RU2139716C1 - Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных - Google Patents
Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных Download PDFInfo
- Publication number
- RU2139716C1 RU2139716C1 RU99103540A RU99103540A RU2139716C1 RU 2139716 C1 RU2139716 C1 RU 2139716C1 RU 99103540 A RU99103540 A RU 99103540A RU 99103540 A RU99103540 A RU 99103540A RU 2139716 C1 RU2139716 C1 RU 2139716C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- proteoglycan aggregates
- solution
- cartilage
- aggregates
- acid form
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине и к медицинской промышленности. Сущность изобретения: дополнительно проводят ферментативный гидролиз измельченных трахей сельскохозяйственных животных раствором 0,5% коллагеназы. Технической задачей изобретения является повышение качества, увеличение выхода и сокращение времени получения конечного продукта.
Description
Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности и может быть использовано для получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных, применяемых в качестве лекарственных средств.
Ближайшим аналогом изобретения является получение агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных путем измельчения ткани, экстрагирования раствором концентрированной соли, диализа экстракта, обработки диализата кислой формой ионообменной смолы, осаждения кислой формы целевого продукта (Патент РФ N 2096038, 1997 г.).
Технической задачей изобретения является создание способа получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных с высокой степенью очистки, увеличение выхода и сокращение времени получения агрегатов протеогликанов.
Технический результат, согласно изобретению, достигается тем, что в способе получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных путем измельчения ткани, экстрагирования раствором концентрированной соли, диализа экстракта, обработки диализата кислой формой ионообменной смолы, осаждения кислой формы целевого продукта.
Дополнительно измельченную ткань подвергают ферментативному гидролизу раствором 0,5% коллагеназы в течение 4 часов.
Дополнительная обработка измельченной ткани раствором 0,5% коллагеназы обусловлена тем, что плотная соединительная ткань хряща сельскохозяйственных животных содержит в основном структурный белок - коллаген, сохранность которого мешает последующему выходу (экстракции) агрегатов протеогликанов.
Мягкий ферментативный гидролиз специфически расщепляет коллаген, не влияет на качество и позволяет увеличить выход конечного продукта.
В качестве фермента выбрана коллагеназа, специфически расщепляющая коллагены 1-го и 3-го типов, так как они являются наиболее часто встречающимися в плотной соединительной ткани. Раствор 0,5% коллагеназы - это оптимальная реакционная концентрация для данного способа. Ферментативный гидролиз проводят при температуре 37oC, так как это оптимальная температура для действия фермента на субстракт. Гидролиз должен идти не более 4 часов, так как избыточное влияние ферментов может привести к частичному расщеплению серцевинного белка агрегатов протеогликанов, что снижает их качество.
Способ, согласно изобретению, осуществляется следующим образом. Хрящевые кольца трахеи сельскохозяйственных животных очищают и измельчают, проводят ферментативный гидролиз раствором 0,5% коллагеназы при температуре 37oC в течение 4 часов, охлаждают, заливают одним из трех концентрированных солевых растворов (4 М гуанидинхлорид, 2 М CaCl2, 3 М MgCl2) и ведут экстракцию при температуре 2-4oC в течение 34 - 48 часов при соотношении 1:15, экстракт отделяют от осадка центрифугированнием (3000 об/мин). Надосадочный раствор диализируют против дистиллированной воды, затем раствор агрегатов протеогликанов центрифугируют (5000 об/мин), обрабатывают кислотной формой ионообменной смолы. Полученную кислую форму осаждают этанолом, насыщенным ацетатом металла. Образовавшийся осадок основной солевой формы агрегатов протеогликанов собирают центрифугированнием, промывают этанолом и эфиром, затем высушивают.
Пример конкретного выполнения способа.
Хрящевые кольца трахей быков очищают, измельчают до получения гомогенной массы на мясорубке. Измельченную массу (200 г) гидролизируют раствором 0,5% коллагеназы при pH 7,2 и температуре 37oC в течение 4 часов. Далее охлаждают, заливают 4 М раствором гуанидинхлорида и ведут экстракцию агрегатов протеогликанов при температуре 2-4oC в течение 48 часов, постоянно перемешивая. Экстракт центрифугируют (3000 об/мин), удаляют белки. К раствору надосадка добавляют хлороформ до насыщения и проводят диализ против дистиллированной воды. Диализат центрифугируют (5000 об/мин), обрабатывают ионообменной смолой - кислой формой (H+ - формой pH 2,0 - 2,5) для перевода агрегатов протеогликанов в кислую форму. Целевой продукт осаждают из предварительно замороженного раствора агрегатов протеогликанов 2 - 3 объемами 96,6% этилового спирта, насыщенного ацетата натрия и получают основную солевую форму агрегатов протеогликанов. Затем смесь оставляют на 24-48 часов для осаждения и концентрирования. Осадок собирают на центрифуге (3000 об/мин), промывают один раз 80% спиртом и три раза 96,6% этиловым спиртом, охлажденным до температуры 15oC этанолом и три раза наркозным эфиром. Окончательно высушивают в эксикаторе в вакууме. Выход агрегатов протеогликанов при использовании способа, согласно изобретению, составляет 10-14% сырой массы исходной ткани.
Claims (1)
- Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных путем измельчения ткани, экстрагирования раствором концентрированной соли, диализа экстракта, обработки диализата кислотной формой ионообменной смолы, осаждение кислотной формы целевого продукта, отличающийся тем, что измельченную ткань дополнительно подвергают ферментативному гидролизу раствором 0,5% коллагеназы в течение 4 ч.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99103540A RU2139716C1 (ru) | 1999-02-23 | 1999-02-23 | Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99103540A RU2139716C1 (ru) | 1999-02-23 | 1999-02-23 | Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2139716C1 true RU2139716C1 (ru) | 1999-10-20 |
Family
ID=20216254
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99103540A RU2139716C1 (ru) | 1999-02-23 | 1999-02-23 | Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2139716C1 (ru) |
-
1999
- 1999-02-23 RU RU99103540A patent/RU2139716C1/ru active
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102690370B (zh) | 一种海洋鱼类鱼骨的综合利用工艺 | |
US3770720A (en) | Process for the extraction of alkali salts of deoxyribonucleic acid from animal organs | |
CN101037468A (zh) | 一种牡蛎活性肽的制备方法 | |
CN101904491B (zh) | 一种牛或羊硫酸软骨素生产工艺 | |
CN107267587A (zh) | 一种动物软骨生物提取的联产工艺方法 | |
CN102188692A (zh) | 一种骨肽组合物及其制剂、制备方法和应用 | |
RU2403288C1 (ru) | Способ получения высокополимерной рнк из сухих пекарских дрожжей | |
RU2139716C1 (ru) | Способ получения агрегатов протеогликанов из хряща сельскохозяйственных животных | |
CN106086139A (zh) | 一种利用淡水鱼头蛋白酶解制备鱼头多肽的方法 | |
CN111471120B (zh) | 一种硫酸软骨素的制备方法及应用 | |
CN103805663A (zh) | 一种从海洋产品中分离纯化提取活性肽的方法 | |
CN107163163A (zh) | 一种硫酸软骨素产品的加工方法 | |
KR100343781B1 (ko) | 가오리류로부터 콘드로이틴황산의 추출 및 정제방법 | |
RU2435862C1 (ru) | Способ получения высокополимерной рнк из отработанных пивных дрожжей | |
RU1417244C (ru) | Способ получения вещества, восстанавливающего функцию предстательной железы | |
RU2061485C1 (ru) | Способ выделения хондроитинсульфата из животных тканей | |
RU2658918C1 (ru) | Способ выделения гликозаминогликанов из вторичных коллагенсодержащих отходов | |
RU2096038C1 (ru) | Способ получения агрегатов протеогликанов из соединительной ткани животного (варианты) | |
CN103880917A (zh) | 鸡肠道抗菌肽的提取方法 | |
RU2139715C1 (ru) | Способ получения солей гликозаминогликанов | |
KR102180261B1 (ko) | 돈육 부산물 유래 헤파린의 추출 방법 | |
SU351547A1 (ru) | Способ получения инсулина-сырца | |
SU948384A1 (ru) | Способ получени средства дл диагностики заболеваний поджелудочной железы | |
SU825083A1 (ru) | Способ получения бежового гидролизата | |
RU2269913C1 (ru) | Способ получения хитина |