RU2670526C2 - Способ получения белковой кормовой биомассы - Google Patents
Способ получения белковой кормовой биомассы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2670526C2 RU2670526C2 RU2015153360A RU2015153360A RU2670526C2 RU 2670526 C2 RU2670526 C2 RU 2670526C2 RU 2015153360 A RU2015153360 A RU 2015153360A RU 2015153360 A RU2015153360 A RU 2015153360A RU 2670526 C2 RU2670526 C2 RU 2670526C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cultivation
- substrate
- phase
- mycelium
- biomass
- Prior art date
Links
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 title claims abstract description 23
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 48
- 241001138370 Pleurotus pulmonarius Species 0.000 claims abstract description 18
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 18
- 239000010902 straw Substances 0.000 claims abstract description 16
- 241000209140 Triticum Species 0.000 claims abstract description 11
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 50
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 17
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 5
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 claims description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 21
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract description 2
- 239000010908 plant waste Substances 0.000 abstract description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 9
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 8
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 8
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 5
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 5
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 5
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 4
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 4
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 4
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 240000001462 Pleurotus ostreatus Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 2
- 235000001603 Pleurotus ostreatus Nutrition 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- 241001149671 Hanseniaspora uvarum Species 0.000 description 1
- 241000218652 Larix Species 0.000 description 1
- 235000005590 Larix decidua Nutrition 0.000 description 1
- 241001443590 Naganishia albida Species 0.000 description 1
- 208000012868 Overgrowth Diseases 0.000 description 1
- 244000193463 Picea excelsa Species 0.000 description 1
- 235000008124 Picea excelsa Nutrition 0.000 description 1
- 241000222350 Pleurotus Species 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002154 agricultural waste Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010170 biological method Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 229920005610 lignin Polymers 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000013022 venting Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Botany (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mushroom Cultivation (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к комбикормовой и перерабатывающей промышленности при переработке возобновляемых растительных отходов. Способ предусматривает глубинное негомогенное жидкофазное культивирование Pleurotus pulmonarius 3.3.2 на крахмал-аммонийной питательной среде, содержащей измельченную пшеничную солому при заданной температуре и рН среды в течение 70-72 ч с последующим твердофазным культивированием при заданных параметрах температуры и влажности среды и сушки с получением целевого продукта. Изобретение позволяет повысить выход биомассы и сократить сроки получения целевого продукта. 2 табл., 2 пр., 2 ил.
Description
Изобретение относится к области биотехнологии, комбикормовой и перерабатывающей промышленности при переработке растительных отходов путем биоконверсии базидиальными грибами, в том числе Pleurotus pulmonarius, и может быть использовано для получения белковой кормовой биомассы на основе пшеничной соломы.
Известно, что растительные отходы сельского хозяйства, в том числе солома пшеницы имеют низкую питательную ценность и усвояемость. Проведение биодеструкции этих отходов химическими или биологическими методами значительно повышает возможность использования их в качестве кормовых добавок. В отличие от химических методов в результате биоконверсии базидиомицетами происходит не только изменение структуры углеводно-лигнинного комплекса растительной биомассы, но и отмечается увеличение содержания в ней белковых веществ, а также повышение ферментной, витаминной и минеральной ценности, что способствует повышению кормовой ценности получаемой продукции.
При проведении процесса твердофазной ферментации растительных субстратов высшими базидиальными грибами условия роста для грибного мицелия на поверхности субстратного блока и в его глубине значительно отличаются. Вследствие повышения температуры и недостаточного поступления кислорода в глубину блока, развитие мицелия гриба происходит в основном на поверхности субстратного блока. Контроль роста в глубине субстратного блока (температуры, рН, влажности) является затруднительным. В отличие от твердофазного культивирования при жидкофазном процессе условия роста мицелия гриба одинаковы по всему объему питательной среды и легко могут быть скорректированы в процессе культивирования.
Известен способ получения кормовой добавки [1]. В твердый остаток после спирто-щелочной экстракции коры лиственницы сибирской (одубины) вносят питательные соли, г/л: (NH4)NO3 1-1,5; KH2PO4 0,5-0,7; KCl 0,1-0,3; MgSO4 0,1-0,5; FeSO4 0,001-0,005, рН 4-5. Жидкостный модуль 3-7. Пропаривают острым паром в течение 20 мин, охлаждают, засевают грибом Pleurotus ostreatus в количестве 3-5% и выращивают при температуре 28-30°С в течение 5-10 сут. Полученный продукт высушивают до воздушно-сухого состояния. Прирост протеина составляет 3-9,5%. Выход продукта 90-95%.
Недостатком данного способа является использование в качестве субстрата твердого остатка коры лиственницы после спирто-щелочной экстракции. Кормовая добавка, полученная на данном субстрате, представляется грубодисперсным и трудноусвояемым кормом для животных. В связи, с этим ее рекомендуют добавлять в количестве не более 5% от массы основных кормов.
Известен способ выращивания плодовых тел съедобных грибов из рода Pleurotus [2], включающий приготовление субстрата на основе лузги подсолнечника или пшеничной соломы. Перед внесением посевного материала к субстрату добавляют суспензию дрожжей Cryptococcus albidus, Hanseniaspora uvarum или Saccharomyces cerevisiae в концентрации 104-107 жизнеспособных клеток в 1 мл на 100 г субстрата. Количество посевного мицелия, выращенного на зерне, составляет 5 г на 150 г субстрата. Зарастание основного субстрата (лузга подсолнечника или пшеничная солома) происходит в термостате при 22-26°С в течение 10-13 суток. Затем засеянные емкости помещают в термостатируемую камеру для выгонки плодовых тел при температуре 20°С, влажности 85-95%. Способ обеспечивает сокращение сроков культивирования на 7 дней и увеличение урожайности.
Недостатком данного способа является использование в качестве посевного материала зернового мицелия, что создает дополнительные трудности при соблюдении условий стерильности на стадии засева.
Известен способ выращивания плодовых тел вешенки [3]. Этот способ включает приготовление питательного субстрата и заполнение им культивационных сосудов с перфорированными стенками, что осуществляют поэтапно. Культивационные сосуды плотно размещены внутри крупногабаритной емкости, инокулируют субстрат зерновым посевным материалом и размещают их так, чтобы непророщенный мицелием субстрат в каждом культивационном сосуде имел контакт с предварительно пророщенным субстратом в другом сосуде. Культивирование продолжают до прорастания субстрата мицелием во всех культивационных сосудах, после чего питательным субстратом заполняют культивационные сосуды до полного объема, выдерживают их в крупногабаритной емкости до прорастания субстрата. После извлечения из крупногабаритной емкости часть их отправляют в камеру плодоношения, а часть отбирают для использования в качестве посевного материала в очередном технологическом цикле.
Недостатком способа является применение нестерильных условий производства, что существенно повышает риск контаминации нежелательными видами грибов, а также высокая трудоемкость при использовании в качестве посевного материала мицелия выращенного на зерне. Длительность процесса приготовления субстрата в данном способе достигает 15 суток.
Наиболее близким к заявленному способу по технической сущности и достигаемому результату является способ переработки отходов растительного сырья с использованием глубинной биомассы мицелия Pleurotus pulmonarius для выращивания плодовых тел [4]. В данном способе мицелиальную биомассу, выращивают в глубинных условиях на питательной среде, которая содержит в своем составе источник азота (NH4 +), источник углерода (крахмал) и комплекс минеральных солей (KCl, NaCl, CaCl, MgSO4, КН2РО4, K2HPO4). В качестве растительного субстрата используют измельченную солому, предварительно простерилизованную в автоклаве в течение 1 часа при 0,5 кгс/см2. Засев проводят в стерильных условиях методом впрыска полученной мицелиальной биомассы в подготовленный субстратный блок шприцом Жане с объемом впрыска 150 мл. Расход культивируемой жидкости для засева 1 дм субстратного блока составляет 100±10 мл. Инкубирование засеянных блоков проводят при температуре 25-27°С и влажности воздуха 60-65% до полного прорастания субстрата мицелием. После полной колонизации субстрата «белые блоки» устанавливают в помещение с температурой 18-20°С для получения плодовых тел.
Недостатком способа является длительность процесса инкубирования субстратного блока мицелием, невысокое качество белковой кормовой биомассы, ввиду того, что рост мицелия происходит в поверхностных слоях блока.
Задачей настоящего изобретения является повышение качества полученной белковой кормовой биомассы и сокращение сроков ее получения за счет создания благоприятных условий роста грибного мицелия.
Технический результат, достигаемый заявляемым способом, заключается в создании благоприятных условий роста грибного мицелия, что позволяет сократить сроки получения белковой кормовой биомассы и повысить ее качество.
Указанный технический результат достигается тем, что в способе получения белковой кормовой биомассы, включающем выращивание посевного материала из штамма РР-3.2 базидиального гриба P.pulmonarius жидкофазным культивированием в глубинных условиях при непрерывном перемешивании за счет барботажа воздуха на крахмал-аммонийной среде и последующее твердофазное культивирование на растительном субстрате, согласно изобретению жидкофазное глубинное негомогенное культивирование P.pulmonarius проводят крахмал-аммонийной среде, содержащей измельченную пшеничную солому, находящуюся в динамических условиях в течение 72 часов, а затем после отделения культуральной жидкости проводят окончательное твердофазное культивирование при температуре 23-25°С. Благоприятные условия роста грибного мицелия создаются за счет его иммобилизации на частицах растительного субстрата, находящегося в питательной среде. Процесс иммобилизации мицелия после отделения культуральной жидкости позволяет сократить продолжительность стадии твердофазного культивирования в сравнении с прототипом.
Предлагаемый способ получения белковой кормовой биомассы обладает следующими преимуществами:
- более равномерное распределение посевного материала по всему объему растительной биомассы;
- сокращаются сроки получения продукта;
- создаются оптимальные условия для сохранения стерильности при засеве и при проведении первой стадии глубинно-твердофазного культивирования;
- мицелий гриба в готовом продукте равномерно распределен по всему объему растительного субстрата;
- на первой стадии глубинного жидкофазного негомогенного культивирования происходит иммобилизация мицелия, адаптация культуры к используемому субстрату и прирост биомассы.
Повышение качества белковой кормовой биомассы достигается за счет равномерного распределения грибного мицелия по всему объему субстратного блока, что обеспечивает постоянство белкового состава по всему объему продукта.
Предлагаемый способ может быть применен и для других мицелиальных грибов, относящихся к экологической группе лигнинотрофных сапрофитов.
Способ получения белковой кормовой биомассы проводят в две стадии.
На первой стадии проходит процесс жидкофазного негомогенного культивирования P.pulmonarius в глубинных условиях на синтетической среде с применением способа иммобилизации мицелия на растительном субстрате (измельченная пшеничная солома), находящимся в питательной среде в незафиксированном состоянии. В процессе проведения первой стадии культивирования происходит иммобилизация мицелия на частицах субстрата, а также адаптация культуры к используемому субстрату и прирост биомассы, так как используемая питательная среда содержит в своем составе все необходимые компоненты для роста мицелия гриба, а процесс культивирования проводят в оптимальных условиях роста глубинной культуры гриба.
Первая стадия культивирования в глубинных условиях протекает с использованием способа иммобилизации мицелия на растительном субстрате (измельченная пшеничная солома). В качестве продуцента используют штамм P.pulmonarius РР-3.2, процесс жидкофазного культивирования в глубинных условиях проводят на крахмал-аммонийной среде при температуре 23-26°С и рН 5,5-5,8 в течение 72 часов. После отделения культуральной жидкости растительный субстрат с иммобилизованным мицелием поступает на вторую стадию технологического процесса - твердофазного культивирования.
На второй стадии проходит более глубокая переработка растительного субстрата мицелием P.pulmonarius до полной колонизации субстратного блока грибным мицелием.
Отличительной особенностью предлагаемого способа является то, что первую стадию культивирования проводят в глубинных условиях на крахмал-аммонийной среде, содержащей измельченную пшеничную солому, которая находится в динамических условиях при постоянном перемешивании за счет барботажа воздуха через питательную среду. В результате этого рост глубинной культуры происходит в контролируемых условиях. В процессе культивирования мицелий P.pulmonarius фиксируется на частицах растительного субстрата.
Способ осуществляется следующим образом. Выращивают чистую культуру гриба P.pulmonarius на сусловом агаре в чашках Петри. Затем полученный поверхностный мицелий переносят в емкость с подготовленной крахмал-аммонийной питательной средой, в которой проводят процесс выращивания посевного материала в глубинных условиях с перемешиванием и подачей стерильного воздуха. Питательная среда содержит в своем составе источник углерода (крахмал), источник азота (NH4 +), и комплекс минеральных солей, содержащий все необходимые для роста мицелия анионы (К+, Na+, Mg2+, Са2+, SO4 2-, Cl-, РО4 3-). Далее посевной материал засевается в коническую двухлитровую колбу с аналогичной питательной средой объемом 1,3-1,5 л в которой содержится измельченная солома. Питательная среда с содержащейся в ней измельченной соломой предварительно стерилизуется путем автоклавирования в течение 1 часа при давлении 0,05-0,06 МПа. Процесс культивирования проводят при температуре 23-26°С и рН 5,5-5,8 при непрерывном барботаже воздуха.
По окончании культивирования и отделения культуральной жидкости - растительный субстрат и с иммобилизованным на нем грибным мицелием поступает на стадию твердофазного культивирования.
Твердофазное культивирование проводят в растительной камере при температуре 23-25°С и влажности воздуха 60% до полной колонизации субстрата грибным мицелием.
Полученный продукт может быть использован в качестве кормовой добавки в рационе питания сельскохозяйственных животных. Полученный продукт может храниться при 5°С (в течение 12 месяцев) и использоваться в качестве посевного материала при выращивании плодовых тел, как по интенсивному, так и экстенсивному способу культивирования, а также в качестве готовых засеянных блоков при выращивании грибов на грибоводческих фабриках.
Пример 1. Штамм РР-3.2 базидиального гриба P.pulmonarius выращивают в чашке Петри на агаризованном сусле в течение 7 суток. Из краевой зоны роста семисуточной культуры вырезают агаровые блоки воздушного мицелия пробойным сверлом диаметром 8 мм, которые в стерильных условиях переносят в конические колбы вместимостью 250 мл с объемом питательной среды 150 мл в каждой. Питательная среда содержит в своем составе, г/л: картофельный крахмал - 20; (NH4)2SO4 - 7,0; K2HPO4 - 0,2; KH2PO4 - 1,3; MgSO4 - 0,5; CaCl2 - 0,1; NaCl - 0,1. Выращивание посевного материала проводят методом жидкофазного культивирования в глубинных условиях на лабораторном шейкере при 220 об/мин в течение 7 суток. Выращенный инокулят в дальнейшем используют в качестве посевного материла.
В качестве растительного субстрата используют измельченную пшеничную солому. Размер частичек растительного субстрата составляет 3-5 мм, количество растительного субстрата составляет - 7 г на 1 литр питательной среды. Используемая питательная среда аналогична питательной среде, используемой при выращивании инокулята. Подготовленную колбу с объемом питательной среды 1,3 л и находящейся в ней измельченным растительным субстратом стерилизуют в автоклаве в течение 1 часа при 0,05 МПа. После охлаждения до комнатной температуры в стерильных условиях производят засев глубинной культуры P.pulmonarius в объеме 300 мл.
Культивирование проводят при непрерывном перемешивании и подаче воздуха в течение 72 часов. Расход воздуха составляет 1,6 л/л среды в мин. Температура культивирования 23°С, рН 5,8.
По окончанию культивирования растительный субстрат с иммобилизованным на нем грибным мицелием поступает на стадию твердофазного культивирования. Культивирование проводят в растильной камере при температуре 25°С и влажности воздуха 60% до стадии образования «белого блока».
После сушки при 35-40°С и упаковки полученный продукт может использоваться в качестве кормовой добавки в рационе питания сельскохозяйственных животных.
Также культуральная жидкость с растительным субстратом после первой стадии культивирования может быть использована как посевной материал и после смешения с измельченной и простерилизованной соломой в соотношении 1:25 поступает на стадию твердофазного культивирования.
Пример 2. Аналогично примеру 1. Температура культивирования 26°С, рН среды 5,5.
В таблице 1 приведены результаты выращивания биомассы P.pulmonarius при различных параметрах процесса культивирования (примеры 1 и 2).
Как видно из данных таблицы 2 в предлагаемом способе белковую кормовую биомассу получают при проведении глубинного жидкофазного негомогенного культивирования P.pulmonarius (глубинно-твердофазного культивирования с добавлением в жидкую фазу измельченного растительного сырья) на питательной среде, содержащей измельченные частицы субстрата. В процессе культивирования P.pulmonarius в динамических условиях происходит иммобилизация мицелия на частицах субстрата, его адаптация к используемому субстрату, что создает благоприятные условия роста мицелия как на стадии глубинно-твердофазного, так и на последующей стадии твердофазного культивирования P.pulmonarius. В прототипе продукт получают при твердофазном культивировании P.pulmonarius на измельченной пшеничной соломе, используя в качестве посевного материала мицелий, выращенный в глубинных условиях.
В таблице 2 приведены сравнительные режимы получения белковой кормовой биомассы по способу прототипу и предлагаемому способу.
Полученная предложенным способом белковая кормовая биомасса может быть использована в сельском хозяйстве и комбикормовой промышленности в качестве добавки в рацион кормления жвачных животных и птиц. Она содержит в своем составе белки, ненасыщенные жирные кислоты и обладает витаминной и минеральной ценностью.
Предлагаемый способ может быть использован для получения белковой кормовой биомассы и с использованием других грибов относящихся к экологической группе лигнинотрофных сапрофитов или с использованием другого растительного сырья.
Источники информации
1. Способ получения кормовой добавки. Величко Н.А., Репях С.М. Патент RU 2093041 С12Р21, C12N 1/14 A01G 1/04, A01H 15/00 A23K1 A23L 1/211 от 20.10.1997 г.
2. Способ выращивания съедобных грибов из рода Pleurotus. Дьяков М.Ю., Кудрявцева О.А., Новоселова Д.Н., Камзолкина О.В. Патент RU 2442823 C12N 1/16 C12N 1/14 A01G 1/04 А01Н 15/00 от 10.07. 2009 г.
3. Способ выращивания вешенки. Ковалева В.С., Мануковский Н.С., Рыгалов В.Е. Патент RU 2086101 A01G 1/04 94042309/13 от 10.08. 1997 г.
4. Мельникова Е.А., Тарченкова Т.М., Миронов П.В. Использование глубинной биомассы мицелия Pleurotus pulmonarius в качестве посевного материала для выращивания плодовых тел, Хвойные бореальной зоны, 2013, Красноярск, Т. XXXI, №3-4, стр. 97-100.
Claims (1)
- Способ получения белковой кормовой биомассы, включающий выращивание посевного материала из штамма РР-3.2 базидиального гриба P.pulmonarius жидкофазным культивированием в глубинных условиях на крахмал-аммонийной среде при непрерывном перемешивании за счет барботажа воздуха при температуре 25-27°С в течение 72 часов, и последующее твердофазное культивирование на растительном субстрате, отличающийся тем, что жидкофазное негомогенное глубинное культивирование проводят на крахмал-аммонийной среде, содержащей измельченную пшеничную солому, находящуюся в динамических условиях при рН 5,5-5,8, а затем после отделения культуральной жидкости проводят окончательное твердофазное культивирование при температуре 23-25°С.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015153360A RU2670526C2 (ru) | 2015-12-11 | 2015-12-11 | Способ получения белковой кормовой биомассы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2015153360A RU2670526C2 (ru) | 2015-12-11 | 2015-12-11 | Способ получения белковой кормовой биомассы |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015153360A RU2015153360A (ru) | 2017-06-16 |
| RU2670526C2 true RU2670526C2 (ru) | 2018-10-23 |
Family
ID=59068002
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015153360A RU2670526C2 (ru) | 2015-12-11 | 2015-12-11 | Способ получения белковой кормовой биомассы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2670526C2 (ru) |
-
2015
- 2015-12-11 RU RU2015153360A patent/RU2670526C2/ru active IP Right Revival
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| КОПЫЛЬЦОВ С.В., ПОНОМАРЕВА Ю.В., ИВАНОВ Г.И., Характеристика штаммов Pleurotus pulmonarius лесных биогеоценозов Северо- Западного Кавказа, Микология и фитопатология, 2009, Т.43, вып. 5, стр. 39-46. * |
| МЕЛЬНИКОВА Е.А., ТАРЧЕНКОВА Т.М., МИРОНОВ П.В., Использование глубинной биомассы мицелия Pleurotus pulmonarius в качестве посевного материала для выращивания плодовых тел, Хвойные бореальной зоны, 2013, Красноярск, Т. XXXI, N 3-4, стр. 97-100. * |
| МЕЛЬНИКОВА Е.А., ТАРЧЕНКОВА Т.М., МИРОНОВ П.В., Использование глубинной биомассы мицелия Pleurotus pulmonarius в качестве посевного материала для выращивания плодовых тел, Хвойные бореальной зоны, 2013, Красноярск, Т. XXXI, N 3-4, стр. 97-100. МОРОЗОВ А.И., Выращивание вешенки, 2003, М, АСТ, стр. 23-28. МОРОЗОВ А.И., Выращивание вешенки, 2003, М, АСТ, стр.35. КОПЫЛЬЦОВ С.В., ПОНОМАРЕВА Ю.В., ИВАНОВ Г.И., Характеристика штаммов Pleurotus pulmonarius лесных биогеоценозов Северо- Западного Кавказа, Микология и фитопатология, 2009, Т.43, вып. 5, стр. 39-46. * |
| МОРОЗОВ А.И., Выращивание вешенки, 2003, М, АСТ, стр. 23-28. МОРОЗОВ А.И., Выращивание вешенки, 2003, М, АСТ, стр.35. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2015153360A (ru) | 2017-06-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR101629793B1 (ko) | 모렐버섯의 생산을 위한 배지 조성물 | |
| Abdullah et al. | Production of liquid spawn of an edible grey oyster mushroom, Pleurotus pulmonarius (Fr.) Quél by submerged fermentation and sporophore yield on rubber wood sawdust | |
| CN107937329B (zh) | 一种提高液体菌种活力的方法 | |
| JP7319254B2 (ja) | 液体及び固体トリコデルマ生成物の大規模生成 | |
| CN107056394A (zh) | 一种真姬菇栽培的方法 | |
| CN102369838B (zh) | 蘑菇的液体种菌的生产方法 | |
| KR101262255B1 (ko) | 버섯 폐배지 및 음식물 퇴비를 함유하는 버섯 재배 배지의 제조방법 | |
| CN105237248A (zh) | 一种灰树花生产培养料及其应用 | |
| CN104206169A (zh) | 利用蛹虫草培养基制备营养麦片的方法 | |
| CN101717309B (zh) | 一种草腐食用菌固体菌种的培养基以及固体菌种的制备方法 | |
| KR20110006267A (ko) | 느타리버섯 재배용 원료 조성물과 이를 이용한 느타리버섯의 재배 방법 | |
| CN106431658B (zh) | 一种平菇培养基及平菇栽培方法 | |
| RU2430155C1 (ru) | Посевной мицелий базидиомицета и способ его приготовления | |
| RU2670526C2 (ru) | Способ получения белковой кормовой биомассы | |
| CN109429989A (zh) | 一种促进蔬菜育苗发芽率和生长的基质及其制备方法 | |
| CN107926482A (zh) | 一种利用液体培养基生产蛹虫草子实体的方法 | |
| RU2354135C2 (ru) | Способ переработки отходов растительного сырья | |
| CN109279937A (zh) | 一种食用菌固体菌种的培养基及其制备方法 | |
| KR101687890B1 (ko) | 느타리버섯의 재배방법 및 배지조성물 | |
| CN113767813A (zh) | 食用真菌菌丝体的固相发酵培养基及其配制和发酵方法 | |
| RU2498558C2 (ru) | Способ получения жидкого мицелия для использования в обогащении белком кормов для животных | |
| KR20100095071A (ko) | 표고버섯 톱밥배지의 제조방법 | |
| KR101190094B1 (ko) | 곡립배지를 이용한 꽃송이 버섯 균사체의 배양방법 | |
| KR20010004813A (ko) | 콩섬유박을 이용한 버섯류의 배양법 | |
| RU2732832C1 (ru) | Культивирование посевного мицелия гриба Pleurotus ostreatus (вешенки обыкновенной) c использованием сырой пивной дробины - отхода пивоваренной промышленности |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20180215 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20180322 |
|
| HZ9A | Changing address for correspondence with an applicant | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20181212 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20191017 |