RU2753363C1 - Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement - Google Patents

Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement Download PDF

Info

Publication number
RU2753363C1
RU2753363C1 RU2020136220A RU2020136220A RU2753363C1 RU 2753363 C1 RU2753363 C1 RU 2753363C1 RU 2020136220 A RU2020136220 A RU 2020136220A RU 2020136220 A RU2020136220 A RU 2020136220A RU 2753363 C1 RU2753363 C1 RU 2753363C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
pectin
nutrient medium
molasses
medium
resistance
Prior art date
Application number
RU2020136220A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Альбина Владимировна Лунева
Эдуард Джавадович Джавадов
Юрий Андреевич Лысенко
Андрей Георгиевич Кощаев
Анна Николаевна Гнеуш
Василий Иванович Дорожкин
Алий Юсуфович Шантыз
Мария Владимировна Анискина
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина"
Priority to RU2020136220A priority Critical patent/RU2753363C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2753363C1 publication Critical patent/RU2753363C1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Public Health (AREA)

Abstract

FIELD: biotechnology.
SUBSTANCE: method for resistance of lactic bacteria for a probiotic supplement involves cultivation of bacteria of the Lactobacillus agilis species on a nutrient medium containing feed molasses, K2HPO4, yeast extract, powdered apple pectin and water in specified amounts at a temperature of 30 to 40°C for 24 hours. The pectin therein is introduced into the nutrient medium at a temperature of the nutrient medium of 30 to 40°C.
EFFECT: invention allows improving the resistance of the biomass of the lactic bacteria on entering the gastrointestinal tract of a bird and to aggressive environmental conditions.
1 cl, 5 tbl

Description

Изобретение относится к микробиологии и сельскому хозяйству, а конкретно к способу повышения устойчивости микроорганизмов на основе молочнокислых бактерий для получения пробиотической добавки с целью повышения мясной продуктивности птицы.The invention relates to microbiology and agriculture, and specifically to a method for increasing the resistance of microorganisms based on lactic acid bacteria for obtaining a probiotic additive in order to increase the meat productivity of poultry.

Современное птицеводство многими путями решает проблему максимальной реализации биоресурсного потенциала птицы и сохранения при этом ее продуктивного здоровья. Ускорение динамики роста и повышение суточных приростов живой массы птицы при снижении экономических затрат на 1 кг прироста живой массы тела является одной из основных задач птицеводства.Modern poultry farming in many ways solves the problem of maximizing the biological resource potential of poultry and maintaining its productive health at the same time. Acceleration of growth dynamics and an increase in daily gains in poultry live weight with a decrease in economic costs per 1 kg of live weight gain is one of the main tasks of poultry farming.

Немаловажным показателем пробиотических свойств молочнокислой флоры является их способность колонизировать желудочно-кишечный тракт, а также их резистентность к биологическим жидкостям организма-хозяина (Выделение и отбор бактерий рода Lactobacillus - основы пробиотических препаратов / И.А. Буряко [и др.] // Пробиотики, пребиотики и синбиотики и функциональные продукты питания: мат. Междунар. конф. - М., 2004. - С. 19; Андрейчин, М.А. Антимикробные свойства желчи и желчных кислот / М.А. Андрейчин // Антибиотики. - 1980. - №25 (12). - С. 936-939; Петров, Л.Н. Основы конструирования пробиотиков повышенной терапевтической активности / Л.Н. Петров // Пробиот. микроорганизмы - современное состояние вопроса и перспективы использования: тез. докл. Междунар. науч.-практ. конф. - М., 2002. - С. 12). Последний показатель возможно визуализировать in vitro путем использования экспериментальных агрессивных сред (Кощаев, А.Г. Биотехнология производства и применение функциональных кормовых добавок для птицы: дис…. докт. биол. наук: 16.00.04 / Кощаев Андрей Георгиевич. - 2008. - 425 с.).An important indicator of the probiotic properties of lactic acid flora is their ability to colonize the gastrointestinal tract, as well as their resistance to biological fluids of the host organism (Isolation and selection of bacteria of the genus Lactobacillus - the basis of probiotic preparations / IA Buryako [et al.] // Probiotics , prebiotics and synbiotics and functional foodstuffs: Mat.International Conf. - M., 2004. - P. 19; Andreichin, M. A. Antimicrobial properties of bile and bile acids / M. A. Andreichin // Antibiotics. - 1980 - No. 25 (12). - P. 936-939; Petrov, LN Fundamentals of designing probiotics with increased therapeutic activity / LN Petrov // Probiotic microorganisms - current state of the art and prospects for use: abstracts of reports. International scientific-practical conference - M., 2002. - P. 12). The last indicator can be visualized in vitro by using experimental aggressive media (Koshchaev, A.G. Biotechnology of production and use of functional feed additives for poultry: dis .... Doctor of Biological Sciences: 16.00.04 / Koshchaev Andrey Georgievich. - 2008. - 425 with.).

Известен способ, предусматривающий внесение в питательную среду пектина из расчета 5-6 г/л (0,5-0,6%), обеспечивающего накопление биомассы микроорганизмов и придачу кисломолочному продукту пре-биотических свойств (Патент РФ №2023396, МПК А23С 9/12, А23С 9/127, 02.03.1993 г.).The known method provides for the introduction of pectin into the nutrient medium at the rate of 5-6 g / l (0.5-0.6%), which ensures the accumulation of biomass of microorganisms and the addition of pre-biotic properties to the fermented milk product (RF Patent No. 2023396, IPC А23С 9 / 12, A23C 9/127, 03/02/1993).

Недостатком способа является отсутствие информации о виде пектина, его консистенции, при какой температуре он добавляется, что в целом не может гарантировать положительный результат.The disadvantage of this method is the lack of information about the type of pectin, its consistency, at what temperature it is added, which in general cannot guarantee a positive result.

Известен способ предусматривающий применение в составе рациона перепелов пробиотической добавки, состоящей из мелассы кормовой, К2НРО4, дрожжевого экстракта и воды (Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных штаммов лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства / А.Г. Кощаев, Ю.А. Лысенко, Мищенко В.А. [и др.] // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2017. - №04 (128). - С. 1102-1115).The known method provides for the use of a probiotic additive in the diet of quails, consisting of fodder molasses, K 2 HPO 4 , yeast extract and water (Intensification of the cultivation process of physiologically adapted strains of lactobacilli as the basis for creating biological products of microbial origin for poultry farming / A.G. Koschaev, Yu. A. Lysenko, Mishchenko V.A.

Наиболее близким является техническое решение, в котором используют питательную среду для культивирования Lactobacillus agilis, состоящей из мелассы кормовой, К2НРО4 и дрожжевого экстракта (Патент РФ №2686326, МПК C12N 1/20, А61К 35/74, А61Р 43/00, 25.04.2019 г.).The closest is the technical solution, which uses a nutrient medium for the cultivation of Lactobacillus agilis, consisting of fodder molasses, K 2 HPO 4 and yeast extract (RF Patent No. 2686326, IPC C12N 1/20, A61K 35/74, A61P 43/00, 04/25/2019).

Недостатком данного способа является то, что при использовании данной пробиотической добавки в рационе птицы будет происходить гибель живой культуры микроорганизма из-за агрессивной среды желудочно-кишечного тракта.The disadvantage of this method is that when this probiotic supplement is used in the diet of a bird, the living culture of the microorganism will die due to the aggressive environment of the gastrointestinal tract.

Техническим результатом является повышение устойчивости молочнокислых культур, за счет использования в питательной среде порошкообразного яблочного пектина.The technical result is to increase the stability of lactic acid cultures, due to the use of powdered apple pectin in the nutrient medium.

Технический результат достигается тем, что в способе повышения устойчивости лактобактерий, в питательную среду для культивирования Lactobacillus agilis, состоящей из мелассы кормовой, К2НРО4, дрожжевого экстракта и воды, согласно изобретению при температуре 30-40°С питательной среды добавляют порошкообразный яблочный пектин из расчета 2,0-4,0 г на 1 литр воды.The technical result is achieved by the fact that in the method of increasing the resistance of lactobacilli, powdered apple pectin is added to the nutrient medium for the cultivation of Lactobacillus agilis, consisting of fodder molasses, K 2 HPO 4 , yeast extract and water, according to the invention at a temperature of 30-40 ° C of the nutrient medium at the rate of 2.0-4.0 g per 1 liter of water.

Новизна заявляемого технического решения обусловлена тем, что используется мелассная среда, отличающаяся включением в ее состав порошкообразного яблочного пектина из расчета 2,0-4,0 г на 1 литр воды при температуре 30-40°С для равномерного распределения и полного растворения.The novelty of the proposed technical solution is due to the fact that a molasses medium is used, characterized by the inclusion of powdered apple pectin in its composition at the rate of 2.0-4.0 g per 1 liter of water at a temperature of 30-40 ° C for uniform distribution and complete dissolution.

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».The features that distinguish the claimed technical solution from the prototype are aimed at achieving a technical result and have not been identified in the study of this and related fields of science and technology and, therefore, correspond to the criterion of "inventive step".

Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемых технических решений критерию «новизна».These differences allow us to conclude that the proposed technical solutions meet the "novelty" criterion.

Соответствие заявляемого решения критерию патентоспособности «промышленная применимость» обусловлено тем, что предлагаемое техническое решение работоспособно и возможно его использование в качестве пробиотической добавки для сельскохозяйственной птицы.Compliance of the proposed solution with the criterion of patentability "industrial applicability" is due to the fact that the proposed technical solution is efficient and can be used as a probiotic additive for poultry.

Способ повышения устойчивости лактобактерий воспроизводится следующим образом.The method for increasing the resistance of lactobacilli is reproduced as follows.

Культивирование микроорганизмов Lactobacillus agilis осуществляют в среде, состоящей из мелассы кормовой - 45,0 г, К2НРО4 - 2,0 г, дрожжевого экстракта - 0,02 г и порошкообразного яблочного пектина, взятого в количестве 3,0 г в расчете на 1 литр воды и внесенного в питательную среду при температуре 30-40°С для равномерного его распределения и полного растворения. Затем в полученную смесь добавляют микроорганизмы Lactobacillus agilis с титром не менее 1,0×105КОЕ/мл в количестве 100,0 г/л и культивируют при температуре 37°С, в течение 24 ч.The cultivation of microorganisms Lactobacillus agilis is carried out in a medium consisting of fodder molasses - 45.0 g, K 2 HPO 4 - 2.0 g, yeast extract - 0.02 g and powdered apple pectin, taken in an amount of 3.0 g per 1 liter of water and introduced into the nutrient medium at a temperature of 30-40 ° C for its uniform distribution and complete dissolution. Then, Lactobacillus agilis microorganisms with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml in an amount of 100.0 g / L are added to the resulting mixture and cultured at 37 ° C for 24 hours.

При использовании порошкообразного яблочного пектина в количестве менее 3,0 г/л, не будет обеспечиваться максимальной жизнеспособности культур в пробиотической добавке.When using powdered apple pectin in an amount of less than 3.0 g / L, the maximum viability of the crops in the probiotic supplement will not be ensured.

При использовании порошкообразного яблочного пектина в количестве более 3,0 г/л, достигается та же жизнеспособность культур в пробиотической добавке, поэтому не имеет смысла брать большее количество.When using powdered apple pectin in an amount of more than 3.0 g / l, the same crop viability is achieved in the probiotic supplement, so it makes no sense to take more.

При внесении порошкообразного яблочного в питательную среду при температуре ниже 30°С не происходит его полного растворения и равномерного распределения, что соответственно не приводит к желаемому эффекту для микроорганизмов.When powdered apple is introduced into the nutrient medium at a temperature below 30 ° C, its complete dissolution and uniform distribution does not occur, which, accordingly, does not lead to the desired effect for microorganisms.

При внесении порошкообразного яблочного пектина в питательную среду при температуре выше 40°С происходит частичное разрушение пектина, что соответственно не приводит к желаемому эффекту для микроорганизмов.When powdered apple pectin is introduced into the nutrient medium at temperatures above 40 ° C, the pectin is partially destroyed, which, accordingly, does not lead to the desired effect for microorganisms.

Первый этап исследований включает изучение выращивания бактерий на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов без применения пектина. Устойчивость лактобактерий визуализировали по наличию или отсутствию роста изучаемой микрофлоры в жидкой питательной среде (мелассной), содержащей натуральный желудочный сок лошади (препарат «Эквин», 90%), желчь крупного рогатого скота медицинская консервированная (20%, 30%, 40%), фенол (0,4%) и NaCl (2%, 4%). Время выращивания культуры составляло 48 ч, температурный оптимум 37°С.The first stage of research includes the study of growing bacteria on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition without the use of pectin. The resistance of lactobacilli was visualized by the presence or absence of growth of the studied microflora in a liquid nutrient medium (molasses) containing natural horse gastric juice (Equin preparation, 90%), medical canned bile of cattle (20%, 30%, 40%), phenol (0.4%) and NaCl (2%, 4%). The cultivation time of the culture was 48 h, the temperature optimum was 37 ° C.

Результаты по влиянию агрессивных сред на выживаемость лактобактерий без применения полисахаридного компонента (пектина) представлены в таблице 1.The results on the effect of aggressive media on the survival of lactobacilli without the use of the polysaccharide component (pectin) are presented in Table 1.

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

Результаты исследований показали, что культуры изучаемых лактобактерий проявили хороший рост только на среде с содержанием 2,0 и 4,0% хлорида натрия, а также при наличии в среде желчи в концентрации 20%. Незначительный рост дала культура на питательной среде, содержащей 30% желчи. В остальных случаях рост исследуемой культуры не проявился.The research results showed that the cultures of the studied lactobacilli showed good growth only on a medium containing 2.0 and 4.0% sodium chloride, as well as in the presence of bile in the medium at a concentration of 20%. A slight growth was given by a culture on a nutrient medium containing 30% bile. In other cases, the growth of the studied culture did not appear.

Следующим этапом исследований является обоснование использования порошкообразного яблочного и цитрусового пектинов для выращивания Lactobacillus agilis на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов. Выбор пектинов обусловлен тем, что на данные пектины существует стандарт, позволяющий их применять для пищевых целей («ГОСТ 29186-91. Пектин. Технические условия»).The next stage of research is the substantiation of the use of powdered apple and citrus pectins for growing Lactobacillus agilis on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition. The choice of pectins is due to the fact that there is a standard for these pectins that allows them to be used for food purposes ("GOST 29186-91. Pectin. Specifications").

Для проведения эксперимента микроорганизмы Lactobacillus agilis выращивали на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов с применением различных доз порошкообразного яблочного пектина:For the experiment, Lactobacillus agilis microorganisms were grown on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition using various doses of powdered apple pectin:

1. Состав среды №1: 45 г/л мелассы кормовой, K2HPO4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 1,0 г/л.1. Composition of medium No. 1: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 1.0 g / l.

2. Состав среды №2: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 2,0 г/л.2. Composition of medium No. 2: 45 g / l of fodder molasses, K 2 NRO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 2.0 g / l.

3. Состав среды №3: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 3,0 г/л.3. Composition of medium No. 3: 45 g / l of fodder molasses, K 2 NRO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 3.0 g / l.

4. Состав среды №4: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 4,0 г/л.4. Composition of medium No. 4: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 4.0 g / l.

5. Состав среды №5: 45 г/л мелассы кормовой, К2HPO4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 5,0 г/л.5. Composition of medium No. 5: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 5.0 g / l.

Результаты влияния различных доз полисахарида растительного происхождения (яблочного пектина) на устойчивость лактобактерий Lactobacillus agilis к агрессивным средам представлены в таблице 2.The results of the influence of various doses of a polysaccharide of plant origin (apple pectin) on the resistance of lactobacilli Lactobacillus agilis to aggressive environments are presented in Table 2.

Figure 00000003
Figure 00000003

Из таблицы 2 видно, что наилучшие результаты исследований проявились с применением в составе питательной среды, на которой выращивали изучаемые лактобактерий, яблочного пектина в дозе - 3,0; 4,0 и 5,0 г/л. В дозе 2,0 г/л яблочного пектина в составе мелассной среды выявлена устойчивость ко всем растворам NaCl и желчи, также незначительный рост в среде, содержащей 0,4% фенола, однако наблюдалось отсутствие роста в желудочном соке. При дозе 1,0 г/л яблочного пектина в составе питательной среды выявлена жизнеспособность как без отсутствия пектина.Table 2 shows that the best research results were manifested with the use in the composition of the nutrient medium on which the studied lactobacilli were grown, apple pectin at a dose of 3.0; 4.0 and 5.0 g / l. At a dose of 2.0 g / l of apple pectin in the molasses medium, resistance to all solutions of NaCl and bile was revealed, as well as an insignificant growth in a medium containing 0.4% phenol, however, there was no growth in gastric juice. At a dose of 1.0 g / l of apple pectin in the nutrient medium, the viability was revealed as without the absence of pectin.

Третьим этапом исследований является изучение выращивания Lactobacillus agilis на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов с применением различных доз порошкообразного цитрусового пектина:The third stage of research is the study of the cultivation of Lactobacillus agilis on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition using various doses of powdered citrus pectin:

1. Состав среды №1: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 1,0 г/л.1. Composition of medium No. 1: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 1.0 g / l.

2. Состав среды №2: 45 г/л мелассы кормовой, К2HPO4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 2,0 г/л.2. Composition of medium No. 2: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 2.0 g / l.

3. Состав среды №3: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 3,0 г/л.3. Composition of medium No. 3: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 3.0 g / l.

4. Состав среды №4: 45 г/л мелассы кормовой, К2HPO4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 4,0 г/л.4. Composition of medium No. 4: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 4.0 g / l.

5. Состав среды №5: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 5,0 г/л.5. Composition of medium No. 5: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 5.0 g / l.

Результаты влияния различных доз полисахарида растительного происхождения (цитрусового пектина) на устойчивость лактобактерий Lactobacillus agilis к агрессивным средам представлены в таблице 3.The results of the influence of various doses of a polysaccharide of plant origin (citrus pectin) on the resistance of lactobacillus Lactobacillus agilis to aggressive environments are presented in Table 3.

Figure 00000004
Figure 00000004

Figure 00000005
Figure 00000005

Из таблицы 3 видно, что наилучшие результаты исследований проявились с применением в составе питательной среды, на которой выращивали изучаемые лактобактерий, цитрусового пектина в дозе - 5,0 г/л.Table 3 shows that the best research results were manifested with the use of citrus pectin in the composition of the nutrient medium on which the studied lactobacilli were grown at a dose of 5.0 g / l.

Результаты проведенных исследований показали, что наиболее эффективной и оптимальной питательной средой является мелассная среда следующего состава: 45 г/л мелассы кормовой, К2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, порошкообразного яблочного пектина - 3,0 г/л и остальное вода. Разработанная пробиотическая добавка может быть использована в производственных условиях при кормлении сельскохозяйственной птицы, в частности для перепелов.The results of the studies showed that the most effective and optimal nutrient medium is molasses medium of the following composition: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, powdered apple pectin - 3 , 0 g / l and the rest is water. The developed probiotic additive can be used in production conditions when feeding poultry, in particular for quails.

Для доказательства эффективности полученной пробиотической добавки на основе микроорганизмов Lactobacillus agilis, выращенных на мелассной среде с добавлением порошкообразного яблочного пектина были проведены научные исследования на перепелах породы Фараон.To prove the effectiveness of the obtained probiotic supplement based on microorganisms Lactobacillus agilis, grown on molasses medium with the addition of powdered apple pectin, scientific studies were carried out on quails of the Pharaoh breed.

Методом групп аналогов было сформировано пять групп перепелов по 90 голов в каждой: контрольная группа - в рационе присутствовал только основной полноценный комбикорм и питьевая вода; 1-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали разработанную пробиотическую добавку в дозе 0,25 мл/гол; 2-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 0,5 мл/гол; 3-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 0,75 мл/гол; 4-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 1,0 мл/гол. Применение пробиотической добавки в опытных группах осуществлялось ежедневно (таблица 4).Using the method of analog groups, five groups of quails, 90 heads in each, were formed: control group - only the main complete feed and drinking water were present in the diet; Experimental group 1 - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank the developed probiotic supplement at a dose of 0.25 ml / head; 2nd experimental group - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank a probiotic supplement at a dose of 0.5 ml / head; The 3rd experimental group - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank a probiotic supplement at a dose of 0.75 ml / head; Experimental group 4 - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank a probiotic supplement at a dose of 1.0 ml / bird. The application of the probiotic supplement in the experimental groups was carried out daily (table 4).

Figure 00000006
Figure 00000006

Перепела выращивались в полупромышленных многоярусных металлических клетках.Quails were raised in semi-industrial multi-tiered metal cages.

Результаты хозяйственных показателей при выращивании перепелов представлены в таблице 5.The results of economic indicators for growing quail are presented in table 5.

Figure 00000007
Figure 00000007

Как видно из таблицы 5, статистически достоверное повышение по живой массе перепелов в сравнении с группой контроля, было выявлено на 21-е сутки в 1-й, 2-й, 3-й и 4-й опытных группах, соответственно, на 5,83; 7,76; 7,80 и 7,16% (Р<0,05). На 28-сутки в 1-й опытной группе живая масса перепелов была больше, чем в контроле на 13,07%, во 2-й на 9,05%, в 3-й - 13,46% при достоверной разнице (Р<0,05). На 35-й день выращивания птицы достоверное повышение живой массы наблюдалось в 1-й, 3-й и 4-й опытных группах на 10,23; 10,60 и 10,83% (Р<0,05). Аналогичная тенденция в 1-й, 3-й и 4-й опытных группах по изучаемому показателю наблюдалась на 42-е сутки, в которых по сравнению с контрольной группой живая масса была достоверно больше на 8,11; 9,12 и 9,75% (Р<0,05).As can be seen from table 5, a statistically significant increase in the live weight of quails in comparison with the control group was revealed on the 21st day in the 1st, 2nd, 3rd and 4th experimental groups, respectively, by 5, 83; 7.76; 7.80 and 7.16% (P <0.05). On the 28th day in the 1st experimental group, the live weight of quails was more than in the control by 13.07%, in the 2nd by 9.05%, in the 3rd - 13.46% with a significant difference (P < 0.05). On the 35th day of poultry rearing, a significant increase in live weight was observed in the 1st, 3rd and 4th experimental groups by 10.23; 10.60 and 10.83% (P <0.05). A similar trend in the 1st, 3rd and 4th experimental groups according to the studied parameter was observed on the 42nd day, in which, in comparison with the control group, the live weight was significantly higher by 8.11; 9.12 and 9.75% (P <0.05).

Сохранность перепелов во всех опытных группах была выше, чем в контрольной на 6,66; 13,33; 5,55 и 14,44%.The safety of quails in all experimental groups was higher than in the control by 6.66; 13.33; 5.55 and 14.44%.

Прирост живой массы перепелов за весь период выращивания в 1-4-й опытных группах также был больше, чем в контрольной на 2,21; 9,45; 2,91 и 10,10%.The increase in the live weight of quails for the entire growing period in the 1st-4th experimental groups was also more than in the control by 2.21; 9.45; 2.91 and 10.10%.

Как видно из таблицы 5, с ростом живой массы опытных птиц повышается и потребление ими комбикормов. При этом затраты кормов на 1 кг прироста живой массы в опытных группах оставались ниже, чем в контрольной на 1,26; 7,79; 2,01 и 7,54%.As can be seen from Table 5, with the growth of the live weight of the experimental birds, the consumption of compound feed by them also increases. At the same time, feed costs per 1 kg of live weight gain in the experimental groups remained lower than in the control by 1.26; 7.79; 2.01 and 7.54%.

Таким образом, результаты испытаний показали, что выращивание перепелов с использованием разработанной пробиотической добавки на основе культуры Lactobacillus agilis, а также выращенная на мелассной среде с добавлением порошкообразного яблочного пектина, в испытуемых дозах обеспечивает повышение продуктивности перепелов, за счет повышения устойчивости микроорганизмов Lactobacillus agilis к агрессивным средам ЖКТ птицы.Thus, the test results showed that raising quails using the developed probiotic supplement based on the culture of Lactobacillus agilis, as well as grown on molasses medium with the addition of powdered apple pectin, in the tested doses provides an increase in the productivity of quails by increasing the resistance of microorganisms Lactobacillus agilis to aggressive poultry gastrointestinal tract environments.

Claims (1)

Способ повышения устойчивости лактобактерий для пробиотической добавки, включающий использование питательной среды для культивирования микроорганизмов Lactobacillus agilis, состоящей из мелассы кормовой, К2НРО4, дрожжевого экстракта и воды, отличающийся тем, что в питательную среду при температуре 30-40°С добавляют порошкообразный яблочный пектин из расчета 2,0-4,0 г на 1 литр воды.A method for increasing the resistance of lactobacilli for a probiotic supplement, including the use of a nutrient medium for the cultivation of microorganisms Lactobacillus agilis, consisting of feed molasses, K 2 HPO 4 , yeast extract and water, characterized in that powdered apple is added to the nutrient medium at a temperature of 30-40 ° C. pectin at the rate of 2.0-4.0 g per 1 liter of water.
RU2020136220A 2020-11-02 2020-11-02 Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement RU2753363C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020136220A RU2753363C1 (en) 2020-11-02 2020-11-02 Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020136220A RU2753363C1 (en) 2020-11-02 2020-11-02 Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2753363C1 true RU2753363C1 (en) 2021-08-13

Family

ID=77349093

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020136220A RU2753363C1 (en) 2020-11-02 2020-11-02 Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2753363C1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2686326C1 (en) * 2018-07-11 2019-04-25 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" Nutrient medium for cultivation of lactobacilli
RU2688429C1 (en) * 2018-07-12 2019-05-21 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" Method of producing a probiotic additive for quail

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2686326C1 (en) * 2018-07-11 2019-04-25 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" Nutrient medium for cultivation of lactobacilli
RU2688429C1 (en) * 2018-07-12 2019-05-21 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" Method of producing a probiotic additive for quail

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
КОЩАЕВ А.Г. и др. Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства, Научный журнал, КубГАУ, 2017, 128 (04), с. 1-14. *
КОЩАЕВ А.Г. и др. Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства, Научный журнал, КубГАУ, 2017, 128 (04), с. 1-14. КОЩАЕВ А.Г. и др. Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных штаммов лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства, Политематический сетевой электронный журнал Кубанского государственного аграрного университета, 2017, N 4 (128), с. 1102-1115.. *
КОЩАЕВ А.Г. и др. Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных штаммов лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства, Политематический сетевой электронный журнал Кубанского государственного аграрного университета, 2017, N 4 (128), с. 1102-1115.. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101278702B (en) Novel microbial feed additive and method of producing the same
CN107047934A (en) Using bacillus subtilis strain to strengthen the method for animal health
CN107312732B (en) Probiotic feed additive
RU2689701C1 (en) Quail growing method
CN112779179A (en) Weissella mesenteroides and application thereof
RU2688429C1 (en) Method of producing a probiotic additive for quail
CN107354097B (en) Lactobacillus preservative for improving survival rate of liquid lactobacillus at normal temperature and application thereof
RU2689680C1 (en) Method of producing a probiotic additive
CN101199558A (en) Compound probiotics for poultry and preparing method thereof
CN101884394B (en) Composite microbial feed additive for chicken and preparation method thereof
RU2689730C1 (en) Method for quail feeding
CN111690574A (en) Weissella mesenteroides and application thereof
RU2652832C1 (en) Method of feeding farm birds
CN112760246A (en) Weissella mesenteroides and application thereof
RU2698213C1 (en) Medium for production of probiotic additive for poultry
RU2686326C1 (en) Nutrient medium for cultivation of lactobacilli
CN107043724B (en) Bacillus licheniformis and separation method and application thereof
CN109439560A (en) A kind of mixed fermentation probiotics method containing bacillus coagulans
RU2753363C1 (en) Method for increasing resistance of lactic bacteria for probiotic supplement
CN103652329A (en) Compound probiotic biological agent
RU2753359C1 (en) Method for increasing viability of lactobacilli
CN107058181B (en) Bacillus subtilis and separation method and application thereof
RU2756559C1 (en) Method for growing quails
RU2759703C1 (en) Method for producing a probiotic supplement for poultry
RU2759305C1 (en) Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria