RU2061485C1 - Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей - Google Patents
Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей Download PDFInfo
- Publication number
- RU2061485C1 RU2061485C1 RU92014708A RU92014708A RU2061485C1 RU 2061485 C1 RU2061485 C1 RU 2061485C1 RU 92014708 A RU92014708 A RU 92014708A RU 92014708 A RU92014708 A RU 92014708A RU 2061485 C1 RU2061485 C1 RU 2061485C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- inorganic salt
- chondroitin sulfate
- aqueous solution
- sulfate
- cholesterol
- Prior art date
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области производства медицинских препаратов, а именно получение биологически активного вещества - хондроитинсульфата. Сущность изобретения заключается в применении к процессу иного режима обезжиривания животного сырья - обработка водой при нагревании при 95-120oC или 0,1-3,5 М водносолевым раствором при нагревании, а также добавлением в экстрагирующую смесь гидроокисей щелочных или щелочноземельных металлов. Данный способ обеспечивает более полное выделение хондроитинсульфата из животной ткани с повышением выхода в 1,7-2,3 раза.
Description
Изобретение относится к области производства медицинских препаратов, а именно к получению биологически активного вещества хондроитинсульфата.
Хондроитинсульфат (ХС) относится к классу мукополисахаридов (глакозаминогликанов) полисахаридов животного происхождения. Структура ХС состоит из чередующихся остатков D-глюкороновой кислоты сульфатированного β--D-галактозамина [1] ХС широко применяется в составе лекарственных препаратов для лечения артологических и офтальмологических заболеваний, для заживления длительно не заживающих ран и т.п. Сырьем для получения ХС служат хрящи животных.
Известен способ получения ХС с применением протеолитических ферментов [2] Трахеи крупного рогатого скота или хрящи рыб измельчают, обезжиривают ферментативному гидролизу. Гидролизат отфильтровывают и осаждают ХС метанолом.
К недостаткам данного способа относится применение для обезжиривания и осаждения взрывоопасных и токсичных ацетона и метанола. Способ не обеспечивает необходимой чистоты продукта, в нем содержится значительное количество белков и пептидов.
Известен также способ выделения ХС путем экстракции водным раствором смеси хлористого калия и едкого калия, удаления их экстрактов балластных веществ действием уксусной кислоты уксусно-кислого калия и двухратного осаждения этанолам [3] Однако, такой способ не обеспечивает высокой степени чистоты ХС содержание белков и пептидов превышает 2% содержание ХС составляет около 75% [4]
Наиболее близок к предлагаемому способу (прототип) выделения ХС путем обезжиривания трахей крупного рогатого скота нагреванием в воде при 60-95oC, экстракции 0,5-3,5 М раствором хлорида натрия при 60-70oС, сорбции на анионите АМ-п из 0,3-1,0 М раствора хлорида натрия при температуре 60-70oС и рН 6,5-8,0 и элюировании 1,8-3,0 М раствором натрия [5] Данный способ обеспечивает выход ХС, не превышающий 12,1 г с 1 кг трахей.
Наиболее близок к предлагаемому способу (прототип) выделения ХС путем обезжиривания трахей крупного рогатого скота нагреванием в воде при 60-95oC, экстракции 0,5-3,5 М раствором хлорида натрия при 60-70oС, сорбции на анионите АМ-п из 0,3-1,0 М раствора хлорида натрия при температуре 60-70oС и рН 6,5-8,0 и элюировании 1,8-3,0 М раствором натрия [5] Данный способ обеспечивает выход ХС, не превышающий 12,1 г с 1 кг трахей.
Цель изобретения повышение выхода хондроитинсульфата.
Поставленная цель достигается тем, что обезжиривание проводят нагреванием в воде при 95-120oC или в 0,1-3,5 М водносолевом растворе при 60-120oC, экстракцию ХС 0,05-1,1 М водным раствором гидроокиси или водным раствором смеси гидроокиси (0,05-1,1 моль/л) и соли (0,1-3,5 моль/л).
Преимуществом предлагаемого способа по сравнению с прототипом в обеспечении более полного выделения ХС из животной ткани. Это достигается с помощью более высокой степени обезжиривания. Обработка водой при 95-120oC или 0,1-3,5 М водно-солевым раствором при 60-120oC обеспечивает снижение содержание жира до 2-3% по сравнению с 6-8% остаточного жира при обработке по способу, указанному в прототипе. Более высокая степень очистки животной ткани от жира облегчает процессы экстракции и сорбции ХС. Добавление в экстрагирующую смесь гидроокиси обеспечивает полное извлечение ХС из животной ткани.
Пример 1. 1 кг трахей крупного рогатого скота измельчают на мясорубке и переносят в колбу. Приливают 3 л 0,2 М раствора натрия хлористого. Нагревают смесь до 60oC и перемешивают при этой температуре 8 ч. По окончании удаляют с поверхности жир. К смеси добавляют 60 г гидроокиси натрия, нагревают смесь до 30oC и перемешивают при этой температуре 6 ч. Затем смесь нейтрализуют добавлением соляной кислоты до рН 5,0 и отделяют жмых. К экстракту добавляют 1,3 кг анионита марки АМ-п, нагревают до 50oC и перемешивают при этой температуре 8 ч. Отделяют АМ-п от экстракта, отмывают водой, добавляют 6 л 1,5 М раствора натрия хлористого и перемешивают при комнатной температуре 5 ч. Отделяют раствор от анионита, фильтруют и осаждают 12 л этанола. Выделяют осадок и сушат при 50oC. Выход ХС 27,0 г. Результаты анализа следующие: содержание ХС 98% [α] 23o, азот - 2,9% характеристическая вязкость [η] 0,23 дл/г.
Пример 2. Взвешивают 1 кг измельченных сухожилий свиней и переносят в колбу. Приливают 2,5 л 1,0 М раствора калия хлористого. Нагревают смесь до 100oC и перемешивают при этой температуре 6 ч. Затем удаляют жир. К смеси добавляют 10 г гидроокиси калия, нагревают до 70oC и перемешивают при этой температуре 8 ч. Затем смесь нейтрализуют добавлением соляной кислоты до рН 8,0 и отделяют жмых. К экстракту добавляют 1,5 кг анионита марки АВ 171 40/100, нагревают до 80oC и перемешивают 6 ч. Отделяют анионит от экстракта, отмывают водой, добавляют 6 л 2,8 М раствора натрия хлористого и перемешивают при комнатной температуре 6 ч. Отделяют раствор от анионита. К раствору добавляют 10 мл 30%-го раствора перманганата натрия, нагревают до обесцвечивания раствора, добавляют 20 г активированного угля и перемешивают 2 ч. По окончании фильтруют раствор и осаждают 12 л этанола. Осадок выделяют и сушат при 60oC. Выход ХС 21,0 г. Результаты анализа следующие: содержание ХС 97% [α] -22oC, азот 2,7% [η] 0,28 дл/г.
Пример 3. Взвешивают 1 кг измельченных хрящей быка и переносят их в автоклав. Приливают к ним 4,0 л воды, нагревают до 120oС и выдерживают 4 ч. Затем удаляют жир. К смеси добавляют 160 к гидроокиси кальция, охлаждают до 10oC и при периодическом перемешивании выдерживают в течение 48 ч. Затем смесь нейтрализуют добавлением уксусной кислоты до рН 7,5 и отделяют жмых. Экстракт обрабатывают 2,0 кг анионита Дауэкс 1 х 2 (фирмы "Sigma") при 30oC. Отделяют анионит от экстракта, отмывают водой и обрабатывают 8 л 2,0 М раствора ацетата натрия. К раствору добавляют 100 мл перекиси водорода, нагревают до обесцвечивания раствора, добавляют 30 г каолина и перемешивают 2 ч. По окончании фильтруют раствор и осаждают 16 л ацетона.
Результаты анализа следующие: содержание ХС 99,0% [α] - 20oС, азот 2,5% [η] 0,22 дл/г.
Таким образом, предлагаемый способ обеспечивает значительно более высокий выход ХС (21,0-27,0 г из 1 кг сырья) по сравнению с прототипом (12,1 г/кг) при сохранении высокой степени очистки ХС.
Литература
1. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды). М. Высшая школа, 1978. 256 с.
1. Степаненко Б.Н. Химия и биохимия углеводов (полисахариды). М. Высшая школа, 1978. 256 с.
2. Сакураи О. и др. Акцепт. заявка Японии, N 50-88291, опубл. 15.07.75
3. Касавина Б. С. и др. Авт. свид. СССР, N 157466, Бюл. изобр. N 18, 1963.
3. Касавина Б. С. и др. Авт. свид. СССР, N 157466, Бюл. изобр. N 18, 1963.
4. Зенкевич Г.Д. Лаб. дело, 1963, т.9, N 4, с.23-26.
5. Васюков С.Е. и др. Авт. свид. СССР N 153274, опубл. 22.08.89.
Claims (3)
- Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей путем экстракции хонороитинсульфата водным раствором смеси неорганической соли и щелочи, очистки экстракта от балластных веществ и осаждения целевого продукта спиртом, отличающийся тем, что, с целью снижения содержания в хондроитинсульфате примесей белковой природы и упрощения процесса, производят предварительное обезжиривание животной ткани нагреванием ее в воде или 0,1-3,5 M водном растворе неорганической соли при 60-120oС, экстракцию хондроитинсульфата ведут при 40-70oC, сорбируют хондроитинсульфат из экстракта на макропористом анионите при рН 6,0-8,0, 40-80oC и концентрации неорганической соли 0,3-1,1 моль/л, элюируют хондроитинсульфат с анионита 1,4-3,0 М водным раствором неорганической соли и очищают хондроитинсульфат обработкой в водном растворе окислителем и активированным углем.
- 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что неорганическая соль выбрана из группы, включающей хлориды, ацетаты, карбонаты или сульфаты щелочных или щелочно-земельных металлов.
- 3. Способ по пп.1-2, отличающийся тем, что окислитель выбран из группы, включающей перекись водорода, перманганат натрия или калия.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU92014708A RU2061485C1 (ru) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU92014708A RU2061485C1 (ru) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2061485C1 true RU2061485C1 (ru) | 1996-06-10 |
RU92014708A RU92014708A (ru) | 1998-06-10 |
Family
ID=20134402
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU92014708A RU2061485C1 (ru) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2061485C1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2478652C1 (ru) * | 2011-11-25 | 2013-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мурманский государственный технический университет" (ФГБОУВПО "МГТУ") | Электрохимический способ очистки хондроитина сульфата |
RU2693262C2 (ru) * | 2014-03-21 | 2019-07-01 | Альтергон С.А. | Способ очистки хондроитин сульфата |
-
1992
- 1992-12-28 RU RU92014708A patent/RU2061485C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Авторское свидетельство СССР N 157466, кл. А 61 К 35/22, 1978. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2478652C1 (ru) * | 2011-11-25 | 2013-04-10 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Мурманский государственный технический университет" (ФГБОУВПО "МГТУ") | Электрохимический способ очистки хондроитина сульфата |
RU2693262C2 (ru) * | 2014-03-21 | 2019-07-01 | Альтергон С.А. | Способ очистки хондроитин сульфата |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US3770720A (en) | Process for the extraction of alkali salts of deoxyribonucleic acid from animal organs | |
CN113234181B (zh) | 一种硫酸软骨素的制备方法 | |
JP2000506367A (ja) | ▲ii▼型コラーゲンの調製法 | |
RU2061485C1 (ru) | Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей | |
HU225240B1 (en) | Process for the production of heparin | |
US20060014256A1 (en) | Sodium chondroitin sulfate, chondroitin-sulfate-containing material and processes for producing the same | |
CA1106282A (en) | Arterial polysaccharide complex, process for its preparation and its use in human therapy | |
US3518243A (en) | Sulfonated derivatives of a glycopeptide extracted from animal organs,useful as drugs and a process for the preparation thereof | |
US4315923A (en) | Process for the production of organ extracts with high herparin content | |
KR100343781B1 (ko) | 가오리류로부터 콘드로이틴황산의 추출 및 정제방법 | |
JP3155746B1 (ja) | Ii型コラーゲンの製造方法 | |
RU1417244C (ru) | Способ получения вещества, восстанавливающего функцию предстательной железы | |
IE47041B1 (en) | Process for the recovery of heparin | |
KR100381363B1 (ko) | 김으로부터 고지혈증 개선효과가 있는 포피란을 추출 및정제하는 방법 | |
SU918294A1 (ru) | Способ получени терапевтически активного сложного полиэфира серной кислоты с мукополисахаридом из трахей крупного рогатого скота | |
CA1132904A (en) | Process for the recovery of heparin | |
KR100353396B1 (ko) | 시알산이결합된폴리펩타이드혼합물 | |
RU2139716C1 (ru) | Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных | |
KR102180261B1 (ko) | 돈육 부산물 유래 헤파린의 추출 방법 | |
SU1438042A1 (en) | Method of obtaining agent "evcalimin" possessing antimicrobial and antiviral activity | |
RU2115662C1 (ru) | Способ получения гиалуроновой кислоты | |
SU948384A1 (ru) | Способ получени средства дл диагностики заболеваний поджелудочной железы | |
EP0059182B1 (en) | A process for isolating aminoacylase enzyme from a mammal kidney extract | |
KR100618073B1 (ko) | 홍어연골 추출물의 추출방법 | |
SU825083A1 (ru) | Способ получения бежового гидролизата |