RU2759305C1 - Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria - Google Patents

Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria Download PDF

Info

Publication number
RU2759305C1
RU2759305C1 RU2020136177A RU2020136177A RU2759305C1 RU 2759305 C1 RU2759305 C1 RU 2759305C1 RU 2020136177 A RU2020136177 A RU 2020136177A RU 2020136177 A RU2020136177 A RU 2020136177A RU 2759305 C1 RU2759305 C1 RU 2759305C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
molasses
nutrient medium
microorganisms
pectin
cultivation
Prior art date
Application number
RU2020136177A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Юрий Андреевич Лысенко
Андрей Георгиевич Кощаев
Александр Николаевич Панин
Альбина Владимировна Лунева
Анна Николаевна Гнеуш
Александра Юрьевна Жучок
Алий Юсуфович Шантыз
Александр Иванович Клименко
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" filed Critical Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина"
Priority to RU2020136177A priority Critical patent/RU2759305C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2759305C1 publication Critical patent/RU2759305C1/en

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Fodder In General (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: agriculture.
SUBSTANCE: invention relates to microbiology and agriculture. The nutrient medium for cultivation of microorganisms of the Lactobacillus genus comprises beet molasses, corn molasses, K2HPO4, a yeast extract, apple pectin, microorganisms of the Lactobacillus genus, and water in a predetermined ratio.
EFFECT: invention provides a possibility to increase the yield of microorganisms of the Lactobacillus genus.
1 cl, 5 tbl

Description

Изобретение относится к микробиологии и сельскому хозяйству, а конкретно к способу культивированию микроорганизмов на основе молочнокислых бактерий для получения пробиотической добавки с целью повышения мясной продуктивности перепелов.The invention relates to microbiology and agriculture, and specifically to a method for the cultivation of microorganisms based on lactic acid bacteria to obtain a probiotic supplement in order to increase the meat productivity of quail.

Современное птицеводство многими путями решает проблему максимальной реализации биоресурсного потенциала птицы и сохранения при этом ее продуктивного здоровья. Ускорение динамики роста и повышение суточных приростов живой массы птицы при снижении экономических затрат на 1 кг прироста живой массы тела является одной из основных задач птицеводства, в частности, перепеловодства.Modern poultry farming in many ways solves the problem of maximizing the biological resource potential of poultry and maintaining its productive health at the same time. Acceleration of growth dynamics and an increase in daily gains in poultry live weight with a decrease in economic costs per 1 kg of live weight gain is one of the main tasks of poultry farming, in particular, quail farming.

Известен способ, предусматривающий внесение в питательную среду пектина из расчета 5-6 г/л (0,5-0,6%), обеспечивающего накопление биомассы микроорганизмов и придачу кисломолочному продукту пребиотических свойств (Патент РФ №2023396, МПК А23С 9/12, А23С 9/127, 02.03.1993 г.).The known method provides for the introduction of pectin into the nutrient medium at the rate of 5-6 g / l (0.5-0.6%), which ensures the accumulation of biomass of microorganisms and the addition of prebiotic properties to the fermented milk product (RF Patent No. 2023396, IPC А23С 9/12, А23С 9/127, 03/02/1993).

Недостатком способа является отсутствие информации о виде пектина, его консистенции, при какой температуре он добавляется, что в целом не может гарантировать положительный результат.The disadvantage of this method is the lack of information about the type of pectin, its consistency, at what temperature it is added, which in general cannot guarantee a positive result.

Известен способ предусматривающий применение в составе рациона перепелов пробиотической добавки, состоящей из мелассы кормовой, K2НРО4 дрожжевого экстракта и воды (Интенсификация процесса культивирования физиологически-адаптированных штаммов лактобацилл как основа создания биопрепаратов микробного происхождения для птицеводства / А.Г. Кощаев, Ю.А. Лысенко, Мищенко В.А. [и др.] // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2017. - №04 (128). - С. 1102-1115).The known method provides for the use of a probiotic additive in the diet of quails, consisting of fodder molasses, K 2 HPO 4 yeast extract and water (Intensification of the cultivation process of physiologically adapted strains of lactobacilli as the basis for creating biological products of microbial origin for poultry farming / A.G. Koschaev, Yu. A. Lysenko, Mishchenko V.A. [et al.] // Polythematic network electronic scientific journal of the Kuban State Agrarian University. - 2017. - No. 04 (128). - P. 1102-1115).

Наиболее близким является техническое решение, в котором используют питательную среду для культивирования лактобактерий, состоящей из следующих соотношений исходных компонентов (г/л): меласса свекловичная (22-23), меласса кукурузная (22-23), K2НРО4 (2,0), дрожжевой экстракт (0,02), микроорганизмы Lactobacillus agilis с титром не менее 1,0×105 КОЕ/мл (99-101), остальное вода (Патент РФ №2686326, МПК C12N 1/20, A61K 35/74, А61Р 43/00, 25.04.2019 г.).The closest is a technical solution in which a nutrient medium for the cultivation of lactobacilli is used, consisting of the following ratios of the initial components (g / l): beet molasses (22-23), corn molasses (22-23), K 2 HPO 4 (2, 0), yeast extract (0.02), microorganisms Lactobacillus agilis with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml (99-101), the rest is water (RF Patent No. 2686326, IPC C12N 1/20, A61K 35 / 74, A61R 43/00, 04/25/2019).

Недостатком данного способа является то, что при использовании данной пробиотической добавки в рационе птицы будет происходить гибель живой культуры микроорганизма из-за агрессивной среды желудочно-кишечного тракта.The disadvantage of this method is that when this probiotic supplement is used in the diet of a bird, a living culture of a microorganism will die due to the aggressive environment of the gastrointestinal tract.

Техническим результатом является повышение жизнеспособности молочнокислых культур, являющиеся представителями естественной микрофлоры ЖКТ диких перепелов, за счет использования в питательной среде порошкообразного яблочного пектина.The technical result is to increase the viability of lactic acid cultures, which are representatives of the natural microflora of the digestive tract of wild quails, due to the use of powdered apple pectin in the nutrient medium.

Технический результат достигается тем, что в питательной среде для культивирования лактобактерий, состоящей из мелассы кормовой, K2НРО4, дрожжевого экстракта и воды, согласно изобретению в питательную среду при температуре 30-40°C добавляют порошкообразный яблочный пектин и вводят микроорганизмы Lactobacillus brevis В-13079 с титром не менее 1,0×105 КОЕ/мл при следующем соотношении исходных компонентов, г/л:The technical result is achieved by the fact that in the nutrient medium for the cultivation of lactobacilli, consisting of fodder molasses, K 2 HPO 4 , yeast extract and water, according to the invention, powdered apple pectin is added to the nutrient medium at a temperature of 30-40 ° C and microorganisms Lactobacillus brevis B are introduced -13079 with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml with the following ratio of the starting components, g / l:

Меласса свекловичная - 22-23Beet molasses - 22-23

Меласса кукурузная - 22-23Corn molasses - 22-23

K2НРО4 - 2,0K 2 NRO 4 - 2.0

Дрожжевой экстракт - 0,02Yeast extract - 0.02

Пектин яблочный - 2,0-4,0Apple pectin - 2.0-4.0

Микроорганизмы Lactobacillus brevis В-13079 с титром не менее 1,0×105 Microorganisms Lactobacillus brevis B-13079 with a titer of at least 1.0 × 10 5

КОЕ/мл - 99-101CFU / ml - 99-101

Вода - остальноеWater is the rest

Новизна заявляемого технического решения обусловлена тем, что используется мелассная среда, включающая в свой состав яблочный пектин (2,0-4,0 г/л), для выращивания молочнокислых микроорганизмов - Lactobacillus brevis В-13079, которые независимыми микробиологическим методом, методом количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени и метагеномными методами были выделены из ЖКТ диких перепелов (Сравнительный анализ и пробиотический потенциал новых штаммов рода Lactobacillus из эволюционно закрепленных ассоциаций желудочно-кишечного тракта дикой птицы / В.В. Радченко, Е.В. Ильницкая, Т.М. Шуваева, М.В. Александрова, А.В. Лунева, Ю.А. Лысенко, Н.Ю. Басова, А.Н. Некрасов, А.Г. Кощаев // Биофармацевтический журнал. - 2020. - Т. 12. №1. - С. 44-49).The novelty of the proposed technical solution is due to the fact that molasses medium is used, which includes apple pectin (2.0-4.0 g / l), for growing lactic acid microorganisms - Lactobacillus brevis B-13079, which are independent microbiological method, quantitative polymerase chain reactions in real time and metagenomic methods were isolated from the digestive tract of wild quails (Comparative analysis and probiotic potential of new strains of the genus Lactobacillus from evolutionarily fixed associations of the gastrointestinal tract of wild birds / V.V. Radchenko, E.V. Ilnitskaya, T.M. Shuvaeva, M.V. Aleksandrova, A.V. Luneva, Yu.A. Lysenko, N.Yu.Basova, A.N. Nekrasov, A.G. Koschaev // Biopharmaceutical Journal. - 2020. - V. 12 . No. 1. - S. 44-49).

Признаки, отличающие заявляемое техническое решение от прототипа, направлены на достижение технического результата и не выявлены при изучении данной и смежной областей науки и техники и, следовательно, соответствуют критерию «изобретательский уровень».The features that distinguish the claimed technical solution from the prototype are aimed at achieving a technical result and have not been identified in the study of this and related fields of science and technology and, therefore, correspond to the criterion of "inventive step".

Эти отличия позволяют сделать вывод о соответствии заявляемых технических решений критерию «новизна».These differences allow us to conclude that the proposed technical solutions meet the “novelty” criterion.

Соответствие заявляемого решения критерию патентоспособности «промышленная применимость» обусловлено тем, что предлагаемое техническое решение работоспособно и возможно его использование для выращивания перепелов.Compliance of the proposed solution with the criterion of patentability "industrial applicability" is due to the fact that the proposed technical solution is efficient and can be used for raising quails.

Питательная среда для культивирования лактобактерий воспроизводится следующим образом.The nutrient medium for the cultivation of lactobacilli is reproduced as follows.

Культивирование микроорганизмов Lactobacillus brevis В-13079 осуществляют в среде, состоящей из мелассы кормовой - 45,0 г, K2НРО4 - 2,0 г, дрожжевого экстракта - 0,02 г и порошкообразного яблочного пектина, взятого в количестве 3,0 г в расчете на 1 литр воды при этом добавленного в питательную среду при температуре 30-40°C для равномерного его распределения и полного растворения. Затем в полученную смесь добавляют микроорганизмы Lactobacillus brevis В-13079 с титром не менее 1,0×105 КОЕ/мл в количестве 100,0 г/л и культивируют при температуре 37°C, в течение 24 ч.The cultivation of microorganisms Lactobacillus brevis B-13079 is carried out in a medium consisting of fodder molasses - 45.0 g, K 2 HPO 4 - 2.0 g, yeast extract - 0.02 g and powdered apple pectin taken in an amount of 3.0 g per 1 liter of water added to the nutrient medium at a temperature of 30-40 ° C for its uniform distribution and complete dissolution. Then, microorganisms Lactobacillus brevis B-13079 with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml in an amount of 100.0 g / L are added to the resulting mixture and cultured at 37 ° C for 24 hours.

При внесении порошкообразного яблочного пектина в питательную среду при температуре ниже 30°C не происходит его полного растворения и равномерного распределения.When powdered apple pectin is introduced into the nutrient medium at temperatures below 30 ° C, its complete dissolution and uniform distribution does not occur.

При внесении порошкообразного яблочного пектина в питательную среду при температуре выше 40°C происходит частичное разрушение пектина.When powdered apple pectin is introduced into the nutrient medium at temperatures above 40 ° C, the pectin is partially destroyed.

При использовании засевной культуры Lactobacillus brevis В-13079 в количестве менее 100,0 г/л, не будет обеспечиваться достижение необходимого титра культуры в пробиотической добавке.When using a seed culture of Lactobacillus brevis B-13079 in an amount of less than 100.0 g / l, it will not be possible to achieve the required culture titer in the probiotic supplement.

При использовании засевной культуры Lactobacillus brevis В-13079 в количестве более 100,0 г/л достигается тот же титр и не имеет смысла брать большее количество.When using a seed culture of Lactobacillus brevis B-13079 in an amount of more than 100.0 g / l, the same titer is achieved and it makes no sense to take a larger amount.

При использовании порошкообразного яблочного пектина в количестве менее 3,0 г/л, не будет обеспечиваться максимальной жизнеспособности культур в пробиотической добавке.When using powdered apple pectin in an amount of less than 3.0 g / l, the maximum viability of the crops in the probiotic supplement will not be ensured.

При использовании порошкообразного яблочного пектина в количестве более 3,0 г/л, достигается та же жизнеспособность культур в пробиотической добавке, поэтому не имеет смысла брать большее количество.When using powdered apple pectin in an amount of more than 3.0 g / l, the same vitality of crops is achieved in the probiotic supplement, so it makes no sense to take more.

Первый этап исследований включает изучение выращивания бактерий на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов без применения пектина. Немаловажным показателем пробиотических свойств молочнокислой флоры является их способность колонизировать желудочно-кишечный тракт, а также их резистентность к биологическим жидкостям организма-хозяина. Последний показатель визуализировали по наличию или отсутствию роста изучаемой микрофлоры в жидкой питательной среде (мелассной), содержащей натуральный желудочный сок лошади (препарат «Эквин», 90%), желчь крупного рогатого скота медицинская консервированная (20%, 30%, 40%), фенол (0,4%) и NaCl (2%, 4%). Время выращивания культуры составляло 48 ч, температурный оптимум 37°C.The first stage of research includes the study of growing bacteria on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition without the use of pectin. An important indicator of the probiotic properties of lactic acid flora is their ability to colonize the gastrointestinal tract, as well as their resistance to biological fluids of the host organism. The latter indicator was visualized by the presence or absence of growth of the studied microflora in a liquid nutrient medium (molasses) containing natural horse gastric juice (Equin preparation, 90%), canned medical bile of cattle (20%, 30%, 40%), phenol (0.4%) and NaCl (2%, 4%). The cultivation time of the culture was 48 h, the temperature optimum was 37 ° C.

Результаты по влиянию агрессивных сред на выживаемость лактобактерий Lactobacillus brevis В-13079 без применения полисахаридного компонента (пектина) представлены в таблице 1.The results on the influence of aggressive media on the survival of lactobacillus Lactobacillus brevis B-13079 without the use of the polysaccharide component (pectin) are presented in Table 1.

Figure 00000001
Figure 00000001

Результаты исследований показали, что культуры изучаемых лактобактерий проявили хороший рост только на среде с содержанием 2,0 и 4,0% хлорида натрия, а также при наличии в среде желчи в концентрации 20%. Незначительный рост дала культура на питательной среде, содержащей 30% желчи. В остальных случаях рост исследуемой культуры не проявился.The research results showed that the cultures of the studied lactobacilli showed good growth only on a medium containing 2.0 and 4.0% sodium chloride, as well as in the presence of bile in the medium at a concentration of 20%. A slight growth was given by a culture on a nutrient medium containing 30% bile. In other cases, the growth of the studied culture did not appear.

Следующим этапом исследований является обоснование использования порошкообразного яблочного и цитрусового пектинов для выращивания Lactobacillus brevis В-13079 на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов. Выбор пектинов обусловлен тем, что на данные пектины существует стандарт, позволяющий их применять для пищевых целей («ГОСТ 29186-91. Пектин. Технические условия»).The next stage of research is to substantiate the use of powdered apple and citrus pectins for growing Lactobacillus brevis B-13079 on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition. The choice of pectins is due to the fact that there is a standard for these pectins that allows them to be used for food purposes ("GOST 29186-91. Pectin. Specifications").

Для проведения эксперимента микроорганизмы Lactobacillus brevis В-13079 выращиванили на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов с применением различных доз порошкообразного яблочного пектина:For the experiment, microorganisms Lactobacillus brevis B-13079 were grown on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition using various doses of powdered apple pectin:

1. Состав среды №1: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 1,0 г/л.1. Composition of medium No. 1: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 1.0 g / l.

2. Состав среды №2: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 2,0 г/л.2. Composition of medium No. 2: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 2.0 g / l.

3. Состав среды №3: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 3,0 г/л.3. Composition of medium No. 3: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 3.0 g / l.

4. Состав среды №4: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 4,0 г/л.4. Composition of medium No. 4: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 4.0 g / l.

5. Состав среды №5: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, яблочный пектин - 5,0 г/л.5. Composition of medium No. 5: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, apple pectin - 5.0 g / l.

Результаты влияния различных доз полисахарида растительного происхождения (яблочного пектина) на устойчивость лактобактерий Lactobacillus brevis В-13079 к агрессивным средам представлены в таблице 2.The results of the influence of various doses of a polysaccharide of plant origin (apple pectin) on the resistance of lactobacillus Lactobacillus brevis B-13079 to aggressive environments are presented in Table 2.

Figure 00000002
Figure 00000002

Figure 00000003
Figure 00000003

Из таблицы 2 видно, что наилучшие результаты исследований проявились с применением в составе питательной среды, на которой выращивали изучаемые лактобактерий, яблочного пектина в дозе - 3,0; 4,0 и 5,0 г/л. В дозе 2,0 г/л яблочного пектина в составе мелассной среды выявлена устойчивость ко всем растворам NaCl и желчи, также незначительный рост в среде, содержащей 0,4% фенола, однако наблюдалось отсутствие роста в желудочном соке. При дозе 1,0 г/л яблочного пектина в составе питательной среды выявлена жизнеспособность как без отсутствия пектина.Table 2 shows that the best research results were manifested with the use of apple pectin in the composition of the nutrient medium on which the studied lactobacilli were grown at a dose of 3.0; 4.0 and 5.0 g / l. At a dose of 2.0 g / l of apple pectin in the molasses medium, resistance to all solutions of NaCl and bile was revealed, as well as an insignificant growth in a medium containing 0.4% phenol, however, there was no growth in gastric juice. At a dose of 1.0 g / l of apple pectin in the composition of the nutrient medium, the viability was revealed as without the absence of pectin.

Третьим этапом исследований является изучение выращивания Lactobacillus brevis В-13079 на мелассной питательной среде с добавлением в ее состав агрессивных компонентов с применением различных доз порошкообразного цитрусового пектина:The third stage of research is the study of the cultivation of Lactobacillus brevis B-13079 on molasses nutrient medium with the addition of aggressive components to its composition using various doses of powdered citrus pectin:

1., Состав среды №1:45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 1,0 г/л.1., Composition of medium No. 1: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 1.0 g / l.

2. Состав среды №2: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 2,0 г/л.2. Composition of medium No. 2: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 2.0 g / l.

3. Состав среды №3: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 3,0 г/л.3. Composition of medium No. 3: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 3.0 g / l.

4. Состав среды №4: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 4,0 г/л.4. Composition of medium No. 4: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 4.0 g / l.

5. Состав среды №5: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, цитрусовый пектин - 5,0 г/л.5. Composition of medium No. 5: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, citrus pectin - 5.0 g / l.

Результаты влияния различных доз полисахарида растительного происхождения (цитрусового пектина) на устойчивость лактобактерий Lactobacillus brevis В-13079 к агрессивным средам представлены в таблице 3.The results of the influence of various doses of a polysaccharide of plant origin (citrus pectin) on the resistance of lactobacillus Lactobacillus brevis B-13079 to aggressive environments are presented in Table 3.

Figure 00000004
Figure 00000004

Из таблицы 3 видно, что наилучшие результаты исследований проявились с применением в составе питательной среды, на которой выращивали изучаемые лактобактерий, цитрусового пектина в дозе - 5,0 г/л.Table 3 shows that the best research results were manifested with the use of citrus pectin in the composition of the nutrient medium on which the studied lactobacilli were grown at a dose of 5.0 g / l.

Результаты проведенных исследований показали, что наиболее эффективной и оптимальной питательной средой является мелассная среда следующего состава: 45 г/л мелассы кормовой, K2НРО4 - 2 г/л, дрожжевого экстракта - 0,02 г/л, порошкообразного яблочного пектина - 3,0 г/л и остальное вода. Разработанный состав питательной среды может быть использован в производственных условиях при дальнейшей разработке биопрепаратов для животноводства, в том числе птицеводства.The results of the studies showed that the most effective and optimal nutrient medium is molasses medium of the following composition: 45 g / l of fodder molasses, K 2 HPO 4 - 2 g / l, yeast extract - 0.02 g / l, powdered apple pectin - 3 , 0 g / l and the rest is water. The developed composition of the nutrient medium can be used in production conditions for the further development of biological products for animal husbandry, including poultry farming.

Для доказательства эффективности полученной пробиотической добавки на основе микроорганизмов Lactobacillus brevis В-13079 в мелассной среде с добавлением порошкообразного яблочного пектина были проведены научные исследования на перепелах Техасской породы.To prove the effectiveness of the obtained probiotic supplement based on microorganisms Lactobacillus brevis B-13079 in molasses medium with the addition of powdered apple pectin, scientific studies were carried out on quails of the Texas breed.

Методом групп аналогов было сформировано пять групп перепелов по 200 голов в каждой: контрольная группа - в рационе присутствовал только основной полноценный комбикорм и питьевая вода; 1-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали разработанную пробиотическую добавку в дозе 0,25 мл/гол; 2-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 0,5 мл/гол; 3-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 0,75 мл/гол; 4-я опытная группа - с основным рационом и питьем воды птице, также выпаивали пробиотическую добавку в дозе 1,0 мл/гол. Применение пробиотической добавки в опытных группах осуществлялось ежедневно (таблица 4).By the method of groups of analogs, five groups of quails, 200 heads in each, were formed: control group - only the main complete feed and drinking water were present in the diet; Experimental group 1 - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank the developed probiotic supplement at a dose of 0.25 ml / head; 2nd experimental group - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank a probiotic supplement at a dose of 0.5 ml / head; 3rd experimental group - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank a probiotic supplement at a dose of 0.75 ml / head; The 4th experimental group - with the main diet and drinking water for the bird, they also drank a probiotic supplement at a dose of 1.0 ml / bird. The application of the probiotic supplement in the experimental groups was carried out daily (table 4).

Figure 00000005
Figure 00000005

Перепела выращивались в полупромышленных многоярусных металлических клетках.Quails were raised in semi-industrial multi-tiered metal cages.

Результаты хозяйственных показателей при выращивании перепелов представлены в таблице 5.The results of economic indicators for growing quail are presented in table 5.

Figure 00000006
Figure 00000006

При изучении сохранности перепелов за период выращивания (56 дней) установлено, что наибольшая выживаемость птиц была зафиксирована в опытных группах. В частности, максимальный показатель был зафиксирован во второй и четвертой опытных группах, который составил 99,0%, затем в третьей опытной группе - 98,5% и далее в первой - 97,5%. Самая низкая сохранность (95,5%) наблюдалась в контрольной группе перепелов, причем основная гибель перепелят была зафиксирована в первые недели жизни птицы.When studying the safety of quails during the growing period (56 days), it was found that the highest survival rate of birds was recorded in the experimental groups. In particular, the maximum indicator was recorded in the second and fourth experimental groups, which amounted to 99.0%, then in the third experimental group - 98.5%, and then in the first - 97.5%. The lowest survival rate (95.5%) was observed in the control group of quails, and the main death of quails was recorded in the first weeks of the bird's life.

При изучении живой массы перепелов установлено, что уже на первую неделю жизни, при взвешивании была выявлена незначительная тенденция к повышению данного показателя в опытных группах. Так в 1-й, 2-й, 3-й и 4-й опытных группах на 7-е сутки взвешивания показатель живой массы перепелов был незначительно выше, чем в контрольной на 2,6; 5,0; 5,6 и 4,6%, соответственно. До 21-х суток наблюдалась аналогичная картина. Однако с 28-и дней и до конца эксперимента во 2-4-й опытных группах была выявлена статистически достоверная разница по изучаемому показателю в сравнении с контрольной группой птиц. На 28-е сутки взвешивания перепелов установлено, что масса птиц во 2-й, 3-й и 4-й опытных группах была достоверно выше, чем в контрольной на 4,7; 5,5 и 4,8% при Р<0,05. При этом в 1-й опытной группе в данный период статистически достоверной разницы не выявлено, как и в принципе до конца эксперимента, но наблюдалась положительная динамика в изучаемом показатели в сравнении с контрольной группой. На 35-й день живая масса перепелов 2-4-й опытных групп была выше, чем в контрольной на 4,1; 4,5 и 3,8% (Р<0,05). Аналогичные статистически достоверные (Р<0,05) показатели в изучаемых опытных группах по отношению к контрольной были выявлены на 42-й и 49-й день взвешивания перепелов. На 56-е сутки были также зафиксированы достоверные различия во 2-й, 3-й и 4-й опытных группах в сравнении с контрольной, соответственно, было выше на 6,3; 6,9 и 6,2% (Р<0,05). В 1-й опытной группе масса перепелов не значительно превышала контрольную на 2,5%.When studying the live weight of quails, it was found that already in the first week of life, when weighing, an insignificant tendency to an increase in this indicator was revealed in the experimental groups. So in the 1st, 2nd, 3rd and 4th experimental groups on the 7th day of weighing, the indicator of the live weight of quails was slightly higher than in the control by 2.6; 5.0; 5.6 and 4.6%, respectively. Until the 21st day, a similar picture was observed. However, from 28 days until the end of the experiment, a statistically significant difference in the studied parameter was revealed in the 2-4 experimental groups in comparison with the control group of birds. On the 28th day of weighing quails, it was found that the weight of birds in the 2nd, 3rd and 4th experimental groups was significantly higher than in the control by 4.7; 5.5 and 4.8% at P <0.05. At the same time, in the 1st experimental group in this period, no statistically significant difference was revealed, as in principle until the end of the experiment, but there was a positive trend in the studied indicators in comparison with the control group. On the 35th day, the live weight of quails of the 2nd-4th experimental groups was higher than in the control by 4.1; 4.5 and 3.8% (P <0.05). Similar statistically significant (P <0.05) indicators in the studied experimental groups in relation to the control were found on the 42nd and 49th day of weighing quails. On the 56th day, significant differences were also recorded in the 2nd, 3rd and 4th experimental groups in comparison with the control, respectively, it was higher by 6.3; 6.9 and 6.2% (P <0.05). In the 1st experimental group, the weight of quails did not significantly exceed the control by 2.5%.

Расчет прироста перепелов во всех группах показал, что в опытных группах изучаемый показатель превосходит контрольную на следующие значения: в 1-й опытной прирост выше на 2,6%; во 2-й группе на 6,6%; в 3-й - 7,1% и в 4-й - 6,4%.Calculation of the increase in quails in all groups showed that in the experimental groups the studied indicator exceeds the control one by the following values: in the 1st experimental the increase is 2.6% higher; in the 2nd group by 6.6%; in the third - 7.1% and in the fourth - 6.4%.

Одним из главных зоотехнических показателей эффективности использования в рационе животных, а в нашем случае птиц, добавок или биопрепаратов является показатель расхода кормов на 1 кг прироста массы (конверсия). Анализ данного значения показал, что в контрольной группе на 1 кг прироста требуется 3,33 кг комбикорма, в то время как в 1-4-й опытных группах необходимо 3,34; 3,28; 3,29 и 3,31 кг. Из этого следует, что наилучшее значение показателя было выявлено во 2-й опытной группе, которое было ниже, чем в группе контроля на 1,5%. В 3-й опытной группе значение показателя было ниже, чем в контроле на 1,2%, в 4-й опытной группе ниже на 0,6%, а в 1-й опытной выше на 0,3%.One of the main zootechnical indicators of the effectiveness of using in the diet of animals, and in our case birds, additives or biological products is the rate of feed consumption per 1 kg of weight gain (conversion). The analysis of this value showed that in the control group, 3.33 kg of compound feed is required per 1 kg of gain, while in the 1st-4th experimental groups 3.34 are required; 3.28; 3.29 and 3.31 kg. From this it follows that the best value of the indicator was found in the 2nd experimental group, which was 1.5% lower than in the control group. In the 3rd experimental group, the value of the indicator was lower than in the control by 1.2%, in the 4th experimental group it was lower by 0.6%, and in the 1st experimental group it was higher by 0.3%.

В целом, обосновать повышенную динамику живой массы перепелов в опытных группах, можно за счет положительного воздействия пробиотической добавки на основе культур Lactobacillus brevis В-13079 и мелассной питательной среды с яблочным пектином, которые способствуют лучшему усвоению энергии и питательных веществ комбикорма птицей.In general, the increased dynamics of the live weight of quails in the experimental groups can be substantiated due to the positive effect of a probiotic supplement based on Lactobacillus brevis B-13079 cultures and molasses nutrient medium with apple pectin, which contribute to a better absorption of energy and nutrients of compound feed by poultry.

Таким образом, результаты испытаний показали, что выращивание перепелов с использованием разработанной пробиотической добавки на основе культуры Lactobacillus brevis В-13079, выделенная из ЖКТ дикого перепела, а также выращенная на мелассной среде с добавлением порошкообразного яблочного пектина, в испытуемых дозах обеспечивает повышение продуктивности перепелов, что особенно выявлено в дозе 0,5 мл/гол, за счет нового состава питательной среды для лактобактерий, в частности Lactobacillus brevis В-13079.Thus, the test results showed that the cultivation of quails using the developed probiotic supplement based on the culture of Lactobacillus brevis B-13079, isolated from the digestive tract of wild quail, as well as grown on molasses medium with the addition of powdered apple pectin, in the tested doses provides an increase in the productivity of quails, which was especially revealed at a dose of 0.5 ml / head, due to the new composition of the nutrient medium for lactobacilli, in particular Lactobacillus brevis B-13079.

Claims (2)

Питательная среда для культивирования микроорганизмов рода Lactobacillus, состоящая из мелассы кормовой, K2НРО4, дрожжевого экстракта и воды, отличающейая тем, что в питательную среду при температуре 30-40°C добавляют порошкообразный яблочный пектин и вводят микроорганизмы рода Lactobacillus с титром не менее 1,0×105 КОЕ/мл при следующем соотношении исходных компонентов, г/л:Nutrient medium for the cultivation of microorganisms of the genus Lactobacillus, consisting of fodder molasses, K 2 HPO 4 , yeast extract and water, characterized in that powdered apple pectin is added to the nutrient medium at a temperature of 30-40 ° C and microorganisms of the genus Lactobacillus with a titer of at least 1.0 × 10 5 CFU / ml with the following ratio of starting components, g / l: Меласса свекловичнаяBeet molasses 22-2322-23 Меласса кукурузнаяCorn molasses 22-2322-23 K2НРО4 K 2 NRO 4 2,02.0 Дрожжевой экстракт Yeast extract 0,020.02 Пектин яблочныйApple pectin 2,0-4,02.0-4.0 Микроорганизмы рода Lactobacillus с титромMicroorganisms of the genus Lactobacillus with a titer не менее 1,0×105 КОЕ/млnot less than 1.0 × 10 5 CFU / ml 99-10199-101 ВодаWater ОстальноеRest
RU2020136177A 2020-11-02 2020-11-02 Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria RU2759305C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020136177A RU2759305C1 (en) 2020-11-02 2020-11-02 Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020136177A RU2759305C1 (en) 2020-11-02 2020-11-02 Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2759305C1 true RU2759305C1 (en) 2021-11-11

Family

ID=78607268

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020136177A RU2759305C1 (en) 2020-11-02 2020-11-02 Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2759305C1 (en)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2686326C1 (en) * 2018-07-11 2019-04-25 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" Nutrient medium for cultivation of lactobacilli
RU2701343C1 (en) * 2018-09-03 2019-09-26 Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ) Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions)

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2686326C1 (en) * 2018-07-11 2019-04-25 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" Nutrient medium for cultivation of lactobacilli
RU2701343C1 (en) * 2018-09-03 2019-09-26 Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ) Nutrient medium for detection of lactic acid bacteria (versions)

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
БОЯРИНЕВА И.В. и др., Исследование условий культивирования микрофлоры симбиотической закваски для хлебопекарного производства, Вестник ВСГУТУ, 2015, N 2 (53), с. 74-80. *
БОЯРИНЕВА И.В. и др., Исследование условий культивирования микрофлоры симбиотической закваски для хлебопекарного производства, Вестник ВСГУТУ, 2015, N 2 (53), с. 74-80. РАДЧЕНКО В.В. и др., Сравнительный анализ и пробиотический потенциал новых штаммов рода Lactobacillus из эволюционно закрепленных микробных ассоциаций желудочно - кишечного тракта дикой птицы, Биофармацевтический журнал, 2020 N 1, Т. 12, с. 25-30. *
РАДЧЕНКО В.В. и др., Сравнительный анализ и пробиотический потенциал новых штаммов рода Lactobacillus из эволюционно закрепленных микробных ассоциаций желудочно - кишечного тракта дикой птицы, Биофармацевтический журнал, 2020 N 1, Т. 12, с. 25-30. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TWI574628B (en) Method for using a bacillus subtilis strain to enhance animal health
CN103555640B (en) Bacillus subtilis and application thereof to livestock breeding
RU2689701C1 (en) Quail growing method
CN107312732B (en) Probiotic feed additive
RU2688429C1 (en) Method of producing a probiotic additive for quail
RU2689680C1 (en) Method of producing a probiotic additive
RU2689730C1 (en) Method for quail feeding
WO2022063296A1 (en) Feed additive for improving oxygen obtaining ability of poultry and use thereof
CN112779179A (en) Weissella mesenteroides and application thereof
CN103045498A (en) Bacillus amyloliquefaciens and application thereof
CN101884394B (en) Composite microbial feed additive for chicken and preparation method thereof
RU2686326C1 (en) Nutrient medium for cultivation of lactobacilli
CN109810914A (en) A kind of fishes and shrimps microbial compound preparation and preparation method thereof
RU2698213C1 (en) Medium for production of probiotic additive for poultry
Xatamov et al. THE USE OF INNOVATIVE METHODS IN FEEDING KARAKUL SHEEP
RU2286066C2 (en) Fodder supplement for poultry science and method for poultry raising
CN113749187A (en) Production method of glucose oxidase feed additive containing catalase
RU2366169C1 (en) Method of egg breed replacement chicken cultivation
RU2759305C1 (en) Nutrient medium for cultivation of lactic bacteria
CN107373164A (en) A kind of chlorella broiler fodder and feeding method
CN106819625A (en) A kind of mandarin fish fermented feed and preparation method thereof
RU2756559C1 (en) Method for growing quails
RU2757355C1 (en) Method for producing a probiotic supplement for quails
RU2753359C1 (en) Method for increasing viability of lactobacilli
RU2759703C1 (en) Method for producing a probiotic supplement for poultry