RU2697219C1 - Рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli - продуцент L-треонина - Google Patents
Рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli - продуцент L-треонина Download PDFInfo
- Publication number
- RU2697219C1 RU2697219C1 RU2018134279A RU2018134279A RU2697219C1 RU 2697219 C1 RU2697219 C1 RU 2697219C1 RU 2018134279 A RU2018134279 A RU 2018134279A RU 2018134279 A RU2018134279 A RU 2018134279A RU 2697219 C1 RU2697219 C1 RU 2697219C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- threonine
- medium
- escherichia coli
- coli
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-12204 - продуцент L-треонина. Изобретение позволяет расширить арсенал бактерий вида Escherichia coli, способных к продукции L-треонина, и продуцировать при ферментации в ферментере с использованием данного штамма в культуральной жидкости более 100 г/л L-треонина за 36 ч культивирования. 1 пр.
Description
Изобретение относится к микробиологии и биотехнологии и касается рекомбинантного штамма бактерии Escherichia coli - продуцента L-треонина.
L-треонин является незаменимой аминокислотой, которую широко используют в качестве фуражной, кормовой добавки и стимулятора роста животного, а также в качестве компонента в лекарственных водных растворах и дополнительного сырья в медицинских продуктах. В настоящее время в развитых странах L-треонин производят всего пять компаний.
Традиционно L-треонин в промышленном масштабе получают методом ферментации с использованием, как правило, селекционных или рекомбинантных штаммов.
Известные высокопродуктивные рекомбинантные штаммы Е. coli - продуценты L-треонина условно можно разделить на две группы: содержащие треониновый оперон с мутантным геном thrA в составе репликативной плазмиды или в составе хромосомы.
Ниже приведены данные для каждой из них при культивировании в ферментере.
К первой группе относятся, например, штамм Е. coli ВКПМ В-3996, содержащий плазмиду pVIC, который продуцирует 85 г/л L-треонина за 36 ч культивирования (US 5175107 и US 5705371), рекомбинантный штамм Е. coli 29-4, содержащий треониновый оперон с мутантным геном thrA на плазмиде, синтезирующий 65 г/л L-треонина за 72 ч, конверсия 48% (Biosci. Biotech. Biochem. 59: 1095-1098. 1995). Известен также штамм ТН28С (pBRThrABCR3), который продуцирует 82,4 г/л L-треонина за 50 ч культивирования, конверсия 39,3% (Molecular Systems Biology 3: article number 149, p. 8. 2007).
Штаммы-продуценты, содержащие репликативную плазмиду, имеют ограничения для промышленного получения L-треонина. Основная проблема связана с нестабильностью плазмиды во время ферментации. Для поддержания плазмиды, несущей ген устойчивости к антибиотику, в среду культивирования необходимо добавлять антибиотик, что коммерчески невыгодно и недопустимо, так как L-треонина используют в качестве кормовой добавки и в лекарственных водных растворах медицинского назначения.
С точки зрения промышленного использования более перспективными являются штаммы, относящиеся ко второй группе - бесплазмидные штаммы Е. coli.
Известен штамм Е. coli Н-8460, полученный в результате мутагенеза и последовательной селекции на резистентность к нескольким аналогам, который продуцирует 75 г/л L-треонина за 70 ч (US 5474918). Другой штамм Е. coli KYI0935, отобранный селективно, является ауксотрофом по метионину и продуцирует 100 г/л L-треонина через 77 ч культивирования при наличии метионина (0,9 г/л) в ферментационной среде (Biosci. Biotech. Biochem., 61 (11): 1877-1882. 1997).
Рекомбинантный штамм Е. coli MDS-205, содержащий модификации генов треонинового оперона, генов, ответственных за деградацию и транспорт L-треонина, а также геном редуцированный за счет удаления несущественных участков генома, продуцирует 40,1 г/л L-треонина (Microb. Cell Fact. 8,2. 2009).
Описан устойчивый к боррелидину рекомбинантный штамм Е. coli, ADM kat-13, в котором мутантный треониновый оперон в составе хромосомы находится под контролем сильного промотора ptac, функционирующего конститутивно за счет инактивации гена-репрессора lacI. Штамм продуцирует 102 г/л L-треонина за 48 ч культивирования, конверсия 33,1% (US 5939307). Другой штамм ADM ТН25.79 TRF-R, полученный также в компании ADM, продуцирует 117,3 г/л L-треонина за 48 ч, конверсия 37,4% (US 7767431).
Ближайший аналог заявляемого штамма - рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-11820 - продуцент L-тренина (RU 2 546 237), который при культивировании в пробирках продуцирует 7,1 г/л L-треонина.
Задачей заявляемого изобретения является расширение арсенала рекомбинантных микроорганизмов, продуцирующих незаменимую аминокислоту L-треонин.
Задача решена путем получения рекомбинантного штамма бактерии Escherichia coli ВКПМ В-12204 - продуцента L-треонина.
Штамм Е. coli ВКПМ В-12204 получают из штамма Е. coli ВКПМ В-2307 за счет последовательного введения множественных изменений, как методами генной инженерии, так и путем селекции в ферментере.
Штамм Е. coli ВКПМ В-2307, является ауксотрофом по L-треонину (мутация в гене thrC) и по изо лейцину (мутация в гене ilvA) и не продуцирует L-треонин.
Получение штамма Escherichia coli ВКПМ В-12204 из штамма Е. coli ВКПМ В-2307 осуществляют в несколько этапов:
1. В исходном штамме Е. coli ВКПМ В-2307 осуществляют замену природного промотора гена galP на промотор Ptac3. Отбирают трансформанты способные к росту на среде LB (мас. %: NaCl - 0,5; дрожжевой экстракт - 0,5; триптон - 1; остальное - вода) с агаром (1,5%) и сахарозой (10%) и чувствительные к хлорамфениколу. Корректность последовательности ДНК в районе модификации здесь и далее на каждом этапе подтверждают методом секвенирования по Сэнгеру (Ргос.Natl. Acad. Sci. U.S.A. 74 (12): 5463-5467, 1977). Полученный штамм Е. coli, содержащий промотор Ptac3 перед геном galP назван T23-Ptac3-galP.
2. В исходном штамме Е. coli ВКПМ В-2307- инактивируют ген sstT путем замещения его ORF кассетой att-Cm-SacB-att. На полученном трансформанте выращивают фаг Р1, осуществляют транедукцию штамма T23-Ptac3-galP данным фагом и отбирают содержащий модификацию ΔsstT::att-Cm-SacB-att транедуктант, устойчивый к хлорамфениколу (0,001%). Затем кассету, содержащую гены cat и sacB, фланкированные att-последовательностями, удаляют. Отбор трансформантов проводят на среде LB с сахарозой и по потере устойчивости к хлорамфениколу. Полученный штамм с инактивированным геном sstT назван T23-Ptac3-galP-ΔsstT.
3. В исходном штамме Е. coli ВКПМ В-2307- инактивируют ген poxl путем замены его ORF кассетой att-Cm-SacB-att, На полученном трансформанте выращивают фаг Р1, осуществляют транедукцию штамма T23-Ptac3-galP-ΔsstT данным фагом и отбирают транедуктант, устойчивый к хлорамфениколу (0,01 г/л) и содержащий модификацию Δpox1::att-Cm-SacB-att. Затем кассету, содержащую гены cat и sacB, а также прилегающий к гену poxl несущественный для жизнедеятельности Е. coli участок геномной ДНК размером около 20 т.п.о. удаляют и отбирают трансформанты способные к росту на среде LB с сахарозой и чувствительные к хлорамфениколу. Полученный штамм Е. coli, содержащий делению ΔpoxB-ltaE (MGF016) размером около 20 т.п.о., называют T23-Ptac3-galP-ΔsstT-ΔpoxB-ltaE.
4. В штамме T23-Ptac3-galP-ΔsstT-ΔpoxB-ltaE инактивируют ген tdh путем замены его ORF кассетой att-Cm-SacB-att. Отбирают трансформант Δtdh::att-Cm-SacB-att, способный расти на среде LB с хлорамфениколом и с «эффектом лизиса» на среде LB с сахарозой. В полученном трансформанте удаляют кассету, содержащую гены cat и sacB. Отбирают трансформанты способные к росту на среде LB с сахарозой (10%) и чувствительные к хлорамфениколу. Полученный штамм с делецией Δtdh назван T23-Ptac3-galP-ΔsstT-ΔpoxB-ltaE-Δtdh.
5. В исходный штамм Е. coli ВКПМ В-2307 вводят треониновый оперон thrABC с мутантным геном thrA (замена Gly433Arg в ферменте ThrA) и генами thrB и thrC дикого типа под контролем индуцибельного промотора Ptac, терминатора TrrnB, а также селективные маркеры Cm и sacB, обеспечивающие устойчивость к хлорамфениколу и лизис клеток на среде LB с сахарозой, соответственно. Кассету, содержащую гены cat и sacB и промотор Ptac, удаляют путем замещения на фрагмент ДНК, содержащий последовательность промотора рН207 фага Т5. На полученном штамме выращивают фаг Р1 и осуществляют транедукцию штамма T23-Ptac3-galP-ΔsstT-ΔpoxB-ltaE-Δtdh данным фагом. После проведения транедукции отбирают транедуктант, способный расти на среде М9 (мас. %: КН2РО4 - 0,3; Na2HPO4 - 0,6; NaCl - 0,05; NH4Cl - 0,1; MgSO4 - 0,05; CaCl2 - 0,001; тиамин - 0,0001; рН 7,0 вода - остальное) с глюкозой (0,2%) и изолейцином (20 мг/л), но без добавления L-треонина. Полученный штамм Е. coli, содержащий модификации Ptac3-galP, ΔsstT, ΔpoxB-ltaE (MGF016), Δtdh, десенсибилизирующую мутацию в ключевом для биосинтеза L-треонина гене thrA (замена Gly433Arg приводит к снятию эффекта ретроингибирования треонином продукта гена thrA - аспартокиназы I-гомосериндегидрогеназы I) и треониновый оперон под контролем промотора рН207 фага Т5 и терминатора транскрипции rrnB, назван N197.
6. Штамм N 197 культивируют в ферментере на среде ФС (мас. %: (NH4)2SO4 - 1; КН2РО4 - 0,1; MgSO4×7H2O - 0,15; NaCl - 0,06; FeSO4 - 0,002; MnSO4×5H2O - 0,002; дрожжевой автолизат (сухой) - 0,2; глюкоза - 3; вода - остальное) с L-изолейцином (0,005%); культуру рассевают до отдельных колоний и отбирают колонии, способные расти и продуцировать треонин в ФС среде с мелом (СаСО3; 2%) в пробирках. В результате отбирают штамм N217, продуцирующий до 10 г/л L-треонина за 24 ч.
Осуществляют культивирование полученного штамма N217 в ферментере в питательной среде ФС в сравнении с ближайшим аналогом - штаммом Escherichia coli ВКПМ В-11820.
Основную ферментацию проводят в литровом ферментере Applicon в питательной среде ФС. Для предотвращения пенообразования в ферментер вносят пеногаситель (0,1% по объему). Исходный объем жидкости в ферментере составляет 0,4 л. В рабочий ферментер вносят 40 мл инокулята из посевного ферментера. Основную ферментацию проводят в течение 48 ч при следующих условиях культивирования: температура - 37°С, обороты мешалки - 1000 об/мин., расход воздуха - 0,5 л/мин., рН 6,9 (рН статирование проводится раствором аммиака (12,5%). Во время ферментации проводят подпитку глюкозо-аммиачной смесью (2,8:1), для приготовления которой используют раствор глюкозы с концентрацией 700 г/л и аммиак. Концентрацию треонина в культуральной жидкости определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Штамм N217 продуцирует 92 г/л L-треонина, а штамм В-11820 - 58 г/л L-треонина за 48 ч.
Штамм N 217 используют для дальнейшего усовершенствования.
7. В штамм N217 вводят прототрофность по изолейцину (Ile-→Ile+). Фаг Р1 выращивают на штамме Е. coli S5 (rhtA+) и проводят транедукцию штамма N217. Отбирают колонии, способные расти на агаризованной среде М9 с цитратом натрия (0,06%), и проверяют их способность расти на среде ФС с изолейцином и без него в пробирках. Отбирают штамм N237 одинаково растущий на среде ФС с изолейцином и без добавления изолейцина и продуцирующий в пробирках до 10 г/л L-треонина.
8. Штамм N 237 культивируют в ферментере в ФК среде. Среда ФК имеет тот же состав, что и ФС среда, но вместо дрожжевого автолизата добавляют жидкий кукурузный экстракт в количестве 2%. Культуру из ферментера рассевают до отдельных колоний и анализируют на способность продуцировать треонин в ФС среде без изолейцина с мелом в пробирках. Ферментацию и отбор проводят последовательно 4 раза, при этом для каждой следующей ферментации посевную культуру готовят из колонии, способной продуцировать L-треонин в пробирках. После 4-х последовательных ферментаций и анализа отдельных колоний получают стабильный штамм N335.
Полученный штамм Escherichia coli N335 депонирован в БРЦ «Всероссийская коллекция промышленных микроорганизмов» (ВКПМ) по адресу 117545 Москва, 1-ый Дорожный проезд, д.1 и имеет регистрационный номер ВКПМ В-12204.
Штамм Escherichia coli ВКПМ В-12204 характеризуется следующими признаками:
Культурально-морфологические признаки.
Грамотрицательные слабо подвижные тонкие палочки средней длины 1,0-1,5 мкм.
Штамм хорошо растет на простых питательных средах. На среде LB с агаром (1,5%) через 24 ч роста при 37°С образует плоские, круглые, с небольшим кремовым оттенком, полупрозрачные на свет колонии, диаметром 2-3 мм, поверхность колоний гладкая, края неровные, слегка волнистые, структура однородная, консистенция пастообразная.
На минимальной среде М9 с глюкозой (0,2%) и агаром (1,5%) через 2-е суток роста при 37°С образует колонии диаметром 1-1,5 мм, серовато-белые, круглые, слегка выпуклые, внутренняя структура однородная, поверхность блестящая, через 4-5 суток колонии приобретают слизистую (мукоидную) консистенцию.
Физиолого-биохимические признаки. Грамотрицательная бактерия, факультативный анаэроб, не образует эндоспор. Сахара не сбраживает. Ассимилирует глюкозу, лактозу, маннозу, галактозу, ксилозу, фруктозу, глицерол и маннитол с образованием кислоты и газа. После 24 ч роста при 37°С в жидкой среде LB наблюдается сильное помутнение, небольшой осадок, запах характерный. Хороший рост по всему уколу на среде LB с агаром.
Оптимальное значение рН для роста 5,5-7,0. Оптимальная температура 37°С. Желатин не разжижает. Индол не образует. На среде с молоком хороший рост с коагуляцией молока Потребностей в факторах роста (аминокислоты, нуклеотиды) не имеет. Устойчивости к антибиотикам не имеет. Штамм не патогенен.
Пример 1. Продукция L-треонина заявляемым штаммом.
Из суточной биомассы штамма Е. coli ВКПМ В-12204 с чашки Петри с LB средой готовят суспензию клеток в 1 мл 0,9% раствора NaCl, определяют оптическую плотность суспензии (OD600) и засевают 20 мл среды А (мас. %: дрожжевой экстракт - 3,5; К2НРО4×3Н2О - 0,33; NaCl - 0,25; глюкоза - 0,3; остальное - вода) в колбе на 0,75 л суспензией клеток в таком объеме, чтобы исходная оптическая плотность культуры в колбе равнялась 0,2. Колбу инкубируют на качалке (250 об./мин.) при 37°С в течение не менее 6 ч до OD600 равной 5,0.
Подготовку посевной культуры проводят в ферментере КФ-103/4 на питательной среде П, имеющей следующий состав (мас. %): кукурузный экстракт (жидкий) - 3,0; (NH4)2SO4 - 0,1; KH2PO4 - 0,2; MgSO4×7H2O - 0,08; FeSO4 - 0,002; MnSO4×H2O - 0,002; глюкоза - 4,0. На каждые 1000 мл среды П добавляют 1,0 мл пеногасителя. В посевной ферментер вносят 0,6 мл инокулята из колбы на 1 л среды П. Культивирование проводят при рН-статировании 25% водным раствором аммиака при рН 6,9 и контроле концентрации растворенного кислорода pO2 равной 20% от насыщения воздуха. Посевную культуру выращивают в течение 16,5 ч до OD600 равной 25.
Основную ферментацию проводят в ферментере КФ-103/4 на питательной среде Ф, имеющей следующий состав (мас. %): кукурузный экстракт (жидкий) - 2; (NH4)2SO4 - 0,05; KH2PO4 - 0,2; MgSO4×7H2O - 0,15; FeSO4 - 0,002; MnSO4×H2O - 0,002; глюкоза - 1,5, вода - остальное. На каждые 1000 мл среды Ф добавляют 2,0 мл пеногасителя. Исходный объем жидкости в ферментере составляет 1000 мл. В рабочий ферментер вносят 80 мл посевной культуры. Культивирование проводят при 33°С, рН-статировании 25% водным раствором аммиака при рН6,9, подпитке 52% (вес/вес) раствором глюкозы и контроле концентрации растворенного кислорода pO2 равной 20% от насыщения воздуха в течение 36 ч.
Концентрацию L-треонина в культуральной жидкости определяют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).
Штамм Escherichia coli ВКПМ В-12204 продуцирует 105,4 г/л L-треонина за 36 ч культивирования в Ф среде, конверсия 43%, скорость синтеза 2,91 г/л/ч.
Штамм Escherichia coli ВКПМ В-12204 по своим биотехнологическим показателям сравним с лучшими зарубежными штаммами Е. coli - продуцентами L-треонина и превосходит ближайший аналог - штамм Escherichia coli ВКПМ fill 820. Полученный штамм является прототрофом и не содержит генов, обеспечивающих устойчивость к антибиотикам.
Claims (1)
- Рекомбинантный штамм Escherichia coli ВКПМ В-12204 - продуцент L-треонина.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018134279A RU2697219C1 (ru) | 2018-09-28 | 2018-09-28 | Рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli - продуцент L-треонина |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018134279A RU2697219C1 (ru) | 2018-09-28 | 2018-09-28 | Рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli - продуцент L-треонина |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2697219C1 true RU2697219C1 (ru) | 2019-08-13 |
Family
ID=67640562
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018134279A RU2697219C1 (ru) | 2018-09-28 | 2018-09-28 | Рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli - продуцент L-треонина |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2697219C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2728242C1 (ru) * | 2019-12-26 | 2020-07-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) | Штамм Escherichia coli - продуцент L-треонина |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5175107A (en) * | 1988-10-25 | 1992-12-29 | Ajinomoto Co., Inc. | Bacterial strain of escherichia coli bkiim b-3996 as the producer of l-threonine |
RU2212448C2 (ru) * | 1996-07-30 | 2003-09-20 | Аче-Даниилз-Мидлэнд Кампэни | Штамм микроорганизма escherichia coli - продуцент l-треонина, способ получения продуцирующего l-треонин штамма e.coli и способ получения l-треонина (варианты) |
US7767431B2 (en) * | 2000-09-28 | 2010-08-03 | Archer-Daniels-Midland Company | Escherichia coli strains which over-produce L-threonine and processes for the production of L-threonine by fermentation |
RU2546237C1 (ru) * | 2013-11-07 | 2015-04-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроогранизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") | Рекомбинантный штамм escherichia coli-продуцент l-треонина |
-
2018
- 2018-09-28 RU RU2018134279A patent/RU2697219C1/ru active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5175107A (en) * | 1988-10-25 | 1992-12-29 | Ajinomoto Co., Inc. | Bacterial strain of escherichia coli bkiim b-3996 as the producer of l-threonine |
RU2212448C2 (ru) * | 1996-07-30 | 2003-09-20 | Аче-Даниилз-Мидлэнд Кампэни | Штамм микроорганизма escherichia coli - продуцент l-треонина, способ получения продуцирующего l-треонин штамма e.coli и способ получения l-треонина (варианты) |
US7767431B2 (en) * | 2000-09-28 | 2010-08-03 | Archer-Daniels-Midland Company | Escherichia coli strains which over-produce L-threonine and processes for the production of L-threonine by fermentation |
RU2546237C1 (ru) * | 2013-11-07 | 2015-04-10 | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроогранизмов" (ФГУП "ГосНИИгенетика") | Рекомбинантный штамм escherichia coli-продуцент l-треонина |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2728242C1 (ru) * | 2019-12-26 | 2020-07-28 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) | Штамм Escherichia coli - продуцент L-треонина |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0593792B2 (en) | Novel L-threonine-producing microbacteria and a method for the production of L-threonine | |
FI92717B (fi) | Bakteerikanta Escherichia coli VKPM (BK M) B-3996 L-treoniinin tuottajana | |
US6132999A (en) | L-threonine-producing microbacteria and a method for the production of L-threonine | |
US6297031B1 (en) | Escherichia coli strain and method for producing L-threonine | |
CN1252278C (zh) | L-苏氨酸的生产方法 | |
EP0858510B1 (de) | Verfahren zur herstellung von o-acetylserin, l-cystein und l-cystein-verwandten produkten | |
KR20000029691A (ko) | 에스케리챠콜리의신규균주,그제조방법및그균주를엘-트레오닌생산을위한발효공정에사용하는용도 | |
CN106434510B (zh) | 一株发酵产l-天冬氨酸的基因工程菌 | |
CN100378215C (zh) | 染色体上fadR基因被敲除的微生物以及通过该突变体发酵生产L-苏氨酸的方法 | |
RU2697219C1 (ru) | Рекомбинантный штамм бактерии Escherichia coli - продуцент L-треонина | |
Downs et al. | Synthesis of thiamine in Salmonella typhimurium independent of the purF function | |
RU2697499C1 (ru) | Бактерия вида Escherichia coli - продуцент L-треонина, способ микробиологического синтеза L-треонина с ее использованием. | |
CN109666617B (zh) | 一种l-高丝氨酸的生产菌株及其构建方法和应用 | |
CN106635945A (zh) | 重组菌株及其制备方法和生产l‑苏氨酸的方法 | |
RU2728251C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном ychE - продуцент L-треонина | |
RU2817252C1 (ru) | Штамм Escherichia coli - продуцент L-треонина | |
RU2787585C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном yhjE - продуцент L-треонина | |
RU2775206C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном yjeM - продуцент L-треонина | |
RU2787583C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном yqeG - продуцент L-треонина | |
RU2774071C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном sdaC - продуцент L-треонина | |
RU2731282C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном ttdT - продуцент L-треонина | |
RU2748676C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном ydgI - продуцент L-треонина | |
CN101072865A (zh) | 具有灭活的lysR基因生成L-苏氨酸的微生物,生产其的方法以及使用所述微生物生产L-苏氨酸的方法 | |
RU2758269C1 (ru) | Штамм Escherichia coli с инактивированным геном lysP - продуцент L-треонина | |
SU1694643A1 (ru) | Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI - продуцент L-треонина |