RU2407063C2 - Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) - Google Patents
Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2407063C2 RU2407063C2 RU2009107386/14A RU2009107386A RU2407063C2 RU 2407063 C2 RU2407063 C2 RU 2407063C2 RU 2009107386/14 A RU2009107386/14 A RU 2009107386/14A RU 2009107386 A RU2009107386 A RU 2009107386A RU 2407063 C2 RU2407063 C2 RU 2407063C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- mice
- malignant
- malignant tumours
- sarcomas
- cells
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и может быть использовано для воспроизведения злокачественных соединительнотканных опухолей для испытания различных способов лечения и средств профилактики злокачественных соединительнотканных опухолей - фибросарком, остеосарком, хондросарком. Для этого мышам линии С57В1/6 имплантируют подкожно иммобилизированные на биодеградируемом носителе полученные у этих мышей в ходе культивирования мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки с хромосомными мутациями. Способ позволяет получить злокачественную опухоль соединительнотканного генеза без перевивания от животного к животному; предотвращает преждевременную элиминацию пересаженных жизнеспособных клеток иммунной системой реципиента, безопасен для исследователя. 5 ил., 1 табл.
Description
Изобретение относится к области медицины, а более конкретно к экспериментальной онкологии, и предназначено для моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) для последующего проведения испытаний способов лечения и профилактики сарком.
Описано множество способов индукции опухолевого роста, преимущественно путем химической индукции канцерогенными веществами, вызывающими трансформацию эпителиальных тканей. Все они обладают следующими недостатками: представляют реальную угрозу здоровью персонала, вынужденному работать с канцерогенами; требуют особо организованной лаборатории; приводят к развитию в основном эпителиальных злокачественных опухолей, по своему биологическому «поведению» и восприимчивости к лекарственным препаратам отличающимся от злокачественных опухолей соединительной ткани.
Известно изобретение: Способ создания эксперементальных опухолей (С2 2257619 RU). Принцип действия данного способа основан на введении клеточной взвеси постоянной линии крысиной саркомы 45. Однако данный способ имеет следующие недостатки: для реализации данного способа в лаборатории необходимо постоянно поддерживать животных с опухолями, постоянно перевивать опухоль, чтобы поддержать ее, что является трудоемкой, затратной процедурой; получаемая опухоль характеризуется неограниченным инфильтративным ростом.
Известно изобретение: Способ создания эксперементальных опухолей брюшной полости (А 2003124795 RU). Принцип действия данного способа аналогичен предыдущему, следовательно, обладает теми же недостатками.
Техническим результатом изобретения является получение злокачественной опухоли соединительнотканного генеза (фибросаркомы) без перевивания от животного к животному; способ предотвращает преждевременную элиминацию пересаженных жизнеспособных клеток иммунной системой реципиентов, безопасен для исследователя.
Результат изобретения достигается тем, что для индукции опухолевого роста in vivo используют мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки мышей линии C57B1/6 30-го - 33-го пассажа, которые в ходе культивирования претерпели хромосомные мутации и приобрели способность к неконтролируемому росту - иммортализации. Анализ каритипической структуры свидетельствует о том, что ей свойственна большая гетерогенность, связанная с высокой частотой полиплоидов (до 31%) и клетками с разными числами хромосом, превышающими диплоидное, без четко выраженного модального числа хромосом. В некоторых клетках обнаружены метацентрические хромосомы, не свойственные нормальному кариотипу мыши.
Данные клетки иммобилизируют на поверхности губчатого носителя из деминерализованного костного матрикса и имплантируют подкожно мышам линии C57B1/6. Через 30 суток наблюдают формирование фибросаркомы в пределах имплантированного фрагмента деминерализованного костного матрикса, существующие без признаков глубокой инвазии до 60 суток.
На фигурах изображены:
Фигура 1. Макропрепарат извлеченного имплантата через 30 сут, внешний вид. Увеличение ×10.
Фигура 2. Макропрепарат извлеченного имплантата через 30 сут, разрез. Увеличение ×10.
Фигура 3. Сканирующая электронная микрофотография поверхности деминерализованного костного матрикса после иммобилизации на нем культуры трансформированных мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток мышей линии C57B1/6. Увеличение: ×300.
Фигура 4. Микрофотография фибросаркомы, развившейся внутри деминерализованного костного матрикса через 30 сут после пересадки. 1 - костные балки деминерализованного костного матрикса; 2 - опухолевая ткань. Увеличение: ×100.
Фигура 5. Микрофотография фибросаркомы с большим количеством полиморфных клеток с гиперхромными ядрами, атипичными митозами. 30 сут после пересадки. ×400.
В таблице 1 показаны результаты эксперимента по воспроизведению сарком предлагаемым способом у мышей линии C57B1/6 и линии Balb.
Предлагаемый способ работает следующим образом: трансформированная клеточная культура мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток является побочным результатом при работе со стромальными клетками костного мозга при их длительном культивировании (30 пассаж). Для моделирования опухолей у лабораторных животных данные клетки извлекают из культуры или из криохранилища. Клеточной взвесью пропитывают губчатый деминерализованный костный матрикс и оставляют в стандартной питательной среде на срок до 7 сут. Сформированный таким образом имплантат пересаживают мышам линии С57В1/6 под кожу спины. Через 30 суток в составе имплантата при гистологическом исследовании определяется опухолевая ткань, по своему строению соответствующая фибросаркоме. Опухоль существует без существенной инвазии за пределы имплантата по крайней мере до 60 суток, что вероятно, связано с изолирующей способностью формирующейся соединительнотканной капсулы.
Таким образом, при использовании данного способа моделируется злокачественная соединительнотканная опухоль фибросаркома; животные реципиенты могут служить тест-объектами для оценки эффективности различных противоопухолевых препаратов.
Преимущества данного способа заключаются в том, что он не требует постоянного поддержания линий животных с опухолями, служащих источником клеточного материала для перевивания; в результате применения безопасного для исследователя материала формируется злокачественная соединительнотканная опухоль.
Пример:
Эффективность способа проверена на лабораторных мышах двух линий C57B1/6 и Balb. Мышам обеих линий пересаживали клетки на деминерализованном матриксе в среднем количестве 5×106 на 1 см3 носителя. При этом установлено, что эффективность воспроизведения опухоли составляет 85% при использовании мышей, изогенных по отношению к первичному источнику получения мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток.
Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком)
| Таблица 1 | |||
| Линия мышей | Количество мышей-реципиентов | Выполненные манипуляции | Количество реципиентов с развившимися опухолями |
| C57B1/6 | 7 | Введение клеток по предлагаемому способу | 6 |
| Balb | 7 | Введение клеток по предлагаемому способу | 1 |
Claims (1)
- Способ создания модели злокачественной соединительнотканной опухоли у экспериментальных животных, отличающийся тем, что мышам линии С57В 1/6 имплантируют подкожно иммобилизированные на пористом биодеградируемом носителе полученные у этих мышей в ходе культивирования мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки с хромосомными мутациями.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009107386/14A RU2407063C2 (ru) | 2009-03-02 | 2009-03-02 | Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2009107386/14A RU2407063C2 (ru) | 2009-03-02 | 2009-03-02 | Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009107386A RU2009107386A (ru) | 2010-09-10 |
| RU2407063C2 true RU2407063C2 (ru) | 2010-12-20 |
Family
ID=42800058
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009107386/14A RU2407063C2 (ru) | 2009-03-02 | 2009-03-02 | Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2407063C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9730959B2 (en) | 2011-12-29 | 2017-08-15 | “Nextgen” Company Limited | Biocomposite for regeneration of injured tissue and organs, a kit for making the biocomposite, a method of making the biocomposite and a method of treating injuries |
| RU2725273C1 (ru) * | 2019-11-05 | 2020-06-30 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ трансплантации фрагмента нейроэндокринной опухоли поджелудочной железы человека в поджелудочную железу иммунодефицитных мышей |
-
2009
- 2009-03-02 RU RU2009107386/14A patent/RU2407063C2/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МУСИНА Р.А. Стволовые клетки: свойства и перспективы использования в медицине. Молекулярная биология, 2004, т.38, №4, с.563-577. КОРОЧКИН Л.И. Что такое стволовые клетки. Природа. 2005, №6, с.1-12. MAROTTA LL, et al. Cancer stem cells: a model in the making. Curr Opin Genet Dev. 2009 Feb; 19(1):44-50. Epub 2009 Jan 21. MOHR A, et al. Mesenchymal stem cells expressing TRAIL lead to tumour growth. inhibition in an experimental lung cancer model. J Cell Mol Med. 2008 Dec; 12(6B):2628-43. Epub 2008 Mar 28. HASHEMI SM, et al. The effect of vaccination with the lysate of heat-shocked tumor. cells on nitric oxide production in BALB/c mice with fibrosarcoma tumor. Cell Biol. Int. 2008 Jul; 32(7):835-40. Epub 2008 Apr 1. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US9730959B2 (en) | 2011-12-29 | 2017-08-15 | “Nextgen” Company Limited | Biocomposite for regeneration of injured tissue and organs, a kit for making the biocomposite, a method of making the biocomposite and a method of treating injuries |
| RU2725273C1 (ru) * | 2019-11-05 | 2020-06-30 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ трансплантации фрагмента нейроэндокринной опухоли поджелудочной железы человека в поджелудочную железу иммунодефицитных мышей |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2009107386A (ru) | 2010-09-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Costa‐Pinto et al. | Chitosan–poly (butylene succinate) scaffolds and human bone marrow stromal cells induce bone repair in a mouse calvaria model | |
| CN107988158B (zh) | 一种三维肿瘤模型脱细胞多孔支架、构建方法及其应用 | |
| RU2407063C2 (ru) | Способ моделирования злокачественных соединительнотканных опухолей (сарком) | |
| Bhat et al. | In Vitro Neo‐Cartilage Formation on a Three‐D imensional Composite Polymeric Cryogel Matrix | |
| CN112029727A (zh) | 脑脱细胞基质颗粒支架及其制备方法和应用 | |
| Chróścicka et al. | Synthetic calcite as a scaffold for osteoinductive bone substitutes | |
| CN111019903A (zh) | 一种制备乳腺癌骨转移类器官的方法 | |
| CN113278587A (zh) | 一种三维工程化乳腺癌肺转移模型、构建方法及应用 | |
| CN108795866B (zh) | 基于骨脱细胞支架的人多发性骨髓瘤微环境模型的构建方法 | |
| TW201520223A (zh) | 生體組織分散用組成物 | |
| US20060233767A1 (en) | Process for producing a tissue transplant construct for reconstructing a human or animal organ | |
| KR102400168B1 (ko) | 생체 내 종양 미세 환경을 재현하는 생체 외 종양 약물 시험 플랫폼 및 그 제조방법 | |
| CN114214266B (zh) | 一种凝胶组合物、生物支架凝胶及其制备方法和应用 | |
| TW201335368A (zh) | 作為三維細胞培養基質之中空聚合物微球 | |
| CN114214283B (zh) | 一种培养肝肿瘤类器官的方法 | |
| US20180200302A1 (en) | Bone marrow stromal cell derived extracellular matrix protein extract and uses thereof | |
| CN109852574A (zh) | 一种细胞支架及其制备方法 | |
| Gunther et al. | Effects of infrared and ultraviolet radiation on the viability of cells immobilized in porous TiNi-based alloy scaffold | |
| CN113881635A (zh) | 一种胸膜间皮瘤类器官的培养基和培养方法 | |
| Jeong et al. | Hyaluronic microparticle-based biomimetic artificial neighbors of cells for three-dimensional cell culture | |
| KR102578904B1 (ko) | 위 오가노이드 배양 및 이식을 위한 탈세포 위 조직 유래 지지체 및 이의 제조방법 | |
| CN108866001B (zh) | 人胰腺癌神经浸润细胞系 | |
| Macheiner et al. | Isolation, identification and culture of myenteric plexus cells from ovine esophagus | |
| CN113502261B (zh) | 一种能高效分化成脂的规模化3d低氧间充质干细胞培养体系 | |
| CN112608900B (zh) | 通过类器官驯化培养结直肠癌细胞系的方法及结直肠癌细胞系 |