RU2020135966A - Способы получения клеток, экспрессирующих рекомбинантный рецептор, и родственные композиции - Google Patents

Способы получения клеток, экспрессирующих рекомбинантный рецептор, и родственные композиции Download PDF

Info

Publication number
RU2020135966A
RU2020135966A RU2020135966A RU2020135966A RU2020135966A RU 2020135966 A RU2020135966 A RU 2020135966A RU 2020135966 A RU2020135966 A RU 2020135966A RU 2020135966 A RU2020135966 A RU 2020135966A RU 2020135966 A RU2020135966 A RU 2020135966A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
nucleotides
chain
antigen
cells
Prior art date
Application number
RU2020135966A
Other languages
English (en)
Inventor
Блайт Д. Сейзер
Кристофер БОРДЖЕС
Стефен Майкл БЕРЛИ
Кристофер Хит НАЙ
Квини ВОНГ
Гордон Грант ВЕЛСТИД
Original Assignee
Джуно Терапьютикс, Инк.
Эдитас Медисин, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Джуно Терапьютикс, Инк., Эдитас Медисин, Инк. filed Critical Джуно Терапьютикс, Инк.
Publication of RU2020135966A publication Critical patent/RU2020135966A/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/17—Lymphocytes; B-cells; T-cells; Natural killer cells; Interferon-activated or cytokine-activated lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
    • A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
    • A61K39/4632—T-cell receptors [TCR]; antibody T-cell receptor constructs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
    • A61K39/464412—CD19 or B4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/464416—Receptors for cytokines
    • A61K39/464417—Receptors for tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin receptor [LTR], CD30
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70578—NGF-receptor/TNF-receptor superfamily, e.g. CD27, CD30, CD40, CD95
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1138—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against receptors or cell surface proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
    • C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the cancer treated
    • A61K2239/48—Blood cells, e.g. leukemia or lymphoma
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/33—Fusion polypeptide fusions for targeting to specific cell types, e.g. tissue specific targeting, targeting of a bacterial subspecies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/20—Type of nucleic acid involving clustered regularly interspaced short palindromic repeats [CRISPRs]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/2302—Interleukin-2 (IL-2)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/2307—Interleukin-7 (IL-7)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/20—Cytokines; Chemokines
    • C12N2501/23—Interleukins [IL]
    • C12N2501/2315—Interleukin-15 (IL-15)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/80—Vectors containing sites for inducing double-stranded breaks, e.g. meganuclease restriction sites

Claims (180)

1. Композиция, содержащая множество сконструированных Т-клеток, содержащих рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, кодированный трансгеном, и генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), где рекомбинантный рецептор способен связываться с антигеном, который ассоциирован с, является специфическим к и/или экспрессирован на клетке или ткани заболевания, расстройства или состояния, и где:
по меньшей мере, или более чем 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% или 90% клеток в композиции содержат генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в TRAC гене и/или TRBC гене; и/или, по меньшей мере, или более чем 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% или 90% клеток в композиции экспрессируют рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, и/или демонстрируют связывание с антигеном; и
трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, интегрированы в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
2. Композиция, содержащая множество сконструированных Т-клеток, содержащих рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, кодированные трансгеном, и генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), где рекомбинантный рецептор способен связываться с антигеном, который ассоциирован с, является специфическим к и/или экспрессирован на клетке или ткани заболевания, расстройства или состояния и где:
коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания рекомбинантного рецептора среди множества клеток ниже, чем 0,70, 0,65, 0,60, 0,55, 0,50, 0,45, 0,40, 0,35 или 0,30 или менее; и/или
коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания рекомбинантного рецептора среди множества клеток на, по меньшей мере, 100%, 95%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20% или 10% ниже чем коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания того же рекомбинантного рецептора, который интегрирован в геном случайной интеграцией.
3. Композиция по п.1 или 2, где сконструированные Т-клетки содержат, по меньшей мере, одно генетическое разрушение целевого сайта в гене TRAC.
4. Композиция по любому из пп.1-3, где сконструированные Т-клетки содержат, по меньшей мере, одно генетическое разрушение целевого сайта в гене TRBC.
5. Композиция по любому из пп.1-4, где сконструированные Т-клетки содержат, по меньшей мере, одно генетическое разрушение целевого сайта в гене TRAC и, по меньшей мере, одно генетическое разрушение целевого сайта в гене TRBC.
6. Композиция по любому из пп.1-5, где TRBC геном является один или оба из генов бета константы Т-клеточного рецептора 1 (TRBC1) или бета константы Т-клеточного рецептора 2 (TRBC2) гене.
7. Композиция по любому из пп.1-6, где генетическое разрушение производится нуклеазой «цинковый палец» (ZFN), TAL-эффекторной нуклеазой (TALEN) или CRISPR-Cas9 сочетанием, которые специфически связываются с, распознают или гибридизируют в целевой сайт.
8. Композиция по любому из пп.1-7, где генетическое разрушение производится CRISPR-Cas9 сочетанием, и CRISPR-Cas9 сочетание содержит направляющую РНК (нРНК), имеющую домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к, по меньшей мере, одному целевому сайту.
9. Композиция по п.8, где CRISPR-Cas9 сочетанием является рибонуклеопротеиновый (RNP) комплекс, содержащий нРНК и Cas9 белок.
10. Композиция по п.9, где генетическое разрушение каждой из множества сконструированных Т-клеток проводят RNP, введенным со множество T клеток электропорацией.
11. Композиция по любому из пп.1-10, где, по меньшей мере, один целевой сайт находится внутри экзона TRAC, TRBC1 и/или TRBC2 гена.
12. Композиция по любому из пп.8-11, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к целевому сайту в TRAC гене и содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из UCUCUCAGCUGGUACACGGC (SEQ ID NO:28), UGGAUUUAGAGUCUCUCAGC (SEQ ID NO:29), ACACGGCAGGGUCAGGGUUC (SEQ ID NO:30), GAGAAUCAAAAUCGGUGAAU (SEQ ID NO:31), GCUGGUACACGGCAGGGUCA (SEQ ID NO:32), CUCAGCUGGUACACGGC (SEQ ID NO:33), UGGUACACGGCAGGGUC (SEQ ID NO:34), GCUAGACAUGAGGUCUA (SEQ ID NO:35), GUCAGAUUUGUUGCUCC (SEQ ID NO:36), UCAGCUGGUACACGGCA (SEQ ID NO:37), GCAGACAGACUUGUCAC (SEQ ID NO:38), GGUACACGGCAGGGUCA (SEQ ID NO:39), CUUCAAGAGCAACAGUGCUG (SEQ ID NO:40), AGAGCAACAGUGCUGUGGCC (SEQ ID NO:41), AAAGUCAGAUUUGUUGCUCC (SEQ ID NO:42), ACAAAACUGUGCUAGACAUG (SEQ ID NO:43), AAACUGUGCUAGACAUG (SEQ ID NO:44), UGUGCUAGACAUGAGGUCUA (SEQ ID NO:45), GGCUGGGGAAGAAGGUGUCUUC (SEQ ID NO:46), GCUGGGGAAGAAGGUGUCUUC (SEQ ID NO:47), GGGGAAGAAGGUGUCUUC (SEQ ID NO:48), GUUUUGUCUGUGAUAUACACAU (SEQ ID NO:49), GGCAGACAGACUUGUCACUGGAUU (SEQ ID NO:50), GCAGACAGACUUGUCACUGGAUU (SEQ ID NO:51), GACAGACUUGUCACUGGAUU (SEQ ID NO:52), GUGAAUAGGCAGACAGACUUGUCA (SEQ ID NO:53), GAAUAGGCAGACAGACUUGUCA (SEQ ID NO:54), GAGUCUCUCAGCUGGUACACGG (SEQ ID NO:55), GUCUCUCAGCUGGUACACGG (SEQ ID NO:56), GGUACACGGCAGGGUCAGGGUU (SEQ ID NO:57) и GUACACGGCAGGGUCAGGGUU (SEQ ID NO:58).
13. Композиция по любому из пп.8-12, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, содержащий последовательность GAGAAUCAAAAUCGGUGAAU (SEQ ID NO:31).
14. Композиция по любому из пп.8-11, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к целевому сайту в одном или более из TRBC1 и TRBC2 генов и содержит a последовательность, выбранную из группы, состоящей из CACCCAGAUCGUCAGCGCCG (SEQ ID NO:59), CAAACACAGCGACCUCGGGU (SEQ ID NO:60), UGACGAGUGGACCCAGGAUA (SEQ ID NO:61), GGCUCUCGGAGAAUGACGAG (SEQ ID NO:62), GGCCUCGGCGCUGACGAUCU (SEQ ID NO:63), GAAAAACGUGUUCCCACCCG (SEQ ID NO:64), AUGACGAGUGGACCCAGGAU (SEQ ID NO:65), AGUCCAGUUCUACGGGCUCU (SEQ ID NO:66), CGCUGUCAAGUCCAGUUCUA (SEQ ID NO:67), AUCGUCAGCGCCGAGGCCUG (SEQ ID NO:68), UCAAACACAGCGACCUCGGG (SEQ ID NO:69), CGUAGAACUGGACUUGACAG (SEQ ID NO:70), AGGCCUCGGCGCUGACGAUC (SEQ ID NO:71), UGACAGCGGAAGUGGUUGCG (SEQ ID NO:72), UUGACAGCGGAAGUGGUUGC (SEQ ID NO:73), UCUCCGAGAGCCCGUAGAAC (SEQ ID NO:74), CGGGUGGGAACACGUUUUUC (SEQ ID NO:75), GACAGGUUUGGCCCUAUCCU (SEQ ID NO:76), GAUCGUCAGCGCCGAGGCCU (SEQ ID NO:77), GGCUCAAACACAGCGACCUC (SEQ ID NO:78), UGAGGGUCUCGGCCACCUUC (SEQ ID NO:79), AGGCUUCUACCCCGACCACG (SEQ ID NO:80), CCGACCACGUGGAGCUGAGC (SEQ ID NO:81), UGACAGGUUUGGCCCUAUCC (SEQ ID NO:82), CUUGACAGCGGAAGUGGUUG (SEQ ID NO:83), AGAUCGUCAGCGCCGAGGCC (SEQ ID NO:84), GCGCUGACGAUCUGGGUGAC (SEQ ID NO:85), UGAGGGCGGGCUGCUCCUUG (SEQ ID NO:86), GUUGCGGGGGUUCUGCCAGA (SEQ ID NO:87), AGCUCAGCUCCACGUGGUCG (SEQ ID NO:88), GCGGCUGCUCAGGCAGUAUC (SEQ ID NO:89), GCGGGGGUUCUGCCAGAAGG (SEQ ID NO:90), UGGCUCAAACACAGCGACCU (SEQ ID NO:91), ACUGGACUUGACAGCGGAAG (SEQ ID NO:92), GACAGCGGAAGUGGUUGCGG (SEQ ID NO:93), GCUGUCAAGUCCAGUUCUAC (SEQ ID NO:94), GUAUCUGGAGUCAUUGAGGG (SEQ ID NO:95), CUCGGCGCUGACGAUCU (SEQ ID NO:96), CCUCGGCGCUGACGAUC (SEQ ID NO:97), CCGAGAGCCCGUAGAAC (SEQ ID NO:98), CCAGAUCGUCAGCGCCG (SEQ ID NO:99), GAAUGACGAGUGGACCC (SEQ ID NO:100), GGGUGACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:101), GGUGACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:102), GUGACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:103), GACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:104), GAUACUGCCUGAGCAGCCGCCU (SEQ ID NO:105), GACCACGUGGAGCUGAGCUGGUGG (SEQ ID NO:106), GUGGAGCUGAGCUGGUGG (SEQ ID NO:107), GGGCGGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:108), GGCGGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:109), GCGGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:110), GGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:111), GGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:112), GCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:113), GGUGAAUGGGAAGGAGGUGCACAG (SEQ ID NO:114), GUGAAUGGGAAGGAGGUGCACAG (SEQ ID NO:115) и GAAUGGGAAGGAGGUGCACAG (SEQ ID NO:116).
15. Композиция по любому из пп.8-11 и 14, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, содержащий последовательность GGCCUCGGCGCUGACGAUCU (SEQ ID NO:63).
16. Композиция по любому из пп.1-15, где интеграция трансгена производится посредством матричного полинуклеотида, введенного в каждую из множества T клеток, где указанный матричный полинуклеотид содержит структуру [5’ плечо гомологии]-[трансген]-[3’ плечо гомологии].
17. Композиция по п.16, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии содержит последовательности нуклеиновых кислот, гомологичные последовательностям нуклеиновых кислот окружающим, по меньшей мере, один целевой сайт.
18. Композиция по п.16 или 17, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет между от около 50 и от около 100 нуклеотидов в длину, от около 100 и от около 250 нуклеотидов в длину, от около 250 и от около 500 нуклеотидов в длину, от около 500 и от около 750 нуклеотидов в длину, от около 750 и от около 1000 нуклеотидов в длину или от около 1000 и от около 2000 нуклеотидов в длину.
19. Композиция по любому из пп.16-18, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет от около 100 до около1000 нуклеотидов, от 100 до 750 нуклеотидов, от 100 до 600 нуклеотидов, от 100 до 400 нуклеотидов, от 100 до 300 нуклеотидов, от 100 до 200 нуклеотидов, от 200 до 1000 нуклеотидов, от 200 до 750 нуклеотидов, от 200 до 600 нуклеотидов, от 200 до 400 нуклеотидов, от 200 до 300 нуклеотидов, от 300 до 1000 нуклеотидов, от 300 до 750 нуклеотидов, от 300 до 600 нуклеотидов, от 300 до 400 нуклеотидов, от 400 до 1000 нуклеотидов, от 400 до 750 нуклеотидов, от 400 до 600 нуклеотидов, от 600 до 1000 нуклеотидов, от 600 до 750 нуклеотидов или от 750 до 1000 нуклеотидов в длину.
20. Композиция по любому из пп.16-19, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет от около 200, 300, 400, 500, 600, 700 или 800 нуклеотидов в длину или любое значение между любыми из вышеописанных.
21. Композиция по любому из пп.16-20, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет более чем от около 300 нуклеотидов в длину, необязательно, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет от около 400, 500 или 600 нуклеотидов в длину или любое значение между любыми из вышеописанных, необязательно, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет между от около 500 и от около 600 нуклеотидов в длину.
22. Композиция по любому из пп.16-21, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет более чем от около 300 нуклеотидов в длину.
23. Композиция по любому из пп.1-22, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, интегрированы в или рядом с целевой сайт в TRAC гене.
24. Композиция по любому из пп.1-22, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, интегрированы в или рядом с целевым сайтом в одном или обоих TRBC1 и TRBC2 генах.
25. Композиция по любому из пп.1-24, где рекомбинантным рецептором является химерный антигенный рецептор (CAR).
26. Композиция по п.25, где CAR содержит внеклеточный домен, содержащий домен антигенного связывания, специфический для антигена, необязательно, где доменом антигенного связывания является scFv; трансмембранный домен; цитоплазматический сигнальный домен, полученный из костимулирующей молекулы, которая необязательно является или содержит 4-1BB, необязательно, человеческий 4-1BB; и цитоплазматический сигнальный домен, полученный из первичной сигнальной ITAM-содержащей молекулы, которая необязательно является или содержит CD3дзэта сигнальный домен, необязательно, человеческий CD3дзэта сигнальный домен; и, необязательно где CAR дополнительно содержит спейсер между трансмембранным доменом и доменом антигенного связывания.
27. Композиция по любому из пп.1-24, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь.
28. Композиция по п.27, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR, содержащий альфа (TCRα) цепь и бета (TCRβ) цепь, и трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRα цепь и последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRβ цепь.
29. Композиция по п.28, где трансген дополнительно содержит один или более мультицистронных элементов, и мультицистронные элементы расположены между последовательностью нуклеиновых кислот, кодирующей TCRα или его часть, и последовательностью нуклеиновых кислот, кодирующей TCRβ или его часть.
30. Композиция по п.29, где мультицистронные элементы содержат последовательность, кодирующую элемент проскока рибосомы, выбранный из T2A, P2A, E2A или F2A или внутренний участок посадки рибосомы (IRES).
31. Композиция по любому из пп.1-24, где сконструированные клетки дополнительно содержат один или более вторых трансгенов, где вторые трансгены интегрированы в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
32. Композиция по п.31, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR, и трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую одну цепь рекомбинантного TCR и второй трансген содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую другую цепь рекомбинантного TCR.
33. Композиция по п.32, где трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRα цепь, и второй трансген содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRβ цепь или его часть.
34. Композиция по любому из пп.31-33, где интеграция второго трансгена производится посредством второго матричного полинуклеотида, введенного в каждую из множества T клеток, где указанный второй матричный полинуклеотид содержит структуру [второе 5’ плечо гомологии]-[один или более вторых трансгенов]-[второе 3’ плечо гомологии].
35. Композиция по любому из пп.31-34, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, интегрированы в или рядом с целевым сайтом в TRAC гене, TRBC1 гене или TRBC2 гене, и один или более вторых трансгенов интегрированы в или рядом с одним или более другими целевыми сайтами среди TRAC гена, TRBC1 гена или TRBC2 гена, и которые не интегрированы трансгеном, кодирующим рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь.
36. Композиция по любому из пп.31-35, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, интегрированы в или рядом с целевым сайтом в TRAC гене, и один или более вторых трансгенов интегрированы в или рядом с одним или более целевыми сайтами в TRBC1 гене и/или TRBC2 гене.
37. Композиция по любому из пп.31 и 34-36, где один или более вторых трансгенов кодирует молекулу, выбранную из костимулирующего лиганда, цитокина, растворимого однонитевого переменного фрагмента (scFv), иммуномодулирующего слитого белка, химерного рецептора переключения (CSR) или корецептора.
38. Композиция по любому из пп.1-37, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, дополнительно содержит гетерологичный регулирующий или контрольный элемент.
39. Композиция по любому из пп.31-37, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, и/или один или более вторых трансгенов независимо дополнительно содержат гетерологичный регулирующий или контрольный элемент.
40. Композиция по п.38 или 39, где гетерологичный регулирующий или контрольный элемент содержит гетерологичный промотор.
41. Композиция по п.40, где гетерологичным промотором является, или он содержит промотор человеческого фактора элонгации 1 альфа (EF1α) или MND промотор или их вариант.
42. Композиция по п.40, где гетерологичным промотором является индуцируемый промотор или репрессируемый промотор.
43. Композиция по любому из пп.28-42, где TCRα цепь содержит постоянную область (Cα) область, в которую введен один или более цистеиновых остатков и/или TCRβ цепь содержит aCβ область, в которую введен один или более цистеиновых остатков, где один или более введенных цистеиновых остатков способны образовывать один или более не нативных дисульфидных мостиков между альфа цепью и бета цепью.
44. Композиция по п.43, где введение одного или более цистеиновых остатков включает замещение не цистеинового остатка цистеиновым остатком.
45. Композиция по любому из пп.28-44, где Cα область содержит цистеин в положении, соответствующем положению 48 с нумерацией, указанной в любой из SEQ ID NO: 24; и/или Cβ область содержит цистеин в положении, соответствующем положению 57 с нумерацией, указанной в SEQ ID NO: 20.
46. Композиция по любому из пп.1-45, где заболеванием, расстройством или состоянием является инфекционное заболевание, аутоиммунное заболевание, воспалительное заболевание или опухоль или рак.
47. Композиция по любому из пп.1-46, где T клетки содержат CD8+ T клетки и/или CD4+ T клетки или их подтипы.
48. Композиция по любому из пп.1-47, где T клетки являются аутологичными субъекту.
49. Композиция по любому из пп.1-48, где T клетки являются аллогенными субъекту.
50. Композиция по любому из пп.1-49, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый носитель.
51. Способ получения генетически сконструированной иммунной клетки, включающий:
(a) введение в иммунную клетку одного или более агентов, где каждый из одного или более агентов независимо способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), тем самым вызывая генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта; и
(b) введение в иммунную клетку матричного полинуклеотида, содержащего трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или его цепь, где указанный рекомбинантный рецептор способен связываться с антигеном, который ассоциирован с, является специфическим к и/или экспрессирован на клетке или ткани заболевания, расстройства или состояния, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR),
где введение матричного полинуклеотида проводят после введения одного или более агента, способного вызывать генетическое разрушение.
52. Способ получения генетически сконструированной иммунной клетки, включающий:
введение в иммунную клетку, имеющую генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), матричного полинуклеотида, содержащего трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или его цепь, где указанный рекомбинантный рецептор способен связываться с антигеном, который ассоциирован с, является специфическим к и/или экспрессирован на клетке или ткани заболевания, расстройства или состояния, где генетическое разрушение вызвано одним или более агентами, где каждый из одного или более агентов независимо способен вызывать генетическое разрушение, и трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
53. Способ по п.51 или 52, где матричный полинуклеотид вводят сразу после или в течение от около 30 секунд, 1 минуты, 2 минут, 3 минут, 4 минут, 5 минут, 6 минут, 6 минут, 8 минут, 9 минут, 10 минут, 15 минут, 20 минут, 30 минут, 40 минут, 50 минут, 60 минут, 90 минут, 2 часов, 3 часов или 4 часов после введения одного или более агентов, способных вызывать генетическое разрушение, необязательно от около 2 часов после введения одного или более агентов.
54. Способ по любому из пп.1-53, где одна или более иммунных клеток содержит T-клетки.
55. Способ по п.54, где Т-клетки содержат CD4+ T-клетки, CD8+ T-клетки или CD4+ и CD8+ T-клетки.
56. Способ по п.55, где Т-клетки содержат CD4+ и CD8+ T-клетки, и соотношение CD4+ к CD8+ T-клеткам составляет от около 1:3 до около 3:1, необязательно, от около 1:2 до около 2:1, необязательно, от около 1:1.
57. Способ по любому из пп.51-56, где каждый из одного или более агентов содержат CRISPR-Cas9 сочетание, и CRISPR-Cas9 сочетание содержит направляющую РНК (нРНК), имеющую домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к, по меньшей мере, одному целевому сайту.
58. Способ по п.57, где CRISPR-Cas9 сочетанием является рибонуклеопротеиновый (RNP) комплекс, содержащий нРНК и Cas9 белок.
59. Способ по п.58, где концентрация RNP составляет или составляет от около 1 мкМ до около 5 мкМ, необязательно, где концентрация RNP составляет или составляет около 2 мкМ.
60. Способ по любому из пп.51-58, где введение одного или более агента проводят электропорацией.
61. Способ по любому из пп.51-60, где матричный полинуклеотид содержится в вирусном векторе, и введение матричного полинуклеотида проводят трансдукцией.
62. Способ по п.61, где вектором является AAV вектор.
63. Способ по любому из пп.51-62, где до введения одного или более агентов, способ включает инкубирование клеток, in vitro со стимулирующими агентами в условиях стимулирования или активации одной или более иммунных клеток.
64. Способ по п.63, где стимулирующие агенты содержат и анти-CD3 и/или анти-CD28 антитела, необязательно анти-CD3/анти-CD28 сферы, необязательно, где соотношение сфер к клеткам составляет около 1:1.
65. Способ по п.63 или 64, включающий удаление стимулирующих агентов из одной или более иммунных клеток до введения одного или более агентов.
66. Способ по любому из пп.51-65, где способ дополнительно включает инкубирование клеток до, во время или после введения одного или более агентов и/или введения матричного полинуклеотида с одним или более рекомбинантными цитокинами, необязательно, где один или более рекомбинантных цитокинов выбирают из группы, состоящей из IL-2, IL-7, и IL-15.
67. Способ по п.66, где один или более рекомбинантных цитокинов добавляют в концентрации, выбранной из концентрации IL-2 от или от около 10 Ед/мл до около 200 Ед/мл, необязательно, от около 50 МЕд/мл до около 100 Ед/мл; IL-7 в концентрации от 0,5 нг/мл до 50 нг/мл, необязательно от около 5 нг/мл до около 10 нг/мл и/или IL-15 в концентрации от 0,1 нг/мл до 20 нг/мл, необязательно от около 0,5 нг/мл до около 5 нг/мл.
68. Способ по п.66 или 67, где инкубирование проводят после введения одного или более агентов и введения матричного полинуклеотида в течение вплоть до приблизительно 24 часов, 36 часов, 48 часов, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или 21 дней, необязательно вплоть до или около 7 дней.
69. Способ по любому из пп.51-68, где рекомбинантным рецептором является химерный антигенный рецептор (CAR).
70. Способ по п.69, где CAR содержит внеклеточный домен, содержащий домен антигенного связывания, специфический для антигена, необязательно, где доменом антигенного связывания является scFv; трансмембранный домен; цитоплазматический сигнальный домен, полученный из костимулирующей молекулы, которая, необязательно, является или содержит 4-1BB, необязательно, человеческий 4-1BB; и цитоплазматический сигнальный домен полученный из первичной сигнальной ITAM-содержащей молекулы, которая, необязательно, является или содержит a CD3дзэта сигнальный домен, необязательно человеческий CD3дзэта сигнальный домен; и необязательно где CAR дополнительно содержит спейсер между трансмембранным доменом и доменом антигенного связывания.
71. Способ по любому из пп.51-68, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь.
72. Способ по п.71, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR, содержащий альфа (TCRα) цепь и бета (TCRβ) цепь, и трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRα цепь и последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRβ цепь.
73. Способ получения генетически сконструированной иммунной клетки, включающий:
(a) введение в иммунную клетку, одного или более агентов, где каждый из одного или более агентов независимо способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), тем самым вызывая генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта; и
(b) введение в иммунную клетку матричного полинуклеотида, содержащего трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор, которым является рекомбинантный Т-клеточный рецептор (TCR) или его антигенсвязывающий фрагмент или его цепь, где указанный трансген содержит гетерологичный промотор, и где трансген нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
74. Способ получения генетически сконструированной иммунной клетки, включающий:
введение в иммунную клетку, имеющую генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), матричного полинуклеотида, содержащего трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор, которым является рекомбинантный Т-клеточный рецептор (TCR) или его антигенсвязывающий фрагмент или его цепь, где указанный трансген содержит гетерологичный промотор, где генетическое разрушение вызвано одним или более агентами, где каждый из одного или более агентов независимо способен вызывать генетическое разрушение, и трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
75. Способ по любому из пп.51-74, где по меньшей мере, один из одного или более агентов способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене TRAC.
76. Способ по любому из пп.51-74, где по меньшей мере, один из одного или более агентов способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене TRBC.
77. Способ по любому из пп.51-74, где один или более агентов содержат, по меньшей мере, один агент, который способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене TRAC и, по меньшей мере, один агент, который способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене TRBC.
78. Способ получения генетически сконструированной иммунной клетки, включающий:
(a) введение в иммунную клетку, по меньшей мере, одного агента, который способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и, по меньшей мере, одного агента, который способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), тем самым вызывая генетическое разрушение целевых сайтов; и
(b) введение в иммунную клетку матричного полинуклеотида, содержащего трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор, которым является рекомбинантный Т-клеточный рецептор (TCR) или его антигенсвязывающий фрагмент или его цепь, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
79. Способ получения генетически сконструированной иммунной клетки, включающий:
введение в иммунную клетку, имеющую генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC), матричного полинуклеотида, содержащего трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор, которым является рекомбинантный Т-клеточный рецептор (TCR) или его антигенсвязывающий фрагмент или его цепь, где генетическое разрушение вызвано, по меньшей мере, одним агентом, который способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в TRAC гене и, по меньшей мере, одним агентом, который способен вызывать генетическое разрушение в TRBC гене, и трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
80. Способ по любому из пп.51-79, где TRBC геном является один или оба из генов бета константы Т-клеточного рецептора 1 (TRBC1) или бета константы Т-клеточного рецептора 2 (TRBC2).
81. Способ по любому из пп.51-56 и 59-80, где один или более агенты содержат нуклеазу «цинковый палец» (ZFN), TAL-эффекторную нуклеазу (TALEN) или и CRISPR-Cas9 сочетание, которые специфически связываются с, распознают или гибридизируют в целевой сайт.
82. Способ по любому из пп.51-56 и 59-81, где каждый из одного или более агентов содержат CRISPR-Cas9 сочетание, и CRISPR-Cas9 сочетание содержит направляющую РНК (нРНК), имеющую домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к, по меньшей мере, одному целевому сайту.
83. Способ по п.82, где CRISPR-Cas9 сочетанием является рибонуклеопротеиновый (RNP) комплекс, содержащий нРНК и Cas9 белок.
84. Способ по п.83, где концентрация RNP составляет или составляет от около 1 мкМ до около 5 мкМ, необязательно, где концентрация RNP составляет или составляет около 2 мкМ.
85. Способ по п.83 или 84, где RNP вводят через электропорацию.
86. Способ по любому из пп.51-76 и 80-85, где, по меньшей мере, один целевой сайт находится внутри экзона TRAC, TRBC1 и/или TRBC2 генов.
87. Способ по любому из пп.77-85, где по меньшей мере, один целевой сайт находится внутри экзона TRAC и экзона в TRBC1 или TRBC2 гене.
88. Способ по любому из пп.57-72 и 82-87, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к целевому сайту в TRAC гене и содержит последовательность, выбранную из группы, состоящей из UCUCUCAGCUGGUACACGGC (SEQ ID NO:28), UGGAUUUAGAGUCUCUCAGC (SEQ ID NO:29), ACACGGCAGGGUCAGGGUUC (SEQ ID NO:30), GAGAAUCAAAAUCGGUGAAU (SEQ ID NO:31), GCUGGUACACGGCAGGGUCA (SEQ ID NO:32), CUCAGCUGGUACACGGC (SEQ ID NO:33), UGGUACACGGCAGGGUC (SEQ ID NO:34), GCUAGACAUGAGGUCUA (SEQ ID NO:35), GUCAGAUUUGUUGCUCC (SEQ ID NO:36), UCAGCUGGUACACGGCA (SEQ ID NO:37), GCAGACAGACUUGUCAC (SEQ ID NO:38), GGUACACGGCAGGGUCA (SEQ ID NO:39), CUUCAAGAGCAACAGUGCUG (SEQ ID NO:40), AGAGCAACAGUGCUGUGGCC (SEQ ID NO:41), AAAGUCAGAUUUGUUGCUCC (SEQ ID NO:42), ACAAAACUGUGCUAGACAUG (SEQ ID NO:43), AAACUGUGCUAGACAUG (SEQ ID NO:44), UGUGCUAGACAUGAGGUCUA (SEQ ID NO:45), GGCUGGGGAAGAAGGUGUCUUC (SEQ ID NO:46), GCUGGGGAAGAAGGUGUCUUC (SEQ ID NO:47), GGGGAAGAAGGUGUCUUC (SEQ ID NO:48), GUUUUGUCUGUGAUAUACACAU (SEQ ID NO:49), GGCAGACAGACUUGUCACUGGAUU (SEQ ID NO:50), GCAGACAGACUUGUCACUGGAUU (SEQ ID NO:51), GACAGACUUGUCACUGGAUU (SEQ ID NO:52), GUGAAUAGGCAGACAGACUUGUCA (SEQ ID NO:53), GAAUAGGCAGACAGACUUGUCA (SEQ ID NO:54), GAGUCUCUCAGCUGGUACACGG (SEQ ID NO:55), GUCUCUCAGCUGGUACACGG (SEQ ID NO:56), GGUACACGGCAGGGUCAGGGUU (SEQ ID NO:57) и GUACACGGCAGGGUCAGGGUU (SEQ ID NO:58).
89. Способ по любому из пп.57-72 и 82-88, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, содержащий последовательность GAGAAUCAAAAUCGGUGAAU (SEQ ID NO:31).
90. Способ по любому из пп.57-72 и 82-87, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, который является комплементарным к целевому сайту в одном или более из TRBC1 и TRBC2 генов и содержит a последовательность, выбранную из группы, состоящей из CACCCAGAUCGUCAGCGCCG (SEQ ID NO:59), CAAACACAGCGACCUCGGGU (SEQ ID NO:60), UGACGAGUGGACCCAGGAUA (SEQ ID NO:61), GGCUCUCGGAGAAUGACGAG (SEQ ID NO:62), GGCCUCGGCGCUGACGAUCU (SEQ ID NO:63), GAAAAACGUGUUCCCACCCG (SEQ ID NO:64), AUGACGAGUGGACCCAGGAU (SEQ ID NO:65), AGUCCAGUUCUACGGGCUCU (SEQ ID NO:66), CGCUGUCAAGUCCAGUUCUA (SEQ ID NO:67), AUCGUCAGCGCCGAGGCCUG (SEQ ID NO:68), UCAAACACAGCGACCUCGGG (SEQ ID NO:69), CGUAGAACUGGACUUGACAG (SEQ ID NO:70), AGGCCUCGGCGCUGACGAUC (SEQ ID NO:71), UGACAGCGGAAGUGGUUGCG (SEQ ID NO:72), UUGACAGCGGAAGUGGUUGC (SEQ ID NO:73), UCUCCGAGAGCCCGUAGAAC (SEQ ID NO:74), CGGGUGGGAACACGUUUUUC (SEQ ID NO:75), GACAGGUUUGGCCCUAUCCU (SEQ ID NO:76), GAUCGUCAGCGCCGAGGCCU (SEQ ID NO:77), GGCUCAAACACAGCGACCUC (SEQ ID NO:78), UGAGGGUCUCGGCCACCUUC (SEQ ID NO:79), AGGCUUCUACCCCGACCACG (SEQ ID NO:80), CCGACCACGUGGAGCUGAGC (SEQ ID NO:81), UGACAGGUUUGGCCCUAUCC (SEQ ID NO:82), CUUGACAGCGGAAGUGGUUG (SEQ ID NO:83), AGAUCGUCAGCGCCGAGGCC (SEQ ID NO:84), GCGCUGACGAUCUGGGUGAC (SEQ ID NO:85), UGAGGGCGGGCUGCUCCUUG (SEQ ID NO:86), GUUGCGGGGGUUCUGCCAGA (SEQ ID NO:87), AGCUCAGCUCCACGUGGUCG (SEQ ID NO:88), GCGGCUGCUCAGGCAGUAUC (SEQ ID NO:89), GCGGGGGUUCUGCCAGAAGG (SEQ ID NO:90), UGGCUCAAACACAGCGACCU (SEQ ID NO:91), ACUGGACUUGACAGCGGAAG (SEQ ID NO:92), GACAGCGGAAGUGGUUGCGG (SEQ ID NO:93), GCUGUCAAGUCCAGUUCUAC (SEQ ID NO:94), GUAUCUGGAGUCAUUGAGGG (SEQ ID NO:95), CUCGGCGCUGACGAUCU (SEQ ID NO:96), CCUCGGCGCUGACGAUC (SEQ ID NO:97), CCGAGAGCCCGUAGAAC (SEQ ID NO:98), CCAGAUCGUCAGCGCCG (SEQ ID NO:99), GAAUGACGAGUGGACCC (SEQ ID NO:100), GGGUGACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:101), GGUGACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:102), GUGACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:103), GACAGGUUUGGCCCUAUC (SEQ ID NO:104), GAUACUGCCUGAGCAGCCGCCU (SEQ ID NO:105), GACCACGUGGAGCUGAGCUGGUGG (SEQ ID NO:106), GUGGAGCUGAGCUGGUGG (SEQ ID NO:107), GGGCGGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:108), GGCGGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:109), GCGGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:110), GGGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:111), GGCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:112), GCUGCUCCUUGAGGGGCU (SEQ ID NO:113), GGUGAAUGGGAAGGAGGUGCACAG (SEQ ID NO:114), GUGAAUGGGAAGGAGGUGCACAG (SEQ ID NO:115) и GAAUGGGAAGGAGGUGCACAG (SEQ ID NO:116).
91. Способ по любому из пп.57-72 и 82-87 и 90, где нРНК имеет домен целенаправленного воздействия, содержащий последовательность GGCCUCGGCGCUGACGAUCU (SEQ ID NO:63).
92. Способ по любому из пп.51-91, где матричный полинуклеотид содержит структуру [5’ плечо гомологии]-[трансген]-[3’ плечо гомологии].
93. Способ по п.92, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии содержит последовательности нуклеиновых кислот гомологичные последовательностям нуклеиновых кислот окружающим, по меньшей мере, один целевой сайт.
94. Способ по п.92 или п.93, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет между от около 50 и от около 100 нуклеотидов в длину, от около 100 и от около 250 нуклеотидов в длину, от около 250 и от около 500 нуклеотидов в длину, от около 500 и от около 750 нуклеотидов в длину, от около 750 и от около 1000 нуклеотидов в длину или от около 1000 и от около 2000 нуклеотидов в длину.
95. Способ по любому из пп.92-94, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет от или от около 100 до около 1000 нуклеотидов, от 100 до 750 нуклеотидов, от 100 до 600 нуклеотидов, от 100 до 400 нуклеотидов, от 100 до 300 нуклеотидов, от 100 до 200 нуклеотидов, от 200 до 1000 нуклеотидов, от 200 до 750 нуклеотидов, от 200 до 600 нуклеотидов, от 200 до 400 нуклеотидов, от 200 до 300 нуклеотидов, от 300 до 1000 нуклеотидов, от 300 до 750 нуклеотидов, от 300 до 600 нуклеотидов, от 300 до 400 нуклеотидов, от 400 до 1000 нуклеотидов, от 400 до 750 нуклеотидов, от 400 до 600 нуклеотидов, от 600 до 1000 нуклеотидов, от 600 до 750 нуклеотидов или от 750 до 1000 нуклеотидов в длину.
96. Способ по любому из пп.92-95, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет от около 200, 300, 400, 500, 600, 700 или 800 нуклеотидов в длину или любое значение между любыми из вышеописанных.
97. Способ по любому из пп.92-96, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет более чем от около 300 нуклеотидов в длину, необязательно, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеют от около 400, 500 или 600 нуклеотидов в длину или любое значение между любыми из вышеописанных.
98. Способ по любому из пп.92-97, где 5’ плечо гомологии и 3’ плечо гомологии независимо имеет более чем от около 300 нуклеотидов в длину.
99. Способ по любому из пп.51-98, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с целевым сайтом в TRAC гене.
100. Способ по любому из пп.51-99, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с целевым сайтом в одном или обоих TRBC1 и TRBC2 генах.
101. Способ по любому из пп.73-100, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR, содержащий альфа (TCRα) цепь и бета (TCRβ) цепь, и трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRα цепь, и последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRβ цепь.
102. Способ по п.72 или 101, где трансген дополнительно содержит один или более мультицистронных элементов, и мультицистронные элементы расположены между последовательностью нуклеиновых кислот, кодирующей TCRα или его часть, и последовательностью нуклеиновых кислот, кодирующей TCRβ или его часть.
103. Способ по п.102, где мультицистронные элементы содержат последовательность, кодирующую элемент проскока рибосомы, выбранный из T2A, P2A, E2A или F2A или внутренний участок посадки рибосомы (IRES).
104. Способ по любому из пп.51-103, где способ дополнительно включает введение в иммунную клетку одного или более вторых матричных полинуклеотидов, содержащих один или более вторых трансгенов, где второй трансген нацелен на интеграцию в или рядом с одним из, по меньшей мере, одного целевого сайта через репарацию, направляемую гомологией (HDR).
105. Способ по п.104, где рекомбинантным рецептором является рекомбинантный TCR, и трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую одну цепь рекомбинантного TCR, и второй трансген содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую другую цепь рекомбинантного TCR.
106. Способ по п.105, где трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRα цепь, и второй трансген содержит последовательность нуклеиновых кислот, кодирующую TCRβ цепь или ее часть.
107. Способ по любому из пп.104-106, где второй матричный полинуклеотид содержит структуру [второе 5’ плечо гомологии]-[один или более вторых трансгенов]-[второе 3’ плечо гомологии].
108. Способ по любому из пп.104-107, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с целевым сайтом в TRAC гене, TRBC1 гене или TRBC2 гене, и один или более вторых трансгенов нацелен на интеграцию в или рядом с одним или более другим целевым сайтом среди TRAC гена, TRBC1 гена или TRBC2 гена, и на который не нацелен трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь.
109. Способ по любому из пп.104-108, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с целевым сайтом в TRAC гене, и один или более вторых трансгенов нацелен на интеграцию в или рядом с одним или более целевыми сайтами в TRBC1 гене и/или TRBC2 гене.
110. Способ по любому из пп.104-109, где один или более вторых трансгенов кодирует молекулу, выбранную из костимулирующего лиганда, цитокина, растворимого однонитевого переменного фрагмента (scFv), иммуномодулирующего слитого белка, химерного рецептора переключения (CSR) или корецептора.
111. Способ по любому из пп.51-110, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, дополнительно содержит регулирующий или контрольный элемент.
112. Способ по любому из пп.104-111, где трансген, кодирующий рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, и/или один или более вторых трансгенов независимо дополнительно содержат гетерологичный регулирующий или контрольный элемент.
113. Способ по п.111 или 112, где гетерологичный регулирующий или контрольный элемент содержит гетерологичный промотор.
114. Способ по п.73, п.74 или 113, где гетерологичным промотором является или он содержит промотор человеческого фактора элонгации 1 альфа (EF1α) или MND промотор или их вариант.
115. Способ по п.73, 74 или 113, где гетерологичным промотором является индуцируемый промотор или репрессируемый промотор.
116. Способ по любому из пп.51-115, где TCRα цепь содержит постоянную область (Cα) область, в которую введен один или более цистеиновых остатков, и/или TCRβ цепь содержит Cβ область, в которую введен один или более цистеиновых остатков, где один или более введенных цистеиновых остатков способны образовывать один или более не нативных дисульфидных мостиков между альфа цепью и бета цепью.
117. Способ по п.116, где введение одного или более цистеиновых остатков включает замещение не цистеинового остатка цистеиновым остатком.
118. Способ по п.116 или 117, где Cα область содержит цистеин в положении, соответствующем положению 48 с нумерацией, указанной в любой из SEQ ID NO: 24; и/или Cβ область содержит цистеин в положении, соответствующем положению 57 с нумерацией, указанной в SEQ ID NO: 20.
119. Способ по любому из пп.51-118, где заболеванием, расстройством или состоянием является инфекционное заболевание, аутоиммунное заболевание, воспалительное заболевание или опухоль или рак.
120. Способ по любому из пп.51-119, где иммунные клетки содержат или обогащены Т-клетками.
121. Способ по п.120, где Т-клетки содержат CD8+ T клетки или их подтипы.
122. Способ по п.120, где Т-клетки содержат CD4+ T клетки или их подтипы.
123. Способ по п.120, где Т-клетки содержат CD4+ T клетки или их подтипы и CD8+ T-клетки или их подтипы.
124. Способ по п.123, где Т-клетки содержат CD4+ и CD8+ T клетки и соотношение CD4+ к CD8+ T клеткам составляет от около 1:3 до около 3:1, необязательно от около 1:2 до около 2:1, необязательно от около 1:1.
125. Способ по любому из пп.51-53 и 57-119, где иммунную клетку получают из мультипотентной или плюрипотентной клетки, которой необязательно является иПСК.
126. Способ по любому из пп.51-125, где иммунной клеткой является первичная клетка от субъекта.
127. Способ по п.126, где субъект имеет или предположительно имеет заболевание или расстройство.
128. Способ по п.126, где субъект является или предположительно является здоровым.
129. Способ по п.126 или 127, где иммунная клетка является аутологичной к субъекту.
130. Способ по любому из пп.126-128, где иммунная клетка является аллогенной к субъекту.
131. Способ по любому из пп.73-130, где матричные полинуклеотиды содержат один или более векторов, которые необязательно являются вирусными векторами.
132. Способ по п.131, где вектором является вирусный вектор, и вирусным вектором является AAV вектор.
133. Способ по п.62 или 132, где AAV вектор выбирают из группы, состоящей из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7 и AAV8 вектора.
134. Способ по п.62, 132 или 133, где AAV вектором является AAV2 или AAV6 вектор.
135. Способ по п.61 или 131, где вектором является вирусный вектор, и вирусным вектором является ретровирусный вектор, необязательно, лентивирусный вектор.
136. Способ по любому из пп.51-135, где матричный полинуклеотид имеет, по меньшей мере, от около 2500, 2750, 3000, 3250, 3500, 3750, 4000, 4250, 4500, 4760, 5000, 5250, 5500, 5750, 6000, 7000, 7500, 8000, 9000 или 10000 нуклеотидов в длину или любое значение между любыми из вышеописанных.
137. Способ по любому из пп.51-136, где полинуклеотид имеет от около 2500 и от около 5000 нуклеотидов, от около 3500 и от около 4500 нуклеотидов или от около 3750 нуклеотидов и от около 4250 нуклеотидов в длину.
138. Способ по любому из пп.73-137, где введение одного или более агентов, способных вызывать генетическое разрушение, и введение матричного полинуклеотида проводят одновременно или последовательно, в любом порядке.
139. Способ по любому из пп.73-138, где введение матричного полинуклеотида проводят после введения одного или более агентов, способных вызывать генетическое разрушение.
140. Способ по п.139, где матричный полинуклеотид вводят сразу после или в течение от около 30 секунд, 1 минуты, 2 минут, 3 минут, 4 минут, 5 минут, 6 минут, 6 минут, 8 минут, 9 минут, 10 минут, 15 минут, 20 минут, 30 минут, 40 минут, 50 минут, 60 минут, 90 минут, 2 часов, 3 часов или 4 часов после введения одного или более агентов, способных вызывать генетическое разрушение, необязательно от около 2 часов после введения одного или более агентов.
141. Способ по любому из пп.73-138, где введение одного или более агентов, способных вызывать генетическое разрушение, и введение матричного полинуклеотид проводят в одной экспериментальной реакции.
142. Способ по любому из пп.73-141, где до введения одного или более агентов, способ включает инкубирование клеток, in vitro со стимулирующими агентами в условиях стимулирования или активации одной или более иммунных клеток.
143. Способ по п.142, где стимулирующие агенты содержат и анти-CD3 и/или анти-CD28 антитела, необязательно анти-CD3/анти-CD28 сферы, необязательно, где соотношение сфер к клеткам составляет около 1:1.
144. Способ по п.142 или 143, включающий удаление стимулирующих агентов из одной или более иммунных клеток до введения одного или более агентов.
145. Способ по любому из пп.73-144, где способ дополнительно включает инкубирование клеток до, во время или после введения одного или более агентов и/или введения матричного полинуклеотида с одним или более рекомбинантными цитокинами, необязательно, где один или более рекомбинантных цитокинов выбирают из группы, состоящей из IL-2, IL-7, и IL-15.
146. Способ по п.145, где один или более рекомбинантных цитокинов добавляют в концентрации, выбранной из концентрации IL-2 от или от около 10 Ед/мл до около 200 Ед/мл, необязательно от около 50 МЕд/мл до около 100 Ед/мл; IL-7 в концентрации от 0,5 нг/мл до 50 нг/мл, необязательно от около 5 нг/мл до около 10 нг/мл и/или IL-15 в концентрации от 0,1 нг/мл до 20 нг/мл, необязательно от около 0,5 нг/мл до около 5 нг/мл.
147. Способ по п.145 или 146, где инкубирование проводят после введения одного или более агентов и введения матричного полинуклеотида в течение вплоть до приблизительно 24 часов, 36 часов, 48 часов, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 или 21 дней, необязательно вплоть до или около 7 дней.
148. Способ по любому из пп.51-147, где, по меньшей мере или более чем 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% или 90% клеток во множестве сконструированных клеток содержат генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене, кодирующем домен или область гена альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гена бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC).
149. Способ по любому из пп.51-148, где по меньшей мере или более чем 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% или 90% клеток во множестве сконструированных клеток экспрессируют рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент и/или демонстрируют связывание с антигеном.
150. Способ по любому из пп.51-149, где коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания рекомбинантного рецептора или его антигенсвязывающего фрагмента среди множества сконструированных клеток ниже, чем 0,70, 0,65, 0,60, 0,55, 0,50, 0,45, 0,40, 0,35 или 0,30 или менее.
151. Способ по любому из пп.51-150, где коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания рекомбинантного рецептора или его антигенсвязывающего фрагмента среди множества сконструированных клеток на, по меньшей мере, 100%, 95%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20% или 10% ниже чем коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания того же рекомбинантного рецептора, который интегрирован в геном случайной интеграцией.
152. Сконструированная клетка или множество сконструированных клеток, созданных с применением способа по любому из пп.51-151.
153. Композиция, содержащая сконструированные клетки или множество сконструированных клеток по п.152.
154. Композиция по п.153, где, по меньшей мере, или более чем 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% или 90% клеток в композиции содержат генетическое разрушение, по меньшей мере, одного целевого сайта в гене, кодирующем домен или область гена альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гена бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC).
155. Композиция по п.153 или 154, где, по меньшей мере, или более чем 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80% или 90% клеток в композиции экспрессируют рекомбинантный рецептор или его антигенсвязывающий фрагмент и/или демонстрируют связывание с антигеном.
156. Композиция по любому из пп.153-155, где коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания рекомбинантного рецептора или его антигенсвязывающего фрагмента или цепи, среди множества клеток, ниже чем 0,70, 0,65, 0,60, 0,55, 0,50, 0,45, 0,40, 0,35 или 0,30 или менее.
157. Композиция по любому из пп.153-156, где коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания рекомбинантного рецептора или его антигенсвязывающего фрагмента или цепи, среди множества клеток, на, по меньшей мере, 100%, 95%, 90%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40%, 30%, 20% или 10% ниже чем коэффициент вариации экспрессии и/или антигенного связывания того же рекомбинантного рецептора, который интегрирован в геном случайной интеграцией.
158. Композиция по любому из пп.153-157, дополнительно содержащая фармацевтически приемлемый носитель.
159. Способ лечения, включающий введение сконструированной клетки, множества сконструированных клеток по п.152, или композиции по любому из пп.1-50 и 153-158 субъекту, нуждающемуся в таковом, необязательно, где субъект имеет заболевание, расстройство или состояние, необязательно, где заболеванием, расстройством или состоянием является рак.
160. Применение сконструированных клеток, множества сконструированных клеток по п.152 или композиции по любому из пп.1-50 и 153-158 для лечения ракового заболевания, расстройства или состояния, необязательно, где заболеванием, расстройством или состоянием является рак.
161. Применение сконструированных клеток, множества сконструированных клеток по п.152 или композиции по любому из пп.1-50 и 153-158 в производстве лекарственного средства для лечения заболевания, расстройства или состояния, необязательно, где заболеванием, расстройством или состоянием является рак.
162. Сконструированные клетки или множество сконструированных клеток по п.152 или композиция по любому из пп.1-50 и 153-158 для применения для лечения ракового заболевания, расстройства или состояния, необязательно, где заболеванием, расстройством или состоянием является рак.
163. Набор, содержащий:
один или более агентов, где каждый из одного или более агентов независимо способен вызывать генетическое разрушение целевого сайта в гене альфа константы Т-клеточного рецептора (TRAC) и/или гене бета константы Т-клеточного рецептора (TRBC); и
матричный полинуклеотид, содержащий трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, где трансген, кодирующий рекомбинантный TCR или его антигенсвязывающий фрагмент или цепь, нацелен на интеграцию в или рядом с целевым сайтом через репарацию, направляемую гомологией (HDR),
и инструкции по проведению способа по любому из пп.51-151.
RU2020135966A 2018-04-05 2019-04-03 Способы получения клеток, экспрессирующих рекомбинантный рецептор, и родственные композиции RU2020135966A (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862653522P 2018-04-05 2018-04-05
US62/653,522 2018-04-05
PCT/US2019/025682 WO2019195492A1 (en) 2018-04-05 2019-04-03 Methods of producing cells expressing a recombinant receptor and related compositions

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2020135966A true RU2020135966A (ru) 2022-05-06

Family

ID=66429544

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020135966A RU2020135966A (ru) 2018-04-05 2019-04-03 Способы получения клеток, экспрессирующих рекомбинантный рецептор, и родственные композиции

Country Status (14)

Country Link
US (1) US20210017249A1 (ru)
EP (1) EP3775238A1 (ru)
JP (1) JP2021520202A (ru)
KR (1) KR20210029707A (ru)
CN (1) CN112585276A (ru)
AU (1) AU2019247200A1 (ru)
BR (1) BR112020020245A2 (ru)
CA (1) CA3094468A1 (ru)
IL (1) IL277702A (ru)
MA (1) MA52656A (ru)
MX (1) MX2020010459A (ru)
RU (1) RU2020135966A (ru)
SG (1) SG11202009313VA (ru)
WO (1) WO2019195492A1 (ru)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3080546A1 (en) 2017-10-03 2019-04-11 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules
CN112566698A (zh) 2018-04-05 2021-03-26 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞受体和表达该t细胞受体的工程化细胞
WO2020223470A1 (en) * 2019-04-30 2020-11-05 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Combination therapies
EP3808765A1 (en) * 2019-10-14 2021-04-21 ETH Zurich Cell line for tcr discovery and engineering and methods of use thereof
WO2021260186A1 (en) 2020-06-26 2021-12-30 Juno Therapeutics Gmbh Engineered t cells conditionally expressing a recombinant receptor, related polynucleotides and methods
WO2022072760A1 (en) * 2020-10-02 2022-04-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Hla class ii-restricted dq t cell receptors against ras with g13d mutation
EP4019538A1 (en) * 2020-12-22 2022-06-29 Charité - Universitätsmedizin Berlin Reprogramming immune cells by targeted integration of zeta-deficient chimeric antigen receptor transgenes
CN117693508A (zh) 2021-03-03 2024-03-12 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞疗法和dgk抑制剂的组合
BR112023022765A2 (pt) 2021-05-05 2024-01-02 Immatics Biotechnologies Gmbh Proteínas de ligação ao antígeno que ligam especificamente o prame
WO2023019185A1 (en) * 2021-08-10 2023-02-16 Gentibio, Inc. Compositions and methods for engineering stable tregs
WO2023056291A1 (en) * 2021-09-28 2023-04-06 Acrigen Biosciences Compositions and methods for nucleic acid modifications
WO2023069790A1 (en) * 2021-10-22 2023-04-27 Sana Biotechnology, Inc. Methods of engineering allogeneic t cells with a transgene in a tcr locus and associated compositions and methods
CN113717991B (zh) * 2021-11-01 2022-02-01 菁良基因科技(深圳)有限公司 一种编辑基因融合的方法
WO2023081900A1 (en) 2021-11-08 2023-05-11 Juno Therapeutics, Inc. Engineered t cells expressing a recombinant t cell receptor (tcr) and related systems and methods
WO2024054944A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a t cell therapy and continuous or intermittent dgk inhibitor dosing
CN116925236A (zh) * 2023-05-12 2023-10-24 上海恩凯细胞技术有限公司 嵌合转换受体及其应用

Family Cites Families (148)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4452773A (en) 1982-04-05 1984-06-05 Canadian Patents And Development Limited Magnetic iron-dextran microspheres
US4690915A (en) 1985-08-08 1987-09-01 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Adoptive immunotherapy as a treatment modality in humans
US4795698A (en) 1985-10-04 1989-01-03 Immunicon Corporation Magnetic-polymer particles
IN165717B (ru) 1986-08-07 1989-12-23 Battelle Memorial Institute
US5219740A (en) 1987-02-13 1993-06-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Retroviral gene transfer into diploid fibroblasts for gene therapy
US5052558A (en) 1987-12-23 1991-10-01 Entravision, Inc. Packaged pharmaceutical product
US5033252A (en) 1987-12-23 1991-07-23 Entravision, Inc. Method of packaging and sterilizing a pharmaceutical product
DE68919715T2 (de) 1988-12-28 1995-04-06 Stefan Miltenyi Verfahren sowie materialien zur hochgraduierten magnetischen abspaltung biologischer materialien.
US5200084A (en) 1990-09-26 1993-04-06 Immunicon Corporation Apparatus and methods for magnetic separation
DE4123760C2 (de) 1991-07-18 2000-01-20 Dade Behring Marburg Gmbh Seroreaktive Bereiche auf den HPV 16 Proteinen E1 und E2
US5436150A (en) 1992-04-03 1995-07-25 The Johns Hopkins University Functional domains in flavobacterium okeanokoities (foki) restriction endonuclease
US5487994A (en) 1992-04-03 1996-01-30 The Johns Hopkins University Insertion and deletion mutants of FokI restriction endonuclease
US5356802A (en) 1992-04-03 1994-10-18 The Johns Hopkins University Functional domains in flavobacterium okeanokoites (FokI) restriction endonuclease
US5323907A (en) 1992-06-23 1994-06-28 Multi-Comp, Inc. Child resistant package assembly for dispensing pharmaceutical medications
DE4228458A1 (de) 1992-08-27 1994-06-01 Beiersdorf Ag Multicistronische Expressionseinheiten und deren Verwendung
US6140466A (en) 1994-01-18 2000-10-31 The Scripps Research Institute Zinc finger protein derivatives and methods therefor
CA2681922C (en) 1994-01-18 2012-05-15 The Scripps Research Institute Zinc finger protein derivatives and methods therefor
EP2022856B1 (en) 1994-08-20 2011-09-14 Gendaq Limited Improvements in or relating to binding proteins for recognition of DNA
GB9824544D0 (en) 1998-11-09 1999-01-06 Medical Res Council Screening system
US5827642A (en) 1994-08-31 1998-10-27 Fred Hutchinson Cancer Research Center Rapid expansion method ("REM") for in vitro propagation of T lymphocytes
WO1996013593A2 (en) 1994-10-26 1996-05-09 Procept, Inc. Soluble single chain t cell receptors
WO1996018105A1 (en) 1994-12-06 1996-06-13 The President And Fellows Of Harvard College Single chain t-cell receptor
US5789538A (en) 1995-02-03 1998-08-04 Massachusetts Institute Of Technology Zinc finger proteins with high affinity new DNA binding specificities
US5840306A (en) 1995-03-22 1998-11-24 Merck & Co., Inc. DNA encoding human papillomavirus type 18
US20020150914A1 (en) 1995-06-30 2002-10-17 Kobenhavns Universitet Recombinant antibodies from a phage display library, directed against a peptide-MHC complex
DE19608753C1 (de) 1996-03-06 1997-06-26 Medigene Gmbh Transduktionssystem und seine Verwendung
US6451995B1 (en) 1996-03-20 2002-09-17 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Single chain FV polynucleotide or peptide constructs of anti-ganglioside GD2 antibodies, cells expressing same and related methods
US5925523A (en) 1996-08-23 1999-07-20 President & Fellows Of Harvard College Intraction trap assay, reagents and uses thereof
GB9710807D0 (en) 1997-05-23 1997-07-23 Medical Res Council Nucleic acid binding proteins
GB9710809D0 (en) 1997-05-23 1997-07-23 Medical Res Council Nucleic acid binding proteins
ATE533784T1 (de) 1997-10-02 2011-12-15 Altor Bioscience Corp Lösliche, einzelkettige proteine des t- zellrezeptors
ID28040A (id) 1998-05-19 2001-05-03 Avidex Ltd Reseptor sel t yang dapat larut
JP2002524081A (ja) 1998-09-04 2002-08-06 スローン − ケッタリング インスティチュート フォー キャンサー リサーチ 前立腺−特異的膜抗原に特異的な融合受容体およびその使用
US6140081A (en) 1998-10-16 2000-10-31 The Scripps Research Institute Zinc finger binding domains for GNN
US6410319B1 (en) 1998-10-20 2002-06-25 City Of Hope CD20-specific redirected T cells and their use in cellular immunotherapy of CD20+ malignancies
US6453242B1 (en) 1999-01-12 2002-09-17 Sangamo Biosciences, Inc. Selection of sites for targeting by zinc finger proteins and methods of designing zinc finger proteins to bind to preselected sites
US6534261B1 (en) 1999-01-12 2003-03-18 Sangamo Biosciences, Inc. Regulation of endogenous gene expression in cells using zinc finger proteins
US6599692B1 (en) 1999-09-14 2003-07-29 Sangamo Bioscience, Inc. Functional genomics using zinc finger proteins
WO2001040798A2 (en) 1999-12-06 2001-06-07 Sangamo Biosciences, Inc. Methods of using randomized libraries of zinc finger proteins for the identification of gene function
WO2001059450A2 (en) 2000-02-08 2001-08-16 Sangamo Biosciences, Inc. Cells expressing zinc finger protein for drug discovery
US20020061512A1 (en) 2000-02-18 2002-05-23 Kim Jin-Soo Zinc finger domains and methods of identifying same
US20040191260A1 (en) 2003-03-26 2004-09-30 Technion Research & Development Foundation Ltd. Compositions capable of specifically binding particular human antigen presenting molecule/pathogen-derived antigen complexes and uses thereof
WO2001088197A2 (en) 2000-05-16 2001-11-22 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for interaction trap assays
CA2410510A1 (en) 2000-06-02 2001-12-13 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Artificial antigen presenting cells and methods of use thereof
JP2002060786A (ja) 2000-08-23 2002-02-26 Kao Corp 硬質表面用殺菌防汚剤
JP5312721B2 (ja) 2000-11-07 2013-10-09 シティ・オブ・ホープ Ｃｄ１９特異的再指向免疫細胞
US7067317B2 (en) 2000-12-07 2006-06-27 Sangamo Biosciences, Inc. Regulation of angiogenesis with zinc finger proteins
GB0108491D0 (en) 2001-04-04 2001-05-23 Gendaq Ltd Engineering zinc fingers
US7070995B2 (en) 2001-04-11 2006-07-04 City Of Hope CE7-specific redirected immune cells
US20090257994A1 (en) 2001-04-30 2009-10-15 City Of Hope Chimeric immunoreceptor useful in treating human cancers
US20040224385A1 (en) 2001-08-20 2004-11-11 Barbas Carlos F Zinc finger binding domains for cnn
ATE290020T1 (de) 2001-08-31 2005-03-15 Avidex Ltd Löslicher t zell rezeptor
US7939059B2 (en) 2001-12-10 2011-05-10 California Institute Of Technology Method for the generation of antigen-specific lymphocytes
US7262054B2 (en) 2002-01-22 2007-08-28 Sangamo Biosciences, Inc. Zinc finger proteins for DNA binding and gene regulation in plants
US8106255B2 (en) 2002-01-23 2012-01-31 Dana Carroll Targeted chromosomal mutagenasis using zinc finger nucleases
US6992176B2 (en) 2002-02-13 2006-01-31 Technion Research & Development Foundation Ltd. Antibody having a T-cell receptor-like specificity, yet higher affinity, and the use of same in the detection and treatment of cancer, viral infection and autoimmune disease
EP1485075A4 (en) 2002-02-20 2006-04-26 Dyax Corp MHC-PEPTIDE COMPLEX BINDING LIGANDS
US20030170238A1 (en) 2002-03-07 2003-09-11 Gruenberg Micheal L. Re-activated T-cells for adoptive immunotherapy
AU2003218382B2 (en) 2002-03-21 2007-12-13 Sangamo Therapeutics, Inc. Methods and compositions for using zinc finger endonucleases to enhance homologous recombination
US7446190B2 (en) 2002-05-28 2008-11-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors
AU2003298574B2 (en) 2002-09-05 2008-04-24 California Institute Of Technology Use of chimeric nucleases to stimulate gene targeting
WO2004033685A1 (en) 2002-10-09 2004-04-22 Avidex Ltd Single chain recombinant t cell receptors
US20050129671A1 (en) 2003-03-11 2005-06-16 City Of Hope Mammalian antigen-presenting T cells and bi-specific T cells
US7888121B2 (en) 2003-08-08 2011-02-15 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for targeted cleavage and recombination
US8409861B2 (en) 2003-08-08 2013-04-02 Sangamo Biosciences, Inc. Targeted deletion of cellular DNA sequences
US7972854B2 (en) 2004-02-05 2011-07-05 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for targeted cleavage and recombination
US20090226474A1 (en) 2004-05-27 2009-09-10 Weidanz Jon A Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof
US20060034850A1 (en) 2004-05-27 2006-02-16 Weidanz Jon A Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof
US20090304679A1 (en) 2004-05-27 2009-12-10 Weidanz Jon A Antibodies as T cell receptor mimics, methods of production and uses thereof
ATE475669T1 (de) 2004-06-29 2010-08-15 Immunocore Ltd Einen modifizierten t-zellen-rezeptor exprimierende zellen
AU2005287278B2 (en) 2004-09-16 2011-08-04 Sangamo Biosciences, Inc. Compositions and methods for protein production
JP2008514685A (ja) 2004-10-01 2008-05-08 メディジーン リミテッド 治療剤に連結した、非天然型ジスルフィド鎖間結合を含有するｔ細胞レセプター
EP2765195A1 (en) 2006-05-25 2014-08-13 Sangamo BioSciences, Inc. Methods and compositions for gene inactivation
CA2651494C (en) 2006-05-25 2015-09-29 Sangamo Biosciences, Inc. Engineered cleavage half-domains
WO2008120203A2 (en) 2007-03-29 2008-10-09 Technion Research & Development Foundation Ltd. Antibodies and their uses for diagnosis and treatment of cytomegalovirus infection and associated diseases
AU2008233051B2 (en) 2007-03-30 2014-04-10 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Constitutive expression of costimulatory ligands on adoptively transferred T lymphocytes
WO2008133938A2 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Sangamo Biosciences, Inc. Targeted integration into the ppp1r12c locus
ES2640216T3 (es) 2007-12-07 2017-11-02 Miltenyi Biotec Gmbh Sistemas y métodos para procesamiento de células
US8479118B2 (en) 2007-12-10 2013-07-02 Microsoft Corporation Switching search providers within a browser search box
AU2009238629C1 (en) 2008-04-14 2015-04-30 Sangamo Therapeutics, Inc. Linear donor constructs for targeted integration
US20120164718A1 (en) 2008-05-06 2012-06-28 Innovative Micro Technology Removable/disposable apparatus for MEMS particle sorting device
JP5173594B2 (ja) 2008-05-27 2013-04-03 キヤノン株式会社 管理装置、画像形成装置及びそれらの処理方法
US8703489B2 (en) 2008-08-22 2014-04-22 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for targeted single-stranded cleavage and targeted integration
EP3156494B8 (en) 2008-12-04 2018-09-19 Sangamo Therapeutics, Inc. Genome editing in rats using zinc-finger nucleases
CA2777053A1 (en) 2009-10-06 2011-04-14 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Human single-chain t cell receptors
SI2496698T1 (sl) 2009-11-03 2019-07-31 City Of Hope Skrajšan epiderimalni receptor faktorja rasti (EGFRt) za selekcijo transduciranih T celic
US8956828B2 (en) 2009-11-10 2015-02-17 Sangamo Biosciences, Inc. Targeted disruption of T cell receptor genes using engineered zinc finger protein nucleases
SG177025A1 (en) 2010-06-21 2012-01-30 Agency Science Tech & Res Hepatitis b virus specific antibody and uses thereof
CA2788850C (en) 2010-02-09 2019-06-25 Sangamo Biosciences, Inc. Targeted genomic modification with partially single-stranded donor molecules
US8771985B2 (en) 2010-04-26 2014-07-08 Sangamo Biosciences, Inc. Genome editing of a Rosa locus using zinc-finger nucleases
CA2798988C (en) 2010-05-17 2020-03-10 Sangamo Biosciences, Inc. Tal-effector (tale) dna-binding polypeptides and uses thereof
CA2805442C (en) 2010-07-21 2020-05-12 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for modification of an hla locus
KR102062407B1 (ko) 2010-12-09 2020-01-03 더 트러스티스 오브 더 유니버시티 오브 펜실바니아 암을 치료하기 위한 키메릭 항원 수용체 변형 t 세포의 용도
BR112013024395B1 (pt) 2011-03-23 2021-10-26 Fred Hutchinson Cancer Research Center Composições adotivas de imunoterapia celular e método para fabricação da dita composição
PE20141271A1 (es) 2011-04-01 2014-10-08 Sloan Kettering Inst Cancer Anticuerpos tipo receptor de celulas t especificos para un peptido wt1 presentado por hla-a2
US20140115726A1 (en) 2011-04-05 2014-04-24 Cellectis New tale-protein scaffolds and uses thereof
US8398282B2 (en) 2011-05-12 2013-03-19 Delphi Technologies, Inc. Vehicle front lighting assembly and systems having a variable tint electrowetting element
ES2723181T3 (es) 2011-07-29 2019-08-22 Univ Pennsylvania Receptores de conmutación coestimulante
WO2013044008A2 (en) 2011-09-21 2013-03-28 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for regulation of transgene expression
AU2012328682B2 (en) 2011-10-27 2017-09-21 Sangamo Therapeutics, Inc. Methods and compositions for modification of the HPRT locus
SI2771357T1 (sl) * 2011-10-28 2018-11-30 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Genetsko T-celično receptorsko modificirane miši
BR112014011417B1 (pt) 2011-11-11 2021-10-13 Fred Hutchinson Cancer Research Center Polipeptídeo isolado capaz de elicitar uma resposta de célula t antígeno-específica para ciclina a1 humana, composição imunogênica compreendendo o referido polipeptídeo, bem como método para preparar células apresentadoras de antígeno, antígeno-pulsadas,e uso destas para superexpressão de ccna1
CA2854819C (en) 2011-11-16 2022-07-19 Sangamo Biosciences, Inc. Modified dna-binding proteins and uses thereof
ES2774160T3 (es) 2012-02-13 2020-07-17 Seattle Childrens Hospital D/B/A Seattle Childrens Res Institute Receptores de antígenos quiméricos biespecíficos y usos terapéuticos de los mismos
WO2013126726A1 (en) 2012-02-22 2013-08-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Double transgenic t cells comprising a car and a tcr and their methods of use
CN107557334B (zh) 2012-05-03 2021-06-25 弗雷德哈钦森癌症研究中心 增强亲和力的t细胞受体及其制备方法
RU2650819C2 (ru) 2012-05-07 2018-04-17 Сангамо Терапьютикс, Инк. Способы и композиции для опосредованной нуклеазой направленной интеграции трансгенов
EP3964567A1 (en) 2012-05-25 2022-03-09 Cellectis Methods for engineering allogeneic and immunosuppressive resistant t cell for immunotherapy
AU2013305838A1 (en) 2012-08-20 2015-02-26 Fred Hutchinson Cancer Center Method and compositions for cellular immunotherapy
WO2014055668A1 (en) 2012-10-02 2014-04-10 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Compositions and methods for immunotherapy
ES2824024T3 (es) 2012-10-10 2021-05-11 Sangamo Therapeutics Inc Compuestos modificadores de células T y usos de los mismos
AU2013355327A1 (en) 2012-12-05 2015-06-11 Sangamo Therapeutics, Inc. Methods and compositions for regulation of metabolic disorders
US9405601B2 (en) 2012-12-20 2016-08-02 Mitsubishi Electric Corporation In-vehicle apparatus and program
KR102363191B1 (ko) 2013-02-26 2022-02-17 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 면역치료용 조성물 및 방법
WO2014153470A2 (en) * 2013-03-21 2014-09-25 Sangamo Biosciences, Inc. Targeted disruption of t cell receptor genes using engineered zinc finger protein nucleases
CA2910489A1 (en) 2013-05-15 2014-11-20 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for treatment of a genetic condition
US9890393B2 (en) 2013-05-29 2018-02-13 Cellectis Methods for engineering T cells for immunotherapy by using RNA-guided CAS nuclease system
US9822162B2 (en) 2013-07-15 2017-11-21 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Anti-human papillomavirus 16 E6 T cell receptors
RU2713333C2 (ru) 2013-07-15 2020-02-04 Дзе Юнайтед Стейтс Оф Америка, Эз Репрезентед Бай Дзе Секретари, Департмент Оф Хелс Энд Хьюман Сёрвисез Способы получения т-клеток против антигена папилломавируса человека
US9108442B2 (en) 2013-08-20 2015-08-18 Ricoh Company, Ltd. Image forming apparatus
US20150098954A1 (en) 2013-10-08 2015-04-09 Elwha Llc Compositions and Methods Related to CRISPR Targeting
KR102228828B1 (ko) 2014-03-11 2021-03-16 셀렉티스 동종이형 이식에 양립성인 t-세포들을 만들어내는 방법
EP3800248A3 (en) 2014-04-18 2021-08-04 Editas Medicine, Inc. Crispr-cas-related methods, compositions and components for cancer immunotherapy
AU2015249371B2 (en) * 2014-04-24 2020-04-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Application of induced pluripotent stem cells to generate adoptive cell therapy products
CA2984484C (en) 2014-05-02 2024-01-23 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods of chimeric autoantibody receptor t cells
BR112016025849A2 (pt) 2014-05-08 2017-10-17 Chdi Foundation Inc métodos e composições para o tratamento da doença de huntington
JP6742991B2 (ja) 2014-05-29 2020-08-19 アメリカ合衆国 抗ヒトパピローマウイルス１６ ｅ７ ｔ細胞受容体
US9816074B2 (en) 2014-07-25 2017-11-14 Sangamo Therapeutics, Inc. Methods and compositions for modulating nuclease-mediated genome engineering in hematopoietic stem cells
RU2017102769A (ru) 2014-07-29 2018-08-28 Пфайзер Инк. EGFRvIII СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ ДЛЯ ИММУНОТЕРАПИИ РАКА
US9616090B2 (en) 2014-07-30 2017-04-11 Sangamo Biosciences, Inc. Gene correction of SCID-related genes in hematopoietic stem and progenitor cells
GB201417803D0 (en) * 2014-10-08 2014-11-19 Adaptimmune Ltd T cell receptors
JP6879910B2 (ja) 2014-10-31 2021-06-02 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア Ｃａｒｔ細胞における遺伝子発現の改変およびその使用
US9790490B2 (en) 2015-06-18 2017-10-17 The Broad Institute Inc. CRISPR enzymes and systems
CN108024544B (zh) 2015-07-13 2022-04-29 桑格摩生物治疗股份有限公司 用于核酸酶介导的基因组工程化的递送方法及组合物
JP6816133B2 (ja) * 2015-10-05 2021-01-20 プレシジョン バイオサイエンシズ，インク． 改変ヒトｔ細胞受容体アルファ定常領域遺伝子を含む遺伝子改変細胞
WO2017070429A1 (en) 2015-10-22 2017-04-27 Regents Of The University Of Minnesota Methods involving editing polynucleotides that encode t cell receptor
WO2017093969A1 (en) 2015-12-04 2017-06-08 Novartis Ag Compositions and methods for immunooncology
JP7128741B2 (ja) 2015-12-18 2022-08-31 サンガモ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｔ細胞受容体の標的化破壊
GB201604953D0 (en) * 2016-03-23 2016-05-04 Immunocore Ltd T cell receptors
MD3440105T2 (ro) * 2016-04-08 2022-09-30 Immunocore Ltd Receptori de celulă T
WO2017193107A2 (en) 2016-05-06 2017-11-09 Juno Therapeutics, Inc. Genetically engineered cells and methods of making the same
JP7193862B2 (ja) * 2016-08-03 2022-12-21 ワシントン・ユニバーシティ キメラ抗原受容体でのｔ細胞性悪性腫瘍の治療のためのｃａｒ－ｔ細胞の遺伝子編集
WO2018073393A2 (en) * 2016-10-19 2018-04-26 Cellectis Tal-effector nuclease (talen) -modified allogenic cells suitable for therapy
EP3592380A1 (en) * 2017-03-31 2020-01-15 Cellectis New universal chimeric antigen receptor t cells specific for cd22
EP4029943A1 (en) * 2017-05-08 2022-07-20 Precision Biosciences, Inc. Nucleic acid molecules encoding an engineered antigen receptor and an inhibitory nucleic acid molecule and methods of use thereof
JP7356354B2 (ja) * 2017-05-12 2023-10-04 クリスパー セラピューティクス アクチェンゲゼルシャフト 細胞の操作のための材料及び方法並びに免疫腫瘍学におけるその使用
JP2020529834A (ja) * 2017-06-30 2020-10-15 プレシジョン バイオサイエンシズ，インク． Ｔ細胞受容体アルファ遺伝子の改変されたイントロンを含む遺伝子改変ｔ細胞
CA3080546A1 (en) * 2017-10-03 2019-04-11 Juno Therapeutics, Inc. Hpv-specific binding molecules

Also Published As

Publication number Publication date
BR112020020245A2 (pt) 2021-04-06
CA3094468A1 (en) 2019-10-10
AU2019247200A2 (en) 2022-06-09
MA52656A (fr) 2021-02-17
KR20210029707A (ko) 2021-03-16
WO2019195492A1 (en) 2019-10-10
SG11202009313VA (en) 2020-10-29
IL277702A (en) 2020-11-30
JP2021520202A (ja) 2021-08-19
AU2019247200A1 (en) 2020-10-15
US20210017249A1 (en) 2021-01-21
MX2020010459A (es) 2021-01-20
CN112585276A (zh) 2021-03-30
EP3775238A1 (en) 2021-02-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2020135966A (ru) Способы получения клеток, экспрессирующих рекомбинантный рецептор, и родственные композиции
US11098325B2 (en) Adeno-associated viral vectors for gene therapy
RU2020136054A (ru) Т-клетки, экспрессирующие рекомбинантный рецептор, соответствующие полинуклеотиды и способы
Jena et al. Redirecting T-cell specificity by introducing a tumor-specific chimeric antigen receptor
US10975136B2 (en) Transposon-based transfection system for primary cells
Dotti et al. Fifteen years of gene therapy based on chimeric antigen receptors:“are we nearly there yet?”
Krug et al. Stability and activity of MCSP-specific chimeric antigen receptors (CARs) depend on the scFv antigen-binding domain and the protein backbone
CN114258429A (zh) 免疫效应细胞工程化和其用途
US20230061455A1 (en) Methods, compositions and components for crispr-cas9 editing of tgfbr2 in t cells for immunotherapy
EP3286210B1 (en) T cell receptor
CN113906133A (zh) 工程改造的iPSC和免疫效应细胞中的CD3重建
JPWO2019195492A5 (ru)
WO2007044033A9 (en) Therapeutic and diagnostic cloned mhc-unrestricted receptor specific for the muc1 tumor associated antigen
Tsukahara et al. The Tol2 transposon system mediates the genetic engineering of T-cells with CD19-specific chimeric antigen receptors for B-cell malignancies
CN114901693A (zh) 用于免疫效应细胞工程化的增强的嵌合抗原受体和其用途
KR20210053925A (ko) Car 발현 t 세포 및 car 발현 벡터
JP6990244B2 (ja) ヒトｃｄ１２３を標的とするキメラ受容体リガンド及びその応用
JPWO2010101249A1 (ja) Ｔ細胞の機能増強方法
CN114761425A (zh) 用于免疫效应细胞工程化的增强的嵌合抗原受体和其用途
EP3903884A1 (en) Modified tcr and production method therefor
CN112500497B (zh) Cltx-nkg2d双特异性嵌合抗原受体细胞及其制备方法和应用
US20230137729A1 (en) Methods, compositions and components for crispr-cas9 editing of cblb in t cells for immunotherapy
JP2021519107A (ja) 膜結合型ＩＬ−１０を発現する遺伝子的にリプログラミングされたＴｒｅｇ
CN110636849A (zh) 用于治疗al淀粉样变的经cs1靶向性嵌合抗原受体修饰的t细胞
BR112021014285A2 (pt) Sequências regulatórias de transcrição específicas de células e usos das mesmas