CN102095860B - 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 - Google Patents
梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102095860B CN102095860B CN 201110027425 CN201110027425A CN102095860B CN 102095860 B CN102095860 B CN 102095860B CN 201110027425 CN201110027425 CN 201110027425 CN 201110027425 A CN201110027425 A CN 201110027425A CN 102095860 B CN102095860 B CN 102095860B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- syphilis
- syphilis specific
- kit
- recombinant antigen
- specific
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法,涉及一种试剂盒。试剂盒设载体板、硝酸纤维膜、梅毒特异性IgG抗体检测线、对照线,检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上;在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体;辣根过氧化物酶标记抗人γ链抗体。先制备梅毒特异性重组抗原,再硝酸纤维素膜的点样,然后制备抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体,标记抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体的辣根过氧化物酶后制备免疫印迹试剂盒。可用于全血、血清、血浆及脑脊液等标本中梅毒特异性IgG抗体的检测。所需标本量极小,不需特殊仪器,且检测简便快速,特异性强,灵敏度高,准确可靠,成本低。
Description
技术领域
本发明涉及一种试剂盒,尤其是涉及一种梅毒特异性IgG抗体检测免疫印迹试剂盒及其制备方法。
背景技术
梅毒(Syphilis)是一种由梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)引起的性传播性疾病,其病原体是梅毒螺旋体,属螺旋体科。梅毒螺旋体主要通过性接触、输血、创口或者胎盘等途径传播。梅毒螺旋体从感染区附近的淋巴结进入血液,播散全身,使机体几乎所有的组织及器官受累,临床表现为全身性,可分为不同临床阶段,包括一期、二期、三期和潜伏期。世界卫生组织(WHO)曾乐观地预言:“由于有高敏度检测方法和高效的治疗方案,梅毒是一种能够通过公共卫生措施得到成功控制的性传播性疾病”。遗憾的是,至今梅毒依然是世界范围的公共卫生问题,缺乏有效的行政控制措施,每年全球大约有1200万的患者,其中60万孕妇患者([1]林丽蓉,杨波,潘锡涛,等.潜在的血源传播患者梅毒血清学检测方法的选择.中华医院感染学杂志.2010,20(10):1491-1494)。事实上,梅毒的感染现状可能要比想象中的更让人悲观。
调查发现,梅毒感染者已经较广泛地存在于普通人群中。
梅毒螺旋体尚不能进行体外培养,梅毒诊断与流行病学调查主要依赖于血清学试验,包括特异性抗体和反应素检测两大类型。梅毒特异性抗体IgM(TP-IgM)和IgG(TP-IgG)抗体分别于2周和4周后产生,即使患者经过足够治疗,其仍能长期存在,甚至终身不消失([2]林丽蓉,但冰,付左根,等.潜在血源传播患者梅毒血清学TRUST/TPPA与IgM抗体联合检测.中国皮肤性病学杂志.2010,152(05):446-448);而另一种抗体物质反应素产生较晚,一般在受感染后5~7周产生,而且晚期梅毒、梅毒治疗后期以及潜伏梅毒可能阴性,因此梅毒特异性抗体的阳性率、敏感性显著高于反应素。TP-IgM是梅毒感染后,机体最先出现的特异性抗体。只要有活的梅毒螺旋体存在,其TP-IgM将会维持在一定的水平。Martina H等([3]MartinaH,Daan W N,Mart M,et al.Comparison of a Treponema pallidum IgM immunoblot with a 19Sfluorescent treponemal antibody absorption test for the diagnosis of congenital syphilis[J].Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,2007,59:61-66.)认为TP-IgM是梅毒早期感染并活动的一项血清学标志,李步荣等([4]李步荣,贺军涛,张毅,等.梅毒螺旋体IgM抗体检测的临床意义[J].第四军医大学学报,2007,28(16):1495-1497)认为TP-IgM与TP-DNA一样,代表着梅毒传染性指标。在排除近期抗梅毒治疗的前提下,TP-IgM若不转阴,提示体内可能残存梅毒螺旋体或治疗不彻底。TP-IgM阴转者随访时再转阳性,表明再次感染梅毒([5]Rawstron SA,Mehta S,Bromberg K,et al.Evaluation of a Treponema pallidum2specificIgM enzyme immunoassay and Treponema pallidum western blot antibody detection in thediagnosis ofmaternal and congenital syphilis[J].Sex Transm Dis,2004,31(2):123-126)。尽管TP-IgM阴性不能完全排除传染性,但TP-IgM阳性必定提示该患者具有传染性。TP-IgG的出现要迟于IgM,能长期存在,甚至终身不消失,因此,TP-IgG是梅毒诊断和流行病学调查的一项重要指标([6]Li-Rong Lin,Zuo-Gen Fu,Bing Dan,et al.Development of a colloidalgold-immunochromatography assay to detect Immunoglobulin G Antibodies to Treponemapallidum with TPN17 and TPN47.Diagnostic Microbiology and Infectious Disease,2010,68:193-200.)。
早期的血清学方法使用完整梅毒螺旋体作为抗原,研究和诊断用的TP是以TP感染兔睾丸获得,这种方法存在花费大、获得的TP量少且不纯(混有宿主蛋白)、与其他病原体存在交叉反应等缺点,因此假阳性也时有发生。随着分子生物学技术的普及及梅毒螺旋体抗原的相继克隆,将重组抗原应用于梅毒实验已经越来越多。目前研究比较多的TP抗原有TPN17、TPN47、TPN15、TPN44.5、TPN36、TP0453、TP0684及TPr家族。采用重组DNA技术制备的重组抗原可以克服完整TP抗原的缺点,能快速、经济地制备无限量特异重组TP抗原。
梅毒特异性IgG抗体检测方法包括梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)及免疫印迹技术(Western-Blot)等,其特异性均较高。一般地,TPPA,ELISA作为临床初筛,当血清学阳性,或临床诊断有困难时,需要采用FTA-ABS及Western-blot作为确认试验。其中,FTA-ABS需要荧光显微镜,而且其结果判断需要训练有素和较丰富经验的专业人员才能完成,因此,其应用推广受到一定的限制。采用Western-blot方法制成的试剂盒,一般常规实验室均可完成,不需要特殊设备,判读也简单明了。现市售的Western-blot试剂均为进口试剂,价格昂贵。
发明内容
本发明的目的是提供一种梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法。
本发明所述梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒设有载体板、硝酸纤维膜、梅毒特异性IgG抗体检测线、对照线,梅毒特异性IgG抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上;在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体;辣根过氧化物酶标记抗人γ链抗体。
所述梅毒特异性重组抗原为TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47梅毒特异性重组抗原。
所述载体板可采用PVC板。
所述梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒的制备方法,包括以下步骤:
1)制备梅毒特异性重组抗原
采用基因克隆技术,PCR扩增编码梅毒螺旋体抗原的DNA,并插入大肠杆菌中使其表达,得梅毒特异性重组抗原;
2)硝酸纤维素膜的点样
在硝酸纤维素膜IgG检测线上包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体,晾干;
3)制备抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体
以人IgG特异性片段γ链为抗原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术,筛选获得稳定分泌抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株;
4)抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体的辣根过氧化物酶(HRP)标记
采用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶(HRP)标记;
5)制备免疫印迹试剂盒
将硝酸纤维膜粘贴在载体板上表面,梅毒特异性IgG抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上,在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被包被人IgG抗体,用切条机切成条状,与酶标记的抗人γ链单克隆抗体及其底物共同组装成梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒。
在步骤1)、2)、5)中,所述梅毒特异性重组抗原可为TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47梅毒特异性重组抗原等。
在步骤2)中,所述梅毒特异性重组抗原和人IgG抗体的浓度可为1~4mg/mL;点样量可为1μL/cm。
在步骤3)中,采用ELISA的方法鉴定McAb效价在1∶107以上。
在步骤4)中,所述辣根过氧化物酶的底物可由0.03%(W/V)的过氧化氢和0.07%(W/V)的二氨基联苯胺组成。
本发明提供了一种采用免疫印迹技术建立梅毒特异性IgG抗体检测试剂条,可用于全血、血清、血浆及脑脊液等标本中梅毒特异性IgG抗体的检测。该检测方法所需的标本量极小,不需要特殊仪器,肉眼直接判读结果,且检测简便快速,特异性强,灵敏度高,准确可靠,成本低,应用广泛。
附图说明
图1为本发明所述梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒中膜条实施例的结构组成示意图。
图2为实验结果模式示意图。在图2中,I为使用前的示意图,H为无效试验(产品质量问题),G为阴性结果,A~F为TP-IgG阳性结果;2为梅毒特异性TPN-15-IgG抗体检测线,3为梅毒特异性TPN-17-IgG抗体检测线,4为梅毒特异性TPN-37-IgG抗体检测线,5为梅毒特异性TPN-44.5-IgG抗体检测线,6为梅毒特异性TPN-47-IgG抗体检测线,7为对照线。
具体实施方式
以下实施例将结合附图对本发明作进一步的说明。
参见图1,本发明所述梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒实施例设有载体板1、梅毒特异性IgG抗体检测线2~6,对照线7和硝酸纤维膜(NC膜)8。
硝酸纤维膜8粘贴在载体板1上表面,梅毒特异性IgG抗体检测线2~6和对照线7依次设在硝酸纤维膜8上;在梅毒特异性IgG抗体检测线处分别包被梅毒特异性重组抗原TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5和TPN47,在对照线7处包被人IgG抗体。
所述载体板采用PVC板。
所述梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒的制备方法,包括以下步骤:
1)制备TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5和TPN47梅毒特异性重组抗原
采用基因克隆技术,PCR扩增编码梅毒螺旋体抗原的DNA,并插入大肠杆菌中使其表达,得TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5和TPN47梅毒特异性重组抗原。
2)硝酸纤维素膜的点样
在硝酸纤维素膜IgG检测线上包被TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体,晾干。
3)制备抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体
以人IgG特异性片段γ链为抗原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术,筛选获得稳定分泌抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株。采用ELISA的方法鉴定McAb效价在1∶107以上。
4)抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体的辣根过氧化物酶(HRP)标记
采用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶(HRP)标记。
5)制备免疫印迹试剂盒
将硝酸纤维膜粘贴在载体板上表面,梅毒特异性IgG抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上;在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47,在对照线处包被人IgG抗体,用切条机切成条状,和酶标记的抗人γ链单克隆抗体及其底物共同组装成梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒。
以下给出采用梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒检测患者的临床标本:
1)标本采用0.01mol/L PBS缓冲液进行1∶50稀释。
2)封闭:采用5%脱脂奶粉(0.01mol/LPBST缓冲液配制)作为封闭液,于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育30min。
3)血清温育:取出所需的膜条,将其放入温育槽内,并编号。在温育槽中分别加入1.5ml已稀释样本。于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育30min。
4)清洗:吸去槽内液体,在摇摆摇床上用1.5ml 0.01mol/L PBS缓冲液清洗膜条3次,每次5min。
5)加酶结合物:在温育槽中加入1.5ml已稀释的酶结合物(采用辣根过氧化物酶标记的抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体为检测抗体),于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育30min。
6)清洗:吸去槽内液体,在摇摆摇床上用1.5ml 0.01mol/L PBS缓冲液清洗膜条3次,每次5min。
7)底物温育:在温育槽中分别加入1.5ml底物液(DAB),于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育10min。
8)终止:吸去槽内液体,用蒸馏水清洗膜条3次,每次1min。
结果判断:将检测膜条放置在结果判定模板中,风干后判断结果。任何蛋白靶标出现的特异性条带,均可判断为阳性,确诊为梅毒(见图2)。
以下给出梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒的性能检定:
1)外观检查:试剂盒无破损,包被反应膜平整、干净无污染斑点、无裂缝,胶带无开胶,无切斜现象。
2)阳性标本符合率:用TP-IgG阳性的不同滴度的阳性参比血清各50份采用梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒检定,计算阳性符合率。阳性参比血清的确定采用FTA-ABS(德国欧蒙公司)法确定的临床标本。
3)阴性标本符合率:用50份阴性参比血清检定,计算阳性符合率。阴性参比血清的确定采用TPPA(日本富士株式会社)法确定的临床标本。
4)批内差异:同一批次梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,用特征性血清检测,要求阳性血清检测结果显示色带的颜色深浅一致,阴性血清检测的结果阴性。
5)批间差异:不同批次梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,用特征性血清检测,要求阳性血清检测结果显示色带的颜色深浅一致,阴性血清检测的结果阴性。
6)干扰试验:检测结果不受标本溶血(n=50)、脂血(n=50)和黄疸(n=50)的干扰。
7)交叉反应:采用本梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,进行系统性红斑狼疮(n=30)、类风湿病(n=30)、免疫性肝炎(n=30)等自身免疫系统疾病的检测,未发现交叉反应。
8)稳定性检测:应用Arrhenius法则,将梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒放置37℃20天后检测,以上各项指标无显著变化,确保成品在室温干燥条件下保存,有效期为18个月。
以下给出具体实施例。
实施例1
将硝酸纤维膜粘贴在载体板上表面,梅毒特异性IgG抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上;在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47,在对照线处包被人IgG抗体,用切条机切成条状,和酶标记的抗人γ链单克隆抗体及其底物共同组装成梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒。
1)标本采用0.01mol/L PBS缓冲液进行1∶50稀释。
2)封闭:采用5%脱脂奶粉(0.01mol/LPBST缓冲液配制)作为封闭液,于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育30min。
3)血清温育:取出所需的膜条,将其放入温育槽内,并编号。在温育槽中分别加入1.5ml已稀释样本。于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育30min。
4)清洗:吸去槽内液体,在摇摆摇床上用1.5ml 0.01mol/L PBS缓冲液清洗膜条3次,每次5min。
5)加酶结合物:在温育槽中加入1.5ml已稀释的酶结合物(采用辣根过氧化物酶标记的抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体为检测抗体),于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育30min。
6)清洗:吸去槽内液体,在摇摆摇床上用1.5ml 0.01mol/L PBS缓冲液清洗膜条3次,每次5min。
7)底物温育:在温育槽中分别加入1.5ml底物液(DAB),于室温(18~25℃)在摇摆摇床上温育10min。
8)终止:吸去槽内液体,用蒸馏水清洗膜条3次,每次1min。
结果判断:将检测膜条放置在结果判定模板中,风干后判断结果。任何蛋白靶标出现的特异性条带,均可判断为阳性,确诊为梅毒(见图2)。
实施例2
与实施例1相似,其区别在于硝酸纤维膜检测线仅由TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5梅毒特异性重组抗原组成,不含有TPN47梅毒特异性重组抗原。结果判断与实施例1相同。
实施例3
与实施例1相似,其区别在于硝酸纤维膜检测线仅由TPN15、TPN17、TPN37、TPN47梅毒特异性重组抗原组成,不含有TPN44.5梅毒特异性重组抗原。结果判断与实施例1相同。
实施例4
与实施例1相似,其区别在于硝酸纤维膜检测线仅由TPN15、TPN17、TPN44.5、TPN47梅毒特异性重组抗原组成,不含有TPN37梅毒特异性重组抗原。结果判断与实施例1相同。
实施例5
与实施例1相似,其区别在于硝酸纤维膜检测线仅由TPN15、TPN37、TPN44.5、TPN47梅毒特异性重组抗原组成,不含有TPN17梅毒特异性重组抗原。结果判断与实施例1相同。
实施例6
与实施例1相似,其区别在于硝酸纤维膜检测线仅由梅毒特异性重组抗原TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47组成,不含有梅毒特异性重组抗原TPN15。结果判断与实施例1相同。
实施例7
与实施例1相似,其区别在于待检标本为脑脊液标本,结果判断与实施例1相同。
实施例8
性能验证试验:按实施例1的方案制备梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,然后进行性能验证。
1)外观检查:试剂盒无破损,包被反应膜平整、干净无污染斑点、无裂缝,胶带无开胶,无切斜现象。
2)阳性标本符合率:用TP-IgG阳性的不同滴度的阳性参比标本各50份采用梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒检定,计算阳性符合率。阳性参比标本的确定采用FTA-ABS(德国欧蒙公司)法确定的临床标本。
3)阴性标本符合率:用50份阴性参比标本检定,计算阳性符合率。阴性参比标本的确定采用TPPA(日本富士株式会社)法确定的临床标本。
4)批内差异:同一批次梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,用特征性标本检测,要求阳性标本检测结果显示色带的颜色深浅一致,阴性标本检测的结果阴性。
5)批间差异:不同批次梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,用特征性标本检测,要求阳性标本检测结果显示色带的颜色深浅一致,阴性标本检测的结果阴性。
6)交叉反应:采用本梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒,进行系统性红斑狼疮(n=30)、类风湿病(n=30)、免疫性肝炎(n=30)等自身免疫系统疾病的检测,未发现交叉反应。
7)稳定性检测:应用Arrhenius法则,将梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒放置37℃20天后检测,以上各项指标无显著变化,确保成品在室温干燥条件下保存,有效期为18个月。
Claims (3)
1.梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒的制备方法,其特征在于所述梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒设有载体板、硝酸纤维膜、梅毒特异性IgG抗体检测线、对照线,梅毒特异性IgG抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上;在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体;辣根过氧化物酶标记抗人γ链抗体;
所述梅毒特异性重组抗原为TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47;
所述制备方法,包括以下步骤:
1)制备梅毒特异性重组抗原
采用基因克隆技术,PCR扩增编码梅毒螺旋体抗原的DNA,并插入大肠杆菌中使其表达,得梅毒特异性重组抗原;所述梅毒特异性重组抗原为TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47;
2)硝酸纤维素膜的点样
在硝酸纤维素膜IgG检测线上包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体,晾干;所述梅毒特异性重组抗原为TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47;所述梅毒特异性重组抗原和人IgG抗体的浓度为1~4mg/mL;点样量为1μL/cm;
3)制备抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体
以人IgG特异性片段γ链为抗原免疫Balb/c小鼠,通过杂交瘤技术,筛选获得稳定分泌抗人IgG单克隆抗体的杂交瘤细胞株;
4)抗人IgG特异性片段γ链单克隆抗体的辣根过氧化物酶标记
采用过碘酸钠法进行辣根过氧化物酶标记;所述辣根过氧化物酶的底物由0.03%(W/V)的过氧化氢和0.07%(W/V)的二氨基联苯胺组成;
5)制备免疫印迹试剂盒
将硝酸纤维膜粘贴在载体板上表面,梅毒特异性IgG抗体检测线和对照线依次设在硝酸纤维膜上,在梅毒特异性IgG抗体检测线处包被梅毒特异性重组抗原,在对照线处包被人IgG抗体,用切条机切成条状,与酶标记的抗人γ链单克隆抗体及其底物共同组装成梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒;所述梅毒特异性重组抗原为TPN15、TPN17、TPN37、TPN44.5、TPN47。
2.如权利要求1所述的梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒的制备方法,其特征在于所述载体板采用PVC板。
3.如权利要求1所述的梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒的制备方法,其特征在于在步骤3)中,采用ELISA的方法鉴定McAb效价在1∶107以上。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201110027425 CN102095860B (zh) | 2011-01-25 | 2011-01-25 | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN 201110027425 CN102095860B (zh) | 2011-01-25 | 2011-01-25 | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102095860A CN102095860A (zh) | 2011-06-15 |
CN102095860B true CN102095860B (zh) | 2013-12-18 |
Family
ID=44129041
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN 201110027425 Expired - Fee Related CN102095860B (zh) | 2011-01-25 | 2011-01-25 | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102095860B (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102288768A (zh) * | 2011-09-19 | 2011-12-21 | 厦门市湖里区妇幼保健院 | 弓形虫IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 |
CN102798721A (zh) * | 2012-05-28 | 2012-11-28 | 上虞常春生物技术有限公司 | 一种食物过敏原检测试剂盒及检测方法 |
Citations (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0189925A2 (en) * | 1985-01-30 | 1986-08-06 | Genetic Diagnostics Corporation | Self-timed immunoassay device |
WO1986004683A1 (en) * | 1985-02-08 | 1986-08-14 | Boehringer Biochemia Robin S.P.A. | Determination of clinical parameters by enzyme immunoprocess |
US6472160B2 (en) * | 1919-09-08 | 2002-10-29 | Fujirebio Inc. | Immunoassay device and immunoassay method using the same |
CN1781022A (zh) * | 2003-04-25 | 2006-05-31 | 拜奥迪吉特实验室技术公司 | 用于进行现场测试的膜条生物传感器系统 |
CN101661040A (zh) * | 2009-09-10 | 2010-03-03 | 杭州艾力康医药科技有限公司 | 梅毒螺旋体抗体唾液快速检测试纸条 |
US7691581B2 (en) * | 2002-10-29 | 2010-04-06 | Viramed Biotech Ag | Means and methods for diagnosing a treponema infection |
CN101825635A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-09-08 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体与特异性总抗体联合检测试剂条及其制备方法 |
CN101825636A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-09-08 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgM抗体与特异性总抗体联合检测试剂条及其制备方法 |
CN101858915A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-10-13 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 |
CN101858916A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-10-13 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgM抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 |
CN201673158U (zh) * | 2010-05-19 | 2010-12-15 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条 |
CN201697919U (zh) * | 2010-05-19 | 2011-01-05 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体与特异性总抗体联合检测试剂条 |
CN201926664U (zh) * | 2011-01-25 | 2011-08-10 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒 |
-
2011
- 2011-01-25 CN CN 201110027425 patent/CN102095860B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6472160B2 (en) * | 1919-09-08 | 2002-10-29 | Fujirebio Inc. | Immunoassay device and immunoassay method using the same |
EP0189925A2 (en) * | 1985-01-30 | 1986-08-06 | Genetic Diagnostics Corporation | Self-timed immunoassay device |
WO1986004683A1 (en) * | 1985-02-08 | 1986-08-14 | Boehringer Biochemia Robin S.P.A. | Determination of clinical parameters by enzyme immunoprocess |
US7691581B2 (en) * | 2002-10-29 | 2010-04-06 | Viramed Biotech Ag | Means and methods for diagnosing a treponema infection |
CN1781022A (zh) * | 2003-04-25 | 2006-05-31 | 拜奥迪吉特实验室技术公司 | 用于进行现场测试的膜条生物传感器系统 |
CN101661040A (zh) * | 2009-09-10 | 2010-03-03 | 杭州艾力康医药科技有限公司 | 梅毒螺旋体抗体唾液快速检测试纸条 |
CN101825635A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-09-08 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体与特异性总抗体联合检测试剂条及其制备方法 |
CN101825636A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-09-08 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgM抗体与特异性总抗体联合检测试剂条及其制备方法 |
CN101858915A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-10-13 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 |
CN101858916A (zh) * | 2010-05-19 | 2010-10-13 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgM抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 |
CN201673158U (zh) * | 2010-05-19 | 2010-12-15 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条 |
CN201697919U (zh) * | 2010-05-19 | 2011-01-05 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体与特异性总抗体联合检测试剂条 |
CN201926664U (zh) * | 2011-01-25 | 2011-08-10 | 厦门大学附属中山医院 | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102095860A (zh) | 2011-06-15 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Seth et al. | Comparison of five blood-typing methods for the feline AB blood group system | |
CN101858914B (zh) | 梅毒特异性总抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 | |
CN101825634A (zh) | 梅毒特异性IgM与IgG抗体联合检测试剂条及其制备方法 | |
CN101825636B (zh) | 梅毒特异性IgM抗体与特异性总抗体联合检测试剂条及其制备方法 | |
CN101825635B (zh) | 梅毒特异性IgG抗体与特异性总抗体联合检测试剂条及其制备方法 | |
CN101858916A (zh) | 梅毒特异性IgM抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 | |
Vasconcellos et al. | Testing different antigen capture ELISA formats for detection of Leptospira spp. in human blood serum | |
CN101858915A (zh) | 梅毒特异性IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条及其制备方法 | |
CN201673156U (zh) | 梅毒特异性IgM抗体胶体金免疫层析检测试剂条 | |
CN102095858A (zh) | 梅毒心磷脂和特异性抗体IgM免疫印迹试剂盒及其制备 | |
CN201926664U (zh) | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒 | |
Muddaiah et al. | Comparative study of Smear Microscopy, Rapid Slide Culture, and Lowenstein-Jensen culture in cases of pulmonary tuberculosis in a tertiary care hospital | |
CN102095860B (zh) | 梅毒特异性IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 | |
Sunita et al. | Specific antibody detection in serum, urine and saliva samples for the diagnosis of cystic echinococcosis | |
CN201926662U (zh) | 梅毒特异性总抗体免疫印迹试剂盒 | |
CN201965132U (zh) | 梅毒特异性IgM抗体免疫印迹试剂盒 | |
CN201955343U (zh) | 梅毒心磷脂和特异性抗体IgM免疫印迹试剂盒 | |
CN102081096A (zh) | 梅毒心磷脂和特异性抗体IgG免疫印迹试剂盒及其制备 | |
CN201926663U (zh) | 梅毒心磷脂和特异性抗体IgG免疫印迹试剂盒 | |
CN202002933U (zh) | 梅毒特异性总抗体和心磷脂抗体免疫印迹试剂盒 | |
RU2532352C2 (ru) | Способ проведения иммунохроматографического анализа для серодиагностики | |
KR101894489B1 (ko) | Igm 반정량적 렙토스피라증 진단 키트 | |
CN201673158U (zh) | 梅毒特异性IgG抗体胶体金免疫层析检测试剂条 | |
CN201697920U (zh) | 梅毒特异性IgM抗体与特异性总抗体联合检测试剂条 | |
CN102288768A (zh) | 弓形虫IgG抗体免疫印迹试剂盒及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20131218 Termination date: 20150125 |
|
EXPY | Termination of patent right or utility model |