RU2435842C1 - Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба - Google Patents
Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба Download PDFInfo
- Publication number
- RU2435842C1 RU2435842C1 RU2010124605/10A RU2010124605A RU2435842C1 RU 2435842 C1 RU2435842 C1 RU 2435842C1 RU 2010124605/10 A RU2010124605/10 A RU 2010124605/10A RU 2010124605 A RU2010124605 A RU 2010124605A RU 2435842 C1 RU2435842 C1 RU 2435842C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nutrient medium
- microbe
- sodium
- cultivation
- brucellous
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению питательных сред, которые создают оптимальные условия для культивирования бруцеллезного микроба. Питательная среда содержит дрожжевую воду, гидролизат говяжьего мяса, натрия хлорид, глюкозу, глицерин, цитрат натрия, метабисульфит натрия и дистиллированную воду. Изобретение позволяет обеспечить оптимальные условия для роста, размножения бруцеллезного микроба при транспортировке питательной среды на любые расстояния.
Description
Изобретение относится к медицинской микробиологии, в частности к получению питательных сред, обеспечивающих оптимальные условия для жизнедеятельности, транспортировки и культивирования бруцеллезного микроба.
Известна питательная среда, основой которой является агар Мартена, следующего состава, г/л: пептон Мартена 0,5; хлористый натрий 3,0; 20% гидроокись натрия 3,0; агар микробиологический 2,0; мясная вода 0,5; pH 7,2±0,1 (Черкесе Ф.К., Богоявленская Л.Б., Бельская Н.А. Микробиология. - М.: Медицина, 1987).
Недостатком данной среды является ее недостаточная продуктивность.
Наиболее близкой к предлагаемой питательной среде является транспортная жидкая питательная среда для сбора, культивирования и транспортировки крови больных, подозреваемых на заболевание бруцеллезом, содержащая, г/л: гидролизат говяжьего мяса 170,0; натрий хлористый 5,0; глицерин 20,0; глюкоза 10,0; цитрат натрия 5,0; САГ-1 0,6; 20%-ная гидроокись натрия 0,001-0,0003, дистиллированная вода до 1 л (патент РФ №2247775. Опубл. 10.03.2005 г. Бюл. №7).
Недостатком данной среды является невозможность приобретения стимулятора роста бруцелл САГ-1 ввиду закрытия института биоорганической химии АН УССР (Украина).
Целью предлагаемого изобретения является получение питательной среды транспортной (жидкой) для культивирования бруцеллезного микроба.
Поставленная цель достигается тем, что питательной основой предлагаемой питательной среды транспортной (жидкой) для культивирования бруцеллезного микроба является гидролизат говяжьего мяса, среда также включает дрожжевую воду, натрия хлорид, глюкозу, глицерин, цитрат натрия, дистиллированную воду с добавлением в среду стимулирующей добавки - метабисульфит натрия, при следующем соотношении ингредиентов, г/л:
| Дрожжевая вода | 18,0-22,0 |
| Гидролизат говяжьего мяса | 70,0-110,0 |
| Натрия хлорид | 3,0-7,0 |
| Глюкоза | 8,0-12,0 |
| Глицерин | 18,0-22,0 |
| Цитрат натрия | 3,0-7,0 |
| Метабисульфит натрия | 0,1-0,5 |
| Дистиллированная вода | до 1 л |
Для получения дрожжевой воды используются дрожжи хлебопекарные прессованные ГОСТ 171-81 (производитель ООО «Дрожжевик», Карачаево-Черкессия, Адыге-Хабльский р-н, Эркин-Шахарский сахарный завод). Сырьем для производства хлебных дрожжей является меласса свекловичная (рафинадная) - отход свеклосахарного производства (патока свекловичная), которая в своем составе содержит термоустойчивые биологически-активные вещества, которые переходят в дрожжи. Кроме того, содержащиеся в них витамины В3, B8, а также Н-биотин являются важнейшими витаминами роста. Также в дрожжах содержатся микроэлементы: бор, фтор, алюминий, фосфор, марганец, железо, медь, молибден, а также аминокислоты: глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, серии, аспарагиновая, глутаминовая, тирозин, пролин - остальные аминокислоты обнаружены в виде следов (Болотов Н.А., Фараджаев Е.Д. Производство хлебопекарных дрожжей. М.: Профессия, 2002. - 167 с.; Семихатова Н.М. Производство дрожжей. М.: Пищевая промышленность, 1967. - 154 с.).
Используемый метабисульфит натрия, по данным авторов Zo Bell С.Е. и Meyer K.F. (1932) (Lankford et al., 1952; Lankford et al.,1956; Rode et al., 1951; Гудзовский А.Г. (1982)), полностью обеспечивает потребность бруцеллезного микроба в присутствии препарата серы.
Предлагаемая среда обеспечивает оптимальные условия для роста и размножения бруцеллезного микроба. Использование дрожжевой воды, а также введение в состав среды стимулирующей добавки метабисульфита натрия вполне заменяют САГ-1, обеспечивают усиление ростовых свойств питательной основы - гидролизата говяжьего мяса - и являются отличительными признаками предлагаемой питательной среды.
Способ приготовления питательной среды транспортной для диагностики бруцеллезного микроба заключается в следующем: хлебные дрожжи в количестве 1 кг растворяют в 2 л дистиллированной воды, подогревают до полного растворения дрожжей, кипятят в течение 5 мин, затем фильтруют через полотно Бельтинга. Готовую дрожжевую воду в количестве 20,0 мл добавляют в 90,0 мл гидролизата говяжьего мяса, разбавленного дистиллированной водой до содержания аминного азота 100 мг % и прокипяченного для удаления хлороформа, затем добавляют натрия хлорид 5,0 г; цитрат натрия 5,0 г, кипятят до растворения всех составляющих, устанавливают pH 7,3±0,1 гидроокисью натрия 20%. Выпавший осадок фильтруют через тканевый фильтр с фильтровальной бумагой, добавляют глюкозу 10,0 г; глицерин 20,0 мл; натрия метабисульфит 0,3 г. Среду разливают в стерильные пенициллиновые флаконы V 15 мл по 5,0±0,1 мл, закупоривают стерильными резиновыми пробками, накрывают алюминиевыми колпачками, вальцуют, стерилизуют при 1 атм 15 мин.
Эффективность заявляемой питательной среды оценивали в соответствии с методическими указаниями «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза», МУ 3.3.2.2124-06, Москва, 2007 г., с использованием в качестве тест-культур референтных вирулентных штаммов бруцелл B. melitensis 16 М; В. abortus 544. Испытуемые культуры выращивали на пластинках плотного агара pH 7,3±0,1 при температуре 37°С 48-120 ч. Из двухсуточных культур готовили 1 млрд взвесь м.т. тест-штаммов, равной 10 ед. по оптическому стандарту мутности ОСО ГИСК им. Л.А.Тарасовича, затем серийными десятикратными разведениями в физиологическом растворе в объеме 4,5 мл доводили до содержания в 1 мл 1000; 500; 100 м.к. Из каждого разведения взвеси культур высевали разовыми шприцами по 0,1 мл в 3 флакона. Посевы инкубировали при температуре 37±1°С в течение 5 суток. Через 48-72-120 ч учитывали количество выросших колоний.
Пример 1. Референтные штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: дрожжевую воду 18,0; гидролизат говяжьего мяса 70,0; натрия хлорид 3,0; глюкозу 8,0; глицерин 18,0; цитрат натрия 3,0; метабисульфит натрия 0,1; дистиллированную воду до 1 л.
При таком соотношении ингредиентов количество колоний, выросших на плотных пластинках агара через 48 ч, для бруцеллезного микроба B. melitensis 16 М и В. abortus 544 при посевной дозе 50 и 10 м.к. составило 290; 248; 201 и 135; 129; 127 колоний в S форме диаметром 1,3 мм, при посевной дозе 100 м.к. на пластинках агара был получен сплошной рост бактерий.
Пример 2. Референтные штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: дрожжевую воду 20,0; гидролизат говяжьего мяса 90,0; натрия хлорид 5,0; глюкозу 10,0; глицерин 20,0; цитрат натрия 5,0; метабисульфит натрия 0,3; дистиллированную воду до 1 л.
При таком соотношении ингредиентов количество колоний, выросших на плотных пластинках агара через 48 ч, для бруцеллезного микроба B. melitensis 16 М и В. abortus 544 при посевной дозе 50 и 10 м.к. составило соответственно 378; 350; 310 и 190; 159; 130 колоний в S форме диаметром 1,5 мм, при посевной дозе 100 м.к. на пластинках агара был получен сплошной рост бактерий.
Пример 3. Референтные штаммы выращивали на питательной среде, содержащей, г/л: дрожжевую воду 22,0; гидролизат говяжьего мяса 110,0; натрия хлорид 7,0; глюкозу 12,0; глицерин 22,0; цитрат натрия 7,0; метабисульфит натрия 0,5; дистиллированную воду до 1 л.
При таком соотношении ингредиентов количество колоний, выросших на плотных пластинках агара через 48 ч, для бруцеллезного микроба B. melitensis 16 М и В. abortus 544 при посевной дозе 50 и 10 м.к. составило 260; 227; 210 и 112; 100; 99 колоний в S форме диаметром 1,3 мм, при посевной дозе 100 м.к. на пластинках агара был получен сплошной рост бактерий.
Таким образом, вариант полученной питательной среды (пример 2) является оптимальным по количеству подобранных ингредиентов, они в совокупности обеспечивают рост культур B. melitensis 16 М и В. abortus 544 и позволяют получить конечную концентрацию бактерий через 48 ч, значительно превышающую посевную дозу.
Питательную среду №2 в количестве 5 мл помещают в пенициллиновые флаконы V 15 мл, закупоривают резиновыми пробками, накрывают алюминиевыми колпачками, вальцуют, стерилизуют при 1 атм 15 мин и используют для введения крови у постели больных, подозреваемых на заболевание бруцеллезом, и транспортируют на любые расстояния.
Claims (1)
- Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба, состоящая, г/л:
Дрожжевая вода 18,0-22,0 Гидролизат говяжьего мяса 70,0-110,0 Натрия хлорид 3,0-7,0 Глюкоза 8,0-12,0 Глицерин 18,0-22,0 Цитрат натрия 3,0-7,0 Метабисульфит натрия 0,1-0,5 Дистиллированная вода Остальное
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010124605/10A RU2435842C1 (ru) | 2010-06-15 | 2010-06-15 | Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2010124605/10A RU2435842C1 (ru) | 2010-06-15 | 2010-06-15 | Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2435842C1 true RU2435842C1 (ru) | 2011-12-10 |
Family
ID=45405566
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2010124605/10A RU2435842C1 (ru) | 2010-06-15 | 2010-06-15 | Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2435842C1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2529364C1 (ru) * | 2013-05-07 | 2014-09-27 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав портребителей и благополучия человека | Бифазная транспортная питательная среда для выделения и выращивания бруцеллезного микроба |
| RU2580028C1 (ru) * | 2014-12-26 | 2016-04-10 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Питательная среда плотная для культивирования бруцелл |
| WO2019056075A1 (ru) * | 2017-09-21 | 2019-03-28 | Абульфат Ахмед оглы АЛЫЕВ | Способ дифференциальной диагностики бруцеллеза животных, питательная среда и способ её приготовления |
-
2010
- 2010-06-15 RU RU2010124605/10A patent/RU2435842C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| ПОЛЯК М.С., СУХАРЕВИЧ В.И., СУХАРЕВИЧ М.Э. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. - СПб.: Элби-СПб, 2008, с.71-78. * |
| СИДОРОВ М.А., СКОРОДУМОВ Д.И., ФЕДОТОВ В.Б., Справочник. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. - М.: КОЛОС, 1985, с.182-184. Медицина. / Под ред. БИРГЕРА. М.О., Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, 1982, с.82. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2529364C1 (ru) * | 2013-05-07 | 2014-09-27 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав портребителей и благополучия человека | Бифазная транспортная питательная среда для выделения и выращивания бруцеллезного микроба |
| RU2580028C1 (ru) * | 2014-12-26 | 2016-04-10 | Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Питательная среда плотная для культивирования бруцелл |
| WO2019056075A1 (ru) * | 2017-09-21 | 2019-03-28 | Абульфат Ахмед оглы АЛЫЕВ | Способ дифференциальной диагностики бруцеллеза животных, питательная среда и способ её приготовления |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103060220B (zh) | 一种高效猪肺炎支原体培养基及其制备方法 | |
| RU2433170C1 (ru) | Питательная среда жидкая для культивирования чумного микроба вакцинного штамма ев | |
| EA021339B1 (ru) | Скоростной микроанализ стерильности | |
| RU2435842C1 (ru) | Питательная среда транспортная (жидкая) для культивирования бруцеллезного микроба | |
| CN110205355A (zh) | 一种微生物高灵敏检测培养基及其制备方法和应用 | |
| RU2626568C1 (ru) | Питательная среда плотная для культивирования и сбора биомассы чумного микроба вакцинного штамма Y.pestis EV | |
| RU2580028C1 (ru) | Питательная среда плотная для культивирования бруцелл | |
| RU2412240C1 (ru) | Питательная среда для выращивания легионелл | |
| RU2681285C1 (ru) | ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ПЛОТНАЯ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БРУЦЕЛЛ ВИДА Brucella neotomae | |
| CN109385381B (zh) | 一种泌尿生殖道支原体双相培养基 | |
| CN104193686B (zh) | N-没食子酰胺-嘧啶基苯磺酰胺类衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN109988811A (zh) | 一种微生物快速检测培养基及其制备方法和应用 | |
| RU2247775C1 (ru) | Транспортная жидкая питательная среда для сбора, культивирования и транспортировки крови больных, подозреваемых на заболевание бруцеллезом | |
| RU2725733C1 (ru) | Транспортная жидкая питательная среда для сохранения жизнеспособности бруцеллезного микроба | |
| RU2238973C1 (ru) | Питательная среда (жидкая) для культивирования бруцелл | |
| RU2518304C2 (ru) | ДВУХФАЗНАЯ ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ТОНКОСЛОЙНОГО КУЛЬТИВИРОВАНИЯ Helicobacter pylori И СПОСОБ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ | |
| CN112680499B (zh) | 一种厌氧微生物的体外检测试剂盒 | |
| RU2299238C2 (ru) | Питательная среда для культивирования бруцелл | |
| CN107418932A (zh) | 一种促进增殖的细胞培养液 | |
| RU2688335C1 (ru) | Питательная среда плотная для культивирования возбудителя бруцеллёза | |
| RU2701343C1 (ru) | Питательная среда для выявления молочнокислых бактерий (варианты) | |
| RU2648160C2 (ru) | Питательная среда для выделения бактерий yersinia enterocolitica | |
| RU2394905C1 (ru) | Питательная среда для культивирования чумного микроба | |
| RU2702174C1 (ru) | ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ПЛОТНАЯ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ И СБОРА БИОМАССЫ ВАКЦИННОГО ШТАММА ЧУМНОГО МИКРОБА Y.pestis EV | |
| RU2460774C1 (ru) | Питательная среда для выращивания легионелл |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150616 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20160420 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170616 |