RU2208435C2 - Внедрение активных веществ в матрицы носителей - Google Patents

Внедрение активных веществ в матрицы носителей Download PDF

Info

Publication number
RU2208435C2
RU2208435C2 RU2000125873/14A RU2000125873A RU2208435C2 RU 2208435 C2 RU2208435 C2 RU 2208435C2 RU 2000125873/14 A RU2000125873/14 A RU 2000125873/14A RU 2000125873 A RU2000125873 A RU 2000125873A RU 2208435 C2 RU2208435 C2 RU 2208435C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
aqueous phase
active substance
emulsion
liquid gas
carrier
Prior art date
Application number
RU2000125873/14A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2000125873A (ru
Inventor
Мари-Луиз АНДЕРССОН (SE)
Мари-Луиз АНДЕРССОН
Катерина БОИССИЕР (SE)
Катерина БОИССИЕР
Анне Мари ЮППО (SE)
Анне Мари ЮППО
Анетте ЛАРССОН (SE)
Анетте ЛАРССОН
Original Assignee
Астразенека Аб
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Астразенека Аб filed Critical Астразенека Аб
Publication of RU2000125873A publication Critical patent/RU2000125873A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2208435C2 publication Critical patent/RU2208435C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/105—Delta proteobacteriales, e.g. Lawsonia; Epsilon proteobacteriales, e.g. campylobacter, helicobacter
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1682—Processes
    • A61K9/1694—Processes resulting in granules or microspheres of the matrix type containing more than 5% of excipient
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D11/00—Solvent extraction
    • B01D11/04—Solvent extraction of solutions which are liquid
    • B01D11/0403—Solvent extraction of solutions which are liquid with a supercritical fluid
    • B01D11/0411—Solvent extraction of solutions which are liquid with a supercritical fluid the supercritical fluid acting as solvent for the solvent and as anti-solvent for the solute, e.g. formation of particles from solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55555—Liposomes; Vesicles, e.g. nanoparticles; Spheres, e.g. nanospheres; Polymers
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T428/00—Stock material or miscellaneous articles
    • Y10T428/29—Coated or structually defined flake, particle, cell, strand, strand portion, rod, filament, macroscopic fiber or mass thereof
    • Y10T428/2982—Particulate matter [e.g., sphere, flake, etc.]
    • Y10T428/2984—Microcapsule with fluid core [includes liposome]
    • Y10T428/2985—Solid-walled microcapsule from synthetic polymer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Catalysts (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
  • Nozzles (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к медицине, а именно касается способа получения рецептуры, которая включает активное вещество или активные вещества, связанные с носителем. Способ заключается в том, что получают эмульсию смешиванием жидкой неводной фазы и жидкой водной фазы, причем водная фаза содержит активное вещество или активные вещества, а носитель присутствует, по меньшей мере, в одной из фаз, эмульсию приводят в контакт с жидким газом, используют технологию антирастворителя и получают компоненты, освобожденные от жидкой фазы. Изобретение дает возможность внедрения активного вещества в систему носителя путем образования эмульсии компонентов и осаждения системы с использованием технологии жидкого газа. 2 с. и 31 з.п.ф-лы, 4 табл.

Description

Изобретение относится к способу получения рецептуры, которая включает активное вещество, связанное с носителем, путем образования эмульсии компонентов и осаждения системы с использованием технологии жидкого газа. Изобретение относится также к рецептуре, получаемой указанным способом.
Предлагалось несколько вариантов решения задачи внедрения активных веществ в матрицы носителей для получения систем частиц. Такие системы можно использовать, например, для рецептур мгновенного высвобождения, рецептур модифицированного высвобождения, рецептур пролонгированного высвобождения, рецептур импульсного высвобождения и т. п.
Некоторыми примерами таких технологий являются:
- микроинкапсулирование горячим расплавом (Schwope et al. Life Sci. 1975, 17, 1877)
- межфазная полимеризация (Birrenbach and Speiser, J. Pharm. Sci. 1976, 65, 1763. Thies, In Encyclopedia of Chemical Technology, 4 ed. Ed. Kirk-Othmer, 1996, 16. p. 632)
- способы выпаривания растворителя (Cleland, In Vaccine Design. The subunit and adjuvant approach, Eds: Powell and Newman Plenum Press, New York. 1995, 439)
- экстрагирование растворителя (Cleland. In Vaccine Design. The subunit and adjuvant approach, Eds: Powell and Newman Plenum Press, New York, 1995, 439)
- распылительная сушка (WO 94/15636).
Важной операцией при получении таких систем является операция внедрения активного вещества. Выбор способа получения системы высвобождения зависит от рода активного вещества, подлежащего внедрению, и желаемых свойств, касающихся высвобождения активного вещества из системы подачи. Все перечисленные выше технологии имеют свои достоинства и недостатки. Так, способ микроинкапсулирования горячим расплавом является неприемлемым для термочувствительных активных веществ. Недостаток способа межфазной полимеризации заключается в том, что мономеры, обладающие высокой химической активностью в растворителе, не смешивающемся с водой, могут реагировать как с материалом ядра, так и с инкапсулированным активным веществом. Недостатком способа, использующего выпаривание растворителя, является большая длительность и возможность применения только для периодических процессов. Как и технология выпаривания растворителя, способ экстрагирования требует длительного времени, так как может применяться только для периодических процессов. Недостатком распылительной сушки является сложность получения частиц, размер которых находится в нанометровом диапазоне. Данный способ также неприемлем для термочувствительных веществ и активных веществ, чувствительных к окислению, поскольку включает воздействие нагревания и воздуха.
В последние годы разработана технология применения сверхкритических жидкостей. Вкратце сверхкритическую жидкость можно определить как жидкость, находящуюся одновременно при температуре и под давлением. которые равны или превышают критические значения. Физико-химические свойства сверхкритических жидкостей зависят от температуры и давления и могут быть выбраны такими, чтобы удовлетворять требованиям конкретного применения.
Существует также несколько новых технологий, применяемых в настоящее время, одна из которых известна как быстрое расширение сверхкритических растворов (БРСР), а другая - как осаждение газом антирастворителем (ОГА). В технологии ОГА вещество, представляющее интерес, растворяют в обычном растворителе, а затем вводят в раствор сверхкритическую жидкость, такую как диоксид углерода, что приводит к быстрому увеличению объема раствора. В результате этого растворяющая способность растворителя резко уменьшается в течение короткого периода времени, что вызывает осаждение частиц (см. J.W. Torn and P.G. Debenedetti in J. Aerosol Sci., 22 (1991), 555-584; P.G. Debenedetti et al. in J. Controlled Release, 24 (1993), 27-44 and J. W Tom et al. ACS Symp Ser 514 (1993) 238-257; ЕР 437451 (Upjohn) and EP 322687 (Schwarz Pharma). Недавно разработали модификацию системы ОГА (WO 95/01221 и WO 96/00610). Ее называют способом УДРСЖ (усиленное диспергирование раствора сверхкритической жидкостью), при котором для образования частиц используют технологии сверхкритических жидкостей.
Белок, как и другие активные вещества, можно внедрять в матрицы носителей, используя перечисленные выше способы инкапсулирования. Белок растворяют в водной фазе, суспендируют или непосредственно растворяют в фазе, содержащей носитель. Недостатком растворения белков в органических растворителях является низкая растворимость белков в органических растворителях и сверхкритических жидкостях / модифицированных сверхкритических потоках (Stahl et al., "Dense Gas Results", Fluid Phase Equilibra, 1983, 10, 269). Еще один недостаток непосредственного растворения или суспендирования белка в органическом растворителе состоит в том, что органический растворитель может разворачивать структуру белка или денатурировать белок (Dill and Shortle Ann. Rev. Biochem., 1991, 60, 795-825). Это может приводить к потере терапевтического эффекта, например иммунологического эффекта.
В технологиях сверхкритических жидкостей белки растворяют непосредственно в диметилсульфоксиде (ДМСО) для получения частиц чистого белка (Winters et al. , J. Pharm. Sci., 1996, 85. 586-594 and Pharm Res. 1997. 14, 1370-1378) или для осаждения совместно с полимером, растворяя и полимер и белок в ДМСО (WO 9629998 и Bertucco et al. In High Pressure Chemical Engineering, 1996. 217-222). Используют даже смесь этанола и воды в качестве растворителя белка и полимера в технологии SAS (EP 0542314 и Torn et al., In Supercritical Fluid Engineering Science. ACS Symposium Series, 1993. 514, 238-257).
Частицы белка получают из водного раствора по технологии УДРСЖ используя трехкомпонентное сопло, в которое вначале совместно вводят раствор белка в воде и этанол, а затем смешивают в сопле со сверхкритическим диоксидом углерода (WO 9600610). Даже если время контакта водного раствора и этанола является весьма кратковременным, оно может вызывать разрушение конформации белка.
Вещества с низкой молекулярной массой также осаждали совместно с полимерами по технологиям сверхкритических жидкостей В ЕР 322687 описано получение лекарственного препарата, содержащего активное вещество и носитель, по технологиям антирастворителя и БРСР (Kim et al. Biotechnol. Prog 1996. 12, 650-661, Chou and Tomasko, The 4th Int. Symp. on Supercritical Fluids, Sendai, Japan, 1997, 55). При этом в технологии антирастворителя активное вещество и носитель растворяли или диспергировали в одной жидкой среде и объединяли со сверхкритической жидкостью. Примеры, приведенные в указанных документах, относятся только к введению гидрофобных соединений в сферы L-ПЛA(L-PLA). Ничего не упоминается о соединениях в водной фазе так же, как и в других исследованиях по технологиям РСА (Bodmeier et al., Pharm. Res., 1995, 12, 1211-1217), SAS (Bertucco et al. In High Pressure Chemical Engineering, 1996, 217-222), ОГА (Chou and Tomasko, The 4th Int. Symp. on Supercritical Fluids, Sendai, Japan, 1997, 55) или ASES (Bleich and Muller, J. Microencapsulation, 1996, 13,131-139).
В настоящее время установлена возможность соединять активное вещество или вещества с системой носителя путем образования эмульсии компонентов и осаждения системы с помощью технологии жидкого газа. Активное вещество или активные вещества внедряют внутрь и/или вокруг системы носителя, что означает, что носитель также может окружать активное вещество или активные вещества.
Данный усовершенствованный способ получения систем носителей. содержащих активные вещества, основан на использовании эмульсий. Эмульсия является смесью двух несмешивающихся жидкостей или фаз. при этом одна жидкость представляет собой тонкую дисперсию в другой жидкости. Одна из жидкостей, например вода или водная фаза, является более полярной по сравнению с другой жидкостью, например органическим растворителем или смесью растворителей (масляной фазой, называемой здесь неводной фазой). Эмульсия может быть либо кинетически устойчивой (макроэмульсия), либо термодинамически устойчивой (микроэмульсия), либо их смесью. Для того чтобы стабилизировать эмульсию, можно использовать эмульгатор, один или в сочетании с другими эмульгаторами, в частности, но без ограничения, поверхностно-активными веществами, полимерами и липидами. Эмульгаторы растворяют в водной фазе и/или в неводной фазе. Активное вещество или вещества, которые требуется внедрить в систему носителя и/или связать с ней, растворяют, суспендируют (в водной фазе) или повышают их растворимость в водной фазе. Материал носителя растворяют в неводной или водной фазе. Водную фазу эмульгируют в неводной фазе или наоборот.
В качестве неограничительных примеров неионных поверхностно-активных веществ можно указать: сложные эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, сложные эфиры сорбитана и жирных кислот, простые полиоксиэтиленалкиловые эфиры, сложные эфиры сахарозы и н-октил-b,D-гликопиранозид (н-ОГ).
Неограничительные примеры анионных поверхностно-активных веществ: додецилсульфат натрия, 1,4-бис(2-этилгексил)сульфосукцинат натрия (АОТ) и соли жирных кислот.
Неограничительные примеры катионных поверхностно-активных веществ: соли алкилтриметиламмония и соли диалкилдиметиламмония.
Неограничительные примеры амфотерных ионных поверхностно-активных веществ: 3((3-холамидопропил)диметиламмоний)-1-пропансульфонат, додецил-N-бетаин.
Неограничительные примеры полимерных эмульгаторов:
поливинилпирролидон, полиглицеринполирицинолеат, поливиниловый спирт и блок-сополимеры.
Неограничительные примеры липидных эмульгаторов: холестерин, фосфатидилхолин, фосфатидилэтаноламин и фосфатидная кислота.
В данном изобретении водная фаза определяется как водные растворы (не смешивающиеся с неводной фазой) и/или другие растворы, которые не смешиваются с неводной фазой и являются более полярными, чем неводная фаза.
Неограничительные примеры неводной фазы: обычные органические растворители, такие как метиленхлорид, хлороформ, этилацетат или смеси органических растворителей.
Неограничительные примеры материала носителя: полимеры. наполнители, вещества, способствующие измельчению, связующие вещества, вещества, усиливающие растворимость и другие эксципиенты, а также их комбинации.
Полимеры могут быть синтетическими или природными. Они могут быть биологически разлагаемыми или неразлагаемыми, например полистирол. Неограничительные примеры групп полимеров, которые можно использовать в качестве носителей: полисахариды, простые полиэфиры, сложные полиэфиры, полиангидриды и полипептиды.
Неограничительные примеры полисахаридов: целлюлозы, гидроксипропилметилцеллюлоза (ГПМЦ), этилцеллюлоза (ЭЦ), пектин, альгинаты, хитозан, агар, гидроксиэтилцеллюлоза (ГЭЦ), ксантан, этилгидроксиэтилцеллюлоза (ЭГЭЦ).
Неограничительные примеры сложных полиэфиров: полилактид (ПЛА), полигликолид (ПГЛ), их сополимеры (ПЛГ), полигидроксибутират (ПГБ) и поликапролактон.
Неограничительные примеры простых полиэфиров: полиэтиленоксид и полипропиленоксид.
Неограничительные примеры полиангидридов: полисебациновая кислота, поликарбофеноксипропан, полифумаровая кислота или их сополимеры.
Примерами активных веществ являются медицинские препараты, токсины, инсектициды, вирусы, диагностические средства, сельскохозяйственные химикаты, промышленные химикаты, чистые химикаты, пищевые добавки, красители, взрывчатые вещества, краски, полимеры, косметические агенты и т.д. Активные вещества могут иметь высокую молекулярную массу (определяемую здесь как превышающую 5000 Дальтонов) и представлять собой, в частности, но без ограничения, белки, антигены, такие как антиген Helicobacter, полипептиды. полинуклеиновые кислоты. полисахариды, или иметь низкую молекулярную массу (определяемую здесь как равную или меньшую 5000 Дальтонов) и представлять собой, в частности, но без ограничения, Bodipy®. Активность ферментов и иммуногенную активность белков можно поддерживать, используя способ согласно настоящему изобретению.
Используемый здесь термин "жидкий газ" включает материал в его сверхкритическом и в близком к сверхкритическому состоянии, а также сжатые газы.
Неограничительные примеры сверхкритических жидкостей: диоксид углерода, оксид азота, гексафторид серы, ксенон, этилен, хлортрифторметан, этан и трифторметан. Состояние, близкое к сверхкритическому, определяется здесь как состояние, при котором давление и/или температура лежат ниже критических значений. Так, например, нижний предел состояния, близкого к критическому, для диоксида углерода составляет 0,65Тс (критическая температура), а для пропана 0,30Тс.
Описанная эмульсионная система может содержать одну или несколько добавок, неограничительными примерами которых являются:
- буферы, например фосфат, карбонат, трис(гидроксиметил)аминометан (TRIS) и т.д.
- вещества, повышающие химическую и/или физическую устойчивость вещества, например, трегалоза и полиэтиленгликоль (ПЭГ),
вспомогательные агенты для дополнительного повышения эффективности активного вещества, например стимуляторы иммунологической реакции, подобные липиду А и его производным, токсину холеры (ТХ), или усилители поглощения, например моно- или диглицериды, жирные кислоты, соли желчи или ферментные ингибиторы, например апротонин, этилендиаминтетрауксусная кислота, полиакриловая кислота, или вспомогательные агенты для целевого введения активного вещества, например антитела,
агенты, повышающие растворимость, подобные н-октил-b,D-гликопиранозиду (н-ОГ).
Настоящее изобретение можно кратко описать как способ получения рецептуры, которая включает активное вещество или активные вещества, связанные с носителем, отличающийся тем, что
- получают эмульсию путем смешивания жидкой неводной фазы и жидкой водной фазы, причем водная фаза включает активное вещество или активные вещества, а носитель присутствует по меньшей мере в одной из фаз,
- обеспечивают контактирование эмульсии с жидким газом, используя технологию антирастворителя,
- получают компоненты, освобожденные от жидкой фазы.
Способ получения системы носителя поясняют примеры в последующем общем описании и в приведенной ниже экспериментальной части.
В общем случае указанные процедуры основаны на получении системы носителя в результате выполнения следующих операций:
- получение водной фазы, содержащей активное вещество или вещества,
- получение неводной фазы (фаз) (не смешивающихся с водной фазой),
- растворение материала носителя, эмульгатора и/или добавок в неводной фазе и/или водной фазе,
- образование эмульсии, состоящей по меньшей мере из водной фазы и неводной фазы,
получение системы носителя с активным веществом путем использования технологии жидкого газа.
Первую операцию можно выполнить путем растворения, диспергирования и/или повышения растворимости активного вещества или веществ в водной фазе.
Четвертую операцию можно выполнить, используя различные технологии эмульгирования, подобные, например, гомогенизации, ультразвуковой гомогенизации и гомогенизации при высоком давлении. Микроэмульсия или макроэмульсия могут представлять собой так называемую двойную эмульсию, у которой неводная фаза диспергирована в водной фазе (содержащей активное вещество (вещества)), диспергированной другой неводной фазе, или у которой водная фаза (содержащая активное вещества (вещества)) диспергирована в неводной фазе, диспергированной в другой водной фазе.
В пятой операции с применением технологии жидкого газа для получения систем носителей с активным веществом используют технологии антирастворителя, неограничительные примеры которых включают УДСРЖ, ASES, SAS, ОГА и РСА. Если водная фаза является наружной фазой макроэмульсии или микроэмульсии, может потребоваться модификатор для смешивания с жидким газом или для совместного введения с эмульсией непосредственно перед контактом с жидким газом. Такой модификатор представляет собой органический растворитель, неограничительными примерами которого являются этанол и ацетон.
Система носителя, содержащая активное вещество (вещества) согласно изобретению, может использоваться для фармацевтических целей, в частности, но без ограничения, для терапевтических, профилактических и диагностических целей.
Если изобретение применяют в фармацевтических целях, то система носителя, нагруженная активным веществом, может быть введена в организм различными способами, в частности, но без ограничения, перорально, ректально, тонзиллярно, трансбуккально, назально, вагинально, парентерально, внутримышечно, подкожно, интраокулярно, внутрилегочно, трансдермально, инплантатно или внутривенно и т.д.
Форма фармацевтический дозировки, полученная данным способом, может быть твердой, полутвердой или жидкой дисперсией, полученной с помощью известных фармацевтических технологий, таких как смешивание, гранулирование, прессование, нанесение покрытия и т.п. Кроме того, рецептуры могут быть монолитными, такими как таблетки или капсулы, или быть в форме составных рецептур, вводимых в организм в таблетке, капсуле или в пакете-саше.
Эмульгаторы могут оказывать влияние на размер капель, поскольку эмульгаторы могут до некоторой степени растворяться в непрерывной фазе. Обычно эмульгаторы снижают поверхностную энергию, что вносит вклад в уменьшение размера капель.
Эмульгаторы могут оказывать влияние на агломерацию систем носителя, поскольку они могут быть расположены на границе раздела капля / сверхкритическая жидкость. Когда капля преобразуется в систему носителя. эмульгатор может по-прежнему располагаться на поверхности системы носителя. При этом расположение эмульгатора на поверхности системы носителя может уменьшать степень агломерации образующейся системы носителя, как было описано ранее для частиц полимера (Mawson et al., Macromolecules, 1997, 30, 71).
Кроме того, эмульгаторы для эмульсии, внедряемые в систему носителя так же, как вещество или вещества, могут улучшать характеристики высвобождения из системы носителя, например, но без ограничения, посредством повышения растворимости вещества и более быстрого проникновения воды в систему носителя.
В данном разделе описаны материалы, способы анализа и технологии получения, используемые в приведенных далее примерах.
В качестве материалов носителя использовали поли(3-гидрокси-бутират)(ПГБ, Astra Tech, Швеция, молекулярная масса (ММ) 63500 г/моль) или сополимер DL-молочной и гликолевой кислот 50:50 (ПМГ RG 502 Н, Boehringer Ingelheim, Германия, ММ 6000 г/моль). н-Октил-β-D-глюкопиранозид (н-ОГ, Sigma. МО, США), поливинлпирролидон (ПВП, Aldrich, Германия, ММ 10000 г/моль) и 1,4-бис(2-этилгексил)сульфосукцинат натрия (АОТ, Sigma, МО, США) использовали в качестве стабилизаторов. Метиленхлорид (99,5%) использовали в качестве растворителя, а диоксид углерода в качестве сверхкритической жидкости. Этанол (99,5%) использовали в качестве модификатора в сверхкритической технологии.
Использовали два различных белка: сильно растворимую в воде карбоновую ангидразу (КА, Sigma, МО, США) и липидированный не растворимый в воде адгезионный белок A Helicobacter pylori в маточном растворе (НраА, CSL, Австралия). Флуоресцентное вещество, использовавшееся в качестве модели вещества с низкой молекулярной массой, представляло собой Bodipy® (D3238, Molecular Probes Europe, Голландия).
Для анализа белка раствор реагента Лэммли-ДСН получали путем разбавления в соотношении 1:4 маточного раствора, состоящего из 1,25 мл TRIS HCl 2 М (рН 6,8) буферного раствора, 5,05 г глицерина (99%), 0,8 г додецилсульфата натрия (ДСН), 1 мл 2-меркаптоэтанола, 1 мкл бромфенола синего и 10 мл воды.
Размер частиц, форму и морфологию исследовали способом сканирующей электронной микроскопии
Частицы ПГБ
а) Общее содержание белка
Частицы (3-10 мм) растворили в 300 мкл хлороформа. Затем добавили Лэммли-ДСН (400 мкл) и экстрагировали белок из органической фазы в водную фазу. Образцы встряхивали при 60oС в течение 30 минут. Водную фазу нагревали до 95oС в течение 15 минут и анализировали содержание белка с помощью электрофореза полиакриламидного геля ДСН-ЭПАГ (SDS-PAGE).
б) содержание Bodipy®:
Воду (5 мл) добавили к 2 мг частиц, содержащих Bodipy® (частицы не растворены). Высвободили Bodipy® из частиц и определили концентрацию спектроскопическим методом (поглощающая способность 97000 М-1см3 GBS UV/VIS 920, Австралия).
Частицы ПМГ
а) Общее содержание белка
К частицам ПМГ (3-10 мг) добавили 1 мл ацетона. Растворили полимер, осадив при этом белок. Осадок белка центрифугировали в течение 15 минут при 17530 g и удалили примерно 2/3 надосадочной жидкости с помощью шприца Гамильтона. Дважды добавили чистый ацетон (1 мл) для промывки осадка. Остаток ацетона испарили вакуумным центрифугированием. Добавили Лэммли-ДСН (200 мкл) и нагрели образец до 95oС в течение 15 минут. Провели анализ на содержание белка с помощью SDS-PAGE.
б) Количественный анализ поверхностно связанного белка
Количественный анализ поверхностно связанного белка выполняли согласно Rafati et al. (Journal of Controlled Release 1997 43, 89-102). К 5-6 мг частиц ПМГ добавили 2 мл 2% раствора (мас./об.) ДСН в воде. Образцы встряхивали в течение 4 часов. Затем образцы центрифугировали в течение 3 минут при 2700 g и перенесли надосадочную жидкость в другую пробирку. Воду испарили вакуумным центрифугированием и добавили 1 мл Лэммли (без ДСН). Водную фазу нагрели до 95oС в течение 15 минут и провели анализ на содержание белка с помощью SDS-PAGE.
Частицы получали на оборудовании, обеспечивающем реализацию способа УДРСЖ (Bradford Particle Design. Bradford. Великобритания) из эмульсии, содержащей активное вещество и носитель (WO 9501221 и WO 9600610).
Эмульсию и антирастворитель (СО2) вводили в соосное сопло, расположенное внутри сосуда высокого давления, который был установлен в печи. При регулируемых условиях температуры и давления антирастворитель экстрагировал растворитель из капель образованной эмульсии. При этом концентрация носителя в каплях увеличивалась, приводя к быстрому образованию частиц. Частицы собирали в сосуде, в то время как антирастворитель и экстрагированный растворитель выводили через регулятор обратного давления.
Применяемое сопло представляло собой трехкомпонентное сопло, подключенное либо в режиме чередования, либо в режиме двух растворов к отверстию диаметром 0,2 мм. В режиме чередования сверхкритическая жидкость проходит по наружному и внутреннему каналу, в то время как эмульсия проходит по среднему каналу. В режиме двух растворов эмульсию и модификатор, такой как, например, этанол, смешивают непосредственно перед контактом со сверхкритической жидкостью. Сверхкритическая жидкость проходит по наружному каналу, модификатор - по среднему каналу, а эмульсия - по внутреннему каналу.
Пример 1. НраА в ПГБ, содержание воды в эмульсии: 20% (об./об.)
ПГБ растворили в метиленхлориде при 0,2 МПа (2 бар), 90oС. Смешали равные объемы 2 мас.% ПВП (водн.) и маточного раствора НраА [1,11 мг/мл НраА в буфере TRIS-HCl: (10 мМ, рН 8) и 2 мас.% н-ОГ]. Данную смесь (3,8 мл) ввели (во время гомогенизации при 20000 об/мин) в дисперсионный сосуд Kinematica объемом 25 мл с 15,2 мл метиленхлорида, содержащего 1 мас.% ПГБ и 0,4 мас.% АОТ. Суммарное время гомогенизации составляло 3 минуты. Использовали гомогенизатор Polytron PT3100. Rotor PT-DA 3012/2 (Kinematica AG, Швейцария). Все операции выполняли при условиях окружающей среды.
С данной эмульсией провели два опыта при различных режимах на оборудовании, обеспечивающем реализацию способа УДРСЖ. В опыте 1 использовали трехкомпонентное сопло в режиме двух растворов с этанолом (скорость потока 0,5 мл/мин) в качестве модификатора. В опыте 2 использовали режим чередования (таблица 1)
Согласно кривым, полученным способом сканирующей электронной микроскопии, размер частиц составлял 1-3 мкм для обоих испытаний (опыт 1 и опыт 2).
Теоретически частицы должны состоять из 55,8 мас.% ПГБ, 43,5 мас.% поверхностно-активных веществ, 0,6 мас.% НраА. Анализ общего содержания НраА в частицах дал результат 0,4% НраА как для опыта 1, так и для опыта 2.
Пример 2. Bodipy® в ПГБ, содержание воды в эмульсии: 33 об.%.
Задача состояла в том, чтобы соединить молекулу с низкой молекулярной массой с матрицей носителя, используя эмульсию с содержанием воды 33 об.%. ПГБ растворили в метиленхлориде при 0,2 МПа (2 бар), 90oС. Смешали равные объемы 2 мас. % ПВП (водн. ) и 2 мас.% н-ОГ, 1,0 мг/мл Bodipy® в буфере TRIS-HCl (10 мМ, рН 8). Данный раствор (2 мл) ввели (во время гомогенизации при 20000 об/мин) в дисперсионный сосуд Kinematica объемом 25 мл с 4 мл метиленхлорида. содержащего 1 мас. % ПГБ и 0,4 мас.% АОТ. Суммарное время гомогенизации составляло 3 минуты. Использовали гомогенизатор Polytron PT3100. Rotor PT-DA 3012/2 (Kinematica AG. Швейцария). Все операции выполняли при условиях окружающей среды. Этанол использовали в качестве модификатора (трехкомпонентное сопло подключали в режиме двух растворов) при скорости потока 0,5 мл/мин. Условия проведения опыта представлены в таблице 2.
Согласно кривым, полученным способом сканирующей электронной микроскопии, размер частиц составлял 1-3 мкм.
Выход из сосуда какого-либо флуоресцентного вещества с потоком диоксида углерода не был отмечен. Это означает, что Bodipy® не был экстрагирован применяемой сверхкритической жидкостью или растворителями.
Пример 3. Bodipy® в ПГБ, содержание воды в эмульсии: 20 об.%.
Задача состояла в том, чтобы соединить молекулу с низкой молекулярной массой с матрицей носителя (как в примере 2), используя эмульсию с содержанием воды 20 об.%. ПГБ растворили в метиленхлориде при 0,2 МПа (2 бар), 90oС. Смешали равные объемы 2 мас.% ПВП (водн.) и 2 мас.% н-ОГ, 1,0 мг/мл Bodipy® в буфере TRIS-HCl (10 мМ, рН 8). Данный раствор (2 мл) ввели (во время гомогенизации при 20000 об/мин) в дисперсионный сосуд Kinematica объемом 25 мл с 8 мл метиленхлорида, содержащего 1 мас.% ПГБ и 0,4 мас.% АОТ. Суммарное время гомогенизации составляло 3 минуты. Использовали гомогенизатор Polytron PT3100. Rotor PT-DA 3012/2 (Kinematica AG. Швейцария). Все операции выполняли при условиях окружающей среды.
Опыт 4 провели в оборудовании, обеспечивающем реализацию способа УДРСЖ, используя трехкомпонентное сопло в режиме двух растворов с этанолом (скорость потока 0,5 мл/мин) в качестве модификатора. В опыте 5 использовали режим чередования (таблица 3).
Согласно кривым, полученным способом сканирующей электронной микроскопии, размер частиц в обоих опытах составлял 1-3 мкм.
Теоретически частицы должны состоять из 55,8 мас.% ПГБ, 43,5 мас.% поверхностно-активных веществ, 0,6 мас.% Bodipy®. Согласно анализу было обнаружено, что содержание Bodipy®, связанного с частицами в опыте 5, составляет 0,7 мас.%
Пример 4. Карбоновая ангидраза в ПМГ, содержание воды в эмульсии 20% об.
200 мкл карбоновой ангидразы (93%) с содержанием 20 мг/мл в буфере TRIS-SO4 (0,1 М, рН 7.5) добавили к 800 мкл 8 мас.% ПМГ, 0,4 мас.% Span 85/Tween 80 (отношение масс 80:20) во время гомогенизации ультразвуковым зондом (CV26, Sonics & Materials Inc., США) при мощности около 30-50 Вт в течение 3 минут. Эмульсию готовили на льду в стеклянном пузырьке объемом 4 мл.
Условия получения частиц в опыте представлены в таблице 4. Опыты проводили с использованием трехкомпонентного сопла в режиме чередования.
Согласно кривым, полученным способом сканирующей электронной микроскопии, размер частиц составлял 10-100 мкм. Теоретически частицы должны состоять из 91,4 мас.% ПМГ, 4,6 мас.% поверхностно-активных веществ и 4,0 мас.% карбоновой ангидразы. При анализе содержания белка в результате получено 4 мас. % карбоновой ангидразы и отсутствие белка, связанного с поверхностью частиц.

Claims (33)

1. Способ получения рецептуры, которая включает активное вещество или активные вещества, связанные с носителем, отличающийся тем, что получают эмульсию смешиванием жидкой неводной фазы и жидкой водной фазы, причем водная фаза содержит активное вещество или активные вещества, а носитель присутствует по меньшей мере в одной из фаз, эмульсию приводят в контакт с жидким газом, используя технологию антирастворителя, и получают компоненты, освобожденные от жидкой фазы.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что активное вещество растворяют в водной фазе.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что активное вещество диспергируют в водной фазе.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что повышают растворимость активного вещества в водной фазе.
5. Способ по любому из пп.1-4, отличающийся тем, что активное вещество является белком.
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что активное вещество является антигеном.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что активное вещество является антигеном Helicobacter.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что активное вещество является липидированным, не растворимым в воде адгезионным белком A Helicobacter pylori.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что активное вещество является специфической, полностью липидированной формой адгезионного белка А Helicobacter pylori.
10. Способ по пп.1-4, отличающийся тем, что активное вещество является веществом с низкой молекулярной массой.
11. Способ по любому из пп.1-10, отличающийся тем, что неводная фаза содержит органический растворитель.
12. Способ по любому из пп.1-11, отличающийся тем, что неводная фаза содержит смесь органических растворителей.
13. Способ по любому из пп.1-12, отличающийся тем, что водная фаза является более полярной, чем неводная фаза.
14. Способ по любому из пп.1-13, отличающийся тем, что эмульсия является макроэмульсией.
15. Способ по любому из пп.1-14, отличающийся тем, что эмульсия является микроэмульсией.
16. Способ по любому из пп.1-15, отличающийся тем, что эмульсия является комбинацией макроэмульсии и микроэмульсии.
17. Способ по любому из пп.1-16, отличающийся тем, что эмульсия содержит эмульгатор.
18. Способ по п.17, отличающийся тем, что эмульгатор является неионным поверхностно-активным веществом.
19. Способ по п.17, отличающийся тем, что эмульгатор является анионным поверхностно-активным веществом.
20. Способ по п.17, отличающийся тем, что эмульгатор является катионным поверхностно-активным веществом.
21. Способ по п.17, отличающийся тем, что эмульгатор является амфотерным поверхностно-активным веществом.
22. Способ по п.17, отличающийся тем, что эмульгатор является полимером.
23. Способ по п.17, отличающийся тем, что эмульгатор является липидом.
24. Способ по любому из пп.1-23, отличающийся тем, что носитель является поли(3-гидроксибутиратом).
25. Способ по любому из пп.1-24, отличающийся тем, что носитель является сополимером DL-молочной и гликолевой кислот.
26. Способ по любому из пп.1-25, отличающийся тем, что эмульсию приводят в контакт с жидким газом посредством применения технологии жидкого газа.
27. Способ по п.26, отличающийся тем, что используемая технология жидкого газа представляет собой усиленное диспергирование раствора сверхкритической жидкостью.
28. Способ по п.26, отличающийся тем, что используемая технология жидкого газа представляет собой систему экстракции растворителя в аэрозоле.
29. Способ по п.26, отличающийся тем, что используемая технология жидкого газа представляет собой систему экстракции сверхкритическим антирастворителем.
30. Способ по п.26, отличающийся тем, что используемая технология жидкого газа представляет собой осаждение газом-антирастворителем.
31. Способ по п.26, отличающийся тем, что используемая технология жидкого газа представляет собой осаждение сжатым антирастворителем.
32. Способ по любому из пп.1-31, отличающийся тем, что жидкий газ представляет собой диоксид углерода.
33. Рецептура, полученная способом по любому из пп.1-32.
RU2000125873/14A 1998-04-14 1999-04-09 Внедрение активных веществ в матрицы носителей RU2208435C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9801287-5 1998-04-14
SE9801287A SE9801287D0 (sv) 1998-04-14 1998-04-14 Incorporation of active substances in carrier matrixes

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2000125873A RU2000125873A (ru) 2002-10-20
RU2208435C2 true RU2208435C2 (ru) 2003-07-20

Family

ID=20410946

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2000125873/14A RU2208435C2 (ru) 1998-04-14 1999-04-09 Внедрение активных веществ в матрицы носителей

Country Status (31)

Country Link
US (1) US6372260B1 (ru)
EP (1) EP1069890B1 (ru)
JP (1) JP2002511400A (ru)
KR (1) KR100600691B1 (ru)
CN (1) CN1201728C (ru)
AR (1) AR019262A1 (ru)
AT (1) ATE329580T1 (ru)
AU (1) AU744874B2 (ru)
BR (1) BR9909636A (ru)
CA (1) CA2327522C (ru)
CY (1) CY1105154T1 (ru)
CZ (1) CZ20003784A3 (ru)
DE (1) DE69931904T2 (ru)
DK (1) DK1069890T3 (ru)
EE (1) EE200000595A (ru)
ES (1) ES2267268T3 (ru)
HU (1) HUP0102305A3 (ru)
ID (1) ID29286A (ru)
IL (1) IL138635A0 (ru)
IS (1) IS5656A (ru)
NO (1) NO329145B1 (ru)
NZ (1) NZ507190A (ru)
PL (1) PL344077A1 (ru)
PT (1) PT1069890E (ru)
RU (1) RU2208435C2 (ru)
SE (1) SE9801287D0 (ru)
SK (1) SK14112000A3 (ru)
TR (1) TR200002960T2 (ru)
TW (1) TW542724B (ru)
WO (1) WO1999052507A1 (ru)
ZA (1) ZA992549B (ru)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6761909B1 (en) * 1999-12-21 2004-07-13 Rxkinetix, Inc. Particulate insulin-containing products and method of manufacture
WO2001045731A1 (en) * 1999-12-21 2001-06-28 Rxkinetix, Inc. Particulate drug-containing products and method of manufacture
GB0102075D0 (en) * 2001-01-26 2001-03-14 Astrazeneca Ab Process
FR2824754B1 (fr) * 2001-05-15 2004-05-28 Separex Sa Procede d'obtention de particules solides a partir d'au moins un produit hydrosoluble
GB0208742D0 (en) 2002-04-17 2002-05-29 Bradford Particle Design Ltd Particulate materials
US20070098784A1 (en) 2001-09-28 2007-05-03 Nutraceutix, Inc. Delivery system for biological component
KR100979877B1 (ko) * 2001-09-28 2010-09-02 뉴트라슈틱스 인코포레이티드 생물학적 성분의 전달 시스템
US20050048077A1 (en) * 2002-02-21 2005-03-03 George Sachs Compositions, test kits and methods for detecting helicobacter pylori
US6998051B2 (en) * 2002-07-03 2006-02-14 Ferro Corporation Particles from supercritical fluid extraction of emulsion
GB0216780D0 (en) * 2002-07-19 2002-08-28 Bradford Particle Design Ltd Methods of particle formation
US6966990B2 (en) 2002-10-11 2005-11-22 Ferro Corporation Composite particles and method for preparing
US6931888B2 (en) 2003-02-07 2005-08-23 Ferro Corporation Lyophilization method and apparatus for producing particles
US7083748B2 (en) * 2003-02-07 2006-08-01 Ferro Corporation Method and apparatus for continuous particle production using supercritical fluid
US7455797B2 (en) * 2003-02-28 2008-11-25 Ferro Corporation Method and apparatus for producing particles using supercritical fluid
CA2523883C (en) * 2003-04-29 2012-01-03 Akzo Nobel N.V. Antisolvent solidification process
CA2524773C (en) 2003-05-08 2014-04-08 Nektar Therapeutics Uk Ltd Particulate coformulations of active substances with excipients
US20060008531A1 (en) * 2003-05-08 2006-01-12 Ferro Corporation Method for producing solid-lipid composite drug particles
WO2005022603A2 (en) * 2003-09-02 2005-03-10 Integral Technologies, Inc. Low cost conductive containers manufactured from conductive loaded resin-based materials
GB0602637D0 (en) * 2006-02-09 2006-03-22 Glaxo Group Ltd Novel process
NL1031224C2 (nl) * 2006-02-23 2007-09-03 Friesland Brands Bv Het bereiden van gedroogde deeltjes met behulp van een superkritisch medium.
WO2007133750A2 (en) * 2006-05-12 2007-11-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Encapsulated nanoparticles for drug delivery
FR2900845B1 (fr) * 2006-05-15 2009-03-06 Commissariat Energie Atomique Procede et dispositif de synthese de particules organiques ou inorganiques enrobees
EP1913955A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Gerhard, Markus Novel method for treating H.pylori infections
US20080260852A1 (en) * 2007-01-23 2008-10-23 Ferro Pfanstiehl Laboratories, Inc. Supercritical fluid extraction produced by in-line homogenization
US7745566B2 (en) * 2007-01-23 2010-06-29 Ferro Corporation Methods for the purification of polymers
WO2008097664A1 (en) 2007-02-11 2008-08-14 Map Pharmaceuticals, Inc. Method of therapeutic administration of dhe to enable rapid relief of migraine while minimizing side effect profile
GB0711680D0 (en) * 2007-06-18 2007-07-25 Prosonix Ltd Process
EP3272354A1 (en) 2016-07-20 2018-01-24 Technische Universität München Agents and methods for the prevention or treatment of h. pylori infections
KR102170146B1 (ko) * 2019-03-05 2020-10-26 서울대학교산학협력단 Pca 공정을 이용한 배양액의 결정화 장치 및 방법

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5639441A (en) * 1992-03-06 1997-06-17 Board Of Regents Of University Of Colorado Methods for fine particle formation

Also Published As

Publication number Publication date
AU4066399A (en) 1999-11-01
JP2002511400A (ja) 2002-04-16
ID29286A (id) 2001-08-16
US6372260B1 (en) 2002-04-16
ATE329580T1 (de) 2006-07-15
KR20010042660A (ko) 2001-05-25
TR200002960T2 (tr) 2000-12-21
WO1999052507A1 (en) 1999-10-21
CA2327522A1 (en) 1999-10-21
SE9801287D0 (sv) 1998-04-14
HUP0102305A3 (en) 2003-04-28
PL344077A1 (en) 2001-09-24
IL138635A0 (en) 2001-10-31
BR9909636A (pt) 2000-12-19
DE69931904T2 (de) 2006-12-21
CN1201728C (zh) 2005-05-18
NO20005150D0 (no) 2000-10-13
PT1069890E (pt) 2006-09-29
DK1069890T3 (da) 2006-08-28
AR019262A1 (es) 2002-02-13
TW542724B (en) 2003-07-21
EP1069890B1 (en) 2006-06-14
SK14112000A3 (sk) 2001-07-10
CY1105154T1 (el) 2010-03-03
NZ507190A (en) 2002-02-01
CZ20003784A3 (cs) 2001-08-15
IS5656A (is) 2000-10-11
NO329145B1 (no) 2010-08-30
HUP0102305A2 (hu) 2001-12-28
DE69931904D1 (de) 2006-07-27
ES2267268T3 (es) 2007-03-01
EP1069890A1 (en) 2001-01-24
NO20005150L (no) 2000-12-08
EE200000595A (et) 2002-04-15
KR100600691B1 (ko) 2006-07-19
AU744874B2 (en) 2002-03-07
CN1309555A (zh) 2001-08-22
ZA992549B (en) 1999-10-14
CA2327522C (en) 2008-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2208435C2 (ru) Внедрение активных веществ в матрицы носителей
EP1549410B1 (en) Method for preparing composite particles
CA2628562C (en) Method and device for producing very fine particles and coating such particles
KR100572711B1 (ko) 캡슐화 방법
JP4374249B2 (ja) 超臨界的流体による処理方法：タンパク質微粒子の調製およびそれらの安定化
JP2002516822A (ja) ポリマー粒子ワクチンデリバリーシステム
JP2004516262A (ja) 親水性活性剤を含有するマイクロ粒子の製造のための誘発相転移法
EP1675571A2 (en) Nanoparticulate therapeutic biologically active agents
JP2005514341A6 (ja) 超臨界的流体による処理方法：タンパク質微粒子の調製およびそれらの安定化
EP2254560B1 (en) Preparation of nanoparticles by using a vibrating nozzle device
EP1722761B1 (en) Method of producing microparticles
KR20020093059A (ko) 마이크로스피어 제조 방법
US7901606B2 (en) Production of porous materials by supercritical fluid processing
MXPA00009914A (en) Incorporation of active substances in carrier matrixes
ES2360356T3 (es) Método para producir micropartículas.

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20040410