RU2502522C1 - Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота - Google Patents
Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота Download PDFInfo
- Publication number
- RU2502522C1 RU2502522C1 RU2012132042/15A RU2012132042A RU2502522C1 RU 2502522 C1 RU2502522 C1 RU 2502522C1 RU 2012132042/15 A RU2012132042/15 A RU 2012132042/15A RU 2012132042 A RU2012132042 A RU 2012132042A RU 2502522 C1 RU2502522 C1 RU 2502522C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- cattle
- vaccine
- electrolysis
- viral diarrhea
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, микробиологии и биотехнологии и может быть использовано при разработке средств специфической профилактики, и, в частности, для получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота. Сущность: для повышения качества целевого продукта за счет возможности использования в качестве инактивирующего агента раствора оксидантов, полученного электролизом раствора хлорида натрия, а также ускорения способа получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота, включающего приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, сбор вируссодержащей жидкости, инактивацию с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме, причем инактивацию вируса вирусной диареи крупного рогатого скота проводят раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0-20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН 7,0-8,0, концентрации оксидантов 0,7-0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1000±50 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=400-600 мг/л в течение 60-70 мин при расходе инактивирующего средства 4,5-5,0 см3 на 0,8- 1,0 л вируссодержащей жидкости. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, микробиологии и биотехнологии, и может быть использовано при разработке средств специфической профилактики, и, в частности, для получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота.
Известен способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота включающем приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса вирусной диареи «Орегон», инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса вирусной диареи, сбор вируссодержащей жидкости, инактивирование ее с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме (Патент РФ №2372938, «Инактивированная бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота и способ профилактики вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота», опубл. 20.11.2009, МКИ А61К 39/205).
Недостатком известного технического решения является использование при инактивации вируса формалина, обладающего канцерогенной активностью. Известно, что при незначительном превышении рабочей концентрации формалин вызывает быструю гибель культур клеток для выращивания вирусов и подавление инфекционной активности вирусов, что нередко сопровождается существенным снижением иммуногенности. При приготовлении вакцины не исключается возможность попадания остатков формальдегида вместе с вакциной в организм иммунизируемых животных, что крайне нежелательно.
Задачей заявленного технического решения является повышение качества целевого продукта за счет возможности использования в качестве инактивирующего агента раствора оксидантов, полученного электролизом раствора хлорида натрия, а также ускорение способа.
Поставленная задача решается в способе получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота, включающем приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, сбор вируссодержащей жидкости, инактивацию с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме тем, что инактивацию вируса вирусной диареи крупного рогатого скота проводят раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0-20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН 7,0-8,0, концентрации оксидантов 0,7-0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1000±50 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=400-600 мг/л в течение 60-70 мин при расходе инактивирующего средства 4,5-5,0 см3 на 0,8-1,0 л вируссодержащей жидкости.
Поставленная задача решается также в способе получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота тем, что в качестве штамма вируса вирусной диареи крупного рогатого скота используют штамм «Орегон» или штамм вируса диареи крупного рогатого скота ГКВ 2336 семейства Flaviviridae рода Pestivirus.
Известен штамм вируса диареи крупного рогатого скота «Орегон» (Патент РФ №2372938, «Инактивированная бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота и способ профилактики вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота», опубл. 20.11.2009, МКИ А61К 39/205).
Известен штамм вируса диареи крупного рогатого скота ГКВ 2336, семейства Flaviviridae, рода Pestivirus (Патент РФ №2395299, Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, рота-, коронавирусной болезней и лептоспироза крупного рогатого скота, МПК А61К 39/295, C12N 7/08, A61P 31/12, опубл. 27.07.2010).
Изобретение иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма «Орегон» вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток коронарных сосудов теленка «КСТ», культивируют вирус вирусной диареи крупного рогатого скота до достижения титра 6,0 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН 7,0, концентрации оксидантов 0,7% и окислительно-восстановительного потенциала +950 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=400 мг/л в течение 60 мин при расходе инактивирующего средства 4,5 см3 на 0,8 л вируссодержащей жидкости в конечной концентрации при температуре 37°С в течение 60 минут при рН 7,2. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 1, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации 1:512, в то время как в известном способе антигенная активность составила 1:256.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Пример 2. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма «Орегон» вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток коронарных сосудов теленка «КСТ», культивируют вирус вирусной диареи крупного рогатого скота до достижения титра 6,5 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН-8,0, концентрации оксидантов 0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1050 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=600 мг/л в течение 70 мин при расходе инактивирующего средства 5,0 см на 1,0 л вируссодержащей жидкости при температуре 38°С в течение 60 минут при рН 7,4. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 2, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации 1:256, в то время как в известном способе антигенная активность составила 1:256.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Пример 3. Приготавливают посевной материал из штамма вируса диареи крупного рогатого скота ГКВ 2336, семейства Flaviviridae, рода Pestivirus, инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток коронарных сосудов теленка «КСТ», культивируют вирус вирусной диареи крупного рогатого скота до достижения титра 6,0 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН 7,0, концентрации оксидантов 0,7% и окислительно-восстановительного потенциала +950 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=400 мг/л в течение 60 мин при расходе инактивирующего средства 4,5 см3 на 0,8 л вируссодержащей жидкости при температуре 37°С в течение 60 минут при рН 7,2. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 3, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации 1:512, в то время как в известном способе антигенная активность составила 1:256.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Пример 4. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма вируса диареи крупного рогатого скота ГКВ 2336, семейства Flaviviridae, рода Pestivims, инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток коронарных сосудов теленка «КСТ», культивируют вирус вирусной диареи крупного рогатого скота до достижения титр 6,5 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН-8,0, концентрации оксидантов 0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1050 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=600 мг/л в течение 70 мин при расходе инактивирующего средства 5,0 см3 на 1,0 л вируссодержащей жидкости при температуре 38°С в течение 60 минут при рН 7,4. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 4 которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации 1:512, в то время как в известном способе антигенная активность составила 1:256.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Кроме того, получаемая согласно заявляемому способу вакцина имеет срок хранения до 1 года.
Техническим результатом, достигаемым при применении предлагаемого изобретения является повышение эффективности инактивационной обработки вируссодержащих материалов при уменьшении концентрации инактивирующего средства, сокращение экспозиции обработки до 60-70 минут против 72 часов у прототипа; установлено, что раствор оксидантов относится к IV классу опасности, в соответствующих концентрациях не вызывает токсического действия на перевиваемую культуру клеток коронарных сосудов теленка «КСТ», используемую для выращивания и накопления вируссодержащего материала, быстро разлагается после воздействия на вирус, исключая тем самым попадание в организм животных с биопрепаратом, обеспечивает снижение затрат на приобретение препарата до 6 раз и повышение безопасности труда обслуживающего персонала, отсутствует вредное влияние на окружающую среду. Вакцина имеет достаточную антигенную активность и обладает протективными свойствами. Способ обработки вируссодержащего материала предложенным инактивантом обеспечивает безопасность продукции, получаемой от сельскохозяйственных животных (мясо, молоко).
Claims (2)
1. Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота, включающий приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, сбор вируссодержащей жидкости, инактивацию с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме, отличающийся тем, что инактивацию вируса вирусной диареи крупного рогатого скота проводят раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0-20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин рН 7,0-8,0, концентрации оксидантов 0,7-0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1000±50 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=400-600 мг/л в течение 60-70 мин при расходе инактивирующего средства 4,5-5,0 см3 на 0,8-1,0 л вируссодержащей жидкости.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве штамма вируса вирусной диареи крупного рогатого скота используют штамм «Орегон» или штамм вируса диареи крупного рогатого скота ГКВ 2336 семейства Flaviviridae рода Pestivirus.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012132042/15A RU2502522C1 (ru) | 2012-07-27 | 2012-07-27 | Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2012132042/15A RU2502522C1 (ru) | 2012-07-27 | 2012-07-27 | Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2502522C1 true RU2502522C1 (ru) | 2013-12-27 |
Family
ID=49817599
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2012132042/15A RU2502522C1 (ru) | 2012-07-27 | 2012-07-27 | Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2502522C1 (ru) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1835659A1 (ru) * | 1990-12-04 | 1996-05-27 | Белорусский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вышелесского | Способ приготовления эритроцитарного диагностикума на основе вируса диареи крупного рогатого скота |
| US20030113704A1 (en) * | 2000-12-21 | 2003-06-19 | Cerus Corporation | Methods for inactivation of pathogens in biological materials |
| US20030165520A1 (en) * | 1998-11-10 | 2003-09-04 | Xuemei Cao | Attenuated forms of bovine viral diarrhea virus |
| RU2236253C2 (ru) * | 2002-10-16 | 2004-09-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома свиней |
| RU2366458C1 (ru) * | 2008-01-09 | 2009-09-10 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") | Ассоциированная вакцина против ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная |
-
2012
- 2012-07-27 RU RU2012132042/15A patent/RU2502522C1/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU1835659A1 (ru) * | 1990-12-04 | 1996-05-27 | Белорусский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им.С.Н.Вышелесского | Способ приготовления эритроцитарного диагностикума на основе вируса диареи крупного рогатого скота |
| US20030165520A1 (en) * | 1998-11-10 | 2003-09-04 | Xuemei Cao | Attenuated forms of bovine viral diarrhea virus |
| US20030113704A1 (en) * | 2000-12-21 | 2003-06-19 | Cerus Corporation | Methods for inactivation of pathogens in biological materials |
| RU2236253C2 (ru) * | 2002-10-16 | 2004-09-20 | Федеральное государственное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных | Вакцина эмульсионная инактивированная против репродуктивно-респираторного синдрома свиней |
| RU2366458C1 (ru) * | 2008-01-09 | 2009-09-10 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") | Ассоциированная вакцина против ротавирусной и коронавирусной инфекций крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sanders et al. | Inactivated viral vaccines | |
| CN101716341B (zh) | 一种人用二倍体细胞狂犬灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN102260649B (zh) | 传染性法氏囊病毒及用鸡胚细胞系和生物反应器繁殖法氏囊病毒制备灭活疫苗和联苗的方法 | |
| CN102174476A (zh) | 预防鸭病毒性肝炎的灭活疫苗及其制备方法 | |
| CN102178945B (zh) | 一种石斑鱼虹彩病毒灭活疫苗的制备方法 | |
| CN103409375A (zh) | 一种接种鸡胚用病毒稀释液及其制备方法 | |
| CN102727879B (zh) | 一种石斑鱼虹彩病毒（sgiv）灭活疫苗的转瓶生产方法 | |
| CN104258389B (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| CN101099864A (zh) | 预防鸡新城疫、传染性支气管炎的二联灭活疫苗的制备方法 | |
| CN104017776A (zh) | 一种羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗及其制备方法和应用 | |
| CN104043117A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
| CN104940191B (zh) | 一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂及制备方法 | |
| CN111729091B (zh) | 一种用家兔检验猪塞内卡病毒病灭活疫苗效力的方法 | |
| CN101745106A (zh) | 一种猪细小病毒病活疫苗及其制备方法 | |
| RU2522780C2 (ru) | Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота | |
| CN102228685A (zh) | 中国大鲵虹彩病毒细胞灭活疫苗的制备及其使用方法 | |
| CN102886043B (zh) | 猪乙型脑炎病毒与猪细小病毒二联灭活疫苗及其制备方法 | |
| RU2502522C1 (ru) | Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота | |
| CN113521261B (zh) | 一种抗冠状病毒和细菌双重纳米免洗消毒凝胶及其制备方法和应用 | |
| RU2509571C1 (ru) | Способ получения вакцины против парагриппа-3 крупного рогатого скота | |
| CN102764432A (zh) | 大鲵病毒性出血病细胞培养灭活疫苗及制备方法和应用 | |
| CN1911445B (zh) | 流行性感冒原代地鼠肾细胞多价疫苗及其制备方法 | |
| CN102526721B (zh) | 一种斑点叉尾鮰出血病的灭活疫苗及制备方法和应用 | |
| CN103100083A (zh) | 疫苗及其制备方法 | |
| CN102600469A (zh) | 一种猪瘟活疫苗 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140728 |