RU206813U1 - Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов - Google Patents

Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов Download PDF

Info

Publication number
RU206813U1
RU206813U1 RU2021117547U RU2021117547U RU206813U1 RU 206813 U1 RU206813 U1 RU 206813U1 RU 2021117547 U RU2021117547 U RU 2021117547U RU 2021117547 U RU2021117547 U RU 2021117547U RU 206813 U1 RU206813 U1 RU 206813U1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
biofilm
biofilms
microorganisms
film
cultivation
Prior art date
Application number
RU2021117547U
Other languages
English (en)
Inventor
Владимир Николаевич Герасимов
Дмитрий Владимирович Гриненко
Ольга Сергеевна Щербатая
Галина Георгиевна Харсеева
Original Assignee
Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ) filed Critical Федеральное бюджетное учреждение науки "Государственный научный центр прикладной микробиологии" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ПМБ)
Priority to RU2021117547U priority Critical patent/RU206813U1/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU206813U1 publication Critical patent/RU206813U1/ru

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12MAPPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M3/00Tissue, human, animal or plant cell, or virus culture apparatus
    • C12M3/04Tissue, human, animal or plant cell, or virus culture apparatus with means providing thin layers
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/14Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/24Methods of sampling, or inoculating or spreading a sample; Methods of physically isolating an intact microorganisms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Устройство представляет собой катушку c внешним диаметром основания D=44 мм, высотой H=56 мм и диаметром центрального стержня d=16 мм, в которую заправляется рентгенографическая плёнка ГОСТ ISO 4090-2011, в верхней части основания предусмотрена технологическая перфорация, предназначенная для беспрепятственного проникновения жидкой питательной среды между слоями плёнки, там же расположен подвес, необходимый для помещения устройства в микробиологическую колбу или в ферментер, где проводят культивирование микроорганизмов.

Description

Полезная модель относится к техническим устройствам для микробиологии, в частности к устройствам культивирования микроорганизмов, предназначенных для выращивания биопленок моно- и смешанных культур микробов на больших площадях поверхности с целью накопления больших объемов биомассы микроорганизмов в виде биопленок, для исследования биогенеза биопленок, для исследования различных биохимических процессов и структурных особенностей биопленок на стадиях их образования, созревания и лизиса, для исследования различных стрессовых воздействий, включая иммунные препараты, антибиотики, биоцины, дезинфектанты, бактериофаги, на сохранность биопленки и на морфо-функциональное состояние клеток в структуре микробной биоплёнки.
До настоящего времени все знания и достижения современной микробиологии о морфологии, физиологии, генетике и адаптационных свойствах микроорганизмов накоплены по результатам исследования планктонных форм микроорганизмов. Известно, что 99 % микроорганизмов в природных экосистемах существуют в виде прикрепленных к субстрату биопленок.
Биопленки - это физические структуры, образуемые микробами на поверхности раздела фаз: жидкость - твердая поверхность, жидкость - воздух, две несмешивающиеся жидкости, твердая поверхность - воздух. Биопленки могут формироваться бактериями одного вида или микробными сообществами. Зрелые, уже сформированные биопленки могут содержать обычные микробы, также покоящиеся или некультивируемые формы микроорганизмов. Биопленки могут образовываться на различных органах и тканях в организме человека и животных, а также на растениях.
Образование биопленок патогенными бактериями способствуют инфекционным поражениям большинства органов (верхних дыхательных путей, легких, сердца, почек, кожи, костей, системы пищеварения).
В связи с этим поиск, разработка и экспериментальный отбор эффективных лекарственных препаратов, иммунопрепаратов, ферментов, антибиотиков и дезинфектантов, предназначенных для подавления образования биопленок, разрушения биопленок и инактивации микробов внутри биопленок, является чрезвычайно важной и актуальной задачей микробиологии и медицины.
Известен способ получения биопленок микроорганизмов в лабораторных условиях при культивировании микробов в жидких питательных средах в колбах или в ферментерах, в которых помещают предметные или покровные стекла и тефлоновые блочки в качестве подложки для образования биопленок [Симонова И.Р., Головин С.Н., Веркина Л.М., Методы культивирования и изучения бактериальных биопленок. Естественные науки, 2017.-1, с.73-79].
Известный способ получения биопленок не позволяет получить большой объем биопленочной биомассы микроорганизмов для исследования в электронном микроскопе тонкой структуры биопленок, для выполнения биохимических и других исследований на биопленках и микробах.
Наиболее близким к предлагаемому устройству и способу культивирования биопленок микроорганизмов является способ культивирования биопленок микроорганизмов в лабораторных условиях в 96-луночных пластиковых планшетах. Суть метода состоит в том, что суспензию планктонной формы микроорганизмов вносят в лунки планшета и инкубируют в оптимальных условиях, затем планктонную форму микробов вместе с питательной средой удаляют из лунок, а биопленку визуализируют с помощью оптической или электронной микроскопии [Чернявский В.И. Бактериальные биопленки и инфекции (лекция)
ChernjavskyV.I. Bacterialbiofilmsandinfection (lecture). Annalsof MNechnikov Institute, 2013.-N].
Однако основными недостатками культивирования микробных биопленок в луночных пластиковых планшетах, являются:
отсутствие достаточного уровня биологической безопасности при выполнении работ по культивированию бактерий возбудителей опасных и особо опасных инфекций;
сложно, неудобно и небезопасно препарировать из лунок пластиковых планшетов биопленочную биомассу микроорганизмов для структурных, биохимических, иммунологических исследований;
не позволяет выращивать большое количество биопленочной биомассы микроорганизмов, необходимое для выполнения электронно-микроскопических исследований ультраструктуры биопленки, а также для количественной оценки морфо-функционального состояния бактерий в биопленке на разных стадиях её развития;
не позволяет получить большие объемы биопленочной биомассы, необходимых для испытания антибактериальных и биоцидных препаратов на структуру биопленок;
не обеспечивает стерильные условия при длительном культивировании микробов в луночных пластиковых планшетах;
не обеспечивает оптимальных условий питания и аэрации микробов при длительном культивировании.
Техническим результатом предлагаемого устройства является обеспечение биологической и технической безопасности при выполнении лабораторных работ по культивированию биопленок микроорганизмов, с более высокой производительностью, обеспечение стерильных условий культивирования микроорганизмов, обеспечение оптимальных условий питания и аэрации микробов при длительном культивировании, обеспечение условий для исследования действия различных факторов и средств на процесс пленкообразования и жизнедеятельность микробов, моделирование условий различных экосистем для исследования образования биопленок микроорганизмов, а также для экспериментального отбора средств лизиса, удаления и инактивации биопленок микроорганизмов.
Технический результат достигается тем, что предлагается устройство для культивирования биопленок микроорганизмов, изготовленное из нержавеющей стали AISI 304, которое представляет собой основание (1) в виде катушки c внешним диаметром D=44 мм, высотой H=56 мм и диаметром центрального стержня d=16 мм, в которую заправляется рентгенографическая плёнка (4) ГОСТ ISO 4090-2011 (без фотографической эмульсии) шириной 48 мм и длиной 300 мм.
В верхней части основания (1) предусмотрена технологическая перфорация, предназначенная для беспрепятственного проникновения жидкой питательной среды между слоями пленки (4). Там же расположен подвес (3), необходимый для помещения устройства в микробиологическую колбу или в ферментер.
Внутри катушки с двух сторон предусмотрена спиральная направляющая (5), в которую в заданном направлении (а) заправляется плёнка (4).
По бокам устройства с четырёх сторон расположены ограничители(6), служащие для усиления основания конструкции (1), а так же для предотвращения контакта верхнего слоя пленки с другими поверхностями.
Спецификация для фиг.1 (Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов):
1. Основание
2. Перфорация
3. Подвес
4. Пленка для культивирования
5. Спиральная направляющая
6. Ограничитель(4 шт.)
Пример 1. Для испытания возможностей предлагаемого лабораторного устройства для культивирования биопленок микроорганизмов в круглодонной микробиологической колбе объемом 3000 см3 с внутренним диаметром горлышка не менее 50 мм в асептических условиях вносят не менее1200 см3 стерильного мясо-пептонного бульона (МПБ) и 9-10 см3 суспензии бактерий Esherichia coli шт. 1257 в концентрации 1-2×107-8м..кл/см3 (по стандарту мутности). В качестве плёнки-подложки для образования биопленки используют рентгеновскую пленку без фотографической эмульсии. Для этого в стерильное устройство для культивирования биопленок заправляют стерильную пленку шириной 48 мм и длиной 300 мм. Устройство вносят в колбу с питательной средой и инкубируют при 37°С на качалке в течение 72 ч. Затем из колбы извлекают устройство, а из устройства извлекают пленку-подложку. Затем плёнку-подложку отмывают в 2-3 сменах стерильной дистиллированной воды для удаления планктонных форм бактерий и остатков питательной среды. Анатомическим скальпелем или лезвием бритвы в небольшом объеме 2,0% раствора глутарового альдегида с двух сторон рентгеновской плёнки-подложки снимают биопленочную биомассу бактерий. Биопленочная влажная биомасса бактерий в количестве 250-300 мкл препарируют для исследования в электронном микроскопе методом ультратонких срезов. Биомассу фиксируют в 4,0 % рабочем растворе глутарового альдегида на какодилатном буфере (рН 7,0-7,2) в течение 18 ч, дофиксируют в 1,0% растворе четырехокиси осмия на ацетат-вероналовом буфере (рН 6,0-6,2), затем образцы биомассы биопленок обезвоживают в градиенте концентрации этанола, пропитывают и заключают в смесь эпоксидных смол. Из пластиковых блоков с биоматериалом на ультрамикротоме изготавливают ультратонкие срезы и визуализируют в просвечивающем электронном микроскопе структуру биопленки и бактерий.
Таким образом, полученные данные визуализации тонкой структуры биомассы биопленки и бактерий Esherichia coli шт. 1257 свидетельствуют о том, что предлагаемое устройство культивирования биопленок микроорганизмов позволяет получать в необходимом объеме биопленочную биомассу для выполнения электронно-микроскопических исследований тонкой структуры биопленки и оценки морфо-функционального состояния микробов в её структуре.
Пример 2. Испытания предлагаемого лабораторного устройства для культивирования биопленок микроорганизмов проводят в коничской микробиологической колбе объемом 3000 см3 с внутренним диаметром горлышка не менее 50 мм. В колбу вносят примерно 1100 см3 стерильного мясо-пептонного бульона (МПБ) и 9-10 см3 суспензии бактерий Staphylococcus aureus шт. 906 в концентрации 1-2×108 м..кл/см3 (по стандарту мутности). В качестве плёнки-подложки для образования биопленки используют рентгеновскую пленку без фотографической эмульсии, для этого в стерильное устройство заправляют стерильную плёнку шириной 48 мм и длиной 290 мм. Устройство вносят в колбу с питательной средой и инкубируют при 37°С на качалке в течение 120 ч. Затем из колбы извлекают устройство, а из устройства плёнку-подложку. Проводят отмывку пленки-подложки в 2-3 сменах стерильной дистиллированной воды для удаления планктонных форм бактерий с поверхности плёнки и остатков культуральной жидкости. От плёнки-подложки отрезают 5-6 фрагментов плёнки с биопленкой размером 7×7 мм и помещают их в 4,0% раствор глутарового альдегида на какодилатном буфере на 24 ч для фиксации структуры биопленки и инактивации микробов. Поверхность фрагментов плёнки-подложки с интактной биопленкой после фиксации в глутаровом альдегиде и обезвоживания в градиенте концентрации этилового спирта, покрывают атомарным золотом в ионной напылительной установке. Образцы исследуют в сканирующем микроскопе с целью получения трехмерных изображений тонкой структуры поверхности микробной биопленки.
С обеих сторон рентгеновской пленки подложки анатомическим скальпелем в небольшом объеме 2,0% раствора глутарового альдегида снимаютвсю биомассу биопленки. Полученную биомассу биопленки бактерий в количестве 250-300 мкл влажной массы фиксируют и препарируют и для исследования в электронном микроскопе методом ультратонких срезов. В просвечивающем электронном микроскопе исследуют тонкую структуру биопленки и морфо-функциональное состояние бактерий в ее структуре.
Таким образом, испытание предлагаемого устройства культивирования биопленки микроорганизмов показало, что двухсторонняя поверхность плёнки-подложки в процессе культивирования бактерий Staphiloccocus aureus шт. 906 обрастает многослойной сплошной биопленкой. На образцах плёнки-подложки, покрытой биопленкой, сканирующей микроскопией визуализируют трехмерную тонкую структуру биопленки и бактерий в ее матриксе. В просвечивающем электронном микроскопе визуализируют тонкую структуру биопленки и бактерий в ее структуре.
Пример 3. Испытания предлагаемого лабораторного устройства для культивирования биопленок микроорганизмов проводят в ферментере объемом 10000 см3. В ферментер наливают 6000 см3 стерильного мясо-пептонного бульона (МПБ) и 600 см3 суспензии бактерий Pseudomonas aeruginosa в концентрации 1-2×107-8 м..кл/см3 (по стандарту мутности). В качестве основы для образования биопленки используют рентгеновскую плёнку без фотографической эмульсии, для этого в стерильное устройство для культивирования биопленок заправляют стерильную плёнку шириной 48 мм и длиной 280 мм. Устройство вносят в ферментер и инкубируют при 37°С в течение 48 ч. Затем из ферментера извлекают устройство, а из устройства - плёнку-подложку. Плёнку отмывают в 2-3 сменах стерильной дистиллированной воды для удаления планктонных форм бактерий и остатков культуральной жидкости. От плёнки-подложки отрезают 5-6 фрагментов с биопленкой размером 10×10 мм и помещают в 4,0% раствор глутарового альдегида на какодилатном буфере на 24 ч для фиксации структуры биопленки и инактивации микробов.
С обеих сторон рентгеновской плёнки-подложки анатомическим скальпелем стерильно снимают биопленку. Полученную биомассу биопленки бактерий фиксируют и препарируют для исследования в электронном микроскопе методом ультратонких срезов. В просвечивающем электронном микроскопе визуализируют и исследуют тонкую структуру биопленки и морфо-функциональное состояние бактерий в её матриксе.
Поверхность фрагментов плёнки-подложки с биопленкой после фиксации в глутаровом альдегиде, обезвоживания в градиенте концентрации ацетона, поверхность покрывают атомарным золотом в ионной напылительной установке. Затем образцы исследуют в сканирующем микроскопе с целью получения трехмерных изображений тонкой структуры поверхности биопленки и информацию о характере распределения бактерий в матриксе биопленки.
Испытание предлагаемого устройства культивирования биопленки микроорганизмов в ферментере показало, что двухсторонняя поверхность плёнки-подложки в процессе культивирования бактерий Pseudomonas aeruginosa обрастает многослойной сплошной биопленкой. На образцах рентгеновской плёнки-подложки, покрытой биопленкой, с помощью сканирующей электронной микроскопией визуализируют при различных увеличениях трехмерную тонкую структуру биопленки и бактерий в ее матриксе.
А накопление большого объема биопленочной биомассы на плёнках-подложках позволяет препарировать биомассу биопленок для ультраструктурных исследований в просвечивающем электронном микроскопе, а также для выполнения других различных лабораторных исследований.
Таким образом, испытания предлагаемого устройства культивирования биопленок различных микробов в микробиологических колбах и в ферментере объемом не более 10000 см3 показало, что в устройстве внутренняя и внешняя поверхности рентгеновской пленки-подложки в процессе культивирования микробов обрастают многослойной сплошной биопленкой. На образцах пленки-подложки, покрытой биопленкой, с помощью сканирующей электронной микроскопии всегда удается визуализировать при различных увеличениях трехмерную тонкую структуру биопленки, определить порядок распределения и упаковки микробов в матриксе биопленки, а также оценить структуру и морфометрические параметры микробов.
Предлагаемое лабораторное устройство позволяет в асептических и безопасных условиях обеспечить многократное увеличение полезной площади поверхности образования биопленки микробов и значительное увеличение количества (объема) биопленочной биомассы микробов для выполнения различных ультраструктурных, биохимических, иммунных исследований.
Предлагаемое лабораторное устройство культивирования биопленок микроорганизмов позволяет также на больших площадях поверхности плёнки-подложки моделировать различные условия образования микробных биопленок, а также проводить экспериментальный отбор антибиотиков, биоцинов, иммунологических препаратов, бактериофагов, дезинфектантов для разрушения биопленок и инактивации микробов в структуре биопленки.

Claims (1)

  1. Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов представляет собой катушку c внешним диаметром основания D=44 мм, высотой H=56 мм и диаметром центрального стержня d=16 мм, выполненную из нержавеющей стали AISI 304, в нижней части верхнего основания катушки и верхней части нижнего основания катушки предусмотрена технологическая перфорация, в которую заправляется рентгенографическая плёнка шириной 48 мм и длиной, равной 300 мм, без фотографической эмульсии, в верхней части катушки расположен подвес, необходимый для помещения устройства в микробиологическую колбу или в ферментер, где проводят культивирование микроорганизмов.
RU2021117547U 2021-06-17 2021-06-17 Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов RU206813U1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021117547U RU206813U1 (ru) 2021-06-17 2021-06-17 Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021117547U RU206813U1 (ru) 2021-06-17 2021-06-17 Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU206813U1 true RU206813U1 (ru) 2021-09-29

Family

ID=78000342

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2021117547U RU206813U1 (ru) 2021-06-17 2021-06-17 Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU206813U1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU220260U1 (ru) * 2023-05-29 2023-09-05 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) Устройство для культивирования биопленочных форм микроорганизмов

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US351046A (en) * 1886-10-19 Adjustable collar attachment for stoves
WO1994010299A1 (en) * 1992-11-05 1994-05-11 Sovmestnoe Rossiisko-Amerikanskoe Predpriyatie 'intermet Engineering' Method of subjecting a microbiological object to a magnetic field and a device for carrying out the same
SU1182817A1 (ru) * 1982-01-12 1994-10-15 Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности Способ выращивания культур клеток
RU2476889C2 (ru) * 2009-07-29 2013-02-27 Динекс Текнолоджиз, Инк. Планшет для образцов

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US351046A (en) * 1886-10-19 Adjustable collar attachment for stoves
SU1182817A1 (ru) * 1982-01-12 1994-10-15 Всесоюзный научно-исследовательский и технологический институт биологической промышленности Способ выращивания культур клеток
WO1994010299A1 (en) * 1992-11-05 1994-05-11 Sovmestnoe Rossiisko-Amerikanskoe Predpriyatie 'intermet Engineering' Method of subjecting a microbiological object to a magnetic field and a device for carrying out the same
RU2476889C2 (ru) * 2009-07-29 2013-02-27 Динекс Текнолоджиз, Инк. Планшет для образцов

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Chernjavsky V. I. Bacterialbiofimsandifection (lection). Annsolf MNechnikov Institute, 2013. -N. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU220260U1 (ru) * 2023-05-29 2023-09-05 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт химической биологии и фундаментальной медицины Сибирского отделения Российской академии наук (ИХБФМ СО РАН) Устройство для культивирования биопленочных форм микроорганизмов

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sachivkina et al. The evaluation of intensity of formation of biomembrane by microscopic fungi of the Candida genus
Nema et al. An animal cell culture: Advance technology for modern research
Garg et al. Biofilm models in endodontics-A narrative review
CN104152403B (zh) 一种建立鹅胚上皮细胞系的方法及建立的鹅胚上皮细胞系
CN108048327A (zh) 一种高效分离硅藻的新方法
RU206813U1 (ru) Устройство для культивирования биопленок микроорганизмов
Ferrarini et al. 3D-dynamic culture models of multiple myeloma
Sakai et al. Embryonic organ culture
CN106754364A (zh) 一种提高肺癌干细胞富集效率的细胞培养容器
Anton et al. Formalin Resistant Fungi Isolated from Cadavers at a Medical School’s Dissection Hall in Malaysia.
Masover et al. Detection of mycoplasmas in cell cultures by cultural methods
Suderman et al. Three-dimensional culture of Rhipicephalus (Boophilus) microplus BmVIII-SCC cells on multiple synthetic scaffold systems and in rotating bioreactors
RU2484446C1 (ru) Способ подготовки образцов биопленок микроорганизмов для исследования в сканирующем электронном микроскопе
KR20180113445A (ko) 실내공기의 미생물 오염 잠재성을 예측하는 온습도 응답 장치 및 그 제조 방법
RU2400746C2 (ru) Способ определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в пищевых продуктах
CN204177654U (zh) 用于生物原位印片法取样和微量染色的实验装置
Aguilar et al. Three-dimensional culture in a methylcellulose-based hydrogel to study the impact of stiffness on megakaryocyte differentiation
Pineda-Martos et al. Chemotropic assay for testing fungal response to strigolactones and strigolactone-Like compounds
CN117143799B (zh) 深海海笔体细胞的培养方法
TR2022015865A2 (tr) Ölü organi̇zmalardan alinan kemi̇k i̇li̇ği̇ mezanki̇mal kök hücreleri̇ni̇n ci̇vci̇v koryoallantoyi̇k membrane (cam) modeli̇nde üreti̇mi̇
RU2827170C1 (ru) Способ культивирования клеток гортани плодов свиньи для вирусологии
RU2640251C2 (ru) Способ получения питательной среды для транспортировки патологического материала, содержащего возбудитель некробактериоза животных
CN206553534U (zh) 一种提高肺癌干细胞富集效率的细胞培养容器
RU2328526C1 (ru) Способ выявления микобактерий туберкулеза крупного рогатого скота
RU2353654C1 (ru) Способ выделения чумного микроба бактериологическим методом из исследуемого материала (варианты)