RU2717018C2 - Фармацевтические и пищевые композиции для индукции насыщения и продления чувства сытости у нуждающихся в этом субъектов - Google Patents
Фармацевтические и пищевые композиции для индукции насыщения и продления чувства сытости у нуждающихся в этом субъектов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2717018C2 RU2717018C2 RU2017110516A RU2017110516A RU2717018C2 RU 2717018 C2 RU2717018 C2 RU 2717018C2 RU 2017110516 A RU2017110516 A RU 2017110516A RU 2017110516 A RU2017110516 A RU 2017110516A RU 2717018 C2 RU2717018 C2 RU 2717018C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- subject
- food
- clpb
- bacteria
- protein
- Prior art date
Links
- 235000019627 satiety Nutrition 0.000 title claims abstract description 28
- 230000036186 satiety Effects 0.000 title claims abstract description 28
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 84
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 title description 17
- 230000035807 sensation Effects 0.000 title description 2
- 235000019615 sensations Nutrition 0.000 title description 2
- 101150036359 clpB gene Proteins 0.000 claims abstract description 147
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 116
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 77
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 claims abstract description 54
- 230000037406 food intake Effects 0.000 claims abstract description 51
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 claims abstract description 6
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 claims abstract description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 112
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 100
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 72
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims description 59
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims description 59
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims description 59
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 46
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 43
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 38
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims description 31
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 30
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 16
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 12
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 11
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 10
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 9
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 9
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 8
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 8
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 claims description 7
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 7
- 229920002581 Glucomannan Polymers 0.000 claims description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 6
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 6
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 claims description 6
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical class OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 5
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 claims description 5
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 claims description 5
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 claims description 5
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 5
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 claims description 5
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims description 4
- LUEWUZLMQUOBSB-GFVSVBBRSA-N mannan Chemical group O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-GFVSVBBRSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 claims description 4
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 claims description 4
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 4
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 4
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 claims description 3
- 244000247812 Amorphophallus rivieri Species 0.000 claims description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 3
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 claims description 3
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 claims description 3
- 229920002752 Konjac Polymers 0.000 claims description 3
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 claims description 3
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002778 food additive Substances 0.000 claims description 3
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 claims description 3
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 claims description 3
- OIZGSVFYNBZVIK-FHHHURIISA-N 3'-sialyllactose Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@@]1(C(O)=O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O[C@H](CO)[C@@H]1O OIZGSVFYNBZVIK-FHHHURIISA-N 0.000 claims description 2
- 235000001206 Amorphophallus rivieri Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 claims description 2
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001828 Gelatine Substances 0.000 claims description 2
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 claims description 2
- 235000010582 Pisum sativum Nutrition 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 2
- 235000020244 animal milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000021255 galacto-oligosaccharides Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000003271 galactooligosaccharides Chemical class 0.000 claims description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 2
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 claims description 2
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000001814 pectin Substances 0.000 claims description 2
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 claims description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 35
- 230000037396 body weight Effects 0.000 abstract description 24
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 154
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 147
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 138
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 77
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 44
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 43
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 42
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 41
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 33
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 29
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 28
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 102100027467 Pro-opiomelanocortin Human genes 0.000 description 19
- 108010088847 Peptide YY Proteins 0.000 description 18
- 108010069820 Pro-Opiomelanocortin Proteins 0.000 description 18
- 239000000683 Pro-Opiomelanocortin Substances 0.000 description 18
- 102000007568 Proto-Oncogene Proteins c-fos Human genes 0.000 description 18
- 108010071563 Proto-Oncogene Proteins c-fos Proteins 0.000 description 18
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 18
- YNXLOPYTAAFMTN-SBUIBGKBSA-N C([C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 YNXLOPYTAAFMTN-SBUIBGKBSA-N 0.000 description 17
- 102100029909 Peptide YY Human genes 0.000 description 17
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 17
- 210000003295 arcuate nucleus Anatomy 0.000 description 17
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 17
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 16
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 16
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 15
- 102400000322 Glucagon-like peptide 1 Human genes 0.000 description 15
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 15
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 15
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 14
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 14
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 14
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 14
- 230000002407 ATP formation Effects 0.000 description 13
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 13
- 230000002891 anorexigenic effect Effects 0.000 description 13
- 229920003134 Eudragit® polymer Polymers 0.000 description 12
- 101710200814 Melanotropin alpha Proteins 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 12
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 12
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 12
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 12
- 102400000740 Melanocyte-stimulating hormone alpha Human genes 0.000 description 11
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 11
- 239000006994 mh medium Substances 0.000 description 11
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- WHNFPRLDDSXQCL-UAZQEYIDSA-N α-msh Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 WHNFPRLDDSXQCL-UAZQEYIDSA-N 0.000 description 11
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 10
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 10
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 10
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 102000001796 Melanocortin 4 receptors Human genes 0.000 description 9
- 108050009019 Melanocortin 4 receptors Proteins 0.000 description 9
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 9
- 230000036528 appetite Effects 0.000 description 9
- 235000019789 appetite Nutrition 0.000 description 9
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 9
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 9
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 9
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 9
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 9
- -1 sterile Substances 0.000 description 9
- 108090000932 Calcitonin Gene-Related Peptide Proteins 0.000 description 8
- 102000004414 Calcitonin Gene-Related Peptide Human genes 0.000 description 8
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 8
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 8
- 230000036541 health Effects 0.000 description 8
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 8
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 8
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 8
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 8
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 8
- 238000001419 two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 7
- 235000019525 fullness Nutrition 0.000 description 7
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 7
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 7
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 7
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 6
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 6
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 6
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 6
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 6
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 6
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 6
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 6
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 6
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 6
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 6
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 6
- JMHFFDIMOUKDCZ-NTXHZHDSSA-N 61214-51-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 JMHFFDIMOUKDCZ-NTXHZHDSSA-N 0.000 description 5
- 108090000860 Endopeptidase Clp Proteins 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-leucine Natural products CC(C)CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O YBAFDPFAUTYYRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 5
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 5
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 5
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 5
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 5
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 235000008924 yoghurt drink Nutrition 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 108010005233 alanylglutamic acid Proteins 0.000 description 4
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 4
- 239000012131 assay buffer Substances 0.000 description 4
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 4
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 235000011850 desserts Nutrition 0.000 description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 235000004213 low-fat Nutrition 0.000 description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 4
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 235000021251 pulses Nutrition 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- 102400000748 Beta-endorphin Human genes 0.000 description 3
- 101800005049 Beta-endorphin Proteins 0.000 description 3
- 102000004219 Brain-derived neurotrophic factor Human genes 0.000 description 3
- 108090000715 Brain-derived neurotrophic factor Proteins 0.000 description 3
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 3
- 102000012289 Corticotropin-Releasing Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010022152 Corticotropin-Releasing Hormone Proteins 0.000 description 3
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 229920000926 Galactomannan Polymers 0.000 description 3
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 101710151321 Melanostatin Proteins 0.000 description 3
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102400000064 Neuropeptide Y Human genes 0.000 description 3
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 3
- 244000299461 Theobroma cacao Species 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 210000004727 amygdala Anatomy 0.000 description 3
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 description 3
- 235000021407 appetite control Nutrition 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 3
- 229940041967 corticotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 3
- KLVRDXBAMSPYKH-RKYZNNDCSA-N corticotropin-releasing hormone (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CNC=N1 KLVRDXBAMSPYKH-RKYZNNDCSA-N 0.000 description 3
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 3
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 3
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 3
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 3
- 235000005686 eating Nutrition 0.000 description 3
- 230000007937 eating Effects 0.000 description 3
- 230000020595 eating behavior Effects 0.000 description 3
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 3
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 3
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 3
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 3
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N glycyl-DL-alpha-alanine Natural products OC(=O)C(C)NC(=O)CN VPZXBVLAVMBEQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002267 hypothalamic effect Effects 0.000 description 3
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 3
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 3
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 3
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 3
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 3
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 3
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 3
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N nucleopeptide y Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 URPYMXQQVHTUDU-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 3
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 230000001956 orexigenic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 3
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229920000193 polymethacrylate Polymers 0.000 description 3
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 3
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Inorganic materials [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- 239000012723 sample buffer Substances 0.000 description 3
- 238000009738 saturating Methods 0.000 description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 3
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 3
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 3
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000582 ATP assay Toxicity 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- AUFHLLPVPSMEOG-YUMQZZPRSA-N Arg-Gly-Glu Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AUFHLLPVPSMEOG-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- YKBHOXLMMPZPHQ-GMOBBJLQSA-N Arg-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YKBHOXLMMPZPHQ-GMOBBJLQSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 2
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 2
- 101000750394 Escherichia coli (strain K12) Chaperone protein ClpB Proteins 0.000 description 2
- 229920003136 Eudragit® L polymer Polymers 0.000 description 2
- 229920003137 Eudragit® S polymer Polymers 0.000 description 2
- 101000978431 Homo sapiens Melanocortin receptor 3 Proteins 0.000 description 2
- 101000986779 Homo sapiens Orexigenic neuropeptide QRFP Proteins 0.000 description 2
- 101000821449 Homo sapiens Secreted and transmembrane protein 1 Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 238000012313 Kruskal-Wallis test Methods 0.000 description 2
- 102000016267 Leptin Human genes 0.000 description 2
- 108010092277 Leptin Proteins 0.000 description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 102100023726 Melanocortin receptor 3 Human genes 0.000 description 2
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M Methacrylate Chemical compound CC(=C)C([O-])=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- BAPJBEWLBFYGME-UHFFFAOYSA-N Methyl acrylate Chemical compound COC(=O)C=C BAPJBEWLBFYGME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 2
- 102000014171 Milk Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010011756 Milk Proteins Proteins 0.000 description 2
- SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N N-L-alpha-glutamyl-L-valine Natural products CC(C)C(C(O)=O)NC(=O)C(N)CCC(O)=O SITLTJHOQZFJGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N N-alpha-L-glutamyl-L-phenylalanine Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 XMBSYZWANAQXEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003797 Neuropeptides Human genes 0.000 description 2
- 102100028142 Orexigenic neuropeptide QRFP Human genes 0.000 description 2
- 102000002512 Orexin Human genes 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 102100021853 Secreted and transmembrane protein 1 Human genes 0.000 description 2
- FTVRVZNYIYWJGB-ACZMJKKPSA-N Ser-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O FTVRVZNYIYWJGB-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 2
- CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N Val-Gly-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O CELJCNRXKZPTCX-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 2
- FTKXYXACXYOHND-XUXIUFHCSA-N Val-Ile-Leu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O FTKXYXACXYOHND-XUXIUFHCSA-N 0.000 description 2
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000036982 action potential Effects 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 108010009111 arginyl-glycyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 2
- 238000013528 artificial neural network Methods 0.000 description 2
- 108010077245 asparaginyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010093581 aspartyl-proline Proteins 0.000 description 2
- 108010038633 aspartylglutamate Proteins 0.000 description 2
- 235000015173 baked goods and baking mixes Nutrition 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N chlorobutanol Chemical compound CC(C)(O)C(Cl)(Cl)Cl OSASVXMJTNOKOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019219 chocolate Nutrition 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 2
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 2
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 2
- 210000002322 enterochromaffin cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000006167 equilibration buffer Substances 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 235000014106 fortified food Nutrition 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 2
- 108010015792 glycyllysine Proteins 0.000 description 2
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 230000003284 homeostatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 2
- 229940039781 leptin Drugs 0.000 description 2
- NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N leptin Chemical compound O=C([C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)CCSC)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O NRYBAZVQPHGZNS-ZSOCWYAHSA-N 0.000 description 2
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 229920003145 methacrylic acid copolymer Polymers 0.000 description 2
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Chemical compound C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010208 microarray analysis Methods 0.000 description 2
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 2
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 2
- 235000021239 milk protein Nutrition 0.000 description 2
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 108060005714 orexin Proteins 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 2
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000000751 protein extraction Methods 0.000 description 2
- 238000000575 proteomic method Methods 0.000 description 2
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QPWYMHBRJDWMIS-AULSSRMGSA-N qrfp Chemical compound C([C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)C(C)C)[C@@H](C)O)CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)C1=CC=C(O)C=C1 QPWYMHBRJDWMIS-AULSSRMGSA-N 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 2
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 2
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 2
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 2
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000539 two dimensional gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 2
- AXFMEGAFCUULFV-BLFANLJRSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[(2s,3r)-2-amino-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound CC[C@@H](C)[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AXFMEGAFCUULFV-BLFANLJRSA-N 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N (2s,3s,4s,5s,6r)-2-[(2r,3s,4r,5r,6s)-6-[(2r,3s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5s,6r)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](OC3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-FSKGGBMCSA-N 0.000 description 1
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGZSVBBLLGZHSF-UHFFFAOYSA-N 4,4-diethylpiperidine Chemical compound CCC1(CC)CCNCC1 DGZSVBBLLGZHSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFDKKNHCYWNNNQ-YOGANYHLSA-N 75976-10-2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)N)C(C)C)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 HFDKKNHCYWNNNQ-YOGANYHLSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006822 Agouti Signaling Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010072151 Agouti Signaling Protein Proteins 0.000 description 1
- BYXHQQCXAJARLQ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O BYXHQQCXAJARLQ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N Ala-Ala-Ser Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YYSWCHMLFJLLBJ-ZLUOBGJFSA-N 0.000 description 1
- JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N Ala-Ala-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)N JBVSSSZFNTXJDX-YTLHQDLWSA-N 0.000 description 1
- DWINFPQUSSHSFS-UVBJJODRSA-N Ala-Arg-Trp Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC2=CC=CC=C12)C(=O)O DWINFPQUSSHSFS-UVBJJODRSA-N 0.000 description 1
- PBAMJJXWDQXOJA-FXQIFTODSA-N Ala-Asp-Arg Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PBAMJJXWDQXOJA-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- FVSOUJZKYWEFOB-KBIXCLLPSA-N Ala-Gln-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)N FVSOUJZKYWEFOB-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- MVBWLRJESQOQTM-ACZMJKKPSA-N Ala-Gln-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O MVBWLRJESQOQTM-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- HXNNRBHASOSVPG-GUBZILKMSA-N Ala-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HXNNRBHASOSVPG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N Ala-Gly-Ala Chemical compound C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZVFVBBGVOILKPO-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HUUOZYZWNCXTFK-INTQDDNPSA-N Ala-His-Pro Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O)N HUUOZYZWNCXTFK-INTQDDNPSA-N 0.000 description 1
- GSHKMNKPMLXSQW-KBIXCLLPSA-N Ala-Ile-Gln Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N GSHKMNKPMLXSQW-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- LNNSWWRRYJLGNI-NAKRPEOUSA-N Ala-Ile-Val Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O LNNSWWRRYJLGNI-NAKRPEOUSA-N 0.000 description 1
- CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N Ala-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O CCDFBRZVTDDJNM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N Ala-Leu-Gly Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O MNZHHDPWDWQJCQ-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KQESEZXHYOUIIM-CQDKDKBSSA-N Ala-Lys-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O KQESEZXHYOUIIM-CQDKDKBSSA-N 0.000 description 1
- DRARURMRLANNLS-GUBZILKMSA-N Ala-Met-Val Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O DRARURMRLANNLS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N Ala-Ser-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](C)N DYXOFPBJBAHWFY-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- MMLHRUJLOUSRJX-CIUDSAMLSA-N Ala-Ser-Lys Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN MMLHRUJLOUSRJX-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HCBKAOZYACJUEF-XQXXSGGOSA-N Ala-Thr-Gln Chemical compound N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)O HCBKAOZYACJUEF-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- BHSYMWWMVRPCPA-CYDGBPFRSA-N Arg-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N BHSYMWWMVRPCPA-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N Arg-Arg-Thr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N NABSCJGZKWSNHX-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- OTZMRMHZCMZOJZ-SRVKXCTJSA-N Arg-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OTZMRMHZCMZOJZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N Arg-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O JEOCWTUOMKEEMF-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- VIINVRPKMUZYOI-DCAQKATOSA-N Arg-Met-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O VIINVRPKMUZYOI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JCROZIFVIYMXHM-GUBZILKMSA-N Arg-Met-Ser Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N JCROZIFVIYMXHM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- VEAIMHJZTIDCIH-KKUMJFAQSA-N Arg-Phe-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O VEAIMHJZTIDCIH-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- XSPKAHFVDKRGRL-DCAQKATOSA-N Arg-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XSPKAHFVDKRGRL-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- UULLJGQFCDXVTQ-CYDGBPFRSA-N Arg-Pro-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O UULLJGQFCDXVTQ-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- OWSMKCJUBAPHED-JYJNAYRXSA-N Arg-Pro-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 OWSMKCJUBAPHED-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- WCZXPVPHUMYLMS-VEVYYDQMSA-N Arg-Thr-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O WCZXPVPHUMYLMS-VEVYYDQMSA-N 0.000 description 1
- XRNXPIGJPQHCPC-RCWTZXSCSA-N Arg-Thr-Val Chemical compound CC(C)[C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)O)C(O)=O XRNXPIGJPQHCPC-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- PJOPLXOCKACMLK-KKUMJFAQSA-N Arg-Tyr-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PJOPLXOCKACMLK-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- QJWLLRZTJFPCHA-STECZYCISA-N Arg-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O QJWLLRZTJFPCHA-STECZYCISA-N 0.000 description 1
- FAEFJTCTNZTPHX-ACZMJKKPSA-N Asn-Gln-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O FAEFJTCTNZTPHX-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- BZMWJLLUAKSIMH-FXQIFTODSA-N Asn-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O BZMWJLLUAKSIMH-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OPEPUCYIGFEGSW-WDSKDSINSA-N Asn-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O OPEPUCYIGFEGSW-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- IBLAOXSULLECQZ-IUKAMOBKSA-N Asn-Ile-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O IBLAOXSULLECQZ-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- NLDNNZKUSLAYFW-NHCYSSNCSA-N Asn-Lys-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O NLDNNZKUSLAYFW-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- BCADFFUQHIMQAA-KKHAAJSZSA-N Asn-Thr-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O BCADFFUQHIMQAA-KKHAAJSZSA-N 0.000 description 1
- IXIWEFWRKIUMQX-DCAQKATOSA-N Asp-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O IXIWEFWRKIUMQX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- HOQGTAIGQSDCHR-SRVKXCTJSA-N Asp-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HOQGTAIGQSDCHR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N Asp-Asp-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O FANQWNCPNFEPGZ-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- VHQOCWWKXIOAQI-WDSKDSINSA-N Asp-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O VHQOCWWKXIOAQI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N Asp-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VAWNQIGQPUOPQW-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N Asp-Glu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O RRKCPMGSRIDLNC-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- HAFCJCDJGIOYPW-WDSKDSINSA-N Asp-Gly-Gln Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O HAFCJCDJGIOYPW-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N Asp-Leu-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O ORRJQLIATJDMQM-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N Asp-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LIVXPXUVXFRWNY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SAKCBXNPWDRWPE-BQBZGAKWSA-N Asp-Met-Gly Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N SAKCBXNPWDRWPE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- HXVILZUZXFLVEN-DCAQKATOSA-N Asp-Met-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HXVILZUZXFLVEN-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- LIJXJYGRSRWLCJ-IHRRRGAJSA-N Asp-Phe-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O LIJXJYGRSRWLCJ-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- BWJZSLQJNBSUPM-FXQIFTODSA-N Asp-Pro-Asn Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BWJZSLQJNBSUPM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PLNJUJGNLDSFOP-UWJYBYFXSA-N Asp-Tyr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PLNJUJGNLDSFOP-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N Asp-Val-Phe Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 SFJUYBCDQBAYAJ-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108060001064 Calcitonin Proteins 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 240000008886 Ceratonia siliqua Species 0.000 description 1
- 235000013912 Ceratonia siliqua Nutrition 0.000 description 1
- 241000122205 Chamaeleonidae Species 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000484025 Cuniculus Species 0.000 description 1
- 244000007835 Cyamopsis tetragonoloba Species 0.000 description 1
- OZHXXYOHPLLLMI-CIUDSAMLSA-N Cys-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OZHXXYOHPLLLMI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 description 1
- QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N Diacetyl Chemical group CC(=O)C(C)=O QSJXEFYPDANLFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010082495 Dietary Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000617624 Escherichia coli M17 Species 0.000 description 1
- 241001302654 Escherichia coli Nissle 1917 Species 0.000 description 1
- 229920003143 Eudragit® FS 30 D Polymers 0.000 description 1
- 229920003153 Eudragit® NE polymer Polymers 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 108010040721 Flagellin Proteins 0.000 description 1
- 241000589601 Francisella Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- LKUWAWGNJYJODH-KBIXCLLPSA-N Gln-Ala-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O LKUWAWGNJYJODH-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- WOACHWLUOFZLGJ-GUBZILKMSA-N Gln-Arg-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O WOACHWLUOFZLGJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- MWLYSLMKFXWZPW-ZPFDUUQYSA-N Gln-Arg-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O MWLYSLMKFXWZPW-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- PHZYLYASFWHLHJ-FXQIFTODSA-N Gln-Asn-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O PHZYLYASFWHLHJ-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- LPYPANUXJGFMGV-FXQIFTODSA-N Gln-Gln-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N LPYPANUXJGFMGV-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- PKVWNYGXMNWJSI-CIUDSAMLSA-N Gln-Gln-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PKVWNYGXMNWJSI-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- KCJJFESQRXGTGC-BQBZGAKWSA-N Gln-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O KCJJFESQRXGTGC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- PNENQZWRFMUZOM-DCAQKATOSA-N Gln-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O PNENQZWRFMUZOM-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- KQOPMGBHNQBCEL-HVTMNAMFSA-N Gln-His-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O KQOPMGBHNQBCEL-HVTMNAMFSA-N 0.000 description 1
- JXBZEDIQFFCHPZ-PEFMBERDSA-N Gln-Ile-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N JXBZEDIQFFCHPZ-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N Gln-Leu-Lys Chemical compound NC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O IULKWYSYZSURJK-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- ZBKUIQNCRIYVGH-SDDRHHMPSA-N Gln-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N ZBKUIQNCRIYVGH-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 1
- WHVLABLIJYGVEK-QEWYBTABSA-N Gln-Phe-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O WHVLABLIJYGVEK-QEWYBTABSA-N 0.000 description 1
- AKDOUBMVLRCHBD-SIUGBPQLSA-N Gln-Tyr-Ile Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O AKDOUBMVLRCHBD-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 1
- VEYGCDYMOXHJLS-GVXVVHGQSA-N Gln-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VEYGCDYMOXHJLS-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Arg-Ala Chemical compound C[C@H](NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C(O)=O AVZHGSCDKIQZPQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RCCDHXSRMWCOOY-GUBZILKMSA-N Glu-Arg-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O RCCDHXSRMWCOOY-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N Glu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- KKCUFHUTMKQQCF-SRVKXCTJSA-N Glu-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KKCUFHUTMKQQCF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- LTUVYLVIZHJCOQ-KKUMJFAQSA-N Glu-Arg-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O LTUVYLVIZHJCOQ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- PXHABOCPJVTGEK-BQBZGAKWSA-N Glu-Gln-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)NCC(O)=O PXHABOCPJVTGEK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- GYCPQVFKCPPRQB-GUBZILKMSA-N Glu-Gln-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N GYCPQVFKCPPRQB-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N Glu-Glu-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O SJPMNHCEWPTRBR-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- MUSGDMDGNGXULI-DCAQKATOSA-N Glu-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O MUSGDMDGNGXULI-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N Glu-Gly-Gly Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O OAGVHWYIBZMWLA-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N Glu-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZWABFSSWTSAMQN-KBIXCLLPSA-N 0.000 description 1
- DNPCBMNFQVTHMA-DCAQKATOSA-N Glu-Leu-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O DNPCBMNFQVTHMA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NWOUBJNMZDDGDT-AVGNSLFASA-N Glu-Leu-His Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CN=CN1 NWOUBJNMZDDGDT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- WNRZUESNGGDCJX-JYJNAYRXSA-N Glu-Leu-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O WNRZUESNGGDCJX-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- OQXDUSZKISQQSS-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O OQXDUSZKISQQSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- CUPSDFQZTVVTSK-GUBZILKMSA-N Glu-Lys-Asp Chemical compound OC(=O)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O CUPSDFQZTVVTSK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N Glu-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ILWHFUZZCFYSKT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- SYWCGQOIIARSIX-SRVKXCTJSA-N Glu-Pro-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O SYWCGQOIIARSIX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BIYNPVYAZOUVFQ-CIUDSAMLSA-N Glu-Pro-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O BIYNPVYAZOUVFQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- YOTHMZZSJKKEHZ-SZMVWBNQSA-N Glu-Trp-Lys Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)=CNC2=C1 YOTHMZZSJKKEHZ-SZMVWBNQSA-N 0.000 description 1
- VIPDPMHGICREIS-GVXVVHGQSA-N Glu-Val-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O VIPDPMHGICREIS-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- SOYWRINXUSUWEQ-DLOVCJGASA-N Glu-Val-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O SOYWRINXUSUWEQ-DLOVCJGASA-N 0.000 description 1
- PUUYVMYCMIWHFE-BQBZGAKWSA-N Gly-Ala-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N PUUYVMYCMIWHFE-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- UGVQELHRNUDMAA-BYPYZUCNSA-N Gly-Ala-Gly Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC([O-])=O UGVQELHRNUDMAA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N Gly-Arg-Arg Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O UPOJUWHGMDJUQZ-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- LXXANCRPFBSSKS-IUCAKERBSA-N Gly-Gln-Leu Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LXXANCRPFBSSKS-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- YYPFZVIXAVDHIK-IUCAKERBSA-N Gly-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CN YYPFZVIXAVDHIK-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N Gly-Gly-Glu Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O GDOZQTNZPCUARW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N Gly-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)CN BHPQOIPBLYJNAW-NGZCFLSTSA-N 0.000 description 1
- PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Ala Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PAWIVEIWWYGBAM-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- LLZXNUUIBOALNY-QWRGUYRKSA-N Gly-Leu-Lys Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN LLZXNUUIBOALNY-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- GLACUWHUYFBSPJ-FJXKBIBVSA-N Gly-Pro-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)CN GLACUWHUYFBSPJ-FJXKBIBVSA-N 0.000 description 1
- OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N Gly-Ser-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O OHUKZZYSJBKFRR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- JSLVAHYTAJJEQH-QWRGUYRKSA-N Gly-Ser-Phe Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JSLVAHYTAJJEQH-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N Gly-Thr-Gln Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O CQMFNTVQVLQRLT-JHEQGTHGSA-N 0.000 description 1
- GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N Gly-Tyr-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GNNJKUYDWFIBTK-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 1
- RIYIFUFFFBIOEU-KBPBESRZSA-N Gly-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)CC1=CC=C(O)C=C1 RIYIFUFFFBIOEU-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- RYAOJUMWLWUGNW-QMMMGPOBSA-N Gly-Val-Gly Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O RYAOJUMWLWUGNW-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- XJQDHFMUUBRCGA-KKUMJFAQSA-N His-Asn-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O XJQDHFMUUBRCGA-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- WZOGEMJIZBNFBK-CIUDSAMLSA-N His-Asp-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WZOGEMJIZBNFBK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- CSTNMMIHMYJGFR-IHRRRGAJSA-N His-His-Arg Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O)C1=CN=CN1 CSTNMMIHMYJGFR-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ORERHHPZDDEMSC-VGDYDELISA-N His-Ile-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N ORERHHPZDDEMSC-VGDYDELISA-N 0.000 description 1
- MJUUWJJEUOBDGW-IHRRRGAJSA-N His-Leu-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 MJUUWJJEUOBDGW-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- JGFWUKYIQAEYAH-DCAQKATOSA-N His-Ser-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O JGFWUKYIQAEYAH-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- WSXNWASHQNSMRX-GVXVVHGQSA-N His-Val-Gln Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N WSXNWASHQNSMRX-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UNDGQKWQNSTPPW-CYDGBPFRSA-N Ile-Arg-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)N UNDGQKWQNSTPPW-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- QADCTXFNLZBZAB-GHCJXIJMSA-N Ile-Asn-Ala Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)O)N QADCTXFNLZBZAB-GHCJXIJMSA-N 0.000 description 1
- IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N Ile-Asp-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N IDAHFEPYTJJZFD-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- RGSOCXHDOPQREB-ZPFDUUQYSA-N Ile-Asp-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N RGSOCXHDOPQREB-ZPFDUUQYSA-N 0.000 description 1
- KUHFPGIVBOCRMV-MNXVOIDGSA-N Ile-Gln-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)O)N KUHFPGIVBOCRMV-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N Ile-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O BEWFWZRGBDVXRP-PEFMBERDSA-N 0.000 description 1
- LPFBXFILACZHIB-LAEOZQHASA-N Ile-Gly-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N LPFBXFILACZHIB-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- HPCFRQWLTRDGHT-AJNGGQMLSA-N Ile-Leu-Leu Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HPCFRQWLTRDGHT-AJNGGQMLSA-N 0.000 description 1
- PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N Ile-Ser-Ser Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N PXKACEXYLPBMAD-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- YCKPUHHMCFSUMD-IUKAMOBKSA-N Ile-Thr-Asp Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N YCKPUHHMCFSUMD-IUKAMOBKSA-N 0.000 description 1
- YWCJXQKATPNPOE-UKJIMTQDSA-N Ile-Val-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N YWCJXQKATPNPOE-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N Ketamine Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C1(NC)CCCCC1=O YQEZLKZALYSWHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001276 Kolmogorov–Smirnov test Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N L-isoleucyl-L-alanine Natural products CCC(C)C(N)C(=O)NC(C)C(O)=O RCFDOSNHHZGBOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N L-leucyl-L-phenylalanine Natural products CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 KFKWRHQBZQICHA-STQMWFEESA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000880493 Leptailurus serval Species 0.000 description 1
- CZCSUZMIRKFFFA-CIUDSAMLSA-N Leu-Ala-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O CZCSUZMIRKFFFA-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- MJOZZTKJZQFKDK-GUBZILKMSA-N Leu-Ala-Gln Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(N)=O MJOZZTKJZQFKDK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N Leu-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N KWTVLKBOQATPHJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N Leu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O KSZCCRIGNVSHFH-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- IGUOAYLTQJLPPD-DCAQKATOSA-N Leu-Asn-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IGUOAYLTQJLPPD-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- VCSBGUACOYUIGD-CIUDSAMLSA-N Leu-Asn-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O VCSBGUACOYUIGD-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- RFUBXQQFJFGJFV-GUBZILKMSA-N Leu-Asn-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O RFUBXQQFJFGJFV-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- ILJREDZFPHTUIE-GUBZILKMSA-N Leu-Asp-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O ILJREDZFPHTUIE-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- RRSLQOLASISYTB-CIUDSAMLSA-N Leu-Cys-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O RRSLQOLASISYTB-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O DZQMXBALGUHGJT-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WIDZHJTYKYBLSR-DCAQKATOSA-N Leu-Glu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WIDZHJTYKYBLSR-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- NEEOBPIXKWSBRF-IUCAKERBSA-N Leu-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O NEEOBPIXKWSBRF-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N Leu-Glu-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN HQUXQAMSWFIRET-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- DDEMUMVXNFPDKC-SRVKXCTJSA-N Leu-His-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N DDEMUMVXNFPDKC-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AOFYPTOHESIBFZ-KKUMJFAQSA-N Leu-His-His Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(O)=O AOFYPTOHESIBFZ-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- AUBMZAMQCOYSIC-MNXVOIDGSA-N Leu-Ile-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O AUBMZAMQCOYSIC-MNXVOIDGSA-N 0.000 description 1
- DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N Leu-Leu-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DSFYPIUSAMSERP-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N Leu-Leu-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O IEWBEPKLKUXQBU-VOAKCMCISA-N 0.000 description 1
- JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N Leu-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O JLWZLIQRYCTYBD-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N Leu-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O HVHRPWQEQHIQJF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N Leu-Lys-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O KPYAOIVPJKPIOU-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- IBSGMIPRBMPMHE-IHRRRGAJSA-N Leu-Met-Lys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O IBSGMIPRBMPMHE-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- DRWMRVFCKKXHCH-BZSNNMDCSA-N Leu-Phe-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CC=CC=C1 DRWMRVFCKKXHCH-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- XWEVVRRSIOBJOO-SRVKXCTJSA-N Leu-Pro-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O XWEVVRRSIOBJOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ADJWHHZETYAAAX-SRVKXCTJSA-N Leu-Ser-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N ADJWHHZETYAAAX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- BTEMNFBEAAOGBR-BZSNNMDCSA-N Leu-Tyr-Lys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N BTEMNFBEAAOGBR-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 1
- FBNPMTNBFFAMMH-AVGNSLFASA-N Leu-Val-Arg Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N FBNPMTNBFFAMMH-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- FBNPMTNBFFAMMH-UHFFFAOYSA-N Leu-Val-Arg Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)NC(C(O)=O)CCCN=C(N)N FBNPMTNBFFAMMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001732 Lignosulfonate Polymers 0.000 description 1
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 description 1
- 229920000161 Locust bean gum Polymers 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N Lys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- YNNPKXBBRZVIRX-IHRRRGAJSA-N Lys-Arg-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O YNNPKXBBRZVIRX-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- ABHIXYDMILIUKV-CIUDSAMLSA-N Lys-Asn-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O ABHIXYDMILIUKV-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- HAUUXTXKJNVIFY-ONGXEEELSA-N Lys-Gly-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O HAUUXTXKJNVIFY-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- SKRGVGLIRUGANF-AVGNSLFASA-N Lys-Leu-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O SKRGVGLIRUGANF-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N Lys-Leu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O AIRZWUMAHCDDHR-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- PLOUVAYOMTYJRG-JXUBOQSCSA-N Lys-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O PLOUVAYOMTYJRG-JXUBOQSCSA-N 0.000 description 1
- WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Met Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(O)=O WAAZECNCPVGPIV-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 description 1
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010070551 Meat Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101800001751 Melanocyte-stimulating hormone alpha Proteins 0.000 description 1
- WPTHAGXMYDRPFD-SRVKXCTJSA-N Met-Lys-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O WPTHAGXMYDRPFD-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- UDOYVQQKQHZYMB-DCAQKATOSA-N Met-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UDOYVQQKQHZYMB-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- RMLLCGYYVZKKRT-CIUDSAMLSA-N Met-Ser-Glu Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O RMLLCGYYVZKKRT-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N Methyl methacrylate Chemical compound COC(=O)C(C)=C VVQNEPGJFQJSBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000009793 Milk Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 201000010859 Milk allergy Diseases 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010065395 Neuropep-1 Proteins 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033307 Overweight Diseases 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 102000018886 Pancreatic Polypeptide Human genes 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 108010084695 Pea Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- WKTSCAXSYITIJJ-PCBIJLKTSA-N Phe-Ile-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O WKTSCAXSYITIJJ-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- GYEPCBNTTRORKW-PCBIJLKTSA-N Phe-Ile-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O GYEPCBNTTRORKW-PCBIJLKTSA-N 0.000 description 1
- RTUWVJVJSMOGPL-KKUMJFAQSA-N Phe-Met-Glu Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N RTUWVJVJSMOGPL-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 1
- OHIYMVFLQXTZAW-UFYCRDLUSA-N Phe-Met-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O OHIYMVFLQXTZAW-UFYCRDLUSA-N 0.000 description 1
- CDHURCQGUDNBMA-UBHSHLNASA-N Phe-Val-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 CDHURCQGUDNBMA-UBHSHLNASA-N 0.000 description 1
- 241000233805 Phoenix Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N Pro-Leu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- FXGIMYRVJJEIIM-UWVGGRQHSA-N Pro-Leu-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FXGIMYRVJJEIIM-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 1
- LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N Pro-Pro-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H]1NCCC1 LEIKGVHQTKHOLM-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N Pro-Val-Leu Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O KHRLUIPIMIQFGT-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- PGSWNLRYYONGPE-JYJNAYRXSA-N Pro-Val-Tyr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O PGSWNLRYYONGPE-JYJNAYRXSA-N 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108010054530 RGDN peptide Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTKUIVBNGBFTTP-WHFBIAKZSA-N Ser-Ala-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O BTKUIVBNGBFTTP-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- HRNQLKCLPVKZNE-CIUDSAMLSA-N Ser-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O HRNQLKCLPVKZNE-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N Ser-Arg-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CO)CCCN=C(N)N WDXYVIIVDIDOSX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- BYIROAKULFFTEK-CIUDSAMLSA-N Ser-Asp-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO BYIROAKULFFTEK-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N Ser-Gln-Asp Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O ULVMNZOKDBHKKI-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- PVDTYLHUWAEYGY-CIUDSAMLSA-N Ser-Glu-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O PVDTYLHUWAEYGY-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N Ser-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O SQBLRDDJTUJDMV-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 1
- YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N Ser-Leu-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O YUJLIIRMIAGMCQ-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 1
- PTWIYDNFWPXQSD-GARJFASQSA-N Ser-Lys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O PTWIYDNFWPXQSD-GARJFASQSA-N 0.000 description 1
- PCMZJFMUYWIERL-ZKWXMUAHSA-N Ser-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O PCMZJFMUYWIERL-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N Ser-Val-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O JGUWRQWULDWNCM-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 101000983124 Sus scrofa Pancreatic prohormone precursor Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000269722 Thea sinensis Species 0.000 description 1
- 235000009470 Theobroma cacao Nutrition 0.000 description 1
- LMMDEZPNUTZJAY-GCJQMDKQSA-N Thr-Asp-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O LMMDEZPNUTZJAY-GCJQMDKQSA-N 0.000 description 1
- VGYBYGQXZJDZJU-XQXXSGGOSA-N Thr-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O VGYBYGQXZJDZJU-XQXXSGGOSA-N 0.000 description 1
- LHEZGZQRLDBSRR-WDCWCFNPSA-N Thr-Glu-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O LHEZGZQRLDBSRR-WDCWCFNPSA-N 0.000 description 1
- XPNSAQMEAVSQRD-FBCQKBJTSA-N Thr-Gly-Gly Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XPNSAQMEAVSQRD-FBCQKBJTSA-N 0.000 description 1
- XOWKUMFHEZLKLT-CIQUZCHMSA-N Thr-Ile-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XOWKUMFHEZLKLT-CIQUZCHMSA-N 0.000 description 1
- AHOLTQCAVBSUDP-PPCPHDFISA-N Thr-Ile-Lys Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](NC(=O)[C@@H](N)[C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O AHOLTQCAVBSUDP-PPCPHDFISA-N 0.000 description 1
- GUHLYMZJVXUIPO-RCWTZXSCSA-N Thr-Met-Val Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O GUHLYMZJVXUIPO-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 1
- STUAPCLEDMKXKL-LKXGYXEUSA-N Thr-Ser-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O STUAPCLEDMKXKL-LKXGYXEUSA-N 0.000 description 1
- NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N Thr-Thr-Ala Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O NDZYTIMDOZMECO-SHGPDSBTSA-N 0.000 description 1
- BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N Thr-Thr-Leu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O BBPCSGKKPJUYRB-UVOCVTCTSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 208000035896 Twin-reversed arterial perfusion sequence Diseases 0.000 description 1
- IMXAAEFAIBRCQF-SIUGBPQLSA-N Tyr-Glu-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N IMXAAEFAIBRCQF-SIUGBPQLSA-N 0.000 description 1
- JKUZFODWJGEQAP-KBPBESRZSA-N Tyr-Gly-Lys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N)O JKUZFODWJGEQAP-KBPBESRZSA-N 0.000 description 1
- QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N Tyr-Ser-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O QFXVAFIHVWXXBJ-AVGNSLFASA-N 0.000 description 1
- NZBSVMQZQMEUHI-WZLNRYEVSA-N Tyr-Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N NZBSVMQZQMEUHI-WZLNRYEVSA-N 0.000 description 1
- NWEGIYMHTZXVBP-JSGCOSHPSA-N Tyr-Val-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(O)=O NWEGIYMHTZXVBP-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N Val-Ala-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(O)=O ASQFIHTXXMFENG-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 1
- WGHVMKFREWGCGR-SRVKXCTJSA-N Val-Arg-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N WGHVMKFREWGCGR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- AGKDVLSDNSTLFA-UMNHJUIQSA-N Val-Gln-Pro Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)N AGKDVLSDNSTLFA-UMNHJUIQSA-N 0.000 description 1
- GBESYURLQOYWLU-LAEOZQHASA-N Val-Glu-Asp Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N GBESYURLQOYWLU-LAEOZQHASA-N 0.000 description 1
- VVZDBPBZHLQPPB-XVKPBYJWSA-N Val-Glu-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O VVZDBPBZHLQPPB-XVKPBYJWSA-N 0.000 description 1
- ZXAGTABZUOMUDO-GVXVVHGQSA-N Val-Glu-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N ZXAGTABZUOMUDO-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- SYOMXKPPFZRELL-ONGXEEELSA-N Val-Gly-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)N SYOMXKPPFZRELL-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- UKEVLVBHRKWECS-LSJOCFKGSA-N Val-Ile-Gly Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N UKEVLVBHRKWECS-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 1
- PYXQBKJPHNCTNW-CYDGBPFRSA-N Val-Ile-Met Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N PYXQBKJPHNCTNW-CYDGBPFRSA-N 0.000 description 1
- FEXILLGKGGTLRI-NHCYSSNCSA-N Val-Leu-Asn Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N FEXILLGKGGTLRI-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- HGJRMXOWUWVUOA-GVXVVHGQSA-N Val-Leu-Gln Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N HGJRMXOWUWVUOA-GVXVVHGQSA-N 0.000 description 1
- UMPVMAYCLYMYGA-ONGXEEELSA-N Val-Leu-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(O)=O UMPVMAYCLYMYGA-ONGXEEELSA-N 0.000 description 1
- UXODSMTVPWXHBT-ULQDDVLXSA-N Val-Phe-His Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)N UXODSMTVPWXHBT-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- RYQUMYBMOJYYDK-NHCYSSNCSA-N Val-Pro-Glu Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N RYQUMYBMOJYYDK-NHCYSSNCSA-N 0.000 description 1
- AJNUKMZFHXUBMK-GUBZILKMSA-N Val-Ser-Arg Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)O)N AJNUKMZFHXUBMK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N Val-Ser-Pro Natural products CC(C)C(N)C(=O)NC(CO)C(=O)N1CCCC1C(O)=O GBIUHAYJGWVNLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N Val-Val-Ser Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)N LLJLBRRXKZTTRD-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 229920001938 Vegetable gum Polymers 0.000 description 1
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229930003471 Vitamin B2 Natural products 0.000 description 1
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 241000607447 Yersinia enterocolitica Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YVNQAIFQFWTPLQ-UHFFFAOYSA-O [4-[[4-(4-ethoxyanilino)phenyl]-[4-[ethyl-[(3-sulfophenyl)methyl]amino]-2-methylphenyl]methylidene]-3-methylcyclohexa-2,5-dien-1-ylidene]-ethyl-[(3-sulfophenyl)methyl]azanium Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C(=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S(O)(=O)=O)C)C=2C(=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S(O)(=O)=O)C)C=C1 YVNQAIFQFWTPLQ-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 108010008685 alanyl-glutamyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010070944 alanylhistidine Proteins 0.000 description 1
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 125000005250 alkyl acrylate group Chemical group 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000012197 amplification kit Methods 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 1
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 108010013835 arginine glutamate Proteins 0.000 description 1
- 108010060035 arginylproline Proteins 0.000 description 1
- 108010036533 arginylvaline Proteins 0.000 description 1
- 210000001815 ascending colon Anatomy 0.000 description 1
- 108010092854 aspartyllysine Proteins 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 235000021168 barbecue Nutrition 0.000 description 1
- 210000004082 barrier epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N batilol Chemical class CCCCCCCCCCCCCCCCCCOCC(O)CO OGBUMNBNEWYMNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 235000015895 biscuits Nutrition 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 1
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 239000004464 cereal grain Substances 0.000 description 1
- 229960004926 chlorobutanol Drugs 0.000 description 1
- 235000020140 chocolate milk drink Nutrition 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 235000013353 coffee beverage Nutrition 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000010835 comparative analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 235000020940 control diet Nutrition 0.000 description 1
- 235000014510 cooky Nutrition 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 238000002790 cross-validation Methods 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 description 1
- 235000015142 cultured sour cream Nutrition 0.000 description 1
- WZHCOOQXZCIUNC-UHFFFAOYSA-N cyclandelate Chemical compound C1C(C)(C)CC(C)CC1OC(=O)C(O)C1=CC=CC=C1 WZHCOOQXZCIUNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- VGBVAARMQYYITG-DESRROFGSA-N des-acetyl msh Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 VGBVAARMQYYITG-DESRROFGSA-N 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021061 dietary behavior Nutrition 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000019961 diglycerides of fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K dihydroxy(stearato)aluminium Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)O[Al](O)O UGMCXQCYOVCMTB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 1
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000012137 double-staining Methods 0.000 description 1
- 235000012489 doughnuts Nutrition 0.000 description 1
- 235000015071 dressings Nutrition 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 238000004146 energy storage Methods 0.000 description 1
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 1
- BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopentane Chemical compound C=CC1CCCC1 BEFDCLMNVWHSGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000012921 fluorescence analysis Methods 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003084 food emulsifier Nutrition 0.000 description 1
- 235000019138 food restriction Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 108010006664 gamma-glutamyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 1
- 229940046240 glucomannan Drugs 0.000 description 1
- 108010078144 glutaminyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 description 1
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 1
- 108010010096 glycyl-glycyl-tyrosine Proteins 0.000 description 1
- 108010074027 glycyl-seryl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010089804 glycyl-threonine Proteins 0.000 description 1
- 108010010147 glycylglutamine Proteins 0.000 description 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 1
- 239000011544 gradient gel Substances 0.000 description 1
- 230000007773 growth pattern Effects 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 1
- 230000007412 host metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 235000011167 hydrochloric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000416 hydrocolloid Substances 0.000 description 1
- 150000004679 hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229920003063 hydroxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940031574 hydroxymethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N incretin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 MGXWVYUBJRZYPE-YUGYIWNOSA-N 0.000 description 1
- 239000000859 incretin Substances 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000534 ion trap mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 235000015141 kefir Nutrition 0.000 description 1
- 229960003299 ketamine Drugs 0.000 description 1
- 239000000252 konjac Substances 0.000 description 1
- 235000019823 konjac gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008141 laxative Substances 0.000 description 1
- 230000002475 laxative effect Effects 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 108010044056 leucyl-phenylalanine Proteins 0.000 description 1
- 108010030617 leucyl-phenylalanyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000021056 liquid food Nutrition 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 235000010420 locust bean gum Nutrition 0.000 description 1
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 1
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 1
- 108010017391 lysylvaline Proteins 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 235000020124 milk-based beverage Nutrition 0.000 description 1
- 235000020166 milkshake Nutrition 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019426 modified starch Nutrition 0.000 description 1
- 230000003990 molecular pathway Effects 0.000 description 1
- 235000019960 monoglycerides of fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 230000037023 motor activity Effects 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- BPGXUIVWLQTVLZ-OFGSCBOVSA-N neuropeptide y(npy) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(O)C=C1 BPGXUIVWLQTVLZ-OFGSCBOVSA-N 0.000 description 1
- 239000003900 neurotrophic factor Substances 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000006286 nutrient intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000006180 nutrition needs Nutrition 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- OFNHNCAUVYOTPM-IIIOAANCSA-N orexin-a Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H]1NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H]2CSSC[C@@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N2)[C@@H](C)O)=O)CSSC1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CNC=N1 OFNHNCAUVYOTPM-IIIOAANCSA-N 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003725 paracellular diffusion Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 210000002963 paraventricular hypothalamic nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 235000015927 pasta Nutrition 0.000 description 1
- 235000014594 pastries Nutrition 0.000 description 1
- 235000019702 pea protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002304 perfume Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 108010012581 phenylalanylglutamate Proteins 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 230000036470 plasma concentration Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920001515 polyalkylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N preproglucagon 78-108 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 GCYXWQUSHADNBF-AAEALURTSA-N 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 108700042769 prolyl-leucyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010087846 prolyl-prolyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010031719 prolyl-serine Proteins 0.000 description 1
- 108010053725 prolylvaline Proteins 0.000 description 1
- 239000011253 protective coating Substances 0.000 description 1
- 230000013777 protein digestion Effects 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N pyridoxal hydrochloride Natural products CC1=NC=C(CO)C(C=O)=C1O RADKZDMFGJYCBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000275 quality assurance Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 235000018770 reduced food intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000011514 reflex Effects 0.000 description 1
- 230000003893 regulation of appetite Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000008117 seed development Effects 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019613 sensory perceptions of taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 1
- 239000011257 shell material Substances 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 235000011888 snacks Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014214 soft drink Nutrition 0.000 description 1
- 235000010199 sorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004334 sorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229940075582 sorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000013223 sprague-dawley female rat Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 230000010473 stable expression Effects 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 239000008221 sterile excipient Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 230000001839 systemic circulation Effects 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 230000035923 taste sensation Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 230000035922 thirst Effects 0.000 description 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000010865 video microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019164 vitamin B2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011716 vitamin B2 Substances 0.000 description 1
- 235000019158 vitamin B6 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011726 vitamin B6 Substances 0.000 description 1
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 1
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 1
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 1
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 1
- BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N xylazine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 BPICBUSOMSTKRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001600 xylazine Drugs 0.000 description 1
- 229940098232 yersinia enterocolitica Drugs 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/30—Dietetic or nutritional methods, e.g. for losing weight
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/164—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/32—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the digestive tract
- A23V2200/3202—Prebiotics, ingredients fermented in the gastrointestinal tract by beneficial microflora
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/32—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on the health of the digestive tract
- A23V2200/3204—Probiotics, living bacteria to be ingested for action in the digestive tract
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/332—Promoters of weight control and weight loss
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Предложены способ индукции насыщения у нуждающегося в этом субъекта, способ пролонгирования чувства сытости у нуждающегося в этом субъекта, способ снижения потребления пищи у нуждающегося в этом субъекта, способ снижения увеличения массы тела у нуждающегося в этом субъекта, способ стимуляции уменьшения массы тела у нуждающегося в этом субъекта. Изобретения предусматривают пероральное введение указанному субъекту эффективного количества бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, который содержит последовательность ARWTGIPVSR. Изобретения позволяют вызывать чувство насыщения, продлевать чувство сытости, снижать потребление пищи, контролировать увеличение массы тела и/или стимулировать уменьшение массы тела у субъекта. 5 н. и 39 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 пр.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ:
В настоящем изобретении предложены фармацевтические и пищевые композиции, вызывающие насыщение и продлевающие чувство сытости у нуждающихся в этом субъектов.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ:
Состав кишечной микробиоты связывают с метаболическими фенотипами хозяина (Ley et al., 2006), и перенос микробиоты, «соответствующей ожирению», может вызывать ожирение (Turnbaugh et al., 2006) и гипрефагию (Vijay-Kumar et al., 2010), что дает основания предполагать, что кишечная микробиота может влиять на пищевое поведение хозяина. Несмотря на то что механизмы, лежащие в основе влияния кишечных бактерий на аппетит хозяина неизвестны, вероятно, что данные бактерии могут использовать молекулярные пути хозяина, контролирующие потребление пищи.
Существующая сегодня модель контроля потребления пищи включает передачу сигналов гормонами чувства голода и насыщения от кишечника к некоторым нейронным сетям мозга, регулирующим гомеостатические и гедонические аспекты питания (Berthoud, 2011; Inui, 1999; Murphy и Bloom, 2006). Главными среди них являются анорексигенные и орексигенные пути, идущие от дугообразного ядра гипоталамуса (ARC), которое содержит нейроны, продуцирующие проопиомеланокортин (РОМС) и нейропептид Y (NPY)/агути-связанный пептид (AgRP) соответственно, передающие сигнал в паравентрикулярное ядро (PVN) (Atasoy et al., 2012; Cowley et al., 1999; Garfield et al, 2015; Shi et al., 2013). Пути ARC и PVN сходятся в латеральном парабрахиальном ядре, из которого отростки анорексигенных нейронов идут к центральному миндалевидному телу (СеА), экспрессирующему связанный с геном кальцитонина пептид (CGRP) (Carter et al., 2013; Garfield et al., 2015).
Предположительные механизмы воздействия кишечной микробиоты на контроль аппетита хозяина могут включать ее активность в накоплении энергии (Turnbaugh et al., 2006) и продукцию нейроактивных трансмиттеров и метаболитов (Dinan et al., 2015; Forsythe и Kunze, 2013; Sharon et al., 2014). Авторы настоящего изобретения доказали влияние бактериальных белков, которые оказывают локальное действие в кишечнике или системное действие непосредственно на контролирующие аппетит пути. Фактически, было показано, что некоторые бактериальные белки имеют гомологию по последовательности с пептидными гормонами, регулирующими аппетит (Fetissov et al., 2008), и недавно белок ClpB, который продуцируется кишечной симбиотической бактерией Escherichia coli (E. coli), был идентифицирован как миметик антигена α-меланоцит-стимулирующего гормона (α-MSH) (Tennoune et al., 2014). α-MSH представляет собой происходящий из РОМС нейропептид, играющий ключевую роль в сигналинге, регулирующем насыщение, путем активации рецепторов меланокортина 4 (MC4R) (Cone, 2005). Несмотря на то, что опосредованные MC4R анорексигенные эффекты α-MSH в основном приписываются их областям действия в центральной нервной системе (Mul et al., 2013), недавнее исследование показало, что активация MC4R в аргентаффинных клетках кишечника стимулирует высвобождение гормонов насыщения глюкагоноподобного пептида-1 (GLP-1) и пептида YY (PYY) (Panaro et al., 2014). Таким образом, α-MSH-подобные молекулы, происходящие из кишечных бактерий, могут непосредственно действовать на аргентаффинные клетки, синтезирующие гормоны насыщения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем изобретении предложены фармацевтические и пищевые композиции, вызывающие (индуцирующие) чувство насыщения и продлевающие чувство сытости у нуждающихся в этом субъектов. В частности, настоящее изобретение определяется формулой изобретения.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы настоящего изобретения показали, что белок ClpB или бактерия, экспрессирующая белок ClpB, способны вызывать чувство насыщения, продлевать чувство сытости, снижать потребление пищи, контролировать увеличение массы тела и/или стимулировать уменьшение массы тела у нуждающегося в этом субъекта.
Таким образом, согласно одному аспекту настоящего изобретения, предложен способ индукции насыщения у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту эффективного количества белка ClpB или эффективного количества бактерии, экспрессирующей белок ClpB.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу продления чувства сытости у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение указанному субъекту эффективного количества белка ClpB или эффективного количества бактерии, экспрессирующей белок ClpB.
Соответственно, согласно одному аспекту настоящего изобретения, предложен способ снижения объема порции пищи у нуждающегося в этом субъекта, включающий введение указанному субъекту эффективного количества белка ClpB или эффективного количества бактерии, экспрессирующей белок ClpB.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу снижения потребления пиши у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение указанному субъекту эффективного количества белка ClpB или эффективного количества бактерии, экспрессирующей белок ClpB.
Еще один аспект настоящего изобретения также относится к способу контроля увеличения массы тела у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение указанному субъекту эффективного количества белка ClpB или эффективного количества бактерии, экспрессирующей белок ClpB.
Еще один аспект настоящего изобретения также относится к способу стимуляции уменьшения массы тела у нуждающегося в этом субъекта, включающему введение указанному субъекту эффективного количества белка ClpB или эффективного количества бактерии, экспрессирующей белок ClpB.
Способы согласно настоящему изобретению предназначены для людей, домашних животных или сельскохозяйственных животных, при этом домашние животные или сельскохозяйственные животные могут быть выбраны из группы, состоящей из собак, кошек, морских свинок, кроликов, свиней, крупного рогатого скота, овец, коз, лошадей и/или домашних птиц. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, субъект представляет собой особь мужского пола или женского пола.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, субъект не страдает ожирением. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, субъект страдает ожирением. Термин «ожирение» при употреблении в настоящей заявке относится к медицинскому состоянию, при котором ИМТ субъекта предпочтительно составляет >30. «ИМТ», или «индекс массы тела», определяется как значение массы тела субъекта, деленное на значение его роста в квадрате. Повсеместно используемая в медицине формула приводит к получению единицы измерения кг/м2. Как правило, субъект, не страдающий ожирением, имеет нормальную массу тела. «Нормальная масса тела» и «избыточная масса тела без осложнений» относится в настоящей заявке к массе тела, обеспечивающей ИМТ между 18,5 и 30.
Подразумевается, что при употреблении в настоящей заявке термин «чувство сытости» относится по существу к гомеостатическому состоянию, когда субъект ощущает, что его пищевые потребности удовлетворены или минимизированы. Считается, что многие физиологические факторы влияют на чувство сытости субъекта. Например, вкусовые ощущения, или вкус, обонятельные ощущения, или запах, а также чувство полноты желудка могут вносить вклад в чувство «сытости» субъекта. Более конкретно, «чувство сытости» представляет собой состояние, при котором дальнейшее потребление пищи подавляется, и определяет время между приемами пищи и количество еды, потребленной за следующий прием пищи. «Усиление чувства сытости» или т.п. означает чувство сытости, более выраженное и/или более пролонгированное по сравнению с контрольной ситуацией. Термин «насыщение» при употреблении в настоящей заявке относится к состоянию, которое приводит к остановке потребления пищи во время приема пищи, как правило, наблюдаемое в пределах некоторого времени (например, 20-30 мин) после начала потребления пищи. Таким образом, в любом месте в настоящем документе ссылка на «индукцию насыщения» или т.п. означает пробуждение стремления прекратить потребление еды во время приема пищи. Влияние на насыщение можно определить по оценке времени прекращения приема пищи. Эффект насыщения заметен, если количество потребленных калорий по окончании приема пищи значительно меньше по сравнению с контролями, например, по меньшей мере на 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10% 20% или более. В течение более длительного периода времени (такого как 1, 2, 3, 4, 5 недель или более), можно также оценить снижение массы тела или изменение массы тела по сравнению с контрольной диетой. Масса тела субъекта, которому регулярно вводят некоторое количество исследуемой композиции (например, один раз в день, два раза в день или более), предпочтительно достоверно контролируется (снижается или повышается в меньшей степени) по сравнению с контрольными субъектами. При употреблении в настоящей заявке термин «контрольный субъект» относится к субъектам, которым не вводят пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению.
При употреблении в настоящей заявке термин «ClpB» имеет его общепринятое значение в данной области техники и также известен как белок теплового шока F84.1, который является членом семейства Hsp100/ClpB гексамерных ААА+-АТРаз. ClpB был описан как важный фактор для приобретенной термоустойчивости и вирулентности и инфицирующей способности некоторых грамотрицательных и грамположительных патогенных бактерий, таких как Staphylococcus aureus, Francisella turalensis, Listeria monocytogenes, Yersinia enterocolitica и Salmonella thyphimurium. В E. coli K12 шаперонный белок ClpB, также известный как белок теплового шока F84.1 или htpM, представляет собой белок из 857 аминокислот. Как правило, шаперонный белок ClpB содержит или состоит из аминокислотной последовательности шаперонного белка ClpB из Е. Coli K12 с последовательностью SEQ ID NO: 1 (референсный номер в NCBI: NP_417083,1, по наличию на 6 ноября 2013 года и/или номер в UniProtKB/Swiss-Prot: Р63284, по наличию на 6 ноября 2013 г.). Как правило, аминокислотная последовательность шаперонного белок ClpB содержит или состоит из аминокислотной последовательности, на 96-100% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1. Предпочтительно, аминокислотная последовательность ClpB на 96, 97, 98, 99 или 100% идентична аминокислотной последовательности 540-550 (ARWTGIPVSR) последовательности SEQ ID NO: 1. В контексте настоящей заявки процент идентичности рассчитывают с помощью полного выравнивания (global alignment, т.е. две последовательности сравнивают по всей длине). Способы определения идентичности двух или более последовательностей хорошо известны в данной области техники. Можно применять, например, программу «Needle», которая использует алгоритм полного выравнивания Нидлмана-Вунша (Needleman and Wunsch, 1970 J. Mol. Biol. 48:443-453) для поиска оптимального выравнивания (включая пропуски) двух последовательностей с учетом полной длины. Программа «Needle» доступна, например, на интернет-сайте ebi.ac.uk. Процент идентичности в соответствии с изобретением предпочтительно рассчитывают с использованием EMBOSS: программа «Needle» (глобальная) с параметром «Gap Open», равным 10.0, параметром «Gap Extend», равным 0,5, и матрицей Blosum62. Согласно изобретению, белок ClpB имитирует белок альфа-MSH для индукции насыщения. Таким образом, согласно некоторым вариантам реализации изобретения, белок ClpB согласно настоящему изобретению распознается антителом против альфа-MSH. Как правило, антитело представляет собой моноклональное антитело. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, антитело представляет собой поликлональное антитело, такое как поликлональные IgG кролика против α-MSH (разведение 1:1000, Peninsula Laboratories, Сан-Карлос, Калифорния, США). Аминокислотная последовательность α-MSH предпочтительно содержит или состоит из аминокислотной последовательности SYSMEHFRWGKPV (SEQ ID NO: 2) (идентификационный номер последовательности в базе данных Gen Pept, PRF: 223274, как доступно на 2 декабря 2013 г.).
SEQ ID NO: 1:
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, белок ClpB вводят указанному субъекту в виде фармацевтической композиции. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, белок ClpB объединен с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и необязательно матрицей замедленного высвобождения, такой как биодеградируемые полимеры, для образования фармацевтической композиции. Термин «фармацевтический» или «фармацевтически приемлемый» относится к химическим соединениям и композициям, которые не производят неблагоприятных, аллергических или других нежелательных реакций при введении млекопитающему, в частности, человеку, в зависимости от конкретного случая. Фармацевтически приемлемый носитель или вспомогательное вещество относится к нетоксичному твердому, полутвердому или жидкому наполнителю, разбавителю, инкапсулирующему материалу или вспомогательной форме для введения любого типа. В фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению активный компонент отдельно или в комбинации с другим активным компонентом можно вводить животным или человеку в виде стандартной лекарственной формы, в виде смеси со стандартными фармацевтическими добавками. Подходящие единичные формы для введения включают формы для перорального введения, такие как таблетки, желатиновые капсулы, порошки, гранулы и суспензии или растворы для перорального введения, формы для сублингвального или буккального введения, аэрозоли, импланты, формы для подкожного, трансдермального, местного, внутрибрюшинного, внутримышечного, внутривенного, субдермального, трансдермального, интратекального и интраназального введения и формы для ректального введения. Предпочтительно, фармацевтические композиции содержат наполнители, которые являются фармацевтически приемлемыми для лекарственной формы для инъекций. Они могут, в частности, представлять собой изотонический раствор, стерильные, солевые растворы (моно- или дифосфат натрия, хлорид натрия, калия, кальция или магния и т.д. или смеси таких солей), или сухие, в частности, лиофилизированные композиции, которые при добавлении стерильной воды или физиологического солевого раствора (в зависимости от конкретного случая) обеспечивают состояние раствора для инъекций. Фармацевтические формы, подходящие для применения в виде инъекций, включают стерильные водные растворы или дисперсии; лекарственные формы, содержащие кунжутное масло, арахисовое масло или водный пропиленгликоль; и стерильные порошки для приготовления стерильных растворов для инъекций или дисперсий для немедленного приема. Во всех случаях форма должна быть стерильной и должна быть текучей до такой степени, чтобы она могла легко использоваться для наполнения шприца. Она должна являться стабильной при условиях изготовления и хранения и должна быть защищена от контаминирующего действия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Растворы, содержащие соединения согласно изобретению в виде свободных оснований или фармакологически приемлемой соли, можно получить в воде, подходящим образом смешанной с поверхностно-активным веществом, таким как гидроксипропилцеллюлоза. Дисперсии также можно получить в глицерине, жидких полиэтиленгликолях и их смеси и в маслах. При обычных условиях хранения и использования указанные препараты содержат консервант для предотвращения роста микроорганизмов. Активный ингредиент может быть включен в композицию в нейтральной форме или в форме соли. Фармацевтически приемлемые соли включают соли присоединения кислоты (образованные со свободными белковыми аминогруппами), которые образованы с неорганическими кислотами, такими как, например, соляная кислота или фосфорные кислоты, или такими органическими кислотами, как уксусная, оксалиновая, винная, миндальная и т.д. Соли, образованные со свободными карбоксильными группами, также могут быть получены из неорганических оснований, таких как, например, гидроксиды натрия, калия, аммония, кальция или железа, и такие органические основания, как изопропиламин, триметиламин, гистидин, прокаин и т.д. Носитель также может представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль и т.д.), их подходящую смесь и растительные масла. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, путем использования покрытия, такого как лецитин, путем поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсии и путем использования поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов можно осуществлять с помощью различных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимерозала и т.д. Во многих случаях предпочтительно включать изотонические агенты, например, сахара или хлорид натрия. Пролонгированное всасывание композиций для инъекции можно осуществлять путем использования в композиции агентов, замедляющих всасывание, например, моностеарата алюминия и желатина. Стерильные растворы для инъекций получают путем включения активных полипептидов в требуемом количестве в подходящем растворителе с различными другими ингредиентами, перечисленными выше, в случае необходимости с последующей стерилизацией фильтрованием. В целом, дисперсии получают путем включения различных стерилизованных активных ингредиентов в стерильный наполнитель, который содержит основную дисперсионную среду и необходимые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных растворов для инъекций предпочтительные способы получения представляют собой методы вакуумной сушки и лиофилизирования, которые приводят к получению порошка активного ингредиента вместе с любым дополнительным желаемым ингредиентом из предварительно стерилизованного фильтрованием раствора. При получении лекарственной формы растворы вводят с помощью способа, совместимого с лекарственной формой, и в таком количестве, которое является терапевтически эффективным. Лекарственные формы легко вводят в различных формах дозирования, таких как типы растворов для инъекций, описанные выше, но также можно использовать капсулы с высвобождением лекарственного средства и т.д. Для парентерального введения в водном растворе, например, указанный раствор должен быть при необходимости забуферен подходящим образом, и жидкий разбавитель сначала должен быть доведен до состояния изотонического раствора с помощью достаточного количества солевого раствора или глюкозы. Эти особые водные растворы являются, в частности, подходящими для внутривенного, внутримышечного, подкожного и внутрибрюшинного введения. В связи с этим стерильные водные среды, которые могут использоваться, будут очевидны специалисту в данной области техники в свете настоящего изобретения. Например, одна доза может быть растворена в 1 мл изотонического раствора NaCl и либо добавлена к 1000 мл гиподермаклизисной жидкости, либо инъецирована в предполагаемое место инфузии. Безусловно, доза будет варьировать в зависимости от состояния субъекта, подлежащего лечению. Человек, ответственный за введение, в любом случае будет определять подходящую дозу для конкретного субъекта.
При употреблении в настоящей заявке выражение «бактерия, экспрессирующая С1рВ» относится к бактерии, которая экспрессирует или экспрессирует на увеличенном уровне шаперонный белок ClpB, как определено выше, или полипептид, содержащий или состоящий из аминокислотной последовательности, на от 96 до 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1, более предпочтительно, на 96, 97, 98, 99 или 100% идентичную аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 1.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, бактерия, экспрессирующая белок ClpB, представляет собой пробиотический штамм бактерий.
Предполагается, что при употреблении в настоящей заявке термин «пробиотический» означает живые микроорганизмы, которые при включении в достаточном количестве оказывают положительный эффект на здоровье, комфорт и самочувствие субъекта помимо стандартных питательных эффектов. Пробиотические микроорганизмы были определены как живые микроорганизмы, которые при введении в подходящем количестве «обеспечивают благоприятный эффект на здоровье хозяина» (FAO/WHO 2001). При употреблении в настоящей заявке выражение «пробиотический штамм бактерий» означает штамм бактерий, которые оказывают благоприятный эффект на здоровье и самочувствие хозяина.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению представляет собой жизнеспособный пробиотический штамм бактерий. Выражение «жизнеспособный пробиотический штамм бактерий» означает микроорганизм, который является метаболически активным и который способен заселять желудочно-кишечный тракт субъекта.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению представляет собой не жизнеспособный пробиотический штамм бактерий, состоящий из смеси бактериальных фрагментов. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, смесь бактериальных фрагментов согласно настоящему изобретению состоит из белков бактериального штамма.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению выбран из пищевых бактерий. Термин «пищевые бактерии» означает бактерии, которые используются и в целом считаются безопасными для употребления в пищу.
Штамм бактерий может представлять собой природный штамм бактерий или может представлять собой штамм бактерий, полученный с помощью генной инженерии.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению представляет собой бактерию, которая конститутивно экспрессирует белок ClpB.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, белок ClpB экспрессируется на увеличенном уровне в бактерии. В целом экспрессия белка «стимулируется», или белок «экспрессируется на увеличенном уровне», когда он экспрессируется или продуцируется в количестве или с выходом, превышающим конкретный базовый выход, который встречается в природе при стандартных условиях. Увеличенную экспрессию белка можно достигнуть, например, путем изменения любого одного или более из следующих факторов: (a) условия роста или жизни клеток хозяина; (b) полинуклеотида, кодирующий белок; (c) промотора, используемого для контроля экспрессии полинуклеотида и числа его копий в клетке; и (d) самих клеток хозяина.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, бактерию подвергают условиям стресса таким образом, что экспрессия белка ClpB активируется в указанной бактерии. Стресс может быть выбран из группы, состоящей из нагревания, температурным изменениям, механическому стрессу или длительному хранению, хранению при низкой влажности и/или лиофилизированию или высушиванию распылением.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, бактерии снабжали питательными веществами по меньшей мере 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 раз. Как правило, питательные вещества доставляли с помощью культуральной среды, подходящей для роста указанных бактерий, например, среды Мюллера-Хинтона, как описано в Примере. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, бактерии выделяют на стадии стационарной фазы роста, следующей за указанным повторяющимся снабжением питательными веществами, так как во время этой фазы концентрация белка ClpB является максимальной.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, бактерии содержат по меньшей мере одну точечную мутацию, приводящую к повышению экспрессии белка ClpB. Термин «точечная мутация» при употреблении в настоящей заявке означает замену и/или делецию нуклеиновой кислоты. Альтернативно (или одновременно), по меньшей мере одна мутация находится в регуляторных последовательностях ДНК гена ClpB, например, в последовательностях контроля транскрипции и трансляции. Предпочтительно, указанная мутация модулирует экспрессию белка. Мутации в регуляторных последовательностях ДНК могут служить для повышения экспрессии белка.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению представляет собой бактерию, созданную с помощью генной инженерии таким образом, чтобы она экспрессировала белок ClpB. Как правило, штамм бактерий трансформируют нуклеиновой кислотой, кодирующей белок ClpB. Термин «трансформация» означает введение «чужеродного» (т.е. постороннего или внеклеточного) гена, последовательности ДНК или РНК в клетку хозяина таким образом, чтобы указанная клетка хозяина экспрессировала введенный ген или последовательность с продукцией желаемого вещества, как правило, белка или фермента, кодируемого введенным геном или последовательностью. Клетка хозяина, которая получает и экспрессирует введенную ДНК или РНК, была «трансформирована». Нуклеиновая кислота может оставаться внехромосомной при трансформации исходного микроорганизма или может быть адаптирована для интеграции в геном микроорганизма. Соответственно, нуклеиновая кислота может включать дополнительные нуклеотидные последовательности, адаптированные таким образом, чтобы способствовать интеграции (например, участок, который обеспечивает гомологичную рекомбинацию и направленную интеграцию в геном хозяина) или стабильной экспрессия и репликации внехромосомной конструкции (например, точку начала репликации, промотор и другие регуляторные последовательности). Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, нуклеиновая кислота представляет собой конструкцию или вектор на основе нуклеиновой кислоты. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, конструкция или вектор на основе нуклеиновой кислоты представляет собой экспрессионную конструкцию или вектор, однако другие конструкции и векторы, такие как конструкции и векторы, используемые для клонирования, включены в настоящее изобретение. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, экспрессионная конструкция или вектор представляет собой плазмиду. Как правило, экспрессионная конструкция/вектор также содержит промотор, как описано выше в настоящей заявке. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, промотор обеспечивает конститутивную экспрессию генов под их контролем. Однако также могут использоваться индуцируемые промоторы. Следует иметь в виду, что экспрессионная конструкция/вектор согласно настоящему изобретению может при желании содержать любое количество регуляторных элементов помимо промотора, а также дополнительные гены, подходящие для экспрессии белка ClpB. Способы трансформации бактериальной клетки внеклеточными нуклеиновыми кислотами хорошо известны в данной области техники.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий представляет собой грамотрицательный штамм.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий является членом семейства Enterobacteriaceaae.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий представляет собой штамм Е. coli. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотические штаммы Е. Coli для применения в соответствии с принципами настоящего изобретения включают непатогенные штаммы Е. Coli, которые проявляют пробиотическую активность. Пример пробиотического штамма Е. Coli представляет собой пробиотический штамм Escherichia coli BU-230-98 (номер депозита в Американской коллекции типовых культур (АТСС) 202226 (DSM 12799)), являющийся изолятом известного коммерчески доступного пробиотического штамма Escherichia coli М-17. Примером непатогенного штамма является E.Coli Nissle 1917. Примером штамма E.coli, который ранее не был известен как пробиотический, является лабораторный штамм E.coli K12.
Как правило, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению поставляется с любой подходящей культуральной средой, хорошо известной в данной области техники. Различные ферментационные среды являются подходящими согласно изобретению, включая, но не ограничиваясь указанными, в первую очередь, например, промышленную среду, в которой культивируют указанный штамм (штаммы) и которая используется в исходном виде или после концентрирования (например, высушивания) или после добавления к другой пищевой основе или продукту. Альтернативно, можно применять бактериальные клетки или бактериальные клетки со средой (например, ферментативным бульоном) или фракции такой среды, содержащей клетки, (т.е. среды с указанным штаммом/штаммами бактерий можно применять). Содержащая клетку или клетки среда содержит живые или жизнеспособные бактериальные клетки и/или мертвые или нежизнеспособные бактериальные клетки штамма (штаммов). Среду, таким образом, можно обрабатывать, путем нагрева и обработки ультразвуком, не ограничиваясь указанными методами. Кроме того, лиофилизированные, или замороженные, бактерии и/или бесклеточные среды (которые могут быть концентрированными) включены в способы получения пробиотического штамма бактерий согласно настоящему изобретению.
Как правило, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению вводят указанному субъекту в результате приема внутрь (т.е. пероральным путем).
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению инкапсулируют для защиты от желудочной среды. Соответственно, согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению представлен в виде композиции в инкапсулированной форме таким образом, чтобы срок выживания был значительно улучшен. В таком случае, наличие капсулы может, в частности, задерживать или предотвращать разрушение микроорганизма в желудочно-кишечном тракте. Следует иметь в виду, что композиции согласно вариантам реализации настоящего изобретения могут быть заключены в капсулы или таблетки с контролируемым по времени высвобождением, покрытые кишечнорастворимой оболочкой. Кишечнорастворимое покрытие позволяет капсуле/таблетке сохраняться в неизменном виде (т.е. в нерастворенном виде) по мере ее прохождения через желудочно-кишечный тракт до тех пор, пока она не достигнет тонкого кишечного. Способы инкапсулирования живых бактериальных клеток хорошо известны в данной области техники (см., например, патенты США General Mills Inc., такие как патент США №6723358). Например, микроинкапсулирование с альгинатом и крахмалом Hi-Maize™ с последующей лиофилизацией было признано эффективным для пролонгирования срока хранения бактериальных клеток в молочных продуктах [см., например, Kailasapathy et al. Curr Issues Intest Microbiol. 2002 September; 3(2):39-48]. Альтернативно, инкапсулирование можно осуществлять с помощью глюкоманнановых волокон, таких как экстрагированные из Amorphophallus konjac. Альтернативно, также можно использовать удержание жизнеспособных пробиотиков в эмульсиях на основе кунжутного масла [см., например, Hou et al. J. Dairy Sci. 86:424-428]. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, агенты кишечнорастворимых покрытий предпочтительно представляют собой сополимеры метилакриловой кислоты и алкилакрилата, такие как полимеры Eudragit®. Было показано, что поли(мет)акрилаты, в частности, являются подходящими в качестве материалов покрытий. EUDRAGIT® представляет собой торговое название для сополимеров, происходящих из сложных эфиров акриловой и метилакриловой кислоты, свойства которых определяются функциональными группами. Отдельные виды EUDRAGIT® различаются по соотношению нейтральных, основных или кислотных групп и, таким образом, по физико-химическим свойствам. Профессиональное применение и комбинация различных полимеров EUDRAGIT® дате возможность получения идеальных растворов для контролируемого высвобождения лекарственного средства для различных фармацевтических и технических применений. EUDRAGIT® обеспечивает функциональные пленки для покрытий таблеток и пеллетов с замедленным высвобождением. Полимеры описаны в международных фармакопеях, таких как Ph.Eur., USP/NF, DMF и JPE. Полимеры EUDRAGIT® могут обеспечивать следующие возможности для лекарственного средства с контролируемым высвобождением: нацеливание на область желудочно-кишечного тракта (желудочная устойчивость, высвобождение в толстом кишечнике), защитные покрытия (маскирование вкуса и запаха, защита от влажности) и задержание высвобождение лекарственного средства (лекарственные формы с замедленным высвобождением). Полимеры EUDRAGIT® доступны в широком диапазоне различных концентрации и физических форм, включая водные растворы, водную дисперсию, органические растворы и твердые вещества. Фармацевтические свойства полимеров EUDRAGIT® определяются по химическим свойствам их функциональных групп. Различают:
- поли(мет)акрилаты, растворимые в улучшающих пищеварение жидкостях (путем образования соли): полимеры EUDRAGIT® L (сополимер метакриловой кислоты), EUDRAGIT® S (сополимер метакриловой кислоты), полимеры EUDRAGIT® FS и Е (основный бутилированный сополимер метакрилата) с кислотными или основными группами обеспечивают pH-зависимое высвобождение активного ингредиента. Применение: от простого маскирования вкуса за счет устойчивости к воздействию желудочного сока до контролируемого высвобождения лекарственного средства во всех отделах кишечника.
- поли(мет)акрилаты, нерастворимые в улучшающих пищеварение жидкостях: полимеры EUDRAGIT® RL и RS (сополимеры аммония и метакрилата) с основными группами и полимеры EUDRAGIT® NE с нейтральными группами обеспечивают контролируемое по времени высвобождение активного вещества за счет независимого от pH набухания.
Кишечнорастворимые покрытия EUDRAGIT® предотвращают высвобождение лекарственного средства в желудке и обеспечивают контролируемое высвобождение в кишечнике. Основным критерием для высвобождения является pH-зависимое растворение покрытия, которое происходит в определенном отделе кишечника (pH от 5 до более 7) в отличие от желудка (pH 1-5). Для указанного применения анионные типы EUDRAGIT®, содержащие карбоксильные группы, можно смешивать друг с другом, что обеспечивает возможность тонкой регуляции pH растворения и, таким образом, определения сайта высвобождения лекарственного средства в кишечнике. EUDRAGIT® L и S типа подходят для кишечнорастворимых покрытий. EUDRAGIT® FS 30 D (водная дисперсия анионного сополимера на основе метилакрилата, метилметилакрилата и метилакриловой кислоты) используется для специфичного контролируемого высвобождения в толстом кишечнике.
Как правило, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению вводят указанному субъекту в виде пищевой композиции. Соответственно, еще один аспект настоящего изобретения относится к пищевой композиции, содержащей количество пробиотического штамма бактерий согласно настоящему изобретению.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пищевая композиция, содержащая пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, выбрана из полноценной пищевой композиции, пищевых добавок, нутрицевтических композиций и т.д. Композицию согласно настоящему изобретению можно применять в качестве пищевого ингредиента и/или кормового ингредиента.
Пищевой ингредиент может быть представлен в виде раствора или в виде твердого вещества в зависимости от применения и/или способа применения и/или способа введения.
Пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, как правило, добавляют в любое время в процессе получения композиции, например, добавляют к пищевой основе в начале процесса получения или к конечному пищевому продукту.
Термин «пищевой продукта» относится к жидкой (т.е. напитку), твердой или полутвердой питательной композиции, в частности, полноценной пищевой композиции (заместителю пищевого продукта), которая не требует дополнительного употребления питательных веществ или композиций пищевых добавок. Композиции пищевых добавок не полностью заменяют прием питательных веществ другими способами. Пищевые продукты и композиции пищевых добавок представляют собой, например, кисломолочные продукты или молочные продукты, которые предпочтительно вводят или принимают перорально один или более раз в день. Кисломолочные продукты могут быть получены непосредственно с использованием бактерий согласно изобретению в процессе изготовления, например, путем добавления к пищевой основе, с использованием хорошо известных способов. В таких способах штамм (штаммы) согласно изобретению можно применять для добавления к обычно используемым и/или для замещения одного или более или части обычно используемых микроорганизмов. Например, при приготовлении кисломолочных продуктов, таких как йогурт или йогуртные напитки, бактерию согласно изобретению можно добавлять или использовать как часть заквасочной культуры или подходящим образом добавлять в процессе такой ферментации. Необязательно бактерии могут быть инактивирвоанными или убитыми позже в процессе получения. Кисломолочные продукты включают молочные продукты, такие как десерты, йогурты, йогуртные напитки, творог, кефир, ферментированные молочные напитки, молочные коктейли, сыры, заправки, пасты с низким содержанием жира, молодой сыр, соевые напитки, мороженое и т.д., но не ограничиваются указанными. Альтернативно, пищевые продукты и/или композиции пищевых добавок могут представлять собой не молочные или молочными не ферментированные продукты (например, штаммы или бесклеточная среда в неферментированном молоке или в другой пищевой среде). Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению инкапсулируют и диспергируют в пищевом продукте (например, в молоке) или непищевой среде. Не кисломолочные продукты могут включать мороженое, питательные батончики и заправки и т.д. Не молочные продукты могут включать порошкообразные смеси для приготовления напитков и питательные батончики и т.д. Продукты могут быть получены с использованием известных способов, таких как добавление эффективного количества штамма (штаммов) и/или бесклеточной культуральной среды к пищевой основе, такой как обезжиренное молоко или молоко или молочный состав и ферментация, как известно. Другие пищевые основы, к которым можно добавлять композиции, содержащие бактериальные клетки и/или бесклеточную культуральную среду, представляют собой мясо, заместители мяса или растительные основы.
Композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, может быть твердой, полутвердой или жидкой. Она может быть представлена в виде пищевого продукта или пищевой добавки, например, в виде таблеток, гелей, порошков, капсул, напитков, батончиков и т.д. Например, композиция может быть представлена в виде порошка, упакованного в сашет, который можно растворять в воде, фруктовом соке, молоке или другом напитке.
При употреблении в настоящей заявке термин «пищевой ингредиент» или «кормовой ингредиент» включает лекарственную форму, которая добавлена или может быть добавлена к функциональным пищевым продуктам или продовольственным продуктам в качестве питательной добавки.
Термин «обогащенный пищевой продукт» или «нутрицевтик» или «функциональный пищевой продукт» означает продовольственный продукт, который содержит ингредиенты, оказывающие благоприятные эффекты на здоровье или способные улучшать физиологические функции.
Термин «пищевая добавка» означает продукт питания, направленный на восполнение нормальной пищевого рациона. Пищевая добавка представляет собой концентрированный источник питательных веществ или других веществ, оказывающая питательный или физиологический эффект при ее отдельном приеме или в виде комбинации в малых количествах.
Согласно изобретению, термин «функциональные пищевые продукты» объединяет продукты питания и соответствующие недавно разработанные продукты, важность которых обусловлена не только их питательной и вкусовой ценностью, но и особыми ингредиентными веществами. Согласно изобретению, важное значение имеют среднее и длительное поддержание и обеспечение здоровья. В этом контексте, не терапевтическое применение является предпочтительным. Термины «нутрицевтики», «обогащенные пищевые продукт» и «оригинальные пищевые продукты», которые также представляют собой варианты реализации изобретения, отчасти являются синонимами, однако употребляются также избирательно. Однако профилактический аспект и обеспечение здоровья, а также пищевые характеристики продуктов дают наиболее ясное определение термина «функциональный пищевой продукт». Во многих случаях этот термин связан с продуктами, которые получают путем сортинга и селекции (как и в случае настоящего изобретения), очистки, концентрации, а также в большой степени путем добавления. Выделенные эффективные вещества, в частности, в форме таблеток или пилюлей, не включены. Несмотря на отсутствие официального определения функциональных пищевых продуктов, большинство групп, имеющих отношение к данной области, соглашается, что они представляют собой продукты, реализуемые на рынке как оказывающие специфические эффекты на здоровье субъекта помимо основных питательных свойств. Соответственно, функциональные пищевые продукты представляют собой обычные пищевые продукты, в которые включены компоненты или ингредиенты (такие как описанные в настоящей заявке), придающие указанному пищевому продукту специфическую функциональность, например, медицинский или физиологический благоприятный эффект, отличный от чисто питательного эффекта.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, напиток представляет собой функциональный напиток или терапевтический напиток, утолитель жажды или обычный напиток. Композицию согласно настоящему изобретению можно использовать, например, в качестве ингредиента для прохладительных напитков, фруктового сока или напитка, содержащего белок молочной сыворотки, оздоровительного чая, какао-напитков, молочных напитков и молочной кислоты бактерий напитки, йогурта и питьевого йогурта, сыра, мороженого, фруктового льда и десертов, кондитерских изделий, бисквитных пирожных и брикетов для кексов, закусочных продуктов, сбалансированных пищевых продуктов и напитков, фруктовых наполнителей, саге глазури, шоколадного наполнителя для хлебобулочных изделий, вкусового наполнителя для творожного пирога, наполнителя для пирожных со вкусом фруктов, глазури для пирожных и пончиков, крема для начинок быстрого приготовления, наполнителей для печенья, готовых к употреблению наполнителей для хлебобулочных изделий, низкокалорийных наполнителей, питательного напитка для взрослых, подкисленного соевого напитка/напитка на основе сока, асептического/стерилизованного шоколадного напитка, смесей для батончиков, порошков для приготовления напитков, обогащенного кальцием соевого молока/молока без добавок и шоколадного молока, обогащенного кальцием кофейного напитка.
Композиция может также применяться в качестве ингредиента пищевых продуктов, таких как американский сырный соус, антислеживающий агент для тертого сыра и сыра в нарезке, чип-дип, сливочный сыр, сухие смеси обезжиренной сметаны для взбивания, полученные замораживанием/оттаиванием молочные сливки для взбивания, полученные замораживанием/оттаиванием стабильные сливки для взбивания, легкий натуральный сыр чеддер с низким содержанием жира, швейцарский йогурт с низким содержанием жира, взбитые замороженные десерты, мороженое в твердой упаковке, мороженое в твердой упаковке с маркировкой безопасности, увеличенной экономичности и гарантии качества, мороженое низкой жирности: мягкое мороженое, соус для барбекю, соус с приправой из сыра, приправа к домашнему сыру, соус Альфредо в виде сухой смеси, смешанный сырный соус, томатный соус в виде сухой смеси и другие.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изоберетнию, применяется с йогуртной продукцией, такой как ферментированный йогуртный напиток, йогурт, питьевой йогурт, сыр, ферментированный крем, молочные десерты и другие. Подходящим образом, композиция также может использоваться в качестве ингредиента в одном или более из продуктов для употребления сыра, мяса, или продуктов, содержащих защитные культуры.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пищевая композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, подходит для получения заменителя пищевого продукта. При употреблении в настоящей заявке термин «заменитель пищевого продукта» включает любой питательный продукт, содержащий белки, углеводы, жиры, витамины и минералы, комбинация которых является подходящей в качестве единственного или главного источника питательных веществ для пищевого продукта, если иное специально не указано. Как правило, заменитель пищевого продукта содержит по меньшей мере один источник углеводов, по меньшей мере один источник липидов и/или по меньшей мере один источник белков. В качестве источника белков может использоваться любой подходящий пищевой белок, например, животные белки (такие как молочные белки, мясные белки и яичные белки); растительные белки (такие как соевый белок, пшеничный белок, рисовый белок и гороховый белок); смеси свободных аминокислот или их комбинации. В частности, молочные белки, такие как казеин и белок молочной сыворотки, а также соевые белки являются предпочтительными. Белки могут быть интактными или гидролизированными или представлять собой смесь интактных и гидролизированных белков. Может быть желательно обеспечивать частично гидролизированные белки (степень гидролиза между 2 и 20%), например, для животных, которые находятся в группе риска развития аллергии на коровье молоко. При необходимости гидролизированных белков можно по желанию проводить процесс гидролиза, как известно в данной области техники. Например, белковый гидролизат молочной сыворотки можно получить путем ферментативного гидролиза фракции молочной сыворотки за один или более этапов. Показано, что если фракция молочной сыворотки, используемая в качестве исходного материала, по существу не содержит лактозу, то белок намного меньше страдает от «лизиновой блокады» во время процесса гидролиза. Это обеспечивает снижение степени «лизиновой блокады», составляющее от приблизительно 15% по массе общего лизина до менее чем приблизительно 10% по массе лизина; например, приблизительно 7% по массе лизина, что существенно улучшает пищевую ценность источника белка. Если композиция содержит источник жира, то он предпочтительно обеспечивает от 5% до 40% энергии композиции; например, от 20% до 30% энергии. Подходящий профиль содержания жира может быть достигнут с использованием смеси канолового масла, кукурузного масла и подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты. Источник углеводов предпочтительно обеспечивает от 40% до 80% энергии композиции. Можно использовать любой подходящий углевод, например, сахарозу, лактозу, глюкозу, фруктозу, сухую кукурузную патоку, мальтодекстрины и их смеси. Как правило, ежедневное замещение продуктов одного приема пищи на низкокалорийные продукты с заменителем пищи способствует поддержанию массы тела после уменьшения массы тела.
Пищевая композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, как правило, содержит носители или наполнители. Термины «носители» или «наполнители» означают материалы, подходящие для введения, и включают любой такой материал, известный в данной области техники, такой как, например, любая жидкость, гель, растворитель, жидкий разбавитель, солюбилизатор и т.п., который является нетоксичным и не приводит к неблагоприятному взаимодействию с любыми компонентами композиции. Примеры приемлемых носителей для питательных продуктов включают, например, воду, солевые растворы, спирт, силикон, воска, вазелиновое масло, растительные масла, полиэтиленгликоли, пропиленгликоль, липосомы, сахара, желатин, лактозу, амилозу, стеарат магния, тальк, поверхностно-активные вещества, кремниевую кислоту, вязкий парафин, парфюмерное масло, моноглицериды и диглицериды жирной кислоты, петролейные эфиры жирных кислот, гидроксиметилцеллюлозу, поливинилпирролидон и т.д.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пищевая композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, содержит некоторое количество пищевых волокон. Пищевые волокна проходят по малому кишечнику в непереваренном ферментами виде и функционируют как природные объемообразующие агенты и слабительное. Пищевое волокно может быть растворимым или нерастворимым. В целом, смесь двух типов является предпочтительной. Подходящие источники пищевых волокон включают сою, горох, овес, пектин, гуаровую камедь, гуммиарабик, фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, сиалиллактозу и олигосахариды, происходящие из животного молока. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пищевое волокно выбрано из маннанов. Маннаны (напроимер, глюкоманнаны и галактоманнаны), такие как гуаровая камедь, камедь бобов рожкового дерева, конжаковая и ксантановая камедь, присутсвуют в клеточных стенках некоторых растений. Глюкоманнаны в целом состоят из (1-4)-β-связанных глюкозных и маннозных единиц, тогда как галактоманнаны в целом состоят из (1-4)-β-маннанового каркаса, содержащего в качестве заместителя одну (1-6)-α-галактозную единицу. Многие бобовые с эндоспермными семенами, такие как гуар и рожковое дерево, содержат галактоманнаны в эндосперме во время развития семени. Глюкоманнаны также могут встречаться в качестве минорного компонента в зернах злаков.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пищевая композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, содержит минералы и микропитательные вещества, такие как следовые элементы и витамины, в соответствии с рекомендациями государственных органов, такими как рекомендованные суточные нормы США (USRDA). Например, композиция может содержать один или более из следующих микропитательных веществ в приведенных диапазонах на суточную дозу: от 300 до 500 мг кальция, от 50 до 100 мг магния, от 150 до 250 мг фосфора, от 5 до 20 мг железа, от 1 до 7 мг цинка, от 0,1 до 0,3 мг меди, от 50 до 200 мкг йода, от 5 до 15 мкг селена, от 1000 до 3000 мкг бета-каротина, от 10 до 80 мг витамина С, от 1 до 2 мг витамина В1, от 0,5 до 1,5 мг витамина В6, от 0,5 до 2 мг витамина В2, от 5 до 18 мг ниацина, от 0,5 до 2,0 мкг витамина В12, от 100 до 800 мкг фолиевой кислоты, от 30 до 70 мкг биотина, от 1 до 5 мкг витамина D, от 3 до 10 мкг витамина Е.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, содержит эмульгаторы. Примеры пищевых эмульгаторов, как правило, включают сложные диацетиловые эфиры моно- и диглицеридов винной кислоты, лецитин и моно- и диглицериды. Подобным образом, могут быть включены подходящие соли и стабилизаторы.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, пищевая композиция, которая содержит пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, содержит по меньшей мере один пребиотик. Термин «пребиотик» означает пищевые вещества, предназначенные для обеспечения роста пробиотического штамма бактерий согласно настоящему изобретению в кишечнике. Пребиотик может быть выбран из группы, состоящей из олигосахаридов и необязательно включает фруктозу, галактозу, маннозу, сою и/или инулин и/или пищевые волокна.
Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения, композиция, содержащая пробиотический штамм бактерий согласно настоящему изобретению, включает защитные гидроколлоиды (такие как камеди, белки, модифицированные крахмалы), связующие вещества, образующие пленку агенты, инкапсулирующие агенты/материалы, материалы стенки/оболочки, матричные соединения, покрытия, эмульгаторы, поверхностно-активные агенты, солюбилизирующие агенты (масла, жиры, воска, лецитины и т.д.), адсорбенты, носители, наполнители, сопутствующие соединения, диспергирующие агенты, увлажнители, вспомогательные вещества, используемые в производственном процессе, растворители, агенты, обеспечивающие текучесть, маскирующие вкус агенты, утяжеляющие агенты, желирующие агенты, гелеобразующие агенты, антиоксиданты и противомикробные агенты. Композиция также может содержать стандартные фармацевтические добавки и адъюванты, вспомогательные вещества и разбавители, включая, но не ограничиваясь указанными, воду, желатин любой природы, растительные камеди, лигнинсульфонат, тальк, сахара, крахмал, гуммиарабик, растительные масла, полиалкиленгликоли, ароматизаторы, консерванты, стабилизаторы, эмульгаторы, буферы, скользящие вещества, красители, смачивающие агенты, наполнители и т.д. Во всех случаях такие дополнительные компоненты выбирают с учетом их пригодности для предполагаемого реципиента.
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, введение белка ClpB (или пробиотического штамма бактерий, экспрессирующего указанный белок) повторяют, например, от 2 до 3 раз в день в течение одного дня или более и в целом в течение продолжительного периода, составляющего по меньшей мере 4 дня или даже от 4 до 15 недель, с одним или более перерывами, если приемлемо. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, белок ClpB вводят одновременно или последовательно с одним приемом пищи субъектом. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, белок ClpB вводят до принятия пищи субъектом.
При употреблении в настоящей заявке термин «эффективное количество» относится к количеству белка ClpB, достаточному для достижения благоприятного эффекта (например, стимуляции насыщения, продления чувства сытости, снижения потребления пищи, контроля увеличения массы тела и/или стимуляции уменьшения массы тела). В контексте настоящего изобретения, количество белка ClpB, которое вводят субъекту, зависит от характеристик указанного субъекта, таких как общее состояние здоровья, возраст, пол и масса тела. Специалист в данной области техники способен определить подходящие дозы в зависимости от указанных и других факторов. Например, когда белок ClpB вводят указанному субъекту в виде пробиотика, штамм согласно настоящему изобретению, способный создавать колонию, будет является достаточным для обеспечения благоприятного эффекта у субъекта. Если пробиотический штамм бактерий вводят в виде пищевого продукта, то указанный пищевой продукт, как правило, содержит между 103 и 1012 КОЕ пробиотического штамма бактерий согласно настоящему изобретению на грамм сухой массы пищевой композиции.
Изобретение также проиллюстрировано следующими фигурами и примерами. Однако следует понимать, что указанные примеры и фигуры никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения.
ФИГУРЫ:
Фигура 1: Эффекты ежедневной внутрижелудочной доставки E.coli K12 дикого типа (WT) или E.coli с делецией гена ClpB (ΔClpB) нормальным взрослым мышам C57Bl6 на массу тела, 24-часовое потребление пищи и режим питания, исследуемые в начале и в конце 3-недельного принудительного кормления. Контрольные мыши (Ctr) не получали какого-либо принудительного кормления. Режим питания оценивали по объему порции пищи, соответствующему среднему количеству пищи, съеденной во время однократного приема пищи, и по частоте приемов пищи, соответствующей количеству принятия пищи за 24 ч, отстоящих друг от друга по меньшей мере на 5 мин. Снижение объема порции пищи отражает более быстрое насыщение, а снижение частоты приема пищи отражает более продолжительное чувство сытости. А. Двухфакторный анализ ANOVA с повторными измерениями, апостериорный критерий Бонферрони, *p<0,05. B, D, G, H, ANOVA, апостериорные критерии Тьюки *p<0,05, **p<0,01, ***p<0,001. Е. t-критерий Стьюдента, *p<0,05.
ПРИМЕР 1:
Материал и способы
Рост E.coli in vitro после регулярного снабжения питательными веществами
Бактерии E.coli K12 культивировали при 37°С в 40 мл среды МН (Becton, Дикинсон, MD), содержащей 30% мясного бульона, 1,75% гидролизата казеина и 0,15% крахмала с pH 7,3 при 25°С в пробирках Falcon на 50 мл. Для моделирования двух предусмотренных графиком ежедневных приемов пищи у людей бактериям обеспечивали свежую среду МН каждые 12 ч в течение 5 последовательных дней. Рост бактерий измеряли как OD при λ=600 нм с помощью спектрофотометра каждые 2 ч после 1-го предоставления среды МН, каждый 1 час после 3-его и каждые 10 мин после 5-го предоставления среды. В конце каждого 12-часового цикла бактерии центрифугировали в течение 5 мин при 6,000 об./мин при комнатной температуре (RT). Супернатанты выливали и замещали эквивалентным объемом (~40 мл) свежей среды МН. После последнего добавления среды МН получали образцы бактерий для экстракции белка в экспоненциальной фазе роста и в последующей стационарной фазе роста.
Экстракция белка
Бактерии E.coli K12 центрифугировали при 4°С в течение 30 мин при скорости 4,000 g. Осадок, содержащий бактерии, растворяли в 2 мл трисгидроксиметиламинометанового буфера (ТРИС-буфера, pH 7,4) и гомогенизировали посредством обработки ультразвуком в течение 3 мин при комнатной температуре. Для отделения белков от нерастворенных фрагментов клеток гомогенат бактерий центрифугировали при 4°С в течение 30 мин при скорости 10,000 g. Супернатант восстанавливали и затем центрифугировали на ультрацентрифуге при 4°С в течение 45 мин при скорости 60,000 g для дальнейшего разделения белков на цитоплазматическую (супернатант) и мембранную (осадок) фракцию. Мембранные белки растворяли в ТРИС-буфере (pH 7,4). Концентрацию белка измеряли с использованием набора 2-D Quant (GE Healthcare, Пискатавей, Нью-Джерси).
Двумерный электрофорез в полиакриламидном геле
Для проведения двумерного электрофореза в полиакриламидном геле (2D-ПААГ) использовали 300 мкг белкового экстракта E.coli для регидратации полосок с иммобилизированным градиентом pH (IPG) (pH 4-7; 18 см; BIO-RAD, Геркулес, Калифорния). Затем белки разделяли в первом направлении путем изоэлектрического фокусирования в общем в течнеие 85,000 В-ч с использованием системы изоэлектрического фокусирования IPGphor (GE Healthcare). После фокусирования полоски IPG инкубировали в течение 15 мин в уравновешивающем буфере [мочевина, 6 моль/л, 30% (об./об.); глицерин, 2% (масс./об.); додецилсульфат натрия (ДСН); Трис-HCl, 50 ммоль/л, pH 8,8; и 0,25% (масс./об.) раствор бромфенолового синего, содержащий 2% (масс./об.) дитиотреитола] и затем алкилировали в течение 15 мин в уравновешивающем буфере, содержащем 4% (масс./об.) йодацетамида. IPG-полоски затем прикрепляли к 10%-ым полиакриламидным градиентным гелям (20 см ⋅ 18 см ⋅ 1 мм) для проведения ДСН-ПААГ. Разделение во втором направлении проводили в течение ночи в системе для вертикального электрофореза Ettan Daltsix (GE Healthcare) при силе электрического тока 12 мА/гель при температуре 25°С. После 2D-ДСН-ПААГ гели фиксировали в течение 2 ч в 2% (об./об.) ортофосфорной кислоте и в 50% (об./об.) метаноле при комнатной температуре. Затем гели промывали водой и белковые пятна визуализировали путем окрашивания красителем Кумасси бриллиантовым синим G-250 (BIO-RAD) [34% (об./об.) метанола, 17% (масс./об.) сульфата аммония, 2% (об./об.) ортофосфорной кислоты и 0,66 г Кумасси бриллиантового синего G-250 /л].
Анализ дифференциальной экспрессии белка
Изображения окрашенных гелей после двумерного электрофореза сканировали с помощью системы ImageScanner II (GE Healthcare), калибровали с помощью маркера шкалы градаций серого (Kodak, Рочестер, Нью-Йорк) и оцифровывали с помощью программой Labscan 6,0 (GE Healthcare). Анализ различающейся экспрессии белка, включающий выявление пятен, количественную оценку, выравнивание и сравнительный анализ, проводили с использованием программы 2D Platinum 5,0 (GE Healthcare). Каждый белковый образец подвергали 2D-ПААГ-электрофоретическому анализу по меньшей мере 3 раза (для мембранных белков) и 4 раза (для цитоплазматических белков) для минимизации изменений, зависимых от цикла, и каждый набор по 3 (или 4) геля сравнивали с помощью программы ImageMaster для подтверждения отсутствия статистически различных пятен в пределах набора гелей. Наиболее репрезентативный гель (миграция в геле, четкость и количество пятен) из каждого набора использовали для сравнения белков Е. Coli, полученных в экспоненциальной и стационарной фазе роста. Уровень экспрессии определяли по относительному объему каждого пятна в геле и выражали как % объем, рассчитанный как объем пятна/∑объемов всех пятен, разделенных в геле. Этот нормированный объем пятна учитывает вариации из-за нагрузки белка и окраски с учетом общего объема по всем точкам, присутствующим в геле. Различия и количество рассчитывали как отношение средних значений % объема для группы точек между 2 фазами. Только пятна с относительным различием объема >1,5 считались значимыми. Отсутствие пятен в пределах геля указывало на отсутствие выявляемой экспрессии белка при выбранных условиях эксперимента. Соответствующие p-значения определяли с помощью t-критерия Стьюдента (уровень значимости p<0,05) после логарифмического преобразования значения объема пятна.
Идентификация белков с помощью жидкостной хроматографии с ионизацией электрораспылением - МС/МС
Интересующие белковые пятна вырезали из окрашенных Кумасси бриллиантовым синим G-250 гелей после двумерного электрофореза с помощью прибора Ettan Spot Picker (GE Healthcare), и переваривание белков в геле осуществляли на автомате Ettan Digester (GE Healthcare), как было ранее описано (Goichon et al., 2011). Белковые экстракты затем ресуспендировали в 10 мкл смеси 5% (об./об.) ацетонитрил/0,1% (об./об.) муравьиная кислота и затем анализировали с помощью системы nano-LC1200, сопряженной с масс-спектрометрической ионной ловушкой 6340 Ion Trap, снабженной источником нанораспыления, и интерфейса HPLC-chip cube (Agilent Technologies, Courtaboeuf, Франция). Вкратце, пептиды концентрировали и обессаливали на предколонке (40 нл, RP-C18) и разделяли на колонке Zorbax С18 (размер пор 30 нм, размер частиц 5 мкм, 43 мм длина × 75 мкм внутренний диаметр; Agilent Technologies). Использовали 9-мин линейный градиент (3%-80% ацетонитрил в 0,1% муравьиной кислоте) при скорости потока 400 нл/мин использовали и элюент анализировали с помощью масс-спектрометрии по типу ионной ловушки.
Для идентификации белка получали перечни пиков МС/МС и сравнивали с базами данных белков с использованием поисковой системы MASCOT Daemon версии 2.2.2 (Matrix Science). Поиск осуществляли по следующим конкретным параметрам: специфичность фермента: трипсин; один пропущенный сайт расщепления допускается; нет фиксированных модификаций; переменные модификации, окисление метионина, карбамидометилирование цистеина, фосфорилирование серина, тирозин и треонина; моноизотопный режим; заряд пептида 2+ и 3+; допуск по массе для ионов-предшественников 1,5 Да; допуск по массе для ионных осколков 0,6 Да; инструмент: ESI-TRAP (масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением и ионной ловушкой); таксономия: Е. coli; база данных: Национальный центр биотехнологической информации (National Center for Biotechnology Information, NCBI [NCBInr 20120531 (18280215 последовательностей, 6265275233 остатков)] (Бетесда, Мэриленд). Совпадения при поиске белка автоматически подтверждались, если они удовлетворяли одному из следующих критериев: идентификация, при которой по меньшей мере два пептида высокого уровня совпадения (жирный шрифт, красный цвет) имеют балл MASCOT больше 54 (p<0,01), или по меньшей мере два пептида высокого уровня совпадения (жирный шрифт, красный цвет) с баллом MASCOT более 47 (p<0,05). Для оценки ложноположительных баллов, все исходные поиски в базе данных осуществляли с использованием опции «ловушка» MASCOT. Результаты считали надежными, если частота ложноположительных совпадений никогда не превышала 1%.
Анализ АТФ
Продукцию АТФ in vitro измеряли с использованием набора для колориметрического/флуориметрического анализа АТФ в соответствии с инструкциями производителя (BioVision, Калифорния). Вкратце, бактериальные белки, полученные в экспоненциальной или стационарной фазе роста, наносили в ряд лунок в двух повторностях для каждой концентрации (1, 10 и 25 мкг/мл в аналитическом буфере для АТФ) и объем доводили до 50 мкл на лунку с помощью аналитического буфера для АТФ. Затем в соответствующие лунки добавляли по 10 мкл раствора различных питательных веществ, 15% сахарозу или среду МН и объем доводили до 50 мкл на лунку с помощью аналитического буфера для АТФ; в контрольные лунки добавляли только буфера для АТФ в объеме 50 мкл на лунку. Планшет инкубировали в течение 2 ч при 37°С. После инкубации в каждую лунку добавляли по 50 мкл реакционной смеси АТФ (содержащей аналитический буфер для АТФ, пробы АТФ, преобразующую и проявляющую смесь для АТФ). Оптическую плотность (OD) измеряли при длине волны 570 нм через 30 мин инкубирования при комнатной температуре в защищенном от дневного света месте.
Разработка и валидация иммуноанализа ClpB
Дизайн анализа для выявления ClpB был основан на нескольких критериях, таких как специфичность и чувствительность выявления в диапазоне линейных концентраций. Определенным условием было выявление ClpB без перекрестной реактивности с α-MSH, которая может возникать из-за наличия α-MSH-подобного эпитопа (эпитопов) в молекуле ClpB. Для облегчения проведения процедуры и выявления сигнала авторы использовали стандартный 96-луночный планшет для ИФА и возможность считывания OD с помощью спектрофотометра. Подробные протоколы ИФА и анализа с помощью Вестерн-блоттинга (WB) ClpB представлены в отдельных разделах.
Для предотвращения связывания «проявляющих» антител (Ab) с «захватывающими» антителами, авторы изобретения получали захватывающие и выявляющие ClpB антитела в различных видах - кроликах и мышах соответственно. Для наиболее эффективного захвата белка ClpB из сложных биологических образцов авторы изобретения покрывали планшет для ИФА поликлональными антителами кролика, имеющими множество эпитопов против ClpB. Для предотвращения перекрестной реактивности между ClpB и α-MSH авторы изобретения использовали в качестве «выявляющих» антител моноклональные антитела мыши против ClpB, которые характеризовались высокий чувствительностью и специфичностью распознавания ClpB по сравнению с α-MSH и были заранее выбраны с помощью ИФА-скрининга нескольких клонов антител. Конъюгированные со щелочной фосфатазой «проявляющие» антитела против антител мыши использовали в качестве общего подхода для ИФА для обеспечения хромогенной ферментативной реакции, регистрируемой как OD, пропорциональная концентрации анализируемого вещества. Получали линейное изменение OD, являющееся результатом анализа 7 последовательных разведений рекомбинантного белка ClpB E.coli, варьирующих от 2 пкМ до 150 пкМ, без достижения плато и без насыщения сигнала OD.
Для того чтобы подтвердить специфичность разработанного анализа ClpB, авторы изобретения измерили концентрацию ClpB в образцах белков, экстрагированных из 10 различных культур бактерий E.coli K12 WT и из культуры мутантного штамма ΔClpB E.coli. Мутантный штамм ΔClpB и соответствующие штаммы дикого типа (WT) были любезно предоставлены доктором Алексом Могком (Dr. Axel Mogk, ZMBH, Гейдельбергский университет, Германия). Более того, исследовали наличие ClpB в указанных образцах бактериальных белков с помощью WB с использованием поликлональных антител кролика против ClpB и сравнивали значения интенсивности сигнала WB-полос и концентрацию ClpB в ИФА. ClpB был выявлен во всех культурах E.coli дикого типа, при этом в 7 культурах концентрация ClpB была выше 1000 пкМ, тогда как ClpB не выявлялся в образце белков, экстрагированных из штамма ΔClpB E.coli. WB-анализ выявил большую полосу с ожидаемым размером 96 кДа у бактерий дикого типа, но не у бактерий ΔClpB E.coli. Уровень OD указанных полос варьировал между отдельными образцами и имел прямую корреляцию с концентрацией ClpB, измеренной с помощью ИФА в тех же образцах культур E.coli. Таким образом, отсутствие выявления ClpB в препаратах белков ΔClpB E.coli подтвердило специфичность анализов, а хорошее соответствие между результата ИФА и WB-анализа обеспечило перекрестную валидацию обоих методов иммунологического выявления ClpB.
Для того чтобы подтвердить, что анализ ClpB в плазме выявляет ClpB, произошедший из кишечных бактерий, авторы изобретения использовали ИФА ClpB для измерения ClpB в плазме мышей, которым в течение 3 недель ежедневно вводили путем внутрижелудочного кормления WT E.coli или ΔClpB E.coli. Образцы плазмы были доступны от предыдущего опубликованного авторами исследования (Tennoune et al., 2014). Авторы изобретения обнаружили, что ClpB в норме присутствовал в плазме крови мышей, включая как контрольных животных, так и мышей, получавших принудительное кормление культуральной жидкостью без бактерий. Важно, что уровень ClpB в плазме был повышен у мышей, получавших WT E.coli, но не изменялся у мышей, которым вводили E.coli с дефицитом ClpB, что подтверждает происхождение плазматического ClpB от кишечных бактерий.
ИФА ClpB
Поликлональные антитела кролика против ClpB E.coli (производится на заказ компанией Delphi Genetics, Госсели, Бельгия), наносили на 96-луночные планшеты Maxisorp (Nunc, Рочестер, Нью-Йорк) в объеме 100 мкл и концентрации 2 мкг/мл в 100 мМ буфере NaHCO3, pH 9,6 на 12 ч при 4°С. Планшеты промывали (5 мин × 3) в фосфатно-солевом буфере (ФСБ), содержавшем 0,05% Tween 20, pH 7,4. Рекомбинантный белок E.coli ClpB (производится на заказ компанией Delphi Genetics), разводили серийно до 5, 10, 25, 50, 70, 100 и 150 пкМ в буфере для образцов (ФСБ, азид натрия 0,02%, pH 7,4) и добавляли в лунки в двух повторностях для получения стандарта. Анализируемые образцы включали: образцы слизистой оболочки толстого кишечника и образцы плазмы мышей и крыс или белки, экстрагированные из культур E.coli K12. Анализируемые образцы добавляли в оставшиеся лунки в двух повторностях и инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре. Планшеты промывали (5 мин × 3) ФСБ, содержащим 0,05% Tween 20, pH 7,4. В лунки добавляли моноклональные антитела мыши против ClpB E.coli (1:500 в буфере для образца, производится на заказ компанией Delphi Genetics) и инкубировали в течение 90 мин при комнатной температуре. Планшеты промывали (5 мин × 3) в ФСБ, содержавшем 0,05% Tween 20, pH 7,4. В лунки добавляли антитела козы против антитела IgG мыши, конъюгированные со щелочной фосфатазой (1:2000 в буфере для образца) от компании Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc. (Вест Гров, Пенсильвания) и инкубировали в течение 90 мин при комнатной температуре. Планшеты промывали (5 мин × 3) в ФСБ 0,05%, содержавшем Tween 20, pH 7,4 и затем добавляли 100 мкл раствора п-нитрофенилфосфата (Sigma, Сент-Луис, Миссури) в качестве субстрата для щелочной фосфатазы. Через 40 мин инкубации при комнатной температуре реакцию останавливали путем добавления 50 мкл 3 н раствора NaOH. OD определяли при длине волны 405 нм с использованием ридера для микротитрационных планшетов Metertech 960 (Metertech Inc., Тайбэй, Тайвань). Значения OD для пустых лунок, полученные в результате считывания планшетов без добавления образцов плазмы или стандартных разведений белка ClpB, вычитали из значений OD для образцов.
Анализ ClpB с помощью Вестерн-блоттинга
Проводили анализ белков, экстрагированных из E.coli K12, с помощью Вестерн-блоттинга. Образцы белков (10 мкг) разделяли в 20% акриламидном геле, содержавшем ДСН, в Трис-глициновом буфере и переносили на нитроцеллюлозную мембрану (GE Healthcare, Орсей, Франция), которую блокировали в течение по меньшей мере 1 ч при комнатной температуре с помощью 5% (масс./об.) обезжиренного сухого молока в TBS (10 ммоль/л трис, pH 8; 150 ммоль/л NaCl) и 0,05% (масс./об.) Tween 20. Затем мембрану инкубировали в течение ночи при 4°C с поликлональными антителами кролика против ClpB E.coli (1:2000, Delphi Genetics). После трехкратной отмывки в блокирующем растворе, содержавшем 5% (масс./об.) обезжиренное сухое молоко в TBS/0,05% Tween 20, мембраны инкубировали в течение 1 ч с конъюгированными с пероксидазой IgG против антител кролика (1:3000, SantaCruz Biotechnology). После трехкратной отмывки пероксидазную реакцию выявляли с использованием набора для выявления ECL (GE Healthcare). Белковые полосы сравнивали со стандартом молекулярных масс (Precision Plus, BioRad), мембраны сканировали с использованием ImageScanner III (GE Healthcare) и анализировали плотность пикселей полос с использованием программы ImageQuant TL версии 7,0 (GE Healthcare).
Кишечное введение белков Е. coli крысам
Животные
Уход и эксперименты на животных проводили в соответствии с нормами, установленными Национальными институтами здравоохранения США и в соответствии правилами Французского и Европейского сообщества (Официальный журнал Европейского сообщества L 358, 18/12/1986). Самок крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г (Janvier, Женест-сент-Иль, Франция) содержали в закрытых клетках (по 3 крысы на клетку) в полностью оборудованном виварии с регулируемыми условиями окружения (температура 22±1°С, 12-часовой светотемновой цикл при включении света в 7:30 утра) в течение 1 недели для их акклиматизации в условиях содержания. Животным предоставляли свободный доступ к стандартному гранулированному корму для грызунов (корм RM1, SDS, Великобритания) и питьевой воде.
Эксперимент #1
Данный эксперимент был разработан для оценки соответствия предложенной авторами модели in vitro роста E.coli картине бактериального роста in vivo в кишечнике. Крысам проводили анестезию раствором кетамин (75 мг/кг, Virbac, Каррос, Франция) / ксилазин (5 мг/кг, Bayer, Леверкузен, Франция) в объеме 3:1, 0,1 мл/100 г массы тела, внутрибрюшинно. После лапаратомии толстый кишечник фиксировали путем наложения 2 лигатур: 1-ая в месте соединения слепой и толстого кишки и 2-ая на 4 см ниже. Инфузию толстого кишечника и взятие образцов содержимого просвета проводили с использованием полипропиленового катетера, помещенного в восходящую ободочную кишку и фиксированного с помощью 1-ой лигатуры. 2 мл среды МН или воды осторожно вливали в толстый кишечник и сразу после этого выпивали для измерения OD. После измерения OD образец содержимого толстого кишечника возвращали обратно. Такое взятие образцов содержимого толстого кишечника без добавления новой среды МН или воды повторяли каждые 5 мин во время первых 20 мин и затем через 30 мин и 60 мин. Плотность бактерий измеряли как OD при λ=600 нм с помощью спектрофотометра. Образцы крови отбирали из воротной вены до начала инфузии и через 30 и 60 мин после 1-ой инфузии. Образцы фекалий отбирали из толстого кишечника в конце эксперимента для экстракции ДНК и ПЦР-анализа ClpB.
Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени
Количественную ПЦР (кПЦР) проводили для анализа бактериальной плотности экспрессирующих ДНК ClpB бактерий с использованием прибора CFX 96 qPCR (BioRad, Калифорния). Тотальную ДНК экстрагировали из крысиного кала с использованием копрологического мининабора QAMP DNA stool (QIAGEN Venlo, Нидерланды). Смесь кПЦР включала 5 мкл SYBR Green Master (QIAgen, Уэст-Сассекс, Великобритания), 0,5 мкМ каждого из прямого и обратного праймеров, ДНК из образцов и воду для достижения общего объема 10 мкл. Праймеры были получены из компании Invitrogen (Сержи-Понтуаз, Франция). Проводили трехстадийную ПЦР с 40 циклами. Денатурацию образцов проводили при 95°С в течение 10 мин, отжиг проводили при 60°С в течение 2 мин и удлинение проводили при 95°С в течение 15 сек.
Эксперимент #2
Цель данного эксперимента заключалась в оценке эффектов белков Е. coli на высвобождение пептидов кишечника (GLP-1 и PYY) в системный кровоток. Крысам проводили анестезию и толстый кишечник фиксировали, как описано выше, проводили вливание в толстый кишечник белков E.coli (0,1 мкг/кг белка в 2 мл ФСБ), экстрагированных в экспоненциальной фазе роста (n=6) или стационарной фазе роста (n=6) один раз в течение 20 мин. Образцы крови отбирали из воротной вены до вливания и через 20 мин после вливания для анализа GLP-1, PYY и ClpB. Образцы слизистой оболочки толстого кишечника отбирали в конце эксперимента для анализа ClpB. Анализы GLP-1 и PYY проводили с использованием набора для флуоресцентного ферментативного иммуноферментного анализа (Phoenix Pharmaceutical inc., Калифорния), в соответствии с инструкциями производителя. Флуоресценцию измеряли при 325 нм (возбуждение) и 420 нм (испускание) с использованием ридера для микротитрационных планшетов Chameleon (HIDEX Inc., Турку, Финляндия).
Введение белков Е. coli крысам, потребление пищи и исследование c-fos в головном мозге
Животные
Самцам крыс Wistar с массой тела 200-250 г (Janvier, Женест-сент-Иль, Франция) позволяли акклиматизироваться в условиях содержания. Животных кормили, как описано выше. За три дня до проведения экспериментов крыс переносили в отдельные метаболические клетки (Tecniplast, Лион, Франция), где им обеспечивали свободный доступ к пище с такой же рационом RM1, но в форме порошка (SDS). Обеспечивали свободный доступ к питьевой воде. Крыс аккуратно брали на руки ежедневно на несколько минут во время периода акклиматизации для того, чтобы приучить их к обращению. В конце периода акклиматизации крыс распределяли на три группы для достижения сходной средней массы тела и использовали в экспериментах 1-3. Два эксперимента, включающие ограничение пищи, проводили на одних и тех же крысах с интервалом в 4 дня. 3-ий эксперимент на крысах со свободным доступом к пище включал новые группы.
Эксперимент #1
Цель 1-го эксперимента заключалась в сравнении эффектов мембранных белков E.coli, экстрагированных в экспоненциальной и стационарной фазе роста. Крыс лишали пищи в течение ночи (между 18,00 ч и 10,00 ч), при этом обеспечивали свободный доступ к воде. На следующий день в 10:00 ч крысам после лишения пищи вводили внутрибрюшинно белки E.coli и животных сразу возвращали в их метаболические клетки, которые содержали заранее взвешенное количество еды. Потребление пищи измеряли через 1,2 и 4 ч. 1-ая группа крыс (n=6) получала 0,1 мг/кг мембранных белков, экстрагированных из E.coli в экспоненциальную фазу роста, в 300 мкл ФСБ; 2-ая группа крыс (n=6) получала 0,1 мг/кг мембранных белков, экстрагированных из E.coli в стационарную фазу росту, и контрольная группа (n=6) получала 300 мкл ФСБ.
Эксперимент #2
Цель 2-го эксперимента заключалась в сравнении эффектов цитоплазматических белков E.coli, экстрагированных в экспоненциальной и стационарной фазе роста. Использовали протокол эксперимента, сходный с протоколом для Эксперимента #1.
Эксперимент #3
Настоящий эксперимент был спланирован для оценки эффектов общего белка Е. coli на потребления пищи у крыс со свободным доступом к пище. Инъекции белков E.coli (0,1 мг/кг белка в 300 мкл ФСБ, внутрибрюшинно), экстрагированых в экспоненциальную фазу роста (n=6) или стационарную фазу роста (n=6), или только ФСБ в качестве контроля (n=6) проводили в 19:30 ч и животных возвращали в их метаболические клетки, которые содержали заранее взвешенное количество пищи. Суммарное потребление пищи измеряли через 2 ч. Сразу после этого крысам проводили анестезию с помощью пентобарбитала натрия (0,2 мг/кг, внутрибрюшинно) и перфузию для иммуногистохимического исследования экспрессии c-fos в головном мозге.
Препараты ткани и иммуногистохимический анализ
Головной мозг фиксировали путем перфузии/иммерсии в 4% параформальдегиде, замораживали, делали срезы (14 мкм) на криостате (Leica Microsystems, Нантер, Франция) и затем обрабатывали для иммуногистохимического анализа с использованием набора тирамидного усиления сигнала (TSA) с флуоресцеином (NEN, Бостон, Массачусетс). Для одноцветного окрашивания использовали поликлональную антисыворотку кролика против c-fos (1:4,000, Ab-5, Calbiochem, Merck KGaA, Дармштадт, Германия). Для двойного окрашивания после TSA применяли метод прямой иммунофлуоресценции с использованием моноклональнох антител кролика против β-эндорфина (β-end) 1:1,000 (Life Technologies, Фредерик, Мериленд), которые выявляли с помощью антител Cyanine-3 против антител кролика 1:200 (Jackson ImmunoResearch, Вест Грув, Пенсильвания), или моноклональных IgG мыши против связанного с геном кальцитонина пептида (CGRP) 1:1,000 (Santa Cruz Biotechnology, inc., TX), которые выявляли с помощью конъюгированных с родамином красным антител против антител мыши в разведении 1:200 (Jackson ImmunoResearch). В дугообразном и вентромедиальном ядре гипоталамуса и в центральном ядре миндалевидного тела положительные клетки считали при увеличении х20 на шести последовательных срезах. Среднее количество положительных клеток на крысу использовали для расчета среднего на группу. С помощью программы Adobe Photoshop 6,0 (Adobe Systems, Сан Джоуз, Калифорния) оптимизировали яркость и контраст цифровых изображений.
Продолжительное введение белков Е. coli у мышей
Самцов мышей линии C57Bl6 возрастом два месяца (n=32) получали из компании Janvier Labs и позволяли животным акклиматизироваться в помещении вивария в течение 1 недели при поддержании 12-часового светотемнового цикла (свет включали в 8:00). Затем мышей помещали по отдельности в клетки для мышей BioDAQ (Research Diets, Inc., Нью-Брансуик, Нью-Джерси), снабженные автоматическим регистратором потребления пищи. Через 3 дня акклиматизации в клетках BioDAQ мышей делили на три группы (n=8), каждая из которых получала разное лечение, включающее две ежедневные (в 9:00 и в 18:30) внутрибрюшинные инъекции какого-либо из следующих вариантов: (i) ФСБ, (ii) бактериальные белки, экстрагированные в экспоненциальной фазе роста (0,1 мг/кг массы тела), (iii) бактериальные белки, экстрагированные в стационарной фазе роста (0,1 мг/кг массы тела). Животные имели свободный доступ к пище (SERLAB, Монтатер, Франция) и питьевой воде, массу тела животных измеряли ежедневно. Данные потребления пищи непрерывных регистрировали в течение одной недели и анализировали с помощью средства просмотра данных BioDAQ 2.3.07 (Research Diets). Для анализа паттерна потребления пищи между приемами пищи устанавливали интервал 300 сек. Показатели чувства сытости рассчитывали как продолжительность (сек) интервала после приема пищи, деленная на количество пищи (г), потребленной за предшествующий прием пищи. После эксперимента мышей умерщвляли путем декапитации; извлекали головной мозг и ткань гипоталамуса иссекали для микроматричного анализа мРНК нейропептидов.
Микроматричный анализ мРНК нейропептидов гипоталамуса
Тотальную РНК экстрагировали из гипоталамуса мышей, которым в течение продолжительного времени вводили белки Е. coli, с использованием набора NucleoSpin® РНК II (Macherey-Nagel, Дюрен, Германия) в соответствии с протоколом производителя. Осуществляли обратную транскрипцию переваренной РНК при 42°С в течение 60 мин с использованием системы для обратной транскрипции ImProm-II™ (Promega, Мэдисон, Висконсин). Полученную кДНК использовали в реакции ПЦР в реальном времени. Панель из 9 пар праймеров была создана с помощью программы Primer express (Life Technologies, Сент-Обен, Франция) и проверена на эффективность и специфичность. Смесь для ПЦР, состоящая из 6 мкл кДНК и 6 мкл реакционной смеси Fast SYBR Green Master Mix (Life Technologies), содержащей специфичные обратные и прямые праймеры в концентрации 100 нМ, распределяли в лунки 96-луночных планшетов с помощью системы для работы с жидкостями Bravo (Agilent) и проводили амплификацию с помощью прибора QuantStudio 12K Flex (Life Technologies). Обеспечивали внутреннюю корректировку различий в количестве входной мРНК для кДНК-сигналов для генов-мишеней по сигналам референсных генов. Уровень экспрессии гена затем сравнивали с соответствующей контрольной группой образцов и изменения определяли с помощью метота 2-ΔΔCq.
Регистрация электрофизиологических показателей
Получали срезы головного мозга (250 мкм) взрослых мышей POMC-eGFP (возрастом 5-7 недель; ссылка: C57BL/6J-Tg(Pomc-EGFP)1Low/J, The Jackson Laboratory), как было описано ранее (Fioramonti et al., 2007). Срезы инкубировали при комнатной температуре в оксигенизированной внеклеточной среде, содержавшей: 118 мМ NaCl, 3 мМ KCl, 1 мМ MgCl2, 25 мМ NaHCO3, 1,2 мМ NaH2PO4, 1,5 мМ CaCl2, 5 мМ Hepes, 2,5 мМ D-глюкозу (осмолярность доведена до 310 мОсм с помощью сахарозы, pH 7,4) в течение периода восстановления, составляющего по меньшей мере 60 мин. После помещения срезов в камеру для регистрации проводили их перфузию со скоростью 2-3 мл/мин той же внеклеточной средой. Срезы анализировали с помощью микроскопа Nikon EF600 (Nikon, Шампиньи-сюр-Марн, Франция), оснащенного флуресцеиновым фильтром для флуоресцентного анализа, и ИК-дифференциально-интерференционной контрастной (ДИК) видеомикроскопии. Жизнеспособные РОМС-нейроны дугообразного ядра визуализировали с использованием объектива Х40 с водной иммерсией (Nikon) с помощью флуоресцентной видеокамеры (Nikon). Боросиликатные пипетки (4-6 MΩ; 1,5 мм OD, Sutter Instruments, Новато, Калифорния) наполняли фильтрованной внеклеточной средой. Регистрацию прикрепленных клеток проводили с использованием усилителя Multiclamp 700В, данные оцифровывали с использованием интерфейса Digidata 1440А и получали при 3 кГц с использованием программы pClamp 10,3 (Axon Instruments, Molecular Devices, Саннивейл, Калифорния). Емкостное сопротивление пипеток и клеток было полностью скомпенсировано. После того как был установлен стабильный базовый уровень 1 нМ раствор ClpB (Delphi Genetics) перфузировали в течение 5-10 минут. Частоту испускания импульсов РОМС-нейронов измеряли в течение последних 3 мин перфузии ClpB, через 7-10 мин после перфузии и сравнивали с частотой испускания импульсов, измеренной за 3 мин до начала перфузии.
Статистический анализ
Данные анализировали и строили графики с использованием программы GraphPad Prism 5,02 (GraphPad Software Inc., Сан Диего, Калифорния). Нормальность оценивали с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Различия между группами анализировали с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) или непараметрического критерия Краскела-Уоллиса (K-W) с апостериорными критериями Тьюки или Данна в соответствии с результатами нормальности. Если приемлемо, отдельные группы сравнивали с использованием t-критерия Стьюдента и корреляций Пирсона или критерия Манна-Уитни (M-W) в соответствии с результатами нормальности. Эффекты в продолжительных экспериментах анализировали с использованием анализа ANOVA повторных измерений (RM) и апостериорных тестов Бонферрони. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего (SEM). Для всех критериев p<0,05 считали статистически достоверным.
Результаты
Рост E.coli после регулярного снабжения питательными веществами
После 1-го снабжения питательной средой Мюллера-Хинтона (МН) культуры E.coli наблюдали три фазы роста бактерий: 1) латентная фаза - 2 ч; 2) экспоненциальная фаза роста - 4 ч и 3) стационарная фаза роста с оптической плотностью 0,35 (OD), которая оставалась стабильной в течение 6 ч. После 3-го и 5-го снабжения средой МН были обнаружены только две фазы роста: экспоненциальная и стационарная; 1-ая фаза начиналась сразу после снабжения питательными веществами. Каждый новый цикл обеспечения питательных веществ характеризовался более короткой продолжительностью экспоненциальной фазы роста: 2 ч после 3-го и 20 мин после 5-го снабжения. После 5-го снабжения питательными веществами экстрагировали бактериальные белки и разделяли на мембранную и цитоплазматическую фракцию, которые использовали для протеомного анализа и in vivo экспериментов на крысах, не получавших пищу. В новом эксперименте для проверки способности продолжительного регулярного снабжения питательными веществами дополнительно ускорять динамику роста бактерий E.coli K12 снабжали питательными веществами 9 раз. Было обнаружено, что после 7-го и 9-го снабжения питательными веществами экспоненциальная фаза роста больше не менялась и длилась в течение 20 мин с таким же относительным повышением (Δ0,3) OD, что отражает одинаковый рост бактерий после каждого снабжения питательными веществами. В соответствии со стандартами мутности по МакФарланду повышение OD на 0,3 соответствует проросту бактерий на 108-109. После 9-го снабжения питательными веществами бактериальные белки экстрагировали в экспоненциальной и стационарной фазе роста. Была показана общая концентрация белка 0,088 мг/мл и 0,15 мг/мл соответственно. Экстрагированные белки исследовали на содержание ClpB и использовали в анализе продукции АТФ и для in vivo экспериментов, включающих вливание в толстый кишечник и системное введение мышам и крысам, имеющим свободный доступ к пище, с последующим выявлением c-fos в головном мозге.
Протеомный анализ
Для анализа различий в профилях экспрессии белков для вызванных питательными веществами фаз роста бактерий проводили двумерный электрофорез в полиакриламидном геле (2D-ПААГ) отдельно для мембранной и цитоплазматической фракции белков E.coli K12, экстрагированных через 10 мин и 2,3 ч после 5-го добавления среды МН, что соответствует экспоненциальной и стационарной фазе роста соответственно. Общее количество выявленных белковых пятен составляло 2895 (1367 мембранных и 1528 цитоплазматических).
Сравнение 2D-ПААГ для мембранных белков экспоненциальной и стационарной фазы выявило 20 белков с различающейся экспрессией (по меньшей мере в 1,5 раза). Среди них 17 белков имели увеличенную экспрессию в экспоненциальной фазе роста, 15 белков были идентифицированы с помощью масс-спектрометрии. Сравнение 2D-ПААГ цитоплазматических белков показало 20 белков с различающейся экспрессией (по меньшей мере в 1,5 раза). В отличие от мембранных белков большинство (19) цитоплазматических белков имело увеличенную экспрессию в стационарной фазе. Только для одного белкового пятна, соответствующего флагеллину, была показана более высокая экспрессию в экспоненциальной фазе роста. Большинство идентифицированных белков представляли собой белки, участвующие анаболических или катаболических процессах, что указывает на общий смешанный метаболический профиль в обеих фазах роста.
Продукция АТФ белками E.coli in vitro
Для того чтобы изучить, могут ли изменения бактериального протеома в фазах роста бактерий влиять на их способность выделять энергию и продукцию АТФ из питательных веществ, вызванную белками E.coli K12 экспоненциальной и стационарной фазы, исследовали in vitro. Было обнаружено, что белки обеих фаз роста были способны повышать продукцию АТФ из различных источников энергии. Концентрация АТР была выше при использовании белок-содержащего смешанного источника энергии, такого как среда МН, по сравнению с раствором сахарозы. Продукция АТФ повышалась дозозависимым образом с повышением концентрации бактериальных белков, однако не было обнаружено существенных различий между эффектами на продукцию АТФ белков экспоненциальной и стационарной фазы.
Продукция ClpB E.coli in vitro
Авторы изобретения разработали и валидировали твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА) для выявления ClpB E.coli, который был использован в настоящем исследовании. Различия в продукции ClpB между фазами роста бактерий исследовали на 4 отдельных культурах E.coli K12. Результаты Вестерн - блоттинга выявили соответствующие полосы ClpB массой 96 кДа во всех белковых препаратах с увеличенным уровнем во время стационарной фазы. Указанные изменения дополнительно подтвердили с использованием ИФА ClpB на тех же препаратах бактериального белка, показавшего, что концентрация ClpB увеличилась в стационарной фазе почти в два раза.
Кишечное вливание питательных веществ и белков E.coli
Для того чтобы проверить, соответствует ли предложенная авторами in vitro модель вызванного питательными веществами роста E.coli динамике роста кишечных бактерий in vivo, крысам, находящимся под анестезией, проводили вливание в толстый кишечник среды МН или воды. Было обнаружено, что медленное вливание среды МН, но не воды, вызывало пролиферацию бактерий в кишечнике с экспоненциальной фазой роста, длящейся в течение 20 мин, что согласуется с данными in vitro. Уровень ClpB в плазме, полученной из воротной вены, значительно не различался через 30 или 60 мин после инфузии МН. Тем не менее, концентрация ClpB в плазме прямо коррелировала с содержанием ДНК ClpB в фекалиях.
Затем для того, чтобы определить, могут ли зависимые от роста бактерий изменения протеома E.coli влиять на механизмы контроля аппетита хозяина локально в кишечнике, в отдельном эксперименте, крысам, находящимся под анестезией, проводили вливание в толстую кишку белков Е. coli экспоненциальной или стационарной фазы роста в концентрации 0,1 мг/кг в течение 20 мин. Концентрация ClpB в слизистой оболочке толстой кишки, измеренная через 20 мин после вливания, была выше у крыс, получавших белки стационарной фазы роста, однако бактериальные белки как экспоненциальной, так и стационарной фазы роста не оказывали влияния на уровень ClpB в плазме. Было обнаружено, что медленное вливание в толстую кишку белков E.coli экспоненциальной фазы роста, но не стационарной фазы роста, приводило к повышению уровня GLP-1 в плазме; повышение уровня PYY было выявлено, напротив, после инфузии белков стационарной фазы, но не экспоненциальной фазы роста, что согласуется с гипотезой авторов о том, что эффекты белков E.coli на сигнальные пути, контролирующие аппетит, хозяина должны зависеть от фазы роста бактерий.
Потребление пищи и экспрессия c-fos в головном мозге после однократных введений белков E.coli у крыс
Поскольку ClpB присутствовал в плазме всех исследуемых крыс и мышей, авторы предположили, что плазматические белки E.coli могут влиять на аппетит благодаря системному действию и что такие эффекты могут быть различными для белков, связанных с разными фазами роста бактерий. В результате проверки этого предположения на крысах, не получавших еду в течение ночи, было обнаружено, что однократное внутрибрюшинное (ВБ) введение (0,1 мг/кг массы тела) мембранной фракции белков E.coli, экстрагированных в стационарной фазе роста, приводило к снижению потребления пищи в течение 1 и 2 часов при возобновлении кормления по сравнению с контрольной группой. Напротив, введение цитоплазматической фракции белков E.coli (0,1 мг/кг массы тела, внутрибрюшинно), экстрагированной в экспоненциальной фазе роста, повышало потребление пищи в течение 4 часов при возобновлении кормления.
Для того, чтобы также исследовать, могут ли общие белки E.coli влиять на спонтанное потребление пищи в зависимости от фазы роста и активировать участки центральной нервной системы, такие как ARC, крысам, имеющим свободный доступ к пище, вводили до начала темновой фазы бактериальные белки (0,1 мг/кг массы тела, внутрибрюшинно). Потребление пищи измеряли в течение 2 ч после инъекции, затем крыс умерщвляли для анализа экспрессии c-fos в головном мозге. Было обнаружено, что крысы, которым вводили бактериальные белки стационарной фазы, потребляли меньше пищи по сравнению с контрольными животными, тогда как введение бактериальных белков, полученных в экспоненциальную фазу роста, значительно не влияло на потребление пищи.
Через два часа после внутрибрюшинной инъекции белков E.coli крысам, имеющим свободный доступ к пище, проводили иммуногистохимический анализ экспрессии c-fos в дугообразном ядре (ARC), вентромедиальном ядре (VMN) гипоталамуса и в центральном ядре миндалевидного тела (СеА). Увеличенное количество c-fos-положительных клеток было обнаружено в ARC и VMN у мышей, получавших бактериальные белки стационарной фазы. Большинство c-fos-экспрессирующих клеток в ARC содержало β-эндорфин (контроли: 71,31±12,81%, экспоненциальная фаза роста E.coli: 73,56±10,45%, стационарная фаза роста E.coli: 80,50±9,68%, ANOVA, р=0,36), т.е. было идентифицировано как анорексигенные РОМС-нейроны. Соответственно, процент оставшихся c-fos-нейронов в ARC значительно не различался между группами (контроли: 28,69±12,81%, экспоненциальная фаза роста E.coli: 26,44±10,45%, стационарная фаза роста E.coli: 19,5±9,68%, ANOVA, р=0,36). Несмотря на то, что общее количество β-эндорфин-положительных клеток значительно не различалось между группами (контроли, 54,82±10,67 клеток, экспоненциальная фаза роста E.coli: 66,03±11,43 клеток, стационарная фаза роста E.coli: 66,03±5,06 клеток, ANOVA, р=0,09), относительное количество активированных β-эндорфиновых нейронов было повышено у крыс, получавших белки стационарной фазы роста по сравнению с контрольными животными и с крысами, получавшими белки экспоненциальной фазы роста. Более того, количество активированных β-эндорфиновых нейронов обратно коррелировало с потреблением пищи (Пирсона r=-0,57, р=0,018).
В СеА количество c-fos-положительных клеток у крыс, которым инъецировали белки стационарной фазы, было повышено по сравнению с двумя другими группами. Почти все c-fos-положительные клетки в СеА были определены как CGRP-экспрессирующие нейроны (контроли, 100±0,01%, экспоненциальная фаза роста E.coli: 100±0,01%, стационарная фаза роста E.coli: 100±0,01%, ANOVA р=0,92). Несмотря на то что общее количество CGRP-положительных нейронов в СеА было сходным среди групп (контроли, 123,8±13,15 клеток, экспоненциальная фаза роста E.coli: 118,3±25,59 клеток, стационарная фаза роста Е.coli: 126,1±6,64 клеток, ANOVA р=0,85), процент CGRP-нейронов с активированным c-fos был повышен только у крыс, получавших белки стационарной фазы. Активация CGRP-нейронов обратно коррелировала с потреблением пищи (Пирсон: r=-0,89, р=0,001).
Паттерн пищевого поведения и нейропептиды гипоталамуса после продолжительного введения белков E.coli мышам
Для того чтобы определить, могут ли бактериальные белки влиять на паттерн пищевого поведения, мышам со свободным доступом к пище проводили ежедневно две инъекции общего белка E.coli (0,1 мг/кг массы тела, внутрибрюшинно) в течение одной недели. Первый день после инъекции характеризовался значительным снижением массы тела и потребления пищи у мышей, получавших бактериальные белки стационарной фазы, но не экспоненциальной фазы роста, по сравнению с контролями. Несмотря на то что ежедневный объем порций пищи значительно не различался между группами, через неделю у мышей, получавших белки стационарной фазы, наблюдалось его снижение по отношению к дню до введения. Частота приема пищи значительно не различалась между группами, несмотря на то что тенденция в сторону повышения наблюдалась у мышей, получавших бактериальные белки стационарной фазы. Несмотря на то что общее потребление пищи среди 3 групп значительно не различалось в течение 6 дней введения, анализ потребления пищи раздельно для светового и темнового периода показал, что у мышей, которым вводили белки фазы экспоненциального роста, наблюдалось увеличенное потребления пищи во время светового периода, но было снижено во время темнового периода. Напротив, у мышей, получавших белки стационарной фазы, наблюдалось более низкое по сравнению с контрольными животными потребление пищи в темновом периоде без каких-либо отличий в световом периоде. Во время первого дня после инъекции показатель чувства сытости был повышен у мышей, получавших белки стационарной фазы, та же группы имела тенденцию к снижению через одну неделю.
Чтобы получить представление о молекулярных изменениях, лежащих в основе изменения паттерна пищевого поведения, наблюдаемого через 6 дней введения бактериальных белков, авторы изобретения анализировали уровень экспрессии в гипоталамусе мРНК некоторых нейропептидов, вовлеченных в контроль аппетита. Было обнаружено, что у мышей, получавших белки стационарной фазы роста, наблюдался увеличенный уровень мРНК-предшественника нейротрофического фактора головного мозга (BDNF) и орексина по сравнению с контрольными животными, а также увеличенный уровень кортикотропин-высвобождающего гормона (CRH) по сравнению с мышами, которым вводили белки фазы экспоненциального роста, которые также имели увеличенный уровень BDNF, но пониженный уровень QRFP.
Электрофизиологическая активация РОМС-нейронов гипоталамуса ClpB
Для того чтобы определить, может ли ClpB как маркер белков E.coli, повышающихся в стационарной фазе роста и миметик α-MSH активировать РОМС-нейроны ARC, его действие проверяли на срезах головного мозга мышей POMC-eGFP с использованием электрофизиологического анализа patch-clamp на прикрепленных клетках. Промывка раствором ClpB (1 нМ) приводила к повышению частоты потенциала действия у ~50% РОМС-нейронов ARC (n=7/13) на 229±109% (исходная частота: 2,02±0,78 Гц по сравнению с ClpB-вызванной: 3,82±1,36 Гц). В целом, РОМС-нейроны не полностью возвращались к исходным показателям частоты испускания импульсов по меньшей мере вплоть до 10 мин после применения ClpB.
Обсуждение
Проведенное авторами исследование выявило, что бактериальные белки могут обеспечивать физиологическую связь между кишечными бактериями и контролем аппетита хозяина, включая как краткосрочные, так и долгосрочные механизмы, связанные с вызванным питательными веществами ростом бактерий в кишечнике и их системными эффектами соответственно. Следующие далее основные результаты подтверждают данное заключение: 1) регулярное снабжение питательными веществами ускоряло и стабилизировало экспоненциальную фазу роста E.coli, длящуюся 20 мин, что согласуется с данными in vivo; 2) стационарная фаза роста E.coli характеризовалась повышением общего содержания бактериальных белков и различающимся протеомом, включая увеличенный ClpB; 3) белки E.coli от обеих фаз роста дозозависимым образом стимулировали продукцию АТФ in vitro; 4) уровень ClpB в плазме не менялся после вызванного питательными веществами роста бактерий в кишечнике, но коррелировал с содержанием ДНК ClpB в кишечной микробиоте; 5) вливание в кишечник белков E.coli, полученных в экспоненциальную и стационарную фазу роста, вызывало стимуляцию GLP-1 и PYY в плазме соответственно; 6) системное введение белков E.coli приводило к значительному снижению потребления пищи только в случае белков, полученных в стационарную фазу, и сопровождалось активацией c-fos в анорексигенных нейронах ARC и СеА; и, наконец 7) ClpB стимулировал частоту испускания импульсов РОМС-нейронов ARC.
Регулярное снабжение питательными веществами и рост бактерий
Среди широкого разнообразия бактерий, которые заселяют желудочно-кишечный тракт человека, E.coli является наиболее распространенным факультативным анаэробом, что объясняет ее применение в качестве модельного организма для изучения симбиотических кишечных бактерий (Foucault et al., 2009). Согласно настоящему изобретению, было обнаружено, что динамика роста E.coli меняется при регулярном снабжении бактерий питательными веществами, где 5-ый цикл обеспечения питательными веществами приводит сразу к экспоненциальному росту, длящемуся 20 мин после стационарной фазы. Затем следуют одинаковые повторения цикла роста после следующего снабжения питательными веществами, что дает основания полагать, что указанное снабжение может обеспечивать цикличность активности внутренних механизмов бактерий. Сходная динамика роста бактерий в ответ на инфузию питательных веществ наблюдалась в толстой кишке крыс, что подтверждает соответствие данных, полученных авторами in vitro, картине in vivo, например, у людей, употребляющих регулярно пищу. Увеличение числа бактерий на 108-109 оставалось стабильным после каждого нового снабжения питательными веществами, что дает основания предполагать, что соответствующая стабильная продукция бактериальной биомассы, включая увеличенное содержание белков в кишечнике, может играть роль фактора вызванной приемом пищи регуляции для хозяина. Учитывая, что средняя фаза приема пищи у людей сходна с продолжительностью экспоненциальной фазы роста бактерий, получающих регулярное снабжение питательными веществами, можно ожидать, что чувство сытости у хозяина может быть вызвано кишечными бактериями, достигающими стационарной фазы роста через 20 мин после контакта с потребленными питательными веществами. Однако бактериальное содержимое в желудочно-кишечном тракте варьирует от 103 в желудке до 1012 в толстом кишечнике. Более того, приблизительно 2 ч необходимо для продвижения поглощенных питательных веществ через желудок и тонкий кишечник и приблизительно 10 ч через толстый кишечник. Такая задержка доставки питательных веществ к большинству кишечных бактерий, вероятно, указывает на то, что помимо непосредственного контакта с питательным болюсом рост бактерий во время фазы приема пищи может также инициироваться питательными веществами, высвобождающимися в просвет кишечника по условному рефлексу Павлова на прием пищи.
Экспрессия бактериальных белков во время фаз роста и восприятие сигнала в кишечнике
Поскольку динамика роста E.coli, регулярно получающих питательные вещества, может быть связана с фазой приема пищи и фазой, следующей за приемом пищи, авторы изобретения исследовали потенциальную возможность связи кишечных бактерий с контролем аппетита хозяина через экспрессию бактериальных белков. Сначала авторы проводили сравнение протеома E.coli в экспоненциальной и стационарной фазе роста. Для этого анализа белки E.coli экстрагировали в середине фазы экспоненциального роста, т.е. через 10 мин после предоставления питательных веществ, и в стационарной фазе роста через 2 ч - это время в норме характеризуется чувством сытости. Обнаружение по меньшей мере 40 белков с различиями в экспрессии между двумя фазами роста подтвердило, что они различаются не только количественно, но и по белковому составу, который увеличивается почти вдвое после пролиферации бактерий, а также меняется качественно. Затем изучали возможное соответствие модифицированного профиля экспрессии белков контролю аппетита хозяина: i) путем сравнения способности бактериальных белков производить источник энергии и ii) путем определения возможных непосредственных эффектов бактериальных белков на пути регуляции аппетита. Возможность последнего подтверждается тем, что белок ClpB E.coli был недавно идентифицирован как конформационный пептидомиметик α-MSH (Tennoune et al., 2014); эти данные подтвердили более раннюю гипотезу авторов о том, что кишечные бактериальные белки, проявляющие гомологию по эпитопам с анорексигенными или орексигенным пептидам, могут отвечать за перекрестную реактивность аутоантител (Fetissov et al., 2008). Таким образом, возможно, что комбинация таких бактериальных пептидомиметиков может влиять непосредственно на аппетит в зависимости от профиля экспрессии белков, связанных с фазой роста бактерий. В результате анализа культур E.coli и слизистой оболочки кишечника был обнаружен увеличенный уровень ClpB, связанный со стационарной фазой роста бактерий. Увеличенный уровень ClpB, таким образом, может вносить вклад в активацию анорексигенных путей после вызванной питательными веществами пролиферации E.coli и повышения продукции бактериальных белков. Важным вопросом является то, на каком этапе бактериальные белки, такие как ClpB, могут действовать на регулирующие аппетит пути.
Несмотря на то что бактериальные белки присутствуют в слизистой оболочке кишечника (Haange et al., 2012), способность их прохождения через стенку кишечника подробно не изучалась (Lim и Rowley, 1985). Теоретически после спонтанного и вызванного лизиса бактерий в кишечнике (Rice и Bayles, 2008), бактериальные компоненты могут проходить через эпителиальный барьер слизистой оболочки в результате всасывания энтероцитами и путем параклеточной диффузии, регулируемой нервной системой кишечника (Neunlist et al., 2012). Например, липополисахарид (ЛПС), который высвобождается при лизисе грамотрицательных бактерий, присутствуют в естественных условиях в плазме здоровых людей и мышей и имеет высокий исходный уровень после употребления пищи с высоким содержанием жиров (Cani et al., 2007). Уровень ЛПС в плазме также повышается после приема пищи (Harte et al., 2012), однако такие данные о бактериальных белках отсутствуют. Авторы настоящего изобретения показали, что уровень ClpB в плазме остается стабильным у крыс после пролиферации бактерий в кишечнике или после вливания в кишечник бактериальных белков. Это указывает на то, что вызванная питательными веществами пролиферация бактерий не оказывает существенного влияния на плазматический ClpB, и наиболее вероятно, другие бактериальные белки, присутствующие в плазме, и, таким образом, указанные белки не могут быть вовлечены в краткосрочный сигналинг в головном мозге, регулирующий насыщение.
Тем не менее, концентрация ClpB в плазме коррелировала с ДНК ClpB в кишечной микробиоте, что дает основания полагать, что количество ClpB-продуцирующих бактерий, которое через длительный период времени должно было бы являться относительно независимым от колебаний, связанных с вызванным питательными веществами ростом бактерий, может являться ключевым фактором, отвечающим за длительное поддержание плазматического уровня ClpB. Это заключение дополнительно подтверждается данными, полученными авторами для валидации ИФА ClpB, показывающими увеличенную концентрацию ClpB в плазме у мышей, постоянно получающих принудительное кормление E.coli в отличие от мышей, которые получали E.coli с мутацией ClpB. В связи с этим возможно, что белки кишечных бактерий, присутствующие в плазме, включая ClpB, могут оказывать системное действие, обеспечивая связь между составом кишечной микробиоты и долгосрочным контролем энергетического метаболизма.
Эффекты белков E.coli на продукцию АТФ in vitro
Энергетический обмен через пищевые цепи отражает универсальную связь между всеми организмами (Yun et al., 2006). АТФ, которая получается в результате катаболизма питательных веществ как у бактерий, так и у животных, служит основным энергетическим субстратом для анаболических процессов. Животные могут чувствовать изменения в АТФ через активность аденозин-5'-монофосфат-активируемой протеинкиназы (АМРК), приводящую к повышению потребления пищи при низком уровне АТФ, и наоборот (Dzamko и Steinberg, 2009). Таким образом, в настоящей работе проводили сравнение способности белков E.coli экспоненциальной фазы роста и стационарной фазы роста производить АТФ in vitro. В самом деле, многие из идентифицированных белков проявляли анаболическую или катаболическую активность. Было обнаружено, что белки E.coli способны стимулировать продукцию АТФ in vitro, что дает основания предполагать, что они могут продолжать катализировать продукцию АТФ после лизиса бактерий в кишечнике. Несмотря на то что не было обнаружено различий в способности продуцировать АТФ между белками от экспоненциальной фазы роста и стационарной фазы роста, зависимая от концентрации бактериальных белков продукция АТФ указывает на то, что повышение содержания бактериальных белков после вызванной питательными веществами пролиферации бактерий должно приводить к более высокому синтезу АТФ. То что эффективность кишечной микробиоты имеет отношение к поглощению энергии в ходе метаболизма хозяина, было ранее установлено путем сравнения полных и стройных людей, а также мышей (Turnbaugh et al., 2006). Данные настоящего изобретения также подтверждают указанные результаты за счет показанной способности белков E.coli производить АТФ. Эти данные также предполагают, что вызванная приемом пищи пролиферация бактерий может приводить к повышению кишечной АТФ, которое может вносить вклад в восприятие через просвет кишечника доступности энергии и расслабления кишечника (Glasgow et al., 1998).
Кишечные эффекты белков E.coli на гормоны насыщения
Далее авторы изобретения исследовали, могут ли белки E.coli в кишечнике стимулировать системное высвобождение кишечных гормонов насыщения, таких как GLP-1 и PYY (Adrian et al., 1985; Batterham et al., 2002; Beglinger и Degen, 2006; Flint et al., 1998). Фактически, оба гормона продуцируются одинаковым или разными аргентаффинными L-клетками, присутствующими во всех отделах кишечника и встречающимися в большом количестве в толстом кишечнике (Eissele et al., 1992), и таким образом, L-клетки непосредственно подвержены действию бактериальных белков. Авторы изобретения обнаружили различные эффекты белков E.coli на высвобождение GLP-1 и PYY, указывающие на стимуляцию GLP-1 белками экспоненциальной фазы роста и стимуляцию PYY белками стационарной фазы роста. Данные результаты указывают на частичное сходство между вызванным питательными веществами ростом бактерий и известной динамикой вызванного приемом пищи высвобождения GLP-1 и PYY. Фактически, как было показано на людях, резкий пик GLP-1 в плазме наблюдается через 15 мин после внутрижелудочной инфузии жидкой пищи, тогда как продолжительное повышение PYY в плазме начинается через 15-30 мин после приема пищи (Edwards et al., 1999; Gerspach et al., 2011). Более долгое высвобождение GLP-1 связывали с захватом жира (van der Klaauw et al., 2013). Таким образом, динамика роста регулярно получающих питательные вещества кишечных бактерий совпадает по времени с динамикой высвобождения GLP-1 и PYY, что предполагает стимулирующую роль кишечных бактерий, и в частности, белков E.coli, в вызванном приемом пищи кишечном сигналинге, регулирующем чувство сытости. Отличающийся эффект белков E.coli, полученных в экспоненциальную фазу роста, на стимуляцию GLP-1, возможно, отражает роль пептидного гормона GLP-1 из семейства инкретинов в гликемическом контроле (Edwards et al., 1999; Steinert et al., 2014). Недавно показанная экспрессия функционального MC4R L-клетками (Panaro et al., 2014) дает основания предполагать их возможную активацию бактериальными белками, имитирующими α-MSH. Увеличенная продукция ClpB во время стационарной фазы роста E.coli, а также увеличенный уровень ClpB в слизистой оболочке кишечника, связанный с увеличенным уровнем PYY в плазме, предполагает непосредственную роль ClpB в активации PYY-продуцирующих L-клеток в толстом кишечнике. С другой стороны, поскольку не идентифицированные белки E.coli, возможно, активируются во время экспоненциальной фазы роста, стимуляция секреции GLP-1 может являться предпочтительной.
Системные эффекты белков E.coli на потребление пищи и регулирующие аппетит мозговые пути
Согласно настоящему изобретению, показано, что периферические инъекции белков E.coli крысам, не получавшим пищу, или крысам, имеющим свободный доступ к пище, а также мышам, имеющим свободный доступ к пище, меняют их потребление пищи в зависимости от фазы роста E.coli. Учитывая, что кишечное вливание питательных веществ не оказывало влияния на уровень ClpB в плазме, который был стабильна в течение короткого периода времени, системное действие бактериальных белков должно было бы объясняться их долгосрочным эффектом, модулирующим аппетит. Более того, из-за короткой продолжительности фазы экспоненциального роста бактериальные белки, которые активируется во время продолжительной стационарной фазы, должно доминировать в плазме, и таким образом, их системное введение может лучше отражать физиологическую картину. Концентрация белков E.coli 0,1 мг/кг, используемая в указанных экспериментах, была сходна с эффективными дозами вызывающих чувство насыщения пептидных гормонов, таких как лептин или PYY, после периферического введения у людей или грызунов (Batterham et al., 2002; Halaas et al., 1995; Heymsfield et al., 1999).
Наблюдали повышение потребления пищи в световую фазу при возобновлении кормления у крыс, не получавших еду, после введения цитоплазматических белков, полученных в экспоненциальную фазу роста, и снижение потребления пищи после введения мембранных белков, полученных в стационарную фазу роста. Данный эксперимент подтвердил тот факт, что различные белковые смеси, полученные от одной и той же бактерии, способны вызывать повышение или снижение потребления пищи в результате их системного действия. Однако в более физиологическом окружении при исследовании эффекта общих белков E.coli у крыс со свободным доступом к пище в темновую фазу, наблюдали только снижение потребления пищи, которое было вызвано белками стационарной фазы.
Результаты повторных инъекций у мышей со свободным доступом к пище также подтвердили роль белков E.coli в создании отрицательного энергетического баланса. В самом деле, первый день инъекций бактериального белка сопровождался снижением потребления пищи и массы тела, которые были значительными у мышей, получавших белки стационарной фазы, и которые также характеризовались относительным увеличением продолжительности чувства сытости. Несмотря на то что потребление пищи у указанных мышей после этого приходило в норму, прогрессирующее снижение объема порции пищи сопровождалось повышением частоты потребления пищи, наиболее вероятно в качестве компенсаторного механизма для поддержания потребления пищи (Meguid et al., 1998). Кроме того, различающиеся эффекты белков E.coli наблюдались во время световой и темновой фаз. Соответственно, паттерн экспрессии мРНК регулирующих аппетит нейропептидов в гипоталамусе показал смешанный ответ с активацией как анорексигенных, так и орехигенных путей. Следует отметить, что в обеих группах мышей, получавших белки E.coli, наблюдалось одинаковое повышение мРНК BDNF - участника анорексигенного пути, более позднего по отношению к MC4R в VMN (Xu et al., 2003). Указанный путь может лежать в основе снижения потребления пищи во время темновой фазы, наблюдаемой в обеих группах, которое была также выражено у мышей, которым вводили белки фазы экспоненциального роста, что указывает на более низкий уровень орексигенных QRFP (Chartrel et al., 2003) и NPY (Herzog, 2003). Напротив, у мышей, которые получали бактериальные белки стационарной фазы, наблюдался усиленный анорексигенный профиль с увеличенным уровнем мРНК CRH, наиболее вероятно задействующего МС4R-экспрессирующие нейроны PVN (Lu et al., 2003). Указанное изменение вместе с увеличенной экспрессией мРНК-предшественника орексина А, который стимулирует частоту приема пищи (Baird et al., 2009), может вносить вклад в снижение объема порции пищи и показатель чувства сытости соответственно у указанных мышей через 6 дней введения.
Авторы изобретения обнаружили у крыс со свободным доступом к пище увеличенную экспрессию c-fos в анорексигенных РОМС-нейронах ARC и VMN, которое давно известно как центр насыщения, взаимосвязанный с РОМС-нейронами ARC (Sternson et al., 2005), что согласуется с гипотезой авторов о том, что бактериальные белки, которые продуцируются во время стационарной фазы, могут активировать некоторые ключевые анорексигенные пути в центральной нервной системе. Полученный паттерн c-fos напоминает паттерн ответа, приводящего к насыщению, во время потребления пищи (Johnstone et al., 2006) или вызванного гормонами чувства сытости, такими как PYY или полипептид поджелудочной железы (Batterham et al., 2002; Challis et al., 2004; Lin et al., 2009). Относительно маленькое число (~10%) c-fos-активных РОМС-нейронов предполагает, что циркулирующие белки E.coli могут оказывать модулирующий эффект на аппетит и массу тела, действуя через этот гипоталамический путь. Несмотря на то что было невозможно определить активацию c-fos нейронами NPY/AgRP, их вклад в сигналинг бактериальными белками не может быть исключен; эти нейроны также экспрессируют MC3R и MC4R (Mounien et al., 2005). Кроме того, более сильная активациях c-fos в CGRP-нейронах СеА (~40%) по сравнению с РОМС-нейронами ARC может говорить о конвергентном действии на более поздних этапах РОМС и NPY/AgRP-нейронов ARC и, возможно, других регулирующих аппетит областей мозга, которые не были исследованы согласно настоящему изобретению, таких как ядро одиночного пучка.
Наконец, для того чтобы определить, может ли активация бактериальными белками регулирующих аппетит участков мозга, таких как РОМС-нейроны ARC, быть вызвана местным действием указанных белков, авторы исследовали способность ClpB при его нанесении на указанные нейроны активировать их электрическую активность. Результаты показали, что приблизительно у половины исследуемых нейронов повышалась частота потенциала действия, при этом указанные нейроны оставались активированными в течение по меньшей мере 10 мин. Продолжительный эффект ClpB соответствует эффекту α-MSH на РОМС-нейроны, экспрессирующие функционально активные рецепторы MC3R и MC4R (Smith et al., 2007). Указанные данные дают основание полагать, что ClpB может являться физиологическим активатором РОМС-нейронов гипоталамуса, отчасти сходным с вызывающими чувство насыщения пептидом PYY и лептином (Batterham et al., 2002; Cowley et al., 2001). Однако остается неизвестным, мог ли белок ClpB непосредственно активировать РОМС-нейроны, или он вызывал их активацию через локальную нейронную сеть.
В целом описанные данные подтверждают роль присутствующих в организме белков E.coli, экспрессия которых повышается в стационарной фазе роста, таких как ClpB, в обеспечении отрицательного энергетического баланса путем активации анорексигенных путей в головном мозге. Эти данные также дают основания полагать, что изменения в составе микробиоты, приводящие к снижению или повышению содержания E.coli и, возможно, других бактерий из семейства Enterobacteriaceae, могут влиять на энергетический баланс хозяина, делая его положительным или отрицательным соответственно.
ПРИМЕР 2
Самцов мышей линии C57Bl6 (Janvier Laboratories) возрастом один месяц содержали, как описано выше, и позволяли животным акклиматизироваться в условиях вивария в течение 1 недели. Мышей распределяли на 3 группы следующим образом: (i) животные, получающие 108 бактерий Е. coli K12 путем принудительного кормления; (ii) животные, получающие 108 бактерий Е. coli K12, дефицитных по ClpB, путем принудительного кормления; (iii) и контрольные животные, которые не получают какого-либо лечения. Штамм, содержащий мутацию в гене ClpB, был создан в лаборатории Бернда Букау (Bernd Bukau, ZMBH, Гейдельбергский университет, Гейдельберг, Германия) и был любезно предоставлен доктором Алексом Могком (Dr Axel Mogk) вместе с соответствующими бактериями Е. coli дикого типа (WT) 5. Мышей помещали по отдельности в клетки BioDAQ (Research Diets) и ежедневно проводили животным внутрижелудочное введение 0,5 мл среды LB, содержащей бактерии, до начала темновой фазы в течение 21 дня. Первые дни кормления сопровождались снижением массы тела и потребления пищи у мышей, получавших WT E.coli в отличие от животных, получающих бактерии, не экспрессирующие белок ClpB (Фигура 1).
ЦИТИРОВАННАЯ ЛИТЕРАТУРА
На всем протяжении настоящей заявки различные ссылки описывают состояние уровня техники, к которому относится настоящее изобретение. Раскрытие указанных ссылок, таким образом, включено в настоящее изобретение посредством ссылки.
Adrian, Т.Е., Ferri, G.L., Bacarese-Hamilton, A.J., Fuessl, H.S., Polak, J.M., and Bloom, S.R. (1985). Human distribution and release of a putative new gut hormone, peptide YY. Gastroenterology 89, 1070-1077.
Atasoy, D., Betley, J.N., Su, H.H., and Sternson, S.M. (2012). Deconstruction of a neural circuit for hunger. Nature 488, 172-177.
Baird, J.-P., Choe, A., Loveland, J.L., Beck, J., Mahoney, C.E., Lord, J.S., and Grigg, L.A. (2009). Orexin-A hyperphagia: hindbrain participation in consummatory feeding responses. Endocrinology 150, 1202-1216.
Batterham, R.L., Cowley, M.A., Small, C.J., Herzog, H., Cohen, M.A., Dakin, C.L., Wren, A.M., Brynes, A.E., Low, M.J., Ghatei, M.A., et al. (2002). Gut hormone PYY(3-36) physiologically inhibits food intake. Nature 418, 650-654.
Beglinger, C., and Degen, L. (2006). Gastrointestinal satiety signals in humans - Physiologic roles for GLP-1 and PYY? Physiology & Behavior 89, 460-464.
Berthoud, H.-R. (2011). Metabolic and hedonic drives in the neural control of appetite: who is the boss? Current Opinion in Neurobiology 21, 888-896.
Cani, P.D., Amar, J., Iglesias, M.A., Poggi, M., Knauf, C., Bastelica, D., Neyrinck, A.M., Fava, F., Tuohy, K.M., Chabo, C., et al. (2007). Metabolic endotoxemia initiates obesity and insulin resistance. Diabetes 56, 1761-1772.
Carter, M.E., Soden, M.E., Zweifel, L.S., and Palmiter, R.D. (2013). Genetic identification of a neural circuit that suppresses appetite. Nature 503, 111-114.
Challis, B.G., Coll, A.P., Yeo, G.S.H., Pinnock, S.B., Dickson, S.L., Thresher, R.R., Dixon, J., Zahn, D., Rochford, J.J., White, A., et al. (2004). Mice lacking pro-opiomelanocortin are sensitive to high-fat feeding but respond normally to the acute anorectic effects of peptide-YY3-36. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101, 4695-4700.
Chartrel, N., Dujardin, C., Anouar, Y., Leprince, J., Decker, A., Clerens, S., Do-Rego, J.C., Vandesande, F., Llorens-Cortes, C., Costentin, J., et al. (2003). Identification of 26RFa, a hypothalamic neuropeptide of the RFamide peptide family with orexigenic activity. Proc Natl Acad Sci USA 100, 15247-15252.
Cone, R.D. (2005). Anatomy and regulation of the central melanocortin system. Nat Neurosci 8, 571-578.
Cowley, M.A., Pronchuk, N., Fan, W., Dinulescu, D.M., Colmers, W.F., and Cone, R.D. (1999). Integration of NPY, AGRP, and melanocortin signals in the hypothalamic paraventricular nucleus: evidence of a cellular basis for the adipostat. Neuron 24, 155-163.
Cowley, M.A., Smart, J.L., Rubinstein, M., Cerdan, M.G., Diano, S., Horvath, T.L., Cone, R.D., and Low, M.J. (2001). Leptin activates anorexigenic POMC neurons through a neural network in the arcuate nucleus. Nature 411, 480-484.
Dinan, T.G., Stilling, R.M., Stanton, C., and Cryan, J.F. (2015). Collective unconscious: How gut microbes shape human behavior. Journal of Psychiatric Research 63, 1-9.
Dzamko, N.L., and Steinberg, G.R. (2009). AMPK-dependent hormonal regulation of whole-body energy metabolism. Acta Physiologica 196, 115-127.
Edwards, С.М., Todd, J.F., Mahmoudi, M., Wang, Z., Wang, R.M., Ghatei, M.A., and Bloom, S.R. (1999). Glucagon-like peptide 1 has a physiological role in the control of postprandial glucose in humans: studies with the antagonist exendin 9-39. Diabetes 48, 86-93.
Eissele, R., Goke, R., Willemer, S., Harthus, H.P., Vermeer, H., Arnold, R., and Goke, B. (1992). Glucagon-like peptide-1 cells in the gastrointestinal tract and pancreas of rat, pig and man. European journal of clinical investigation 22, 283-291.
Fetissov, S.O., and , P. (2011). The new link between gut-brain axis and neuropsychiatric disorders. Curr Opin Clin Nutr Metab Care 14, 477-482.
Fetissov, S.O., Hamze Sinno, M., , M., Bole-Feysot, C., , P., , Т., and , P. (2008). Autoantibodies against appetite-regulating peptide hormones and neuropeptides: putative modulation by gut microflora. Nutrition 24, 348-359.
Fioramonti, X., Contie, S., Song, Z., Routh, V.H., Lorsignol, A., and Penicaud, L. (2007). Characterization of glucosensing neuron subpopulations in the arcuate nucleus: integration in neuropeptide Y and pro-opio melanocortin networks? Diabetes 56, 1219-1227.
Flint, A., Raben, A., Astrup, A., and Hoist, J.J. (1998). Glucagon-like peptide 1 promotes satiety and suppresses energy intake in humans. The Journal of Clinical Investigation 707, 515-520.
Forsythe, P., and Kunze, W. (2013). Voices from within: gut microbes and the CNS. Cellular and Molecular Life Sciences 70, 55-69.
Foucault, M.-L., Thomas, L., Goussard, S., Branchini, B.R., and Grillot-Courvalin, C. (2009). In vivo bioluminescence imaging for the study of intestinal colonization by Escherichia coli in mice. Applied and Environmental Microbiology 76, 264-274.
Garfield, A.S., Li, C., Madara, J.C., Shah, B.P., Webber, E., Steger, J.S., Campbell, J.N., Gavrilova, O., Lee, C.E., Olson, D.P., et al. (2015). A neural basis for melanocortin-4 receptor-regulated appetite. Nat Neurosci doi: 10,1038/nn,4011.
Gerspach, A.C., Steinert, R.E., , L., Graber-Maier, A., and Beglinger, C. (2011). The role of the gut sweet taste receptor in regulating GLP-1, PYY, and CCK release in humans. Am J Physiol Endocrinol Metab 301, E317-E325.
Glasgow, I., Mattar, K., and Krantis, A. (1998). Rat gastroduodenal motility in vivo: involvement of NO and ATP in spontaneous motor activity. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol 275, G889-G896.
Goichon, A., , M., Claeyssens, S., Lecleire, S., Cailleux, A.-F., Bole-Feysot, C., Chan, P., Donnadieu, N., Lerebours, E., Lavoinne, A., et al. (2011). Effects of an enteral glucose supply on protein synthesis, proteolytic pathways, and proteome in human duodenal mucosa. The American Journal of Clinical Nutrition 94, 784-794.
Haange, S.B., Oberbach, A., Schlichting, N., Hugenholtz, F., Smidt, H., von Bergen, M., Till, H., and Seifert, J. (2012). Metaproteome analysis and molecular genetics of rat intestinal microbiota reveals section and localization resolved species distribution and enzymatic functionalities. J Proteome Res 11, 5406-5417.
Halaas, J.L., Gajiwala, K.S., Maffei, M., Cohen, S.L., Chait, B.T., Rabinowitz, D., Lallone, R.L., Burley, S.K., and Friedman, J.M. (1995). Weight-reducing effects of the plasma protein encoded by the obese gene. Science 269, 543-546.
Harte, A.L., Varma, M.C., Tripathi, G., McGee, K.C., Al-Daghri, N.M., Al-Attas, O.S., Sabico, S., , J.P., Ceriello, A., Saravanan, P., et al. (2012). High fat intake leads to acute postprandial exposure to circulating endotoxin in type 2 diabetic subjects. Diabetes Care 35, 375-382.
Herzog, H. (2003). Neuropeptide Y and energy homeostasis: insights from Y receptor knockout models. Eur J Pharmacol 480, 21-29.
Heymsfield, S.B., Greenberg, A.S., Fujioka, K., Dixon, R.M., Kushner, R., Hunt, Т., Lubina, J.A., Patane, J., Self, В., Hunt, P., et al. (1999). Recombinant leptin for weight loss in obese and lean adults: A randomized, controlled, dose-escalation trial. JAMA 282, 1568-1575.
Inui, A. (1999). Feeding and body-weight regulation by hypothalamic neuropeptides--mediation of the actions of leptin. Trends Neurosci 22, 62-67.
Johnstone, L.E., Fong, T.M., and Leng, G. (2006). Neuronal activation in the hypothalamus and brainstem during feeding in rats. Cell Metabolism 4, 313-321.
Ley, R.E., Turnbaugh, P.J., Klein, S., and Gordon, J.I. (2006). Microbial ecology: Human gut microbes associated with obesity. Nature 444, 1022-1023.
Lim, P.L., and Rowley, D. (1985). Intestinal absorption of bacterial antigens in normal adult mice. II. A comparative study of techniques. Int Arch Allergy Appl Immunol 76, 30-36.
Lin, S., Shi, Y.-C, Yulyaningsih, E., Aljanova, A., Zhang, L., Macia, L., Nguyen, A.D., Lin, E.-J.D., During, M.J., Herzog, H., et al. (2009). Critical role of arcuate Y4 receptors and the melanocortin system in pancreatic polypeptide-induced reduction in food intake in mice. PLoS One 4, e8488.
Lu, X.Y., Barsh, G.S., Akil, H., and Watson, S.J. (2003). Interaction between alpha-melanocyte-stimulating hormone and corticotropin-releasing hormone in the regulation of feeding and hypothalamo-pituitary-adrenal responses. J Neurosci 23, 7863-7872.
Manning, S., and Batterham, Rachel L. (2014). Enteroendocrine MC4R and energy balance: linking the long and the short of it. Cell Metabolism 20, 929-931.
Meguid, M.M., Laviano, A., and Rossi-Fanelli, F. (1998). Food intake equals meal size times mean number. Appetite 31, 404.
Mounien, L., Bizet, P., Boutelet, I., Vaudry, H., and , S. (2005). Expression of melanocortin MC3 and MC4 receptor mRNAs by neuropeptide Y neurons in the rat arcuate nucleus. Neuroendocrinology 82, 164-170.
Mul, J.D., Spruijt, B.M., Brakkee, J.H., and Adan, R.A.H. (2013). Melanocortin MC4 receptor-mediated feeding and grooming in rodents. European Journal of Pharmacology 719, 192-201.
Murphy, K.G., and Bloom, S.R. (2006). Gut hormones and the regulation of energy homeostasis. Nature 444, 854-859.
Neunlist, M., Van Landeghem, L., Mahe, M.M., Derkinderen, P., Bruley des Varannes, S.B., and Rolli-Derkinderen, M. (2012). The digestive neuronal-glial-epithelial unit: a new actor in gut health and disease. Nat Rev Gastroenterol Hepatol 10, 90-100.
Panaro, B.L., Tough, I.R., Engelstoft, M.S., Matthews, R.T., Digby, G.J., Moller, C.L., Svendsen, В., Gribble, F., Reimann, F., Hoist, J.J., et al. (2014). The melanocortin-4 receptor is expressed in enteroendocrine L cells and regulates the release of peptide YY and glucagon-like peptide 1 in vivo. Cell Metab 20, 1018-1029.
Parks, B.W., Nam, E., Org, E., Kostem, E., Norheim, F., Hui, S.T., Pan, C., Civelek, M., Rau, C.D., Bennett, B.J., et al. (2013). Genetic control of obesity and gut microbiota composition in response to high-fat, high-sucrose diet in mice. Cell Metabolism 17, 141-152.
Power, M.L., and Schulkin, J. (2008). Anticipatory physiological regulation in feeding biology: Cephalic phase responses. Appetite 50, 194-206.
Rice, K.C, and Bayles, K.W. (2008). Molecular control of bacterial death and lysis. Microbiology and Molecular Biology Reviews 72, 85-109.
Sharon, G., Garg, N., Debelius, J., Knight, R., Dorrestein, Pieter C., and Mazmanian, Sarkis K. (2014). Specialized metabolites from the microbiome in health and disease. Cell Metabolism 20, 719-730.
Shi, Y.-C, Lau, J., Lin, Z., Zhang, H., Zhai, L., Sperk, G., Heilbronn, R., Mietzsch, M., Weger, S., Huang, X.-F., et al. (2013). Arcuate NPY controls sympathetic output and BAT function via a relay of tyrosine hydroxylase neurons in the PVN. Cell Metabolism 17, 236-248.
Smith, M.A., Hisadome, K., Al-Qassab, H., Heffron, H., Withers, D.J., and Ashford, M.L. (2007). Melanocortins and agouti-related protein modulate the excitability of two arcuate nucleus neuron populations by alteration of resting potassium conductances. J Physiol 578, 425-438.
Steinert, R.E., Schirra, J., Meyer-Gerspach, A.C, Kienle, P., Fischer, H., Schulte, F., Goeke, В., and Beglinger, С. (2014). Effect of glucagon-like peptide-1 receptor antagonism on appetite and food intake in healthy men. The American Journal of Clinical Nutrition 100, 514-523.
Sternson, S.M., Shepherd, G.M.G., and Friedman, J.M. (2005). Topographic mapping of VMH - arcuate nucleus microcircuits and their reorganization by fasting. Nat Neurosci 8, 1356-1363.
Takagi, K., Legrand, R., Asakawa, A., Amitani, H., , M., Tennoune, N., , M., Claeyssens, S., do Rego, J.-C., , P., et al. (2013). Anti-ghrelin immunoglobulins modulate ghrelin stability and its orexigenic effect in obese mice and humans. Nat Commun 4:2685.
Tennoune, N., Chan, P., Breton, J., Legrand, R., Chabane, Y.N., Akkermann, K., Jarv, A., Ouelaa, W., Takagi, K., Ghouzali, I., et al. (2014). Bacterial ClpB heat-shock protein, an antigen-mimetic of the anorexigenic peptide [alpha]-MSH, at the origin of eating disorders. Transl Psychiatry 4, e458.
Tennoune, N., Legrand, R., Ouelaa, W., Breton, J., Lucas, N., Bole-Feysot, C., Rego, J.-C.d., , P., and Fetissov, S.O. (2015). Sex-related effects of nutritional supplementation of Escherichia coli: Relevance to eating disorders. Nutrition 31, 498-507.
Turnbaugh, P.J., Ley, R.E., Mahowald, M.A., Magrini, V., Mardis, E.R., and Gordon, J.I. (2006). An obesity-associated gut microbiome with increased capacity for energy harvest. Nature 444, 1027-1131.
van der Klaauw, A.A., Keogh, J.M., Henning, E., Trowse, V.M., Dhillo, W.S., Ghatei, M.A., and Farooqi, I.S. (2013). High protein intake stimulates postprandial GLP1 and PYY release. Obesity 21, 1602-1607.
Vijay-Kumar, M., Aitken, J.D., Carvalho, F.A., Cullender, T.C., Mwangi, S., Srinivasan, S., Sitaraman, S.V., Knight, R., Ley, R.E., and Gewirtz, A.T. (2010). Metabolic syndrome and altered gut microbiota in mice lacking toll-like receptor 5. Science 328, 228-231.
Wick, L.M., Quadroni, M., and Egli, T. (2001). Short- and long-term changes in proteome composition and kinetic properties in a culture of Escherichia coli during transition from glucose-excess to glucose-limited growth conditions in continuous culture and vice versa. Environ Microbiol 3, 588-599.
Xu, В., Goulding, E.H., Zang, K., Cepoi, D., Cone, R.D., Jones, K.R., Tecott, L.H., and Reichardt, L.F. (2003). Brain-derived neurotrophic factor regulates energy balance downstream of melanocortin-4 receptor. Nat Neurosci 6, 736-742.
Yun, A.J., Lee, P. Y., Doux, J.D., and Conley, B.R. (2006). A general theory of evolution based on energy efficiency: its implications for diseases. Medical Hypotheses 66, 664-670.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110> Inserm
<120> ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ И ПИЩЕВЫЕ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ИНДУЦИКЦИИ НАСЫЩЕНИЯ И ПРОДЛЕНИЯ
ЧУВСТВА СЫТОСТИ У НУЖДАЮЩИХСЯ В ЭТОМ СУБЪЕКТОВ
<130> CDM - 692/PCT
<160> 2
<170> PatentIn версия 3.5
<210> 1
<211> 857
<212> БЕЛОК
<213> Escherichia coli
<400> 1
Met Arg Leu Asp Arg Leu Thr Asn Lys Phe Gln Leu Ala Leu Ala Asp
1 5 10 15
Ala Gln Ser Leu Ala Leu Gly His Asp Asn Gln Phe Ile Glu Pro Leu
20 25 30
His Leu Met Ser Ala Leu Leu Asn Gln Glu Gly Gly Ser Val Ser Pro
35 40 45
Leu Leu Thr Ser Ala Gly Ile Asn Ala Gly Gln Leu Arg Thr Asp Ile
50 55 60
Asn Gln Ala Leu Asn Arg Leu Pro Gln Val Glu Gly Thr Gly Gly Asp
65 70 75 80
Val Gln Pro Ser Gln Asp Leu Val Arg Val Leu Asn Leu Cys Asp Lys
85 90 95
Leu Ala Gln Lys Arg Gly Asp Asn Phe Ile Ser Ser Glu Leu Phe Val
100 105 110
Leu Ala Ala Leu Glu Ser Arg Gly Thr Leu Ala Asp Ile Leu Lys Ala
115 120 125
Ala Gly Ala Thr Thr Ala Asn Ile Thr Gln Ala Ile Glu Gln Met Arg
130 135 140
Gly Gly Glu Ser Val Asn Asp Gln Gly Ala Glu Asp Gln Arg Gln Ala
145 150 155 160
Leu Lys Lys Tyr Thr Ile Asp Leu Thr Glu Arg Ala Glu Gln Gly Lys
165 170 175
Leu Asp Pro Val Ile Gly Arg Asp Glu Glu Ile Arg Arg Thr Ile Gln
180 185 190
Val Leu Gln Arg Arg Thr Lys Asn Asn Pro Val Leu Ile Gly Glu Pro
195 200 205
Gly Val Gly Lys Thr Ala Ile Val Glu Gly Leu Ala Gln Arg Ile Ile
210 215 220
Asn Gly Glu Val Pro Glu Gly Leu Lys Gly Arg Arg Val Leu Ala Leu
225 230 235 240
Asp Met Gly Ala Leu Val Ala Gly Ala Lys Tyr Arg Gly Glu Phe Glu
245 250 255
Glu Arg Leu Lys Gly Val Leu Asn Asp Leu Ala Lys Gln Glu Gly Asn
260 265 270
Val Ile Leu Phe Ile Asp Glu Leu His Thr Met Val Gly Ala Gly Lys
275 280 285
Ala Asp Gly Ala Met Asp Ala Gly Asn Met Leu Lys Pro Ala Leu Ala
290 295 300
Arg Gly Glu Leu His Cys Val Gly Ala Thr Thr Leu Asp Glu Tyr Arg
305 310 315 320
Gln Tyr Ile Glu Lys Asp Ala Ala Leu Glu Arg Arg Phe Gln Lys Val
325 330 335
Phe Val Ala Glu Pro Ser Val Glu Asp Thr Ile Ala Ile Leu Arg Gly
340 345 350
Leu Lys Glu Arg Tyr Glu Leu His His His Val Gln Ile Thr Asp Pro
355 360 365
Ala Ile Val Ala Ala Ala Thr Leu Ser His Arg Tyr Ile Ala Asp Arg
370 375 380
Gln Leu Pro Asp Lys Ala Ile Asp Leu Ile Asp Glu Ala Ala Ser Ser
385 390 395 400
Ile Arg Met Gln Ile Asp Ser Lys Pro Glu Glu Leu Asp Arg Leu Asp
405 410 415
Arg Arg Ile Ile Gln Leu Lys Leu Glu Gln Gln Ala Leu Met Lys Glu
420 425 430
Ser Asp Glu Ala Ser Lys Lys Arg Leu Asp Met Leu Asn Glu Glu Leu
435 440 445
Ser Asp Lys Glu Arg Gln Tyr Ser Glu Leu Glu Glu Glu Trp Lys Ala
450 455 460
Glu Lys Ala Ser Leu Ser Gly Thr Gln Thr Ile Lys Ala Glu Leu Glu
465 470 475 480
Gln Ala Lys Ile Ala Ile Glu Gln Ala Arg Arg Val Gly Asp Leu Ala
485 490 495
Arg Met Ser Glu Leu Gln Tyr Gly Lys Ile Pro Glu Leu Glu Lys Gln
500 505 510
Leu Glu Ala Ala Thr Gln Leu Glu Gly Lys Thr Met Arg Leu Leu Arg
515 520 525
Asn Lys Val Thr Asp Ala Glu Ile Ala Glu Val Leu Ala Arg Trp Thr
530 535 540
Gly Ile Pro Val Ser Arg Met Met Glu Ser Glu Arg Glu Lys Leu Leu
545 550 555 560
Arg Met Glu Gln Glu Leu His His Arg Val Ile Gly Gln Asn Glu Ala
565 570 575
Val Asp Ala Val Ser Asn Ala Ile Arg Arg Ser Arg Ala Gly Leu Ala
580 585 590
Asp Pro Asn Arg Pro Ile Gly Ser Phe Leu Phe Leu Gly Pro Thr Gly
595 600 605
Val Gly Lys Thr Glu Leu Cys Lys Ala Leu Ala Asn Phe Met Phe Asp
610 615 620
Ser Asp Glu Ala Met Val Arg Ile Asp Met Ser Glu Phe Met Glu Lys
625 630 635 640
His Ser Val Ser Arg Leu Val Gly Ala Pro Pro Gly Tyr Val Gly Tyr
645 650 655
Glu Glu Gly Gly Tyr Leu Thr Glu Ala Val Arg Arg Arg Pro Tyr Ser
660 665 670
Val Ile Leu Leu Asp Glu Val Glu Lys Ala His Pro Asp Val Phe Asn
675 680 685
Ile Leu Leu Gln Val Leu Asp Asp Gly Arg Leu Thr Asp Gly Gln Gly
690 695 700
Arg Thr Val Asp Phe Arg Asn Thr Val Val Ile Met Thr Ser Asn Leu
705 710 715 720
Gly Ser Asp Leu Ile Gln Glu Arg Phe Gly Glu Leu Asp Tyr Ala His
725 730 735
Met Lys Glu Leu Val Leu Gly Val Val Ser His Asn Phe Arg Pro Glu
740 745 750
Phe Ile Asn Arg Ile Asp Glu Val Val Val Phe His Pro Leu Gly Glu
755 760 765
Gln His Ile Ala Ser Ile Ala Gln Ile Gln Leu Lys Arg Leu Tyr Lys
770 775 780
Arg Leu Glu Glu Arg Gly Tyr Glu Ile His Ile Ser Asp Glu Ala Leu
785 790 795 800
Lys Leu Leu Ser Glu Asn Gly Tyr Asp Pro Val Tyr Gly Ala Arg Pro
805 810 815
Leu Lys Arg Ala Ile Gln Gln Gln Ile Glu Asn Pro Leu Ala Gln Gln
820 825 830
Ile Leu Ser Gly Glu Leu Val Pro Gly Lys Val Ile Arg Leu Glu Val
835 840 845
Asn Glu Asp Arg Ile Val Ala Val Gln
850 855
<210> 2
<211> 13
<212> БЕЛОК
<213> Homo sapiens
<400> 2
Ser Tyr Ser Met Glu His Phe Arg Trp Gly Lys Pro Val
1 5 10
<---
Claims (44)
1. Способ индукции насыщения у нуждающегося в этом субъекта, включающий пероральное введение указанному субъекту эффективного количества бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, который содержит последовательность ARWTGIPVSR.
2. Способ пролонгирования чувства сытости у нуждающегося в этом субъекта, включающий пероральное введение указанному субъекту эффективного количества бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, который содержит последовательность ARWTGIPVSR.
3. Способ снижения потребления пищи у нуждающегося в этом субъекта, включающий пероральное введение указанному субъекту эффективного количества бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, который содержит последовательность ARWTGIPVSR.
4. Способ снижения увеличения массы тела у нуждающегося в этом субъекта, включающий пероральное введение указанному субъекту эффективного количества бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, который содержит последовательность ARWTGIPVSR.
5. Способ стимуляции уменьшения массы тела у нуждающегося в этом субъекта, включающий пероральное введение указанному субъекту эффективного количества бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, который содержит последовательность ARWTGIPVSR.
6. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанный субъект представляет собой человека, домашнее животное или сельскохозяйственное животное.
7. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанный субъект представляет собой особь мужского пола или особь женского пола.
8. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанный субъект не страдает ожирением.
9. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанный субъект страдает ожирением.
10. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что индекс массы тела (ИМТ) указанного субъекта находится в интервале от 18,5 и до 30.
11. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанный белок ClpB содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 80% идентичную последовательности SEQ ID NO:1.
12. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанный белок ClpB содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 95, 96, 97, 98, 99 или 100 % идентичную последовательности SEQ ID NO:1.
13. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанную бактерию, которая экспрессирует белок ClpB, вводят указанному субъекту в виде фармацевтической композиции.
14. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанную бактерию, которая экспрессирует белок ClpB, вводят указанному субъекту в виде пищевой композиции.
15. Способ по п. 13, отличающийся тем, что указанную фармацевтическую композицию вводят указанному субъекту в виде единичной формы для введения, выбранной из группы, состоящей из форм, вводимых пероральным путем, таких как таблетки, желатиновые капсулы, порошки, гранулы и суспензии или растворы для перорального введения, форм для сублингвального или буккального введения.
16. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что указанная бактерия, которая экспрессирует белок ClpB, представляет собой пробиотический штамм бактерий.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий выбран из пищевых бактерий.
18. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий представляет собой природный штамм бактерий или штамм бактерий, полученный путем генной инженерии.
19. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий представляет собой бактерию, которую подвергали условиям стресса, приводящим к увеличению экспрессии белка ClpB в указанной бактерии.
20. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий представляет собой бактерию, которую снабжали питательными веществами по меньшей мере 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 раз.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что указанная бактерия выделена на стадии стационарной фазы роста, которая следует за указанным повторяемым снабжением питательными веществами.
22. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий содержит по меньшей мере одну точечную мутацию, приводящую к увеличению экспрессии белка ClpB.
23. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий представляет собой бактерию, сконструированную путем генной инженерии для экспрессии белка ClpB.
24. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий представляет собой штамм E. coli.
25. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий инкапсулируют для защиты от среды желудка.
26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий инкапсулируют в капсулы или таблетки с кишечнорастворимым покрытием с контролируемым по времени высвобождением.
27. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий вводят в виде пищевой композиции.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция, которая содержит указанный пробиотический штамм бактерий, выбрана из полноценных пищевых композиций, пищевых добавок, нутрицевтических композиций и т.п.
29. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанный пробиотический штамм бактерий используют в качестве пищевого или кормового ингредиента в указанной пищевой композиции.
30. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция представляет собой жидкую, твердую или полутвердую пищевую композицию.
31. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция представляет собой кисломолочный продукт.
32. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция представляет собой функциональный пищевой продукт.
33. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция представляет собой напиток.
34. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция представляет собой заменитель пищевого продукта.
35. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция содержит некоторое количество пищевых волокон.
36. Способ по п. 35, отличающийся тем, что указанное пищевое волокно выбрано из группы, состоящей из сои, гороха, овса, пектина, гуаровой камеди, гуммиарабика, фруктоолигосахаридов, галакто-олигосахаридов, сиалиллактозы и олигосахаридов, полученных из молока животных.
37. Способ по п. 35, отличающийся тем, что указанное пищевое волокно выбрано из маннанов, таких как глюкоманнаны.
38. Способ по п. 37, отличающийся тем, что указанное пищевое волокно выбрано из маннанов, таких как глюкоманнаны Amorphophallus konjac.
39. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанная пищевая композиция содержит по меньшей мере один пребиотик.
40. Способ по п. 39, отличающийся тем, что указанный пребиотик выбран из группы, состоящей из олигосахаридов, и необязательно содержит фруктозу, галактозу, маннозу, сою, и/или инулин, и/или пищевые волокна.
41. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что введение бактерии, которая экспрессирует белок ClpB, повторяют от 2 до 3 раз в день, в течение одного дня или более.
42. Способ по п. 41, отличающийся тем, что указанное введение осуществляют в течение продолжительного периода, составляющего по меньшей мере 4 дня, или даже от 4 до 15 недель, или от 1 до 3 месяцев, от 1 до 3 лет, или постоянно.
43. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что бактерию, которая экспрессирует белок ClpB, вводят одновременно или последовательно с одним приемом пищи указанным субъектом.
44. Способ по пп. 1-4 или 5, отличающийся тем, что бактерию, которая экспрессирует белок ClpB, вводят до приема пищи указанным субъектом.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP14306552 | 2014-10-02 | ||
EP14306552.2 | 2014-10-02 | ||
PCT/IB2015/001126 WO2016059455A1 (en) | 2014-10-02 | 2015-06-05 | Pharmaceutical and food compositions for inducing satiation and prolonging satiety in subjects in need thereof |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2017110516A3 RU2017110516A3 (ru) | 2018-11-05 |
RU2017110516A RU2017110516A (ru) | 2018-11-05 |
RU2717018C2 true RU2717018C2 (ru) | 2020-03-17 |
Family
ID=51799054
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017110516A RU2717018C2 (ru) | 2014-10-02 | 2015-06-05 | Фармацевтические и пищевые композиции для индукции насыщения и продления чувства сытости у нуждающихся в этом субъектов |
RU2017142932A RU2017142932A (ru) | 2014-10-02 | 2016-04-05 | Фармацевтические и пищевые композиции для индуцирования насыщения и продления сытости у нуждающихся в этом субъектов |
RU2018138995A RU2766585C2 (ru) | 2014-10-02 | 2017-04-05 | Способы индуцирования и пролонгирования насыщения, уменьшения объёма и поглощения пищи, контроля веса и стимулирования снижения веса |
Family Applications After (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2017142932A RU2017142932A (ru) | 2014-10-02 | 2016-04-05 | Фармацевтические и пищевые композиции для индуцирования насыщения и продления сытости у нуждающихся в этом субъектов |
RU2018138995A RU2766585C2 (ru) | 2014-10-02 | 2017-04-05 | Способы индуцирования и пролонгирования насыщения, уменьшения объёма и поглощения пищи, контроля веса и стимулирования снижения веса |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US20170252399A1 (ru) |
EP (2) | EP3200814B1 (ru) |
JP (3) | JP6855372B2 (ru) |
KR (3) | KR20170066543A (ru) |
CN (2) | CN106999545B (ru) |
AU (2) | AU2015332168B2 (ru) |
BR (2) | BR112017006770A2 (ru) |
CA (2) | CA2962907C (ru) |
ES (3) | ES2928379T3 (ru) |
HK (1) | HK1252744A1 (ru) |
IL (1) | IL256136B (ru) |
MX (3) | MX2017004317A (ru) |
PT (1) | PT3439684T (ru) |
RU (3) | RU2717018C2 (ru) |
WO (2) | WO2016059455A1 (ru) |
Families Citing this family (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2016193829A1 (en) * | 2015-06-05 | 2016-12-08 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Pharmaceutical and food compositions for inducing satiation and prolonging satiety in subjects in need thereof. |
US10729770B2 (en) | 2013-12-05 | 2020-08-04 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Bacterial influence on regulation of appetite via ClpB protein mimicry of alpha-MSH |
RU2717018C2 (ru) * | 2014-10-02 | 2020-03-17 | Инсерм (Энститю Насьональ Де Ля Сантэ Э Де Ля Решерш Медикаль) | Фармацевтические и пищевые композиции для индукции насыщения и продления чувства сытости у нуждающихся в этом субъектов |
EP3384922A1 (en) | 2017-04-03 | 2018-10-10 | Targedys | Brassicaceae protein extract and uses thereof |
FR3076981B1 (fr) * | 2018-01-19 | 2020-01-31 | Zhivko Radev | Methode de fabrication de produits alimentaires a base de yaourt |
CN108715851B (zh) * | 2018-04-28 | 2023-05-16 | 中山大学 | 一种斜带石斑鱼摄食调控相关基因AgRP1及其应用 |
US20210401020A1 (en) * | 2018-11-28 | 2021-12-30 | Targedys | Hafnia alvei formulations |
ES2935711T3 (es) * | 2018-11-28 | 2023-03-09 | Targedys | Composiciones de Hafnia Alvei que comprenden elementos minerales |
EP3841890A4 (en) * | 2019-05-22 | 2021-12-29 | Mizkan Holdings Co., Ltd. | Insoluble dietary fiber-containing solid composition and method for manufacturing same |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1997003359A1 (en) * | 1995-07-07 | 1997-01-30 | Oravax, Inc. | Helicobacter clpb |
US6716810B1 (en) * | 1998-12-09 | 2004-04-06 | Eleanor Roosevelt Institute | Composition and method for regulation of body weight and associated conditions |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE69941212D1 (de) | 1998-03-23 | 2009-09-17 | Gen Mills Inc | Verkapselung von komponenten in essbaren produkten |
PL1981516T3 (pl) * | 2006-01-27 | 2019-03-29 | Dupont Nutrition Biosciences Aps | Zastosowanie mikroorganizmów probiotycznych w leczeniu i zapobieganiu otyłości i pokrewnym zaburzeniom |
JP2009534034A (ja) * | 2006-04-19 | 2009-09-24 | ノヴォ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 原核微生物におけるo−グリコシル化治療用タンパク質の発現 |
EP2030623A1 (en) * | 2007-08-17 | 2009-03-04 | Nestec S.A. | Preventing and/or treating metabolic disorders by modulating the amount of enterobacteria |
EP2053122A1 (en) * | 2007-10-23 | 2009-04-29 | Nestec S.A. | Stress tolerant bifidobacteria |
US9173910B2 (en) * | 2012-02-29 | 2015-11-03 | The General Hospital Corporation | Compositions of microbiota and methods related thereto |
WO2016193829A1 (en) * | 2015-06-05 | 2016-12-08 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Pharmaceutical and food compositions for inducing satiation and prolonging satiety in subjects in need thereof. |
US10729770B2 (en) * | 2013-12-05 | 2020-08-04 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Bacterial influence on regulation of appetite via ClpB protein mimicry of alpha-MSH |
WO2015082655A1 (en) * | 2013-12-05 | 2015-06-11 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Bacterial influence of host feeding and emotion via clpb protein mimicry of a-msh |
WO2015082633A1 (en) * | 2013-12-05 | 2015-06-11 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Bacterial influence on regulation of appetite via clpb protein mimicry of alpha-msh |
RU2717018C2 (ru) * | 2014-10-02 | 2020-03-17 | Инсерм (Энститю Насьональ Де Ля Сантэ Э Де Ля Решерш Медикаль) | Фармацевтические и пищевые композиции для индукции насыщения и продления чувства сытости у нуждающихся в этом субъектов |
-
2015
- 2015-06-05 RU RU2017110516A patent/RU2717018C2/ru active
- 2015-06-05 BR BR112017006770-6A patent/BR112017006770A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2015-06-05 ES ES20191957T patent/ES2928379T3/es active Active
- 2015-06-05 WO PCT/IB2015/001126 patent/WO2016059455A1/en active Application Filing
- 2015-06-05 US US15/516,040 patent/US20170252399A1/en not_active Abandoned
- 2015-06-05 CN CN201580062185.1A patent/CN106999545B/zh active Active
- 2015-06-05 JP JP2017517358A patent/JP6855372B2/ja active Active
- 2015-06-05 EP EP15775784.0A patent/EP3200814B1/en active Active
- 2015-06-05 CA CA2962907A patent/CA2962907C/en active Active
- 2015-06-05 KR KR1020177011994A patent/KR20170066543A/ko not_active Application Discontinuation
- 2015-06-05 AU AU2015332168A patent/AU2015332168B2/en active Active
- 2015-06-05 MX MX2017004317A patent/MX2017004317A/es unknown
- 2015-06-05 EP EP20191957.8A patent/EP3769777B9/en active Active
- 2015-06-05 ES ES15775784T patent/ES2828952T3/es active Active
-
2016
- 2016-04-05 BR BR112017026241-0A patent/BR112017026241A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2016-04-05 AU AU2016272850A patent/AU2016272850A1/en not_active Abandoned
- 2016-04-05 MX MX2017015702A patent/MX2017015702A/es unknown
- 2016-04-05 JP JP2017563130A patent/JP6876627B2/ja active Active
- 2016-04-05 RU RU2017142932A patent/RU2017142932A/ru not_active Application Discontinuation
- 2016-04-05 KR KR1020187000213A patent/KR20180011841A/ko unknown
-
2017
- 2017-04-05 JP JP2019503629A patent/JP6987122B2/ja active Active
- 2017-04-05 US US16/091,678 patent/US10888592B2/en active Active
- 2017-04-05 CA CA3020050A patent/CA3020050A1/en active Pending
- 2017-04-05 WO PCT/EP2017/058116 patent/WO2017174658A1/en active Application Filing
- 2017-04-05 CN CN201780022494.5A patent/CN109310736B/zh active Active
- 2017-04-05 MX MX2018012056A patent/MX2018012056A/es unknown
- 2017-04-05 RU RU2018138995A patent/RU2766585C2/ru active
- 2017-04-05 PT PT177161817T patent/PT3439684T/pt unknown
- 2017-04-05 KR KR1020187031721A patent/KR102472169B1/ko active IP Right Grant
- 2017-04-05 ES ES17716181T patent/ES2808939T3/es active Active
- 2017-12-05 IL IL256136A patent/IL256136B/en active IP Right Grant
-
2018
- 2018-09-19 HK HK18112063.7A patent/HK1252744A1/zh unknown
-
2020
- 2020-06-08 US US16/895,460 patent/US11389489B2/en active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1997003359A1 (en) * | 1995-07-07 | 1997-01-30 | Oravax, Inc. | Helicobacter clpb |
US6716810B1 (en) * | 1998-12-09 | 2004-04-06 | Eleanor Roosevelt Institute | Composition and method for regulation of body weight and associated conditions |
Non-Patent Citations (8)
Title |
---|
FETISSOV S.O. ET AL. Autoantibodies against appetite-regulating peptide hormones and neuropeptides: Putative modulation by gut microflora // Nutrition 24 (2008) 348-359. * |
FETISSOV S.O. ET AL. Autoantibodies against appetite-regulating peptide hormones and neuropeptides: Putative modulation by gut microflora // Nutrition 24 (2008) 348-359. FETISSOV S.O. ET AL. Autoantibodies against neuropeptides are associated with psychological traits in eating disorders // PNAS, October 11, 2005, vol. 102, no. 41, pp.14865-14870. ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том II: Социально-экологические и клинические последствия дисбаланса микробной экологии человека и животных. - М.: Издательство ГРАНТЪ, 1998, с. 127-130. * |
FETISSOV S.O. ET AL. Autoantibodies against neuropeptides are associated with psychological traits in eating disorders // PNAS, October 11, 2005, vol. 102, no. 41, pp.14865-14870. * |
HELLSTROM P.M. ET AL. DIGESTIVO Interactions between gastric emptying and satiety, with special reference to glucagon-like peptide-1. Physiology & Behavior 74 (2001) 735-741 * |
OLSZEWSKI P.K. ET AL.Role of a-MSH in the regulation of consummatory behavior: immunohistochemical evidence. AJP-Regulatory Integrative Comp Physiol, Аugust 2001, vol. 281: R673-R680 * |
TENNOUNE N. Validation du concept du mimetisme moleculaire entre les proteines d'E. Coli K12 et l'α-MSH. These de doctorate en Biologie. Sous la direction de Serguei Fetissov. Sountenue en 2013. Найдено онлайн: https://www.theses.fr/2013ROUES043. * |
TENNOUNE N. Validation du concept du mimetisme moleculaire entre les proteines d'E. Coli K12 et l'α-MSH. These de doctorate en Biologie. Sous la direction de Serguei Fetissov. Sountenue en 2013. Найдено онлайн: https://www.theses.fr/2013ROUES043. HELLSTROM P.M. ET AL. DIGESTIVO Interactions between gastric emptying and satiety, with special reference to glucagon-like peptide-1. Physiology & Behavior 74 (2001) 735-741. OLSZEWSKI P.K. ET AL.Role of a-MSH in the regulation of consummatory behavior: immunohistochemical evidence. AJP-Regulatory Integrative Comp Physiol, Аugust 2001, vol. 281: R673-R680. * |
ШЕНДЕРОВ Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том II: Социально-экологические и клинические последствия дисбаланса микробной экологии человека и животных. - М.: Издательство ГРАНТЪ, 1998, с. 127-130. * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11389489B2 (en) | Pharmaceutical and food compositions for inducing satiation and prolonging satiety in subjects in need thereof | |
US10682389B2 (en) | Pharmaceutical and food compositions for inducing satiation and prolonging satiety in subjects in need thereof | |
JP2018521982A5 (ru) | ||
JP2018503597A5 (ru) | ||
EP3439684B1 (en) | Hafnia alvei based pharmaceutical and food compositions for inducing satiation and prolonging satiety | |
JP2020015757A (ja) | その必要がある対象の飽食を誘導し、満腹を延長させる医薬組成物および食品組成物 |