CN1309555A - 载体基质中活性物质的掺入 - Google Patents
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Abstract
本发明是通过形成各成分的乳液,并使用流化气体技术使系统沉淀,而将活性物质渗入载体系统的方法。
Description
发明领域
本发明涉及通过形成各成分的乳液，并采用流化气体技术使体系沉淀，来配制与载体相结合的活性物质之制剂的方法。本发明也涉及由该方法获得的制剂。
发明背景
针对为获得颗粒系统而使活性物质掺入载体基质所出现的问题，人们提出过几种解决方案。所述系统例如可应用于立即释放制剂，变式释放制剂、延迟释放制剂、脉冲式释放制剂等。
该技术的某些例子如下述文献所述：
-热熔化微囊包封(Schwope等人“生命科学”，1975,17,1877)
-界面聚合法(Birrenbach and Speiser，“药物科学”，1976,65,1763,Thies，“化学技术百科全书”4ed.Ed.Kirk-Othmer,1996,16,p.632)
-溶剂蒸发法(Cleland，“疫苗设计，亚单元和辅药法”，Eds:Powelland Newman Plenum Press,New York,1995,439)
-溶剂萃取(Cleland，“疫苗设计，亚单元和辅药法”，Eds:Powelland Newman Plenum Press,New York,1995,439)
-喷雾干燥(WO94/15636)
制备该系统的重要步骤是活性物质的掺入。释放系统制备方法的选择，要视准备掺入何种活性物质，以及活性物质从释放系统中所希望的释放比例来决定。所有上面列举的技术，均有其各自的优缺点。就热熔微囊包封法来说，不适用于热敏感性活性物质。界面聚合法的缺点是水混溶性溶剂中的高活性单体，既可以与核心材料反应也可与被包封的活性物质反应。溶剂蒸发法的缺点是耗时，且只能批量生产，同样，萃取法也耗时及只限于批量生产。喷雾干燥法的缺点是在纳米级范围内难以形成颗粒。因为加工中要暴露于热和空气，因而该方法也不适宜于对热、对氧化敏感的活性物质。
近年来超临界流体技术得到发展。简单说来，所谓“超临界流体”可以定义为同时处于其临界压力和临界温度、或其以上的流体。超临界流体的物化性质随温度和压力具有灵活性，可以加以选择以适应给定的应用。现今已有几种新技术得到应用，一种称之为“超临界溶液的快速膨胀法”(RESS)，另一种称之为“气体抗溶剂沉淀法”(GAS)。GAS技术中，将所研究的物质溶解于常规溶剂中，将二氧化碳之类的超临界流体导入该溶液，导致该溶液体积快速膨胀。结果溶剂的溶解能力短时间内急剧下降，使颗粒开始沉淀。参见Cf J.W.Tom和P.G.Debenedetti“气溶胶科学杂志”，22(1991),555-584；P.G.Debenedetti等人，“有控释放”，24(1993),27-44和J.W.Tom等人，ACS SympSer 514(1993)238-257；EP 437 451(Upjohn)和EP 322 687(Schwarz Pharma)。目前已开发出一种GAS体系的改良法(WO95/01221和WO96/00610)，称之为SEDS(借助超临界流体提高溶液分散性)法，该方法利用超临界流体技术形成颗粒。
像其它活性物质一样，使用上述的包封法蛋白质也可以掺入载体基质中。蛋白质可溶于水相，悬浮或直接溶于含载体相。而蛋白质的缺点是在有机溶剂和超临界流体/改性超临界流体中的溶解性很低(见Stahl等人“高密度气相研究结果”，《流体相平衡》1983,10,269)。直接溶于或悬浮于有机溶液中的蛋白质的另一缺点是引起蛋白伸展和变性(见Dill和Shortle《生物化学年度综述》1991,60,795-825)。这会使蛋白质失去治疗效果，例如丧失免疫效果。
超临界技术中，为配制纯蛋白颗粒，将蛋白质直接溶于DMSO(见Winters等人《药物科学杂志》，1996,85,586-594和《药物研究》，1997,14,1370-1378)，或者在聚合物共沉淀法中，聚合物和蛋白质都溶于DMSO(见WO9629998和Bertucco等人，《高压化学工程》1996,217-222)。在SAS法中，甚至以乙醇和水的混合物用作蛋白质和聚合物的溶剂(见EP0542314和Tom等人《超临界流体工程学，ACS讨论会论文集》，1993,514,238-257)。
在SEDS技术中，使用三元喷头从水溶液中制备蛋白颗粒。其中，蛋白水溶液首先与乙醇一起共同引入，然后在喷头中与超临界二氧化碳混合(WO9600610)。即使水溶液与乙醇接触时间很短，也可能引起蛋白质构象破坏。
以超临界流体技术，低分子量物质也可以与聚合物一起共沉淀。EP322687介绍了以抗溶剂技术和RESS，制备含活性物质和载体的药物(见Kim等人《生物技术进展》，1996,12,650-661,Chou和Tomasko《第四届超临界流体国际讨论会》，Sendai,Japan,1997,55)。此处，抗溶剂技术中，活性物质与载体溶解或分散于相同液体介质中，并与超临界流体相结合。在这些文献的例子中，只涉及L-PLA球形疏水化合物的掺入，未提及有关水相化合物的掺入，其它有关PCA(Bodmeier等人《药物研究》，1995,12,121l-1217),SAS(Bertucco等人《高压化学工程》，1996,217-222),GAS(Chou和Tomasko《第四届超临界流体国际讨论会》Sendai,Japan.1997,55)or ASES(Bleich和Müller，《微包封杂志》，1996,13,131-139)的研究报告也未见介绍。
本发明介绍
现已发现可以通过形成各成分的乳液，并用流化气体技术将该体系沉淀，而将活性物质(一种或多种)与载体系统相结合。所述活性物质(一种或多种)掺入载体系统中和/或围绕其周围，其中也包括载体包围这些活性物质(一种或多种)。
该制备含活性物质的载体系统的改进方法，系基于乳液的使用。该乳液是两种不混溶性液体，或两相的混合物，其中一种液体细分散于另一液体中。一种液体与另一液体相比极性较高，例如水或水相与有机溶剂或溶剂混合物(油相，此处称为非水相)相比。该乳液可以是动力学稳定性的(粗乳化液)或热力学稳定性的(微乳化液)，或二者相结合。为使乳液稳定，可使用一种乳化剂，或其与其它多种乳化剂相结合，例如表面活性剂、聚合物、脂类等，但不限于这些。乳化剂溶解于水相或非水相。准备掺入或/和结合入载体系统的活性物质(一种或多种)被溶解、悬浮或加溶于水相中。载体物质溶解于非水相或水相，水相被乳化于非水相中，反之亦然。
非离子表面活性剂可以是(但不限于)：聚氧亚乙基脱水山梨醇脂肪酸酯、脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧亚乙基烷基醚、蔗糖酯、正辛基-β,D-吡喃葡糖苷(n-OG)。
阴离子表面活性剂可以是(但不限于)：十二烷基硫酸钠、1,4-二(2-乙基己基)磺基琥珀酸钠(AOT)，以及脂肪酸盐。
阳离子表面活性剂可以是(但不限于)：烷基三甲基铵盐和二烷基二甲基铵盐。
两性离子表面活性剂可以是(但不限于)：3((3-胆酰氨丙基)二甲基铵基)-1-丙烷磺酸盐、十二烷基-N-甜菜碱。
聚合物乳化剂可以是(但不限于)：聚乙烯吡咯烷酮、聚甘油多聚蓖酸酯、聚乙烯醇和嵌段共聚物。
脂类乳化剂可以是(但不限于)：胆甾醇、卵磷酯、磷脂酰乙醇胺、磷脂酸。
本发明中，水相定义为含水溶液(与非水相不混溶)和/或与非水相不混溶的其它溶液，及比非水相极性更高的其它溶液。
非水相包括(但不限于)常规有机溶剂，如二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯等，或有机溶剂的混合物。
载体可以是(但不限于)：聚合物、填料、崩解剂、粘结剂、增溶剂及其它赋形剂，或其相结合。
聚合物可以是合成的或天然的。可以是生物可降解性的，或不是，例如聚苯乙烯。可以用作载体的聚合物类如下(但不限于这些)：多糖、聚酯、聚醚、聚酐和多肽。
多糖的例子是(但不限于)：纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、乙基纤维素(EC)、果胶、藻酸盐、脱乙酰壳多糖、琼脂、羟乙基纤维素(HEC)、黄原胶、乙基羟基乙基纤维素(EHEC)。
聚酯的例子是(但不限于)：聚交酯(PLA)、聚乙醇酸交酯(PGA)、以上这些的共聚物(PLG)、聚羟基丁酸酯(PHB)和聚己酸内酯。
聚醚的例子是(但不限于)：聚环氧乙烷、和聚环氧丙烷。
聚酐的例子是(但不限于)：聚癸二酸、聚羰苯氧基丙烷、聚富马酸或以上这些的共聚物。
活性物质的例子是药剂、毒素、杀虫剂、病毒、诊断助剂、农用化学品、市售化学剂、精细化学品、食品、染料、炸药、油漆、聚合物、或化妆品等。所述活性物质可以是高分子物(定义为分子量5000道尔顿以上)，例如蛋白质、抗原(例如螺杆菌属抗原)、多肽、聚核酸、多糖，但不限于这些，或者可以是低分子物(定义为分子量5000道尔顿或以下)，例如Bodipy、但不限于这些。蛋白质的酶活性物及免疫活性物，通过使用本发明的方法可以维持其活性。
本文中流化气体的定义包括处于其超临界或近超临界状态的物质，以及压缩气体。超临界流体可以是(但不限于)二氧化碳、氧化氮、六氟化硫、氙、乙烯、一氯三氟甲烷、乙烷和三氟甲烷。近超临界状态定义为压力和/或温度在临界值以下的状态。例如，认为近超临界状态的下限对于二氧化碳来说是0.65Tc(临界温度)，对于丙烷来说是0.30Tc。
所述乳液体系可以含一种或多种添加剂，例如下述物质(但不限于这些)：——缓冲剂，例如磷酸盐、碳酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)等；——提高活性物质化学和/或物理稳定性的物质，例如海藻糖和聚乙二醇(PEG)；——进一步提高活性物质效果的助剂，例如脂质A和其衍生物之类的免疫反应刺激质、霍乱毒素(CT)、或甘油单酯或二酯之类的吸收促进剂、脂肪酸、胆盐或抑肽酶之类的酶抑制剂、乙二胺四乙酸、聚丙烯酸、或靶向活性物质的助剂，例如抗体；——增溶剂，如正辛基-β,D-吡喃葡糖苷(n-OG)
本发明可以简单地描述为制剂的配制方法，所述制剂包含与载体相结合的活性物质(一种或多种)，其特征在于：——将液态非水相和液态水相混合配制成乳液，所述水相中含活性物质(一种或多种)，而载体存在于至少一个相中，——采用抗溶剂技术，以流化气体与乳液接触，——获得从液相中分离出的单元。
挑选来制造载体系统的方法，由下面的一般介绍及实验部分举例说明。
总的来说，这些方法是以下述步骤为基础形成载体系统：——配制含活性物质(一种或多种)的水相；——配制非水相(一个或多个，不与水相混溶)；——将载体材料、乳化剂和/或添加剂溶于非水相和/或水相；——形成由至少一个水相和一个非水相形成的乳液；——使用流化气体技术形成带有活性物质的载体系统。
该第一步可通过将活性物质溶解、分散和/或加溶在水相中而完成。
该第四步可以使用不同乳化技术来完成，例如匀化法、超声波和高压匀化法。微乳液或粗乳液也可以是所谓的双乳液，其中非水相分散在水相中(含活性物质)，而该水相又分散在另一非水相中，或者水相(含活性物质)分散在非水相中，而该非水相又分散在另一水相中。
第五步中，用来形成带有活性物质的载体系统的流化气体技术是抗溶剂技术，例如(但不限于)SEDS、ASES、SAS、GAS和PCA等。如果水相是粗乳液或微乳液中的最外相，可能需要加改性剂与流化气体混合，或在正要与流化气体接触之前将其与乳液一起引入。所述改性剂是有机溶剂，例如乙醇和丙酮等。
本发明含活性物(一种或多种)的载体系统可用于药物领域，例如用于治疗、预防和诊断之目的。
如果本发明涉及药物应用，则载有活性物质的载体系统可由不同途径给药，例如口服、直肠给药、舌下给药、颊内给药、鼻内给药、阴道给药、非肠道给药、肌内给药、皮下给药、眼内给药、肺部给药、透皮给药、植入给药，或静脉内给药等等。
以该技术配制的药物剂量形式可以是固体、半固体或液体分散液，可使用已知制药技术，例如掺混、造粒、压片、包衣等来配制。此外，该制剂可以是单份的片或胶囊等，或者是多份制剂的片、胶囊或香粉等。
因为乳化剂可以在连续相中溶解到一定程度，所以液滴的大小可能受乳化剂的影响。乳化剂一般降低表面能，这可使液滴变小。
乳化剂也可影响载体系统的聚集，因为它们可以位于液滴/超临界界面中。当液滴转化成载体系统时，乳化剂可以仍位于载体系统表面上。由此，乳化剂在表面或载体上的位置，可以降低所形成的载体系统的聚集程度，正如已有文献对聚合物颗粒的介绍(见Mawson等人《大分子》，1997,30,71)。
此外，掺入载体系统以及活性物质的乳液所用的乳化剂，可以改善载体系统的释放特征，例如通过使活性物增溶，以及加快水在载体系统中的渗透等来实现。
实验部分材料和方法
在这一部分，介绍下述实施例中所用材料、分析方法和制备技术。
聚(3-羟基丁酸)(PHB，分子量(MW)63500g/mol，购自AstaTech,SWeden)或聚(DL-乳酸-共-乙醇酸)50∶50(PLG RG 502H,MW6000g/mol，购自Boehringer Ingelheim,Germany)用作载体材料。正辛基-β,D-吡喃葡糖苷(n-OG，购自Sigma,MO,USA)、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP,MW10000g/mol，购自Aldrich,Germany)和1,4-二(2-乙基己基)磺基琥珀酸钠(AOT，购自Sigma,MO,USA)用作稳定剂。二氯甲烷(99.5％)用作溶剂，而二氧化碳用作超临界流体。乙醇(99.5％)用作超临界工艺的改性剂。
采用两种不同的蛋白质：高水溶性碳酸酐酶(CA，购自Sigma,MO,USA)和类脂化的水不溶性幽门螺杆菌粘附蛋白A配成的贮备液(HpaA,购自CSL,Australia)。用作低分子量模型物质的荧光材料是Bodipy(D3238，购自Molecular Probes Europe,Holland)。
在蛋白分析时，将1.25ml TRIS HCl 2M(pH6.8)缓冲液、5.05g甘油(99％)、0.8g十二烷基硫酸钠(SDS)、1ml 2-巯基乙醇、1μl溴酚蓝和10ml水组成的贮备液稀释至四分之一浓度，配制SDSlaemmli试验溶液。颗粒分析
用扫描电子显微镜研究颗粒粒度、形式和形态。载负的活性物质测定PHB颗粒
a)总蛋白含量：
将颗粒(3-10mg)溶解于300μl氯仿中。加入SDS-laemmli(400μl)并将蛋白质从有机相提取到水相。样品于60℃振荡30分钟。将水相加热到95℃持续15分钟，并通过聚丙烯酰胺凝胶电脉法(SDS-PAGE)分析蛋白含量。
b)Bodipy含量：
将水(5ml)加入到含Bodipy的2mg颗粒中(颗粒不溶解)。Bodipy从颗粒中释放出来，用光谱法测定其浓度(吸收度97000M-1cm3 GBCUV/VIS920,Australia)。PLG颗粒
a)总蛋白含量：
将1ml丙酮加入到PLG颗粒(3-10mg)中。该聚合物溶解而蛋白质沉淀出来。以17530xg条件，将该蛋白沉淀离心处理15分钟，用Hamilton注射器移走2/3上清液，加入纯丙酮(1ml)洗涤该沉淀二次。用真空离心处理法将残留的丙酮蒸发。加入SDS-Laemmli(200μl)将样品加热至95℃持续15分钟。以SDS-PAGE法分析蛋白含量。
b)分析表面结合的蛋白量：
按照Rafali等人(见《有控释放杂志》，1997,43,89-102)的方法分析结合于表面的蛋白量。将2ml 2％(w/v)SDS水溶液加入到5-6mg PLG颗粒中，将该样品振荡4小时。于2700xg将样品离心处理3分钟，将上清液移至新试管中。真空离心蒸发出水，并加入1mlLaemmli(无SDS)。水相加热至95℃持续15分钟。用SDS-PAGE法分析蛋白含量。制备颗粒
在SEDS装置中(购自Bradford Particle Design,Bradford,UK)从含活性物质及载体(WO9501221和WO9600610)的乳液中制备颗粒。
将乳液和抗溶剂(CO2)引入共轴喷头中，该喷头位于压力容器中，而该压力容器位于炉中。在控压控温条件下，抗溶剂从形成的乳液滴中萃取出溶剂。液滴中的载体含量由此提高，便很快形成颗粒。将颗粒收集于容器中，通过后压力调节器，抗溶剂和提取出的溶剂流出。
所用喷头是三成分喷头，以夹层式或两股溶液式连通，其开口直径0.2mm。所述夹层式中，超临界流体通过最里面和最外面的通道，而乳液通过中间通道。所述两股溶液式中，乳液和改性剂(如乙醇)在正好要与超临界流体接触之前相混合；所述超临界流体通过外通道，改性剂通过中间通道，而乳液通过里通道。实施例1：HpaA于PHB中，乳液中水含量为20％(v/v)
于2bar压力，90℃下将PHB溶于二氯甲烷中，将等体积2％(w/w)PVP(水溶液)和HpaA贮备液〔1.11mg/ml HpaA的TRIS-HCl缓中液(10mM,pH8)和2％(w/w)n-OG〕混合。该混合物(3.8ml)被注入(于20000rpm匀化期间)25ml Kinematica分散液容器中的、含1％(w/w)PHB和0.4％(w/w)AOT的15.2ml二氯甲烷中。总匀化时间是3分钟，所用匀化器是Polytron PT3100,Rotor PT-DA3012/2(Kinematica AG,Switzerland制造)。整个过程在环境条件下进行。
以SEDS装置中的不同操作条件对该乳液进行两次实验。实验1以乙醇(流速0.5ml/分)作为改性剂，采用两股溶液式，用三成分喷头进行。实验2以夹层式进行(列表1)。
表1实施例1中的乳液SEDS工艺
根据SEM图，颗粒粒度是1-3μm(实验1和实验2)。
| 实验号 | 改性剂 | P(bar) | T(℃) | 流速CO2(ml/min) | 流速乳液(ml/min) |
| 1 | 乙醇 | 180 | 50 | 26 | 0.1 |
| 2 | - | 240 | 35 | 26 | 0.1 |
颗粒的理论组成应是：55.8％(w/w)PHB、43.5％(w/w)表面活性剂、0.6％(w/w)HpaA。对颗粒中的HpaA总量进行分析，结果是0.4％HpaA(实验1和2)。实施例2：Bodipy于PHB中，乳液中的水含量为33％(v/v)
该实施例目的是使用含33％(v/v)水的乳液，将低分子量分子结合入载体基质中。将PHB于2bar、90℃下溶于二氯甲烷，将等体积2％(w/w)PVP(水溶液)和2％(w/w)n-OG、1.0mg/ml Bodipy的TRIS-HCl缓冲液(10mM,pH8)混合。将该溶液(2ml)注入(于20000rpm匀化期间)25ml Kinematica分散液容器中的、含1％(w/w)PHB和0.4％(w/w)AOT的4ml二氯甲烷中。总匀化时间是3分钟，所用匀化器是Polytron PT3100,Rotor PT-DA3012/2(KinematicaAG,Switzerland)。整个程序在环境条件下进行。以乙醇作改性剂(该三成分喷头以两股溶液式连通)，流速为0.5ml/分。操作条件列于表2。
表2实施例2中乳液的SEDS工艺
根据SEM图，该颗粒粒度为1-3μm。
| 实验号 | P(bar) | T(℃) | 流速CO2(ml/min) | 流速乳液(ml/min) |
| 3 | 180 | 50 | 26 | 0.1 |
随着二氧化碳流过、没有荧光物质痕迹留于容器中，这说明Bodipy未被超临界流体或所用溶剂提取。实施例3：Bodipy于PHB中，乳液中水含量为20％(v/v)
如实施例2，该实施例目的是使用含20％(v/v)水的乳液，将低分子量分子结合入载体基质中。将PHB于2bar、90℃下溶于二氯甲烷，将等体积2％(w/w)PVP(水溶液)和2％(w/w)n-OG、1.0mg/mlBodipy的TRIS-HCl缓冲液(10mM,pH8)混合。将该溶液(2ml)注入(于20000rpm匀化期间)25ml Kinematica分散液容器中的、含1％(w/w)PHB和0.4％(w/w)AOT的8ml二氯甲烷中。总匀化时间是3分钟，所用匀化器是Polytron PT3100,Rotor PT-DA3012/2(Kinematica AG,Switzerland)。整个程序在环境条件下进行。
使用两股溶液式三成分喷头，以乙醇(流速0.5ml/分)作改性剂，在SEDS装置中进行实验4。而实验5采用夹层式(表3)。
表3实施例3中乳液的SEDS工艺
根据SEM图，该两实验的颗粒粒度为1-3μm。
| 实验号 | 改性剂 | P(bar) | T(℃) | 流速CO2(ml/min) | 流速乳液(ml/min) |
| 4 | 乙醇 | 180 | 50 | 26 | 0.1 |
| 5 | - | 240 | 35 | 26 | 0.1 |
颗粒的理论组成是：55.8％(w/w)PHB、43.5％(w/w)表面活性剂和0.6％(w/w)Bodipy。对实验5中结合入颗粒中的Bodipy量分析，发现是0.7％(w/w)。实施例4：碳酸酐酶于PLG中，乳液中水含量为20％(v/v)
TRIS-SO4缓冲剂(0.1M,pH7.5)中的200μl 20mg/ml碳酸酐酶(93％)，在以超声波探针(购自Sonics & Materials Inc.的CV26型)均化期间加入到800μl 8％(w/w)PLG、0.4％(w/w)Span85/Tween80(80∶20重量比)中，于约30-50W匀化3分钟。乳液于冰上的4ml玻璃瓶中配制。
制备颗粒的操作条件列于表4，该实验用三成分喷头以夹层式进行。
表4实施例4中乳液的SEDS工艺
按照SEM图，所制得的颗粒粒度为10-100μm。
| 实验号 | P(bar) | T(℃) | 流速CO2(ml/min) | 流速乳液(ml/min) |
| 6 | 240 | 35 | 26 | 0.1 |
该颗粒的理论组成是：91.4％(w/w)PLG、4.6％(w/w)表面活性剂和4.0％(w/w)碳酸酐酶。对蛋白量分析得出有4％(w/w)碳酸酐酶，而没有蛋白结合入颗粒表面。
Claims (33)
1．含有一种或多种活性物质与载体相结合的制剂的制备方法，其特征在于：——将液态非水相与液态水相混合配制成乳液，所述水相含一种或多
种活性物质，而载体存在于至少一个相中；——采用抗溶剂技术，使所述乳液与流化气体接触；和——获得从液相中分离出的单元。
2．根据权利要求1的方法，其中活性物质溶解于水相中。
3．根据权利要求1的方法，其中活性物质分散于水相中。
4．根据权利要求1的方法，其中活性物质加溶于水相中。
5．根据前述权利要求任一项的方法，其中活性物质是蛋白质。
6．根据权利要求5的方法，其中活性物质是抗原。
7．根据权利要求6的方法，其中活性物质是螺杆菌属抗原。
8．根据权利要求7的方法，其中活性物质是类脂化水不溶性幽门螺杆菌粘附蛋白A。
9．根据权利要求8的方法，其中活性物质是特异性全类脂化型幽门螺杆菌粘附蛋白A。
10．根据权利要求1-4的方法，其中活性物质是低分子量物质。
11．根据前述权利要求任一项的方法，其中非水相含有机溶剂。
12．根据前述权利要求任一项的方法，其中非水相含有机溶剂混合物。
13．根据前述权利要求任一项的方法，其中水相的极性高于非水相。
14．根据前述权利要求任一项的方法，其中乳液是粗乳化液。
15．根据前述权利要求任一项的方法，其中乳液是微乳化液。
16．根据前述权利要求任一项的方法，其中乳液是粗乳化液与微乳化液相结合。
17．根据前述权利要求任一项的方法，其中乳液含有乳化剂。
18．根据权利要求17的方法，其中乳化剂是非离子表面活性剂。
19．根据权利要求17的方法，其中乳化剂是阴离子表面活性剂。
20．根据权利要求17的方法，其中乳化剂是阳离子表面活性剂。
21．根据权利要求17的方法，其中乳化剂是两性离子表面活性剂。
22．根据权利要求17的方法，其中乳化剂是聚合物。
23．根据权利要求17的方法，其中乳化剂是脂类。
24．根据前述权利要求任一项的方法，其中载体是聚(3-羟基丁酸酯)。
25．根据前述权利要求任一项的方法，其中载体是聚(DL-乳酸-共-乙醇酸)。
26．根据前述权利要求任一项的方法，其中通过采用流化气体技术，使乳液与流化气体接触。
27．根据权利要求26的方法，其中所采用的流化气体技术是SEDS。
28．根据权利要求26的方法，其中所采用的流化气体技术是ASES。
29．根据权利要求26的方法，其中所采用的流化气体技术是SAS。
30．根据权利要求26的方法，其中所采用的流化气体技术是GAS。
31．根据权利要求26的方法，其中所采用的流化气体技术是PCA。
32．根据前述权利要求任一项的方法，其中流化气体是二氧化碳。
33．前述权利要求任一项所制备的制剂。
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Cited By (2)
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|---|---|---|---|---|
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|---|---|---|---|---|
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101404901B (zh) * | 2006-02-23 | 2013-09-25 | 菲仕兰品牌公司 | 使用超临界介质制备干燥颗粒的方法 |
| CN101443109B (zh) * | 2006-05-15 | 2012-05-23 | 法国原子能委员会 | 用于合成涂布有机或无机颗粒的方法 |
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