RU2767255C1

RU2767255C1 - Способ получения сухого экстракта из листьев гинкго двулопастного

Info

Publication number: RU2767255C1
Application number: RU2021102431A
Authority: RU
Inventors: Элеонора Федоровна Степанова; Елена Владимировна Ковтун
Priority date: 2021-02-02
Filing date: 2021-02-02
Publication date: 2022-03-17

Abstract

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения экстракта листьев гинкго билоба. Способ получения сухого экстракта листьев гинко билоба, включающий в себя ультразвуковую экстракцию спиртом этиловым 70%, перед экстракцией листья гинкго билоба измельчают до величины частиц размером 2 мм, экстрагируют сырье в ультразвуковом экстракторе при соотношении сырье:экстрагент 1:5, в течение 90 минут с частотой ультразвуковых колебаний 22 кГц при удельном расходе энергии 22,2 Вт/л и непрерывном охлаждении холодной водой, подаваемой в охлаждающую рубашку аппарата; по истечении времени полученный экстракт сливают, удаляют путем перегонки спирт этиловый; остаток концентрируют в шаровом выпарительном аппарате до содержания влаги 40-50%; полученную массу сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50-55°С, а затем превращают в порошок в шаровой мельнице. Вышеописанный способ позволяет увеличить содержание биологически активных соединений в конечном продукте. 3 пр.

Description

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к получению экстракта листьев гинкго двулопастного, и может быть использовано в медицине, косметологии, а также для получения лекарственных форм с экстрактом из листьев гинкго двулопастного.

Билобагинкго или гинкго двулопастный (от лат. GinkgoBiloba) - голосеменное растение, единственный представитель реликтового вида. Это листопадное дерево. Растение гинкго билоба является двудомным (https://www.medicalnewstoday.com/articles/263105.php).

Уникальный химический состав листоподобной хвои гинкго билоба представляет обширную таблицу из более, чем 100 активных веществ. Более 1/4 состава гинкго билоба занимает содержание таких веществ, как биофлавоноиды - кверцетин, изорамнетин, кемпферол и флавоноидные гликозиды - гинкгетин, билобетин, мирицетин. Из высушенного растительного сырья, а именно из зеленых листьев, выделяют экстракт гинкго билоба. Это вытяжка полезных веществ из гинкго билоба. Существуют жидкие вытяжки и сухие. Для изготовления 0,5 кг полезного сырья необходимо около 30 кг листьев (https://monographs.iarc.fr/wp-content/uploads/2018/06/mono 108-03.pdfl.

Экстракт гинкго двулопастного (билоба) замедляет процесс старения кожи и организма (антиоксидантное действие); оказывает иммуномодулирующее и противовирусное действие; купирует воспаление; снижает активность свертывающей системы крови, уменьшая показатель вязкости крови; оказывает антиагрегантный эффект (противотромботическое действие достигается за счет стабилизации мембран эритроцитов и тромбоцитов) расширяет просвет сосудов, укрепляет сосудистые стенки и тонус венозных сосудов; снижает проницаемость стенки сосудов, оказывая противоотечное действие; проявляет антигистаминный эффект; оказывает диуретическое действие; стимулирует клеточный метаболизм (полезен для улучшения мозгового кровообращения);улучшает память, сохраняет ясность ума, повышает способность к обучению (ПРЕПАРАТЫ ГИНКГО БИЛОБА: ПО ПУТИ ОТКРЫТИЙ В КЛИНИЧЕСКОЙ НЕЙРОФАРМАКОЛОГИИ. Бурчинский С.Г. // Международный неврологический журнал. - 2016. - № 4 (82). - С. 83-87). Препараты и лекарства, содержащие гинкго билоба, имеют весьма обширные показания к применению: атеросклероз; мигрени и головокружения; нарушениях мозгового кровообращения различного происхождения; болезнь Альцгеймера (ВОЗМОЖНОСТИ ПРЕПАРАТОВ ГИНКГО БИЛОБЫ В СТРАТЕГИИ ФАРМАКОТЕРАПИИ СОСУДИСТОЙ ДЕМЕНЦИИ. Бурчинский С.Г. // Международный неврологический журнал. - 2012. - № 1 (47). - С. 6-10).

В настоящее время в России применяется сухой экстракт как ингредиент комбинированных композиций в биологически активных добавках к пище, а также как лекарственный препарат в различных лекарственных формах: таблетках, капсулах: Билобил^®; Билобил^®интенс 120; Билобил^® форте; Витрум^®Мемори; Гинкго; Гинкго Билоба; Гинкго двулопастное; Гинкго двулопасмтного экстракт сухой; Гинкио; Гинкоум^®; Гинос^®; Мемоплант; Танакан^®. Кроме этого, на рынке присутствует сырье - Гинкго двулопастного листья, для приготовления настоев в домашних условиях (www.rlsnet.ru).

Известен способ получения экстракта гинкобилоба, имеющего пониженное содержание 4'-O-метилпиридоксина и бифлавонов (патент РФ 2356563). Этот способ включает следующие стадии: (а)получение раствора экстракта гинкго в растворителе; (б) нанесение раствора на адсорбирующую смолу, выбранную из сополимера на основе стирола и дивинилбензола или сополимера на основе бромированного стирола и дивинилбензола, и элюирование очищенного экстракта из адсорбирующей смолы с помощью растворителя, причем бифлавоны остаются на адсорбирующей смоле; (в) нанесение раствора на сильнокислый ионообменник и элюирование очищенного экстракта из ионообменника с применением растворителя, при этом 4'-O-метилпиридоксин остается на ионообменнике, растворитель на стадиях (а), (б) и (в) независимо выбран из водного алканола, содержащего 1-3 атома углерода, и водного кетона, содержащего 3-6 атомов углерода; и (г) концентрирование и сушка раствора экстракта с получением сухого экстракта с содержанием 4'-O-метилпиридоксина не более 20 м.д. и/или содержанием бифлавонов, не превышающим 25% от их содержания в первоначальном экстракте. Изобретение позволяет получать экстракт с пониженным содержанием 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов.

Разработан и другой способ получения экстракта из гинкго билоба, имеющего пониженное содержание 4'-O-метилпиридоксина и/или бифлавонов (патент РФ 2367459), который включает стадии: а) экстракцию листьев гинкго билоба с применением ацетона, содержащего воду, или алканола, содержащего 1-3 атома углерода и содержащего воду, или безводного металла, b) выделение органического растворителя путем концентрации раствора до содержания, 10% по весу, с возможной добавкой на конечных стадиях перегонки воды; с) разбавление оставшегося водного раствора водой до содержания твердых веществ от 5 до 25% по весу, охлаждение до температуры ниже 25°С и выдержку до образования осадка, d) обработку оставшегося водного раствора сульфатом аммония и последующей экстракцией по меньшей мере один раз с помощью метилэтилкетона или смеси метил этилкетона и ацетона, е) концентрирование полученного экстракта и разбавление его смесью этанол-вода с получением раствора, содержащего 50% по весу воды и 50% по весу этанола, и с содержанием твердых веществ равных 10% по весу, f) обработку раствора соединением свинца или нерастворимым полиамидом, g) экстракцию отфильтрованного раствора с помощью алифатического или циклоалифатического растворителя с точкой кипения от 60 до 100°С, h) концентрирование оставшегося водно-спиртового раствора с последующей обработкой сульфатом аммония и экстракцией метилэтилкетоном и этанолом, i) концентрирование полученной органической фазы до содержания твердых веществ, равного от 50 до 70% по весу, к) растворение концентрата в водном спирте, содержащем 1-3 атома углерода, и возможного фильтрования, 1) фильтрацию через смолу - адсорбент на основе возможно замещенных стиролов/дивинилбенолов, и/или сильнокислый ионообменник и m) сушку концентрата при пониженном давлении с получением сухого экстракта для изготовления лекарственного средства.

Позднее эти же авторы усовершенствовали способ получения экстракта из листьев гинкго билоба, обратив внимание на высокое содержание суммы флавоноидов (патент РФ 2640018). Способ получения сухого экстракта листьев гинкго билоба, содержащего от 22,0% по весу до 27,0% по весу флавоноидов в расчете на флавонгликозиды, от 2,6% по весу до 3,2% по весу билобалида, от 2,8% по весу до 3,4% по весу гинкголидов А, В и С и не более 5 м.д. гинкголевых кислот, включает в себя определенные стадии. Получают сухой экстракт, который соответствует всем требованиям Европейской фармакопеи в отношении содержания всех компонентов, в том числе содержания билобалида и гинкголидов А, В, С. Настоящее изобретение относится к усовершенствованному многостадийному способу получения экстракта листьев гинкго билоба для применения в качестве лекарственного средства.

Известно также получение экстракта из листьев гинкго двулопастного (патент РФ 2163254), содержащего флавоноиды и минимальное количество терпенов. Листья гинкго двулопастного экстрагируют 6-12 частями воды, содержащей 60% ацетона, при 50-60°С, и концентрируют раствор, уменьшая содержание ацетона до величины, меньшей чем 3%. Этот раствор охлаждают, и липиды удаляют декантированием. Водный раствор экстрагируют 2-5 частями этилацетата, содержащего 0-20% гептана. Полученный раствор экстрагируют минимальным количеством смеси ацетон - бутанол (0-15% ацетона) в присутствии сульфата аммония. Органическую фазу концентрируют; после добавления этанола раствор вновь концентрируют. После повторного разбавления этанолом раствор охлаждают и отфильтровывают нерастворимый осадок. Полученный раствор концентрируют, сушат и измельчают для получения флавоноидного экстракта в виде однородного порошка. Этот способ принят нами за прототип.

Кроме этого, известно применение ультразвука при получении экстрактов. Например, изобретение по патенту РФ 2446852, предусматривает охлаждение исходного сырья, его измельчение, смешивание с экстрагентом, экстракцию с последующим охлаждением и фильтрованием. Для проведения экстракции смесь исходного сырья с экстрагентом помещают в герметичный контейнер, размещенный в рабочем объеме экстрактора, затем проводят ультразвуковую экстракцию в режиме кавитации в течение 20-40 мин, создавая внутри контейнера избыточное давление 0,3-1,85 МПа. Источник ультразвука располагают снаружи контейнера. Изобретение позволяет упростить получение целевого продукта за счет интенсификации массообменного процесса между экстрагентом и исходным сырьем.

Наиболее близким по технической сущности является способ экстракции из твердого растительного сырья (патент РФ 2104733), согласно которому технический результат достигается в результате воздействия ультразвука с частотой колебаний 20-22 кГц в растворе этанола (20-70%) на предварительно измельченное сырье, с интенсивностью воздействия 1-70 Вт/см² в течение 60-420 с. Главным недостатком прототипа является применение токсичных экстрагентов: ацетона, этилацетата, гептана, бутанола. А также длительный процесс получения экстракта.

Задачей изобретения является интенсификация процесса экстрагирования суммы флавоноидов из листьев Гинкго билоба.

Технический результат изобретения - получение сухого экстракта листьев Гинкго билоба, выражающееся в увеличении содержания биологически активных соединений в конечном продукте, исключение применения токсичных органических растворителей и интенсификации процесса.

Технический результат достигается проведением экстракции листьев гинкго билоба 70% этиловым спиртом под действием ультразвука в следующей последовательности: измельченные листья гинкго билоба (точная масса) засыпают в ультразвуковой экстрактор, заливают 70% спиртом этиловым, тщательно размешивают встроенной в аппарат мешалкой до полного исчезновения воздушных пробок. Герметично закрывают крышку, включают экстрактор на 10 минут. Система охлаждается путем подачи в кожух аппарата холодной воды. Периодически перемешивают. Каждые 10 мин отбирают по 10 мл для проведения анализа. Полученный экстракт сушат.

Изобретение характеризуется следующими примерами.

Пример 1

Лист гинкго билоба, измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. К_п сырья составляет 0,3 см³. Точную навеску (600 г), засыпают через верхний люк в рабочую емкость ультразвукового экстрактора НО-230.00П. на съемную решетку с сеткой (ложное дно) для задержки растительного сырья и разделения зоны экстрагирования. Заливают 3 л 70% спирта этилового. С помощью ручной рамной мешалки, вмонтированной в крышку, тщательно перемешивают для удаления воздуха. Крышку экстрактора закрывают герметично и проводят экстракцию. Смесь обрабатывают ультразвуком с частотой ультразвуковых колебаний 22 кГц. Удельный расход энергии составляет 22,2 Вт/л. При этом систему непрерывно охлаждают холодной водой (20-25°С), подаваемой в охлаждающую рубашку аппарата из водопровода. Кроме того, во время процесса экстракции перемешивание не прекращают. Время экстракции составляет 90 мин.

По истечении времени излучатель отключают, готовый продукт сливают через сливной патрубок, расположенный в нижней части экстрактора. Количество готового продукта составляет 2,75 л.

В готовом экстракте определяют сухой остаток, содержание которого составляет 9,5%, содержание экстрактивных веществ - до 30%, содержание суммы флавоноидов составляет 0,196±0,046% в пересчете на рутин.

Пример 2

Лист гинкго билоба измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. К_п сырья составляет 0,3 см³. Точную навеску (500 г) засыпают через верхний люк в рабочую емкость ультразвукового экстрактора НО-230.00П. на съемную решетку с сеткой (ложное дно) для задержки растительного сырья и разделения зоны экстрагирования. Заливают 2,5 л 60% спирта этилового. С помощью ручной рамной мешалки, вмонтированной в крышку, тщательно перемешивают для удаления воздуха. Крышку экстрактора закрывают герметично и проводят экстракцию. Смесь обрабатывают ультразвуком с частотой ультразвуковых колебаний 22 кГц. Удельный расход энергии составляет 22,2 Вт/л. При этом систему непрерывно охлаждают холодной водой (20-25°С), подаваемой в охлаждающую рубашку аппарата из водопровода. Кроме того, во время процесса экстракции перемешивание не прекращают.

Время экстракции составило 120 мин.

По истечении времени излучатель отключают, готовый продукт сливают через сливной патрубок, расположенный в нижней части экстрактора. Количество готового продукта составляет 2,25 л.

В готовом экстракте определяют сухой остаток, содержание которого составляет 8%, содержание экстрактивных веществ - до 20%, содержание суммы флавоноидов составляет 0,175±0,046% в пересчете на рутин.

Пример 3

Лист гинкго билоба, измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. К_п сырья составляет 0,3 см³. Точную навеску (800 г), засыпают через верхний люк в рабочую емкость ультразвукового экстрактора НО-230.00П. на съемную решетку с сеткой (ложное дно) для задержки растительного сырья и разделения зоны экстрагирования. Заливают 4 л 75% спирта этилового. С помощью ручной рамной мешалки, вмонтированной в крышку, тщательно перемешивают для удаления воздуха. Крышку экстрактора закрывают герметично и проводят экстракцию. Смесь обрабатывают ультразвуком с частотой ультразвуковых колебаний 22 кГц. Удельный расход энергии составляет 22,2 Вт/л. При этом систему непрерывно охлаждают холодной водой (20-25°С), подаваемой в охлаждающую рубашку аппарата из водопровода. Кроме того, во время процесса экстракции перемешивание не прекращают.

Время экстракции составило 90 мин.

По истечении времени излучатель отключают, готовый продукт сливают через сливной патрубок, расположенный в нижней части экстрактора. Количество готового продукта составляет 3,5 л.

В готовом экстракте определяют сухой остаток, содержание которого составляет 9,3%, содержание экстрактивных веществ - до 30%, содержание суммы флавоноидов составляет 0,195±0,046% в пересчете на рутин.

Сушку полученного экстракта проводят с использованием промежуточного этапа сгущения. Спирт отгоняют без участия вакуума. Полученный остаток отстаивают и концентрируют в шаровом вакуум-выпарном аппарате, до содержания влаги около 40-50%. Высушивание полученной массы проводят контактным способом в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50-55°С. Полученную массу превращают в порошок в шаровой мельнице. Оценивают по содержанию суммы флавоноидов, содержание которой в пересчете на рутин составляет 0,260±0,046%.

Таким образом, предлагаемый способ получения сухого экстракта листьев гинко билоба, отличается от известных способов использованием нетоксичного растворителя, скоростью получения экстракта и соблюдением температурного режима экстракции, что позволяет сохранить термолабильные биологически активные вещества.

Claims

Способ получения сухого экстракта листьев гинко билоба, включающий в себя ультразвуковую экстракцию спиртом этиловым 70%, отличающийся тем, что перед экстракцией листья гинкго билоба измельчают до величины частиц размером 2 мм, экстрагируют сырье в ультразвуковом экстракторе при соотношении сырье:экстрагент 1:5, в течение 90 минут с частотой ультразвуковых колебаний 22 кГц при удельном расходе энергии 22,2 Вт/л и непрерывном охлаждении холодной водой, подаваемой в охлаждающую рубашку аппарата; по истечении времени полученный экстракт сливают, удаляют путем перегонки спирт этиловый; остаток концентрируют в шаровом выпарительном аппарате до содержания влаги 40-50%; полученную массу сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 50-55°С, а затем превращают в порошок в шаровой мельнице.