RU2144085C1 - Способ получения бактериохлорофилла а - Google Patents
Способ получения бактериохлорофилла а Download PDFInfo
- Publication number
- RU2144085C1 RU2144085C1 RU96114423/13A RU96114423A RU2144085C1 RU 2144085 C1 RU2144085 C1 RU 2144085C1 RU 96114423/13 A RU96114423/13 A RU 96114423/13A RU 96114423 A RU96114423 A RU 96114423A RU 2144085 C1 RU2144085 C1 RU 2144085C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bacteriochlorophyll
- petroleum ether
- dioxane
- end product
- target product
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к химии биологически активных соединений и применяется в фотодинамической терапии рака. Бактериохлорофилл а экстрагируют диоксаном с последующим переводом пигмента в петролейный эфир. Целевой продукт отделяют при уменьшении содержания диоксана в петролейном эфире. Проводят очистку целевого продукта переосаждением бактериохлорофилла а из хлорированных углеводородов насыщенными углеводородами. Способ позволяет повысить выход целевого продукта и снизить его себестоимость.
Description
Изобретение относится к химии биологически активных соединений и касается усовершенствования способа получения бактериохлорофилла a, который используется в качестве исходного сырья при создании сенсибилизаторов второго поколения для фотодинамической терапии рака.
Бактериохлорофилл a представляет из себя сложную молекулу тетрагидропорфирина:
Известен единственный способ получения бактериохлорофилла a, основанный на экстракции пигментов метанолом из биомассы пурпурных фототрофных бактерий родов Rhodopseudomonas viridis и Rhodospirillum rubrum, упаривании экстракта под вакуумом, с последующей очисткой бактериохлорофилла a с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии [1].
Известен единственный способ получения бактериохлорофилла a, основанный на экстракции пигментов метанолом из биомассы пурпурных фототрофных бактерий родов Rhodopseudomonas viridis и Rhodospirillum rubrum, упаривании экстракта под вакуумом, с последующей очисткой бактериохлорофилла a с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии [1].
К недостаткам этого метода следует отнести:
1) большие потери бактериохлорофилла a на стадиях упаривания и хроматографической очистки за счет интенсивного окисления,
2) высокую стоимость и сложность процесса высокоэффективной жидкостной хроматографии,
3) низкую производительность и выход процесса по бактериохлорофиллу a.
1) большие потери бактериохлорофилла a на стадиях упаривания и хроматографической очистки за счет интенсивного окисления,
2) высокую стоимость и сложность процесса высокоэффективной жидкостной хроматографии,
3) низкую производительность и выход процесса по бактериохлорофиллу a.
Целью изобретения является улучшение способа получения бактериохлорофилла a и повышение его выхода.
Поставленная цель достигается следующим образом.
Биомассу пурпурных фотосинтетических бактерий Rhodopseudomonas capsulata заливают диоксаном, перемешивают и подвергают центрифугированию. Полученный раствор разбавляют петролейным эфиром и встряхивают в делительной воронке. Образуется два слоя. Нижний водно-диоксановый слой содержит водорастворимые вещества из экстракта, верхний - бактериохлорофилл a, каротиноиды, липиды и другие жирорастворимые продукты. Легкую фракцию отделяют и разбавляют двумя объемами воды. При встряхивании диоксан перераспределяется из петролейного эфира в воду и бактериохлорофилл a постепенно начинает выпадать в осадок. Суспензии дают отстояться и затем отфильтровывают. Полученный бактериохлорофилл a - сырец, растворяют в хлороформе (20 мл на 1 г бактериохлорофилла) и переосаждают петролейным эфиром (10 мл на 1 мл хлороформа) и затем отфильтровывают. Операцию переосажления повторяют несколько раз до тех пор, пока спектральные характеристики и ТСХ не подтвердят гомогенность соединения. Выход целевого продукта составляет от 1.2 до 1.5 г на 1 кг биомассы.
Отличительными признаками заявляемого способа являются:
1) замена метанола на диоксан при экстракции бактериохлорофилла а из биомассы пурпурных бактерий,
2) осаждение бактериохлорофилла, что позволяет существенно ускорить очистку целевого продукта,
3) отказ от хроматографических методов очистки, ведущих к значительному окислению бактериохлорофилла.
1) замена метанола на диоксан при экстракции бактериохлорофилла а из биомассы пурпурных бактерий,
2) осаждение бактериохлорофилла, что позволяет существенно ускорить очистку целевого продукта,
3) отказ от хроматографических методов очистки, ведущих к значительному окислению бактериохлорофилла.
Пример 1. 500 г замороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (20% воздушно-сухой массы) заливают 1.1 л диоксана, после размораживания перемешивают, центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 3000 об/мин, декантируют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.5 л петролейного эфира (т.кип. 70 - 90oC). Смесь встряхивают и дают отстояться. Верхний слой отделяют и встряхивают с 1 л воды для частичной экстракции диоксана, при этом из петролейного эфира постепенно выпадает осадок бактериохлорофилла. Водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок высушивают, растворяют в 20 мл хлороформа и заливают 200 мл петролейпого эфира. Выпавший осадок бактериохлорофилла отфильтровывают. Операцию переосаждения повторяют два раза.
Выход 0.60 г.
Электронный спектр в хлороформе, λmax (соотношение интенсивностей) : 367, 581, 778 нм (1: 0.30: 0.95).
H1ЯМР, (CDCl3) м. д. : 9.4, 8.52, 8.38, 6.44, 4.21, 4.10, 3.86, 3.66, 3.44. 3.33, 2.5, 1.58, 1.41.
Пример 2. 300 г предварительно замороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (18% воздушно-сухой массы) размораживают, заливают 0.7 л диоксана, тщательно перемешивают, центрифугируют, декантируют. Шрот заливают 0.1 л диоксана, центрифугируют, декантируют. Экстракты объединяют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.3 л петролейного эфира. Смесь встряхивают и дают отстояться. Нижний слой отделяют, а к верхнему приливают 1 л воды и встряхивают. После отстаивания водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок промывают петролейным эфиром (2 раза по 50 мл), высушивают, растворяют в 15 мл хлороформа и бактериохлорофилл переосаждают 150 мл петролейного эфира. Осадок бактериохлорофилла отфильтровывают, промывают 100 мл холодного петролейного эфира и высушивают в вакуум-эксикаторе под вакуумом над парафином.
Выход 0.41 г.
Пример 3. 660 г предварительно замороженной и размороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (22% а.с.в.) заливают 1.2 л диоксана, тщательно перемешивают и оставляют на 12 ч. Экстракт центрифугируют, декантируют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.5 л петролейного эфира. Смесь встряхивают и дают отстояться. Нижнюю фракцию отделяют, а к верхней фракции приливают 1 л воды и встряхивают. После отстаивания водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок высушивают, растворяют в 50 мл хлороформа, к раствору постепенно добавляют 300 мл петролейного эфира. Выпавший осадок бактериохлорофилла отфильтровывают и высушивают.
Выход 1.05 г.
Пример 4. Способ осуществляют по примеру 1, экстракцию из диоксана и переосаждение из хлороформа проводят гексаном.
Выход 0.62 г.
Литература:
1. Berger, G.; Kleo, J.; Andrianambinintsoa, S.; Neumann, J. M; Leonhard, M.// Preparation and purification of chlorophylls, bacteriochlorophylls and of their derivatives. // J. Liq. Chromatogr., 13(2), 333-44, 1990.5
1. Berger, G.; Kleo, J.; Andrianambinintsoa, S.; Neumann, J. M; Leonhard, M.// Preparation and purification of chlorophylls, bacteriochlorophylls and of their derivatives. // J. Liq. Chromatogr., 13(2), 333-44, 1990.5
Claims (1)
- Способ получения бактериохлорофилла путем разрушения клеточных стенок в биомассе пурпурных бактерий, экстракции природного пигмента органическим растворителем и очистки целевого продукта, отличающийся тем, что экстракцию бактериохлорофилла а ведут диоксаном с последующим переводом пигмента в петролейный эфир и отделением целевого продукта при уменьшении содержания диоксана в петролейном эфире, а очистку целевого продукта проводят путем переосаждения бактериохлорофилла а из хлорированных углеводородов насыщенными углеводородами.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96114423/13A RU2144085C1 (ru) | 1996-07-12 | 1996-07-12 | Способ получения бактериохлорофилла а |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96114423/13A RU2144085C1 (ru) | 1996-07-12 | 1996-07-12 | Способ получения бактериохлорофилла а |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU96114423A RU96114423A (ru) | 1998-10-20 |
RU2144085C1 true RU2144085C1 (ru) | 2000-01-10 |
Family
ID=20183400
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU96114423/13A RU2144085C1 (ru) | 1996-07-12 | 1996-07-12 | Способ получения бактериохлорофилла а |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2144085C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2671158C2 (ru) * | 2013-03-11 | 2018-10-29 | Тукад Ип Сарл | Способ получения бактериохлорофилла а |
-
1996
- 1996-07-12 RU RU96114423/13A patent/RU2144085C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Berger, G., Kleo, J.; Andrianambinintsoa, S.; Neumann, J.M; Leonhard, M.//Preparation and purification of chlorophylls, bacteriochlorophylls and of their derivatives.// J.Lig.Chromatogr., 13(2), 33-34, 1990. * |
Ефремов А.В. и др. Изучение факторов, влияющих на продуцирование бактериохлорофилла пурпурными бактериями Rhodopseudomonas capsulata. Тезисы докладов первой международной конференции по биокоординационной химии, 20-22 декабря 1994 г., Иваново, 1994, с. 106. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2671158C2 (ru) * | 2013-03-11 | 2018-10-29 | Тукад Ип Сарл | Способ получения бактериохлорофилла а |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN1041310C (zh) | 10-脱乙酰基浆果赤霉素ⅲ制造方法 | |
RU2107065C1 (ru) | Способ получения 10-дезацетилбаккатина iii | |
Otte et al. | Identification of the major chlorosomal bacteriochlorophylls of the green sulfur bacteria Chlorobium vibrioforme and Chlorobium phaeovibrioides; their function in lateral energy transfer | |
CN103145780A (zh) | 一种蓝莓花色苷的制备方法与所制备的蓝莓花色苷的应用 | |
CN108372307B (zh) | 一种纳米金的制备方法、纳米金及应用 | |
Castillo et al. | Matrix solid-phase dispersion as a greener alternative to obtain bioactive extracts from Haematococcus pluvialis. Characterization by UHPLC-QToF | |
KR20110119071A (ko) | 원심분리 분배 크로마토그래피를 사용하여 해조류에서 푸코잔틴을 분리하는 방법 | |
RU2144085C1 (ru) | Способ получения бактериохлорофилла а | |
CN1197972C (zh) | 一种生产番茄红素的方法 | |
CN113121718B (zh) | 一种迷果芹多糖psgp-2及其制备方法与应用 | |
CN111568818A (zh) | 一种含有水解藻提取物的抗蓝光冻干面膜组合物及其制备方法 | |
RU2676271C1 (ru) | Способ комплексной переработки бурых водорослей | |
CN1857717A (zh) | 一种毛蚶抗癌肽类提取物及其制备方法 | |
CN112159440B (zh) | 一种酚苷类化合物及其制备方法和用途 | |
Seritti et al. | Production of hydrophobic fluorescent organic matter by the marine diatom Phaeodactylum tricornutum | |
RU2176268C2 (ru) | Способ производства облепихового масла | |
CN111303094A (zh) | 一种茶藨子木层孔菌苯并呋喃类衍生物及其制备方法和应用 | |
Bezhuashvili et al. | Trans-Piceid Stilbenoid in the Juice and Skin of the red Grape (Vitis vinifera L.) Varieties growing in Georgia | |
Bjørnland | Chromatographic separation and spectrometric characterization of native carotenoids from the marine dinoflagellate Thoracosphaera heimii | |
RU2180342C2 (ru) | Способ получения метилового эфира феофорбида (а) | |
CN1723921A (zh) | 一种毛蚶糖肽类提取物及其制备方法 | |
RU2793805C1 (ru) | Способ получения полисахаридов из шрота (отходов переработки) бурых водорослей | |
CN116283944B (zh) | 一种芳樟醇氧化物-呋喃型异黄酮类化合物及其分离方法和应用 | |
CN116854702A (zh) | 一种以青蒿膏为原料制备青蒿素g的方法 | |
EP2321300B1 (de) | Chlorophyllkataboliten |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20050713 |