RU2528057C1 - Штамм "г 244/11" вируса блютанга 14 серотипа для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов - Google Patents
Штамм "г 244/11" вируса блютанга 14 серотипа для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2528057C1 RU2528057C1 RU2013134763/10A RU2013134763A RU2528057C1 RU 2528057 C1 RU2528057 C1 RU 2528057C1 RU 2013134763/10 A RU2013134763/10 A RU 2013134763/10A RU 2013134763 A RU2013134763 A RU 2013134763A RU 2528057 C1 RU2528057 C1 RU 2528057C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- serotype
- strain
- bluetongue virus
- bluetongue
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии. От племенной нетели выделен штамм вируса блютанга 14 серотипа, депонированный в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под №3032. Штамм является новым, ранее неизвестным, выделенным на территории РФ. Изобретение может быть использовано в научно-исследовательских институтах и предприятиях биологической промышленности при конструировании биопрепаратов, в частности вакцин против блютанга 14 серотипа и контроля их иммуногенности, а также изготовления антигенов для диагностических наборов. 2 табл., 3 пр.
Description
Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии и представляет собой штамм Г244/11 вируса блютанга (БТ), используемый в научно-исследовательских институтах и предприятиях биологической промышленности при конструировании биопрепаратов, в частности вакцин против блютанга 14 серотипа и контроля их иммуногенности, а также изготовления антигенов для диагностических наборов.
Вирус блютанга (катаральной лихорадки овец) относится к сем. Reoviridae, род Orbivirus, содержит линейную двуспиральную РНК, состоящую из 10 сегментов, диаметром 70-80 нм.
В настоящее время известно о 26 серотипах вируса блютанга. Для России проблема блютанга стала наиболее актуальной в связи с широкомасштабным импортом племенного крупного рогатого скота из неблагополучных по данному заболеванию стран западной Европы и возможным ввозом вирусоносителей. Блютанг включен в перечень болезней, подлежащих регистрации в МЭБ, и в «Перечень карантинных и особо опасных болезней животных» в России. В связи с продолжительной виремией и отсутствием явных клинических признаков, КРС считают основным резервуаром вируса.
При экспедиционных эпизоотологических обследованиях южных приграничных территорий в отобранных пробах сывороток крови овец были обнаружены специфические антитела к вирусу блютанга, однако клинических признаков болезни не было обнаружено (1). В республике Бурятия, в местности Тапхар у овец была установлена болезнь с симптомами и признаками, характерными для БТ и высокими уровнями заболеваемости и летальности (2). Тогда же был выделен вирус, который размножался в перевиваемой культуре клеток почки сибирского горного козерога (ПСГК-60) в титре 6,5-7,0 lg ЦПД 50/мл, почки зеленой мартышки (VERO) в титре 5,0-6,0 lg ЦПД 50/мл, почки овцы (ПО) в титре 5,0-6,0 lg ЦПД 50/мл. При типировании в реакции нейтрализации (РН) этот штамм отнесли к 16-му серотипу (прототип). В России разработана инактивированная гидроокисьалюминиевая вакцина на основе 16-го серотипа вируса блютанга, которая была успешно применена в Бурятии при ликвидации вспышки блютанга (4). Однако эта вакцина не может защитить животных от заражения вирусом блютанга 14 серотипа, так как нейтрализующие антитела вырабатываются в организме и защищают только от заражения гомологичным серотипом вируса блютанга, поэтому вирус-вакцину изготавливают только из тех серотипов, которые циркулируют в данной местности (3).
Целью настоящего изобретения является получение нового производственного вирулентного штамма вируса блютанга, выделенного в Российской Федерации и обладающего стабильными культуральными свойствами и высокой биологической и антигенной активностью, для конструирования биопрепаратов, в частности вакцин против блютанга 14 серотипа и контроля их иммуногенности, а также изготовления антигенов для диагностических наборов.
Поставленная цель достигается получением штамма «Г244/11» вируса блютанга, выделенного от племенной нетели из хозяйства Смоленской области. Вирус выделили с использованием куриных эмбрионов и культур клеток, затем идентифицировали его прямым вариантом МФА и типировали реакцией нейтрализации с сыворотками, специфическими к 25 серотипам вируса блютанга. Этот штамм размножается в культурах клеток почки сайги (ПС) в титре 6,5-7,5 lg ЦПД 50/мл, VERO - в титре 5,5-6,5 lg ЦПД 50/мл, при внутривенном введении куриным эмбрионам (КЭ) в титре 4,5-5,5 lg ЭЛД 50/мл. При типировании в РН с постоянной дозой сыворотки по индексу нейтрализации штамм отнесен к 14 серотипу вируса блютанга.
Штамм является новым, ранее неизвестным, выделенным на территории РФ, обозначен как штамм Г244/11 и депонирован в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии Россельхозакадемии под №3032.
Новый штамм Г244/11 характеризуется следующими признаками и свойствами.
Морфологические свойства. При электронно-микроскопическом исследовании в вируссодержащем материале обнаруживают округлые частицы, имеющие икосаэдрический тип симметрии, размером от 68 до 70 нм.
Культуральные свойства. Штамм размножается в перевиваемых линиях клеток гомологичного и гетерологичного происхождения: ПО, ПС, почки сирийского хомячка (ВНК-21/13), ПСГК-60, VERO, и др. Репродукция вируса сопровождается цитопатическим действием, приводящим к полной деструкции монослоя на 3-5 сутки культивирования.
Инфекционная активность. Накопление вируса в зависимости от культуральной системы, множественности заражения и длительности культивирования составляет 5,5-7,5 lg ТЦД50/мл.
Патогенность для лабораторных животных. Штамм вызывает гибель 11-12 дневных КЭ на 2-5 сутки после внутривенного заражения.
Антигенные свойства. Вирусоспецифические антигены, общие для всех серотипов вируса блютанга, выявляются в реакции преципитации, связывания комплемента, иммунофлуоресценции и др.
Типовая принадлежность. Типирование выделенного вируса проводили в РН с постоянной дозой сыворотки (5). Использовали 96-луночные микропланшеты Costar с односуточной культурой клеток VERO, нормальную и специфическую к 25 серотипам вируса БТ сыворотку овец, а также сыворотки, специфичные к антигенно-родственным заболеваниям, вызываемым вирусами эпизоотической геморрагической болезни оленей (ЭГБО) и болезни Ибараки (БИ). В таблице 1 приведены результаты типирования выделенного изолята в РН на уровне 3 пассажа на культуре клеток VERO с постоянной дозой сыворотки. При этом определяли индекс нейтрализации (ИН), который выражает максимальное количество инфекционных доз, которое нейтрализуется данной сывороткой, по сравнению с контрольной (отрицательной) сывороткой. Логарифм индекса нейтрализации вычисляют по разности логарифмических показателей титра вируса в контроле (с отрицательной сывороткой) и в присутствии сыворотки.
| Таблица 1 | ||||
| Результаты типирования выделенного изолята по индексу нейтрализации | ||||
| № п/п | Наименование сывороток | Титр вируса (lg ТЦД50/мл) | Индекс нейтр (ИН) | |
| 1 | CC* против вируса блютанга 1 серотипа | 4,25 | 0,25 | |
| 2 | CC против вируса блютанга 2 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 3 | CC против вируса блютанга 3 серотипа | 4,25 | 0,25 | |
| 4 | CC против вируса блютанга 4 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 5 | CC против вируса блютанга 5 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 6 | CC против вируса блютанга 6 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 7 | CC против вируса блютанга 7 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 8 | CC против вируса блютанга 8 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 9 | CC против вируса блютанга 9 серотипа | 4,00 | 0,50 | |
| 10 | CC против вируса блютанга 10 серотипа | 4,25 | 0,25 | |
| 11 | CC против вируса блютанга 11 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 12 | CC против вируса блютанга 12 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 13 | CC против вируса блютанга 13 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 14 | CC против вируса блютанга 14 серотипа | 1,50 | 3,0 | |
| 15 | CC против вируса блютанга 15 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 16 | CC против вируса блютанга 16 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 17 | CC против вируса блютанга 17 серотипа | 4,75 | 0 | |
| 18 | CC против вируса блютанга 18 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 19 | CC против вируса блютанга 19 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 20 | CC против вируса блютанга 20 серотипа | 4,25 | 0,25 | |
| 21 | CC против вируса блютанга 21 серотипа | 3,75 | 0,75 | |
| 22 | CC против вируса блютанга 22 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 23 | CC против вируса блютанга 23 серотипа | 4,25 | 0,25 | |
| 24 | CC против вируса блютанга 24 серотипа | 4,25 | 0,25 | |
| 25 | CC против вируса блютанга 25 серотипа (нет)** | - | - | |
| 26 | CC против вируса блютанга 26 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 27 | CC против вируса болезни Ибараки | 4,50 | 0 | |
| 28 | CC против вируса ЭГБО 1 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 29 | CC против вируса ЭГБО 2 серотипа | 4,50 | 0 | |
| 30 | HC*** овцы | 4,50 | 0 | |
| 31 | HC фетальная плода КРС | 4,50 | 0 | |
| * - CC - специфическая сыворотка | ||||
| ** - Вирус выделен и идентифицирован только у коз, нет сыворотки | ||||
| *** - HC - нормальная сыворотка | ||||
Логарифм ИН до 1 считают отрицательным, от 1 до 2 - сомнительным, равным и более 2 - положительным. Полученные результаты однозначно подтверждают как принадлежность выделенного изолята к вирусу блютанга, так и его чистоту от антигенно-родственных вирусов ЭГБО и болезни Ибараки. Наибольший индекс нейтрализации (3,0 lg) наблюдали с сывороткой, специфичной к 14-му серотипу вируса блютанга. Индексы нейтрализации выделенного штамма сыворотками, специфичными к остальным двадцати четырем серотипам вируса блютанга, и гетерологичными сыворотками не превышал 0,75 lg. Следовательно, выделенный штамм вируса блютанга идентифицирован и типирован как вирус блютанга 14 серотипа.
Способ и срок хранения, периодичность пассажей. Штамм хранят в лиофилизированном состоянии при температуре не выше минус 40°C и «освежают» пассированием в культуре клеток один раз в 10 лет.
Контаминация бактериями, грибами, микоплазмами и посторонними вирусами. Лиофилизированный штамм не контаминирован бактериями, грибами, микоплазмами и посторонними вирусами.
Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1. Накопление вируса в культуре клеток VERO и ПС.
В табл.2 приведены сведения по культивированию штамма «Г244/11» вируса блютанга в монослое культур клеток VERO, ПС и ВНК-21 (суспензионный трофовариант).
| Таблица 2 | |||||
| Наименование культуры клеток | Накопление вируса блютанга штамма Г244/11 (lg ЦПД50/мл) | ||||
| 1 пассаж | 2 пассаж | 3 пассаж | 4 пассаж | 5 пассаж | |
| VERO | 1,5 | 4,0 | 4,5-5,5 | 5,5-6,0 | 5,5-6,0 |
| ПС (после 2 пассажей на VERO) | 5,5-6,0 | 6,0-6,5 | 6,5-7,0 | 6,5-7,5 | 6,5-7,5 |
| ВПК-21/13 (после 2 пассажей на VERO) | 5,0-5,5 | 6,0-6,25 | 6,5-7,0 | 6,5-7,5 | 6,5-7,5 |
Как следует из табл.2, титры выделенного вируса в культуре клеток VERO на уровне пятого пассажа составили 5,5-6,0 lg ЦПД 50/мл, в культуре клеток ПС на уровне пятого пассажа 6,5-7,5 lg ЦПД 50/мл, в культуре клеток ВПК-21/13 на уровне пятого пассажа 6,5-7,5 lg ЦПД 50/мл, что обеспечивает возможность приготовления сырья для инактивированной вакцины.
Пример 2. Приготовление культурального специфического антигена вируса блютанга штамм Г244/11.
Суспензионную культуру клеток ВНК 21/13 в количестве 10 л с концентрацией клеток 0,7-1,0 млн кл/мл заражали вирусом блютанга штамм Г244/11 с множественностью заражения 0,01 ТЦД50/кл. Поддерживающая среда - 0,25% ФГМ 2% сыворотки крупного рогатого скота (КРС). Вирус культивировали при (37,0±0,5)°C, поддерживая pH среды в пределах 7,0-7,4 в течение 40-60 часов до появления в суспензии 30% мертвых клеток. После этого клетки осаждали центрифугированием при 4000 об/мин 30 мин и готовили лизат инфицированных клеток. С этой целью к осадку добавляли дистиллированную воду до 100 мл, ресуспендировали и замораживали при минус (20,0±5,0)°C. После оттаивания обрабатывали ультразвуком 2 раза по 12 мкм в течение 1 минуты с интервалом 1 мин и снова суспензию с клеточным дебрисом замораживали и оттаивали, затем центрифугировали при 4000 об/мин 30 мин. Надосадочную жидкость, содержащую антиген блютанга, отбирали, а к осадку добавляли такое же количество дистиллированной воды, ресуспендировали его и с ним проводили те же операции. Полученный вторичный осветленный лизат объединяли с первым и инактивировали β-пропиолактоном. С этой целью к 200 мл объединенного надосадка лизированных клеток, содержащего антиген вируса блютанга, прогретого до (37,0±0,5)°C, вносили 0,2 мл β-пропиолактона и выдерживали при этой температуре 2 ч при постоянном перемешивании. Затем снова вносили β-пропиолактон в том же количестве и выдерживали 18 часов при (4,0±2,0)°C. Полноту инактивации антигена проверяли в 3-х последовательных пассажах в чувствительной культуре клеток ВПК 21/13. Полученный антиген не содержал остаточной инфекционности, обладал высокой специфичностью и активностью в реакциях длительного связывания комплемента (1:64-1:256) и диффузионной преципитации (1:2-1:4).
Пример 3. Получение инактивированного культурального вируссодержащего сырья из вируса блютанга штамм Г244/11 с применением суспензионного метода культивирования.
Для получения производственного вируса суспензионные клетки ВПК 21/13 (посевная концентрация клеток 300-500 тыс/мл) в среде 0,25 ФГМ-С на солевом растворе Эрла помещают в реактор (10-50 л) и выращивают при (37,0±0,5)°C и постоянном перемешивании в течение 2-3 сут до увеличения клеточной концентрации в до (1-2)×106 кл/мл. Затем суспензию клеток указанной концентрации заражают вирусом блютанга 14 серотипа и инкубируют при температуре (37,0±0,5)°C. В течение 48-72 ч отбирают пробы на определение жизнеспособности клеток в суспензии, затем производят подсчет в камере Горяева после окрашивания 0,5% водным раствором трипанового синего по общепринятой методике. При обнаружении (80±10,0)% нежизнеспособных клеток, культивирование прекращают и отбирают пробы вируса для определения инфекционной активности и отсутствия контаминации бактериальной и грибной микрофлорой.
Полученное таким образом культуральное вируссодержащее сырье вируса блютанга 14 серотипа с исходной биологической активностью 5,5-7,0 lg ТЦД50/см3, инактивируют препаратом A-24, добавляют масляный адъювант - остальное до 100 мас.%, тщательно перемешивают и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, масс.%:
| Культуральное инактивированное сырье | |
| 14 серотипа вируса блютанга | 30,00 |
| А-24 | 0,02 |
| Монтанид ISA-70 | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета. Содержание антигена в вакцине составляет 30%.
Пример 4. Получение инактивированного культурального вируссодержащего сырья из вируса блютанга штамм Г244/11 с применением роллерного метода культивирования.
Для получения культурального вируссодержащего сырья вирусом блютанга (штамм Г244/11) заражают элективную клеточную культуру ПС или Vero, выращенную в роллерных бутылях, с множественностью 0,01-0,001 ТЦД50/клетка, и инкубируют при (37,0±0,5)°C в течение 48-72 часов до проявления характерных цитопатических изменений и поражении 90-100% клеточного монослоя. Затем содержимое бутылей объединяют и определяют инфекционность вирусного материала титрованием в культуре клеток. Затем к вируссодержащей культуральной суспензии с исходной активностью не менее 6,5 lg ТЦД50/мл вносят препарат A-24, растворяют его путем тщательного перемешивания и инкубируют при 37°C 48 ч.
К полученному таким образом инактивированному сырью добавляют масляный адъювант - остальное до 100%, тщательно перемешивают, пропускают через коллоидную мельницу для эмульгирования и получают вакцину при следующем соотношении компонентов, масс %:
Культуральное инактивированное сырье
| 14 серотипа вируса блютанга | 50,00 |
| A-24 | 0,02 |
| Масляный адъювант | остальное |
Приготовленная таким образом вакцина представляет собой эмульсию бледно-розового цвета. Содержание антигена в вакцине составляет 50%.
Вакцину вводят по 1,5 см3 подкожно 4 овцам или по 3 см3 2 нетелям в область внутренней поверхности бедра, дважды с интервалом 14 сут. До иммунизации и через 21 день после второй вакцинации от животных отбирают кровь и сыворотку исследуют на наличие вируснейтрализующих антител в реакции нейтрализации. РН проводят по стандартной методике со 100-300 ТЦД50 вируса гомологичного серотипа в пробирках или микрометодом в планшетах (разведение сывороток с 1:2 до 1:128), использование культуры клеток Vero или ВНК-21/13. Вакцина вызывала образование BH-антител у испытуемых животных в титрах 1:8-1:16. Вакцину считают иммуногенной, если она индуцирует образование вируснейтрализующих антител в исследуемых сыворотках крови вакцинированных животных в титре не ниже 1:4 против гомологичного серотипа вируса, включенного в состав вакцины.
Источники информации
1. Серологический мониторинг катаральной лихорадки овец / А.Ю. Чичикин, А.Л. Семенихин, А.А. Коломыцев, А.А. Стрижаков, М.Б. Новикова, А.В. Луницин, А.В. Книзе // Вирусные болезни сельскохозяйственных животных. - Тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции. Владимир: ОПИиНИ ВНИИЗЖ. - 1995. - С.167.
2. Идентификация и типирование вируса катаральной лихорадки овец / И.Ф. Вишняков, А.А. Стрижаков, М.Б. Новикова, А.В. Луницин, В.В. Куриннов, Г.М. Карпов, В.И. Балышева, К.С. Волокитина // Ветеринария. - 1995. - №4. - С.20-25.
3. Катаральная лихорадка овец (КЛО, блютанг, синий язык) // Пятьдесят лет борьбы с особо опасными болезнями животных / Рос. акад. с.-х. наук; ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии; ред. кол.: Д.В. Колбасов (гл. ред.) [и др.] - Владимир: Атлас. - 2008. - С.52-54.
4. Серологическое обследование жвачных в Бурятии через семь лет после вспышки блютанга / Стрижаков А.А., Новикова М.Б., Цыбанов С.Ж., Муруева Г.Б. // Междунар. науч.-практ. конф. "Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными, экзот. зооантропоноз. болезнями животных": Сб. ст. - Покров, 2000, - С.63-64.
5. BLUETONGUE // Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals, 5th edition, 2004 CHAPTER 2.1.9. [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.oie.int/fr/normes/mmanual/A_summry.htm/. - Загл. с экрана.
Claims (1)
- Штамм «Г244/11» вируса блютанга 14 серотипа, семейства Reoviridae рода Orbivirus, депонированный в Коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под инв. №3032, для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013134763/10A RU2528057C1 (ru) | 2013-07-25 | 2013-07-25 | Штамм "г 244/11" вируса блютанга 14 серотипа для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013134763/10A RU2528057C1 (ru) | 2013-07-25 | 2013-07-25 | Штамм "г 244/11" вируса блютанга 14 серотипа для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2528057C1 true RU2528057C1 (ru) | 2014-09-10 |
Family
ID=51540225
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013134763/10A RU2528057C1 (ru) | 2013-07-25 | 2013-07-25 | Штамм "г 244/11" вируса блютанга 14 серотипа для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2528057C1 (ru) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2077583C1 (ru) * | 1995-01-18 | 1997-04-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии | Штамм "тапхар" вируса блютанга febris infecthiosa catarhaliss ovium, используемый для изготовления вакцины |
| RU2352357C1 (ru) * | 2007-08-28 | 2009-04-20 | ГНУ ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии | Способ получения универсального инактивированного антигена вируса блютанга для серодиагностики |
| RU2391114C1 (ru) * | 2008-12-29 | 2010-06-10 | Открытое Акционерное Общество "Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины" | Способ изготовления вакцины против блютанга крупного и мелкого рогатого скота (варианты) и вакцина против блютанга крупного и мелкого рогатого скота |
-
2013
- 2013-07-25 RU RU2013134763/10A patent/RU2528057C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2077583C1 (ru) * | 1995-01-18 | 1997-04-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии | Штамм "тапхар" вируса блютанга febris infecthiosa catarhaliss ovium, используемый для изготовления вакцины |
| RU2352357C1 (ru) * | 2007-08-28 | 2009-04-20 | ГНУ ВНИИ ветеринарной вирусологии и микробиологии | Способ получения универсального инактивированного антигена вируса блютанга для серодиагностики |
| RU2391114C1 (ru) * | 2008-12-29 | 2010-06-10 | Открытое Акционерное Общество "Институт Биотехнологий Ветеринарной Медицины" | Способ изготовления вакцины против блютанга крупного и мелкого рогатого скота (варианты) и вакцина против блютанга крупного и мелкого рогатого скота |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106267195B (zh) | 一种猪病毒性腹泻三联抗原抗体复合物及其制备方法 | |
| CN111000993B (zh) | 一种鸭病毒性肝炎、鸭呼肠孤病毒病二联灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN105664150B (zh) | 一种鸡新城疫病毒、禽流感病毒和禽腺病毒三联灭活疫苗 | |
| CN109207436B (zh) | 一株i群4型禽腺病毒毒株及其应用 | |
| CN105535958B (zh) | 一种鸡新城疫病毒、传染性支气管炎、禽腺病毒三联灭活疫苗 | |
| CN102805864A (zh) | 鸡新城疫和h9n2亚型禽流感二联灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN109097340B (zh) | 一种禽腺病毒、一种四联疫苗及其制备方法 | |
| RU2603003C1 (ru) | Вакцина инактивированная сорбированная против ящура типов а, о, азия-1 | |
| CN104258389A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| CN104888213A (zh) | 一种猪瘟脾淋源复合活疫苗的制备方法 | |
| RU2378014C2 (ru) | Ассоциированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная | |
| RU2675995C1 (ru) | Штамм "ВН-3" вируса гепатита утят типа I рода Avihepatovirus семейства Picornaviridae для производства вакцинных препаратов и диагностических наборов | |
| CN103864931B (zh) | 一种伪狂犬病标准阳性血清的制备及其冻干保存方法 | |
| RU2528057C1 (ru) | Штамм "г 244/11" вируса блютанга 14 серотипа для вирусологических исследований, изготовления вакцинных и диагностических препаратов | |
| Islam et al. | Isolation and characterization of infectious laryngotracheitis virus in layer chickens | |
| RU2560569C2 (ru) | Штамм "алексеевский" вируса оспы свиней для вирусологических, молекулярно-генетических, мониторинговых исследований, изготовления вакцин и диагностических препаратов | |
| Li et al. | Preparation and immunoprotection of subgroup B avian leukosis virus inactivated vaccine | |
| CN102764432A (zh) | 大鲵病毒性出血病细胞培养灭活疫苗及制备方法和应用 | |
| CN106636013A (zh) | 安卡拉病毒毒株FAdV‑HB及其灭活疫苗的制备和应用 | |
| CN103028112B (zh) | 一种鸡新城疫和传染性支气管炎二联活疫苗 | |
| RU2647757C1 (ru) | Штамм "Волгоградский" вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота для вирусологических, молекулярно-генетических, мониторинговых исследований, изготовления вакцин и диагностических препаратов | |
| RU2658351C1 (ru) | Штамм "гс-11" вируса инфекционного бронхита кур для производства инактивированных сорбированных и эмульгированных вакцин, а также диагностических целей | |
| CN111494614A (zh) | 一种三联灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN105770885B (zh) | 一种鸡新城疫病毒、禽腺病毒二联灭活疫苗 | |
| RU2607791C1 (ru) | Аттенуированный штамм "СКА-2015 ВНИИВВиМ" вируса африканской чумы свиней VIII серотипа для вирусологических и молекулярно-генетических исследований |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160726 |