RU2613322C2 - Способ профилактики и/или лечения инсулинорезистентности - Google Patents
Способ профилактики и/или лечения инсулинорезистентности Download PDFInfo
- Publication number
- RU2613322C2 RU2613322C2 RU2014112223A RU2014112223A RU2613322C2 RU 2613322 C2 RU2613322 C2 RU 2613322C2 RU 2014112223 A RU2014112223 A RU 2014112223A RU 2014112223 A RU2014112223 A RU 2014112223A RU 2613322 C2 RU2613322 C2 RU 2613322C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- rel
- bacteria
- hallii
- eubacterium hallii
- insulin resistance
- Prior art date
Links
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 title claims abstract description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 47
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 title claims abstract description 46
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims abstract description 11
- 241001531197 [Eubacterium] hallii Species 0.000 claims abstract description 58
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 55
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 36
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 81
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 15
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 15
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 claims description 13
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 claims description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 13
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 9
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 8
- 208000030172 endocrine system disease Diseases 0.000 claims description 8
- 208000010067 Pituitary ACTH Hypersecretion Diseases 0.000 claims description 7
- 208000020627 Pituitary-dependent Cushing syndrome Diseases 0.000 claims description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 15
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 2
- 241000588813 Alcaligenes faecalis Species 0.000 description 48
- 229940005347 alcaligenes faecalis Drugs 0.000 description 47
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 33
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 24
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 23
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 20
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 18
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 18
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 17
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 17
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 17
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 16
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 15
- 241000736262 Microbiota Species 0.000 description 14
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 12
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 12
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 10
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 230000009230 endogenous glucose production Effects 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 8
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 8
- 102000052508 Lipopolysaccharide-binding protein Human genes 0.000 description 8
- 108010053632 Lipopolysaccharide-binding protein Proteins 0.000 description 8
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 8
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 7
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 7
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 7
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 7
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 7
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 6
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 6
- GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N Nitrous Oxide Chemical compound [O-][N+]#N GQPLMRYTRLFLPF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 6
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000018 DNA microarray Methods 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 5
- 230000002183 duodenal effect Effects 0.000 description 5
- 230000001610 euglycemic effect Effects 0.000 description 5
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 5
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 5
- 230000000910 hyperinsulinemic effect Effects 0.000 description 5
- 210000001630 jejunum Anatomy 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 5
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000001272 nitrous oxide Substances 0.000 description 3
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 3
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 3
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- YPMOAQISONSSNL-UHFFFAOYSA-N 8-hydroxyoctyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCCCCCCCO YPMOAQISONSSNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001156739 Actinobacteria <phylum> Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000605059 Bacteroidetes Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241000605860 Prevotella ruminicola Species 0.000 description 2
- 241000194049 Streptococcus equinus Species 0.000 description 2
- MCMNRKCIXSYSNV-UHFFFAOYSA-N Zirconium dioxide Chemical compound O=[Zr]=O MCMNRKCIXSYSNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011316 allogeneic transplantation Methods 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 238000007707 calorimetry Methods 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 2
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 2
- 238000003066 decision tree Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 2
- -1 elixirs Substances 0.000 description 2
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 2
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000002039 glucoregulatory effect Effects 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 210000003405 ileum Anatomy 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 230000036284 oxygen consumption Effects 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000020125 yoghurt-based beverage Nutrition 0.000 description 2
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 description 1
- 208000004881 Amebiasis Diseases 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 206010001980 Amoebiasis Diseases 0.000 description 1
- 102000018616 Apolipoproteins B Human genes 0.000 description 1
- 108010027006 Apolipoproteins B Proteins 0.000 description 1
- 238000012935 Averaging Methods 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 229940123208 Biguanide Drugs 0.000 description 1
- 241000726107 Blastocystis hominis Species 0.000 description 1
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 1
- 241000589876 Campylobacter Species 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 241000218631 Coniferophyta Species 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102100025012 Dipeptidyl peptidase 4 Human genes 0.000 description 1
- 206010052804 Drug tolerance Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- 208000037487 Endotoxemia Diseases 0.000 description 1
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N Glucagon-like peptide 1 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC=1N=CNC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 DTHNMHAUYICORS-KTKZVXAJSA-N 0.000 description 1
- 101800000224 Glucagon-like peptide 1 Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 108010023302 HDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 101000684208 Homo sapiens Prolyl endopeptidase FAP Proteins 0.000 description 1
- 241000598436 Human T-cell lymphotropic virus Species 0.000 description 1
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 206010060378 Hyperinsulinaemia Diseases 0.000 description 1
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 1
- 241001112724 Lactobacillales Species 0.000 description 1
- 206010049287 Lipodystrophy acquired Diseases 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000000536 PPAR gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010016731 PPAR gamma Proteins 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 102100040918 Pro-glucagon Human genes 0.000 description 1
- 241000192142 Proteobacteria Species 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 241000398180 Roseburia intestinalis Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000607768 Shigella Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 241001148134 Veillonella Species 0.000 description 1
- 241001261005 Verrucomicrobia Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 241000607734 Yersinia <bacteria> Species 0.000 description 1
- YAJCHEVQCOHZDC-QMMNLEPNSA-N actrapid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3N=CNC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@H](C)CC)[C@H](C)CC)[C@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C(N)=O)C1=CNC=N1 YAJCHEVQCOHZDC-QMMNLEPNSA-N 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 1
- 150000004283 biguanides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 229940011597 blastocystis hominis Drugs 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 235000015155 buttermilk Nutrition 0.000 description 1
- 235000019577 caloric intake Nutrition 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002192 cholecystectomy Methods 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 238000002790 cross-validation Methods 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000000081 effect on glucose Effects 0.000 description 1
- 230000003028 elevating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003877 glucagon like peptide 1 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000003451 hyperinsulinaemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008980 hyperinsulinism Diseases 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000859 incretin Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 208000006132 lipodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 239000008297 liquid dosage form Substances 0.000 description 1
- 235000021056 liquid food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 238000010801 machine learning Methods 0.000 description 1
- 229960003511 macrogol Drugs 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021590 normal diet Nutrition 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000013116 obese mouse model Methods 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 1
- 238000007410 oral glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000858 peroxisomal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 210000003752 saphenous vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000013515 script Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000001599 sigmoid colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000001629 sign test Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 description 1
- 235000021055 solid food Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000012066 statistical methodology Methods 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/52—Adding ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
- A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K2035/11—Medicinal preparations comprising living procariotic cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, и касается профилактики и/или лечения инсулинорезистентности. Для этого вводят эффективное количество Eubacterium hallii в виде фармацевтической, пищевой или кормовой композиции. Способ обеспечивает эффективную коррекцию инсулинорезистентности за счет повышения уровня Eubacterium hallii в тонком кишечнике. 9 з.п. ф-лы, 3 пр., 1 табл.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области медицины. Настоящее изобретение относится к бактериям из таксономической группы Eubacterium halli et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel., необязательно используемым в фармацевтических, пищевых или кормовых композициях, для применения их в качестве лекарственного средства, в частности для профилактики и/или лечения инсулинорезистентности и/или осложнений, связанных с инсулинорезистентностью, таких как метаболический синдром, дислипидемия и сахарный диабет 2 типа.
Предпосылки создания изобретения
Ожирение является, прежде всего, следствием вредных пищевых и физических привычек, развивающихся на неблагоприятном генетическом фоне. Ожирение является основным фактором риска для развития различных широко распространенных медицинских состояний, таких как метаболический синдром, сахарный диабет 2 типа, заболевания сердечно-сосудистой системы. Как метаболически активный орган желудок человека содержит плотное и разнообразное сообщество микроорганизмов, в котором доминируют тысячи разных бактериальных видов. Имеется все больше подтверждений роли микробиоты кишечника в метаболизме организма-хозяина.
Филогенетическая группа, которая охватывает подавляющее большинство микробиоты кишечника, включает грамотрицательные микроорганизмы Bacteroidetes, Proteobacteria и Verrucomicrobia, а также грамположительные Firmicutes и Actinobacteria. Ранее было показано, что кишечная микробиота вносит вклад в развитие в ожирение у мышей, вызванное диетой. Согласно этим данным, по всей видимости, микробиота в толстой кишке у мышей с ожирением характеризуется сниженной плотностью заселения микробов и обогащением их видами, утилизирующими углеводы и липиды. Предположительно короткоцепочечные жирные кислоты, ацетат, пропионат и бутират, продуцируемые специфическими бактериями кишки, могут служить в качестве сигнала, который напрямую влияет на печеночную и периферическую чувствительность к инсулину в организме хозяина. С другой стороны, проведенные в последнее время исследования показали, что меньшее разнообразие кишечной микробиоты у мышей ассоциируется с эндотоксемией, индуцируемой хроническим воспалением, последующим развитием инсулинорезистентности.
Показано, что у людей измененная микробиота толстой кишки коррелирует с ожирением, хотя нет общего мнения относительно специфических бактериальных групп среди разных видов и отсутствуют доказательство их провоцирующей заболевание роли. Поскольку метаболически здоровые и нездоровые фенотипы ожирения существуют и при наличии инсулинорезистентности и без нее, то различные опубликованные к настоящему времени материалы относительно взаимосвязи между составом микробиоты кишечника и ожирением у человека страдают недостатками, определяемыми гетерогенностью фенотипов ожирения, различными отягощающими факторами (например, диета, лечение) и появлением все новых методов анализа микробиоты кишечника. Это особенно справедливо для мелкой микробиоты кишечника, которая относительно недоступна для анализа, но которая влияет на большую площадь поверхности. Было показано, что микробная флора в тонком кишечнике менее разнообразна, чем в толстой кишке, причем она заметно обогащена бактериями, принадлежащими к Lactobacillales и Veillonella spp. (Booijnk et al. 2010 Env Microbiol 12: 3213-27). Таким образом, в данной области очевидна потребность в других лекарственных средствах, которые могли бы применяться при лечении и/или профилактике инсулионрезистентности и сахарного диабета 2 типа и преимущественно средств, которые пациент может легко использовать, не нарушая привычного образа жизни, например таких, которые были бы представлены в виде пищевых продуктов, подходящих для ежедневного приема.
Краткое описание сущности изобретения
Настоящее изобретение относится к Eubacterium hallii et rel. и/или к Alcaligenes faecalis et rel., применяемых для профилактики и/или лечения инсулинорезистентности и/или состояний, связанных с инсулинорезистентностью, таких как метаболический синдром, дислипидемия и сахарный диабет 2 типа, а также инсулинорезистентности, возникающей при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах).
Во втором аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической, пищевой или кормовой композиции, включающей Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel., для целей их использования при профилактике и/или лечении инсулинорезистентности и/или родственных состояний, таких как метаболический синдром дислипидемия и сахарный диабет 2 типа, а также инсулинорезистентности, возникающей при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах).
В еще одном аспекте настоящее изобретение относится к способу профилактики и/или лечения инсулинорезистентности и/или родственных состояний у субъекта, при наличии такой необходимости, где указанный способ включает стадию повышения уровня Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в тонком кишечнике. Уровень присутствующих в тонком кишечнике бактерий Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. может быть повышен по способу, выбранному из группы, состоящей из введения указанному субъекту эффективного количества Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. и введения эффективного количества соединения, способного повысить в тонком кишечнике уровень Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel.
В другом своем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической, пищевой или кормовой композиции, включающей Alcaligenes faecalis et rel. Указанная композиция может представлять собой напиток. Указанная фармацевтическая, пищевая или кормовая композиция, включающая Alcaligenes faecalis et rel., может применяться в качестве лекарственного средства.
Определения
В контексте настоящего описания термин "инсулинорезистентность" употребляется в общепринятом в данной области значении. Инсулинорезистентность представляет собой физиологическое состояние, при котором природный гормон инсулин становится менее эффективным по снижению уровня сахаров в крови. Это может привести к тому, что уровень глюкозы в крови может выйти за пределы нормального диапазона и вызвать неблагоприятные эффекты на здоровье, такие как метаболический синдром, дислипидемия и впоследствии сахарный диабет 2 типа. Термин "осложнения, связанные с инсулинорезистентностью" и "состояния, связанные с инсулинорезистентностью" в контексте настоящего описания включают, без ограничения, метаболический синдром, дислипидемию и сахарный диабет 2 типа, а также инсулинорезистентность, возникающую при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах).
Добавление сочетания "et rel." после обозначения родовой группы бактерий (2 уровень в названии группы) означает "и родственные", т.е. указывает на то, что включаются все родственные представители этой филогенетической группы, а именно те представители, которые указаны в таблице 3 в WO 2011/043654 (где указанная работа включена в настоящее описание в качестве ссылки), в колонке, озаглавленной как "уровень 3". Эта информация, включающая приведенные там генные последовательности 16S рРНК, может использоваться для разработки специфических ПЦР праймеров или ЛЦР (LCR) зондов для выявления одного или большего числа представителей этих групп. В ряде работ добавляемое словосочетание "et rel." заменяется на "подобный", чтобы указать на тот факт, что данная группа включает более чем один родственный вид. Однако это, скорее, не совсем четкое обозначение и в этой связи все термины с добавлением "et rel." определяются в таблице 3 из WO 2011/043654, где указанный материал был также опубликован в Rajilic-Stojaniovic et al. (2007. Environ. Microbiol. 9(9):2125-2136).
В контексте настоящего изобретения рассматриваемый субъект может представлять собой животное или человека. Предпочтительно указанным субъектом является человек. Термин "здоровый субъект", используемый в тексте настоящего описания, не страдает от инсулинорезистентности и/или сахарного диабета и предпочтительно не имеет нарушений или заболеваний в области желудочно-кишечного тракта, и более предпочтительно не имеет любых других известных медицинских состояний или заболеваний. Предпочтительно описываемый здесь "здоровый субъект" характеризуется индексом массы тела (BMI) в диапазоне значений от 18,5 до 24,9 мг/м2.
В контексте настоящего описания уровень бактерий из таксона Eubacterium halli et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel., присутствующих в образце, например в образце, взятом из кишечника (таком, как дуоденальный образец или фекальный образец), повышается в том случае, когда он становится значительно больше, чем уровень одной или нескольких других из числа указанных бактерий в контрольном образце, например в контрольном образце из кишечника (таком, как дуоденальный образец или фекальный образец). Считается также, что он повышается, когда уровень бактерий из таксона Eubacterium halli et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в образце превосходит по меньшей мере на 5%, например на 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50% уровень бактерий из таксономической группы Eubacterium halli et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в контрольном образце. В тексте настоящего описания термин "контрольный образец" относится к образцу, взятому у субъекта, который проходит лечение, проводимое путем введения бактерий из таксона Eubacterium halli et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel., перед введением указанных бактерий из таксономической группы Eubacterium halli et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel., необязательно в эффективном количестве.
В контексте настоящего описания термин "эффективное количество" относится к количеству, которое является достаточным для достижения желательного терапевтического и/или профилактического эффекта, например представляет собой количество, которое приводит к лечению и/или профилактике инсулинорезистентности и/или родственных осложнений, таких как дислипидемия и сахарный диабет 2 типа, а также инсулинорезистентности, возникающей при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах). В контексте терапевтического или профилактического применения количество вводимых субъекту бактерий будет зависеть от вида и серьезности заболевания или состояния и от показателей, характеризующих самого субъекта, таких как общее состояние здоровья, возраст, пол, масса тела и толерантность к лекарственным средствам. Указанное количество будет также зависеть от стадии развития заболевания или состояния, их тяжести и типа. Любой специалист со средним уровнем знаний в данной области может определить подходящую дозировку, зависящую от этих и других факторов. Рассматриваемые бактерии могут также вводиться в сочетании с одним или несколькими дополнительными фармацевтическими средствами. В частности, применяемая в контексте бактерий фраза "терапевтически эффективное количество" обозначает уровни бактерий, которые ведут к улучшению физиологических эффектов заболевания или состояния, ассоциированного с инсулинорезистентностью и/или родственными осложнениями типа дислипидемии и сахарного диабета 2 типа, а также с инсулинорезистентностью, возникающей при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах). Любой специалист со средним уровнем знаний в данной области может определить, в каком случае следует проводить лечение или профилактику такого заболевания или состояния.
В данном документе и в прилагаемой к нему формуле изобретения глагол "включать" и различные его формы используется в неограничительном смысле и означает, что следующие за ним позиции включаются, но при этом позиции, которые конкретно не названы, не исключаются из определения. Кроме того, глагол "состоять" может быть заменен сочетанием "состоять по существу”, которое означает, что композиция по настоящему изобретению может включать один или несколько дополнительных компонентов, кроме тех, что были конкретно указаны, и эти один или несколько дополнительных компонентов не меняют уникальных характеристик, свойственных настоящему изобретению.
Дополнительно ссылка на какой-либо элемент посредством использования для этого неопределенного артикля "a" или "an" не исключает возможность того, что присутствует более чем один такой элемент, если из контекста явно не следует, что должен быть один и только один такой элемент. Таким образом, неопределенный артикль "a" или "an" обычно следует понимать как "по меньшей мере один".
Подробное описание изобретения
Авторы настоящего изобретения выявили причинную роль мелкой микробиоты тонкого кишечника в развитии инсулинорезистентности и дислипидемии. У 18 здоровых мужчин со свежим диагностированным метаболическим синдромом взяли образцы биопсии из тонкого кишечника, с последующим промыванием кишечника полиэтиленгликолем через дуоденальный зонд, и далее распределили их случайным образом на группы, в которых проводили аллогенную или аутологичную фекальную трансплантацию. Аллогенную фекальную трансплантацию проводили в группе из 9 человек, где фекальный материал был получен от здорового и худого донора.
Группа с аутологичной трансплантацией включала 9 других человек, которым трансплантировали их собственный фекальный материал.
Было показано, что субъекты из так называемой аллогенной группы характеризовались иной макробиотой в сигмовидной кишке, нежели это было показано для аутологичной группы, как следовало из результатов анализа с использованием филогенетического микрочипа (чип для использования в кишечном тракте человека (the Human Intestinal Tract Chip), HITChip) (Rajilic-Stojanovic. 2009. Environ. Microbiol. 11(7):1736-1751). Уровень TG-обогащенных липопротеинов в состоянии натощак (соотношение TG/ApoB) значительно снижался у субъектов в аллогенной группе, тогда как вовсе не менялся после инфузии аутологичных фекалий. Хотя вес исследуемых субъектов оставался стабильным, через 6 недель после трансплантации фекалий, было обнаружено улучшение как с точки зрения периферической (Rd), так и печеночной чувствительности к инсулину (супрессия EGP) через 6 недель у испытуемых в аллогенной группе, тогда как никаких заметных изменений не наблюдалось в группе, получавшей аутологичный материал.
Авторы настоящего изобретения идентифицировали изменения кишечной микробиоты, наблюдавшиеся между субъектами в группах аллогенной и аутологичной трансплантации фекального материала. Сравнение микробиоты в тонком кишечнике, наблюдаемой на базовом уровне и через 6 недель в группе с аллогенной трансплантацией, показало повышение уровня бактерий, относящихся к обитателям повздошной кишки Alcaligenes faecalis, а также к продуценту бутирата Eubacterium halli. Следует особо отметить, что уровень указанного продуцента бутирата снижался почти в два раза после инфузии в группе аутологичного введения. Бактерии, относящиеся к Eubacterium hallii et rel., включают относительно быстро растущих анаэробов. Они обладают способностью метаболизировать лактат в бутират в ходе процесса, зависимого от ацетата (Munoz-Tamayo et al 2011 FEMS Microbiol Ecolo 76: 615-624). Лактат и ацетат относятся к метаболитам, обильно представленным в верхнем отделе кишечника, который заселен другими стрептококками и лактобациллами, способными продуцировать эти соединения (Booijink et al 2010, vide supra). Однако один определенный аспект настоящего изобретения относится к субстратам, лактату и ацетату, включенным в композицию, содержащую бактерии, относящиеся к таксону Eubacterium hallii et rel. Бактерии, относящиеся к Alcaligenes faecalis (входящие в таксон Alcaligenes faecalis et rel.), представляют собой факультативные анаэробные бактерии, которые способны разлагать широкий диапазон субстратов, причем они обладают уникальной способностью продуцировать закись азота и оксид азота в низкокислородных условиях в присутствии аммиака (Anderson et al 1993 Appl Environ Microbiol 95: 3525-33). Так как в верхнем отделе кишечника создаются такие условия, то вполне вероятно, что Alacaligenes faecalis продуцирует оксид азота. Авторы предположили, что оксид азота может действовать как терапевтическое средство при лечении пациентов с диабетом 2 типа и с метаболическим синдромом (Ahanchi et al 2008. Am J Physiol Heart Circ Physiol 295: H2388-98). Тогда как поступление закиси азота посредством его продукции кишечными бактериями не было описано.
Таким образом, настоящее изобретение относится к бактериям из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или к бактериям из таксона Alcaligenes faecalis et rel., применяемым при профилактике и/или лечении осложнений, связанных с инсулинорезистентностью, таких как метаболический синдром, дислипидемия и сахарный диабет 2 типа, а также с инсулинорезистентностью, возникающей при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах). В другом варианте настоящее изобретение относится к бактериям из таксона Eubacteiium hallii et rel. и/или к бактериям из таксона Alcaligenes faecalis et rel., применяемым при профилактике и/или лечении клинического состояния у млекопитающего, такого как человек, которое возникает в результате того, что эндогенный гормон инсулин становится менее эффективным по снижению уровня сахаров в крови, с последующим изменением профилей холестерина в плазме крови. Неограничивающие примеры таких клинических состояний включают метаболический синдром, дислипидемию и сахарный диабет 2 типа, а также инсулинорезистентность, возникающую при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах). Бактерии, относящиеся к одному из этих таксонов, могут использоваться сами по себе как лекарственное средство для достижения указанных целей, или бактерии из таксона Eubacteiium hallii et rel. и бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут использоваться в сочетании как лекарственное средство. Кроме того, может использоваться сочетание бактерий из любого одного таксона или бактерий из этих таксонов, взятых вместе, с используемыми в настоящее время в клинической практике терапевтическим агентами (например, такими как бигуаниды, производные сульфонуреума, агонисты PPAR-гамма (гамма-рецепторы, активируемые пероксисомными пролифераторами), ингибиторы DPPIV (дипептилпептидазы IV), а также инъецируемые формы препаратов типа агониста GLP1 (глюкагоноподобный пептид-1) и/или экзогенный инсулин быстрого/длительного действия).
Настоящее изобретение также относится к фармацевтической, пищевой или кормовой композиции, включающей Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel., применяемой при профилактике и/или лечении инсулинорезистентности и/или родственных осложнений типа дислипидемии и сахарного диабета 2 типа. Указанная фармацевтическая, пищевая или кормовая композиция предпочтительно включает эффективное количество Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. Предпочтительно указанная фармацевтическая, пищевая или кормовая композиция включает в целом от примерно 106 до примерно 1012, предпочтительно от примерно 108 до примерно 1012, бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel. Предпочтительно указанные бактерии присутствуют в композиции в количестве, равном дневной дозе.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической, пищевой или кормовой композиции, включающей Alcaligenes faecalis et rel., необязательно применяемой в качестве лекарственного средства. Указанная композиция может включать носитель, такой как инертный носитель.
Предпочтительно описываемая здесь композиция пригодна для энтерального или перорального введения. Композиция для энтерального или перорального введения может представлять собой пищевую композицию, кормовую композицию или фармацевтическую композицию. Такая пищевая композиция, кормовая композиция или фармацевтическая композиция не включает фекальные композиции или композиции, полученные из фекальных композиций. Рассматриваемая фармацевтическая композиция обычно будет включать носитель, такой как фармацевтический носитель, в дополнение к бактериям из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактериям из таксона Alcaligenes faecalis et rel. Указанный носитель представляет собой предпочтительно инертный носитель. Предпочтительная форма носителя зависит от предполагаемого способа варианта (терапевтического) применения. Фармацевтический носитель может быть представлен совместимым, нетоксичным веществом, подходящим для доставки бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel. в желудочно-кишечный тракт субъекта. Так, например, в качестве носителя может использоваться стерильная вода или инертные твердые вещества, применяемые обычно с добавлением фармацевтически приемлемых адъюванта, забуферивающего вещества, средства, способствующего диспергированию, и т.п. Рассматриваемая композиция может представлять собой либо жидкость, например это может быть стабилизированная суспензия бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel., либо разные варианты твердой формы, такие как порошок лиофилизированных бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel. В случае лиофилизации может быть применен криопротектор, такой как лактоза, трегалоза или гликоген. Так, например, в случае перорального введения бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут быть использованы в виде твердых дозированных форм, таких как капсулы, таблетки и порошки, или в виде жидких дозированных форм, таких как эликсиры, сиропы и суспензии. Бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут быть включены в состав капсул, таких как желатиновые капсулы, вместе с неактивными ингредиентами и порошкообразными носителями, такими как, например, глюкоза, лактоза, сахароза, маннит, крахмал, целлюлоза или производные целлюлозы, стеарат магния, стеариновая кислота, натрий-сахарин, тальк, карбонат магния и т.п.
Предпочтительная композиция по настоящему изобретению представляет собой такую композицию, которая пригодна для ее потребления субъектом, который представляет собой предпочтительно человека или животное, отличное от человека. Такие композиции могут быть представлены в форме пищевой добавки или пищи или пищевой композиции (в целом обозначаемые здесь как "пищевая композиция"), которые, помимо бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel., также содержат подходящую пищевую основу. Альтернативно такая композиция может быть представлена в форме кормовой добавки или кормового вещества, или кормовой композиции (в целом обозначаемые здесь как "кормовая композиция"). Пища или пищевая композиция, или корм или кормовая композиция в контексте настоящего изобретения обозначает жидкость, пригодную для применения человеком или животным, отличным от человека, например это может быть питье или напиток. Пища или пищевая композиция или кормовая композиция может также иметь вид твердой, полутвердой или жидкой пищи, или пищевой композиции, и в частности может также представлять молочный продукт, такой как ферментированный молочный продукт, включающий, без ограничения, йогурт, напиток на основе йогурта или пахту. Указанные пища или пищевая композиция, или кормовая композиция могут быть получены по способу, который по сути уже известен, например, путем добавления в соответствующем количестве бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel. к подходящей пище, пищевой основе или кормовой основе. Аналогично указанный способ может включать использование указанных бактерий в инкапсулированной форме, как было описано выше, поскольку в этом случае они могут проходить через желудок с низким значением pH. Этот способ может быть предпочтительным, поскольку в этом случае снижается уровень следовых количеств бутирата, связанных с ростом бактерий, относящихся к таксону Eubacterium hallii et rel., и которые могут придавать неприятный запах пище или пищевой композиции. В другом варианте осуществления настоящего изобретения бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут вводиться в пищу, пищевую композицию или кормовую композицию или использоваться для их получения, например, путем ферментации. При таком варианте бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут использоваться по способу, который по сути уже известен, для получения таких ферментированных пищевых продуктов или пищевых композиций, или кормовых композиций, например, по уже известному способу получения ферментированных молочных продуктов с использованием молочнокислых бактерий. В рамках таких способов бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут использоваться в дополнение к обычно используемому микроорганизму, и/или они могут замещать один или несколько обычно используемых микроорганизмов или их часть.
Предпочтительно указанные выше композиции будут содержать бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. в количествах, которые удобны для введения (перорального), как было указано выше, например, в виде одной или нескольких доз в день или в неделю. В частности, препарат может содержать стандартную дозу бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel.
В другом своем аспекте настоящее изобретение относится к способу профилактики и/или лечения инсулинорезистентности и/или связанных к нею осложнений типа дислипидемии и сахарного диабета 2 типа у субъекта, при наличии у него такой необходимости, где указанный способ включает стадию повышения уровня Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в тонком кишечнике.
Уровень указанных бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel. может быть определен посредством анализа уровня последовательностей нуклеиновых кислот, аминокислотных последовательностей и/или метаболитов, специфичных для указанных, одной или нескольких, бактерий, и, предпочтительно, уровня последовательностей нуклеиновых кислот, специфичных для указанных одной или нескольких бактерий.
Уровень одной или нескольких бактерий предпочтительно может быть определен при оценке уровня специфичных последовательностей нуклеиновых кислот в исследуемом образце, взятом из тонкого кишечника, где указанные последовательности нуклеиновых кислот представляют собой предпочтительно генные последовательности 16S рРНК бактерий из таксона Eubacterium hallii et rel. и/или бактерий из таксона Alcaligenes faecalis et rel., более предпочтительно один или несколько вариабельных участков из генных последовательностей указанной 16S рРНК, например один или несколько вариабельных участков V1 и/или V6 из генных последовательностей указанной 16S рРНК.
Уровень бактерий Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в тонком кишечнике может быть повышен по способу, выбранному из группы, состоящей из введения эффективного количества Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. рассматриваемому субъекту и введения эффективного количества соединения, способного повысить уровень Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в тонком кишечнике. Соединения, способные повысить уровень Eubacterium hallii et rel. в тонком кишечнике, включают, без ограничения, лактат и ацетат. Альтернативно Eubacterium hallii et rel. может быть введен в сочетании с бактериями, продуцирующими молочную кислоту, такими как Lactobacillus spp. и Bifidobacterium spp. Бактерии, продуцирующие молочную кислоту, могут присутствовать в ферментированном пищевом продукте, таком как йогурт или напиток на основе йогурта, которые хорошо известны, и к указанному продукту могут быть добавлены бактерии Eubacterium hallii et rel. Соединения, способные повысить уровень Alcaligenes faecalis et rel. в тонком кишечнике, могут включать, без ограничения, субстраты, позволяющие получать закись азота и оксид азота в низкокислородных условиях в присутствии аммиака.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения бактерии из таксона Eubacterium hallii et rel.представляют собой бактерии Eubacterium hallii штамм L2-7. Штамм L2-7 (DSM 17630) Eubacterium hallii доступен от компании Deutsche Sammlung von Mikroorganismen (DSMZ). Бактерии из таксона Alcaligenes faecalis et rel. могут, например, культивироваться по методу, описанному в Annamalai et al. (Ann Microbiol. 2011 December; 61(4): 801-807).
Любой специалист со средним уровнем знаний в данной области сможет легко подобрать эффективное количество соединения, способного повышать уровень Eubacterium hallii et rel. и/или Alcaligenes faecalis et rel. в тонком кишечнике с использованием стандартных способов, которые уже хорошо известны.
Все ссылки на патентные публикации и научные статьи, приведенные в данном описании, полностью включены в него в качестве ссылок.
Следует понимать, что представленное выше описание имеет своей целью проиллюстрировать некоторые варианты осуществления настоящего изобретения, но оно никоим образом не ограничивает область настоящего изобретения. На основе приведенного в данном описании материала для специалиста в данной области будут очевидны многие другие варианты, которые охватываются областью притязаний настоящего изобретения, включая суть настоящего изобретения и очевидные сочетания известных методик и описанных в настоящем изобретении.
Примеры
Пример 1
Способы. Проводили рандомизированное контролируемое испытание с двойной слепой меткой, в рамках которого у субъектов с ожирением оценивали эффект однократной аллогенной инфузии фекальной микробной флоры (от худого донора) на метаболизм глюкозы, применительно к составу кишечной микробиоты.
Субъекты. По показателям метаболического синдрома, таким как окружность талии >102 см и уровень глюкозы натощак >5,6 ммоль/1,17, проводили скрининг среди лиц с ожирением мужского пола, относящихся к белой расе. В испытание не включали субъектов с холецистэктомией и/или лиц, подвергавшихся какой-либо лекарственной терапии и/или применявших пробиотики и/или антибиотики за последние три месяца. Все лица, включенные в испытание, дали свое письменное согласие. Протокол испытания, утвержденный экспертным советом Института (Institutional Review Board), проводили в соответствии с принципами Хельсинкской Декларации (Declaration of Helsinki) (1996). Испытание было зарегистрировано в Голландском каталоге испытаний (Dutch Trial Register) (NTR1776).
Скрининг худых доноров
По объявлению в газете были найдены худые мужчины белой расы (индекс массы тела (BM)I<23 кг/м2) для включения в испытание. Они заполнили анкету, касающуюся ритма опорожнения кишечника, поездок, которые они совершали, наличия сопутствующих заболеваний и применения лекарственной терапии. Провели скрининг лиц, включенных в испытание, на наличие инфекционных заболеваний с использованием адаптированной версии анкеты, разработанной Голландской службой переливания крови (Dutch Blood Transfusion service) (Sanquin)(Langeveld et al. 2008. J Clin Endocrinol Metab;93(3):845-851). Кровь исследовали на наличие антител к вирусу иммунодефицита человека; Т-лимфотропному вирусу человека; вирусу гепатита A, B и C; цитомегаловирусу, вирусу Эпштейна-Барра, стронгилоидоза и амебиаза. Доноров также исключали, если при скрининге их фекалий выявлялись паразитарные формы (например, Blastocystis hominis или Dietamoeba fragilis), Clostridium difficile и другие возможные патогенные бактерии (Shigella, Campylobacter, Yersinia, Salmonella).
Протокол проведения эксперимента
Метаболизм глюкозы оценивали на базовом уровне и в ходе двустадийного эугликемического гиперинсулинемического «клэмп»-теста для определения эндогенной продукции глюкозы (EGP), печеночной и периферической чувствительности к инсулину (Rate of disposal, Rd) с использованием [6,6 2H2]-глюкозы. Регистрировали вес тела и анализировали состав тела с использованием биоимпеданс диагностики. Показатель затраты энергии в покое (REE) и дыхательный коэффициент определяли по методу непрямой калориметрии (Langeveld, J Clin Endocrinol Metab 2008;93(3):845-851).
Участникам испытания разрешили придерживаться их обычной диеты, но попросили вести дневник по питанию с еженедельным вводом онлайн (www.dieetinzicht.nl) для отслеживания количества потребляемых калорий. После ночного голодания испытуемые и доноры принесли свежеполученный утренний кал для анализа; исследуемых субъектов распределили случайным образом в двойном слепом режиме по группам, в которых проводят аллогенную (от худых доноров мужского пола с индексом массы тела <23 кг/м2) или аутологичную (их собственный кал) микробную инфузию в кишку путем гастродуоденальной инфузии (см. процедуру). Вначале исследуемых субъектов подвергали гастродуоденоскопии, отбирали образцы биопсии из тонкого кишечника (в зоне тощей кишки) рядом со связкой Трейтца. Биопсийные образцы собирали в стерильные пробирки, быстро замораживали в жидком азоте и обрабатывали по описанному ранее методу (Langeveld et al., supra). Вводили дуоденальный зонд и проводили промывание кишечника раствором макрогола в течение 5 часов для очищения от фекального загрязнения после инфузии кишечной микрофлоры. Биопсию под контролем гастродуоденоскопии и эугликемический гиперинсулинемический «клэмп»-тест повторяли через 6 недель после трансплантации.
Эуглиемический гиперинсулинемический «клэмп»-тест
После 12-часового голодания вводили катетер в латеральную подкожную вену руки для инфузии меченной стабильным изотопом [6,6-2H2]глюкозы (Cambridge Isotopes, Andover, MA), инсулина и глюкозы. Второй катетер вводили ретроградно в вену контралатеральной руки и держали в терморегулируемой (60ºC) прозрачной пластиковой коробке для отбора образцов венозной крови, превращенной в артериальную. Проводили инфузию 0,9% NaCI со скоростью течения 50 мл/час, чтобы поддерживать в спокойном состоянии катетеры. В момент времени t=0 час (0800) отбирали образцы крови для определения фонового обогащения. Затем начинали примированную непрерывную инфузию меченной изотопом [6,6-2H2]-глюкозы (первая фаза 8,8 мкмоль/кг; непрерывная инфузия 0,11 мкмоль/кг/мин) и продолжали инфузию до окончания «клэмп»-теста. После завершения 2-часового периода установления равновесия отбирали образцы крови для изотопного анализа и образцы для определения глюкорегуляторных гормонов, свободных жирных кислот (СЖК (FFA)) и инкретинов. После этого (t=2,0 часа) проводили 2-стадийный эугликемический гиперинсулинемический «клэмп»-тест: 1 стадия теста включала инфузию инсулина со скоростью 20 мЕд/м2/мин (Актрапид (Actrapid) 200 МЕ/мл; компания Ново Нордиск Фарма BV, Нидерланды (Novo Nordisk Farma BV, Alphen aan den Rijn, Netherlands)) для оценки печеночной чувствительности к инсулину. Начинали инфузию 20% глюкозы для поддержания концентрации глюкозы в плазме крови на уровне 5 ммоль/л. Концентрации глюкозы в плазме измеряли каждые 5 минут у кровати с использованием глюкометра Бекмана (Beckman). Через 2 часа (t=4 часа) с 5-минутными интервалами отбирали образцы крови для измерения концентраций глюкозы и изотопного анализа. Другой образец крови отбирали для определения уровня глюкорегуляторных гормонов и свободных жирных кислот. После этого повышали скорость инфузии инсулина до значения 60 мЕд/м2/мин (стадия 2) для оценки периферической чувствительности к инсулину. Еще через 2 часа (t=6 час) повторяли отбор крови для анализа.
Состав крови определяли на базовом уровне и через 6 недель по методу биоэлектрического импедансного анализа (Maltron BF906; Maltron, Rayleigh, UK). Потребление кислорода (VO2) и продукцию СО2 (VCO2) измеряли постоянно, в течение последних 20 минут на базовом уровне и в ходе эугликемического гиперинсулинемического «клэмп»-теста путем непрямой калориметрии с использованием вентилируемой вытяжки (Sensormedics model 2900; Sensormedics, Anaheim, CA). Показатель затраты энергии в покое (REE), уровни окисления углеводов (СНО) и окисления свободных жирных кислот (FAO) рассчитывали исходя из значений потребления кислорода и продукции диоксида углерода. Скорость появления (Ra) и скорость исчезновения глюкозы (Rd) рассчитывали с использованием модифицированной формы уравнений Стила (Steele) для измерений в нестационарном состоянии, как было описано ранее. Рассчитывали эндогенную продукцию глюкозы (EGP) для 38 образцов на основе разницы между появлением глюкозы Ra и скоростью инфузии глюкозы. Как периферическую (Rd), так и печеночную чувствительность к инсулину (по супрессии EGP) рассчитывали и выражали как среднее значение в виде диапазона.
Анализ кишечной микробиоты
Выделение ДНК
ДНК выделяли и очищали по методу, включающему использование повторной разбивки материала смешанными шариками в колонке, как было описано ранее (Zoetendal, Syst Appl Microbiol 2001;24(3):405-410). Для выделения ДНК из образцов биопсии авторы использовали другой протокол разбивки шариками (Nadkarni et al. 2002. Microbiology 2002;148(Pt 1):257-266). Вкратце, процедура состояла в том, что 0,5 грамм (сырой вес) фекалий суспендировали в лизирующем буфере (500 мМ NaCI, 50 мМ Трис-HCI, pH 8, 50 мМ ЭДТА, 4% ДСН), в котором содержались циркониевые шарики и стеклянные шарики. Пробирку встряхивали на Fastprep (установленном на отметке 5,5) в течение 3 мин при температуре 4ºC и затем проводили инкубацию при температуре 95ºC в течение 15 минут. ДНК в супернатанте осаждали при добавлении ацетата аммония и изопропанола, промывали 70% этанолом и затем обрабатывали протеиназой K и РНКазой, не содержащей ДНКазы. В конце процедуры ДНК очищали на QIAamp «спин» колонке (Qiagen) в соответствии с инструкциями производителя. Определяли концентрацию ДНК с использованием спектрофотометра NanoDrop 1000 (Nanodrop® Technologies, Wilmington, DE).
Определение профиля микробиоты с использованием чипов HITChip
Использовали чипы HITChip для определения филогенетического профиля микробиоты в фекалиях и образцах биопсии из тонкого кишечника, как было описано ранее (Rajilic-Stovanojic. 2009, supra). Вкратце, процедура состояла в том, что на основе 10 нг ДНК проводили амплификацию генных последовательностей 16S рРНК с использованием праймеров T7prom-Bact-27-for и Uni-1492-rev, после чего проводили транскрипцию in vitro и мечение Cy3 и Cy5 соответственно фекальных образцов. Праймер Prok-1369-rev использовали в качестве обратного праймера для биопсийных образцов, поскольку Uni-1492-rev в основном направлен на присутствующую в очень высоких количествах человеческую ДНК, что приводит к снижению эффективной амплификации генной последовательности 16S рРНК для бактериального гена (данные не приведены). Эквимолярные смеси меченных Cy3/Cy5 мишеней для 16S рРНК фрагментировали и далее подвергали гибридизации на микроносителях при температуре 62,5ºC в течение 16 часов в ротационной печи (Agilent Technologies, Amstelveen, The Netherlands), после чего слайды промывали и сушили. Образцы группировали в виде дуплексов (техническая репликация). После сканирования слайдов полученные данные выгружали из микроносителей с использованием программного обеспечения Agilent Feature Extraction, версии 7.5-9.1 (http://www.agilent.com). Затем данные анализа микроносителей нормализовали с использованием минимаксной стратегии и далее анализировали набор R-скриптов (http://vww.r-project.org/) в сочетании с использованием соответствующей базы данных, работающей под контролем системы управления базами данных MySQL (http://www.mysql.com). Иерархическую кластеризацию профилей зондов проводили с использованием метода оценки интервала корреляций и полного сцепления.
Процедура трансплантации фекалий
В день проведения инфузии пациент и донор приносили свежий кал (примерно 200 грамм, полученный в течение 6 часов перед планируемым использованием). Образцы фекалий (аллогенные или аутологичные) отбирали до и после обработки для оценки влияния процедуры обработки на состав присутствующих в образце микробов. Полученный кал заливали 500 мл стерильного солевого раствора (0,9% NaCl), переносили в блендер и перемешивали в течение 10 минут. Затем гомогенизированный раствор дважды фильтровали через чистое металлическое сито. После этого полученный фильтрат переносили в стерильную стеклянную бутыль объемом 1000 мл и хранили при комнатной температуре до завершения промывки кишечника у пациента. В итоге полученный из фекалий микробный раствор постепенно вводили через дуоденальную трубку, примерно в течение 30 минут.
Биохимия
Получали образцы плазмы натощак для определения уровней общего холестерина, холестерина ЛПНП (LDLc), холестерина ЛПВП (HDLc) и триглицеридов (ТГ (TG)) с использованием коммерчески доступных ферментативных наборов для тестирования (Randox, USA and Daiichi, Japan). Все анализы проводили с использованием автоматического анализатора Cobas Mira (Horiba, France). ЛПС-связывающий белок (ЛПБ (LBP)) и C-реактивный белок (СРБ (CRP)) определяли с использованием коммерчески доступного набора для ИФТФА (ELISA) (HyCult, USA and Roche, Switzerland). Концентрации короткоцепочечных жирных кислот в фекалиях, включающи[ ацетат, бутират и пропионат, определяли по описанной ранее методике (Wolever et al. 2000. Br J Nutr;84(1):57-61).
Анализ реакции кишечной микробиоты и слизистой организма-хозяина
Отбирали образцы утреннего стула на базовом уровне и через 6 недель соответственно как у доноров, так и у испытуемых субъектов для определения состава микробиоты. Образцы собирали в два пластиковых контейнера, сразу же замораживали при температуре -20ºC и затем в течение недели переносили в условия с температурой -80ºC. Состав микробиоты в образцах биопсии из тонкого кишечника и в фекальных образцах анализировали с использованием чипа для кишечного тракта человека (Human Intestinal Tract Chip (HITChip)), на специально изготовленном микроносителе Agilent (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA), содержащем примерно 5500 олигонуклеотидных зондов, которые охватывают свыше 1000 фенотипов кишечника (Rajilic-Stojanovic et al. 2009, vide supra). Количественную оценку общего числа бактерий и метаногенов проводили по методу количественной ПЦР на основе генной последовательности 16S рРНК с использованием той же ДНК, которую брали для HITChip анализа. Полученные с использованием экспрессионных биочипов Human HT-12 v3 данные по транскриптому из биоптата тонкого кишечника (lllumina, San Diego, USA) выгружали на Gene Expression Omnibus (registrationnumber: GSE30854). Более подробно анализ кишечной микробиоты и анализ биочипов приведен в приложении к данному описанию.
Статистический анализ
Статистический анализ проводили с использованием программного обеспечения SPSS, версия 16. Полученные данные выражали в виде среднего значения ± стандартная ошибка среднего (нормальное распределение) или среднего значения (несимметричное распределение). Для сравнения данных между группами использовали параметрический t-критерий Стьюдента (нормальное распределение) или критерий знаковых рангов Уилкоксона (несимметричное распределение). Все приведенные значения P являются двусторонними. Экспрессионный анализ для HITChip и llumina биочипов проводили с использованием линейного смешанного метода и метода решающих деревьев, а также анализа канонических корреляций (CCA). Статистическую обработку данных проводили на программном обеспечении Microsoft Office Excel или R для статистического анализа (http://r-project.org/).
Статистический анализ HITChip и llumina биочипов
Экспрессионный анализ на HITChip и llumina биочипов проводили с использованием пакета прикладных программ NLME (Pinheiro and Bates. Mixed-effect models in S and S-plus. Springer; 2000). Строили линейную смешанную модель для оценки влияния времени (0 или 6 недель), режима обработки (аутологичный или аллогенный вариант), а также создавали модель для оценки перекрестного воздействия двух основных эффектов. Примененный в эксперименте формат повторных измерений дополняли включением специфичного для пациента случайного эффекта. Для каждой измеряемой единицы (ген или бактерии) рассчитывали различия с использованием пакета программ multcomp и полученные при этом значения величины p корректировали, проводя множественные сравнения с использованием пакета программ q-value (Bretz. HTWP. Multiple Comparisons Using R. CRC Press, Boca Raton, 2010; Storey J.A. A direct approach to false discovery rates. Journal of the Royal Statistical Society Series B (statistical methodology) 2010;64(3):479-498). Индивидуальную временную стабильность фекальной микробиоты у пациентов в обеих группах определяли, рассчитывая корреляцию Пирсона на олигонуклеотидном уровне между образцами, отобранными во время трансплантации и через 6 недель соответственно.
В образцах из тощей кишки, бактериальные группы, ассоциированные с разницей между аллогенными и аутологичными группами, определяли по методу решающих деревьев на основе данных об изменении бактериального состава до трансплантации и через 6 недель после трансплантации в качестве ковариантов. Затем использовали усреднение по бутстрепу (бэггинг) (Breiman. Bagging predictors. Machine Learning 1996;24(2)) в сочетании с анализом избыточности с получением жесткой оценки исследуемых бактериальных групп, определяющих различие, для оценки p-величины расхождения и для визуализации. Ассоциацию между генной экспрессией и образцами из тощей кишки оценивали с использованием анализа канонических корреляций разреженных матриц (CCA разреженных матриц). Для снижения эффекта слишком близкой подгонки исследовали набор коррелируемых генов, состоящий из десяти генов, для которых наиболее выражено различие в экспрессии. Данные по микробиоте включали данные по HITCHip на шести таксонах, для которых было показано, что они вносят существенный вклад в различие между аутологичными и аллогенными образцами в образцах из тощей кишки. В рамках CCA анализа регуляризацию параметров вначале оценивали по методу перекрестной проверки с исключением. Затем эту модель повторяли применительно ко всем данными и рассчитывали корреляции с каноническими вариантами.
Результаты
Базовые характеристики
Были скринированы 44 мужчины с ожирением на наличие у них признаков метаболического синдрома и 20 из них были включены в испытание. Два субъекта были исключены из анализа в связи с приемом антибиотика в ходе испытания, не связанным с введением микробного трансплантата. Таким образом, в итоге анализы были проведены для восемнадцати субъектов.
Влияние трансплантации фекалий на чувствительность к инсулину, уровни фекальных SCFA и LBP
Семь здоровых худых доноров, один из которых неоднократно был донором, использовали для аллогенной трансплантации девяти субъектам с ожирением, имеющим метаболический синдром. Субъектам с ожирением вводили инфузией равные количества фекалий из аллогенного или аутологичного источника фекальной микробиоты (190±33 и 187±47 грамм, ns). Кроме того, не отличалось время обработки материалf от момента получения фекалий до инфузии (5,8±0,8 и 6,1±1,2 часа в аллогенной и аутологичной группах соответственно). Ни у одного из субъектов с ожирением не выявлялось никаких побочных реакций в ходе испытания и не развивался синдром раздраженного кишечника в соответствии с римскими критериями III.
Вес тела оставался стабильным, как следовало из его значений на базовом уровне и через 6 недель (показатели для аллогенной группы 122,7+19 до 122,5±19 кг, в сравнении с показателями для аутологичной группы: 113,2±20 до 113,4±20 кг, ns). В обеих группах после микробной фекальной инфузии не было отмечено какого-либо эффекта на калорийность потребляемой пищи, показатели затраты энергии в покое или уровень окисления углеводов/жирных кислот (данные не приведены). Отмечалось заметное улучшение периферической чувствительности к инсулину через 6 недель после аллогенной трансплантации фекалий (медианное значение Rd: от 26,2 до 45,3 мкмоль/кг⋅мин, p<0,05), тогда как в группе аутологичной обработки не наблюдалось заметных изменений (медианное значение Rd: от 21,0 до 19,5 мкмоль/кг⋅мин, ns). Наблюдалась тенденция к улучшению печеночной чувствительности к инсулину, выраженная в супрессии EGP относительно базового уровня (медианное значение супрессии EGP: от 51,5 до 61,6%, p=0,08), тогда как никакого эффекта не было выявлено в группе аутологичного введения (медианное значение супрессии EGP: от 53,8 до 52,4%, ns). В обеих группах не наблюдалось изменений в глюкореуляторных гормонах ни на базовом уровне, ни в ходе гиперинсулинемии (данные приведены на файле).
Худые доноры характеризовались повышенным уровнем бутирата и пропионата в сравнении с участниками, страдающими ожирением, признак, который также наблюдался при аллогенной инфузии фекалий. Кроме того?авторы наблюдали значительное снижение уровня липополисахарид-связывающего белка (ЛСБ (LBP)) через 6 недель после трансплантации материала от худого донора (медианное значение ЛСБ (LBP): от 19,9 до 18,6 мкг/мл (p<0,05 и медианное значение СРБ (CRP): от 1,5 до 1,6 мг/л, ns), тогда как никаких значительных изменений не наблюдалось в аутологичной группе (медианное значение ЛСБ (LBP): от 23,0 до 22,3 мкг/мл и медианное значение СРБ (CRP): от 3,1 до 2,5 мг/л, ns).
Эффект фекального трансплантата на микробиоту кишки в фекалиях
Фекальная микробиота у субъектов с ожирением характеризовалась меньшим разнообразием микрофлоры кишки, более высоким содержанием Bacteroidetes и меньшим содержанием бактерий из кластера XlVa Clostridium, в сравнении с худыми донорами (данные не приведены). Для оценки влияния микробной трансплантации авторы сравнивали фекальную микробиоту на базовом уровне и через 6 недель. Общее число фекальных бактерий не менялось после инфузии фекальных микеробов. Через 6 недель анализ видоспецифичного уровня демонстрировал четкое разделение образцов, относящихся к аллогенной и аутологичной группам. В целом, происходило значительное повышение одиннадцати бактериальных групп (в 1,5-2,5 раза) при аллогенной инфузии фекальных микробов, которое существенно влияло на распределение по группам. Указанные группы включали бактерии, относящиеся к известному продуценту бутирата Roseburia intestinalis, Oxalobacte formigenes трансформирующему оксалат, к разным представителям Ruminococci и другим Firmicutes.
Эффект фекального трансплантата на кишечную микробиоту в тонком кишечнике
Общее число бактерий в тонком кишечнике не менялось после инфузии фекальных микробов. Через шесть недель был детектирован набор из семи бактерий, в значительной мере ассоциированных с разницей между аллогенной и аутологичной группами по анализу биоптатов из тонкого кишечника (Таблица 1). Дополнительно проведенные анализы продемонстрировали значительную ассоциацию (r=0,8, p<0,01) между концентрациями Eubacterium hallii в тонком кишечнике и улучшением чувствительности к инсулину (Rd) у испытуемых людей с метаболическим синдромом через 6 недель после трансплантации фекалий от худых доноров. Кроме того, была обнаружена выраженная корреляция (r=0,6, p<0,05) между концентрациями Alcaligenes faecalis и улучшением чувствительности к инсулину (Rd) у испытуемых субъектов с метаболическим синдромом через 6 недель после трансплантации фекалий от худого донора. А именно: уровень E. hallii снижался в аутологичной группе почти в два раза после инфузии. Другие бактерии, уровень которых специфически повышался в аутологичной группе, в сравнении с аллогенной группой включали обитателей повздошной кишки, таких как Lachnobacillus bovis, Streptococcus bovis и Prevotella ruminicola. Уровень Corynebacterium spp. снижался в аллогенной группе, но повышался в аутологичной группе. И, наконец, бактерии, относящиеся к грамотрицательным Escherichia coli, демонстрировали почти двукратное снижение в аллогенной группе и 2-кратное повышение в аутологичной группе (Таблица 1).
Таблица 1 Изменение в микробиоте слизистой тощей кишки после инфузии аллогенного фекального трансплантата (n=9 на группу) |
|||
Филогенетическая группа | Бактериальная группа | Аллогенная группа Кратность изменения после/перед транспланта-цией |
Аутологичная группа Кратность изменения после/перед трансплантацией |
Firmicutes | Eubacterium hallii et rel. | 1,09 | 0,61 |
Proteobacteria | Alcaligenes faecalis et rel. | 1,18 | 0,97 |
Firmicutes | Streptococcus bovis et rel. | 0,89 | 1,23 |
Firmicutes | Lachnobacillus dovis et rel. | 0,63 | 0,98 |
Actinobacteria | Corinebacterium spp. | 0,87 | 1,34 |
Proteobacteria | Escherichia coli et rel. | 0,58 | 2,21 |
Bacteroidetes | Prevotella ruminicola et rel. | 0,99 | 1,01 |
Пример 2
Штамм Eubacterium hallii L2-7, описанный Barcenilla et al (2000, Appl. Environ. Microbiol., Apr;66(4): 1654-61; DSM 17630; который был получен из лаборатории Исследовательского Института в Шотландии от проф. Harry Flint (Rowett 5 Research Institute, Aberdeen, Scotland, UK)), растили в 2 бутылях объемом по 500 мл, каждая, в среде Вилькинса-Шальгрена (Wilkins-Chalgren) (1976, Antimicrob. Agents Chemother. 10. 926-928) в анаэробных условиях, до плотности примерно 2×109 клеток на 1 мл. После этого культуры центрифугировали (10000 об/мин в течение 15 минут при 4ºC), промывали два раза анаэробным ФБР (20 мМ, pH 7, как описано подробно на сайте http://en.wikipedia.org/wiki/Phosphate_buffered_saline) и ресуспендировали в 20 мл 10% глицерина в 20 мМ ФБР с добавкой 20 мМ глюкозы и 20 мМ мальтодекстрина и все при температуре -80ºС в аликвотах по 100 мкл, содержащих примерно 1011 клеток на 1 мл. Все манипуляции выполняли в анаэробных условиях.
Пример 3
8-недельные самцы мышей db/db, фенотип C57BL6, а также самцы мышей C57BL6 были получены из Лаборатории Джексона (Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME, USA) и оставлены для акклиматизации в AMC виварии (ARIA) в течение 2 недель до начала эксперимента. Мыши содержались в условиях постоянного 12-часового светотемнового цикла, с контролируемыми показателями температуры и влажности, и имели свободный доступ к пище (стандартный корм) и воде. Вес тела животных измеряли один раз в неделю. Начиная с 10-недельного возраста, вводили перорально E. hallii в количестве 106, 108 или 1010 КОЕ в 100 мкл концентрированной глюкозы, в качестве носителя (20 мМ). Раствор вводили каждое утро через ротовой зонд с использованием шприца 21 размера, в течение 14 дней (n=8 на группу). В качестве контроля использовали вариант введения только носителя. Мышам db/db вводили через рот культуру Е. Hallii (n=8 на группу) в течение 2 недель с повышением вводимых доз (10×E10/100 мкл, 10×E8/100 мкл и 10×E6/100 мкл) или растворители (солевой раствор + глицерин) соответственно. По методу, описанному в примере 1, оценивали эффект их введения на липидный профиль (измеряли уровни общего холестерина, ЛПНП, ЛПВП и TG в образцах плазмы крови, взятой натощак, как было описано в примере 1), уровень глюкозы в плазме крови натощак и уровни инсулина для оценки резистентности к инсулину (тест HOMA), а также влияние на уровень глюкозы после принятия пищи (оральный тест на толерантность к глюкозе). Количество короткоцепочечных жирных кислот - ацетата, бутирата и пропионата - в периферической и портальной крови определяли на масс-спектрометре (см. Vrieze et al., Gastroenterology 2012, June 20, Epub ahead of print). Кроме того, после умерщвления мышей в образцах из тонкого кишечника и фекалий определяли концентрации E. hallii.
В описанном эксперименте авторы обнаружили выраженное влияние кратковременного перорального введения E. hallii L2-7 в тонкий кишечник на нормализацию инсулинорезистентности (определяемой по расчету показателя HOMA и по постпрандиальному метаболизму глюкозы, оценивая AUC на кривой, описывающей пероральную толерантность к глюкозе), а также на липидный профиль натощак у мышей db/db.
Claims (10)
1. Способ профилактики и/или лечения инсулинорезистентности и/или осложнений, связанных с инсулинорезистентностью, у субъекта, при наличии у него такой необходимости, отличающийся тем, что указанный способ включает стадию повышения уровня Eubacterium hallii в тонком кишечнике.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что уровень Eubacterium hallii в тонком кишечнике повышают по методу, выбранному из группы, состоящей из введения эффективного количества Eubacterium hallii указанному субъекту и введения эффективного количества соединения, способного повысить уровень Eubacterium hallii в тонком кишечнике.
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что содержит введение эффективного количества Eubacterium hallii указанному субъекту.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные осложнения, связанные с инсулинорезистентностью, выбраны из метаболического синдрома, дислипидемии, сахарного диабета 2 типа и/или инсулинорезистентности, возникающей при эндокринных заболеваниях (например, у индивидуумов с сахарным диабетом 1 типа, страдающих ожирением, при болезни Кушинга и при липодистрофических синдромах).
5. Способ по п. 2, где эффективное количество Eubacterium hallii представляет собой количество от примерно 106 до примерно 1012 бактерий из таксона Eubacterium hallii.
6. Способ по п. 2, где эффективное количество Eubacterium hallii вводится указанному субъекту в виде фармацевтической, пищевой или кормовой композиции.
7. Способ по п. 2, где эффективное количество Eubactenum hallii вводится указанному субъекту в лиофилизированной форме.
8. Способ по п. 2, где эффективное количество Eubactenum hallii сформулировано для перорального введения.
9. Способ по п. 6, где эффективное количество Eubactenum hallii содержится в фармацевтической, пищевой или кормовой композиции в суточной разовой дозе.
10. Способ по любому из предшествующих пунктов, где Eubactenum hallii представляет собой Eubacterium hallii штамм L2-7.
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161528931P | 2011-08-30 | 2011-08-30 | |
NL2007319 | 2011-08-30 | ||
NL2007319 | 2011-08-30 | ||
US61/528,931 | 2011-08-30 | ||
PCT/NL2012/050592 WO2013032328A1 (en) | 2011-08-30 | 2012-08-30 | Method for preventing and/or treating insulin resistance |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2014112223A RU2014112223A (ru) | 2015-10-10 |
RU2613322C2 true RU2613322C2 (ru) | 2017-03-15 |
Family
ID=47756609
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2014112223A RU2613322C2 (ru) | 2011-08-30 | 2012-08-30 | Способ профилактики и/или лечения инсулинорезистентности |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9433650B2 (ru) |
EP (1) | EP2753187B1 (ru) |
JP (1) | JP6116568B2 (ru) |
KR (1) | KR101982491B1 (ru) |
CN (1) | CN104244733B (ru) |
AU (1) | AU2012302364B2 (ru) |
BR (1) | BR112014004890A8 (ru) |
CA (1) | CA2851602C (ru) |
DK (1) | DK2753187T3 (ru) |
PL (1) | PL2753187T3 (ru) |
RU (1) | RU2613322C2 (ru) |
SG (1) | SG11201401811WA (ru) |
WO (1) | WO2013032328A1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2734336C1 (ru) * | 2020-03-27 | 2020-10-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ ранней неинвазивной диагностики метаболических нарушений у детей и подростков |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SG11201401811WA (en) | 2011-08-30 | 2014-09-26 | Amc Amsterdam | Method for preventing and/or treating insulin resistance |
BR112014021388A2 (pt) | 2012-02-29 | 2017-07-18 | Ethicon Endo Surgery Inc | composições de microbiota e métodos rela-cionados às mesmas |
US8906668B2 (en) | 2012-11-23 | 2014-12-09 | Seres Health, Inc. | Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof |
CA3212772A1 (en) | 2012-11-23 | 2014-05-30 | Seres Therapeutics, Inc. | Synergistic bacterial compositions and methods of production and use thereof |
EP3584308A3 (en) | 2013-02-04 | 2020-03-04 | Seres Therapeutics, Inc. | Compositions and methods |
EP2951283A4 (en) | 2013-02-04 | 2017-01-25 | Seres Therapeutics, Inc. | Compositions and methods |
WO2014145958A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Seres Health, Inc. | Network-based microbial compositions and methods |
WO2015013214A2 (en) | 2013-07-21 | 2015-01-29 | Whole Biome, Inc. | Methods and systems for microbiome characterization, monitoring and treatment |
RU2722482C2 (ru) | 2013-11-25 | 2020-06-01 | Серес Терапеутикс, Инк. | Синергические бактериальные композиции и способы их получения и применения |
WO2015095241A2 (en) | 2013-12-16 | 2015-06-25 | Seres Health, Inc. | Bacterial compositions and methods of use thereof for treatment of immune system disorders |
GB2551642B (en) | 2014-10-31 | 2020-09-23 | Pendulum Therapeutics Inc | Methods and compositions relating to microbial treatment and diagnosis of disorders |
AU2016205975B2 (en) | 2015-01-09 | 2021-05-27 | Wageningen Universiteit | Bacteria-comprising compositions and methods of using the same for treating and/or preventing gastrointestinal, metabolic and/or other diseases |
BR112018013292A2 (pt) * | 2015-12-31 | 2018-12-04 | Caelus Pharmaceuticals B V | ?método para preparar uma preparação de e. hallii e para promover formação de ácido butírico, e, preparação de e. hallii? |
CN106974939B (zh) * | 2016-01-15 | 2020-08-25 | 深圳华大生命科学研究院 | 厚壁菌类益生菌在治疗和预防肥胖及其相关疾病中的应用 |
WO2017136492A1 (en) * | 2016-02-02 | 2017-08-10 | Oncoimmune, Inc. | Use of cd24 proteins for treating leptin-deficient conditions |
CA3014525A1 (en) * | 2016-02-25 | 2017-08-31 | Caelus Pharmaceuticals B.V. | Compositions and methods for preventing and/or treating vitamin b12 deficiency |
WO2017178496A1 (en) | 2016-04-11 | 2017-10-19 | Wageningen Universiteit | Novel bacterial species |
WO2018049019A1 (en) | 2016-09-07 | 2018-03-15 | Temple University - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Compositions and methods for treatment of insulin resistance |
CA3049299A1 (en) * | 2017-01-19 | 2018-07-26 | Pleonova Ab | Autologous fecal sample for use in the treatment of microbial dysbiosis |
JP2020530840A (ja) | 2017-08-14 | 2020-10-29 | セレス セラピューティクス インコーポレイテッド | 胆汁うっ滞性疾患を治療するための組成物及び方法 |
AU2018326705A1 (en) | 2017-08-30 | 2020-03-05 | Pendulum Therapeutics, Inc. | Methods and compositions for treatment of microbiome-associated disorders |
KR20200128126A (ko) * | 2018-03-02 | 2020-11-11 | 아카데미쉬 메디쉬 센트럼 | 자가 면역 질환의 예방 또는 치료를 위한 대변 |
JP2021532097A (ja) * | 2018-07-19 | 2021-11-25 | ペンデュラム セラピューティクス, インコーポレイテッド | 微生物生着のための方法および組成物 |
EP3952848A1 (en) | 2019-04-09 | 2022-02-16 | Dermbiont, Inc. | Compositions and methods for improving skin health and for the treatment and prevention of diseases, disorders and conditions associated with pathogenic microbes |
EP4013434A1 (en) | 2019-08-14 | 2022-06-22 | Wageningen Universiteit | Bacterium comprising myo-inositol to propionate pathway |
NL2024569B1 (en) | 2019-12-24 | 2021-09-06 | Univ Wageningen | Bacterium comprising myo-inositol to propionate pathway |
EP4228665A1 (en) * | 2020-10-14 | 2023-08-23 | Dermbiont, Inc. | Compositions and methods for improving skin health and for the treatment and prevention of diseases, disorders and conditions associated with fungi and other pathogenic microbes |
CN113604400B (zh) * | 2021-08-26 | 2023-06-02 | 王玉莹 | 具有预防或治疗糖尿病作用的新型乳杆菌yuyingw |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6224862B1 (en) * | 1996-03-20 | 2001-05-01 | Baxter Aktiengesellschaft | Pharmaceutical preparation for treating blood coagulation disorders |
US6645530B1 (en) * | 1988-08-02 | 2003-11-11 | Gastro Services Pty Limited | Treatment of gastro-intestinal disorders |
WO2008076696A2 (en) * | 2006-12-18 | 2008-06-26 | Washington University In St. Louis | The gut microbiome as a biomarker and therapeutic target for treating obesity or an obesity related disorder |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5902578A (en) * | 1996-03-25 | 1999-05-11 | Abbott Laboratories | Method and formula for the prevention of diarrhea |
US6227863B1 (en) | 1998-02-18 | 2001-05-08 | Donald Spector | Phonics training computer system for teaching spelling and reading |
US6224863B1 (en) * | 1998-10-30 | 2001-05-01 | University Of South Carolina | Antibiotic composition from alcaligenes species and method for making and using the same |
EP1228769A1 (de) * | 2001-02-02 | 2002-08-07 | Jörg-Peter Prof. Schür | Symbiontisches Regenerativum |
JP4307006B2 (ja) * | 2002-03-28 | 2009-08-05 | キリンフードテック株式会社 | 糖尿病予防剤 |
GB0307026D0 (en) | 2003-03-27 | 2003-04-30 | Rowett Res Inst | Bacterial supplement |
US20080069861A1 (en) * | 2006-09-19 | 2008-03-20 | National Starch And Chemical Investment Holding Corporation | Probiotic/Non-Probiotic Combinations |
JP5350626B2 (ja) | 2007-12-20 | 2013-11-27 | キリンフードテック株式会社 | 樹状細胞活性化用組成物 |
US9603876B2 (en) * | 2008-09-25 | 2017-03-28 | New York University | Compositions and methods for restoring gastrointestinal microbiota following antibiotic treatment |
JP5661050B2 (ja) * | 2009-01-23 | 2015-01-28 | カダント インコーポレイテッド | 製紙機の改善された脱水性能をもたらすシステムおよび方法 |
WO2011043654A1 (en) | 2009-10-05 | 2011-04-14 | Aak Patent B.V. | Methods for diagnosing irritable bowel syndrome |
AU2011256017B2 (en) * | 2010-05-18 | 2013-11-28 | Able Corporation | Method for inhibition of methane production |
WO2012142605A1 (en) | 2011-04-15 | 2012-10-18 | Samaritan Health Services | Rapid recolonization deployment agent |
SG11201401811WA (en) | 2011-08-30 | 2014-09-26 | Amc Amsterdam | Method for preventing and/or treating insulin resistance |
-
2012
- 2012-08-30 SG SG11201401811WA patent/SG11201401811WA/en unknown
- 2012-08-30 CN CN201280053708.2A patent/CN104244733B/zh active Active
- 2012-08-30 RU RU2014112223A patent/RU2613322C2/ru active
- 2012-08-30 EP EP12758652.7A patent/EP2753187B1/en active Active
- 2012-08-30 JP JP2014528318A patent/JP6116568B2/ja active Active
- 2012-08-30 KR KR1020147008451A patent/KR101982491B1/ko active IP Right Grant
- 2012-08-30 WO PCT/NL2012/050592 patent/WO2013032328A1/en active Application Filing
- 2012-08-30 PL PL12758652T patent/PL2753187T3/pl unknown
- 2012-08-30 US US14/241,851 patent/US9433650B2/en active Active
- 2012-08-30 DK DK12758652.7T patent/DK2753187T3/en active
- 2012-08-30 AU AU2012302364A patent/AU2012302364B2/en active Active
- 2012-08-30 CA CA2851602A patent/CA2851602C/en active Active
- 2012-08-30 BR BR112014004890A patent/BR112014004890A8/pt not_active Application Discontinuation
-
2016
- 2016-07-11 US US15/207,335 patent/US9623055B2/en active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6645530B1 (en) * | 1988-08-02 | 2003-11-11 | Gastro Services Pty Limited | Treatment of gastro-intestinal disorders |
US6224862B1 (en) * | 1996-03-20 | 2001-05-01 | Baxter Aktiengesellschaft | Pharmaceutical preparation for treating blood coagulation disorders |
WO2008076696A2 (en) * | 2006-12-18 | 2008-06-26 | Washington University In St. Louis | The gut microbiome as a biomarker and therapeutic target for treating obesity or an obesity related disorder |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
US 6224862 B101.05.2001. * |
И.Е.ЧАЗОВА и др. "Метаболический синдром". Media Medica 2004, с.6-8, 48. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2734336C1 (ru) * | 2020-03-27 | 2020-10-15 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Сибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ ранней неинвазивной диагностики метаболических нарушений у детей и подростков |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20140294774A1 (en) | 2014-10-02 |
AU2012302364B2 (en) | 2016-07-28 |
US9623055B2 (en) | 2017-04-18 |
CA2851602C (en) | 2020-07-14 |
CN104244733A (zh) | 2014-12-24 |
BR112014004890A8 (pt) | 2018-02-06 |
PL2753187T3 (pl) | 2019-05-31 |
US20160317589A1 (en) | 2016-11-03 |
JP6116568B2 (ja) | 2017-04-19 |
DK2753187T3 (en) | 2019-01-28 |
CN104244733B (zh) | 2017-07-28 |
US9433650B2 (en) | 2016-09-06 |
AU2012302364A1 (en) | 2014-04-17 |
RU2014112223A (ru) | 2015-10-10 |
BR112014004890A2 (pt) | 2017-03-21 |
JP2014527068A (ja) | 2014-10-09 |
WO2013032328A1 (en) | 2013-03-07 |
EP2753187B1 (en) | 2018-10-24 |
KR101982491B1 (ko) | 2019-05-27 |
EP2753187A1 (en) | 2014-07-16 |
CA2851602A1 (en) | 2013-03-07 |
KR20140128936A (ko) | 2014-11-06 |
SG11201401811WA (en) | 2014-09-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2613322C2 (ru) | Способ профилактики и/или лечения инсулинорезистентности | |
JP6494859B2 (ja) | 細菌株を含む組成物 | |
Vrieze et al. | Transfer of intestinal microbiota from lean donors increases insulin sensitivity in individuals with metabolic syndrome | |
Wang et al. | Bifidobacteria exert species-specific effects on constipation in BALB/c mice | |
Pinzone et al. | Microbial translocation in chronic liver diseases | |
Chung et al. | Intestinal removal of free fatty acids from hosts by Lactobacilli for the treatment of obesity | |
Tamboli et al. | Probiotics in inflammatory bowel disease: a critical review | |
US20060115465A1 (en) | Treatment of gastrointestinal disorders | |
JP2020516318A (ja) | 操作された共生細菌及び使用方法 | |
Odamaki et al. | Effect of probiotic yoghurt on animal-based diet-induced change in gut microbiota: an open, randomised, parallel-group study | |
Ding et al. | Prospective study reveals host microbial determinants of clinical response to fecal microbiota transplant therapy in type 2 diabetes patients | |
US20200078425A1 (en) | Methods and Compositions for Treating Obesity, Inflammation, or Metabolic Disorders with Bacteriophages | |
JP2024074864A (ja) | 微生物生着のための方法および組成物 | |
CN114729299B (zh) | 产生血清素的细菌 | |
CN111304120A (zh) | Blautia sp B2132菌在预防和/或治疗炎症性肠病中的应用 | |
KR102590051B1 (ko) | 건강한 한국인의 장내 핵심 유산균을 이용한 장내 마이크로바이옴 환경 및 장 건강 개선용 프로바이오틱스 조성물 | |
ES2705740T3 (es) | Método para prevenir y/o tratar la resistencia a la insulina | |
WO2023092141A2 (en) | Compositions for metabolic health | |
Fontanellas-Romá et al. | Nutritional Interventions with Bacillus coagulans Improved Glucose Metabolism and Hyperinsulinemia in Mice with Acute Intermittent Porphyria | |
Okombo | Use of a probiotic for reduction of gastrointestinal oxalate absorption |