RU2330886C2 - НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ Aequorea coerulscens И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ - Google Patents
НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ Aequorea coerulscens И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ Download PDFInfo
- Publication number
- RU2330886C2 RU2330886C2 RU2004125585/13A RU2004125585A RU2330886C2 RU 2330886 C2 RU2330886 C2 RU 2330886C2 RU 2004125585/13 A RU2004125585/13 A RU 2004125585/13A RU 2004125585 A RU2004125585 A RU 2004125585A RU 2330886 C2 RU2330886 C2 RU 2330886C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- nucleic acid
- cell
- polypeptide
- protein
- fluorescent
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 6
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 title abstract 5
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 title abstract 5
- 241000243290 Aequorea Species 0.000 title 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract 20
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract 20
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract 7
- 238000002372 labelling Methods 0.000 claims abstract 6
- 241001531066 Aequorea coerulescens Species 0.000 claims abstract 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims 17
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims 12
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 5
- 230000004927 fusion Effects 0.000 claims 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims 3
- 230000007762 localization of cell Effects 0.000 claims 2
- 102220549285 CBY1-interacting BAR domain-containing protein 1_F64L_mutation Human genes 0.000 claims 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 claims 1
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims 1
- 102220306159 rs185266383 Human genes 0.000 claims 1
- 102200054160 rs28941775 Human genes 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
- C07K14/43595—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from coelenteratae, e.g. medusae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области генной инженерии и биотехнологии и может быть использовано для мечения белков, клеток и организмов. Путем введения замен в нуклеиновую кислоту Aequorea coerulescens, кодирующую бесцветный GFP-подобный белок acGFP, получена нуклеиновая кислота, кодирующая флуоресцентный белок. Кассета экспрессии, содержащая данную нуклеиновую кислоту под контролем регуляторных элементов, обеспечивает биосинтез флуоресцентного белка в клетке. С помощью данной генетической конструкции получены трансгенный организм и клетка, продуцирующие флуоресцентный белок, кодируемый указанной нуклеиновой кислотой. Данный флуоресцентный белок используют в способах мечения клетки, внутриклеточной структуры и белка, а также для регистрации транскрипционной активности промотора. Применение изобретения позволяет расширить арсенал маркировочных средств, используемых в биохимии, молекулярной биологии и медицинской диагностике. 10 н. и 1 з.п. ф-лы, 25 ил.
Description
Claims (11)
1. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая флуоресцентный полипептид, имеющая нуклеотидную последовательность, по существу, соответствующую открытой рамке считывания аминокислотной последовательности кодируемого флуоресцентного полипептида, где указанная выделенная нуклеиновая кислота выбрана из группы, состоящей из:
(a) нуклеиновой кислоты, полученной из нуклеиновой кислоты, которая кодирует белок Aequorea coerulescens acGFP, характеризующийся аминокислотной последовательностью, показанной на фиг. 1, путем введения замен в положения нуклеиновой кислоты Aequorea coerulescens, приводящих к по меньшей мере одной из замен E222G, Y220L, Н148Т или H148S и необязательно к одной или более заменам, выбранным из группы, состоящей из V111, N19D, Т62А, F64L, К101Е, Е115К, N121S, F165L, Е172К, Е172А, Т206А, F221L, Y237I, K238Q в указанной аминокислотной последовательности кодируемого полипептида, и к возникновению у кодируемого полипептида способности к флуоресценции;
(b) нуклеиновой кислоты, кодирующей аминокислотную последовательность, выбранную из группы аминокислотных последовательностей, показанных на фиг. 3, 5, 6, 7, 9, 12, 15, 17, 19 и 21.
2. Выделенная нуклеиновая кислота по п.1, содержащая нуклеотидную последовательность, выбранную из группы нуклеотидных последовательностей, показанных на фиг. 3, 5, 6, 7, 9, 12, 15, 17, 19, 21 и 23, или нуклеотидную последовательность, отличающуюся от указанной вследствие вырожденности генетического кода.
3. Кассета экспрессии, содержащая нуклеиновую кислоту по п.1 под контролем регуляторных элементов, необходимых для экспрессии нуклеиновой кислоты в клетке-хозяине, которая будучи интегрированной в геном клетки или при введении в клетку в виде внехромосомного элемента, способна обеспечить экспрессию флуоресцентного полипептида, кодируемого нуклеиновой кислотой по п.1.
4. Клетка, продуцирующая флуоресцентный полипептид, кодируемый нуклеиновой кислотой по п.3, содержащая кассету экспрессии по п.3 в виде внехромосомного элемента или элемента, интегрированного в геном этой клетки.
5. Выделенный полипептид, способный к флуоресценции и кодируемый нуклеиновой кислотой по п.1.
6. Слитый полипептид, способный к флуоресценции, состоящий из полипептида по п.5 и партнера слияния, представляющего собой направляющий к мишени пептид или сигнальный пептид.
7. Трансгенный организм, содержащий кассету экспрессии по п.3 в виде внехромосомного элемента или интегрированную в геном и способный экспрессировать флуоресцентный полипептид по п.5.
8. Способ мечения белка, включающий связывание указанного белка с полипептидом по п.5 путем создания нуклеиновой кислоты, кодирующей пептид по п.5, оперативно связанной с нуклеиновой кислотой, кодирующей указанный белок, и получение флуоресцентного слитого белка по п.6.
9. Способ мечения клетки, включающей трансфекцию клетки кассетой по п.3 и продуцирование клеткой флуоресцентного пептида по п.5.
10. Способ мечения внутриклеточной структуры, включающий (а) трансфекцию клетки экспрессионной кассетой, содержащей нуклеиновую кислоту по п.1, слитую с нуклеиновой кислотой, кодирующей сигнал клеточной локализации, специфичный в отношении клеточной структуры, подлежащей мечению, под контролем регуляторных элементов, обеспечивающих продуцирование флуоресцентного полипептида по п.5, слитого с сигналом клеточной локализации, и (b) экспрессию флуоресцентного слитого пептида в клетке.
11. Способ регистрации транскрипционной активности промотора, включающий (а) продуцирование пептида по п.5 в клетке путем ее трансфекции экспрессирующей кассетой по п.3, содержащей промотор, ответственный в природе за экспрессию изучаемого гена; (b) регистрацию клеточной флуоресценции.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US35151802P | 2002-01-22 | 2002-01-22 | |
US60/351,518 | 2002-01-22 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2004125585A RU2004125585A (ru) | 2005-04-20 |
RU2330886C2 true RU2330886C2 (ru) | 2008-08-10 |
Family
ID=27613506
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2004125585/13A RU2330886C2 (ru) | 2002-01-22 | 2003-01-17 | НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ Aequorea coerulscens И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US7432053B2 (ru) |
EP (1) | EP1485481B1 (ru) |
JP (3) | JP4510464B2 (ru) |
AT (1) | ATE458816T1 (ru) |
AU (1) | AU2003208520B2 (ru) |
CA (1) | CA2474108C (ru) |
DE (1) | DE60331422D1 (ru) |
DK (1) | DK1485481T3 (ru) |
ES (1) | ES2340154T3 (ru) |
IL (2) | IL162568A0 (ru) |
RU (1) | RU2330886C2 (ru) |
WO (1) | WO2003062270A2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010107405A1 (ru) * | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Razumenko Mihail Viktorovich | Способ получения пептидов, специфично распознающих определённые типы клеток и предназначенных для терапевтических целей |
RU2602452C2 (ru) * | 2014-05-14 | 2016-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии гена Российской академии наук | Способ выявления веществ и их композиций с противоопухолевой активностью |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU2003208520B2 (en) * | 2002-01-22 | 2008-06-05 | Takara Bio Usa, Inc. | Fluorescent protein from aequorea coerulscens and uses therof |
JP4480674B2 (ja) | 2002-12-26 | 2010-06-16 | ザクリトエ アクツィオネルノエ オブシェストヴォ “エフロージェン” | コペポーダ種由来の蛍光たんぱく質および該たんぱく質の使用方法 |
EP2482075A1 (en) | 2004-12-01 | 2012-08-01 | Proteologics, Ltd | Ubiquitin ligase assays and related reagents |
US8268550B2 (en) * | 2009-06-26 | 2012-09-18 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and methods for identification of PARP function, inhibitors, and activators |
WO2010151664A2 (en) | 2009-06-26 | 2010-12-29 | Massachusetts Institute Of Technology | Compositions and methods for treating cancer and modulating stress granule formation |
US8435961B2 (en) | 2009-06-26 | 2013-05-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and compositions for increasing the activity of inhibitory RNA |
KR101800878B1 (ko) * | 2010-03-31 | 2017-11-27 | 전남대학교 산학협력단 | 비-형광성 형광 단백질을 이용한 유전독성 분석방법 |
WO2011135040A1 (en) | 2010-04-30 | 2011-11-03 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Fluorescent antibody fusion protein, its production and use |
US9134301B2 (en) * | 2010-11-22 | 2015-09-15 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Sorting of adherent cells by selective transformation of labels |
US9040248B2 (en) | 2012-06-06 | 2015-05-26 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Kits for detecting and monitoring endocrine disrupting chemicals (EDCs) |
US20140024066A1 (en) * | 2012-06-20 | 2014-01-23 | California Institute Of Technology | Animal model having photo-activatable mitochondria |
JPWO2022215532A1 (ru) * | 2021-04-07 | 2022-10-13 | ||
CN116023460B (zh) * | 2022-10-28 | 2023-11-10 | 无锡佰翱得生物科学股份有限公司 | 一种StayGold黄色荧光蛋白及其应用 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5625048A (en) * | 1994-11-10 | 1997-04-29 | The Regents Of The University Of California | Modified green fluorescent proteins |
US5777079A (en) | 1994-11-10 | 1998-07-07 | The Regents Of The University Of California | Modified green fluorescent proteins |
US5668750A (en) * | 1995-07-28 | 1997-09-16 | Nec Corporation | Bipolar multiplier with wide input voltage range using multitail cell |
US5874304A (en) * | 1996-01-18 | 1999-02-23 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Humanized green fluorescent protein genes and methods |
US6096865A (en) * | 1996-05-06 | 2000-08-01 | Amgen Inc. | Mutants of the green fluorescent protein having improved fluorescent properties at 37° |
WO2000034326A1 (en) | 1998-12-11 | 2000-06-15 | Clontech Laboratories, Inc. | Fluorescent proteins from non-bioluminescent species of class anthozoa, genes encoding such proteins and uses thereof |
MXPA03004772A (es) * | 2000-12-01 | 2004-04-20 | 3M Innovative Properties Co | Composiciones adhesivas sensibles a presion reticuladas y articulos adhesivos basados en las mismas, utiles en aplicaciones a alta temperatura. |
GB0109858D0 (en) * | 2001-04-23 | 2001-06-13 | Amersham Pharm Biotech Uk Ltd | Fluorscent proteins |
AU2003208520B2 (en) | 2002-01-22 | 2008-06-05 | Takara Bio Usa, Inc. | Fluorescent protein from aequorea coerulscens and uses therof |
-
2003
- 2003-01-17 AU AU2003208520A patent/AU2003208520B2/en not_active Expired
- 2003-01-17 DE DE60331422T patent/DE60331422D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 JP JP2003562147A patent/JP4510464B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2003-01-17 IL IL16256803A patent/IL162568A0/xx unknown
- 2003-01-17 WO PCT/IB2003/000907 patent/WO2003062270A2/en active Application Filing
- 2003-01-17 US US10/501,629 patent/US7432053B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 DK DK03706812.9T patent/DK1485481T3/da active
- 2003-01-17 EP EP03706812A patent/EP1485481B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 CA CA2474108A patent/CA2474108C/en not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 ES ES03706812T patent/ES2340154T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-17 RU RU2004125585/13A patent/RU2330886C2/ru active
- 2003-01-17 AT AT03706812T patent/ATE458816T1/de not_active IP Right Cessation
-
2004
- 2004-06-16 IL IL162568A patent/IL162568A/en not_active IP Right Cessation
-
2008
- 2008-08-28 US US12/200,113 patent/US7879988B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2008-08-28 US US12/199,983 patent/US7667016B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2008-08-28 US US12/200,064 patent/US7897726B2/en active Active
-
2009
- 2009-10-22 JP JP2009243614A patent/JP2010046084A/ja active Pending
-
2010
- 2010-11-05 JP JP2010248679A patent/JP5465649B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
GREEN-FLUORESCENT PROTEIN. * |
Proteins. 2000 Dec 1; 41(4):429-37. FEBS Lett. 1995 Jun 26; 367(2):163-6. Nat Biotechnol. 1999 Oct; 17(10):969-73. Nucleic Acids Res.2000 August 15; 28(16):e78. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010107405A1 (ru) * | 2009-03-20 | 2010-09-23 | Razumenko Mihail Viktorovich | Способ получения пептидов, специфично распознающих определённые типы клеток и предназначенных для терапевтических целей |
RU2602452C2 (ru) * | 2014-05-14 | 2016-11-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии гена Российской академии наук | Способ выявления веществ и их композиций с противоопухолевой активностью |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US7432053B2 (en) | 2008-10-07 |
DE60331422D1 (de) | 2010-04-08 |
IL162568A (en) | 2010-12-30 |
RU2004125585A (ru) | 2005-04-20 |
JP2005526495A (ja) | 2005-09-08 |
WO2003062270B1 (en) | 2004-04-01 |
JP5465649B2 (ja) | 2014-04-09 |
US20090148939A1 (en) | 2009-06-11 |
AU2003208520B2 (en) | 2008-06-05 |
JP4510464B2 (ja) | 2010-07-21 |
ATE458816T1 (de) | 2010-03-15 |
US7667016B2 (en) | 2010-02-23 |
JP2011087581A (ja) | 2011-05-06 |
US7897726B2 (en) | 2011-03-01 |
JP2010046084A (ja) | 2010-03-04 |
WO2003062270A8 (en) | 2004-11-04 |
ES2340154T3 (es) | 2010-05-31 |
WO2003062270A3 (en) | 2003-11-27 |
US20060167225A1 (en) | 2006-07-27 |
IL162568A0 (en) | 2005-11-20 |
WO2003062270A2 (en) | 2003-07-31 |
CA2474108C (en) | 2012-06-19 |
EP1485481A2 (en) | 2004-12-15 |
EP1485481B1 (en) | 2010-02-24 |
US20090148940A1 (en) | 2009-06-11 |
CA2474108A1 (en) | 2003-07-31 |
DK1485481T3 (da) | 2010-06-07 |
US20090137033A1 (en) | 2009-05-28 |
US7879988B2 (en) | 2011-02-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2330886C2 (ru) | НОВЫЕ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИЕ БЕЛКИ Aequorea coerulscens И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ | |
US11124788B2 (en) | Asx-specific protein ligase | |
DK1218504T3 (da) | GL50 molekyler og anvendelser deraf | |
WO1999064592A3 (en) | Green fluorescent proteins for measuring the ph of a biological sample | |
US20090042216A1 (en) | Method for purifying proteins and/or biomolecule or protein complexes | |
ES2254043T1 (es) | Proteinas fluorescentes y cromoproteinas procedentes de especies hidrozoa que no son aequorea y metodos para usarlas. | |
US5948677A (en) | Reading frame independent epitope tagging | |
Williams et al. | Recombinant glycoprotein production in the slime mould Dictyostelium discoideum | |
WO2013154731A1 (en) | Protein scaffolds for selective enrichment of metal ions | |
US8273549B2 (en) | Compositions and methods for the expression of selenoproteins in eukaryotic cells | |
EP2684952A1 (en) | Azoline compound and azole compound library and method for producing same | |
KR102617593B1 (ko) | 바이러스 뉴클레오캡시드를 이용한 목적 단백질 발현 플랫폼 | |
WO2003040312A3 (en) | Multifunctional green fluorescent protein and uses thereof | |
RU2005118079A (ru) | Флуоресцирующие белки и хромопротеины из видов, не относящихся к aequorea hydrozoa, и способы их получения | |
EA200300420A1 (ru) | Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, выделенный полипептид и способ его получения, способ обнаружения их присутствия в образце (варианты), клетка-хозяин (варианты), антитело, набор (варианты), способ модулирования активности полипептида, способ идентификации (варианты) и применение соединения, способ выявления субъекта (варианты) и способ лечения субъекта с нарушением, связанным с калиевыми каналами (варианты) | |
WO2003020912A3 (en) | Novel clark protein and nucleic acid molecules and uses therefor | |
KR20240072296A (ko) | 단량체 DsRed와 인테인 변이체를 이용한 재조합 단백질의 세포 외부 분비 시스템 | |
CA2335335A1 (en) | Human erythrocyte differentiation related factor | |
WO2002018439A3 (en) | 52991, a human transporter protein and uses therefor | |
ATE415422T1 (de) | Menschliches gas-6 (growth arrest-specific gene 6) protein und dafür kodierende nukleinsäuren | |
WO2005005647A2 (en) | Compositions, splice variants and methods relating to ovarian specific genes and proteins | |
WO2001079497A3 (en) | 33556, a human transporter and uses thereof | |
WO2003091448A3 (en) | 696803, a human transporter family member and uses therefor | |
WO2003089591A2 (en) | Method of production of soluble and functional large eukaryotic proteins | |
WO2002079427A3 (en) | 84226, a novel human cation transporter family member and uses thereof |