CN113308412A - 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺 - Google Patents

一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN113308412A
CN113308412A CN202110780706.4A CN202110780706A CN113308412A CN 113308412 A CN113308412 A CN 113308412A CN 202110780706 A CN202110780706 A CN 202110780706A CN 113308412 A CN113308412 A CN 113308412A
Authority
CN
China
Prior art keywords
assisting
potato
corrosion
bacillus cereus
leaves
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110780706.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113308412B (zh
Inventor
徐粲然
王建凤
周长勇
王兴涛
卢滇楠
孙厚真
邵晴晴
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tsinghua University
Original Assignee
Tsinghua University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Tsinghua University filed Critical Tsinghua University
Priority to CN202110780706.4A priority Critical patent/CN113308412B/zh
Publication of CN113308412A publication Critical patent/CN113308412A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113308412B publication Critical patent/CN113308412B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F17/00—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation
    • C05F17/20—Preparation of fertilisers characterised by biological or biochemical treatment steps, e.g. composting or fermentation using specific microorganisms or substances, e.g. enzymes, for activating or stimulating the treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05G—MIXTURES OF FERTILISERS COVERED INDIVIDUALLY BY DIFFERENT SUBCLASSES OF CLASS C05; MIXTURES OF ONE OR MORE FERTILISERS WITH MATERIALS NOT HAVING A SPECIFIC FERTILISING ACTIVITY, e.g. PESTICIDES, SOIL-CONDITIONERS, WETTING AGENTS; FERTILISERS CHARACTERISED BY THEIR FORM
    • C05G3/00—Mixtures of one or more fertilisers with additives not having a specially fertilising activity
    • C05G3/80—Soil conditioners
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
    • Y02W30/00—Technologies for solid waste management
    • Y02W30/40—Bio-organic fraction processing; Production of fertilisers from the organic fraction of waste or refuse

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Soil Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本申请涉及马铃薯茎叶处理的领域，具体公开了一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺。一种蜡样芽孢杆菌，拉丁名为Bacillus cereus，命名为P‑2，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22630。马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，包括以下步骤：S1、清理地膜，粉碎茎叶；S2、喷洒助腐菌剂，助腐菌剂包含助腐菌液，助腐菌液中的助腐菌包含蜡样芽孢杆菌P‑2；S3、旋耕覆土，原位腐熟。本申请的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺具有提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的优点。

Description

一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺
技术领域
本申请涉及马铃薯茎叶处理的领域，更具体地说，它涉及一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺。
背景技术
马铃薯作为我国小麦、玉米、水稻三大主粮的补充，逐渐成为第四大主粮作物。马铃薯的种植已成为解决粮食问题以及农民增收的一个重要途径。
但是马铃薯收获后，茎叶处理成了当地农民的一个头疼问题。为不影响下季其它农作物的播种，大部分农民将马铃薯茎叶从田间移至路边，然后弃之不用，使其自然风干或者焚烧，这种处理方式造成了马铃薯生物资源的极大浪费，不利于农业可持续发展。
发明内容
为了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展，本申请提供一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺。
本申请提供了一种蜡样芽孢杆菌，拉丁名为Bacillus cereus，命名为P-2，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.22630。
所述的蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus P-2，保藏日期为2021年5月28日，含有如SEQ IDNO.1所示的基因序列。
本申请提供的一种马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺采用如下的技术方案：
一种马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，包括以下步骤：
S1、清理地膜，粉碎茎叶；
S2、喷洒助腐菌剂，每千克茎叶喷洒的助腐菌剂的体积为0.05～0.08L，所述助腐菌剂包含助腐菌液，所述助腐菌液中的助腐菌的活菌数为15～220亿/mL，所述助腐菌包含权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌P-2；
S3、旋耕覆土，原位腐熟。
通过采用上述技术方案，先将马铃薯茎叶中掺杂的地膜清理干净，以提高后续助腐菌剂喷洒的均匀性，同时可以环保腐熟还田，减少地膜对土壤结构的破坏情况，茎叶粉碎后增大了与助腐菌剂的接触面积，提高了腐熟效率；之后喷洒助腐菌剂，均匀地喷洒在粉碎后的茎叶上，助腐菌剂中包含助腐菌液，由于助腐菌液中的助腐菌包含蜡样芽孢杆菌P-2，能有效地降解马铃薯茎叶中的纤维素、木质素和蛋白质等；之后通过旋耕覆土，使助腐菌在黑暗阴湿的环境下生活繁殖，加速马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，整个工艺结束后，马铃薯茎叶便可以在原位进行腐熟，既不影响下一季其它农作物的播种，还增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
可选的，所述助腐菌还包含黑曲霉和/或解淀粉芽孢杆菌。
通过采用上述技术方案，蜡样芽孢杆菌P-2与黑曲霉复配，蜡样芽孢杆菌P-2与解淀粉芽孢杆菌复配，以及蜡样芽孢杆菌P-2、黑曲霉和解淀粉芽孢杆菌复配时，均对蜡样芽孢杆菌P-2降解马铃薯茎叶的过程起到了不同程度的增强效果，进一步增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而有效地改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
可选的，所述助腐菌液由体积份比例为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2的菌液与解淀粉芽孢杆菌的菌液混合而成或由菌种数为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌混合培养而成。
通过采用上述技术方案，当助腐菌液中，由蜡样芽孢杆菌P-2的菌液与解淀粉芽孢杆菌的菌液按照体积份比例为1:1混合或由菌种数为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌混合培养制得时，助腐菌剂对马铃薯茎叶的降解效果优异，且对土壤中的速效钾、有效磷增加量较多，从而有效地改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
可选的，所述助腐菌液的生产工艺为：A1、菌种活化；A2、摇瓶接种；A3、种子罐培养；A4、发酵罐培养。
通过采用上述技术方案，由于先对菌种进行活化，使菌种恢复活性，然后对恢复活性的菌种进行摇瓶接种，使菌种进行生长和繁殖，再将摇瓶中的菌液放到种子罐中培养，提供更大的生长范围和更多的营养物质，菌种迅速增殖，浓度增大，最后放入发酵罐中培养，菌种继续增殖，便可得到所需要的浓度的菌液。
可选的，所述助腐菌剂还包含玉米浆液，所述助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为8：（1～3），所述玉米浆液的生产工艺为：每1L水中加入100g玉米浆干粉，搅拌至均匀，并调节pH至中性。
通过采用上述技术方案，玉米浆液对助腐菌液起到一定的分散作用，助腐菌剂喷洒到马铃薯茎叶上之后，玉米浆液降低了马铃薯茎叶的表面张力，助腐菌液迅速润湿马铃薯茎叶，使得助腐菌对马铃薯茎叶产生降解作用；同时，玉米浆液为助腐菌提供充分的营养物质，促进了助腐菌的增殖，为马铃薯茎叶的原位腐熟奠定了基础，提高了助腐菌对马铃薯茎叶的降解效率，促进马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
可选的，所述玉米浆液的生产工艺中加入碳酸钠调节pH至中性。
通过采用上述技术方案，采用碳酸钠调节玉米浆液的pH，在起到pH调节作用的同时，助腐菌剂降解马铃薯茎叶产生的酸性物质与碳酸钠反应生成二氧化碳，在覆盖的土壤中形成气泡，气泡破灭后使覆盖的土壤更加疏松，提高了覆盖的土壤的透气率，氧气逐渐进入到被处理的马铃薯茎叶处，进一步促进了助腐菌的生长和繁殖，从而提高了助辅菌剂对马铃薯茎叶的降解效果，促进马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
可选的，所述种子罐包括罐体和火焰接种装置，所述罐体上设置有进料筒，所述进料筒与罐体内部连通，所述进料筒远离罐体的一端开设有进料口，所述进料筒上设置有用于堵塞进料口的筒盖，所述火焰接种装置包括接种环和点火机构，所述接种环同轴套设于进料筒的外壁上，所述接种环上沿其周向开设有用于盛装酒精的酒精槽，所述筒盖上设置有灭火环，当所述进料口被筒盖封堵时，所述灭火环与酒精槽插接配合，所述点火机构包括主动火石、被动火石、导气管和燃气瓶，所述主动火石设置于灭火环上，所述被动火石设置于接种环靠近酒精槽的侧壁上，当所述灭火环与酒精槽脱离时，所述主动火石与被动火石可抵接，所述燃气瓶设置于罐体的外壁上，所述燃气瓶通过导气管与酒精槽连通，所述导气管上设置有用于控制燃气流通的控制阀。
通过采用上述技术方案，采用火焰接种装置，在向种子罐内倒入菌液前，将筒盖从进料口上取下，同时通过控制阀控制燃气通过导气管流通至酒精槽中，取筒盖的过程中，氧气进入酒精槽内，同时主动火石与被动火石抵接后摩擦产生火花，火花点燃燃气后产生火焰点燃酒精槽内的酒精，即可在进料口周围布满火焰，再倒入菌液，可以减少菌液倒入种子罐的过程中空气中的杂菌，从而降低了杂菌对菌液的污染，减少了杂菌对助腐菌增殖的抑制作用，进而提高了助腐菌剂对马铃薯茎叶的降解效果。
可选的，所述筒盖上设置有密封塞，所述密封塞与进料口插接配合。
通过采用上述技术方案，密封塞的设置提高了筒盖与进料口的密封性，进一步减少了菌液被污染的情况。
可选的，所述控制阀上设置有用于控制控制阀启闭的接触开关，所述筒盖上设置有压板，所述压板与接触开关可抵接。
通过采用上述技术方案，由于采用接触开关与压板可抵接，筒盖与进料筒连接和拆卸的过程中便可以实现对燃气流通的控制，工作人员操作更省力。
综上所述，本申请具有以下有益效果：
1、由于本申请先将马铃薯茎叶中掺杂的地膜清理干净，茎叶粉碎后增大了与助腐菌剂的接触面积，之后喷洒助腐菌剂，均匀地喷洒在粉碎后的茎叶上，助腐菌包含蜡样芽孢杆菌P-2，能有效地降解马铃薯茎叶中的纤维素、木质素和蛋白质等；之后通过旋耕覆土，使助腐菌在黑暗阴湿的环境下生活繁殖，加速马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，整个工艺结束后，马铃薯茎叶便可以在原位进行腐熟，既不影响下一季其它农作物的播种，还增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
2、本申请中优选采用由蜡样芽孢杆菌P-2的菌液与解淀粉芽孢杆菌的菌液按照体积份比例为1:1混合或由菌种数为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌混合培养制得时，助腐菌剂对马铃薯茎叶的降解效果优异，且对土壤中的速效钾、有效磷增加量较多，从而有效地改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
3、本申请采用玉米浆液，对助腐菌液起到一定的分散作用，降低了马铃薯茎叶的表面张力，助腐菌液迅速润湿马铃薯茎叶，使得助腐菌对马铃薯茎叶产生降解作用；同时，玉米浆液为助腐菌提供充分的营养物质，促进了助腐菌的增殖，为马铃薯茎叶的原位腐熟奠定了基础，提高了助腐菌对马铃薯茎叶的降解效率，促进马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
附图说明
图1是本申请实施例2-15中的种子罐的整体结构示意图；
图2是本申请实施例2-15中的火焰接种装置的局部结构示意图。
附图标记说明：100、罐体；110、进料筒；111、进料口；200、筒盖；210、灭火环；220、密封塞；230、连接杆；240、压板；300、火焰接种装置；310、接种环；311、酒精槽；320、点火机构；321、主动火石；322、被动火石；323、导气管；324、燃气瓶；325、控制阀；326、接触开关。
具体实施方式
以下结合附图1-2和实施例对本申请作进一步详细说明。予以特殊说明的是：以下实施例中未注明具体条件者按照常规条件或制造商建议的条件进行，以下实施例中所用原料除特殊说明外均可来源于普通市售。
黑曲霉为保藏编号为CGMCC No.11113的黑曲霉（Aspergillus niger）。
解淀粉芽孢杆菌为保藏编号为CGMCC No.10126的解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliquefaciens）。
以下实施例中的马铃薯种植地块选取山东省枣庄市山亭区桑村镇苏庄村马铃薯种植地块，由沃地丰生物肥料科技（山东）股份有限公司进行实施。
实施例
实施例1
菌株筛选：
1、制备培养基：
无机盐液体培养基：硫酸铵2g，磷酸氢二钾1g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁0.4g，溶解于2000mL去离子水中，121℃灭菌15min。
LB液体培养基：酵母粉0.5g，氯化钠1g，蛋白胨1g，溶解于100mL去离子水中，121℃灭菌15min。
PDA液体培养基：马铃薯浸出粉0.3g，葡萄糖2g，溶解于100mL去离子水中，121℃灭菌15min。
2、土壤环流驯化法筛选菌株：
称取200g土壤与10g马铃薯茎段放入循环流化床内，底部放入四层纱布。将1500mL经过121℃灭菌15min的无机盐液体培养基随蠕动泵抽入流化床，蠕动泵转速为170rpm，气泵排气量为2L/min，随时向流化床中补给剩余的无机盐液体培养基溶液，每隔两天取环流液100μL作为样品，分别稀释100倍、104倍、106倍、108倍，各取100μL分别涂布在LB液体培养基和PDA液体培养基上，放置在30℃恒温箱中培养。
挑选混合菌株中的单一菌落，进行划线分离提纯，经过多次分离纯化后得到单一菌株，剔除生长较慢且易染菌的菌株后，共筛选得到4株细菌，2株真菌。
3、马铃薯茎叶降解效果验证:
取马铃薯茎切成21个2.5cm的小段，分别放入装有土壤的50mL三角瓶中，分为7个实验组，每个实验组做3个平行实验，6个实验组依次加入不同的菌液，每个三角瓶中加入2mL菌液，用土覆盖，剩余的实验组不加菌，作为空白对照组。
未降解前的马铃薯茎段呈鲜绿色，木质素外壳与内部纤维素连接紧密，7天后挖出各实验组的马铃薯茎观察其腐熟程度，其中P-2对马铃薯茎的腐熟效果最好，马铃薯茎的内部纤维素被完全降解，只余部分木质素外壳。
4、菌种鉴定：
对菌株P-2进行DNA测序，测得菌株P-2为蜡样芽孢杆菌，进行保藏。
实施例2
助腐菌液的制备：
A1、菌种活化：
（1）配置营养肉汁琼脂培养基：将10g蛋白胨、3g牛肉膏、5g氯化钠、20g琼脂与1L蒸馏水混合后，pH调至7.0，在121℃下、压力为0.1Mpa的环境中灭菌30min，倒在培养皿中冷却凝固，备用。
（2）取实施例1保藏的蜡样芽孢杆菌P-2作为助腐菌，恢复到室温状态。
（3）在无菌环境下，通过划线接种方式将蜡样芽孢杆菌P-2接种到营养肉汁琼脂培养基上，34℃恒温下培养出单菌落。
A2、摇瓶接种：
（1）配置液体营养肉汁培养基：将10g蛋白胨、3g牛肉膏、5g氯化钠与1L蒸馏水混合后，pH调至7.0，在121℃下、压力为0.1Mpa的环境中灭菌30min，降温至34℃，倒在摇瓶中备用。
（2）在无菌环境下，将A1中活化的蜡样芽孢杆菌P-2的单菌落接种至盛有液体营养肉汁培养基的摇瓶中，在34℃下恒温摇床，速率为180r/min，培养42h，得到菌液。
A3、种子罐培养：
向容积为5L的种子罐中投入50g蛋白胨、15g牛肉膏、25g氯化钠，加蒸馏水至5L，pH调至7.0，在121℃、0.1Mpa的环境中灭菌30min，降温至34℃，罐压调整至0.01Mpa，将S2中培养的菌液转移至种子罐中，保持温度为34℃，转速为150r/min，通气量系数比为1:0.8，培养24h，得到种子罐培养后的菌液。
参照图1和图2，种子罐包括罐体100，罐体100的顶部设置有与罐体100内部连通的进料筒110，进料筒110远离罐体100的一端开设有进料口111，进料口111与罐体100内部连通，且进料筒110上设置有筒盖200，筒盖200上一体成型有密封塞220，密封塞220与进料口111插接配合，可以堵塞进料口111，提高种子罐的密封性。
罐体100上还设置有火焰接种装置300，火焰接种装置300包括同轴套设于进料筒110外壁上的接种环310，接种环310远离罐体100的一侧沿其周向开设有酒精槽311，酒精槽311可以盛装点火用的酒精。筒盖200的外周同轴一体成型有灭火环210，当进料口111被筒盖200封堵时，灭火环210与酒精槽311插接配合，可以灭掉酒精槽311中的火焰。
火焰接种装置300还包括点火机构320，点火机构320包括嵌设于灭火环210上的主动火石321，接种环310靠近酒精槽311的侧壁上嵌设有被动火石322，当灭火环210与酒精槽311插接配合时，主动火石321位于被动火石322靠近酒精槽311槽底的一侧。当灭火环210与酒精槽311脱离时，主动火石321与被动火石322可抵接，在主动火石321和被动火石322的摩擦作用下产生火花。
罐体100的外壁上还螺栓连接有燃气瓶324，燃气瓶324连通有导气管323，导气管323远离燃气瓶324的一端穿过接种环310的侧壁与酒精槽311连通，导气管323上连接有控制阀325，以控制燃气的流通，控制阀325上设置有接触开关326，以控制控制阀325的启闭，筒盖200上通过连接杆230焊接有压板240。当筒盖200堵塞进料口111时，即灭火环210与酒精槽311插接时，压板240与接触开关326抵接，接触开关326控制控制阀325关闭，燃气不流通；当筒盖200与进料口111脱离时，即灭火环210与酒精槽311脱离时，压板240与接触开关326脱离，接触开关326控制控制阀325开启，燃气向酒精槽311内流通。
本申请实施例一种种子罐的实施原理为：工作人员向种子罐中转移菌液前，首先将密封塞220从进料口111中拔出来，使筒盖200脱离进料口111，灭火环210与酒精槽311脱离，压板240与接触开关326脱离，接触开关326控制控制阀325开启，燃气由燃气瓶324向酒精槽311内流通，灭火环210与酒精槽311脱离的过程中，主动火石321与被动火石322抵接，在主动火石321和被动火石322的摩擦作用下产生火花，火花点燃流通至酒精槽311内的燃气形成火焰，火焰迅速点燃酒精槽311内的酒精，火焰沿着进料筒110的周向燃起，杀灭进料口111附近的杂菌，然后便可以向种子罐找那个转移菌液，减少了菌液转移过程中杂菌的影响。当菌液转移完毕后，将密封塞220与进料口111插接配合，进料口111重新被封堵，同时压板240与接触开关326抵接，接触开关326控制控制阀325关闭，燃气不再向酒精槽311内流通，降低了酒精槽311内产生火焰的可能，同时灭火环210与酒精槽311插接配合，隔绝酒精槽311与外界空气的接触，火焰便被灭掉。
A4、发酵罐培养：
向容积为100L的发酵罐中投入豆饼粉4kg、花生饼粉2.5kg、玉米淀粉2.5kg、鱼粉1.5kg、磷酸二氢钾0.6kg、 蛋白胨1kg、酵母粉0.5kg、牛肉膏0.7kg、葡萄糖0.8kg、硫酸亚铁1kg，加蒸馏水补足至100L，pH调至7.0，在灭菌温度为121℃下蒸汽灭菌35分钟，灭菌压力为0.12Mpa，降温至34℃，将S3种子罐培养后的菌液转移至发酵罐中，保持34℃，180r/min ,发酵3天，得到发酵后的菌液，备用。
马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，包括以下步骤：
S1、选取已经收获了马铃薯的17㎡亩产3000公斤茎叶的马铃薯种植地块，清理地膜，粉碎茎叶。
S2、取发酵后的菌液进行稀释，得到活菌数为15亿/mL的助腐菌液，即得到助腐菌剂，向S1粉碎的茎叶上喷洒助腐菌剂，每千克茎叶喷洒的助腐菌剂的体积为0.05L。
S3、采用旋耕机旋耕覆土，马铃薯茎叶在助腐菌剂的作用下原位腐熟。
实施例3
本实施例与实施例2的区别在于：
S2、取发酵后的菌液进行稀释，得到蜡样芽孢杆菌P-2的活菌数为50亿/mL的助腐菌液，即得到助腐菌剂，向S1粉碎的茎叶上喷洒助腐菌剂，每千克茎叶喷洒的助腐菌剂的体积为0.065L。
实施例4
本实施例与实施例2的区别在于：
S2、取发酵后的菌液进行稀释，得到蜡样芽孢杆菌P-2的活菌数为220亿/mL的助腐菌液，即得到助腐菌剂，向S1粉碎的茎叶上喷洒助腐菌剂，每千克茎叶喷洒的助腐菌剂的体积为0.05L。
实施例5
本实施例与实施例3的区别在于：助腐菌包含蜡样芽孢杆菌P-2和黑曲霉，助腐菌液由体积份比例为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2的菌液与黑曲霉的菌液混合而成。
黑曲霉的菌液按照如下步骤培养而成：
A1、菌种活化：
（1）配置马铃薯葡萄糖琼脂培养基：取去皮的马铃薯块200g，切块后加蒸馏水1L煮沸30min，滤去马铃薯块，加蒸馏水将滤液补足至1L，加入20g葡萄糖完全溶解，pH自然，在121℃下、压力为0.1Mpa的环境中灭菌30min，倒在培养皿中冷却凝固，备用。
（2）取黑曲霉，恢复到室温状态。
（3）在无菌环境下，通过划线接种方式将黑曲霉接种到马铃薯葡萄糖培养基上，30℃恒温下培养出单菌落。
A2、摇瓶接种：
（1）配置马铃薯葡萄糖培养基：取去皮的马铃薯块200g，切块后加蒸馏水1L煮沸30min，滤去马铃薯块，加蒸馏水将滤液补足至1L，加入20g葡萄糖完全溶解，pH自然，在121℃下、压力为0.1Mpa的环境中灭菌30min，降温至30℃，倒在摇瓶中备用。
（2）在无菌环境下，将A1中活化的黑曲霉的单菌落接种至盛有马铃薯葡萄糖培养基的摇瓶中，在30℃下恒温摇床，速率为180r/min，培养48h，当摇瓶内出现菌丝密度大，菌丝球明显不浑浊即可得到菌液。
A3、种子罐培养：
取去皮的马铃薯块1kg，切块后加蒸馏水5L煮沸30min，滤去马铃薯块，加蒸馏水将滤液补足至5L。向容积为5L的种子罐中投入100g葡萄糖，加马铃薯块煮沸后的滤液补足至5L，使葡萄糖完全溶解，pH自然。在121℃、0.1Mpa的环境中灭菌30min，降温至30℃，罐压调整至0.01Mpa，将S2中培养的菌液转移至种子罐中，保持温度为30℃，转速为150r/min，通气量系数比为1:0.8，培养24h，得到种子罐培养后的菌液。
种子罐结构与实施例3中的种子罐相同。
A4、发酵罐培养：
向容积为100L的发酵罐中投入豆饼粉4kg、花生饼粉2.5kg、玉米淀粉2.5kg、鱼粉1.5kg、磷酸二氢钾0.6kg、 蛋白胨1kg、酵母粉0.5kg、牛肉膏0.7kg、葡萄糖0.8kg、硫酸亚铁1kg，加蒸馏水补足至100L，pH自然，在灭菌温度为121℃下蒸汽灭菌35分钟，灭菌压力为0.12Mpa，降温至30℃，将S3种子罐培养后的菌液转移至发酵罐中，保持30℃，180r/min ,发酵3天，得到发酵后的菌液，备用。
实施例6
本实施例与实施例3的区别在于：助腐菌包含蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌，助腐菌液由体积份比例为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2的菌液与解淀粉芽孢杆菌的菌液混合而成。
解淀粉芽孢杆菌的菌液的培养过程与蜡样芽孢杆菌P-2的菌液的培养过程一致。
实施例7
本实施例与实施例3的区别在于：助腐菌包含蜡样芽孢杆菌P-2、黑曲霉和解淀粉芽孢杆菌，助腐菌液由体积份比例为1：1：1的蜡样芽孢杆菌P-2的菌液、黑曲霉的菌液和解淀粉芽孢杆菌的菌液混合而成。
黑曲霉的菌液的培养过程详见实施例4。
解淀粉芽孢杆菌的菌液的培养过程与蜡样芽孢杆菌P-2的菌液的培养过程一致。
实施例8
本实施例与实施例2的区别在于：助腐菌剂包含助腐菌液和玉米浆液，其中助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为8：1。
玉米浆液的生产工艺如下：每1L蒸馏水中添加100g玉米浆干粉，搅拌至均匀，并加入碳酸钠调节pH至中性，得到玉米浆液。
实施例9
本实施例与实施例3的区别在于：助腐菌剂包含助腐菌液和玉米浆液，其中助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为4：1。
玉米浆液的生产工艺详见实施例7。
实施例10
本实施例与实施例4的区别在于：助腐菌剂包含助腐菌液和玉米浆液，其中助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为8:3。
玉米浆液的生产工艺详见实施例7。
实施例11
本实施例与实施例5的区别在于：助腐菌剂包含助腐菌液和玉米浆液，其中助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为4:1。
玉米浆液的生产工艺详见实施例7。
实施例12
本实施例与实施例6的区别在于：助腐菌剂包含助腐菌液和玉米浆液，其中助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为4:1。
玉米浆液的生产工艺详见实施例7。
实施例13
本实施例与实施例7的区别在于：助腐菌剂包含助腐菌液和玉米浆液，其中助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为4:1。
玉米浆液的生产工艺详见实施例7。
实施例14
本实施例与实施例12的区别在于：助腐菌液为菌种数为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌混合培养而成。
实施例15
本实施例与实施例12的区别在于：玉米浆液的生产工艺中加入氢氧化钠调节pH。
实施例16
本实施例与实施例3的区别在于：本实施例中采用的种子罐上无火焰接种装置300。
对比例
对比例1
选取已经收获了马铃薯的17㎡亩产3000公斤茎叶的马铃薯种植地块，清理地膜，粉碎茎叶，将茎叶收集后进行焚烧处理。
对比例2
马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，包括以下步骤：
S1、选取已经收获了马铃薯的17㎡亩产3000公斤茎叶的马铃薯种植地块，清理地膜，粉碎茎叶。
S2、采用旋耕机旋耕覆土，马铃薯茎叶原位自然腐熟。
性能检测试验
检测方法
1、对实施例2-16和对比例2处理马铃薯种植地块的腐熟情况进行检测，判定助辅菌剂与马铃薯茎叶混合后升温后降至常温为腐熟结束，助辅菌剂与马铃薯茎叶混合后达到55℃所用时间和整个腐熟周期的检测结果详见表1。
2、根据“LY/T1121.7-2014”的检测方法对实施例2-16和对比例1-2处理后的马铃薯种植地块进行土壤中的有效磷含量的检测，检测结果详见表1。
3、根据“NY/T889-2004”的检测方法对实施例2-16和对比例1-2处理后的马铃薯种植地块进行土壤中的有效磷含量的检测，检测结果详见表1。
表1
实施例/对比例 有效磷mg/kg 速效钾mg/kg 腐熟周期/天 达到55℃所用时间/小时
实施例2 62.13 212.7 7.9 73.15
实施例3 62.32 213.5 7.7 72.8
实施例4 62.36 212.5 7.6 72.3
实施例5 63.15 215.3 7.3 67.6
实施例6 65.28 219.2 7 67.2
实施例7 63.52 216.3 7.1 67.8
实施例8 67.01 230.3 6.5 63.3
实施例9 67.11 231.3 6.4 61.2
实施例10 67.25 230.1 6.2 59.1
实施例11 69.21 231.5 6 57.7
实施例12 74.31 249 5.7 57.1
实施例13 68.43 232.6 5.9 57.4
实施例14 74.28 246.3 5.7 56.9
实施例15 68.31 231 6.1 58.9
实施例16 60.4 210.5 8.1 75.8
对比例1 39.9 142 / /
对比例2 54.2 176 32 /
结合各实施例和对比例1并结合表1可以看出，各实施例采用本申请的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺对马铃薯茎叶进行处理，而对比例1采用相关技术中的方法对马铃薯茎叶进行处理，与对比例1处理后的马铃薯种植地块相比，本申请的工艺处理后马铃薯种植地块的有效磷和速效钾均有不同程度的提高，体现了本申请的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺在不影响下一季其他农作物的播种情况下，增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
结合实施例3和对比例1并结合表1可以看出，实施例3处理后的马铃薯种植地块中有效磷比对比例1处理后的马铃薯种植地块提高了22.42mg/kg，速效钾提高了71.5mg/kg。
结合实施例3、对比例2并结合表1可以看出，实施例3比对比例2多了喷洒助辅菌剂的一步工艺，而实施例3的腐熟周期仅7.7天，对比例1的腐熟周期需要32天，对比例2虽然马铃薯茎叶原位腐熟，但是马铃薯茎叶自然降解，腐熟时间长，影响了下一季其它农作物的播种，且对比例2处理后的马铃薯种植地块土壤中的有效磷和速效钾均少于实施例3处理后的结果，体现了喷洒助辅菌剂在不影响下一季其他农作物的播种情况下，提高了马铃薯茎叶的腐熟效率，还可以增加土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
分析原因在于：通过先将马铃薯茎叶中掺杂的地膜清理干净，对茎叶粉碎，喷洒助腐菌剂，使茎叶与助辅菌剂混合均匀，旋耕覆土，使助腐菌在黑暗阴湿的环境下生活繁殖，助腐菌蜡样芽孢杆菌P-2能有效地降解马铃薯茎叶中的纤维素、木质素和蛋白质，降解马铃薯茎叶，使马铃薯茎叶快速原位腐熟还田，既不影响下一季其它农作物的播种，还增加了土壤中的速效钾、有效磷，改善了土壤理化性状。
由实施例2、3、4并结合表1可知，随着助腐菌的浓度提高，腐熟速度增大，腐熟效果越来越好，土壤中速效钾和有效磷的含量也有所增加，但是实施例4与实施例3差距不大，而实施例3已经有较好的效果，且成本低，因此实际使用中采用实施例3的工艺更符合实际处理需求。
结合实施例3和实施例16并结合表1可以看出，实施例3采用的种子罐有火焰接种装置300，而实施例16采用的种子罐无火焰接种装置300。由试验结果来看，实施例3处理后的马铃薯种植地块中速效钾和有效磷更多，实施例3处理时的腐熟周期和腐熟时达到55℃所用时间也更少，即腐熟效率更高，因此，体现了火焰接种装置300对于清洁杂菌，从而提高马铃薯茎叶的腐熟效率以及对土壤理化性状的改善所起的作用。
结合实施例3、5、6、7并结合表1可以看出，实施例3的助腐菌仅有蜡样芽孢杆菌P-2，实施例5的助腐菌为蜡样芽孢杆菌P-2和黑曲霉复配，实施例6的助腐菌为蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌复配，实施例7的助腐菌为蜡样芽孢杆菌P-2、黑曲霉和解淀粉芽孢杆菌复配。由试验结果来看，实施例5、实施例6、实施例7处理时的腐熟周期和腐熟时达到55℃所用时间均有减少，即腐熟效率提高，且实施例5、实施例6、实施例7分别处理后的马铃薯种植地块中速效钾和有效磷均有增加，体现了这三种复配情况对提高马铃薯茎叶的腐熟效率以及对土壤理化性状的改善所起的作用。
但是由上述可知，在实施例5、实施例6、实施例7中，由试验结果来看，实施例6处理后的马铃薯种植地块中速效钾和有效磷增加的最多，实施例6处理时的腐熟周期和腐熟时达到55℃所用时间也最少，体现了蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌复配时，对提高马铃薯茎叶的腐熟效率以及对土壤理化性状的改善所起的作用。
结合实施例6、实施例12并结合表1可以看出，实施例12中用到的助腐菌剂比实施例6用到的助腐菌剂多加了玉米浆液，由试验结果来看，与实施例6相比，实施例12处理时的腐熟周期和腐熟时达到55℃所用时间均有减少，即腐熟效率提高。与实施例6处理后马铃薯种植地块相比，实施例12处理后的马铃薯种植地块中速效钾和有效磷均有增加。体现了玉米浆液对提高马铃薯茎叶的腐熟效率以及对土壤理化性状的改善所起的作用。
分析原因在于：玉米浆液对助腐菌液起到一定的分散作用，助腐菌剂喷洒到马铃薯茎叶上之后，玉米浆液降低了马铃薯茎叶的表面张力，助腐菌液中迅速润湿马铃薯茎叶，使得助腐菌对马铃薯茎叶产生降解作用；同时，玉米浆液为助腐菌提供充分的营养物质，促进了助腐菌的增殖，为马铃薯茎叶的原位腐熟奠定了基础，提高了助腐菌对马铃薯茎叶的降解效率，促进马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
结合实施例12和实施例15并结合表1可以看出，实施例15中用到的玉米浆液采用氢氧化钠调节pH，而实施例12中用到的玉米浆液采用碳酸钠调节pH，由试验结果来看，实施例12处理后的马铃薯种植地块中速效钾和有效磷更多，实施例12处理时的腐熟周期和腐熟时达到55℃所用时间也更少，即腐熟效率更高，因此，体现了采用碳酸钠调节pH的方法对提高马铃薯茎叶的腐熟效率以及对土壤理化性状的改善所起的作用。
分析原因可能在于：助腐菌剂降解马铃薯茎叶产生的酸性物质与碳酸钠反应生成二氧化碳，在覆盖的土壤中形成气泡，气泡破灭后使覆盖的土壤更加疏松，提高了覆盖的土壤的透气率，氧气逐渐进入到被处理的马铃薯茎叶处，进一步促进了助腐菌的生长和繁殖，从而提高了助辅菌剂对马铃薯茎叶的降解效果，促进马铃薯茎叶原位腐熟还田进程，增加了土壤中的速效钾、有效磷，从而改善了土壤理化性状，因此，获得了提高马铃薯生物资源的利用率，促进农业可持续发展的效果。
本具体实施例仅仅是对本申请的解释，其并不是对本申请的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本申请的权利要求范围内都受到专利法的保护。
序列表
<110> 清华大学
<120> 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1437
<212> DNA
<213> 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)
<400> 1
gtcaccttag gcggctggct ccaaaaaggt taccccaccg acttcgggtg ttacaaactc 60
tcgtggtgtg acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgcg gcatgctgat 120
ccgcgattac tagcgattcc agcttcatgt aggcgagttg cagcctacaa tccgaactga 180
gaacggtttt atgagattag ctccacctcg cggtcttgca gctctttgta ccgtccattg 240
tagcacgtgt gtagcccagg tcataagggg catgatgatt tgacgtcatc cccaccttcc 300
tccggtttgt caccggcagt caccttagag tgcccaactt aatgatggca actaagatca 360
agggttgcgc tcgttgcggg acttaaccca acatctcacg acacgagctg acgacaacca 420
tgcaccacct gtcactctgc tcccgaagga gaagccctat ctctagggtt ttcagaggat 480
gtcaagacct ggtaaggttc ttcgcgttgc ttcgaattaa accacatgct ccaccgcttg 540
tgcgggcccc cgtcaattcc tttgagtttc agccttgcgg ccgtactccc caggcggagt 600
gcttaatgcg ttaacttcag cactaaaggg cggaaaccct ctaacactta gcactcatcg 660
tttacggcgt ggactaccag ggtatctaat cctgtttgct ccccacgctt tcgcgcctca 720
gtgtcagtta cagaccagaa agtcgccttc gccactggtg ttcctccata tctctacgca 780
tttcaccgct acacatggaa ttccactttc ctcttctgca ctcaagtctc ccagtttcca 840
atgaccctcc acggttgagc cgtgggcttt cacatcagac ttaagaaacc acctgcgcgc 900
gctttacgcc caataattcc ggataacgct tgccacctac gtattaccgc ggctgctggc 960
acgtagttag ccgtggcttt ctggttaggt accgtcaagg tgccagctta ttcaactagc 1020
acttgttctt ccctaacaac agagttttac gacccgaaag ccttcatcac tcacgcggcg 1080
ttgctccgtc agactttcgt ccattgcgga agattcccta ctgctgcctc ccgtaggagt 1140
ctgggccgtg tctcagtccc agtgtggccg atcaccctct caggtcggct acgcatcgtt 1200
gccttggtga gccgttacct caccaactag ctaatgcgac gcgggtccat ccataagtga 1260
cagccgaagc cgcctttcaa tttcgaacca tgcagttcaa aatgttatcc ggtattagcc 1320
ccggtttccc ggagttatcc cagtcttatg ggcaggttac ccacgtgtta ctcacccgtc 1380
cgccgctaac ttcataagag caagctctta atccattcgc tcgacttgca tgtatag 1437
序列表
<110> 清华大学
<120> 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1437
<212> DNA
<213> 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)
<400> 1
gtcaccttag gcggctggct ccaaaaaggt taccccaccg acttcgggtg ttacaaactc 60
tcgtggtgtg acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgcg gcatgctgat 120
ccgcgattac tagcgattcc agcttcatgt aggcgagttg cagcctacaa tccgaactga 180
gaacggtttt atgagattag ctccacctcg cggtcttgca gctctttgta ccgtccattg 240
tagcacgtgt gtagcccagg tcataagggg catgatgatt tgacgtcatc cccaccttcc 300
tccggtttgt caccggcagt caccttagag tgcccaactt aatgatggca actaagatca 360
agggttgcgc tcgttgcggg acttaaccca acatctcacg acacgagctg acgacaacca 420
tgcaccacct gtcactctgc tcccgaagga gaagccctat ctctagggtt ttcagaggat 480
gtcaagacct ggtaaggttc ttcgcgttgc ttcgaattaa accacatgct ccaccgcttg 540
tgcgggcccc cgtcaattcc tttgagtttc agccttgcgg ccgtactccc caggcggagt 600
gcttaatgcg ttaacttcag cactaaaggg cggaaaccct ctaacactta gcactcatcg 660
tttacggcgt ggactaccag ggtatctaat cctgtttgct ccccacgctt tcgcgcctca 720
gtgtcagtta cagaccagaa agtcgccttc gccactggtg ttcctccata tctctacgca 780
tttcaccgct acacatggaa ttccactttc ctcttctgca ctcaagtctc ccagtttcca 840
atgaccctcc acggttgagc cgtgggcttt cacatcagac ttaagaaacc acctgcgcgc 900
gctttacgcc caataattcc ggataacgct tgccacctac gtattaccgc ggctgctggc 960
acgtagttag ccgtggcttt ctggttaggt accgtcaagg tgccagctta ttcaactagc 1020
acttgttctt ccctaacaac agagttttac gacccgaaag ccttcatcac tcacgcggcg 1080
ttgctccgtc agactttcgt ccattgcgga agattcccta ctgctgcctc ccgtaggagt 1140
ctgggccgtg tctcagtccc agtgtggccg atcaccctct caggtcggct acgcatcgtt 1200
gccttggtga gccgttacct caccaactag ctaatgcgac gcgggtccat ccataagtga 1260
cagccgaagc cgcctttcaa tttcgaacca tgcagttcaa aatgttatcc ggtattagcc 1320
ccggtttccc ggagttatcc cagtcttatg ggcaggttac ccacgtgtta ctcacccgtc 1380
cgccgctaac ttcataagag caagctctta atccattcgc tcgacttgca tgtatag 1437

Claims (10)

1.一种蜡样芽孢杆菌，拉丁名为Bacillus cereus，命名为P-2，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.22630。
2.一种马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：包括以下步骤：
S1、清理地膜，粉碎茎叶；
S2、喷洒助腐菌剂，每千克茎叶喷洒的助腐菌剂的体积为0.05～0.08L，所述助腐菌剂包含助腐菌液，所述助腐菌液中的助腐菌的活菌数为15～220亿/mL，所述助腐菌包含权利要求1所述的蜡样芽孢杆菌P-2；
S3、旋耕覆土，原位腐熟。
3.根据权利要求2所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述助腐菌还包含黑曲霉和/或解淀粉芽孢杆菌。
4.根据权利要求3所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述助腐菌液由体积份比例为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2的菌液与解淀粉芽孢杆菌的菌液混合而成或由菌种数为1:1的蜡样芽孢杆菌P-2和解淀粉芽孢杆菌混合培养而成。
5.根据权利要求2所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述助腐菌液的生产工艺为：A1、菌种活化；A2、摇瓶接种；A3、种子罐培养；A4、发酵罐培养。
6.根据权利要求2所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述助腐菌剂还包含玉米浆液，所述助腐菌液与玉米浆液的体积份比例为8：（1～3），所述玉米浆液的生产工艺为：每1L水中加入100g玉米浆干粉，搅拌至均匀，并调节pH至中性。
7.根据权利要求6所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述玉米浆液的生产工艺中加入碳酸钠调节pH至中性。
8.根据权利要求5所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述种子罐包括罐体（100）和火焰接种装置（300），所述罐体（100）上设置有进料筒（110），所述进料筒（110）与罐体（100）内部连通，所述进料筒（110）远离罐体（100）的一端开设有进料口（111），所述进料筒（110）上设置有用于堵塞进料口（111）的筒盖（200），所述火焰接种装置（300）包括接种环（310）和点火机构（320），所述接种环（310）同轴套设于进料筒（110）的外壁上，所述接种环（310）上沿其周向开设有用于盛装酒精的酒精槽（311），所述筒盖（200）上设置有灭火环（210），当所述进料口（111）被筒盖（200）封堵时，所述灭火环（210）与酒精槽（311）插接配合，所述点火机构（320）包括主动火石（321）、被动火石（322）、导气管（323）和燃气瓶（324），所述主动火石（321）设置于灭火环（210）上，所述被动火石（322）设置于接种环（310）靠近酒精槽（311）的侧壁上，当所述灭火环（210）与酒精槽（311）脱离时，所述主动火石（321）与被动火石（322）可抵接，所述燃气瓶（324）设置于罐体（100）的外壁上，所述燃气瓶（324）通过导气管（323）与酒精槽（311）连通，所述导气管（323）上设置有用于控制燃气流通的控制阀（325）。
9.根据权利要求8所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述筒盖（200）上设置有密封塞（220），所述密封塞（220）与进料口（111）插接配合。
10.根据权利要求8所述的马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺，其特征在于：所述控制阀（325）上设置有用于控制控制阀（325）启闭的接触开关（326），所述筒盖（200）上设置有压板（240），所述压板（240）与接触开关（326）可抵接。
CN202110780706.4A 2021-07-09 2021-07-09 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺 Active CN113308412B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110780706.4A CN113308412B (zh) 2021-07-09 2021-07-09 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110780706.4A CN113308412B (zh) 2021-07-09 2021-07-09 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113308412A true CN113308412A (zh) 2021-08-27
CN113308412B CN113308412B (zh) 2022-03-11

Family

ID=77381513

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110780706.4A Active CN113308412B (zh) 2021-07-09 2021-07-09 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113308412B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116349551A (zh) * 2023-03-30 2023-06-30 黑龙江省绿色食品科学研究院 一种食用菌液体菌种制种机及其使用方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090238811A1 (en) * 2002-09-09 2009-09-24 Mcdaniel C Steven Enzymatic Antimicrobial and Antifouling Coatings and Polymeric Materials
WO2010062707A1 (en) * 2008-10-30 2010-06-03 Joule Unlimited, Inc. Methods and compositions for producing carbon-based products of interest in micro-organisms
US20100233146A1 (en) * 2002-09-09 2010-09-16 Reactive Surfaces, Ltd. Coatings and Surface Treatments Having Active Enzymes and Peptides
CN104017761A (zh) * 2014-06-23 2014-09-03 天津商业大学 一种蜡样芽孢杆菌及其应用
CN104049026A (zh) * 2014-06-23 2014-09-17 天津商业大学 一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法
MX2014011347A (es) * 2014-09-22 2016-03-22 Humberto Schwarzbeck Noriega Biofertilizante a base de un consorcio microbiano con vehiculo mineral y su metodo de produccion y aplicacion.
RU2724538C1 (ru) * 2019-10-25 2020-06-23 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН" (ТюмНЦ СО РАН) Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20090238811A1 (en) * 2002-09-09 2009-09-24 Mcdaniel C Steven Enzymatic Antimicrobial and Antifouling Coatings and Polymeric Materials
US20100233146A1 (en) * 2002-09-09 2010-09-16 Reactive Surfaces, Ltd. Coatings and Surface Treatments Having Active Enzymes and Peptides
WO2010062707A1 (en) * 2008-10-30 2010-06-03 Joule Unlimited, Inc. Methods and compositions for producing carbon-based products of interest in micro-organisms
CN104017761A (zh) * 2014-06-23 2014-09-03 天津商业大学 一种蜡样芽孢杆菌及其应用
CN104049026A (zh) * 2014-06-23 2014-09-17 天津商业大学 一种用于筛选微生物胞外胶原酶的酶谱方法
MX2014011347A (es) * 2014-09-22 2016-03-22 Humberto Schwarzbeck Noriega Biofertilizante a base de un consorcio microbiano con vehiculo mineral y su metodo de produccion y aplicacion.
RU2724538C1 (ru) * 2019-10-25 2020-06-23 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Тюменский научный центр Сибирского отделения РАН" (ТюмНЦ СО РАН) Средство для стимуляции роста меристемной культуры Solanum tuberosum

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116349551A (zh) * 2023-03-30 2023-06-30 黑龙江省绿色食品科学研究院 一种食用菌液体菌种制种机及其使用方法
CN116349551B (zh) * 2023-03-30 2023-10-10 黑龙江省绿色食品科学研究院 一种食用菌液体菌种制种机及其使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113308412B (zh) 2022-03-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110894477B (zh) 一种用于降解餐厨垃圾的复配菌剂、应用及餐厨垃圾降解方法
CN109182193B (zh) 微生物菌剂及其制备方法和应用
CN106591185B (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌植物亚种及其菌剂的制备和应用
CN105567612B (zh) 一种园林废弃物降解复合菌剂制备及应用
CN104667320B (zh) 一种用于处理生活垃圾的复合微生物除臭剂及其制备方法
CN102442849A (zh) 一种利用秸秆制备的防病生物有机肥及其制备方法
CN103333845B (zh) 一种绿针假单胞菌及其发酵培养方法
CN108264401B (zh) 一种生物有机肥及制备工艺与施用方法
CN110358710B (zh) 一株侧孢芽孢杆菌及在制备抗病耐盐碱功能微生物制剂中的应用
CN110396028B (zh) 一种适用于油菜的生物有机肥料及应用
CN104478532A (zh) 一种高效微生态生物肥及其制备方法
CN104293719B (zh) 一种发酵床陈化垫料的快腐菌剂、有机肥及其生产方法
CN117603888B (zh) 一株蜡样芽孢杆菌及其在养殖尾水处理中的应用
CN103387428A (zh) 一种有机物料腐熟剂的制备方法
CN113308412B (zh) 一种蜡样芽孢杆菌和马铃薯茎叶降解及原位腐熟还田工艺
CN101215532A (zh) 一种巨大芽孢杆菌及其在酵素菌中的应用和应用方法
CN104894025A (zh) 一种链霉菌菌株及其应用
CN103570447B (zh) 利用烟草废弃物生产育苗基质的方法
CN104909846A (zh) 一种含有解淀粉芽孢杆菌hfj-7的复合鸡粪腐熟发酵剂及其应用
CN113913344B (zh) 一种有机物料腐熟剂及其制备方法
CN101525584B (zh) 一种氟磺胺草醚农药残留降解菌及其生产的菌剂
CN101165170A (zh) 一种阿特拉津除草剂降解菌及其菌剂制备方法
CN105733963A (zh) 一种复合发酵秸秆降解剂、制备方法及应用
CN107354112B (zh) 一株噻虫醛降解菌及其应用
CN113215059B (zh) 一株具有防病、解磷、降解农残的芽孢杆菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant