RU2724538C1 - Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum - Google Patents

Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum Download PDF

Info

Publication number
RU2724538C1
RU2724538C1 RU2019134348A RU2019134348A RU2724538C1 RU 2724538 C1 RU2724538 C1 RU 2724538C1 RU 2019134348 A RU2019134348 A RU 2019134348A RU 2019134348 A RU2019134348 A RU 2019134348A RU 2724538 C1 RU2724538 C1 RU 2724538C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solanum tuberosum
growth
bacillus cereus
strain
meristem culture
Prior art date
Application number
RU2019134348A
Other languages
English (en)
Inventor
Николай Олегович Ренёв
Андрей Михайлович Субботин
Сергей Анатольевич Петров
Владимир Алексеевич Мальчевский
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН" (ТюмНЦ СО РАН)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН" (ТюмНЦ СО РАН) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН" (ТюмНЦ СО РАН)
Priority to RU2019134348A priority Critical patent/RU2724538C1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2724538C1 publication Critical patent/RU2724538C1/ru

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01NPRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области сельскохозяйственной биотехнологии. Штамм микроорганизма Bacillus cereus ВКПМ В-12401 может быть использован для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum. Изобретение позволяет повысить выход меристемной культуры Solanum tuberosum.

Description

Изобретение относится к области сельскохозяйственной биотехнологии, а именно к регуляторам роста растений, содержащих микроорганизмы или вещества полученные из них и может быть использовано в биотехнологическом производстве, сельском хозяйстве и биологии.
Современным трендом в растениеводстве является переход к принципиально новым, экологически "чистым" препаратам стимулирующим рост растений. Биотехнологический синтез препаратов стимулирующих рост растений на основе микроорганизмов и их метаболитов являются одним из наиболее перспективных таких направлений.
Известен и описан ряд штаммов стимулирующих рост растений использующихся в растениеводстве.
Известен патент №2495119 «Штамм бактерий Bacillus subtilis 8А в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов» [2]. Штамм бактерий Bacillus subtilis 8А, депонированный в коллекции ГНУ ВНИСХМ РОССЕЛЬХОЗАКАДЕМИИ под номером RCAM 00876. Он обладает ростостимулирующей активностью по отношению к различным сельскохозяйственным культурам.
Известен патент №2551968 «Штамм бактерий Bacillus pumillus А 1.5 в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней, вызываемых фитопатогенными микроорганизмами» [3]. Штамм обладает антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным бактериям и грибам и ростостимулирующей активностью по отношению к растениям. Для обработки семян сельскохозяйственных растений на основе штамма Bacillus pumillus А 1.5 готовится препарат «Эндохит» с титром
бактерий не менее 3×108 КОЕ/мл. Обработка семян производится 10% раствором препарата.
Известен патент №2284353 «Штамм микроорганизмов Bacillus mycoides var. В.А. для получения биопрепарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от болезней», положительно влияющий на рост растений [1]..
Известен патент №2624032 "Штамм микроорганизма Bacillus cereus 875 TS в качестве средства повышения продуктивности растений", повышающий продуктивность зерновых [4].
Задачей изобретения является использование штамма микроорганизма Bacillus cereus в сельском хозяйстве, в качестве средства стимулятора роста меристемной культуры Solanum tuberosum. Поставленная задача решается благодаря тому, что применяется штамм бактерий Bacillus cereus ВКПМ В-12401 в качестве средства для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum.
Штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов ФГУП ГосНИИГенетика за № В-12401 выделен из многолетнемерзлых пород (серого ожелезненного песка ниже торфяного горизонта, глубина места отбора пробы 2 м. ниже берегового растительного покрова) при отборе проб с правого берега реки Чара на 9 км. выше по течению реки от поселка Новая Чара (Читинская обл.), координаты: (N560 45, 688', Е 1180 11, 440').
Штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 характеризуется следующими культурально-морфологическими и физиолого-биохимическими признаками.
Культурально-морфологические особенности штамма Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401. Колонии на ГРМ-агаре матовые, шероховатые, мелкие, с неровным краем. Грамположительные палочки имеют центральное расположение споры.
Культивирование штамма Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 осуществляют в термостате посевом клеток бактерий штрихом в стандартные пробирки на скошенный питательный агар для культивирования микроорганизмов (ГРМ-агар (г. Оболенск, ТУ 9398-020-78095326-2006) или питательный агар для культивирования широкого спектра микроорганизмов (ООО «НПЦ «Биокомпас-С», г. Углич, ТУ 9385-001-64786015-2012)) в аэробных условиях, в термостате при t° от +25 до +36°С 24 часа. Все работы по культивированию осуществляют при соблюдении стерильности.
Физиолого-биохимические особенности штамма Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401: каталаза+, оксидаза+, рост на среде ЖСА+, лецитиназа-, желатиназа-, рост на кровяном агаре+, гемолиз+, рост на среде МПБ+, рост на среде МПА+, анаэробный рост-, рост на цитратной среде+, глюкоза К+, арабиноза К+, ксилоза К+, крахмал-, казеин+, восстановление нитратов+, сероводород-, индол-.
Чувствительность к антибиотикам: штамм Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401. Заявляемый штамм чувствителен к пенициллину, эритромицину, налидиксовой кислоте, линкомицину, устойчив к стрептомицину.
Срок хранения высеянного в пробирки на питательную среду штамма Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 в холодильнике (2°С - 5°С) 2 месяца.
Штамм бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 не является зоопатогенным или фитопатогенным.
Метаболиты штамма бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 были проверены в лабораторных условиях на способность стимулировать рост меристемной культуры Solanum tuberosum, путем ее предварительной обработки их раствором.
Достижение указанного технического результата изобретения проводилось следующим образом.
Культивирование штамма бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 №В-12401 осуществляли по описанной выше методике. Штамм бактерий высевали штрихом в 5 пробирок на скошенный, приготовленный стандартным
методом питательный агар (ГРМ-агар, г. Оболенск, ТУ 9398-020-78095326-2006) и культивировали в термостате 48 часа при t=26°C. Затем производили смыв микроорганизмов из каждой пробирки 5 мл дистиллированной воды. Концентрацию микроорганизмов определяли культуральным методом серийных разведений по количеству КОЕ на агаризованной питательной среде в чашках Петри (Герхард, 1984). После определения количества клеток бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 в исходной маточной суспензии плотность культур доводили до рабочей концентрации в 1х109 м.к./мл (микробных клеток в 1 мл физиологического раствора). Затем суспензию клеток замораживали на 24 часа при Т-15°С после чего ее оттаивали при Т-22°С в течение 18 часов. Цикл замораживания-оттаивания повторяли 3 раза. По нашим экспериментальным данным этот способ увеличивает выход вторичных метаболитов бактерий в водную среду в 2 раза. Общая масса пептидных комплексов в фильтратах определялась биуретовым методом и методом жидкостной препаративной хроматографии на хроматографе фирмы «Gilson») и составляла 200 мкг/мл.
Получали стерильный раствор метаболитов методом фильтрования бактериальной суспензии через фильтр фирмы «Millipor» с диаметром пор 0,22 мкм (Durapore membrane filters, type 0.22 mm GV). Полученные фильтраты, содержащие метаболиты, использовали для дальнейшей работы. Для проведения исследований по влиянию метаболитов бактерий на развитие меристемных растений картофеля их в количестве (дозе) 250 мкл. (50 мкг по пептидным комплексам) раскапывали (наносили) на поверхность питательной среды Мурасиге-Скуга, разлитую в пробирки по 5 мл. В контрольном варианте, в том же объеме, добавляли отфильтрованный смыв с поверхности питательного агара для культивирования микроорганизмов. Через 60 минут в эти пробирки начинали высаживать микрочеренки меристемных растений Solanum tuberosum.
Исследование влияния микробных метаболитов проводилось на меристемных культурах Solanum tuberosum сорта «Жуковский ранний»,
селекции Всероссийского научно-исследовательского института картофельного хозяйства имени А.Г. Лорха. Микроклоны получали, вырезая участок побега каллусных растений с пазушной почкой размером 15 мм, с последующим их культивированием на среде Мурасиге-Скуга без гормонов. На поверхность среды, после высадки микрочеренков, добавляли по 250 мкл раствора бактериальных метаболитов (50 мкг по пептидным комплексам). В контрольном варианте, в том же объеме, добавляли отфильтрованный смыв с поверхности питательного агара для культивирования микроорганизмов. Оценка результатов эксперимента проводилась через 10, 20 и 30 суток. Критериями оценки являлись морфометрические показатели меристемной культуры Solanum tuberosum: общая масса и длина корней, а так же площадь корневой системы и листовой поверхности.
Статистический обсчет материала проводился согласно международным требованиям, предъявляемым к обработке результатов данных научных исследований, при помощи программы для персональных компьютеров «SPSS 11,5 for Windows».
По сравнению с контрольной группой меристемных растений на всех этапах оценки в динамике эксперимента меристемные растения предварительно обработанные раствором метаболитами штамма бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 обладали статистически достоверно (р<0,05) более высокими значениями общей массы и длины корней, а так же площадью корневой системы и листовой поверхности. Данные факты однозначно указывают на способность метаболитов штамма бактерий Bacillus cereus 9-08-СН9 № В-12401 в лабораторных условиях стимулировать, при предварительной обработке их раствором, рост меристемной культуры Solanum tuberosum.
Технико-экономическая эффективность предлагаемого технического решения, обусловлена ускорением роста общей массы и длины корней, а так же площади корневой системы и листовой поверхности меристемной
культуры Solanum tuberosum, что безусловно существенно сокращает сроки ее производства и увеличивает его экономическую эффективность.
Источники информации
1. Патент РФ №2005113784/13, 05.05.2005. Иванов А.А., Темнова О.В., Быкова Н.В., Орлова Н. А. Штамм микроорганизмов Bacillus mycoides var. В.А. для получения биопрепарата, используемого для стимуляции роста и защиты растений от болезней // Патент России №2284353. 2006. Бюл. №27.
2. Патент РФ №2012151104/10, 29.11.2012. Чеботарь В.К., Михеева М.А., Чижевская Е.П., Щербаков А.В., Петров В.Б, Быкова Н.В., Орлова Н.A., Темнова О.В. Штамм бактерий Bacillus subtilis 8А в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от фитопатогенных микроорганизмов // Патент России №2495119. 2013. Бюл. №28.
3. Патент РФ №2013136149/10, 01.08.2013. Чеботарь В.К., Ерофеев С.B., Щербаков А.В., Чижевская Е.П. Штамм бактерий Bacillus pumillus А 1.5, в качестве средства повышения продуктивности растений и их защиты от болезней, вызываемых фитопатогенными микроорганизмами // Патент России №2551968. 2015. Бюл. №16.
4. Патент РФ №2016114388, 13.04.2016. Субботин А.М, Нарушко М.В., Петров С.А., Симонова Е.О., Доманская О.В. Штамм микроорганизма Bacillus cereus 875 TS в качестве средства повышения продуктивности растений // Патент России №2624032. 2017. Бюл. №19.

Claims (1)

  1. Применение штамма бактерий Bacillus cereus ВКПМ В-12401 в качестве средства для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum.
RU2019134348A 2019-10-25 2019-10-25 Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum RU2724538C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019134348A RU2724538C1 (ru) 2019-10-25 2019-10-25 Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019134348A RU2724538C1 (ru) 2019-10-25 2019-10-25 Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2724538C1 true RU2724538C1 (ru) 2020-06-23

Family

ID=71136032

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019134348A RU2724538C1 (ru) 2019-10-25 2019-10-25 Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2724538C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113308412A (zh) * 2021-07-09 2021-08-27 清华大学 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2626543C2 (ru) * 2015-11-09 2017-07-28 Общество с ограниченной ответственностью "Промышленные Инновации" Штамм бактерий Paenibacillus mucilaginosus, способ стимуляции роста и защиты растений от болезней и применение штамма бактерий Paenibacillus mucilaginosus в качестве удобрения и агента биологического контроля (противопатогенного средства) в профилактике и/или лечении заболевания растений
RU2673155C1 (ru) * 2017-11-08 2018-11-22 Общество с ограниченной ответственностью "Исследовательский Центр "ФитоИнженерия" Штамм Bacillus amyloliquefaciens, обладающий антибактериальной и фунгистатической активностью, и микробиологический препарат на его основе против болезни растения, вызываемой фитопатогенным микроорганизмом

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2626543C2 (ru) * 2015-11-09 2017-07-28 Общество с ограниченной ответственностью "Промышленные Инновации" Штамм бактерий Paenibacillus mucilaginosus, способ стимуляции роста и защиты растений от болезней и применение штамма бактерий Paenibacillus mucilaginosus в качестве удобрения и агента биологического контроля (противопатогенного средства) в профилактике и/или лечении заболевания растений
RU2673155C1 (ru) * 2017-11-08 2018-11-22 Общество с ограниченной ответственностью "Исследовательский Центр "ФитоИнженерия" Штамм Bacillus amyloliquefaciens, обладающий антибактериальной и фунгистатической активностью, и микробиологический препарат на его основе против болезни растения, вызываемой фитопатогенным микроорганизмом

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
МАСЛАК Д.В., ЗУБКЕВИЧ О.Н. и др. Способность регулятора роста растений Гулливер защищать картофель (Solanum tuberosum) от фитопатогенов, *
МАСЛАК Д.В., ЗУБКЕВИЧ О.Н. и др. Способность регулятора роста растений Гулливер защищать картофель (Solanum tuberosum) от фитопатогенов, Труды БГУ, 2013, Т. 8, ч. 2, с.118-122. *
ПЕТРОВ С.А. и др. Нефтезагрязнение земель криолитозоны и разработка способа их биологической рекультивации, Известия Самарского научного центра РАН, 2016, Т 18, N 2(3), с.783-788. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113308412A (zh) * 2021-07-09 2021-08-27 清华大学 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺
CN113308412B (zh) * 2021-07-09 2022-03-11 清华大学 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111040976B (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
Kim et al. Effect of the microalga Chlorella fusca CHK0059 on strawberry PGPR and biological control of Fusarium wilt disease in non-pesticide hydroponic strawberry cultivation
CN110200016B (zh) 防治马铃薯疮痂病并能促进马铃薯生长的链霉菌菌株pbsh9及其应用
CN112375688B (zh) 一种球孢白僵菌及其在生物防治玉米大斑病中的应用
CN111592987B (zh) 一株淡紫拟青霉菌及其在抑制植物生长中的应用
US11576385B2 (en) Method for increasing wheat yield and preventing wheat diseases and use thereof
CN102634551B (zh) 一种海藻附生真菌氯代缩酚酸环醚类化合物及其制备和应用
RU2724538C1 (ru) Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum
RU2634415C1 (ru) Штамм гриба Trichoderma asperellum для получения биопрепарата комплексного действия для растениеводства
CN112602717A (zh) 一种防控稻瘟病菌的药物
KR101756683B1 (ko) 바실러스 아밀로리퀘파시엔스 균주, 이를 포함하는 미생물 제제 및 이를 포함하는 생물 농약
KR20020031961A (ko) 길항미생물인 스트렙토마이세스 카슈겐시스 지비에이-0927균주, 이를 포함하는 미생물 제제, 및 이를 이용한 난시들음병 및 오이 흑성병 병해를 방제하는 방법
RU2409660C1 (ru) Штамм бактерий bacillus mucilaginosus, обладающий антагонистической активностью по отношению к фитопатогенным микроорганизмам и способностью трансформировать труднодоступный для растений фосфор, и его применение
RU2624032C1 (ru) Штамм микроорганизма Bacillus cereus 875 TS в качестве средства повышения продуктивности растений
CN108587969B (zh) 可防治棉花黄萎病的大丽轮枝菌的菌株hcx-01的制备及其应用
CN108559716B (zh) 一株防治辣椒疫病的高效生防菌株及其应用
RU2722670C1 (ru) Средство стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum
RU2408722C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus mucilaginosus Bac 1208, ОБЛАДАЮЩИЙ ПОВЫШЕННЫМИ ФОСФОР И КАЛИЙ МОБИЛИЗУЮЩИМИ СВОЙСТВАМИ И УДОБРЕНИЕ НА ЕГО ОСНОВЕ
CN107142211B (zh) 一种杀根结线虫的桔绿木霉Snef1910及代谢产物及应用
CN109077068A (zh) 一种真菌链格孢在防控外来入侵杂草黄花刺茄中的应用
RU2732627C1 (ru) Средство для повышения холодоустойчивости и продуктивности растений
CN110205262B (zh) 类球红细菌a2菌株、生防菌剂及其制备方法和应用
RU2607028C1 (ru) Штамм микроорганизмов Achromobacter spanius 10-50-TS2 в качестве средства повышения устойчивости растений к хлоридному засолению
CN115011645B (zh) 吡啶甲酸在制备防治黄单胞菌病害的生物农药上的应用
RU2627608C1 (ru) Штамм микроорганизмов Bacillus megaterium 2-06-TS1 в качестве активатора фотосинтеза и энергии прорастания растений