RU2721726C9 - Устройство экспресс-диагностирования сердечной деятельности - Google Patents
Устройство экспресс-диагностирования сердечной деятельности Download PDFInfo
- Publication number
- RU2721726C9 RU2721726C9 RU2018135637A RU2018135637A RU2721726C9 RU 2721726 C9 RU2721726 C9 RU 2721726C9 RU 2018135637 A RU2018135637 A RU 2018135637A RU 2018135637 A RU2018135637 A RU 2018135637A RU 2721726 C9 RU2721726 C9 RU 2721726C9
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hfbp
- antibodies
- markers
- ami
- specified
- Prior art date
Links
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title description 5
- VMVIOLQWKUPXMI-BYPYZUCNSA-N (2s)-1-(2,2,3,3,4,4,4-heptafluorobutanoyl)pyrrolidine-2-carbonyl chloride Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)C(=O)N1CCC[C@H]1C(Cl)=O VMVIOLQWKUPXMI-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 51
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 claims abstract description 42
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 41
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 41
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 24
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 claims abstract description 22
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims abstract description 16
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 claims description 25
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 20
- 102000004903 Troponin Human genes 0.000 claims description 16
- 108090001027 Troponin Proteins 0.000 claims description 16
- 102000013394 Troponin I Human genes 0.000 claims description 11
- 108010065729 Troponin I Proteins 0.000 claims description 11
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 claims description 8
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 3
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 claims description 3
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 claims description 3
- 108090000362 Lymphotoxin-beta Proteins 0.000 claims description 2
- 102000013534 Troponin C Human genes 0.000 claims description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 7
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 abstract description 4
- 102000030914 Fatty Acid-Binding Human genes 0.000 abstract description 3
- 108091022862 fatty acid binding Proteins 0.000 abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 7
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 5
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 4
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 230000003680 myocardial damage Effects 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000004625 Aspartate Aminotransferases Human genes 0.000 description 1
- 108010003415 Aspartate Aminotransferases Proteins 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 1
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 101100226596 Gallus gallus FABP gene Proteins 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003855 L-lactate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108700023483 L-lactate dehydrogenases Proteins 0.000 description 1
- 108010062374 Myoglobin Proteins 0.000 description 1
- 102000036675 Myoglobin Human genes 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000003547 immunosorbent Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 1
- 208000037891 myocardial injury Diseases 0.000 description 1
- 238000013146 percutaneous coronary intervention Methods 0.000 description 1
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
- G01N33/54386—Analytical elements
- G01N33/54387—Immunochromatographic test strips
- G01N33/54388—Immunochromatographic test strips based on lateral flow
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/92—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving lipids, e.g. cholesterol, lipoproteins, or their receptors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
- G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
- G01N2333/4701—Details
- G01N2333/4712—Muscle proteins, e.g. myosin, actin, protein
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/32—Cardiovascular disorders
- G01N2800/324—Coronary artery diseases, e.g. angina pectoris, myocardial infarction
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к иммуноанализу для выявления кардиомаркеров на ранних стадиях кардиального события, такого как инфаркт миокарда. Изобретение касается устройства для обнаружения маркеров острого инфаркта миокарда (ОИМ) в образце крови человека, включающего иммобилизованную в полосе иммуноанализа смесь по меньшей мере двух антител или конъюгатов антител, одновременно вступающую в реакцию по меньшей мере с сердечным тропонином (СТ) и с сердечной формой белка, связывающего жирные кислоты (HFBP), объединенные реакции обеспечивают визуальный сигнал, если концентрация каждого из указанных маркеров превышает определенное заданное пороговое значение, составляющее 0,5 нг/мл для СТ и 5 нг/мл для HFBP, указанный визуальный сигнал быстро и достоверно указывает на событие ОИМ в критический период от 1 до 4 часов с момента его возникновения. Технический результат - выявление диагностических маркеров крови уже в течение получаса при появлении симптомов острого инфаркта миокарда. 19 з.п. ф-лы, 1 табл., 1 пр.
Description
Область техники изобретения
Настоящее изобретение относится к иммуноанализу для выявления кардиомаркеров на ранних стадиях кардиального события, такого как инфаркт миокарда. В частности, изобретение представляет собой устройство для выявления диагностически релевантной комбинации двух маркеров крови уже в течение получаса при появлении симптомов острого инфаркта миокарда.
Уровень техники изобретения
Ежегодно около одного миллиона человек только в Соединенных Штатах страдают острым инфарктом миокарда (ОИМ), из которых 10% могут умереть в течение одного года в зависимости от степени тяжести заболевания и качества вмешательства. В любом случае, медицинская помощь, включая первичное чрескожное коронарное вмешательство и/или тромболитическую терапию, если необходимо, должна быть оказана по возможности незамедлительно. Было продемонстрировано, что сокращение продолжительности между началом боли за грудиной и реперфузией до менее чем четырех часов имеет решающее значение для снижения некроза миокарда и улучшения сердечной деятельности, снижая показатель 30-дневной смертности [Но Y.C. et al.: Crit. Care Med. 42 (2014) 1788-96]. Очень важна ранняя диагностика ОИМ, но чувствительность классической ЭКГ для диагностирования ОИМ у пациентов с болью в груди по ишемическому типу ненамного превышает 50% [The Merck Manual, 17-я редакция (1999), стр. 1673]. В этой связи кардиомаркеры крови имеют огромное значение. Для оценки повреждения миокарда использовались различные белки, которые просачиваются из поврежденных клеток миокарда в кровоток, включая миоглобин или энзимы, такие как аспартатаминотрансфераза, лактатдегидрогеназа или креатинфосфокиназа. В настоящее время это, главным образом, тропонины, которые были признаны достаточно специфичными для выявления повреждений миокарда. К сожалению, кардиотропонины, хотя и остаются повышенными в течение двух недель после события ОИМ, проявляются не сразу и хорошо могут быть замерены только через несколько часов после события ОИМ, т.е. первые моменты, когда правильный диагноз является наиболее критическим, освещены недостаточно. Поэтому целью настоящего изобретения является создание способа диагностики острого инфаркта миокарда путем выявления соответствующих маркеров крови. Было установлено, что сердечная форма белка, связывающего жирные кислоты (HFBP), является другим маркером ОИМ и, как правило, появляется в крови в течение, приблизительно, одного часа, и достигает пикового значения в течение, приблизительно, пяти часов в пределах события ОИМ [Tanaka Т. et al.: Clinical Biochemistry 24 (1991) 195-201; Van Nieuwenhoven F.A. et al.: Circulation 92 (1995) 2848-54], но диагностическая точность HFBP в качестве единственного маркера оказалась недостаточной в клинических условиях [Park S.Y. et al.: Clin. Neurol. Neurosurg. 115 (2013) 405-10]. Другой целью настоящего изобретения является создание способа диагностирования острого инфаркта миокарда путем обнаружения более одного маркера крови.
Еще одной целью настоящего изобретения является создание устройства для диагностики ОИМ, которое использует более одного маркера крови инфаркта миокарда.
Еще одной целью настоящего изобретения является создание устройства для оказания помощи в диагностике ОИМ в течение нескольких часов после события ОИМ.
Другие цели и преимущества настоящего изобретения будут представлены по мере описания.
Краткое изложение сущности изобретения
Настоящее изобретение представляет собой устройство для обнаружения маркеров острого инфаркта миокарда (ОИМ) в образце крови человека, указанное устройство включает смесь по меньшей мере двух антител или конъюгатов антител, вступающую в реакцию по меньшей мере с сердечным тропонином (СТ) и с сердечной формой белка, связывающего жирные кислоты (HFBP). Указанные маркеры предпочтительно включают СТ и HFBP, причем указанные конъюгаты антител одновременно вступают в реакцию с указанными маркерами, присутствующими в указанном образце крови, тем самым создают визуальный сигнал, если концентрация каждого из указанных маркеров превышает определенное заданное пороговое значение. Антитела или конъюгаты антител вступают в реакцию с указанными маркерами крови только после отделения плазмы крови от клеток крови; клетки крови не контактируют с указанными антителами, как известно специалисту, поскольку клетки крови сначала удаляются на предварительном фильтре; обычно плазма перемещается к антителу или конъюгату антитела для образования комплекса маркер-антитело или комплекса
конъюгата маркер-антитело, который создает визуальный сигнал либо сам, либо после реакции с дополнительными реагентами. Пороговое значение для каждого маркера определяется из распределения его концентрации в крови здорового населения. В одном из вариантов осуществления изобретения, указанное пороговое значение выше 95-го перцентиля в указанном распределении для каждого из маркеров. В другом варианте осуществления изобретения, указанное пороговое значение выше 99-го перцентиля в указанном распределении для каждого из маркеров. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, указанное пороговое значение для каждого маркера ниже максимальной концентрации маркера в крови, которая не создает визуальный сигнал при вступлении в реакцию с указанными антителами или конъюгатами антител, если указанный маркер в образце один. В одном варианте осуществления устройства по данному изобретению, указанное пороговое значение для СТ составляет 0,5 нг/мл, а указанное пороговое значение для HFBP составляет 5 нг/мл. В другом варианте осуществления, указанное пороговое значение для СТ составляет около 1 нг/мл, а указанное пороговое значение для HFBP составляет около 10 нг/мл. В одном варианте осуществления, устройство по изобретению создает визуальный сигнал, если концентрация СТ в указанном образце крови составляет по меньшей мере 0,5 нг/мл и одновременно концентрация HFBP в указанном образце крови составляет по меньшей мере 5 нг/мл. В другом варианте осуществления, устройство по изобретению создает визуальный сигнал, если концентрации СТ и HFBP в указанном образце крови составляют по меньшей мере 1 нг/мл и 5 нг/мл, соответственно. В еще одном варианте осуществления, устройство по изобретению создает визуальный сигнал, если концентрации СТ и HFBP в указанном образце крови составляют по меньшей мере 1 нг/мл и 10 нг/мл, соответственно. Указанный тропонин может содержать белки, выбранные из тропонина-С, тропонина-I, тропонина-Т, комплекса указанных тропонинов или смеси, содержащей по меньшей мере два из указанных тропонинов. Предпочтительно, чтобы тропонин-I или тропонин-Т был использован в качестве кардиомаркера. Указанную смесь антител или конъюгатов антител обычно иммобилизуют в полосе иммуноанализа в устройстве по данному изобретению. Указанная полоса может быть частью устройства иммуноанализа, например, набора латерального проточного иммуноанализа. В одном из вариантов осуществления, указанное устройство иммуноанализа включает в себя ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay - твердофазный иммуносорбентный анализ). Указанную смесь антител или конъюгатов антител иммобилизуют в полосе иммуноанализа в виде одной узкой полоски, которая настроена на изменение цвета при наличии антигенов, а именно указанных маркеров крови ОИМ. Таким образом, указанный визуальный сигнал представляет собой изменение цвета указанной полоски, вызванное реакцией цветообразования маркера с конъюгатом антитела. В другом аспекте изобретения, указанная смесь антител или конъюгатов антител может быть иммобилизована в указанной полосе в виде нескольких узких полосок, которые различаются указанным заданным пороговым значением и создают визуальные сигналы при различных концентрациях указанных маркеров (различающихся по чувствительности). Устройство по изобретению может с успехом содержать контрольные полоски, демонстрирующие сравнительную интенсивность цвета либо до, либо после контакта с указанным образцом крови. Сравнительные полоски могут включать в себя антитела или конъюгаты антител, вступающие в реакцию с типовыми белками крови (альбумины, иммуноглобулины и др.), антитела или конъюгаты антител, конъюгированные таким образом и иммобилизованные в таком количестве, чтобы создать цветовой
сигнал желаемой интенсивности при контакте с указанным образцом крови. Сравнительные полоски могут содержать цвет желаемой интенсивности, присутствующий в устройстве до вступления в контакт с указанным образцом, а также стабильный уже после контакта с указанным образцом. Указанный цвет желаемой интенсивности может соответствовать ожидаемому цветовому сигналу, созданному соответствующими концентрациями маркеров в образце крови. Набор сравнительных полосок позволяет оценить концентрацию кардиомаркеров в образце крови при сравнении визуального сигнала, созданного кардиомаркером крови или сочетанием маркеров, с набором сравнительных полосок.
В предпочтительном варианте осуществления изобретения, предусмотрено устройство для обнаружения события ОИМ, включающее одну или несколько смесей антител, одновременно специфичных как для СТ, так и для HFBP, антитела или конъюгаты антител, иммобилизованные в полосе иммуноанализа в виде одной или нескольких узких полосок и вступающие в реакцию с кардиомаркерами СТ и HFBP по меньшей мере в одном образце крови, чтобы создать визуальный сигнал(ы), если концентрация каждого из указанных маркеров превышает определенное заданное пороговое значение, указанная полоса дополнительно содержит контрольные полоски, демонстрирующие сравнительные интенсивности цвета либо до, либо после контакта с указанным образцом крови, причем несколько указанных узких полосок в некоторых случаях вступают в реакцию с указанными маркерами в указанном образце крови с различными чувствительностями и создают указанные визуальные сигналы при различных концентрациях маркера. Устройство по изобретению обеспечивает оценку концентрации СТ и/или HFBP в указанном образце, основанную либо на сравнении интенсивностей указанного
сигнала(ов) с указанными сравнительными интенсивностями, либо на сравнении двух сигналов, соответствующих двум различным концентрациям маркера. По одному аспекту изобретения, оценка концентрации СТ и/или HFBP в указанном образце обеспечивает оценку времени, прошедшего между отбором образца и событием ОИМ. В одном примере устройства, согласно изобретению, указанное пороговое значение составляет 0,5 нг/мл для СТ и 10 нг/мл для HFBP для одной из указанных нескольких узких полосок, причем положительный сигнал указывает на то, что событие ОИМ произошло у донора указанного образца не менее одного часа назад. В другом примере устройства, согласно изобретению, указанное заданное пороговое значение составляет 1 нг/мл для СТ и 20 нг/мл для HFBP для одной из указанных нескольких узких полосок, причем положительный сигнал указывает на то, что событие ОИМ произошло у донора указанного образца не менее трех часов назад. В еще одном примере устройства, согласно изобретению, указанное заданное пороговое значение составляет 4 нг/мл для СТ и 80 нг/мл для HFBP для одной из указанных нескольких узких полосок, причем положительный сигнал указывает на то, что событие ОИМ произошло у донора указанного образца не менее девяти часов назад. Комбинированные сигналы нескольких "хорошо отлаженных" полосок обеспечивают более точные результаты. Например, устройство, согласно изобретению, может включать в себя полоску с пороговым значением 0,5 нг/мл для СТ и 10 нг/мл для HFBP, и другую полоску с пороговым значением 1 нг/мл для СТ и 20 нг/мл для HFBP, причем положительный сигнал в первой указанной полоске вместе с отрицательным сигналом во второй указанной полоске указывают на то, что событие ОИМ произошло в указанном донорском образце в период, примерно, от 3 до 6 часов тому назад.
Изобретение обеспечивает способ диагностики кардиального события, в частности ОИМ, включающий взятие образца крови пациента с подозрением на наличие такого события, например пациента, страдающего от боли в груди по ишемическому типу, и нанесение образца на устройство иммуноанализа, содержащее смесь по меньшей мере двух антител или конъюгатов антител, которая вступает в реакцию по меньшей мере с СТ и HFBP. В другом аспекте изобретения, берутся по меньшей мере два образца в два разных периода времени, причем оценки концентраций СТ и/или HFBP в указанных двух образцах повышают точность оценки времени события ОИМ.
Подробное описание сущности изобретения
Авторы изобретения обнаружили, что одновременное выявление двух сердечных маркеров крови с использованием смеси антител или конъюгатов антител может исключить необходимость использования предыдущих способов, имеющих целью раннее подтверждение кардиального события в случае, например, боли в груди по ишемическому типу или при других симптомах. Изобретение представляет собой устройство экспресс-диагностирования сердечной деятельности, позволяющее быстро диагностировать пациента с подозрением на наличие кардиального события, в частности острого инфаркта миокарда (ОИМ), в течение наиболее критического периода, составляющего несколько часов с момента события. В одном аспекте, изобретение обеспечивает качественный латеральный проточный иммунохроматографический анализ, включающий смесь двух антител или конъюгатов антител, каждое из которых является специфичным для одного кардиомаркера и нацелено на одновременное выявление обоих маркеров при низких концентрациях, характерных для ранних стадий кардиального события, в то время как комбинированный сигнал
иммуноанализа, созданный обоими маркерами, при превышении определенного порогового уровня указывает на наличие события. В предпочтительном варианте осуществления изобретения, один из маркеров представляет собой сердечный тропонин (СТ), а другой представляет собой сердечную форму белка, связывающего жирные кислоты (HFBP). В одном варианте осуществления изобретения, HFBP выявляется примерно через полчаса после появления симптомов, тогда как уровни в это время составляют около 5 нг/мл (базовые уровни 95% здорового населения находятся в диапазоне 0,5-3,5), тогда как тропонин-I обнаруживается примерно через три часа после симптомов, когда его уровни превышают 1 нг/мл. Например, результаты клинических испытаний показали аддитивный эффект двух маркеров, причем каждый из них по отдельности был необнаруживаемым ниже определенной концентрации (обычно 1 нг/мл для тропонина и 5 нг/мл для HFBP), но оба вместе в тех же концентрациях обеспечивали истинно положительные результаты; в одном примере, 0,14 нг/мл тропонина или 4,92 нг/мл FABP не обнаруживался, а образец содержащий 0,14 нг/мл тропонина с 4,92 нг/мл HFBP стал обнаруживаться.
Применительно к "антителу" в описании изобретения, речь может идти как об антителе, так и о деривате антитела или конъюгате антитела, соответствующим аспектом которых является способность агента вступать в реакцию с антигеном, а именно с кардиомаркером. Смесь антител в устройстве или способе, согласно изобретению, может содержать более одного антитела против одного маркера; смесь может содержать антитела против нескольких форм маркера, например, против нескольких форм тропонина, или против нескольких эпитопов на одном и том же маркере. Разумеется, что устройство и способ, согласно изобретению, используют известные в данной области реакции, такие как реакции комплекса антитело-антиген с другим антителом или конъюгатом антитела, целью которых является получение как можно более сильного визуального сигнала. Например, в одном варианте осуществления изобретения, устройство включает два антитела для реакции с СТ и одно антитело для реакции с HFBP, а также два конъюгата антител для реакции с комплексами СТ и один конъюгат антитела для реакции с комплексами HFBP.
Согласно одному аспекту, анализ нацелен на качественное определение HFBP и тропонина I в образце цельной крови диагностируемого пациента, указанные маркеры обычно обнаруживаются в крови в течение 1 часа и в течение 4 часов, соответственно, после повреждения миокарда, при раздельном контроле, причем следует отметить, что существующая практика не основывается на обнаружении только HFBP.
Средства раздельного обнаружения HFBP и тропонина I были описаны; однако, изобретение объединяет две отдельные реакции в один эффект, который выражается в одном индикаторном сигнале. В важном аспекте изобретения, устройство, включающее в себя смесь антител или конъюгатов антител, специфичных для двух кардиомаркеров, одновременно обнаруживает комбинированные минимальные уровни кардиотропонина I и/или HFBP; в одном из вариантов осуществления настоящего изобретения, указанные минимальные уровни могут быть едва различимы, если измеряются отдельно. Преимущественно, устройство по изобретению обеспечивает результаты через несколько минут, например от 10 до 15 минут; очень важно, что результаты могут быть получены в течение первых нескольких наиболее критических часов после кардиального события, в частности в течение четырех часов, например, в течение трех часов или в течение двух часов. Дело в том, что положительный результат при обнаружении повышенных уровней HFBP и СТ после предполагаемого кардиального события у пациента указывает на чрезвычайную ситуацию и предписывает госпитализацию пациента в больницу; новый подход к объединению обоих маркеров в одну линию упрощает интерпретацию практических результатов. Более того, общая линия теста для двух кардиомаркеров улучшает сенситивность теста, в котором комплексы большего количества антител или конъюгатов антител, таких как анти-HFBP и антитропонин I, способствуют интенсивности одной и той же полоски. Благодаря этому накопительному эффекту обнаруживается меньше маркеров в одной полоске, содержащей смесь антител, чем в двух отдельных полосках, содержащих раздельные антитела или конъюгаты антител. Однако, основным преимуществом нового устройства и способа является усредняющий эффект сочетания сигналов в критический период от одного до четырех часов после события ОИМ, что обеспечивает быстрые и надежные результаты практически в режиме онлайн.
Изобретение будет далее описано и проиллюстрировано следующими примерами.
Примеры
Были получены конъюгаты антител, обеспечивающие цветную реакцию с СТ, HFBP или человеческим сывороточным альбумином, в частности антитропонин I, анти-HFBP и анти-HSA (anti Human Serum Albumin - антитела к сывороточному альбумину человека). Конъюгаты антител применялись для иммобилизации в узких полосках, на полосах капиллярных ложе, сконфигурированных на иммобилизацию
конъюгатов антител. Были использованы полосы для подготовки устройств латерального проточного иммуноанализа (далее LFID). Иммобилизуя ряд конъюгатных количеств/концентраций (объемы определенных концентраций, которые должны быть нанесены на полосу для иммобилизации конъюгата, соответствующие различным общим количествам цветобразующих реагентов в полоске), и посредством взаимодействия полосок с рядом образцов, содержащих различные концентрации антигена, для всех антигенов были определены необходимые количества реагентов для желаемой интенсивности сигнала. Были определены следующие пороговые количества/концентрации: количество антитропонина I для обнаружения 1 нг/мл тропонина I в образце и количество aнти-FABP-3 для обнаружения 5 нг/мл HFBP в образце, пороговые количества, соответствующие максимальной величине, обеспечивающей неразличимый цветовой сигнал. Образцы, включающие 3 нг/мл тропонина-I или 15 мг/мл HFBP, обеспечили при одинаковых условиях достаточно яркие цветовые полоски. Анти-HSA применялся в таком количестве, чтобы обеспечить сильный сигнал (примерно в 10 раз сильнее, чем 3 нг/мл тропонина-I с тропониновой полоской) и служить в качестве контроля того, что LFID в принципе работает. Смесь конъюгатов антител была подготовлена путем смешивания указанного порогового количества антитропонина I и указанного порогового количества FABP-3.
Было подготовлено девять LFID, все из которых содержали контрольную полоску HSA (Human Serum Albumin - сывороточный альбумин человека); три содержали пороговое количество для обнаружения 1 нг/мл тропонина-I, три содержали пороговое количество для обнаружения 5 нг/мл HFBP, и еще три содержали полоску со смешанными конъюгатами антител, включающими указанные
пороговые количества антитропонина-I и анти-HFBP. Образец человеческой крови от здорового донора (с очень низкими уровнями кардиомаркеров) был разделен на три порции: тропонин-1 был добавлен в первую порцию до концентрации 1 нг/мл, HFBP был добавлен во вторую порцию до концентрации 5 нг/мл, и оба маркера были добавлены в концентрациях 1 и 5 нг/мл, соответственно, в третью порцию. Каждую порцию наносили на LFIDs, включающие соответствующее антитело. Различимые сигналы появились (+) или не появились (-) в устройствах, как показано в Таблице 1.
Таблица 1
Наличие (+) или отсутствие (-) видимого сигнала в девяти устройствах. Три устройства содержали анти-СТ, следующие три устройства содержали анти-HFBP, и еще три содержали смесь антител; образец крови, содержащий 1 нг/мл добавленного тропонина-I, был нанесен на устройства с анти-СТ; образец крови, содержащий 5 нг/мл HFBP был нанесен на устройства с анти-HFBP; образец крови, содержащий 1 нг/мл добавленного тропонина-I и 5 нг/мл добавленного HFBP, был нанесен на устройства со смесями.
С - контроль, М - кардиомаркер.
В таблице показаны достоверные результаты, полученные с устройств (в трех экземплярах). Концентрации 1 и 5 нг/мл двух маркеров, соответственно, относятся к очень ранней стадии кардиального события. Таблица показывает, что устройство по изобретению может предоставить релевантную информацию, способствующую ранней диагностике ОИМ.
Хотя данное изобретение и описано с точки зрения некоторых конкретных примеров, возможны многие модификации и вариации. Поэтому предполагается, что в рамках приложенной формулы изобретения, указанное изобретение может быть реализовано иначе, чем конкретно описано.
Claims (20)
1. Устройство для обнаружения маркеров острого инфаркта миокарда (ОИМ) в образце крови человека, включающее иммобилизованную в полосе иммуноанализа смесь по меньшей мере двух антител или конъюгатов антител, одновременно вступающую в реакцию по меньшей мере с сердечным тропонином (СТ) и с сердечной формой белка, связывающего жирные кислоты (HFBP), объединенные реакции обеспечивают визуальный сигнал, если концентрация каждого из указанных маркеров превышает определенное заданное пороговое значение, составляющее 0,5 нг/мл для СТ и 5 нг/мл для HFBP, указанный визуальный сигнал быстро и достоверно указывает на событие ОИМ в критический период от 1 до 4 часов с момента его возникновения.
2. Устройство по п. 1, включающее в себя другую смесь указанных антител или конъюгатов антител, где указанное пороговое значение составляет 4 нг/мл для СТ и 80 нг/мл для HFBP и где указанный визуальный сигнал показывает, что событие ОИМ произошло не менее девяти часов назад.
3. Устройство по п. 1, в котором указанное пороговое значение для каждого маркера определяется из распределения его концентрации в крови здорового населения.
4. Устройство по п. 3, в котором указанное пороговое значение выше 95-го перцентиля в указанном распределении для каждого из маркеров.
5. Устройство по п. 3, в котором указанное пороговое значение выше 99-го перцентиля в указанном распределении для каждого из маркеров.
6. Устройство по п. 3, в котором указанное пороговое значение для каждого маркера ниже максимальной концентрации маркера, которая не создает визуальный сигнал, если указанный маркер в образце один.
7. Устройство по п. 1, включающее в себя другую смесь указанных антител или конъюгатов антител, где указанное пороговое значение для СТ составляет около 1 нг/мл, а указанное пороговое значение для HFBP составляет около 10 нг/мл.
8. Устройство по п. 1, в котором указанный тропонин включает белки, выбранные из группы, состоящей из тропонина-С, тропонина-I, тропонина-Т, комплекса указанных тропонинов и смеси, содержащей по меньшей мере два из указанных тропонинов.
9. Устройство по п. 1, в котором указанная полоса является частью набора латерального проточного иммуноанализа.
10. Устройство по п. 1, в котором указанная смесь антител или конъюгатов антител иммобилизована в полосе иммуноанализа в виде одной узкой полоски и в котором указанный визуальный сигнал представляет собой изменение цвета указанной полоски.
11. Устройство по п. 1, в котором указанная смесь антител или конъюгатов антител иммобилизована в указанной полосе в виде нескольких узких полосок, различающихся указанным заданным пороговым значением и создающих указанный визуальный сигнал при различных концентрациях указанных маркеров (различающихся по чувствительности).
12. Устройство по п. 10 или 11, дополнительно включающее контрольные полоски, демонстрирующие сравнительную интенсивность цвета либо до, либо после контакта с указанным образцом крови.
13. Устройство по п. 1, включающее ELISA.
14. Устройство по п. 1, включающее одну или несколько смесей антител или конъюгатов антител, одновременно специфичных как для СТ, так и для HFBP, антитела или конъюгаты антител, иммобилизованные в полосе иммуноанализа в виде одной или нескольких узких полосок и вступающие в реакцию с указанными маркерами по меньшей мере в одном образце крови для создания визуального сигнала(ов), если концентрация каждого из указанных маркеров превышает определенное заданное пороговое значение, указанная полоса дополнительно включает контрольные полоски, демонстрирующие сравнительные интенсивности цвета либо до, либо после контакта с указанным образцом крови, причем несколько указанных узких полосок в некоторых случаях вступают в реакцию с указанными маркерами в указанном образце крови с различными чувствительностями и создают указанные визуальные сигналы при различных концентрациях маркера.
15. Устройство по п. 13, обеспечивающее оценку концентрации СТ и/или HFBP в указанном образце, основанную либо на сравнении интенсивностей указанного сигнала(ов) с указанными сравнительными интенсивностями, либо на сравнении двух сигналов, соответствующих двум различным концентрациям маркера.
16. Устройство по п. 14, в котором указанная оценка концентрации СТ и/или HFBP в указанном образце обеспечивает оценку времени, прошедшего между отбором образца и событием ОИМ.
17. Устройство по п. 14, в котором указанное заданное пороговое значение составляет 0,5 нг/мл для СТ и 10 нг/мл для HFBP для одной из указанных нескольких узких полосок и в котором положительный сигнал указывает, что событие ОИМ произошло у донора указанного образца не менее одного часа назад.
18. Устройство по п. 14, в котором указанное заданное пороговое значение составляет 1 нг/мл для СТ и 20 нг/мл для HFBP для одной из указанных нескольких узких полосок и в котором положительный сигнал указывает, что событие ОИМ произошло у донора указанного образца не менее трех часов назад.
19. Устройство по п. 14, в котором указанное заданное пороговое значение составляет 4 нг/мл для СТ и 80 нг/мл для HFBP для одной из указанных нескольких узких полосок и в котором положительный сигнал указывает, что событие ОИМ произошло у донора указанного образца не менее девяти часов назад.
20. Устройство по п. 14, в котором указанный по меньшей мере один образец крови включает по меньшей мере два образца, отобранных в два разных периода времени, и в котором оценки концентраций СТ и/или HFBP в указанных двух образцах повышают точность оценки времени события ОИМ.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL245091A IL245091B (en) | 2016-04-13 | 2016-04-13 | Single stage cardiac test device |
| IL245091 | 2016-04-13 | ||
| PCT/IL2017/050359 WO2017179036A1 (en) | 2016-04-13 | 2017-03-22 | One step cardiac test device |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018135637A3 RU2018135637A3 (ru) | 2020-05-13 |
| RU2018135637A RU2018135637A (ru) | 2020-05-13 |
| RU2721726C2 RU2721726C2 (ru) | 2020-05-21 |
| RU2721726C9 true RU2721726C9 (ru) | 2020-07-15 |
Family
ID=60042390
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018135637A RU2721726C9 (ru) | 2016-04-13 | 2017-03-22 | Устройство экспресс-диагностирования сердечной деятельности |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20190154705A1 (ru) |
| EP (1) | EP3442428B1 (ru) |
| JP (1) | JP7251982B2 (ru) |
| CN (1) | CN109561887A (ru) |
| ES (1) | ES2908917T3 (ru) |
| IL (1) | IL245091B (ru) |
| RU (1) | RU2721726C9 (ru) |
| WO (1) | WO2017179036A1 (ru) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1998178A1 (en) * | 2007-05-29 | 2008-12-03 | F. Hoffman-la Roche AG | H-FABP as early predictor of myocardial infarction |
| CN101806804A (zh) * | 2010-01-08 | 2010-08-18 | 兰州生物制品研究所 | 用于免疫学方法检测急性心肌梗塞的试剂及测试条 |
| US20110076692A1 (en) * | 2009-09-29 | 2011-03-31 | Ramakrishna Sista | Detection of Cardiac Markers on a Droplet Actuator |
| WO2011113905A1 (en) * | 2010-03-18 | 2011-09-22 | Roche Diagnostics Gmbh | Method for staging myocardial infarction and for monitoring efficacy of intervention |
| RU113847U1 (ru) * | 2011-10-05 | 2012-02-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью Научно-Производственное Объединение "Биотест" (Ооо Нпо "Биотест") | КОМБИНИРОВАННАЯ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ-МАРКЕРОВ ИНФАРКТА МИОКАРДА сБСЖК И ТРОПОНИНА I В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ |
| RU2464572C1 (ru) * | 2010-07-29 | 2012-10-20 | Сабир Насирович Велиев | Тест-система для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты, и тропонина i в образце цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда (варианты) |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5604105B1 (en) * | 1990-10-12 | 1999-08-24 | Spectral Diagnostics Inc | Method and device for diagnosingand distinguishing chest pain in early onset thereof |
| JPH04285765A (ja) * | 1991-03-13 | 1992-10-09 | Casio Comput Co Ltd | デジタルレコーダ |
| JPH09304393A (ja) * | 1996-05-15 | 1997-11-28 | Ind Technol Res Inst | 急性心筋梗塞診断キット |
| JPH11326326A (ja) * | 1998-05-13 | 1999-11-26 | Dainippon Printing Co Ltd | 免疫検査体 |
| GB0509305D0 (en) | 2005-05-06 | 2005-06-15 | Randox Lab Ltd | Method |
| EP1977242B1 (en) | 2006-01-27 | 2016-08-03 | Becton Dickinson and Company | Lateral flow immunoassay with encapsulated detection modality |
| WO2007114947A2 (en) | 2006-04-04 | 2007-10-11 | Singulex, Inc. | Highly sensitive system and methods for analysis of troponin |
| WO2008066997A2 (en) | 2006-09-27 | 2008-06-05 | Cmed Technologies Ltd. | A method for quantitative measurement of cardiac biochemical markers |
| EP2167975A1 (en) | 2007-05-29 | 2010-03-31 | F. Hoffmann-Roche AG | H-fabp as early predictor of myocardial infarction |
| CN101271108A (zh) * | 2008-01-11 | 2008-09-24 | 广州益善生物技术有限公司 | 心肌梗塞早期诊断液相芯片及其制备方法 |
| JP5124601B2 (ja) | 2009-01-23 | 2013-01-23 | 惠三 山口 | オキサ型β−ラクタマーゼ産生菌の検出方法、同定方法及びキット |
| JP2010210444A (ja) | 2009-03-10 | 2010-09-24 | Beacle Inc | 多抗原同時検出用ナノ粒子 |
| WO2011017605A2 (en) | 2009-08-07 | 2011-02-10 | Affinimark Technologies, Inc. | Device and methods for the immunological identification of cerebrospinal fluid |
| WO2013036913A1 (en) * | 2011-09-08 | 2013-03-14 | Nexus Dx, Inc. | A multilevel analyte assay |
| CN203616317U (zh) | 2013-12-05 | 2014-05-28 | 北京汇创宜医疗科技有限公司 | 一种用于急性心梗诊断的组合检测卡 |
| CN103954778A (zh) | 2014-05-22 | 2014-07-30 | 江苏金标世纪生物科技有限公司 | 心肌梗塞三联快速检测试剂盒及其制备方法 |
| CN104714031A (zh) | 2015-03-25 | 2015-06-17 | 王义明 | 一种心肌梗死快速检测试剂盒 |
-
2016
- 2016-04-13 IL IL245091A patent/IL245091B/en active IP Right Grant
-
2017
- 2017-03-22 WO PCT/IL2017/050359 patent/WO2017179036A1/en active Application Filing
- 2017-03-22 RU RU2018135637A patent/RU2721726C9/ru active
- 2017-03-22 JP JP2018554438A patent/JP7251982B2/ja active Active
- 2017-03-22 EP EP17782044.6A patent/EP3442428B1/en active Active
- 2017-03-22 ES ES17782044T patent/ES2908917T3/es active Active
- 2017-03-22 CN CN201780032538.2A patent/CN109561887A/zh active Pending
- 2017-03-22 US US16/091,385 patent/US20190154705A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1998178A1 (en) * | 2007-05-29 | 2008-12-03 | F. Hoffman-la Roche AG | H-FABP as early predictor of myocardial infarction |
| US20110076692A1 (en) * | 2009-09-29 | 2011-03-31 | Ramakrishna Sista | Detection of Cardiac Markers on a Droplet Actuator |
| CN101806804A (zh) * | 2010-01-08 | 2010-08-18 | 兰州生物制品研究所 | 用于免疫学方法检测急性心肌梗塞的试剂及测试条 |
| WO2011113905A1 (en) * | 2010-03-18 | 2011-09-22 | Roche Diagnostics Gmbh | Method for staging myocardial infarction and for monitoring efficacy of intervention |
| RU2464572C1 (ru) * | 2010-07-29 | 2012-10-20 | Сабир Насирович Велиев | Тест-система для иммунохроматографического определения сердечного белка, связывающего жирные кислоты, и тропонина i в образце цельной крови для экспресс-диагностики инфаркта миокарда (варианты) |
| RU113847U1 (ru) * | 2011-10-05 | 2012-02-27 | Общество С Ограниченной Ответственностью Научно-Производственное Объединение "Биотест" (Ооо Нпо "Биотест") | КОМБИНИРОВАННАЯ ИММУНОХРОМАТОГРАФИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ-МАРКЕРОВ ИНФАРКТА МИОКАРДА сБСЖК И ТРОПОНИНА I В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL245091A0 (en) | 2016-08-31 |
| RU2018135637A3 (ru) | 2020-05-13 |
| RU2721726C2 (ru) | 2020-05-21 |
| EP3442428A1 (en) | 2019-02-20 |
| EP3442428B1 (en) | 2022-03-02 |
| US20190154705A1 (en) | 2019-05-23 |
| JP7251982B2 (ja) | 2023-04-04 |
| CN109561887A (zh) | 2019-04-02 |
| WO2017179036A1 (en) | 2017-10-19 |
| IL245091B (en) | 2020-02-27 |
| EP3442428A4 (en) | 2019-10-16 |
| ES2908917T3 (es) | 2022-05-04 |
| JP2019514009A (ja) | 2019-05-30 |
| RU2018135637A (ru) | 2020-05-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5976732B2 (ja) | 神経学的状態のバイオマーカー検出方法およびアッセイ | |
| Van Engelen et al. | Age-related changes of neuron-specific enolase, S-100 protein, and myelin basic protein concentrations in cerebrospinal fluid | |
| Michetti et al. | The nervous system-specific S-100 antigen in cerebrospinal fluid of multiple sclerosis patients | |
| JP3551678B2 (ja) | ヘモグロビンＡ１ｃの測定法及びキット | |
| Panteghini | Diagnostic application of CK-MB mass determination | |
| EP2281203A1 (en) | A marker for graft failure and mortality | |
| US11598781B2 (en) | Method for predicting the risk of incidence of chronic kidney disease | |
| US20080311591A1 (en) | Differential Immunoassay | |
| EP1898215B1 (en) | Method of assaying endocrine substance in specimen | |
| JP2013501919A (ja) | 脳脊髄液の免疫的識別のための装置および方法 | |
| DE69221666T2 (de) | Verfahren zur Diagnose von Nierenkrankheiten durch Nachweisung von Albuminfragmenten | |
| Missler et al. | Measurement of S-100 protein in human blood and cerebrospinal fluid: analytical method and preliminary clinical results | |
| JP4751555B2 (ja) | 脳卒中のための診断アッセイ | |
| WO2016064545A1 (en) | Lateral flow immunoassay methods and devices for simultaneously detecting hemoglobin s, hemoglobin c, and hemoglobin a in newborns, infants, children, and adults | |
| AU2001287423B2 (en) | Methods and kits for separation and detection of proteins in biological samples | |
| RU2721726C9 (ru) | Устройство экспресс-диагностирования сердечной деятельности | |
| JPH07311200A (ja) | 生物学的液体中の遊離リガンドの測定方法および測定用キット | |
| EP1371986A1 (en) | Diagnosis of Alzheimer's disease based on the hAbeta42:hAbeta40 ratio | |
| Nakamura et al. | Clinical evaluation of the liquid-chromatographic determination of urinary free cortisol. | |
| EP1360499B1 (de) | Bestimmung des zytosolischen nadp-abhängigen malatdecarboxylase-isoenzyms | |
| Vuori et al. | The use of myoglobin/carbonic anhydrase III ratio as a marker for myocardial damage in patients with renal failure | |
| WO2018191406A1 (en) | Detection of predictors of preeclampsia | |
| JP3171681B2 (ja) | 糖化蛋白の測定方法 | |
| Dods | Early detection of myocardial infarction by an immunoradiometric procedure for creatine kinase MB. | |
| Oellerich et al. | Evaluation of enzyme immunoassays for determination of thyroxine (EMIT, ENZYMUN) and of thyroxine binding index |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| TH4A | Reissue of patent specification |