RU2702011C1 - Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний - Google Patents
Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний Download PDFInfo
- Publication number
- RU2702011C1 RU2702011C1 RU2018141468A RU2018141468A RU2702011C1 RU 2702011 C1 RU2702011 C1 RU 2702011C1 RU 2018141468 A RU2018141468 A RU 2018141468A RU 2018141468 A RU2018141468 A RU 2018141468A RU 2702011 C1 RU2702011 C1 RU 2702011C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibodies
- allergic
- antigens
- autoimmune
- infectious
- Prior art date
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и позволяет проводить диагностику инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний. Для этого проводят иммуноферментный анализ жидких биологических сред, содержащих циркулирующие иммунные комплексы, состоящие из антигенов и связанных с ними антител. Перед иммуноферментным анализом дополнительно проводят воздействие ультразвука на жидкую биологическую среду в течение 3-10 минут, частотой 22 кГц, мощностью 400 Вт при температуре 25-38°С, при воздействии которого происходит высвобождение свободных антигенов и антител без нарушения их биологической активности. Изобретение позволяет решать проблему ранней диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний. 1 табл.
Description
Изобретение относится к медицине и может быть применено в области клинической лабораторной диагностики.
Предлагается способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний путем обработки жидких биологических сред воздействием энергии акустического поля ультразвука с целью кавитационной дезинтеграции иммунных комплексов, для получения свободных антител и антигенов, которые в дальнейшем используются для проведения иммуноферментного анализа (далее - ИФА).
Известен способ раннего выявления специфических антигенов и антител с помощью ИФА (патент РФ на изобретение №2185629, опубл. 20.07.2002). Способ обеспечивает повышение точности диагностики ранних поражений нервной системы при туберкулезе, а именно определяют антитела к основному белку миелина в сыворотке крови с помощью ИФА по оптической плотности и при их содержании больше 0,199 оптических единиц, диагностируя туберкулезное поражение нервной системы на ранних стадиях.
Ранняя диагностика, например ВИЧ-инфекции, одинаково важна как для здоровья зараженного пациента, так и для всего общества. Чем раньше будет определен ВИЧ-статус пациента, тем более эффективной может быть терапия, тем раньше можно будет ограничить дальнейшее распространение инфекции.
В настоящее время для клинической лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции, широко используются различные способы обнаружения ВИЧ, основанные на выявлении антигенов вируса и антител к ВИЧ, а также генетического материала вируса иммунодефицита. Все эти способы обладают различной эффективностью, требуют различного оборудования и разного уровня профессиональной подготовки персонала, а результаты исследований - грамотной интерпретации.
Наиболее близким по своей технической сущности к предполагаемому изобретению, выбранный в качестве прототипа, является способ диагностика ВИЧ-инфекции с помощью обнаружения антигенов и антител к ВИЧ-инфекции методом ИФА (Руководство для врачей «Вирус Иммунодефицита Человека - медицина», Н.А. Беляков, А.Г. Рахманов и др. Санкт-Петербург, 2011 г.).
Этот способ включает:
- этап иммунной реакции: получение иммунохимического комплекса в результате поэтапного или одномоментного добавления иммунных реагентов, один из которых содержит ферментную метку;
- этап промывки, целью которой является удаление не связавшихся компонентов;
- этап проведения ферментативной реакции за счет добавления субстрата (или субстрата и хромогена) с последующим внесением стоп-реагента для остановки реакции;
- этап учета и интерпретации результатов анализа.
При обследовании пациента на ВИЧ-инфекцию методом ИФА возможно получение ложноотрицательных результатов. Это может иметь место в период «серологического окна», когда инфицирование произошло относительно недавно, уровень антител в крови пациента еще очень низкий и чувствительность тест-систем недостаточна для их выявления. Ложноотрицательные результаты могут наблюдаться и в терминальной стадии болезни, характеризующейся тяжелым поражением иммунной системы с глубоким нарушением процесса образования антител.
Недостатком этого способа является то, что ИФА выявляет свободные антитела и антигены, находящиеся в жидкой биологической среде, но циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК), состоящие из связанных между собой антигенов и антител в результате этого анализа не выявляются, тем самым, не могут быть использованы для диагностики различных заболеваний.
Задачей предлагаемого изобретения является решение проблемы ранней и экспертной диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний.
Для решения поставленной задачи предлагается способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний, который, как и наиболее близкий, выбранный в качестве прототипа, включает ИФА жидких биологических сред, содержащих ЦИК, состоящие из антигенов и связанных с ними антител.
В отличие от прототипа, в предлагаемом способе перед ИФА жидких биологических сред дополнительно проводят воздействие ультразвука на жидкую биологическую среду, при котором происходит высвобождение свободных антигенов и антител без нарушения их биологической активности в течение 3-10 минут, частотой 22 кГц, мощностью 400 Вт при температуре 25°-38°С.
Сущность предлагаемого изобретения заключается в том, что с помощью ультразвукового воздействия на жидкую биологическую среду происходит диссоциация ЦИК, сопровождающаяся высвобождением свободных антигенов и антител без нарушения их биологической активности.
Границы частоты ультразвукового воздействия 22 кГц и его мощности 400 Вт обусловлены необходимостью получения эффекта кавитации в жидких биологических средах, содержащих биологические объекты белковой и липопротеидной природы - антитела и антигены, активации химических реакций, в том числе с разрывом иммунохимических связей между биомолекулами ЦИК.
При ультразвуковом воздействии на жидкую биологическую среду с частотой большей, чем 22 кГц происходят конформационные изменения биомолекул и иммунных комплексов, и, как следствие, потеря иммунной активности входящих в них антител и антигенов.
Диапазон температур обусловлен теми же причинами - необходимостью сохранения антителами и антигенами, входящих в состав ЦИК, биологической активности.
Заявленный способ осуществляют следующим образом.
Пластиковую пробирку с 1,0 мл жидкой биологической среды, например, сыворотки крови, помещают в устройство, позволяющее производить ультразвуковой воздействие на ЦИК сыворотки крови. Под действием ультразвука на сыворотку крови в течение 3-10 мин, частотой 22 кГц, мощностью 400 Вт при температуре 25°-38°С из ЦИК сыворотки крови происходит высвобождение свободных, сохраняющих биологическую активность антигенов и антител и их наличие выявляется далее методом ИФА или иммунного блотинга (далее - ИБ).
С помощью ИБ выявляют различные антитела, например, специфические к ВИЧ антигенам. Эти антитела относятся к классу Ig G. Например, выявлены Ig G специфические антитела к gp 41 антигенам ВИЧ.
При аллергических заболеваниях выявляют антитела двух основных классов Ig G и Ig Е. Ig Е специфические антитела выявляют к аллергенам (их более 1000).
В таблице 1 проиллюстрирована возможность достижения технического результата - выявление свободных Ig G специфических антител к ВИЧ во всем заявленном интервале значений.
По результатам экспериментов выявили, что при указанных условиях возможно выявление Ig G специфических антител к ВИЧ с возрастанием их диагностического титра после ультразвукового воздействия. За диагностический титр принимали значение максимального разведения сыворотки крови, в котором методом ИФА выявлялись Ig G специфические антитела к ВИЧ.
Было произведено обследование 7 больных ВИЧ-инфекцией, у которых ранее в сыворотке крови методами ИФА и ИБ были выявлены свободные специфические антитела к ВИЧ класса Ig G в диагностических титрах 1:1000 и 1:2000.
Для выделения из состава ЦИК свободных Ig G специфических антител к ВИЧ было проведено ультразвуковое воздействие на сыворотку крови с помощью источника ультразвука частотой 22 кГц, мощностью 400 Вт на активной нагрузке в течение 10 мин при температуре 25°С - 38°С.
Как видно из таблицы 1 после воздействия ультразвука на сыворотку крови в течение 3-10 минут диагностический титр специфических антител к ВИЧ вырос во всех подвергнутых ультразвуковому воздействию пробах. Это является свидетельством того, что возросла концентрация свободных специфических антител к ВИЧ класса Ig G. Рост диагностического титра находится в пределах от 4 раз (пробы №№2, 3, 4, 6) до 8 раз (проба №7).
При воздействии ультразвука на сыворотку крови диагностический титр специфических антител к ВИЧ достиг максимальных значений на 5 минуте, при дальнейшем воздействии от 6 до 10 минут достигнутые максимальные значения не менялись.
При повышении температуры от 26°С до 38°С результаты диагностических титров были так же неизменны. Биологическая иммунная активность специфических антител к ВИЧ класса Ig G, выделенных из ЦИК, была подтверждена в исследованиях методом ИФА.
Итак, предлагаемое изобретение решает поставленную задачу, а именно, решает проблему ранней и экспертной диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний.
Claims (1)
- Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний, включающий иммуноферментный анализ жидких биологических сред, содержащих циркулирующие иммунные комплексы, состоящие из антигенов и связанных с ними антител, отличающийся тем, что перед иммуноферментным анализом дополнительно проводят воздействие ультразвука на жидкую биологическую среду, при котором происходит высвобождение свободных антигенов и антител без нарушения их биологической активности в течение 3-10 минут, частотой 22 кГц, мощностью 400 Вт при температуре 25-38°С.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018141468A RU2702011C1 (ru) | 2018-11-26 | 2018-11-26 | Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018141468A RU2702011C1 (ru) | 2018-11-26 | 2018-11-26 | Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2702011C1 true RU2702011C1 (ru) | 2019-10-03 |
Family
ID=68170952
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018141468A RU2702011C1 (ru) | 2018-11-26 | 2018-11-26 | Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2702011C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2809774C2 (ru) * | 2022-06-08 | 2023-12-18 | Владимир Леонидович Пастушенков | Способ диагностики резистентности к прогестерону |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4033741C2 (de) * | 1989-11-02 | 1994-03-31 | Falko Volkhardt E Dipl Tittel | Vorrichtung zum Nachweis von HIV-Antikörpern im Vollblut mit Anzeige des Ergebnisses |
RU2662555C2 (ru) * | 2005-05-27 | 2018-07-26 | Онкиммьюн Лимитед | Улучшенные способы иммуноанализа |
-
2018
- 2018-11-26 RU RU2018141468A patent/RU2702011C1/ru active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4033741C2 (de) * | 1989-11-02 | 1994-03-31 | Falko Volkhardt E Dipl Tittel | Vorrichtung zum Nachweis von HIV-Antikörpern im Vollblut mit Anzeige des Ergebnisses |
RU2662555C2 (ru) * | 2005-05-27 | 2018-07-26 | Онкиммьюн Лимитед | Улучшенные способы иммуноанализа |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
CHEN R. et al. Ultrasound-accelerated immunoassay, as exemplified by enzyme immunoassay of choriogonadotropin //Clinical chemistry, 1984, Т. 30, N. 9, С. 1446-1451. * |
БЕЛЯКОВ Н. А. и др. Вирус иммунодефицита человека-медицина, 2011. АКОПЯН В. Б., Ершов Ю. А. Основы взаимодействия ультразвука с биологическими объектами //М.: МГТУ им. НЭ Баумана, 2005, Т. 224. * |
БЕЛЯКОВ Н. А. и др. Вирус иммунодефицита человека-медицина, 2011. АКОПЯН В. Б., Ершов Ю. А. Основы взаимодействия ультразвука с биологическими объектами //М.: МГТУ им. НЭ Баумана, 2005, Т. 224. CHEN R. et al. Ultrasound-accelerated immunoassay, as exemplified by enzyme immunoassay of choriogonadotropin //Clinical chemistry, 1984, Т. 30, N. 9, С. 1446-1451. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2809774C2 (ru) * | 2022-06-08 | 2023-12-18 | Владимир Леонидович Пастушенков | Способ диагностики резистентности к прогестерону |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Carvalho et al. | Performance of recombinant K39 antigen in the diagnosis of Brazilian visceral leishmaniasis | |
BRPI0615678A2 (pt) | método para diagnosticar infecções | |
JP2008178421A (ja) | リンパ球機能の測定方法 | |
Hosseini et al. | General overviews on applications of ELISA | |
RU2702011C1 (ru) | Способ диагностики инфекционных, аллергических, аутоиммунных и онкологических заболеваний | |
Mohamed et al. | Human cystic echinococcosis in the nalut district of western libya: a clinico-epidemiological study | |
Nekoua et al. | Salivary anti-coxsackievirus-B4 neutralizing activity and pattern of immune parameters in patients with type 1 diabetes: a pilot study | |
RU181920U1 (ru) | Иммуночип для трепонема-специфической серологической диагностики сифилиса | |
RU2394496C1 (ru) | Способ диагностики сифилиса путем одновременного определения реагиновых и трепонемоспецифических антител к t.pallidum на микроскопных альдегидных слайдах | |
De Jonge et al. | Presence of circulating anodic antigen in serum of Schistosoma intercalatum-infected patients from Gabon | |
CN102095860B (zh) | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 | |
RU2486520C1 (ru) | Способ экспресс-диагностики антигенов энтеровирусов в цереброспинальной жидкости | |
WO2005064340B1 (fr) | Methode de diagnostic serologique et determination de statut vaccinal comprenant differents controles | |
RU2731521C1 (ru) | Способ диагностики радиационных поражений организма и способ получения противолучевого антительного бентонитового препарата для диагностики радиационных поражений организма | |
Otoni et al. | Chemokine profile in the sera and urine of patients with schistosomal glomerulopathy | |
RU2704973C1 (ru) | Способ подготовки компонентов для проведения экспресс-теста на токсоплазмоз животных и экспресс-тест на токсоплазмоз | |
Murray et al. | Use of PCR testing in diagnosing chlamydiosis | |
RU2572717C1 (ru) | Способ иммунодиагностики заболеваний, вызванных helicobacter pylori-инфекцией | |
RU2730980C1 (ru) | Способ диагностики лямблиоза | |
US20210046473A1 (en) | Multiplexed mass and nanoparticle detection imaging, tools, fluidics, and methods of making and using the same | |
RU2707571C1 (ru) | Способ прогнозирования развития туберкулеза у здоровых лиц | |
RU2415439C1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики увеита при ревматоидном артрите и болезни бехтерева | |
Yu | Medical-biological significance of specific CIC and good perspectives of immune complex disintegration using ultrasonic in laboratory diagnostics of HIV-infection | |
Buzatu et al. | AB0557 Haematological involvement (CYTOPENIA) at the time of the diagnosis is associated with less severe ocular involvement in patients with primary sjogren syndrome | |
Teke et al. | AB0558 Are regulatory t cell levels different in active and inactive sle patients? |