RU2624044C2 - Применение фармацевтической или пищевой композиции или пищевой добавки для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий - Google Patents
Применение фармацевтической или пищевой композиции или пищевой добавки для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий Download PDFInfo
- Publication number
- RU2624044C2 RU2624044C2 RU2014107771A RU2014107771A RU2624044C2 RU 2624044 C2 RU2624044 C2 RU 2624044C2 RU 2014107771 A RU2014107771 A RU 2014107771A RU 2014107771 A RU2014107771 A RU 2014107771A RU 2624044 C2 RU2624044 C2 RU 2624044C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strains
- coli
- dsm
- use according
- lactobacillus
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 55
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims abstract description 25
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 title claims abstract description 17
- 230000009467 reduction Effects 0.000 title abstract description 4
- 239000002778 food additive Substances 0.000 title abstract 3
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 title abstract 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 title description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 36
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 claims abstract description 25
- 241001646719 Escherichia coli O157:H7 Species 0.000 claims abstract description 19
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims abstract description 19
- 241000186684 Lactobacillus pentosus Species 0.000 claims abstract description 18
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 claims abstract description 17
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 claims abstract description 14
- 241000588754 Klebsiella sp. Species 0.000 claims abstract description 13
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 101710121003 Oxygen-evolving enhancer protein 3, chloroplastic Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 claims description 29
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 claims description 29
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 claims description 29
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims description 29
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 claims description 29
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims description 29
- PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N L-N-acetyl-Cysteine Chemical compound CC(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O PWKSKIMOESPYIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 23
- 229960004308 acetylcysteine Drugs 0.000 claims description 23
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 20
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 18
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 15
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 15
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 13
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 13
- 230000008018 melting Effects 0.000 claims description 8
- 238000002844 melting Methods 0.000 claims description 8
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 6
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000001847 bifidogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 claims description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 41
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 46
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 24
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 23
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 23
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 23
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 21
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 12
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 12
- 108010062877 Bacteriocins Proteins 0.000 description 11
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 11
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 11
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 9
- 241001495410 Enterococcus sp. Species 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 8
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 8
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 8
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 8
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 7
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 6
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 6
- 231100000001 growth retardation Toxicity 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 6
- 241001112696 Clostridia Species 0.000 description 5
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 4
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241001430149 Clostridiaceae Species 0.000 description 3
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 3
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 3
- 241001036088 Escherichia coli O104:H4 Species 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 230000000369 enteropathogenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 3
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- OSBLTNPMIGYQGY-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid;boric acid Chemical compound OB(O)O.OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O OSBLTNPMIGYQGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 description 2
- 241000588923 Citrobacter Species 0.000 description 2
- 206010012741 Diarrhoea haemorrhagic Diseases 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 2
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 2
- 208000032759 Hemolytic-Uremic Syndrome Diseases 0.000 description 2
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 2
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 2
- 241001647786 Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii Species 0.000 description 2
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 2
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 2
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 2
- VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N cadaverine Chemical compound NCCCCCN VHRGRCVQAFMJIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 229940009976 deoxycholate Drugs 0.000 description 2
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 208000027909 hemorrhagic diarrhea Diseases 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N putrescine Chemical compound NCCCCN KIDHWZJUCRJVML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 208000013223 septicemia Diseases 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N tyramine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C=C1 DZGWFCGJZKJUFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 2
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- VLEIUWBSEKKKFX-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;2-[2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OCC(N)(CO)CO.OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O VLEIUWBSEKKKFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005097 23S Ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 241000589875 Campylobacter jejuni Species 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 241000193155 Clostridium botulinum Species 0.000 description 1
- 206010009657 Clostridium difficile colitis Diseases 0.000 description 1
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 1
- 241000193470 Clostridium sporogenes Species 0.000 description 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical class S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 241000588697 Enterobacter cloacae Species 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241000533845 Enterolobium cyclocarpum Species 0.000 description 1
- 241001360526 Escherichia coli ATCC 25922 Species 0.000 description 1
- 241000191070 Escherichia coli ATCC 8739 Species 0.000 description 1
- 208000019331 Foodborne disease Diseases 0.000 description 1
- 241000588731 Hafnia Species 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 108091029795 Intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 1
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010024641 Listeriosis Diseases 0.000 description 1
- 239000006154 MacConkey agar Substances 0.000 description 1
- 240000002129 Malva sylvestris Species 0.000 description 1
- 235000006770 Malva sylvestris Nutrition 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N Methanethiol Chemical compound SC LSDPWZHWYPCBBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001602730 Monza Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000193157 Paraclostridium bifermentans Species 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 206010035742 Pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 208000003100 Pseudomembranous Enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 206010037128 Pseudomembranous colitis Diseases 0.000 description 1
- 239000005700 Putrescine Substances 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 1
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 1
- 108010017898 Shiga Toxins Proteins 0.000 description 1
- 239000008051 TBE buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006114 decarboxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 208000001848 dysentery Diseases 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- -1 for example Chemical class 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- CJNBYAVZURUTKZ-UHFFFAOYSA-N hafnium(IV) oxide Inorganic materials O=[Hf]=O CJNBYAVZURUTKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 1
- 229930186900 holotoxin Natural products 0.000 description 1
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000000871 hypocholesterolemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019671 masking sweet taste Nutrition 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 231100000243 mutagenic effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 108010009719 mutanolysin Proteins 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000002826 nitrites Chemical class 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007119 pathological manifestation Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000011253 protective coating Substances 0.000 description 1
- 238000001853 pulsed-field electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000020185 raw untreated milk Nutrition 0.000 description 1
- 101150079601 recA gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000004763 spore germination Effects 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006068 taste-masking agent Substances 0.000 description 1
- 239000001974 tryptic soy broth Substances 0.000 description 1
- 108010050327 trypticase-soy broth Proteins 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 229960003732 tyramine Drugs 0.000 description 1
- 208000019206 urinary tract infection Diseases 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
- A23L33/175—Amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/20—Reducing nutritive value; Dietetic products with reduced nutritive value
- A23L33/21—Addition of substantially indigestible substances, e.g. dietary fibres
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
- A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
- A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/745—Bifidobacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01017—Lysozyme (3.2.1.17)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/167—Pentosus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/169—Plantarum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/175—Rhamnosus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/44—Oils, fats or waxes according to two or more groups of A61K47/02-A61K47/42; Natural or modified natural oils, fats or waxes, e.g. castor oil, polyethoxylated castor oil, montan wax, lignite, shellac, rosin, beeswax or lanolin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Предложено применение фармацевтической композиции, пищевой композиции или пищевой добавки для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий, принадлежащих к серотипу Е. coli O157:Н7, Listeria monocytogenes АТСС 19112 и Klebsiella sp. При этом фармацевтическая композиция, пищевая композиция или пищевая добавка содержит по меньшей мере один бактериальный штамм, выбранный из группы, состоящей из Lactobacillus rhamnosus LR04 DSM 16605, Lactobacillus plantarum LP01 LMG P-21021, Lactobacillus plantarum LP02 LMG P-21020 и Lactobacillus pentosus LPS01 DSM 21980. Группа изобретений обеспечивает эффективное ингибирование или уменьшение роста бактерий Е. coli O157:Н7, Listeria monocytogenes АТСС 19112 и Klebsiella sp. 3 н. и 24 з.п. ф-лы, 6 ил., 7 табл.
Description
Настоящее изобретение относится к штаммам лактобактерий и бифидобактерий, оказывающим ингибирующее/уменьшающее действие на рост различных биотипов E. coli (грамотрицательные), включая E. coli O157:H7 и O104:Н4, и различных видов бактерий, принадлежащих к семейству Clostridiaceae (анаэробные, грамположительные палочки), которые ответственны за гнилостное разложение и серьезные кишечные инфекции (Clostridium difficile).
Кроме того, настоящее изобретение относится к штаммам лактобактерий, обладающим специфической антимикробной активностью в отношении Listeria monocytogenes (грамположительные), Enterococcus sp. и Klebsiella sp.(грамотрицательные). Кроме того, настоящее изобретение относится к фармацевтической или пищевой композиции, или добавке, или медицинскому устройству, содержащим по меньшей мере один из указанных штаммов лактобактерий и/или бифидобактерий, возможно в комбинации с ацетилцистеином и/или лизоцимом.
Известно, что бактерия Escherichia coli - сокращенно Е. coli - является самым известным видом рода Escherichia: у нее установлен по меньшей мере 171 серотип, характеризующийся различными комбинациями антигенов О, Н, К, F. Она является одним из основных видов бактерий, которые живут в нижней части кишечника теплокровных животных (птиц и млекопитающих, включая человека) и которые необходимы для правильного переваривания пищи. Ее присутствие в водоемах указывает на наличие условий фекального загрязнения (она является основным индикатором фекальной контаминации наряду с энтерококками).
Род Escherichia, наряду с другими родами, такими как, например, Enterobacter, Klebsiella, Citrobacter и Serratia, объединены под названием колиформные бактерии. Формально «колиформная группа» включает неспорообразующие аэробные и анаэробные бактерии.
Несмотря на то, что она является нормальным обитателем кишечника и играет важнейшую роль в процессе пищеварения, существуют ситуации, при которых Е. coli может вызывать заболевания у человека и животных. Некоторые штаммы Е. coli являются возбудителями кишечных и внекишечных заболеваний, таких как инфекции мочевых путей, менингит, перитонит, септицемия и пульмонит. Некоторые штаммы Е. coli являются токсинообразующими, то есть они продуцируют токсины, которые помимо всего прочего могут быть причиной диареи. Дизентерия, вызванная Е. coli, является обычной пищевой токсикоинфекцией, так как ею заражаются, главным образом, через контаминированные пищевые продукты. Контаминация может происходить через плохо приготовленное инфицированное мясо, через непастеризованное молоко и сделанные из него сыры и через другие пищевые продукты, контаминированные фекалиями. Е. coli продуцирует четыре вида токсинов, которые подразделяют по их различной чувствительности к термической обработке на термолабильные и термостабильные и по их токсикогенному действию - шигатоксины и гемолитические токсины, HlyA.
Термолабильный токсин, называемый LT, очень похож по структуре и функциям на холерный токсин. Он содержит субъединицу 'А' и пять субъединиц 'В' в голотоксине. Субъединицы В способствуют адгезии и проникновению токсина в клетки кишечника хозяина, где субъединица А стимулирует высвобождение воды клетками, вызывая диарею.
«Штамм» Е. coli представляет собой группу с определенными характеристиками, которые дают возможность сделать его узнаваемым среди других штаммов Е. coli, аналогично способу, посредством которого можно отличать животных различных пород. Различные штаммы Е. coli живут в различных видах животных, так что возможно установить, попадает ли фекальное вещество в воду, например, из организмов людей или птиц.
Новые штаммы Е. coli постоянно возникают из-за природного биологического процесса мутации, и некоторые из этих штаммов обладают свойствами, которые могут быть опасными для животного-хозяина. Хотя у большинства взрослых людей патогенный штамм, вероятно, не вызвал бы ничего, кроме диареи, и не смог бы породить никаких симптомов, у маленьких детей, или больных людей, или людей, ослабленных недавно перенесенными заболеваниями или подвергающихся особым видам лечения, новый штамм может стать причиной серьезных заболеваний или даже смерти. Примером чрезвычайно вирулентного штамма Е. coli является E. coli O157:H7. Штаммы энтерогеморрагической Е. coli являются основными штаммами, ответственными за заболевание в промышленно развитых странах. Серотипом, ответственным в большинстве случаев за эти заболевания, является E. coli O157:H7.
Е. coli O157:H7 или энтерогеморрагическая Escherichia coli (EHEC) представляет собой энтерогеморрагический штамм бактерии Escherichia coli, который является причиной заболеваний, передающихся через пищу. Инфекция часто приводит к геморрагической диарее, а иногда к почечной недостаточности, гемолитико-уремическому синдрому (ГУС), особенно у молодых людей, детей и пожилых людей.
Передача происходит посредством фекально-орального пути, и большинство случаев заболевания связано с употреблением в пищу сырых или недоваренных продуктов, загрязненных землей или контаминированной водой, или употреблением овощей, загрязненных такой водой. У жвачных животных она живет в кишечнике в качестве симбионта, но не вызывает патологии из-за недостатка рецепторов токсина, продуцируемого бактерией. Что касается рода Clostridium, известно, что многие пищевые продукты содержат эти бактерии, которые ответственны за процессы расщепления самих пищевых продуктов, и что если они проглатываются вместе с пищей и достигают кишечника, они способны изменять состав микрофлоры и вызывать гнилостное разложение.
Пищевыми продуктами, обычно обуславливающими эти пищевые токсикоинфекции, являются виды свежего мяса, контаминированного, в частности, Clostridium perfringens, С. sporogenes, С. Bifermentans и так далее, которые могут гидролизовать сахара, образуя вещества с неприятным запахом, такие как индол, аммиак и меркаптаны.
С другой стороны, рыба может быть поражена другим видом Clostridium, С. botulinum, который может развиваться и продуцировать токсин даже при низких температурах (4°С). Среди клостридий наиболее опасной для человека является Clostridium difficile, которая может продуцировать энтеротоксины, ответственные за случаи геморрагической диареи, псевдомембранозного колита с серьезными осложнениями, такими как перфорация, септицемия и смерть. Бактерия образует споры, устойчивые к нагреванию, и переносится от человека к человеку посредством фекально-орального пути.
В основном патогенез, обусловленный С. difficile, связан с применением антибиотиков, которые вызывают заметный дисбаланс в кишечной микрофлоре, обуславливая преобладание вызывающих гниение видов в ущерб видам с ферментативным действием.
С. difficile распространена повсеместно, в частности в больничной среде, и может колонизировать кишечник небольшой части здоровых индивидуумов (примерно 5%). Применение антибиотиков сопряжено с ее чрезмерным ростом и серьезными патологическими проявлениями вследствие ее резистентности к большинству антибиотиков. После того как споры проглатывают, они, преодолев желудочный барьер, оседают в толстом кишечнике, где они прорастают и развиваются в вегетативные формы, которые путем бинарного деления образуют многочисленную популяцию, обуславливающую множественные патологические формы, которые создают особенно серьезные проблемы для людей пожилого возраста.
По имеющимся оценкам, в настоящее время этим организмом заражены более 30% пациентов, получающих лечение в больницах Соединенных Штатов. Кроме того, Listeria monocytogenes является повсеместно распространенным патогеном, ответственным за листериоз человека, потенциально смертельную инфекцию пищевого происхождения.
Пробиотические бактерии (лактобациллы и бифидобактерии) являются микроорганизмами, которые приносят пользу здоровью хозяина, и по этой причине в большинстве случаев употребляются постоянно возрастающим числом людей, которые выбирают пищевые продукты, кисломолочные продукты, йогурт и пищевые добавки, содержащие пробиотические бактерии.
Поэтому сохраняется потребность иметь доступные пробиотические бактерии, способные колонизировать кишечник и оказывать благоприятные воздействия на организм-хозяина. В частности, сохраняется необходимость иметь доступные пробиотические бактерии, способные преобладать над патогенными видами с последующей пользой для здоровья. И даже более конкретно, сохраняется необходимость иметь доступные пробиотические бактерии, способные предупреждать и/или лечить инфекции и/или патологии, связанные с патогенными бактериями (грамположительными и грамотрицательными).
После интенсивной научно-исследовательской работы заявитель неожиданно обнаружил, что отобранные бактерии способны соответствующим образом отвечать вышеупомянутым потребностям.
Более того, заявитель неожиданно обнаружил, что при использовании N-ацетилцистеина, который обладает свойством разрушать бактериальные биопленки, обычно продуцируемые для самозащиты патогенными микроорганизмами, действие бактериоцинов отобранных пробиотических штаммов гораздо более эффективно.
Кроме того, неожиданно обнаружено, что при использовании конкретной методики микроинкапсулирования в липидную матрицу предпочтительно растительного происхождения, которая дает защиту от желудочного сока лизоциму, последний способен проходить неповрежденным через гастродуоденальную область пищеварительного тракта, чтобы быть активированным на уровне толстого кишечника и проявлять свое литическое действие в отношении спор всех видов клостридий. В результате этого гидролитического действия на споры рода Clostridium, и в частности С. difficile, в момент их прорастания, образование вегетативных клеток, обуславливающих увеличение популяции патогена и образование токсинов, не происходит.
Комбинированное действие пробиотических штаммов с ферментативной активностью и барьерным эффектом против вызывающих гниение видов, включая клостридий, в сочетании с прямым действием лизоцима, который фактически предотвращает прорастание спор клостридий, составляет исключительную и инновационную стратегию в отношении этой опасной группы патогенов.
Вся комбинация (пробиотические бактерии по настоящему изобретению, продуцирующие бактериоцины, и/или N-ацетилцистеин, который разрушает бактериальную биопленку, и/или лизоцим, предпочтительно в микроинкапсулированной форме в липидной матрице, который блокирует прорастание спор) представляет собой инновационное средство, способное бороться с большим количеством патогенных штаммов, в отношении которых до сих пор нет эффективной стратегии противодействия.
Объектом настоящего изобретения является отбор штаммов лактобактерий и/или бифидобактерий, которые способны продуцировать бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода, для применения в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с: различными патогенами, включая Е. coli, и в частности Е. coli O157:Н7 и O104:Н4; и/или вызывающими гниение микроорганизмами, принадлежащими к семейству Clostndiaceae, Clostridium difficile; и/или патогенами Listeria monocytogenes, Enterococcus sp., Klebsiella sp., причем указанные бактерии также возможно использовать в комбинации с N-ацетилцистеином и/или лизоцимом. Лизоцим может быть микроинкапсулирован и защищен от желудочного сока в липидной матрице. В предпочтительном воплощении липидная матрица имеет растительное происхождение, обладая температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°.
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство, содержащие по меньшей мере один из указанных штаммов бактерий для применения в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с патогенами Е. coli, включая Е. coli O157:Н7; и/или вызывающими гниение микроорганизмами, принадлежащими к семейству Clostridiaceae, включая Clostridium difficile; и/или патогенами Listeria monocytogenes, Enterococcus sp., Klebsiella sp.
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство, содержащие по меньшей мере один из указанных штаммов бактерий в комбинации с N-ацетилцистеином.
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство, содержащие по меньшей мере один из указанных штаммов бактерий в комбинации с лизоцимом. В предпочтительном воплощении лизоцим является микроинкапсулированным.
Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство, содержащие по меньшей мере один из указанных штаммов бактерий в комбинации с N-ацетилцистеином и с лизоцимом. В предпочтительном воплощении лизоцим является микроинкапсулированным в липидную матрицу. В предпочтительном воплощении липидная матрица имеет растительное происхождение, обладая температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°.
Другие предпочтительные воплощения настоящего изобретения описаны в продолжении описания и будут заявлены в прилагаемых зависимых пунктах формулы изобретения.
Перечень таблиц и графических материалов
В таблице 1 показан список 14 штаммов лактобацилл, 4 штаммов бифидобактерий и 2 штаммов стрептококков, которые были протестированы в отношении 4 биотипов Е coli.
В таблицах 2-5 перечислены штаммы, которые продуцируют бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода и которые способны бороться, ингибировать или уменьшать рост патогенных бактерий, принадлежащих к виду E. coli, включая Е. coli O157:Н7.
Таблицы 6 и 7 относятся к штаммам рода Lactobacillus.
На фиг. 1 показана методика, использованная для тестирования штаммов, которые являются объектом настоящего изобретения.
На фиг. 2 показаны зоны задержки роста, образованные штаммами, перечисленными в таблице 4, в отношении Е. coli (АТСС 8739, АТСС 10536, АТСС 35218, АТСС 25922) и серотипа O157:Н7 (CQ 9485).
Фиг. 3 относится к данным, показанным в таблицах 6 и 7.
Фиг. 4 относится к in vitro ингибиторной активности штаммов пробиотических бактерий в отношении E. coli. Результаты (выражены в мм) представляют собой среднее значение ± стандартное отклонение (SD) 3 независимых экспериментов.
Фиг. 5 и 6 относятся к in vitro ингибиторной активности штаммов пробиотических бактерий в отношении других энтеропатогенных бактерий. На фиг. 5 результаты (выражены в мм) представляют собой средние значения ± стандартное отклонение (SD) 3 независимых экспериментов. Условные обозначения на фиг. 6: L. rhamnosus LR04 (диск 5); L. plantarum LP01 (диск 4), L. pentosus LPS01 (диск 2) и L. plantarum LP02 (диск 1).
Заявитель провел значительную исследовательскую работу и скрининговые исследования, начав с очень обширной группы штаммов бактерий. По окончании этого исследования заявитель обнаружил и отобрал группу штаммов бактерий, принадлежащих к виду или к нескольким видам, выбранным из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus pentosus и Bifidobacterium breve. Отобранные штаммы способны продуцировать бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода, а они представляют собой вещества, которые способны эффективно бороться, ингибировать или уменьшать рост патогенных бактерий. Эти штаммы имеют обоснованное применение и использование в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с грамотрицательными и/или грамположительными патогенными бактериями.
Патогенные бактерии выбраны из группы, содержащей колиформные бактерии и клостридии. Колиформные бактерии представляют собой группу бактерий, принадлежащих к семейству Enterobacteriaceae. В частности, колиформные бактерии представляют собой палочковидные, грамотрицательные, аспорогенные, аэробные и факультативные анаэробные бактерии, которые сбраживают лактозу с образованием газа и кислот при 35-37°С за 48 часов и обладают ферментом бета-галактозидазой. Они являются повсеместно распространенными организмами; некоторые присутствуют в фекальном веществе и поэтому используются в качестве индикатора загрязнения как воды, так и пищи, источником других являются вода или почва. Группа содержит более пятидесяти родов, среди них Citrobacter, Enterobacter, предпочтительно Enterobacter cloacae, Escherichia, предпочтительно Е. coli, Hafnia, Klebsiella, предпочтительно Klebsiella pneumoniae, Serratia и Yersinia. Другие патогены, во всех случаях представляющие интерес в контексте настоящего изобретения, принадлежат к семейству Clostridiaceae, в особенности относятся к С. difficile. Антагонистическое действие проявляется также в отношении видов, выбранных из группы, содержащей Salmonella enteriditis, Campylobacter jejunii, Helicobacter pylori, Listeria monocytogenes, Enterococcus sp. и Klebsiella sp.
Объектом настоящего изобретения является фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство, содержащие по меньшей мере один бактериальный штамм, принадлежащий к виду или к нескольким видам, выбранным из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из: Lactobacillus delbrueckii, Lactobacillus delbrueckii subsp.delbrueckii, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus reuteri и Bifidobacterium breve, способный продуцировать бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода, для применения в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с патогенами, такими как Е. coli, С. difficile, Listeria monocytogenes, Enterococcus sp. и Klebsiella sp.
В одном воплощении фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство содержат по меньшей мере один бактериальный штамм, принадлежащий к виду или к нескольким видам, выбранным из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из: Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus и Lactobacillus pentosus, способный продуцировать бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода, для применения в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с патогенами, такими как Е. coli, С. difficile, Listeria monocytogenes, Enterococcus sp. и Klebsiella sp.
Штамм и/или различные возможные комбинации вышеупомянутых штаммов (смотри также таблицы 1-5 ниже), выбранные для указанной цели, могут быть использованы отдельно или в комбинации с N-ацетилцистеином; или в комбинации с микроинкапсулированным лизоцимом; или в комбинации с N-ацетилцистеином и микроинкапсулированным лизоцимом.
В одном воплощении патоген Е. coli выбран из Е coli O157:Н7 и Е. coli O104:Н4.
В таблице 1 показан список 14 штаммов лактобацилл, 4 штаммов бифидобактерий и 2 штаммов стрептококков, которые были протестированы в отношении 4 биотипов Е coli. Величины выражены в зонах задержки роста (мм).
Протестированные бактерии, представленные в таблице 1, взятые отдельно или в комбинации друг с другом, имеют обоснованное применение в контексте настоящего изобретения.
В одном воплощении штаммы бактерий выбраны из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из бактерий, перечисленных в таблице 2.
Штаммы, представленные в таблице 2, способны продуцировать бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода, которые могут бороться, ингибировать и уменьшать рост патогенных бактерий, принадлежащих к виду Е. coli, включая Е. coli O157:Н7.
Штаммы, представленные в таблице 2, тестировали по отдельности с целью определения их способности проявлять антагонизм (ингибировать рост или уменьшать число одного или более чем одного опасного или патогенного вида/рода микроорганизмов), как указано в четырех колонках справа в таблице 1.
Все штаммы, описанные и/или заявленные в настоящей заявке на патент, депонированы в соответствии с Будапештским договором и предоставляются в распоряжение общественности по запросу в компетентный орган по депонированию.
В другом воплощении штаммы бактерий выбраны из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из бактерий, перечисленных в таблице 3.
В дополнительном воплощении штаммы бактерий выбраны из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из бактерий, перечисленных в таблице 4.
Композиция по настоящему изобретению имеет дополнительное обоснованное применение также для применения в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с патогенами Е. coli, Н. pylori и Clostridium difficile.
В одном воплощении композиция по настоящему изобретению содержит или, альтернативно, состоит из 1-8 штаммов, выбранных из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из штаммов, перечисленных в таблице 4.
В другом предпочтительном воплощении композиция по настоящему изобретению содержит или, альтернативно, состоит из 1-6 штаммов, предпочтительно 2-5 штаммов, даже более предпочтительно 3-4 штаммов, выбранных из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из штаммов, перечисленных в таблице 4.
В предпочтительном воплощении композиция содержит или, альтернативно, состоит из шести штаммов, которые перечислены в таблице 5; или из 4 лактобацилл, перечисленных в таблице 5.
Заявитель обнаружил, что штаммы бактерий, выбранных из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из L. pentosus LPS01 DSM 21980, L. plantarum LP01 LMG P-21021, L. plantarum LP02 LMG P-21020 и L. rhamnosus LR04 DSM 16605, способны проявлять ингибиторную активность в отношении 4 штаммов Е. coli; в частности, штаммы L rhamnosus LR04 DSM 16605 и L. pentosus LPS01 DSM 21980 демонстрируют более заметную активность также в отношении серотипа O157:Н7.
Более того, заявитель обнаружил, что штамм L. plantarum LP01 LMG Р-21021 демонстрировал ингибиторную способность в отношении всех энтеропатогенных бактерий, в частности в отношении Listena monocytogenes.
Объектом настоящего изобретения является фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство, содержащие по меньшей мере один бактериальный штамм, принадлежащий к виду или к нескольким видам, выбранным из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из: Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus и Lactobacillus pentosus, который способен продуцировать бактериоцины, и/или метаболиты, и/или перекись водорода, для применения в профилактическом и/или терапевтическом лечении инфекций и/или патологий, связанных с патогенами, такими как Е. coli, включая серотип O157:Н7, и Listena monocytogenes.
В одном воплощении указанная фармацевтическая или пищевая композиция, или добавка, или медицинское устройство содержат по меньшей мере один бактериальный штамм, выбранный из группы, содержащей или, альтернативно, состоящей из L. pentosus LPS01 DSM 21980, L. plantarum LP01 LMG P-21021, L. plantarum LP02 LMG P-21020 и L. rhamnosus LR04 DSM 16605; предпочтительно она содержит или состоит из штаммов L rhamnosus LR04 DSM 16605 и L. pentosus LPS01 DSM 21980; или она содержит или состоит из штамма L. plantarum LP01 LMG P-21021.
В композиции по настоящему изобретению смесь штаммов бактерий находится в количестве, составляющем от 0,5 до 20% по массе от общей массы композиции, предпочтительно от 2,5 до 10%. В предпочтительном воплощении композиция может к тому же содержать по меньшей мере одно пребиотическое волокно и/или углевод, обладающий бифидогенным действием.
Пребиотическое волокно, которое находит применение в композиции по настоящему изобретению, представляет собой волокно, которое должно быть использовано штаммами бактерий, присутствующими в композиции, но не патогенами, для противодействия которым оно предназначено.
Кроме того, композиция может также содержать другие активные ингредиенты и/или компоненты, такие как витамины, минералы, биоактивные пептиды, вещества с антиокислительным, гипохолестеринемическим, гипогликемическим и противовоспалительным действием и агенты, маскирующие сладкий вкус, в количестве, обычно составляющем от 0,001 до 20% по массе, предпочтительно от 0,01 до 5% по массе, всегда в зависимости от вида активного компонента и его рекомендованной суточной дозы, если он присутствует, от общей массы композиции.
Пищевую композицию, которая является объектом настоящего изобретения, например симбиотическую композицию, или добавку, или фармацевтическую композицию, или медицинское устройство, получают исходя из методик и оборудования, известных специалистам в данной области техники.
В предпочтительном воплощении композиция содержит бактерии в концентрации, составляющей от 1×106 до 1×1011 колониеобразующих единиц (КОЕ)/г смеси, предпочтительно от 1×108 до 1×1010 КОЕ/г смеси.
В предпочтительном воплощении композиция содержит бактерии в концентрации, составляющей от 1×106 до 1×1011 КОЕ/доза, предпочтительно от 1×108 до 1×1010 КОЕ/доза.
Доза может составлять от 0,2 до 10 г, например она составляет 0,25 г, 1 г, 3 г, 5 г или 7 г.
Пробиотические бактерии, используемые в настоящем изобретении, могут находиться в твердой форме, в частности в форме порошка, дегидрированного порошка или лиофилизированного.
Все композиции по настоящему изобретению готовят согласно методикам, известным специалистам в данной области техники, и при использовании известного оборудования.
В предпочтительном воплощении композиция, которая является объектом настоящего изобретения, содержит к тому же ацетилцистеин (или N-ацетилцистеин), который представляет собой N-ацилированное производное аминокислоты цистеина, и лизоцим, предпочтительно микроинкапсулированный и защищенный от желудочного сока в липидной матрице, как описано выше.
Заявитель обнаружил, что применение ацетилцистеина в сочетании с одним или двумя штаммами бактерий, описанных в таблицах 1-5 или в различных предпочтительных воплощениях, упомянутых выше, способствует разрушению бактериальной биопленки, продуцируемой самими патогенными бактериями и которая используется указанными патогенами в качестве защиты. На практике видно, что патогенные бактерии способны образовывать защитное покрытие (биопленку) вокруг клеток. Биопленка делает клетки патогенов более трудноуязвимыми и лучше защищенными. Ацетилцистеин способен проникать в биопленку клеток и разрушать ее, облегчая атаку на патогенные клетки с помощью бактериоцинов, и/или метаболитов, и/или перекиси водорода, продуцируемых штаммами бактерий, которые являются объектом настоящего изобретения.
Количество ацетилцистеина, присутствующего в композиции для введения, которая является объектом настоящего изобретения, составляет от 10 до 1000 мг/сутки, предпочтительно оно составляет от 200 до 600 мг/сутки. Ацетилцистеин предпочтительно в твердой форме смешивают с пробиотическими бактериями предпочтительно в твердой или лиофилизированной форме при использовании методик и оборудования, известных специалистам в данной области техники.
Количество лизоцима, предпочтительно микроинкапсулированного, присутствующего в композиции для введения, которая является объектом настоящего изобретения, составляет от 10 до 2000 мг/сутки, предпочтительно оно составляет от 400 до 1000 мг/сутки. Лизоцим (предпочтительно микроинкапсулированный) находится предпочтительно в твердой форме, и его смешивают с пробиотическими бактериями предпочтительно в твердой или лиофилизированной форме при использовании методик и оборудования, известных специалистам в данной области техники.
Количества ацетилцистеина и микроинкапсулированного лизоцима, присутствующих в композиции для введения, которая является объектом настоящего изобретения, соответственно составляют от 10 до 1000 мг/сутки, предпочтительно от 200 до 600 мг/сутки, тогда как микроинкапсулированный лизоцим составляет от 10 до 2000 мг/сутки, предпочтительно от 400 до 1000 мг/сутки; их смешивают с пробиотическими бактериями в твердой форме, предпочтительно в твердой или лиофилизированной форме, при использовании методик и оборудования, известных специалистам в данной области техники. Количество N-ацетилцистеина, присутствующего в композиции, которая является объектом настоящего изобретения, составляет от 10 до 1000 мг/сутки, предпочтительно от 50 до 200 мг/сутки, даже более предпочтительно от 60 до 150 мг/сутки. N-ацетилцистеин имеется в продаже в фармацевтически приемлемой форме, предпочтительно в твердой форме, и его смешивают с пробиотическими бактериями, предпочтительно в твердой или лиофилизированной форме, при использовании методик и оборудования, известных специалистам в данной области техники, с получением гомогенной композиции.
Количество лизоцима, предпочтительно микроинкапсулированного и защищенного от желудочного сока, присутствующего в композиции, которая является объектом настоящего изобретения, составляет от 10 до 2000 мг/сутки, предпочтительно оно составляет от 400 до 1000 мг/сутки, даже более предпочтительно от 500 до 800 мг/сутки, предпочтительно в твердой форме; его смешивают с пробиотическими бактериями, предпочтительно в твердой или лиофилизированной форме, при использовании методик и оборудования, известных специалистам в данной области техники, с получением гомогенной композиции. Лизоцим имеется в продаже в фармацевтически приемлемой форме.
Экспериментальная часть
Антимикробную активность 14 штаммов лактобацилл, 4 штаммов бифидобактерий и 2 штаммов стрептококков тестировали в отношении 4 биотипов E coll. АТСС 8739, АТСС 10536, АТСС 35218 и АТСС 25922; они являются общественно доступными. Величины выражают в виде зон задержки роста (мм). Данные показаны в таблице 1.
Для определения антимикробной активности штаммы тестировали согласно протоколу, изложенному в Santini et al. (2010) Characterization of probiotic strains: an application as feed additives in poultry against Campylobacter jejuni. IntJ Food Microbiol. 2010 Jul 31; 141 Supp 11:398-108. Epub 2010 Apr 8.
Штаммы бактерий, перечисленные в таблице 1, культивировали в бульоне MRS (среда де Манн, Рогоза и Шарпа (deMann, Rogosa и Sharpe)) при 37°С в течение 18 часов при использовании системы для создания анаэробной атмосферы (GasPack System). Различные биотипы Е. coli активировали в триптическом соевом бульоне (TBS) и инкубировали в аэробных условиях при 37°С в течение 18 часов. Перед экспериментами штаммы пересевали по меньшей мере три раза. Для капельного теста на агаре (тест, известный специалистам в данной области техники) проводили следующую процедуру. На практике, 10 микролитров культуры вышеупомянутых штаммов лактобацилл, выращенных при 37°С в течение ночи (культуральная жидкость плюс среда), помещали (наносили в виде капель) на поверхность чашки с агаризованной средой (содержащей агаризованную среду TBS). Чашку инкубировали в течение 18 часов при 37°С, давая возможность штамму (пятну на месте нанесения капли) разрастись. Биотипы Е. coli (0,1%) инкубировали в триптическом соевом мягком агаре и разливали на пятна в чашки, указанные выше. Как только верхний слой агара застывал, чашки переворачивали и инкубировали в аэробных условиях при 37°С в течение 24 часов. Каждый тест повторяли дважды. Через 24 часа чашки визуально исследовали путем осмотра и определения зон задержки роста. Наличие зоны задержки роста 2 мм или более вокруг пятна лактобацилл считали положительным результатом (смотри фиг. 1 с кратким описанием используемого способа).
Для бифидобактерий использовали такую же методику, как и для лактобацилл.
Методика использования верхнего слоя агара:
Штамм Е. coli, высеянный штрихом на чашку Петри с агаризованной средой (агаризованная среда МакКонки), инкубируют в аэробных условиях в течение 24 часов. 1 или 2 колонии отбирают и разводят в 1 мл стерильной воды до достижения ими величины мутности 0,5 по шкале МакФарланда (известная шкала, упоминаемая в справочных таблицах).
100 мкл этой суспензии инокулируют в 50 мл мягкой агаризованной среды (LAPTg с 0,7% агара) при температуре примерно 45°С, так чтобы поддерживать ее в жидком состоянии.
3 мл мягкого агара выливают на поверхность чашки с предварительно выращенными лактобациллами.
Подсушивают (дают агару затвердеть) и инкубируют при 37°С в аэробных условиях в течение 18-20 часов.
Результаты получают посредством измерения зоны задержки роста.
Результаты
A. In vitro скрининг штаммов по настоящему изобретению, обладающих активностью в отношении биотипов E. coli.
Активность по ингибированию роста Е. coli определяли при использовании живых бактериальных культур штаммов, перечисленных в таблице 1. Положительные результаты получали для всех штаммов, перечисленных в таблице 2. В частности, штаммы, перечисленные в таблицах 3-5, отличались сильным ингибирующим/уменьшающим рост воздействием на все протестированные биотипы E. coli.
В. Отбор штаммов по настоящему изобретению, обладающих ингибиторной активностью в отношении токсинообразующей бактерии Е. coli O157:Н7.
Штаммы, перечисленные в таблице 1, также тестировали в отношении Е. coli O157:Н7. Ингибиторную активность в отношении роста Е. coli O157:Н7 определяли при использовании живых бактериальных культур штаммов, перечисленных в таблице 1.
Как показано на фиг.2, только 5 протестированных штаммов демонстрировали способность ингибировать/уменьшать рост биотипов протестированных Е. coli, включая энтерогеморрагическую Е. coli O157:Н7 (CQ9485). На фиг. 2 результаты выражены в виде стандартного отклонения (SD) зон задержки роста, подсчитанных по трем различным тестам и при допуске значения отсечки 2 мм.
Из экспериментальных данных, представленных выше, можно сделать вывод, что 6 лактобацилл и 2 бифидобактерии (таблица 4) демонстрируют in vitro активность по ингибированию/уменьшению роста четырех штаммов Е. coli (АТСС 8739, АТСС 10536, АТСС 35218, АТСС 25922), которые ответственны за выработку широкого спектра биогенных аминов, таких как, например, меркаптан, гистамин, кадаверин, путресцин и тирамин, путем декарбоксилирования аминокислот. Эти биогенные амины считают ответственными за опасные системные интоксикации. Кроме того, при наличии нитритов и нитратов могут быть образованы N-нитрозамины, которые демонстрируют сильную мутагенную активность, которая может быть причиной некоторых видов рака. Наконец, экспериментальные данные, представленные выше, показывают, что пять штаммов протестированных бактерий являются активными в отношении патогенного штамма Е. coli O157:Н7 (CQ9485), который способен продуцировать один или более чем один шигатоксин, который является очень опасным для здоровья человека и может даже приводить к смерти.
Экспериментальная часть
Материалы и методы: микроорганизмы и условия культивирования
В настоящем исследовании использовали 4 различных вида пробиотических бактерий, принадлежащих к роду Lactobacillus (таблицы 6 и 7). Все бактерии культивировали в среде де Манн, Рогоза и Шарпа (MRS), (поставляемой компанией Becton Dickinson, Милан, Италия) при 37°С в течение 18 часов в анаэробных условиях (GasPak, Becton Dickinson, Милан, Италия). Следующие 4 биотипа Е. соli были использованы в качестве штаммов-мишеней: Е. coli АТСС 8739, Е. coli АТСС 10536, Е. coli АТС С 35218 и Е. coli АТСС 25922, закупаемые у Американской коллекции типовых культур (АТСС, Роквилл, Мэриленд, США). Энтерогеморрагический штамм Е. coli O157:Н7 (CQ 9485) был предложен отделением гастроэнтерологии больницы Maggiore della Carita, Новара, Италия. Listena monocytogenes АТСС 19112 закупали у Американской коллекции типовых культур; Enterococcus sp. и Klebsiella sp. выделяли из образцов кала новорожденных, подверженных коликам (Болонский университет, Италия). Все биотипы Е. coli, Enterococcus sp. и Klebsiella sp. культивировали в триптон-соевом бульоне (TSB) (Biotest, Рокуэй, Нью-Джерси, США) и инкубировали в аэробных условиях при 37°С в течение 18 часов. Listena monocytogenes культивировали в среде Фразера (Oxoid, Гэмпшир, Великобритания) и инкубировали в аэробных условиях при 37°С в течение 18 часов. Все бактериальные штаммы пересевали по меньшей мере три раза, перед тем как использовать в экспериментах по ингибированию.
Ферментативный профиль при использовании тест-системы API 50 CHL
Виды пробиотических бактерий, принадлежащих к роду Lactobacillus, культивировали в течение 18 часов при 37°С, дважды промывали в стерильной воде и центрифугировали при 6000 об/мин в течение 5 минут. После ресуспендирования в воде в пробирку, содержащую 5 мл воды, добавляли количество образца так, чтобы достичь величины мутности 2 по шкале МакФарланда. Количество образца, равное двойному количеству, использованному ранее, добавляли в 10 мл среды API 50 CHL (системы API, BioMerieux). 200 мкл суспензии переносили в каждую лунку тест-панели API 50 СН. Все лунки перекрывали парафиновым маслом для обеспечения анаэробных условий. Тест-панели увлажняли и инкубировали при 37°С. Изменение исходного цвета (пурпурный) проверяли через 1 и 2 суток инкубирования.
Праймеры и видоспецифический ПНР-анализ
Геномную ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) каждого штамма Lactobacillus экстрагируют с помощью набора MicroLysis™ (Labogen, Po, Италия). А именно 2 мкл каждой бактериальной культуры добавляют в лизирующий буфер и лизис проводят с помощью амплификатора/термоциклера Gene Amp PCR System 9700 (Perkin-Elmer, Монца, Италия), следуя инструкциям производителя.
Для штаммов L. plantarum и L. pentosus праймеры, используемые для реакции ПЦР (полимеразная цепная реакция), конструировали на основе гена recA, тогда как для штамма L. rhamnosus использовали межгенный участок, заключенный между 16S и 23S рибосомальной РНК (рибонуклеиновой кислоты) (таблица 6). Все праймеры были синтезированы фирмой Sigma-Aldrich.
Для амплификации составляли смесь (25 мкл) из 2х GoTaq Green Master Mix (Promega), 1 мкл ДНК после лизиса и набора видоспецифичных праймеров (0,30 мМ). Циклы ПЦР проводили с помощью амплификатора/термоциклера Gene Amp PCR System 9700. Программы амплификации показаны в таблице 6.
PFGE (гель-электрофорез в пульсирующем поле)
Штаммы Lactobacillus культивируют в среде MRS до тех пор, пока оптическая плотность при 600 нм (OD600) не достигает 0,8. После промывания в буферном растворе, состоящем из 10 мМ Tris (трис(гидроксиметил)аминометана), 20 мМ NaCl, 50 мМ ЭДТА (этилендиаминтетрауксусной кислоты), с рН 7,2 клетки ресуспендируют в 300 мкл такого же буферного раствора. После добавления 300 мкл 2% агарозы (Bio-Rad) образцы выливают в заливочные формы.
Застывшие гелевые матриксы инкубируют в течение 18 часов при 37°С в лизирующем буферном растворе (6 мМ Tris, 1 М NaCl, 100 мМ ЭДТА, 1% саркосила, 0,2% дезоксихолата, рН 7,6) при добавлении 2,5 мг/мл лизоцима (Sigma) и 4 Ед/мл мутанолизина (Sigma). Обработку протеиназой К (1 мг/мл) проводили в буферном растворе, содержащем 100 мМ ЭДТА, 1% саркосила, 0,2% дезоксихолата, при рН 8,0 в течение 24 часов при 50°С. Матриксы промывают 4 раза буферным раствором, содержащим 20 мМ Tris, 50 мМ ЭДТА, при рН 8,0, добавляя в первые 2 промывки 1 мМ фенилметилсульфонилфторида (Sigma). Перед расщеплением эндонуклеазой рестрикции матриксы дважды промывают буфером ТЕ (Tris-ЭДТА) и затем уравновешивают в течение 1 часа в соответствующем рестрикционном буфере. Процессы расщепления эндонуклеазами рестрикции проводят в течение 18 часов при 37°С с эндонуклеазой Notl и при 50°С с эндонуклеазой Sfil. Электрофоретический цикл проводят в аппарате CHEF DR III (Bio-Rad) при использовании 1% агарозного геля (Bio-Rad) в 0,5 М буфере ТВЕ (Tris-борат-ЭДТА).
Цикл задается со следующими параметрами: Notl (время пульса: 1-11 с, напряженность поля 6 В/см, температура буфера 14°С, время цикла 27 ч); Sfil (время пульса: 1-15 с, напряженность поля 5 В/см, температура буфера 14°С, время цикла 22 ч). Агарозный гель окрашивают этидиум бромидом (0,5 мг/мл) и рассматривают в УФ свете.
Оценка in vitro ингибиторной активности
Антимикробную активность в отношении E. coli оценивали при использовании протокола, описанного Santini С. et al. Вкратце, 10 мкл каждой LAB культуры с оптической плотностью при 600 нм примерно 1,0 заливают (наносят в виде капель) на поверхность чашки Петри с агаризованной средой LAPTg и инкубируют в анаэробных условиях в течение 24 часов при 37°С, создавая возможность бактериального роста (пятна). Штамм-мишень Е. coli (0,1%) инокулируют в триптический соевый мягкий агар и заливают на чашки, содержащие пятна. После застывания чашки переворачивают и инкубируют в аэробных условиях в течение 24 часов при 37°С.
Каждый эксперимент проводили в двух повторностях. Наличие свободной от роста исследуемого патогена зоны (зоны задержки роста) считали положительным результатом.
Количественное определение ингибиторной активности пробиотика в отношении различных штаммов Е. coli проводили в лабораториях отдела исследований и разработок компании Biolab Research, MofinAlce Group, тогда как количественное определение, относящееся к энтерогеморрагическому штамму Е. coli O157:Н7, проводили квалифицированные специалисты частной клиники «I Cedri», Фара-Новарезе, Италия.
Антимикробную активность в отношении Listeria monocytogenes, Enterococcus sp. и Klebsiella sp.оценивали при использовании диско-диффузионного метода. Вкратце, LAB культуры культивировали в среде MRS в течение 24 часов при 37°С, затем промывали и ресуспендировали в свежей среде. Патоген равномерно высевают на поверхность чашки Петри, содержащей агаризованную среду, селективную для исследуемых патогенных видов. Различные бумажные диски размещают на поверхности чашки с патогеном и затем пропитывают каждый диск 100 мкл LAB культуры. Чашки инкубируют при 37°С в течение 24 часов. Наличие свободной от роста исследуемого патогена зоны (зоны задержки роста) считали положительным результатом. Результаты выражают в виде зон задержки роста (мм). При определении порог значимости результата составляет 2 мм.
Результаты
In vitro ингибиторная активность пробиотических штаммов в отношении патогенных бактерий
Антимикробная активность некоторых штаммов лактобацилл в отношении патогенных бактерий имеет многофакторный характер и включает выработку перекиси водорода, молочной кислоты, известных молекул, таких как бактериоцины, и неизвестных молекул, устойчивых к нагреванию.
Как показано на фиг. 4, результаты, полученные с помощью капельного метода на агаре и живых клеток, подчеркнули тот факт, что все тестируемые бактерии демонстрируют ингибиторную активность в отношении четырех штаммов Е. coli. Пробиотическими штаммами, которые демонстрируют наибольшую ингибиторную активность, являются L. rhamnosus LR04 и L. pentosus LPS01. Данные, полученные при использовании в качестве мишени также и энтерогеморрагического штамма Escherichia coli, серотип O157:1-17, продемонстрировали наилучшую ингибиторную активность в присутствии L. rhamnosus LR04 и L. pentosus LPS01 (фиг. 4).
Для лучшей характеристики исследуемых пробиотических штаммов анализ был расширен на другие патогенные виды, которые поражают желудочно-кишечный тракт человека, с использованием диско-диффузионного метода. Штамм L. plantarum LP01 неожиданно продемонстрировал наилучшую ингибиторную способность в отношении всех протестированных энтеропатогенных бактерий, в частности в отношении Listeria monocytogenes.
Claims (27)
1. Применение фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере один бактериальный штамм, выбранный из группы, состоящей из Lactobacillus rhamnosus LR04 DSM 16605, Lactobacillus plantarum LP01 LMG P-21021, Lactobacillus plantarum LP02 LMG P-21020 и Lactobacillus pentosus LPS01 DSM 21980, для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий, принадлежащих к серотипу Е. coli O157:Н7, Listeria monocytogenes АТСС 19112 и Klebsiella sp.
2. Применение по п.1, где указанная композиция содержит или, альтернативно, состоит из двух, или трех, или четырех указанных штаммов, принадлежащих к одному или более чем одному виду.
3. Применение по п.1, где указанные штаммы бактерий выбраны из группы, состоящей из штаммов L. rhamnosus LR04 DSM 16605 и L. pentosus LPS01 DSM 21980, для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий, принадлежащих к серотипу Е. coli O157:Н7.
4. Применение по п.1, где бактериальный штамм представляет собой L. plantarum LP01 LMG Р-21021 для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий, принадлежащих к виду Listeria monocytogenes.
5. Применение по п.1, где указанная композиция дополнительно содержит ацетилцистеин.
6. Применение по п.1, где указанная композиция дополнительно содержит лизоцим.
7. Применение по п.1, где указанная композиция дополнительно содержит лизоцим, микроинкапсулированный в липидной матрице, предпочтительно природного происхождения, обладающей температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°С.
8. Применение по п.1, где указанная композиция дополнительно содержит ацетилцистеин и лизоцим, микроинкапсулированный в липидной матрице, предпочтительно природного происхождения, обладающей температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°С.
9. Применение по любому из пп.1-8, где указанная композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно пребиотическое волокно и/или углеводы, обладающие бифидогенным действием.
10. Применение пищевой композиции, содержащей по меньшей мере один бактериальный штамм, выбранный из группы, состоящей из Lactobacillus rhamnosus LR04 DSM 16605, Lactobacillus plantarum LP01 LMG P-21021, Lactobacillus plantarum LP02 LMG P-21020 и Lactobacillus pentosus LPS01 DSM 21980, для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий, принадлежащих к серотипу Е. coli O157:Н7, Listeria monocytogenes АТСС 19112 и Klebsiella sp.
11. Применение по п.10, где указанная композиция содержит или, альтернативно, состоит из двух, или трех, или четырех указанных штаммов, принадлежащих к одному или более чем одному виду.
12. Применение по п.10, где указанные штаммы бактерий выбраны из группы, состоящей из штаммов L. rhamnosus LR04 DSM 16605 и L. pentosus LPS01 DSM 21980.
13. Применение по п. 10, где бактериальный штамм представляет собой L. plantarum LP01 LMG P-21021.
14. Применение по п.10, где указанная композиция дополнительно содержит ацетилцистеин.
15. Применение по п.10, где указанная композиция дополнительно содержит лизоцим.
16. Применение по п.10, где указанная композиция дополнительно содержит лизоцим, микроинкапсулированный в липидной матрице, предпочтительно природного происхождения, обладающей температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°С.
17. Применение по п.10, где указанная композиция дополнительно содержит ацетилцистеин и лизоцим, микроинкапсулированный в липидной матрице, предпочтительно природного происхождения, обладающей температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°С.
18. Применение по любому из пп.10-17, где указанная композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно пребиотическое волокно и/или углеводы, обладающие бифидогенным действием.
19. Применение пищевой добавки, содержащей по меньшей мере один бактериальный штамм, выбранный из группы, состоящей из Lactobacillus rhamnosus LR04 DSM 16605, Lactobacillus plantarum LP01 LMG P-21021, Lactobacillus plantarum LP02 LMG P-21020 и Lactobacillus pentosus LPS01 DSM 21980, для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий, принадлежащих к серотипу Е. coli O157:Н7, Listeria monocytogenes АТСС 19112 и Klebsiella sp.
20. Применение по п.19, где указанная добавка содержит два, или три, или четыре указанных штамма, принадлежащих к одному или более чем одному виду.
21. Применение по п.19, где указанные штаммы бактерий выбраны из группы, состоящей из штаммов L. rhamnosus LR04 DSM 16605 и L. pentosus LPS01 DSM 21980.
22. Применение по п.19, где бактериальный штамм представляет собой L. plantarum LP01 LMG P-21021.
23. Применение по п.19, где указанная добавка дополнительно содержит ацетилцистеин.
24. Применение по п.19, где указанная добавка дополнительно содержит лизоцим.
25. Применение по п.19, где указанная добавка дополнительно содержит лизоцим, микроинкапсулированный в липидной матрице, предпочтительно природного происхождения, обладающей температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°С.
26. Применение по п.19, где указанная добавка дополнительно содержит ацетилцистеин и лизоцим, микроинкапсулированный в липидной матрице, предпочтительно природного происхождения, обладающей температурой плавления, составляющей от 30 до 80°С, предпочтительно от 40 до 70°С, даже более предпочтительно от 50 до 60°С.
27. Применение по любому из пп.19-26, где указанная добавка дополнительно содержит по меньшей мере одно пребиотическое волокно и/или углеводы, обладающие бифидогенным действием.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT000475A ITRM20110475A1 (it) | 2011-09-09 | 2011-09-09 | Ceppi di batteri lattici e/o bifido batteri, opzionalmente addizionati di n-acetilcisteina e/o lisozima microincapsulato gastroprotetto, aventi attivita' di inibizione/riduzione della crescita di differenti biotipi di e.coli, incluso e.coli o157:h7 e |
| ITRM2011A000475 | 2011-09-09 | ||
| PCT/IB2012/001745 WO2013034975A1 (en) | 2011-09-09 | 2012-09-10 | Strains of lactic acid bacteria and/or bifidobacteria inhibiting/reducing the growth of different biotypes of e. coli and different biotypes of clostridia |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2014107771A RU2014107771A (ru) | 2015-10-20 |
| RU2624044C2 true RU2624044C2 (ru) | 2017-06-30 |
Family
ID=44899092
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2014107771A RU2624044C2 (ru) | 2011-09-09 | 2012-09-10 | Применение фармацевтической или пищевой композиции или пищевой добавки для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20150017128A1 (ru) |
| EP (1) | EP2753687B1 (ru) |
| JP (1) | JP6193858B2 (ru) |
| KR (1) | KR102219203B1 (ru) |
| CN (1) | CN103827291A (ru) |
| BR (1) | BR112014005139A2 (ru) |
| DK (1) | DK2753687T3 (ru) |
| ES (1) | ES2675127T3 (ru) |
| IT (1) | ITRM20110475A1 (ru) |
| PL (1) | PL2753687T3 (ru) |
| RU (1) | RU2624044C2 (ru) |
| WO (1) | WO2013034975A1 (ru) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1403661B1 (it) | 2011-01-28 | 2013-10-31 | Probiotical Spa | Composizione effervescente in forma solida per uso in applicazioni vaginali per il trattamento di infezioni vaginali. |
| ITMI20110791A1 (it) | 2011-05-09 | 2012-11-10 | Probiotical Spa | Ceppi di batteri in grado di metabolizzare gli ossalati. |
| ITMI20110792A1 (it) | 2011-05-09 | 2012-11-10 | Probiotical Spa | Ceppi di batteri appartenenti al genere bifidobacterium per uso nel trattamento della ipercolesterolemia. |
| ITMI20110793A1 (it) | 2011-05-09 | 2012-11-10 | Probiotical Spa | Ceppi di batteri probiotici e composizione sinbiotica contenente gli stessi destinata alla alimentazione dei neonati. |
| ITRM20110477A1 (it) | 2011-09-09 | 2013-03-10 | Giovanni Mogna | Composizione comprendente n-acetilcisteina e/o lisozima microincapsulato gastroprotetto in associazione con batteri probiotici in grado di ripristinare l'effetto barriera proprio dello stomaco che viene perso durante il trattamento farmacologico dell |
| ITMI20111718A1 (it) | 2011-09-23 | 2013-03-24 | Probiotical Spa | Un materiale impermeabile alla umidita e allo ossigeno per confezionare prodotti dietetici, cosmetici e specialita medicinali. |
| ITMI20130795A1 (it) * | 2013-05-14 | 2014-11-15 | Probiotical Spa | Composizione comprendente batteri lattici e/o bifidobatteri per uso nel trattamento preventivo e/o curativo delle infezioni batteriche e/o delle infiammazioni del tratto urinario e/o della prostata che sono la causa di prostatiti e ipertrofia prostat |
| ITMI20130792A1 (it) * | 2013-05-14 | 2014-11-15 | Mofin S R L | Metodo per la prevenzione e/o riduzione dello sviluppo della listeria nell'industria casearia e prevenzione della listeriosi nell'uomo. |
| ITMI20130793A1 (it) * | 2013-05-14 | 2014-11-15 | Probiotical Spa | Composizione comprendente batteri lattici per uso nel trattamento preventivo e/o curativo delle cistiti ricorrenti. |
| ITMI20130794A1 (it) * | 2013-05-14 | 2014-11-15 | Probiotical Spa | Composizione comprendente batteri lattici per uso nel trattamento preventivo e/o curativo delle vaginosi batteriche. |
| EP3064072A1 (en) * | 2015-02-11 | 2016-09-07 | AB-Biotics S.A. | Probiotic lactobacillus strains for use in treating urinary tract infections |
| DE202016008796U1 (de) * | 2015-07-16 | 2019-10-24 | Lg Innotek Co., Ltd. | Lichtemittierende Vorrichtungseinheit |
| ITUB20160207A1 (it) * | 2016-02-03 | 2017-08-03 | Probioresearch S R L | Nuovo ceppo di Lactobacillus reuteri con caratteristiche probiotiche, suo utilizzo e composizioni che lo contengono |
| WO2018109665A1 (en) * | 2016-12-15 | 2018-06-21 | Nestec Sa | Compositions and methods that modulate bacteria in a companion animal |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006013588A1 (en) * | 2004-08-05 | 2006-02-09 | Anidral S.R.L. | Folic acid producing bifidobacterium bacterial strains, formulations and use thereof |
| RU2316586C2 (ru) * | 2002-03-21 | 2008-02-10 | Бифодан А/С | ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ШТАММЫ Lactobacillus (ВАРИАНТЫ) И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
| WO2010136891A1 (en) * | 2009-05-27 | 2010-12-02 | Probiotical S.P.A. | Bacteriocin-producing lactobacillus pentosus and the use thereof in food and pharmaceutical compositions |
| US20110177198A1 (en) * | 2008-05-13 | 2011-07-21 | OU Tervisliku PIIMa Biotehnologiate Arenduskeskus (Biocompetence Centre of Healthy Diary Products) | Isolated Microorganism Strain Lactobacillus Plantarum Tensia DSM 21380 as Antimicrobial and Antihypertensive Probiotic, Food Product and Composition Comprising Said Microorganism and Use of Said Microorganism for Preparation of Antihypertensive Medicine and Method for Suppressing Pathogens and Non-Starter Lactobacilli in Food Product |
| EP2360237A1 (en) * | 2008-12-03 | 2011-08-24 | CJ CheilJedang Corporation | Novel lactobacillus plantarum and composition containing the same |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA39965C2 (uk) * | 1993-12-03 | 2001-07-16 | Лайфор Леборетріз Лтд | Вірусоцидний, бактерицидний та руйнуючий сперматозоїди вагінальний засіб і вагінальний супозиторій ( варіанти ) |
| US8828432B2 (en) * | 1996-10-28 | 2014-09-09 | General Mills, Inc. | Embedding and encapsulation of sensitive components into a matrix to obtain discrete controlled release particles |
| FR2765078B1 (fr) * | 1997-06-27 | 1999-09-17 | Guyomarc H Nutrition Animale | Procede d'amelioration de l'efficacite d'un probiotique, preparation d'additifs alimentaires et aliments pour animaux la contenant |
| US6262019B1 (en) * | 1998-04-30 | 2001-07-17 | Vit-Immune, L. C. | Method of treatment of glutathione deficient mammals |
| ITMI20042189A1 (it) * | 2004-11-16 | 2005-02-16 | Anidral Srl | Composizione a base di batteri probiotici e suo uso nella prevenzione e-o nel trattamento di patologie e-o infezioni respiratorie e nel miglioramento della funzionalita' intestinale |
| JP2006180836A (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-13 | Marudai Food Co Ltd | 食中毒菌感染を抑制する乳酸菌、ならびにそれを含む発酵物、食品および医薬組成物 |
| JP4050784B2 (ja) * | 2005-02-03 | 2008-02-20 | 株式会社Ｎｒｌファーマ | マトリックス型腸溶性・徐放性組成物 |
| JPWO2007020884A1 (ja) * | 2005-08-12 | 2009-02-26 | 明治乳業株式会社 | β−ディフェンシンを介した感染予防効果を有するビフィズス菌または乳酸菌とそれを含有する食品・医薬品組成物 |
| ES2338702T3 (es) * | 2005-10-11 | 2010-05-11 | Probiotical S.P.A. | Procedimiento para la preparacion de cultivos bacterianos probioticos analergicos y uso relacionado. |
| AU2006306241B9 (en) * | 2005-10-24 | 2012-03-08 | Nestec S.A. | Dietary fiber formulation and method of administration |
| WO2007100765A2 (en) * | 2006-02-28 | 2007-09-07 | Childrens Memorial Hospital | Lysozyme-modified probiotic components and uses thereof |
| US20080175899A1 (en) * | 2007-01-19 | 2008-07-24 | Ross Mairi R | Formulation for promoting sinus health in nasal cavities |
| EP2248908A1 (en) * | 2009-05-05 | 2010-11-10 | Eurolactis Group S.A. | Probiotic microorganisms isolated from donkey milk |
| US20120195868A1 (en) * | 2009-07-27 | 2012-08-02 | Nestec S.A. | Nutritional compositions comprising fiber and probiotics |
| US9255246B2 (en) * | 2010-06-28 | 2016-02-09 | Probiotical S.P.A. | Use of lactobacilli inhibiting gas producing coliform bacterial isolated from infants affected by colic |
-
2011
- 2011-09-09 IT IT000475A patent/ITRM20110475A1/it unknown
-
2012
- 2012-09-10 BR BR112014005139A patent/BR112014005139A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2012-09-10 WO PCT/IB2012/001745 patent/WO2013034975A1/en active Application Filing
- 2012-09-10 EP EP12780278.3A patent/EP2753687B1/en active Active
- 2012-09-10 DK DK12780278.3T patent/DK2753687T3/en active
- 2012-09-10 CN CN201280044032.0A patent/CN103827291A/zh active Pending
- 2012-09-10 PL PL12780278T patent/PL2753687T3/pl unknown
- 2012-09-10 ES ES12780278.3T patent/ES2675127T3/es active Active
- 2012-09-10 RU RU2014107771A patent/RU2624044C2/ru active
- 2012-09-10 KR KR1020147009472A patent/KR102219203B1/ko active IP Right Grant
- 2012-09-10 US US14/344,047 patent/US20150017128A1/en not_active Abandoned
- 2012-09-10 JP JP2014529082A patent/JP6193858B2/ja active Active
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2316586C2 (ru) * | 2002-03-21 | 2008-02-10 | Бифодан А/С | ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ШТАММЫ Lactobacillus (ВАРИАНТЫ) И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ |
| WO2006013588A1 (en) * | 2004-08-05 | 2006-02-09 | Anidral S.R.L. | Folic acid producing bifidobacterium bacterial strains, formulations and use thereof |
| US20110177198A1 (en) * | 2008-05-13 | 2011-07-21 | OU Tervisliku PIIMa Biotehnologiate Arenduskeskus (Biocompetence Centre of Healthy Diary Products) | Isolated Microorganism Strain Lactobacillus Plantarum Tensia DSM 21380 as Antimicrobial and Antihypertensive Probiotic, Food Product and Composition Comprising Said Microorganism and Use of Said Microorganism for Preparation of Antihypertensive Medicine and Method for Suppressing Pathogens and Non-Starter Lactobacilli in Food Product |
| EP2360237A1 (en) * | 2008-12-03 | 2011-08-24 | CJ CheilJedang Corporation | Novel lactobacillus plantarum and composition containing the same |
| WO2010136891A1 (en) * | 2009-05-27 | 2010-12-02 | Probiotical S.P.A. | Bacteriocin-producing lactobacillus pentosus and the use thereof in food and pharmaceutical compositions |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| COLLADO M.C. ET AL. Probiotic strains and their combination inhibit in vitro adhesion of pathogens to pig intestinal mucosa // Curr. Microbiol., 2007, 55:260-265. JOHNSON-HENRY K.C. ET AL. Lactobacillus rhamnosus strain GG prevents enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7-induced changes in epithelial barrier function // Infection and Immunity, Apr. 2008, vol. 76, no. 4, pp. 1340-1348. EATON K.A. ET AL. Probiotic Lactobacillus reuteri ameliorates disease due to enterohemorrhagic Escherichia coli in germfree mice // Infection and Immunity, Jan. 2011, vol. 79, no. 1, pp. 185-191. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20150000452A (ko) | 2015-01-02 |
| PL2753687T3 (pl) | 2019-02-28 |
| DK2753687T3 (en) | 2018-05-28 |
| BR112014005139A2 (pt) | 2017-04-18 |
| ES2675127T3 (es) | 2018-07-06 |
| CN103827291A (zh) | 2014-05-28 |
| WO2013034975A1 (en) | 2013-03-14 |
| EP2753687A1 (en) | 2014-07-16 |
| EP2753687B1 (en) | 2018-04-18 |
| JP6193858B2 (ja) | 2017-09-06 |
| RU2014107771A (ru) | 2015-10-20 |
| US20150017128A1 (en) | 2015-01-15 |
| KR102219203B1 (ko) | 2021-02-23 |
| JP2014526242A (ja) | 2014-10-06 |
| ITRM20110475A1 (it) | 2013-03-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2624044C2 (ru) | Применение фармацевтической или пищевой композиции или пищевой добавки для ингибирования или уменьшения роста патогенных бактерий | |
| Taheur et al. | Anti-bacterial and anti-biofilm activity of probiotic bacteria against oral pathogens | |
| Koll et al. | Characterization of oral lactobacilli as potential probiotics for oral health | |
| KR20120010080A (ko) | 락토바실러스 플란타룸 및 그의 용도 | |
| CA2711425A1 (en) | Antimicrobial activity of bacteriocin-producing lactic acid bacteria | |
| Ahmed et al. | Antimicrobial role of Lactobacillus species as potential probiotics against enteropathogenic bacteria in chickens | |
| Vitola et al. | Probiotic potential of Lactobacillus casei CSL3 isolated from bovine colostrum silage and its viability capacity immobilized in soybean | |
| KR101381547B1 (ko) | 병원성 세균의 생육을 억제하는 김치에서 분리한 신규류코노스톡 메센트로이드 및 이의 용도 | |
| Bigwood et al. | Inhibition of Listeria monocytogenes by Enterococcus mundtii isolated from soil | |
| Saliba et al. | Probiotic and safety assessment of Lactobacillus strains isolated from Lebanese Baladi goat milk | |
| Liu et al. | Inhibition of virulence gene expression in Salmonella Dublin, Escherichia coli F5 and Clostridium perfringens associated with neonatal calf diarrhea by factors produced by lactic acid bacteria during fermentation of cow milk | |
| Daba et al. | Evaluation of Enterococcus strains newly isolated from Egyptian sources for bacteriocin production and probiotic potential | |
| MELIA et al. | The screening of probiotic lactic acid bacteria from honey of stingless bee from West Sumatra, Indonesia and using as starter culture | |
| Guan et al. | Characterization and in vitro assessment of probiotic potential of Lactiplantibacillus plantarum BXM2 from fermented honey passion fruit beverage | |
| Elbagory et al. | Impact of probiotic strains on growth of some food poisoning bacteria from milk and soft cheese | |
| Saguibo et al. | Identification and characterization of lactic acid bacteria isolated from some medicinal and/or edible Philippine plants | |
| Amer et al. | Cronobacter sakazakii (Enterobacter sakazakii) | |
| Jasim et al. | Comparative study between the effect of the Lactic Acid Bacteria and non against some pathogenic bacteria | |
| Imane et al. | Characterization and screening of the potential probiotic lactic acid bacteria and Bifidobacterium strains isolated of different biotopes | |
| Houshang et al. | Isolation and Identification of Lactobacilli Found in Nomads Traditional Yogurt in the City of Jahrom Using PCR Method and, the Study of Their Interactional Effects on Streptococcus mutans as Cause of Tooth Decay Using Disc and Auger Hole Methods | |
| Chauhan | Screening of potential probiotic lactic acid bacteria from fresh water fish intestine | |
| Pieniz et al. | Assessment of beneficial properties of Enterococcus strains | |
| MAHMOUDI et al. | Evaluation of in vitro antagonism and protection against enteropathogenic experimental challenge of different strains of Bifidobacterium | |
| Wang | Comparison of Microbial Quality of Commercial Probiotic Dietary Supplements | |
| WO1997006811A1 (en) | Protection against pathogenic microorganisms |