RU2615135C2

RU2615135C2 - Производное пирролидин-3-илуксусной кислоты

Info

Publication number: RU2615135C2
Application number: RU2014107536A
Authority: RU
Inventors: Итиро ЙОСИДА; Тадаси ОКАБЕ; Ясунобу МАЦУМОТО; Нобухиса ВАТАНАБЕ; Йосиаки ОХАСИ; Юдзи ОНИЗАВА; Хитоси ХАРАДА
Original assignee: Эйсай Ар Энд Ди Менеджмент Ко., Лтд.
Priority date: 2011-09-13
Filing date: 2012-09-11
Publication date: 2017-04-04
Also published as: CY1117460T1; RS54582B1; EP2757103A4; IL230804A0; PT2757103E; MX358494B; AU2012309556A1; AR087788A1; MX2014002210A; DK2757103T3; EP2757103A1; BR112014004267A2; ES2564732T3; IL230804A; CN103764648B; BR112014004267B1; JPWO2013039057A1; KR101963922B1; RU2014107536A; CA2844617C

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы (1)

,

где R представляет собой C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, C_3-8циклоалкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, или С_3-8циклоалкенильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, X представляет собой C_1-6алкильную группу, Y и Ζ являются одинаковыми или отличными друг от друга, и каждый из них представляет собой атом галогена или C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей В, n равняется 0 или 1, при этом группа заместителей А состоит из атомов галогена, и группа заместителей В состоит из атомов галогена, обладающим ингибирующим эффектом на путь фракталкин-CX3CR1. 14 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 ил., 5 табл., 14 пр.

Description

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к производному пирролидин-3-илуксусной кислоты. Конкретнее, настоящее изобретение относится к производному пирролидин-3-илуксусной кислоты, которое является пригодным в качестве терапевтического средства от воспалительного заболевания кишечника.

Предшествующий уровень техники

[0002] Хемокины являются главными факторами миграции клеток и регулируют инфильтрацию лимфоцитов в ткани при помощи усиления передвижения клеток и активации молекул адгезии. Хемокины классифицируют на четыре подсемейства CC, CXC, C и CX3C исходя из их последовательностей с первыми двумя остатками цистеина.

[0003] Фракталкин является единственным представителем семейства хемокинов CX3C и имеет отличительные особенности в структуре и функциях, которые не обнаружены у других хемокинов. Фракталкин связывается с рецептором, CX3CR1, который может опосредовать сильную адгезию без участия в этом опосредовании селектина или интегрина даже в присутствии физиологического кровотока. Это означает, что система фракталкин-CX3CR1 обеспечивает опосредование многоступенчатого механизма инфильтрации с участием селектина или интегрина только при помощи одноступенчатой реакции.

[0004] Экспрессию фракталкина эндотелиальными клетками сосудов индуцируют воспалительные цитокины TNF и IL-1. В то же время моноциты, практически все NK-клетки и некоторые Т-клетки экспрессируют CX3CR1, а нейтрофилы не экспрессируют его. Таким образом, считается, что система фракталкин-CX3CR1 является весьма эффективным механизмом мобилизации иммунных клеток поблизости от эндотелиальвых клеток поврежденных тканей или в тканях.

[0005] Принимая во внимание взаимосвязь между системой фракталкин-CX3CR1 и патологическими процессами, предположили, что система фракталкин-CX3CR1 вовлечена в развитие и патологические процессы аутоиммунных заболеваний, таких как ревматоидный артрит, воспалительное заболевание кишечника, волчаночный нефрит и рассеянный склероз (непатентный литературный источник 1). В частности, что касается воспалительного заболевания кишечника, сообщается, что экспрессия фракталкина повышается в воспаленных участках тканей толстой кишки пациентов, и что CX3CR1 играет важную роль в инфильтрации иммунных клеток в ткань толстой кишки (непатентный литературный источник 2).

[0006] Антитела, описанные в патентном литературном источнике 1, и низкомолекулярные соединения, описанные в патентных литературных источниках 2-6, ранее были известны как ингибиторы фракталкина.

[0007] Кроме того, описано, что соединения, описанные в патентном литературном источнике 7, являются пригодными в качестве антагонистов хемокинового рецептора CCR2, но отличаются от подобных ингибиторов из семейства веществ, действующих на хемокины.

Список упомянутых документов

Патентный литературный источник

[0008]

Патентный литературный источник 1: выложенная публикация заявки на патент Японии №2002-345454.

Патентный литературный источник 2: WO 2006/107257.

Патентный литературный источник 3: WO 2006/107258.

Патентный литературный источник 4: WO 2008/039138.

Патентный литературный источник 5: WO 2008/039139.

Патентный литературный источник 6: WO 2009/120140.

Патентный литературный источник 7: выложенная публикация заявки на патент США №2010/0210633.

Непатентный литературный источник

[0009]

Непатентный литературный источник 1: Umehara et al., "Fractalkine in Vascular Biology", Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., Vol. 24, pp. 34-40, 2004

Непатентный литературный источник 2: Kobayashi et al., "Exclusive Increase of CX3CR1_CD28_CD4_ T Cells in Inflammatory Bowel Disease and Their Recruitment as Intraepithelial Lymphocytes ", Inflamm. Bowel. Dis., Vol. 13, pp. 837-846, 2007

Краткое описание изобретения

Техническая задача

[0010] Целью настоящего изобретения является обеспечение соединения с ингибирующим эффектом на путь фракталкин-CX3CR1.

Решение задачи

[0011] В результате интенсивных исследований авторы настоящего изобретения осуществили настоящее изобретение. Конкретно, настоящее изобретение относится к

[1] соединению, представленному формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли,

[Химическая формула 1]

где R представляет собой С_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, C_3-8циклоалкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, или С_3-8циклоалкенильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А,

X представляет собой С_1-6алкильную группу,

Y и Z являются одинаковыми или отличными друг от друга, и каждый из них представляет собой атом галогена или C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей B,

n равняется 0 или 1,

группа заместителей А состоит из атомов галогена, и

группа заместителей В состоит из атомов галогена;

[2] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно [1], где R является фторбутильной группой, пентильной группой, циклогексильной группой, дифторциклогексильной группой, циклопентенильной группой или циклогексенильной группой;

[3] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно [1] или [2], где X является метильной группой;

[4] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[3], где Y является атомом хлора;

[5] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[4], где Z является атомом хлора, метильной группой, дифторметильной группой или трифторметильной группой;

[6] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[5], где n равняется 1;

[7] соединению, выбранному из группы, состоящей из

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-3-({1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамоил)-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[(1-циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-(3-{[(3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-3-{[(1-циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты и

2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

или его фармацевтически приемлемой соли;

[8] лекарственному средству, содержащему соединение или его фармацевтически приемлемую соль согласно любому из [1]-[7] в качестве активного ингредиента;

[9] терапевтическому средству от воспалительного заболевания кишечника, содержащему соединение или его фармацевтически приемлемую соль согласно любому из [1]-[7] в качестве активного ингредиента;

[10] терапевтическому средству согласно [9], где воспалительное заболевание кишечника является язвенным колитом или болезнью Крона;

[11] ингибитору пути фракталкин-CX3CR1, содержащему соединение или его фармацевтически приемлемую соль согласно любому из [1]-[7] в качестве активного ингредиента;

[12] ингибитору фракталкина, содержащему соединение или его фармацевтически приемлемую соль согласно любому из [1]-[7] в качестве активного ингредиента;

[13] ингибитору CX3CR1, содержащему соединение или его фармацевтически приемлемую соль согласно любому из [1]-[7] в качестве активного ингредиента;

[14] способу лечения воспалительного заболевания кишечника, включающему введение пациенту соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7];

[15] способу согласно [14], где воспалительное заболевание кишечника является язвенным колитом или болезнью Крона;

[16] способу ингибирования пути фракталкин-CX3CR1, включающему введение пациенту соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7];

[17] способу ингибирования фракталкина, включающему введение пациенту соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7];

[18] способу ингибирования CX3CR1, включающему введение пациенту соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7];

[19] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7], которое применяют для лечения воспалительного заболевания кишечника;

[20] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно [19], где воспалительное заболевание кишечника является язвенным колитом или болезнью Крона;

[21] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7], которое применяют для ингибирования пути фракталкин-CX3CR1;

[22] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7], которое применяют для ингибирования фракталкина;

[23] соединению или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7], которое применяют для ингибирования CX3CR1;

[24] применению соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7] при получении терапевтического средства от воспалительного заболевания кишечника;

[25] применению согласно [24], где воспалительное заболевание кишечника является язвенным колитом или болезнью Крона;

[26] применению соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7] при получении ингибитора пути фракталкин-CX3CR1;

[27] применению соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7] при получении ингибитора фракталкина и [28] применению соединения или его фармацевтически приемлемой соли согласно любому из [1]-[7] при получении ингибитора CX3CR1.

Полезные эффекты изобретения

[0012] Согласно результатам описанных ниже тестов соединения согласно настоящему изобретению обладают ингибирующим эффектом на путь фракталкин-CX3CR1. Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению являются пригодными в качестве терапевтических средств от воспалительного заболевания кишечника.

Краткое описание графических материалов

[0013] На ФИГ. 1 показан график, демонстрирующий результаты тестового примера 2 для соединений из примеров 3, 6 и 11;

на ФИГ. 2 показан график, демонстрирующий результаты тестового примера 2 для соединений из примеров 2, 7 и 8;

на ФИГ. 3 показан график, демонстрирующий результаты тестового примера 2 для соединений из примеров 1, 9 и 10; и

на ФИГ. 4 показан график, демонстрирующий результаты тестового примера 2 для соединений из примеров 12, 13 и 14.

Описание вариантов осуществления

[0014] Настоящее изобретение будет подробно описано ниже.

[0015] В данном описании настоящее изобретение не ограничено конкретной кристаллической формой, а может предусматривать любую из кристаллических форм или их смесей, хотя могут существовать кристаллические полиморфы. Настоящее изобретение также предусматривает аморфные формы, и при этом соединения согласно настоящему изобретению предусматривают ангидриды, гидраты и сольваты.

[0016] Далее в данном документе будут описаны значения выражений, символов и т.п., описанных в данном описании, и настоящее изобретение будет подробно описано.

[0017] Выражение "C_1-6алкильная группа" в данном описании означает линейную или разветвленную алкильную группу, содержащую 1-6 атомов углерода, и примеры включают метильную группу, этильную группу, 1-пропильную группу, 2-пропильную группу, 2-метил-1-пропильную группу, 2-метил-2-пропильную группу, 1-бутильную группу, 2-бутильную группа, 1-пентильную группу, 2-пентильную группу, 3-пентильную группу, 1-гексильную группу, 2-гексильную группу и 3-гексильную группу.

[0018] Выражение "C_3-8циклоалкильная группа" в данном описании означает моноциклическую насыщенную алифатическую углеводородную группу, содержащую 3-8 атомов углерода, и примеры включают циклопропильную группу, циклобутильную группу, циклопентильную группу, циклогексильную группу, циклогептильную группу и циклооктильную группу.

[0019] Выражение "С_3-8циклоалкенильная группа" в данном описании означает моноциклическую алифатическую углеводородную группу, содержащую 3-8 атомов углерода и содержащую 1-4 двойные связи в кольце, и примеры включают циклопропенильную группу, циклобутенильную группу, циклопентенильную группу, циклогексенильную группу, циклогептенильную группу и циклооктенильную группу.

[0020] Выражение "атом галогена" в данном описании означает атом фтора, атом хлора, атом брома или атом йода.

[0021] R в соединении, представленном формулой (1), представляет собой C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, C_3-8циклоалкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А, или C_3-8циклоалкенильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей А. Предпочтительно R представляет собой фторбутильную группу, пентильную группу, циклогексильную группу, дифторциклогексильную группу, циклопентенильную группу или циклогексенильную группу.

[0022] X в соединении, представленном формулой (1), представляет собой C_1-6алкильную группу. Предпочтительно X представляет собой метильную группу.

[0023] Y и Z в соединении, представленном формулой (1), являются одинаковыми или отличными друг от друга, и каждый из них представляет собой атом галогена или C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей В. Предпочтительно Y представляет собой атом хлора. Предпочтительно Z представляет собой атом хлора, метильную группу, дифторметильную группу или трифторметильную группу.

[0024] В соединении, представленном формулой (1), n равняется 0 или 1 и предпочтительно равняется 1.

[0025] Группа заместителей А состоит из атомов галогена и предпочтительно является атомом фтора.

[0026] Группа заместителей В состоит из атомов галогена и предпочтительно является атомом фтора, атомом хлора или атомом брома, более предпочтительно атомом фтора.

[0027] Выражение "фармацевтически приемлемая соль" в данном описании не ограничено особым образом, поскольку образуется соль с соединением, представленным формулой (1), и она является фармацевтически приемлемой, и примеры включают неорганические кислые соли, органические кислые соли, неорганические основные соли, органические основные соли и кислотные или основные соли аминокислот.

[0028] Предпочтительные примеры неорганических кислых солей включают гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, нитраты и фосфаты, и предпочтительные примеры органических кислых солей включают ацетаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, тартраты, цитраты, лактаты, стеараты, бензоаты, соли миндальной кислоты, метансульфонаты, этансульфонаты, p-толуолсульфонаты и бензолсульфонаты.

[0029] Предпочтительные примеры неорганических основных солей включают соли щелочных металлов, такие как соли натрия и соли калия, соли щелочноземельных металлов, такие как соли кальция и соли магния, соли алюминия и соли аммония, и предпочтительные примеры органических основных солей включают соли диэтиламина, соли диэтаноламина, соли меглумина и соли N,N'-дибензилэтилендиамина.

[0030] Предпочтительные примеры кислотных солей аминокислот включают аспартаты и глутаматы, и предпочтительные примеры основных солей аминокислот включают соли аргинина, соли лизина и соли орнитина.

[0031] Соединение, представленное формулой (1), можно получать описанным ниже способом и также можно получать при помощи усовершенствования способа, описанного ниже, специалистами в данной области техники исходя из общеизвестных знаний. Однако, способ получения соединения, представленного формулой (1), не ограничен этими способами.

[0032] Соединение, представленное формулой (1) (далее в данном документе также называемое соединением (1)), можно получать с помощью процесса А, процесса В и процесса С, подробно описанных ниже, с использованием промежуточного продукта, представленного формулой (2), в качестве исходного материала.

[Химическая формула 2]

[На схеме R, X, Y, Z и n являются такими, как определено выше.]

[0033] При необходимости последовательность соответствующих процессов можно изменить исходя из общеизвестных знаний специалистов в данной области техники. За каждым процессом могут следовать способы очистки, известные специалисту в данной области техники, или можно перейти к осуществлению следующего процесса без выделения и очистки.

[0034] (Процесс А) Амидирование

[Химическая формула 3]

[где X, R и n являются такими, как определено выше.]

[0035] Данный процесс является процессом получения соединения (4) путем подвергания карбоксильной группы соединения (2) и аминогруппы соединения (3) дегидратационной конденсации в инертном растворителе в присутствии конденсирующего средства и основания с образованием амидной связи.

[0036] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают амиды, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид и 1-метилпирролидинон, эфиры, такие как тетрагидрофуран, и сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид, при этом N,N-диметилформамид является предпочтительным.

[0037] Примеры применяемых конденсирующих средств включают гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(пирролидино)фосфония (далее в данном документе называемый PyBOP), бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфиновый хлорид (далее в данном документе называемый BOP-С1), гексафторфосфат бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)фосфония, гексафторфосфат 2-(бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония и диэтилцианофосфат, при этом PyBOP или ВОР-С1 являются предпочтительными и PyBOP является наиболее предпочтительным.

[0038] Примеры применяемого основания включают триэтиламин и диизопропилэтиламин, при этом триэтиламин является предпочтительным.

[0039] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя, конденсирующего средства и основания, но обычно составляет от -20°C до 100°C, предпочтительно от 0°С до 60°С.

[0040] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя, конденсирующего средства и основания, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от одного часа до трех дней.

[0041] (Процесс В) Арилметилирование

[Химическая формула 4]

[где R, X, Y, Z и n являются такими, как определено выше, и представляет собой атом галогена, группу алкилсульфонилокси или группу арилсульфонилокси.]

[0042] Данный процесс является процессом получения соединения (6) путем реакции соединения (4) с соединением (5) в инертном растворителе в присутствии основания.

[0043] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают амиды, такие как N,N-диметилформамид, N,N-диметилацетамид и 1-метилпирролидинон, и сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид, при этом N,N-диметилформамид является предпочтительным.

[0044] Примеры применяемого основания включают неорганические основания, такие как карбонат натрия и карбонат калия, при этом карбонат калия является предпочтительным.

[0045] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и основания, но обычно составляет от -20°C до 100°C, предпочтительно от 0°С до 60°C.

[0046] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и основания, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от 1 до 24 часов.

[0047] (Процесс С) Удаление трет-бутильной группы

[Химическая формула 5]

[где R, X, Y, Z и n являются такими, как определено выше.]

[0048] Данный процесс является процессом получения соединения (1) путем реакции соединения (6) с кислотой в отсутствии растворителя или в инертном растворителе.

[0049] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают галогензамещенные углеводороды, такие как дихлорметан и хлороформ, толуол, диоксан, воду и смешанный растворитель из диоксана и воды, при этом дихлорметан является предпочтительным.

[0050] Примеры применяемой кислоты включают карбоновые кислоты, такие как трифторуксусная кислота, и неорганические кислоты, такие как соляная кислота, при этом трифторуксусная кислота является предпочтительной.

[0051] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и кислоты, но обычно составляет от -20°C до 100°C, предпочтительно от 0°C до 40°C.

[0052] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и кислоты, но обычно составляет от 30 минут до одного дня, предпочтительно от 1 до 12 часов.

[0053] Способ получения посредством процесса D и процесса F также можно применять в качестве другого способа получения соединения (1).

[0054] (Процесс D) Восстановительное аминирование

[Химическая формула 6]

[где X, Y и Z являются такими, как определено выше.]

[0055] Данный процесс является процессом получения соединения (8) путем реакции соединения (2) с соединением (7) и восстановителем в инертном растворителе в присутствии или отсутствии кислоты.

[0056] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают эфиры, такие как тетрагидрофуран, и спирты, такие как метанол и этанол, при этом тетрагидрофуран или метанол являются предпочтительными.

[0057] Примеры применяемого восстановителя включают боргидридные соединения, такие как триацетоксиборогидрид натрия, цианоборогидрид натрия и борогидрид натрия, при этом триацетоксиборогидрид натрия является предпочтительным.

[0058] В данном процессе можно применять или не применять кислоту, и если применяют, то применяемая кислота не ограничена особым образом в той мере, в которой она не ингибирует реакцию, и предпочтительно является уксусной кислотой.

[0059] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя, восстановителя и кислоты, но обычно составляет от -20°C до 100°C, предпочтительно от 0°C до 60°C.

[0060] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя, восстановителя и кислоты, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от 1 до 48 часов.

[0061] Даже если соединение (2), будучи исходным материалом, образует соль, дальнейшее протекание реакции можно обеспечить путем добавления органического амина, такого как триэтиламин, в количестве одного или нескольких эквивалентов относительно количества карбоновой кислоты, образующей соль.

[0062] (Процесс Е) Гидрирование

Соединение (4), в котором арилметильная группа удалена, можно получать путем подвергания соединения (6), полученного при вышеописанном процессе В, реакции гидрирования. Соединение (4) далее может быть превращено с помощью процесса B в соединение (6), к которому добавлена арилметильная группа, содержащая различные заместители.

[Химическая Формула 7]

[где R, Z и n являются такими, как определено выше, Y¹ и Y² имеют такое же значение, как и вышеуказанный Y, и Z¹, и Z² имеют такое же значение, как и вышеуказанный Z.]

[0063] Данный процесс является процессом получения соединения (4) путем реакции соединения (6) с водородом в инертном растворителе в присутствии восстановительного катализатора с удалением арилметильной группы.

[0064] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают спирты, такие как метанол и этанол, эфиры, такие как тетрагидрофуран, диоксан и диметилоксиэтан, и сложные эфиры органических кислот, такие как этил ацетат, при этом эфиры, спирты, сложные эфиры органических кислот или смешанные растворители из них являются предпочтительными, и метанол или этанол являются наиболее предпочтительными.

[0065] Примеры применяемых восстановительных катализаторов включают Pd/C, гидроксид палладия, никель Ренея, оксид платины и платиновую чернь, при этом Pd/C или гидроксид палладия является предпочтительным.

[0066] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала и растворителя, но обычно составляет от 0°C до 70°C, предпочтительно от 10°C до 50°C.

[0067] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и температуры реакции, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от одного до трех дней.

[0068] В случае применения восстановительного катализатора давление водорода в ходе реакции обычно составляет от 0,5 до 10 атмосфер, предпочтительно от 1 до 5 атмосфер.

[0069] Как правило, соединение, полученное в данном процессе, можно использовать в следующем процессе только после отфильтровывания катализатора.

[0070] (Процесс F)

Соединение (1) также можно получать с помощью процесса F.

[Химическая формула 8]

[0071] (Процесс Р-1) Амидирование

Данный процесс является процессом получения соединения (11) путем подвергания карбоксильной группы соединения (8) и аминогруппы соединения (10) дегидратационной конденсации, и его можно осуществлять при помощи способа, подобного таковому процесса А.

[0072] (Процесс F-2) Удаление трет-бутильной группы и трет-бутоксикарбонильной группы

Данный процесс является процессом получения соединения (12) путем реакции соединения (11) с кислотой, и его можно осуществлять при помощи способа, подобного таковому процесса С.

[0073] (Процесс F-3) Восстановительное аминирование

Данный процесс является процессом получения соединения (1) путем реакции соединения (12) с альдегидным соединением (13) в присутствии восстановителя, и его можно осуществлять при помощи способа, подобного таковому процесса D.

[0074] Соединения (10) и (13) могут быть доступны в качестве коммерчески доступных соединений, или их можно легко получить из коммерчески доступных соединений при помощи способов, обычно осуществляемых специалистами в данной области техники.

[0075] (Процесс G)

Соединение (2) также можно получать с помощью нижеописанного процесса G.

[Химическая формула 9]

[где X является таким, как определено выше, V представляет собой атом водорода или метоксигруппу, и W² представляет собой атом галогена.]

[0076] (Процесс G-1) Этерификация

Данный процесс является процессом получения соединения (16) путем реакции соединения (14) с соединением (15) в инертном растворителе в присутствии основания. Данный процесс можно осуществлять согласно процессу В.

[0077] (Процесс G-2) Циклоприсоединение

Данный процесс является процессом по лучения соединения (17) путем реакции соединения (16) с N-(метоксиметил)-N-(триметилсилилметил)бензиламином в инертном растворителе в присутствии кислоты.

[0078] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают эфиры, такие как тетрагидрофуран, галогензамещенные углеводороды, такие как дихлорметан и хлороформ, и ароматические углеводороды, такие как бензол и толуол, при этом дихлорметан, и толуол, и смешанный растворитель из них являются предпочтительными.

[0079] Применяемая кислота может быть любой кислотой, обычно используемой специалистами в данной области техники, и предпочтительно является трифторуксусной кислотой.

[0080] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя, восстановителя и кислоты, но обычно составляет от -20°C до 60°C, предпочтительно от 10°C до 40°C.

[0081] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя, восстановителя и кислоты, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от 1 до 24 часов.

[0082] Реакция может быть экзотермической, предпочтительно добавлять по каплям N-(метоксиметил)-N-(триметилсилилметил)бензиламин после смешивания соединения (16), растворителя и кислоты, в то же время следует проявлять осторожность относительно выделения тепла.

[0083] (Процесс С-3) Алкилирование

Данный процесс является процессом получения соединения (18) путем воздействия основанием на соединение (17) в инертном растворителе и затем реакции с трет-бутилбромацетатом.

[0084] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают эфиры, такие как тетрагидрофуран и диэтиловый эфир, алифатические углеводороды, такие как гексан, ароматические углеводороды, такие как толуол, и смешанные растворители из них, при этом тетрагидрофуран и смешанный растворитель из тетрагидрофурана и гексана являются предпочтительными.

[0085] Предпочтительные примеры применяемого основания включают литиевые соли органических аминов, такие как диизопропиламид лития и бис(триметилсилил)амид лития, при этом диизопропиламид лития и бис(триметилсилил)амид лития являются более предпочтительными.

[0086] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и основания, но обычно составляет от -100°C до 50°C, предпочтительно от -80°C до -40°C, наиболее предпочтительно от -80°C до -70°C.

[0087] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и основания, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от 1 до 24 часов, наиболее предпочтительно от 2 до 5 часов.

[0088] (Процесс G-4) Реакция гидрирования

Данный процесс является процессом, в котором осуществляют реакцию соединения (18) с водородом в инертном растворителе в присутствии восстановительного катализатора с удалением бензильной группы.

[0089] Данный процесс можно осуществлять согласно вышеописанному процессу Е.

[0090] (Процесс G-5) Хиральное разделение

Данный процесс является процессом получения соединения (2) путем подвергания рацемата соединения (2) хиральному разделению.

[0091] Применяемый растворитель для подвижной фазы или загрузки образца при разделении не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не оказывает неблагоприятных эффектов на колонки или образцы, и примеры включают воду, водные солевые растворы, спирты, такие как метанол, этанол и 2-пропанол, гексан, ацетонитрил, тетрагидрофуран, трифторуксусную кислоту, диэтиламин или смешанные растворители из них, при этом ацетонитрил, этанол или смешанный растворитель из этанола и гексана являются предпочтительными.

[0092] Примеры применяемой колонки для разделения включают различные коммерчески доступные колонки для оптического разделения, при этом CHIRALPAK AD-H, CHIRALPAK IA и CHTRALCEL OZ-H, произведенные Daicel Chemical Industries, Ltd., являются предпочтительными.

[0093] Температура колонки в ходе разделения предпочтительно составляет от 10°C до 45°C.

[0094] (Процесс Н)

Соединение (3), применяемое в процессе А или подобном, также можно получать при помощи нижеописанного процесса Н.

[Химическая формула 10]

[где R и n являются такими, как определено выше.]

[0095] (Процесс Н-1) Восстановительное аминирование

Данный процесс является процессом получения соединения (20) путем реакции соединения (19) с соединением (13) в присутствии восстановителя в инертном растворителе в присутствии или отсутствии кислоты, и его можно осуществлять согласно процессу D.

[0096] (Процесс Н-2) Удаление трет-бутоксикарбонильной группы

Данный процесс является процессом получения соединения (3) путем реакции соединения (20) с кислотой в отсутствии растворителя или в инертном растворителе с удалением трет-бутоксикарбонильной группы, и его можно осуществлять согласно процессу С.

[0097] (Процесс I)

Соединение (2) также можно получать при помощи нижеописанного процесса I с использованием рацемата соединения (2) в качестве исходного материала.

[Химическая формула 11]

[где X и V являются такими, как определено выше.]

[0098] (Процесс I-1) Введение бензилоксикарбонильной группы

Данный процесс является процессом, в котором осуществляют реакцию рацемата соединения (2) с бензилхлорформиатом в инертном растворителе в присутствии основания с введением бензилоксикарбонильной группы.

[0099] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают эфиры, такие как тетрагидрофуран и 1,4-диоксан, воду, N,N-диметилформамид, дихлорметан, ацетон и смешанные растворители из них, при этом смешанный растворитель из воды и ацетона является предпочтительным.

[0100] Примеры применяемого основания включают неорганические основания, такие как гидроксид натрия, гидроксид калия, бикарбонат натрия, карбонат натрия и карбонат калия, и органические амины, такие как триэтиламин и диизопропилэтиламин, при этом гидроксид натрия является предпочтительным.

[0101] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и основания, но обычно составляет от -30°C до 20°C, предпочтительно от -10°C до 15°C.

[0102] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала, растворителя и основания, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от 1 до 24 часов.

[0103] Процесс I-2) Реакция этерификации

Данный процесс является процессом получения соединения (22) путем реакции соединения (21) с галоидным бензилом в инертном растворителе в присутствии основания. Данный процесс можно осуществлять согласно процессу В.

[0104] (Процесс I-3) Хиральное разделение

Данный процесс является процессом получения хиральной формы соединения (22) путем подвергания соединения (22) хиральному разделению. Данный процесс можно осуществлять согласно процессу G-5.

[0105] (Процесс I-4) Реакция гидрирования

Данный процесс является процессом получения соединения (2) путем реакции хиральной формы соединения (22) с водородом в инертном растворителе в присутствии восстановительного катализатора. Данный процесс можно осуществлять согласно процессу Е.

[0106] (Процесс J)

Соединение (2) также можно получать при помощи нижеописанного процесса J с использованием соединения (18) в качестве исходного материала.

[Химическая формула 12]

[где X и V имеют такое же значение, как указано выше.]

[0107] (Процесс J-1) Введение бензилоксикарбонильной группы

Данный процесс является процессом получения соединения (22) путем реакции соединения (18) с бензилхлорформиатом в инертном растворителе с замещением бензильной группы бензилоксикарбонильной группой.

[0108] Применяемый растворитель не ограничен особым образом в той мере, в которой он до некоторой степени растворяет исходный материал и не ингибирует реакцию, и примеры включают тетрагидрофуран, толуол, дихлорметан, хлороформ и смешанные растворители из них, при этом дихлорметан является предпочтительным.

[0109] Температура реакции варьирует в зависимости от исходного материала и растворителя, но обычно составляет от -20°C до 60°C, предпочтительно от 0°C до 40°C.

[0110] Время реакции варьирует в зависимости от исходного материала и растворителя, но обычно составляет от 30 минут до пяти дней, предпочтительно от 1 до 24 часов.

[0111] (Процесс J-2) Хиральное разделение

[0112] (Процесс J-3) Реакция гидрирования

[0113] После завершения реакции в каждом процессе каждого способа, описанного выше, целевое соединение в каждом процессе можно собрать из реакционной смеси согласно обычному способу.

[0114] Например, если вся реакционная смесь представляет собой жидкость, реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры или, при необходимости, охлаждают льдом и нейтрализуют, в соответствующих случаях, кислотой, щелочью, окислителем или восстановителем, добавляют органический растворитель, не смешивающийся с водой и не реагирующий с целевым соединением, такой как этил ацетат, и отделяют слой, содержащий целевое соединение. Далее добавляют растворитель, не смешивающийся с полученным в результате слоем и не реагирующий с целевым соединением, промывают слой, содержащий целевое соединение, и отделяют слой. Более того, если слой является органическим слоем, целевое соединение можно собрать путем высушивания при помощи осушителя, такого как безводный сульфат магния или безводный сульфат натрия, и отгонки растворителя. Если слой является водным слоем, целевое соединение можно собрать путем электрического обессоливания и затем лиофилизации слоя.

[0115] К тому же, если вся реакционная смесь представляет собой жидкость и, при наличии возможности, целевое соединение можно собрать только путем отгонки веществ, отличных от целевого соединения (таких как растворитель или реагент), при нормальном давлении или пониженном давлении.

[0116] Далее, если только целевое соединение осаждают в виде твердого вещества, или если вся реакционная смесь, описанная выше, представляет собой жидкость и в ходе сбора осаждают только целевое соединение, целевое соединение далее можно собрать путем сбора целевого соединения с помощью сначала фильтрации, промывки целевого соединения, собранного с помощью фильтрации, соответствующим органическим или неорганическим растворителем и высушивания, так что маточный раствор обрабатывают способом, подобным таковому в случае, когда вся реакционная смесь, описанная выше, представляет собой жидкость.

[0117] Более того, если только реагент или катализатор присутствуют в виде твердого вещества, или вся реакционная смесь, описанная выше, представляет собой жидкость, и в ходе сбора только реагент или катализатор осаждают в виде твердого вещества, и целевое соединение растворено в растворе, целевое соединение можно собрать с помощью сначала отфильтровывания реагента или катализатора, промывки отфильтрованного реагента или катализатора соответствующим органическим или неорганическим растворителем, объединения полученных в результате промывочных вод с маточным раствором и обработки полученной в результате смеси способом, подобным таковому в случае, когда вся реакционная смесь, описанная выше, представляет собой жидкость.

[0118] В частности, если вещества, отличные от целевого соединения, которые содержатся в реакционной смеси, не ингибируют реакцию на следующем этапе, реакционную смесь также можно использовать на следующем этапе как есть без выделения целевого соединения каким-либо особым образом.

[0119] При необходимости рекристаллизацию, различные хроматографические способы и перегонку можно осуществлять для того, чтобы повысить степень чистоты целевого соединения, собранного вышеописанным способом.

[0120] Как правило, если собранное целевое соединение является твердым веществом, степень чистоты целевого соединения можно повысить путем рекристаллизации. При рекристаллизации можно применять один растворитель или смесь нескольких растворителей, не реагирующих с целевым соединением. В частности, целевое соединение сначала растворяют в одном или нескольких растворителях, не реагирующих с целевым соединением при комнатной температуре или при нагревании. Полученную в результате смесь охлаждают ледяной водой или подобным образом, либо перемешивают, либо выдерживают при комнатной температуре, так что целевое соединение может кристаллизоваться из смеси.

[0121] Степень чистоты собранного целевого соединения можно повысить путем различных хроматографических способов. В общем, возможно применять слабые кислотные силикагели, такие как силикагель 60, произведенный Merck KGaA (70-230 меш или 340-400 меш), и BW-300, произведенный Fuji Silysia Chemical Ltd. (300 меш). В тех случаях, если целевое соединение является основным и адсорбируется на вышеописанных силикагелях слишком сильно, также возможно использовать NH-силикагели, такие как силикагель, покрытый пропиламином, произведенный Fuji Silysia Chemical Ltd. (200-350 меш), и одноразовую предварительно заполненную колонку для препаративной хроматографии при среднем давлении, произведенную Yamazen Corporation (Hi-Flash Amino). В тех случаях, если целевое соединение является биполярным или должно быть элюировано с помощью более полярного растворителя, такого как метанол, например, также возможно использовать NAM-200H или NAM-300H, произведенный NAM Laboratory, или YMC GEL ODS-A, произведенный YMC Co. Ltd. Также возможно использовать одноразовые предварительно заполненные колонки для препаративной хроматографии при среднем давлении, как описано выше, которые предварительно заполнены наполнителями и произведены Yamazen Corporation, Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Biotage AB или W.R. Grace & Co. (Hi-Flash Amino). Целевое соединение, степень чистоты которого повышают, можно получать путем элюирования целевого соединения одним или несколькими растворителями, не реагирующими с целевым соединением, с использованием этих силикагелей и отгонки растворителя(растворителей).

[0122] В тех случаях, если собранное целевое соединение представляет собой жидкость, степень чистоты целевого соединения также можно повысить путем перегонки. При перегонке целевое соединение можно отогнать путем подвергания целевого соединения пониженному давлению при комнатной температуре или при нагревании.

[0123] Типичные примеры способа получения соединения (1) были описаны выше. При получении соединения (1) сырьевые соединения и различные реагенты могут образовывать соли или сольваты, такие как гидраты, причем все из них варьируют в зависимости от исходного материала, применяемого растворителя или подобного и не ограничены особым образом в той мере, в которой они не ингибируют реакцию. Кроме того, применяемый растворитель варьирует в зависимости от исходного материала, реагента или подобного и, разумеется, не ограничен особым образом в той мере, в которой он не ингибирует реакцию и растворяет исходный материал до некоторой степени. Если соединения (1) получают в виде свободных форм, они могут быть превращены в соли, которые могут быть образованы соединениями (1), или сольватами соединений, или солями, при помощи обычных способов.

[0124] Если соединения (1) получают в виде солей или сольватов, они могут быть превращены в свободные формы соединений (1) при помощи обычных способов.

[0125] Различные изомеры, полученные для соединений (1) (такие как геометрические изомеры, оптические изомеры, ротамеры, стереоизомеры и таутомеры), можно очистить и выделить с использованием общих способов разделения, например, рекристаллизация, образование диастереомерной соли, ферментативное разделение и различные хроматографические способы (такие как тонкослойная хроматография, колоночная хроматография и газовая хроматография).

[0126] Соединения (1) или их фармацевтически приемлемые соли можно составить при помощи обычных способов, и примеры лекарственных форм включают пероральные составы (такие как таблетки, гранулы, порошки, капсулы и сиропы), составы для инъекций (для внутривенного введения, внутримышечного введения, подкожного введения и интраперитонеального введения) и составы для наружного применения (такие как составы для чрескожного всасывания (такие как мази и пластыри), офтальмологические препараты, назальные препараты и суппозитории).

[0127] Эти твердые составы, такие как таблетки, капсулы, гранулы и порошки могут содержать, как правило, от 0,001 до 99,5 вес.%, предпочтительно от 0,01 до 90 вес.% или т.п. соединений (1) или их фармацевтически приемлемых солей.

[0128] При производстве пероральных твердых составов таблетки, гранулы, порошки и капсулы можно получать путем добавления, при необходимости, разбавителей, связывающих веществ, разрыхлителей, смазывающих веществ, красителей или т.п. к соединениям (1) или их фармацевтически приемлемым солям и обработки при помощи обычных способов. При необходимости таблетки, гранулы, порошки, капсулы и т.п. также можно покрыть оболочкой.

[0129] Примеры разбавителей включают лактозу, кукурузный крахмал и микрокристаллическую целлюлозу, примеры связывающих веществ включают гидроксипропилцеллюлозу и гидроксипропилметилцеллюлозу, и примеры разрыхлителей включают кальций-карбоксиметилцеллюлозу и кроскармеллозу натрия.

[0130] Примеры смазывающих веществ включают стеарат магния и стеарат кальция, и примеры красителей включают оксид титана.

[0131] Примеры веществ, входящих в состав пленочной оболочки, включают гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу и метилцеллюлозу.

[0132] Разумеется, что любые вспомогательные вещества, описанные выше, не ограничены этими примерами.

[0133] При получении составов для инъекций (для внутривенного введения, внутримышечного введения, подкожного введения и интраперитонеального введения), их можно получить путем добавления, при необходимости, регуляторов pH, буферов, суспендирующих средств, солюбилизирующих компонентов, антиоксидантов, консервантов (антисептиков), веществ, регулирующих тоничность, или т.п. к соединениям (1) или их фармацевтически приемлемым солям и обработки при помощи обычных способов. Лиофилизированные составы, которые необходимо растворить перед применением, также можно получить путем лиофилизации. Эти составы для инъекций можно вводить внутривенно, подкожно и внутримышечно, например.

[0134] Примеры регуляторов pH и буферов включают органические кислоты или неорганические кислоты и/или их соли, примеры суспендирующих средств включают метилцеллюлозу, полисорбат 80 и натрий-карбоксиметилцеллюлозу, примеры солюбилизирующих компонентов включают полисорбат 80 и полиоксиэтиленсорбитанмонолаурат, примеры антиоксидантов включают α-токоферол, примеры консервантов включают метилпарагидроксибензоат и этилпарагидроксибензоат, и примеры веществ, регулирующих тоничность, включают глюкозу, хлорид натрия и маннит; тем не менее, разумеется, что вспомогательные вещества не ограничены этими примерами.

[0135] Эти составы для инъекций могут содержать, как правило, от 0,000001 до 99,5 вес.%, предпочтительно от 0,00001 до 90 вес.% или т.п. соединений (1) или их фармацевтически приемлемых солей.

[0136] При получении составов для наружного применения составы для чрескожного всасывания (такие как мази и пластыри), глазные капли, капли для носа, суппозитории и т.п. можно получить путем добавления основных веществ и, при необходимости, эмульгаторов, консервантов, регуляторов pH, красителей и т.п., описанных выше, к соединениям (1) или их фармацевтически приемлемым солям, и обработки при помощи обычных способов.

[0137] Различные сырьевые материалы, традиционно применяемые для фармацевтических препаратов, препаратов общего воздействия, косметических средств и т.п. можно использовать в качестве основных веществ, и примеры включают сырьевые материалы, такие как животные и растительные масла, минеральные масла, сложноэфирные синтетические масла, воски, высшие спирты и очищенную воду.

[0138] Эти составы для наружного применения могут содержать, как правило, от 0,000001 до 99,5 вес.%, предпочтительно от 0,00001 до 90 вес.% или т.п. соединений (1) или их фармацевтически приемлемых солей.

[0139] Доза лекарственного средства согласно настоящему изобретению обычно варьирует в зависимости от симптома, возраста, пола, веса или т.п., но является допустимой, если она является дозой, достаточной для получения необходимого эффекта. Например, для взрослого человека дозу от приблизительно 0,1 до 5000 мг (предпочтительно 0,5-1000 мг, более предпочтительно 1-600 мг) в день вводят при одной дозе в течение одного или нескольких дней или при 2-6 дозах, разделенных на несколько введений, в течение одного дня.

[0140] Настоящее изобретение также предусматривает изотопно-меченые соединения (1), и такие соединения являются такими же, что и соединения (1), за исключением того, что один или несколько атомов замещены атомом(атомами) с атомной массой или массовым числом, отличным от атомной массы или массового числа, обычно обнаруживаемого в природе. Изотопы, которые могут быть включены в соединения (1), являются изотопами водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора, йода и хлора, например, и включают ²H, ³H, ¹¹C, ¹⁴C, ¹³N, ¹⁵О, ¹⁸F, ³²Р, ³⁵S, ¹²³I и ¹²⁵I.

[0141] Соединения (1), содержащие вышеописанные изотопы и/или другие изотопы или их фармацевтически приемлемые производные (такие как соли), находятся в пределах формулы изобретения настоящего описания. Изотопно-меченые соединения по настоящему изобретению, например, соединения, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как ³H и/или ¹⁴C, являются пригодными для анализов распределения в тканях применительно к лекарственным средствам и/или субстратам. Считается, что ³H и ¹⁴C являются пригодными из-за легкости их получения и обнаружения. Считается, что изотопы ¹¹C и ¹⁸F являются пригодными для PET (позитронно-эмиссионной томографии), считается, что изотоп ¹²⁵I является пригодным для SPECT (однофотонной эмиссионной компьютерной томографии), и все эти изотопы являются пригодными для томографии головного мозга. Замещение более тяжелыми изотопами, такими как ²Н, дает определенные терапевтические преимущества, такие как увеличение периода полувыведения in vivo благодаря более высокой метаболической стабильности или снижение необходимой дозы, и, таким образом, при определенных условиях его считают подходящим. Изотопно-меченые соединения (1) можно постоянно получать путем осуществлением методик, раскрытых в следующих схемах и/или примерах, с использованием легко доступных изотопно-меченых реагентов вместо реагентов, не являющихся изотопно-мечеными.

[0142] Соединения (1) можно применять в качестве химических зондов, для того чтобы улавливать целевые белки среди биологически активных низкомолекулярных соединений. В частности, соединение (1) можно превратить в зонд для аффинной хроматографии, фотоаффинный зонд или т.п. путем введения группы-метки, линкера или т.п. во фрагмент, отличающийся от структурного фрагмента, необходимого для проявления активности соединения, с помощью методики, описанной в J. Mass Spectrum. Soc. Jpn., Vol. 51, No. 5, 2003, pp. 492-498, или патентном документе WO 2007/139149, или т.п.

[0143] Примеры групп-меток, линкеров или т.п., используемых для химических зондов, включают группы, показанные в группе, состоящей из (1)-(5) ниже:

(1) группы для мечения белков, такие как группы для фотоаффинного мечения (такие как бензоильная группа, бензофеноновая группа, азидогруппа, карбонилазидогруппа, диазиридиновая группа, группа енона, диазогруппа и нитрогруппа) и группы, обладающие химическим сродством (такие как кетоновая группа, в которой α-углеродный атом замещен атомом галогена, карбамоильная группа, сложноэфирная группа, алкилтиогруппа, акцепторы Михаэля, такие как α,β-ненасьпценные кетоны и сложные эфиры, и эпоксидная группа),

(2) расщепляемые линкеры, такие как -S-S-, -O-Si-O-, моносахариды (такие как группа глюкозы и группа галактозы) или дисахариды (такие как лактоза), и олигопептидные линкеры, расщепляемые путем ферментативной реакции,

(3) маркерные группы для фишинга, такие как биотин и 3-(4,4-дифтор-5,7-диметил-4Н-3а,4а-диаза-4-бора-5-индацен-3-ил)пропионильная группа,

(4) обнаруживаемые маркеры, такие как меченые радиоактивным изотопом группы, такие как ¹²⁵I, ³²P, ³H и ¹⁴C; флуоресцентные группы-метки, такие как флуоресцеин, родамин, дансил, умбеллиферон, 7-нитрофуразанильная и 3-(4,4-дифтор-5,7-диметил-4Н-3а,4а-диаза-4-бора-з-индацен-3-ил)пропионильная группа; хемилюминесцентные группы, такие как люциферин и люминол; и ионы тяжелых металлов, такие как ионы металлов-лантаноидов и ионы радия; или

(5) группы, связанные с твердофазными носителями, такие как стеклянные шарики, стеклянные пластины, титрационные микропланшеты, агарозные гранулы, агарозные слои, полистирольные гранулы, полистирольные слои, полиамидные гранулы и полиамидные слои.

Зонды, полученные путем введения групп-меток или т.п., выбранных из группы, состоящей из (1)-(5) выше, в соединения (1) согласно способу, описанному в вышеупомянутых документах, или т.п., можно применять в качестве химических зондов для определения меченых белков, что является применимым, например, для поиска новых мишеней для лекарственного вещества.

Примеры

[0144] Соединения (1) можно получать при помощи способов, описанных в примерах ниже, например, и эффекты соединений (1) можно подтверждать при помощи способов, описанных ниже в тестовых примерах. Однако, эти способы являются иллюстративными, и настоящее изобретение так или иначе не ограничено следующими конкретными примерами.

[0145] В тех случаях, когда оксид дейтерия применяли в качестве растворителя, используемого для измерения в ¹Н-ЯМР для подтверждения структур соединений, химический сдвиг спектра каждого соединения показан в виде значения, скорректированного по отношению к химическому сдвигу остаточного пика растворителя в оксиде дейтерия как 4,79.

[0146] (Пример 1) Хиральная форма 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты

[0147] (Пример 1а) Трет-бутил-4-{[(бензилокси)карбонил]амино}пиперидин-1-карбоксилат

Трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилат (10 г, 49,9 ммоль), N,N-диизопропилэтиламин (26 мл, 149 ммоль), бензилхлорформиат (8,5 мл, 59,5 ммоль) и дихлорметан (дегидратированный) (300 мл) смешивали при охлаждении льдом. Полученную в результате смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Водный насыщенный раствор бикарбоната натрия добавляли к реакционной смеси, которую три раза экстрагировали дихлорметаном. Органический слой промывали солевым раствором, и высушивали над безводным сульфатом натрия, и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (13,1 г, выход 78,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,24-1,38 (2Н, m), 1,45 (9Н, s), 1,88-2,00 (2Н, br), 2,80-2,94 (2Н, br), 3,60-3,72 (1Н, br), 3,92-4,10 (2Н, br), 4,63-4,75 (1Н, m), 5,09 (2Н, s), 7,26-7,40 (5Н, m).

[0148] (Пример 1b) Бензил-N-(пиперидин-4-ил)карбамат

Смесь трет-бутил-4-{[(бензилокси)карбонил]амино}пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 1а (13,1 г, 39,2 ммоль), 5 N водного раствора соляной кислоты (40 мл, 200 ммоль) и метанола (40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 23 часов. 5 N водный раствор гидроксида натрия (40 мл) добавляли к реакционной смеси при охлаждении льдом. Воду и растворитель отгоняли из реакционной смеси, в то время как смесь азеотропно перегоняли с этанолом. Этанол добавляли к остатку, нерастворимое вещество удаляли с помощью фильтрации, и фильтрат концентрировали с получением титульного соединения (9,10 г, выход 99,1%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,31-1,42 (2Н, m), 1,92-2,04 (2Н, br), 2,70 (2Н, d, J=12 Гц), 3,10 (2Н, d, J=12 Гц), 3,56-3,68 (1H, br), 4,72-4,81 (1Н, br), 5,09 (2Н, s), 7,26-7,40 (5Н, m).

[0149] (Пример 1с) Хиральная форма бензил-N-[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамата

(5S)-(-)-2,2,3-Триметил-5-бензил-4-имидазолидинондихлоруксусную кислоту (90 мг, 0,259 ммоль), N-фторбензолсульфонимид (484 мг, 1,53 ммоль), 2-пропанол (0,4 мл) и тетрагидрофуран (дегидратированный) (3,6 мл) смешивали при комнатной температуре. Реакционную смесь охлаждали до -10°C и затем добавляли пентаналь (0,175 мл, 1,67 ммоль) с последующим перемешиванием в течение трех часов и 20 минут, в то же время она естественным образом нагревалась от -10°C до комнатной температуры. Бензил-N-(пиперидин-4-ил)карбамат, полученный в примере 1b (304 мг, 1,3 ммоль), и триацетоксиборогидрид натрия (600 мг, 2,83 ммоль) добавляли к реакционной смеси, которую перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов и 40 минут. Воду и водный раствор бикарбоната натрия добавляли к реакционной смеси, нерастворимое вещество удаляли с помощью фильтрации, и полученный в результате фильтрат дважды экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали солевым раствором и высушивали над безводным сульфатом натрия, и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением смеси хиральных форм титульного соединения (44 мг, выход 10,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,94 (3Н, t, J=7 Гц), 1,38-1,70 (6Н, m), 1,85-2,00 (2Н, br), 2,14-2,24 (2Н, m), 2,35-2,48 (1Н, m), 2,55-2,64 (1Н, m), 2,80-3,00 (2Н, m), 3,48-3,60 (1Н, m), 4,59-4,72 (2Н, m), 5,09 (2Н, s), 7,26-7,37 (5Н, m).

Разделение оптических изомеров с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHIRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), элюент: гексан/этанол = 9/1 (об/об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм).

(Результат анализа) Полученную в результате смесь хиральных форм анализировали при вышеуказанных условиях анализа и наблюдали пик при времени удержания, составляющем 7,30 минуты (энантиомерный избыток: 80% ее), и пик при времени удержания, составляющем 8,28 минуты.

Далее получали две партии смеси хиральных форм при помощи способа, подобного вышеописанному способу. В общем три партии смеси хиральных форм (451 мг, 1,4 ммоль) растворяли в этаноле (18 мл), и несколько раз разделяли на оптические изомеры при следующих условиях фракционирования, и пик с более коротким временем удержания разделяли на фракции с получением титульного соединения (318 мг).

(Условия фракционирования) Колонка: CHCRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (2 см в диаметре × 25 см), элюент: гексан/этанол = 9/1 (об./об.), скорость потока: 10 мл/мин., обнаружение: UV (220 нм).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,94 (3H, t, J=7 Гц), 1,38-1,70 (6Н, m), 1,85-2,00 (2Н, br), 2,14-2,24 (2Н, m), 2,35-2,48 (1H, m), 2,55-2,64 (1H, m), 2,80-3,00 (2Н, m), 3,48-3,60 (1Н, m), 4,59-4,72 (2Н, m), 5,09 (2Н, s), 7,26-7,37 (5Н, m).

Полученное в результате титульное соединение анализировали при вышеуказанных условиях анализа с обнаружением того, что время удержания составляло 7,41 минуты, и энантиомерный избыток составлял >99% ее.

[0150] (Пример 1d) Хиральная форма 1-(2-фторпентил)пиперидин-4-амина

Смесь хиральной формы (с более коротким временем удержания) бензил-N-[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамата, полученной в примере 1 с (318 мг, 0,986 ммоль), 10% Pd/C (100 мг) и метанола (7 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов в атмосфере водорода. Атмосферу в реакционном сосуде заменяли азотом, отфильтровывали 10% Pd/C, и растворитель отгоняли с получением титульного соединения (249 мг).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,95 (3Н, t, J=7 Гц), 1,35-1,70 (4Н, m), 1,92-2.10 (2Н, br), 2,20-2,32 (2Н, br), 2,48-2,62 (2Н, br), 2,65-2,91 (2Н, m), 3,18-3,30 (2Н, br), 3,31-3,42 (1Н, br), 4,72-4,93 (1Н, m).

[0151] (Пример 1е) Бензил-(2Е)-бут-2-еноат

Кротоновую кислоту (70 г, 812 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (467 мл), который охлаждали на ледяной бане в атмосфере азота, и добавляли карбонат калия (61,6 г, 447 ммоль). Бромистый бензил (91,7 мл, 772 ммоль) добавляли по каплям к реакционной смеси в течение 20 минут. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Этилацетат добавляли к реакционной смеси, которую фильтровали через целит. Профильтрованный раствор этил ацетата промывали водой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органический слой высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (142 г, выход: 99,4%).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,87-1,90 (3Н, m), 5,17 (2Н, s), 5,87-5,92 (1Н, m), 6,98-7,07 (1Н, m), 7,26-7,39 (5Н, m).

[0152] (Пример 1f) Бензил-(3RS,4SR)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат

Бензил-(2Е)-бут-2-еноат, полученный в примере 1е (20,5 г, 116 ммоль), растворяли в дихлорметане (5 мл), и смесь охлаждали на ледяной бане с перемешиванием. Добавляли трифторуксусную кислоту (257 мкл, 3,47 ммоль) и N-(метоксиметил)-N-(триметилсилилметил)бензиламин (33,1 г, 139 ммоль) добавляли по каплям к реакционной жидкости в течение 15 минут, так что внутренняя температура не превышала 62°C, в то же время осуществляли промывание дихлорметаном (25 мл). Реакционную жидкость выдерживали, пока она не достигала комнатной температуры, и перемешивали в течение 15 часов. Реакционную жидкость концентрировали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (38 г).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,14 (3Н, d, J=6 Гц), 2,18-2,22 (1H, m), 2,48-2,65 (2Н, m), 2,75-2,85 (2Н, m), 2,90-2,94 (1Н, m), 3,54-3,66 (2Н, m), 5,13 (2Н, s), 7,20-7,40 (10Н, m).

[0153] (Пример 1g) Бензил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилат

Бензил-(3RS,4SR)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат, полученный в примере 1f (30 г, 97,4 ммоль), растворяли в тетрагидрофуране (300 мл), который охлаждали до -70°C с перемешиванием в атмосфере азота. 1.11 М раствор диизопропиламида лития/н-гексан-тетрагидрофурана (105 мл, 116 ммоль) добавляли по каплям в течение 20 минут, так что внутренняя температура не превышала -64,3°C. Смесь перемешивали при -70°C в течение 1 часа и затем по каплям добавляли тетрагидрофуран (30 мл) и трет-бутил-бромацетат (26,6 г, 136 ммоль) в течение 10 минут, так что внутренняя температура не превышала -60°C. Реакционную смесь перемешивали при -70°C в течение дополнительного одного часа и затем к реакционной смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония. Сразу после этого реакционную смесь разводили водой и добавляли этилацетат. Органический слой промывали солевым раствором и 5 N водным раствором соляной кислоты и затем высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/гептан). Остаток дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии на NH-силикагеле (растворитель для элюирования: гептан/этилацетат = 98/2) с получением титульного соединения (6 г, выход: 14,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,86 (3Н, d, J=6 Гц), 1,34 (9Н, s), 2,05-2,15 (2Н, m), 2,53 (1H, d, J=17 Гц), 2,91-3,00 (3Н, m), 3,28 (1Н, d, J=10 Гц), 3,59-3,72 (2Н, m), 5,08-5,16 (2Н, m), 7,19-7,39 (10H, m).

При помощи подобного способа получали 18,1 г титульного соединения.

[0154] (Пример 1h) 1,3-Дибензил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

Бензил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилат, полученный способом, подобным таковому в примере 1g (11,7 г, 27,6 ммоль), растворяли в дихлорметане (117 мл) и бензилхлорформиат (23,7 мл, 166 ммоль) добавляли по каплям к реакционной жидкости в течение 20 минут, так что внутренняя температура не превышала 22°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов и затем отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на NH-силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (9,1 г, выход: 70,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,84-0,90 (3Н, m), 1,32-1,46 (9Н, m), 2,09-2,16 (1Н, m), 2,21-2,27 (1Н, m), 3,04-3,14 (2Н, m), 3,33-3,38 (1Н, m), 3,60-3,68 (1Н, m), 4,32 (1Н, t, J=12 Гц), 5,07-5,20 (4Н, m), 7,26-7,36 (10Н, m).

Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа 1) Колонка: CHTRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), элюент: гексан/этанол = 95/5 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм)

(Результат анализа) Полученное в результате титульное соединение анализировали при вышеуказанных условиях анализа 1 и наблюдали пик при времени удержания, составляющем 8,56 минуты, и пик при времени удержания, составляющем 10,85 минуты.

Титульное соединение, полученное отдельно, анализировали на хиральной колонке, отличной от вышеописанной колонки.

(Условия анализа 2) Колонка: CHTRALPAK IA (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), элюент: гексан/этанол = 95/5 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм) (Результат анализа) Полученное в результате титульное соединение анализировали при вышеописанных условиях анализа 2 и наблюдали пик при времени удержания, составляющем 6,78 минуты, и пик при времени удержания, составляющем 8,20 минуты.

[0155] (Пример 1i) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

1,3-Дибензил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат, полученный в примере 1h (9,1 г), несколько раз разделяли на оптические изомеры при следующих двух типах условий А или В.

Разделение оптических изомеров с помощью HPLC;

(Условия фракционирования А) Колонка: CHIRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (2 см в диаметре ×25 см), элюент: гексан/этанол=85/15 (об./об.), скорость потока: 8-10 мл/мин. (Условия фракционирования В) Колонка: CHIRALPAK IA (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (3 см в диаметре ×25 см), элюент: гексан/этанол=95/5 (об./об.), скорость потока: 22 мл/мин.

Пик с более коротким временем удержания разделяли на фракции, и полученные в результате три партии затем анализировали при следующих условиях анализа. Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHIRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре ×15 см), элюент: гексан/этанол=95/5 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм).

(Результат анализа) Время удержания составляло от 9,0 минут до 9,3 минут, и энантиомерный избыток составлял>99% ее для всех партий.

Объединяли три партии, полученную в результате хиральную форму (4,04 г) растворяли в метаноле (121 мл), добавляли 10% Pd/C (0,77 г) и атмосферу заменяли газообразным водородом. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 13 часов, и затем перемешивали с добавлением теплой воды (от 30 до 40°С, 122 мл), и растворяли осажденное твердое вещество. После того, как отфильтровывали Pd/C, растворитель концентрировали и высушивали с получением титульного соединения (2,1 г).

¹H-ЯМР (400 МГц, D₂O) δ ppm; 0,97 (3Н, d, J=7 Гц), 1,42 (9Н, s), 2,15-2,22 (1Н, m), 2,30 (1H, d, J=17 Гц), 2,93 (1H, d, J=17 Гц), 3,04 (1H, t, J=12 Гц), 3,18 (1H, d, J=12 Гц), 3,49 (1H, dd, J=8,12 Гц), 4,03 (1H, d, J=12 Гц).

[0156] (Пример 1j) (3S,4R)-1-Бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Смесь (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 1i (1,8 г, 7,4 ммоль), бензальдегида (1,51 мл, 14,8 ммоль), уксусной кислоты (0,635 мл, 11,1 ммоль), триацетоксиборогидрида натрия (3,14 г, 14,8 ммоль) и метанола (35 мл) нагревали при 40°С в течение 38 часов и 30 минут. Реакционную смесь концентрировали и полученный в результате остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ODS-силикагель, растворитель

для элюирования: вода/метанол) с получением титульного соединения в виде партии А (584 мг) и партии В (708 мг).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) для партии А δ ppm; 1,02 (3Н, d, J=7 Гц), 1,38 (9Н, s), 2,14 (1H, d, J=17 Гц), 2,15-2,28 (1Н, br), 2,97 (1Н, d, J=17 Гц), 3,10-3,42 (3Н, m), 4,00-4,10 (1Н, m), 4,30-4,40 (1Н, br), 4,46 (1Н, d, J=12 Гц), 7,45-7,53 (5Н, m).

¹Н-ЯМР для партии В: такой же, как ЯМР для партии А.

[0157] (Пример 1k) Хиральная форма трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-бензил-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата

Смесь (3S,4R)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 1j (300 мг, 0,9 ммоль), хиральной формы 1-(2-фторпентил)пиперидин-4-амина, полученной в примере 1d (182 мг, 0,967 ммоль), триэтиламина (0,376 мл, 2,7 ммоль), PyBOP (656 мг, 1,26 ммоль) и N,N-диметилформамида (4,5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 61 часа и 30 минут. Триэтиламин (0,207 мл, 1,49 ммоль) и PyBOP (360 мг, 0,69 ммоль) затем добавляли с последующим перемешиванием в течение четырех часов и 30 минут. Воду добавляли к реакционной смеси, которую дважды экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, и высушивали над безводным сульфатом магния, и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (161 мг, выход 35,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 0,96 (3Н, t, J=7 Гц), 1,40 (9Н, s), 1,40-1,60 (6Н, m), 1,82-2,09 (4Н, m), 2,16-2,28 (2Н, m), 2,36 (1Н, d, J=10 Гц), 2,35-2,50 (1Н, m), 2,56-2,67 (3Н, m), 2,80-2,90 (2Н, br), 3,09 (1Н, d, J=16 Гц), 3,58-3,79 (4Н, m), 4,59-4,80 (1Н, m), 7,25-7,40 (5Н, m), 8,58 (1Н, d, J=8 Гц).

[0158] (Пример 11) Хиральная форма трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата

Смесь хиральной формы трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-бензил-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученной в примере 1k (161 мг, 0,32 ммоль), 20% гидроксида палладия (135 мг) и метанола (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов в атмосфере водорода. Атмосферу в реакционном сосуде заменяли азотом, отфильтровывали 20% гидроксид палладия и отгоняли растворитель. 2-(Бромметил)-1-хлор-3-(трифторметил)бензол (159 мг, 0,581 ммоль), карбонат калия (97 мг, 0,702 ммоль) и N,N-диметилформамид (2 мл) добавляли к полученному в результате остатку, который нагревали при 45°C в течение трех часов и 15 минут. Воду добавляли к реакционной смеси, которую дважды экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония, и высушивали над безводным сульфатом магния, и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (153 мг, выход 78,9%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,91(3Н, d, J=7 Гц), 0,95 (3Н, t, J=7 Гц), 1,38-1,70 (7Н, m), 1,39 (9Н, s), 1,82-1,90 (1Н, br), 1,97 (1Н, d, J=16 Гц), 2,00-2,20 (3H, m), 2,31-2,45 (1Н, m), 2,50-2,68 (3Н, m), 2,80-2,92 (3Н, m), 3,12 (1H, d, J=16 Гц), 3,57 (1Н, d, J=10 Гц), 3,60-3,72 (1H, m), 3,92 (1Н, d, J=13 Гц), 3,93 (1Н, d, J=13 Гц), 4,56-4,74 (1Н, m), 7,37 (1Н, t, J=8 Гц), 7,61-7,68 (2Н, m), 7,85 (1H, d, J=8 Гц).

[0159] (Пример 1m) Хиральная форма 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты

Смесь хиральной формы трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученной в примере 11 (153 мг, 0,252 ммоль), трифторуксусной кислоты (2 мл, 26,9 ммоль) и дихлорметана (дегидратированного) (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов и 35 минут. Реакционную смесь концентрировали и полученный в результате остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ODS-силикагель, растворитель для элюирования: вода/метанол) с получением титульного соединения (122 мг, выход 88%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,94-1,02 (6Н, m), 1,32-1,70 (5Н, m), 1,82-1,90 (1Н, br), 2,07-2,20 (3Н, m), 2,35-2,75 (8Н, m), 2,81-3,05 (3Н, m), 3,19 (1Н, d, J=10 Гц), 3,63-3,75 (1Н, m), 3,89 (1Н, d, J=13 Гц), 4,00 (1Н, d, J=13 Гц), 4,56-4,76 (1Н, m), 7,40 (1Н, t, J=8 Гц), 7,62-7,70 (2Н, m), 8,52 (1Н, d, J=7 Гц).

[0160] (Пример 2) 2-[(3S,4R)-1-[(2,6-Дихлорфенил)метил]-3-({1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамоил)-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0161] (Пример 2а) 4,4-Дифтор-N-метокси-N-метилциклогексан-1-карбоксамид

Смесь этил-4,4-дифторциклогексан-1-карбоксилата (1,9 г, 9,88 ммоль) и тетрагидрофурана (60 мл) охлаждали до -70°C и добавляли гидрохлорид N,O-диметилгидроксиамина (1,44 г, 14,8 ммоль). Далее 1,05 М н-пропилмагния бромида (24,2 мл, 25,2 ммоль) добавляли по каплям к реакционной смеси при -55°C в течение пяти минут, так что внутренняя температура не превышала -35°C, и реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Насыщенный водный раствор хлорида аммония добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этил ацетатом. Органический слой высушивали над сульфатом магния и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (1,7 г, выход 83%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,65-1,95 (6Н, br), 2,13-2,30 (2Н, br), 2,70-2,82 (1Н, br), 3,20 (3Н, s), 3,70 (3Н, s).

[0162] (Пример 2b) 4,4-Дифторциклогексан-1-карбальдегид

Смесь 4,4-дифтор-N-метокси-N-метилциклогексан-1-карбоксамида, полученного в примере 2а (1,7 г, 8,21 ммоль), и тетрагидрофурана (60 мл) охлаждали до -70°C, добавляли 1,0 М раствор гидрида диизобутилалюминия/толуола (9,85 мл, 9,85 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при -60°C в течение 35 минут. Далее добавляли 1,0 М раствор гидрида диизобутилалюминия/толуола (5 мл, 5 ммоль) при -65°C и реакционную смесь перемешивали при -70°C в течение двух часов. 2 N водный раствор соляной кислоты добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этил ацетатом. Органический слой высушивали над сульфатом магния и отгоняли растворитель с получением неочищенного продукта на основе титульного соединения (1,4 г).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,72-1,92 (4Н, br), 1,95-2,18 (4Н, br), 2,30-2,40 (1Н, br), 9,68 (1Н, s).

[0163] (Пример 2с) Трет-бутил-N-{1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамат

Смесь неочищенного продукта на основе 4,4-дифторциклогексан-1-карбальдегида, полученного в примере 2b (1,4 г), и тетрагидрофурана (100 мл) охлаждали до 0°C, к ней добавляли трет-бутил-N-(пиперидин-4-ил)карбамат (2,27 г, 11,3 ммоль) с последующим перемешиванием в течение 20 минут. Триацетоксиборогидрид натрия (2,2 г, 10,4 ммоль) затем добавляли к реакционной смеси, которую перемешивали при комнатной температуре в течение восьми часов. Солевой раствор добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этил ацетатом. Органический слой высушивали над сульфатом магния и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/гептан). Полученный в результате остаток растворяли в этил ацетате и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, и затем отгоняли растворитель с получением титульного соединения (650 мг, выход 20,7%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,15-2,20 (17Н, m), 1,44 (9Н, s), 2,70-2,85 (2H, br), 3,38-3,53 (1Н, br), 4,37-4,50 (1Н, br).

[0164] (Пример 2d) 1-[(4,4-Дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-амин

4N раствор хлороводорода/1,4-диоксана (11 мл, 43 ммоль) добавляли к смеси трет-бутил-N-{1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамата, полученного в примере 2с (650 мг, 1,96 ммоль), и метанола (11 мл), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение трех часов. После концентрирования реакционной жидкости остаток растворяли в этилацетате, добавляли 1 N водный раствор гидроксида натрия и отделяли органический слой. Далее водный слой дважды экстрагировали этилацетатом, органические слои высушивали над сульфатом натрия, и затем отгоняли растворитель с получением титульного соединения (419 мг, выход 92%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,16-1,42 (7Н, m), 1,59-2,16 (12Н, m), 2,58-2,68 (1Н, m), 2,74-2,82 (2Н, m).

[0165] (Пример 2е)(4-Метоксифенил)метил-(2Е)-бут-2-еноат

Кротоновую кислоту (17,2 г, 200 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (100 мл) с охлаждением на ледяной бане в атмосфере азота и добавляли порошкообразный карбонат калия (15,2 г, 110 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 минут и затем добавляли по каплям 4-метоксибензилхлорид (29,8 г, 190 ммоль) в течение 15 минут. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение четырех часов и при 45°C в течение 14 часов. К реакционной жидкости добавляли этилацетат (500 мл) и воду (200 мл). Отделенный органический слой промывали водой (100 мл × 2) и солевым раствором (100 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органические слои объединяли, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта на основе титульного соединения (40,51 г, выход: 98,2%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,87 (3Н, dd, J=2,7 Гц), 3,81 (3Н, s), 5,10 (2Н, s), 5,87 (1Н, dq, J=2,16 Гц), 6,86-6,92 (2Н, m), 7,00 (1Н, dq, J=7, 16 Гц), 7,28-7,34 (2Н, m).

[0166] (Пример 2f) (4-Метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат

Титульное соединение (57,86 г, выход: 86,5%) получали из (4-метоксифенил)метил-(2Е)-бут-2-еноата, полученного в примере 2е (40,6 г, 197 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере If.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,12 (3Н, d, J=7 Гц), 2,17-2,24 (1H, m), 2,46-2,62 (2Н, m), 2,73-2,86 (2Н, m), 2,87-2,93 (1H, m), 3,55 (1Н, d, J=13 Гц), 3,63 (1Н, d, J=13 Гц), 3,81 (3Н, s), 5,03-5,10 (2Н, m), 6,86-6,92 (2Н, m), 7,21-7,35 (7Н, m).

[0167] (Пример 2g) (4-Метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилат

Титульное соединение (60,3 г, выход: 80,1%) получали из (4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, полученного в примере 2f (56,7 г, 166 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1g.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,83 (3Н, d, J=7 Гц), 1,35 (9Н, s), 2,05-2,14 (2Н, m), 2,51 (1Н, d, J=17 Гц), 2,90-2,98 (2Н, m), 3,60 (1Н, d, J=13 Гц), 3,70 (1Н, d, J=13 Гц), 3,81 (3Н, s), 5,04 (1Н, d, J=12 Гц), 5,07 (1Н, d, J=12 Гц), 6,85-6,91 (2Н, m), 7,19-7,34 (7Н, m).

[0168] (Пример 2h) 1-Бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

Титульное соединение (15 г, выход: 65,1%) получали из (4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, полученного в примере 2g (21 г, 46,3 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1h.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,80-0,88 (3Н, m), 1,38 (9Н, d, J=5 Гц), 2,04-2,15 (1Н, m), 2,22 (1Н, dd, J=3,7 Гц), 3,00-3,12 (2Н, m), 3,30-3,36 (1H, m), 3,57-3,67 (1H, m), 3,79 (3Н, d, J=4 Гц), 4,30 (1H, t, J=12 Гц), 5,00-5,16 (4H, m), 6,82-6.86 (2H, m), 7,23-7,39 (7H, m).

Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHIRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), 40°C, элюент: гексан/этанол = 9/1 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм).

(Результат анализа) Полученное в результате титульное соединение анализировали при вышеописанных условиях анализа и наблюдали пик при времени удержания, составляющем 7,14 минуты, и пик при времени удержания, составляющем 9,06 минуты.

[0169] (Пример 2i) 1-Бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

1-Бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат, полученный в примере 2h (7,2 г, 14,5 ммоль), несколько раз разделяли на оптические изомеры с помощью HPLC (CHIRALPAK AD-H (2 см в диаметре × 25 см), причем растворитель для элюирования: гексан/этанол = 85/15, скорость потока: 8-10 мл/мин.) с получением хиральной формы, соответствующей пику с более коротким временем удержания (2,92 г, выход: 40,5%).

Анализ с помощью HPLC

(Результат анализа) Полученную в результате хиральную форму анализировали при вышеописанных условиях анализа с обнаружением того, что время удержания составляло 7,18 минуты и энантиомерный избыток составлял >99% ее.

[0170] (Пример 2j) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Этанол (50 мл) и 10% Pd/C (500 мг) добавляли к 1-бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилату, полученному в примере 2i (2,92 г, 5.87 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 38 часов и пяти минут в атмосфере водорода. Воду (100 мл) добавляли к реакционной жидкости, которую перемешивали и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением титульного соединения (1,37 г, выход: 95,9%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, D₂O) δ ppm; 1,00 (3Н, d, J=7 Гц), 1,45 (9Н, s), 2,16-2,37 (1Н, m), 2,33 (1H, d, J=17 Гц), 2,96 (1H, d, J=17 Гц), 3,05-3,11 (1Н, m), 3,22 (1Н, d, J=12 Гц), 3,50-3,56 (1Н, m), 4,07 (1H, d, J=12 Гц).

[0171] (Пример 2k) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

2,6-Дихлорбензальдегид (646 мг, 3,7 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (782 мг, 3,7 ммоль) добавляли к смеси (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной при помощи способа из примера 2j (600 мг, 2,47 ммоль), уксусной кислоты (0,14 мл, 2,47 ммоль) и метанола (10 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов. Затем добавляли 2,6-дихлорбензальдегид (430 мг, 2,5 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (522 мг, 2,5 ммоль) с последующим перемешиванием при температуре окружающей среды 40°С в течение 10,5 часа. Воду добавляли к реакционной смеси, которую пять раз экстрагировали дихлорметаном, и концентрировали органический слой. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/метанол) с получением партии А (32 мг) и партии В (551 мг) титульного соединения.

Химический сдвиг партии А показан ниже. Партия В является объединением трех фракций, полученных при очистке на колонке, и их объединяли после подтверждения, что химический сдвиг для каждой фракции является подобным химическому сдвигу для партии А.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,01 (3Н, d, J=7 Гц), 1,42 (9Н, s), 2,05-2,11 (1Н, m), 2,16-2,22 (1Н, m), 2,65-2,69 (2Н, m), 2,97-3,04 (2Н, m), 3,70 (1Н, d, J=10 Гц), 4,07-4,15 (2Н, m), 7,22 (1Н, dd, J=8, 9 Гц), 7,35 (2Н, d, J=8 Гц).

[0172] (Пример 21) Трет-бутил-2-[(3S,4R]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-3-({1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамоил)-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Титульное соединение (409 мг, выход: 92%) получали из 1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-амина, полученного в примере 2d (201 мг, 0,87 ммоль), и (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 2k (290 мг, 0,72 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1k.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,85-0,93 (3Н, m), 1,15-2,14 (19Н, m), 1,41 (9Н, s), 2,57-2,71 (4Н, m), 2,92 (1Н, t, J=10 Гц), 3,12 (1H, d, J=16 Гц), 3,59-3,72 (2Н, m), 3,96 (2Н, s), 7,18 (1H, t, J=8 Гц), 7,33 (2Н, d, J=8 Гц), 8,11 (1Н, d, J=8 Гц).

[0173] (Пример 2m) 2-[(3S,4R)-1-[(2,6-Дихлорфенил)метил]-3-({1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамоил)-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (242 мг, выход: 66%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-3-({1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамоил)-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 21 (409 мг, 0,66 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1m.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,87-0,93 (3Н, m), 1,20-2,38 (19Н, m), 2,62-2,71 (2Н, m), 2,86-3,12 (4Н, m), 3,61-3,73 (2Н, m), 4,01-4,09 (2Н, m), 7,29 (1Н, dd, J=8,9 Гц), 7,43 (2Н, d, J=8 Гц).

[0174] (Пример 3) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0175] (Пример 3а) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

Трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилат (849 мг, 4,24 ммоль), триэтиламин (1,18 мл, 8,48 ммоль) и PyBOP (2,21 г, 4,24 ммоль) добавляли к раствору (3S,4R)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной при помощи способа, подобного таковому из примера 1j (942 мг, 2,83 ммоль), в N,N-диметилформамиде (20 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи. Этилацетат добавляли к реакционной жидкости, которую промывали 1N водным раствором гидроксида натрия и солевым раствором. Это высушивали над безводным сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: гептан/этилацетат) с получением титульного соединения (1,33 г, выход: 91,1%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,20-1,40 (2Н, m), 1,40 (9Н, s), 1,48 (9Н, s), 1,78-1,88 (1Н, m), 1,92-1,98 (1Н, br), 1,96 (1Н, d, J=16 Гц), 2,03-2,09 (1Н, m), 2,36 (1Н, d, J=10 Гц), 2,58-2,68 (2Н, m), 2,89-2,95 (2Н, m), 3,10 (1Н, d, J=16 Гц), 3,59 (1Н, d, J=10 Гц), 3,66 (2Н, s), 3,83-4,00 (3Н, m), 7,23-7,35 (5Н, m), 8,65 (1Н, d, J=7 Гц).

MS (ESI) m/z: 538,2 (M+Na)⁺.

[0176] (Пример 3b) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

20% гидроксид палладия (724 мг) добавляли к раствору трет-бутил-4-[(3S,4R)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 3а (1,33 г, 2,58 ммоль), в метаноле (30 мл), который перемешивали в атмосфере водорода на протяжении ночи. Реакционную жидкость фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением титульного соединения (1,04 г, выход: 94,7%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,20-1,52 (2Н, m), 1,41 (9Н, s), 1,43 (9Н, s), 1,80-2,10 (5Н, m), 2,00 (1Н, d, J=16 Гц), 2,55-2,61 (1Н, m), 2,80-3,06 (2Н, m), 2,92 (1Н, d, J=10 Гц), 3,12 (1Н, d, J=16 Гц), 3,35 (1Н, d, J=9 Гц), 3,70 (1Н, d, J=10 Гц), 3,80-4,00 (3Н, m), 8,30 (1Н, d, J=7 Гц). MS (ESI) m/z: 426,1 (M+H)⁺.

[0177] (Пример 3с) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

2-(Бромметил)-1-хлор-3-(трифторметил)бензол (443 мг, 1,62 ммоль) и карбонат калия (244 мг) добавляли к раствору трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 3b (345 мг, 0,811 ммоль), в N,N-диметилформамиде (дегидратированном) (10 мл), который перемешивали при 45°C в течение шести часов и при 40°C в течение двух дней. Этилацетат добавляли к реакционной жидкости, которую промывали 1 N водным раствором гидроксида натрия и солевым раствором. Это высушивали над безводным сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: гептан/этилацетат) с получением титульного соединения (320 мг, выход: 63,8%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,13-1,18 (2Н, m), 1,39 (9Н, s), 1,49 (9Н, s), 1,53-1,65 (1Н, m), 1,76-1,86 (1Н, m), 1,98 (1H, d, J=16 Гц), 2,02-2,10 (1Н, m), 2,51 (1Н, d, J=10 Гц), 2,60-2,80 (3Н, m), 2,88 (1H, t, J=10 Гц), 3,12 (1Н, d, J=16 Гц), 3,53 (1Н, d, J=10 Гц), 4,09-4,25 (5Н, m), 7,38 (1Н, t, J=8 Гц), 7,63 (2Н, d, J=8 Гц), 7,96 (1H, d, J=8 Гц).

MS (ESI) m/z: 640,2 (M+Na)⁺.

[0178] (Пример 3d) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метил-3-[(пиперидин-4-ил)карбамоил]пирролидин-3-ил]уксусная кислота

Трифторуксусную кислоту (8 мл) добавляли к раствору трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 3с (320 мг, 0,518 ммоль), в дихлорметане (дегидратированном) (8 мл) при охлаждении льдом с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью ODS колоночной хроматографии (растворитель для элюирования: вода/метанол) с получением смеси, содержащей титульное соединение (344 мг).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,83 (3Н, d, J=5 Гц), 1,43-1,63 (2Н, m), 1,76-1,89 (1Н, m), 1,92-2,00 (1Н, m), 2,03-2,19 (2Н, m), 2,55-2,68 (2Н, m), 2,91-3,10 (4Н, m), 3,25-3,36 (2Н, m), 3,45-3,59 (1Н, m), 3,75-4,18 (3Н, m), 7,41-7,76 (3Н, m).

MS (ESI) m/z: 462,3 (М+Н)⁺

[0179] (Пример 3е) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Циклогекс-1-ен-1-карбальдегид (423 мкл, 3,73 ммоль), уксусную кислоту (300 мкл) и триацетоксиборогидрид натрия (789 мг, 3,73 ммоль) добавляли к раствору смеси 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метил-3-[(пиперидин-4-ил)карбамоил]пирролидин-3-ил]уксусной кислоты, полученной при помощи способа из примера 3d (344 мг, 0,745 ммоль), в тетрагидрофуране (дегидратированном) (10 мл) с последующим перемешиванием на протяжении ночи. Воду и метанол добавляли к реакционной жидкости, которую концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью ODS колоночной хроматографии (растворитель для элюирования: вода/метанол). Очищенный продукт растворяли в дихлорметане, суспендировали путем добавления гексана и концентрировали с получением титульного соединения (180 мг, выход: 43,4%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,89 (3Н, d, J=7 Гц), 1,23-1,38 (2Н, m), 1,44-1,82 (6Н, m), 1,82-1,96 (1Н, m), 1,96-2,25 (5Н, m), 2,30-2,45 (2Н, m), 2,55-2,68 (2Н, m), 2,92-3,20 (5Н, m), 3,54 (1Н, d, J=10 Гц), 3,64-3,78 (1Н, m), 3,95 (1Н, d, J=10 Гц), 4,05 (1H, d, J=10 Гц), 5,76 (1H, s), 7,47-7,52 (1H, m), 7,72 (1H, d, J=7 Гц), 7,77 (1H, d, J=8 Гц).

MS (ESI) m/z: 578,3 (M+Na)⁺

[0180] (Пример 4. Другой способ для соединения из примера 3) 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0181] (Пример 4а) Трет-бутил-N-[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамат

Смесь трет-бутил-N-(пиперидин-4-ил)карбамата (5,3 г, 26,5 ммоль), 1-циклогексен-1-карбоксальдегида (3,5 г, 31,8 ммоль), триацетоксиборогидрида натрия (7,29 г, 34,4 ммоль), уксусной кислоты (0,5 мл) и тетрагидрофурана (дегидратированного) (80 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 85 часов и 30 минут. Воду и бикарбонат натрия добавляли к реакционной смеси, которую перемешивали и затем дважды экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали солевым раствором, и высушивали над безводным сульфатом натрия, и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (NH-силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (7,47 г, выход: 95,7%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,35-1,50 (2Н, m), 1,44 (9Н, s), 1,51-1,65 (4Н, m), 1,84-2,03 (8Н, m), 2,68-2,80 (4Н, m), 3,39-3,50 (1Н, m), 4,38-4,48 (1Н, m), 5,54 (1H, s).

[0182] (Пример 4b) 1-(Циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-амин

Смесь трет-бутил-N-[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамата, полученного в примере 4а (7,47 г, 25,4 ммоль), 5 N водного раствора соляной кислоты (25 мл, 125 ммоль) и метанола (100 мл) перемешивали при 70°C в течение 1,5 часа. Реакционную смесь охлаждали льдом, добавляли 5 N водный раствор гидроксида натрия (25 мл, 125 ммоль) и отгоняли растворитель. Воду добавляли к остатку, который дважды экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали солевым раствором, и высушивали над безводным сульфатом натрия, и отгоняли растворитель с получением титульного соединения (4,73 г, выход: 95,8%).

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,30-1,50 (4Н, m), 1,51-1,70 (4Н, m), 1,75-2,08 (8Н, m), 2,59-2,68 (1Н, m), 2,72-2,88 (4Н, m), 5,55 (1Н, s).

[0183] (Пример 4с) 1-Бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

Раствор (4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, полученного в примере 2g (18 г, 39,7 ммоль), в дихлорметане (85,7 мл) доводили до внутренней температуры 10-20°C и к нему добавляли бензилхлорформиат (11,9 мл, 79,4 ммоль). После возврата к комнатной температуре и перемешивания в течение 0,5 часа реакционную смесь немедленно концентрировали. Полученный в результате неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (12,89 г, выход: 65,3%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,80-0,88 (3Н, m), 1,38 (9Н, d, J=5 Гц), 2,04-2.15 (1Н, m), 2,22 (1Н, dd, J=3, 17 Гц), 3,00-3,12 (2Н, m), 3,62 (1Н, m), 3,79 (3Н, d, J=4 Гц), 4,30 (1H, t, J=12 Гц), 5,00-5,16 (4Н, m), 6,82-6,86 (2Н, m), 7,23-7,39 (8Н, m).

[0184] (Пример 4d) 1-Бензил-3-(4-мегоксифенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

1-Бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат, полученный в примере 4с (12,7 г, 26 ммоль), несколько раз разделяли на оптические изомеры с помощью HPLC (CHIRALPAK AD-H (2 см в диаметре × 25 см), растворитель для элюирования: гексан/этанол = 85/15, скорость потока: 8-10 мл/мин.) с получением хиральной формы, соответствующей пику с более коротким временем удержания (5,7 г, выход: 44,9%). Затем две порции полученной в результате хиральной формы (5,3 г) очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования; гептан/этилацетат) с получением 5,2 г титульного соединения.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,81-0,88 (3Н, m), 3,37-3,38 (9Н, m), 2,04-2.16 (1Н, m), 2,19-2,25 (1Н, m), 3,00-3,12 (2Н, m), 3,30-3,36 (1Н, m), 3,56-3,67 (1Н, m), 3,75-3,79 (3Н, m), 4,26-4,33 (1Н, m), 5,00-5,16 (4Н, m), 6,82-6,86 (2Н, m), 7,27-7,37 (7Н, m).

Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHIRALPAK AD-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), 40°C, элюент: гексан/этанол = 9/1 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм)

(Результат анализа) Очищенную хиральную форму анализировали при вышеописанных условиях анализа с обнаружением, что время удержания составляло 7,15 минуты и энантиомерный избыток составлял >99% ее.

[0185] (Пример 4е) 1-Бензил-3-(4-метоксйфенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

1-Бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат, полученный при помощи способа, подобного таковому из примера 4с (7,8 г, 16,5 ммоль), несколько раз разделяли на оптические изомеры с помощью HPLC (CHIRALPAK AD-H, растворитель для элюирования: гексан/этанол = 85/15) с получением хиральной формы с более коротким временем удержания (3,3 г, выход: 42,3%).

[0186] (Пример 4i) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Метанол (70 мл) и 10% Pd/C (600 мг) добавляли к 1-бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилату, полученному при помощи способа из примера 4е (3,3 г, 6,63 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение трех дней в атмосфере водорода. Воду (70 мл) добавляли к реакционной жидкости, которую перемешивали и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением титульного соединения (1,15 г, выход: 71,3%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, D₂O) был таким же, что и ЯМР для соединения, полученного в примере 2j.

[0187] (Пример 4g) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Метанол (3 мл) и 10% Pd/C (30 мг) добавляли к 1-бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилату, который получали в примере 4d и который использовали без очистки с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (104 мг, 0,21 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи в атмосфере водорода. Воду добавляли к реакционной жидкости, которую перемешивали и фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением титульного соединения (48,7 мг, выход: 95,3%).

[0188] (Пример 4h) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Метанол (100 мл) и 10% Pd/C (559 мг) добавляли к 1-бензил-3-(4-метоксифенил)метил-(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилату, полученному в примере 4d (5,2 г, 10,5 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение восьми часов и 15 минут в атмосфере водорода. Воду (100 мл) добавляли к реакционной жидкости, которую перемешивали в течение одного часа и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Комбинацию (3,2 г, 13,2 ммоль) остатка и (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примерах 2j, 4f и 4g, суспендировали путем добавления метанола (25 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, и при этом сбор с помощью фильтрации дал 3,02 г титульного соединения.

¹Н-ЯМР (400 МГц, D₂O) δ ppm; 0,98 (3Н, d, J=7 Гц), 1,43 (9Н, s), 2,14-2,24 (1Н, m), 2,31 (1Н, d, J=17 Гц), 2,94 (1Н, d, J=17 Гц), 3,06 (1Н, t, J=11 Гц), 3,20 (1Н, d, J=12 Гц), 3,51 (1Н, dd, J=8,12 Гц), 4,05 (1Н, d, J=12 Гц).

[0189] (Пример 4i) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

1-(Циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-амин, полученный в примере 4b (240 мг, 1,24 ммоль), N-диметилформамид (3 мл), триэтиламин (344 мкл, 2,47 ммоль) и PyBOP (856 мг, 1,64 ммоль) добавляли к (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоте, полученной в примере 4h (200 мг, 0,822 ммоль), с последующим перемешиванием с нагреванием на масляной бане при 45°C в течение 1,5 часа. Воду добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этилацетатом. Органический слой высушивали над сульфатом магния и концентрировали. К нему добавляли 2-(бромметил)-1-хлор-3-(трифторметил)бензол (247 мг, 0,903 ммоль), карбонат калия (170 мг, 1,23 ммоль) и N,N-диметилформамид (1 мл) с последующим нагреванием с перемешиванием на масляной бане при 45°C в течение трех часов. Воду добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой и солевым раствором и затем высушивали над сульфатом магния. Полученный в результате неочищенный продукт дважды очищали с помощью колоночной хроматографии (NH-силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан и силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (353 мг, выход 70,1%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,91 (3Н, d, J=7 Гц), 1,31-1,42 (2Н, m), 1,39 (9Н, s), 1,54-1,66 (5Н, m), 1,81-2,09 (9Н, m), 2,53 (1Н, d, J=10 Гц), 2,63-2,77 (5Н, m), 2,88 (1Н, t, J=10 Гц), 3,11 (1Н, d, J=16 Гц), 3,56 (1Н, d, J=10 Гц), 3,61-3,72 (1Н, m), 3,92 (1Н, d, J=13 Гц), 3,98 (1H, d, J=13 Гц), 5,54 (1H, s), 7,36 (1Н, t, J=8 Гц), 7,62 (1Н, d, J=4 Гц), 7,64 (1Н, d, J=4 Гц), 7,83 (1Н, d, J=8 Гц).

[0190] (Пример 4j) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Трифторуксусную кислоту (1,5 мл, 20,3 ммоль) добавляли к раствору трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 4i (353 мг, 0,577 ммоль), в дихлорметане (400 мкл), который перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью ODS колоночной хроматографии (растворитель для элюирования: метанол/вода) с получением титульного соединения (215 мг, выход 67%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,01 (3Н, d, J=7 Гц), 1,22-1,34 (2Н, m), 1,42-1,68 (7Н, m), 1,79-2,07 (6Н, m), 2,38-2,46 (1Н, m), 2,49 (1Н, d, J=10 Гц), 2,56 (1Н, d, J=14 Гц), 2,67-2,82 (6Н, m), 3,00 (1H, t, J=10 Гц), 3,16 (1Н, d, J=10 Гц), 3,63-3,76 (1Н, m), 3,88 (1H, d, J=14 Гц), 4,01 (1Н, d, J=14 Гц), 5,55 (1Н, s), 7,40 (1Н, t, J=8 Гц), 7,64 (1Н, d, J=4 Гц), 7,66 (1H, d, J=4 Гц), 8,56 (1Н, d, J=8 Гц)

Удельное вращение:

{[α]}_{D}^{29}

+ 37,1 (с 0,11, МеОН)

[0191] (Пример 5. Другой способ для соединения из примера 3) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0192] (Пример 5а) Трет-бутил-4-[(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

20% гидроксид палладия (300 мг) добавляли к раствору бензил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, полученного при помощи способа, подобного таковому из примера 1g (3 г, 7,08 ммоль), в метаноле (200 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи в атмосфере водорода. Реакционную жидкость фильтровали и промывали метанолом. Теплую воду при приблизительно 40°C добавляли к продукту, собранному с помощью фильтрации, для растворения твердого вещества с последующей фильтрацией. Фильтрат концентрировали вместе с первым фильтратом с получением незащищенной формы (1,7 г).

Метанол (44 мл), 2,6-дихлорбензальдегид (4,83 г, 27,6 ммоль) и уксусную кислоту (1,1 мл, 18,4 ммоль) добавляли к незащищенной форме, полученной при помощи способа, подобного вышеописанному способу (4,47 г, 18,4 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 15 минут и добавляли триацетоксиборогидрид натрия (6,16 г, 27,6 ммоль) с последующим нагреванием с перемешиванием при 40°C на протяжении ночи. К реакционной жидкости добавляли нейтральный буфер [приготовленный из дигидрогенфосфата калия (13,65 г), додекагидрата гидрогенфосфата динатрия (71,6 г) и воды (1,5 л)], добавляли этилацетат и гептан и смесь фильтровали. Фильтрат экстрагировали этилацетатом, органический слой высушивали над сульфатом натрия и концентрировали, и полученный в результате неочищенный продукт затем очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, растворитель для элюирования: метанол/этилацетат) и объединяли с продуктом, собранным с помощью фильтрации, с получением (3RS,4SR)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты (3,9 г). Трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилат (974 мг, 4,89 ммоль), N,N-диметилформамид (10 мл), триэтиламин (1,14 мл, 8,13 ммоль) и PyBOP (2,54 г, 4,89 ммоль) добавляли к этому соединению (1,64 г, 4,07 ммоль) с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи. Воду добавляли к реакционной жидкости, которую экстрагировали этилацетатом, и органический слой затем промывали водой и солевым раствором, и высушивали над сульфатом магния. Неочищенный продукт, полученный путем концентрирования, очищали с помощью колоночной хроматографии (NH-силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (2,10 г, выход: 88,1%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,91 (3Н, d, J=7 Гц), 1,15-1,34 (2Н, m), 1,40 (9Н, s), 1,49 (9Н, s), 1,58-1,70 (2Н, m), 1,76-1,84 (1Н, br), 1,98 (1Н, d, J=16 Гц), 2,03-2,13 (1Н, m), 2,54-2,65 (2Н, m), 2,66-2,88 (2Н, br), 2,92 (1Н, t, J=10 Гц), 3,11 (1Н, d, J=16 Гц), 3,59 (1Н, d, J=10 Гц), 3,81-3,90 (1Н, m), 3,95 (2Н, s), 3,90-4,07 (2Н, br), 7,18 (1H, dd, J=7, 8 Гц), 7,33 (1Н, d, J=8 Гц), 8,23 (1Н, d, J=8 Гц).

Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHIRALPAK IA (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), 40°C, элюент: гексан/этанол = 95/5 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм).

(Результат анализа) Полученное в результате титульное соединение анализировали при вышеописанных условиях анализа, и наблюдали пик при времени удержания, составляющем 3,46 минуты, и пик при времени удержания, составляющем 6,04 минуты.

[0193] (Пример 5b) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

Трет-бутил-4-[(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат, полученный в примере 5а (2,04 г, 3,49 ммоль), несколько раз разделяли на оптические изомеры с помощью HPLC (CHIRALPAK IA (3 см в диаметре × 25 см), растворитель для элюирования: гексан/этанол = 94/6, скорость потока: 22 мл/мин.) с получением титульного соединения (хиральной формы, соответствующей пику с более коротким временем удержания) (859 мг, 42,1%) и оптического изомера (хиральной формы, соответствующей пику с более длительным временем удержания) (817 мг, 40%), соответственно. Хиральная форма, соответствующая пику с более коротким временем удержания; ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,91 (3Н, d, J=7 Гц), 1,15-1,33 (2Н, m), 1,40 (9Н, s), 1,49 (9Н, s), 1,76-1,84 (1Н, m), 1,98 (1H, d, J=16 Гц), 2,01-2,11 (1Н, m), 2,57 (1Н, d, J=10 Гц), 2,57-2,64 (1Н, m), 2,69-2,82 (2Н, m), 2,92 (1Н, t, J=10 Гц), 3,11 (1Н, d, J=16 Гц), 3,59 (1Н, d, J=10 Гц), 3,80-4,09 (2Н, m), 3,95 (2Н, s), 7,18 (1Н, t, J=8 Гц), 7,33 (2Н, d, J=8 Гц), 8,23 (1Н, d, J=8 Гц).

Анализ с помощью HPLC

(Результат анализа) Полученную в результате хиральную форму, соответствующую пику с более коротким временем удержания, анализировали при вышеописанных условиях анализа с обнаружением того, что время удержания составляло 3,44 минуты и энантиомерный избыток составлял >99% ее.

[0194] (Пример 5с) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

20% гидроксид палладия (75,8 мг) добавляли к раствору трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксбэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 5b (758 мг, 1,29 ммоль), в метаноле (20 мл) с последующим перемешиванием при 40°C в течение трех часов в атмосфере водорода. Реакционную жидкость фильтровали и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта (501 мг). 2-(Бромметил)-1-хлор-3-(трифторметил)бензол (145 мг, 0,532 ммоль) и карбонат калия (53,2 мг) добавляли к раствору этого неочищенного продукта (174 мг) в N,N-диметилформамиде (дегидратированном) (6 мл) с последующим перемешиванием на протяжении ночи. Затем добавляли 2-(бромметил)-1-хлор-3-(трифторметил)бензол (145 мг, 0,532 ммоль) и карбонат калия (106 мг) с последующим перемешиванием в течение четырех часов. Этилацетат добавляли к реакционной жидкости, которую промывали 1 N водным раствором гидроксида натрия и солевым раствором. Это высушивали над безводным сульфатом магния и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: гептан/этилацетат) с получением титульного соединения (82 мг, выход: 32,4%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,12-1,18 (2Н, m), 1,39 (9Н, s), 1,49 (9Н, s), 1,53-1,65 (1Н, m), 1,76-1,86 (1Н, m), 1,98 (1Н, d, J=16 Гц), 2,02-2,10 (1Н, m), 2,51 (1H, d, J=10 Гц), 2,61-2,81 (3Н, m), 2,89 (1H, t, J=10 Гц), 3,12 (1Н, d, J=16 Гц), 3,53 (1Н, d, J=10 Гц), 3,80-4,10 (5Н, m), 7,38 (1Н, t, J=8 Гц), 7,63 (2Н, d, J=8 Гц), 7,96 (1Н, d, J=8 Гц).

MS (ESI) m/z: 618,1 (М+Н)⁺

[0195] (Пример 5d) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метил-3-[(пиперидин-4-ил)карбамоил]пирролидин-3-ил]уксусная кислота

Трифторуксусную кислоту (3 мл) добавляли к раствору трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 5с (82 мг, 0,133 ммоль), в дихлорметане (дегидратированном) (3 мл) при охлаждении льдом с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью ODS колоночной хроматографии (растворитель для элюирования: вода/метанол) с получением титульного соединения (72 мг, выход: количеств.).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,90 (3Н, d, J=5 Гц), 1,51-1,70 (2Н, m), 1,82-1,91 (1Н, m), 1,99-2,08 (1Н, m), 2,12-2,23 (2Н, m), 2,61 (1Н, d, J=9 Гц), 2,60-2,70 (2Н, m), 2,95-3,12 (4Н, m), 3,25-3,36 (2Н, m), 3,53 (1Н, d, J=9 Гц), 3,83-3,92 (1Н, m), 3,97 (1Н, d, J=13 Гц), 4,07 (1Н, d, J=13 Гц), 7,51 (1Н, t, J=8 Гц), 7,73 (1Н, J=8 Гц), 7,78 (1Н, J=8 Гц).

MS (ESI) m/z: 462,2 (M+H)⁺

[0196] (Пример 5e) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Циклогекс-1-ен-1-карбальдегид (25,9 мкл, 0,227 ммоль), уксусную кислоту (30 мкл) и триацетоксиборогидрид натрия (68,8 мг, 0,325 ммоль) добавляли к раствору 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метил-3-[(пиперидин-4-ил)карбамоил]пирролидин-3-ил]уксусной кислоты, полученной при помощи способа из примера 5d (15 мг, 0,0325 ммоль), в тетрагидрофуране (дегидратированном) (2 мл) с последующим перемешиванием на протяжении ночи. Воду и метанол добавляли к реакционной жидкости, которую концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью ODS колоночной хроматографии (растворитель для элюирования: вода/метанол) с получением титульного соединения (12,8 мг, выход: 70,8%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,89 (3Н, d, J=7 Гц), 1,50-1,90 (2Н, m), 1,83-1,95 (1Н, m), 2,00-2,22 (5Н, m), 2,30-2,45 (2Н, m), 2,57-2,68 (2Н, m), 2,92-3,14 (5Н, m), 3,54 (1Н, d, J=10 Гц), 3,64-3,78 (1Н, m), 3,95 (1Н, d, J=13 Гц), 4,05 (1Н, d, J=13 Гц), 5,76 (1Н, s), 7,49 (1Н, t, J=8 Гц), 7,72 (1Н, d, J=8 Гц), 7,77 (1Н, d, J=8 Гц).

MS (ESI) m/z: 556,3 (M+H)⁺

[0197] (Пример 6) 2-[(3S,4R)-1-[(2-Хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0198] (Пример 6а) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Титульное соединение (154 мг, выход 27,2%) получали из (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной при помощи способа, подобного таковому из примера 1i (360 мг, 1,48 ммоль), и 2-хлор-6-метилбензальдегида (416 мг, 2,69 ммоль), полученного при помощи способа, подобного способу, описанному в примере

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,01 (3Н, d, J=7 Гц), 1,41 (9Н, s), 2,10 (1Н, d, J=17 Гц), 2,15-2,23 (1Н, m), 2,42 (3Н, s), 2,63-2,69 (2Н, m), 2,97 (1Н, t, J=10 Гц), 3,01 (1Н, d, J=17 Гц), 3,68 (1Н, d, J=9 Гц), 4,00 (2Н, s), 7,09-7,26 (3Н, m).

[0199] (Пример 6b) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Титульное соединение (212 мг, выход 94,2%) получали из (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 6а (154 мг, 0,403 ммоль), и 1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-амина, полученного в примере 4b (110 мг, 0,564 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1k.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,21-1,39 (3Н, m), 1,40 (9Н, s), 1,52-1,69 (5Н, m), 1,81-2,12 (8Н, m), 1,99 (1Н, d, J=16 Гц), 2,44 (3Н, s), 2,52 (1Н, d, J=10 Гц), 2,61 (1Н, dd, J=6, 9 Гц), 2,68 (2Н, br d, J=9 Гц), 2,75 (2Н, s), 2,86 (1Н, t, J=10 Гц), 3,10 (1H, d, J=16 Гц), 3,58 (1Н, d, J=10 Гц), 3,60-3,70 (1Н, m), 3,79 (1Н, d, J=13 Гц), 3,84 (1Н, d, J=13 Гц), 5,54 (1Н, s), 7,08-7,14 (2Н, m), 7,23-7,26 (1Н, m), 8,00 (1H, d, J=8 Гц).

[0200] (Пример 6с) 2-[(3S,4R)-1-[(2-Хлор-6-мегилфенил)метил]-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (140 мг, выход 73,4%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 6b (212 мг, 0,38 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1m.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,93 (3Н, d, J=7 Гц), 1,57-1,80 (6Н, m), 1,90-2,39 (8Н, m), 2,49 (3Н, s), 2,61-3,38 (8Н, m), 3,59-4,20 (4Н, m), 5,95 (1Н, s), 7,18-7,39 (3Н, m).

[0201] (Пример 7) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0202] (Пример 7а) Циклопент-1-ен-1-карбальдегид

Смесь перйодата натрия (28,6 г, 134 ммоль) и воды (250 мл) добавляли к смеси 1,2-циклогександиола (12 г, 103 ммоль) и диэтилового эфира (150 мл), которую перемешивали при комнатной температуре в течение 35 минут. 20% водный раствор гидроксида калия (40 мл, 206 ммоль) добавляли к реакционной смеси, которую перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов. Реакционную смесь дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Органический слой высушивали над безводным сульфатом магния и отгоняли растворитель с получением титульного соединения (6,1 г, выход 61,6%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,96-2,04 (2Н, m), 2,50-2,57 (2Н, m), 2,58-2,66 (2Н, m), 6,87-6,90 (1Н, m), 9,80 (1Н, s).

[0203] (Пример 7b) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]мегил}-3-{[1-(циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (288 мг, выход: 73,5%) получали из 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-4-метил-3-[(пиперидин-4-ил)карбамоил]пирролидин-3-ил]уксусной кислоты, полученного в примере 3d (334 мг, 0,723 ммоль), циклопент-1-ен-1-карбальдегида, полученного в примере 7а (209 мг, 2,17 ммоль), уксусной кислоты (300 мкл) и триацетоксиборогидрида натрия (460 мг, 2,17 ммоль) при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 3е.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,89 (3Н, d, J=7 Гц), 1,24-1,35 (2Н, m), 1,50-1,66 (2Н, m), 1,70-1,78 (1Н, m), 1,85-1,99 (3Н, m), 2,11-2,22 (2Н, m), 2,29-2,42 (4Н, m), 2,61 (1Н, d, J=10 Гц), 2,60-2,68 (1H, m), 2,91-3,02 (2Н, m), 3,07 (1H, d, J=16 Гц), 3,54 (1Н, d, J=10 Гц), 3,64-3,78 (1Н, m), 3,95 (1H, d, J=14 Гц), 4,05 (1Н, d, J=14 Гц), 5,74 (1H, s), 7,50 (1Н, t, J=8 Гц), 7,71 (1Н, d, J=8 Гц), 7,78 (1H, d, J=8 Гц).

MS (ESI) m/z: 564,3 (M+Na)⁺

[0204] (Пример 8) 2-[(3S,4R)-1-[(2-Хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[(1-циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0205] (Пример 8а) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[(2-трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-амидо}пиперидин-1-карбоксилат

Титульное соединение (237 мг, выход 91,7%) получали из (3S,4R)-3-[(2-трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 6а (175 мг, 0,458 ммоль), и трет-бутил-4-аминопиперидин-1-карбоксилата (137 мг, 0,684 ммоль) при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1k.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=8 Гц), 1,15-1,30 (2Н, m), 1,40 (9Н, s), 1,49 (9Н, s), 1,58-1,68 (2Н, m), 1,78-1,88 (1Н, br), 1,99 (1Н, d, J=8 Гц), 2,05-2,11 (1Н, m), 2,42 (3Н, s), 2,50 (1Н, d, J=10 Гц), 2,60-2,66 (1Н, m), 2,70-2,81 (2Н, br), 2,85 (1Н, t, J=10 Гц), 3,10 (1H, d, J=16 Гц), 3,55 (1Н, d, J=10 Гц), 3,74-4,10 (4Н, m), 7,07-7,15 (2Н, m), 7,22-7,27 (1Н, m), 8,14 (1Н, d, J=8 Гц).

[0206] (Пример 8b) 2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[(1-циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Смесь трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[(2-трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-амидо}пиперидин-1-карбоксилата, полученного в примере 8а (237 мг, 0,42 ммоль), трифторуксусной кислоты (2,3 мл, 31 ммоль) и дихлорметана (дегидратированного) (2,3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение трех часов и 30 минут. Реакционную смесь концентрировали и циклопент-1-ен-1-карбальдегид, полученный в примере 7а (121 мг, 1,26 ммоль), триэтиламин (0,176 мл, 1,26 ммоль) и тетрагидрофуран (5 мл) добавляли к полученному в результате остатку с последующим перемешиванием в течение 35 минут. Триацетоксиборогидрид натрия (267 мг, 1,26 ммоль) добавляли к реакционной смеси, которую перемешивали при комнатной температуре в течение 13 часов. Реакционную смесь концентрировали и полученный в результате остаток дважды очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ODS силикагель, растворитель для элюирования: вода/метанол) с получением титульного соединения (88 мг, выход 42,9%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,50-1,68 (2Н, br), 1,74-1,83 (1Н, br), 1,88-2,00 (3Н, m), 2,19-2,30 (2Н, m), 2,31-2,43 (6Н, m), 2,48 (3Н, s), 2,62-2,72 (2Н, m), 2,90-3,09 (4Н, m), 3,25-3,40 (2Н, m), 3,61 (1Н, d, J=10 Гц), 3,66-3,78 (1Н, m), 3,89-4,06 (2Н, m), 5,73 (1Н, s), 7,14-7,20 (2Н, m), 7,25-7,30 (1Н, m).

[0207] (Пример 9) 2-[(3S,4R)-3-{[(3S)-1-(Циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0208] (Пример 9а) Трет-бутил-N-[(3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамат

1-Циклогексен-1-карбоксальдегид (1,48 мл, 13 ммоль) добавляли к смеси (3S)-(-)-3-(трет-бутоксикарбониламино)пирролидина (2,0 г, 10,8 ммоль), уксусной кислоты (1,24 мл, 21,6 ммоль) и тетрагидрофурана (дегидратированного) (27 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 15 минут, и затем добавляли триацетоксиборогидрид натрия (4,58 г, 21,6 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 часов и 45 минут. Насыщенный водный раствор бикарбоната натрия добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этилацетатом. Органический слой высушивали над сульфатом натрия и отгоняли растворитель. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на NH-силикагеле (растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением титульного соединения (1,3 г, выход: 42,9%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,44 (9Н, s), 1,50-1,65 (5Н, m), 1,95-2,03 (4Н, br), 2,17-2,29 (2Н, m), 2,40-2,55 (2Н, m), 2,65-2,74 (1H, m), 2,84-2,94 (2Н, m), 4,10-4,19 (1Н, br), 4,77-4,87 (1Н, br), 5,56 (1H, brs).

[0209] (Пример 9b) (3S)-1-(Циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-амин

Смесь трет-бутил-N-[(3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамата, полученного в примере 9а (1,3 г, 4,64 ммоль), и этанола (9,2 мл) перемешивали при охлаждении льдом, добавляли 5 N водный раствор соляной кислоты (9,28 мл, 46,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов и 30 минут. Реакционную смесь перемешивали при охлаждении льдом, добавляли 5 N водный раствор гидроксида натрия (9,28 мл, 46,4 ммоль) и отгоняли растворитель. Этанол добавляли к остатку, осажденное твердое вещество отфильтровывали и растворитель отгоняли из фильтрата. Этанол далее добавляли к остатку, осажденное твердое вещество отфильтровывали и растворитель отгоняли из фильтрата с получением титульного соединения (0,8 г, выход 95,6%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 1,50-1,68 (6Н, m), 1,90-2,05 (3Н, m), 2,14-2,23 (1Н, m), 2,28-2,32 (1Н, m), 2,43-2,49 (1Н, m), 2,63-2,73 (2Н, m), 2,91-2,98 (2Н, m), 3,44-3,50 (1Н, m), 5,62 (1H, brs).

[0210] (Пример 9с) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-3-{[(3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Титульное соединение (236 мг, выход 58%) получали из (3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-амина, полученного в примере 9b (169 мг, 0,94 ммоль), и (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 2k (290 мг, 0,72 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1k.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,91 (3Н, d, J=7 Гц), 1,41 (9Н, s), 1,50-1,63 (6Н, m), 1,87-2,14 (6Н, m), 2,20-2,25 (1H, m), 2,33-2,40 (1Н, m), 2,51-2,67 (4Н, m), 2,79-2,94 (3Н, m), 3,11 (1Н, d, J=16 Гц), 3,62 (1H, d, J=10 Гц), 3,92-4,02 (2Н, m), 4,28-4,38 (1Н, m), 5,74 (1Н, br s), 7,17 (1Н, dd, J=7, 8 Гц), 7,32 (2H, d, J=8 rH), 8,30 (1H, d, J=7 Гц).

[0211] (Пример 9d) 2-[(3S,4R)-3-{[(3S)-1-(Циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (173 мг, выход 81%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-3-{[(3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 9с (236 мг, 0,42 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1m.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,89 (3Н, d, J=7 Гц), 1,55-1,67 (4Н, m), 1,73-1,84 (1Н, m), 1,92-2,32 (7Н, m), 2,58-2,68 (2Н, m), 2,74-2,85 (2Н, m), 2,96-3,15 (4Н, m), 3,20-3,34 (2Н, m), 3,61 (1Н, d, J=10 Гц), 4,00-4,08 (2Н, m), 4,18-4,27 (1Н, m), 5,74 (1Н, br s), 7,29 (1Н, dd, J=7, 9 Гц), 7,40-7,44 (2H, m).

[0212] (Пример 10) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0213] (Пример 10а) 1-Гексилпиперидин-4-амин

Титульное соединение получали при помощи способа, подобного способу, описанному в патентном документе US 2005/0222175 А1 и примерах 4а и 4b.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm: 0,80 (3Н, t, J=7 Гц), 1,05-1,45 (12Н, m), 1,73 (2Н, d, J=6 Гц), 1,88 (2Н, t, J=6 Гц), 2,21 (2Н, dd, J=6,8 Гц), 2,52-2,62 (1Н, m), 2,79 (2H, d, J=12 Гц)

[0214] (Пример 10b) Метил-3-хлор-2-метилбензоат

Иодметан (1,96 мл, 31,5 ммоль) добавляли к смеси 3-хлор-2-метилбензойной кислоты (3,58 г, 21 ммоль), карбоната калия (5,8 г, 42 ммоль) и N,N-диметилформамида (35,9 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 18 часов и 30 минут. Воду и этилацетат добавляли к реакционной жидкости и экстрагировали органический слой. Органический слой последовательно промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония и солевым раствором и затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: гептан/этилацетат) с получением титульного соединения (3,67 г, выход: 97%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 2,60 (3Н, s), 3,91 (3Н, s), 7,13-7,21 (1Н, m), 7,50 (1Н, dd, J=1,8 Гц), 7,70 (1Н, dd, J=1,8 Гц).

[0215] (Пример 10с) Метил-2-(бромметил)-3-хлорбензоат

Суспензию метил-3-хлор-2-метилбензоата, полученного в примере 10b (1 г, 5,42 ммоль), тетрахлорида углерода (13,3 мл), N-бромсукцинимида (1,06 г, 5,96 ммоль) и пероксида бензоила (3,5 мг, 0,0108 ммоль) нагревали на масляной бане при 90°C в условиях потока азота. Через три часа и 45 минут завершали нагревание и смесь разводили водой, этилацетатом и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, высушивали над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением титульного соединения (1,43 г, выход: 100%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 4,00 (3Н, s), 5,12 (2Н, s), 7,32 (1Н, t, J=8 Гц), 7,58 (1H, dd, J=2,8 Гц), 7,86 (1H, dd, J=2,8 Гц).

[0216] (Пример 10d) [2-(Бромметил)-3-хлорфенил]метанол

Дихлорметан (10 мл) добавляли к метил-2-(бромметил)-3-хлорбензоату, полученному в примере 10 с (500 мг, 1,9 ммоль), 1,04 М раствор гидрида диизобутилалюминия/н-гексана (4,57 мл, 4,75 ммоль) добавляли при -78°C с последующим перемешиванием в течение одного часа в атмосфере азота. Добавляли насыщенный водный раствор соли Рошеля и трет-бутилметиловый эфир с последующей экстракцией трет-бутилметиловым эфиром. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над сульфатом магния и затем обеспечивали прохождение через силикагелевую подушку. Элюат концентрировали с получением титульного соединения (440 мг, выход 98,3%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,82 (1Н, t, J=6 Гц), 4,78 (2Н, s), 4,85 (2Н, d, J=5 Гц), 7,25-7,28 (1Н, m), 7,31-7,40 (2Н, m).

[0217] (Пример 10е) 2-(Бромметил)-3-хлорбензальдегид

Дихлорметан (15 мл) и диоксид марганца (1,69 г, 19,4 ммоль) добавляли к [2-(бромметил)-3-хлорфенил]метанолу, полученному в примере 10d (440 мг, 1,87 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи. Далее добавляли диоксид марганца (1,2 г, 13,8 ммоль) с последующим нагреванием с перемешиванием при 40°C в течение 2,5 часа. Реакционную смесь фильтровали через целит и промывали этилацетатом. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный в результате неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, растворитель для элюирования: гептан/этилацетат = 99/1→90/10) с получением титульного соединения (289 мг, выход 66,2%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 5,13 (2Н, s), 7,48 (1Н, t, J=8 Гц), 7,66 (1Н, dd, J=1,8 Гц), 7,77 (1Н, dd, J=1,8 Гц), 10,23 (1H, s).

[0218] (Пример 10f) 2-(Бромметил)-1-хлор-3-(дифторметил)бензол

Дихлорметан (10 мл) добавляли к 2-(бромметил)-3-хлорбензальдегиду, полученному в примере 10е (289 мг, 1,24 ммоль), трифторид [бис(2-метоксиэтил)амино]серы (457 мкл, 2,48 ммоль) добавляли при 0°C с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 часа в атмосфере азота. Насыщенный водный раствор бикарбоната натрия добавляли при 0°C к реакционной смеси, которую экстрагировали диэтиловым эфиром. Органический слой промывали солевым раствором, высушивали над сульфатом магния и затем концентрировали. Полученный в результате неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, растворитель для элюирования: гептан/этилацетат = 99/1→95/5) с получением титульного соединения (238,3 мг, выход 75,2%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 4,74 (2Н, s), 6,93 (1Н, t, J=55 Гц), 7,37 (1Н, t, J=8 Гц), 7,53 (2Н, t, J=8 Гц).

[0219] (Пример 10g) (3RS,4SR)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

20% гидроксид палладия (500 мг) добавляли к раствору бензил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, полученного при помощи способа, подобного способу из примера 1g (8,35 г, 19,7 ммоль), в метаноле (200 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи в атмосфере водорода. Реакционную смесь фильтровали и тщательно промывали палладий на фильтровальной бумаге горячей водой при 50°С. Фильтрат концентрировали и тщательно азеотропно перегоняли с метанолом и толуолом с получением белого, твердого вещества (3,92 г). К нему добавляли метанол (20 мл), 2,6-дихлорбензальдегид (5,64 г, 32,2 ммоль), уксусную кислоту (966 мкл, 16,1 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (6,82 г, 32,2 ммоль) с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи. Реакционную смесь далее нагревали с перемешиванием на горячей водяной бане при 50°С в течение трех часов. Нейтральный буфер [приготовленный из дигидрогенфосфата калия (13,65 г), додекагидрата гидрогенфосфата динатрия (71,6 г) и воды (1,5 л)] и этилацетат добавляли к реакционной смеси и отфильтровывали твердое вещество. Твердое вещество на фильтровальной бумаге промывали этилацетатом с получением титульного соединения в виде белого твердого вещества. Фильтрат экстрагировали этилацетатом и органический слой затем высушивали над сульфатом натрия, концентрировали, очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, растворитель для элюирования: метанол/этилацетат) и объединяли с твердым веществом на фильтровальной бумаге с получением титульного соединения (3,77 г, выход 58,2%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,01 (3Н, d, J=7 Гц), 1,42 (9Н, s), 2,09 (1Н, d, J=16 Гц), 2,14-2,24 (1Н, m), 2,62-2,69 (2Н, m), 2,99 (1Н, t, J=10 Гц), 3,02 (1Н, d, J=10 Гц), 3,71 (1Н, d, J=10 Гц), 4,08 (1Н, d, J=12 Гц), 4,12 (1Н, d, J=12 Гц), 7,21 (1Н, J=8 Гц), 7,23 (1Н, J=8 Гц), 7,37 (1Н, J=8 Гц).

[0220] (Пример 10h) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

1-Гексилпиперидин-4-амин, полученный в примере 10а (894 мг, 4,85 ммоль), триэтиламин (1,04 мл, 7,46 ммоль), N,N-диметилформамид (10 мл) и PyBOP (2,52 г, 4,85 ммоль) добавляли к (3RS,4SR)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоте, полученной в примере 10g (1,5 г, 3,73 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи. Воду добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой и солевым раствором и высушивали над сульфатом натрия. Это концентрировали и неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (NH-силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат/гептан) с получением белого твердого вещества (1,85 г). Это разделяли на оптические изомеры с помощью HPLC (CHIRALPAK IA (3 см в диаметре × 25 см), растворитель для элюирования: этанол/гексан = 6/94, скорость потока: 20 мл/мин.) с получением хиральной формы, соответствующей пику с более коротким временем удержания (875 мг).

Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHIRALPAK IA (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 15 см), 40°С, элюент: гексан/этанол 9/1 (об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (210 нм). (Результат анализа) Полученную в результате хиральную форму анализировали при вышеописанных условиях анализа с обнаружением того, что время удержания составляло 4,85 минуты и энантиомерный избыток составлял >99% ее.

[0221] (Пример 10i) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Метанол (10 мл) и 20% гидроксид палладия (50 мг) добавляли к 250 мг трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 10h, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение двух часов в атмосфере водорода. Реакционную смесь фильтровали и фильтрат концентрировали с получением титульного соединения (180 мг).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,85-0,90 (3Н, m), 1,04 (3Н, d, J=6 Гц), 1,25-1,35 (5Н, m), 1,42 (9Н, s), 1,78-2,10 (6Н, m), 2,26-2,50 (4Н, m), 2,88-3,05 (3Н, m), 3,23 (1Н, d, J=13 Гц), 3,29-3,54 (5Н, m), 3,55-3,67 (1Н, m), 4,17 (1Н, d, J=13 Гц), 4,27-4,40 (1Н, br), 7,82-7,92 (1Н, br).

[0222] (Пример 10j) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

N,N-Диметилформамид (400 мкл), 2-(бромметил)-1-хлор-3-(дифторметил)бензол, полученный в примере 10f (24,9 мг, 0,0976 ммоль), и карбонат калия (20,2 мг, 0,146 ммоль) добавляли к трет-бутил-2-[(3S,4R)-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил] ацетату, полученному в примере 10i (20 мг, 0,0488 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре на протяжении ночи. Этилацетат и воду добавляли к реакционной смеси, которую экстрагировали этил ацетатом. Органический слой промывали солевым раствором и высушивали над сульфатом магния. Это концентрировали и полученный в результате неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (NH-силикагель, растворитель для элюирования: гептан/этилацетат = 98/2→80/20) с получением титульного соединения (14,4 мг, выход 50,2%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,87-0,94 (6Н, m), 1,22-1,35 (6Н, m), 1,40 (9Н, s), 1,40-1,49 (2Н, m), 1,68-1,76 (1Н, m), 1,77-2,12 (7Н, m), 2,24-2,28 (2Н, m), 2,54 (1Н, d, J=10 Гц), 2,59-2,63 (1Н, m), 2,74-2,88 (3Н, m), 3,13 (1Н, d, J=16 Гц), 3,61 (1Н, d, J=10 Гц), 3,61-3,72 (1Н, m), 3,91 (1Н, d, J=13 Гц), 3,95 (1Н, d, J=13 Гц), 6,96 (1Н, t, J=55 Гц), 7,35 (1Н, t, J=8 Гц), 7,54 (2Н, d, J=8 Гц), 7,65 (1H, d, J=8 Гц).

[0223] (Пример 10k) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (13,9 мг, выход 61,5%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного при помощи способа, подобного таковому из примера 10j (25 мг, 0,0428 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1m.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,82-0,90 (3Н, m), 0,93 (3Н, d, J=7 Гц), 1,23-1,34 (6Н, m), 1,52-1,64 (2Н, m), 1,76-1,98 (4Н, m), 2,22-2,44 (4Н, m), 2,50-2,78 (5Н, m), 2,91 (1Н, t, J=8 Гц), 3,22-3,35 (1H, br), 3,36-3,43 (1Н, m), 3,70-3,82 (1Н, m), 3,92 (1Н, d, J=14 Гц), 3,96 (1Н, d, J=14 Гц), 7,21 (1Н, t, J=55 Гц), 7,30 (1Н, t, J=8 Гц), 7,48 (1Н, d, J=8 Гц), 7,55 (1Н, d, J=8 Гц), 8,92-9,08 (1Н, br).

[0224] (Пример 11) 2-[(3S,4R)-3-{[(1-Циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0225] (Пример 11а) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Метанол (3 мл), 2,6-дихлорбензальдегид (431 мг, 2,46 ммоль), уксусную кислоту (73,8 мкл, 1,23 ммоль) и триацетоксиборогидрид натрия (521 мг, 2,46 ммоль) добавляли к (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоте, полученной при помощи способа, подобного таковому из примера 1i (300 мг, 1,23 ммоль), с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение двух дней. Воду добавляли к системе, которую экстрагировали этилацетатом, и органический слой высушивали над сульфатом натрия и концентрировали. Полученный в результате неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, растворитель для элюирования: метанол/этилацетат) с получением титульного соединения (180 мг). В то же время, после разделения водный слой концентрировали и очищали с помощью ODS колоночной хроматографии (растворитель для элюирования, метанол/вода) с получением (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты (120 мг). Титульное соединение (42,7 мг) получали путем осуществления подобной реакции, причем снова с использованием полученного сырьевого материала, и объединяли с первым титульным соединением (180 мг).

Подтверждали, что ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) был таким же, что и ЯМР для соединения, полученного в примере 10g.

[0226] (Пример 11b) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-{3-[(1-циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Титульное соединение (274 мг, выход 85,8%) получали из (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 11а (222 мг, 0,55 ммоль), и 1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-амина, полученного в примере 4b (150 мг, 0,772 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1k.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,91 (3Н, d, J=8 Гц), 1,31-1,50 (2Н, m), 1,42 (9Н, s), 1,52-1,72 (5Н, m), 1,81-2,12 (9Н, m), 2,55-2,70 (4Н, m), 2,75 (2Н, s), 2,92 (1Н, t, J=10 Гц), 3,12 (1Н, d, J=16 Гц), 3,60-3,72 (2Н, m), 3,96 (2Н, s), 5,54 (1Н, s), 7,18 (1Н, t, J=8 Гц), 7,33 (2Н, d, J=8 Гц), 8,09 (1Н, d, J=8 Гц).

[0227] (Пример 11с) 2-[(3S,4R)-3-{[(1-Циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (169 мг, выход 68,2%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-{3-[(1-циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 11b (274 мг, 0,474 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1m.

¹H-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,89 (3Н, d, J=7 Гц), 1,56-1,75 (6Н, m), 1,78-1,94 (2Н, m), 2,00-2,26 (6Н, m), 2,36-2,48 (2Н, m), 2,60-2,64 (1H, m), 2,68 (1Н, d, J=10 Гц), 2,95-3,19 (6Н, m), 3,62 (1Н, d, J=10 Гц), 3,68-3,80 (1H, br), 3,99-4,07 (2Н, m), 5,76 (1Н, s), 7,29 (1H, t, J=8 Гц), 7,43 (2Н, d, J=8 Гц).

[0228] (Пример 12) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0229] (Пример 12а) Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат

Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат, полученный в примере 3b (375 мг, 0,881 ммоль), растворяли в N,N-диметилформамиде (7 мл). К нему добавляли карбонат калия (304 мг, 2,2 ммоль) и 2-(бромметил)-1-хлор-3-(дифторметил)бензол, полученный при помощи способа, подобного таковому из примера 10f (450 мг, 1,76 ммоль), и смесь нагревали на масляной бане при 45°C в течение двух часов. Реакционную смесь разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором хлорида аммония. Отделенный органический слой промывали три раза насыщенным водным раствором хлорида аммония, высушивали над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (силикагель, растворитель для элюирования: гептан/этилацетат) с получением титульного соединения (332 мг, выход: 62,8%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,13-1,74 (3Н, m), 1,39 (9Н, s), 1,49 (9Н, s), 1,75-1,87 (1Н, m), 2,00 (1Н, d, J=16 Гц), 2,04-2,15 (1H, m), 2,52 (1H, d, J=10 Гц), 2,56-2,83 (3Н, m), 2,86 (1Н, t, J=10 Гц), 3,12 (1Н, d, J=10 Гц), 3,57 (1H, d, J=10 Гц), 3,80-4,16 (3Н, m), 3,90 (1Н, d, J=13 Гц), 3,96 (1Н, d, J=13 Гц), 6,93 (1Н, t, J=55 Гц), 7,37 (1H, t, J=8 Гц), 7,55 (2Н, d, J=8 Гц), 7,77 (1H, d, J=8 Гц).

[0230] (Пример 12b) 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Трет-бутил-4-[(3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-4-метилпирролидин-3-амидо]пиперидин-1-карбоксилат, полученный в примере 12а (332 мг, 0,553 ммоль), растворяли в дихлорметане (3,0 мл), к нему добавляли трифторуксусную кислоту (3,0 мл), и смесь затем выдерживали при комнатной температуре. Через два часа и 30 минут реакционную жидкость концентрировали и дважды азеотропно перегоняли с дихлорметаном с получением промежуточного продукта. 186 мг полученного в результате промежуточного продукта (372 мг) растворяли в тетрагидрофуране (5 мл), добавляли триэтиламин (116 мкл, 0,831 ммоль) и циклогекс-1-ен-1-карбальдегид (91,5 мг, 0,831 ммоль) и смесь выдерживали при комнатной температуре. Через 30 минут к ней добавляли триацетоксиборогидрид натрия (176 мг, 0,831 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре. Через 10 часов и 50 минут смесь концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (ODS, растворитель для элюирования: вода/метанол) с получением титульного соединения (80 мг) в виде белого твердого вещества.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,90 (3Н, d, J=7 Гц), 1,57-1,75 (6Н, m), 1,83-1,96 (2Н, m), 2,02-2,13 (4Н, m), 2,15-2,27 (1Н, m), 2,27 (1Н, d, J=16 Гц), 2,46-2,65 (3Н, m), 2,61 (1Н, d, J=10 Гц), 2,95 (1Н, t, J=9 Гц), 2,97 (1Н, d, J=16 Гц), 3,03-3,16 (2Н, m), 3,20-3,27 (2Н, m), 3,50 (1Н, d, J=10 Гц), 3,74-3,83 (1Н, m), 3,98 (1H, d, J=13 Гц), 4,02 (1H, d, J=13 Гц), 5,78-5,86 (1H, br), 7,26 (1H, t, J=55 Гц), 7,42 (1H, t, J=8 Гц), 7,60 (2H, d, J=8 Гц).

[0231] (Пример 13) 2-[(3S,4R)-1-{[2-Хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (76 мг) получали способом, подобным способу, описанному в примере 12b, с использованием промежуточного продукта, полученного в примере 12b (186 мг), и циклопент-1-ен-1-карбальдегида, полученного в примере 7а (79,9 мг, 0,831 ммоль).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,90 (3Н, d, J=7 Гц), 1,58-1,75 (2Н, m), 1,80-2,00 (4Н, m), 2,15-2,27 (1Н, m), 2,47 (1Н, d, J=16 Гц), 2,32-2,42 (4Н, m), 2,46-2,65 (3Н, m), 2,62 (1Н, d, J=10 Гц), 2,95 (1Н, t, J=9 Гц), 2,99 (1Н, d, J=16 Гц), 3,03-3,16 (2Н, m), 3,36-3,43 (2Н, m), 3,51 (1Н, d, J=10 Гц), 3,73-3,82 (1H, m), 3,98 (1Н, d, J=13 Гц), 4,03 (1Н, d, J=13 Гц), 5,78-5,83 (1Н, br), 7,25 (1Н, t, J=55 Гц), 7,43 (1Н, t, J=8 Гц), 7,61 (2Н, d, J=8 Гц).

[0232] (Пример 14) 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

[0233] (Пример 14а) 1-(циклогексилметил)пиперидин-4-амин

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm: 0,77-0,87 (2Н, m), 1,11-1,49 (8Н, m), 1,61-1,80 (5Н, m), 1,97 (2Н, t, J=12 Гц), 2,14 (2Н, d, J=7 Гц), 2,50-2,64 (1H, m), 2,96 (2Н, d, J=12 Гц).

[0234] (Пример 14b) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-бензил-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Титульное соединение (250 мг, выход: 81,4%) получали из (3S,4R)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в примере 1j (200 мг, 0,6 ммоль), и 1-(циклогексилметил)пиперидин-4-амина, полученного в примере 14а (141 мг, 0,72 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1k.

¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,80-0,98 (2Н, m), 0,92 (3Н, d, J=7 Гц), 1,07-2,15 (17Н, m), 1,58 (9Н, s), 1,95 (1H, d, J=16 Гц), 2,10 (1Н, d, J=7 Гц), 2,36 (1H, d, J=10 Гц), 2,55-2,83 (4Н, m), 3,08 (1Н, d, J=16 Гц), 3,59 (1Н, d, J=10 Гц), 3,63-3,77 (1Н, m), 3,64 (1H, d, J=13 Гц), 3,69 (1Н, d, J=13 Гц), 7,21-7,36 (5Н, m), 8,56 (1Н, d, J=8 Гц).

[0235] (Пример 14с) Трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетат

Титульное соединение (198 мг, выход: 67,9%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-бензил-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 14b (250 мг, 0,489 ммоль), и 2-(бромметил)-1-хлор-3-(дифторметил)бензола, полученного при помощи способа, подобного таковому из примера 10f (250 мг, 0,978 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 11.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,78-0,97 (2Н, m), 0,91 (3Н, d, J=7 Гц), 1,08-2,13 (18Н, m), 1,40 (9Н, s), 2,00 (1Н, d, J=17 Гц), 2,05 (1Н, d, J=7 Гц), 2,54 (1Н, d, J=10 Гц), 2,61 (1Н, dd, J=6, 10 Гц), 2,66-2,77 (2Н, m), 2,85 (1Н, t, J=10 Гц), 3,60 (1H, d, J=17 Гц), 3,58-3,72 (1H, m), 3,92 (1H, d, J=13 Гц), 3,96 (1Н, d, J=13 Гц), 6,97 (1Н, t, J=55 Гц), 7,36 (1Н, t, J=8 Гц), 7,51-7,58 (2Н, m), 7,62 (1Н, d, J=8 Гц).

[0236] (Пример 14d) 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота

Титульное соединение (140 мг, выход: 79,8%) получали из трет-бутил-2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогексилметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]ацетата, полученного в примере 14 с (194 мг, 0,325 ммоль), при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 1m.

¹Н-ЯМР (400 МГц, CD₃OD) δ ppm; 0,90 (3Н, d, J=7 Гц), 0,93-1,06 (2Н, m), 1,16-1,40 (4Н, m), 1,62-1,83 (8Н, m), 1,85-1,98 (2Н, m), 2,17-2,28 (1Н, m), 2,29 (1Н, d, J=16 Гц), 2,41-2,50 (1Н, m), 2,56-2,80 (4Н, m), 2,90-2,99 (2Н, m), 3,10-3,25 (2Н, m), 3,49 (1Н, d, J=10 Гц), 3,76-3,86 (1Н, m), 3,97 (1Н, d, J=13 Гц), 4,01 (1Н, d, J=13 Гц), 7,28 (1Н, t, J=55 Гц), 7,42 (1H, t, J=8 Гц), 7,56-7,63 (2H, m).

[0237] (Эталонный пример 1) 1,3-Дибензил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-1,3-дикарбоксилат

[0238] (Эталонный пример 1а) (3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

44,7 г (4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилата получали при помощи способа, подобного способу, описанному в примерах 2е-2g. Часть этого соединения (20 г, 44,1 ммоль) растворяли в метаноле (316 мл), добавляли 10% Pd/C (3,93 г) и атмосферу заменяли газообразным водородом. Смесь перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи, и затем перемешивали с добавлением теплой воды (36°C, 160 мл) в течение 30 минут, и осажденное твердое вещество растворяли. Pd/C отфильтровывали, фильтрат затем концентрировали, так что оставалось от приблизительно 20 до 40 мл воды, и добавляли метанол (80 мл) к мутному остатку, содержащему воду, который перемешивали в течение 30 минут. Осажденное твердое вещество отфильтровывали (партия А). ¹Н-ЯМР для партии А показан ниже.

Партию В получали при помощи подобного способа с использованием (4-метоксифенил)метил-(3RS,4SR)-1-бензил-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоксилата (21 г, 46,3 ммоль). После подтверждения того, что ¹Н-ЯМР для партии В являлся таким же, что и ¹Н-ЯМР для партии А, партию А и партию В объединяли и высушивали с получением титульного соединения (9,91 г).

¹Н-ЯМР (400 МГц, D₂O) δ ppm; 0,97 (3Н, d, J=6 Гц), 1,42 (9Н, s), 2,12-2,24 (1Н, m), 2,29 (1Н, d, J=17 Гц), 2,93 (1H, d, J=17 Гц), 3,04 (1H, t, J=12 Гц), 3,18 (1H, d, J=12 Гц), 3,49 (1H, dd, J=8,12 Гц), 4,03 (1H, d, J=12 Гц).

[0239] (Эталонный пример 1b) (3RS,4SR)-1-[(бензилокси)карбонил]-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

2 N водный раствор гидроксида натрия (20,2 мл) добавляли к смеси (3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в эталонном примере 1а (9,84 г, 40,5 ммоль), ацетона (39 мл) и воды (49 мл) с перемешиванием при охлаждении льдом (0-1°С) и реакционную смесь растворяли путем перемешивания в течение 45 минут. Бензилхлорформиат (6,35 мл, 44,5 ммоль) и 2 N водный раствор гидроксида натрия (22,3 мл) одновременно добавляли по каплям к реакционной смеси при внутренней температуре, составляющей 3,5°С или ниже, с перемешиванием при охлаждении льдом (0-1°С) в течение 20 минут. Реакционную жидкость перемешивали на ледяной бане и обеспечивали постепенный возврат к комнатной температуре. Это перемешивали при комнатной температуре на протяжении ночи. 1 N водный раствор гидроксида натрия (10 мл) добавляли к реакционной жидкости с перемешиванием при охлаждении льдом (внутренняя температура: приблизительно 15°С) и смесь доводили до pH 12. Обеспечивали возврат реакционной жидкости к комнатной температуре и три раза промывали путем добавления этилового эфира. Водный слой доводили до pH 2-3 путем последовательного добавления 2 N водного раствора соляной кислоты (20,2 мл) и 1 N водного раствора соляной кислоты (13 мл) с перемешиванием при охлаждении льдом (внутренняя температура: 5°C или ниже). Обеспечивали возврат водного слоя к комнатной температуре и три раза экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали солевым раствором и затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток растворяли в этилацетате, четыре раза промывали водой и затем солевым раствором, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением титульного соединения (14,53 г, выход: 95,1%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,02 (3Н, t, J=8 Гц), 1,42 (9Н, s), 2,14-2,22 (1Н, m), 2,27 (1Н, d, J=17 Гц), 3,04 (1H, d, J=5, 17 Гц), 3,12-3,19 (1Н, m), 3,35 (1Н, dd, J=7, 12 Гц), 3,65-3,72 (1Н, m), 4,29 (1Н, dd, J=7, 12 Гц), 5,09-5,19 (2Н, m), 7,26-7,38 (5Н, m).

[0240] (Эталонный пример 1с) 1,3-Дибензил-(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролиддн-1,3-дикарбоксилат

Бромистый бензил (4,48 мл, 37,7 ммоль) добавляли к смеси (3RS,4SR)-1-[(бензилокси)карбонил]-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты, полученной в эталонном примере 1b (14,5 г, 38,5 ммоль), карбоната калия (10,6 г, 77 ммоль) и N,N-диметилформамида (50 мл) с перемешиванием при охлаждении льдом (внутренняя температура: 3-7°С) и смесь перемешивали в течение одного часа, обеспечивали возврат к комнатной температуре и перемешивали на протяжении ночи. Воду добавляли к реакционной жидкости, которую три раза экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, последовательно промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (пять раз), водой (дважды) и солевым раствором и затем высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением титульного соединения (17,67 г, выход: 98,2%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 0,84-0,89 (3Н, m), 1,36-1,39 (9Н, m), 2,09-2,18 (1Н, m), 2,24 (1Н, dd, J=3, 17 Гц), 3,04-3,13 (2Н, m), 3,35 (1Н, dd, J=8, 12 Гц), 3,59-3,68 (1Н, m), 4,32 (1Н, t, J=12 Гц), 5,06-5,20 (4Н, m), 7,29-7,36 (10Н, m).

[0241] (Эталонный пример 2) (3S,4R)-3-[2-(Трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

[0242] (Эталонный пример 2а) (-)-Дибензоил-L-тартрат (4-метоксифенил)метил-(3R,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат

(4-Метоксифенил)метил-(3RS,4RS)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат, отдельно полученный при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 2f (1000 мг, 2,946 ммоль), растворяли в метилизобутилкетоне (4 мл), и добавляли (-)-дибензоил-L-винную кислоту (1055 мг), и растворяли. Кристаллы, полученные из (4-метоксифенил)метил-(3RS,4RS)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, отдельно полученного при помощи способа, подобного таковому из примера 2f, и (-)-дибензоил-L-винную кислоту добавляли к полученному в результате растворе в качестве кристаллов-затравок, и полученный в результате осадок отфильтровывали с получением титульного соединения (757 мг, выход: 36,8%). Этанол (3,02 мл) добавляли к 755 мг полученного в результате твердого вещества, которое нагревали и растворяли, и затем добавляли трет-бутилметиловый эфир (6,04 мл). Полученный в результате осадок отфильтровывали с получением титульного соединения (658 мг, выход: 87,2%) в виде кристаллов.

(4-Метоксифенил)метил-(3RS,4RS)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат, отдельно полученный при помощи способа, подобного способу, описанному в примере 2f (150,0 г, 441 ммоль), растворяли в метилизобутилкетоне (600 мл), и добавляли (-)-дибензоил-L-винную кислоту (157,0 г), и растворяли с перемешиванием. (4-Метоксифенил)метил (3R,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат-(-)-дибензоил-L-тартрат, полученный при помощи способа, описанного в предыдущем абзаце, добавляли к полученному в результате раствору в качестве кристаллов-затравок (7,5 мг) с последующим перемешиванием в течение 18 часов и 18 минут. Осажденное твердое вещество отфильтровывали и промывали метилизобутилкетоном (150 мл). Полученное в результате твердое вещество высушивали при пониженном давлении при 50°C с получением титульного соединения (152,07 г, выход: 49,4%). Этанол (600 мл) добавляли к 150,00 г полученного в результате твердого вещества, которое нагревали до 80°C с перемешиванием, и подтверждали растворение твердого вещества, после чего нагревание останавливали. Через пятьдесят девять минут после остановки нагревания добавляли трет-бутилметиловый эфир (300 мл) в течение девяти минут; через дополнительные шесть минут добавляли кристаллы-затравки (5 мг). Через 12 минут трет-бутилметиловый эфир (900 мл) добавляли в течение двух часов и 38 минут с последующим перемешиванием в течение дополнительных 10 часов и 43 минут. Осажденное твердое вещество отфильтровывали и промывали смесью этанола и трет-бутилметилового эфира (75 мл + 150 мл). Полученное в результате твердое вещество высушивали при пониженном давлении при 50°C с получением титульного соединения (106,40 г, выход: 70,9%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ ppm; 1,05 (3Н, d, J=6 Гц), 2,32-2,45 (2Н, m), 2,64-2,78 (1Н, m), 2,92-3,12 (3Н, m), 3,75 (3Н, s), 3,80-3,94 (2Н, m), 5,04 (2Н, dd, J=12, 16 Гц), 5,77 (2Н, s), 6,90-6,96 (2Н, m), 7,26-7,38 (7Н, m), 7,52-7,58 (4Н, m), 7,66-7,72 (2Н, m), 7,95-8,05 (2Н, m).

Анализ с помощью HPLC

(Условия анализа) Колонка: CHTRALCEL OJ-H (произведенная Daicel Chemical Industries, Ltd.) (0,46 см в диаметре × 25 см), элюент: гексан/этанол/диэтиламин = 850/150/1 (об./об./об.), скорость потока: 1 мл/мин., обнаружение: UV (226 нм).

(Результат анализа) Полученное в результате титульное соединение анализировали при вышеописанных условиях анализа, и наблюдали пик при времени удержания, составляющем 8,62 минуты (энантиомерный избыток: 98,0% ее), и пик при времени удержания, составляющем 10,9 минуты.

[0243] (Эталонный пример 2b) (4-Метоксифенил)метил-(3R,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилат

Этилацетат (900 мл) добавляли к (-)-дибензоил-L-тартрату (4-метоксифенил)метил-(3R,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилата, полученного в эталонном примере 2а (104,0 г), и добавляли 1 N водный раствор гидроксида натрия (600 мл) с перемешиванием. Водный слой удаляли и органический слой дважды промывали водой (100 мл, 50 мл). Полученный в результате органический слой концентрировали при пониженном давлении при 50°C с получением титульного соединения (49,8 г, выход: 98,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ ppm; 1,12 (3Н, d, J=7 Гц), 2,19 (1Н, dd, J=6, 9 Гц), 2,44-2,62 (2Н, m), 2,73-2,84 (2Н, m), 2,85-2,92 (1Н, m), 3,55 (1Н, d, J=13 Гц), 3,63 (1Н, d, J=13 Гц), 3,81 (3Н, s), 5,02-5,10 (2Н, m), 6,85-6,90 (2Н, m), 7,21-7,33 (7Н, m).

[0244] (Эталонный пример 2с) (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновая кислота

Тетрагидрофуран (200 мл) добавляли к (4-метоксифенил)метил-(3R,4R)-1-бензил-4-метилпирролидин-3-карбоксилату, полученному в эталонном примере 2b (29,50 г, 87 ммоль), с последующей азеотропной сушкой. Далее добавляли тетрагидрофуран (200 мл) с последующей азеотропной сушкой. Тетрагидрофуран (400 мл) добавляли к этому продукту, который охлаждали на бане с сухим льдом и этанолом, и раствор диизопропиламида лития/н-гексан-тетрагидрофурана (129 мл, 1,11 М, 144 ммоль) добавляли в течение 27 минут. Через 30 минут раствор трет-бутилового бромацетата (21,20 г, 144 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) добавляли в течение семи минут. Через 39 минут добавляли 20% водный раствор хлорида аммония (440 мл) и далее добавляли этилацетат (440 мл) для осуществления экстракции. Полученный в результате органический слой дважды промывали водой (60 мл, 60 мл) и концентрировали при пониженном давлении при 30°C. Метанол (150 мл) и гидроксид палладия (885 мг) добавляли к полученному в результате концентрату с последующим перемешиванием при давлении водорода (0,35 МПа) в течение семи часов и 20 минут. Воду (200 мл) и тетрагидрофуран (100 мл) добавляли к реакционной жидкости с последующей фильтрацией и катализатор последовательно промывали метанолом (50 мл) и водой (50 мл × 2). Промывочные воды из фильтра концентрировали при пониженном давлении при 50°С, полученный в результате водный слой промывали трет-бутилметиловым эфиром (100 мл) и водный слой после промывания концентрировали при пониженном давлении при 50°C. Метанол (150 мл) добавляли к полученному в результате остатку, и смесь обрабатывали ультразвуком, и затем фильтровали. Полученное в результате твердое вещество высушивали при пониженном давлении при 50°C с получением титульного соединения (8,16 г, выход: 38,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, D₂O) δ ppm; 1,00 (3Н, d, J=7 Гц), 1,45 (9Н, s), 2,16-2,28 (1Н, m), 2,33 (1H, d, J=17 Гц), 2,97 (1Н, d, J=17 Гц), 3,08 (1Н, t, J=12 Гц), 3,22 (1Н, d, J=12 Гц), 3,50-3,58 (1Н, m), 4,07 (1H, d, J=12 Гц).

[0245] (Эталонный пример 3) Этанольный сольват (R)-(-)-1,1'-бинафтил-2,2'-диилгидрогенфосфата (3S,4R)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновой кислоты

(3RS,4SR)-3-[2-(трет-бутокси)-2-оксоэтил]-4-метилпирролидин-3-карбоновую кислоту, полученную при помощи способа, подобного таковому из эталонного примера 1а (500 мг), (R)-(-)-1,1'-бинафталин-2,2'-диилгидрогенфосфат (359 мг), этанол (10,0 мл) и воду (10,0 мл) последовательно добавляли в 50 мл кругл о донную колбу с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение приблизительно 22 часов. Осажденное твердое вещество собирали с помощью фильтрации и промывали смесью 1:1 этанола-воды (2 мл). Влажный продукт высушивали при пониженном давлении при 40°С в течение приблизительно одного часа с получением титульного соединения (269 мг, выход: 20,5%).

¹Н-ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ ppm: 0,88 (3Н, d, J=7 Гц), 1,06 (3Н, t, J=7 Гц), 1,38 (9Н, s), 2,09-2,16 (1Н, m), 2,44 (1H, d, J=18 Гц), 2,74 (1H, t, J=12 Гц), 2,87 (1H, d, J=18 Гц), 3,11 (1H, d, J=12 Гц), 3,41-3,47 (2H, m), 3,81 (1H, d, J=12 Гц), 4,36 (1H, t, J=5 Гц), 7,21 (2H, d, J=9 Гц), 7,28-7,31 (2H, t, J=8 Гц), 7,38-7,45 (4H, m), 8,02 (4Н, t, J=8 Гц).

8,85 мг вышеупомянутого белого твердого вещества взвешивали в стеклянный сосуд с завинчивающейся крышкой. К нему добавляли 0,2 мл воды MilliQ и 0,8 мл 99,5% этанола. Впоследствии, все это поровну разделяли на три порции в 1,5 мл флаконы для LCMS, и флаконы свободно закрывали крышками и выдерживали при комнатной температуре. Через девять дней во флаконах наблюдали осажденные кристаллы. Осуществляли эксперимент с рентгеноструктурным анализом при помощи R-AXIS RAPID II (Rigaku Corporation) с использованием полученных в результате монокристаллов (0,40×0,40×0,06 мм). Кристаллографические данные и результаты структурного анализа показаны в таблице 1, и данные атомных координат показаны в таблицах 2-4. Действительную структуру титульного соединения определяли исходя из таких результатов.

[Таблица 1]
Температура				296 K
Длина волны				1,5418 Å
Кристаллическая система, пространственная группа				Моноклинная система, P2₁
Параметр кристаллической решетки				а=12,8692 (4) Å
				b=10,9651 (3) Å
				с=23,8299 (7) Å
				β=95,637 (2)°
Объем				3346,4 (2) Å³
Величина Z, рассчитанная плотность				4,1,357 г/см³
Коэффициент поглощения				12,406 см^-1
Размер кристалла				0,40×0,40×0,06 мм
Максимальное измеренное 2θ				136,5°
Общее количество отображений/ Количество уникальных отображений				35631/11955 [R (концентрация)=0,0631]
Завершенность				98,5%
Структурный раствор				Прямой способ (SIR92)
Сужение параметров				Способ наименьших квадратов для F²
Данные/параметр				11955/835
Указатель соответствия				1,103
R-фактор (все данные)				0,0739
R-фактор (I>2σ(I))				0,0477
Параметр отсеивания				-0,00 (3)
Разница между наибольшим и наименьшим пиками				0,43 и -0,40 е/Å³
[Таблица 2]
	x	z	y		U (равн.)
Р1	-0,30549 (7)	0,02152 (8)	0,50227 (4)		3,88 (2)
Р2	0,27020 (8)	0,29225 (8)	0,07402 (5)		4,25 (2)
01	-0,3526 (2)	0,1284 (2)	0,52810 (1)		4,36 (6)
02	-0,3275 (2)	-0,1009 (2)	0,5232 (2)		4,78 (6)
03	-0,1819 (2)	0,0485 (3)	0,5071 (1)		4,17 (5)
04	-0,3345 (2)	0,0201 (3)	0,4358 (1)		4,33 (5)
05	0,3291 (3)	0,3968 (3)	0,0554 (2)		5,68 (7)
06	0,3241 (3)	0,1735 (3)	0,0789 (2)		5,81 (7)
07	0,1636 (2)	0,2859 (3)	0,0336 (1)		4,07 (5)
08	0,2280 (2)	0,3167 (3)	0,1343 (1)		4,30 (5)
09	0,4552 (3)	-0,0428 (3)	0,0300 (2)		5,31 (7)
010	0,3598 (3)	-0,0464 (3)	0,1033 (1)		4,86 (6)

011	0,5908 (3)	-0,1764 (4)	0,1547 (2)	7,02 (9)
012	0,5024 (3)	-0,2371 (3)	0,2258 (2)	5,75 (7)
013	0,2710 (3)	-0,1574 (3)	0,4519 (2)	5,39 (7)
014	0,4273 (2)	-0,0998 (3)	0,4927 (2)	5,64 (7)
015	0,3547 (3)	-0,0085 (4)	0,3501 (2)	7,00 (9)
016	0,1998 (2)	0,0539 (3)	0,3086 (1)	5,14 (6)
017	0,5245 (4)	-0,5826 (4)	0,1062 (2)	8,6 (1)
018	0,417 (1)	0,432 (1)	0,3597 (7)	27,9 (7)
N1	0,4848 (4)	-0,2939 (4)	-0,0160 (2)	5,49 (9)
N2	0,4327 (4)	0,1896 (4)	0,5073 (2)	4,89 (8)
C1	-0,1225 (3)	-0,0260 (4)	0,4752 (2)	4,06 (8)
C2	-0,1255 (3)	-0,0052 (4)	0,4183 (2)	4,19 (8)
C3	-0,0719 (3)	-0,0909 (4)	0,3854 (2)	4,69 (9)
C4	-0,0791 (4)	-0,0875 (5)	0,3263 (2)	5,8 (1)
C5	-0,0310 (5)	-0,1735 (6)	0,2967 (3)	7,8 (2)
C6	0,0283 (6)	-0,2649 (6)	0,3240 (4)	8,6 (2)
C7	0,0370 (4)	-0,2729 (5)	0,3811 (3)	7,3 (2)
C8	-0,0124 (3)	-0,1871 (4)	0,4143 (3)	5,2 (1)
C9	-0,0085 (4)	-0,1966 (5)	0,4725 (3)	5,6 (1)
C10	-0,0627 (3)	-0,1192 (4)	0,5031 (2)	5,00 (9)
С11	-0,2906 (3)	0,1083 (4)	0,4029 (2)	4,33 (8)
C12	-0,1878 (3)	0,0971 (4)	0,3927 (2)	4,21 (8)
C13	-0,1444 (3)	0,1916 (4)	0,3603 (2)	4,43 (8)
C14	-0,0375 (4)	0,1966 (4)	0,3516 (2)	5,27 (9)
C15	0,0028 (4)	0,2881 (5)	0,3224 (3)	6,5 (2)
C16	-0,0635 (5)	0,3792 (5)	0,2969 (3)	6,9 (2)
C17	-0,1655 (5)	0,3780 (5)	0,3048 (3)	6,7 (2)
C18	-0,2101 (4)	0,2867 (5)	0,3367 (2)	5,21 (9)
C19	-0,3152 (4)	0,2885 (5)	0,3465 (2)	6,1 (1)
C20	-0,3559 (4)	0,2021 (5)	0,3796 (2)	5,7 (1)
C21	0,0837 (3)	0,2113 (4)	0,0497 (2)	3,85 (7)
C22	0,0252 (3)	0,2484 (3)	0,0923 (2)	3,49 (7)
C23	-0,0515 (3)	0,1662 (3)	0,1095 (2)	3,81 (7)
C24	-0,1043 (3)	0,1861 (4)	0,1576 (2)	4,44 (8)
C25	-0,1780 (4)	0,1049 (5)	0,1724 (2)	5,8 (1)
C26	-0,2030 (5)	0,0004 (5)	0,1398 (3)	6,9 (2)
C27	-0,1507(4)	-0,0222 (5)	0,0945 (3)	6,4 (2)
C28	-0,0720 (4)	0,0561 (4)	0,0784(2)	4,68 (9)
C29	-0,0149 (4)	0,0295 (4)	0,0330 (2)	5,6 (1)
C30	0,0637 (4)	0,1038 (4)	0,0199 (2)	5,28 (9)

[Таблица 3]
C31	0,1477 (3)	0, 4005 (4)	0,1378 (2)	3,83 (7)
C32	0,0475 (3)	0,3697 (3)	0,1190 (2)	3,36 (7)
C33	-0,0330 (3)	0,4594 (4)	0,1223 (2)	3,65 (7)

С34	-0,1383 (3)	0,4398 (4)	0,1003 (2)	4,30 (8)
С35	-0,2124 (4)	0,5278 (5)	0,1034 (2)	5,5 (1)
С36	-0,1866 (5)	0,6406 (5)	0,1268 (3)	6,4 (2)
С37	-0,0872 (5)	0,6641 (4)	0,1475 (3)	6,3 (2)
С38	-0,0064 (4)	0,5749 (4)	0,1465 (2)	4,69 (8)
С39	0,0979 (4)	0,5978 (4)	0,1669 (2)	5,5 (1)
С40	0,1740 (4)	0,5145 (4)	0,1631 (2)	5,02 (9)
С41	0,5212 (4)	-0,2809 (4)	0,0451 (2)	4,50 (8)
С42	0,4249 (3)	-0,2360 (3)	0,0731 (2)	3,50 (7)
С43	0,3342 (4)	-0,2979 (4)	0,0362 (2)	4,49 (8)
С44	0,3695 (4)	-0,2987 (6)	-0,0228 (2)	6,5 (2)
С45	0,4161 (3)	-0,0981 (4)	0,0671 (2)	3,91 (7)
С46	0,4261 (3)	-0,2755 (4)	0,1337 (2)	3,94 (7)
С47	0,5158 (4)	-0,2244 (4)	0,1718 (2)	4,42 (8)
С48	0,2262 (4)	-0,2444 (5)	0,0384 (2)	6,1 (1)
С49	0,5829 (4)	-0,1967 (7)	0,2712 (2)	6,9 (2)
С50	0,6778 (5)	-0,2758 (8)	0,2683 (4)	11,6 (3)
С51	0,5293 (6)	-0,2179 (9)	0,3237 (3)	11,8 (3)
С52	0,6039 (6)	-0,0633 (8)	0,2658 (3)	10,2 (2)
С53	0,4024 (3)	0,1337 (4)	0,4509 (2)	4,17(8)
С54	0,3066 (3)	0,0503 (3)	0,4574 (2)	3,28 (6)
С55	0,2645 (3)	0,1071 (4)	0,5115 (2)	4,11 (7)
С56	0,3633 (4)	0,1414 (5)	0,5485 (2)	5,27 (9)
С57	0,3424 (3)	-0,0754 (3)	0,4684 (2)	3,97 (7)
С58	0,2247 (3)	0,0656 (4)	0,4074 (2)	3,86 (7)
С59	0,2682 (4)	0,0315 (4)	0,3529 (2)	4,59 (8)
С60	0,1912 (4)	0,0265 (5)	0,5417 (2)	6,3 (1)
С61	0,2251 (4)	0,0340 (5)	0,2506 (2)	5,5 (1)
С62	0,3176 (5)	0,1142 (6)	0,2394 (3)	8,1 (2)
С63	0,2454 (5)	-0,1016 (6)	0,2416 (2)	7,2 (2)
С64	0,1280 (5)	0,0737 (7)	0,2156 (2)	8,6 (2)
С65	0,528 (1)	-0,615 (1)	0,1682 (6)	15,5 (4)
С66	0,566 (2)	-0,715 (2)	0,1763 (6)	18,6 (5)
С67	0,294 (2)	0,503 (2)	0,3239 (6)	20,9 (6)
С68	0,285 (2)	0,370 (2)	0,3574 (6)	19,7 (6)
H1	0,5162	-0,2306	-0,0325	8,23
Н2А	0,4928	0,1800	0,5194	7,43
Н2В	0,4204	0,2798	0,5013	8,18
Н4	-0,1173	-0,0257	0,3071	6,91
Н5	0,4183	0,3988	0,0833	9,66
Н5А	-0,0381	-0,1706	0,2575	9,35
Н6	0,0623	-0, 3213	0,3030	10,32
Н7	0,0762	-0,3357	0,3988	8,73
Н9	0,0372	-0,2466	0,4886	6,92

H10		-0,0604		-0,1277	0,5420	6,00
Н13		0,2937		-0,2206	0,4609	5,92
Н14		0,0067		0,1351	0,3665	6,33
Н15		0,0742		0,2910	0,3191	7,77
Н16		-0,0369		0,4395	0,2749	8,32
Н17		-0,2082		0,4395	0,2887	8,08
[Таблица 4]
Н19	-0,3584		0,3496		0,3303	7,37
Н20	-0,4257		0,2053		0,3865	6,80
Н24	-0,0892		0,2550		0,1796	5,33
Н25	-0,2118		0,1192		0,2045	7,00
Н26	-0,2550		-0,0525		0,1493	8,25
Н27	-0,1672		-0,0919		0,0732	7,65
Н29	-0,0309		-0,0400		0,0115	6,67
Н30	0,1039		0,0826		-0,0090	6,34
Н34	-0,1572		0,3655		0,0834	5,16
Н35	-0,2811		0,5119		0,0896	6,63
Н36	-0,2378		0,7001		0,1283	7,71
Н37	-0,0708		0,7405		0,1628	7,58
Н39	0,1150		0,6728		0,1835	6,60
Н40	0,2425		0,5317		0,1769	6,02
Н41А	0,5777		-0,2223		0,0506	5,40
Н41В	0,5455		-0,3586		0,0609	5,40
Н43	0,3313		-0,3830		0,0486	5,38
Н44А	0,3457		-0,3723		-0,0427	7,84
Н44В	0,3413		-0,2287		-0,0441	7,84
Н46А	0,3612		-0,2504		0,1478	4,73
Н46В	0,4292		-0,3638		0,1354	4,73
Н48А	0,1754		-0,2967		0,0184	7,27
Н48В	0,2233		-0,1651		0,0211	7,27
Н48С	0,2114		-0,2372		0,0770	7,27
Н50А	0,6611		-0,3584		0,2771	13,90
Н50В	0,7332		-0,2470		0,2950	13,90
Н50С	0,6998		-0,2722		0,2310	13,90
Н51А	0,5307		-0,1442		0,3454	14,10
Н51В	0,5649		-0,2814		0,3457	14,10
Н51С	0,4582		-0,2417		0,3134	14,10
Н52А	0,6571		-0,0513		0,2408	12,22
Н52В	0,6270		-0,0302		0,3022	12,22
Н52С	0,5411		-0,0226		0,2509	12,22
Н53А	0,4591		0,0845		0,4392	5,00
Н53В	0,3857		0,1966		0,4228	5,00
Н55	0,2271		0,1828		0,5009	4,93
Н56А	0,3491		0,2033		0,5759	6,32

Н56В	0,3940	0,0708	0,5683	6,32
Н58А	0,1662	0,0127	0,4131	4,64
Н58В	0,1992	0,1488	0,4048	4,64
Н60А	0,1278	0,0136	0,5177	7,56
Н60В	0,1754	0,0656	0,5759	7,56
Н60С	0,2241	-0,0506	0,5505	7,56
Н62А	0,3110	0,1922	0,2570	9,71
Н62В	0,3190	0,1250	0,1995	9,71
Н62С	0,3813	0,0759	0,2548	9,71
Н63А	0,2688	-0,1136	0,2050	8,68
Н63В	0,1821	-0,1466	0,2443	8,68
Н63С	0,2981	-0,1297	0,2700	8,68
Н64А	0,1146	0,1581	0,2229	10,35
Н64В	0,0701	0,0253	0,2250	10,35
Н64С	0,1370	0,0633	0,1764	10,35

[0246] Действительные структуры соединений из примеров 1-14 определяли и называли исходя из информации, полученной в эталонном примере 3.

[0247] Структурные формулы соединений из примеров 1-8 являются следующими.

[Химическая формула 13]

[0248] Структурные формулы соединений из примеров 9-14 являются следующими.

[Химическая формула 14]

[0249] (Тестовый пример 1) Ингибирование миграции клеток в анализе индуцированного фракталкином хемотаксиса

(1) Способ

Ингибирующие эффекты соединений из примеров на индуцированную фракталкином миграцию клеток исследовали с использованием клеток В300, трансфицированных CX3CR1.

После уравновешивания планшета Transwell (24-луночные блоки, размер пор: 5 мкм, произведенный Corning Incorporated) раствор фракталкина (0,3 нМ, произведенный R&D Systems, Inc.) добавляли в нижние лунки. Клетки В300, экспрессирующие CX3CR1, которые предварительно инкубировали с тестовым соединением (0,001, 0,003, 0,01 или 0,03 мкМ) в течение 30 минут, помещали в лунки верхнего слоя с последующим инкубированием в условиях 5% СО₂ в течение 3,5 часов при 37°C. Количество клеток, мигрировавших в нижние лунки, оценивали с использованием CellTiter (произведенного Promega Corporation).

Ингибирующую норму тестового соединения по отношению к индуцированной фракталкином миграции клеток подсчитывали с помощью следующей формулы, где [А] представляет собой количество мигрировавших клеток в присутствии как фракталкина, так и тестового соединения, [В] представляет собой количество мигрировавших клеток в присутствии фракталкина и в отсутствии тестового соединения, и [С] представляет собой количество мигрировавших клеток в отсутствии как фракталкина, так и тестового соединения; 50% ингибирующую концентрацию (IC₅₀) рассчитывали исходя из ингибирующей нормы.

Ингибирующая норма (%) = [1-{(А-С)/(В-С)}]×100

[0250] (2) Результаты

Результаты этого тестового примера показаны в следующей таблице.

[Таблица 5]
Тестовое соединение	IC₅₀ (нМ)
Пример 1	13
Пример 2	21
Пример 3	4
Пример 6	11
Пример 7	5
Пример 8	31
Пример 9	16
Пример 10	14
Пример 11	6
Пример 12	6
Пример 13	16
Пример 14	12

[0251] (Тестовый пример 2) Снижение потери массы тела в модели колита, индуцированного трансплантацией Т клеток

(1) Способ

С использованием SCID-мышей с индуцированным колитом, которым вводили CD4-положительные клетки CD45RB-high, выделенные из спленоцитов мышей BALB/c, оценивали эффективность соединений из примеров по изменениям массы тела. Эксперимент осуществляли в течение 31 дня. В день 1 CD4-положительные клетки CD45RB-high, выделенные из селезенки мышей BALB/c (5×10⁵ клеток/мышь), вводили внутривенно SCID-мышам. С дня 16 по день 31 соединение из примера вводили SCID-мышам перорально один раз в день с последующим измерением массы тела всех животных в день 19, 22, 24, 26, 29 и 31.

Эффективность оценивали по изменениям массы тела в день 19, 22, 24, 26, 29 или 31. Изменение массы тела (%) определяли с помощью формулы, показанной ниже, где [А] представляет собой массу тела в день 16, и [В] представляет собой массу тела применительно к каждому дню, в который осуществляли измерение массы тела (день 19, 22, 24, 26, 29 или 31).

Изменение массы тела (%) = В/А×100

[0252] (2) Результаты

Результаты показаны на фиг. 1-4. Ось абсцисс на фигурах показывает количество прошедших дней, где день, в который SCID-мышам внутривенно вводили CD4-положительные клетки CD45RB-high, выделенные из селезенки мышей BALB/c (5×10⁵ клеток/мышь), является днем 0.

Claims

1. Соединение, представленное формулой (1), или его фармацевтически приемлемая соль

где R представляет собой C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей A, C_3-8циклоалкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей A, или C_3-8циклоалкенильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей A,

X представляет собой C_1-6алкильную группу,

Y и Z являются одинаковыми или отличными друг от друга, и каждый представляет собой атом галогена или C_1-6алкильную группу, незамещенную или содержащую 1-3 заместителя, выбранных из группы заместителей B,

n равен 0 или 1,

группа заместителей A состоит из атомов галогена, и

группа заместителей B состоит из атомов галогена.

2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где R представляет собой фторбутильную группу, пентильную группу, циклогексильную группу, дифторциклогексильную группу, циклопентенильную группу или циклогексенильную группу.

3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где X является метильной группой.

4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где Y является атомом хлора.

5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где Ζ представляет собой атом хлора, метильную группу, дифторметильную группу или трифторметильную группу.

6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где n равен 1.

7. Соединение, выбранное из группы, состоящей из 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(2-фторпентил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусной кислоты,

или его фармацевтически приемлемая соль.

8. Лекарственное средство, содержащее соединение или его фармацевтически приемлемую соль по п. 1 в качестве активного ингредиента.

9. Терапевтическое средство от воспалительного заболевания кишечника, содержащее соединение или его фармацевтически приемлемую соль по п. 1 в качестве активного ингредиента.

10. Терапевтическое средство по п. 9, отличающееся тем, что воспалительным заболеванием кишечника является язвенный колит или болезнь Крона.

11. Ингибитор пути фракталкин-CX3CR1, содержащий соединение или его фармацевтически приемлемую соль по п. 1 в качестве активного ингредиента.

12. Ингибитор фракталкина, содержащий соединение или его фармацевтически приемлемую соль по п. 1 в качестве активного ингредиента.

13. Ингибитор CX3CR1, содержащий соединение или его фармацевтически приемлемую соль по п. 1 в качестве активного ингредиента.

14. 2-[(3S,4R)-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-3-({1-[(4,4-дифторциклогексил)метил]пиперидин-4-ил}карбамоил)-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль

15. 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль

16. 2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль

17. 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]метил}-3-{[1-(циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль

18. 2-[(3S,4R)-1-[(2-хлор-6-метилфенил)метил]-3-{[(1-циклопент-1-ен-1-илметил)пиперидин-4-ил]карбамоил}-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль

19. 2-[(3S,4R)-3-{[(3S)-1-(циклогекс-1-ен-1-илметил)пирролидин-3-ил]карбамоил}-1-[(2,6-дихлорфенил)метил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль

20. 2-[(3S,4R)-1-{[2-хлор-6-(дифторметил)фенил]метил}-3-[(1-гексилпиперидин-4-ил)карбамоил]-4-метилпирролидин-3-ил]уксусная кислота или ее фармацевтически приемлемая соль