RU2112766C1 - Олигонуклеотиды, фармацевтическая композиция - Google Patents

Олигонуклеотиды, фармацевтическая композиция Download PDF

Info

Publication number
RU2112766C1
RU2112766C1 RU95110774/04A RU95110774A RU2112766C1 RU 2112766 C1 RU2112766 C1 RU 2112766C1 RU 95110774/04 A RU95110774/04 A RU 95110774/04A RU 95110774 A RU95110774 A RU 95110774A RU 2112766 C1 RU2112766 C1 RU 2112766C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq idn
seq
sequence
idn
ambassador
Prior art date
Application number
RU95110774/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU95110774A (ru
Inventor
Колот Судир (FR)
Колот Судир
Пиротзки Эдуардо (FR)
Пиротзки Эдуардо
Original Assignee
Сосьете Де Консей Де Решерш Э Д'Аппликасьон Сьентифик (С.К.Р.А.С.)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Сосьете Де Консей Де Решерш Э Д'Аппликасьон Сьентифик (С.К.Р.А.С.) filed Critical Сосьете Де Консей Де Решерш Э Д'Аппликасьон Сьентифик (С.К.Р.А.С.)
Publication of RU95110774A publication Critical patent/RU95110774A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2112766C1 publication Critical patent/RU2112766C1/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y205/00—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5)
    • C12Y205/01—Transferases transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5) transferring alkyl or aryl groups, other than methyl groups (2.5.1)
    • C12Y205/01029—Geranylgeranyl diphosphate synthase (2.5.1.29)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Изобретение относится к олигонуклеотидам и их производным для подавления экспрессии изопренилпротеинтрансфераз, фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и к использованию таких композиций олигонуклеотидов для лечения или терапии заболеваний человека или животных, вызванных ненормальной и/или нерегулируемой пролиферацией. Олигонуклеотиды имеют формулу (I): P - O-R (I), где Р либо отсутствует, либо представляет собой последовательность из одного или более оснований, выбранных из А (аденин), Т/(тимин), С (цитозин) или G (гуанин); О является последовательностью, выбранной из: SEQIDN1: AGAAGCCATG AT; SEQIDN2: GGACGTGACT GT; SEQIDN3: AAGGAGTAGC AG; SEQIDN4: CAGGCAGTAG CA; SEQIDN5: CCCGTCGTCC AT; SEQIDN6: CTGTCCCTGT AC; SEQIDN7: ACTTCTCTCT CC; SEQIDN8: ACTTGGTCCT AA; SEQIDN9: GCCATCATTC TG; SEQIDN10: GATCTGGACC AC; SEQIDN11: CTCAATAGCA TC; SEQIDN12: GTTTTTGGGG TG; SEQIDN13: TCTCACATCC TC; SEQIDN14: TTGTAAGAAC TG; SEQIDN15: GAAGTGCTTC TC; SEQIDN16: GCCTCTTTC AG; SEQIDN17: GGCATCTGTC AG; SEQIDN18: CGGCTGGCAT CC; SEQIDN19: GAACTGACAC AC; SEQIDN20: ACGATCACAT CA; SEQIDN21: ATCAACATGC AG; SEQIDN22: CTGCATATCG AC; SEQIDN23: CAGTGCACCA GC; SEQIDN24: CTGCAGCCTC GG; SEQIDN25: ACTCTGGA CC; SEQIDN26: CAAGAATCCT CG; SEQIDN27: ACATCTGCTC TG; SEQIDN28: TCTGTACTCG TC; SEQIDN29: CTACAGTACA GC; SEQIDN30: CCCGTCGTCC ATAGG; SEQIDN31: CCCGTCGTCC ATAGGGGA; SEQIDN32: CCCGTCGTCC ATAGGGGAC GC; SEQIDN33: GGACGTGACT GTTTC; SEQIDN34: GGACGTGACT GTTTCCAC; SEQIDN35: GGACGTGACT GTTTCCACTG; SEQIDN36: GGACGTGACT GTTTCCACTG AGTC, R либо отсутствует, либо представляет собой последовательность из одного или более оснований, выбранных А, Т, С или G. Фармацевтическая композиция, обладающая антипролиферативным действием, содержащая в качестве активного ингредиента эффективное количество, по крайней мере, одного олигонуклеотида формулы (I) в смеси с фармацевтически приемлемым разбавителем и/или носителем, пригодным для выбранного способа введения. 2 с. и 12 з.п.ф-лы, 9 табл.

Description

Изобретение относится к олигонуклеотидам и их производным, которые подавляют экспрессию изопренилпротеинтарнофераз, терапевтическим композициям, содержащим такие соединения, и использованию таких композиций олигонуклеотидов для лечения или терапии заболеваний человека или животных, вызванных ненормальной и/или нерегулируемой клеточной пролиферацией.
Любой живой организм, будь он одноклеточным или многоклеточным, характеризуется способностью к размножению, феноменом, требующим репликации материала наследственности (ДНК и т.д.) и одинакового распределения реплицированной ДНК между двумя "дочерними" клетками. Существует большое число очень разных молекул с митогенной активностью, которые действуют "специфичным для клетки" образом. "Сигнальные" молекулы или факторы роста являются типами полипептидов, которые в очень низких количествах и после взаимодействия с клетками-мишенями могут вызывать каскад событий, которые завершают репликацию ДНК и митоз.
Факторы роста действуют на клеточный цикл не непосредственно, а путем взаимодействия с серией трансмембранных рецепторов, расположенных на плазматической мембране мишеневых клеток, и их активации. Этот механизм запускает цепную реакцию в клетке, которая приводит к митозу. Активируемые внутриклеточные события могут меняться от одного типа клеток к другому для одних и тех же рецепторов.
Одна из первых стадий связывания фактора роста с его рецептором состоит и в активации киназного белка и фосфорилировании белков. Один из белков, образующих это звено сигнальной трансдукции, является белком ras, белком в 21 к-дальтон, модифицированным с помощью механизма пренилирования. Пренилирование является посттрансляционным изменением, которое включает ковалентное связывание изопренильных группировок с цистеином многочисленных белков. Таким образом, изопренилирование может быть переносом фарнезильной группировки или геранилгеранильной группировки к мишеневым белкам. Эта модификация позволяет некоторым белкам связаться с местом действия на мембране. Таким образом, одним из результатов подавления этого пренилирования является предотвращение трансдукции экстраклеточных сигналов к ядру и, следовательно, клеточной пролиферации.
К настоящему времени определены характеристики трех типов ферментов, которые катализируют эту модификацию: фарнезилпротеинтрансферазы, геранилгеранилпротеинтрансферазы типа 1 и геранилгеранилпротеинтрансферазы типа 2. Эти ферменты распознают консенсусные последовательности, расположенные на C-концах белков.
Одним из последствий блокирования синтеза этих ферментов является блокада основных путей сигнальной передачи, которая приводит к пролиферации клеток.
Большинство классических активных ингредиентов взаимодействует с белками, продуктом трансляции генетической информации и подавляют их функции. Данное изобретение направлено на современный терапевтический подход: антисмысловую стратегию. Указанный подход предполагает селективную модуляцию экспрессии гена путем селективного соединения нуклеотидной цепи (олигонуклеотидов) с комплементарной им последовательностью на матричной или предматричной РНК или ДНК и, следовательно, подавляется синтез соответствующего белка. Используемые молекулы взаимодействуют непосредственно с системой генетической информации.
Олигонуклеотиды, комплементарные продуктам транскрипции, называются "антисмысловыми" олигонуклеотидами. Олигонуклеотиды, имеющие ту же самую последовательность, что и продукты транскрипции, называются "смысловыми" олигонуклеотидами. Первоначально эти соединения были рационально предназначены для подавления образования продукта гена путем удаления соответствующей матричной РНК с помощью гидролиза РНК-азой H. Вскоре выяснилось, что механизм действия этих антисмысловых олигонуклеотидов не так прост. Эти олигонуклеотиды могли взаимодействовать с разным числом клеточных мишеней, не являющихся нуклеиновыми кислотами. Эти олигонуклеотиды могли взаимодействовать с геном с образованием структур с тройной спиралью и подавлением образования продуктов транскрипции. Олигонуклеотиды могли взаимодействовать с интронэкзонными соединениями предматричной РНК, мешая таким образом правильному сплайсингу продукта транскрипции. Олигонуклеотиды могли гибридизоваться с мРНК в цитоплазме путем образования дуплекса РНК-ДНК, который быстро разрушается ферментом РНК-азой H или препятствуя движению рибосомного комплекса по мРНК, блокируя, таким образом, трансляцию. Олигонуклеотиды, особенно модифицированные олигонуклеотиды, могли взаимодействовать с рядом клеточных компонентов, таких как белки. Эти взаимодействия могли быть специфичными для последовательности (например, факторы транскрипции) или могли быть неспецифичными для последовательности (например, факторы роста). Таким образом, олигонуклеотиды (ПОСЛ ИД N 1-36) могут вызывать остановку пролиферации путем любого одного или сочетания вышеназванных механизмов.
Изобретение, в частности, направлено на применение антисмысловых олигонуклеотидов для блокирования синтеза ферментов, как указано выше. Это предполагает их использование в качестве антипролиферативных средств пpи сердечно-сосудистых заболеваниях, в онкологии, дерматологии, при некоторых вирусных инфекциях и при любых патологических состояниях, связанных с клеточной пролиферацией.
При антисмысловой методологии могут использоваться антисмысловые олигонуклеотиды или антисмысловые РНК. Методология с антисмысловыми олигонуклеотидами отличается от методологии с антисмысловыми РНК. При последней сегмент ДНК гена встраивается в векторную ДНК в противоположной ориентации нормальной смысловой и, таким образом, во время транскрипции указанного вектора одна из цепей его ДНК реплицируется в РНК. Вставка фрагмента гена с обратной последовательностью приводит к синтезу in situ РНК, которая комплементарна нормальной мРНК, синтезируемой самой клеткой. Эта РНК, называемая антисмысловой РНК, может гибридизоваться с экспрессируемой в норме мРНК и, таким образом, подавлять трансляцию мишеневого белка. Такой метод использовался Prendergast et al. (Cell Growth and differenciation 4,707-713, September 93) для оценки роли фарнезилпротеинтрансферазы, кДНК для β- субъединицы этой фарназилпротеинтрансферазы клонировали и очищали; мишеневые клетки подвергали генной инженерии для получения экспрессии молекул антисмысловой РНК in situ.
Метод с антисмысловой РНК особенно удобен в качестве механистического средства для выявления роли белка в клетке, и в конце концов, в качестве терапевтического средства с использованием сложных тонких методик генной терапии, тогда как антисмысловые олигонуклеотиды более привлекательны в качестве фармацевтических препаратов и рассматриваются контролирующими инстанциями (в регламентирующих источниках) как классические химические вещества. Кроме того, олигонуклеотиды можно легко синтезировать в большом объеме с помощью классической химии, тогда как молекулы антисмысловой РНК получают в биологической системе и существуют многочисленные препятствия ее получения в промышленном масштабе.
Способ дозирования фарнезилпротеинтрансфераз был исследован в EP 456180: более конкретно, с помощью указанного метода может быть измерена активность потенциального ингибитора фарнезилпротеинтрансфераз. Но ни в коем случае такой метод не дает возможности определить структуру нового потенциального ингибитора фарнезилпротеинтрансфераз, и в этом патенте также не описана какая-либо молекула, относящаяся к данному изобретению.
Изобретение представляет олигонуклеотиды (антисмысловые или смысловые), которые селективно гибридизуются с геном или продуктами транскрипции для субъединиц изопренилпротеинтрансфераз и, предпочтительно, для субъединиц α и/или β изопренилпротеинтрансфераз. Олигонуклеотид может включать от 2 до 50 единиц, предпочтительно от 8 до 35 единиц. Более предпочтительно олигонуклеотид содержит от 10 до 25 единиц.
Олигонуклеотиды этого изобретения могут быть синтезированы любым известным способом химического синтеза олигонуклеотидов. Олигонуклеотиды наиболее целесообразно получать, используя любой коммерчески доступный автоматический синтезатор нуклеиновых кислот. Одним из способов синтеза олигонуклеотидов является бетацианоэтилфосфорамидатный метод, описанный S.L.Beaucage and al (Tet Let. 22 (1981) 1859-1862).
Изобретение также представляет производные таких олигонуклеотидов, т.е. олигонуклеотидов, в которых скелет был модифицирован по всей длине олигонуклеотида или в одном из положений 5' или 3' или в обоих. Фактически олигонуклеотиды чувствительны к ферментам нуклеазам, которые гидролизуют их до нуклеотидов, олигонуклеотиды становятся резистентными к нуклеазам путем модификации, например, химической природы самого сахара или фосфатно- сахарных межнуклеотидных связей: таким образом фосфодиэфирная цепь может быть заменена, например, фосфоротиоатной, фосфородитиоатной, метилфосфонатной, фосфорамидатной, фосфоэтилориэфирной, бутиламидатной, пиперазидатной или морфолидатной цепью. Могут быть выполнены другие типы модификаций по всей длине олигонуклеотида или на 5' и/или 3' к концам олигонуклеотидов, чтобы сделать олигонуклеотиды более устойчивыми в биологической среде. А также, фосфатные связи между нуклеотидами могли заменяться амидными связями (пептидные нуклеиновые кислоты). К тому же трансмембранный переход олигонуклеотидов может быть ускорен путем превращения последних в более гидрофобные: это может быть достигнуто, например, путем присоединения гидрофобных заместителей, таких как холестериновые или ароматические группировки или полимер. Частично или по всей длине олигонуклеотида могли включаться модифицированные основания. Также частично или по всей длине олигонуклеотида могли включаться конформационно модифицированные нуклеотиды (например, олигонуклеотид с α- -аномерной конформацией), устойчивые к нуклеазам или со свойствами повышенных гибридизаций или внутриклеточного проникновения. Таким образом, термин "производное" включает нуклеотид, модифицированный одним из способов, описанных выше, или любым другим способом, хорошо известным специалисту.
Предпочтительными олигонуклеотидами этого изобретения являются олигонуклеотиды с последовательностями с ПОСЛ ИД N 1 по ПОСЛ ИД N 36 соответственно. Могут также использоваться их комплементарные последовательности или смысловые олигонуклеотиды по этому изобретению.
Изобретение, кроме того, представляет олигонуклеотиды, содержащие, по крайней мере, часть одной из последовательностей, выбираемой из с ПОСЛ ИД N 1 по ПОСЛ ИД N 36.
Изобретение, кроме того, представляет терапевтические композиции, содержащие в качестве активного ингредиента, по крайней мере, один антисмысловой олигонуклеотид по этому изобретению в смеси с фармацевтически приемлемым растворителем и/или носителем, пригодным для выбранного пути введения. Композиция может применяться путем местного, системного или локального лечения, она может принимать форму жидкости или инъекций, липосом, лекарственной формы с длительным выделением, геля, мази для местного применения или любой другой приемлемой формы для избранного способа введения.
И наконец, изобретение представляет использование композиции по данному изобретению в способе лечения человека или животного, у которого присутствует ненормальная и/или нерегулируемая клеточная пролиферация.
Следующие примеры иллюстрируют изобретение.
Пример 1. Действие антисмыслового олигонуклеотида на пролиферацию клеток гладкой мускулатуры крыс.
Клетки гладкой мускулатуры аорты крыс-самцов Wistar изолировали путем ферментативного расщепления (коллагеназа и эластаза) и культивировали в присутствии среды DMEM, 10% плодной телячьей сыворотки (FCS), 2 мм глютамина, 50 Ед/мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина. Использовали клетки гладкой мускулатуры между 3-м и 7-м пассажирами в 24 ячеечных платах.
Через 3 дня культивирования клетки изолировали в сыворотке в течение 72 часов. Клетки затем стимулировали (или нет) 1% сыворотки или 5 нг/мл bFGF (основного фактора роста фибробластов) и обрабатывали одновременно в присутствии или в отсутствии продуктов этого изобретения при концентрации 10-5 М в течение 24 часов. За четыре часа перед концом инкубации клетки метили тимидином, содержащим тритий (1 мкС/мл). Включение останавливают добавлением 5% ТХУ на 10 минут, затем клетки разглаживали 500 мкл 0,5 н. NaOH. Образцы по 400 мкл отбирали и помещали в пузырьки для определения сцинтилляции, содержащие 400 мкл 0,5 н. HCl и 10 мл.
Активность олигонуклеотидов определяется путем измерения клеточной пролиферации, выраженной в процентах. Полученные результаты показаны в табл. 1.
Пример 2. Изучение зависимости ответной реакции от дозы. Действие антисмысловых последовательностей на пролиферацию гладкой мускулатуры крыс.
План эксперимента был идентичен описанному в примере 1. Клетки обрабатывали соединениями этого изобретения в концентрациях: 10-9М, 10-8М, 10-7М, 10-6М и 10-5М (см. табл. 2).
Пример 3. Влияние размера на биологическую активность in vitro антисмысловых олигонуклеотидов.
Методика эксперимента была идентичной описанной в примере 1. Клетки обрабатывали соединениями этого изобретения (см. табл. 3).
Пример 4. Изучение in vitro антипролиферативного действия антисмысловых олигонуклеотидов на модели ангиопластики (крысы и кролика)
Самцам с нормальным давлением крыс Wistar или новозеландских кроликов проводили анестезию и делали разрез для выведения подвздошной артерии. Артерию очищали от окружающей соединительной ткани и вставляли французский катетер - баллон Фогарти. Баллон накачивали воздухом, чтобы расширить артерию, и продвигали три раза туда и обратно для получения дезендотелезированного повреждения.
Олигонуклеотид, растворенный в 25% плюрониевом геле, непосредственно наносили вокруг выделенного участка артерии. Раны закрывали и животных забивали через 21 день. Осуществляли гистоморфометрический анализ срезов дезендотелеализированных артерий и измеряли внутренние и средние области. Процент пролиферации определяли (как указано табл.4 и 5).
Во всем описании принято, что выражение "ПОСЛ ИД (смысловая)" является олигонуклеотидной последовательностью комплементарной олигонуклеотидной последовательности ПОСЛ ИД.
Пример 5.
а) Действие in vitro смысловых и антисмысловых олигонуклеотидов на фарнезилтрансферазу в C6 глиомных клетках крысы.
Клетки высевали при плотности 5000 клеток/чашку и инкубировали на среде, дополненной 5% лошадиной сыворотки, 2,5% плодной телячьей сыворотки. Через 24 часа среду заменяли на среду без сыворотки плюс липофектин и различные олигонуклеотиды в концентрации 5 мкм для осуществления трансфекции. После 5 часов инкубации среду заменяли на нормальную, следовательно, содержащую 15% лошадиной сыворотки и 2,5% плодной телячьей сыворотки. Затем инкубацию продолжали в течение 72 часов при 37oC. Клеточную пролиферацию оценивали по числу клеток после трипсинизации монослоя, используя счетчик кольтер модель ZM (см. табл.6).
b) Протекание со временем действия антисмысловых олигонуклеотина α -субъединицу фарнезилпирофосфатсинтетазы.
Клетки обрабатывали, как изложено выше, подсчет клеток производили в параллельных образцах с контрольных и обработанных олигонуклеотидами чашек на 3, 7 и 14 день. Значение p было < 0,05% в каждый из 3 дней проведения эксперимента.
Пример 6. Изучение антипролиферативного действия на глиобластоме у крыс.
а) Действие ex vivo антисмысловых олигонуклеотидов на опухолегенность клеток глиомы C6.
Клетки обрабатывали, как описано выше. Через 24 часа после трансфекции олигонуклеотидами α- -субъединицы для фарнезилтрансферазы (5 мкМ) необработанные и обработанные клетки вводили внутрицеребрально самцам крыс Sprague-Dawley, в возрасте 7-8 недель, весящих примерно 180-200 г. Животным проводили анестезию путем в/б инъекции 1,5 мг/кг веса тела ксилазина с последующим в/б введением 5 мг/кг веса керамина через 10 минут. В левый сосудистый ганглий в 3 мм от средней линии и на глубину 5 мм стереотаксически с помощью 10 мкм шприца Гамильтона вводили 1,5•105 клеток в 3 мкл фосфатнобуферного физраствора, заранее приготовленных с помощью трипсинизации. Ранее мы проследили на крысах, которых забивали в дни, следующие за имплантированием опухоли, что средний срок выживания составил 24 дня. Гистологический анализ мозга, полученного от всех животных, выявил, что имплантация опухолей была успешной в 100% случаев. За два часа до забоя всем крысам вводили 40 мг BrdU. Животных забивали путем декапитации. Весь мозг извлекали у всех животных и фиксировали погружением в 70% этанол на 2 дня при 4oC. Пролиферацию опухоли определяли посредством цитофлюорометрического анализа с бипараметрической ДНК (BrdU) двух полусфер мозга (см. табл.8).
b) Действие олигонуклеотидов in vivo на опухолегенность клеток глиомы C6.
Необработанные клетки глиомы M C6 готовили из 48-часовой культуры клеток в чашках Петри и стереотаксически вводили в левое полушарие мозга крыс, как описано выше. Сразу же после введения клеток в дорсальный карман подключали насос Alzet, содержащий или носитель, или смысловой олигонуклеотид, или антисмысловой (в достаточном количестве для доставки 5 мкМ концентрации олигонуклеотидов/сутки). Различные вещества доставляли к месту инъекции клеток посредством введения трубочки диаметром 0,5 мм. Весь статистический анализ выполняли, используя критерий Дункана (см. табл.9).
Пример 7. Приготовление фармацевтических композиций.
Соединения согласно изобретению могут быть лиофилизированы и использованы в лиофилизированной форме без дополнительных добавок или использованы, например, в форме липосом. Липосомы могут быть приготовлены любым традиционным способом, известным специалистам.
а) Лиофилизированная форма.
Порошок лиофилизированного олигонуклеотида согласно изобретению может быть использован без каких-либо добавок и, таким образом, такая композиция содержит 100% олигонуклеотиды. Такая форма композиции может быть введена местно в дозе 5 мг/кг/день.
б) Раствор катионных липосом.
Липосомы готовят с использованием олигонуклеотидов согласно изобретению в виде порошка (лиофилизированной формы) и катионным липидом N-(1-(2,3-диолцилокси)пропил)-N,N,N-триметиламмонийхлоридом.
Концентрация составляет 10 мг антисмысловых олигонуклеотидов на 1 мл раствора. Такой раствор может быть введен в дозе 1-10 мг/кг/день.
Перечень последовательностей
Информация по ПОСЛ ИД N 1
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 1
AGAAGCCATG AT
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 2
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N2
GGACGTGACT GT
(2) Информация по ПОСЛ ИД N3
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(С) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 3
AAGGACTAGC AG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 4
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число цепей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(IX) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 4
CAGGCAGTAG CA
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 5
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 5
CCCGTCGTCC AT
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 6
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 6
CTGTCCCTGT AC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 7
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(IX) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 7
ACTTCTCTCT CC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 8
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 8
ACTTGGTCCT AA
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 9
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 9
GCCATCATTC TG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 10
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) антисмысловая: да
(XI) описание последовательности: ПОСЛ ИД N 10
GATCTGGACC AC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 11
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 11
CTCAATAGCA TC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 12
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 12
GTTTTTGGGG TG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 13
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(IX) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 13
TCTCACATCC TC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 14
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 14
TTGTAAGAAC TG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 15
(1) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 15
GAAGTGCTTC TC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 16
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 16
GCCTCTTTC AG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 17
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 17
GGCATCTGTC AG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 18
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 18
CGGCTGGCAT CC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 19
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 19
GAACTGACAC AC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 20
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 20
ACGATCACAT CA
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 21
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 21
ATCAACATGC AG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 22
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 22
CTGCATATCG AC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 23
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 23
CAGTGCACCA GC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 24
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 24
CTGCAGCCTC GG
(2)Информация по ПОСЛ ИД N 25
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 25
ACTCTCTGGA CC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 26
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 26
CAAGAATCCT CG
(2)Информация по ПОСЛ ИД N 27
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 27
ACATCTGCTC TG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 28
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 28
TCTGTACTCG TC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 29
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 12 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 29
CTACAGTACA GC
(2)Информация по ПОСЛ ИД N 30
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 15 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 30
CCCGTCGTCC ATAGG
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 31
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 18 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 31
CCCGTCGTCC ATAGGGGA
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 32
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 21 пара оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 32
CCCGTCGTCC ATAGGGGACG C
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 33
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 15 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 33
GGACGTGACT GTTTC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 34
(A) длина: 18 пар оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 34
GGACGTGACT GTTTCCAC
(2) Информация по ПОСЛ ИД N 35
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 21 пара оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 35
GGACGTGACT GTTTCCACTG A
(2)Информация по ПОСЛ ИД N 36
(I) Характеристики последовательности:
(A) длина: 24 пары оснований
(B) тип: нуклеотидная
(C) число нитей: одинарная
(D) топология: линейная
(IV) Антисмысловая: да
(XI) Описание последовательности: ПОСЛ ИД N 36
GGACGTGACT GTTTCCACTG AGTC

Claims (13)

1. Олигонуклеотид, селективно гибритизирующийся с геном или продуктами транскрипции для субъединиц изопренилпротеин-трансфераз, имеющий формулу I
P-O-R,
где P либо отсутствует, либо представляет собой последовательность из одного или более оснований, выбранных из A (аденин), T (тимин), C (цитозин) или G (гуанин);
О является последовательностью, выбранной из
Figure 00000001

R либо отсутствует, либо представляет собой последовательность из одного или более оснований, выбранных A, T, C или G.
2. Олигонуклеотид по п.1, отличающийся тем, что гибридизируется с геном илипродуктамитранскрипциидлясубъединицα-и/илиβ-изопренил-протеин-трансфераз.
3. Олигонуклеотид по п.1 или 2, отличающийся тем, что изопренил-протеин-трансфераза выбирается из фарнезил-протеин-трансферазы, геранил-геранил-протеин-трансферазы типа 1 и геранил-геранил-протеин-трансферазы типа 2.
4. Олигонуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что включает 2 - 50 единиц.
5. Олигонуклеотид по п.4, отличающийся тем, что включает 10 - 20 единиц.
6. Олигонуклеотид по п.5, отличающийся тем, что включает 10 - 20 единиц.
7. Олигонуклеотид по п.6, отличающийся тем, что имеет формулу:
Figure 00000002

8. Олигонуклеотид по любому из предшествующих пунктов, отличающийся тем, что имеет модифицированный скелет.
9. Олигонуклеотид по п.8, отличающийся тем, что по крайней мере одно из нуклеотидных оснований модифицировано.
10. Олигонуклеотид по п.9, отличающийся тем, что модифицированное нуклеотидное основание имеет α-аномерную конформацию.
11. Олигонуклеотид по п.8, отличающийся тем, что по крайней мере одна из связывающих групп модифицирована.
12. Олигонуклеотид по п.8, отличающийся тем, что одно или оба положения 5' и 3' модифицированы.
13. Олигонуклеотид по п.12, отличающийся тем, что одно или положения 5' и 3' модифицированы путем замещения гидрофобной или защищающей группы.
14. Фармацевтическая композиция, обладающая антипролиферативным действием, содержащая в качестве активного ингредиента эффективное количество по крайней мере одного олигонуклеотида по любому из предшествующих пунктов в смеси с фармацевтически приемлемым разбавителем и/или носителем, пригодным для выбранного способа введения.
RU95110774/04A 1994-06-29 1995-06-28 Олигонуклеотиды, фармацевтическая композиция RU2112766C1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9413035A GB9413035D0 (en) 1994-06-29 1994-06-29 Antisense oligonucleeotides
GB9413035.8 1994-06-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU95110774A RU95110774A (ru) 1997-04-20
RU2112766C1 true RU2112766C1 (ru) 1998-06-10

Family

ID=10757497

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU95110774/04A RU2112766C1 (ru) 1994-06-29 1995-06-28 Олигонуклеотиды, фармацевтическая композиция

Country Status (25)

Country Link
US (1) US5856461A (ru)
EP (1) EP0692535A1 (ru)
JP (1) JPH0851985A (ru)
KR (1) KR960000914A (ru)
CN (1) CN1124142A (ru)
AU (1) AU689887B2 (ru)
BR (1) BR9503015A (ru)
CA (1) CA2152233A1 (ru)
CZ (1) CZ291496B6 (ru)
DZ (1) DZ1903A1 (ru)
FI (1) FI953170A (ru)
FR (2) FR2721930B1 (ru)
GB (2) GB9413035D0 (ru)
HU (1) HU219823B (ru)
IE (1) IE950477A1 (ru)
MA (1) MA23595A1 (ru)
NO (1) NO952601L (ru)
NZ (1) NZ272398A (ru)
OA (1) OA10221A (ru)
PL (1) PL309384A1 (ru)
RU (1) RU2112766C1 (ru)
SE (1) SE9502259L (ru)
SK (1) SK83895A3 (ru)
TN (1) TNSN95068A1 (ru)
ZA (1) ZA955288B (ru)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997002817A1 (en) * 1995-07-13 1997-01-30 University Of Cincinnati Compounds useful in the treatment of neurofibromatosis
CN1301731A (zh) * 1999-12-24 2001-07-04 上海博德基因开发有限公司 一种新的多肽——多异戊二烯基合成酶蛋白9和编码这种多肽的多核苷酸
AU2002230651A1 (en) * 2000-12-07 2002-06-18 Bristol-Myers Squibb Company Human g-protein coupled receptor expressed highly in kidney
US20030212017A1 (en) * 2002-05-10 2003-11-13 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of farnesyl transferase beta subunit expression
US7507808B2 (en) * 2002-12-12 2009-03-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of endothelial lipase expression
EP1667522B1 (en) 2003-09-09 2018-01-17 Geron Corporation Modified oligonucleotides for telomerase inhibition
US8785409B2 (en) * 2007-01-30 2014-07-22 Geron Corporation Compounds having anti-adhesive effects on cancer cells
JOP20200257A1 (ar) 2014-05-01 2017-06-16 Geron Corp تركيبات أوليجو نوكليوتيد وطرق لتحضيرها

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4571421A (en) * 1979-11-05 1986-02-18 Genentech, Inc. Mammalian gene for microbial expression
US5004803A (en) * 1988-11-14 1991-04-02 Genetics Institute, Inc. Production of procoagulant proteins
US5420245A (en) * 1990-04-18 1995-05-30 Board Of Regents, The University Of Texas Tetrapeptide-based inhibitors of farnesyl transferase
US5185248A (en) * 1990-05-08 1993-02-09 E. R. Squibb & Sons, Inc. Farnesyl-protein transferase assay for identifying compounds that block neoplastic transformation
KR100242671B1 (ko) * 1991-03-07 2000-03-02 고돈 에릭 유전학적으로 처리한 백신 균주
NZ244820A (en) * 1991-10-25 1994-01-26 Isis Pharmaceuticals Inc Oligonucleotide inhibitor of epstein-barr virus.
US5348853A (en) * 1991-12-16 1994-09-20 Biotronics Corporation Method for reducing non-specific priming in DNA amplification
US5585479A (en) * 1992-07-24 1996-12-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Antisense oligonucleotides directed against human ELAM-I RNA

Also Published As

Publication number Publication date
GB9513246D0 (en) 1995-09-06
HU9501913D0 (en) 1995-08-28
CN1124142A (zh) 1996-06-12
FR2721930B1 (fr) 1997-01-03
DZ1903A1 (fr) 2002-02-17
GB2290791A (en) 1996-01-10
EP0692535A1 (fr) 1996-01-17
FR2721827A1 (fr) 1996-01-05
FI953170A (fi) 1995-12-30
US5856461A (en) 1999-01-05
CA2152233A1 (en) 1995-12-30
NO952601L (no) 1996-01-02
SK83895A3 (en) 1996-05-08
SE9502259L (sv) 1995-12-30
FI953170A0 (fi) 1995-06-27
HU219823B (hu) 2001-08-28
RU95110774A (ru) 1997-04-20
AU689887B2 (en) 1998-04-09
ZA955288B (en) 1996-01-31
CZ168895A3 (en) 1996-05-15
HUT72133A (en) 1996-03-28
JPH0851985A (ja) 1996-02-27
NZ272398A (en) 1996-04-26
GB2290791B (en) 1998-08-05
SE9502259D0 (sv) 1995-06-21
AU2329995A (en) 1996-01-11
CZ291496B6 (cs) 2003-03-12
TNSN95068A1 (fr) 1996-02-06
BR9503015A (pt) 1996-06-04
MA23595A1 (fr) 1995-12-31
OA10221A (fr) 1997-09-19
IE950477A1 (en) 1996-01-10
NO952601D0 (no) 1995-06-28
KR960000914A (ko) 1996-01-25
FR2721930A1 (fr) 1996-01-05
GB9413035D0 (en) 1994-08-17
PL309384A1 (en) 1996-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4643906B2 (ja) 遺伝子発現の標的化阻害のための合成二本鎖オリゴヌクレオチド
EP2370577B1 (en) Usirna complexes
EP0690726B1 (en) Antisense inhibition of c-myc to modulate the proliferation of smooth muscle cells
US20150232847A1 (en) Targeting oligonucleotides and related methods for modulating fxn rna
JP2015523853A (ja) Ａｔｐ２ａ２発現を調節するための組成物及び方法
JP2015518712A (ja) Ｍｅｃｐ２発現を調節するための組成物及び方法
JP2015518713A (ja) Ｕｔｒｎ発現を調節するための組成物及び方法
JP2015518710A (ja) ヘモグロビン遺伝子ファミリー発現を調節するための組成物及び方法
JP2016521556A (ja) Ｆｏｘｐ３発現を調節するための組成物及び方法
JP2015523855A (ja) Ａｐｏａ１及びａｂｃａ１発現を調節するための組成物及び方法
JPH06506834A (ja) 閉鎖アンチセンス及びセンスオリゴヌクレオチドとそれらの適用
JP2015518714A (ja) 遺伝子発現を調節するための組成物及び方法
RU2112766C1 (ru) Олигонуклеотиды, фармацевтическая композиция
AU2016219052B2 (en) Compositions and methods for modulating RNA
JP4690649B2 (ja) 標的化された遺伝子発現阻害のための新規なオリゴリボヌクレオチド誘導体
US20030176384A1 (en) Antisense oligonucleotides for the inhibition of integrin alphav -subunit expression
Akhtar et al. Sequence and chemistry requirements for a novel aptameric oligonucleotide inhibitor of EGF receptor tyrosine kinase activity
CN114369130A (zh) 修饰的硫代寡核苷酸及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20030629