RU2144085C1 - Способ получения бактериохлорофилла а - Google Patents

Способ получения бактериохлорофилла а Download PDF

Info

Publication number
RU2144085C1
RU2144085C1 RU96114423/13A RU96114423A RU2144085C1 RU 2144085 C1 RU2144085 C1 RU 2144085C1 RU 96114423/13 A RU96114423/13 A RU 96114423/13A RU 96114423 A RU96114423 A RU 96114423A RU 2144085 C1 RU2144085 C1 RU 2144085C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
bacteriochlorophyll
petroleum ether
dioxane
end product
target product
Prior art date
Application number
RU96114423/13A
Other languages
English (en)
Other versions
RU96114423A (ru
Inventor
А.Ф. Миронов
А.В. Ефремов
Original Assignee
Московская государственная академия тонкой химической технологии им.М.В.Ломоносова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Московская государственная академия тонкой химической технологии им.М.В.Ломоносова filed Critical Московская государственная академия тонкой химической технологии им.М.В.Ломоносова
Priority to RU96114423/13A priority Critical patent/RU2144085C1/ru
Publication of RU96114423A publication Critical patent/RU96114423A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2144085C1 publication Critical patent/RU2144085C1/ru

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относится к химии биологически активных соединений и применяется в фотодинамической терапии рака. Бактериохлорофилл а экстрагируют диоксаном с последующим переводом пигмента в петролейный эфир. Целевой продукт отделяют при уменьшении содержания диоксана в петролейном эфире. Проводят очистку целевого продукта переосаждением бактериохлорофилла а из хлорированных углеводородов насыщенными углеводородами. Способ позволяет повысить выход целевого продукта и снизить его себестоимость.

Description

Изобретение относится к химии биологически активных соединений и касается усовершенствования способа получения бактериохлорофилла a, который используется в качестве исходного сырья при создании сенсибилизаторов второго поколения для фотодинамической терапии рака.
Бактериохлорофилл a представляет из себя сложную молекулу тетрагидропорфирина:
Figure 00000001

Известен единственный способ получения бактериохлорофилла a, основанный на экстракции пигментов метанолом из биомассы пурпурных фототрофных бактерий родов Rhodopseudomonas viridis и Rhodospirillum rubrum, упаривании экстракта под вакуумом, с последующей очисткой бактериохлорофилла a с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии [1].
К недостаткам этого метода следует отнести:
1) большие потери бактериохлорофилла a на стадиях упаривания и хроматографической очистки за счет интенсивного окисления,
2) высокую стоимость и сложность процесса высокоэффективной жидкостной хроматографии,
3) низкую производительность и выход процесса по бактериохлорофиллу a.
Целью изобретения является улучшение способа получения бактериохлорофилла a и повышение его выхода.
Поставленная цель достигается следующим образом.
Биомассу пурпурных фотосинтетических бактерий Rhodopseudomonas capsulata заливают диоксаном, перемешивают и подвергают центрифугированию. Полученный раствор разбавляют петролейным эфиром и встряхивают в делительной воронке. Образуется два слоя. Нижний водно-диоксановый слой содержит водорастворимые вещества из экстракта, верхний - бактериохлорофилл a, каротиноиды, липиды и другие жирорастворимые продукты. Легкую фракцию отделяют и разбавляют двумя объемами воды. При встряхивании диоксан перераспределяется из петролейного эфира в воду и бактериохлорофилл a постепенно начинает выпадать в осадок. Суспензии дают отстояться и затем отфильтровывают. Полученный бактериохлорофилл a - сырец, растворяют в хлороформе (20 мл на 1 г бактериохлорофилла) и переосаждают петролейным эфиром (10 мл на 1 мл хлороформа) и затем отфильтровывают. Операцию переосажления повторяют несколько раз до тех пор, пока спектральные характеристики и ТСХ не подтвердят гомогенность соединения. Выход целевого продукта составляет от 1.2 до 1.5 г на 1 кг биомассы.
Отличительными признаками заявляемого способа являются:
1) замена метанола на диоксан при экстракции бактериохлорофилла а из биомассы пурпурных бактерий,
2) осаждение бактериохлорофилла, что позволяет существенно ускорить очистку целевого продукта,
3) отказ от хроматографических методов очистки, ведущих к значительному окислению бактериохлорофилла.
Пример 1. 500 г замороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (20% воздушно-сухой массы) заливают 1.1 л диоксана, после размораживания перемешивают, центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 3000 об/мин, декантируют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.5 л петролейного эфира (т.кип. 70 - 90oC). Смесь встряхивают и дают отстояться. Верхний слой отделяют и встряхивают с 1 л воды для частичной экстракции диоксана, при этом из петролейного эфира постепенно выпадает осадок бактериохлорофилла. Водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок высушивают, растворяют в 20 мл хлороформа и заливают 200 мл петролейпого эфира. Выпавший осадок бактериохлорофилла отфильтровывают. Операцию переосаждения повторяют два раза.
Выход 0.60 г.
Электронный спектр в хлороформе, λmax (соотношение интенсивностей) : 367, 581, 778 нм (1: 0.30: 0.95).
H1ЯМР, (CDCl3) м. д. : 9.4, 8.52, 8.38, 6.44, 4.21, 4.10, 3.86, 3.66, 3.44. 3.33, 2.5, 1.58, 1.41.
Пример 2. 300 г предварительно замороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (18% воздушно-сухой массы) размораживают, заливают 0.7 л диоксана, тщательно перемешивают, центрифугируют, декантируют. Шрот заливают 0.1 л диоксана, центрифугируют, декантируют. Экстракты объединяют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.3 л петролейного эфира. Смесь встряхивают и дают отстояться. Нижний слой отделяют, а к верхнему приливают 1 л воды и встряхивают. После отстаивания водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок промывают петролейным эфиром (2 раза по 50 мл), высушивают, растворяют в 15 мл хлороформа и бактериохлорофилл переосаждают 150 мл петролейного эфира. Осадок бактериохлорофилла отфильтровывают, промывают 100 мл холодного петролейного эфира и высушивают в вакуум-эксикаторе под вакуумом над парафином.
Выход 0.41 г.
Пример 3. 660 г предварительно замороженной и размороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (22% а.с.в.) заливают 1.2 л диоксана, тщательно перемешивают и оставляют на 12 ч. Экстракт центрифугируют, декантируют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.5 л петролейного эфира. Смесь встряхивают и дают отстояться. Нижнюю фракцию отделяют, а к верхней фракции приливают 1 л воды и встряхивают. После отстаивания водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок высушивают, растворяют в 50 мл хлороформа, к раствору постепенно добавляют 300 мл петролейного эфира. Выпавший осадок бактериохлорофилла отфильтровывают и высушивают.
Выход 1.05 г.
Пример 4. Способ осуществляют по примеру 1, экстракцию из диоксана и переосаждение из хлороформа проводят гексаном.
Выход 0.62 г.
Литература:
1. Berger, G.; Kleo, J.; Andrianambinintsoa, S.; Neumann, J. M; Leonhard, M.// Preparation and purification of chlorophylls, bacteriochlorophylls and of their derivatives. // J. Liq. Chromatogr., 13(2), 333-44, 1990.5

Claims (1)

  1. Способ получения бактериохлорофилла путем разрушения клеточных стенок в биомассе пурпурных бактерий, экстракции природного пигмента органическим растворителем и очистки целевого продукта, отличающийся тем, что экстракцию бактериохлорофилла а ведут диоксаном с последующим переводом пигмента в петролейный эфир и отделением целевого продукта при уменьшении содержания диоксана в петролейном эфире, а очистку целевого продукта проводят путем переосаждения бактериохлорофилла а из хлорированных углеводородов насыщенными углеводородами.
RU96114423/13A 1996-07-12 1996-07-12 Способ получения бактериохлорофилла а RU2144085C1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU96114423/13A RU2144085C1 (ru) 1996-07-12 1996-07-12 Способ получения бактериохлорофилла а

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU96114423/13A RU2144085C1 (ru) 1996-07-12 1996-07-12 Способ получения бактериохлорофилла а

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU96114423A RU96114423A (ru) 1998-10-20
RU2144085C1 true RU2144085C1 (ru) 2000-01-10

Family

ID=20183400

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU96114423/13A RU2144085C1 (ru) 1996-07-12 1996-07-12 Способ получения бактериохлорофилла а

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2144085C1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2671158C2 (ru) * 2013-03-11 2018-10-29 Тукад Ип Сарл Способ получения бактериохлорофилла а

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Berger, G., Kleo, J.; Andrianambinintsoa, S.; Neumann, J.M; Leonhard, M.//Preparation and purification of chlorophylls, bacteriochlorophylls and of their derivatives.// J.Lig.Chromatogr., 13(2), 33-34, 1990. *
Ефремов А.В. и др. Изучение факторов, влияющих на продуцирование бактериохлорофилла пурпурными бактериями Rhodopseudomonas capsulata. Тезисы докладов первой международной конференции по биокоординационной химии, 20-22 декабря 1994 г., Иваново, 1994, с. 106. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2671158C2 (ru) * 2013-03-11 2018-10-29 Тукад Ип Сарл Способ получения бактериохлорофилла а

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1041310C (zh) 10-脱乙酰基浆果赤霉素ⅲ制造方法
RU2107065C1 (ru) Способ получения 10-дезацетилбаккатина iii
Otte et al. Identification of the major chlorosomal bacteriochlorophylls of the green sulfur bacteria Chlorobium vibrioforme and Chlorobium phaeovibrioides; their function in lateral energy transfer
CN103145780A (zh) 一种蓝莓花色苷的制备方法与所制备的蓝莓花色苷的应用
CN108372307B (zh) 一种纳米金的制备方法、纳米金及应用
Castillo et al. Matrix solid-phase dispersion as a greener alternative to obtain bioactive extracts from Haematococcus pluvialis. Characterization by UHPLC-QToF
KR20110119071A (ko) 원심분리 분배 크로마토그래피를 사용하여 해조류에서 푸코잔틴을 분리하는 방법
RU2144085C1 (ru) Способ получения бактериохлорофилла а
CN1197972C (zh) 一种生产番茄红素的方法
CN113121718B (zh) 一种迷果芹多糖psgp-2及其制备方法与应用
CN111568818A (zh) 一种含有水解藻提取物的抗蓝光冻干面膜组合物及其制备方法
RU2676271C1 (ru) Способ комплексной переработки бурых водорослей
CN1857717A (zh) 一种毛蚶抗癌肽类提取物及其制备方法
CN112159440B (zh) 一种酚苷类化合物及其制备方法和用途
Seritti et al. Production of hydrophobic fluorescent organic matter by the marine diatom Phaeodactylum tricornutum
RU2176268C2 (ru) Способ производства облепихового масла
CN111303094A (zh) 一种茶藨子木层孔菌苯并呋喃类衍生物及其制备方法和应用
Bezhuashvili et al. Trans-Piceid Stilbenoid in the Juice and Skin of the red Grape (Vitis vinifera L.) Varieties growing in Georgia
Bjørnland Chromatographic separation and spectrometric characterization of native carotenoids from the marine dinoflagellate Thoracosphaera heimii
RU2180342C2 (ru) Способ получения метилового эфира феофорбида (а)
CN1723921A (zh) 一种毛蚶糖肽类提取物及其制备方法
RU2793805C1 (ru) Способ получения полисахаридов из шрота (отходов переработки) бурых водорослей
CN116283944B (zh) 一种芳樟醇氧化物-呋喃型异黄酮类化合物及其分离方法和应用
CN116854702A (zh) 一种以青蒿膏为原料制备青蒿素g的方法
EP2321300B1 (de) Chlorophyllkataboliten

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20050713