RU2388472C2 - Антагонисты альфаvбета3 и альфаvбета6 интегринов в качестве антифибротических агентов - Google Patents
Антагонисты альфаvбета3 и альфаvбета6 интегринов в качестве антифибротических агентов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2388472C2 RU2388472C2 RU2006114395/15A RU2006114395A RU2388472C2 RU 2388472 C2 RU2388472 C2 RU 2388472C2 RU 2006114395/15 A RU2006114395/15 A RU 2006114395/15A RU 2006114395 A RU2006114395 A RU 2006114395A RU 2388472 C2 RU2388472 C2 RU 2388472C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- liver
- cells
- fibrosis
- migration
- activated
- Prior art date
Links
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 title claims abstract description 13
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 title abstract description 28
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 title abstract description 28
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title description 6
- 230000003510 anti-fibrotic effect Effects 0.000 title 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims abstract description 35
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 206010004664 Biliary fibrosis Diseases 0.000 claims description 2
- JHJAHOCSWUTJGR-UHFFFAOYSA-N 3-(3,5-dichlorophenyl)-3-[[3-phenylmethoxy-2-[5-(pyridin-2-ylamino)pentanoylamino]propanoyl]amino]propanoic acid Chemical group C=1C(Cl)=CC(Cl)=CC=1C(CC(=O)O)NC(=O)C(NC(=O)CCCCNC=1N=CC=CC=1)COCC1=CC=CC=C1 JHJAHOCSWUTJGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229940123038 Integrin antagonist Drugs 0.000 claims 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 abstract description 42
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 abstract description 26
- 238000013508 migration Methods 0.000 abstract description 22
- 230000005012 migration Effects 0.000 abstract description 22
- 210000000013 bile duct Anatomy 0.000 abstract description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 15
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 12
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 abstract description 8
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 abstract description 6
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 abstract description 5
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 abstract description 5
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 abstract description 4
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 abstract description 4
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 abstract description 4
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 abstract description 4
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 3
- FXNDIJDIPNCZQJ-UHFFFAOYSA-N 2,4,4-trimethylpent-1-ene Chemical compound CC(=C)CC(C)(C)C FXNDIJDIPNCZQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 abstract description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract description 2
- CUOIGPRQBYBGKW-UHFFFAOYSA-N 3-(3,5-dichlorophenyl)-3-[[3-(2-hydroxy-2,2-diphenylacetyl)oxy-2-[5-(pyridin-2-ylamino)pentanoylamino]propanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound C(C(O)(C1=CC=CC=C1)C1=CC=CC=C1)(=O)OCC(C(=O)NC(CC(=O)O)C1=CC(=CC(=C1)Cl)Cl)NC(CCCCNC1=NC=CC=C1)=O CUOIGPRQBYBGKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 102100031168 CCN family member 2 Human genes 0.000 abstract 1
- 101000777550 Homo sapiens CCN family member 2 Proteins 0.000 abstract 1
- 235000019892 Stellar Nutrition 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 39
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 26
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 22
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 22
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 20
- 230000007882 cirrhosis Effects 0.000 description 17
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 14
- 238000011161 development Methods 0.000 description 13
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 13
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 11
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 11
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 11
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 11
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 description 11
- 108010081589 Becaplermin Proteins 0.000 description 10
- 108010039419 Connective Tissue Growth Factor Proteins 0.000 description 10
- 102000015225 Connective Tissue Growth Factor Human genes 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 10
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 9
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 8
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 8
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 8
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 7
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 7
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 6
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 6
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 6
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 6
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 6
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010047852 Integrin alphaVbeta3 Proteins 0.000 description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 5
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 5
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 5
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 5
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 4
- 206010019668 Hepatic fibrosis Diseases 0.000 description 4
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 4
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 4
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 4
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 4
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 4
- 230000003352 fibrogenic effect Effects 0.000 description 4
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- -1 pyridin-2-ylamino Chemical group 0.000 description 4
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 230000037390 scarring Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N triacetin Chemical compound CC(=O)OCC(OC(C)=O)COC(C)=O URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 4
- 208000008439 Biliary Liver Cirrhosis Diseases 0.000 description 3
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 3
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- 108010029483 alpha 1 Chain Collagen Type I Proteins 0.000 description 3
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 3
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 208000010710 hepatitis C virus infection Diseases 0.000 description 3
- 108010021309 integrin beta6 Proteins 0.000 description 3
- 229940125798 integrin inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 3
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000033222 Biliary cirrhosis primary Diseases 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 208000018565 Hemochromatosis Diseases 0.000 description 2
- 206010019799 Hepatitis viral Diseases 0.000 description 2
- 208000002972 Hepatolenticular Degeneration Diseases 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 description 2
- 108010020950 Integrin beta3 Proteins 0.000 description 2
- 102000008607 Integrin beta3 Human genes 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 2
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 2
- 102000014962 Monocyte Chemoattractant Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010064136 Monocyte Chemoattractant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000012654 Primary biliary cholangitis Diseases 0.000 description 2
- 108010059712 Pronase Proteins 0.000 description 2
- 239000013614 RNA sample Substances 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 208000018839 Wilson disease Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 150000003938 benzyl alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 2
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 235000013773 glyceryl triacetate Nutrition 0.000 description 2
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 2
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 2
- 208000007386 hepatic encephalopathy Diseases 0.000 description 2
- 210000004024 hepatic stellate cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 2
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 description 2
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- VCMGMSHEPQENPE-UHFFFAOYSA-N ketamine hydrochloride Chemical compound [Cl-].C=1C=CC=C(Cl)C=1C1([NH2+]C)CCCCC1=O VCMGMSHEPQENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001865 kupffer cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 108010000685 platelet-derived growth factor AB Proteins 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 210000003240 portal vein Anatomy 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008347 soybean phospholipid Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 2
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 2
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 229960002622 triacetin Drugs 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 201000001862 viral hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 2
- QYEFBJRXKKSABU-UHFFFAOYSA-N xylazine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=CC=CC(C)=C1NC1=NCCCS1 QYEFBJRXKKSABU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N (3beta,5beta,7alpha)-3,7-Dihydroxycholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)CC2 RUDATBOHQWOJDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 2-[benzyl-(4-methoxyphenyl)sulfonylamino]-n-hydroxy-4-methylpentanamide Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1S(=O)(=O)N(C(CC(C)C)C(=O)NO)CC1=CC=CC=C1 VKUYLANQOAKALN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODOMGNRHMFPUEP-UHFFFAOYSA-N 3-(2,1,3-benzothiadiazol-5-yl)-3-[6-[2-[6-(methylamino)pyridin-2-yl]ethoxy]-1h-indol-3-yl]propanoic acid Chemical compound CNC1=CC=CC(CCOC=2C=C3NC=C(C3=CC=2)C(CC(O)=O)C2=CC3=NSN=C3C=C2)=N1 ODOMGNRHMFPUEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 4-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-1-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound C1C(C(O)=O)N(C(=O)OC(C)(C)C)CC1NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 UPXRTVAIJMUAQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 1
- IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N Arg-Gly-Asp Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O IYMAXBFPHPZYIK-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 101000645291 Bos taurus Metalloproteinase inhibitor 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000007257 Budd-Chiari syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006154 Chronic hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 206010053567 Coagulopathies Diseases 0.000 description 1
- 229940122097 Collagenase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010010317 Congenital absence of bile ducts Diseases 0.000 description 1
- 206010056533 Congenital hepatic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- VVNCNSJFMMFHPL-VKHMYHEASA-N D-penicillamine Chemical compound CC(C)(S)[C@@H](N)C(O)=O VVNCNSJFMMFHPL-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 101800004490 Endothelin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102400000686 Endothelin-1 Human genes 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 206010019842 Hepatomegaly Diseases 0.000 description 1
- 101000669513 Homo sapiens Metalloproteinase inhibitor 1 Proteins 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000018967 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010051742 Platelet-Derived Growth Factor beta Receptor Proteins 0.000 description 1
- 208000035965 Postoperative Complications Diseases 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 208000034189 Sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 1
- 101710108790 Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 239000004809 Teflon Substances 0.000 description 1
- 229920006362 Teflon® Polymers 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108010031374 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000425571 Trepanes Species 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 1
- 108010038182 alcoholic prolamine solution Proteins 0.000 description 1
- 208000006682 alpha 1-Antitrypsin Deficiency Diseases 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000434 anti-fibrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000003472 antidiabetic agent Substances 0.000 description 1
- 229940125708 antidiabetic agent Drugs 0.000 description 1
- 108010072041 arginyl-glycyl-aspartic acid Proteins 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 1
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 1
- 201000005271 biliary atresia Diseases 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 208000015294 blood coagulation disease Diseases 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 230000009852 coagulant defect Effects 0.000 description 1
- 239000002442 collagenase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000006835 compression Effects 0.000 description 1
- 238000007906 compression Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002934 diuretic Substances 0.000 description 1
- 229940030606 diuretics Drugs 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004528 endothelial cell apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002702 enteric coating Substances 0.000 description 1
- 238000009505 enteric coating Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 208000016253 exhaustion Diseases 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000009760 functional impairment Effects 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 230000002394 glycogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 231100000784 hepatotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000001553 hepatotropic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- NTHXOOBQLCIOLC-UHFFFAOYSA-N iohexol Chemical compound OCC(O)CN(C(=O)C)C1=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C(I)C(C(=O)NCC(O)CO)=C1I NTHXOOBQLCIOLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000014861 isolated congenital hepatic fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 229960004184 ketamine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 210000005162 left hepatic lobe Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003908 liver function Effects 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 210000003593 megakaryocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 230000006548 oncogenic transformation Effects 0.000 description 1
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 1
- 210000004738 parenchymal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 229960001639 penicillamine Drugs 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 238000011458 pharmacological treatment Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 201000006038 polycystic kidney disease 4 Diseases 0.000 description 1
- 208000007232 portal hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 210000005163 right hepatic lobe Anatomy 0.000 description 1
- 229940069575 rompun Drugs 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 1
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine Chemical compound C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C([O-])=O ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N ursodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 RUDATBOHQWOJDD-UZVSRGJWSA-N 0.000 description 1
- 229960001661 ursodiol Drugs 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002227 vasoactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/433—Thidiazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Предложено применение антагониста интегрина αvβ для получения лекарственного средства для лечения вторичного билиарного фиброза печени, где указанный антагонист является 3-{3-бензилокси-2-[5-(пиридин-2-иламино)пентаноиламино]пропаноиламино}-3-(3,5-дихлорфенил)-пропионовой кислотой. Показано, что данное соединение ингибирует интегрины αv, в частности αvβ3 и αvβ6 интегрины, осуществляет понижающую регуляцию фиброгенеза путем ингибирования клеточной миграции и продукции молекул профиброгена (например, коллагеназ, ТМР-1) и цитокинов (например, CTGF) с помощью активированных печеночных звездчатых клеток/миофибробластов, активированных эпителия и эндотелия. Этот антагонист может эффективно предотвращать, уменьшать или даже вызывать обратное развитие вторичного билиарного фиброза печени путем снижения общего коллагена печени на 50-70% после 5-6-недельной окклюзии желчного протока. 7 ил., 1 табл.
Description
ОБЛАСТЬ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Данное изобретение относится к ингибированию αv интегринов, в частности αvβ3 и αvβ6 интегринов, с помощью специфических антагонистов, предпочтительно непептидных антагонистов, таких как EMD 409915 и EMD 409849, родственных соединений и соединений со сравнимой специфичностью, которые осуществляют понижающую регуляцию фиброгенеза с помощью ингибирования клеточной миграции и продукции профиброгенных молекул (например, коллагеназы, ТМР-1) и цитокинов (например, CTGF, TGFβ1,2) с помощью активированных печеночных звездчатых клеток, активированных миофибробластов и активированного фибробластами эпителия и эндотелия. Эти антагонисты в отдельности или в комбинации с другими агентами могут эффективно предотвращать, уменьшать или даже вызывать обратное развитие прогрессивного фиброза, такого как фиброз/цирроз печени, а также фиброз других органов, таких как легкие, почки, кишечник, поджелудочная железа, кожа и артерии.
ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ И УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Активированные печеночные звездчатые клетки и миофибробласты играют центральную роль в развитии хронических заболеваний печени. Они депонируют избыток компонентов экстрацеллюлярного матрикса, что приводит к фиброзу и, в конце концов, к циррозу. Цирроз определяется как искажение структуры печени тяжелыми сосудистыми и функциональными аномалиями. Последствиями этого являются гипертензия воротной вены с развитием асцитов и пищеводного варикозного кровотечения, печеночная энцефалопатия и предрасположенность к частым летальным инфекциям. Определенные рецепторы клетка-клетка и, особенно, клетка-матрикс, главным образом интегрины, подвергаются повышающей регуляции на активированном эндотелии и HSC/MF, передавая сигналы миграции, усиления роста и другие профиброгенные сигналы.
Таким образом, активация интегрина αvβ3 опосредует активацию и миграцию HSC/MF в ответ на профиброгенные цитокины, такие как PDGF-АВ/ВВ, и индуцирует повышающую регуляцию экспрессии HSC/MF профиброгенных цитокинов, таких как CTGF, фактор, который стимулирует синтез коллагена ауто- и паракринным путем.
Подобно этому, значительная повышающая регуляция интегрина αvβ6 была обнаружена в активированных эпителиальных клетках, в частности в пролиферирующем эндотелии желчного протока фиброзной печени, что дополнительно усиливает фиброгенез путем запуска секреции основной мембраны и других профиброгенных белков и ростовых факторов, которые активируют HSC/MF.
Лечение фиброзных заболеваний печени и цирроза с помощью специфических антагонистов интегринов αvβ3 и αvβ6 может блокировать миграцию и активацию эндотелиальных клеток, HSC/MF и эпителиальных клеток и, таким образом, замедлять или даже вызывать обратное развитие фиброгенеза. Поскольку аналогично печени, активированные миофибробластоподобные клетки и эпителиальные клетки играют центральную роль в патогенезе других прогрессивных фиброзных заболеваний, специфические антагонисты интегринов αvβ3 и αvβ6 также могут использоваться для лечения фиброзных расстройств других органов, например поджелудочной железы, кишечника, легких, сердца, почек, артерий или кожи.
Интегрины представляют собой семейство трансмембранных клеточных рецепторов, которые опосредуют взаимодействия между клетками и между клетками и экстрацеллюлярным матриксом. Потеря опосредуемых интегринами контактов обычно приводит к апоптозу. Рецепторы интегринов состоят из α и β субъединиц, которые могут существовать, по крайней мере, в 24 различных комбинациях, каждая из которых имеет свои собственные специфичности связывания и свойства передачи сигналов. Подсемейство β3 цепей состоит из двух интегринов, αIIβ3 и αvβ3. αIIβ3 экспрессируется на тромбоцитах и мегакариоцитах и участвует в процессе образования тромбов, αvβ3 представляет собой нетромбоцитарный интегрин, который экспрессируется эндотелиальными и миофибробластными клетками, определенными активированными фибробластами/миофибробластами, а также некоторыми воспалительными клетками (1-3). Цепь β6 интегрина, в основном, обнаруживается на эпителиальных клетках и некоторых активированных фибробластах/миофибробластах, она образует гетеродимер только с субъединицей αv (4).
Некоторые сообщения продемонстрировали, что экспрессия αvβ3, которая происходит, тесно ассоциирована с онкогенной трансформацией и развитием опухоли, то есть инвазивными и метастатическими свойствами опухолевых клеток человека. Индуцированная экспрессия интегрина αvβ3 на поверхности эндотелитальных клеток, как предполагают, является существенной для миграции эндотелиальных клеток, пролиферации и образования трубчатых структур (5). В последние годы стало очевидным, что адгезия к белкам экстрацеллюлярного матрикса (ЕСМ), опосредованная интегринами, необходима для роста и выживания большинства типов клеток (2). Нарушение адгезии задерживает клетки в фазе G1 и вызывает апоптоз. Было обнаружено, что интегрин αvβ3 играет фундаментальную роль в процессе ангиогенеза путем ингибирования апоптоза эндотелиальных клеток (6). Сверхэкспрессия αvβ3 в клетках яичника китайского хомячка повышает активность Rho и усиливает образование волокон (7), факторов, которые связаны с адгезией, миграцией и активацией.
Понижающая регуляция рецепторной системы PDFG (BB)-PDGFBβ играет важную роль в процессе фиброгенеза, то есть при de novo образовании и отложении экстрацеллюлярного матрикса (ЕСМ) в таких органах, как печень (8). Активированный рецептор PDGFβ может быть подвергнут совместной иммунопреципитации вместе с αvβ3 (9) интегрином. Недавно было показано, что αvβ3 взаимодействует с фрагментом RGD пептида, трансформирующего ростового фактора бета (TGFβ) (10), ассоциированного с латентным состоянием (LAPβ1), который может быть вовлечен в раковый процесс и в ряд воспалительных и фиброзных заболеваний, при которых экспрессия обоих белков играет важную роль.
αvβ3 является существенным для гладкой мускулатуры и миграции эндотелиальных клеток, а также при образовании кровеносных сосудов в ткани с протекающими процессами грануляции. До настоящего времени потенциальная роль αvβ3 при фиброзе печени и фиброзе других органов оставалась в значительной степени неисследованной (11-19).
Интегрин αvβ6, в основном, обнаруживается в активированных эпителиальных и фибробластных клетках. Он подвергается значительной повышающей регуляции во время повреждения тканей (20-22). Мыши, у которых отсутствует эта субъединица интегрина, демонстрируют удивительную устойчивость к индукции легочного фиброза (20). Активация и пролиферация эпителиальных клеток желчного протока регулярно обнаруживается при хроническом повреждении печени и фиброзе, а пролиферирующий эпителий желчного протока представляет собой основной источник профиброгенных факторов, таких как TGFβ1, TGFβ2 и CTGF, а также некоторых белков ЕСМ, при фиброзе печени, в частности фиброзе желчного протока (23, 24).
HSC/MF и миофибробласты считаются основными типами клеток, которые отвечают за избыток депонирования ЕСМ во время активного печеночного фиброгенеза. Как было показано, они синтезируют и высвобождают несколько типов коллагенов, в частности коллагены типа I и типа III, образующие фибрилл, которые свойственны для рубцевых тканей, ламинин-2, фибронектин и TIMP-1, основной ингибитор коллагеназ, и другие (12-19, 25-27). Миграция этих клеток является критической для их аккумуляции в сайтах печеночного повреждения. После активации культивируемые HSC/MF мигрируют в ответ на некоторые стимулы, включая ростовые факторы, такие как PDGF-AB, PDGF-ВВ, вазоактивные вещества, такие как эндотелин-1, и хемокины, такие как хемотаксический белок моноцитов (МСР-1) (28-30).
HSC/MF экспрессируют ряд интегринов, лигандами которых, в первую очередь, являются молекулы ЕСМ, которые трансдуцируют экстрацеллюлярные сигналы от ЕСМ в клетки в соответствии с цитокинами/ростовыми факторами (перекрестная передача сигнала) (1-3). Некоторые активности HSC/MF могут регулироваться с помощью интегринов, включая клеточную пролиферацию, сжатие, миграцию и синтез ЕСМ (1-3). Более того, интегрины также могут активировать латентный TGFβ, усиливая, таким образом, фиброгенную активность этого ключевого цитокина (10, 22). Таким образом, фармакологическое модулирование взаимодействия между HSC/MF и окружающим ЕСМ путем влияния путем интегриновой передачи сигналов является потенциальной стратегией для ограничения фиброза печени и фиброза других органов.
Несмотря на то, что миграция HSC/MF in vivo является сложной для измерения, вещества, которые ингибируют HSC/MF in vitro, являются главными кандидатами для снижения их аккумуляции в поврежденной печени. Кроме того, ингибирование активации, миграции и пролиферации эндотелиальных и эпителиальных клеток желчного протока может дополнительно подавлять фиброгенез в хронически поврежденной печени.
Приведенное ниже иллюстрирует клиническое воздействие на хронические фиброзные заболевания, как представлено на примере печеночного фиброза. Сценарий является подобным для всех фиброзных заболеваний, таких как те, что поражают легкие, почки, кишечник, поджелудочную железу, кожу или артерии. Так, по оценкам, только в Германии с населением 100 миллионов приблизительно 500000 людей страдают от цирроза печени, от хронических заболеваний печени на последней стадии, а ежегодный показатель смертности по причине цирроза колеблется от 50000 до 100000 человек (12, 31). Цирроз может быть определен как нарушение структуры печени при избыточной аккумуляции экстрацеллюлярного матрикса (ЕСМ), что приводит к образованию аномальных узелков печеночных клеток, перисинусоидальному склерозу и шунтированию крови от метаболически активных гепатоцитов. Пациенты с циррозом печени легко могут войти в состояние декомпенсированного заболевания печени со всеми последствиями поврежденной синтетической функции печени (расстройства коагуляции, нарушенный синтез альбумина и питательных веществ), что приводит к общему истощению, эдеме, портальной гипертензии, что ведет к возникновению асцитов и пищеводного варикозного кровотечения, предрасположенности к тяжелым инфекциям и к развитию печеночной энцефалопатии. Цирроз сам по себе способствует значительному увеличению распространенности первичной карциномы печеночных клеток.
В то время как на Западе приблизительно половина случаев цирроза возникает по причине алкогольной зависимости, другая половина имеет разнообразные другие причины, такие как (в порядке снижения значимости) хронический вирусный гепатит С и В, аутоиммунные заболевания (первичный желчный цирроз, классический иммунный гепатит, первичный склерозирующий холангит), метаболические заболевания (гемохроматоз, болезнь Вилсона, дефицит по α1-антитрипсину, тиросенемия, гликогенная гепатомегалия), фиброз желчного пузыря, индуцированный лекарственными средствами фиброз (индуцированный, например, метотрексатом), врожденные аномалии (врожденный печеночный фиброз, билиарная атрезия, синдром Алагилла), послеоперационные осложнения (вторичный билиарный цирроз), или васкулярные заболевания (синдром Бада Киари). Эти заболевания и причины цирроза печени могут быть легко экстраполированы на другие западные страны. Это количество может быть даже более высоким, чем в западных странах, с более высоким значением вирусных гепатитов В и С. Каузальное лечение этих заболеваний печени является ограниченным (12, 31). Так, даже самые лучшие доступные фармакологические терапии могут устранять вирус гепатита В только у 40%, а вирус гепатита С только у 30-40-50% пациентов с хроническим вирусным гепатитом. Эти терапии всегда включают введение интерферона на протяжении 6-12 месяцев и, таким образом, являются дорогостоящими и обремененными значительными побочными эффектами. Увеличивающаяся проблема здоровья представляет собой эпидемии гепатита С (32), который становится хроническим у 80-90% инфицированных лиц и который имеет распространенность от 0,5 до 1% в Западной Европе, от 1 до 1,5% в США, приблизительно 2% в Восточной Европе и Азии и до 20% в некоторых странах, подобных Египту. Некоторые заболевания печени, такие как иммунные расстройства, могут лечиться симптоматически или, возможно, слабо замедляться в своем развитии до цирроза с помощью агентов, таких как кортикостероиды (при классическом аутоиммунном гепатите) и урсодезоксихолевая кислота (при первичном билиарном циррозе). В других случаях такое развитие может предотвращаться, когда заболевания обнаружены на ранней стадии. Примерами являются венесекция при гемохроматозе и использование хелатирующих агентов, таких как D-пеницилламин при болезни Вилсона, по причине нехватки доноров и высокой стоимости трансплантация печени является возможной только в некоторых, отдельных случаях печеночного заболевания на последней стадии.
Упомянутые неблагоприятные стимулы, такие как гепатотоксины, включая алкоголь, гепатотропные вирусы, иммунные реакции, ассоциированные с печенью, метаболические заболевания и застой желчи, могут осуществлять запуск фиброгенеза печени, то есть избыточный синтез и депонирование экстрацеллюлярного матрикса (ЕСМ). При острых заболеваниях печени, таких как самоограниченный вирусный гепатит, фиброгенез уравновешивается с помощью фибролиза, то есть удаления избытка ЕСМ. Однако повторяющиеся инсульты средней степени тяжести или дополнительные вредные влияния, например хронический гепатит С в сочетании с потреблением алкоголя, что возникает при многих хронических заболеваниях печени, сдвигают метаболизм ЕСМ к фиброгенезу, приводя, таким образом, к фиброзу или циррозу (12-19, 32). При фиброгенезе повреждения гепатоцитов или эпителия желчного протока ведет к активации мононуклеарных клеток, высвобождению фиброгенных факторов и активации клеток мезенхимы печени. Активированные клетки Купфера, то есть специфические для печени макрофаги, а также пролиферирующий эпителий желчного протока, как полагают, являются первичными источниками потенциально фиброгенных цитокинов и ростовых факторов, которые, в конечном счете, нацеливают HSC/MF, то есть те типы клеток, которые отвечают за избыток депонирования ЕСМ в печени (12-19, 32). Как было упомянуто выше, оба этих типа клеток находятся в связи со всеми другими мезенхимально-эпителиальными и васкулярными органами (14, 33-44). При активации с помощью фиброгенных ростовых факторов и нарушении их нормального трехмерного окружения матриксом покоящиеся HSC/MF подвергаются трансформации в клеточный фенотип, который характеризуется высоким пролиферативным потенциалом и способностью вырабатывать избыток молекул ЕСМ. Эта трансформация, которая обычно характеризуется приобретением миофибробластного маркера α актина гладкой мускулатуры, играет центральную роль в защитной программе, которая направлена на быстрое закрытие потенциально летальной раны.
В обычном случае эта программа является самоограниченной, если нарушающий нормальное функционирование агент присутствует только в течение короткого периода времени, но эта программа может приводить к фиброзу и циррозу, когда она подвергается непрерывной активации. Еще раз следует подчеркнуть, что клетки и факторы, которые приводят к фиброзу и циррозу печени, являются почти идентичными тем, что лежат в основе процессов, которые приводят к фиброзу и рубцеванию других органов.
Таким образом, при многих хронических заболеваниях печени (12-19, 32) и других органов, таких как сердце, почки, легкие, артерии, кожа, кишечник и поджелудочная железа (14, 33-44), которые приводят к фиброзу, непрерывное повреждение не может быть предотвращено или хотя бы снижено, в лучшем случае. Кроме того, пациенты обычно имеют уже развитую стадию структурного и функционального нарушения. Это требует развития способов лечения, которые могут или остановить развитие фиброза органа, или даже вызвать обратное развитие прогрессирующего рубцевания. Такие способы лечения должны предполагать пероральное введение, должны быть экономически приемлемыми и быть свободными от нежелательных побочных эффектов.
КОРОТКОЕ ОПИСАНИЕ СУТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Задача настоящего изобретения заключается в обеспечении способа лечения патологических состояний, при которых активированные фибробласты, миофибробластные клетки и миофибробласты, а также активированные эндотелиальные и эпителиальные клетки вырабатывают и/или индуцируют выработку избытка экстрацеллюлярного матрикса, что приводит к нежелательному рубцеванию. Это относится к фиброзу и циррозу печени, а также фиброзу других органов, таких как легкие, почки, кишечник, поджелудочная железа, кожа и артерии, которые могут подвергаться почти идентичным патологическим процессам.
Другая задача настоящего изобретения заключается в обеспечении композиций вещества для лечения патологических состояний, с помощью которых ингибируются активированные фибробласты, миофибробластные клетки и миофибробласты, а также активированные эндотелиальные и эпителиальные клетки и, таким образом, рубцевание, по крайней мере, частично ингибируется. Было обнаружено, что указанные выше заболевания и патологические состояния могут успешно подвергаться лечению с помощью ингибиторов интегринов, предпочтительно ингибиторов интегринов αβ, более предпочтительно антагонистов αvβ3 и αvβ6, в соответствии с чем включаются как пептидные, так и непептидные молекулы. Предпочтительно, когда ингибиторы EMD 409915 и EMD 409849, известные из предшествующего уровня техники, или такие, которые легко могут быть получены в соответствии со стандартными способами, представляют собой эффективные лекарственные средства в указанном контексте.
EMD 409915 является 3-бензо[1,2,5]тиадиазол-5-ил-3-{6-[2-(6-метиламинопиридин-2-ил)этокси]-1H-индол-3-ил} пропионовой кислотой.
EMD 409849 является 3-{3-бензиокси-2-[5-(пиридин-2-иламино)пентаноиламино]пропаноиламино}-3-(3,5-дихлорфенил)пропионовой кислотой.
Эти антагонисты отдельно или в сочетании с другими агентами могут эффективно предотвращать, уменьшать или даже вызывать обратное развитие прогрессивного фиброза, такого как фиброз/цирроз печени и фиброз других органов, таких как легкие, почки, кишечник, поджелудочная железа, кожа и артерии.
КОРОТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг.1. Эффект EMD 409915 при концентрации 10-9-10-6 М на а) клетки CFSC-2G, линия HSC крыс и b) первичные крысиные HSC/MF, обработанные с помощью PDGF-BB (10 нг/мл). Миграцию клеток оценивали в течение 20 часов. Данные представляют один из ≥3 независимых экспериментов, осуществленных в трехкратной повторности и представленных как среднее значение ± SEM (% по отношению к исходному уменьшению ширины царапины).
Фиг.2. Эффект EMD 409915 при концентрации 10-10-10-6 М на миграцию клеток HSC/MF, стимулированных фетальной сывороткой теленка (FCS). Данные представляют один из ≥3 независимых экспериментов, осуществленных в трехкратной повторности и представленных как среднее значение ± SEM (% по отношению к исходному уменьшению ширины царапины).
Фиг.3. Синтез ДНК, измеренный с помощью встраивания BrdU в HSC/MF, стимулированные с помощью PDGF-BB (10 нг/мл), в течение 24 часов в присутствии EMD 409915 при концентрации 10-6М - 10-8М. Данные представляют один из ≥3 независимых экспериментов, осуществленных в четырехкратной повторности и представленных как среднее значение ± SEM (произвольные единицы).
Фиг.4. Синтез ДНК, измеренный с помощью встраивания BrdU в HSC/MF, стимулированные с помощью FCS, в течение 24 часов в присутствии EMD 409915 при концентрации 10-6М - 10-8М. Данные представляют один из ≥3 независимых экспериментов, осуществленных в четырехкратной повторности и представленных как среднее значение ± SEM (произвольные единицы).
Фиг.5. Экспрессия CTGF в клетках CFSC-2G, обработанных EMD 409915 при концентрации 10-6М - 10-8М в присутствии PDGF-BB (10 нг/мл), в течение 24 часов. Данные представляют один из ≥3 независимых экспериментов, осуществленных в четырехкратной повторности и представленных как среднее значение ± SEM (произвольные единицы).
Фиг.6. Экспрессия а) проколлагена α1(I), b) TGFβ1 и с) CTGF при первичном билиарном фиброзе. Экспрессию измеряли при осуществлении ПЦР в реальном времени при использовании общей РНК, полученной из печени крыс: крыс, подвергшихся ложной операции (Sham), и крыс с фиброзом по причине окклюзии желчного протока в течение 6 недель (BDL). Каждый прямоугольник представляет образцы РНК из печени, полученные от трех индивидуальных животных, данные представлены как среднее значение ± SEM (произвольные единицы).
Фиг.7. Экспрессия а) бета 3 интегрина и b) бета 6 интегрина при фиброзе печени. Экспрессию измеряли при осуществлении ПЦР в реальном времени при использовании общей РНК, полученной из печени крыс: крыс, подвергшихся ложной операции (Sham), и крыс с фиброзом по причине окклюзии желчного протока в течение 6 недель (BDL). Каждый прямоугольник представляет образцы РНК из печени, полученные от трех индивидуальных животных, данные представлены как среднее значение ± SEM (произвольные единицы).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫХ ВОПЛОЩЕНИЙ
Способы
Изоляция HSC и культура
Кратко, печень подвергали перфузии in situ через воротную вену при использовании канюли 16-18 G с HBSS, не содержащим кальция (Gybco, UK), в течение 5 минут, после чего использовали 0,1% проназу Е (Sigma), а потом 0,025% коллагеназу типа IV (Sigma) в модифицированной Дюльбекко среде Игла в течение 10-15 минут каждая среда. Вычленяли разложившуюся печень, осторожно измельчали и инкубировали в дальнейшем с 0,04% проназы, 0,025% коллагеназы, 0,002% ДНКазы (Sigma) в модифицированной Дюльбекко среде Игла, дополненной 25 мМ HEPES при температуре 37°С в течение 10-30 минут при осторожном перемешивании. После фильтрации через 100 мкм нейлоновую марлю паренхимные клетки удаляли при центрифугировании при низкой скорости. Фракцию HSC собирали на границе раздела градиента после обогащения путем двухэтапного центрифугирования в градиенте 11 и 13% Nycodenz (Sigma) при 1500 g в течение 15 минут без торможения и высаживали при плотности 0,5×106/см2 в DMEM с добавлением 10% FCS, пенициллина и стрептомицина. Среду меняли каждые 24 часа, а в дальнейшем каждые 48 часов. Жизнеспособность изолированных клеток оценивали с помощью вытеснения трепановым голубым, при этом она была большей, чем 95-98%. Чистоту изолятов HSC подтверждали с помощью их типичного морфологического внешнего вида: липидные капли в цитоплазме, демонстрация зеленоватой аутофлуоресценции при возбуждении 390 нм и форма, напоминающая звезду. Контаминацию клетками Купфера оценивали по способности поглощать латексные бусинки размером 3 мкм, она была ниже 3-5% после изоляции и почти не определялась после первого пассажа. Для экспериментов использовали клетке в промежутке между первым и третьим пассажем, если не указано другое.
В дополнение использовали HSC линии клеток CFSC-2G (умеренно активированные, которые были любезно предоставлены доктором М. Ройкиндом, Вашингтон DC, США).
Опыты на животных
Взрослых самцов крыс Wistar со средним весом 206±19 г подвергали следующей микрохирургической процедуре под оперативным микроскопом (OPMI6-S, Zeiss, Germany) (45-47): 1) после анестезии с помощью 100 мг/кг гидрохлорида кетамина (Ketanest®, Parke-Davis, Germany) и 10 мг/кг гидрохлорида 5,6-дигидро-2-(2,6-ксилидино)-4Н-1,3-тиазина (Rompun®, Bayer, Germany) делали надрез по средней линии живота; 2) проводили иссечение общего желчного протока, ставили тефлоновый катетер (Abbocath®-T 26 G, Venisystems, USA), размещали его дистально и проксимально не полностью накладывали лигатуру с помощью 5-0 шелка (Perma-hand®, Ethicon, Germany); 3) осуществляли ретроградную инъекцию натрий-амидотриазоата (Ethibloc®, Ethicon, Germany) при дозе 0,02 мл/100 г веса тела; 4) удаляли катетер, закрывали проксимальную лигатуру, разъединяли желчный проток между лигатурами и смыкали края раны. После окклюзии желчного протока (BDO) животные получали нормальный корм (Altromin®, Lage, Germany), а также свободный доступ к воде. Ранняя смертность (в пределах 1 часа-3 дней) у крыс происходила по причине подтекания желчи и составляла до 9%. Поскольку на этой модели фиброз становится явным только через две недели BDO, животные, которые умерли ранее, не учитывались для статистического анализа. Через 6 недель крыс умерщвляли при использовании анестезии кетанест/ромпан и с помощью пунктуры правого желудочка осуществляли обескровливание. Печень и селезенку взвешивали, и кусочки весом 1-2 г левой и правой печеночных долей фиксировали в 4% формалине или быстро замораживали в жидком азоте для осуществления гистологии, определяли мРНК и гидроксипролин (HYP).
Анализ царапины
Миграцию клеток оценивали путем измерения уменьшения площади царапины. Клетки высевали на планшет на 24 ячейки при плотности 60000 клеток/ячейка. После достижения конфлюэнтности клетки истощали на среде, не содержащей сыворотки, в течение 24 часов перед нанесением царапины через монослой клеток при использовании кончика стерильной пипетки. После повреждения клетки предварительно обрабатывали с помощью ингибитора интегрина αvβ3 в увеличивающихся концентрациях (10-10М - 10-6М) в течение 30 минут, а потом обрабатывали PDGF-BB в концентрации 10 нг/мл и при отсутствии сыворотки. Уменьшение площади царапины измеряли в трех различных точках на ячейку при использовании специального окуляра с микрометром, содержащим сетку, спустя 15-20 часов.
Встраивание BrdU
Для оценки клеточной пролиферации de novo синтез ДНК оценивали как встраивание BrdU. Клетки высевали при плотности 20000 клеток/ячейка в планшеты на 96 ячеек в ростовую среду, содержащую 10% фетальной сыворотки теленка (FCS). Через 24 часа среду заменяли до 0% FCS и осуществляли инкубацию в течение последующих 24 часов, после чего осуществляли инкубацию в среде, содержащей PDGF-BB в концентрации 10 нг/мл, ингибитор интегрина αvβ3 (10-9-10-5) или без ингибитора в течение 20 часов. В течение последних часов инкибируемые клетки импульсно метили с помощью BrdU, и его встраивание измеряли при использовании набора ELISA (Roche) и считывающего устройства для микротитровальных планшетов.
ПЦР в реальном времени
Общую РНК изолировали из клеточных лизатов при использовании коммерческого набора RNApure (PeqLab, Erlangen, Germany) в соответствии с рекомендациями производителя. Матричную кДНК получали с помощью обратной транскрипции 0,5 мг общей РНК.
Относительные транскрипционные уровни количественно оценивали с помощью RT-ПЦР, применяя систему LightCycler (Roche), при использовании 1,5 мкл разведения матричной кДНК в общем реакционном объеме 15 мкл, который включал Taq ДНК-полимеразу, дНТФ-смесь, реакционный буфер и 3,0 мМ MgCl2, которые обеспечивались с помощью набора «LightCycler FastStart DNA Master Hybridization Probes» (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany) в соответствии с инструкциями производителя. Для каждого измеренного транскрипта использовали как стандарт серии разведении одного образца от 1:2 до 1:32. Данные анализировали с помощью программы LightCycler при использовании опции «пропорциональный максимум второй производной». Амплифицировали вспомогательные гены бета-2 микроглобулина или GAPDH в параллельной реакции для нормализации результатов.
TaqMan зонды и наборы праймеров определяли при использовании программного обеспечения Primer Express (Perkin Elmer) на основе опубликованных последовательностей. Смысловые и антисмысловые праймеры (каждый в концентрации 0,5 мкМ) и 0,125 мкМ 5'-фосфорилированного зонда, меченного на своем 5'-конце с помощью опознавательного красителя (FAM), a на 3'-конце - молекулой гасителя (TAMRA), синтезировали на MWG Biotech AG (Ebersberg, Germany). Наборы праймеров, которые использовали для измерения экспрессии специфических целевых генов, представлены в таблице.
Для количественного определения транскрипционных уровней интегринов β3 и β6 в стационарной фазе роста использовали ПЦР с SYBR зеленым в качестве флуорофора (Molecular Probes, Eugene, OR). Для разграничения специфического продукта ПЦР от неспецифических продуктов и димеров праймеров осуществляли анализ кривых плавления. Так как различные продукты ДНК плавятся при различных температурах, является возможным разграничить подлинные продукты димеров праймеров и неспецифические продукты.
Все эксперименты осуществляли в клеточной культуре с миофибробластоподобной клеточной линией CFSC-2G (клеточная линия HSC, полученная из цирротической печени) и первичными HSC/MF. Для оценки влияния ингибитора интегрина αvβ3 на миграцию клетки высевали на планшеты на 24 ячейки и после достижения конфлюэнтности подвергали истощению при отсутствии FCS в течение 24 часов. Наносили царапины на клетки, обработанные с помощью PDFG-BB в концентрации 10 нг/мл в присутствии или в отсутствие ингибитора αvβ3 при концентрации 10-6-10-9М. Значение миграции измеряли спустя 17-20 часов как уменьшение исходной ширины царапины.
Ингибитор αvβ3 сильно ингибирует клеточную миграцию, индуцированную PDGF-BB, в участок зоны царапины зависимым от дозы образом. Полное устранение миграции наблюдали при концентрации 10-6 М во всех использованных типах клеток (Фиг.1). При этом неожиданно было обнаружено, что отсутствует влияние ингибитора интегрина αvβ3 на миграцию клеток, стимулированных FCS (Фиг.2), что могло быть по причине стимуляции других, вероятно, более нормальных путей метаболизма, вовлеченных в миграцию, которые запускаются FCS. EMD 409915 не выявил какого-либо значительного ингибирования миграции даже при пониженных концентрациях FCS (0,25%) (данные не представлены). Эти наблюдения дают возможность предположить, что миграция HSC/MF, индуцированная PDGF, является специфически зависимой от αvβ3 и находится под его сильным влиянием. Таким образом, является заманчивым блокировать HSCMF миграцию в фиброзной печени и других фиброзных органах весьма специфическим образом, не препятствуя в значительной степени процессу «нормальной» миграции путем использования ингибирования β3 интегрина.
Для проверки, демонстрирует ли ингибитор αvβ3 подобное влияние на клеточную пролиферацию, клетки истощали на среде без сыворотки в течение 24 часов, а потом обрабатывали с помощью PDGF-BB в концентрации 10 нг/мл и при содержании ингибитора αvβ3 в концентрации 10-8М - 10-6М на протяжении 24 часов. При этих условиях ингибитор αvβ3 не оказывает никакого влияния на клеточную пролиферацию, стимулированную PDGF-BB, во всех типах клеток (Фиг.3). Такое же отсутствие эффекта наблюдали для клеточной пролиферации, стимулированной сывороткой (Фиг.4).
Для исследования, оказывает ли ингибитор интегрина αvβ3 какой-либо эффект на экспрессию мРНК в HSC/MF, измеряли экспрессию спектра основных про- и анти-фиброгенных молекул, подобных проколлагену α1(I) I, TGFβ1, TGFβ2, ММР-3, ММР-13, ММР-2, ростового фактора соединительной ткани (CTGF) и ТЕМР-1 с помощью ПЦР в реальном времени. Клетки, выращенные до стадии конфлюэнтности, истощали в течение 24 часов в среде, не содержащей сыворотки, потом предварительно обрабатывали с помощью ингибитора αvβ3 в течение 30 минут и стимулировали при использовании PDFG-BB (10 нг/мл) на протяжении последующих 24 часов. Как показано на Фиг.5, ингибитор αvβ3 понижает регуляцию CTGF в клетках CFSC-2G зависимым от дозы образом, при этом максимальное ингибирование наблюдается при концентрации 10-6. Не наблюдали никаких изменений транскрипционных уровней других ЕСМ молекул (данные не показаны). Для исследования моделей экспрессии интегринов во время фиброза печени использовали крысиную модель полной непроходимости желчного протока в течение 6 недель, что приводило к циррозу с 4- или 10-12-кратной аккумуляцией относительного (на г печени) и абсолютного (на общий вес печени) печеночного коллагена, соответственно. Через 6 недель после окклюзии желчного протока наблюдали значительную понижающую регуляцию экспрессии мРНК проколлагена α1(I) I, TGFβ1, TGFβ2 и CTGF (25-, 10-, 200- и 190-кратную, соответственно) по сравнению с ложно прооперированными животными (Фиг.6). В то же время мРНК αvβ3 подвергалась умеренной понижающей регуляции (Фиг.7а), в то время как очень высокую (180-кратную) сверхэкспрессию субъединицы интегрина р6 наблюдали в образцах цирротической печени (Фиг.7b). Сильную понижающую регуляцию интегрина αvβ3 никогда не наблюдали при фиброзных заболеваниях и при печеночном фиброзе, в частности. Клетки, ответственные за эту понижающую регуляцию, в основном, представляют собой пролиферирующие эпителиальные клетки желчного протока (а также активированные HSC/миофибробласты), такие клетки, которые секретируют большие количества профиброгенных цитокинов, таких как TGFβ и CTGF, и которые, таким образом, представляют собой первичные мишени для терапии печеночного фиброза, в отличие от активированных HSC/MF. Кроме того, наши недавние пилотные исследования на модели неослабевающего прогрессивного фиброза печени крыс вследствие окклюзии желчного протока (5-6 животных на группу) дают возможность предположить, что специфическое ингибирование β6 интегрина с помощью EMD 409849 может значительно улучшить вторичный билиарный печеночный фиброз путем снижения общего коллагена печени на 50-70% после 5-6-недельной окклюзии желчного протока. Взятые вместе эти данные показывают, что ингибирование интегринов αvβ3 и αvβ6 с помощью специфических низкомолекулярных пептидов и, в частности, их непептидных аналогов, является мощным орудием для улучшения, блокирования или даже обеспечения обратного развития фиброза печени и других органов, лечение которых остается в большой степени труднодостижимым (11-19, 33-44).
Соединения для применения в соответствии с настоящим изобретением, и/или их физиологически приемлемые соли, и/или их физиологически приемлемые производные могут, таким образом, использоваться для получения фармацевтических композиций или препаратов путем введения их в приемлемой дозе вместе, по крайней мере, с одним наполнителем или вспомогательным веществом и, если это является желательным, с одним или более дополнительными активными соединениями. Композиции или препараты, полученные таким образом, могут использоваться в качестве лекарственных средств в медицине и ветеринарии. Приемлемые наполнители представляют собой органические или неорганические вещества, которые являются приемлемыми для энтерального (например, перорального или ректального) или парентерального введения и не вступают в реакцию с соединениями, которые используются в соответствии с настоящим изобретением. Они представляют собой, например, воду, растительные масла, бензиловые спирты, полиэтиленгликоли, глицеринтриацетат или другие глицериды жирных кислот, желатин, соевый лецитин, углеводы, такие как лактоза или крахмал, стеарат магния, тальк или целлюлоза. Для перорального введения, в частности, используют таблетки, покрытые оболочкой таблетки, капсулы, сиропы, соки или капли. Особый интерес представляют покрытые оболочкой таблетки и капсулы, имеющие энтерические покрытия или капсульные оболочки. Для ректального введения используют суппозитории, а для парентерального введения - растворы, предпочтительно масляные или водные растворы, а также суспензии, эмульсии или имплантаты.
Соединения для применения в соответствии с данным изобретением могут также быть лиофилизированы, и полученные таким образом лиофилизаты используют для производства препаратов для инъекций. Такие указанные композиции или препараты могут быть стерилизованными и/или могут содержать вспомогательные вещества, такие как консерванты, стабилизаторы и/или смачивающие агенты, эмульгаторы, соли для регулирования осмотического давления, буферные вещества, красители или вкусовые агенты. Если это является желательным, то они могут также содержать одно или более дополнительных активных соединений, например один или более витаминов, диуретиков, противовоспалительных соединений, антидиабетических агентов, анальгетиков, противовоспалительных агентов или соединений, отличных от соединений, которые используются в соответствии с настоящим изобретением, таких как соединения, которые не составляют предмет настоящего изобретения, и могут использоваться в диагностике, профилактике и/или лечении расстройств, клинических картин и/или симптомов, как описано в данной заявке, например, для улучшения и усиления терапевтического эффекта и/или переносимости дополнительных соединений.
Фармацевтические композиции в соответствии с изобретением могут быть получены или произведены в соответствии со способами, известными в области техники, или аналогичными с ними. Обычно фармацевтические композиции в соответствии с изобретением получают с помощью нехимических способов, например, путем перемешивания активных ингредиентов, например, с физиологически приемлемыми наполнителями, вспомогательными веществами, дополнительными веществами и носителями, и превращения смеси в желаемую дозированную форму, например в таблетки, с помощью методов прессования, или превращения в растворы с помощью растворения активных ингредиентов в растворителе. В общем случае активные ингредиенты превращают в фармацевтическую композицию вместе с одним или более наполнителями, например твердым, жидким и/или полужидким наполнителем, или одним или более вспомогательным веществом, в сочетании с одним или более дополнительными активными ингредиентами.
Эти препараты могут использоваться в качестве лекарственного средства в медицине и ветеринарии. Приемлемые наполнители представляют собой органические или неорганические вещества, которые являются приемлемыми для энтерального (например, перорального), парентерального или местного введении и не реагируют с новыми соединениями. Они представляют собой, например, воду, растительные масла, бензиловые спирты, алкиленгликоли, полиэтиленгликоли, глицеринтриацетат или другие глицериды жирных кислот, желатин, соевый лецитин, углеводы, такие как лактоза или крахмал, стеарат магния, тальк или вазелин. Приемлемыми для перорального введения, в частности, являются таблетки, пилюли, покрытые оболочкой таблетки, капсулы, порошки, гранулы, сиропы, соки или капли, приемлемыми для ректального введения являются суппозитории, приемлемыми для парентерального введения являются растворы, предпочтительно масляные или водные растворы, а также суспензии, эмульсии или имплантаты, а предпочтительными для местного применения являются мази, кремы или порошки. Новые соединения могут также быть лиофилизированы, а полученные лиофилизаты использованы, например, для получения инъекционных препаратов. Указанные препараты могут быть стерилизованными и/или могут содержать вспомогательные вещества, такие как лубриканты, консерванты, стабилизаторы и/или смачивающие агенты, эмульгаторы, соли для регулирования осмотического давления, буферные вещества, красители, вкусовые агенты и/или множество дополнительных активных ингредиентов, например один или более витаминов.
Для введения в виде ингаляционного аэрозоля является возможным использовать аэрозоли, в которых активные ингредиенты либо растворены, либо суспендированы в газе-вытеснителе или смеси газов-вытеснителей (например, СО2 или хлорфторуглероды). Активный ингредиент предпочтительно использовать в данной заявке в тонкоизмельченной форме, в случае которой могут присутствовать один или более дополнительных физиологически приемлемых растворителей, например этанол. Ингаляционные растворы могут вводиться с помощью традиционных ингаляторов.
В соответствии с этим антагонисты предпочтительно вводятся в дозах от приблизительно 0,001 мг до 200 мг, более предпочтительно от приблизительно 0,01 мг до 100 мг, даже более предпочтительно от приблизительно 0,01 мг до 50 мг и, в частности, от 0,01 до 30 мг, на одну единичную дозу.
Суточная доза предпочтительно является большей или равной приблизительно 0,0001 мг/кг, более предпочтительно большей или равной приблизительно 0,001 мг/кг, даже более предпочтительно большей или равной приблизительно 0,005 мг/кг, большей или равной приблизительно 0,01 мг/кг или большей или равной приблизительно 0,1 мг/кг. Суточная доза предпочтительно является меньшей или равной приблизительно 30 мг/кг, более предпочтительно меньшей или равной приблизительно 20 мг/кг, даже более предпочтительно меньшей или равной приблизительно 15 мг/кг, меньшей или равной приблизительно 5 мг/кг или меньшей или равной приблизительно 1 мг/кг веса тела.
Claims (1)
- Применение антагониста αvβ интегрина для получения лекарственного средства для лечения вторичного билиарного фиброза печени, где указанный антагонист является 3-{3-бензилокси-2-[5-(пиридин-2-иламино)пентаноиламино]пропаноиламино}-3-(3,5-дихлорфенил)пропановой кислотой.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP03022048.7 | 2003-10-01 | ||
EP03022048 | 2003-10-01 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2006114395A RU2006114395A (ru) | 2007-11-27 |
RU2388472C2 true RU2388472C2 (ru) | 2010-05-10 |
Family
ID=34486055
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2006114395/15A RU2388472C2 (ru) | 2003-10-01 | 2004-09-16 | Антагонисты альфаvбета3 и альфаvбета6 интегринов в качестве антифибротических агентов |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20070117849A1 (ru) |
EP (1) | EP1667668B1 (ru) |
JP (1) | JP4912881B2 (ru) |
KR (1) | KR101191068B1 (ru) |
CN (1) | CN100462068C (ru) |
AR (1) | AR045960A1 (ru) |
AT (1) | ATE399542T1 (ru) |
AU (1) | AU2004283413B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0414927A (ru) |
CA (1) | CA2540730C (ru) |
DE (1) | DE602004014795D1 (ru) |
DK (1) | DK1667668T3 (ru) |
ES (1) | ES2308227T3 (ru) |
MX (1) | MXPA06003477A (ru) |
PL (1) | PL1667668T3 (ru) |
RU (1) | RU2388472C2 (ru) |
WO (1) | WO2005039547A1 (ru) |
ZA (1) | ZA200603427B (ru) |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP4473117B2 (ja) | 2002-03-13 | 2010-06-02 | バイオジェン・アイデック・エムエイ・インコーポレイテッド | 抗αvβ6抗体 |
GB0722650D0 (en) * | 2007-11-19 | 2007-12-27 | Ge Healthcare Ltd | Novel imaging method |
CN101497656B (zh) * | 2009-03-09 | 2012-08-15 | 东南大学 | 与整合素αvβ3具有高结合活性的多肽及其应用 |
GB0922014D0 (en) | 2009-12-17 | 2010-02-03 | Ge Healthcare Ltd | Novel integrin binders |
EP2831104B1 (en) * | 2012-03-29 | 2021-04-21 | Biogen MA Inc. | Biomarkers for use in integrin therapy applications |
US8716226B2 (en) | 2012-07-18 | 2014-05-06 | Saint Louis University | 3,5 phenyl-substituted beta amino acid derivatives as integrin antagonists |
EP2875021B1 (en) | 2012-07-18 | 2017-08-23 | Saint Louis University | Beta amino acid derivatives as integrin antagonists |
WO2014124302A1 (en) | 2013-02-07 | 2014-08-14 | Scifluor Life Sciences, Llc | Fluorinated integrin antagonists |
WO2014143739A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof |
WO2014144466A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Biogen Idec Ma Inc. | Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof |
RU2017132433A (ru) * | 2015-02-19 | 2019-03-19 | Сайфлуор Лайф Сайенсиз, Инк. | Фторированные производные тетрагидронафтиридинилнонановой кислоты и их применение |
JP2019500355A (ja) | 2015-12-30 | 2019-01-10 | セントルイス ユニバーシティ | 汎インテグリンアンタゴニストとしてのメタ−アザ環式アミノ安息香酸誘導体 |
KR102515507B1 (ko) * | 2016-11-08 | 2023-03-28 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 알파 v 인테그린 억제제로서의 피롤 아미드 |
EP3538527B1 (en) * | 2016-11-08 | 2021-10-13 | Bristol-Myers Squibb Company | Azole amides and amines as alpha v integrin inhibitors |
US10610104B2 (en) | 2016-12-07 | 2020-04-07 | Progenity, Inc. | Gastrointestinal tract detection methods, devices and systems |
BR112019012071A2 (pt) | 2016-12-14 | 2019-11-12 | Progenity Inc | tratamento de uma doença do trato gastrointestinal com um inibidor de integrina |
US20230033021A1 (en) | 2018-06-20 | 2023-02-02 | Progenity, Inc. | Treatment of a disease of the gastrointestinal tract with an integrin inhibitor |
CA3120619A1 (en) | 2018-11-19 | 2020-05-28 | Progenity, Inc. | Methods and devices for treating a disease with biotherapeutics |
US11707610B2 (en) | 2019-12-13 | 2023-07-25 | Biora Therapeutics, Inc. | Ingestible device for delivery of therapeutic agent to the gastrointestinal tract |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
HUP0105479A3 (en) * | 1999-02-20 | 2002-06-28 | Merck Patent Gmbh | Betha-alanine derivatives, process for producing them and pharmaceutical compositions containing them |
DE19933173A1 (de) * | 1999-07-15 | 2001-01-18 | Merck Patent Gmbh | Cyclische Peptidderivate als Inhibitoren des Integrins alpha¶v¶beta¶6¶ |
DE10006139A1 (de) * | 2000-02-11 | 2001-08-16 | Merck Patent Gmbh | Indol-3-yl-Derivate |
DE10063173A1 (de) * | 2000-12-18 | 2002-06-20 | Merck Patent Gmbh | Harnstoff- und Urethanderivate |
IL157706A0 (en) * | 2001-03-02 | 2004-03-28 | Medimmune Inc | METHODS OF PREVENTING OR TREATING INFLAMMATORY OR AUTOIMMUNE DISORDERS BY ADMINISTERING INTEGRIN alphav beta3 ANTAGONISTS |
DE10112771A1 (de) * | 2001-03-16 | 2002-09-26 | Merck Patent Gmbh | Inhibitoren des Integrins alpha¶v¶beta¶6¶ |
-
2004
- 2004-09-16 WO PCT/EP2004/010396 patent/WO2005039547A1/en active IP Right Grant
- 2004-09-16 AT AT04765296T patent/ATE399542T1/de active
- 2004-09-16 EP EP04765296A patent/EP1667668B1/en active Active
- 2004-09-16 DK DK04765296T patent/DK1667668T3/da active
- 2004-09-16 US US10/574,215 patent/US20070117849A1/en not_active Abandoned
- 2004-09-16 RU RU2006114395/15A patent/RU2388472C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2004-09-16 MX MXPA06003477A patent/MXPA06003477A/es active IP Right Grant
- 2004-09-16 AU AU2004283413A patent/AU2004283413B2/en not_active Ceased
- 2004-09-16 CA CA2540730A patent/CA2540730C/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-09-16 JP JP2006529991A patent/JP4912881B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-09-16 BR BRPI0414927-0A patent/BRPI0414927A/pt active Search and Examination
- 2004-09-16 DE DE602004014795T patent/DE602004014795D1/de active Active
- 2004-09-16 KR KR1020067006141A patent/KR101191068B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2004-09-16 PL PL04765296T patent/PL1667668T3/pl unknown
- 2004-09-16 ES ES04765296T patent/ES2308227T3/es active Active
- 2004-09-16 CN CNB2004800286709A patent/CN100462068C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-10-01 AR ARP040103571A patent/AR045960A1/es not_active Application Discontinuation
-
2006
- 2006-04-28 ZA ZA200603427A patent/ZA200603427B/en unknown
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
STN on the web, база данных CAS AN 139: 191476, AN138:180760 RN 497955-40-5 [online] [найдено 11.09.2008]. STN on the web, база данных CAS AN 142: 441882 RN 851333-14-7 [on line] [найдено 11.09.2008]. * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2540730A1 (en) | 2005-05-06 |
BRPI0414927A (pt) | 2006-11-07 |
AR045960A1 (es) | 2005-11-16 |
AU2004283413B2 (en) | 2010-09-02 |
EP1667668A1 (en) | 2006-06-14 |
AU2004283413A1 (en) | 2005-05-06 |
RU2006114395A (ru) | 2007-11-27 |
CN1863520A (zh) | 2006-11-15 |
KR20060090818A (ko) | 2006-08-16 |
WO2005039547A1 (en) | 2005-05-06 |
ATE399542T1 (de) | 2008-07-15 |
MXPA06003477A (es) | 2006-06-05 |
DE602004014795D1 (de) | 2008-08-14 |
CN100462068C (zh) | 2009-02-18 |
JP2007507440A (ja) | 2007-03-29 |
JP4912881B2 (ja) | 2012-04-11 |
CA2540730C (en) | 2012-08-21 |
DK1667668T3 (da) | 2008-09-15 |
ZA200603427B (en) | 2007-09-26 |
US20070117849A1 (en) | 2007-05-24 |
KR101191068B1 (ko) | 2012-10-15 |
EP1667668B1 (en) | 2008-07-02 |
ES2308227T3 (es) | 2008-12-01 |
PL1667668T3 (pl) | 2008-10-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2388472C2 (ru) | Антагонисты альфаvбета3 и альфаvбета6 интегринов в качестве антифибротических агентов | |
Matsushita et al. | Hypoxia-induced endothelial apoptosis through nuclear factor-κB (NF-κB)–mediated bcl-2 suppression: in vivo evidence of the importance of NF-κB in endothelial cell regulation | |
Leeper et al. | Apelin prevents aortic aneurysm formation by inhibiting macrophage inflammation | |
Zhang et al. | Cortistatin protects myocardium from endoplasmic reticulum stress induced apoptosis during sepsis | |
CN105358150A (zh) | 用于心脏病的bet抑制疗法 | |
WO2017088775A1 (zh) | 苯磺酰胺基苯甲酰胺类化合物用于抑制肝纤维化的用途 | |
Wu et al. | Suppression of hepatocyte CYP1A2 expression by Kupffer cells via AhR pathway: the central role of proinflammatory cytokines | |
Balsam et al. | Caspase-3 inhibition preserves myocardial geometry and long-term function after infarction | |
WO2023185085A1 (zh) | Pd1抑制剂在制备心脏成纤维细胞转分化抑制剂中的用途 | |
Lv et al. | Effect of QiShenYiQi Pill on myocardial collagen metabolism in rats with partial abdominal aortic coarctation | |
EP3119414B1 (en) | Ostreolysin for use in the treatment of overweight and obesity | |
Giannini et al. | Podocytopathy in obesity: challenges of living large | |
CN108938638A (zh) | Zinc62678696在制备抑制肝纤维化药物的用途 | |
Becquemont et al. | Lymphocyte P‐glycoprotein expression and activity before and after rifampicin in man | |
KR102481553B1 (ko) | 신혈관 형성 억제를 위한 c-19 스테로이드 | |
JP2002318231A (ja) | シュワン細胞活性化剤及びそのスクリーニング方法 | |
Yu et al. | MiR-204 inhibits hypertension by regulating proliferation and apoptosis of vascular smooth muscle cells | |
Lin et al. | Mac-1 deficiency ameliorates pressure overloaded heart failure through inhibiting macrophage polarization and activation | |
Усанова et al. | LIVER FIBROSIS | |
KR101530019B1 (ko) | 혈관성형술 또는 동맥내막절제술 후 재협착 및 장기 섬유증으로 인한 질환의 치료에 유용한 5베타, 14베타-안드로스테인 유도체 | |
CN108685896B (zh) | 千层纸素a在制备治疗和/或预防慢性周围血管闭塞性疾病药物中的用途 | |
US6812003B2 (en) | Compounds and methods for modulating cell-adhesion mediated drug resistance | |
Li et al. | Astilbin inhibits proliferation of rat aortic smooth muscle cells induced by angiotensin II and down-regulates expression of protooncogene | |
CN118203666A (zh) | 减少rna g-四链体含量或抑制rna g-四链体结构形成的物质的医药用途 | |
CN110604735A (zh) | 一种治疗肝纤维化、硬皮病的化合物及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20160917 |