RU2020109904A - МОДИФИЦИРОВАННАЯ ДНК С ЗАМКНУТЫМИ КОНЦАМИ (зкДНК) - Google Patents

МОДИФИЦИРОВАННАЯ ДНК С ЗАМКНУТЫМИ КОНЦАМИ (зкДНК) Download PDF

Info

Publication number
RU2020109904A
RU2020109904A RU2020109904A RU2020109904A RU2020109904A RU 2020109904 A RU2020109904 A RU 2020109904A RU 2020109904 A RU2020109904 A RU 2020109904A RU 2020109904 A RU2020109904 A RU 2020109904A RU 2020109904 A RU2020109904 A RU 2020109904A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
ccdna
vector
itr
paragraphs
zcdna
Prior art date
Application number
RU2020109904A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2800026C2 (ru
Inventor
Роберт Майкл КОТИН
Озан Алкан
Аннализе Джонс
Дуглас Энтони КЕРР
Ара Карл МАЛАКИАН
Мэтью Джон СИММОНС
Тереза Л. РАЙТ
Original Assignee
Дженерейшен Био Ко.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Дженерейшен Био Ко. filed Critical Дженерейшен Био Ко.
Publication of RU2020109904A publication Critical patent/RU2020109904A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2800026C2 publication Critical patent/RU2800026C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A61K48/005—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy characterised by an aspect of the 'active' part of the composition delivered, i.e. the nucleic acid delivered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/64—General methods for preparing the vector, for introducing it into the cell or for selecting the vector-containing host
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/66—General methods for inserting a gene into a vector to form a recombinant vector using cleavage and ligation; Use of non-functional linkers or adaptors, e.g. linkers containing the sequence for a restriction endonuclease
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/50—Physical structure
    • C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
    • C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/14011—Baculoviridae
    • C12N2710/14111—Nucleopolyhedrovirus, e.g. autographa californica nucleopolyhedrovirus
    • C12N2710/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/48—Vector systems having a special element relevant for transcription regulating transport or export of RNA, e.g. RRE, PRE, WPRE, CTE
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
    • C12N2840/60—Vectors comprising a special translation-regulating system from viruses

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Claims (66)

1. Невирусный бескапсидный ДНК-вектор с ковалентно-замкнутыми концами (зкДНК-вектор), характеризующийся тем, что указанный зкДНК-вектор содержит по меньшей мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность, функционально расположенную между последовательностями асимметричных инвертированных концевых повторов (асимметричными ITR), причем по меньшей мере один из асимметричных ITR содержит функциональный сайт концевого разрешения и сайт связывания Rep.
2. ЗкДНК-вектор по п. 1, где указанный зкДНК-вектор при расщеплении рестрикционным ферментом, имеющим один сайт распознавания на указанном зкДНК-векторе, анализируемый с применением как нативного, так и денатурирующего гель-электрофореза, демонстрирует характеристические полосы линейной и непрерывной ДНК, по сравнению с линейными и прерывистыми ДНК-контролями.
3. ЗкДНК-вектор по пп. 1 или 2, где одна или более из последовательностей асимметричных ITR взяты из вируса, выбранного из парвовируса, депендовируса и аденоассоциированного вируса (AAV).
4. ЗкДНК-вектор по п. 3, где указанные асимметричные ITR взяты из разных вирусных серотипов.
5. ЗкДНК-вектор по п. 4, где указанные один или более асимметричных ITR взяты из серотипа AAV, выбранного из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11 и AAV12.
6. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-3, где одна или более из последовательностей асимметричных ITR являются синтетическими.
7. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-3 и 6, где один или более из указанных ITR не является ITR дикого типа.
8. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-7, где один или оба асимметричных ITR модифицированы делецией, инсерцией и/или заменой по меньшей мере в одной из областей ITR, выбранных из A, A’, B, B’, C, C’, D и D’.
9. ЗкДНК-вектор по п. 8, где указанная делеция, инсерция и/или замена приводит к делеции всей или части структуры «петля на стебле», в норме образуемой областями A, A’, B, B’ C или C’.
10. ЗкДНК-вектор по п. 8 или 9, где один или оба асимметричных ITR модифицированы делецией, инсерцией и/или заменой, которая приводит к делеции всей или части структуры «петля на стебле», в норме образуемой областями B и B’.
11. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 8-10, где один или оба асимметричных ITR модифицированы делецией, инсерцией и/или заменой, которая приводит к делеции всей или части структуры «петля на стебле», в норме образуемой областями C и C’.
12. ЗкДНК-вектор по п. 10 или 11, где один или оба асимметричных ITR модифицированы делецией, инсерцией и/или заменой, которая приводит к делеции части структуры «петля на стебле», в норме образуемой областями B и B’, и/или частью структуры «петля на стебле», в норме образуемой областями C и C’.
13. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-12, где один или оба асимметричных ITR содержат одну структуру «петля на стебле» в области, которая в норме содержит первую структуру «петля на стебле», образованную областями B и B’, и вторую структуру «петля на стебле», образованную областями C и C’.
14. ЗкДНК-вектор по п. 13, где один или оба асимметричных ITR содержат один «стебель» и две «петли» в области, которая в норме содержит первую структуру «петля на стебле», образованную областями B и B’, и вторую структуру «петля на стебле», образованную областями C и C’.
15. ЗкДНК-вектор по п. 13 или 14, где один или оба асимметричных ITR содержат один «стебель» и одну «петлю» в области, которая в норме содержит первую структуру «петля на стебле», образованную областями B и B’, и вторую структуру «петля на стебле», образованную областями C и C’.
16. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-15, где по меньшей мере один асимметричный ITR представляет собой модифицированный ITR AAV2, содержащий нуклеотидную последовательность, выбранную из: ITR на фиг. 26A или 26B, SEQ ID NOS: 101-499 или 545-547, ITR, имеющую последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную последовательности ITR на фиг. 26A или 26B, и ITR, имеющую последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную SEQ ID NO: 101-499 и 545-547.
17. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-16, где по меньшей мере один асимметричный ITR представляет собой модифицированный ITR AAV2, содержащий нуклеотидную последовательность SEQ ID NO. 2, 52, 63 или 64, или нуклеотидную последовательность, по меньшей мере на 95% идентичную SEQ ID NO. 2, 52, 63 или 64.
18. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-16, где 5’-ITR представляет собой ITR AAV дикого типа, а 3’-ITR содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 2, 64, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128,130, 132, 134, 469-483 и 546 и последовательностей ITR, показанных на фиг. 26A, и последовательностей, по меньшей мере на 95% идентичных любым из указанных выше последовательностей.
19. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-16, где 3’-ITR представляет собой ITR AAV дикого типа, а 5’-ITR содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 52, 63, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 484-499, 545 и 547 и последовательностей ITR, показанных на фиг. 26B, и последовательностей, по меньшей мере на 95% идентичных любым из указанных выше последовательностей.
20. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-16, где 5’-ITR содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 52, 63, 101, 103, 105, 107, 109, 111, 113, 115, 117, 119, 121, 123, 125, 127, 129, 131, 133, 484-499, 545 и 547, последовательностей ITR, показанных на фиг. 26B, и последовательностей, по меньшей мере на 95% идентичных любым из указанных выше последовательностей; а 3’-ITR содержит последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 2, 64, 102, 104, 106, 108, 110, 112, 114, 116, 118, 120, 122, 124, 126, 128,130, 132, 134, 469-483 и 546, последовательностей ITR, показанных на фиг. 26A, и последовательностей, по меньшей мере на 95% идентичных любым из указанных выше последовательностей.
21. ЗкДНК-вектор по п. 1, содержащий по меньшей мере два асимметричных ITR, выбранных из:
а. SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO:52; и
b. SEQ ID NO: 2 и SEQ ID NO: 51.
22. ЗкДНК-вектор по п. 1, содержащие пару асимметричных ITR, выбранных из:
a. SEQ ID NO:1 и SEQ ID NO:52; и
b. SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:51.
23. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-20, где один или оба асимметричных ITR содержат последовательность, отличную от SEQ ID NO: 2, 52, 63 64, 113, 114 и 557.
24. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-23, где вся гетерологичная нуклеотидную последовательность или ее часть находится под контролем по меньшей мере одного регуляторного переключателя.
25. ЗкДНК-вектор по п. 24, где по меньшей мере один регуляторный переключатель выбран из регуляторных переключателей, приведенных в таблице 11.
26. ЗкДНК-вектор по любому из пп. 1-25, где указанный вектор находится в наноносителе.
27. ЗкДНК-вектор по п. 26, где указанный наноноситель содержит липидную наночастицу (ЛНЧ).
28. Невирусный бескапсидный ДНК-вектор с ковалентно-замкнутыми концами (зкДНК-вектор) по любому из пп. 1-25, который получают способом, включающим следующие этапы:
a. инкубация популяции клеток насекомых, несущих экспрессионную конструкцию зкДНК, в присутствии по меньшей мере одного белка Rep, причем указанная экспрессионная конструкция зкДНК кодирует зкДНК-вектор, в условиях, эффективных для, и на протяжении времени, достаточного для того чтобы индуцировать продуцирование указанного зкДНК-вектора в клетках насекомых; и
b. выделение указанного зкДНК-вектора из клеток насекомых.
29. ЗкДНК-вектор по п. 28, где указанную экспрессионную конструкцию зкДНК выбирают из зкДНК-плазмиды, зкДНК-бакмиды и зкДНК-бакуловируса.
30. ЗкДНК-вектор по п. 28 или 29, где указанная клетка насекомого экспрессирует по меньшей мере один белок Rep.
31. ЗкДНК-вектор по п. 30, где по меньшей мере один белок Rep взят из вируса, выбранного из парвовируса, депендовируса и аденоассоциированного вируса (AAV).
32. ЗкДНК-вектор по п. 31, где по меньшей мере один белок Rep взят из серотипа AAV, выбранного из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11 и AAV12.
33. Экспрессионная конструкция зкДНК, которая кодирует зкДНК-вектор по любому из пп. 1-25.
34. Экспрессионная конструкция зкДНК по п. 33, которая представляет собой зкДНК-плазмиду, зкДНК-бакмиду или зкДНК-бакуловирус.
35. Клетка-хозяин, содержащая экспрессионную конструкцию зкДНК по п. 33 или 34.
36. Клетка-хозяин по п. 35, которая экспрессирует по меньшей мере один белок Rep.
37. Клетка-хозяин по п. 36, отличающаяся тем, что по меньшей мере один белок Rep взят из вируса, выбранного из парвовируса, депендовируса и аденоассоциированного вируса (AAV).
38. Клетка-хозяин по п. 37, отличающаяся тем, что по меньшей мере один белок Rep взят из серотипа AAV, выбранного из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV11 и AAV12.
39. Клетка-хозяин по любому из пп. 35-38, представляющая собой клетку насекомого.
40. Клетка-хозяин по п. 39, представляющая собой клетку Sf9.
41. Способ получения зкДНК-вектора, включающий:
a. инкубацию клетки-хозяина по любому из пп. 35-40 в условиях, эффективных для, и на протяжении времени, достаточного для того чтобы индуцировать продуцирование зкДНК-вектора; и
b. выделение указанной зкДНК из клеток-хозяев.
42. Способ лечения, предотвращения, облегчения, мониторинга или диагностики заболевания или нарушения у субъекта, включающий: введение нуждающемуся в этом субъекту композиции, содержащей зкДНК-вектор по любому из пп. 1-25, где по меньшей мере одну гетерологичную нуклеотидную последовательность выбрана для лечения, предотвращения, облегчения, диагностики или мониторинга указанного заболевания или нарушения.
43. Способ по п. 42, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность при транскрипции или трансляции корректирует аномальное количество эндогенного белка у указанного субъекта.
44. Способ по п. 42, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидную последовательность при транскрипции или трансляции корректирует аномальную функцию или активность эндогенного белка или пути у указанного субъекта.
45. Способ по любому из пп. 42-44, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность кодирует или содержит нуклеотидную молекулу, выбранную из РНКи, миРНК, микроРНК, днкРНК, и антисмыслового олиго- или полинуклеотида.
46. Способ по любому из пп. 42-44, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность кодирует белок.
47. Способ по п. 42, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность кодирует маркерный белок.
48. Способ по любому из пп. 42-46, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность кодирует агонист или антагонист эндогенного белка или пути, ассоциированного с указанным заболеванием или нарушением.
49. Способ по любому из пп. 42-46, где указанная по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность кодирует антитело.
50. Способ по пп. 42-49, где указанный зкДНК-вектор вводят в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
51. Способ доставки терапевтического белка субъекту, включающий введение субъекту композиции, содержащей зкДНК-вектор по любому из пп. 1-25, где по меньшей мере одна гетерологичная нуклеотидная последовательность кодирует терапевтический белок.
52. Способ по п. 51, где указанный терапевтический белок представляет собой терапевтическое антитело.
53. Набор, содержащий зкДНК-вектор по любому из пп. 1-25 и наноноситель, упакованные в контейнер с вкладышем в упаковку.
54. Набор для получения зкДНК-вектора, содержащий:
a. экспрессионную конструкцию, содержащую по меньшей мере один сайт рестрикции для инсерции по меньшей мере одной гетерологичной последовательности нуклеотидов, или регуляторного переключателя, или обоих, причем указанный по меньшей мере один сайт рестрикции функционально расположен между последовательностями асимметричных инвертированных концевых повторов (асимметричных ITR), и по меньшей мере один из асимметричных ITR содержит функциональный сайт концевого разрешения и сайт связывания Rep.
55. Набор по п. 54, который подходит для получения зкДНК-вектора по любому из пп. 1-25.
56. Набор по п.54 или 55, дополнительно содержащий популяцию клеток насекомых, лишенную кодирующих последовательностей вирусного капсида, где в присутствии белка Rep может индуциррваться продуцирование зкДНК-вектора.
57. Набор по любому из пп. 54-56, дополнительно содержащий вектор, содержащий последовательность полинуклеотидов, которая кодирует по меньшей мере один белок Rep, где указанный вектор подходит для экспрессии указанного по меньшей мере одного белка Rep в клетке насекомого.
RU2020109904A 2017-09-08 2018-09-07 МОДИФИЦИРОВАННАЯ ДНК С ЗАМКНУТЫМИ КОНЦАМИ (зкДНК) RU2800026C2 (ru)

Applications Claiming Priority (13)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762556329P 2017-09-08 2017-09-08
US201762556324P 2017-09-08 2017-09-08
US201762556335P 2017-09-08 2017-09-08
US201762556281P 2017-09-08 2017-09-08
US201762556319P 2017-09-08 2017-09-08
US201762556331P 2017-09-08 2017-09-08
US62/556,329 2017-09-08
US62/556,335 2017-09-08
US62/556,319 2017-09-08
US62/556,331 2017-09-08
US62/556,281 2017-09-08
US62/556,324 2017-09-08
PCT/US2018/049996 WO2019051255A1 (en) 2017-09-08 2018-09-07 CLOSED-ENDED DNA (CEDNA) MODIFIED

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2023117629A Division RU2023117629A (ru) 2017-09-08 2018-09-07 МОДИФИЦИРОВАННАЯ ДНК С ЗАМКНУТЫМИ КОНЦАМИ (зкДНК)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2020109904A true RU2020109904A (ru) 2021-10-08
RU2800026C2 RU2800026C2 (ru) 2023-07-14

Family

ID=

Also Published As

Publication number Publication date
JP2022190081A (ja) 2022-12-22
SG11202000698SA (en) 2020-03-30
MX2020002500A (es) 2020-09-17
WO2019051255A1 (en) 2019-03-14
CA3075168A1 (en) 2019-03-14
BR112020004151A2 (pt) 2020-09-08
IL272797A (en) 2020-04-30
AU2018327348A1 (en) 2020-02-20
US20200283794A1 (en) 2020-09-10
PH12020500465A1 (en) 2021-01-25
JP2020532981A (ja) 2020-11-19
KR20200051011A (ko) 2020-05-12
EP3678710A1 (en) 2020-07-15
CN111132699A (zh) 2020-05-08
EP3678710A4 (en) 2021-06-09
MA50100A (fr) 2020-07-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2020532981A5 (ru)
JP7395550B2 (ja) 新規アデノ随伴ウイルスキャプシドタンパク質
JP2022190081A5 (ru)
US20180289757A1 (en) Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof
RU2018116076A (ru) Модифицированные гены атаксии фридрейха и векторы для генной терапии
CN101522903B (zh) 具有重叠开放阅读框的基因在昆虫细胞中的表达及其方法和组合物
JP6366581B2 (ja) 改変されたアデノ随伴ウイルスベクター組成物
CA2530029C (en) Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof
FI3684423T3 (fi) Adenoassesioidun viruksen kapsidivariantteja ja niiden käyttömenetelmiä
RU2018119710A (ru) Кодирующие фактор viii варианты с пониженным содержанием cpg, композиции и способы, и применение в лечении нарушений гемостаза
JP2021003120A5 (ru)
BR112020023292A2 (pt) vírus adeno-associado (aav), composição, método para a entrega de um transgene a uma célula, uso do aav, método para o tratamento de um indivíduo, vetor, célula, método para a produção de um vírus adeno-associado (aav), vírus adeno-associado (aav)
JP7493566B2 (ja) 筋ジストロフィーを治療するためのマイクロジストロフィン断片のアデノ随伴ウイルスベクター送達
TW202104592A (zh) 重複投予基因療法載體之方法
JP2020533276A5 (ru)
JP2021514659A (ja) Ａａｖキメラ
JP6966463B2 (ja) 組換えウイルス産物及びｄｕｘ４エクソンスキッピングを誘導するための方法
RU2020109904A (ru) МОДИФИЦИРОВАННАЯ ДНК С ЗАМКНУТЫМИ КОНЦАМИ (зкДНК)
JP2023519762A (ja) ジスフェリン二重ベクターを用いた遺伝子治療
JP2022552014A (ja) Ｉｒｆ２ｂｐｌ遺伝子の変異に関連する障害の治療のための材料および方法
CA3138274A1 (en) Intrathecal and intravenous combination gene therapy for the treatment of infantile batten disease
JPWO2020168222A5 (ru)
JPWO2020186150A5 (ru)
RU2023117629A (ru) МОДИФИЦИРОВАННАЯ ДНК С ЗАМКНУТЫМИ КОНЦАМИ (зкДНК)
RU2021126774A (ru) Модуляция активности rep белка при получении днк с замкнутыми концами (зкднк)