RU2688429C1 - Method of producing a probiotic additive for quail - Google Patents
Method of producing a probiotic additive for quail Download PDFInfo
- Publication number
- RU2688429C1 RU2688429C1 RU2018125799A RU2018125799A RU2688429C1 RU 2688429 C1 RU2688429 C1 RU 2688429C1 RU 2018125799 A RU2018125799 A RU 2018125799A RU 2018125799 A RU2018125799 A RU 2018125799A RU 2688429 C1 RU2688429 C1 RU 2688429C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- molasses
- microorganisms
- cultivation
- medium
- agilis
- Prior art date
Links
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K50/00—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
- A23K50/70—Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for birds
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Birds (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и сельскому хозяйству, а конкретно к способу получения пробиотической добавке на основе молочнокислых бактерий для кормления перепелов с целью повышения их мясной продуктивности птицы.The invention relates to biotechnology and agriculture, and specifically to a method for producing a probiotic supplement based on lactic acid bacteria for feeding quails in order to increase their poultry meat productivity.
Современное птицеводство многими путями решает проблему максимальной реализации биоресурсного потенциала птицы и сохранения при этом ее продуктивного здоровья. Ускорение динамики роста и повышение суточных приростов живой массы птицы при снижении экономических затрат на 1 кг прироста живой массы тела является одной из основных задач птицеводства, в частности, перепеловодства.Modern poultry farming in many ways solves the problem of maximizing the bird's bioresource potential and at the same time preserving its productive health. Accelerating the dynamics of growth and increasing daily increase in live weight of poultry while reducing economic costs per 1 kg increase in live weight is one of the main tasks of the poultry industry, in particular, quailing.
Существуют способы повышения мясной продуктивности птицы за счет введение микроэлементов, витаминов, пробиотиков в корма птице. При этом в составе кормовых добавок микробного происхождения чаще используют микроорганизмы, которые проявляют пробиотические свойства, однако не являются естественной микрофлорой желудочно-кишечного тракта данного вида птицы.There are ways to increase the poultry meat productivity by introducing trace elements, vitamins, probiotics in poultry feed. At the same time, microbial organisms are more often used in the composition of feed additives of microbial origin, which exhibit probiotic properties, but are not the natural microflora of the gastrointestinal tract of this species of bird.
Известно использование для выращивания микробной культуры мелассной среды в составе на 1 л : 45 г свекловичной мелассы, 2 г KH2PO4, 0,02 г дрожжевого экстракта (Патент РФ №243864, МПК C05F 3/00, А01С 3/00, C05F 11/08, 27.12., 2011 г.).Known use for the cultivation of microbial culture molasses medium in the composition of 1 liter: 45 g of beet molasses, 2 g of KH 2 PO 4 , 0.02 g of yeast extract (Patent RF №243864, IPC
Известен способ предусматривающий применение в составе комбикормов для перепелов пробиотической кормовой добавки, включающей три вида молочнокислых бактерий: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus B-5788, Lactobacillus acidophilus B-3235, Lactococcus lactis ssp. lactis B-3145, выращенных на среде, состоящей из воды, мелассы свекловичной, молока или молочной сыворотки, которая обеспечивает повышение сохранности и продуктивности перепелов (Кобыляцкая Г.В. Получение и эффективность применения пробиотика Трилактобакт в перепеловодстве: автореф. дис. … канд. с.-х. наук / Г.В. Кобыляцкая. - Краснодар, 2013. - 24 с.).The known method provides for the use in the composition of animal feed for quails of a probiotic feed additive, which includes three types of lactic acid bacteria: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus B-5788, Lactobacillus acidophilus B-3235, Lactococcus lactis ssp. lactis B-3145 grown on a medium consisting of water, beet molasses, milk or whey, which improves the safety and productivity of quails (Kobylyatskaya GV Receipt and efficacy of using probiotic Trilatobact in quailing: abstract of thesis ... cand. of agricultural sciences / GV Kobylyatskaya. - Krasnodar, 2013. - 24 p.).
Недостатком данного способа является то, что в состав пробиотика входят микроорганизмы, которые не являются естественными представителями микробиома желудочно-кишечного тракта перепелов, а используемая питательная среда позволяет достичь титра каждой культуры всего лишь до не менее 5,0×107 КОЕ/мл, тем самым добавка не будет обеспечивать максимальную реализацию биологического потенциала птицы.The disadvantage of this method is that the probiotic contains microorganisms that are not natural representatives of the microbiome of the gastrointestinal tract of quails, and the nutrient medium used allows to achieve the titer of each culture to at least 5.0 × 10 7 CFU / ml, most additive will not ensure maximum realization of the biological potential of the bird.
Наиболее близким является способ предусматривающий, выращивание молочнокислых культур на мелассной среде (Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных штаммов лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства / А.Г. Кощаев, Ю.А. Лысенко, Мищенко В.А. [и др.] // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2017. - №04 (128). - С. 1102-1115).The closest is a method involving the cultivation of lactic acid cultures on molasses medium (Intensification of the cultivation process of physiologically adapted strains of lactobacilli as the basis for the creation of microbial biopreparations for poultry farming / AG Koshchaev, Yu.A. Lysenko, Mishchenko VA [and others .] // Polythematic network electronic scientific journal of the Kuban State Agrarian University - 2017. - №04 (128). - P. 1102-1115).
Недостатком данного способа является то, что отсутствует информация о том, из какой конкретно мелассы состоит данная среда, какой вносится титр культуры молочнокислых микроорганизмов в среду, что в совокупности не может гарантировать достоверность полученных результатов.The disadvantage of this method is that there is no information about what particular molasses this medium consists of, what the titer of the culture of lactic acid microorganisms is added to the medium, which together cannot guarantee the reliability of the results obtained.
Техническим результатом является повышение титра молочнокислых культур Lactobacillus agilis, за счет культивирования лактобактерий, являющиеся представителями естественной микрофлоры ЖКТ перепелов.The technical result is to increase the titer of lactic acid cultures of Lactobacillus agilis, due to the cultivation of lactobacilli, which are representatives of the natural microflora of the gastrointestinal tract of quails.
Технический результат достигается тем, что в способе получения пробиотической добавки для перепелов, включающем культивирование микроорганизмов Lactobacillus agilis в среде состоящей из мелассы кормовой 45,0 г, К2НРО4 - 2,0 г и дрожжевого экстракта - 0,02 г из расчета на 1 литр воды, согласно изобретению меласса кормовая состоит из свекловичной и кукурузной меласс, взятых в соотношении 1:1, затем в полученную смесь добавляют микроорганизмы Lactobacillus agilis с титром не менее 1,0×105 КОЕ/мл и культивируют при температуре 37 С, в течение 24 ч.The technical result is achieved by the fact that in the method of obtaining probiotic supplements for quail, including the cultivation of microorganisms Lactobacillus agilis in an environment consisting of feed molasses 45.0 g, K 2 HPO 4 - 2.0 g and yeast extract - 0.02 g based on 1 liter of water according to the invention, molasses fodder consists of beet and corn molasses, taken in a 1: 1 ratio, then Lactobacillus agilis microorganisms with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml are added to the mixture and cultured at 37 ° C, within 24 hours
Новизна заявляемого технического решения обусловлена тем, что используется среда из свекловичной и кукурузной меласс, для выращивания молочнокислых микроорганизмов - Lactobacillus agilis, которые независимыми микробиологическим методом, методом количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени и метагеномными методами были выделены из ЖКТ перепелов (Идентификация штаммов автохтонной микрофлоры - основы биопрепаратов лечебно-профилактического действия / В.В. Радченко, Е.В. Ильницкая, А.С. Родионова, Т.М. Шуваева, Ю.А. Лысенко, Г.А. Плутахин, А.И. Манолов, И.М. Донник, А.Г. Кощаев // Биофармацевтический журнал. - 2016. Том. - 8, №1. - С. 3-12; Метагеномное профилирование бактериозеноза пищеварительного тракта различных линий перепелов / Е.Р. Кириллова, Т.В. Григорьева, М.Н. Синягина и др. // Материалы всероссийской конференции с международным участием, посвященная 40-летию кафедры генетики Института фундаментальной медицины и биологии Казанского университета. - Казань. - 2016. - С. 55-56; Автохтонная микрофлора дикой птицы - основа препаратов лечебно-профилактического действия для промышленной птицы / А.С. Родионова, Е.В. Ильницкая, В.В. Радченко, А.В. Лихоман, Ю.А. Лысенко, А.Г. Кощаев // XXVIII зимняя молодежная научная школа «Перспективные направления физико-химической биологии и биотехнологии». Сборник тезисов. - М.: ФАНО России, 2016. - С. 151).The novelty of the proposed technical solution is due to the fact that the medium from beet and corn molasses is used for growing lactic acid microorganisms - Lactobacillus agilis, which were isolated from the gastrointestinal tract using independent microbiological methods, real-time quantitative polymerase chain reaction and metagenomic methods (Identification of autochthonous microorganism strains) - The basis of biological preparations of therapeutic and prophylactic action / V.V. Radchenko, E.V. Ilnitskaya, A.S. Rodionova, T.M. Shuvaeva, Y.A. Lysenko, G.A. Plut Khin, AI Manolov, IM Donnik, AG Koshchaev // Biopharmaceutical Journal. - 2016. Vol. - 8, No. 1. - P. 3-12; Metagenomic profiling of bacteriocenosis of the digestive tract of various quail lines / ER Kirillova, TV Grigorieva, MN Sinyagin, etc. // Proceedings of the All-Russian Conference with international participation, dedicated to the 40th anniversary of the Department of Genetics of the Institute of Fundamental Medicine and Biology, Kazan University - Kazan. - pp. 55-56; Autochthonous microflora of wild birds - the basis of therapeutic and prophylactic drugs for industrial poultry / А.S. Rodionova, E.V. Ilnitskaya, V.V. Radchenko, A.V. Likhoman, Yu.A. Lysenko, A.G. Koshchaev // XXVIII winter youth scientific school "Perspective directions of physical and chemical biology and biotechnology". Collection of theses. - M .: FANO of Russia, 2016. - p. 151).
Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».Signs that distinguish the claimed technical solution from the prototype, aimed at achieving a technical result and not identified in the study of this and related areas of science and technology and, therefore, meet the criterion of "inventive step".
Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемых технических решений критерию «новизна».These differences allow us to conclude that the proposed technical solutions comply with the “novelty” criterion.
Соответствие заявляемого решения критерию патентоспособности «промышленная применимость» обусловлено тем, что предлагаемое техническое решение работоспособно и возможно его использование для выращивания перепелов.The compliance of the proposed solution to the patentability criteria "industrial applicability" is due to the fact that the proposed technical solution is operational and its use for growing quails is possible.
Сущность изобретения поясняется чертежами, где на рис. 1 - представлен график зависимости количества микроорганизмов от состава мелассной среды; на рис. 2 - представлен график зависимости количества редуцирующих веществ от времени культивирования микроорганизмов на мелассной среде №3; на рис. 3 - представлен график зависимости количества микроорганизмов от состава питательных сред; на рис. 4 - представлен график зависимости количества микроорганизмов от времени их культивирования при температуре 36°С; на рис. 5 - представлен график зависимости количества микроорганизмов от времени их культивирования при температуре 38°С.The invention is illustrated by drawings, where Fig. 1 is a graph of the number of microorganisms as a function of the composition of the molasses medium; in fig. 2 shows a graph of the dependence of the amount of reducing substances on the time of cultivation of microorganisms on molasses medium No. 3; in fig. 3 shows a graph of the number of microorganisms on the composition of nutrient media; in fig. 4 shows a graph of the number of microorganisms as a function of the time of their cultivation at a temperature of 36 ° C; in fig. 5 is a graph showing the dependence of the number of microorganisms on the time of their cultivation at a temperature of 38 ° C.
Способ получения пробиотической добавки осуществляется следующим образом.The method of obtaining probiotic supplements as follows.
Культивирование микроорганизмов Lactobacillus agilis осуществляют в среде состоящей из мелассы кормовой 45,0 г, которая состоит из свекловичной и кукурузной меласс, К2НРО4 - 2,0 г и дрожжевого экстракта - 0,02 г в расчете на 1 литр воды. Затем в полученную смесь добавляют микроорганизмы Lactobacillus agilis с титром не менее 1,0×105 КОЕ/мл и культивируют при температуре 37 С, в течение 24 ч.The cultivation of microorganisms Lactobacillus agilis is carried out in an environment consisting of molasses feed 45.0 g, which consists of beet and corn molasses, K 2 NRA 4 - 2.0 g and yeast extract - 0.02 g per 1 liter of water. Then, Lactobacillus agilis microorganisms with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml are added to the resulting mixture and cultured at 37 ° C for 24 hours.
При использовании засевной культуры Lactobacillus agilis с титром менее 1,0×105 КОЕ/мл, не будет обеспечиваться достижение необходимого титра культуры в пробиотической добавке.When using Lactobacillus agilis seed culture with a titer of less than 1.0 × 10 5 CFU / ml, the required culture titer in the probiotic supplement will not be achieved.
При использовании засевной культуры Lactobacillus agilis с титром более 1,0×105 КОЕ/мл достигается тот же титр и не имеет смысла брать большее количество.When using Lactobacillus agilis seeding culture with a titer of more than 1.0 × 10 5 CFU / ml, the same titer is achieved and it does not make sense to take a larger amount.
Первый этап исследований включает выращивание бактерий Lactobacillus agilis на мелассной питательной среде различного состава. Время выращивания культуры составляло 48 ч, температурный оптимум 37°С.The first stage of research includes the cultivation of bacteria Lactobacillus agilis on molasses nutrient medium of different composition. The time of cultivation of the culture was 48 hours, the temperature optimum was 37 ° C.
Для подбора питательного субстрата для Lactobacillus agilis использовали мелассную питательную среду следующих составов:For the selection of the nutrient substrate for Lactobacillus agilis used molasses nutrient medium of the following compositions:
1. Состав мелассной среды №1: 45 г/л мелассы кормовой (100% свекловичной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л.1. Composition of molasses medium No. 1: 45 g / l molasses fodder (100% beet molasses), K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l.
2. Состав мелассной среды №2: 45 г/л мелассы кормовой (100% кукурузной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л.2. Composition of molasses medium No. 2: 45 g / l molasses fodder (100% corn molasses), K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l.
3. Состав мелассной среды №3: 45 г/л мелассы кормовой (50% свекловичной и 50% кукурузной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л.3. Composition of molasses medium No. 3: 45 g / l molasses fodder (50% beet and 50% corn molasses), K 2 NRA 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l.
4. Состав мелассной среды №4: 45 г/л мелассы кормовой (25% свекловичной и 75% кукурузной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л.4. Composition of molasses medium No. 4: 45 g / l molasses fodder (25% beet and 75% corn molasses), K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l.
5. Состав мелассной среды №5: 45 г/л мелассы кормовой (75% свекловичной и 25% кукурузной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л.5. Composition of molasses medium No. 5: 45 g / l molasses fodder (75% beet and 25% corn molasses), K 2 NRA 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l.
Определение титра микрофлоры проводили согласно ГОСТа 10444.11-89 (пункт 4.2.2). Брали 1,0 мл выращенной каждой культуры и помещали в колбу объемом 100 см3 и заливали 99,0 мл стерильным физиологическим растворов, оставляли на 1 ч. При этом получали разведение 1:100. После этого готовили ряд последовательных десятикратных разведений до 10-10. Для каждого разведения применяли отдельные стерильные наконечники. Посев в чашки Петри проводили согласно (на Лактобакагар из разведений 10-7, 10-8, 10-9, 10-10. Из разведений 10-7, 10-8, 10-9, 10-10 стерильным наконечником автоматического дозатора по 1 мл суспензии переносли в 4 чашки Петри, в которые заливают стерильную, расплавленную питательную среду, охлажденную до 38-40°С. Круговым движением чашек Петри в них перемешивали среду и оставляют до застывания агара. Чашки с засеянными средами помещали в термостат и выдерживали при (37±1)°С в течении 72 ч. По количеству выросших колоний согласно (ГОСТ 9225-84 (пункт 4.5.3) определяли общий титр микроорганизмов. Число жизнеспособных клеток в 1 мл препарата (X), вычисляли по формуле:The determination of the microflora titer was carried out according to GOST 10444.11-89 (clause 4.2.2). They took 1.0 ml of each culture grown and placed in a flask with a volume of 100 cm 3 and poured 99.0 ml with sterile saline, left for 1 hour. A dilution of 1: 100 was obtained. After that they prepared a series of consecutive tenfold dilutions up to 10 -10 . Separate sterile tips were used for each dilution. Sowing in Petri dishes was carried out according to (on Laktobakagar from
где: N - среднеарифметическое значение числа колоний в чашках Петри; Р - порядковый номер десятикратного разведения, в котором отмечается рост бактерий.where: N is the arithmetic mean value of the number of colonies in Petri dishes; P - the serial number of tenfold dilution, in which the growth of bacteria.
В процессе культивирования проводился анализ динамики потребления редуцирующих веществ (РВ) с исходной концентрацией 4%. Метод определения редуцирующих веществ основан на восстанавливающей способности моноформ сахаров - глюкозы и фруктозы.In the process of cultivation, an analysis of the dynamics of consumption of reducing substances (PB) with an initial concentration of 4% was carried out. The method of determining the reducing substances is based on the reducing ability of the monoforms of sugars - glucose and fructose.
Результаты по количеству исследуемых микробных культур, полученные в лабораторных условиях при культивировании в мелассной среде, представлены на рисунке 1, где по оси абсцисс указаны номера составов мелассной среды, а по оси ординат - количество микроорганизмов.Results on the number of microbial cultures studied, obtained under laboratory conditions during cultivation in a molasses medium, are presented in Figure 1, where the composition numbers of the molasses medium are indicated on the abscissa axis and the number of microorganisms on the ordinate axis.
В результате проведенного исследования наиболее эффективной оказалась мелассная среда №3, где в качестве кормовой мелассы использовалось 50% свекловичной и 50% кукурузной мелассы, титр Lb. agilis составил 3,3×1010 КОЕ/мл, в то время как на других вариантах титр используемых культур не превысил 1,0×109 КОЕ/мл. Так на мелассной питательной среде №1 количество Lb. agilis составило 2,1×109 КОЕ/мл; на варианте №2 Lb. agilis - 6,7×109 КОЕ/мл; вариант №4 Lb. agilis - 9,0×109 КОЕ/мл и вариант №5 Lb. agilis - 6,3×109 КОЕ/мл.As a result of the study, molasses medium No. 3 turned out to be the most effective, where 50% of beet and 50% of corn molasses, Lb. titer, were used as fodder molasses. agilis was 3.3 × 10 10 CFU / ml, while on other variants the titer of the cultures used did not exceed 1.0 × 10 9 CFU / ml. So on molasses nutrient No. 1 amount of Lb. agilis was 2.1 × 10 9 CFU / ml; on
Также в процессе культивирования снимали динамику потребления редуцирующих веществ (РВ) на мелассной среде №3, результаты которой представлены на рисунке 2, где по оси абсцисс указано время культивирования микроорганизмов, а по оси ординат - количество редуцирующих веществ.Also in the process of cultivation, the dynamics of consumption of reducing substances (PB) on molasses medium No. 3 were recorded, the results of which are shown in Figure 2, where the time of cultivation of microorganisms is indicated on the abscissa and the number of reducing substances is shown on the ordinate axis.
По результатам контроля потребления углеродного субстрата можно сделать вывод о его истощении уже к 24 ч от начала культивирования.Based on the results of monitoring the carbon substrate consumption, it can be concluded that it is depleted by as early as 24 hours from the start of cultivation.
Следующим этапом исследований являлось определение влияния на рост используемых культур различных питательных сред, которые часто используют для культивирования лактобактерий. Время выращивания для всех культур составляло 48 ч, температурный оптимум 37°С.The next stage of the research was to determine the effect on growth of the used cultures of various nutrient media, which are often used for the cultivation of lactobacilli. The cultivation time for all cultures was 48 h, the temperature optimum was 37 ° C.
Для подбора питательного субстрата для молочнокислых микроорганизмов использовали среды следующего состава:For the selection of nutrient substrate for lactic acid microorganisms used environment of the following composition:
1. Среда для молочнокислых бактерий (г. Углич): дрожжевой экстракт - 0,2%; кукурузный экстракт - 0,3%; глюкозный сироп - 2%; аскорбиновая кислота (цитрат натрия) - 4 г/л; КН2РО4 - 2 г/л.1. Environment for lactic acid bacteria (Uglich): yeast extract - 0.2%; corn extract - 0.3%; glucose syrup - 2%; ascorbic acid (sodium citrate) - 4 g / l; KN 2 PO 4 - 2 g / l.
2. Состав среды МРС, г/л: пептон - 10,0; дрожжевой экстракт - 20,0; глюкоза - 20,0; дикалия гидрофосфат - 2,0; натрия ацетат - 5,0; триаммония цитрат - 2,0; магния сульфат - 0,2; марганца сульфат 4-водный - 0,05.2. The composition of the medium MPC, g / l: peptone - 10.0; yeast extract - 20,0; glucose - 20.0; dipotassium phosphate - 2.0; sodium acetate - 5,0; triammonium citrate - 2.0; magnesium sulfate - 0.2; manganese sulfate 4-water - 0.05.
3. Состав среды ГПС, г/л: Na2HPO4 1 2-водный - 3,2; KH2PO4 - 0,3; MgSO4 - 0,5; NaCl - 0,5; пептон - 2,0; дрожжевой экстракт - 0,05; глюкоза - 25.3. The composition of the medium HPS, g / l: Na 2 HPO 4 1 2-water - 3.2; KH 2 PO 4 - 0.3; MgSO 4 - 0.5; NaCl - 0.5; peptone - 2.0; yeast extract - 0.05; glucose - 25.
4. Состав мелассной среды: 45 г/л мелассы кормовой (50% свекловичной и 50% кукурузной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л.4. The composition of the molasses medium: 45 g / l molasses fodder (50% beet and 50% corn molasses), K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l.
Результаты по количеству исследуемых микробных культур, полученные в лабораторных условиях при культивировании в различных питательных средах, представлены на рисунке 3, где по оси абсцисс указаны различные питательные среды, а по оси ординат - количество микроорганизмов.Results on the number of microbial cultures studied, obtained under laboratory conditions during cultivation in various nutrient media, are presented in Figure 3, where different nutrient media are indicated on the abscissa axis and the number of microorganisms on the ordinate axis.
В результате проведенного исследования наиболее эффективной оказалась мелассная среда, так как титр Lb. agilis составил 4,7×1010 КОЕ/мл. Менее эффективной оказалась среда для молочнокислых бактерий г. Углич - Lb. agilis - 8,7×109 КОЕ/мл. При выращивании лактобактерий на среде ГПС были получены следующие результаты: Lb. agilis - 2,7×109 КОЕ/мл, а на МРС: Lb. agilis - 2,0×109 КОЕ/мл.As a result of the study, the molasses medium turned out to be the most effective, since the titer Lb. agilis was 4.7 × 10 10 CFU / ml. The environment for lactic acid bacteria was less effective. Uglich - Lb. agilis - 8.7 × 10 9 CFU / ml. When growing lactobacilli on the environment HPS were obtained the following results: Lb. agilis - 2.7 × 10 9 CFU / ml, and on MPC: Lb. agilis - 2.0 × 10 9 CFU / ml.
Далее определяли оптимальную температуру культивирования испытуемых микроорганизмов с целью повышения титра клеток в наиболее короткие сроки. Представленные выше результаты культивирования получены при температуре выращивания 37°С.Next, we determined the optimal cultivation temperature of the tested microorganisms in order to increase the cell titer in the shortest possible time. The above cultivation results were obtained at a growing temperature of 37 ° C.
Была заложена серия опытов по определению максимальной термотолерантности данных культур при выращивании на мелассной среде №3 в течение 48 ч. Результаты зависимости количества клеток молочнокислых бацилл от температуры представлены на рисунках 4 и 5, где по оси абсцисс указано время культивирования микроорганизмов, а по оси ординат - количество микроорганизмов.A series of experiments was laid to determine the maximum thermotolerance of these crops when grown on molasses medium No. 3 for 48 hours. The results of temperature dependence of the number of lactic acid bacilli cells are presented in Figures 4 and 5, where the time of cultivation of microorganisms is indicated on the abscissa axis and - the number of microorganisms.
Итог культивирования при 39°С не представлен, так как при этой температуре ни одна культура не выявила роста относительно засевного титра. Однако после снижения температуры культивирования до 37°С рост восстановился в прежнем объеме, что свидетельствует о том, что культура не отмерла, а перешла в фазу задержки роста, продолжавшуюся до снижения температуры на 2-3°С.The result of cultivation at 39 ° C is not represented, since at this temperature no culture showed growth relative to the seed titer. However, after the cultivation temperature was reduced to 37 ° C, the growth was restored in the same volume, which indicates that the culture did not die off, but entered the phase of growth inhibition, which continued until the temperature decreased by 2-3 ° C.
На основании приведенных результатов культивирования на различных средах и при различных температурах установлено, что наибольший титр клеток достигался к 24 ч от начала выращивания независимо от состава сред. Более длительное выращивание и повышение температуры ведет к снижению титра и, как правило, увеличению количества нежизнеспособных клеток.Based on the results of cultivation on various media and at different temperatures, it was established that the highest cell titer was achieved by 24 hours from the start of the cultivation, regardless of the composition of the media. Longer growth and increase in temperature leads to a decrease in titer and, as a rule, an increase in the number of non-viable cells.
Результаты проведенных исследований показали, что наиболее эффективной питательной средой является мелассная среда следующего состава: 45 г/л мелассы кормовой (50% свекловичной и 50% кукурузной мелассы), К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, при этом оптимум температурного и временного режимов составляют 37°С и 24 ч, соответственно. Разработанная мелассная среда может быть использована в производственных условиях при дальнейшей разработки биопрепаратов для животноводства, в том числе птицеводства.The results of the studies showed that the most effective nutrient medium is molasses medium of the following composition: 45 g / l molasses feed (50% beet and 50% corn molasses), K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, while the optimum temperature and time regimes are 37 ° C and 24 h, respectively. The developed molasses environment can be used under production conditions during the further development of biological products for animal husbandry, including poultry farming.
Пример конкретного осуществления способа.An example of a specific implementation of the method.
Для повышения продуктивности перепелов использовали пробиотическую добавку на основе микроорганизмов Lactobacillus agilis. Для подбора оптимальной дозы использования пробиотической добавки был проведен научный эксперимент на перепелах японской породы.To increase the productivity of quails, a probiotic supplement based on microorganisms Lactobacillus agilis was used. To select the optimal dose of probiotic supplement use, a scientific experiment was conducted on quails of the Japanese breed.
Методом групп аналогов было сформировано пять групп перепелов по 20 голов в каждой: контрольная группа - в рационе присутствовал только основной полноценный комбикорм и питьевая вода; 1-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 0,2 мл/гол; 2-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 0,5 мл/гол; 3-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 1,0 мл/гол. Применение пробиотической добавки в опытных группах осуществлялось ежедневно (таблица 2).By the method of groups of analogues, five groups of quails of 20 animals each were formed: the control group - only the main complete feed and drinking water were present in the diet; The 1st experimental group - with the basic ration and drinking water to the bird, they also drank a probiotic supplement in a dose of 0.2 ml / goal; 2nd experimental group - with the basic ration and drinking water to the bird, they also drank a probiotic supplement in a dose of 0.5 ml / goal; The 3rd experimental group - with the basic ration and drinking water to the bird, also drank a probiotic supplement in a dose of 1.0 ml / goal. The use of probiotic supplements in the experimental groups was carried out daily (Table 2).
Перепела выращивались в полупромышленных многоярусных металлических клетках.Quails were grown in industrial multi-tier metal cages.
Результаты хозяйственных показателей при выращивании перепелов представлены в таблице 3.The results of economic indicators for growing quails are presented in table 3.
Результаты хозяйственных показателей при выращивании перепелов представлены в таблице 3.The results of economic indicators for growing quails are presented in table 3.
Как видно из таблицы, значительное повышение по живой массе перепелов в сравнении с группой контроля было выявлено на 21-е сутки во 2-й и 3-й опытных группах, соответственно, на 7,80 и 7,16%. На 28-е сутки во 2-й опытной группе живая масса перепелов была больше, чем в контроле на 13,46%, а в 3-й - на 14,21%. На 35-й день выращивания птицы значительное повышение живой массы наблюдалось во 2-й и 3-й опытных группах на 10,60 и 10,83%. Аналогичная тенденция в этих опытных группах по изучаемому показателю наблюдалась на 42-е сутки, в которой живая масса была выше на 9,12 и 9,75%. Необходимо отметить, что в 1-й опытной группе наблюдалось незначительное повышение живой массы за весь период выращивания.As can be seen from the table, a significant increase in live weight of quails in comparison with the control group was detected on the 21st day in the 2nd and 3rd experimental groups, respectively, at 7.80 and 7.16%. On the 28th day, in the 2nd experimental group, the live weight of quails was greater than in the control by 13.46%, and in the 3rd group - by 14.21%. On the 35th day of bird rearing, a significant increase in live weight was observed in the 2nd and 3rd experimental groups by 10.60 and 10.83%. A similar trend in these experimental groups for the studied indicator was observed on the 42nd day, in which the live weight was higher by 9.12% and 9.75%. It should be noted that in the 1st experimental group there was a slight increase in live weight over the entire growing period.
Сохранность перепелов во всех группах была одинакова и составила 100,0%. Прирост живой массы перепелов за весь период выращивания в опытных группах также был больше, чем в контрольной на 2,91; 9,45 и 10,10%.The safety of quails in all groups was the same and amounted to 100.0%. The increase in live weight of quails for the entire period of cultivation in the experimental groups was also greater than in the control group by 2.91; 9.45 and 10.10%.
Как видно из данных таблицы 3, с ростом живой массы опытных птиц повышается и потребление ими комбикормов. При этом затраты корма на 1 кг прироста живой массы в опытных группах оставались ниже, чем в контрольной на 2,01; 7,79; и 6,78%.As can be seen from the data of table 3, with an increase in the live weight of experimental birds, their consumption of compound feeds also increases. The cost of feed per 1 kg increase in live weight in the experimental groups remained lower than in the control by 2.01; 7.79; and 6.78%.
В целом, обосновать повышенную динамику живой массы перепелов в опытных группах, можно за счет положительного воздействия биопрепаратов на основе культур Lactobacillus agilis, которые способствуют лучшему усвоению энергии и питательных веществ комбикорма птицей.In general, to justify the increased dynamics of live weight of quails in the experimental groups, it is possible due to the positive effects of biological products based on Lactobacillus agilis cultures, which contribute to better absorption of energy and nutrients of the compound feed by poultry.
Таким образом, результаты испытаний показали, что выращивание перепелов с использованием разработанной пробиотической добавки на основе культуры вида Lactobacillus agilis, выделенная из ЖКТ перепела, а также выращенная на мелассной среде, в испытуемых дозах обеспечивает повышение продуктивности перепелов, что особенно выявлено в дозе 0,5 мл/гол.Thus, the test results showed that growing quails using the developed probiotic supplement based on the culture of the species Lactobacillus agilis, isolated from the gastrointestinal tract of quails, and also grown on a molasses medium, in test doses provides an increase in the productivity of quails, which was especially detected at a dose of 0.5 ml / goal.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018125799A RU2688429C1 (en) | 2018-07-12 | 2018-07-12 | Method of producing a probiotic additive for quail |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018125799A RU2688429C1 (en) | 2018-07-12 | 2018-07-12 | Method of producing a probiotic additive for quail |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2688429C1 true RU2688429C1 (en) | 2019-05-21 |
Family
ID=66636830
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018125799A RU2688429C1 (en) | 2018-07-12 | 2018-07-12 | Method of producing a probiotic additive for quail |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2688429C1 (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2752993C1 (en) * | 2020-11-03 | 2021-08-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method for feeding quails |
| RU2753363C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-08-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement |
| RU2757355C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-10-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method for producing a probiotic supplement for quails |
| RU2761882C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-12-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Medium for producing a probiotic supplement for poultry |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2412612C1 (en) * | 2009-12-29 | 2011-02-27 | ООО "Научно-технический центр биологических технологий в сельском хозяйстве" | Method for production of "ferm km" probiotic fodder additive for domestic animals and birds |
-
2018
- 2018-07-12 RU RU2018125799A patent/RU2688429C1/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2412612C1 (en) * | 2009-12-29 | 2011-02-27 | ООО "Научно-технический центр биологических технологий в сельском хозяйстве" | Method for production of "ferm km" probiotic fodder additive for domestic animals and birds |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства, КОЩАЕВ А. Г. и др. Научный журнал КУБГАУ, номер 128 (04), 2017 г. Найдено в Интернет: http://ej.kubagro.ru/2017/04/pdf/76.pdf. * |
| Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства, КОЩАЕВ А. Г. и др. Научный журнал КУБГАУ, номер 128 (04), 2017 г. Найдено в Интернет: http://ej.kubagro.ru/2017/04/pdf/76.pdf. Эффективность использования пробиотической добавки Трилактокор в рационе перепелов, КОЩАЕВ А. Г. и др. Биология и биотехнологиии, Аграрный вестник Урала номер 08 (162), 2017 г., с. 24-31. * |
| Эффективность использования пробиотической добавки Трилактокор в рационе перепелов, КОЩАЕВ А. Г. и др. Биология и биотехнологиии, Аграрный вестник Урала номер 08 (162), 2017 г., с. 24-31. * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2753363C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-08-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement |
| RU2757355C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-10-14 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method for producing a probiotic supplement for quails |
| RU2761882C1 (en) * | 2020-11-02 | 2021-12-13 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Medium for producing a probiotic supplement for poultry |
| RU2752993C1 (en) * | 2020-11-03 | 2021-08-11 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Method for feeding quails |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2689701C1 (en) | Quail growing method | |
| RU2688429C1 (en) | Method of producing a probiotic additive for quail | |
| RU2689680C1 (en) | Method of producing a probiotic additive | |
| CN101461453B (en) | Composite microbial feed additive for beasts and birds | |
| RU2689730C1 (en) | Method for quail feeding | |
| CN107312732B (en) | Probiotic feed additive | |
| CN104106726A (en) | New probiotic, and probiotic fermentation feed prepared by using it | |
| KR20210057813A (en) | Composition and method for reducing atmospheric methane and nitrous oxide emissions | |
| RU2686326C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of lactobacilli | |
| CN112779179A (en) | Weissella mesenteroides and application thereof | |
| RU2698213C1 (en) | Medium for production of probiotic additive for poultry | |
| CN111690574A (en) | Weissella mesenteroides and application thereof | |
| CN101805698A (en) | Preparation method of microbial compound preparation based on various probiotic fermenting cultures | |
| RU2652832C1 (en) | Method of feeding farm birds | |
| KR100541379B1 (en) | Animal feed additives and method of producing the same | |
| JP2001149023A (en) | Bioactive agent and animal feed additive using the same | |
| CN103652329A (en) | Compound probiotic biological agent | |
| CN106819625A (en) | A kind of mandarin fish fermented feed and preparation method thereof | |
| RU2352136C2 (en) | Feed additive based on beet pulp and method of producing feed additive through fermentation of beet pulp | |
| RU2756559C1 (en) | Method for growing quails | |
| RU2761882C1 (en) | Medium for producing a probiotic supplement for poultry | |
| RU2757355C1 (en) | Method for producing a probiotic supplement for quails | |
| RU2752993C1 (en) | Method for feeding quails | |
| RU2759703C1 (en) | Method for producing a probiotic supplement for poultry | |
| Paliy et al. | Enhanced cultivation technology for lacto and bifidobacteria |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20200713 |