1, было подтверждено, что экспрессия GlyT1 была значительно ниже, чем у нормального контроля, в областях головного мозга пациентов с болезнью Альцгеймера, где бляшки накапливались в гиппокампе и в лобной доле.
Пример 2: Наблюдение за патологией трансгенных мышей посредством ингибирования GlyT1 и GlyT2 у мышей APP/PS1 TG
2.1. Подготовка мышей с моделью APP/PS1 TG
Трансгенные мыши (APP/PS1 TG; животные с моделью болезни Альцгеймера; B6C3-Tg (APPswe, PSEN1dE)85Dbo/Mmjax) и мыши дикого типа были получены из лаборатории Джексона (Bar Harbor, Maine, USA). Мышей APP/PS1 TG скрещивали с мышами дикого типа и поддерживали как мышей с двойными гемизиготами. Все генотипы были подтверждены с помощью ПЦР-анализа с использованием хвостовой ДНК в соответствии со стандартными условиями ПЦР в лаборатории Джексона. Пластиковые клетки, по 1 мыши на клетку, ставили в помещение для разведения животных и обеспечивали свободный доступ к корму и воде при 12-часовом цикле день/ночь при температуре 21±1°C.
2.2. Введение ингибиторов GlyT1 и GlyT2 мышам-моделям
Ингибитор GlyT1 (гидрохлорид LY2365109) и ингибитор GlyT2 (N-арахидонилглицин) вводили перорально и ежедневно в течение 4 недель в концентрации 10 мг/кг/день 7-месячным трансгенным мышам, у которых были обнаружены бета-амилоидные бляшки, которые еще не были в достаточной степени сформированы.
2.3. Подготовка образца ткани головного мозга
Мышей анестезировали 2% авертином (20 мг/г, внутрибрюшинно). Затем мышам вводили путем перфузии 0,9% NaCl и извлекали головной мозг. Полушария головного мозга фиксировали в течение ночи при 4°С в 4% параформальдегиде (рН 7,4).
2.4. Иммуногистохимическое окрашивание
Фиксированные ткани головного мозга, приготовленные как описано в Примере 2.3., разрезали на срезы толщиной 30 мкм для проведения иммуногистохимического окрашивания. Фиксированные ткани подвергали реакции с 0,5% раствором тиофлавина S в течение 10 минут для окрашивания бляшек Аβ. После двукратной промывки 50% этанолом и однократной промывки DPBS, окрашенные ткани помещали на предметные стекла и исследовали с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа.
В результате, как показано на изображениях окрашивания бета-амилоидных бляшек на фиг. 2, было подтверждено, что по сравнению с мышами (ингибитор TG GlyT2), которым вводили ингибитор GlyT2, количество и общая площадь бляшек были значительно увеличены у мышей, которым вводили ингибитор GlyT1 (TG, ингибитор GlyT1). Это указывает на то, что GlyT1 специфически участвует в образовании бляшек бета-амилоида.
Пример 3: Подтверждение влияния AAV-GlyT1, введенного в большую цистерну (Cisterna Magna), на уменьшение количества амилоидных бляшек у мышей APP/PS1 TG
3.1. Подготовка мышей с моделью APP/PS1 TG
Трансгенные мыши (APP/PS1 TG; животные с моделью болезни Альцгеймера; B6C3-Tg (APPswe, PSEN1dE)85Dbo/Mmjax) и мыши дикого типа были получены из лаборатории Джексона (Bar Harbor, Maine, USA). Мышей APP/PS1 TG скрещивали с мышами дикого типа и поддерживали как мышей с двойными гемизиготами. Все генотипы были подтверждены с помощью ПЦР-анализа с использованием хвостовой ДНК в соответствии со стандартными условиями ПЦР в лаборатории Джексона. Пластиковые клетки, по 1 мыши на клетку, ставили в помещение для разведения животных и обеспечивали свободный доступ к корму и воде при 12-часовом цикле день/ночь при температуре 21±1°C.
3.2. Введение аденоассоциированного вируса (AAV)-GlyT1 мышам-моделям
AAV (AAV-GlyT1), экспрессирующий переносчик глицина (GlyT1) SEQ ID NO: 1, подвергали рекомбинации в соответствии со способом производства вируса Vigene Biosciences (Rockville, MD, USA).
В частности, экспрессионный вектор конструировали путем встраивания гена GlyT1 в AAV, имеющий серотип AAV9, а затем вектор переносили в упаковывающие клетки, после чего трансдуцированные упаковывающие клетки культивировали, а затем фильтровали для получения раствора, содержащего частицы AAV, который затем концентрировали и очищали. После этого, AAV-GlyT1 вводили однократно в большую цистерну 5-месячных мышей APP/PS1 TG в концентрации 5×1010 вирусных частиц (VP) или 1,5×1011 VP. Контрольным мышам вводили 5×1010 VP AAV-GFP.
3.3. Подготовка образца ткани головного мозга
Мышей анестезировали 2% авертином (20 мг/г, внутрибрюшинно). Затем мышам вводили путем перфузии 0,9% NaCl и извлекали головной мозг. Полушария головного мозга фиксировали в течение ночи при 4°С в 4% параформальдегиде (рН 7,4).
3.4. Иммуногистохимическое окрашивание
Фиксированные ткани головного мозга, приготовленные как описано в Примере 1.3., разрезали на срезы толщиной 30 мкм для проведения иммуногистохимического окрашивания. Фиксированные ткани подвергали реакции с 0,5% раствором тиофлавина S в течение 10 минут для окрашивания бляшек Аβ. После двукратной промывки 50% этанолом и однократной промывки DPBS, окрашенные ткани помещали на предметные стекла и исследовали с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа.
В результате, как показано на изображениях окрашивания бета-амилоидных бляшек на фиг. 3 и на графиках на фиг. 4, было подтверждено, что по сравнению с контрольными мышами (TG-Veh), количество и общая площадь бляшек были значительно уменьшены у мышей, которым вводили AAV-GlyT1.
Пример 4: Подтверждение влияния AAV-GlyT1, введенного в большую цистерну, на улучшение когнитивной функции у мышей APP/PS1 TG
4.1. Подготовка модели мыши APP/PS1 TG
Трансгенные мыши (APP/PS1 TG; животные с моделью болезни Альцгеймера; B6C3-Tg (APPswe, PSEN1dE)85Dbo/Mmjax) и мыши дикого типа были получены из лаборатории Джексона (Bar Harbor, Maine, USA). Мышей APP/PS1 TG скрещивали с мышами дикого типа и поддерживали как мышей с двойными гемизиготами. Все генотипы были подтверждены с помощью ПЦР-анализа с использованием хвостовой ДНК в соответствии со стандартными условиями ПЦР в лаборатории Джексона. Пластиковые клетки, по 1 мыши на клетку, ставили в помещение для разведения животных и обеспечивали свободный доступ к корму и воде при 12-часовом цикле день/ночь при температуре 21±1°C.
4.2. Введение AAV-GlyT1 мышам-моделям
AAV-GlyT1, полученный тем же методом, описанным выше в 1.2, вводили однократно в большую цистерну 5-месячных мышей APP/PS1 TG в концентрации 5×1010 вирусных частиц (VP) или 1,5×1011 VP. Контрольным мышам вводили 5×1010 VP AAV-GFP.
4.3. Тест с использованием Y-образного лабиринта (оценка с помощью Y-образного лабиринта)
Тест с использованием Y-образного лабиринта проводили в лабиринтной конструкции, состоящей из трех одинаковых ответвлений длиной 40 см (15 см по высоте стены) под углом 120 градусов. Этот эксперимент представляет собой поведенческий эксперимент с использованием инстинктивных поисковых привычек грызунов и представляет собой метод, основанный на высокой возможности исследования новых областей. Чем больше подопытное животное запоминало последнее ответвление и не заходило в одно и то же ответвление, тем лучше была память. Время поиска составляло 8 минут на животное, а окончательный результат выражали в виде значения спонтанного изменения (%).
Спонтанное изменение (%) вычисляли по следующей формуле:
[Формула]:
Спонтанное изменение (%)=количество триплетов/(всего входов в ответвления-2)
Поведенческие особенности анализировали с помощью программного обеспечения SMART VIDEO TRACKING (Panlab, США). Все данные, полученные в экспериментах, выражали как среднее ± среднее значение стандартной ошибки (SEM), и группу, которой вводили лекарственное средство, сравнивали с группой, которой лекарственное средство не вводили, для проведения межгруппового анализа с помощью t-критерия Стьюдента.
Как показано на фиг. 5, в результате осуществления теста с использованием Y-образного лабиринта на 12 неделе после введения AAV-GlyT1 трансгенным животным с деменцией Альцгеймера (APP/PS1 TG) было подтверждено, что значение спонтанного изменения (%), полученное путем измерения относительной частоты последовательного входа в лабиринт путем определения окружающих подсказок, увеличивалось до значения, близкого к значению для позитивного контроля (WT, Veh) по сравнению с негативным контролем (TG, AAV-GFP).
--->
<110> Amyloid Solution Inc
Industry-Academic Cooperation Foundation, Yonsei University
<120> Фармацевтическая композиция для лечения нейродегенеративного
заболевния головного мозга, включающая переносчик глицина
в качестве активного ингредиента
<130> PX210052PCT
<150> KR 10-2020-0044988
<151> 2020-04-14
<160> 1
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 1956
<212> ДНК
<213> Homo sapiens
<400> 1
atgagcggcg gagacacgcg ggctgcgatc gctcgcccca ggatggccgc ggctcatgga 60
cctgtggccc cctcttcccc agaacagaat ggtgctgtgc ccagcgaggc caccaagagg 120
gaccagaacc tcaaacgggg caactggggc aaccagatcg agtttgtact gacgagcgtg 180
ggctatgccg tgggcctggg caatgtctgg cgcttcccat acctctgcta tcgcaacggg 240
ggaggcgcct tcatgttccc ctacttcatc atgctcatct tctgcgggat ccccctcttc 300
ttcatggagc tctccttcgg ccagtttgca agccaggggt gcctgggggt ctggaggatc 360
agccccatgt tcaaaggagt gggctatggt atgatggtgg tgtccaccta catcggcatc 420
tactacaatg tggtcatctg catcgccttc tactacttct tctcgtccat gacgcacgtg 480
ctgccctggg cctactgcaa taacccctgg aacacgcatg actgcgccgg tgtactggac 540
gcctccaacc tcaccaatgg ctctcggcca gccgccttgc ccagcaacct ctcccacctg 600
ctcaaccaca gcctccagag gaccagcccc agcgaggagt actggaggct gtacgtgctg 660
aagctgtcag atgacattgg gaactttggg gaggtgcggc tgcccctcct tggctgcctc 720
ggtgtctcct ggttggtcgt cttcctctgc ctcatccgag gggtcaagtc ttcagggaaa 780
gtggtgtact tcacggccac gttcccctac gtggtgctga ccattctgtt tgtccgcgga 840
gtgaccctgg agggagcctt tgacggcatc atgtactacc taaccccgca gtgggacaag 900
atcctggagg ccaaggtgtg gggtgatgct gcctcccaga tcttctactc actgggctgc 960
gcgtggggag gcctcatcac catggcttcc tacaacaagt tccacaataa ctgttaccgg
1020
gacagtgtca tcatcagcat caccaactgt gccaccagcg tctatgctgg cttcgtcatc
1080
ttctccatcc tcggcttcat ggccaatcac ctgggcgtgg atgtgtcccg tgtggcagac
1140
cacggccctg gcctggcctt cgtggcttac cccgaggccc tcacactact tcccatctcc
1200
ccgctgtggt ctctgctctt cttcttcatg cttatcctgc tggggctggg cactcagttc
1260
tgcctcctgg agacgctggt cacagccatt gtggatgagg tggggaatga gtggatcctg
1320
cagaaaaaga cctatgtgac cttgggcgtg gctgtggctg gcttcctgct gggcatcccc
1380
ctcaccagcc aggcaggcat ctattggctg ctgctgatgg acaactatgc ggccagcttc
1440
tccttggtgg tcatctcctg catcatgtgt gtggccatca tgtacatcta cgggcaccgg
1500
aactacttcc aggacatcca gatgatgctg ggattcccac cacccctctt ctttcagatc
1560
tgctggcgct tcgtctctcc cgccatcatc ttctttattc tagttttcac tgtgatccag
1620
taccagccga tcacctacaa ccactaccag tacccaggct gggccgtggc cattggcttc
1680
ctcatggctc tgtcctccgt cctctgcatc cccctctacg ccatgttccg gctctgccgc
1740
acagacgggg acaccctcct ccagcgtttg aaaaatgcca caaagccaag cagagactgg
1800
ggccctgccc tcctggagca ccggacaggg cgctacgccc ccaccatagc cccctctcct
1860
gaggacggct tcgaggtcca gccactgcac ccggacaagg cgcagatccc cattgtgggc
1920
agtaatggct ccagccgcct ccaggactcc cggata 1956
<---
Claims (25)
1. Применение фармацевтической композиции, содержащей белок-переносчик глицина или молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, в качестве активного ингредиента, для профилактики или лечения когнитивных нарушений вследствие дегенеративного заболевания головного мозга,
где дегенеративное заболевание головного мозга выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, легких когнитивных нарушений, церебральной амилоидной ангиопатии, амилоидного инсульта, сенильной деменции и бокового амиотрофического склероза;
где белок-переносчик глицина представляет собой переносчик глицина-1 (GlyT1) и
где GlyT1 содержит аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1.
2. Применение по п. 1, где GlyT1 содержит аминокислотную последовательность, кодируемую полинуклеотидной последовательностью SEQ ID NO:1.
3. Применение по п. 1, где белок-переносчик глицина способствует внутриклеточному транспорту внеклеточного глицина.
4. Применение по п. 1, где фармацевтическую композицию вводят индивидууму, выбранному из следующих индивидуумов:
(1) индивидуумов, которые имеют более высокий уровень или более высокий риск агрегации бета-амилоида, чем нормальные индивидуумы, не имеющие дегенеративного заболевания головного мозга;
(2) индивидуумов, которые имеют более высокий уровень или более высокий риск агрегации тау-белка, чем нормальные индивидуумы, не имеющие дегенеративного заболевания головного мозга;
(3) индивидуумов, которые имеют более высокий уровень или более высокий риск фосфорилирования тау-белка, чем нормальные индивидуумы, не имеющие дегенеративного заболевания головного мозга; и
(4) индивидуумов, у которых выполняются условия, соответствующие по меньшей мере одному из (1)-(3).
5. Применение по п. 4, где агрегация бета-амилоида вызвана глицином.
6. Применение фармацевтической композиции, содержащей вектор, включающий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-переносчик глицина в качестве активного ингредиента для профилактики или лечения когнитивных нарушений вследствие дегенеративного заболевания головного мозга,
где дегенеративное заболевание головного мозга выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, легких когнитивных нарушений, церебральной амилоидной ангиопатии, амилоидного инсульта, сенильной деменции и бокового амиотрофического склероза;
где белок-переносчик глицина представляет собой переносчик глицина-1 (GlyT1) и
где GlyT1 содержит аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1.
7. Применение по п. 6, где вектор представляет собой любой вектор, выбранный из группы, состоящей из плазмидного вектора, космидного вектора, бактериофагового вектора, аденовирусного вектора, ретровирусного вектора и аденоассоциированного вирусного вектора.
8. Применение по п. 7, где аденоассоциированный вирусный вектор представляет собой любой вектор, выбранный из группы, состоящей из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10 и AAV11.
9. Применение фармацевтической композиции, содержащей клетку, трансформированную вектором, содержащим молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-переносчик глицина в качестве активного ингредиента для профилактики или лечения когнитивных нарушений вследствие дегенеративного заболевания головного мозга, где дегенеративное заболевание головного мозга выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, легких когнитивных нарушений, церебральной амилоидной ангиопатии, амилоидного инсульта, сенильной деменции и бокового амиотрофического склероза;
где белок-переносчик глицина представляет собой переносчик глицина-1 (GlyT1) и
где GlyT1 содержит аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1.
10. Применение по п. 9, где клетка представляет собой любую клетку, выбранную из группы, состоящей из стволовой клетки, клетки-предшественника и клетки животного.
11. Применение белка-переносчика глицина или молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок, для профилактики или лечения когнитивных нарушений вследствие дегенеративного заболевания головного мозга, где дегенеративное заболевание головного мозга выбрано из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гентингтона, легких когнитивных нарушений, церебральной амилоидной ангиопатии, амилоидного инсульта, сенильной деменции и бокового амиотрофического склероза;
где белок-переносчик глицина представляет собой переносчик глицина-1 (GlyT1) и
где GlyT1 содержит аминокислотную последовательность, кодируемую нуклеотидной последовательностью, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
KR10-2020-0044988 | 2020-04-14 | ||
KR10-2021-0031435 | 2021-03-10 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2816256C1 true RU2816256C1 (ru) | 2024-03-27 |
Family
ID=
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1993010228A1 (en) * | 1991-11-12 | 1993-05-27 | Synaptic Pharmaceutical Corporation | Dna encoding a glycine transporter and uses thereof |
US5824486A (en) * | 1996-05-31 | 1998-10-20 | Allelix Neuroscience Inc. | Glycine transporter-transfected cells and uses thereof |
WO2000029564A2 (en) * | 1998-11-12 | 2000-05-25 | Gliatech Inc. | Human glycine transporter type 2 |
US6238883B1 (en) * | 1998-08-28 | 2001-05-29 | Smithkline Beecham Plc | Neurotransmitter transporter SC6 |
US6251617B1 (en) * | 1997-04-11 | 2001-06-26 | Allelix Neuroscience, Inc. | Glycine transporter |
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1993010228A1 (en) * | 1991-11-12 | 1993-05-27 | Synaptic Pharmaceutical Corporation | Dna encoding a glycine transporter and uses thereof |
US5824486A (en) * | 1996-05-31 | 1998-10-20 | Allelix Neuroscience Inc. | Glycine transporter-transfected cells and uses thereof |
US6251617B1 (en) * | 1997-04-11 | 2001-06-26 | Allelix Neuroscience, Inc. | Glycine transporter |
US6238883B1 (en) * | 1998-08-28 | 2001-05-29 | Smithkline Beecham Plc | Neurotransmitter transporter SC6 |
WO2000029564A2 (en) * | 1998-11-12 | 2000-05-25 | Gliatech Inc. | Human glycine transporter type 2 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ROBERT J. HARVEY et al. A critical role for glycine transporters in hyperexcitability disorders, Frontiers in Molecular Neuroscience, Vol.1, 2008. БЕРЕЗОВ Т.Т. и др. Биологическая химия, М.: "Медицина", 1998. БЕЛИКОВ. В.Г. Фармацевтическая химия: учебн.пособ., М.: МЕДпресс-информ, 2007, стр.27-29. ЗАГРЕБИН В.Л. и др. Патогенетические механизмы развития болезни Альцгеймера. Вестник ВолгГМУ, Выпуск 3 (59). 2016, стр.7-12. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE60106763T2 (de) | Glutaminsäure decarboxylase (gad) abgabesystem zur behandlung neurodegeneraliver erkrankungen | |
DE69535703T2 (de) | AAV-vermittelte Zufuhr von DNA an Zellen des Nervensystems | |
Specchio et al. | Neuronal ceroid lipofuscinosis: potential for targeted therapy | |
US10087224B2 (en) | Gene therapy for Alzheimer's and other neurodegenerative diseases and conditions | |
US20220265762A1 (en) | Composition, comprising tmem176b or an expression or activity regulator thereof as an active ingredient, for prevention or treatment of degenerative brain disease | |
EP3254702B1 (en) | Aav/xbp1s-ha virus, gene therapy method and use thereof in the optimisation and improvement of learning, memory and cognitive capacities | |
KR20120006073A (ko) | 신경변성 질환에 대한 유전자 요법 | |
BR112016025819B1 (pt) | Vetores de vírus adeno-associados para o tratamento de doenças de depósito lisossômico | |
CN110121356A (zh) | 治疗cns疾病的方法和载体 | |
CN115089715B (zh) | Alpk1基因作为中枢神经系统疾病预防或治疗靶点的应用 | |
Weng et al. | (R1441C) LRRK2 induces the degeneration of SN dopaminergic neurons and alters the expression of genes regulating neuronal survival in a transgenic mouse model | |
Donsante et al. | Progress in gene and cell therapies for the neuronal ceroid lipofuscinoses | |
TW202111127A (zh) | 用於治療亨丁頓舞蹈症之組合物及方法 | |
Prabhakar et al. | Survival benefit and phenotypic improvement by hamartin gene therapy in a tuberous sclerosis mouse brain model | |
WO2017201425A1 (en) | Anabolic enhancers for ameliorating neurodegeneration | |
JP2022058346A (ja) | グルコーストランスポーター1発現用アデノ随伴ウイルスベクター | |
RU2816256C1 (ru) | Фармацевтическая композиция для лечения дегенеративного заболевания головного мозга, включающая переносчик глицина в качестве активного ингредиента | |
US20180263945A1 (en) | Pyruvate compounds for treatment of peripheral neuropathy | |
Özgür-Günes et al. | Long-term disease prevention with a gene therapy targeting oligodendrocytes in a mouse model of adrenomyeloneuropathy | |
US20230190872A1 (en) | Pharmaceutical composition for treating degenerative brain disease, including glycine transporter as active ingredient | |
KR20210127609A (ko) | 글라이신 수송체를 유효성분으로 포함하는 퇴행성 뇌질환 치료용 약학적 조성물 | |
JP2023534293A (ja) | 脆弱x症候群の治療のための方法及び組成物 | |
US20210222167A1 (en) | Slc2a1 lncrna as a biologic and related treatments and methods | |
JP2024069332A (ja) | Tmem176b、その発現または活性モジュレーターを有効成分として含む神経変性脳疾患の予防または治療用組成物 | |
Neve et al. | A comprehensive study of the spatiotemporal pattern of β-amyloid precursor protein mRNA and protein in the rat brain: lack of modulation by exogenously applied nerve growth factor |