CN111040976B - 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一株解淀粉芽孢杆菌及其应用。本发明采用稀释分离和平板对峙培养法从多种植物组织及其根际土壤中分离筛选出1株对多种病原菌具有强烈拮抗作用的菌株T23，经过形态学和生理生化特征性试验、16s rRNA和gyrB基因序列分析，将该株细菌鉴定为解淀粉芽孢杆菌。进一步对该菌株代谢产物的活性进行了测定，并通过温室盆栽试验测定该拮抗菌株对番茄早疫病、油菜菌核病和瓜蒌炭疽病的防治效果，以便应用于后续的番茄早疫病、油菜菌核病和瓜蒌炭疽病的生防制剂的研制和开发。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，尤其涉及一株解淀粉芽孢杆菌及其应用。
背景技术
植物病害的发生严重影响作物的产量及其产品的品质。由于农业防治成本相对较高，化学防治容易对环境造成污染，培育抗病品种周期长，生物防治近年来被认为是很有前景的一种防治途径。生物防治作为一种潜在的新的病害防治手段，就是利用生物物种间的相互作用，以一种或一类生物抑制另一种或另一类生物，从而对病害进行防控。由于通过这种防治手段，不会对环境造成不可逆的污染、安全性高，并且不会产生定向选择的作用使病害产生抗性，所以生物防治近年来一直是植物病害防治领域的研究重点和热点。
根据相关研究文献表明，在已知的生防微生物中，生防真菌和生防细菌的比例占据了绝大多数，其中生防细菌在细菌分类中，芽孢杆菌是一个大属，同时也是生物防治领域研究最多的物种之一，其中枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌的防治效果最为显著。侯毅平研究的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis NJ-18)，来源于土壤分离筛选，对油菜菌核病具有很好的防治效果，其抑制机理是可以抑制油菜菌核病病菌的菌丝生长，并且该菌株的无菌滤液也具有很好的拮抗效果。有研究表明解淀粉芽孢杆菌可以成功定殖至果蔬表皮，与病原菌竞争果蔬周围的营养，分泌抗菌物质以抑制病原菌生长，同时诱导果蔬防御系统来抵御病原菌入侵。此外，这些芽孢杆菌用于防治采后病害的研究报道也屡见不鲜，其中一些拮抗菌株已在实验室研制开发有效的生物制剂，有的拮抗菌已经制成商品投放市场。
油菜菌核病是一种由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)引起的真菌性病害，在我国油菜种植区发生广泛，严重影响了油菜作物产量和安全。近年来由于化学药剂的大规模使用，对环境造成不可逆的破坏。因此需要寻找新可持续的环境友好型防治手段。番茄早疫病是番茄生产上的重要病害之一，防治该病最有效的药剂为二甲酰亚胺类杀菌剂——异菌脲，该药剂具有保护和一定的治疗作用。但随着该药剂使用时间的延长，使番茄早疫病菌不仅对其产生抗药性，而且大量的番茄都属于即食性蔬果，农药的残留已严重影响到番茄的品质和消费者的健康。因此，研究者们希望通过寻找高效低毒的化学药剂或对环境友好的生防菌剂来进行番茄早疫病的防控。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，目的在于解决现有技术中的一部分问题或至少缓解现有技术中的一部分问题。
本发明是这样实现的，一株解淀粉芽孢杆菌，保藏编号为：CCTCC NO：M 2019975。名称为解淀粉芽孢杆菌T23(Bacillus amyloliquefaciens T23)。已于2019年11月25日保藏至中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学，邮编：430072。
如上述的一株解淀粉芽孢杆菌在防治番茄早疫病、油菜菌核病、瓜蒌炭疽病、茶炭疽病、茶轮斑病、棉花枯萎病和马铃薯晚疫病中的任一种中的应用。
进一步地，所述应用具体为利用所述解淀粉芽孢杆菌的发酵液对病原菌抑制。
如上述的一株解淀粉芽孢杆菌在制备用于防治番茄早疫病、油菜菌核病、瓜蒌炭疽病、茶炭疽病、茶轮斑病、棉花枯萎病及马铃薯晚疫病中的至少一种的农药制剂中的应用。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：
本发明采用稀释分离法从多种植株组织及其根际土壤中获得175株细菌菌株。通过平板对峙法对7种植物病原真菌进行拮抗筛选，得到一株对多种病原菌具有较强拮抗作用的细菌T23。经生理生化特征性试验、16S rDNA和gyrB基因的序列分析，将该菌株T23鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。生物活性测定结果表明，菌株T23的无菌滤液可明显抑制油菜菌核病菌、番茄早疫病菌和瓜蒌炭疽病菌的菌丝生长，其抑制率可分别达到97.2％、91.5％和83.5％。将菌株T23的细菌发酵液喷施接种番茄早疫病菌的番茄幼苗，2周后其防效可达到79.7％。同时将菌株T23的菌悬液喷施接种油菜菌核病菌的盆栽油菜植株、6天后该处理的防效可达到56.8％。进一步的将菌株T23的发酵液喷施接种瓜蒌炭疽病菌的瓜蒌幼苗，3周后其防效达到57.9％。这表明菌株T23可以作为潜在的生防菌资源用于番茄早疫病、油菜菌核病和瓜蒌炭疽病生防制剂的研发。
本发明公开一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)T23及其在防治作物真菌性病害中的应用。本发明所述菌株T23对番茄早疫病菌、油菜菌核病菌和瓜蒌炭疽病菌具有较好的抑制作用，可明显减轻作物番茄早疫病、油菜菌核病和瓜蒌炭疽病的发生，并且在盆栽试验中效果较好，说明T23菌株可用于开发针对作物真菌性病害的生物农药。同时该菌株对部分植物致病真菌也有较好的抑菌作用，如茶炭疽病菌、茶轮斑病菌和棉花枯萎病菌。
附图说明
图1是拮抗细菌对油菜菌核病菌菌丝生长的抑制作用；
图2是16s rRNA和gyrB基因片段PCR扩增的电泳图；图A和B分别为16s rRNA和gyrB基因片段的电泳图，其中泳道1-2分别为菌株T22和T23，M为DNA Marker；
图3是基于gyrB基因序列对拮抗细菌T23及其近缘种参考菌株构建的系统进化树；
图4是菌株T23无菌滤液对2种病原真菌菌丝生长的抑制作用；图A和C分别为番茄早疫病菌和油菜菌核病菌在PDA平板上的生长；图B和D分别为番茄早疫病菌和油菜菌核病菌在含有拮抗菌无菌滤液的PDA平板上的生长；
图5是喷施T23菌液15d后对番茄早疫病的防治效果；图A和B(左)为喷施番茄早疫病菌的分生孢子悬浮液后番茄发病症状；图B(右)为采用处理2方法后的番茄发病症状；
图6是喷施菌株T23菌液6d后对油菜菌核病的防治效果；图A为喷施拮抗菌T23菌液处理后抑制油菜菌核病菌侵染的防治效果；图B为仅接种油菜菌核病菌的油菜发病症状。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明，各实施例及试验例中所用的设备和试剂如无特殊说明，均可从商业途径得到。此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
本发明披露了一株解淀粉芽孢杆菌及其应用，本发明中涉及的供试菌株：7种供试病原真菌，油菜菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum、番茄早疫病菌Alternaria solani、瓜蒌炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides、茶轮斑病菌Pseudopestalotiopsischinensis、棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vasinfectum、马铃薯晚疫病菌Phytophthora infestans、茶炭疽病菌Colletotrichum fructicola，由安徽农业大学植物病理系提供。供试植物：番茄皖粉2号，栽培用土为营养土，光照和黑暗时间各为12h，种植时间约45d；种植地点为安徽农业大学温室。油菜品种：德油7号，种子购于合肥丰乐种业公司。瓜蒌品种：皖楼9号，由安徽有余跨越瓜蒌食品开发有限公司提供。本发明涉及的解淀粉芽孢杆菌保藏信息：保藏编号为：CCTCC NO：M 2019975。名称为解淀粉芽孢杆菌T23(Bacillusamyloliquefaciens T23)。已于2019年11月25日保藏至中国典型培养物保藏中心，地址：中国.武汉.武汉大学，邮编：430072。
实施例1菌株的分离筛选
1.细菌的分离和纯化：从油菜田和小麦田采集健康的植株叶片和根围土壤，称取植物叶片和根围土样品各10g，叶片组织经无菌研钵碾碎后，分别将植物组织和根围土放入盛有50mL无菌水的三角瓶中，180r·min-1振荡10min，获得组织悬浮液和土壤悬浮液。采用稀释分离法将悬浮液分别进行梯度稀释10-1～10-6，每个梯度取100μL分别均匀涂布在营养琼脂(NA)平板上，每个浓度各3个重复，然后放于28℃恒温培养箱中倒置培养。待细菌菌落长出后，挑取形态特征不同的代表性单菌落，于NA平板上划线纯化，将纯化后的细菌菌株保存于NA试管斜面，4℃冰箱保存备用。
拮抗菌的筛选：采用抑菌圈法对分离获得的175株细菌进行拮抗病原真菌的筛选。将目标病原真菌的菌丝块接种于PDA平板活化培养2～3d，同时将纯化好的细菌菌株在NA平板进行活化24～48h。待活化菌株长好后，将目标病原真菌的菌丝块(Ф＝6mm)分别接种于PDA平板中央，然后用接种针将活化的细菌点接于距离病原菌丝块2.5cm处，每皿点接2个菌株，3次重复，25℃黑暗培养2～6d，观察各平板病原菌的菌落生长情况，从中筛选出具有显著拮抗作用的菌株。进一步的，采用平板对峙法检测初筛获得的拮抗菌株T23对7种目标病原菌的拮抗效果。在PDA平板中心接目标病原菌菌饼(Ф＝6mm)，待测菌株划线于菌饼一侧30mm位置，以只接目标病原菌的平板为对照，每处理3个重复，倒置于28℃恒温箱培养6d，观察各平板病原菌的菌落生长情况，确定拮抗细菌的抑菌效果。
结果：从植物组织内外和根围土壤中共分离获得175株细菌，经平板对峙培养筛选，得到2株细菌(T22和T23)对多种病原真菌的菌丝生长有抑制作用。菌株T23对油菜菌核病菌、番茄早疫病菌、瓜蒌炭疽病菌和茶轮斑病菌的抑制效果明显，抑菌率可达66.7％、51.3％、52.4％和57.6％，见表1。拮抗菌株T23在平板对峙培养中，对油菜菌核病菌的菌丝生长表现出强烈的抑制作用，经对峙培养6天后抑菌圈直径达到25mm，见图1。
表1 拮抗菌株的平板抑制效果
2.拮抗菌株的鉴定
细菌形态学与生理生化试验：将筛选获得的广谱强拮抗菌株接种于NA平板上，28℃恒温培养24～48h，观察菌落形态；挑取培养24h的拮抗菌株T23进行革兰氏染色；参照《常见细菌系统鉴定手册》对这些菌株分别进行生长温度、需盐性和硝酸盐还原等生理生化指标测定。
结果：拮抗菌株T23在营养肉汤琼脂培养基上呈白色不透明菌落，表面粗糙，菌落边缘不规则。厌氧生长，接触酶反应结果呈阳性，能将淀粉水解，可以还原硝酸盐。不可以用柠檬酸盐，不能生长于5％NaCL培养基中，最适合生长温度是28-30℃。根据细菌鉴定手册，结果表明该细菌与解淀粉芽孢杆菌比较相似。
分子鉴定：采用溶菌酶法从新鲜菌体中提取基因组DNA，利用16S rRNA通用引物P1F：5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3'，见SEQ ID NO.1和P2F：5'-CGGTTACCTTGTTAGGACTTCACC-3'，见SEQ ID NO.2对其进行PCR扩增，94℃预变性5min、94℃变性30s、55℃退火30s、72℃延伸90s，30个循环，72℃终延伸10min。同时利用gyrB基因的引物UP1：5'-GAAGTCATCATGACCGTTCTGCAYGCNGGNGGNAARTTYGA-3'，见SEQ ID NO.3和UP2R：5'-AGCAGGGTACGGATGTGCGAGCCRTCNACRTCNGCRTCNGTAT-3'，见SEQ ID NO.4对其进行PCR扩增。引物由英潍捷基(上海)贸易有限公司合成。具体反应条件如下：94℃预变性5min、94℃变性1min、50-55℃退火1min、72℃延伸2min、30个循环，72℃终延伸10min。将目的片段送至合肥擎科生物科技有限公司进行测序。将获得的16s rRNA和gyrB基因序列分别在NCBI网站(National Center for Biotechnology Information)上进行BLAST同源性搜索，明确与测试菌株序列同源性高的参考菌株及其物种地位。同时利用MEGA 5.0软件、采用Neighbour-joining方法构建系统进化树，确定拮抗菌株T23的分类地位。
16s rRNA片段扩增及序列分析结果：提取拮抗细菌的全基因组DNA，经过PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳检测得到一条大小在1.5kb左右的条带，见图2A。经测序后，菌株T23的16s rRNA基因片段的大小为1511bp，将所得到的基因序列在GenBank中进行BLAST比对。结果显示，菌株T23与Bacillus sp.(枯草杆菌)、B.amyloliquefaciens(解淀粉芽孢杆菌)、B.velezensis、B.subtilis(枯草芽孢杆菌)、B.methylotrophicus(甲基营养型芽孢杆菌)的序列同源性达到99％。
GyrB基因片段扩增及聚类分析结果：提取拮抗菌株的全基因DNA，经过PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳检测得到一条大小在1.2kb左右的条带，见图2B。经测序后，菌株T23基因片段的大小为1153bp。将所得到的基因序列在GenBank中进行BLAST比对，结果表明，该细菌与已报道的解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)的相似性达到99％。利用MEGA生物信息学软件和Neighbour-joining方法构建系统进化树进行聚类分析，结果表明，菌株T23与报道的解淀粉芽孢杆菌(JN086139，JQ734538和JQ734540)紧密的聚类成一簇，见图3。结合形态学和生理生化特征，以及gyrB基因序列的聚类分析，将菌株T23鉴定为解淀粉芽胞杆菌。
实施例2拮抗菌株的抑菌研究
拮抗菌无菌滤液对病原真菌菌丝生长的抑制作用：采用菌丝生长速率法测定菌株T23对油菜菌核病菌、番茄早疫病菌和瓜蒌炭疽病菌的抑制作用。将拮抗菌株T23接种于NA平板上，28℃恒温培养24h。挑取单菌落接种于盛有100mL NA液体培养基的三角瓶中，在28℃、180r·min-1条件下振荡培养24h，得到菌株T23的发酵液。将菌株发酵液在4℃、12000r·min-1离心20min，然后将离心后获得的上清液于0.22μm孔径的细菌过滤器过滤，得到拮抗菌株T23的无菌滤液。将获得的无菌滤液与50℃左右的PDA液体培养基以1：9比例混合倒平板。在含有无菌滤液的PDA平板中央，将目标病原真菌的菌丝块(Ф＝6mm)置于PDA平板中央。同时设CK对照组，以无菌NA液体培养基与PDA培养基混合制成平板，然后于平板中央接种目标病原菌。每个处理设3个重复，将接种病原真菌的平板放于25℃培养箱中培养5～6d，观察拮抗菌的代谢产物对目标病原菌菌丝生长的影响。
灭菌代谢液对病原真菌菌丝生长的抑制作用：将拮抗菌株T23的发酵液在121℃条件下高温灭菌20min，得到拮抗菌株的灭菌代谢液。将5mL的灭菌代谢液加入至45mL PDA培养基中混匀，倒平板。然后在所倒的平板中央，将直径为6mm的病原真菌菌丝块一面与培养基贴合。同时设CK对照组，以5mL NA液体培养基与45mL PDA培养基混合倒平板，并在平板中央接种目标真菌。每个处理设3个重复。将接种病原真菌的平板放于25℃培养箱中培养5～6d，观察拮抗菌的灭菌代谢液对目标病原菌菌丝生长的影响。
无菌滤液对油菜菌核病菌、番茄早疫病菌和瓜蒌炭疽病菌的抑制活性结果：拮抗菌株T23的无菌滤液对油菜菌核和番茄早疫病菌的菌丝生长有显著的抑制作用，其抑制率分别为97.2％和91.5％，见图4。该拮抗菌株的无菌滤液对瓜蒌炭疽病菌的菌丝生长抑制作用也较明显，抑制率达到83.5％。然而，高温处理拮抗菌株的发酵液后，其代谢产物对供试病原菌的菌丝生长则失去抑制活性。
拮抗菌株的产蛋白酶活性测定：预先活化拮抗菌株T23，在所配制好的灭菌的脱脂牛奶培养基平板中央接种拮抗菌株，在28℃培养24h，观察拮抗菌株在脱脂牛奶培养基平板上的生长情况。如果接种菌株分泌蛋白酶，则在平板上接种点周围会出现透明圈，通过透明圈的大小判断拮抗菌株产生的蛋白酶活性强弱。
拮抗菌株的产蛋白酶活性测定结果：在脱脂蛋白培养基上，如果菌株可以产生分解蛋白的蛋白酶，则培养基会出现明显的透明圈。由于拮抗菌的代谢产物经过高温处理后而丧失了抑菌活性，所以初步判断该菌株的抑菌活性可能与活体菌株本身或者产生的蛋白酶类等不耐高温物质有关。本研究结果发现，菌株T23可以较好的产生分解蛋白的透明圈，这说明拮抗菌株T23可以产生蛋白酶，蛋白类大分子化合物可能是该菌株抑制病菌菌丝生长的原因之一。
菌株T23对番茄早疫病的防效测定：菌株T23对番茄早疫病室内防效测定共设2个处理。处理1：在番茄苗长出4叶期时，用小型喷雾器将拮抗菌株T23的发酵液(108CFU/mL)均匀喷施于番茄叶片表面，至叶尖滴水为止。1d后，采用同样的方法喷施番茄早疫病菌的孢子悬浮液(106分生孢子/mL)，每处理5盆，重复3次。28℃保湿24h，每隔1天观察番茄幼苗发病情况。处理2：先喷施番茄早疫病菌的分生孢子悬浮液，1d后再喷施拮抗菌株T23的细菌发酵液，其余操作同上。病害严重度分级标准：以叶片为单位按0～4级标准调查病情。0级：无病斑；1级：病斑面积占羽状叶面积的1/4以下；2级：病斑面积占羽状叶面积的1/4～1/2；3级：病斑面积占羽状叶面积的1/2～3/4，近一半小叶枯死；4级：病斑面积占羽状叶面积的3/4以上，一半以上或全面小叶枯死。
拮抗菌T23对番茄早疫病的防效结果：由表2可以看出，菌株T23对番茄早疫病具有一定的防效，其中处理2要明显高于处理1。喷施拮抗菌T23的发酵菌液15d后，处理1和处理2的防病效果分别为27.2％和79.7％。番茄幼苗接种早疫病菌分生孢子悬浮液2周后，可观察到处理的番茄叶片出现典型的黄褐色坏死点或病斑(图5A)，而番茄幼苗接种早疫病菌分生孢子悬浮液后，间隔24h喷施拮抗菌T23的细菌悬浮液，于温室培养2周后，在处理的番茄叶片上仅观察到少量的黄褐色坏死点，病斑数量少(图5B)，这说明采用处理2方式可明显抑制番茄病菌的分生孢子侵染和扩展速率。
表2 喷施拮抗菌T23菌液对番茄早疫病的防治效果
菌株T23对油菜菌核病的防效测定：事先活化油菜菌核病菌培养，将所筛选出来的拮抗菌株T23制作菌悬液。试验所用的油菜的品种为德油7号，事先在培养箱中育苗，12h光照。12h黑暗，相对湿度80％，待所种的油菜发芽后，将油菜苗移栽至单独的培养盆，每盆种植幼苗3株，待油菜长至约6-10片时，制备上述的拮抗菌株T23的发酵液和无菌滤液。实验设为A、B两个处理，A处理于接菌前24h喷施发酵液，B处理于接菌前24h喷施无菌滤液，设喷施无菌水和液体NA培养基对照，随后接种直径6mm的油菜菌核病菌菌丝块，接种后的油菜喷施清水并用棉花保湿，保持在20℃，80％湿度的人工气候箱中培养观察。病害严重度分级标准：0级：无病；1级：病斑面积占全叶10％以下；2级：病斑面积占全叶11～30％；3级：病斑面积占全叶31～50％；4级：病斑面积占全叶50％以上。
拮抗菌T23对油菜菌核病的防效结果：由表3可以看出，菌株T23的发酵液对油菜菌核病具有较好的防效，而拮抗菌株T23的无菌滤液对油菜菌核病的防效较低。接种油菜菌核病菌6d后，两种处理的防病效果分别为56.8％和22.2％。从图6可看出，拮抗菌T23的发酵液处理对油菜菌核病菌的侵染具有一定防效。与喷施拮抗菌株发酵液的叶片比较(图6A)，未喷施拮抗菌的CK组的油菜叶片，病叶数量相对较多，病斑面积较大(图6B)。
表3 菌株T23对油菜菌核病的盆栽防效
菌株T23对瓜蒌炭疽病的防效测定：将瓜蒌种子催芽、播种和育苗，待瓜蒌苗长至约5～10片叶进行接种试验。提前在PDA平板上活化瓜蒌炭疽病菌，待其产生分生孢子堆时，制备瓜蒌炭疽病菌的分生孢子悬浮液(106分生孢子/mL)，同时制备拮抗菌株T23的发酵液(108CFU/mL)。实验设两个处理，处理1：在瓜蒌苗长至5～10片叶时，将拮抗菌株T23的发酵液均匀喷施于瓜蒌叶片表面。48h后，喷施瓜蒌炭疽病菌的分生孢子悬浮液，每处理3盆，重复3次。处理2：先喷施瓜蒌炭疽病菌的分生孢子悬浮液，48h后再喷施拮抗菌株T23的细菌发酵液，其余操作同上。将接种后的瓜蒌苗移至人工气候室中28℃、85％相对湿度条件下培养，每隔1天观察瓜蒌苗发病情况。病害严重度分级标准：0级：无病；1级：病斑面积占全叶10％以下；2级：病斑面积占全叶11～30％；3级：病斑面积占全叶31～50％；4级：病斑面积占全叶50％以上。
拮抗菌T23对瓜蒌炭疽病的防效结果：由表4可以看出，菌株T23对瓜蒌炭疽病具有一定的防效，其中处理2要明显高于处理1。喷施拮抗菌T23的发酵菌液3周后，处理1和处理2的防病效果分别为26.3％和57.9％。这说明处理2方式可明显抑制瓜蒌炭疽病菌分生孢子的萌发和侵染，对瓜蒌炭疽病表现出较好防效。
表4 喷施拮抗菌T23发酵液对瓜蒌炭疽病的防治效果
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
序列表
<110> 安徽农业大学
<120> 一株解淀粉芽孢杆菌及其应用
<160> 4
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列(P1F)
<400> 1
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 2
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列(P2F)
<400> 2
cggttacctt gttaggactt cacc 24
<210> 3
<211> 41
<212> DNA
<213> 人工序列(UP1)
<400> 3
gaagtcatca tgaccgttct gcaygcnggn ggnaarttyg a 41
<210> 4
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列(UP2R)
<400> 4
agcagggtac ggatgtgcga gccrtcnacr tcngcrtcng tat 43
Claims (4)
1.一株解淀粉芽孢杆菌，其特征在于：保藏编号为：CCTCC NO：M 2019975；名称为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens） T23。
2.如权利要求1所述的一株解淀粉芽孢杆菌在防治番茄早疫病、油菜菌核病、瓜蒌炭疽病、茶炭疽病、茶轮斑病、棉花枯萎病及马铃薯晚疫病中的任一种中的应用；其中，所述番茄早疫病由番茄早疫病菌（Alternaria solani）引起，所述油菜菌核病由油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起，所述瓜蒌炭疽病由瓜蒌炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起，所述茶炭疽病由茶炭疽病菌（Colletotrichum fructicola），所述茶轮斑病由茶轮斑病菌（Pseudopestalotiopsis chinensis）引起，所述棉花枯萎病由棉花枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum）引起，所述马铃薯晚疫病由马铃薯晚疫病菌（Phytophthora infestans）引起。
3.根据权利要求2所述的一株解淀粉芽孢杆菌在防治番茄早疫病、油菜菌核病、瓜蒌炭疽病、茶炭疽病、茶轮斑病、棉花枯萎病及马铃薯晚疫病中的任一种中的应用，其特征在于：所述应用具体为利用所述解淀粉芽孢杆菌的发酵液对病原菌抑制；其中，所述番茄早疫病由番茄早疫病菌（Alternaria solani）引起，所述油菜菌核病由油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起，所述瓜蒌炭疽病由瓜蒌炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起，所述茶炭疽病由茶炭疽病菌（Colletotrichum fructicola），所述茶轮斑病由茶轮斑病菌（Pseudopestalotiopsis chinensis）引起，所述棉花枯萎病由棉花枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum）引起，所述马铃薯晚疫病由马铃薯晚疫病菌（Phytophthora infestans）引起。
4.如权利要求1所述的一株解淀粉芽孢杆菌在制备用于防治番茄早疫病、油菜菌核病、瓜蒌炭疽病、茶炭疽病、茶轮斑病、棉花枯萎病及马铃薯晚疫病中的至少一种的农药制剂中的应用；其中，所述番茄早疫病由番茄早疫病菌（Alternaria solani）引起，所述油菜菌核病由油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）引起，所述瓜蒌炭疽病由瓜蒌炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）引起，所述茶炭疽病由茶炭疽病菌（Colletotrichum fructicola），所述茶轮斑病由茶轮斑病菌（Pseudopestalotiopsis chinensis）引起，所述棉花枯萎病由棉花枯萎病菌（Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum）引起，所述马铃薯晚疫病由马铃薯晚疫病菌（Phytophthora infestans）引起。
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Patent Citations (5)
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