RU2687887C1 - Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа - Google Patents
Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа Download PDFInfo
- Publication number
- RU2687887C1 RU2687887C1 RU2018133220A RU2018133220A RU2687887C1 RU 2687887 C1 RU2687887 C1 RU 2687887C1 RU 2018133220 A RU2018133220 A RU 2018133220A RU 2018133220 A RU2018133220 A RU 2018133220A RU 2687887 C1 RU2687887 C1 RU 2687887C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gas
- hydroxypyrene
- trifluoroacetamide
- trimethylsilyl
- bis
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 title claims abstract description 22
- BIJNHUAPTJVVNQ-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxypyrene Chemical compound C1=C2C(O)=CC=C(C=C3)C2=C2C3=CC=CC2=C1 BIJNHUAPTJVVNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 20
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 title description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 12
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- XCOBLONWWXQEBS-KPKJPENVSA-N N,O-bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide Chemical compound C[Si](C)(C)O\C(C(F)(F)F)=N\[Si](C)(C)C XCOBLONWWXQEBS-KPKJPENVSA-N 0.000 claims abstract description 10
- BIJNHUAPTJVVNQ-LOIXRAQWSA-N 2,3,4,5,6,7,8,9,10-nonadeuteriopyren-1-ol Chemical compound [2H]C1=C([2H])C(O)=C2C([2H])=C([2H])C3=C([2H])C([2H])=C([2H])C4=C([2H])C([2H])=C1C2=C43 BIJNHUAPTJVVNQ-LOIXRAQWSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 10
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 9
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 8
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 claims description 7
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 claims description 5
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 4
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 claims description 3
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 claims 5
- 239000011651 chromium Substances 0.000 claims 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 2
- KRVSOGSZCMJSLX-UHFFFAOYSA-L chromic acid Substances O[Cr](O)(=O)=O KRVSOGSZCMJSLX-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 125000005575 polycyclic aromatic hydrocarbon group Chemical group 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 abstract 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 238000006884 silylation reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 3
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 3
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N chlorotrimethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)Cl IJOOHPMOJXWVHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- BBEAQIROQSPTKN-UHFFFAOYSA-N pyrene Chemical compound C1=CC=C2C=CC3=CC=CC4=CC=C1C2=C43 BBEAQIROQSPTKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- -1 1-hydroxypyrene-d19 Chemical compound 0.000 description 1
- QRKUHYFDBWGLHJ-UHFFFAOYSA-N N-(tert-butyldimethylsilyl)-N-methyltrifluoroacetamide Chemical compound FC(F)(F)C(=O)N(C)[Si](C)(C)C(C)(C)C QRKUHYFDBWGLHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000012496 blank sample Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- GVEPBJHOBDJJJI-UHFFFAOYSA-N fluoranthrene Natural products C1=CC(C2=CC=CC=C22)=C3C2=CC=CC3=C1 GVEPBJHOBDJJJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 150000003220 pyrenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 description 1
- 239000005051 trimethylchlorosilane Substances 0.000 description 1
- PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N trimethylsilane Chemical class C[SiH](C)C PQDJYEQOELDLCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, в частности к медицинским, токсикологическим исследованиям, и может быть использовано при диагностике экологически обусловленной патологии, вызванной полициклическими ароматическим углеводородами (ПАУ), в лабораториях биохимии, специализированных учреждениях и клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений. Способ определения 1-гидроксипирена в моче включает добавление к пробе изотопно-меченного стандарта 1-гидроксипирена-d9, ферментативный гидролиз β-глюкуронидазой при 55°С в течение 1 ч, двукратную экстракцию гексаном, упаривание полученного экстракта досуха в небольшом токе азота, дериватизацию сухого остатка силилирующим N,O-бис-(триметилсилил)трифторацетамидом при 22-25°С в течение 5 минут с последующим газохроматографическим анализом на капиллярной колонке с масс-селективным детектором в течение 20 минут. Техническим результатом является повышение точности и чувствительности анализа, сокращение времени пробоподготовки. 3 ил., 7 табл.
Description
Изобретение относится к области аналитической токсикологии и биологического мониторинга, и может быть использовано при оценке воздействия полициклических ароматических углеводородов (ПАУ) на организм человека. В подавляющем случае ПАУ присутствуют в виде смесей, одним из основных компонентов по уровню концентрации является пирен. Метаболит пирена - 1-гидроксипирен (Фиг. 1) является стабильным соединением, относительно легко и надежно определяемым в моче.
Известный способ определения 1-гидроксипирена в моче методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) включает в себя предварительный ферментативный гидролиз β-глюкуронидазой при 37°С 16 ч, твердофазную экстракцию на картридже С18, анализ метанольного экстракта методом ВЭЖХ с флуориметрическим детектором. Предел обнаружения 0,1 нг/см3, нижний предел количественного определения 2 нг/см3 при объеме пробы 10 см3, относительное стандартное отклонение воспроизводимости (RSD) 12,6%, коэффициент корреляции градуировочного графика 0,990, правильность (R) 88±9%. [Jongeneelen F.J., Anzion R.B.M., Henderson Р.Т. Determination of hydroxylated metabolites of polycyclic aromatic hydrocarbons in urine // J. of Chromatography. 1987. V. 413. P. 227-232]. К недостаткам данного способа можно отнести большой объем пробы, длительность процедуры ферментативного гидролиза (16 ч) и ВЭЖХ анализа (50 мин), недостаточная чувствительность для определения концентрации 1-гидроксипирена в моче у населения, а также невысокая точность (RSD 12% и R=88%).
При использовании метода ВЭЖХ возникают проблемы из-за ошибок при идентификации зарегистрированных компонентов. Количественное определение их также может быть затруднено вследствие наложения или неполного разделения хроматографических пиков.
Другим подходящим способом (прототип) является определение 1-гидроксипирена в моче газовой хроматографией с масс-селективным детектированием (ГХ-МС) в режиме электронного удара.
Способ включает в себя следующие стадии: ферментативный гидролиз β-глюкуронидазой при 37°С 17-18 ч, твердофазную экстракцию, упаривание экстракта в токе азота, дериватизацию сухого остатка силилирующим реагентом N,O-бис-(триметилсилил) трифторацетамид (БСТФА) при температуре 60°С 40 мин, ГХ-МС анализ в течение 40 мин. Предел обнаружения 0,5 нг/см3, нижний предел количественного определения 1 нг/см3 при объеме пробы 3 см3, относительное стандартное отклонение воспроизводимости (RSD) 6,7-13,1%, коэффициент корреляции градуировочного графика 0,995, правильность (R) 88,7%. [С.Schummer, О. Delhomme, B.M.R. Appenzeller. Comparison of MTBSTFA and BSTFA in derivatization reaction of polar compounds prior to GC/MS analysis / Talanta 2009. - V. 77. P. 1473-1482].
Технической задачей предлагаемого способа является повышение точности определения методом ГХ-МС за счет использования изотопно-меченного стандарта 1-гидроксипирена-d9, повышение чувствительности определения за счет увеличения степени экстракции из биологической матрицы, а также значительное сокращение времени пробоподготовки за счет уменьшения продолжительности ее следующих стадий: ферментативного гидролиза, дериватизации 1-гидроксипирена силилирующим реагентом N,O-бис-(триметилсилил) трифторацетамид (БСТФА) (Фиг. 2), ГХ-МС анализа.
Указанная техническая задача достигается путем внесения в анализируемые пробы мочи изотопно-меченного стандарта 1-гидроксипирена-d9, проведения ферментативного гидролиза в течение 1 часа при 55°С, 2-х кратной жидкостно-жидкостной экстракции гексаном, упаривания гексанового экстракта досуха в токе азота, силилирования сухого остатка N,O-бис-(триметилсилил) трифторацетамидом (БСТФА) при температуре 22-25°С в течение 5 мин и проведении газохроматографического анализа на капиллярной колонке с масс-селективным детектированием в течение 20 мин.
Из патентной и научно-технической литературы нам неизвестны способы количественного определения 1-гидроксипирена в моче, содержащие совокупность предложенных нами признаков, что позволяет сделать вывод о новизне заявляемого технического решения.
Кроме того, из существующего уровня техники нам неизвестно использование существенных признаков, характеризующих предлагаемый способ, для достижения описываемого технического результата.
Способ осуществляют следующим образом:
К 2 см3 мочи в центрифужной пробирке вместимостью 10 см3 вносят 20 мм3 раствора 1-гидроксипирена-d9 в ацетонитриле (5 мкг/см3), 1 см3 ацетатно-уксусного буфера с рН=5, 20 мм3 водного раствора β-глюкуронидазы (активность >85000), нагревают 1 ч при 55°С, затем охлаждают 20 мин до температуры 20-25°С, добавляют 0,5 г сульфата магния, 2 см3 гексана и интенсивно встряхивают на мультивортексе 2 мин, после этого разделяют фазы на центрифуге при 4000 об/мин 10 мин, отделяют гексановый экстракт, перенося его во флакон вместимостью 5 см3 с коническим дном, снова вносят 2 см3 гексана, интенсивно встряхивают на мультивортексе 2 мин, разделяют фазы на центрифуге при 4000 об/мин 10 мин, отделяют гексановый экстракт, объединяя с первым экстрактом. Объединенный гексановый экстракт упаривают досуха в небольшом токе азота при температуре водяной бани 60°С, затем к сухому остатку вносят 100 мм3 реагента БСТФА и выдерживают 5 мин.
Основное же преимущество метода ГХ-МС по сравнению с ВЭЖХ - это более лучшее разделение компонентов и возможность применения изотопно-меченного стандарта 1 -гидроксипирен-d9 (дейтерированный стандарт).
Хромато-масс-спектрометрический анализ осуществляют в следующих условиях (табл. 1).
Идентификацию на хроматограммах 1-гидроксипирена и 1-гидроксипирена-d9 в виде производных (триметилсиланов) проводят по времени удерживания и соотношению интенсивностей регистрируемых ионов (таблица 2).
Количественное определение по предлагаемому способу проводят методом внутреннего стандарта по растворам известной концентрации 1-гидроксипирена в моче от 0,1 до 100 нг/см3, предварительно обработанным аналогично анализируемым пробам. При градуировке процедуру ферментативного гидролиза допускается не проводить.
При реакции силилирования 1-гидроксипирена реагентом БСТФА, содержащим 1% триметилхлорсилана, установлено, что температура и время реакции не оказывают значимого влияния на аналитический сигнал, особенно если в качестве аналитического сигнала выступает относительная площадь (высота) пика (табл. 3).
Данные показывают, что силилирование достаточно проводить при комнатной температуре 20-25°С в течение 5 мин и с внутренним стандартом, так как величина RSD самая минимальная.
Экспериментальным путем установлено, что при твердофазной экстракции (ТФЭ) степень экстракции 1-гидроксипирена из мочи составляет 8%, а при жидкостно-жидкостной экстракции (ЖЖЭ) гексаном около 90% (табл. 4).
Несмотря на то, что ТФЭ более современный способ, чем ЖЖЭ, степень извлечения аналита данным способом очень низкая. Это объясняется не тем, что аналит плохо адсорбируется на сорбент C18 и/или плохо элюируется с него метанолом, а тем, что в образце мочи присутствует большое количество полярных соединений, содержащие в своем составе ОН, СООН, NH, NH2 группы, и гораздо в больших концентрациях, чем наш аналит. Эти компоненты оказывают мешающее влияние при силилировании 1-гидроксипирена реагентом БСТФА. Получается, что реакцию силилирования вступает очень малое количество 1-гидроксипирена. При ЖЖЭ гексаном извлекаются в основном соединения неполярной или малополярной природы, которые не оказывают мешающее влияние при дериватизации БСТФА. Поэтому, подходящим способом извлечения 1-гидроксипирена из биологической матрицы является 2-х кратная ЖЖЭ гексаном.
Основными факторами, влияющими на эффективность жидкостно-жидкостной экстракции являются тип экстрагента, продолжительность экстракции, число экстракций, природа и количество высаливающего агента. Опытным путем установлено, что гексан, является более удобным экстрагентом чем, диэтиловый эфир и толуол, так как меньше мешающих влияний при дериватизации. В качестве высаливающего агента подходит сульфат магния, чем сульфат натрия, так как выше процент извлечения аналита. Оптимальные условия проведения ЖЖЭ 1-гидрокиспирена из мочи сводятся к следующим: масса сульфата магния 0,5 г, время экстракции 1-2 мин, кратность экстракции 2.
В таблице 5 приведены результаты анализа реальных образцов мочи работников алюминиевого производства, при двух вариантах ферментативного гидролиза.
Сравнивая два варианта ферментативного гидролиза, видно, что концентрации 1-гидроксипирена не сильно различаются, при втором варианте концентрации аналита даже выше, поэтому ферментативный гидролиз β-глюкуронидазой лучше проводить при температуре 55°С в течение 60 мин (1 ч).
Установлены валидационные характеристики: предел обнаружения, предел количественного определения, линейный диапазон, повторяемость, внутрилабораторная прецизионность, правильность, матричный эффект, селективность.
Предел обнаружения и предел количественного определения составили 0,02 и 0,1 нг/см3 соответственно. Линейный диапазон установили по 6 модельным образцам мочи с разными концентрациями 1-гидроксипирена (0.1, 2, 10, 20, 40, 100 нг/см3), коэффициент корреляции r>0.999. Приемлемый критерий для r не ниже 0,990. Таким образом, линейный диапазон составил от 0,1 до 100 нг/см3. Прецизионность и точность оценивали для 4 образцов мочи с веденными концентрациями 0,5; 2; 20 и 40 нг/см3, каждый образец анализировали 2 раза 5 дней. По результатам анализа рассчитали относительное стандартное отклонение (RSD, %) повторяемости и внутрилабораторной прецизионности, точность как отношение значения найденной концентрации к значению веденной концентрации (табл. 6).
Все значения правильности, лежащие в диапазоне от 96,5 до 102% от номинальной концентрации анализируемого вещества, соответствовали приемлемому критерию (100±7%). Повторяемость (RSD, %) лежит в интервале 1.0-4.4% и внутрилабораторная прецизионность (RSD, %) 6.0-6.4%, также в соответствии с приемлемыми критериями (не выше 12%). Введенные концентрации перекрываются с доверительными интервалами найденных концентраций.
Матричный эффект оценивали в виде относительного смещения ВМЕ, сравнивая относительные сигналы аналита введенного в органический растворитель (As) определенного количества и того же количества веденного в образец мочи (Am) (табл. 10). Расчет осуществляли по следующей формуле (2)
Максимальный матричный эффект составляет 3,9% и не превышает приемлемый критерий 6%.
На рисунке (фиг. 3) приведены масс-хроматограммы холостого образца и 3-х образцов с разными концентрациями 1-гидроксипирена (0.1, 0.5, 39 нг/см3).
Пик ТМС-1-гидроксипирена узкий (полуширина пика 1.5 с), симметричный, мешающие пики отсутствуют. Таким образом, достигается отличная селективность определения. Значение RSD измерения времен удерживания составляет 0,027%.
Данный способ количественного определения 1-гидроксипирена был апробирован на образцах мочи работников (31 человек) производства алюминия. Интервал содержания составил от 0,31 до 263 нг/см3. Также были проанализированы и образцы мочи работников других производств (14 человек), где в производственной воздушной среде отсутствуют ПАУ. Здесь с концентрации лежат от 0,08 до 0,9 нг/см3.
Таким образом, предлагаемым способом с удовлетворительным пределом количественного определения 0.1 нг/см3 можно определять 1-гидроксипирен в моче при более малом объеме анализируемой пробы 2 см3 не только у работников производств алюминия, но и у лиц, не занятых в данном производстве. Применение данного способа позволяет уменьшить продолжительность анализа за счет уменьшения продолжительности ее следующих стадий: ферментативного гидролиза, дериватизации 1-гидроксипирена реагентом БСТФА, ГХ-МС анализа по сравнению с прототипом. Также применение способа позволяет повысить точность определения за счет использования изотопно-меченного стандарта 1-гидроксипирена-d19, повысить чувствительность определения за счет увеличения степени экстракции из биологической матрицы.
Claims (1)
- Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа, включающий ферментативный гидролиз β-глюкуронидазой, экстракцию анализируемого вещества, упаривание экстракта в токе азота, дериватизацию сухого остатка силилирующим реагентом N,O-бис-(триметилсилил) трифторацетамид, газохроматографический анализ с масс-селективным детектированием, отличающийся тем, что в пробу добавляют изотопно-меченный стандарт 1-гидроксипирена-d9, проводят ферментативный гидролиз в течение 1 часа при 55°С, двухкратную жидкостно-жидкостную экстракцию гексаном, дериватизацию сухого остатка при 22-25°С в течение 5 минут с последующим газохроматографическим анализом на капиллярной колонке с масс-селективным детектором в течение 20 минут.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018133220A RU2687887C1 (ru) | 2018-09-18 | 2018-09-18 | Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2018133220A RU2687887C1 (ru) | 2018-09-18 | 2018-09-18 | Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2687887C1 true RU2687887C1 (ru) | 2019-05-16 |
Family
ID=66578659
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018133220A RU2687887C1 (ru) | 2018-09-18 | 2018-09-18 | Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2687887C1 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114460200A (zh) * | 2022-02-09 | 2022-05-10 | 上海市质量监督检验技术研究院 | 一种鉴别蚕丝绵甲基丙烯酰胺接枝增重的方法 |
| RU2814310C1 (ru) * | 2023-07-19 | 2024-02-28 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований" | Способ определения гидроксилированных полициклических ароматических углеводородов в моче |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103175920A (zh) * | 2013-03-01 | 2013-06-26 | 红云红河烟草(集团)有限责任公司 | 尿液中八种一羟基多环芳烃的气相色谱-质谱联用检测方法 |
-
2018
- 2018-09-18 RU RU2018133220A patent/RU2687887C1/ru active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103175920A (zh) * | 2013-03-01 | 2013-06-26 | 红云红河烟草(集团)有限责任公司 | 尿液中八种一羟基多环芳烃的气相色谱-质谱联用检测方法 |
Non-Patent Citations (4)
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114460200A (zh) * | 2022-02-09 | 2022-05-10 | 上海市质量监督检验技术研究院 | 一种鉴别蚕丝绵甲基丙烯酰胺接枝增重的方法 |
| CN114460200B (zh) * | 2022-02-09 | 2023-08-08 | 上海市质量监督检验技术研究院 | 一种鉴别蚕丝绵甲基丙烯酰胺接枝增重的方法 |
| RU2814310C1 (ru) * | 2023-07-19 | 2024-02-28 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Восточно-Сибирский институт медико-экологических исследований" | Способ определения гидроксилированных полициклических ароматических углеводородов в моче |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Peters et al. | Method development in forensic toxicology | |
| Silva et al. | Improved quantitative detection of 11 urinary phthalate metabolites in humans using liquid chromatography–atmospheric pressure chemical ionization tandem mass spectrometry | |
| Van Eeckhaut et al. | Validation of bioanalytical LC–MS/MS assays: evaluation of matrix effects | |
| Zhang et al. | Measurement of neurotransmitters from extracellular fluid in brain by in vivo microdialysis and chromatography–mass spectrometry | |
| EP1962097A1 (en) | Mass spectrometric quantitative detection of methyl malonic acid and succinic acid using hilic on a zwitterionic stationary phase | |
| Nomura et al. | Simple and rapid analysis of amatoxins using UPLC–MS–MS | |
| Versace et al. | Automated DBS extraction prior to Hilic/RP LC–MS/MS target screening of drugs | |
| Nakamoto et al. | Monolithic silica spin column extraction and simultaneous derivatization of amphetamines and 3, 4-methylenedioxyamphetamines in human urine for gas chromatographic-mass spectrometric detection | |
| CN112630311B (zh) | 用于检测情感障碍的代谢标记物和试剂盒及使用方法 | |
| Sterz et al. | Enrichment and properties of urinary pre-S-phenylmercapturic acid (pre-SPMA) | |
| CA2906589A1 (en) | Method for determining derivatized analytes in a separated biological fluid | |
| RU2687887C1 (ru) | Способ определения 1-гидроксипирена в моче методом хромато-масс-спектрометрического анализа | |
| Koryagina et al. | Chromatography–mass spectrometry determination of alkyl methylphosphonic acids in urine | |
| Thevis et al. | Detection of stanozolol and its major metabolites in human urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry | |
| Dong et al. | Quantitative analysis of glycerol levels in human urine by liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| CN117250288A (zh) | 一种血浆中儿茶酚胺代谢物的检测方法和应用 | |
| KR20090027896A (ko) | 아민 카르바밀레이티드 유도체화와액체크로마토그래피/전기분무-이중질량분석기를 이용한인체의 뇨 또는 혈청에서의 폴리아민 검출 방법 | |
| de Oliveira et al. | Trends and challenges in analytical chemistry for multi-analysis of illicit drugs employing wastewater-based epidemiology | |
| CN110554105B (zh) | 一种手性羧酸类化合物的分析方法 | |
| CN112611814B (zh) | 一种干血片中1,5-脱水葡萄糖醇的测定方法 | |
| Jang et al. | Determination of 5-hydroxyindole-3-acetic acid in wastewater by high performance liquid chromatography coupled with tandem mass spectrometric detection | |
| RU2688184C1 (ru) | Способ определения производных катехоламинов в моче | |
| Song et al. | Capillary high performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization mass spectrometry for rapid analysis of pinane monoterpene glycosides in Cortex Moutan | |
| Wang et al. | Advancing towards practice: A novel LC-MS/MS method for detecting retinol in dried blood spots | |
| RU2613115C1 (ru) | Способ определения формальдегида в моче методом газохроматографического анализа |