RU2546880C2 - Method of probiotic feed preparation for farm animals - Google Patents
Method of probiotic feed preparation for farm animals Download PDFInfo
- Publication number
- RU2546880C2 RU2546880C2 RU2013125554/10A RU2013125554A RU2546880C2 RU 2546880 C2 RU2546880 C2 RU 2546880C2 RU 2013125554/10 A RU2013125554/10 A RU 2013125554/10A RU 2013125554 A RU2013125554 A RU 2013125554A RU 2546880 C2 RU2546880 C2 RU 2546880C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- vkpm
- potassium phosphate
- rncim
- bacillus subtilis
- tap water
- Prior art date
Links
Abstract
Description
Изобретение относится к кормопроизводству, в частности к способам приготовления пробиотических препаратов и биологически активных кормовых добавок для животных, птицы, оказывающих разностороннее действие на животный организм, и позволяющих применять их для стимуляции роста и повышения продуктивности.The invention relates to feed production, in particular to methods for the preparation of probiotic preparations and biologically active feed additives for animals, birds, having a versatile effect on the animal organism, and allowing them to be used to stimulate growth and increase productivity.
Пробиотические препараты кормового назначения рассматриваются как потенциальная альтернатива кормовым антибиотикам, поэтому применение пробиотиков считается важнейшим элементом получения экологически чистых продуктов питания. Пробиотики - живые микробные добавки, которые оказывают благоприятное действие на организм животных путем улучшения кишечного микробного баланса, стимулируют обменные и иммунные процессы. Биологический потенциал пробиотических бактерий способствует улучшению здоровья животных, повышению уровня продуктивности, лучшему использованию кормов.Probiotic feed preparations are considered as a potential alternative to feed antibiotics; therefore, the use of probiotics is considered to be an essential element in obtaining environmentally friendly food products. Probiotics are living microbial supplements that have a beneficial effect on the animal organism by improving the intestinal microbial balance, stimulate metabolic and immune processes. The biological potential of probiotic bacteria helps to improve animal health, increase productivity, and better use of feed.
Определяющим фактором эффективности пробиотиков во многом является технология получения этих препаратов. Современный подход к разработке пробиотических препаратов подразумевает, во-первых, применение различных видов микроорганизмов в определенных сочетаниях и, во-вторых, выпуск их в форме, допускающей длительное хранение при обычной температуре. Клинико-экспериментальные исследования показали, что под действием желудочного сока и желчи многие пробиотики теряют почти 90% своей активности к моменту попадания в кишечник. Поэтому разрабатываются различные способы повышения выживаемости бактерий, например, за счет их иммобилизации на пористых носителях, включения в состав препарата компонентов питательной среды.The determining factor in the effectiveness of probiotics is largely the technology for producing these drugs. The modern approach to the development of probiotic drugs involves, firstly, the use of various types of microorganisms in certain combinations and, secondly, their release in a form that allows long-term storage at ordinary temperature. Clinical and experimental studies have shown that under the influence of gastric juice and bile, many probiotics lose almost 90% of their activity by the time they enter the intestine. Therefore, various methods are being developed to increase the survival of bacteria, for example, by immobilizing them on porous carriers and by incorporating components of a nutrient medium into the preparation.
Известен способ получения сухого пробиотического препарата, предусматривающий получение маточной культуры штаммов микроорганизмов Rhuminococcus albus Kr, Lactobacillus acidophilus Scav ВКПМ В-4625, совместное культивирование маточной культуры на подсолнечном шроте при температуре 30-45°С в течение 4-8 суток, с последующим смешиванием полученной полувлажной формы с сухим шротом в соотношении 110-112 до получения влажности в готовом препарате 8-10% (1).A known method of obtaining a dry probiotic preparation, comprising obtaining a uterine culture of strains of microorganisms Rhuminococcus albus Kr, Lactobacillus acidophilus Scav VKPM B-4625, co-cultivation of the uterine culture in sunflower meal at a temperature of 30-45 ° C for 4-8 days, followed by mixing obtained semi-moist form with dry meal in a ratio of 110-112 until moisture in the finished product is 8-10% (1).
К недостаткам данного способа относится длительность процесса культивирования маточной культуры на подсолнечном шроте и сложность поддержания заявленного штамма руминококка в чистом виде, так как для этого требуется обязательное присутствие рубцовой жидкости в питательной среде.The disadvantages of this method include the duration of the process of culturing the uterine culture on sunflower meal and the difficulty of maintaining the claimed strain of ruminococcus in its pure form, since this requires the mandatory presence of scar fluid in the nutrient medium.
Из уровня техники известен способ получения биологически активной кормовой добавки, включающий две стадии ее получения: глубинное аэробное культивирование пробиотической бациллы - штамма В. subtilis ВКПМ В-8130 с получением жидкой культуры (первая стадия), и последующая твердофазная ферментация растительного сырья при затрудненном доступе кислорода (вторая стадия). В качестве растительного сырья используют облепиховый, шиповниковый, подсолнечный шрот или жмых, отходы мукомольного производства, производства круп (2).The prior art method for producing biologically active feed additives, including two stages of its production: deep aerobic cultivation of a probiotic bacillus strain B. subtilis VKPM B-8130 to obtain a liquid culture (first stage), and subsequent solid-phase fermentation of plant materials with difficult access of oxygen (second stage). As plant raw materials, sea buckthorn, dogrose, sunflower meal or cake, waste from flour milling, and cereal production are used (2).
Недостатком является использование монокультуры бактерий, что ограничивает спектр биологического действия препарата на организм животного.The disadvantage is the use of a monoculture of bacteria, which limits the spectrum of the biological effect of the drug on the animal.
Ближайшим аналогом заявленного способа рассматривается способ получения пробиотической кормовой добавки Ферм КМ, которую получают путем раздельного глубинного культивирования штаммов Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, Bacillus subtilis ВКПМ В-2984, Bacillus subtilis ВКПМ В-4099 и Bacillus licheniformis ВКПМ В-4162 и последующего твердофазного ферментирования. Полученные жидкие культуры Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, Bacillus subtilis ВКПМ В-2984 и Bacillus ВКПМ В-4099 смешивают в заданном соотношении, наносят на носитель - стерильный свекловичый жом, который предварительно обрабатывают целлюлолитическим ферментом, растворенным в питательной среде, содержащей на 30 л воды мелассу - 255-265 г, калий фосфорнокислый двузамещенный - 98-102 г, магний сернокислый - 25-26 г, дрожжи - 1,8-2,2 г. Доводят рН смеси до 6,0-6,5 и выдерживают 2 ч при температуре 45-50°С. После предобработки свекловичного жома к нему добавляют смесь культуральных жидкостей Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, Bacillus subtilis ВКПМ В-2984, Bacillus subtilis ВКПМ В-4099 и Bacillus licheniformis ВКПМ В-4162, доводят рН до 7,5-8,0 и влажность замеса до 43-48% Смесь тщательно перемешивают, расфасовывают в мешки и проводят твердофазную ферментацию в условиях ограниченного доступа кислорода при температуре 45-50°С в течение 48-50 ч. После чего смесь высушивают до влажности продукта 8-10%. Полученный продукт передают на двухступенчатое дробление для получения однородной массы с крупностью, соответствующей требованиям продукции комбикормовой промышленности (3). Технология получения кормовых пробиотических препаратов в настоящем изобретении включает неполную твердофазную ферментацию содержащего клетчатку растительного субстрата (фитоносителя), в качестве которого используется измельченная солома, соевый шрот, подсолнечный шрот подобранной пробиотической композицией микроорганизмов. Конечный продукт состоит из биомассы пробиотиков, продуктов их метаболизма, продуктов биотрансформации фитосубстрата. В препарат входят фиточастицы, являющиеся клетчатковым микросорбентом. В состав бактериальной композиции пробиотического препарата включены живые клетки трех штаммов Bacillus subtilis ВКПМ В-8130, Lactococcus lactis subsp. laclis F-116 ВКПМ В-4591, а также Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559. Композиция подобранных бактерий демонстрирует пробиотический эффект в сочетании с активностью важнейших ферментов: целлюлазой, эндоглюканазой, амилазой, комплексом протеаз, липазой. Бактерии выделяют органические кислоты, биологически активные вещества, витамины, аминокислоты, иммуноактивные пептиды - продукты метаболизма пробиотиков. Штамм Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 отличается выделением соматостатин-подобного пептида, который выступает опосредованным антагонистом по отношению к этому гормону, поскольку вызывает аутоиммунную нейтрализацию эндогенного соматостатина, что снижает ингибирующее действие данного гормона на гормон роста соматотропин, инсулин и гастрин, и ведет к ростостимулирующему действию на организм животного (4). Примененный штамм лактококка Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 ВКПМ В-4591, известный как продуцент низина (5), обладает широким спектром антибиотического действия и уникальными фунгицидными свойствами (6). Штамм Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559, известный в получении корма из растительного сырья (7), выделяет целлюлазы и введен в композицию с целью предобработки поверхности фитоносителя, повышения рельефности поверхности для увеличения площади образующейся на ней биопленки пробиотиков. Пробиотики в виде биопленки на фитоносителе отличаются высокой биологической активностью и повышенным сроком сохранности препарата. Бактерии в биопленке устойчивы к воздействию ультрафиолетового излучения, вирусам, антибиотикам и высушиванию. В ней по иному происходят физиологические процессы, продукция метаболитов и биологически активных веществ.The closest analogue of the claimed method is considered a method for producing a probiotic feed additive of Farms KM, which is obtained by separate deep cultivation of strains of Bacillus subtilis VKPM B-8130, Bacillus subtilis VKPM B-2984, Bacillus subtilis VKPM B-4099 and Bacillus licheniformis VKPM B-4162 and subsequent solid phase fermentation. The obtained liquid cultures of Bacillus subtilis VKPM B-8130, Bacillus subtilis VKPM B-2984 and Bacillus VKPM B-4099 are mixed in a predetermined ratio, applied to a carrier - sterile beet pulp, which is pretreated with cellulolytic enzyme dissolved in a nutrient medium containing 30 l molasses water - 255-265 g, disubstituted potassium phosphate - 98-102 g, magnesium sulfate - 25-26 g, yeast - 1.8-2.2 g. The pH of the mixture is adjusted to 6.0-6.5 and incubated 2 h at a temperature of 45-50 ° C. After pretreatment of beet pulp, a mixture of culture liquids Bacillus subtilis VKPM B-8130, Bacillus subtilis VKPM B-2984, Bacillus subtilis VKPM B-4099 and Bacillus licheniformis VKPM B-4162 is added to it, the pH is adjusted to 7.5-8.0 and humidity kneading up to 43-48% The mixture is thoroughly mixed, packaged in bags and solid-phase fermentation is carried out under conditions of limited access of oxygen at a temperature of 45-50 ° C for 48-50 hours. After that, the mixture is dried to a moisture content of 8-10%. The resulting product is transferred to two-stage crushing to obtain a homogeneous mass with a particle size that meets the requirements of the feed industry products (3). The technology for producing probiotic feed preparations in the present invention includes incomplete solid-phase fermentation of cellulose-containing plant substrate (phytofacil), which is used as chopped straw, soybean meal, and sunflower meal with a selected probiotic composition of microorganisms. The final product consists of the biomass of probiotics, the products of their metabolism, the products of biotransformation of phytosubstrate. The drug includes phytoparticles, which are cellular microsorbent. The bacterial composition of the probiotic preparation included living cells of three strains of Bacillus subtilis VKPM B-8130, Lactococcus lactis subsp. laclis F-116 VKPM B-4591, as well as Cellulomonas flavigena VKPM B-2559. The composition of selected bacteria demonstrates a probiotic effect in combination with the activity of the most important enzymes: cellulase, endoglucanase, amylase, protease complex, lipase. Bacteria secrete organic acids, biologically active substances, vitamins, amino acids, immunoactive peptides - metabolic products of probiotics. The Bacillus subtilis strain VKPM B-8130 is distinguished by the release of a somatostatin-like peptide, which acts as an indirect antagonist to this hormone, because it causes autoimmune neutralization of endogenous somatostatin, which reduces the inhibitory effect of this hormone on growth hormone somatotropin, insulin and gastrin, and leads to growth action on the animal's body (4). Applied strain of lactococcus Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 VKPM B-4591, known as the producer of nisin (5), has a wide spectrum of antibiotic action and unique fungicidal properties (6). The strain Cellulomonas flavigena VKPM B-2559, known in the preparation of feed from plant materials (7), isolates cellulases and is introduced into the composition with the aim of pretreating the surface of the phytocarrier and increasing the surface relief to increase the area of the probiotic biofilm formed on it. Probiotics in the form of biofilms on a phytocarrier are characterized by high biological activity and an increased shelf life of the drug. The bacteria in the biofilm are resistant to ultraviolet radiation, viruses, antibiotics and drying. In it, physiological processes, the production of metabolites and biologically active substances occur differently.
Технический результат изобретения заключается в повышении биологической активности препарата, увеличении до 7 месяцев срока его сохранности, применение препарата обеспечивает высокоэффективное использование корма, улучшает его конверсию, прирост живой массы молодняка, переваривание животными некрахмалистых полисахаридов из различных видов зерна.The technical result of the invention is to increase the biological activity of the drug, increase its shelf life up to 7 months, the use of the drug provides highly efficient use of feed, improves its conversion, increase in live weight of young animals, digestion of non-starch polysaccharides from various types of grains by animals.
Технический результат от реализации изобретения достигается тем, что в способе получения кормового пробиотического препарата для сельскохозяйственных животных проводят подготовку фитоносителя путем смешивания 4-4,5 кг содержащего клетчатку растительного субстрата с 1 л водопроводной воды, 150-160 г автолизата пекарских дрожжей, 2-3 г калия фосфорнокислого двузамещенного, 0,5-0,6 г магния сернокислого, 6-8 г мелассы и последующей стерилизацией автоклавированием, в полученный фитоноситель вносят жидкую культуру Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559 и выдерживают при 45-47°С в течение 4-4,5 ч, а затем вносят жидкие культуры Bacilis subtilis ВКПМ В-8130 и Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 ВКПМ В-4591 в равных количествах, смесь перемешивают, выдерживают при температуре 37-38°С в течение 48-50 ч и высушивают до влажности 8-10%. Полученный пробиотический препарат в виде биопленки на фитоносителе сохраняет свою биологическую активность в течение 7 месяцев. Препарат предназначен для повышения эффективности пищеварения, повышения массы тела сельскохозяйственных животных и птицы, введением ее в кормовые рационы в дозе 1 кг/т прямым вводом в комбикорм или вводом ее в премиксы, БМВД, суперконцентраты или другие составляющие комбикорма.The technical result from the implementation of the invention is achieved by the fact that in the method for producing a feed probiotic preparation for farm animals, a phytocarrier is prepared by mixing 4-4.5 kg of fiber-containing plant substrate with 1 l of tap water, 150-160 g of baker's yeast autolysate, 2-3 g of potassium phosphate disubstituted, 0.5-0.6 g of magnesium sulfate, 6-8 g of molasses and subsequent sterilization by autoclaving, the cellulomonas flavigena VKPM B-2559 liquid culture is introduced into the resulting phyto-carrier and aged they are burnt at 45-47 ° C for 4-4.5 hours, and then Bacilis subtilis VKPM B-8130 and Lactococcus lactis subsp. liquid cultures are introduced. lactis F-116 VKPM B-4591 in equal amounts, the mixture is stirred, kept at a temperature of 37-38 ° C for 48-50 hours and dried to a moisture content of 8-10%. The obtained probiotic preparation in the form of a biofilm on a phytocarrier retains its biological activity for 7 months. The drug is intended to increase the efficiency of digestion, increase the body weight of farm animals and poultry, by introducing it into feed diets at a dose of 1 kg / t by direct input into compound feed or by entering it into premixes, BMVD, superconcentrates or other components of compound feed.
Экспериментально было найдено, что предпочтительными средами, используемыми для приготовления жидких пробиотических культур, вносимых в подготовленный фитоноситель, являются среды следующего состава:It was experimentally found that the preferred media used for the preparation of liquid probiotic cultures introduced into the prepared phytocarrier are media of the following composition:
жидкую культуру Bacilis subtilis ВКПМ В-8130 получают выращиванием на среде, содержащей, масс.%: глюкоза 2,0-2,2, пептон 0,5-0,6, дрожжевой экстракт 0,3-0,4, калий фосфорнокислый двузамещенный 0,1-0,12, калий фосфорнокислый однозамещенный 0,05-0,055, магний сернокислый 0,02-0,022, вода водопроводная - остальное;a liquid culture of Bacilis subtilis VKPM B-8130 is obtained by growing on a medium containing, wt.%: glucose 2.0-2.2, peptone 0.5-0.6, yeast extract 0.3-0.4, potassium phosphate disubstituted 0.1-0.12, monosubstituted potassium phosphate 0.05-0.055, magnesium sulfate 0.02-0.022, tap water - the rest;
жидкую культуру Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559 получают выращиванием на среде, содержащей, масс.%: глюкоза 2,0-2,2, пептон 0,5-0,6, дрожжевой экстракт 0,3-0,4, калий фосфорнокислый двузамещенный, 0,1-0,12, калий фосфорнокислый однозамещенный 0,05-0,055, магний сернокислый 0,02-0,022, измельченная солома 25-27, вода водопроводная - остальное;a liquid culture of Cellulomonas flavigena VKPM B-2559 is obtained by growing on a medium containing, wt.%: glucose 2.0-2.2, peptone 0.5-0.6, yeast extract 0.3-0.4, potassium phosphate disubstituted , 0.1-0.12, monosubstituted potassium phosphate 0.05-0.055, magnesium sulfate 0.02-0.022, ground straw 25-27, tap water - the rest;
жидкую культуру Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 ВКПМ В-4591 получают выращиванием на среде, содержащей, масс.%: сахароза 2,0-2,2, калий фосфорнокислый однозамещенный 0,2-0,22, магний сернокислый 0.02-0.022, автолизат пекарских дрожжей 35-37 мг% по азоту аммония, вода водопроводная - остальное.liquid culture of Lactococcus lactis subsp. lactis F-116 VKPM B-4591 is obtained by growing on a medium containing, wt.%: sucrose 2.0-2.2, potassium phosphate monosubstituted 0.2-0.22, magnesium sulfate 0.02-0.022, baker's yeast autolysate 35- 37 mg% ammonium nitrogen, tap water - the rest.
При проведении исследований по подбору сырья природного происхождения в качестве содержащего клетчатку растительного субстрата (используемого фитоносителя) было обнаружено, что измельченная солома, соевый шрот, подсолнечный шрот обеспечивают высокую активность культуры Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559 при ферментативной предобработке поверхности фитоносителя, что приводит к повышению рельефности поверхности, обеспечивающей увеличение площади биопленки, образующейся на ней при выращивании вышеобозначенных пробиотических культур. Благодаря особенностям химического состава шроты соответствуют сложным трофическим потребностям и молочнокислых бактерий Lactococcus lactis, т.к. содержат аминный азот на уровне 0,189-0,218% и растворимые и легкогидролизуемые углеводы 1,723-2,793% при концентрации минеральных веществ в пределах 6,4-9,7%, что позволяет считать данное сырье ценным питательным субстратом.When conducting studies on the selection of raw materials of natural origin as a fiber-containing plant substrate (phytosupport used), it was found that chopped straw, soybean meal, and sunflower meal provide a high activity of the Cellulomonas flavigena VKPM B-2559 culture during enzymatic pretreatment of the surface of the phytocarrier, which leads to an increase surface relief, providing an increase in the area of biofilm formed on it during the cultivation of the above-mentioned probiotic cultures. Due to the chemical composition, the meal corresponds to the complex trophic needs of the lactic acid bacteria Lactococcus lactis, because contain amine nitrogen at the level of 0.189-0.218% and soluble and hydrolyzable carbohydrates 1.723-2.793% at a concentration of mineral substances in the range of 6.4-9.7%, which allows us to consider this raw material as a valuable nutrient substrate.
Приведенные ниже примеры описывают настоящее изобретение и иллюстрируют его осуществление.The following examples describe the present invention and illustrate its implementation.
Пример 1. Технология получения препарата:Example 1. The technology of obtaining the drug:
Глубинным способом при аэрации и температуре 37°С выращивают штамм Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 в жидкой питательной среде состава, масс.%: глюкоза - 2.0; пептон - 0.5; дрожжевой экстракт - 0.3; калий фосфорнокислый 2-х замещенный - 0,1; калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,05, магний сернокислый - 0,02, вода водопроводная - остальное до 1 л, рН 7 до достижения культурой стационарной фазы развития.A deep method at aeration and a temperature of 37 ° C is grown strain Bacillus subtilis VKPM B-8130 in a liquid nutrient medium composition, wt.%: Glucose - 2.0; peptone - 0.5; yeast extract - 0.3; potassium phosphate 2-substituted-0.1; monosubstituted potassium phosphate - 0.05, magnesium sulfate - 0.02, tap water - the rest is up to 1 l, pH 7 until the culture reaches the stationary phase of development.
В 1 л жидкой питательной среды аналогичного состава, но с добавлением 25 г/л измельченной соломы выращивают штамм Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559 при температуре 37°С до достижения культурой стационарной фазы развития.In 1 l of a liquid nutrient medium of a similar composition, but with the addition of 25 g / l of chopped straw, a strain of Cellulomonas flavigena VKPM B-2559 is grown at a temperature of 37 ° C until the culture reaches a stationary phase of development.
В 1 л жидкой питательной среды, состава, мас.%: сахароза - 2,0, калий фосфорнокислый однозамещенный - 0,2; магний сернокислый - 0,02; автолизат пекарских дрожжей - 35 мг% по азоту аммония; вода водопроводная - остальное, рН 6,8-7,0 выращивают штамм Lactococcus lactis subsp. lactis ВКПМ В-4591 до достижения культурой стационарной фазы развития.In 1 l of a liquid nutrient medium, composition, wt.%: Sucrose - 2.0, potassium phosphate monosubstituted - 0.2; magnesium sulfate - 0.02; baker's yeast autolysate - 35 mg% ammonium nitrogen; tap water - the rest, a pH of 6.8-7.0 grow a strain of Lactococcus lactis subsp. lactis VKPM B-4591 until the culture reaches the stationary phase of development.
Подготавливают фитоноситель: 4,0 кг измельченной соломы смешивают с 1 л водопроводной воды, 150 г автолизата пекарских дрожжей, 2 г K2HPO4, 0,125 г MgSO4, 1,5 г мелассы, полученную массу после перемешивания стерилизуют автоклавированием. В полученную стерильную массу фитоносителя вносят 1 л выращенной культуры Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559, все перемешивают и выдерживают при температуре 45°С в течение 4 ч.The phytocarrier is prepared: 4.0 kg of crushed straw is mixed with 1 l of tap water, 150 g of baker's yeast autolysate, 2 g of K 2 HPO 4 , 0.125 g of MgSO 4 , 1.5 g of molasses, the resulting mass is sterilized by autoclaving after mixing. Into the obtained sterile mass of phytocarrier, add 1 liter of the grown culture of Cellulomonas flavigena VKPM B-2559, mix everything and maintain at a temperature of 45 ° C for 4 hours.
В подготовленный фитоноситель последовательно вносят 1 л выращенной культуры Bacillus snbtilis ВКПМ В-8130 и 1 л выращенной культуры Lactococcus lactis subsp. Lactis ВКПМ В-4591. Смесь после перемешивания выдерживают при температуре 37°С в течение 48 ч и затем высушивают при температуре не выше 45°С до влажности 8%. Количество живых бактерий L. acidophilus и В. subtilis в сухом препарате составляет не менее 3×109 КОЕ/г и 4×1010 KOE/г соответственно.1 l of the grown culture of Bacillus snbtilis VKPM B-8130 and 1 l of the grown culture of Lactococcus lactis subsp are successively added to the prepared phytocarrier. Lactis VKPM B-4591. After stirring, the mixture is maintained at a temperature of 37 ° C for 48 hours and then dried at a temperature not exceeding 45 ° C to a moisture content of 8%. The amount of living bacteria L. acidophilus and B. subtilis in a dry preparation is at least 3 × 10 9 CFU / g and 4 × 10 10 KOE / g, respectively.
Пример 2. Приготовление фитоносителя на основе подсолнечного шротаExample 2. Preparation of phytocarrier based on sunflower meal
Жидкие пробиотические культуры готовят по способу, аналогичному описанному в примере 1.Liquid probiotic cultures are prepared according to a method similar to that described in example 1.
Подготавливают фитоноситель: 4,5 кг измельченного подсолнечного шрота смешивают с 1 л водопроводной воды, 160 г автолизата пекарских дрожжей, 3 г K2HPO4, 0,130 г MgSO4 и 1,8 г мелассы, полученную массу после перемешивания стерилизуют автоклавированием. В полученную стерильную массу фитоносителя вносят 1 л выращенной культуры Cellulomonas flavigena ВКПМ В-2559, все перемешивают и выдерживают при температуре 45°С в течение 4 ч. Затем в смесь последовательно вносят 1 л выращенной культуры Bacillus subtilis ВКПМ В-8130 и 1 л выращенной культуры Lactococcus lactis subsp.Lactis ВКПМ B-4591. Смесь после перемешивания выдерживают при температуре 38°С в течение 50 ч и затем высушивают при температуре не выше 45°С до влажности 10%.The phytocarrier is prepared: 4.5 kg of crushed sunflower meal is mixed with 1 l of tap water, 160 g of baker's yeast autolysate, 3 g of K 2 HPO 4 , 0.130 g of MgSO 4 and 1.8 g of molasses, the resulting mass is sterilized by autoclaving after mixing. 1 l of the grown Cellulomonas flavigena VKPM B-2559 culture is added to the obtained sterile phytosupply mass, everything is mixed and kept at a temperature of 45 ° C for 4 hours. Then, 1 l of the grown Bacillus subtilis VKPM B-8130 culture and 1 l of grown cultures of Lactococcus lactis subsp. Lactis VKPM B-4591. After stirring, the mixture is kept at a temperature of 38 ° C for 50 hours and then dried at a temperature not exceeding 45 ° C to a moisture content of 10%.
Пример 3Example 3
Была проведена ферментация соломы кормовым пробиотическим препаратом по способу, описанному в примере 1. Полученный препарат влажностью 9% введен в комбикорм для лабораторных крыс из расчета 1 кг препарата на 1 тонну кормосмеси, в состав которой кроме комбикорма для крыс входило зерно. В эксперименте были подобраны две группы молодых крыс в возрасте 1 месяца, по 5 самок и по 5 самцов в каждой, уравненные по средней массе тела. Контрольных животных содержали на обычном рационе, опытных - на рационе с введенной кормовой добавкой. Еженедельно проводили индивидуальное взвешивание крыс. В результате кормления в течение месяца было получено: средняя масса тела опытных животных составила 181.2 г, общий привес 71,6 г и среднесуточный прирост живой массы тела - 21,7 г. В то время как средняя масса тела контрольных крыс составила 166,4 г, общий привес 64,4 г и среднесуточный прирост - 19,6 г. Таким образом, средняя масса тела опытных животных на 10,7% была больше контрольных, общий привес - на 11,2% больше, чем в группе контрольных крыс, что соответствовало увеличению на 10,7% среднесуточного прироста опытных животных.The straw was fermented with a feed probiotic preparation according to the method described in Example 1. The resulting preparation with a moisture content of 9% was introduced into compound feed for laboratory rats at the rate of 1 kg of the preparation per 1 ton of feed mixture, which included grain in addition to compound feed for rats. In the experiment, two groups of young rats were selected at the age of 1 month, 5 females and 5 males each, equal to the average body weight. Control animals were kept on a normal diet, experimental animals were kept on a diet with a feed additive. The rats were individually weighed weekly. As a result of feeding during the month, the following was obtained: the average body weight of the experimental animals was 181.2 g, the total weight gain was 71.6 g and the average daily gain in live body weight was 21.7 g. While the average body weight of the control rats was 166.4 g , the total weight gain was 64.4 g and the average daily gain was 19.6 g. Thus, the average body weight of the experimental animals was 10.7% more than the control, the total weight gain was 11.2% more than in the group of control rats, which corresponded to an increase of 10.7% in the average daily gain of experimental animals.
Полученный пробиотический препарат в виде биопленки на фитоносителе сохранял свою биологическую активность в течение 7 месяцев, что подтвердили повторные испытания препарата в рационе 1 месячных крыс спустя 6 месяцев хранения препарата при комнатной температуре в проветриваемом помещении. В результате повторного опытного кормления в описанных выше условиях в течение месяца комбикормом, в состав которого был введен препарат, срок хранения которого составил 6 месяцев, было получено: средняя масса тела опытных животных составила 180,8г, общий привес 70,8 г и среднесуточный прирост живой массы тела - 21,5 г.The obtained probiotic preparation in the form of a biofilm on a phytocarrier retained its biological activity for 7 months, which was confirmed by repeated tests of the drug in the diet of 1 month old rats after 6 months of storage of the drug at room temperature in a ventilated room. As a result of repeated experimental feeding under the conditions described above for a month with compound feed, which included a preparation with a shelf life of 6 months, it was obtained: the average body weight of the experimental animals was 180.8 g, the total weight gain was 70.8 g, and the average daily gain live body weight - 21.5 g.
Пример 4. Была проведена ферментация подсолнечного шрота кормовым пробиотическим препаратом по способу, описанному в примере 1. Полученный препарат влажностью 8% введен в комбикорм для цыплят из расчета 1 кг препарата на 1 тонну кормосмеси. В эксперименте были подобраны две группы - контрольная и опытная по 10 голов в каждой. Птица потребляла полнорационные комбикорма с питательностью по нормам ВНИТИП (2010 г.) вволю.Example 4. Fermentation of sunflower meal with a feed probiotic preparation was carried out according to the method described in Example 1. The resulting preparation with a moisture content of 8% was introduced into compound feed for chickens at the rate of 1 kg of preparation per 1 ton of feed mixture. In the experiment, two groups were selected - control and experimental with 10 goals each. The bird consumed full-feed mixed fodder with nutrition according to the norms of VNITIP (2010) ad libitum.
Контрольных птиц содержали на обычном рационе, опытных - на рационе с введенной кормовой добавкой. Скармливание в течение месяца молодняку опытной группы комбикорма, содержащего биологически активную пробиотическую добавку, способствовало увеличению живой массы цыплят на 11,4%. Расход корма на 1 кг прироста живой массы опытного молодняка составил 1,65 кг, что на 3,5% ниже, чем у птицы контрольной группы, что указывало на повышение переваримости и усвояемости корма.Control birds were kept on a normal diet, experimental birds - on a diet with a feed additive. Feeding a young experimental group of feed containing a biologically active probiotic supplement for a month contributed to an increase in live weight of chickens by 11.4%. Feed consumption per 1 kg of live weight gain of the experimental young was 1.65 kg, which is 3.5% lower than that of the poultry of the control group, which indicated an increase in digestibility and digestibility of the feed.
Пример 5. Была проведена ферментация соевого шрота кормовым пробиотическим препаратом по способу, описанному в примере 1. Полученный препарат влажностью 8% введен в комбикорм для молодняка кроликов из расчета 1 кг препарата на 1 тонну кормосмеси. В эксперименте были подобраны две группы - контрольная и опытная по 5 голов в каждой. Кроликов содержали в сетчатых клетках, поение производили из сосковых поилок, кормление - из бункеров вволю, температура воздуха колебалась в пределах 18,5-20,3°С. Кормление осуществлялось смесью кормовой гранулированной №343 для скармливания с.-х. животным. Контрольных животных содержали на обычном рационе, опытных - на рационе с введенной кормовой добавкой. Переваримость питательных веществ определяли по существующим методикам зоотехнического анализа. При введении в комбикорм препарата переваримость рациона и его отдельных компонентов через месяц эксперимента возросла по сравнению с контролем на 13,5%, переваримость сырого протеина - на 21,8%, сырой клетчатки - на 43,2%. Среднесуточный прирост живой массы увеличился по сравнению с контролем на 13%.Example 5. Fermentation of soybean meal with a feed probiotic preparation was carried out according to the method described in Example 1. The resulting preparation with a moisture content of 8% was introduced into mixed feed for young rabbits at the rate of 1 kg of preparation per 1 ton of feed mixture. In the experiment, two groups were selected - control and experimental with 5 goals each. Rabbits were kept in mesh cages, water was produced from nipple drinkers, feeding was done from bunkers ad libitum, air temperature ranged from 18.5–20.3 ° С. Feeding was carried out with a granular feed mixture No. 343 for feeding agricultural products. to animals. Control animals were kept on a normal diet, experimental animals were kept on a diet with a feed additive. Digestibility of nutrients was determined by existing methods of zootechnical analysis. With the introduction of the drug into the feed, the digestibility of the diet and its individual components after a month of the experiment increased compared to the control by 13.5%, the digestibility of crude protein - by 21.8%, crude fiber - by 43.2%. The average daily gain in live weight increased by 13% compared with the control.
Источники информацииInformation sources
1. Патент RU 2280464, 27.07.2006.1. Patent RU 2280464, 07.27.2006.
2. Патент RU 2346463 C2, 20.02.2009.2. Patent RU 2346463 C2, 02.20.2009.
3. Патен RU 2412612 С1, 27.02.2011.3. Patent RU 2412612 C1, 02.27.2011.
4. Н.А. Ушакова, В.В. Вознесенская, А.А. Козлова, А.В. Нифатов, и др. Выделение соматостатин-подобного пептида клетками Bacillus subtilis B-8130, кишечного симбионта дикой птицы Tetrao urogallus, и влияние бациллы на животный организм // Доклады АН. 2010, том 434, №2, с.282-285.4. N.A. Ushakova, V.V. Voznesenskaya, A.A. Kozlova, A.V. Nifatov et al. Isolation of a somatostatin-like peptide by cells of Bacillus subtilis B-8130, the intestinal symbiont of wild bird Tetrao urogallus, and the effect of the bacillus on the animal organism // Doklady AN. 2010, Volume 434, No. 2, pp. 282-285.
5. SU 1687616 A1, 30.10.1991.5. SU 1687616 A1, 10.30.1991.
6. Стоянова Л.Г., Устюгова Е.А., Нетрусов А.А. Антимикробные метаболиты молочнокислых бактерий, разнообразие и свойства (обзор). Прикладная биохимия и микробиология 2012, т.48, №3, с.259-275.6. Stoyanova L. G., Ustyugova E. A., Netrusov A. A. Antimicrobial metabolites of lactic acid bacteria, variety and properties (review). Applied Biochemistry and Microbiology 2012, v. 48, No. 3, p. 259-275.
7. Патент RU 2155496 C2, 10.09.2003.7. Patent RU 2155496 C2, 09/10/2003.
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013125554/10A RU2546880C2 (en) | 2013-06-03 | 2013-06-03 | Method of probiotic feed preparation for farm animals |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013125554/10A RU2546880C2 (en) | 2013-06-03 | 2013-06-03 | Method of probiotic feed preparation for farm animals |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013125554A RU2013125554A (en) | 2014-12-10 |
| RU2546880C2 true RU2546880C2 (en) | 2015-04-10 |
Family
ID=53296713
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013125554/10A RU2546880C2 (en) | 2013-06-03 | 2013-06-03 | Method of probiotic feed preparation for farm animals |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2546880C2 (en) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2019092136A1 (en) * | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Nolivade | Composition for improving the health of livestock |
| WO2019092134A1 (en) * | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Nolivade | Composition for improving the well-being of animals |
| RU2773533C2 (en) * | 2015-05-11 | 2022-06-06 | Майбиотикс Фарма Лтд | Systems and methods for growing probiotic bacterium biofilm on solid particles for intestine colonization by bacteria |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111733107A (en) * | 2020-07-07 | 2020-10-02 | 安徽农业大学 | Bovine-derived composite micro-ecological preparation and application thereof |
| CN114480167B (en) * | 2021-12-23 | 2024-01-12 | 美益添生物医药(武汉)有限公司 | Lactococcus lactis MD-622 and application thereof |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2155496C2 (en) * | 1997-04-18 | 2000-09-10 | Владимирова Елена Георгиевна | Method of preparing feed from vegetable raw material |
| RU2280464C2 (en) * | 2004-03-22 | 2006-07-27 | Александр Иванович Петенко | Method for preparing dry probiotic preparation "batsell" |
| RU2346463C2 (en) * | 2007-03-20 | 2009-02-20 | Нина Александровна Ушакова | Method for production of dietary supplement |
| RU2412612C1 (en) * | 2009-12-29 | 2011-02-27 | ООО "Научно-технический центр биологических технологий в сельском хозяйстве" | Method for production of "ferm km" probiotic fodder additive for domestic animals and birds |
-
2013
- 2013-06-03 RU RU2013125554/10A patent/RU2546880C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2155496C2 (en) * | 1997-04-18 | 2000-09-10 | Владимирова Елена Георгиевна | Method of preparing feed from vegetable raw material |
| RU2280464C2 (en) * | 2004-03-22 | 2006-07-27 | Александр Иванович Петенко | Method for preparing dry probiotic preparation "batsell" |
| RU2346463C2 (en) * | 2007-03-20 | 2009-02-20 | Нина Александровна Ушакова | Method for production of dietary supplement |
| RU2412612C1 (en) * | 2009-12-29 | 2011-02-27 | ООО "Научно-технический центр биологических технологий в сельском хозяйстве" | Method for production of "ferm km" probiotic fodder additive for domestic animals and birds |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| УШАКОВА Н.А. и др., Новое поколение пробиотических препаратов кормового назначения, Фундаментальные науки. Научные обзоры. 2012, N1, стр.184-192. ГАЛКИНА И.В. и др. Идентификация и отбор культур Lactococcus lactis для разработки технологии защитно- профилактических пищевых добавок., Инновационные технологии в пищевой промышленности, Минск "ИВЦ Минфина", 2009, стр. 70-79. * |
| ХАТИМОВА Н.Р., Разработка рецептуры пробиотической кормовой добавки на основе СО2 шротов пряно- ароматического сырья, Автореф. на соискание ученой степени кандидата технических наук, Краснодар, 2010 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2773533C2 (en) * | 2015-05-11 | 2022-06-06 | Майбиотикс Фарма Лтд | Systems and methods for growing probiotic bacterium biofilm on solid particles for intestine colonization by bacteria |
| RU2773533C9 (en) * | 2015-05-11 | 2022-10-12 | Майбиотикс Фарма Лтд | Systems and methods for growing probiotic bacterium biofilm on solid particles for intestine colonization by bacteria |
| WO2019092136A1 (en) * | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Nolivade | Composition for improving the health of livestock |
| WO2019092134A1 (en) * | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Nolivade | Composition for improving the well-being of animals |
| US11213554B2 (en) | 2017-11-08 | 2022-01-04 | Nolivade | Composition for improving the health of livestock |
| RU2779648C2 (en) * | 2021-11-29 | 2022-09-12 | Общество с ограниченной ответственностью "Научно-технический центр биологических технологий в сельском хозяйстве" (ООО "НТЦ БИО") | Method for obtaining a biologically active feed additive for farm animals and poultry |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013125554A (en) | 2014-12-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105661011B (en) | Functional biological protein feed leavening agent and fermented protein feed | |
| CN101449744B (en) | Multifunctional biology aquatic feedstuff additive | |
| RU2412612C1 (en) | Method for production of "ferm km" probiotic fodder additive for domestic animals and birds | |
| CN106260504B (en) | Method for producing microbial fermentation wet feed by using beer yeast paste | |
| CN101683125A (en) | Method for preparing biological fermentation feed for pigs | |
| CN101914460B (en) | Method for fermenting phodotorula benthica culture | |
| CN101107970A (en) | Bion cow concentrated feed and method for making same | |
| CN101412983A (en) | Bacillus coagulans, preparation of high-density cultivated spore preparation, and use thereof | |
| CN101186896A (en) | Fermentation material for composite microorganism and preparation method thereof | |
| CN102228129A (en) | Fermented feed | |
| CN102599351A (en) | Bio-enzyme and microorganism containing compound feed additive and preparation process thereof | |
| CN106983032A (en) | A kind of microorganism compound feed additive and preparation method thereof | |
| CN103184174B (en) | Production method of bacillus subtilis biological agent used for sodium humate-containing feed in medium | |
| CN103907747A (en) | Preparing method of high-protein feed | |
| CN101073585A (en) | Microbial preparation for improving eel liver growth and its making method | |
| CN115067419A (en) | Application of feed additive and preparation method of earthworm fermentation liquor | |
| RU2546880C2 (en) | Method of probiotic feed preparation for farm animals | |
| KR100287825B1 (en) | Probiotics For Feed Additives | |
| RU2506810C1 (en) | Method for production of complex biologically active fodder additive for sturgeon fishes | |
| KR100688441B1 (en) | Feed additive using citrus peel and method for manufacturing thereof | |
| CN110946211A (en) | Fermented wheat bran and preparation method and application thereof | |
| KR101252134B1 (en) | Feed additives for promoting growth of cattle and process for the preparation of feed for breeding cattle using the same | |
| CN104206671A (en) | Method for preparing biological feed from entire plant of sugarcane | |
| CN103918888A (en) | Method for preparing biological feed by taking sugarcane as raw material | |
| CN101597586A (en) | A kind of product enzyme probiotic bacterium and production method thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HC9A | Changing information about author(s) | ||
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150604 |