RU2794141C2 - Однодоменные наноантитела против шиповидного белка вируса SARS-CoV-2 - Google Patents
Однодоменные наноантитела против шиповидного белка вируса SARS-CoV-2 Download PDFInfo
- Publication number
- RU2794141C2 RU2794141C2 RU2021117171A RU2021117171A RU2794141C2 RU 2794141 C2 RU2794141 C2 RU 2794141C2 RU 2021117171 A RU2021117171 A RU 2021117171A RU 2021117171 A RU2021117171 A RU 2021117171A RU 2794141 C2 RU2794141 C2 RU 2794141C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- seq
- sequence
- cov
- sars
- antibody
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к тяжелоцепочечному антителу или его антигенсвязывающему фрагменту, которое специфически связывается с S-белком вируса SARS-CoV-2. Изобретение эффективно для ингибирования связывания S-белка вируса SARS-CoV-2 и клеточного рецептора ACE2. 2 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 пр.
Description
Область техники
Изобретение относится к биотехнологии и биохимии, а именно моноклональному тяжелоцепочечному антителу верблюдовых, специфически связывающемуся с белком Spike вируса SARS-CoV-2.
Уровень техники
Вирус SARS-Cov-2 является возбудителем острой респираторной инфекции COVID-19, заболевания, в отдельных случаях характеризующегося тяжелым течением и развитием обширного поражения легочного эпителия. Для специфической противовирусной терапии COVID-19 могут применяться препараты на основе антител, нейтрализующих вирус SARS-Cov-2. Нейтрализующие антитела способны специфически и с высокой степенью сродства связываться с участком RBD шиповидного (S) белка вируса SARS-Cov-2 и препятствовать взаимодействию шиповидного белка и рецептора ACE2, расположенного на поверхности эпителиальных клеток, за счет чего происходит блокирование возможности проникновения вируса в клетку. Антитела, связывающиеся с другими областями шиповидного белка SARS-Cov-2, не обладают нейтрализующей активностью, но могут быть использованы для иммунодиагностики SARS-Cov-2 при помощи иммуноферментного анализа. Антитела к шиповидному белку SARS-Cov-2 могут иметь различную структуру: это могут быть антитела вида IgA, IgD, IgE, IgG или IgM, полученные из различных видов животных или человека, за связывание с шиповидным белком в составе таких белковых молекул ответственны участки VH и VL тяжелых и легких цепей; либо фрагменты указанных антител, такие как Fab, представляющие собой спаренные участки VH-CH1 и VL-CH1, либо ScFv, представляющие собой единую полипептидную цепь, содержащую участки VH и VL, соединенные гибким полипептидным линкером, либо тяжелоцепочечные антитела или их фрагменты. Последние представляют собой антитела особой структуры, лишенные легких цепей, которые встречаются в организме животных семейства верблюдовые. За связывание с белком-мишенью в составе таких антител отвечает единственный домен VHH, который эволюционно приспособлен к функционированию без вариабельного домена легкой цепи. Домен VHH обладает более протяженными участками связывания антигена CDR1 и CDR3, а также каркасными областями, имеющими ряд гидрофильных замен, что обеспечивает таким антителам хорошие физико-химические свойства и способность связываться с антигенами со сродством и специфичностью, сравнимыми или превосходящими таковые у антител традиционной структуры. Домен VHH тяжелоцепочечного антитела, называемый также нанотелом, обладает наименьшим размером среди всех фрагментов антител, способных специфически распознавать мишени (`15 кДа по сравнению с ~35 кДа для фрагментов ScFv), высокой стабильностью и хорошей тканевой проникающей способностью.
Известны различные антитела традиционной структуры, способные специфически связываться с доменом RBD вируса SARS-Cov-2 и обладающие нейтрализующей активностью. Известно моноклональное антитело к RBD фрагменту в составе S белка вируса SARS-CoV-2 [Патентная заявка РФ № 2020138183, МПК C12N 1/00 (2006.01), опубл. 2020.11.20]. Описан также изолированный фрагмент ДНК, кодирующий участки легкой и тяжелой цепи указанного антитела, и антигенсвязывающий фрагмент указанного моноклонального антитела. Специфичность моноклонального антитела к RBD фрагменту в составе S белка вируса SARS-CoV-2 подтверждена методами иммуноферментного анализа, иммуноблоттинга, иммуноцитохимического и иммуногистохимического окрашивания. Установлена нуклеотидная последовательность вариабельных доменов моноклонального антитела. Изобретение позволяет получить новые моноклональные антитела, селективно связывающие RBD фрагмент в составе S белка вируса SARS-CoV-2. Указанное моноклональное антитело обладает традиционной структурой, и для него не описана возможность использования в виде фрагмента ScFv, кроме того, для производства такого антитела необходимо использовать исключительно эукариотические экспрессионные системы.
Известны наноантитела и их фрагменты, обладающие способностью связываться с доменом RBD шиповидного белка SARS-CoV-2, либо другими областями шиповидного белка, в том числе, обладающие нейтрализующей активностью в отношении SARS-CoV-2. В качестве примера рассмотрена заявка (CN, 112010967B, МПК C07K 16/10, A61P 11/00, A61P 31/14, G01N 33/56983, A61K 2039/505, C07K 2317/565, C07K 2317/567, C07K 2317/569, C07K 2317/76, G01N 2333/165, опубл. 2020.12.01), раскрывающая новое наноантитело, обладающее нейтрализующей активностью в отношении коронавируса SARS-CoV-2, метод его приготовления и применения. Наноантитело обладает малым молекулярным весом, высоким сродством к SARS-CoV-2 и низкой стоимостью производства. В изобретении раскрыты последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, обеспечивающие распознавание эпитопов в составе домена RBD шиповидного белка SARS-CoV-2. Указанное наноантитело отличается от наноантитела, описанного в настоящей заявке последовательностями CDR1, CDR2 и CDR3 и распознаваемыми эпитопами в составе шиповидного белка SARS-CoV-2. Подобное относится и к другим известным наноантителам к шиповидному белку SARS-CoV-2.
Известна генетическая конструкция для экспрессии рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2, штамм клеток яичника китайского хомячка CHO-S-RBD, продуцирующего рекомбинантный белок - рецептор-связывающий домен (RBD) вируса SARS-CoV-2, который может быть использован для диагностических целей [Патент РФ №2723008, C07K 14/165, опубл. 08.06.2020]. Описан так же способ получения штамма клеток яичника китайского хомячка CHO-S-RBD продуцента рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2, содержащий определенную генетическую конструкцию, введение указанной генетической конструкции в клетки путем липофекции; селекцию клеток на антибиотике Hygromycin B. Раскрыта информация о штамме клеток яичника китайского хомячка CHO-S-RBD, продуценте рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2. Описаны способы получения рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2 включающие: культивирование штамма клеток яичника китайского хомячка CHO-S-RBD; хроматографическую очистку рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2 из культуральной среды штамма клеток яичника китайского хомячка CHO-S-RBD; подтверждение получения рекомбинантного белка RBD вируса SARS-CoV-2. Создан рекомбинантный белок RBD вируса SARS-CoV-2 для выявления антител к SARS-CoV-2. Создана тест-система для иммуноферментного анализа сыворотки или плазмы крови человека. Разработан способ для анализа сыворотки или плазмы крови реконвалесцентов COVID-19 для отбора образцов наиболее перспективных для терапии пациентов, инфицированных SARS-CoV-2. Разработан способ анализа сыворотки или плазмы крови человека для определения титра антител к вирусу SARS-CoV-2. Изобретение предоставляет быструю и эффективную тест-систему для определения наиболее перспективных образцов сыворотки или плазмы крови реконвалесцентов COVID-19 для терапии пациентов, инфицированных SARS-CoV-2. Изобретение позволяет сократить время и упростить процедуру анализа сыворотки или плазмы крови реконвалесцентов COVID-19 для отбора образцов наиболее перспективных для терапии пациентов, инфицированных SARS-CoV-2. Перечисленные технические решения не используют антитела или их фрагменты, нацеленные на шиповидный белок SARS-CoV-2.
Краткое описание изобретения
Задачи, решаемые с помощью настоящего изобретения
Целью настоящего изобретения является получение однодоменного антитела или его фрагмента к шиповидному белку вируса SARS-CoV-2, которые могут обладать нейтрализующей активностью в отношении вируса SARS-CoV-2 за счет связывания с шиповидным белком и предотвращения его взаимодействия с клеточным рецептором ACE2, а также фармацевтической композиции, содержащей их в качестве активного ингредиента.
Средства для решения задач
В результате проведенных исследовательских работ авторами были получены однодоменные антитела, способные селективно связываться с шиповидным белком вируса SARS-CoV-2. Для полученных наноантител были определены последовательности участков CDR и определена способность блокировать взаимодействие между вирусным шиповидным белком и клеточным рецептором ACE2.
Согласно одному варианту осуществления, изобретение относится к следующему.
Тяжелоцепочечное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывается с S-белком вируса SARS-CoV-2, содержащее области определения комплементарности (CDR),
где антитело выбрано из группы, состоящей из:
(1) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:1,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:12, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:23;
(2) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:2,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:13, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:24;
(3) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:3,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:14, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:25;
(4) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:4,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:15, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:26;
(5) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:5,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:16, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:27;
(6) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:6,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:17, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:28;
(7) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:7,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:18, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:29;
(8) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:8,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:19, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:30;
(9) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:9,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:20, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:31;
(10) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:10,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:21, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:32;
(11) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:11,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:22, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:33;
2. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое ингибирует связывание S-белка вируса SARS-CoV-2 и клеточного рецептора ACE2.
3. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое представляет собой IgA, IgD, IgE, IgG или IgM; моноклональное антитело или поликлональное антитело
Осуществление изобретения
Описанные в документе антитела могут относиться к молекулам иммуноглобулинов, которые способны специфически связываться с определенной мишенью, в частности, остатками сахаров в составе полипептидов, полипептидами или белками при помощи как минимум одного сайта распознавания антигена, который расположен в вариабельном участке иммуноглобулиновой молекулы. Антитела могут являться моноклональными или олигоклональными.
Антитела могут относиться к тяжелоцепочечным иммуноглобулинам верблюдовых, состоящим из гомодимеров особых тяжелых цепей иммуноглобулинов, в которых отсутствуют константные домены CH1, а вариабельные домены содержат более протяженные участки CDR1 и CDR3.
Антитела могут принадлежать к различным классам иммуноглобулинов, в частности, IgA, IgM, IgG или любому их подклассу. Разделение иммуноглобулинов на различные классы производят основываясь на особенностях аминокислотной последовательности константных участков тяжелых цепей антитела.
Антитела к шиповидному белку вируса SARS-CoV-2 могут представлять собой тяжелоцепочечные антитела IgG, в частности, IgG1 или IgG2, или иной подкласс IgG. Кроме того, антитела к шиповидному белку либо их антигенсвязывающие фрагменты могут быть представлены в виде мономеров, либо мультимеров, в том числе, гетеромультимеров.
Антигенсвязывающие фрагменты тяжелоцепочечных антител, описанных в данном документе, также называемые наноантителами, является функциональным и структурным компонентом антитела и обеспечивает способность связывания с антигеном как в составе полноразмерного антитела, так и в виде отдельного белка. Антигенсвязывающий фрагмент может быть получен как в результате протеолитического расщепления полноразмерного антитела, так и путем экспрессии его последовательности в гетерологической экспрессионной системе, в клетках прокариот (например, e. coli), или эукариот (например, в клеточных линиях HEK-293 либо CHO).
Термин "специфически связывается" является термином, хорошо известным специалистам в данной области, и способы определения специфического связывания антител с антигеном или конкретным эпитопом в его составе хорошо известны. Например, следует учитывать, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с одним эпитопом в составе шиповидного белка SARS-CoV-2, могут связываться с указанным эпитопом в составе шиповидного белка SARS-CoV-2 с более высокой аффинностью и активностью связывания, быстрее и/или с большей продолжительностью, чем с другим эпитопом или отличными от эпитопа сайтами. Однако антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с первой мишенью, не исключаются из специфического связывания со второй мишенью.
Моноклональное антитело означает препарат молекул антител, в котором отдельные молекулы антител являются идентичными, за исключением присутствия небольшого количества мутантных вариантов. Моноклональные антитела нацелены на один эпитоп и являются высокоспецифическими. Кроме того, в отличии от поликлональных антител, которые нацеливается на разные антигены или разные эпитопы, каждое моноклональное антитело нацеливается на один эпитоп антигена. Определение "моноклональное" указывает на свойство антитела, и оно не должно истолковываться как ограниченное необходимостью получения антител конкретным способом.
Антитело к шиповидному белку SARS-CoV-2 в соответствии с настоящим изобретением или его антигенсвязывающий фрагмент могут быть дополнительно модифицированы в соответствии с общими техническими принципами, хорошо известными специалистам в данной области, с помощью различных способов модификации отдельно или в комбинации.
Пример 1. Получение наноантител к шиповидному белку SARS-CoV-2
Животное семейства верблюдовые (альпака) было подвергнуто троекратной иммунизации рекомбинантным тримерным шиповидным белком SARS-CoV-2, который был предварительно наработан в эукариотической экспрессионной системе. Для первичной иммунизации использовали 350 мкг шиповидного белка, растворенного в 500 мкл фосфатно-солевого буфера, смешанные с 500 мкл полного адьюванта Фрейнда. Иммунизацию производили серией подкожных и внутримышечных инъекций в область кожной складки правой передней ноги. Для повторных иммунизаций использовали по 250 мкг шиповидного белка, растворенного в 500 мкл фосфатно-солевого буфера, смешанные с 500 мкл неполного адьюванта Фрейнда, способом, аналогичным указанному выше. Иммунизации производили с интервалом в 3 недели. Через 5 дней после третьей иммунизации, у животного забирали 100 мл периферической крови венозной пункцией, из цельной крови проводили выделение фракции мононуклеарных клеток. К выделенной фракции добавляли 50 мкг биотинилированного шиповидного белка и проводили иммуномагнитную сепарацию связавшихся с шиповидным белком клеток, экспрессирующих специфичные к нему В-клеточные рецепторы, после чего из выделенной клеточной фракции экстрагировали тотальную клеточную РНК. Из препаратов РНК получали кДНК в реакции обратной транскрипции с праймером CGCCATCAAGGTACCAGTTGA, полученный образец кДНК использовали для амплификации специфических последовательностей, кодирующих участки VHH тяжелоцепочечных антител с праймерами GAACAGACCACCATGTCTAGASARKTGCRRSTSGTRGAGWCYGKGGGRGG, GATCGGATCCGGTTGTGGTTTTGGTGTCTTGGG и GATCGGATCCGGGGGGTCTTCGCTGTGGTGCG. Наработку кодирующих последовательностей проводили в реакции ПЦР с последующим электрофоретическим разделением продуктов реакции и выделением специфического продукта длиной 300-500 п.н. при помощи твердофазной экстракции. Затем препарат подвергали рестрикции при помощи эндонуклеаз XbaI и BamHI и лигировали в фагмиду pHEN2-XB. Лигазную смесь электропорировали в электрокомпетентные клетки штамма TG-1, которые затем высеивали на 25-см чашки с LB-агаром и карбенициллином в концентрации 100 мг/мл. Выросшие колонии объединяли и использовали бактериальную культуру для получения фаговых библиотек путем инфекции экспоненциально растущей в жидкой среде бактериальной культуры бактериофагом M13KO7. Полученные препараты фаговых библиотек преципитировали в присутствии PEG/NaCl и концентрировали, после чего проводили определение инфекционного титра предельными разведениями. Для проведения первого раунда селекции в обеих фаговых библиотеках в качестве мишени использовали полноразмерный тримерный шиповидный белок SARS-Cov-2, сорбированный на поверхности поликарбонатных пробирок. После проведения первого раунда селекции, фаговые библиотеки использовали для заражения культуры бактериальных клеток TG-1, которые затем повторно высеивали на 25-см чашки с LB-агаром и карбенициллином, а затем экспансировали в жидкой среде после заражения хелперным фагом M13KO7 и концентрировали для проведения второго раунда селекции. Второй раунд селекции был проведен на каждой из библиотек в двух постановках: в первом случае, в качестве мишени также использовался полноразмерный шиповидный белок, а во втором – рецептор-связывающий домен RBD. Целью второго раунда было обогащение наборов последовательностей вариантами, селективно связывающимися с функционально-активной областью шиповидного белка и, как следствие, имеющими большие шансы на обладание нейтрализующей активностью. После проведения вторых раундов селекции, зараженные культуры клеток TG-1 высеивали 25-см чашки с LB-агаром и карбенициллином, после чего анализировали индивидуальные колонии на наличие вставок целевой длины (300-500 п.н.), затем отобранные целевые моноклональные препараты бактерий использовали для получения моноклональных бактериофагов, экспонирующих в составе оболочечного белка pIII антигенсвязывающие фрагменты однодоменных антител. Полученные препараты использовали для оценки специфичности связывания с шиповидным белком SARS-Cov-2 при помощи иммуноферментного анализа с детекцией моноклональными антителами к pIII, мечеными пероксидазой хрена. Клоны, характеризовавшиеся высокой специфичностью связывания с мишенью, были использованы для заражения бактериальной клеточной линии HB-2151 и получения культур клеток-продуцентов растворимых антигенраспознающих фрагментов однодоменных антител, меченых полигистидиновой меткой. Наработанные и очищенные препараты нанотел исследовали методом конкурентного иммуноферментного анализа (Фиг. 1) для поиска вариантов, обладающих способностью прерывать взаимодействие между шиповидным белком SARS-Cov-2 и рецептором ACE2, их степень сродства к рецептору-мишени была определена методом биослойной интерферометрии (Фиг. 2), после чего биологическая активность оценена в эксперименте с нейтрализацией репортерных лентивирусных векторов, псевдотипированных шиповидным белком на клеточной линии HEK-293, гиперэкспрессирующей ACE2, и в опытах по нейтрализации натурального SARS-Cov-2 на клеточной линии Vero (Фиг. 3).
Изобретение иллюстрировано следующими материалами.
Фиг. 1 – результаты конкурентного ИФА с растворимыми нанотелами к шиповидному белку SARS-Cov-2 и внеклеточной частью рецептора ACE2
Фиг. 2 – таблица значений константы диссоциации, измеренной методом биослойной интерферометрии для некоторых вариантов блокирующих нанотел к шиповидному белку, а также указание последовательностей, кодирующих их области CDR.
Фиг. 3 – таблица значений минимальных титров нанотел к шиповидному белку, в присутствие которых наблюдалось подавление инфекции SARS-Cov-2 монослоя чувствительных клеток Vero.
Перечень последовательностей
SEQ ID NO 1: GSIFSIRIMG
SEQ ID NO 2: GVTFTNYGMG
SEQ ID NO 3: GRTFESYAMG
SEQ ID NO 4: GSIFSNNAMA
SEQ ID NO 5: RSIGNINAMG
SEQ ID NO 6: ENIVGTRAMA
SEQ ID NO 7: GLTFSSSAMG
SEQ ID NO 8: GRAFTMPAMG
SEQ ID NO 9: GRTLRTYDMG
SEQ ID NO 10: ERTFSEYAVG
SEQ ID NO 11: GRAFSNYVMG
SEQ ID NO 12: TTTISGIGTYYADSVKG
SEQ ID NO 13: AIRRSGGITYNEDSVKG
SEQ ID NO 14: AISWSGGSTYYADSVKG
SEQ ID NO 15: SITGGGNTKYADSVKG
SEQ ID NO 16: AISWSGGSTHYADSVTG
SEQ ID NO 17: TIFTTSTTYYTPSVKG
SEQ ID NO 18: NINWSGGHTYYRDSVKG
SEQ ID NO 19: GINWSGSRTAYADSVKN
SEQ ID NO 20: AIRWSSGYQYYTDSVRG
SEQ ID NO 21: GINWSGSNTHYGESVKG
SEQ ID NO 22: AISRGGATTSYADSVKG
SEQ ID NO 23: YVRDKDGRAY
SEQ ID NO 24: AVGPVTATLTRNPADFGS
SEQ ID NO 25: AASTFRSDGAALYLDEYDY
SEQ ID NO 26: NTDPPLGTWAVEYDY
SEQ ID NO 27: AADTYGLGYDLLNLLASIDY
SEQ ID NO 28: NTAAVNERTS
SEQ ID NO 29: AVASNDYGLPSEKFLYDY
SEQ ID NO 30: AADRQIQDKVDVTAAEYDY
SEQ ID NO 31: AAKLALSSIDSPESEYPY
SEQ ID NO 32: AADHNLATDLTLFALGLLDYDY
SEQ ID NO 33: AAESARRVAVRTRADDYDS
Claims (48)
1. Тяжелоцепочечное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывается с S-белком вируса SARS-CoV-2, содержащее области определения комплементарности (CDR),
где антитело выбрано из группы, состоящей из:
(1) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:1,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:12, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:23;
(2) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:2,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:13, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:24;
(3) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:3,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:14, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:25;
(4) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:4,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:15, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:26;
(5) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:5,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:16, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:27;
(6) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:6,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:17, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:28;
(7) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:7,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:18, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:29;
(8) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:8,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:19, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:30;
(9) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:9,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:20, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:31;
(10) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:10,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:21, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:32;
(11) антитела, содержащего
CDR1 с последовательностью SEQ ID NO:11,
CDR2 с последовательностью SEQ ID NO:22, и
CDR3 с последовательностью SEQ ID NO:33.
2. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое ингибирует связывание S-белка вируса SARS-CoV-2 и клеточного рецептора ACE2.
3. Антитело или антигенсвязывающий фрагмент по п.1, которое представляет собой IgA, IgD, IgE, IgG или IgM; моноклональное антитело или поликлональное антитело.
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2021117171A RU2021117171A (ru) | 2022-12-12 |
RU2794141C2 true RU2794141C2 (ru) | 2023-04-11 |
Family
ID=
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2744274C1 (ru) * | 2020-11-20 | 2021-03-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Моноклональное антитело к RBD фрагменту в составе S белка вируса SARS-CoV-2 |
CN112010967B (zh) * | 2020-09-07 | 2021-03-23 | 康维众和(中山)生物药业有限公司 | 新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体及其制备方法与应用 |
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN112010967B (zh) * | 2020-09-07 | 2021-03-23 | 康维众和(中山)生物药业有限公司 | 新型冠状病毒SARS-Cov-2中和毒性的纳米抗体及其制备方法与应用 |
RU2744274C1 (ru) * | 2020-11-20 | 2021-03-04 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук (ИБХ РАН) | Моноклональное антитело к RBD фрагменту в составе S белка вируса SARS-CoV-2 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
CHRISTOPHER O. BARNES et al., SARS-CoV-2 neutralizing antibody structures inform therapeutic strategies, Nature, 2020, Vol.588, N.7839, pp. 682-687. BIN JU et al., Human neutralizing antibodies elicited by SARS-CoV-2 infection, Nature, 2020, Vol.584. LIANG MF et al., SARS patients-derived human recombinant antibodies to S and M proteins efficiently neutralize SARS-coronavirus infectivity, Biomed Environ Sci., 2005, 18(6), 363-374. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU776464B2 (en) | Monoclonal antibodies, antigens and diagnosis and therapy of malignant diseases | |
JP7235256B2 (ja) | 重症熱性血小板減少症候群ウイルスの外膜糖タンパク質に結合する抗体及びその用途 | |
CN109438576B (zh) | 一种抗人cd47单克隆抗体的制备及其应用 | |
RU2019132843A (ru) | Антитело против в7-н3, его антигенсвязывающий фрагмент и их медицинское применение | |
JP2014511378A (ja) | Pcsk9アンタゴニスト | |
KR20150041801A (ko) | 복합체-특이적 항체 및 항체 단편 및 그의 용도 | |
WO2021180110A1 (zh) | 抗basigin人源化抗体用于制备治疗新型冠状病毒肺炎药物的应用 | |
JP2023534923A (ja) | SARS-CoV-2を標的にする抗原結合分子 | |
CN115461364A (zh) | 一种抗新型冠状病毒的单克隆抗体及其应用 | |
JP2023530003A (ja) | 抗Claudin18.2抗体およびその使用 | |
CN111727199A (zh) | 针对中东呼吸综合征-冠状病毒具有中和活性的结合分子 | |
RU2794141C2 (ru) | Однодоменные наноантитела против шиповидного белка вируса SARS-CoV-2 | |
CN116425870A (zh) | 一种抗新型冠状病毒n蛋白单克隆抗体31a8及其产品和应用 | |
CN111518208B (zh) | 抗cd47抗体及其应用 | |
KR101906558B1 (ko) | Tspan8에 특이적인 신규 항체 및 이의 용도 | |
TWI775422B (zh) | 重組抗體、包含重組抗體之套組及其用途 | |
CN107074925A (zh) | 用于预防和/或治疗亨廷顿氏病的物质和方法 | |
JP5683466B2 (ja) | 抗psk抗体 | |
TWI603979B (zh) | 抗人類膜錨定型免疫球蛋白a抗體能夠溶解帶有膜錨定型免疫球蛋白a的b淋巴球與降低免疫球蛋白a 的生產 | |
CN114316040A (zh) | 一种抗新型冠状病毒的全人源单克隆抗体及其用途 | |
WO2021236509A1 (en) | Anti-sars-cov-2 antibodies and uses thereof | |
CN115124615B (zh) | 抗新型冠状病毒rbd结构域抗原的纳米抗体 | |
CN111153989B (zh) | Echo30单克隆抗体的制备及其用途 | |
EP4194054A1 (en) | Camelid antibodies for use in therapy and diagnosis | |
US20230228763A1 (en) | Process for direct readout of immunoglobulins |