RU2522780C2 - Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота - Google Patents
Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота Download PDFInfo
- Publication number
- RU2522780C2 RU2522780C2 RU2012132044/10A RU2012132044A RU2522780C2 RU 2522780 C2 RU2522780 C2 RU 2522780C2 RU 2012132044/10 A RU2012132044/10 A RU 2012132044/10A RU 2012132044 A RU2012132044 A RU 2012132044A RU 2522780 C2 RU2522780 C2 RU 2522780C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- cattle
- strain
- preparing
- electrolysis
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, вирусологии и биотехнологии и касается способа получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. Охарактеризованный способ: приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, сбор вируссодержащей жидкости, инактивацию ее с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме. При этом инактивацию вируссодержащей жидкости проводят раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0-20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH 7,0-8,0, концентрации оксидантов 0,7-0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1000±50 мВ и при расходе инактивирующего средства 4,5-5,0 см3 на 0,8-1,0 л вируссодержащей жидкости, а инактивацию вируссодержащей жидкости проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=200-300 мг/л в течение 60-70 мин и при температуре 37-38°С при рН 7,2-7,4. Представленное изобретение может быть использовано при разработке средств специфической профилактики и, в частности, для получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота. 1 з.п. ф-лы, 4 пр.
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, микробиологии и биотехнологии, может быть использовано при разработке средств специфической профилактики и, в частности, для получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.
Известен способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, включающий приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса инфекционного ринотрахеита, сбор вируссодержащей жидкости, инактивирование ее с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме (Патент РФ №2378014, «Ассоциированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная», опубл. 10.01.2010, МКИ A61K 39/205).
Недостатком известного технического решения является использование при инактивации вируса формалина, обладающего канцерогенной активностью. Известно, что при незначительном превышении рабочей концентрации формалин вызывает быструю гибель культур клеток для выращивания вирусов и подавление инфекционной активности вирусов, что нередко сопровождается существенным снижением иммуногенности. При приготовлении вакцины не исключается возможность попадания остатков формальдегида вместе с вакциной в организм иммунизируемых животных, что крайне нежелательно.
Задачей заявленного технического решения является повышение качества целевого продукта за счет возможности использования в качестве инактивирующего агента раствора оксидантов, полученного электролизом раствора хлорида натрия, а также ускорение способа.
Поставленная задача решается в способе получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, включающем приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, сбор вируссодержащей жидкости, инактивацию ее с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме, тем, что инактивацию вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота проводят раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0-20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH 7,0-8,0, концентрации оксидантов 0,7-0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1000±50 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=200-300 мг/л в течение 60-70 мин при расходе инактивирующего средства 4,5-5,0 см3 на 0,8-1,0 л вируссодержащей жидкости.
Поставленная задача решается также в способе получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота тем, что в качестве штамма вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота используют вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота штамм ГКВ 2333, семейства Herpes viridae, подсемейства Alphaherpesviridae или штамм «ВНИИЗЖ» вируса ИРТ КРС, сем. Herpesviridae, рода Varicellavims, коллекция ФГУ «ВГНКИ» «ВНИИЗЖ-ДЕП».
Известен штамм вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота штамм ГКВ 2333 (Патент РФ №2395299, «Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, рота-, коронавирусной болезней и лептоспироза крупного рогатого скота», опубл. 27.07.2010, МКИ A61K 39/295, C12N 7/08, A61P 31/12).
Известен штамм инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота штамм «ВНИИЗЖ» вируса ИРТ КРС, сем. Herpesviridae, рода Varicellavims, коллекция ФГУ «ВГНКИ» «ВНИИЗЖ-ДЕП» (Патент РФ №2378014, «Ассоциированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная», опубл. 10.01.2010, МКИ A61K 39/205).
Изобретение иллюстрируется на следующих примерах.
Пример 1. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма ГКВ 2333, семейства Herpesviridae, подсемейства Alphaherpesviridae вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток почки теленка «ПТ-80», культивируют вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота до достижения титра 5,5 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH 7,0, концентрации оксидантов 0,7% и окислительно-восстановительного потенциала +950 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=200 мг/л в течение 60 мин при расходе инактивирующего средства 4,5 см3 на 0,8 л вируссодержащей жидкости при температуре 37°C в течение 60 минут при pH 7,2. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 1, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации (PH) 4 log2, в то время как в известном способе антигенная активность составила 3 log2.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Пример 2. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма ГКВ 2333, семейства Herpesviridae, подсемейства Alphaherpesviridae вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток почки теленка «ПТ-80», культивируют вирус вирусной диареи крупного рогатого скота до достижения титра 6,0 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH 8,0, концентрации оксидантов 0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1050 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=300 мг/л в течение 70 мин при расходе инактивирующего средства 5,0 см на 1,0 л вируссодержащей жидкости при температуре 38°C в течение 60 минут при pH 7,4. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 2, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации (PH) 4 log2, в то время как в известном способе антигенная активность составила 4 log2.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Пример 3. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма «ВНИИЗЖ» вируса ИРТ КРС, сем. Herpesviridae, рода Varicellavims, коллекция ФГУ «ВГНКИ» «ВНИИЗЖ-ДЕП», инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток почки теленка «ПТ-80», культивируют вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота до достижения титра 5,5 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH 7,0, концентрации оксидантов 0,7% и окислительно-восстановительного потенциала +950 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=150 мг/л в течение 60 мин при расходе инактивирующего средства 4,5 см3 на 0,8 л вируссодержащей жидкости при температуре 37°C в течение 60 минут при pH 7,2. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 3, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации (PH) 3 log2, в то время как в известном способе антигенная активность составила 4 log2.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Пример 4. Приготавливают вируссодержащий материал из штамма «ВНИИЗЖ» вируса ИРТ КРС, сем. Herpesviridae, рода Varicellavims, коллекция ФГУ «ВГНКИ» «ВНИИЗЖ-ДЕП», инфицируют вируссодержащим материалом культуру перевиваемых клеток почки теленка «ПТ-80», культивируют вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота до достижения титра 6,0 lg (ТЦД 50/мл), проводят сбор вируссодержащей жидкости, инактивируют раствором оксидантов, полученным электролизом 20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH - 8,0, концентрации оксидантов 0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1050 мВ, обработку проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=250 мг/л в течение 70 мин при расходе инактивирующего средства 5,0 см3 на 1,0 л вируссодержащей жидкости при температуре 38°C в течение 60 минут при pH 7,4. Далее целевой продукт получают согласно известному способу. Получили вакцину 4, которая имеет антигенную активность в реакции нейтрализации (PH) 4 log2, в то время как в известном способе антигенная активность составила 4 log2.
Вакцину проверили на антигенность на лабораторных животных. В результате вакцина оказалась антигенноактивной и обладала протективными свойствами.
Кроме того, получаемая согласно заявляемому способу вакцина имеет срок хранения до 1 года.
Техническим результатом, достигаемым при применении предлагаемого изобретения является повышение эффективности инактивационной обработки вируссодержащих материалов при уменьшении концентрации инактивирующего средства, сокращение экспозиции обработки до 60-70 минут против 72 часов у прототипа; установлено, что раствор оксидантов относится к IV классу опасности, в соответствующих концентрациях не вызывает токсического действия на перевиваемую культуру клеток «ПТ-80», используемую для выращивания и накопления вируссодержащего материала, быстро разлагается после воздействия на вирус, исключая тем самым попадание в организм животных с биопрепаратом, обеспечивает снижение затрат на приобретение препарата до 6 раз и повышение безопасности труда обслуживающего персонала, отсутствует вредное влияние на окружающую среду. Вакцина имеет достаточную антигенную активность и обладает протективными свойствами. Способ обработки вируссодержащего материала предложенным инактивантом обеспечивает безопасность продукции, получаемой от сельскохозяйственных животных (мясо, молоко).
Claims (2)
1. Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, включающий приготовление вируссодержащего материала из штамма вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, инфицирование вируссодержащим материалом культуры перевиваемых клеток, культивирование вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота, сбор вируссодержащей жидкости, инактивацию ее с последующим приготовлением целевого продукта в жидкой форме, отличающийся тем, что инактивацию вируссодержащей жидкости проводят раствором оксидантов, полученным электролизом 10,0-20,0%-ного раствора хлорида натрия, причем электролиз ведут до достижения величин pH 7,0-8,0, концентрации оксидантов 0,7-0,9% и окислительно-восстановительного потенциала +1000±50 мВ и при расходе инактивирующего средства 4,5-5,0 см3 на 0,8-1,0 л вируссодержащей жидкости, причем инактивацию вируссодержащей жидкости проводят в одну стадию при содержании активного хлора Сах=200-300 мг/л в течение 60-70 мин и при температуре 37-38°С при рН 7,2-7,4.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве штамма вируса инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота используют вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота штамм ГКВ 2333, семейства Herpesviridae, подсемейства Alphaherpesviridae или штамм «ВНИИЗЖ» вируса ИРТ КРС, сем. Herpesviridae, рода Varicellavims, коллекция ФГУ «ВГНКИ» «ВНИИЗЖ-ДЕП».
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012132044/10A RU2522780C2 (ru) | 2012-07-27 | 2012-07-27 | Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2012132044/10A RU2522780C2 (ru) | 2012-07-27 | 2012-07-27 | Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2012132044A RU2012132044A (ru) | 2014-02-10 |
RU2522780C2 true RU2522780C2 (ru) | 2014-07-20 |
Family
ID=50031708
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2012132044/10A RU2522780C2 (ru) | 2012-07-27 | 2012-07-27 | Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2522780C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2649754C2 (ru) * | 2016-08-31 | 2018-04-04 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" | Способ изготовления формолвакцины гидроокисьалюминиевой полиштаммной против стрептококковых заболеваний крупного рогатого скота |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2090210C1 (ru) * | 1993-12-21 | 1997-09-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии | Способ изготовления инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотракеита крупного рогатого скота |
US20040081666A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-04-29 | Dominowski Paul Joseph | Cattle reproductive disease vaccines |
RU2378014C2 (ru) * | 2007-12-20 | 2010-01-10 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") | Ассоциированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная |
RU2395299C1 (ru) * | 2009-03-31 | 2010-07-27 | Автономная некоммерческая организация "Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных" (АНО "НИИ ДПБ") | Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, рота-, коронавирусной болезней и лептоспироза крупного рогатого скота |
-
2012
- 2012-07-27 RU RU2012132044/10A patent/RU2522780C2/ru not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2090210C1 (ru) * | 1993-12-21 | 1997-09-20 | Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии | Способ изготовления инактивированной культуральной вакцины против инфекционного ринотракеита крупного рогатого скота |
US20040081666A1 (en) * | 2002-08-26 | 2004-04-29 | Dominowski Paul Joseph | Cattle reproductive disease vaccines |
RU2378014C2 (ru) * | 2007-12-20 | 2010-01-10 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" (ФГУ "ВНИИЗЖ") | Ассоциированная вакцина против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита и коронавирусной инфекции крупного рогатого скота эмульсионная инактивированная |
RU2395299C1 (ru) * | 2009-03-31 | 2010-07-27 | Автономная некоммерческая организация "Научно-исследовательский институт диагностики и профилактики болезней человека и животных" (АНО "НИИ ДПБ") | Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, рота-, коронавирусной болезней и лептоспироза крупного рогатого скота |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2649754C2 (ru) * | 2016-08-31 | 2018-04-04 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности" | Способ изготовления формолвакцины гидроокисьалюминиевой полиштаммной против стрептококковых заболеваний крупного рогатого скота |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2012132044A (ru) | 2014-02-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Sanders et al. | Inactivated viral vaccines | |
CN111135295B (zh) | 一种大口黑鲈虹彩病毒病灭活疫苗及其制备方法 | |
CN101716341B (zh) | 一种人用二倍体细胞狂犬灭活疫苗及其制备方法 | |
CN102174476A (zh) | 预防鸭病毒性肝炎的灭活疫苗及其制备方法 | |
CN102178945B (zh) | 一种石斑鱼虹彩病毒灭活疫苗的制备方法 | |
CN110144333B (zh) | 一株铜绿假单胞菌噬菌体及其应用 | |
CN102727879B (zh) | 一种石斑鱼虹彩病毒(sgiv)灭活疫苗的转瓶生产方法 | |
CN104017776B (zh) | 一种羊传染性脓疱病毒细胞弱毒疫苗及其制备方法和应用 | |
CN104258389B (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
CN110893235B (zh) | 一种鲫造血器官坏死病灭活疫苗及其制备方法 | |
CN104043117A (zh) | 一种疫苗组合物及其制备方法和应用 | |
CN104367996A (zh) | 一种用传代细胞源生产猪伪狂犬病活疫苗的方法及其制品 | |
CN1897958A (zh) | 从天然肉桂提取物中获得的抗病毒制剂 | |
CN104940191B (zh) | 一种脂溶性没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯消毒剂及制备方法 | |
CN105154410B (zh) | 一种鸭细小病毒毒株及其活疫苗 | |
RU2522780C2 (ru) | Способ получения вакцины против инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота | |
ES2778928T3 (es) | Producción a gran escala de virus en cultivos celulares | |
CN101745106A (zh) | 一种猪细小病毒病活疫苗及其制备方法 | |
CN106929480B (zh) | 猪繁殖与呼吸综合征病毒株及其应用 | |
RU2502522C1 (ru) | Способ получения вакцины против вирусной диареи крупного рогатого скота | |
RU2509571C1 (ru) | Способ получения вакцины против парагриппа-3 крупного рогатого скота | |
CN107158370B (zh) | 貉犬瘟热冻干活疫苗及其制备方法和应用 | |
CN102526721B (zh) | 一种斑点叉尾鮰出血病的灭活疫苗及制备方法和应用 | |
CN102764432A (zh) | 大鲵病毒性出血病细胞培养灭活疫苗及制备方法和应用 | |
CN102600469A (zh) | 一种猪瘟活疫苗 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140728 |